WO2021060341A1 - Ｄｎｍｔ阻害剤の用途 - Google Patents

Ｄｎｍｔ阻害剤の用途 Download PDF

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WO2021060341A1
WO2021060341A1 PCT/JP2020/035945 JP2020035945W WO2021060341A1 WO 2021060341 A1 WO2021060341 A1 WO 2021060341A1 JP 2020035945 W JP2020035945 W JP 2020035945W WO 2021060341 A1 WO2021060341 A1 WO 2021060341A1
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WO
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formula
тκι
group
resistant cml
therapeutic agent
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PCT/JP2020/035945
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French (fr)
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孫市 酒向
祐樹 倉橋
晋也 木村
達郎 渡邉
博志 嬉野
和晴 蒲池
Original Assignee
大原薬品工業株式会社
国立大学法人佐賀大学
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Definitions

  • the present invention relates to the use of an orally administrable DNMT inhibitor that has high stability to the hydrolytic metabolizing enzyme cytidine deaminase and can replace 5-aza-2'-deoxycytidine.
  • CML chronic myelogenous leukemia
  • Non-Patent Document 2 There was no curative treatment for CML except for allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, but since the advent of imatinib, a ⁇ competitive ⁇ L tyrosine kinase inhibitor (Tyrosine Kinase Inhibitor, ⁇ ) in 2001. The use of this drug dramatically improved the prognosis of CML.
  • second-generation ⁇ nolotinib, dasatinib and bosutinib
  • third-generation ⁇ which are expected to be more effective than imatinib, can be used clinically, and the treatment results of CML have been further improved.
  • Non-Patent Documents 3 to 4 some cases of ⁇ reaction refractory and ⁇ resistance acquisition cases due to point mutations in the ⁇ L tyrosine kinase domain have been reported (Non-Patent Documents 3 to 4), and effective treatments for them are Still limited. On the other hand, it has been reported that epigenetic changes are involved in the stage progression of CML and the acquisition of resistance to ⁇ , and the use of DNMTs inhibitors such as 5-azacitidine has been studied (Non-Patent Documents 5 to 5). 6).
  • DNMTs is an abbreviation for DNA methyltransferases, methylation of the 6-position amino group of the adenine ring in the DNA strand (Adenine N 6 -specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.72), cytosine. Catalyzes methylation of the ring 4-position amino group (Cytosine N 4- specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.113) or methylation to the cytosine ring 5-position (Cytosine C 5- specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.37) It is a group of enzymes.
  • Non-Patent Documents 7-8 a group of enzymes that catalyze methylation to the 5-position of the cytosine ring in the sequence portion called ⁇ pG island, which is often found in the promoter region of the expressed gene (maintenance methyltransferase DNMT1 and de novo methyltransferase DNMT3 family). Is of particular physiological interest because it plays a vital role in regulating the normal development and differentiation of cells (Non-Patent Documents 7-8).
  • DNMTs are also deeply involved in cancer development. That is, it is thought that 60 to 90% of all ⁇ pG have methylation at the 5-position of the cytosine ring, but abnormal levels of DNA methylation are closely related to silencing of expressed genes, and the promoter region. It has been clarified that the transcription / expression of a gene in which ( ⁇ pG island) is methylated at the 5-position of the cytosine ring at a high level is silenced (Non-Patent Documents 9 to 11).
  • cells are equipped with a mechanism to introduce a methyl group to the 5-position of the cytosine ring at the same position in the newly created DNA strand, and it is also DNMTs that enable this "replication of DNA methylation". .. Therefore, in cancerous cells, most of the tumor suppressor genes are suppressed in transcription and expression, and are in a silencing state, so that they can easily proliferate.
  • the SH group of the cysteine residue at the catalytically active center of DNMT attacks the cytosine ring 6 position in the DNA sequence, thereby activating the cytosine ring 5 position and methylating.
  • a reaction mechanism has been proposed that promotes methyl group transfer from the group donor S-adenosyl-L-methionine.
  • 5-azacitidine product name: "Vidaza (registered trademark)
  • decitabine product name: " Dacogen (registered trademark)
  • cytosine nucleosides DNA instead of 2'-deoxycytidine via the nucleic acid biosynthesis route.
  • Drugs with such a mechanism of action can be used as a wide range of anticancer agents, but all compounds are easily hydrolyzed by the metabolic enzyme citidine deaminase present in blood and liver. Due to its drawback of being deaminated, it is only used clinically as a therapeutic agent for high-risk myelodysplastic syndrome and acute myelodysplastic syndrome, and because of its chemical instability, it can be used as an injection. The current situation is that it remains. Therefore, it is desired to develop an orally administrable drug that has high stability to cytidine deaminase and can replace 5-azacitidines.
  • Patent Documents 1 and 2 SGI-110 (guadecitabin) (Patent Documents 1 and 2) has been found as a compound having high stability to the hydrolytic metabolizing enzyme cytidine deaminase, and a prodrug of 5-aza-2'-deoxycytidine has been found. Although clinical development is underway as a drug, this compound is extremely polar due to its dinucleotide structure, is not easily permeated through the membrane, and is not suitable as an oral administration agent (Non-Patent Documents 12 to 14). ..
  • An object of the present invention is to create an orally administrable compound having high stability to the hydrolyzable metabolizing enzyme citidine deaminase and which can replace 5-aza-2'-deoxycytidine, and high-risk bone marrow. It is intended to be provided not only as a therapeutic agent for dysplasia syndrome and acute myelogenous leukemia, but also as a therapeutic agent or a preventive agent for CML ( ⁇ resistant CML) that has acquired ⁇ resistance.
  • the present inventors provide a drug that is more useful than 5-aza-2'-deoxycytidine (product name: "Dacogen (registered trademark)" as a therapeutic drug for various myelodysplastic syndromes including high-risk myelodysplastic syndrome.
  • a new compound having high stability to the hydrolyzable metabolizing enzyme cytidine deaminase and having excellent pharmacological action and physicochemical properties that can easily enter the nucleic acid biosynthesis route in vivo.
  • various sugar-modified derivatives of 5-aza-2'-deoxycytidine were synthesized, and their chemical reactivity and biological activity were investigated.
  • the R 3 , R 4 and R 5 are C 1 to C 8 alkyl groups or C 6 to C 10 aryl groups or C 7 to C 14 aryl alkyl groups, respectively, which may have a substituent [1]. ]
  • a prophylactic / therapeutic agent for ⁇ -resistant CML which comprises combining the prophylactic / therapeutic agent for ⁇ -resistant CML according to any one of [1] to [9] with a concomitant agent.
  • the prophylactic / therapeutic agent for ⁇ -resistant CML according to [10], wherein the concomitant agent is a p53 gene inhibitor or an enzyme inhibitor.
  • the enzyme inhibitor is one or more selected from the group consisting of a tyrosine kinase inhibitor (TKI), a histone deacetylase inhibitor, a histone deacetylase inhibitor, a histone demethylase inhibitor, and the like.
  • TKI tyrosine kinase inhibitor
  • the preventive / therapeutic agent for ⁇ resistant CML is one or more selected from the group consisting of a tyrosine kinase inhibitor (TKI), a histone deacetylase inhibitor, a histone deacetylase inhibitor, a histone demethylase inhibitor, and the like.
  • the p53 gene inhibitor or enzyme inhibitor is one or more selected from the group consisting of Pifithrin, Nutlin, DS3201, HBI-8000, Trichostatin A (TSA), Suramin, EPZ005687, Adox and the like.
  • TSA Trichostatin A
  • Equation (I): (In the formula, R 1 and R 2 are hydrogen atoms or formula (II): respectively.
  • R 3 , R 4 and R 5 are alkyl groups or aryl groups or arylalkyl groups which may have substituents, respectively). However, this excludes cases where R 1 and R 2 are hydrogen atoms at the same time.
  • a method for preventing or treating ⁇ -resistant CML which comprises administering an effective amount of the compound represented by) or a salt thereof.
  • Equation (I): (In the formula, R 1 and R 2 are hydrogen atoms or formula (II): respectively.
  • R 3 , R 4 and R 5 are alkyl groups or aryl groups or arylalkyl groups which may have substituents, respectively). However, this does not apply when R 1 and R 2 are hydrogen atoms at the same time.
  • a method for preventing or treating ⁇ -resistant CML which comprises administering an effective amount of the compound represented by) or a salt thereof and a concomitant drug.
  • R 3 , R 4 and R 5 are alkyl groups or aryl groups or arylalkyl groups which may have substituents, respectively). However, this does not apply when R 1 and R 2 are hydrogen atoms at the same time. ) Use of the compound represented by) or a salt thereof.
  • the sugar moiety silyl ether derivative of 5-aza-2'-deoxycytidine is more lipophilic than the corresponding 5-aza-2'-deoxycytidine, allowing oral administration and intestinal tract. After being absorbed in the blood or in the liver, it is non-enzymatically hydrolyzed and activated in the cell membrane or intracellular of CML cells without being affected by the hydrolyzable metabolic enzyme cytidine deaminase, resulting in nucleic acid biosynthesis. Since it is presumed that it exhibits DNMT enzyme inhibitory activity by being incorporated into DNA via the route, it can be expected to function as a therapeutic or prophylactic agent for ⁇ -resistant CML whose expression is induced by DNMT. In addition, the sugar moiety silyl ether derivative of 5-aza-2'-deoxycytidine of the present invention is expected as an effective oral DNMT enzyme inhibitor against ⁇ resistant CML.
  • the compound of the present invention or a salt thereof is a compound represented by the following formula (I).
  • R 1 and R 2 are hydrogen atoms or formula (II): respectively.
  • R 3 , R 4 and R 5 are alkyl groups or aryl groups or arylalkyl groups which may have substituents, respectively). However, this does not apply when R 1 and R 2 are hydrogen atoms at the same time.
  • alkyl group refers to a saturated aliphatic hydrocarbon group, for example, a linear or branched or cyclic alkyl group having 1 to 8 carbon atoms, for example, a methyl group or an ethyl group.
  • propyl group isopropyl group, butyl group, sec- butyl group, an isobutyl group, tert- butyl group, a pentyl group, C 1 ⁇ C 6 alkyl group such as hexyl, heptyl, 2-methylhexyl group, 5-methyl Hexyl group, 2,2-dimethylpentyl group, 4,4-dimethylpentyl group, 2-ethylpentyl group, 1,1,3-trimethylbutyl group, 1,2,2-trimethylbutyl group, 1,3,3 -Trimethylbutyl group, 2,2,3-trimethylbutyl group, 2,3,3-trimethylbutyl group, 1-propylbutyl group, 1,1,2,2-tetramethylpropyl group, octyl group, 2-methyl Heptyl group, 3-methylheptyl group, 6-methylheptyl group, 2-ethylhexyl group, 5,5-dimethylhexyl group,
  • C 1 to C 6 alkyl groups are methyl, ethyl and propyl groups.
  • a more preferred example of the C 1 to C 6 alkyl groups is the ethyl group.
  • preferred examples of the cyclic alkyl group are a cyclopentyl group and a cyclohexyl group.
  • Aryl refers to monocyclic or bicyclic aromatic hydrocarbons. It is preferably a C 6 to C 10 aryl group such as a phenyl group and a naphthyl group, and more preferably a phenyl group.
  • Arylalkyl refers to an alkyl group substituted with an aryl. Preferably, a C 7 ⁇ C 14 arylalkyl group. Examples of C 7 to C 14 arylalkyl groups include, but are not limited to, benzyl group, phenethyl group, naphthylmethyl group and the like.
  • alkyl group which may have a substituent, the aryl group which may have a substituent, or the arylalkyl group which may have a substituent means that even if it has a substituent, It means that it may be non-replacement.
  • the substituent may have 1 to 5, preferably 1 to 3, or more than 2 substituents at the substituents of the alkyl group, aryl group or arylalkyl group. In the case of, each substituent may be the same or different.
  • substituent include an alkyl group, a halogen atom, a cyano group, a nitro group and the like, and an example of a preferable substituent is an alkyl group or a halogen atom.
  • Halogen atom means a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, an iodine atom and the like. Preferred examples are fluorine and chlorine atoms.
  • the salt of the compound represented by the formula (I) of the present invention may be any salt as long as it is a pharmacologically acceptable salt.
  • the salt include inorganic acid salts (for example, hydrochlorides, sulfates, hydrobromates and phosphates, etc.), organic acid salts (for example, acetates, trifluoroacetates, succinates, etc.).
  • inorganic acid salts for example, hydrochlorides, sulfates, hydrobromates and phosphates, etc.
  • organic acid salts for example, acetates, trifluoroacetates, succinates, etc.
  • acid addition salts such as maleate, fumarate, propionate, citrate, tartrate, lactate, oxalate, methanesulfonate, p-toluenesulfonate, etc.). It is not limited to.
  • the compound represented by the formula (I) of the present invention may be a crystal, a single crystal form, or a mixture of a plurality of crystal forms.
  • the crystal can be produced by crystallization by applying a crystallization method known per se.
  • the compound represented by the formula (I) of the present invention may be a solvate (for example, a hydrate), and a solvate and a non-solvate (for example, a non-hydrate). All of are included in the compound represented by the formula (I).
  • the sugar moiety silyl ether derivative of 5-aza-2'-deoxycytidine of the present invention can be a prodrug of 5-aza-2'-deoxycytidine.
  • sugar silyl ether derivatives of 5-aza-2'-deoxycytidine are very stable to cytidine deaminase, these derivatives absorbed from the gastrointestinal tract are in the blood. It is expected to have the property of being less susceptible to hydrolytic metabolism by the enzyme cytidine deaminase in the liver.
  • the sugar moiety silyl ether derivative of 5-aza-2'-deoxycytidine (see formula (I)) according to the present invention which is expected to have high stability to the above hydrolyzable metabolizing enzymes, is induced to be expressed by DNMT. It can be a therapeutic or prophylactic agent for ⁇ resistant CML.
