WO2021162144A1 - 세포 배양 용기 - Google Patents

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WO2021162144A1
WO2021162144A1 PCT/KR2020/002009 KR2020002009W WO2021162144A1 WO 2021162144 A1 WO2021162144 A1 WO 2021162144A1 KR 2020002009 W KR2020002009 W KR 2020002009W WO 2021162144 A1 WO2021162144 A1 WO 2021162144A1
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WO
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cell culture
graphene layer
electrical stimulation
substrate
culture vessel
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PCT/KR2020/002009
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English (en)
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조상근
배범진
정문태
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엘지전자 주식회사
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Publication date
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
    • C12M1/42—Apparatus for the treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02—Form or structure of the vessel
    • C12M23/10—Petri dish
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/20—Material Coatings

Definitions

  • the present invention relates to a cell culture vessel. More particularly, it relates to a cell culture vessel capable of effectively applying electrical stimulation to the deposited graphene layer included in the culture substrate.
  • Graphene is a structure in which hexagonal shapes of 6 carbons are connected to each other to form a two-dimensional single layer. And it has a structure differentiated from graphite having a three-dimensional structure.
  • corona treatment or an additional protein material (Extracellular matrix, ECM) was coated on a substrate and cultured and differentiated without external stimulus, or an external stimulus such as an electric field was applied to perform culture and differentiation.
  • ECM Extracellular matrix
  • the substrate may be disposed between the working electrode and the counter electrode spaced apart from the working electrode and the counter electrode, and the cells cultured on the substrate may receive electrical stimulation by an electric field generated between the working electrode and the counter electrode.
  • the present invention is to provide a cell culture vessel capable of directly applying electrical stimulation to cultured cells.
  • the present invention is intended to solve all problems that can be generated or predicted from the prior art in addition to the technical problems described above.
  • the cell culture vessel comprises a base substrate, at least one deposited graphene layer disposed on the base substrate, and at least one electrical stimulation input terminal coupled to a working electrode to transmit electrical stimulation to the deposited graphene layer. includes a substrate.
  • the electrical stimulation input terminal may be directly coupled to the deposited graphene layer.
  • a plurality of the electrical stimulation input terminal may be disposed to be spaced apart from each other on the edge of the deposited graphene layer.
  • the base substrate may include polystyrene (PS).
  • PS polystyrene
  • the base substrate may include a conductive metal layer, and the conductive metal layer may include at least one of ITO, Ag, Au, and Cu.
  • the deposited graphene layer may be directly disposed on the base substrate, and the electrical stimulation input terminal may be directly coupled to the base substrate.
  • the working electrode for transmitting electrical stimulation to the deposited graphene layer and a counter electrode electrically opposite to the working electrode, wherein the working electrode is directly coupled to the culture substrate, and the counter electrode is spaced apart from the culture substrate can be located.
  • Each of the working electrode and the counter electrode may have a plate shape parallel to the culture substrate or a linear shape intersecting the culture substrate.
  • a culture substrate case including a case bottom on which the culture substrate is placed and an outer wall surrounding the case bottom edge and a culture substrate case cover covering an upper opening of the culture substrate case, wherein the culture substrate case cover is the working electrode and at least one electrode insertion hole through which at least one of the counter electrodes passes.
  • the working electrode and the counter electrode may be connected to a power supply.
  • At least one of the working electrode and the counter electrode may include at least one of PT, Au, Ag, Ti, and Stainless Steel.
  • the deposited graphene layer may be a single layer or a multilayer in which a plurality of layers are stacked, and the number of deposited graphene layers may be 1 to 5.
  • An oxygen functional group may be formed on the surface of the deposited graphene layer.
  • the cell culture vessel of the present invention may include an input terminal capable of delivering electrical stimulation to the deposited graphene layer, and thus the culture efficiency may be improved by effectively delivering the electrical stimulation to the cells to be cultured.
  • FIG. 1 is a perspective view of a cell culture vessel according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 2 is an exploded perspective view of a cell culture vessel according to an embodiment of the present invention.
  • FIG 3 is a plan view of a culture substrate according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 4 is a plan view of a culture substrate according to another embodiment of the present invention.
  • FIG. 6 is a cross-sectional view of a cell culture vessel according to an embodiment of the present invention.
  • the cell culture vessel 100 of the present invention includes an electrical stimulation input terminal capable of disposing a deposited graphene layer 12 on a base substrate 11 and transmitting electrical stimulation to the deposited graphene layer 12, thereby providing electricity to cultured cells. stimuli can be transmitted effectively.
  • FIGS. 1 to 6 a cell culture vessel 100 according to an embodiment of the present invention will be described with reference to FIGS. 1 to 6 .
  • the cell culture vessel 100 may include a culture substrate 10 on which direct cell culture is performed.
  • the culture substrate 10 is a base substrate 11 , at least one deposited graphene layer 12 disposed on the base substrate 11 , and at least one electrical stimulus for transferring electrical stimulation to the deposited graphene layer 12 . It may include a stimulus input terminal 14 .
  • the base substrate 11 may physically implement the basic structure of the culture substrate 10 and form mechanical durability.
  • the base substrate 11 may be at least one of a ceramic material, glass, a polymer and a polymer cured plastics.
  • the base substrate 11 may include polystyrene (PS).
  • PS polystyrene
  • the constituent material of the base substrate 11 is not limited to the above-described subject, and it will be said that it includes a range that can be easily designed and changed by a person skilled in the art within an appropriate range of cell culture.
  • the culture substrate 10 places the deposited graphene layer 12 on the base substrate 11 , and the surface of the deposited graphene layer 12 . can form an oxygen functional group.
  • cell culture uniformity can be improved and contamination can be minimized and easy long-term storage is possible.
  • Graphene of the deposited graphene layer 12 is an inorganic material composed of carbon, and since the crystal structure is regular, cell culture uniformity can be improved, contamination possibility is small, and storage is easy.
