WO2021230179A1 - 再発または難治性の多発性骨髄腫治療のための医薬 - Google Patents

再発または難治性の多発性骨髄腫治療のための医薬 Download PDF

Info

Publication number
WO2021230179A1
WO2021230179A1 PCT/JP2021/017630 JP2021017630W WO2021230179A1 WO 2021230179 A1 WO2021230179 A1 WO 2021230179A1 JP 2021017630 W JP2021017630 W JP 2021017630W WO 2021230179 A1 WO2021230179 A1 WO 2021230179A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
nsd2
multiple myeloma
inhibitor
prechemotherapy
administration
Prior art date
Application number
PCT/JP2021/017630
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
和志 沼田
麻弓 北川
Original Assignee
第一三共株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 第一三共株式会社 filed Critical 第一三共株式会社
Publication of WO2021230179A1 publication Critical patent/WO2021230179A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Definitions

  • the present invention relates to a drug for treating multiple myeloma containing a compound having a Nuclear receptor binding SET domain protein 2 (NSD2) inhibitory activity, a method for treating multiple myeloma including administration of an NSD2 inhibitor, and a method for treating multiple myeloma.
  • NSD2 inhibitors for the treatment of multiple myeloma.
  • Multiple myeloma is a plasmacytoid tumor that develops and progresses due to the accumulation of multiple genetic abnormalities.
  • the origin of most multiple myeloma cells is post germinal center B-cell, and the onset of multiple myeloma is CCND group by immunoglobulin region (immunoglobulin: IG) translocation, large MAF group, FGFR3, NSD2, etc. It is thought that the activation of the antibody is involved, and that the accumulation of further genomic abnormalities and epigenetic changes such as DNA methylation and histone modification are involved in the development of the pathological condition.
  • immunoglobulin region immunoglobulin region
  • drug therapy for multiple myeloma was mainly a combination of melphalan and steroids (such as prednisolone), but in recent years, proteasome inhibitors, immunomodulators, histon deacetylase inhibitors, etc.
  • a plurality of drugs having a novel mechanism of action such as antibody drugs have been put on the market, and treatments combining them are being performed.
  • the t (4; 14) translocation is a gene translocation that has been reported to be found at a frequency of 15% to 20% of untreated multiple myeloma (Non-Patent Document 1).
  • ectopic expression and activation mutation of FGFR3, a kind of oncogene was initially thought to be important for the pathogenesis of multiple myeloma. It was subsequently confirmed that about one-third of multiple myeloma with FGFR3 does not express FGFR3, and the frequency of actual FGFR3 activation mutations is low (Non-Patent Document 2).
  • NSD2 a histone methyltransferase
  • Patent Document 1 As a compound that inhibits NSD1 belonging to the same family as NSD2, a compound having a Benzothiazole (benzothiazole) skeleton (Patent Document 1) has been reported. As compounds that inhibit NSD2, VERTICILLIN (Patent Document 2), 3-hydrazinyl quinoxaline-2-thiol (Patent Document 3) and the like have been reported.
  • the present invention relates to a pharmaceutical agent for treating relapsed or refractory multiple myeloma, and a method for treating relapsed or refractory multiple myeloma.
  • the present invention relates to the following [1] to [18].
  • a therapeutic agent for relapsed or refractory multiple myeloma that has received at least one prior treatment and contains an NSD2 inhibitor.
  • the drug according to [1] or [2], wherein the pretreatment is one or more selected from chemotherapy, radiation therapy and immunotherapy.
  • the drug according to [3], wherein the prechemotherapy comprises administration of one or more agents selected from the group consisting of proteasome inhibitors, immunomodulators, histone deacetylase inhibitors and antibody drugs.
  • Prechemotherapy includes melphalan, bortezomib, prednisolone, dexamethasone, lenalidomide, doxorubicin, vincrisphamide, cyclophosphamide, daratumumab, isatuximab, bendamustine, carmustine, salidomide, pomalidomide, ixazomib, carphylzomib.
  • the pharmaceutical according to [3] which comprises the administration of one or more agents selected from the group consisting of selenexol.
  • the drug according to [5], wherein the prechemotherapy comprises administration of daratumumab or isatuximab.
  • [7] A method for treating relapsed or refractory multiple myeloma that has received at least one prior treatment, including administration of an NSD2 inhibitor.
  • [8] The method according to [7], wherein the multiple myeloma is positive for t (4; 14) translocation.
  • the pretreatment is one or more selected from chemotherapy, radiation therapy and immunotherapy.
  • the prechemotherapy comprises administration of one or more agents selected from the group consisting of proteasome inhibitors, immunomodulators, histone deacetylase inhibitors and antibody drugs.
  • Pre-chemotherapy includes melphalan, bortezomib, prednisolone, dexamethasone, lenalidomide, doxorubicin, vincrisphamide, cyclophosphamide, daratumumab, isatuccimab, bendamustine, carmustine, salidomide, pomalidomide, ixazomib, carphylzomib
  • the method according to [9] which comprises the administration of one or more agents selected from the group consisting of selenexol.
  • the method according to [11], wherein the prechemotherapy comprises administration of daratumumab or isatuximab.
  • NSD2 inhibitor for the treatment of relapsed or refractory multiple myeloma that has received at least one prior treatment.
  • Prechemotherapy comprises administration of one or more agents selected from the group consisting of proteasome inhibitors, immunomodulators, histone deacetylase inhibitors and antibody drugs [13] to [15].
  • the inhibitor according to any one.
  • Prechemotherapy includes melphalan, bortezomib, prednisolone, dexamethasone, lenalidomide, doxorubicin, vincrisphamide, cyclophosphamide, daratumumab, isatuximab, bendamustine, carmustin, salidomide, pomalidomide, ixazomib, carphylzomib.
  • the inhibitor according to [15] which comprises the administration of one or more agents selected from the group consisting of selenexol.
  • the inhibitor according to [17], wherein the prechemotherapy comprises administration of daratumumab or isatuximab.
  • the present invention is useful for the treatment of relapsed or refractory multiple myeloma.
  • Figure 1A shows the results in LP-1 cells and Figure 1B shows the results in OPM-2 cells.
  • the symbol black circle indicates the Non-Targeting (NT) shRNA processing group
  • the symbol black square indicates the NSD2 shRNA processing group.
  • the horizontal axis shows the number of days after infection with each shRNA lentivirus
  • the vertical axis shows Relative cellular growth. Error bars represent SD. It is a figure which shows the growth inhibitory effect by NSD2 knockdown on the human multiple myeloma-derived cell line which has a t (4; 14) translocation or NSD2 activation mutation.
  • FIG. 1C shows the results in KMS-11 cells
  • 1D shows the results in MM.1S (E1099K) cells.
  • the symbol black circle indicates the Non-Targeting (NT) shRNA processing group
  • the symbol black square indicates the NSD2 shRNA processing group.
  • the horizontal axis shows the number of days after infection with each shRNA lentivirus
  • the vertical axis shows Relative cellular growth. Error bars represent SD. It is a figure which shows the growth inhibitory effect by NSD2 knockdown on the cell line derived from human multiple myeloma of t (4; 14) translocation negative.
  • Figure 2A shows the results in RPMI-8226 cells
  • Figure 2B shows the results in U266.B1 cells.
  • the symbol black circle indicates the NT shRNA processing group
  • the symbol black square indicates the NSD2 shRNA processing group.
  • the horizontal axis shows the number of days after infection with each shRNA lentivirus
  • the vertical axis shows Relative cellular growth. Error bars represent SD.
  • NSD2 in the present invention also called WHSC1, MMSET, KIAA1090 or TRX5
  • H3K36 histone H3 lysine 36
  • the representative nucleotide and amino acid sequences of human NSD2 are registered as GenBank accession numbers NM_133330.2 and NP_579877.1, respectively (SEQ ID NOs: 1 and 2).
  • the nucleotide sequence (CDS) encoding the NSD2 protein is the following sequence.
  • the amino acid sequence of the NSD2 protein is as follows.
  • the NSD2 inhibitor may be one that inhibits the activity of NSD2 or one that inhibits the expression of NSD2.
  • inhibiting includes not only the complete elimination of activity or expression, but also the partial reduction of them.
  • the NSD2 protein produced using E. coli or the like or the NSD2 partial protein containing the SET domain is used as an enzyme, and the peptide containing the sequence of histone H3 lysine 36 is used as a substrate, and the test substance and S- After reacting in the presence of adenosylmethionine, an antibody that recognizes methylated histone H3 lysine 36 is reacted as a primary antibody, and then an HRP-labeled secondary antibody that recognizes the primary antibody is reacted, and then HRP. It can be confirmed by a method of detecting methylation by color development or luminescence by adding the substrate of.
  • NSD2 Chemiylated Assay Kit BPS Bioscience
  • AlphaLISA assay PerkinElmer
  • MTase-Glo® Methyltransferase Assay Promega
  • HTRF HTRF
  • kits such as (registered trademark) (Cisbio), TOF-MS / MS, LC-MS / MS, SPA (Scintillation Proximity Assay), SPR (Surface Plasma Resonance), NMR (Nuclear Magnetic Resonance), CETSA ( Cellular Thermal Shift Assay), the method described in the international release WO2011 / 103028, etc. can be applied.
  • the analysis of the expression of the NSD2 gene can be specifically carried out, for example, by measuring the amount of mRNA that is a transcript of the gene to be measured, or by measuring the amount of protein that is a gene product to be measured. can.
  • a known gene expression detection method can be used. For example, Northern blotting method, dot blotting method, polymerase chain reaction (PCR), reverse transcription PCR (RT-PCR), quantitative RT-PCR, hybridization method, and DNA array method, next-generation sequencing, digital PCR, etc.
  • the amount of mRNA can be measured using the molecular biology technique of.
  • a known protein measuring method can be used.
  • various methods using antibodies against the NSD2 protein can be applied. Specific examples thereof include Western blotting, enzyme-linked ImmunoSorbent Assay (ELISA), and radioimmunoassay (RIA).
  • ELISA enzyme-linked ImmunoSorbent Assay
  • RIA radioimmunoassay
  • the antibody against the NSD2 protein uses the NSD2 protein as an antigen, and as long as it specifically binds to the antigen, a human antibody, a mouse antibody, a rat antibody, a rabbit antibody, a sheep antibody, or the like may be appropriately used.
  • the antibody may be a polyclonal antibody or a monoclonal antibody, but a monoclonal antibody is preferable in that a homogeneous antibody can be stably produced.
  • Polyclonal and monoclonal antibodies can be produced by methods well known to those of skill in the art.