  • Examples of the dehydrohalizing agent to be used include organic bases and inorganic bases, and the organic bases are not limited to these, but imidazole, 1-methylimidazole, morpholine, triethylamine, etc. Examples thereof include N, N-diisopropylethylamine, pyridine, 4-dimethylaminopyridine, n-butyllithium or potassium-tert-butoxide, and examples of the inorganic base include, but are not limited to, sodium hydride, sodium carbonate, and carbonic acid. Examples thereof include sodium hydrogen hydrogen, potassium carbonate, potassium hydrogen carbonate, cesium carbonate and the like.
  • the amount of the base used is preferably equal to or more than the equivalent amount of the raw material compound. Further, although the range of usually 1.0 to 50.0 equivalents can be exemplified with respect to 1 mol of the raw material compound, the range of 1.0 to 10.0 equivalents is preferable, and more preferably 1.0 to 5. It is preferably in the range of 0 equivalents.
  • the reaction of the present invention is preferably carried out in the presence of a solvent.
  • the solvent in the reaction of the present invention may be any solvent as long as the reaction proceeds. Examples of the solvent include N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide and dimethyl sulfoxide.
  • the amount of the solvent used may be any amount as long as the reaction proceeds. The amount of solvent used in the reaction of the present invention can be appropriately adjusted by those skilled in the art.
  • the reaction temperature of the present invention is not particularly limited.
  • the temperature is ⁇ 20 ° C. to 50 ° C. (that is, ⁇ 20 ° C. to + 50 ° C.), preferably ⁇ 10 ° C. to 30 ° C. (Ie, -10 ° C to + 30 ° C), more preferably -10 ° C to 20 ° C (ie, -10 ° C to + 20 ° C), and even more preferably -5 ° C to 15 ° C (ie, -5 ° C to plus). 15 ° C.), particularly preferably in the range of ⁇ 5 ° C. to 10 ° C. (that is, -5 ° C. to + 10 ° C.).
  • reaction time The reaction time of the present invention is not particularly limited. In one embodiment, from the viewpoint of improving the yield, suppressing by-products, economic efficiency, etc., 0.5 hours to 120 hours, preferably 1 hour to 72 hours, more preferably 1 hour to 48 hours, and further. Preferably, the range of 1 hour to 24 hours can be exemplified. However, the reaction time of the present invention can be appropriately adjusted by those skilled in the art.
  • composition of the Present Invention The compound represented by the formula (I) of the present invention can be used as it is or mixed with a pharmacologically acceptable carrier by a method known per se to prepare a pharmaceutical composition for mammals.
  • mammals For example, humans, monkeys, cats, pigs, horses, cows, mice, rats, guinea pigs, dogs, rabbits, etc.
  • a pharmacologically acceptable carrier for example, humans, monkeys, cats, pigs, horses, cows, mice, rats, guinea pigs, dogs, rabbits, etc.
  • the pharmacologically acceptable carrier various conventional organic or inorganic carrier substances are used as the preparation material, and examples thereof include excipients, lubricants, binders and disintegrants in solid preparations. Examples thereof include solvents, solubilizing agents and suspending agents, tensioning agents and buffering agents in liquid preparations. Further, if necessary, preparation additives such as preservatives, antioxidants, colorants and sweeteners can also be used.
  • Examples of the dosage form of the pharmaceutical composition include tablets, capsules (including soft capsules and microcapsules), granules, powders, syrups, emulsions, suspensions, oral preparations such as sustained-release agents, and the like. , These can be safely administered orally. However, this does not apply because liquid preparation is also possible.
  • the pharmaceutical composition can be produced by a method commonly used in the field of formulation technology, for example, the method described in the Japanese Pharmacopoeia.
  • the compound represented by the formula (I) of the present invention has many therapeutic and prophylactic uses.
  • the compounds of the invention are used in the treatment of a wide variety of diseases that are sensitive to treatment with cytidines (eg, 5-aza-2'-deoxycytidine).
  • Preferred indications that can be treated with the compounds of the invention include those with unwanted or uncontrolled cell division.
  • Such indications include a variety of cancers, but preferably CML whose expression is evoked by the ⁇ CR- ⁇ L fusion gene, more preferably TKI-resistant CML.
  • it can be expected to be effective against acute lymphocytic leukemia and acute myeloid leukemia.
  • Examples of the concomitant agent of ⁇ -resistant CML of the present invention include, but are not limited to, ⁇ , a p53 gene inhibitor, an enzyme inhibitor, and the like.
  • ⁇ are Imatinib, Gefitinib, Erlotinib, Sorafenib, Dasatinib, Sunitinib, Sunitinib, Lapatinib, Lapatinib, Lapatinib, Lapatinib (Crizotinib), Luxolitinib, Vandertinib, Vemurafenib, Axitinib, Bosutinib, Canonzantinib, Canonzantinib, (Afatinib), Dabrafenib, Ibrutinib, Trametinib, Ceritinib, Nintedanib, Lenvatinib, Lenvatinib, Parbotinib, Carbocitinib, Carbocitinib (B
  • Non-Patent Document 2 The p53 gene inhibitor or enzyme inhibitor refers to Pifithrin, Nutlin, DS3201, HBI-8000, Trichostatin A (TSA), Suramin, EPZ005687, Adox and the like.
  • TSA Trichostatin A
  • the administration time of the prophylactic or therapeutic agent for ⁇ -resistant CML and the concomitant agent is not limited, and both of the concomitant agents are administered to the administration subject. They may be administered at the same time or at different times.
  • the prophylactic or therapeutic agent for ⁇ -resistant CML and the concomitant drug may be formulated separately, or may be a mixture of both.
  • the dose of the concomitant drug may be based on the clinically used dose, and can be appropriately selected depending on the administration target, administration route, disease, combination and the like.
  • the dose of the concomitant drug may be, for example, one-third to three times the dose when the concomitant drug is used as a single agent.
  • the administration form of the prophylactic or therapeutic agent for ⁇ -resistant CML and the concomitant agent of the present invention is not particularly limited, and it is sufficient that the prophylactic or therapeutic agent for ⁇ -resistant CML and the concomitant agent are combined at the time of administration.
  • Such administration forms include, for example, (1) administration of a single preparation obtained by simultaneously formulating a prophylactic or therapeutic agent for ⁇ -resistant CML and a concomitant drug, and (2) prevention or prevention of ⁇ -resistant CML. Simultaneous administration of two types of preparations obtained by separately formulating a therapeutic drug and a concomitant drug by the same route of administration, (3) Prevention of ⁇ -resistant CML or obtaining a therapeutic drug and a concomitant drug separately. Administration of the two preparations with a time lag in the same administration route, (4) Different administration routes of the two preparations obtained by separately formulating a prophylactic or therapeutic drug for ⁇ resistant CML and a concomitant drug.
  • Prophylactic or therapeutic drug for ⁇ -resistant CML and concomitant drug separately formulated and administered at different routes of administration for example, ⁇ resistance
  • Prophylactic or therapeutic agents for sex CML ⁇ administration in the order of concomitant agents, or administration in the reverse order are separately formulated and administered at different routes of administration (for example, ⁇ resistance)
  • ⁇ resistance Prophylactic or therapeutic agents for sex CML ⁇ administration in the order of concomitant agents, or administration in the reverse order
  • the prophylactic or therapeutic agent for ⁇ -resistant CML of the present invention the following excellent effects can be obtained.
  • the dose of ⁇ -resistant CML can be reduced as compared with the case where a prophylactic or therapeutic drug and a concomitant drug are administered alone.
  • the type of concomitant drug can be selected according to the patient's symptoms (mild, severe, etc.).
  • the treatment period can be set longer by selecting a concomitant drug having a different mechanism of action from the prophylactic or therapeutic drug for ⁇ resistant CML.
  • the therapeutic effect can be sustained by selecting a concomitant drug having a different mechanism of action from the prophylactic or therapeutic drug for ⁇ resistant CML.
  • a synergistic effect can be obtained by using a prophylactic or therapeutic agent for ⁇ -resistant CML in combination with a concomitant agent.
  • a DNMT inhibitor for example, a compound represented by the formula (I)
  • a concomitant drug for example, a compound represented by the formula (I)
  • the content ratio of the DNMT inhibitor (for example, the compound represented by the formula (I)) in the pharmaceutical preparation is usually 0.1 to 100% (w / w).
  • the content ratio of the DNMT inhibitor (for example, the compound represented by the formula (I)) is usually 0.1 to 99.9% (w / w).
  • Suitable pharmaceutical compositions used in the present invention include compositions in which the active ingredient is present in an effective amount, i.e., in an amount effective to achieve therapeutic and / or prophylactic objectives in the condition being treated. Things are included.
  • the pharmaceutical composition used in the present invention is provided as a dosage form for oral administration.
  • the pharmaceutical compositions provided herein may be provided in solid, semi-solid or liquid dosage form for oral administration.
  • oral administration also includes buccal, tongue and sublingual administration.
  • Suitable oral dosage forms include tablets, capsules, pills, troches, medicated candy, aromatics, cashiers, pellets, drug-added chewing gums, granules, powders, effervescent or non-foaming powders or granules.
  • Solutions, emulsions, suspensions, solutions, wafers, sprinkles, elixirs and syrups but not limited to these.
  • the pharmaceutical composition comprises binders, fillers, diluents, disintegrants, wetting agents, lubricants, flow promoters, colorants, pigment migration inhibitors, sweeteners and flavors. It may contain a carrier or excipient that is acceptable as one or more pharmaceuticals, not limited to these.
  • the amount of the compound represented by the formula (I) of the present invention in the pharmaceutical composition or dosage form is, for example, about 1 mg to about 2,000 mg, about 10 mg to about 2,000 mg, about 20 mg to about 2,000 mg, and the like. It may be in the range of about 50 mg to about 1,000 mg, about 100 mg to about 500 mg, about 150 mg to about 500 mg or about 150 mg to about 250 mg.
  • its effective dose is the nature of the cancer, the degree of progression of the cancer, the treatment policy, the degree of metastasis, the amount of the tumor, the weight, the age, the sex and the patient.
  • the pharmaceutically effective amount is generally determined based on factors such as clinically observed symptoms and the degree of cancer metastasis.
  • the daily dose is, for example, about 0.01 mg / kg to about 10 mg / kg (for an adult weighing 60 kg, about 0.5 mg to about 500 mg), preferably about 0.05 mg when administered to humans. It is from / kg to about 5 mg / kg, more preferably from about 0.1 mg / kg to about 2 mg / kg.
  • the administration may be performed once or in multiple doses.
  • the sugar moiety silyl of 5-aza-2'-deoxycytidine according to the present invention which has high stability to the above-mentioned hydrolytic metabolic enzyme and has appropriate hydrolytic reactivity under physiological conditions.
  • the ether derivative (see formula (I)) can be a therapeutic or prophylactic agent for ⁇ resistant CML.
  • the target 3'position silyloxy-5-aza-2'-deoxycytidine derivative (in the formula (I), R 1 is a hydrogen atom and R 2 is a silyl group) is white. It can be isolated as a powder.
  • This synthesis method is hereinafter abbreviated as synthesis method A.
  • Table 1 shows the analysis results in the case of 5'-O- (Triethylsilyl) -5-aza-2'-deoxycytidine (Compound F).
  • Non-enzymatic hydrolysis of 5-aza-2'-deoxycytidine sugar silyl ether derivative 5-Aza-2'-deoxycytidine sugar silyl ether derivative (see formula (I)), eg 5'- About 1 mg of O- (Triethylsilyl) -5-aza-2'-deoxycytidine (Compound F) was dissolved in 1 mL of acetonitrile, 5 ⁇ L of it was added to 100 ⁇ L of 10 mM PBS solution, and the mixture was stirred at 37 ° C.
  • Anti-CML and anti-T ⁇ resistant CML activity of 5-aza-2'-deoxycytidine sugar silyl ether derivative CML cell lines (BV173, MYL, Ba / F3 BCR-ABL WT ) and ⁇ resistant CML cell lines (MYL-R, Ba / F3 BCR-ABL T315I ) in the table below are used in culture medium (10% FBS and RPMI-). In 1640), seeds were seeded on a 96-well plate at 3,000 to 7,000 cells / 100 ⁇ L / well, and cultured at 37 ° C. for about 3 hours under a 5% carbon dioxide gas stream.
  • each diluted with a culture solution to 50 ⁇ M to 0.05 ⁇ M (MYL, Ba / F3 BCR-ABL WT , MYL-R, Ba / F3 BCR-ABL T315I ) and 500 nM to 0.1 nM (BV173).
  • IC 50 was calculated ratio of Ba / F3 BCR-ABL T315I lines to MYL-R strain and Ba / F3 BCR-ABL WT strain for MYL strain, respectively (see Table 3-2).
  • Table 3-1) Table 3-2
  • the MYL-R strain is a MYL strain that overexpresses Lyn
  • the Ba / F3 BCR-ABL T315I strain is a strain in which the ABLT315I mutation is introduced into the Ba / F3 BCR-ABL WT strain, both of which have ⁇ resistance. Have won.
  • the sugar moiety silyl ether derivative of 5-aza-2'-deoxycytidine (for example, compound F: 5'-O- (Triethylsilyl) -5-aza-2'- Deoxycytidine) was found to have very high anti-CML activity and anti- ⁇ resistant CML activity.
  • the anti-CML activity of this compound F against the MYL-R strain is considerably higher than that of 5-azacitidine, and is similar to that of 5-aza-2'-deoxycytidine.
  • DNA demethylation effect of 5-aza-2'-deoxycytidine sugar moiety silyl ether derivative The methylation ratio of the ⁇ pG island cytosine moiety of LINE-1 (Long interspersed nucleotide factor-1) was measured using the pyrosequencing method.
  • a DNMT inhibitor having high stability against the metabolic enzyme cytidine deaminase can be provided to the medical field as a novel ⁇ resistant CML therapeutic agent or preventive agent.