  • cell culture vessel 100 since the crystal structure is regular, compared to a case in which a substrate is conventionally treated with a protein coating (eg, extracellular matrix), cell culture can be uniform. In addition, since proteins and the like are easily denatured by external environmental changes (temperature, moisture, and bacteria), the cell culture vessel 100 according to the embodiment of the present invention can facilitate long-term storage while minimizing contamination.
  • a protein coating eg, extracellular matrix
  • graphene can have a similar function to the extracellular matrix protein, which is essential as a role for adsorbing cells and supplying nutrients in cell culture, so that binding compatibility with cells can be high.
  • the surface of the deposited graphene layer 12 included in the cell culture vessel 100 according to the embodiment of the present invention is modified to form oxygen functional groups on the surface of the deposited graphene layer 12 .
  • oxygen functional groups may be formed on the surface of the deposited graphene layer 12 by connecting and adding oxygen to carbon constituting the deposited graphene layer 12 or replacing carbon with oxygen.
  • the cell culture vessel 100 can improve adhesion or adsorption of cells to be cultured by forming oxygen functional groups on the surface of the deposited graphene layer 12 .
  • various functional groups with high binding properties to oxygen functional groups may be disposed in the cells to be cultured, and these oxygen functional groups serve to increase hydrophilicity. facilitate the process.
  • Improvement of such initial adhesion properties can improve cell culture efficiency.
  • the deposited graphene layer 12 included in the cell culture vessel 100 according to the embodiment of the present invention can effectively culture cells by oxygen functional groups formed on the surface.
  • the delivery of nutrients is improved by the oxygen functional group formed on the surface of the deposited graphene layer 12, so that effective cell culture can be performed.
  • the oxygen functional group is electrically negatively charged, whereas the amino acids, which are nutrients necessary for cell culture, are electrically positively charged, and the amino acids, which are nutrients, can be easily adsorbed to the oxygen functional groups formed on the surface of the deposited graphene layer 12 .
  • the supply of nutrients to the cells to be cultured can be increased, thereby maximizing the cell culture and differentiation efficiency.
  • the deposited graphene layer 12 included in the cell culture vessel 100 may be composed of a single layer or a multi-layer in which a plurality of layers are stacked, and the number of layers of the deposited graphene layer 12 is 1 to 5 can be
  • the deposited graphene layer 12 is a concept opposite to flake-type graphene formed by pulverizing graphite, and unlike flake-type graphene formed by stacking several tens to hundreds of graphene layers, deposited graphene
  • the pinned layer 12 may have several graphene layers, respectively, constituting the deposited graphene layer 12, and may be significantly smaller than that of flake-type graphene.
  • the cell culture vessel 100 includes a multi-layer deposited graphene layer 12, thereby improving cell culture efficiency.
  • the oxygen functional group included in the deposited graphene layer 12 may be formed by adding oxygen by connecting oxygen to carbon constituting the graphene, or by substituting oxygen for carbon. Therefore, when the deposited graphene layer 12 is composed of multiple layers, oxygen functional groups can be additionally formed for each layer, so that as the number of spots to which cells to be cultured will be adsorbed increases, effective cell culture can be performed.
  • the number of oxygen functional groups may increase from the lowest layer to the highest layer.
  • the lowest layer means a graphene layer closest to the base substrate 11
  • the uppermost layer means a graphene layer stacked farthest from the base substrate 11 .
  • the oxygen functional group may be formed by substituting carbon constituting graphene due to damage to the surface of the deposited graphene layer 12 by oxidation plasma treatment, which will be described later, the deposited graphene layer 12 having the greatest damage by oxidation plasma treatment. ) has the most oxygen functional groups in the uppermost layer, and the oxygen functional groups may decrease toward the lowest layer.
  • the deposited graphene layer 12 of the cell culture vessel 100 by controlling the number of graphene layers constituting the deposited graphene layer 12 to within 5 layers, too many graphene layers are stacked and oxidized plasma It is possible to prevent the formation of oxygen functional groups in the graphene layer adjacent to the lowest layer because the treatment effect is not realized.
  • the cell culture vessel 100 can effectively transmit electrical stimulation through the electrical stimulation input terminal 14 to cells that are adhered or adsorbed to the deposited graphene layer 12 of the culture substrate 10 and are being cultured. Cell culture efficiency can be improved.
  • the electrical stimulation delivered to the cultured cells is transmitted from the power supply device 50 to the electrode 40 , and the electrical stimulation transmitted to the electrode 40 again is deposited on the graphene layer It can be delivered to (12) and finally delivered to the cultured cells.
  • the power supply device 50 may transmit electrical stimulation to the deposited graphene layer 12 through the working electrode 41 and the counter electrode 42 .
  • the working electrode 41 and the counter electrode 42 may be electrically connected to the power supply device 50 through a separate wire, etc., but the connection structure of the electrode 40 and the power supply device 50 is illustrated in the drawings and the above description. is not limited to, it will be said to include a structure that can be easily designed and changed by those skilled in the art.
  • the working electrode 41 and the counter electrode 42 mean electrodes having polarities electrically opposite to each other, and the working electrode 41 or the counter electrode 42 does not mean a specific polarity.
  • the electrical stimulation input terminal 14 may be directly coupled to the deposited graphene layer 12 , and the electrical stimulation input terminal 41 may be directly coupled to the working electrode 41 at the same time.
  • the electrical stimulation input terminal 14 is directly coupled to the deposited graphene layer 12 at the same time as directly coupled to the working electrode 41, there is no need for a separate high-resistance electrical stimulation mediator, the working electrode ( The electrical stimulation transmitted from 41) can be effectively applied to the deposited graphene layer 12 .
  • the deposited graphene layer 12 is a material having excellent electrical conductivity, the electric stimulation applied to the anchored graphene layer 12 can be effectively attached to and adsorbed on the surface of the deposited graphene layer 12 and transferred to the cultured cells, as a result. Cell culture may be improved.