  • the term "treatment” includes reducing the rate of disease progression, improving or alleviating the condition, and improving remission or prognosis. For example, reducing the growth of cancerous cells (or destroying them), reducing the symptoms that result from the disease, improving the quality of life of those suffering from the disease, the disease. It includes, but is not limited to, reducing the dose of other medications required to treat the disease, delaying the progression of the disease, and / or prolonging the survival of the subject.
  • pretreatment means any therapeutic action that has already been performed on a patient with multiple myeloma who is the target of treatment with an NSD2 inhibitor.
  • pretreatment means any therapeutic action that has already been performed on a patient with multiple myeloma who is the target of treatment with an NSD2 inhibitor.
  • surgical therapy chemotherapy, radiation therapy and immunotherapy.
  • Chemotherapy is a therapy that uses compounds that are useful in the treatment of cancer.
  • Compounds useful in the treatment of cancer include, for example, alkylating agents, antimetabolites, antitumor antibiotics, antitumor plant components, BRM (biological responsiveness regulators), hormones, vitamins, antitumor properties. Examples include antibodies, molecular targeted drugs, and other antitumor agents.
  • examples of the alkylating agent include an alkylating agent such as nitrogen mustard, nitrogen mustard N-oxide, bendamustine or chlorambutyl, an aziridine-based alkylating agent such as carmustine or thiotepa, dibromomannitol or dibromo.
  • Epoxide-based alkylating agents such as darsitol, nitrosourea-based alkylating agents such as carmustine, lomustine, semustine, nimustine hydrochloride, streptosocin, chlorozotocin or lanimustine, busulfan, improsulfan tosylate, temozolomid or dacarbazine, etc. Can be mentioned.
  • antimetabolites examples include purine antimetabolites such as 6-mercaptopurine, 6-thioguanine or thioinosin, and pyrimidine antimetabolites such as fluorouracil, tegafur, tegafur-uracil, carmofur, doxifluidine, broxuridine, cytarabine or enocitabine.
  • purine antimetabolites such as 6-mercaptopurine, 6-thioguanine or thioinosin
  • pyrimidine antimetabolites such as fluorouracil, tegafur, tegafur-uracil, carmofur, doxifluidine, broxuridine, cytarabine or enocitabine.
  • agents, antimetabolites such as methotrexate or trimetrexate, and the like can be mentioned.
  • antitumor antibiotic examples include mitomycin C, bleomycin, peplomycin, daunorubicin, acralubicin, doxorubicin, idarubicin, pirarubicin, THP-adriamycin, 4'-epidoxorubicin or epirubicin, chromomycin A3 or actinomycin D. Be done.
  • antitumor plant components and derivatives thereof include vinca alkaloids such as vindesine, vincristine or vinblastine, taxanes such as paclitaxel, docetaxel and cabazitaxel, and epipodophilotoxins such as etoposide or teniposide. ..
  • BRM examples include tumor necrosis factor or indomethacin.
  • hormones examples include hydrocortisone, dexamethasone, methylprednisolone, prednisolone, plastolone, betamethasone, triamcinolone, oxymethasone, nandrolone, metenolone, phosfestol, ethinylestradiol, chlormadinone, mepethiostan or medroxyprogesterone.
  • vitamins examples include vitamin C and vitamin A.
  • Antitumor antibodies, molecular-targeted drugs include bortezomib, isatuximab, elotuzumab, trastuzumab, rituximab, cetuximab, nimotuzumab, denosmab, bebashizumab, infliximab, pizirizumab, lapatinib , Double phenib, tramethinib, cobimetinib, pazopanib, parvosicrib, panobinostat, sorafenib, crizotinib, bemurafenib, quizartinib, bortezomib, calfilzomib, ixazomib, gilteritinib, senetuximab, etc.
  • antitumor agents include, for example, cisplatin, carboplatin, oxaliplatin, tamoxiphene, retrozole, anastrozole, exemestane, tremiphencitrate, flubestland, bicalutamide, flutamide, mittane, leuprorelin, goseleline acetate.
  • Camptothecin Iphosphamide, Cyclophosphamide, Melphalan, L-asparaginase, Aceclaton, Sizophyllan, Pisibanir, Procarbadin, Pipobroman, Neocartinostatin, Hydroxyurea, Ubenimex, Azacitidine, Decitabin, Salidomidide, Lenalide, Pomalidomide Alternatively, crestin and the like can be mentioned.
  • Radiation therapy uses a device called a linac that generates high-energy X-rays, and the therapeutic radiation includes electron beams, proton beams, heavy particle beams, ⁇ (alpha) rays, and ⁇ (beta). It is a therapy that damages the DNA of cells by generating radiation, ⁇ (gamma) rays, etc. and irradiating the patient to be treated, resulting in death of cancer cells.
  • Myeloma cells are generally sensitive to radiation, and radiation therapy is used for tumor shrinkage and pain relief.
  • Immunotherapy is a method of restoring and treating a patient's immune system, and (1) a method of sustaining the activation of immunity (T cells, etc.) in the body (preventing braking), for example.
  • Treatment method using an immune checkpoint inhibitor (2) A method of removing T cells from the body, inserting a gene that distinguishes the marker of cancer cells, increasing the number, and then returning the T cells to the body, for example, effector T cell therapy, (3) )
  • a method of strengthening immunity in the body for example, a method of BCG administration, etc. can be mentioned.
  • Immune checkpoint inhibitors include PD-1 inhibitors (nivolumab, pembrolizumab, etc.), PD-L1 inhibitors (durvalumab, atezolizumab, avelumab, etc.), and CTLA-4 inhibitors (ipilimumab, etc.).
  • effector T cell therapy include CAR-T therapy.
  • the method for strengthening immunity in the body include cytokine therapy such as interferon ⁇ , interferon gamma, and interleukin 2, and a method using an immunostimulant such as BCG.
  • t (4; 14) translocation in the present invention is sometimes referred to as t (4; 14) (p16; q32) and is a mutual immunoglobulin IgH region frequently found in multiple myeloma. It is a translocation that increases gene expression of target genes on various chromosomes.
  • the t (4; 14) translocation can be detected by using a commercially available kit such as the FISH method or the RT-PCR method. For example, it can be detected as a fusion signal by the FISH method using a probe sandwiching the FGFR3 gene and the IGH gene. It can also be detected by the method described in a known document (Blood. 1999 Jul 15; 94 (2): 724-32).
  • recurrence means the definition of "recurrence” in the commonly used sense, but for example, it means that a pathological condition that has disappeared or diminished by treatment reappears.
  • refractory means the definition of "refractory” in the commonly used sense, but for example, it means that the effect of treatment is difficult to obtain.
  • One aspect of the invention relates to a pharmaceutical agent for the treatment of relapsed or refractory multiple myeloma that has received at least one prior treatment and contains an NSD2 inhibitor.
  • Another aspect of the invention relates to a method of treating relapsed or refractory multiple myeloma that has received at least one prior treatment, including administration of an NSD2 inhibitor.
  • Another aspect of the invention relates to an NSD2 inhibitor for the treatment of relapsed or refractory multiple myeloma that has received at least one prior treatment.
  • treatment with an NSD2 inhibitor is effective because the rate of positive t (4; 14) translocation is high in relapsed or refractory multiple myeloma that has been previously treated.
  • the NSD2 inhibitor since the NSD2 inhibitor exhibits an antitumor effect specific to cells in which NSD2 is activated, it can be used as a safe drug having little effect on normal cells and the like.
  • pretreatment includes, but is not limited to, one or more selected from chemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, including all the pretreatments mentioned above, and chemotherapy is preferred. Among them, it is more preferable to include administration of one or more agents selected from the group consisting of proteasome inhibitors, immunomodulators, histone deacetylase inhibitors and antibody drugs, and it is more preferable to include administration of one or more agents, which is a standard treatment for multiple myeloma.
  • Proteasome inhibitors such as voltezomib, calfilzomib, ixazomib, alkylating agents such as melfaran and cyclophosphamide, anthracicline antitumor antibiotics such as doxorubicin, steroids such as dexamethasone and decadron, renalidomido, Select from immunomodulators such as pomalydomidosalidomide, anti-CD38 antibodies such as daratumumab and isatuximab, anti-SLAMF7 antibodies such as erotuzumab, histone deacetylase (HDAC) inhibitors such as panobinostat, and BCL-2 inhibitors such as VENCLEXTA.
  • HDAC histone deacetylase
  • a combination of two, three, four or five agents is particularly suitable.
  • Pretreatment involving administration of one or more agents is preferred. It is more preferably comprising administration of daratumumab or isatuximab, and even more preferably comprising administration of daratumumab.
  • the NSD2 inhibitor is intravenously, intramuscularly, subcutaneously, locally, orally, transdermally, intraperitoneally, intrathoracically, by transplantation, by inhalation, intrathecal cavity.
  • the dose of the active compound depends, for example, on the subject's age, body weight, general health, gender and diet, time of administration, route of administration, rate of excretion, any combination of drugs.
  • the NSD2 inhibitor in the present invention includes synthetic compounds such as low molecular weight compounds, medium molecular weight compounds and high molecular weight compounds and pharmaceutically acceptable salts thereof, as well as peptides, proteins, nucleic acids (including shRNA, siRNA, etc.), natural products, and natural products. It may contain an antibody, a cell, or the like. It may be a drug complex in which an antibody or peptide is bound to a synthetic compound via a linker, spacer or the like as appropriate. Further, it may be an inhibitor of NSD2 using the technology of Targeted Protein Degradation. NSD2 inhibitors can be screened using the method for confirming NSD2 inhibition described above.
  • NSD2 inhibitor examples include the compound and its derivative described in WO2019 / 113469, VERTICILLIN and its derivative described in US2014161785, the compound and its derivative described in WO2015 / 152437, and CN109734677. Specific examples thereof include, but are not limited to, the compound and its derivative thereof, the compound described in WO2021 / 0268803 and its derivative, and the like. Further, these deuterium bodies may be used.
  • the salt may be, for example, a halide such as a hydrochloride or an iodide hydroxide; an inorganic acid salt such as a nitrate, a perchlorate, a sulfate or a phosphate; a methane.
  • a halide such as a hydrochloride or an iodide hydroxide
  • an inorganic acid salt such as a nitrate, a perchlorate, a sulfate or a phosphate
  • methane a methane