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Abstract

【課題】　高リスクな骨髄異形成症候群や急性骨髄白血病の治療薬として臨床使用されている注射剤「ダコジェン（登録商標）」）に代わり、加水分解的代謝酵素シチジンデアミナーゼに対して高い安定性を有し、且つ、経口投与でも体内に吸収され、核酸生合成ルートに取り込まれてＤＮＡメチル基転移酵素ＤＮＭＴを阻害する作用を有する化合物をТΚΙ抵抗性ＣＭＬの治療薬又は予防薬として提供すること。 【解決手段】　次の式（I）で表される化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤を提供する。 （式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）： （式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は同時に水素原子である場合を除く。）

Description

ＤＮＭＴ阻害剤の用途
　本発明は、加水分解的代謝酵素シチジンデアミナーゼに対する高い安定性を有し、且つ、５－アザ－２’－デオキシシチジンに代わり得る経口投与可能なＤＮＭＴ阻害剤の用途に関する。
　成人白血病全体の１５～２０％を占める慢性骨髄性白血病（Chronic myeloid leukemia, ＣＭＬ)の発症は、遺伝子上のｔ(9;22)(q34;q11)転座によるフィラデルフィア染色体の発現に起因しており、この転座の結果として産生されるΒＣＲ-ΑΒＬ融合蛋白質によってΑΒＬチロシンキナーゼが恒常的に活性化され、造血幹細胞レベルでのクローン性増殖が無制限に起こることに所以している。なお、このＣＭＬでは、慢性期から移行期、急性転化期へと段階的に病状が進行するのが一般的である（非特許文献１）。
　ＣＭＬの治療法としては、同種造血幹細胞移植を除いて根治的な方法がなかったが、2001年にΑТΡ競合型ΑΒＬチロシンキナーゼ阻害剤（Tyrosine Kinase Inhibitor,ТΚΙ）であるイマチニブが登場して以来、この薬剤の使用によりＣＭＬの予後は劇的に改善された。現在では、イマチニブよりも高い効果が期待できる第二世代ТΚΙ(ニロチニブ、ダサチニブやボスチニブ)や第三世代ТΚΙ(ポナチニブ)が臨床上で使用できるようになり、ＣＭＬの治療成績は更に改善されてきている（非特許文献２）。しかし、一部には、ТΚΙ反応不応事例やΑΒＬチロシンキナーゼドメイン内の点突然変異等によるТΚΙ抵抗性獲得事例が報告されており（非特許文献３～４）、それらに対する有効な治療法は未だ限られている。一方、ＣＭＬの病期進行やТΚΙ抵抗性獲得に関しては、エピジェネティックな変化が関与していることも報告され、５－アザシチジン等のＤＮＭＴs阻害剤の利用検討がなされている（非特許文献５～６）。
　ＤＮＭＴsとは、ＤＮＡメチル基転移酵素群（DNA-methyltransferases）の略称であり、ＤＮＡ鎖中のアデニン環６位アミノ基のメチル化（Adenine N6-specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.72）、シトシン環４位アミノ基のメチル化（Cytosine N4-specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.113）又はシトシン環５位へのメチル化（Cytosine C5-specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.37）を触媒する酵素群である。特に、発現遺伝子のプロモーター領域によく認められるСｐＧアイランドと称される配列部分においてシトシン環５位へのメチル化を触媒する酵素群（維持メチル基転移酵素 ＤＮＭＴ１やde novoメチル基転移酵素 ＤＮＭＴ３ファミリー）は、細胞の正常な発生と分化を調節する際に極めて重要な役割を果たしている（非特許文献７～８）ことから、生理学的に特に注目されている。
　また、ＤＮＭＴsは、がんの発達においても深く関係している。即ち、全てのСｐＧの６０～９０％はシトシン環５位がメチル化されていると考えられているが、異常なレベルのＤＮＡメチル化は発現遺伝子のサイレンシングと深く関連しており、プロモーター領域（СｐＧアイランド）が高レベルにシトシン環５位メチル化されている遺伝子は、其の転写・発現がサイレンシングしていることが明らかにされている（非特許文献９～１１）。
　一方、細胞には、新しく作られるＤＮＡ鎖においても同じ位置のシトシン環５位へメチル基を導入するしくみが備わっており、この「ＤＮＡメチル化の複製」を可能にしているのもＤＮＭＴsである。その故、がん化した細胞では、がん抑制遺伝子の多くが転写・発現抑制されてサイレンシング状態になり、増殖しやすい状態になっている。
　なお、このシトシン環５位のメチル化に関しては、ＤＮＭＴの触媒活性中心にあるシステイン残基のＳＨ基がＤＮＡ配列中のシトシン環６位を攻撃することによりシトシン環５位が活性化され、メチル基供与体Ｓ－アデノシル－Ｌ－メチオニンからのメチル基転移を促すという反応機構が提案されている。
　このような背景を持つＤＮＭＴsに対する選択的な酵素阻害剤として、５－アザシチジン（製品名：「ビダーザ（登録商標））や其の２’－デオキシ体（デシタビン、製品名：「ダコジェン（登録商標）」）が見いだされ、高リスクな骨髄異形成症候群や急性骨髄白血病の治療薬として臨床使用されている。なお、これらの薬剤はシトシンヌクレオシド類と化学構造（シトシン環５位炭素原子が窒素原子に置換された構造）が酷似しており、核酸生合成ルートを経て、２’－デオキシシチジンの代わりにＤＮＡ中へ入り込むことにより、がん抑制遺伝子プロモーター領域（СｐＧアイランド）におけるＤＮＭＴsによるシトシン環５位のメチル化反応を自殺的に阻害し、がん抑制遺伝子の正常な発現を可能にして治療効果を現わすとされている。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000009
 