  • the bonding structure of the working electrode 41 and the deposited graphene layer 12 of the counter electrode 42 may be different from each other.
  • the working electrode 41 is directly coupled to the culture substrate 10 through the electrical stimulation input terminal 14, but the counter electrode 42 is positioned spaced apart from the culture substrate 10, for example, For example, it may be located in the culture solution accommodated in the cell culture vessel 100 .
  • the working electrode 41 applies an electrical stimulation directly to the culture substrate 10 through the electrical stimulation input terminal 14, but the counter electrode 42 may be disposed to be spaced apart from the culture substrate 10 with a culture medium having a relatively significant electrical resistance therebetween.
  • At least one of the working electrode 41 and the counter electrode 42 may include at least one of Pt, Au, Ag, Ti, and stainless steel for efficient transmission of electrical stimulation.
  • the material of the working electrode 41 and the counter electrode 42 is not limited to the above description, and it will be said that a material that can be easily changed by a person skilled in the art is included.
  • the electrical stimulation input terminal 14 may be disposed on the culture substrate 10 in various forms.
  • Figure 3 (a) includes a single electrical stimulation input terminal 14
  • Figure 3 (b) is a plan view when a plurality of electrical stimulation input terminal 14 is included.
  • the electrical stimulation input terminal 14 may be disposed on the edge of the deposited graphene layer 12 or the base substrate 11 , and even if it is disposed on the edge of the base substrate 11 . It may be directly electrically connected to the deposited graphene layer 12 .
  • the electrical stimulation applied to the electrical stimulation input terminal 14 from the edge of the deposited graphene layer 12 or the base substrate 11 may be transmitted by spreading the electrical stimulation from a portion close to the electrical stimulation input terminal 14 .
  • the cell culture vessel 100 is provided with a plurality of electrical stimulation input terminals 14, and each electrical stimulation input terminal 14 is deposited with a graphene layer 12, with reference to FIG. Alternatively, they may be disposed to be spaced apart from each other on the edge of the base substrate 11 .
  • the electrical stimulation delivered by the plurality of electrical stimulation input terminals 14 uniformly arranged on the edge of the culture substrate 10 can be delivered to the cells uniformly cultured in the entire area of the culture substrate 10 .
  • the culture substrate 10' of the cell culture vessel 100 according to the embodiment of the present invention is different from the above-described culture substrate 10 in structure and configuration, except that the same description may be applied to the wooden paper configurations.
  • the base substrate 11' may include a conductive metal layer, and specifically, at least one of ITO, Ag, Au and Cu. may include
  • the base substrate 11 ′ is a material that the conductive metal layer has significantly superior electrical conductivity compared to the deposited graphene layer 12 , and is not limited to the types described above, and includes a range that can be easily designed and changed by a person skilled in the art. will be.
  • the culture substrate 10' may have a graphene deposited layer 12 disposed directly on the base substrate 11' made of a conductive metal layer, and the electrical stimulation input terminal 14 may be directly coupled to the base substrate 11'.
  • the electrical stimulation input terminal 14 is necessarily directly coupled to the deposited graphene layer 12 , or separately, the deposited graphene layer 12 and the electrical stimulation input terminal 14 inside the culture substrate 10 ′ ), it is sufficient if the electrical stimulation input terminal 14 and the deposited graphene layer 12 are disposed on the culture substrate 10 ′ including the conductive metal layer.
  • the base substrate 11 ′ includes a conductive metal layer having excellent electrical conductivity, electrical stimulation can be more effectively applied to the entire deposited graphene layer 12 .
  • the base substrate 11 ′ includes a conductive metal layer having very good electrical conductivity
  • the deposited graphene layer 12 portion that is far from the electrical stimulation input terminal 14 through the base substrate 11 ′ It can transmit and apply electrical stimulation effectively even to
  • the base substrate 11 ′ itself can serve as a medium for transmitting electrical stimulation, the position of the electrical stimulation input terminal 14 does not necessarily need to be located on the same surface as the deposited graphene layer 14 .
  • the position of the electrical stimulation input terminal 14 is not limited as long as it is located on one surface of the base substrate 11 ', the shape and structure of the working electrode 41 is also not limited to those already posted in the above description and drawings. .
  • the electrical stimulation input terminal 14 may be located on the bottom of the base substrate 11' on which the deposited graphene layer 12 is disposed, and the base substrate 11' including the conductive metal layer itself is a working electrode ( 41), the wire connected to the power supply device 50 may be directly coupled and electrically connected to the electrical stimulation input terminal 14 .
  • the cell culture vessel 100 may include a culture substrate case 20 including an outer wall 21 surrounding the case bottom 22 and the case bottom 22 rim on which the culture substrates 10 and 10' are placed. .
  • it may further include a culture substrate case cover 30 covering the upper opening of the culture substrate case (20).
  • the culture substrate case 20 and the culture substrate case cover 30 coupled to each other can be divided so that the inner space can be separated from the outside, and through this, it is possible to prevent external bacteria from invading and contamination of the cultured cells.
  • the culture substrate case cover 30 may be provided with at least one electrode insertion hole 31 through which at least one of the working electrode 41 and the counter electrode 42 passes.
  • the electrode insertion hole 31 is an opening, and by inserting the working electrode 41 or the counter electrode 42 , the opening may be shielded.
  • the number and shape of the electrode insertion hole 31 is not limited to the content shown in the drawings, but is generally within a range corresponding to the number, arrangement structure and shape of each of the provided working electrode 41 and the counter electrode 41 . It will be said that it includes the range where the engineer of the company can easily change the design.
  • the cell culture vessel 100 effectively applies uniform electrical stimulation to the culture substrates 10 and 10' by controlling the shape of the counter electrode 42 as well as the culture substrates 10 and 10'. can do.