  • Lower alkane sulfonates such as sulfonates, trifluoromethane sulfonates, ethane sulfonates; allyl sulfonates such as benzene sulfonates, p-toluene sulfonates; formates, acetates, apple salts , Organic acid salts such as fumarate, succinate, citrate, tartrate, oxalate, maleate; and amino acid salts such as ornithate, glutamate, asparagate, sodium salts, potassium salts, Alkali metal salts such as lithium salt; Alkaline earth metal salts such as calcium salt and magnesium salt; Inorganic salts such as ammonium salt; Dibenzylamine salt, morpholine salt, phenylglycine alkyl ester salt, ethylenediamine salt, N-methylglucamine Salt, diethylamine salt, triethylamine salt, cyclohexylamine salt
  • the pharmaceutically acceptable salt may exist as a free substance or a solvate. It may exist as a hydrate by absorbing moisture in the air.
  • the solvate is not particularly limited as long as it is pharmaceutically acceptable, but specifically, a hydrate, a solvate of ethanol, or the like is preferable.
  • a nitrogen atom is present in the compound represented by the general formula (1), it may be an N-oxide compound, and these solvates and N-oxide compound are also included in the scope of the present invention. ..
  • stereoisomers can be produced. It also includes all of these steric isomers and mixtures of any proportion of these steric isomers.
  • stereoisomer The definition of the stereoisomer is as shown in 1996 IUPC, Pure and Applied Chemistry 68, 2193-2222. Whether the pharmaceutically acceptable salts are present as tautomers, the tautomers are present in equilibrium, or a form is predominantly present. Included within the scope of the invention.
  • a tautomer is an isomer produced by shifting the proton of one atom of a molecule to another atom.
  • a pharmaceutically acceptable salt changes into a desired compound by enzymatically oxidizing, reducing, or hydrolyzing it by a reaction with an enzyme or gastric acid under physiological conditions in the living body, or by hydrolyzing it with gastric acid or the like. It may be a "pharmaceutically acceptable prodrug compound”.
  • prodrug examples include acylated, alkylated, phosphorylated compounds and the like.
  • the prodrug of the compound can be produced from the compound (1) by a known method.
  • compound prodrugs include those that change to a desired compound under physiological conditions, as described in Hirokawa Shoten, 1990, "Drug Development,” Vol. 7, Molecular Design, pp. 163 to 198.
  • the pharmaceutical according to the present invention may contain an NSD2 inhibitor and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • a pharmaceutically acceptable carrier is a pharmaceutically acceptable material that is involved in transporting a compound of the present invention or a composition containing a compound of the present invention from one organ or organ to another organ or organ. (For example, excipients, diluents, additives, solvents, etc.).
  • an appropriate preparation for example, oral preparation or injection
  • the preparation can be made by the preparation method of various commonly used preparations.
  • the oral preparation include tablets, powders, granules, capsules, pills, troches, solutions, syrups, elixirs, emulsions, oily or aqueous suspensions and the like.
  • it may be in the free form or in the form of a salt.
  • Aqueous preparations can be prepared by forming pharmaceutically acceptable acids and acid adducts, or by using alkali metal salts such as sodium.
  • a stabilizer, a preservative, a solubilizing agent, or the like can be used in the preparation.
  • a solution containing these auxiliary agents and the like may be stored in a container and then freeze-dried to prepare a solid preparation at the time of use. Further, a single dose may be stored in one container, or a plurality of doses may be stored in one container.
  • solid preparation examples include tablets, powders, granules, capsules, pills, and troches. These solid formulations may contain pharmaceutically acceptable additives along with the compounds of the present invention.
  • additive examples include fillers, bulking agents, binders, disintegrants, dissolution accelerators, wetting agents or lubricants, which are selected and mixed as necessary. And can be formulated.
  • liquid preparation examples include a solution, a syrup, an elixir, an emulsion, or a suspension.
  • additive include a suspending agent or an emulsifier, and these can be selected and mixed as necessary to be formulated.
  • Substances for formulation include, but are not limited to: amino acids such as glycine, alanine, glutamine, asparagine, arginine or lysine, antibacterial agents, ascorbic acid, sodium sulfate or sodium hydrogen sulfite, etc.
  • Antioxidants phosphoric acid, citric acid, borate buffer, sodium hydrogen carbonate, buffers such as Tris-Hcl solution, fillers such as mannitol and glycine, chelating agents such as ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) , Caffeine, polyvinylpyrrolidin, complexing agents such as ⁇ -cyclodextrin and hydroxypropyl- ⁇ -cyclodextrin, bulking agents such as glucose, mannitol or dextrin, other carbohydrates such as monosaccharides and disaccharides, colorants, flavors.
  • buffers such as Tris-Hcl solution
  • fillers such as mannitol and glycine
  • chelating agents such as ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA)
  • Caffeine polyvinylpyrrolidin
  • complexing agents such as ⁇ -cyclodextrin and hydroxypropyl- ⁇ -cyclodextrin
  • Agents such as emulsifiers and polyvinylpyrrolidin, low molecular weight polypeptides, salt-forming counterions, benzalkonium chloride, benzoic acid, salicylic acid, thymerosal, phenetyl alcohol, methylparaben, propylparaben, chlorexidine, sorbitol or excess.
  • Preservatives such as hydrogen oxide, solvents such as glycerin, propylene glycol or polyethylene glycol, sugar alcohols such as mannitol or sorbitol, suspending agents, sorbitan esters, polysorbates such as polysorbate 20 and polysorbate 80, triton, tromethamine ( tromethamine), surfactants such as lecithin or cholesterol, stabilization enhancers such as sucrose and sorbitol, elastic enhancers such as sodium chloride, potassium chloride and mannitol / sorbitol, transport agents, excipients, and / or pharmaceuticals. Auxiliary agent.
  • the amount of the substance for these preparations to be added is preferably 0.01 to 100 times, particularly 0.1 to 10 times the weight of the drug.
  • the suitable composition in the pharmaceutical product can be appropriately determined by those skilled in the art according to the applicable disease, the applicable administration route, and the like.
  • the excipient or carrier in the formulation may be liquid or solid. Suitable excipients and carriers may be water for injection, saline, artificial cerebrospinal fluid or other substances commonly used for parenteral administration. A neutral saline solution or a saline solution containing serum albumin can also be used as a carrier.
  • the pharmaceutical composition can include Tris buffer at pH 7.0-8.5, acetic acid buffer at pH 4.0-5.5, and citric acid buffer at pH 3.0-6.2. These buffers can also contain sorbitol and other compounds.
  • the present invention can be used for the treatment of multiple myeloma in mammals, especially humans.
  • the dose and interval of the NSD inhibitor of the present invention may be appropriately selected at the discretion of the physician depending on the location of the disease, the height, weight, sex or medical history of the patient.
  • the dose range is about 0.01 mg / kg body weight to about 500 mg / kg body weight, preferably about 0.1 mg / kg body weight per day for one active ingredient. It weighs about 100 mg / kg.
  • it is preferably administered once a day or in 2 to 4 divided doses, preferably repeated at appropriate intervals.
  • the daily dose may exceed the above-mentioned dose if necessary at the discretion of the doctor.
  • the present invention may be used in combination with other antitumor agents.
  • examples include concomitant use with the drugs listed above as drugs used in chemotherapy.
  • it may be administered simultaneously with the concomitant drug, may be administered separately at intervals, may be a single preparation, or may be a separate preparation.
  • It may also be used in combination with radiation therapy or immunotherapy.
  • Bone marrow cells derived from patients with intractable multiple myeloma were attached to a slide glass by cytospin and fixed. Chromosomes 4p16.3 and 14q32.3 are colored orange using the MetaSystems Probes Xcyting Locus-Specific Probes; XL t (4; 14) (FGFR3 / IGH DF; MetaSystems, D-5108-100-OG) kit, respectively. It was stained green and the presence or absence of chromosomal translocation was observed from about 100 cell images. Imaging and observation were performed using Vectra Polaris® (PerkinElmer).
  • t (4; 14) positive cells Cells in which at least one yellow signal is detected in one cell nucleus are judged to be t (4; 14) positive cells, and the t (4; 14) positive rate (%) in the bone marrow cells of one patient is calculated by the following formula. ) Was calculated.
  • Each cell was cultured at 37 ° C in the presence of 5% CO 2 using medium supplemented with 10% or 20% fetal bovine serum (FBS).
  • FBS fetal bovine serum
  • LP-1 cells IMDM (Gibco: 12440-053), 20% FBS KMS-11 cells, OPM-2 cells, U266.B1 cells, MM.1S cells, RPMI-8226 cells: RPMI-1640 (Gibco: A10491), 10% FBS
  • a short hairpin (sh) RNA expression wrench viral vector preparation plasmid NSD2 MISSION shRNA plasmid DNA (SHCLND-NM_007331 target sequence: CCGGCGGAAAGCCAAGTTCACCTTTCGAGAGAAAGGTGAACTTGGCTTTCCGTTTTTG) was purchased from SIGMA ALDRICH as a negative control. Registered trademark
  • pLKO.1-puro Non-Mammalian shRNA Control plasmid DNA SHC002 was used.
  • shRNA For the expression of shRNA, lipofectamine (registered trademark) 2000 (Invitrogen) was used, and the above plasmid was used together with ViraPower (registered trademark) Lentiviral Expression System (Life Technologies) on Lenti-X 293T cells (Takara Bio Inc., Cat). .No. 632180) was co-transfected to prepare a lentivirus for characterization of the shRNA expression cassette. Each cell line was infected with the prepared lentivirus, and puromycin (InvivoGen) was continuously added from the day after the infection (Day 1) to select infected cells.
  • ViraPower registered trademark
  • Lentiviral Expression System Life Technologies
  • RNA interference with NSD2 was observed to strongly inhibit cell proliferation in t (4; 14) translocation-positive MM cell lines and NSD2 active mutant MM (multiple myeloma) -derived cell lines (Fig. 1). On the other hand, in other MM (multiple myeloma) -derived cell lines, no inhibition of cell proliferation due to RNA interference with NSD2 was observed (Fig. 2).
  • NSD2 knockdown confirmed a positive t (4; 14) translocation and a strong growth inhibitory effect on NSD2-active multiple myeloma cells selectively.
  • the present invention it has been clarified that the treatment of relapsed or refractory multiple myeloma is possible by using an NSD2 inhibitor. Therefore, the present invention can make a great contribution in the medical field, particularly in the field of cancer treatment.
  • SEQ ID NO: 1 NSD2 mRNA encoding the NSD2 protein (SEQ ID NO: 2).
  • SEQ ID NO: 2 Amino acid sequence of NSD2 protein.