　このような作用機序を有する薬剤は、本来ならば広範囲な抗がん剤としての利用が可能であるが、いずれの化合物も血中や肝臓内に存在する代謝酵素シチジンデアミナーゼにより容易に加水分解的脱アミノ化されるという欠点があるため、高リスクな骨髄異形成症候群や急性骨髄白血病治療薬としての臨床使用に留まり、また、化学的な不安定性を有する故に、注射剤としての剤形に留まっているのが現状である。その故、シチジンデアミナーゼに対して高い安定性を有し、且つ、５－アザシチジン類に代わり得る経口投与可能な薬剤の出現が望まれている。
　なお、最近、加水分解的代謝酵素シチジンデアミナーゼに対して高い安定性を有する化合物としてＳＧＩ-１１０（グアデシタビン）（特許文献１～２）が見出され、５－アザ－２’－デオキシシチジンのプロドラッグとして臨床開発が進められているが、この化合物はジヌクレオチド構造を有するために非常に極性が高く、膜透過が容易でなく、経口投与剤としては不向きである（非特許文献１２～１４）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000010
 
 
米国公開２００７０７２７９６号公報（日本特許５０３０９５８号明細書） 国際公開２０１３０３３１７６号公報（日本特許６０３８９２１号明細書）
ドラッグデザイン、ディベロップメント　アンド　セラピー（Drug Design, Development and Therapy），２０１９年, 第１３巻，ｐ．８２５－８４３. ヨーロピアン　ジャーナル　オブ　メディシナル　ケミストリー（European Journal of Medicinal Chemistry）, ２０１９年, 第１７０巻, ｐ．５５－７２. セラポイティック　アドバンシス　イン　ヘマトロジー（Therapeutic Advances in Hematology）, ２０１４年, 第５巻、第４号, ｐ．１０７－１２０. ステムセル　インベスティゲーション（Stem Cell Investigation）, ２０１８年, 第５巻, ｐ．１０；　カレント　オピニオン　イン　ヘマトロジー（Current Opinion in Hematology）, ２０１９年, 第２６巻，第２号，ｐ．１１９－１２３. キャンサー　サイエンシス（Cancer Sciences）, ２０１４年, 第１０５巻，第３号，ｐ．２９７－３０７. セル　デス　アンド　ディジーズ（Cell Death and Disease）, ２０１７年, 第８巻，第１０号, e３１１４. ケミカル　レビューズ（Chemical Reviews），２０１５年，第１１５巻，第６号, ｐ．２２４０～２２５４． バイオモレキュールス（Biomolecules），２０１７年，第７巻，第１号，E３；　ジーンズ（バーゼル）（Genes (Basel））,２０１９年，第１０巻，第２号，E１７２． 単行本「エピジェネティックス：ア　レファレンス　マヌアル」（Epigenetics: A Reference Manual），２０１１年，クレイグＪＭ，ワングＮＣ著，カイスターアカデミックプレス． セル　アンド　バイオサイエンス（Cell & Bioscience），２０１４年，第４巻, ４６． モレキュラー　キャンサー（Molecular Cancer），２０１７年，第１６巻，第１号，２９． オンコターゲット（Oncotarget），２０１７年，第８巻, 第２号，ｐ．２９４９～２９５９． エピジェネティックス（Epigenetics）,２０１６年，第１１巻，第１０号，ｐ．７０９～７２０． ランセット　ヘマトロジー（The Lancet Haematology），２０１９年，第６巻，第６号，e３１７－e３２７．
　本発明の課題は、加水分解的代謝酵素シチジンデアミナーゼに対して高い安定性を有し、且つ、５－アザ－２’－デオキシシチジンに代わり得る経口投与可能な化合物を創製し、高リスクな骨髄異形成症候群や急性骨髄白血病の治療薬としてのみならず、ТΚΙ抵抗性を獲得したＣＭＬ（ТΚΙ抵抗性ＣＭＬ）に対する治療薬又は予防薬として提供することにある。
　本発明者らは、高リスクな骨髄異形成症候群を含む様々な骨髄腫瘍の治療薬として５－アザ－２’－デオキシシチジン（製品名：「ダコジェン（登録商標）」）よりも有用な医薬品を提供するため、加水分解的代謝酵素シチジンデアミナーゼに対する高い安定性を有し、且つ、生体内で核酸生合成ルートへ容易に入り込むことができる優れた薬理作用と物理化学的性質を兼ね備えた新たな化合物を見出すべく鋭意研究を行ってきた。その中で、５－アザ－２’－デオキシシチジンの様々な糖部修飾誘導体を合成し、それらの化学的反応性と生物活性を調べた結果、対応する糖部シリルエーテル誘導体が、シチジンデアミナーゼに対する優れた安定性を有し、且つ、抗ＣＭＬ活性を示すことを見出し、これらの知見を下に更に詳細な検討を重ね、本発明を完成するに到った。
　本発明は、以下記載の発明を提供することにより、上記課題を解決したものである。
〔１〕
　式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000011
 
 
 
（式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000012
 
（式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ1及びＲ２は同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔２〕
　前記Ｒ１が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ２が水素原子である、〔１〕に記載の化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔３〕
　前記Ｒ２が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ１が水素原子である、〔１〕に記載の化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔４〕
　前記Ｒ１及びＲ２が、それぞれ式（II）で表されるシリル基である、〔１〕に記載の化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔５〕
　前記Ｒ３、Ｒ４及びＲ５が、それぞれ置換基を有していてもよいＣ１～Ｃ８アルキル基又はＣ６～Ｃ１０アリール基又はＣ７～Ｃ１４アリールアルキル基である、〔１〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔６〕
　アルキル基が、メチル基、エチル基又はプロピル基である、〔１〕～〔５〕のいずれか１項に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔７〕
　アルキル基が、エチル基である、〔１〕～〔６〕のいずれか１項に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔８〕
　前記Ｃ６～Ｃ１０アリール基がフェニル基又はナフチル基である、〔５〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔９〕
　前記Ｃ７～Ｃ１４アリールアルキル基が、ベンジル基、フェネチル基又はナフチルメチル基である、〔５〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔１０〕
　〔１〕～〔９〕のいずれか１項に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤を併用剤と組み合わせてなることを特徴とする、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔１１〕
　併用剤が、ｐ５３遺伝子阻害剤又は酵素阻害剤である、〔１０〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔１２〕
　酵素阻害剤が、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、ヒストンメチル化酵素阻害剤、ヒストン脱メチル化酵素阻害剤などからなる群から選択される１種以上である、〔１１〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔１３〕
　ｐ５３遺伝子阻害剤又は酵素阻害剤が、Ｐｉｆｉｔｈｒｉｎ、Ｎｕｔｌｉｎ、ＤＳ３２０１、ＨＢＩ-８０００、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、スラミン（Ｓｕｒａｍｉｎ）、ＥＰＺ００５６８７及びＡｄｏｘなどからなる群から選択される１種以上である、〔１１〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
〔１４〕
　式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000013
 
 
（式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000014
 
 
（式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は、同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩の有効量を投与することを特徴とする、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
〔１５〕
　式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000015
 
 
（式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000016
 
 
（式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩及び併用剤の有効量を投与することを特徴とする、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
〔１６〕
　〔１５〕に記載の式（Ｉ）で表される化合物又は其の塩が、前記併用剤と同時に投与されることを特徴とする、〔１５〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
〔１７〕
　〔１５〕に記載の式（Ｉ）で表される化合物又は其の塩が、前記併用剤の投与前又は投与後に投与されることを特徴とする、〔１５〕に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
〔１８〕
　ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤を製造するための式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000017
 
 
（式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000018
 
（式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩の使用。
　本発明によれば、５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体は、対応する５－アザ－２’－デオキシシチジンよりも脂溶性が高いので、経口投与が可能となり、腸部で吸収された後、血中や肝臓内で加水分解的代謝酵素シチジンデアミナーゼの影響を受けることなく、ＣＭＬ細胞の細胞膜内又は細胞内で非酵素的に加水分解されて活性化され、核酸生合成ルートを経てＤＮＡに組み込まれることによりＤＮＭＴ酵素阻害活性を示すと推測されることから、ＤＮＭＴによって発現が惹起されるТΚΙ抵抗性ＣＭＬの治療薬又は予防薬として機能することが期待できる。また、本発明の５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体はТΚΙ抵抗性ＣＭＬに対して有効な経口ＤＮＭＴ酵素阻害剤として期待される。
　特に言及しない限り、本明細書及び特許請求の範囲で用いた用語は、以下に述べる意味を有する。
本発明の化合物又は其の塩
　本発明の化合物は、下記の式（Ｉ）で表される化合物である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000019
 