  • the counter electrode 42 may have a plate shape parallel to the culture substrates 10 and 10' or a linear shape that intersects the culture substrates 10 and 10'.
  • the counter electrode 42 is positioned linearly to cross, for example, perpendicular to, the culture substrates 10 and 10 ′, and at the same time to be positioned at the center of the culture substrates 10 and 10 ′. By disposing it, it is possible to prevent a portion of the culture substrates 10 and 10' from being too far from the counter electrode 42, thereby preventing the electrical stimulation from becoming remarkably non-uniform.
  • the counter electrode 42 has a plate shape parallel to the culture substrates 10 and 10', so that from each part of the deposited graphene layer 12 to the counter electrode 42 Since the distance is the same and shortened at the same time, it is possible to effectively and uniformly apply electrical stimulation to the entire culture substrate 10, 10'.

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Abstract

본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기는 베이스 기판, 상기 베이스 기판 상에 배치된 적어도 하나의 증착 그래핀층 및 작업 전극과 결합하여 상기 증착 그래핀층에 전기자극을 전달하는 적어도 하나의 전기자극 입력단을 포함하는 배양기판을 포함한다.

Description

세포 배양 용기
본 발명은 세포 배양 용기에 관한 발명이다. 보다 상세하게는 배양기판에 포함된 증착 그래핀층에 전기자극을 효과적으로 인가할 수 있는 세포 배양 용기에 관한 발명이다.
그래핀(Graphene)이란 탄소 6개로 이루어진 육각형 모양이 서로 연결되어 2차원 단일층을 이루는 구조로 0차원의 풀러렌(Fullerene), 관 (tube) 모양의 1차원 구조를 가진 탄소나노튜브(Carbon Nanotube) 및 3차원 구조를 가진 그래파이트(Graphite)와는 차별되는 구조를 지니고 있다.
한편, 종래의 세포 배양 용기는 코로나 처리 또는 추가 단백질 물질(Extracellular matrix, ECM)을 기판에 코팅하고 외부자극 없이 배양 및 분화 진행하거나 또는 전기장 등 외부자극을 인가하여 배양 및 분화를 진행하였다.
구체적으로, 기판이 작업 전극 및 카운터 전극과 이격되어 작업 전극 및 카운터 전극 사이에 배치될 수 있고, 작업 전극과 카운터 전극간에 발생하는 전기장(electric filed)에 의해 기판에서 배양되는 세포가 전기자극을 받을 수 있었다.
하지만, 이 경우, 기판의 배양 세포는 전기장에 의해 간접적으로 전기자극을 받을 수 밖에 없으므로, 배양 세포에 전기자극이 효과적으로 전달되지 못해 배양효율이 저하될 수 있는 문제가 있었다.
본 발명이 해결하고자 하는 기술적 과제를 설명하면 다음과 같다.
첫째, 본 발명은 배양 세포에 전기자극을 직접 인가할 수 있는 세포 배양 용기를 제공하는데 있다.
기타, 본 발명은 상기에 기재한 기술적 과제외에 종래기술로부터 발생되거나 예측될 수 있는 모든 문제점을 해결하기 위한 것이다.
본 발명에 따른 세포 배양 용기는 베이스 기판, 상기 베이스 기판 상에 배치된 적어도 하나의 증착 그래핀층 및 작업 전극과 결합하여 상기 증착 그래핀층에 전기자극을 전달하는 적어도 하나의 전기자극 입력단을 포함하는 배양기판을 포함한다.
상기 전기자극 입력단은 상기 증착 그래핀층에 직접 결합될 수 있다.
상기 전기 자극 입력단은 복수개로 상기 증착 그래핀층의 테두리에 서로 이격되어 배치될 수 있다.
상기 베이스 기판은 폴리스틸렌(PS)를 포함할 수 있다.
상기 베이스 기판은 전도성 금속층을 포함할 수 있고, 상기 전도성 금속층은 ITO, Ag, Au 및 Cu 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.
상기 증착 그래핀층은 상기 베이스 기판 상에 직접 배치되고, 상기 전기자극 입력단은 상기 베이스 기판에 직접 결합될 수 있다.
상기 증착 그래핀층에 전기자극을 전달하는 상기 작업 전극 및 상기 작업 전극에 전기적으로 반대되는 카운터 전극을 더 포함하고, 상기 작업 전극은 상기 배양기판과 직접 결합되고, 상기 카운터 전극은 상기 배양기판과 이격되어 위치할 수 있다.
상기 작업 전극 및 상기 카운터 전극 각각은 상기 배양기판에 평행한 판상형 또는 상기 배양기판과 교차하는 선형일 수 있다.
상기 배양기판이 안치되는 케이스 바닥 및 상기 케이스 바닥 테두리를 둘러싸는 외벽을 포함하는 배양기판 케이스 및 상기 배양기판 케이스의 상측 개구를 덮는 배양기판 케이스 커버 를 포함하며, 상기 배양기판 케이스 커버는 상기 작업 전극 및 상기 카운터 전극 중 적어도 하나가 관통하는 적어도 하나의 전극 삽입구를 포함할 수 있다.
상기 작업 전극 및 상기 카운터 전극은 전원 공급기와 연결될 수 있다.
상기 작업 전극 및 상기 카운터 전극 중 적어도 하나는 PT, Au, Ag, Ti 및 Stainless Steel 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.
상기 증착 그래핀층은 단층 또는 복수의 층이 적층된 다층일 수 있고, 상기 증착 그래핀층의 층수는 1 내지 5일 수 있다.
상기 증착 그래핀층의 표면에 산소 작용기가 형성될 수 있다.
상기와 같이 구성된 본 발명에 따른 세포 배양 용기의 효과를 설명하면 다음과 같다.
본 발명의 세포 배양 용기은 증착 그래핀층에 전기자극을 전달할 수 있는 입력단을 포함하여 배양되는 세포에 전기자극을 효과적으로 전달함으로써 배양 효율이 향상될 수 있다.