Abstract

再発または難治性の多発性骨髄腫の治療方法を提供すること。 NSD2阻害活性を有する化合物を含有する多発性骨髄腫治療のための医薬、NSD2阻害物質を投与することを含む多発性骨髄腫の治療方法および、多発性骨髄腫の治療のためのNSD2阻害物質を提供する。

Description

再発または難治性の多発性骨髄腫治療のための医薬
　本発明は、Nuclear receptor binding SET domain protein 2 （NSD2）阻害活性を有する化合物を含有する多発性骨髄腫治療のための医薬、NSD2阻害物質を投与することを含む多発性骨髄腫の治療方法、および、多発性骨髄腫の治療のためのNSD2阻害物質に関する。
　多発性骨髄腫は複数の遺伝子異常の蓄積により発症・進展する形質細胞性腫瘍である。大半の多発性骨髄腫細胞の起源はpost germinal center B-cellであり、多発性骨髄腫の発症には、免疫グロブリン領域（immunoglobulin: IG）転座によるCCND 群、大MAF群、FGFR3、NSD2などの活性化が関与し、病態の進展においてはさらなるゲノム異常の蓄積や、DNA メチル化やヒストン修飾といったエピジェネティック変化が関与していると考えられている。
　多発性骨髄腫の薬物療法は、かつてはメルファランとステロイド剤（プレドニゾロンなど）の併用が中心であったが、近年になって、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬、抗体薬等の新規作用機序を有する薬剤が複数上市され、それらを組み合わせた治療が行われている。
　t(4;14)転座は未治療多発性骨髄腫のうち15％から20％の頻度で見出されることが報告されている遺伝子転座である（非特許文献１）。t(4;14)転座においては、当初、一種のがん遺伝子であるFGFR3の異所性発現と活性化変異が多発性骨髄腫の病態形成に重要であろうとされたが、本転座を有する多発性骨髄腫のうち約三分の一はFGFR3 発現がなく、また、実際のFGFR3 活性化変異の出現頻度は低いことがその後確認された(非特許文献２）。一方でヒストンメチル基転移酵素であるNSD2は、本転座を有する多発性骨髄腫患者全てで過剰発現していることや、NSD2ノックアウトモデルで細胞接着能の変化や腫瘍増殖能の低下が、NSD2 活性化モデルでDNA 修復能亢進が示唆されるなどしており、今日では多発性骨髄腫病態にはFGFR3 よりもNSD2 の方が寄与していると考えられている（非特許文献３、４、５、６）。そのため、多発性骨髄腫の治療薬の標的として近年NSD2が注目されているが、NSD2阻害薬が医薬として承認された例は未だ無い。
　NSD2と同じファミリーに属するNSD1を阻害する化合物としては、Benzothiazole（ベンゾチアゾール）骨格を有する化合物（特許文献１）が報告されている。NSD2を阻害する化合物としては、VERTICILLIN（特許文献２）、３－ヒドラジニルキノキサリン－２－チオール（特許文献３）などが報告されている。
国際公開WO2019/113469号 米国出願公開2014161785号 国際公開WO2011/103028号
Kuehl WM et al. J Clin Invest. 2012; 122(10): 3456-3463 Onwuazor ON et al. Blood. 2003; 102(2): 772-773 Zhan F et al. Blood. 2006; 108(6): 2020-2028 Lauring J et al. Blood. 2008; 111(2): 856-864 Kuo AJ et al. Mol Cell. 2011; 44(4): 609-620 Chesi M et al. Blood. 1998; 92(9): 3025-3034
　本発明は、再発または難治性の多発性骨髄腫の治療のための医薬、および、再発または難治性の多発性骨髄腫の治療方法に関する。
　本発明者らは、多発性骨髄腫患者由来骨髄サンプル中のt(4;14)転座の陽性率をFISHアッセイにより解析することにより、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発・難治多発性骨髄腫におけるt(4;14)陽性率が高いことを見出した。さらに、本発明者らは、NSD2ノックダウンによるt(4;14)転座陽性多発性骨髄腫細胞株およびNSD2活性型変異多発性骨髄腫細胞株に対する有意な抗腫瘍効果を確認し、本発明を完成した。
　すなわち、本発明は、次の［１］～［１８］に関する。
［１］NSD2阻害物質を含有する、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療用医薬。
［２］多発性骨髄腫がt(4;14)転座陽性である［１］に記載の医薬。
［３］前治療が、化学療法、放射線療法および免疫療法から選択される１以上である［１］または［２］に記載の医薬。
［４］前化学療法が、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬および抗体医薬からなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである［３］に記載の医薬。
［５］前化学療法が、メルファラン、ボルテゾミブ、プレドニゾロン、デキサメタゾン、レナリドミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ダラツムマブ、イサツキシマブ、ベンダムスチン、カルムスチン、サリドマイド、ポマリドミド、イキサゾミブ、カルフィルゾミブ、エロツズマブ、ベネトクラクス、パノビノスタットおよびセレネキソールからなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである［３］に記載の医薬。
［６］前化学療法が、ダラツムマブまたはイサツキシマブの投与を含むものである［５］に記載の医薬。
［７］NSD2阻害物質を投与することを含む、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療方法。
［８］多発性骨髄腫がt(4;14)転座陽性である［７］に記載の方法。
［９］前治療が、化学療法、放射線療法および免疫療法から選択される１以上である［７］または［８］記載の方法。
［１０］前化学療法が、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬および抗体医薬からなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである［９］に記載の方法。
［１１］前化学療法が、メルファラン、ボルテゾミブ、プレドニゾロン、デキサメタゾン、レナリドミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ダラツムマブ、イサツキシマブ、ベンダムスチン、カルムスチン、サリドマイド、ポマリドミド、イキサゾミブ、カルフィルゾミブ、エロツズマブ、ベネトクラクス、パノビノスタットおよびセレネキソールからなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである［９］に記載の方法。
［１２］前化学療法が、ダラツムマブまたはイサツキシマブの投与を含むものである［１１］に記載の方法。
［１３］少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療のためのNSD2阻害物質。
［１４］多発性骨髄腫がt(4;14)転座陽性である［１３］に記載の阻害物質。
［１５］前治療が、化学療法、放射線療法および免疫療法から選択される１以上である［１３］または［１４］に記載の阻害物質。
［１６］前化学療法が、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬および抗体医薬からなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである［１３］から［１５］のいずれか１に記載の阻害物質。
［１７］前化学療法が、メルファラン、ボルテゾミブ、プレドニゾロン、デキサメタゾン、レナリドミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ダラツムマブ、イサツキシマブ、ベンダムスチン、カルムスチン、サリドマイド、ポマリドミド、イキサゾミブ、カルフィルゾミブ、エロツズマブ、ベネトクラクス、パノビノスタットおよびセレネキソールからなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである［１５］に記載の阻害物質。
［１８］前化学療法が、ダラツムマブまたはイサツキシマブの投与を含むものである［１７］に記載の阻害物質。
　本発明は、再発または難治性の多発性骨髄腫の治療に有用である。
t(4;14)転座またはNSD2活性化変異を有するヒト多発性骨髄腫由来細胞株に対するNSD2ノックダウンによる増殖阻害効果を示す図である。
　図1AはLP-1細胞、図1BはOPM-2細胞における結果をそれぞれ示す。図中シンボル黒丸はNon-Targeting（NT)shRNA処理群、シンボル黒四角はNSD2 shRNA処理群を示す。各図における横軸はそれぞれのshRNAレンチウイルス感染後の日数を示し、縦軸はRelative cellular growthを示す。エラーバーはSDを表す。
t(4;14)転座またはNSD2活性化変異を有するヒト多発性骨髄腫由来細胞株に対するNSD2ノックダウンによる増殖阻害効果を示す図である。図1CはKMS-11細胞、図１DはMM.1S(E1099K)細胞における結果をそれぞれ示す。図中シンボル黒丸はNon-Targeting（NT)shRNA処理群、シンボル黒四角はNSD2 shRNA処理群を示す。各図における横軸はそれぞれのshRNAレンチウイルス感染後の日数を示し、縦軸はRelative cellular growthを示す。エラーバーはSDを表す。 t(4;14)転座陰性のヒト多発性骨髄腫由来細胞株に対するNSD2ノックダウンによる増殖阻害効果を示す図である。
　図2AはRPMI-8226細胞、図2BはU266.B1細胞における結果をそれぞれ示す。図中シンボル黒丸はNT shRNA処理群、シンボル黒四角はNSD2 shRNA処理群を示す。各図における横軸はそれぞれのshRNAレンチウイルス感染後の日数を示し、縦軸はRelative cellular growthを示す。エラーバーはSDを表す。
　本発明におけるNSD2は、WHSC1、MMSET、KIAA1090またはTRX5とも呼ばれ、ヒストンH3リジン36（H3K36)のメチル化酵素である。例えば、ヒトのNSD2の代表的なヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、各々GenBankアクセッション番号NM_133330.2およびNP_579877.1として登録されている（配列番号１および２）。
　NSD2タンパク質をコードするヌクレオチド配列（CDS）は下記の配列である。
ATGGAATTTAGCATCAAGCAGAGTCCCCTTTCTGTTCAGAGTGTTGTAAAGTGCATAAAGATGAAGCAGGCACCAGAAATCCTCGGCAGTGCCAACGGGAAGACTCCGAGCTGCGAGGTGAACCGCGAGTGTTCTGTGTTCCTCAGCAAAGCCCAGCTCTCCAGTAGCCTGCAGGAGGGGGTCATGCAGAAGTTTAACGGCCACGACGCCCTGCCCTTTATTCCAGCCGACAAGCTGAAAGATCTTACTTCCCGGGTGTTTAATGGAGAACCCGGCGCACACGATGCCAAACTGCGTTTTGAGTCCCAGGAAATGAAAGGGATTGGGACACCCCCTAACACTACCCCTATCAAAAATGGCTCTCCAGAAATTAAGCTGAAAATCACCAAAACATACATGAATGGGAAGCCTCTCTTTGAATCTTCCATTTGTGGTGACAGTGCTGCTGATGTGTCTCAGTCAGAAGAAAATGGACAAAAACCAGAAAACAAGGCGAGAAGGAACAGGAAGAGGAGCATAAAATATGACTCCTTGCTGGAGCAGGGCCTTGTCGAAGCAGCTCTTGTGTCTAAGATCTCAAGTCCTTCAGATAAAAAGATTCCAGCTAAGAAAGAGTCTTGTCCAAACACTGGAAGAGACAAAGACCACCTGTTGAAATACAACGTTGGTGATTTGGTGTGGTCCAAAGTGTCGGGTTACCCTTGGTGGCCTTGCATGGTTTCTGCAGATCCACTCCTTCACAGCTATACCAAACTTAAAGGTCAGAAAAAGAGTGCACGCCAGTATCACGTACAGTTCTTTGGTGACGCCCCAGAAAGAGCTTGGATATTTGAGAAGAGCCTCGTAGCTTTTGAAGGAGAAGGACAGTTTGAAAAATTATGCCAGGAAAGTGCCAAGCAGGCACCCACGAAAGCTGAGAAAATTAAGCTATTGAAACCAATTTCAGGGAAATTGAGGGCCCAGTGGGAAATGGGCATTGTTCAAGCAGAAGAAGCTGCAAGCATGTCAGTGGAGGAGCGGAAAGCCAAGTTCACCTTTCTCTATGTGGGGGACCAGCTTCATCTCAACCCTCAAGTAGCCAAGGAGGCTGGCATTGCTGCAGAGTCTTTGGGAGAAATGGCAGAATCCTCAGGAGTCAGTGAAGAAGCTGCTGAAAACCCCAAGTCTGTGAGAGAAGAGTGCATTCCCATGAAGAGAAGGCGGAGGGCCAAACTGTGTAGCTCTGCAGAGACCCTGGAGAGTCACCCCGACATAGGGAAGAGTACTCCTCAAAAGACGGCAGAGGCTGACCCCAGAAGAGGAGTAGGGTCTCCTCCTGGGAGGAAGAAGACCACAGTCTCCATGCCACGAAGCAGGAAGGGAGATGCAGCATCCCAGTTTTTGGTCTTCTGTCAAAAACACAGGGATGAGGTGGTAGCTGAGCACCCAGATGCTTCAGGTGAGGAGATTGAAGAGCTGCTCAGGTCACAGTGGAGTCTGCTGAGTGAGAAGCAGAGAGCACGCTACAACACCAAGTTTGCCCTGGTGGCCCCTGTCCAGGCTGAAGAAGACTCTGGTAATGTAAATGGGAAAAAAAGAAACCACACAAAGAGGATACAGGACCCTACAGAAGATGCTGAAGCTGAGGACACACCCAGGAAAAGACTCAGGACGGACAAGCACAGTCTTCGGAAGAGAGACACAATCACTGACAAAACGGCCAGAACAAGCTCTTACAAGGCCATGGAGGCAGCCTCCTCGCTCAAGAGCCAGGCAGCAACGAAAAATCTGTCTGATGCATGTAAACCACTGAAGAAGCGAAATCGGGCTTCCACGGCAGCATCTTCAGCTCTTGGGTTTAGCAAAAGTTCATCTCCTTCTGCATCCTTAACTGAGAATGAGGTCTCGGACAGCCCGGGAGACGAGCCCTCGGAGTCCCCATACGAAAGTGCAGACGAAACACAAACTGAAGTATCTGTCTCATCCAAAAAGTCTGAGCGAGGAGTGACTGCCAAAAAGGAGTATGTGTGCCAGCTGTGTGAGAAGCCGGGCAGCCTCCTGCTCTGTGAAGGACCCTGCTGCGGAGCTTTCCACCTCGCCTGCCTTGGGCTTTCCCGGAGGCCAGAAGGGAGGTTCACCTGCAGCGAGTGTGCCTCAGGGATTCACTCATGTTTCGTGTGTAAAGAGAGCAAGACAGATGTTAAGCGCTGTGTGGTAACTCAGTGTGGAAAATTTTACCATGAGGCTTGTGTGAAAAAATACCCTCTGACTGTATTTGAGAGCCGAGGTTTCCGCTGCCCCCTCCACAGCTGTGTGAGCTGCCATGCTTCCAACCCTTCAAACCCAAGGCCGTCAAAAGGTAAAATGATGCGGTGTGTCCGCTGCCCCGTTGCCTATCACAGCGGGGATGCTTGTCTGGCAGCAGGATGCTCAGTGATCGCCTCCAACAGCATCATCTGCACTGCCCACTTCACTGCTCGGAAGGGGAAGCGACACCACGCCCACGTCAACGTGAGCTGGTGCTTCGTGTGCTCCAAAGGGGGGAGCCTTCTGTGCTGTGAGTCCTGCCCAGCGGCCTTCCACCCTGACTGCCTGAACATCGAGATGCCTGACGGCAGCTGGTTCTGCAATGACTGCAGGGCTGGGAAGAAGCTGCACTTCCAGGATATCATTTGGGTGAAACTTGGGAACTACAGATGGTGGCCGGCAGAAGTTTGCCATCCCAAAAATGTTCCCCCAAATATTCAGAAAATGAAGCACGAGATTGGAGAATTCCCTGTGTTTTTCTTTGGGTCTAAAGATTATTACTGGACGCATCAGGCGCGAGTGTTCCCGTACATGGAGGGGGACCGGGGCAGCCGCTACCAGGGGGTCAGAGGGATCGGAAGAGTCTTCAAAAACGCACTGCAAGAAGCTGAAGCTCGTTTTCGTGAAATTAAGCTTCAGAGGGAAGCCCGAGAAACACAGGAGAGCGAGCGCAAGCCCCCACCATACAAGCACATCAAGGTGAATAAGCCTTACGGGAAAGTCCAGATCTACACAGCGGATATTTCAGAAATCCCTAAGTGCAACTGCAAGCCCACAGATGAGAATCCTTGTGGCTTTGATTCGGAGTGTCTGAACAGGATGCTGATGTTTGAGTGCCACCCGCAGGTGTGTCCCGCGGGCGAGTTCTGCCAGAACCAGTGCTTCACCAAGCGCCAGTACCCAGAGACCAAGATCATCAAGACAGATGGCAAAGGGTGGGGCCTGGTCGCCAAGAGGGACATCAGAAAGGGAGAATTTGTTAACGAGTACGTTGGGGAGCTGATCGACGAGGAGGAGTGCATGGCGAGAATCAAGCACGCACACGAGAACGACATCACCCACTTCTACATGCTCACTATAGACAAGGACCGTATAATAGACGCTGGCCCCAAAGGAAACTACTCTCGATTTATGAATCACAGCTGCCAGCCCAACTGTGAGACCCTCAAGTGGACAGTGAATGGGGACACTCGTGTGGGCCTGTTTGCCGTCTGTGACATTCCTGCAGGGACGGAGCTGACTTTTAACTACAACCTCGATTGTCTGGGCAATGAAAAAACGGTCTGCCGGTGTGGAGCCTCCAATTGCAGTGGATTCCTCGGGGATAGACCAAAGACCTCGACGACCCTTTCATCAGAGGAAAAGGGCAAAAAGACCAAGAAGAAAACGAGGCGGCGCAGAGCAAAAGGGGAAGGGAAGAGGCAGTCAGAGGACGAGTGCTTCCGCTGCGGTGATGGCGGGCAGCTGGTGCTGTGTGACCGCAAGTTCTGCACCAAGGCCTACCACCTGTCCTGCCTGGGCCTTGGCAAGCGGCCCTTCGGGAAGTGGGAATGTCCTTGGCATCATTGTGACGTGTGTGGCAAACCTTCGACTTCATTTTGCCACCTCTGCCCCAATTCGTTCTGTAAGGAGCACCAGGACGGGACAGCCTTCAGCTGCACCCCGGACGGGCGGTCCTACTGCTGTGAGCATGACTTAGGGGCGGCATCGGTCAGAAGCACCAAGACTGAGAAGCCCCCCCCAGAGCCAGGGAAGCCGAAGGGGAAGAGGCGGCGGCGGAGGGGCTGGCGGAGAGTCACAGAGGGCAAA
　NSD2タンパク質のアミノ酸配列は下記の配列である。
MEFSIKQSPLSVQSVVKCIKMKQAPEILGSANGKTPSCEVNRECSVFLSKAQLSSSLQEGVMQKFNGHDALPFIPADKLKDLTSRVFNGEPGAHDAKLRFESQEMKGIGTPPNTTPIKNGSPEIKLKITKTYMNGKPLFESSICGDSAADVSQSEENGQKPENKARRNRKRSIKYDSLLEQGLVEAALVSKISSPSDKKIPAKKESCPNTGRDKDHLLKYNVGDLVWSKVSGYPWWPCMVSADPLLHSYTKLKGQKKSARQYHVQFFGDAPERAWIFEKSLVAFEGEGQFEKLCQESAKQAPTKAEKIKLLKPISGKLRAQWEMGIVQAEEAASMSVEERKAKFTFLYVGDQLHLNPQVAKEAGIAAESLGEMAESSGVSEEAAENPKSVREECIPMKRRRRAKLCSSAETLESHPDIGKSTPQKTAEADPRRGVGSPPGRKKTTVSMPRSRKGDAASQFLVFCQKHRDEVVAEHPDASGEEIEELLRSQWSLLSEKQRARYNTKFALVAPVQAEEDSGNVNGKKRNHTKRIQDPTEDAEAEDTPRKRLRTDKHSLRKRDTITDKTARTSSYKAMEAASSLKSQAATKNLSDACKPLKKRNRASTAASSALGFSKSSSPSASLTENEVSDSPGDEPSESPYESADETQTEVSVSSKKSERGVTAKKEYVCQLCEKPGSLLLCEGPCCGAFHLACLGLSRRPEGRFTCSECASGIHSCFVCKESKTDVKRCVVTQCGKFYHEACVKKYPLTVFESRGFRCPLHSCVSCHASNPSNPRPSKGKMMRCVRCPVAYHSGDACLAAGCSVIASNSIICTAHFTARKGKRHHAHVNVSWCFVCSKGGSLLCCESCPAAFHPDCLNIEMPDGSWFCNDCRAGKKLHFQDIIWVKLGNYRWWPAEVCHPKNVPPNIQKMKHEIGEFPVFFFGSKDYYWTHQARVFPYMEGDRGSRYQGVRGIGRVFKNALQEAEARFREIKLQREARETQESERKPPPYKHIKVNKPYGKVQIYTADISEIPKCNCKPTDENPCGFDSECLNRMLMFECHPQVCPAGEFCQNQCFTKRQYPETKIIKTDGKGWGLVAKRDIRKGEFVNEYVGELIDEEECMARIKHAHENDITHFYMLTIDKDRIIDAGPKGNYSRFMNHSCQPNCETLKWTVNGDTRVGLFAVCDIPAGTELTFNYNLDCLGNEKTVCRCGASNCSGFLGDRPKTSTTLSSEEKGKKTKKKTRRRRAKGEGKRQSEDECFRCGDGGQLVLCDRKFCTKAYHLSCLGLGKRPFGKWECPWHHCDVCGKPSTSFCHLCPNSFCKEHQDGTAFSCTPDGRSYCCEHDLGAASVRSTKTEKPPPEPGKPKGKRRRRRGWRRVTEGK
　NSD2阻害物質は、NSD2の活性を阻害するものであってもNSD2の発現を阻害するものであってもよい。ここで、「阻害する」とは活性または発現を完全に消失させることのみならず、それらを一部でも低下させることも含む。
　NSD2活性の阻害は、例えば、E. coli等を用いて生産したNSD2タンパク質あるいはSETドメインを含むNSD2部分タンパク質を酵素とし、ヒストンH3リジン36の配列を含むペプチドを基質として、被検物質及びS-アデノシルメチオニン存在下で反応させた後、メチル化ヒストンH3リジン36を認識する抗体を一次抗体として反応させ、さらに、当該一次抗体を認識するHRP-ラベルの二次抗体を反応させた後、HRPの基質を添加することにより発色や発光でメチル化を検出する方法等により確認することができる。その他、ヒストンメチル化を検出できる汎用方法を適用することができ、例えば、NSD2 Chemiluminescent Assay Kit（BPS Bioscience）、AlphaLISA assay（PerkinElmer社）、MTase-Glo（登録商標）Methyltransferase Assay (Promega社)、HTRF（登録商標） (Cisbio社)等の市販のキットや、TOF-MS/MS、LC-MS/MS、SPA (Scintillation Proximity Assay)、SPR（Surface Plasmon Resonance）、NMR（Nuclear Magnetic Resonance）、CETSA (cellular Thermal Shift Assay)、国際公開WO2011/103028に記載の方法等を適用することができる。
　NSD2遺伝子の発現の解析は、具体的には、例えば、測定対象の遺伝子の転写産物であるmRNA量を測定するか、または測定対象の遺伝子産物であるタンパク質量を測定することにより実施することができる。
　mRNA量を測定する方法としては、公知の遺伝子発現検出方法を用いることができる。例えば、ノーザンブロッティング法、ドットブロット法、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）、逆転写PCR(RT-PCR)、定量RT-PCR、ハイブリダイゼーション法、およびDNAアレイ法、次世代シーケンシング、デジタルPCR等の数々の分子生物学的手法を使用してmRNA量の測定を実施できる。
　NSD2タンパク質を定量的に測定する方法としては、公知のタンパク質測定法を用いることができる。例えば、NSD2タンパク質に対する抗体を使用した各種の方法を適用できる。具体的には、ウエスタンブロット法、酵素免疫固相法（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay; ELISA）、および放射免疫測定法（Radio Immuno Assay; RIA）等を挙げることができる。
　なお、NSD2タンパク質に対する抗体は、NSD2タンパク質を抗原とするものであって、当該抗原に特異的に結合する限り、ヒト型抗体、マウス抗体、ラット抗体、ウサギ抗体、ヒツジ抗体等を適宜用いることができる。抗体は、ポリクローナル抗体であってもモノクローナル抗体であっても良いが、均質な抗体を安定的に生産できる点で、モノクローナル抗体が好ましい。ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体は、当業者に周知の方法により生産することができる。