 
（式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000020
 
（式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩である。
　「アルキル基」とは、特に限定しない限り、飽和脂肪族炭化水素基、例えば、炭素数が１～８個の直鎖又は分岐鎖状又は環状のアルキル基をいい、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基等のＣ１～Ｃ６アルキル基、ヘプチル基、２－メチルヘキシル基、５－メチルヘキシル基、２，２－ジメチルペンチル基、４，４－ジメチルペンチル基、２－エチルペンチル基、１，１，３－トリメチルブチル基、１，２，２－トリメチルブチル基、１，３，３－トリメチルブチル基、２，２，３－トリメチルブチル基、２，３，３－トリメチルブチル基、１－プロピルブチル基、１，１，２，２－テトラメチルプロピル基、オクチル基、２－メチルヘプチル基、３－メチルヘプチル基、６－メチルヘプチル基、２－エチルヘキシル基、５，５－ジメチルヘキシル基、２，４，４－トリメチルペンチル基、１－エチル－１－メチルペンチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基及びシクロオクチル基等の基を挙げることができるが、Ｃ１～Ｃ６アルキル基が好ましい。Ｃ１～Ｃ６アルキル基の好ましい例は、メチル基、エチル基及びプロピル基である。Ｃ１～Ｃ６アルキル基のより好ましい例は、エチル基である。また、環状のアルキル基の好ましい例は、シクロペンチル基及びシクロヘキシル基である。
　「アリール」とは、単環式又は二環式芳香族性炭化水素をいう。好ましくは、例えば、フェニル基及びナフチル基等のＣ６～Ｃ１０アリール基であり、より好ましくは、フェニル基である。
　「アリールアルキル」とは、アリールにより置換されたアルキル基をいう。好ましくは、Ｃ７～Ｃ１４アリールアルキル基である。Ｃ７～Ｃ１４アリールアルキル基の例は、ベンジル基、フェネチル基又はナフチルメチル基等を含むが、これらに限定されるものではない。
　「置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基又は置換基を有していてもよいアリールアルキル基」とは、置換基を有していても、無置換であってもよいことをいう。置換されている場合、置換基は前記アルキル基、アリール基又はアリールアルキル基の置換可能な位置に１～５個、好ましくは１～３個を有していてもよく、置換基数が２個以上の場合は各置換基が同一又は異なっていてもよい。置換基としては、アルキル基、ハロゲン原子、シアノ基及びニトロ基等が挙げられるが、好ましい置換基の例は、アルキル基又はハロゲン原子である。
　「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子及びヨウ素原子等をいう。好ましい例は、フッ素原子及び塩素原子である。
　本発明の式（Ｉ）で表される化合物の塩は、薬理学的に許容される塩であれば如何なる塩であってもよい。其の塩としては、例えば、無機酸塩（例えば、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩及びリン酸塩等）、有機酸塩（例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、蓚酸塩、メタンスルホン酸塩及びｐ－トルエンスルホン酸塩等）等の酸付加塩等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
　本発明の式（Ｉ）で表される化合物は、結晶であってもよく、結晶形が単一であっても、複数の結晶形の混合物であってもよい。其の結晶は、自体公知の結晶化法を適用して結晶化することによって製造することができる。
　また、本発明の式（Ｉ）で表される化合物は、溶媒和物（例えば、水和物等）であってもよく、溶媒和物及び無溶媒和物（例えば、非水和物等）のいずれも式（Ｉ）で表される化合物に包含される。
　本発明の５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、５－アザ－２’－デオキシシチジンのプロドラッグとなり得る。
　５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、シチジンデアミナーゼに対して非常に安定であることから、消化管から吸収されたこれらの誘導体は血中や肝臓にある酵素シチジンデアミナーゼによる加水分解的代謝を受けにくい性質を有していることが期待される。
　上記の加水分解的代謝酵素に対する高い安定性が期待される、本発明に係る５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、ＤＮＭＴによって発現が惹起されるТΚΙ抵抗性ＣＭＬの治療薬又は予防薬となり得る。
本発明の式（Ｉ）で表される化合物の製造法
　本発明に係る５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、次に示す方法で製造できる。即ち、５－アザ－２’－デオキシシチジン（式（Ｉ）を参照：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）と適切な置換基を有するハロゲノシリル体とを脱ハロゲン化水素剤の存在下で反応させることにより、目的とする５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）を容易に得ることができる。
（脱ハロゲン化水素剤）　使用する脱ハロゲン化水素剤としては、有機塩基及び無機塩基が挙げられ、有機塩基としては、これらに限られないが、イミダゾール、１－メチルイミダゾール、モルフォリン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、ｎ-ブチルリチウム又はカリウム-ｔｅｒｔ-ブトキシド等が挙げられ、無機塩基としては、これらに限られないが、水素化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム又は炭酸セシウム等が挙げられる。塩基の使用量としては、原料化合物の当量以上が好ましい。更には、原料化合物１モルに対して通常１.０～５０.０当量の範囲を例示できるが、好ましくは１.０～１０.０当量の範囲が良く、より好ましくは１.０～５.０当量の範囲であることが良い。
（溶媒）
　反応の円滑な進行等の観点から、本発明の反応は溶媒の存在下で実施することが好ましい。本発明の反応における溶媒は、反応が進行する限りは、いずれの溶媒でもよい。
　溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセタミドやジメチルスルホキシドが挙げられる。溶媒の使用量は、反応が進行する限りは、いずれの量でもよい。本発明の反応における溶媒の使用量は当業者により適切に調整されることができる。
（反応温度）
　本発明の反応温度は、特に制限されない。一つの態様においては、収率の向上、副生成物の抑制及び経済効率等の観点から、－２０℃～５０℃（即ち、マイナス２０℃～プラス５０℃）、好ましくは－１０℃～３０℃（即ち、マイナス１０℃～プラス３０℃）、より好ましくは－１０℃～２０℃（即ち、マイナス１０℃～プラス２０℃）、更に好ましくは－５℃～１５℃（即ち、マイナス５℃～プラス１５℃）、特に好ましくは－５℃～１０℃（即ち、マイナス５℃～プラス１０℃）の範囲を例示できる。
（反応時間）
　本発明の反応時間は、特に制限されない。一つの態様においては、収率の向上、副生成物の抑制及び経済効率等の観点から、０.５時間～１２０時間、好ましくは１時間～７２時間、より好ましくは１時間～４８時間、更に好ましくは１時間～２４時間の範囲を例示できる。しかしながら、本発明の反応時間は、当業者により適切に調整されることができる。
本発明の医薬組成物
　本発明の式（Ｉ）で表される化合物は、そのまま、あるいは自体公知の方法により薬理学的に許容される担体と混合して医薬組成物とすることにより、哺乳動物（例えば、ヒト、サル、ネコ、ブタ、ウマ、ウシ、マウス、ラット、モルモット、イヌやウサギ等）に対して安全な医薬品として用いることができる。
　ここにおいて、薬理学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、例えば、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤等が挙げられ、液状製剤における溶剤、溶解補助剤及び懸濁化剤等、張化剤及び緩衝剤等が挙げられる。また、必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤や甘味剤等の製剤添加物を用いることもできる。
　医薬組成物の剤形としては、例えば、錠剤、カプセル剤（ソフトカプセルやマイクロカプセルを含む。）、顆粒剤、散剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤又は徐放剤等の経口剤等が挙げられ、これらは経口的に安全に投与できる。ただし、液剤投与も可能であるので、この限りではない。
　医薬組成物は、製剤技術分野において慣用の方法、例えば、日本薬局方に記載の方法等により製造することができる。
本発明の式（Ｉ）で表される化合物の用途
　本発明の式（Ｉ）で表される化合物は多くの治療的及び予防的用途を有する。好ましい実施態様では、本発明の化合物は、シチジン類（例えば、５－アザ－２’－デオキシシチジン）による治療に感受性を有する極めて多様な疾患の治療に用いられる。本発明の化合物を用いて治療することができる好ましい適応症には、望ましくない又は無制御の細胞分裂を伴うものが含まれる。そのような適応症には様々ながんが含まれるが、好ましくは、ΒＣＲ-ΑΒＬ融合遺伝子によって発現が惹起されるＣＭＬ、より好ましくは、ＴＫＩ抵抗性のＣＭＬが適応対象である。また、他にも急性リンパ性白血病や急性骨髄性白血病にも効果が期待できる。
　本発明のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの併用剤としては、例えば、ТΚΙ、ｐ５３遺伝子阻害剤又は酵素阻害剤等が挙げられるが、これらに限定するものではない。
　ТΚΙとは、イマチニブ(Imatinib)、ゲフィチニブ(Gefitinib)、エルロチニブ(Erlotinib)、ソラフェニブ(Sorafenib)、ダサチニブ(Dasatinib)、スニチニブ(Sunitinib)、ラパチニブ(Lapatinib)、ニロチニブ(Nilotinib)、パゾポニブ (Pazoponib)、クリゾチニブ(Crizotinib)、ルキソリチニブ(Ruxolitinib)、バンデルチニブ(Vandertinib)、ベムラフェニブ(Vemurafenib)、アキシチニブ(Axitinib)、ボスチニブ(Bosutinib)、カノンザンチニブ(Canonzantinib)、ポナチニブ(Ponatinib)、レゴラフェニブ(Regorafenib)、トファシチニブ(Tofacitinib)、アファチニブ(Afatinib)、ダブラフェニブ(Dabrafenib)、イブルチニブ(Ibrutinib)、トラメチニブ(Trametinib)、セリチニブ(Ceritinib)、ニンテダニブ(Nintedanib)、レンバチニブ(Lenvatinib)、パルボチニブ(Palbocitinib)、カルボザンチニブ(Carbozantinib)、アカラブルチニブ(Aclabrutinib)、ブリガチニブ(Brigatinib)、ネラチニブ(Neratinib)、ダコミチニブ(Dacomitinib)、ギルテリチニブ(Gilteritinib)、ラロトレチニブ(Larotrectinib)、ロルラチニブ(Lorlatinib)及びオシメルチニブ(Osimertinib)等をいう（非特許文献２）。
　ｐ５３遺伝子阻害剤又は酵素阻害剤とは、Ｐｉｆｉｔｈｒｉｎ、Ｎｕｔｌｉｎ、ＤＳ３２０１、ＨＢＩ-８０００、トリコスタチンＡ(ＴＳＡ）、スラミン(Ｓｕｒａｍｉｎ）、ＥＰＺ００５６８７及びＡｄｏｘ等をいう。
　本発明のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを組み合わせる場合、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤の投与時期は限定されず、併用剤両者を、投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とは別々に製剤化されていてもよいし、両者が混合された合剤であってもよい。併用剤の投与量は、臨床上用いられている投与量に準ずればよく、投与対象、投与ルート、疾患及び組み合わせ等により適宜選択することができる。併用剤の投与量は、例えば、当該併用剤を単剤として使用する時の投与量の３分の１から３倍量とすればよい。
　本発明のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤の投与形態は、特に限定されず、投与時に、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とが組み合わされておればよい。このような投与形態としては、例えば、（１）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを同時に製剤化して得られる単一の製剤の投与、（２）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、（３）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与、（４）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、（５）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与（例えば、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬→併用剤の順序での投与、あるいは逆の順序での投与）等が挙げられる。
　本発明のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを組み合わせることにより、以下のような優れた効果を得ることができる。
（１）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤を単独で投与する場合に比べて、其の投与量を軽減することができる、
（２）患者の症状（軽症、重症等）に応じて、併用剤の種類を選択することができる、
（３）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と作用機序が異なる併用剤を選択することにより、治療期間を長く設定することができる、
（４）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と作用機序が異なる併用剤を選択することにより、治療効果の持続を図ることができる、
（５）ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬と併用剤とを併用することにより、相乗効果が得られる。
　本発明のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療薬を医薬製剤として患者に投与する場合、ＤＮＭＴ阻害剤(例えば、式（Ｉ）で表される化合物）を単独で製剤化してもよいし、併用薬剤、薬学的に許容される担体等と混合して製剤化してもよい。医薬製剤中のＤＮＭＴ阻害剤（例えば、式（Ｉ）で表される化合物）の含有割合は通常０.１～１００％（ｗ／ｗ）である。また、医薬製剤に、併用剤を配合する場合、ＤＮＭＴ阻害剤（例えば、式（Ｉ）で表される化合物）の含有割合は通常０.１～９９.９％（ｗ／ｗ）である。
　本発明で使用される適切な医薬組成物には、活性成分が有効な量で、即ち、治療される症状で、治療的及び/又は予防的目的を達成するために有効な量で存在する組成物が含まれる。
　本発明で使用される医薬組成物は、経口投与用剤形として提供される。本明細書において提供される医薬組成物は、経口投与のために、固形、半固形又は液状投与剤形で提供され得る。本明細書で用いられる場合、経口投与には、頬、舌及び舌下投与も含まれる。適切な経口投与剤形には、錠剤、カプセル剤、丸剤、トローチ、薬用キャンディー、芳香製剤、カシェ剤、ペレット剤、薬物添加チューインガム、顆粒剤、原末、発泡製剤又は非発泡粉末若しくは顆粒剤、溶液、エマルジョン、懸濁液、溶液、ウェハ、スプリンクル、エリキシル剤及びシロップ剤が含まれるが、これらに限定されない。活性成分に加え、医薬組成物は、結合剤、充填剤、希釈剤、崩壊剤、湿潤剤、滑沢剤、流動促進剤、着色剤、色素遊走阻止剤、甘味剤及び香味料を含むが、これらに限定されない１種以上の医薬品として許容し得る担体又は賦形剤を含んでもよい。
　医薬組成物又は剤形内の本発明の式（Ｉ）で表される化合物の量は、例えば、約１ｍｇ～約２,０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約２,０００ｍｇ、約２０ｍｇ～約２,０００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１,０００ｍｇ、約１００ｍｇ～約５００ｍｇ、約１５０ｍｇ～約５００ｍｇ又は約１５０ｍｇ～約２５０ｍｇの範囲であってもよい。
　本発明の化合物を抗がん剤として用いる場合、其の有効投与量は、がんの性質、がんの進行程度、治療方針、転移の程度、腫瘍の量、体重、年齢、性別及び患者の（遺伝的）人種的背景等に依存して適宜選択できるが、薬学的有効量は一般に、臨床上観察される症状、がんの進行度合い等の要因に基づいて決定される。一日あたりの投与量は、例えば、ヒトに投与する場合は、約０.０１ｍｇ/ｋｇ～約１０ｍｇ/ｋｇ（体重６０ｋｇの成人では、約０.５ｍｇ～約５００ｍｇ）、好ましくは約０.０５ｍｇ/ｋｇ～約５ｍｇ/ｋｇ、より好ましくは約０.１ｍｇ/ｋｇ～約２ｍｇ/ｋｇである。投与は、１回で投与しても複数回に分けて投与してもよい。
　このようにして得られた５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）について、シチジンデアミナーゼ存在下での安定性を調べたところ、本発明に係る糖部シリルエーテル基を有する誘導体はいずれの場合も、シチジンデアミナーゼ存在下でも非常に安定であることが判明し、これら５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体は血中や肝臓にある酵素シチジンデアミナーゼによる加水分解的代謝を受けにくいことが確認できた。一方、５’位に水酸基を有する５－アザ－２’－デオキシシチジン（式（Ｉ）を参照：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）は、用いた条件下で、３０分以内に分解した。
　また、このようにして得られた５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）について、生理的条件に近い環境下（例えば、３７℃、ＰＢＳ溶液中）で安定性を調べたところ、本発明に係る誘導体のうち、シリル基に直結した置換基をうまく選択すると、適度なスピードで加水分解され、対応する５－アザ－２’－デオキシシチジン（式（Ｉ）を参照：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）を効率良く生成することが確認できた。また、適度なスピードで加水分解される５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体は、抗ＣＭＬ活性を示すことも確認できている。
　その故、上記の加水分解的代謝酵素に対する高い安定性を有し、且つ、生理的条件下で適度な加水分解反応性を有する本発明に係る５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬ治療薬又は予防薬となり得る。
　それらの５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）の製造と代謝酵素シチジンデアミナーゼに対する安定性やＰＢＳ溶液中の加水分解反応性に関する実験の詳細や抗ＣＭＬ活性について、以下に示す。
実施例
　以下に、実施例を挙げて本発明を更に詳しく説明するが、これらは本発明を限定するものではない。
　以下の実施例において、室温は、約１５～３０℃を意味する。１Ｈ－ＮＭＲと１３Ｃ－ＮＭＲスペクトルは、日本電子ＪＮＭ－ＥＣＺ　４００Ｒを用いて測定し、ＣＤＣｌ３、ＤＭＳＯ－ｄ６又はＣＤ３ＯＤを溶媒として用い、内部標準のテトラメチルシランからのケミカルシフトδ（ｐｐｍ）を示した。其の他の本明細書中の記号は、以下の意味を示す。ｓ：一重線、ｄ：二重線、dd：二重の二重線、ｔ：三重線、q：四重線、ｍ：多重線、ｂr：ブロード、ｂr ｓ：ブロードな一重線、Ｊ：結合定数　また、各化合物のMassスペクトルデータは、Yamazen Smart Flash MS system装置（APCI法）を用いて測定した値である。　以下に、本検討で得られた５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）に関する反応時間、カラム溶出溶媒系、単離収率や機器データを示す。
３’,５’－ジシリルオキシ－５－アザ－２’－デオキシシチジン類の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000021
 