도 1은 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기의 사시도이다.
도 2는 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기의 분해 사시도이다.
도 3은 본 발명 실시예에 따른 배양기판의 평면도이다.
도 4는 본 발명 다른 실시예 따른 배양기판의 평면도이다.
도 5는 본 발명 실시예 및 비교예에 따른 세포 배양 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명 실시예 따른 세포 배양 용기의 단면도이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 후술하는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다.
본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의되며, 명세서에서 용어의 의미에 대해 별도로 기재한 내용이 있다면 용어의 의미는 상기 기재 내용으로 정의될 것이다. 명세서 전체에 걸쳐 동일 참조 부호는 동일 구성요소를 지칭한다.
본원 발명의 세포 배양 용기(100)는 베이스 기판(11) 상에 증착 그래핀층(12)을 배치시키고, 증착 그래핀층(12)에 전기자극을 전달할 수 있는 전기자극 입력단을 포함하여 배양 세포에 전기자극을 효과적으로 전달할 수 있다.
이와 관련하여, 도 1 내지 도 6을 참조하여 본 발명의 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)에 대해 설명한다.
먼저, 도 1 내지 도 3을 참고하면, 세포 배양 용기(100) 직접적인 세포 배양이 이루어 지는 배양 기판(10)을 포함할 수 있다.
구체적으로, 배양 기판(10)은 베이스 기판(11), 베이스 기판(11) 상에 배치된 적어도 하나의 증착 그래핀층(12) 및 증착 그래핀층(12)에 전기자극을 전달하는 적어도 하나의 전기자극 입력단(14)을 포함할 수 있다.
베이스 기판(11)은 물리적으로 배양 기판(10)의 기본 구조를 구현하는 동시에 기계적 내구성을 형성할 수 있다.
베이스 기판(11)은 세라믹 물질, 유리, 폴리머 및 코폴리머가 중합 경화된 플라스틱 중 적어도 하나일 수 있다.
일 예로, 베이스 기판(11)은 폴리스틸렌(Polystyrene, PS)을 포함할 수 있다.
다만, 베이스 기판(11)의 구성 물질은 상기 기재된 대상에 한정되는 것은 아니며, 통상의 기술자가 세포 배양의 적절한 범위에서 용이하게 설계 변경할 수 있는 범위까지 포함한다고 할 것이다.
본 발명의 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)는 전술한 바와 같이, 배양 기판(10)이 베이스 기판(11) 상에 증착 그래핀층(12)을 배치시키고, 증착 그래핀층(12)의 표면에 산소 작용기를 형성할 수 있다.
구체적으로, 베이스 기판(11) 상에 증착 그래핀층(12)을 배치시킴으로써, 세포 배양 균일성을 향상시킬 수 있는 동시에 오염을 최소화 하면서 용이한 장기 보관이 가능하다.
증착 그래핀층(12)의 그래핀(Graphene)은 탄소로 구성된 무기물질로서, 결정 구조가 규칙적이므로, 세포 배양 균일성을 향상시킬 수 있으며, 오염 가능성이 적고 보관이 용이하다.
즉, 종래에 기판에 단백질 코팅(예를 들어, extracellular matrix) 처리 등을 한 경우와 비교해, 결정 구조가 규칙적이므로, 세포 배양이 균일해 질 수 있다. 또한, 단백질 등은 외부 환경 변화(온도, 습기 및 세균) 등에 의해 쉽게 변성되므로, 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)는 오염을 최소화하면서 장기 보관을 용이하게 할 수 있다.
또한, 그래핀은 세포 배양에 있어서 세포가 흡착하고 영양 물질이 공급되는 역할로서 필수적인 세포외기질 단백질과 유사한 기능을 할 수 있으므로, 세포와의 결합 호환성이 높을 수 있다.
나아가, 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)에 포함된 증착 그래핀층(12)은 표면이 개질되어 증착 그래핀층(12)의 표면에 산소 작용기를 형성할 수 있다.
구체적으로, 증착 그래핀층(12)을 구성하는 탄소(Carbon)에 산소를 연결시켜 부가하거나, 탄소를 산소와 치환시킴으로써, 산소 작용기가 증착 그래핀층(12)의 표면에 형성될 수 있다.
증착 그래핀층(12)에 형성된 산소 작용기는 에폭시기 (C-O-C), 히드록시기 (-OH), 카르복실기 (-COOH) 및 카르보닐기 (C=O) 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.
본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)는 증착 그래핀층(12) 표면에 산소 작용기 형성함으로써, 배양 시킬 세포의 부착 또는 흡착성을 향상시킬 수 있다.
구체적으로, 배양될 세포 내에는 산소 작용기와 결합성이 높은 다양한 작용기들이 배치될 수 있고, 이러한 산소 작용기들은 친수성을 높여주는 역할을 하며, 이를 통해, 배양 초기 단계에서 배양액 내의 세포들이 기판에 부착되는 과정을 용이하게 한다.
이러한 초기 부착특성 개선은 세포 배양 효율을 개선시킬 수 있다.
본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)에 포함된 증착 그래핀층(12)은 표면에 형성된 산소 작용기에 의해 효과적인 세포 배양을 할 수 있다.
구체적으로, 증착 그래핀층(12)의 표면에 형성된 산소 작용기에 의해 영양물질들의 전달이 개선되어 효과적인 세포 배양을 할 수 있다.
산소 작용기는 전기적으로 음전하인데 반해, 세포 배양에 필요한 영양물질인 아미노산류는 전기적으로 양전하로서, 영양물질인 아미노산류는 증착 그래핀층(12)의 표면에 형성된 산소 작용기와 쉽게 흡착될 수 있다.
따라서, 배양되는 세포로 영양물질의 공급이 증대될 수 있어 세포의 배양 및 분화 효율을 극대화할 수 있다.