　本明細書における、用語「治療」とは疾患進行の速度を減少させること、病状を改善又は緩和すること、及び寛解又は予後の改善が含まれる。例えば、がん性細胞の増殖を低減させること（又はがん性細胞を破壊すること）、疾患から生じる症候を減少させること、疾患に罹患している者の生活の質を改善させること、疾患を治療するために必要とされる他の薬物療法の用量を減少させること、疾患の進行を遅延させること、及び／又は被験体の生存を延長させることが含まれるがこれらに限定されない。
　本明細書における、用語「前治療」は、NSD2阻害物質による治療の対象となる多発性骨髄腫患者に対し、既に行われていた何らかの治療的行為を意味する。例えば、外科的療法、化学療法、放射線療法および免疫療法が挙げられる。
　化学療法は、がんの治療において有用な化合物を用いる療法である。がんの治療において有用な化合物としては、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、抗腫瘍性植物成分、BRM（生物学的応答性制御物質）、ホルモン、ビタミン、抗腫瘍性抗体、分子標的薬、その他の抗腫瘍剤等が挙げられる。
　より具体的に、アルキル化剤としては、例えば、ナイトロジェンマスタード、ナイトロジェンマスタードN-オキシド、ベンダムスチンもしくはクロラムブチル等のアルキル化剤、カルボコンもしくはチオテパ等のアジリジン系アルキル化剤、ディブロモマンニトールもしくはディブロモダルシトール等のエポキシド系アルキル化剤、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ニムスチンハイドロクロライド、ストレプトゾシン、クロロゾトシンもしくはラニムスチン等のニトロソウレア系アルキル化剤、ブスルファン、トシル酸インプロスルファン、テモゾロミドまたはダカルバジン等が挙げられる。
　各種代謝拮抗剤としては、例えば、6-メルカプトプリン、6-チオグアニンもしくはチオイノシン等のプリン代謝拮抗剤、フルオロウラシル、テガフール、テガフール・ウラシル、カルモフール、ドキシフルリジン、ブロクスウリジン、シタラビン若しくはエノシタビン等のピリミジン代謝拮抗剤、メトトレキサートもしくはトリメトレキサート等の葉酸代謝拮抗剤等が挙げられる。
　抗腫瘍性抗生物質としては、例えば、マイトマイシンC、ブレオマイシン、ペプロマイシン、ダウノルビシン、アクラルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、ピラルビシン、THP-アドリアマイシン、4 ’-エピドキソルビシンもしくはエピルビシン、クロモマイシンA 3 またはアクチノマイシンD 等が挙げられる。
　抗腫瘍性植物成分およびそれらの誘導体としては、例えば、ビンデシン、ビンクリスチンもしくはビンブラスチン等のビンカアルカロイド類、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル等のタキサン類、またはエトポシドもしくはテニポシド等のエピポドフィロトキシン類が挙げられる。
　BRMとしては、例えば、腫瘍壊死因子またはインドメタシン等が挙げられる。
　ホルモンとしては、例えば、ヒドロコルチゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プラステロン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、オキシメトロン、ナンドロロン、メテノロン、ホスフェストロール、エチニルエストラジオール、クロルマジノン、メペチオスタンまたはメドロキシプロゲステロン等が挙げられる。
　ビタミンとしては、例えば、ビタミンＣまたはビタミンＡ等が挙げられる。
　抗腫瘍性抗体、分子標的薬としては、ダラツムマブ、イサツキシマブ、エロツズマブ、トラスツズマブ、リツキシマブ、セツキシマブ、ニモツズマブ、デノスマブ、ベバシズマブ、インフリキシマブ、ピジリズマブ、ラムシルマブ、メシル酸イマチニブ、ダサチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、オシメルチニブ、スニチニブ、ラパチニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、コビメチニブ、パゾパニブ、パルボシクリブ、パノビノスタット、ソラフェニブ、クリゾチニブ、ベムラフェニブ、キザルチニブ、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、イキサゾミブ、ギルテリチニブ、ベネトクラクス、セレネキソール等が挙げられる。
　その他の抗腫瘍剤としては、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、タモキシフェン、レトロゾール、アナストロゾール、エキセメスタン、トレミフェンクエン酸塩、フルベストラント、ビカルタミド、フルタミド、ミトタン、リュープロレリン、ゴセレリン酢酸塩、カンプトテシン、イホスファミド、シクロホスファミド、メルファラン、Ｌ－アスパラギナーゼ、アセクラトン、シゾフィラン、ピシバニール、プロカルバジン、ピポブロマン、ネオカルチノスタチン、ヒドロキシウレア、ウベニメクス、アザシチジン、デシタビン、サリドマイド、レナリドミド、ポマリドミド、エリブリン、トレチノインまたはクレスチン等が挙げられる。
　放射線療法とは放射線治療とは、高エネルギーX線を発生させるリニアックと呼ばれる装置等を用い、治療用放射線としては、電子線、陽子線、重粒子線、α（アルファ）線、β（ベータ）線、γ（ガンマ）線などを発生させて治療対象となる患者に照射することにより細胞のDNAに損傷を与え、がん細胞を死に至らしめる療法である。骨髄腫細胞は一般に放射線に感受性が高く、腫瘍縮小や疼痛緩和のために放射線治療が用いられる。
　免疫療法とは、患者の免疫本来の力を回復させて治療する方法であり、（1) 体内の免疫(T細胞など)の活性化を持続する（ブレーキがかかるのを防ぐ）方法、例えば、免疫チェックポイント阻害薬を用いた治療方法、（2) T細胞を体外に取り出してから、がん細胞の目印を見分ける遺伝子を入れて増やしてから体に戻す方法、例えばエフェクターT細胞療法、（3) 体内の免疫を強める方法、例えば、BCG投与による方法などが挙げられる。免疫チェックポイント阻害薬としては、PD-1阻害薬（ニボルマブ、ペンブロリズマブなど）やPD-L1阻害薬（デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブなど）、CTLA-4阻害薬（イピリムマブなど）が挙げられる。エフェクターT細胞療法としては、CAR-T療法などが挙げられる。体内の免疫を強める方法としては、インターフェロンα、インターフェロンγ、インターロイキン２などのサイトカイン療法や、BCGなどの免疫賦活剤を用いた方法が挙げられる。
　本発明における「t(4;14)転座」は、t(4;14)(p16;q32)と表記される場合もあり、多発性骨髄腫において高頻度に見出される免疫グロブリンIgH領域の相互転座であり、さまざまな染色体上のターゲット遺伝子の遺伝子発現を増加させる。t(4;14)転座はFISH 法やRT-PCR法等による市販のキット等を用いて検出することができる。例えば FGFR3遺伝子とIGH遺伝子を挟んだプロ－ブを用いるFISH法により融合シグナルとして検出することができる。公知の文献（Blood. 1999 Jul 15;94(2):724-32）に記載された方法によっても検出できる。
　本発明において、用語「再発」は、通常に用いられる意味での「再発」の定義を意味するが、例えば、一旦は治療により消失、縮小した病態が再び現れることをいう。
　本発明において、用語「難治性」は、通常に用いられる意味での「難知性」の定義を意味するが、例えば、治療による効果が得られにくい性質を示すことをいう。
　本発明の一態様は、NSD2阻害物質を含有する、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療用医薬に関する。
　本発明の別の一態様は、NSD2阻害物質を投与することを含む、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療方法に関する。
　本発明の別の一の態様は、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療のためのNSD2阻害物質に関する。
　本願明細書に示されるように、前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫はt(4;14)転座陽性率が高いため、NSD2阻害剤による治療が有効である。また、NSD2阻害物質はNSD2が活性化された細胞特異的に抗腫瘍効果を示すので、正常細胞等への影響が少ない安全な医薬として用いることができる。
　ここで、「前治療」は上記に述べたすべての前治療を含み、限定されないが、化学療法、放射線療法および免疫療法から選択される１以上であることが好ましく、化学療法が好適であり、その中でも、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬および抗体医薬からなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものであることがより好ましく、多発性骨髄腫の標準的治療に用いられる、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、イキサゾミブなどのプロテアソーム阻害剤、メルファラン、シクロホスファミドなどのアルキル化剤、ドキソルビシンなどのアントラサイクリン系抗腫瘍性抗生物質、デキサメタゾン、デカドロンなどのステロイド薬、レナリドミド、ポマリドミドサリドマイドなどの免疫調整薬、ダラツムマブ、イサツキシマブなどの抗CD38抗体、エロツズマブなどの抗SLAMF7抗体、パノビノスタットなどのヒストン脱アセチル化酵素（HDAC）阻害剤、ベネトクラクスなどのBCL-2阻害剤から選ばれる2剤、3剤、4剤または5剤の併用の治療が特に好適である。また、メルファラン、ボルテゾミブ、プレドニゾロン、デキサメタゾン、レナリドミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ダラツムマブ、イサツキシマブ、ベンダムスチン、カルムスチン、サリドマイド、ポマリドミド、イキサゾミブ、カルフィルゾミブ、エロツズマブ、ベネトクラクス、パノビノスタットおよびセレネキソールからなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含む前治療が好適である。ダラツムマブまたはイサツキシマブの投与を含むものであることがより好ましく、ダラツムマブの投与を含むものがさらに好ましい。
　本発明において、NSD2阻害物質は、静脈内に、筋肉内に、皮下に、局所的に、経口的に、経皮的に、腹腔内に、胸腔内に、移植によって、吸入によって、髄腔内に、脳室内に、腫瘍内又は鼻腔内に投与され得る。適切な用量は、通常の熟練した医師又は獣医師の知識の範囲内の多数の要因に依存することが理解される。活性化合物の用量は、例えば、対象者の年齢、体重、全般的な健康状態、性別及び食事、投与時間、投与経路、排泄速度、任意の薬物の組み合わせに依存する。
　本発明におけるNSD2阻害物質は低分子化合物、中分子化合物、高分子化合物等の合成化合物およびその薬学上許容される塩のほか、ペプチド、タンパク質、核酸（shRNA、siRNA等を含む）、天然物、抗体、細胞等を含むものであってもよい。合成化合物と適宜リンカー、スペーサー等を介して抗体やペプチドが結合した薬物複合体であってもよい。また、Targeted Protein Degradationの技術を利用したNSD2の阻害物質であってもよい。NSD2阻害物質は、前記のNSD2阻害を確認する方法を用いてスクリーニングすることができる。NSD2阻害物質としては、例えば、国際公開WO2019/113469号に記載の化合物およびその誘導体、US2014161785号に記載のVERTICILLINおよびその誘導体、国際公開WO2015/152437号に記載の化合物およびその誘導体、CN109734677号に記載の化合物およびその誘導体、WO2021/026803号に記載の化合物およびその誘導体などが具体例として挙げられるが、これらに限定されない。また、これらの重水素体であってもよい。
　NSD2阻害物質が塩を形成する場合の塩としては、例えば塩酸塩、ヨウ化水素酸塩等のハロゲン化水素酸塩；硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、燐酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩等の低級アルカンスルホン酸塩；ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩等のアリ－ルスルホン酸塩；ギ酸塩、酢酸塩、りんご酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩；及びオルニチン酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩等のアミノ酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アンモニウム塩等の無機塩；ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、N-メチルグルカミン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、シクロヘキシルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、N,N’-ジベンジルエチレンジアミン塩、ジエタノールアミン塩、N-ベンジル-N-(2-フェニルエトキシ）アミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩等の有機アミン塩、等を挙げることができる。