 
　５－アザ－２’－デオキシシチジン（式（Ｉ）を参照：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）（１ｍＭ）の無水Ｎ，Ｎ-ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）懸濁液にイミダゾール（２ｍＭ）を加えた後、対応するシリルクロリド（２.５ｍＭ）を氷冷下に約１０分間かけて滴下し、次いで、徐々に室温にもどしながら原料が消失するまで撹拌する。其の反応液を酢酸エチル－飽和食塩水（２：１）混液５０ｍＬに注ぎ、酢酸エチルで抽出する。其の抽出液を飽和食塩水（それぞれ１０ｍＬにて、二度）にて洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、不溶物を濾去した抽出液を減圧乾固して得られる油状の残留物をシリカゲルパックカラム（Yamazen Smart Flash MS system装置）にて分離精製することにより、目的とする５－アザ－２’－デオキシシチジンの３’,５’－ジシリルエーテル誘導体（式（Ｉ）中、Ｒ1とＲ２がシリル基である化合物。）は白色粉末として単離することができる。
化合物Ａ：　３’,５’－ジ（Ｏ－トリメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：3’,5’-Di(O-trimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine:（式（I）中、R１＝ R２＝ Trimethylsilyl基）（合成条件・単離法：反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：７０％）
　1H-NMR (CDCl3): 8.69 (s, 1H), 6.17 (dd, J= 6.4 and 4.4Hz, 1H), 5.89 (br s, 1H), 5.44 (br s, 1H), 4.36 (q, J= 5.6Hz, 1H), 3.94-3.96 (m, 1H), 3.88 (dd, J= 11.6 and 2.8Hz, 1H), 3.71 (dd, J= 12.0 and 2.4Hz, 1H), 2.50 (q, J= 6.8Hz, 1H), 2.17-2.23 (m, 1H), 0.16 (s, 9H), and 0.12 (s, 9H).
　13C-NMR (CDCl3): 166.4, 156.2, 154.0, 87.6, 86.6, 69.7, 60.8, 42.2, 0.10, and -0.69. 
　Mass: 373.3 [M+H]+ (Calcd. for C14H28N4O4Si2, MW= 372.16). 
化合物Ｂ：　３’,５’－ジ（Ｏ－トリエチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：3’,5’-Di(O-triethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine:（式（I）中、R１＝ R2＝ Triethylsilyl基）（合成条件・単離法：反応時間：約２時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－ｎ－ヘキサン系、単離収率：５４％）
　1H-NMR (CDCl3): 8.67 (s, 1H), 6.19 (dd, J= 6.4 and 4.8Hz, 1H), 5.61 (br, 1H), 5.38 (br, 1H), 4.41 (q, J= 4.8Hz, 1H), 3.96-3.98 (m, 1H), 3.91 (dd, J= 11.6 and 2.8Hz, 1H), 3.76 (dd, J= 11.6 and 2.0Hz, 1H), 2.51 (dt, J= 13.2 and 6.0Hz, 1H), 2.15-2.21 (m, 1H), 0.92-0.99 (m, 18H), and 0.56-0.68 (m, 12H).   
　13C-NMR (CDCl3): 166.4, 156.2, 154.0, 88.0, 86.6, 70.2, 61.5, 42.7, 6.8, 4.7, and 4.2. 
　Mass: 457.4 [M+H]+ (Calcd. for C20H40N4O4Si2, MW= 456.26).
化合物Ｃ：　３’,５’－ジ（Ｏ－ノルマルオクチルジメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：3’,5’-Di(O-n-octyldimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine:（式（I）中、R１＝ R２＝ n-Octyldimethylsilyl基）（合成条件・単離法：反応時間：約２時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－ｎ－ヘキサン系、単離収率：５４％）
　1H-NMR (CD3OD)：8.61 (s, 1H), 6.10 (t, J= 5.2Hz, 1H), 4.46 (dd, J= 10.0 and 4.8Hz, 1H), 3.97 (dd, J= 6.4 and 2.8Hz, 1H), 3.88 (dd, J= 11.6 and 3.2Hz. 1H), 3.76 (dd, J= 11.2 and 2.4Hz, 1H), 2.41 (dt, J= 13.6 and 6.0Hz, 1H), 2.24 (dt, J= 13.6 and 5.6Hz, 1H), 1.29-1.34 (m, 24H), 0.87-0.91 (m, 6H), 0.61-0.68 (m, 4H), 0.14 (s, 6H), and 0.12 (s, 6H).
　13C-NMR (CD3OD)：166.7, 155.8, 155.0, 88.0, 86.5, 70.8, 61.2, 41.6, 33.3, 31.8, 29.16, 29.12, 29.11, 23.0, 22.9, 22.4, 16.0, 15.6, 13.2, -2.78, -2.89, -3.57, and -3.75.
　Mass：569.5 [M+H]+ (Calcd. for C28H56N4O4Si2, MW= 568.38).
５’－シリルオキシ－５－アザ－２’－デオキシシチジン類の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000022
 