본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)에 포함된 증착 그래핀층(12)은 단층 또는 복수의 층이 적층된 다층으로 구성될 수 있고, 증착 그래핀층(12)의 층 수는 1 내지 5일 수 있다.
본 명세서에서 증착 그래핀층(12)은 흑연을 분쇄하여 형성한 플레이크(flake)형 그래핀에 반대되는 개념으로, 수십 내지 수백층의 그래핀이 적층되어 형성되는 플레이크형 그래핀과 달리, 증착 그래핀층(12)은 증착 그래핀층(12)을 구성하는 각각의 각각의 그래핀층이 수개로 플레이크형 그래핀에 비해 현저히 적을 수 있다.
특히, 본 발명 실시예에 다른 세포 배양 용기(100)는 다층의 증착 그래핀층(12)을 포함함으로써, 세포 배양 효율을 향상시킬 수 있다.
구체적으로, 전술한 바와 같이, 증착 그래핀층(12)에 포함된 산소 작용기는 그래핀을 구성하는 탄소에 산소를 연결시켜 부가하거나 탄소를 산소와 치환시킴으로서 형성될 수 있다. 따라서, 증착 그래핀층(12)이 다층으로 구성된 경우, 각 층마다 산소 작용기를 추가적으로 형성할 수 있어 배양시킬 세포가 흡착될 스팟(spot)이 증가됨에 따라 효과적인 세포 배양을 할 수 있다.
다층의 증착 그래핀층(12)은 최저층에서 최상층으로 갈수록 산소 작용기의 수가 증가할 수 있다.
본 명세서에서 최저층은 베이스 기판(11)에 가장 인접한 그래핀층을 의미하고, 최상층은 베이스 기판(11)으로부터 가장 멀리 적층된 그래핀층을 의미한다.
산소 작용기는 후술할 산화 플라즈마 처리에 의해 증착 그래핀층(12)의 표면이 데미지를 입어 그래핀을 구성하는 탄소가 치환되어 형성될 수 있으므로, 산화 플라즈마 처리에 의한 데미지가 가장 큰 증착 그래핀층(12)의 최상층에서 가장 산소 작용기가 많고, 최저층으로 갈수록 산소 작용기가 적어질 수 있다.
다만, 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)의 증착 그래핀층(12)은 증착 그래핀층(12)을 구성하는 그래핀층의 층수를 5층 이내로 제어함으로써 지나치게 많은 그래핀층이 적층되어 산화 플라즈마 처리 효과가 구현되지 못해 최저층에 인접한 그래핀층에 산소 작용기가 형성되지 않는 것을 방지할 수 있다.
본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)는 배양기판(10)의 증착 그래핀층(12)에 부착 또는 흡착되어 배양되고 있는 세포에 전기자극 입력단(14)을 통해 효과적으로 전기자극을 전달할 수 있어 세포배양 효율을 향상시킬 수 있다.
먼저, 다시 도 1 내지 도 3을 참고하면, 배양되는 세포에 전달되는 전기자극은 전력공급장치(50)로부터 전극(40)에 전달되고, 다시 전극(40)에 전달된 전기 자극은 증착 그래핀층(12)에 전달되어 최종적으로 배양되는 세포에 전달될 수 있다.
구체적으로, 전력공급장치(50)는 작업 전극(41) 및 카운터 전극(42)을 통해 증착 그래핀층(12)으로 전기자극을 전달할 수 있다.
작업 전극(41) 및 카운터 전극(42)은 별도의 와이어등을 통해 전력공급장치(50)와 전기적으로 연결될 수 있으나, 전극(40)과 전력공급장치(50)의 연결 구조가 도면 및 상기 기재에 한정되는 것은 아니며, 통상의 기술자가 용이하게 설계 변경할 수 있는 구조까지 포함한다고 할 것이다.
또한, 본 명세서에서 작업 전극(41)과 카운터 전극(42)은 서로 전기적으로 반대되는 극성을 가지는 전극을 의미하며, 작업 전극(41) 또는 카운터 전극(42)이 특정한 극성을 의미하는 것은 아니다.
이어서, 전기자극 입력단(14)은 증착 그래핀층(12)에 직접 결합될 수 있고, 전기자극 입력단(41)은 동시에 작업 전극(41)과 직접 결합될 수 있다.
즉, 전기자극 입력단(14)은 작업 전극(41)과도 직접 결합함과 동시에 증착 그래핀층(12)과도 직접 결합하기 때문에, 별도의 저항성이 큰 전기자극 매개 물질을 구비할 필요 없이, 작업 전극(41)으로부터 전달되는 전기 자극을 효과적으로 증착 그래핀층(12)에 인가할 수 있다.
증착 그래핀층(12)은 전기 전도도가 우수한 소재이므로, 정착 그래핀층(12)에 인가된 전기작극은 효과적으로 증착 그래핀층(12) 표면에 부착 및 흡착되어 배양되는 세포에 전달될 수 있고, 결과적으로 세포 배양성이 향상될 수 있다.
한편, 작업 전극(41)과 카운터 전극(42)의 증착 그래핀층(12)과의 결합 구조가 서로 상이할 수 있다.
구체적으로, 전술한 바와 같이 작업 전극(41)은 전기자극 입력단(14)을 통해 배양기판(10)과 직접 결합되나, 카운터 전극(42)은 배양기판(10)과 이격되어 위치하며, 예를 들어 세포 배양 용기(100)에 수용된 배양액 속에 위치할 수 있다.
즉, 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)는 선택적으로, 작업 전극(41)은 전기자극 입력단(14)을 통해 직접 배양기판(10)에 전기 자극을 인가하나, 카운터 전극(42)은 상대적으로 전기 저항이 상당한 배양액을 사이에 두고 배양기판(10)과 이격되어 배치될 수 있다.
나아가, 작업 전극(41) 및 카운터 전극(42) 중 적어도 하나는 전기자극의 효율적 전달을 위해 Pt, Au, Ag, Ti 및 Stainless steel 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.
다만, 작업 전극(41) 및 카운터 전극(42)의 구성 물질은 상기 기재에 한정되는 것은 아니며, 통상의 기술자가 용이하게 설계 변경할 수 있는 물질까지 포함한다고 할 것이다.
도 3은 본 발명 실시예에 따른 배양기판(10)의 서로 다른 실시예를 나타낸 것으로, 전기자극 입력단(14)은 다양한 형태로서 배양기판(10)에 배치될 수 있다.
구체적으로, 도 3(a)는 단수의 전기자극 입력단(14)을 포함한 것이며, 도 3(b)는 복수의 전기자극 입력단(14)이 포함된 경우의 평면도이다.
구체적으로, 도 3(a)를 참고하면, 전기자극 입력단(14)은 증착 그래핀층(12) 또는 베이스 기판(11)의 테두리에 배치될 수 있고, 또한, 베이스 기판(11) 테두리에 배치되더라도 증착 그래핀층(12)과 전기적으로 직접 연결되어 있을 수 있다.
따라서, 증착 그래핀층(12) 또는 베이스 기판(11)의 테두리에서 전기자극 입력단(14)으로 인가된 전기자극은 전기자극 입력단(14)에 가까운 부분부터 전기자극이 확산되어 전달될 수 있다.
한편, 전기자극 입력단(14)으로부터 거리가 먼 증착 그리팬층(14)은 자체 저항에 의해 전기자극이 감소할 수 있고, 세포 배양을 효과적으로 하기 위해서는 배양되는 세포에 인가되는 전기자극이 균일한 것이 바람직할 수 있다.
따라서, 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)는 도 3(b)를 참고하면, 복수의 전기자극 입력단(14)을 구비하고, 각 전기자극 입력단(14)이 증착 그래핀층(12) 또는 베이스 기판(11)의 테두리에 서로 이격되어 배치될 수 있다.
그 결과, 배양기판(10)의 테두리에 균일하게 배치된 복수의 전기자극 입력단(14)에 의해 전달되는 전기자극이 배양기판(10)의 전체적인 면적에서 균일하게 배양되는 세포로 전달될 수 있다.
당연히 복수의 전기자극 입력단(14)이 구비되는 경우, 도면에 게시된 것과 달리 작업 전극(41)의 수도 이에 대응되도록 복수로 구비되어야 할 것이다.
이어서, 도 4를 참고하여 본 발명 다른 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)에 대해 설명한다. 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)의 배양기판(10')은 전술한 배양기판(10)과 구조 및 구성이 상이한 것을 제외하고 나무지 구성들에 대해서는 동일한 설명이 적용될 수 있다.
따라서, 이하에서는 차이점에 대해 집중해서 설명하도록 한다.
본 발명 다른 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)의 배양기판(10')은 베이스 기판(11')이 전도성 금속층을 포함할 수 있고, 구체적으로, ITO, Ag, Au 및 Cu 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.
베이스 기판(11')은 전도성 금속층은 증착 그래핀층(12)에 비해 전기 전도도가 현저히 우수한 물질로서, 상기 기재된 종류에 한정되는 것은 아니며, 통상의 기술자가 용이하게 설계 변경할 수 있는 범위까지 포함한다고 할 것이다.
배양기판(10')은 전도성 금속층으로 이루어진 베이스 기판(11') 상에 증착 그래핀층(12)이 직접 배치되고, 전기자극 입력단(14)이 베이스 기판(11')에 직접 결합될 수 있다.
즉, 배양기판(10')은 전기자극 입력단(14)이 증착 그래핀층(12)에 반드시 직접 결합되어 있거나, 별도로 배양기판(10')내부적으로 증착 그래핀층(12)과 전기자극 입력단(14)이 별도로 연결될 필요없이, 전기자극 입력단(14) 및 증착 그래핀층(12)이 전도성 금속층을 포함하는 배양기판(10') 상에 배치되어 있기만 하면 족하다.
본 발명 실시예에 따른 배양기판(10')은 베이스 기판(11')이 전기 전도성이 우수한 전도성 금속층을 포함함으로써 증착 그래핀층(12) 전체에 더욱 효과적으로 전기자극을 인가할 수 있다.
구체적으로, 베이스 기판(11')은 전기 전도성이 매우 우수한 전도성 금속층을 포함하고 있기 때문에, 베이스 기판(11')을 매개로하여 전기자극 입력단(14)으로부터 거리가 먼 증착 그래핀층(12) 부분에 까지도 효과적으로 전기자극을 전달 및 인가시킬 수 있다
나아가, 베이스 기판(11') 자체가 전기자극을 전달하는 매개 역할을 할 수 있으므로, 전기자극 입력단(14)의 위치가 반드시 증착 그래핀층(14)과 동일한 일면 상에 위치할 필요도 없다.
또한, 전기자극 입력단(14)의 위치는 베이스 기판(11')일면 상에 위치하는 한 제한이 없으므로, 작업 전극(41)의 형상 및 구조 역시 전술한 내용 및 도면에 이미 게시된 바에 한정되지 않는다.
예를 들어, 전기자극 입력단(14)은 증착 그래핀층(12)이 배치되는 베이스 기판(11')의 저면에 위치할 수 있고, 전도성 금속층을 포함하는 베이스 기판(11') 자체가 작업 전극(41)이 되어 전력공급장치(50)에 연결된 와이어가 직접 전기자극 입력단(14)과 결합 및 전기적으로 연결될 수도 있다.
이어서, 다시 도 2 및 도 5를 참고하여, 본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)의 부가적인 구성들에 대해 설명한다.
세포 배양 용기(100)는 배양기판(10, 10')이 안치되는 케이스 바닥(22) 및 케이스 바닥(22) 테두리를 둘러싸는 외벽(21)을 포함한 배양기판 케이스(20)를 포함할 수 있다.
또한, 배양기판 케이스(20)의 상측 개구를 덮는 배양기판 케이스 커버(30)를 더 포함할 수 있다.
서로 결합하는 배양기판 케이스(20) 및 배양기판 케이스 커버(30)는 내부 공간이 외부와 분리될 수 있도록 구분할 수 있으며, 이를 통해 외부 세균이 침입해 배양 세포가 오염되는 것을 방지할 수 있다.
물론, 배양기판 케이스 커버(30)에는 작업 전극(41) 또는 카운터 전극(42) 중 적어도 하나가 관통하는 적어도 하나의 전극 삽입구(31)가 구비될 수 있다.
전극 삽입구(31)는 개구로서, 작업 전극(41) 또는 카운터 전극(42)이 삽입됨으로써, 상기 개구가 차폐될 수 있다.
나아가, 전극 삽입구(31)의 개수 및 형상은 도면에 게시된 내용에 한정되는 것이 아니라, 구비되는 작업 전극(41) 및 카운터 전극(41) 각각의 개수, 배치구조 및 형상에 대응되는 범위에서 통상의 기술자가 용이하게 설계 변경할 수 있는 범위까지 포함하다고 할 것이다.
본 발명 실시예에 따른 세포 배양 용기(100)는 배양기판(10, 10') 뿐만 아니라, 카운터 전극(42)의 형상을 제어하여 균일한 전기자극을 효과적으로 배양 기판(10,10')에 인가할 수 있다.
구체적으로, 카운터 전극(42)은 배양기판(10,10')에 평행한 판상형 또는 배양기판(10,10')에 교차하는 선형일 수 있다.
도 5(a)를 참고하면, 카운터 전극(42)이 배양기판(10,10')에 교차, 예를 들어 수직하도록 선형으로 위치되는 동시에, 배양기판(10,10')의 중심에 위치하도록 배치됨으로써, 카운터 전극(42)으로부터 배양기판(10,10')의 일부분이 지나치게 멀어져 전기자극이 현저히 불균일해지는 것을 예방할 수 있다.
뿐만 아니라, 도 5(b)를 참고하면, 카운터 전극(42)이 배양기판(10,10')에 평행한 판상형이 됨으로써, 증착 그래핀층(12)의 각 부분으로부터 카운터 전극(42)에 이르는 거리가 동일한 동시에 짧아져 효과적으로 배양기판(10,10') 전체에 균일하고 효과적으로 전기자극을 인가할 수도 있다.
이상, 본 발명의 실시예에 대하여 도시하고 설명하였지만, 본 발명은 상술한 특정의 실시예에 한정되지 아니하며, 청구범위에서 청구하는 본 발명의 요지를 벗어남이 없이 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 다양한 변형실시가 가능한 것은 물론이고, 이러한 변형실시들은 본 발명의 기술적 사상이나 전망으로부터 개별적으로 이해되어서는 안될 것이다.

Claims (13)

  1. 베이스 기판;
    상기 베이스 기판 상에 배치된 적어도 하나의 증착 그래핀층; 및
    작업 전극과 결합하여 상기 증착 그래핀층에 전기자극을 전달하는 적어도 하나의 전기자극 입력단;을 포함하는 배양기판을 포함하는
    세포 배양 용기.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 전기자극 입력단은 상기 증착 그래핀층에 직접 결합된 세포 배양 용기.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 전기 자극 입력단은 복수개로 상기 증착 그래핀층의 테두리에 서로 이격되어 배치된 세포 배양 용기.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 베이스 기판은 폴리스틸렌(PS)를 포함하는 세포 배양 용기.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 베이스 기판은 전도성 금속층을 포함할 수 있고,
    상기 전도성 금속층은 ITO, Ag, Au 및 Cu 중 적어도 하나를 포함하는 세포 배양 용기.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 증착 그래핀층은 상기 베이스 기판 상에 직접 배치되고,
    상기 전기자극 입력단은 상기 베이스 기판에 직접 결합된 세포 배양 용기.
  7. 제5항에 있어서,
    상기 증착 그래핀층에 전기자극을 전달하는 상기 작업 전극 및 상기 작업 전극에 전기적으로 반대되는 카운터 전극을 더 포함하고,
    상기 작업 전극은 상기 배양기판과 직접 결합되고, 상기 카운터 전극은 상기 배양기판과 이격되어 위치하는 세포 배양 용기.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 카운터 전극은 상기 배양기판에 평행한 판상형 또는 상기 배양기판과 교차하는 선형인 세포 배양 용기.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 배양기판이 안치되는 케이스 바닥 및 상기 케이스 바닥 테두리를 둘러싸는 외벽을 포함하는 배양기판 케이스; 및
    상기 배양기판 케이스의 상측 개구를 덮는 배양기판 케이스 커버;를 포함하며,
    상기 배양기판 케이스 커버는 상기 작업 전극 및 상기 카운터 전극 중 적어도 하나가 관통하는 적어도 하나의 전극 삽입구를 포함하는 세포 배양 용기.
  10. 제7항에 있어서,
    상기 작업 전극 및 상기 카운터 전극은 전원 공급기와 연결되어 있는 세포 배양 용기.
  11. 제7항에 있어서,
    상기 작업 전극 및 상기 카운터 전극 중 적어도 하나는 Pt, Au, Ag, Ti 및 Stainless Steel 중 적어도 하나를 포함하는 세포 배양 용기.
  12. 제1항에 있어서,
    상기 증착 그래핀층은 단층 또는 복수의 층이 적층된 다층일 수 있고,
    상기 증착 그래핀층의 층수는 1 내지 5인 세포 배양 용기.
  13. 제1항에 있어서,
    상기 증착 그래핀층의 표면에 산소 작용기가 형성된 세포 배양 용기.
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