　薬学上許容される塩は、遊離体もしくは溶媒和物として存在することもある。空気中の水分を吸収すること等により水和物として存在することもある。溶媒和物としては、医薬的に許容し得るものであれば特に限定されないが、具体的には、水和物、エタノール和物等が好ましい。また、一般式（１）で表される化合物中に窒素原子が存在する場合にはＮ－オキシド体となっていてもよく、これら溶媒和物及びＮ－オキシド体も本発明の範囲に含まれる。それらの構造によっては、立体異性体を生じ得る。これらの立体異性体、およびこれらの立体異性体の任意の割合の混合物をもすべて含むものである。立体異性体の定義は1996 IUPC, Pure and Applied Chemistry 68,2193-2222に示す通りである。薬学上許容される塩が、互変異性体として存在する場合、それらの互変異性体が平衡状態で存在している場合も、またはある形が支配的に存在している場合のいずれも本発明の範囲内に含まれる。互変異性体とは分子の１個の原子のプロトンが他の原子にシフトすることによって生じる異性体のことをいう。
　薬学上許容される塩は、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により酵素的に酸化、還元、加水分解等を起こしたり、胃酸等により加水分解等を起こして所望の化合物に変化される「医薬的に許容されるプロドラッグ化合物」であってもよい。
　上記プロドラッグとしては、アシル化、アルキル化、リン酸化された化合物等が挙げられる。
　化合物のプロドラッグは公知の方法によって化合物（１）から製造することができる。また、化合物のプロドラッグは、広川書店1990年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計163頁～198頁に記載されているような、生理的条件で所望の化合物に変化するものも含まれる。
　本発明にかかる医薬は、NSD2阻害物質と薬学的に許容し得る担体を含み得る。薬学的に許容し得る担体とは、本発明の化合物または本発明の化合物を含む組成物を、ある器官または臓器から他の器官または臓器に輸送することに関与する、薬学的に許容される材料（例えば、賦形剤、希釈剤、添加剤、溶媒等）を意味する。
　製剤の調製方法としては投与法に応じ適当な製剤（例えば、経口剤または注射剤）を選択し、通常用いられている各種製剤の調製法にて調製できる。経口剤としては、例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、トローチ剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、または油性ないし水性の懸濁液等を例示できる。経口投与の場合では遊離体のままでも、塩の型のいずれでもよい。水性製剤は薬学的に許容される酸と酸付加物を形成させるか、ナトリウム等のアルカリ金属塩とすることで調製できる。注射剤の場合は製剤中に安定剤、防腐剤または溶解補助剤等を使用することもできる。これらの補助剤等を含むこともある溶液を容器に収納後、凍結乾燥等によって固形製剤として用時調製の製剤としてもよい。また、一回投与量を一の容器に収納してもよく、また複数回投与量を一の容器に収納してもよい。
　固形製剤としては、例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、またはトローチ剤が挙げられる。これらの固形製剤は、本発明の化合物とともに薬学的に許容し得る添加物を含んでもよい。添加物としては、例えば、充填剤類、増量剤類、結合剤類、崩壊剤類、溶解促進剤類、湿潤剤類または滑沢剤類が挙げられ、これらを必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。
　液体製剤としては、例えば、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、または懸濁剤が挙げられる。添加物としては、例えば、懸濁化剤または乳化剤が挙げられ、これらを必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。
　製剤用の物質として以下のものを挙げることができるが、これらに制限されない：グリシン、アラニン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリジン等のアミノ酸類、抗菌剤、アスコルビン酸、硫酸ナトリウム又は亜硫酸水素ナトリウム等の抗酸化剤、リン酸、クエン酸、ホウ酸バッファー、炭酸水素ナトリウム、トリス－塩酸（Tris-Hcl）溶液等の緩衝剤、マンニトールやグリシン等の充填剤、エチレンジアミン四酢酸（EDTA）等のキレート剤、カフェイン、ポリビニルピロリジン、β－シクロデキストリンやヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン等の錯化剤、グルコース、マンノース又はデキストリン等の増量剤、単糖類、二糖類等の他の炭水化物、着色剤、香味剤、希釈剤、乳化剤やポリビニルピロリジン等の親水ポリマー、低分子量ポリペプチド、塩形成対イオン、塩化ベンズアルコニウム、安息香酸、サリチル酸、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロレキシジン、ソルビン酸又は過酸化水素等の防腐剤、グリセリン、プロピレン・グリコール又はポリエチレングリコール等の溶媒、マンニトール又はソルビトール等の糖アルコール、懸濁剤、ソルビタンエステル、ポリソルベート20やポリソルベート80等のポリソルベート、トリトン（triton）、トロメタミン（tromethamine）、レシチン又はコレステロール等の界面活性剤、スクロースやソルビトール等の安定化増強剤、塩化ナトリウム、塩化カリウムやマンニトール・ソルビトール等の弾性増強剤、輸送剤、賦形剤、及び／又は薬学上の補助剤。これらの製剤用の物質の添加量は、薬剤の重量に対して0.01～100倍、特に0.1～10倍添加するのが好ましい。製剤中の好適な組成は当業者によって、適用疾患、適用投与経路などに応じて適宜決定することができる。
　製剤中の賦形剤や担体は液体でも固体でもよい。適当な賦形剤や担体は注射用の水や生理食塩水、人工脳脊髄液や非経口投与に通常用いられている他の物質でもよい。中性の生理食塩水や血清アルブミンを含む生理食塩水を担体に用いることもできる。医薬組成物にはpH7.0-8.5のTrisバッファー、pH4.0-5.5の酢酸バッファー、pH3.0-6.2のクエン酸バッファーを含むことができる。また、これらのバッファーにソルビトールや他の化合物を含むこともできる。
　本発明は、哺乳類、特にヒトの多発性骨髄腫の治療に用いることができる。本発明のNSD阻害物質の投与量および投与間隔は、疾患の場所、患者の身長、体重、性別または病歴によって、医師の判断により適宜選択され得る。本発明の医薬をヒトに投与する場合、投与量の範囲は、一種類の有効成分につき、１日当たり、約0.01mg/kg体重～約500mg/kg体重、好ましくは、約0.1mg/kg体重～約100mg/kg体重である。ヒトに投与する場合、好ましくは、１日あたり１回、あるいは２から４回に分けて投与され、適当な間隔で繰り返すのが好ましい。また、１日量は、医師の判断により必要によっては上記の量を超えてもよい。
　本発明は他の抗腫瘍剤との併用として用いてもよい。上記の化学療法に用いる薬剤として挙げた薬剤との併用が例として挙げられる。併用においては、併用薬と同時の投与でもよく、時間をおいて別々の投与でもよく、単一製剤であってもよく、別々の製剤であってもよい。
　また、放射線治療や免疫療法との併用としてもよい。
　以下に示す実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではなく、これらはいかなる意味においても限定的に解釈されない。
（試験例１)　
難治性多発性骨髄腫患者由来の骨髄細胞をサイトスピンによってスライドガラスに貼りつけ固定した。MetaSystems Probes社のXcyting Locus-Specific Probes; XL t(4;14) (FGFR3/IGH DF; MetaSystems, D-5108-100-OG)キットを用いて染色体4p16.3と14q32.3をそれぞれオレンジ色と緑色に染色し、約100個の細胞画像から染色体転座の有無を観察した。Vectra Polaris（登録商標） (PerkinElmer社)を用いて撮像および観察した。一つの細胞核内に最低一つの黄色シグナルが検出された細胞をt(4;14)陽性細胞と判断し、以下の計算式によって1患者の骨髄細胞中のt(4;14)陽性率（%）を算出した。
　t(4;14)陽性率（%）= t(4;14)陽性細胞数÷カウントした全細胞数x100
　結果を表１に示す。
　尚、表中の「－」は細胞が壊れていたため、実験不成立であったことを示す。
　健常人の骨髄細胞を用いたt(4;14)転座FISH解析において最大約10%の偽陽性シグナルが検出されることが報告されている（BLOOD, 2001, Vol 98, 4)。よって、10%以上のt(4;14)陽性率を示した検体をt(4;14)陽性MM患者と判定した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
（試験例２）NSD2ノックダウンによる細胞増殖阻害
　t(4;14）陽性のヒト多発性骨髄腫由来細胞株（LP-1細胞、OPM-2細胞、KMS-11細胞）、NSD活性型変異E1099Kを有するヒト多発性骨髄腫由来細胞株（MM.1S)、およびt(4;14）陰性のヒト多発性骨髄腫由来細胞株（RPMI-8226細胞、U266.B1細胞）に対するNSD2ノックダウンの影響をRNA干渉により検討した。
　各細胞は10%または20%のウシ胎児血清（FBS）を添加した培地を用いて5% CO2存在下37°Cで培養した。細胞と培地の組み合わせは下記の通りである。
　LP-1細胞: IMDM (Gibco:12440-053), 20%FBS
　KMS-11細胞、OPM-2細胞、U266.B1細胞、MM.1S細胞、RPMI-8226細胞： RPMI-1640 (Gibco:A10491) , 10%FBS
　NSD2タンパク質をノックダウンするために、ショートヘアピン(sh)RNA発現レンチウイルスベクター作製用プラスミド（NSD2 MISSION shRNA Plasmid DNA (SHCLND-NM_007331 標的配列:CCGGCGGAAAGCCAAGTTCACCTTTCTCGAGAAAGGTGAACTTGGCTTTCCGTTTTTG)をSIGMA ALDRICHより購入した。陰性対照にはMISSION（登録商標）pLKO.1-puro Non-Mammalian shRNA Control Plasmid DNA (SHC002)を用いた。
　shRNAの発現に際しては、リポフェクタミン（登録商標）2000(Invitrogen)を使用して、ViraPower（登録商標） Lentiviral Expression System (Life Technologies)とともに上記のプラスミドを、Lenti-X 293T細胞（タカラバイオ株式会社、Cat. No. 632180）にコトランスフェクトし、shRNA発現カセットの形質導入のためのレンチウイルスを作製した。作製したレンチウイルスを各細胞株に感染させ、感染翌日（Day 1）からpuromycin（InvivoGen）を添加し続け感染細胞を選抜した。感染5または7日後（Day 5またはDay 7）に96 well plateに100 μLずつ細胞希釈液を播種し、Relative cellular growthの値は、ATPlite（PerkinElmer社、Cat. No. 6016949）を細胞に添加し測定したシグナル値÷100,000により算出した。
　NSD2に対するRNA干渉により、t(4;14)転座陽性MM細胞株およびNSD2活性型変異MM（多発性骨髄腫）由来細胞株において強い細胞増殖阻害が観察された（図1）。一方、その他のMM（多発性骨髄腫)由来細胞株においてはNSD2に対するRNA干渉による細胞増殖阻害は観察されなかった（図2）。
　NSD2ノックダウンによりt(4;14)転座陽性およびNSD2活性型多発性骨髄腫細胞選択的に強い増殖阻害効果が確認された。
　本発明により、NSD2阻害剤を用いることにより再発または難治性の多発性骨髄腫治療が可能であることが明らかとなった。従って、本発明は、医療分野、特にがん治療の分野において、大きく貢献しうるものである。
配列番号１：NSD2タンパク質（配列番号２）をコードする NSD2 mRNA。
配列番号２：NSD2タンパク質のアミノ酸配列。