 
　５－アザ－２’－デオキシシチジン（式（Ｉ）を参照：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）（１ｍＭ）の無水Ｎ，Ｎ-ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）懸濁液にイミダゾール（１.５ｍＭ）を加えた後、対応するシリルクロリド（１.２ｍＭ）を氷冷下に約１０分間かけて滴下し、次いで、徐々に室温にもどしながら原料が消失するまで（約１～１７時間）撹拌する。其の反応液を酢酸エチル－飽和食塩水（２：１）混液５０ｍＬに注ぎ、酢酸エチルで抽出する。其の抽出液を飽和食塩水（それぞれ１０ｍＬにて、二度）にて洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、不溶物を濾去した抽出液を減圧乾固して得られる油状の残留物をシリカゲルパックカラム（Yamazen Smart Flash MS system装置）にて分離精製することにより、目的とする５－アザ－２’－デオキシシチジンの５’位シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）中、Ｒ1がシリル基であり、Ｒ２が水素原子である化合物。）は白色粉末として単離することができる。
化合物Ｄ：　５’－Ｏ－（トリメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(Trimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、R1= Trimethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：１０％）
　1H-NMR (CD3OD): 8.66 (s, 1H), 6.13 (t, J= 6.0Hz, 1H), 4.35-4.42 (m, 1H), 3.67-4.02 (m, 9H), 2.34-2.50 (m, 1H), 2.20-2.32 (m, 1H), and 0.14 (s, 9H).
　13C-NMR (CDCl3): 166.3, 156.0, 154.1, 87.6, 86.8, 71.6, 62.3, 42.6, and 0.1. 
　Mass: 301.3 [M+H]+ (Calcd. for C11H20N4O4Si, MW= 300.13).
化合物Ｅ：　５’－Ｏ－（ノルマルオクチルジメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(n-Octyldimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、R1= n-Octyldimethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：２４％）
　1H-NMR (CD3OD): 8.65 (s, 1H), 6.12 (t, J= 5.6Hz, 1H), 4.34-4.37 (m, 1H), 4.00-4.02 (m, 1H), 3.91-3.95 (m, 1H), 3.76-3.79 (m, 1H), 2.45 (ddd, J= 13.6, 6.4, and 4.4Hz, 1H), 2.24 (m, 1H), 1.27-1.34 (m, 8H), 0.87-0.89 (m, 4H), 0.61-0.63 (m, 3H), and 0.12 (s, 6H). 
　13C -NMR (CD3OD): 156.2, 155.8, 155.1, 87.9, 86.7, 70.5, 61.8, 41.6, 33.2, 31.8, 29.1, 22.4, 15.6, 13.1, -1.38, -2.96, -3.73, and -3.83.
　Mass: 399.3 [M+H]+ (Calcd. for C18H34N4O5Si, MW= 398.23). 
化合物Ｆ： ５’－Ｏ－（トリエチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(Triethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、 R1= Triethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：８１％）
　1H-NMR (CDCl3): 8.62 (s, 1H), 6.26 (t, J= 6.0Hz, 1H), 6.25 (br, 1H), 5.58 (br, 1H), 4.47-4.51 (m, 1H), 4.09-4.11 (m, 1H), 3.93 (dd, J= 10.8 and 2.4Hz, 1H), 3.82 (dd, J= 11.6 and 2.0Hz, 1H), 2.64-2.70 (m, 1H), 2.66 (br, 1H), 2.23 (dt, J= 12.0 and 6.4Hz, 1H), 0.96 (t, J= 8.0Hz, 9H), and 0.63 (q, J= 8.0Hz, 6H).
　13C-NMR (CDCl3): 166.3, 156.0, 154.1, 87.6, 86.8, 71.6, 62.3, 42.6, 6.7, and 4.1.
　Mass: 343.3 [M+H]+ (Calcd. for C14H26N4O4Si, MW= 342.17). 
化合物Ｇ：　５’－Ｏ－（イソプロピルジメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(i-Propyldimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、R1= i-Propyldimethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：　反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：４８％）
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.38 (s, 1H), 7.51 (br s, 1H), 7.49 (br s, 1H), 6.00 (t, J= 6.4Hz, 1H), 5.25 (d, J= 4.8Hz, 1H), 4.16 (q, J= 4.4Hz, 1H), 3.85-3.62 (m, 3H), 2.25-2.03 (m, 2H), 0.92-0.85 (m, 6H), 0.85-0.74 (m, 1H), and 0.02 (s, 6H).
　13C-NMR (DMSO-d6): 166.4, 156.0, 153.6, 87.6, 85.6, 70.4, 62.7, 40.6, 17.3, 14.3, and -4.14.
　Mass: 329.4 [M+H]+ (Calcd. for C13H24N4O4Si, MW= 328.16).
化合物Ｈ：　５’－Ｏ－（イソプロピルジエチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(i-Propyldiethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、R1= i-Propyldiethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：５６％）
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.42 (s, 1H), 7.55 (br s, 1H), 7.53 (br s, 1H), 6.05 (t, J= 6.4Hz, 1H), 5.30 (d, J= 4.4Hz, 1H), 4.24 (q, J= 4.4Hz, 1H), 3.90-3.72 (m, 3H), 2.29-2.07 (m, 2H), 0.99-0.88 (m, 13H), and 0.68-0.55 (m, 4H).
　13C-NMR (DMSO-d6): 166.4, 155.9, 153.6, 87.7, 85.6, 70.4, 63.0, 40.6, 17.6, 12.5, 7.34, and 3.00.
　Mass: 357.4 [M+H]+ (Calcd. for C15H28N4O4Si, MW= 356.19).
化合物Ｉ：　５’－Ｏ－（シクロペンチルジメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(c-Pentyldimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、R1= c-Pentyldimethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：反応時間：約０.５時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：１３％）
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.39 (s, 1H), 7.49 (s, 2H), 6.00 (t, J= 6.4Hz, 1H), 5.25 (d, J= 4.8Hz, 1H), 4.15 (q, J= 4.0Hz, 1H), 3.86-3.63 (m, 3H), 2.02-2.24 (m, 2H), 1.17-1.72 (m, 8H), 0.94 (dq, J= 8.4 and 2.0Hz, 1H), and 0.01 (s, 6H).
　13C-NMR (DMSO-d6): 166.4, 156.0, 153.6, 87.6, 85.7, 70.5, 62.7, 40.4, 27.5, 27.2, 25.7, and -3.2.
　Mass: 355.5 [M+H]+ (Calcd. for C15H26N4O4Si, MW= 354.17).
化合物Ｊ：　５’－Ｏ－（シクロヘキシルジメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(c-Hexyldimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、 R1= c-Hexyldimethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：５３％）
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.37 (s, 1H), 7.49 (s, 2H), 5.99 (t, J= 6.2Hz, 1H), 5.24 (d, J= 4.8Hz, 1H), 4.15 (q, J= 4.4Hz, 1H), 3.62-3.85 (m, 3H), 2.03-2.25 (m, 2H), 1.52-1.70 (m, 5H), 0.96-1.20 (m, 5H), 0.64 (dt, J= 12.4 and 3.2Hz, 1H), and 0.00 (s, 6H). 
　13C-NMR (DMSO-d6): 166.4, 156.0, 153.6, 87.7, 85.8, 70.5, 62.8, 40.4, 27.8, 26.9, 26.8, 26.3, and -3.73.
　Mass: 369.4 [M+H]+ (Calcd. for C16H28N4O4Si, MW= 368.19).
化合物Ｋ：　５’－Ｏ－（シクロペンチルジエチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：5’-O-(c-Pentyldiethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、 R1= c-Pentyldiethylsilyl基、R2= H）（合成条件・単離法：反応時間：約１時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：３１％）
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.43 (s, 1H), 7.55 (s, 2H), 6.05 (t, J= 6.2Hz, 1H), 5.30 (d, J= 3.6Hz, 1H), 4.23 (br s, 1H), 3.69-3.92 (m, 3H), 2.04-2.35 (m, 2H), 1.25-1.83 (m, 8H), 0.83-1.15 (m, 6H), 1.04 (m, 1H), and 0.61 (q, J= 4.0Hz, 4H). 
　13C-NMR (DMSO-d6): 166.5, 155.9, 153.6, 87.8, 85.7, 70.5, 63.1, 41.5, 27.6, 27.1, 24.0, 7.4, and 3.9.
　Mass: 383.3 [M+H]+ (Calcd. for C17H30N4O4Si, MW= 382.20).
３’－シリルオキシ－５－アザ－２’－デオキシシチジン類の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000023
 
 
　３’,５’－ジシリルオキシ－５－アザ－２’－デオキシシチジン類（式（Ｉ）中、Ｒ1とＲ２がシリル基である化合物。）（１ｍＭ）の無水シクロペンチルメチルエーテル溶液（１０ｍＬ）に、カンファースルホン酸（１ｍＭ）を加え、室温下にて約１日間撹拌する。其の反応液を重曹溶液にて中和後、不溶物を濾去し、其の濾液を減圧乾固して得られる油状の残留物をシリカゲルパックカラム（Yamazen Smart Flash MS system装置）にて分離精製することにより、目的とする３’位シリルオキシ－５－アザ－２’－デオキシシチジン誘導体（式（Ｉ）中、Ｒ1が水素原子であり、Ｒ２がシリル基である化合物。）は白色粉末として単離することができる。この合成法は、以後、合成法Ａと略する。
　また、上記の３’,５’－ジシリルオキシ－５－アザ－２’－デオキシシチジン類（式（Ｉ）中、Ｒ1とＲ２がシリル基である化合物。）（１ｍＭ）の無水イソプロパノール溶液（１０ｍＬ）に、触媒量のＣＡＮ（Cerium Ammonium Nitrate）を加え、室温下にて約１日間撹拌することによっても、目的とする３’－シリルオキシ－５－アザ－２’－デオキシシチジン誘導体（式（Ｉ）中、Ｒ1が水素原子であり、Ｒ２がシリル基である化合物。）は得ることができる。この合成法は、以後、合成法Ｂと略する。
化合物Ｌ：　３’－Ｏ－（トリエチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：3’-O-(Triethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、 R1= H、R2= Triethylsilyl基）（合成条件・単離法：反応時間：約１日間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：２９％（合成法Ａ）、５０％（合成法Ｂ））
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.48 (s, 1H), 7.54 (br s, 1H), 7.51 (br s, 1H), 6.01 (t, J= 6.4Hz, 1H), 5.10 (t, J= 5.2Hz, 1H), 4.39-4.42 (m, 1H), 3.81 (q, J= 3.6Hz, 1H), 3.57-3.63 (m, 1H), 3.51-3.55 (m, 1H), 2.15-2.28 (m, 2H), 0.92 (t, J= 8.4Hz, 9H), and 0.58 (q, J= 7.6Hz, 6H). 
　13C-NMR (DMSO-d6): 165.8, 155.9, 153.1, 87.7, 85.1, 71.3, 60.6, 40.7, 6.6, and 4.1. 
　Mass: 343 [M+H]+ (Calcd. for C14H26N4O4Si, MW= 342.17).
化合物Ｍ：　３’－Ｏ－（ノルマルプロピルジメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：3’-O-(n-Propyldimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、R1= H、R2= n-Propyldimethylsilyl基）（合成条件・単離法：反応時間：約１.５時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：１０％（合成法Ａ））
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.48 (s, 1H), 7.53 (br s, 1H), 7.51 (br s, 1H), 5.99 (t, J= 6.4Hz, 1H), 5.09 (br s, 1H), 4.38-4.41 (m, 1H), 3.79 (q, J= 4.0Hz, 1H), 3.60 (br d, J= 12.4Hz, 1H), 3.51 (br d, J= 12.4Hz, 1H), 2.14-2.25 (m, 2H), 1.29-1.37 (m, 2H), 0.94 (t, J= 7.2Hz, 3H), 0.56-0.60 (m, 2H), and 0.10 (s, 6H). 
　13C-NMR (DMSO-d6): 165.9, 155.9, 153.1, 87.5, 85.1, 71.1, 60.5, 18.6, 17.9, 16.2, and -1.6. 
　Mass: 329 [M+H]+ (Calcd. for C13H24N4O4Si, MW= 328.16).
化合物Ｎ：　３’－Ｏ－（イソプロピルジメチルシリル）－５－アザ－２’－デオキシシチジン：3’-O-(i-Propyldimethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（式（Ｉ）中、R1= H、R2= i-Propyldimethylsilyl基）（合成条件・単離法：反応時間：約３時間、カラム溶出溶媒：酢酸エチル－メタノール系、単離収率：１７％（合成法Ａ））
　1H-NMR (DMSO-d6): 8.48 (s, 1H), 7.53 (br s, 1H), 7.51 (br s, 1H), 6.01 (t, J= 6.4Hz, 1H), 5.09 (t, J= 5.2Hz, 1H), 4.39-4.42 (m, 1H), 3.80 (q, J= 3.6Hz, 1H), 3.58-3.81 (m, 1H), 3.51-3.55 (m, 1H), 2.17-2.26 (m, 2H), 0.93 (br s, 3H), 0.92 (br s, 3H), 0.81-0.86 (m, 1H), and 0.07 (s, 6H).  
　13C-NMR (DMSO-d6): 165.9, 155.9, 153.1, 87.5, 85.0, 71.2, 60.5, 40.5, 16.7, 13.8, -3.9, and -4.0.
　Mass: 329 [M+H]+ (Calcd. for C13H24N4O4Si, MW= 328.16).
試験例１
　５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体のシチジンデアミナーゼに対する安定性
　５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）約１ｍｇをアセトニトリル１ｍＬに溶解し、其の１０μＬをＰＢＳ１ｍＬに添加し、得られた溶液にシチジンデアミナーゼのＰＢＳ溶液１０μＬを加えて、３７℃にて約１時間撹拌した。其の反応液にアセトニトリル１ｍＬを加えて遠心分離し、上澄み液をＨＰＬＣ分析した。例えば、5’-O-(Triethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（化合物Ｆ）の場合の分析結果を表１に示す。
　シチジンデアミナーゼ：CDA(1-146aa), Human, His-tagged, Recombinant cytidine deaminase (ATGen社)
　ＨＰＬＣ測定条件：
　　　カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ　ＰＡＫ　ＡＤＭＥ
　　　　　　　４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ、粒子サイズ：３μｍ
　　　溶出：　溶出液Ａ＝１０ｍＭ蟻酸アンモニウム含有精製水
　　　　　　　溶出液Ｂ＝アセトニトリル
　　　　　　　Ａ：Ｂ＝９９：１→５：９５、３０分間のグラジエントモード
　　　流出速度：１.０ｍＬ/分　　　　オーブン温度：４０℃
　　　検出器：ＵＶ２４０ｎｍ
（表１）
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000024
　このように、本発明に係る５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、シチジンデアミナーゼに対して非常に安定であった。一方、５－アザ－２’－デオキシシチジンは、上記した反応条件下で完全に消失した。
試験例２
　５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体の非酵素的加水分解
　５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）、例えば、5’-O-(Triethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine（化合物Ｆ）約１ｍｇをアセトニトリル１ｍＬに溶解し、其の５μＬを１０ｍＭ ＰＢＳ溶液１００μＬに添加し、３７℃にて撹拌した。其の反応物を経時的にＨＰＬＣ分析した結果、対応する脱シリル体（5-Aza-2’-deoxycytidine：式（Ｉ）中、Ｒ1及びＲ２が水素原子である。）の生成が確認でき、他の分解物の生成は殆ど認められなかった。
　なお、ＨＰＬＣ測定条件は、試験例１の場合と同じ分析条件である。
（表２）
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000025
試験例３
　５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体の抗ＣＭＬおよび抗TΚΙ抵抗性ＣＭＬ活性 
　下表中のＣＭＬ細胞株(BV173, MYL, Ba/F3 BCR-ABLWT)とТΚΙ抵抗性ＣＭＬ細胞株(MYL-R, Ba/F3 BCR-ABLT315I)を培養液(10%FBSとRPMI-1640)中で３,０００～７,０００cells/１００μＬ/ウェルで９６ウェルプレートへ播種し、５％炭酸ガス気流下、３７℃で約３時間培養した。次に、５０μＭ～０.０５μＭ(MYL, Ba/F3 BCR-ABLWT, MYL-R, Ba/F3 BCR-ABLT315I)及び５００ｎＭ～０.１ｎＭ(BV173)となるように培養液で希釈した各化合物１００μＬずつを上記の９６ウェルプレートへ加え、２４時間培養した後、遠心分離(4℃, 1500rpm, 5分間)し、上清の培養液を破棄し、培養液で希釈した化合物１００μＬずつを再添加した。更に２４時間(計４８時間) 培養した後、同様の操作を繰り返した。更に２４時間(計７２時間）培養した後、ＣＣＫ-８試薬(DOJINDO、CK04)を用いて付属マニュアルに従って反応した後、プレートリーダー（Varioskan Flash、サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）で各ウェルの４５０ｎｍと６２０ｎｍ(Blank)の吸収を測定した。検体無添加ウェルの値を１００％とした時の各検体処理ウェルの値を相対値で表し、IC50（μM）値を算出した（表３-１を参照）。また、MYL株に対するMYL-R株とBa/F3 BCR-ABLWT株に対するBa/F3 BCR-ABLT315I株のIC50比をそれぞれ算出した(表３-２を参照)。
（表３-１）
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000026
 
（表３-２）
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000027
 
　MYL-R株はLynを過剰発現したMYL株であり、また、Ba/F3 BCR-ABLT315I株はBa/F3 BCR-ABLWT株にABLT315I変異を導入した株であり、いずれもТΚΙ抵抗性を獲得している。表３-１と表３-２ の結果から、５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（例えば、化合物Ｆ：5’-O-(Triethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine）は非常に高い抗ＣＭＬ活性および抗ТΚΙ抵抗性ＣＭＬ活性を有していることが判明した。なお、この化合物ＦのMYL-R株に対する抗ＣＭＬ活性は、５－アザシチジンの場合よりもかなり高く、５－アザ－２’－デオキシシチジンの場合と類似している。
試験例４
　５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体のＤＮＡ脱メチル化効果
　パイロシーケンス法を用い、ＬＩＮＥ-１（Long interspersed nucleotide factor-1）のСｐＧアイランドシトシン部メチル化比率を測定した。
　ＢＶ１７３細胞株（約50,000個/mL）含有溶液に、０.１ｎＭまたは１．０ｎＭ、５．０ｎＭ、１０．０ｎＭ、５０．０ｎＭ濃度の５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（例えば、化合物F：5’-O-(Triethylsilyl)-5-aza-2’-deoxycytidine）溶液を添加し、ＲＰＭＩ-１６４０（10%FBS及びPenn-strepを含有）培地中で７２時間培養した後、細胞からＤＮＡを抽出し、亜硫酸水素塩で処置した後にＬＩＮＥ-１のСｐＧメチル化率を測定した（表４を参照）。
（表４）
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000028
 
　その結果、５－アザ－２’－デオキシシチジンの糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、ＢＶ１７３株に対してＤＮＡ脱メチル化作用を有することが確認できた。
　本発明によれば、代謝酵素シチジンデアミナーゼに対する高い安定性を有するＤＮＭＴ阻害剤を新規ТΚΙ抵抗性ＣＭＬ治療薬又は予防薬として医療現場に提供することができる。

Claims (18)

  1. 　式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000001
     
     
    （式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000002
     
    （式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  2. 　前記Ｒ１が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ２が水素原子である、請求項１に記載の化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  3. 　前記Ｒ２が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ１が水素原子である、請求項１に記載の化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  4. 　前記Ｒ１及びＲ２が、それぞれ式（II）で表されるシリル基である、請求項１に記載の化合物又は其の塩を含有するТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  5. 　前記Ｒ３、Ｒ４及びＲ５が、それぞれ置換基を有していてもよいＣ１～Ｃ８アルキル基又はＣ６～Ｃ１０アリール基又はＣ７～Ｃ１４アリールアルキル基である、請求項１に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  6. 　アルキル基が、メチル基、エチル基又はプロピル基である、請求項１～５のいずれか１項に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  7. 　アルキル基が、エチル基である、請求項１～６のいずれか１項に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  8. 　前記Ｃ６～Ｃ１０アリール基がフェニル基又はナフチル基である、請求項５に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  9. 　前記Ｃ７～Ｃ１４アリールアルキル基が、ベンジル基、フェネチル基又はナフチルメチル基である、請求項５に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  10. 　請求項１～９のいずれか１項に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤を併用剤と組み合わせてなることを特徴とする、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  11. 　併用剤が、ｐ５３遺伝子阻害剤又は酵素阻害剤である、請求項１０に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  12. 　酵素阻害剤が、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、ヒストンメチル化酵素阻害剤、ヒストン脱メチル化酵素阻害剤等からなる群から選択される１種以上である、請求項１１に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  13. 　酵素阻害剤が、ＤＳ３２０１、ＨＢＩ-８０００、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、スラミン（Ｓｕａｍｉｎ）、ＥＰＺ００５６８７及びＡｄｏｘ等からなる群から選択される１種以上である、請求項１１に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤。
  14. 　式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000003
     
    （式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000004
     
    （式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は、同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩の有効量を投与することを特徴とする、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
  15. 　式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000005
     
    （式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000006
     
    （式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は、同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩及び併用剤の有効量を投与することを特徴とする、ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
  16. 　請求項１５に記載の式（Ｉ）で表される化合物又は其の塩が、前記併用剤と同時に投与されることを特徴とする、請求項１５に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
  17. 　請求項１５に記載の式（Ｉ）で表される化合物又は其の塩が、前記併用剤の投与前又は投与後に投与されることを特徴とする、請求項１５に記載のТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防又は治療方法。
  18. 　ТΚΙ抵抗性ＣＭＬの予防・治療剤を製造するための式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000007
     
    （式中、Ｒ1及びＲ２は、それぞれ水素原子又は式（II）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000008
     
    （式中、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。ただし、Ｒ１及びＲ２は、同時に水素原子である場合を除く。）で表される化合物又は其の塩の使用。
     
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