Claims (18)

  1. 　NSD2阻害物質を含有する、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療用医薬。
  2. 　多発性骨髄腫がt(4;14)転座陽性である請求項１に記載の医薬。
  3. 　前治療が、化学療法、放射線療法および免疫療法から選択される１以上である請求項１または２に記載の医薬。
  4. 　前化学療法が、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬および抗体医薬からなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである請求項３に記載の医薬。
  5. 　前化学療法が、メルファラン、ボルテゾミブ、プレドニゾロン、デキサメタゾン、レナリドミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ダラツムマブ、イサツキシマブ、ベンダムスチン、カルムスチン、サリドマイド、ポマリドミド、イキサゾミブ、カルフィルゾミブ、エロツズマブ、ベネトクラクス、パノビノスタットおよびセレネキソールからなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである請求項３に記載の医薬。
  6. 　前化学療法が、ダラツムマブまたはイサツキシマブの投与を含むものである請求項５に記載の医薬。
  7. 　NSD2阻害物質を投与することを含む、少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療方法。
  8. 　多発性骨髄腫がt(4;14)転座陽性である請求項７に記載の方法。
  9. 　前治療が、化学療法、放射線療法および免疫療法から選択される１以上である請求項７または８に記載の方法。
  10. 　前化学療法が、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬および抗体医薬からなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである請求項９に記載の方法。
  11. 　前化学療法が、メルファラン、ボルテゾミブ、プレドニゾロン、デキサメタゾン、レナリドミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ダラツムマブ、イサツキシマブ、ベンダムスチン、カルムスチン、サリドマイド、ポマリドミド、イキサゾミブ、カルフィルゾミブ、エロツズマブ、ベネトクラクス、パノビノスタットおよびセレネキソールからなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである請求項９に記載の方法。
  12. 　前化学療法が、ダラツムマブまたはイサツキシマブの投与を含むものである請求項１１に記載の方法。
  13. 　少なくとも1つ以上の前治療を受けた再発または難治性の多発性骨髄腫の治療のためのNSD2阻害物質。
  14. 　多発性骨髄腫がt(4;14)転座陽性である請求項１３に記載の阻害物質。
  15. 　前治療が、化学療法、放射線療法および免疫療法から選択される１以上である請求項１３または１４に記載の阻害物質。
  16. 　前化学療法が、プロテアソーム阻害剤、免疫調整薬、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬および抗体医薬からなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである請求項１５に記載の阻害物質。
  17. 　前化学療法が、メルファラン、ボルテゾミブ、プレドニゾロン、デキサメタゾン、レナリドミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ダラツムマブ、イサツキシマブ、ベンダムスチン、カルムスチン、サリドマイド、ポマリドミド、イキサゾミブ、カルフィルゾミブ、エロツズマブ、ベネトクラクス、パノビノスタットおよびセレネキソールからなる群から選択される１以上の薬剤の投与を含むものである請求項１５に記載の阻害物質。
  18. 　前化学療法が、ダラツムマブまたはイサツキシマブの投与を含むものである請求項１７に記載の阻害物質。
PCT/JP2021/017630 2020-05-11 2021-05-10 再発または難治性の多発性骨髄腫治療のための医薬 WO2021230179A1 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2020083503 2020-05-11
JP2020-083503 2020-05-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2021230179A1 true WO2021230179A1 (ja) 2021-11-18

Family

ID=78525813

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2021/017630 WO2021230179A1 (ja) 2020-05-11 2021-05-10 再発または難治性の多発性骨髄腫治療のための医薬

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2021230179A1 (ja)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019113469A1 (en) * 2017-12-07 2019-06-13 The Regents Of The University Of Michigan Nsd family inhibitors and methods of treatment therewith

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019113469A1 (en) * 2017-12-07 2019-06-13 The Regents Of The University Of Michigan Nsd family inhibitors and methods of treatment therewith

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LAURING, J. ET AL. ET AL.: "The multiple myeloma- associated MMSET gene contributes to cellular adhesion, clonogenic growth, and tumorigenicity", BLOOD, vol. 111, no. 2, 2008, pages 856 - 864, XP055058387, DOI: 10.1182/blood-2007-05-088674 *
QIAN SHENXIAN; GAO DA-QUAN; XIE YAPING; XU YIN; HUANG XILIAN: "Down-Regulation of MMSET by RNA Interference Affects Cell Viability and Tumorigenicity in t(4;14) Myeloma Plasma Cells", BLOOD, AMERICAN SOCIETY OF HEMATOLOGY, US, vol. 120, no. 21, 16 November 2012 (2012-11-16), US , pages 3998, XP086657530, ISSN: 0006-4971, DOI: 10.1182/blood.V120.21.3998.3998 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mondello et al. Dual inhibition of histone deacetylases and phosphoinositide 3-kinase enhances therapeutic activity against B cell lymphoma
US20190071668A1 (en) Compositions and methods for identification, assessment, prevention, and treatment of cancer using slncr isoforms
AU2014368906A1 (en) Cancer treatment using combinations of ERK and RAF inhibitors
JP2023182572A (ja) がんの診断及び治療方法
US20200046696A1 (en) Treatment of cancer with smg1-inhibitors
JP6564449B2 (ja) がんの併用治療法
JP6823587B2 (ja) Ｍｄｍ２阻害剤とｂｔｋ阻害剤との併用治療法
AU2013307383A1 (en) Aminoheteroaryl compounds as MTH1 inhibitors
CN114729358A (zh) 涉及miRNA-193a的新疗法
CN112512577A (zh) 结直肠癌的治疗、预防和预后检测的方法
JP2019527037A (ja) がんのための診断及び治療方法
JP7453915B2 (ja) 栄養製品
WO2021230179A1 (ja) 再発または難治性の多発性骨髄腫治療のための医薬
JP2023500334A (ja) がん治療のためのマイクロバイオータ及び代謝物の力の活用
US20230012172A1 (en) Compositions and methods for treatment of platinum-based chemotherapeutic resistant tumors
EP4010002A1 (en) Novel therapeutic use
EP3794010A1 (en) Methods of modulating activity of a cyclic dinucleotide (cdn) with a cdn transporter-modulating agent
EP3329923A1 (en) The potential of crbn-independent imid resensitization by epigenetic therapy
US11712439B2 (en) Methods and materials for identifying and treating bet inhibitor-resistant cancers
WO2023008533A1 (ja) 膵臓がん及び胆管がんの治療のための医薬用組成物
US20240141436A1 (en) Compounds, Compositions and Methods of Treatment Thereof
CN115068487B (zh) 包含己酸羟孕酮的抗肿瘤联合制剂及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 21805078

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 21805078

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP