RU2487883C2 - Аналоги азацитидина и их применение - Google Patents
Аналоги азацитидина и их применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2487883C2 RU2487883C2 RU2010116154A RU2010116154A RU2487883C2 RU 2487883 C2 RU2487883 C2 RU 2487883C2 RU 2010116154 A RU2010116154 A RU 2010116154A RU 2010116154 A RU2010116154 A RU 2010116154A RU 2487883 C2 RU2487883 C2 RU 2487883C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- aza
- compound
- cancer
- formula
- Prior art date
Links
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N U-18,496 Chemical class O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 title abstract description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 48
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 12
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 23
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 14
- 230000001613 neoplastic Effects 0.000 claims description 12
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 claims description 8
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 210000002808 Connective Tissue Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000001035 Gastrointestinal Tract Anatomy 0.000 claims description 3
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 3
- 206010025310 Other lymphomas Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 claims description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 claims description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 3
- 210000004556 Brain Anatomy 0.000 claims description 2
- 206010024324 Leukaemias Diseases 0.000 claims description 2
- 210000001672 Ovary Anatomy 0.000 claims description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 2
- 210000002307 Prostate Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000003932 Urinary Bladder Anatomy 0.000 claims description 2
- 201000009251 multiple myeloma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000003793 myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 210000002264 Mammary Glands, Animal Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004293 Mammary Glands, Human Anatomy 0.000 claims 1
- 230000002489 hematologic Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 32
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 230000003110 anti-inflammatory Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 87
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 34
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 28
- KWMUVCHOORZICC-VMOCIQDGSA-N [(2R,3S,4R,5R)-5-(4-amino-2-oxo-1,3,5-triazin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl (E)-octadec-9-enoate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COC(=O)CCCCCCC/C=C/CCCCCCCC)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)N=C1 KWMUVCHOORZICC-VMOCIQDGSA-N 0.000 description 27
- 229960002756 Azacitidine Drugs 0.000 description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 201000010874 syndrome Diseases 0.000 description 14
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 13
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 13
- 239000002609 media Substances 0.000 description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- -1 ribose monosaccharide Chemical class 0.000 description 13
- 102100002692 NFKB1 Human genes 0.000 description 12
- 101700086102 NFKB1 Proteins 0.000 description 12
- 230000001640 apoptogenic Effects 0.000 description 11
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 description 11
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N acetic acid ethyl ester Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 9
- 230000001472 cytotoxic Effects 0.000 description 9
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 7
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 7
- 230000002757 inflammatory Effects 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 7
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 description 6
- XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N Decitabine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 6
- 229960002768 Dipyridamole Drugs 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N formic acid Chemical group OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N Acridine orange Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3C=C21 DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940023040 Acyclovir Drugs 0.000 description 5
- IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N Dipyridamole Chemical compound C=12N=C(N(CCO)CCO)N=C(N3CCCCC3)C2=NC(N(CCO)CCO)=NC=1N1CCCCC1 IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N Ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 5
- 108060001084 Luciferase family Proteins 0.000 description 5
- 239000007759 RPMI Media 1640 Substances 0.000 description 5
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 5
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000000840 anti-viral Effects 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 230000001973 epigenetic Effects 0.000 description 5
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 5
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 5
- 108091006442 nucleoside transporters Proteins 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N propylene glycol Chemical class CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1N1[N+](C=2C=CC(I)=CC=2)=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=N1 JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 0 *C(C1(*)*)OC(CO*)C1O Chemical compound *C(C1(*)*)OC(CO*)C1O 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 1-[(1S,2R,3R,4S,5R,6R)-3-carbamimidamido-6-{[(2R,3R,4R,5S)-3-{[(2S,3S,4S,5R,6S)-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-(methylamino)oxan-2-yl]oxy}-4-formyl-4-hydroxy-5-methyloxolan-2-yl]oxy}-2,4,5-trihydroxycyclohexyl]guanidine Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 102100016237 ESR2 Human genes 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M NaHCO3 Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N acyclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 4
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 description 4
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 4
- 102000037207 nucleoside transporters Human genes 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010059512 Apoptosis Diseases 0.000 description 3
- 101700051675 ESR2 Proteins 0.000 description 3
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N dCyd Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 3
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000051 modifying Effects 0.000 description 3
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological Effects 0.000 description 3
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 2
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 2
- 108050008874 Annexins Proteins 0.000 description 2
- 102000000412 Annexins Human genes 0.000 description 2
- HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N Benzidine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C=C1 HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100003292 CDA Human genes 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N Cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 230000007067 DNA methylation Effects 0.000 description 2
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N Deoxyribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 2
- 108010031325 EC 3.5.4.5 Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000000509 Estrogen Receptor beta Human genes 0.000 description 2
- 230000036826 Excretion Effects 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100016162 HMBS Human genes 0.000 description 2
- 108060003756 HMBS Proteins 0.000 description 2
- 229940088597 Hormone Drugs 0.000 description 2
- 230000036650 Metabolic stability Effects 0.000 description 2
- 210000004400 Mucous Membrane Anatomy 0.000 description 2
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001331 Nose Anatomy 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N Oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N Oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000030951 Phosphotransferases Human genes 0.000 description 2
- 108091000081 Phosphotransferases Proteins 0.000 description 2
- 230000036908 Plasma Stability Effects 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J Pyrophosphate Chemical class [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 2
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M Sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960005322 Streptomycin Drugs 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 2
- CXVGEDCSTKKODG-UHFFFAOYSA-N Sulisobenzone Chemical compound C1=C(S(O)(=O)=O)C(OC)=CC(O)=C1C(=O)C1=CC=CC=C1 CXVGEDCSTKKODG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N Thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 201000009030 carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001605 fetal Effects 0.000 description 2
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-O hydron;2H-tetrazole Chemical compound C1=NN=[NH+]N1 KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 229940002612 prodrugs Drugs 0.000 description 2
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 2
- 230000000717 retained Effects 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 102000003995 transcription factors Human genes 0.000 description 2
- 108090000464 transcription factors Proteins 0.000 description 2
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 2
- CYTCTRAEJYIZRX-UHFFFAOYSA-N (9a-hydroxy-3,5a-dimethyl-9-methylidene-2-oxo-3,3a,4,5,6,7,8,9b-octahydrobenzo[g][1]benzofuran-6-yl) acetate Chemical compound C1CC2(C)C(OC(C)=O)CCC(=C)C2(O)C2C1C(C)C(=O)O2 CYTCTRAEJYIZRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONCXFUAOAOCNRC-QZOPMXJLSA-N (Z)-docos-13-enoic acid;(Z)-octadec-9-enoic acid Chemical class CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCC(O)=O ONCXFUAOAOCNRC-QZOPMXJLSA-N 0.000 description 1
- JIHQDMXYYFUGFV-UHFFFAOYSA-N 1,3,5-Triazine Chemical group C1=NC=NC=N1 JIHQDMXYYFUGFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 2-(diethylamino)ethyl 4-aminobenzoate;(2S,5R,6R)-3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;hydrate Chemical compound O.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1.N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 289-95-2 Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MFEFTTYGMZOIKO-UHFFFAOYSA-N 5-azacytosine Chemical compound NC1=NC=NC(=O)N1 MFEFTTYGMZOIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PHEDXBVPIONUQT-LQLWEASQSA-N 63597-44-4 Chemical compound C([C@@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-LQLWEASQSA-N 0.000 description 1
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N ADRIAMYCIN Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 206010000565 Acquired immunodeficiency syndrome Diseases 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Natural products NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000643 Adenine Drugs 0.000 description 1
- XJKJWTWGDGIQRH-BFIDDRIFSA-N Alginic acid Chemical compound O1[C@@H](C(O)=O)[C@@H](OC)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](C)[C@@H](O)[C@H]1O XJKJWTWGDGIQRH-BFIDDRIFSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000000481 Breast Anatomy 0.000 description 1
- 210000003123 Bronchioles Anatomy 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-L CHEBI:8154 Chemical class [O-]P([O-])=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate dianion Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000000170 Cell Membrane Anatomy 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960000724 Cidofovir Drugs 0.000 description 1
- VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N Cidofovirum Chemical compound NC=1C=CN(C[C@@H](CO)OCP(O)(O)=O)C(=O)N=1 VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 229920002676 Complementary DNA Polymers 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 229940104302 Cytosine Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102100013239 DCK Human genes 0.000 description 1
- 229940072185 DRUGS FOR TREATMENT OF TUBERCULOSIS Drugs 0.000 description 1
- 108010033174 Deoxycytidine Kinase Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K Dicalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000019739 Dicalciumphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 230000035521 G2 Phase Effects 0.000 description 1
- 230000010337 G2 phase Effects 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N Gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N Guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 230000036499 Half live Effects 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229940097709 Hepsera Drugs 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N Isobutane Chemical compound CC(C)C NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 1
- 208000008456 Leukemia, Myelogenous, Chronic, BCR-ABL Positive Diseases 0.000 description 1
- 230000035779 M Phase Effects 0.000 description 1
- 230000027311 M phase Effects 0.000 description 1
- 108010047230 Member 1 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 1
- 210000004379 Membranes Anatomy 0.000 description 1
- 230000036740 Metabolism Effects 0.000 description 1
- 210000001616 Monocytes Anatomy 0.000 description 1
- 241000238367 Mya arenaria Species 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N N'-amino-N-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- FSVCQIDHPKZJSO-UHFFFAOYSA-L Nitro blue tetrazolium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 FSVCQIDHPKZJSO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000019055 Nucleoside Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- XAPRFLSJBSXESP-UHFFFAOYSA-N Oxycinchophen Chemical compound N=1C2=CC=CC=C2C(C(=O)O)=C(O)C=1C1=CC=CC=C1 XAPRFLSJBSXESP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 Penicillin Drugs 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 210000003800 Pharynx Anatomy 0.000 description 1
- WOZSCQDILHKSGG-UHFFFAOYSA-N Preveon Chemical compound N1=CN=C2N(CCOCP(=O)(OCOC(=O)C(C)(C)C)OCOC(=O)C(C)(C)C)C=NC2=C1N WOZSCQDILHKSGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M Propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N Saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 Saccharin Drugs 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- 229940054269 Sodium Pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 102000018075 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- 230000037034 TERMINAL HALF LIFE Effects 0.000 description 1
- 102100019730 TP53 Human genes 0.000 description 1
- 229940113082 Thymine Drugs 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 229940035893 Uracil Drugs 0.000 description 1
- 208000001756 Virus Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000021375 Xenogenes Species 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229960003205 adefovir dipivoxil Drugs 0.000 description 1
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 108060003434 alpha Proteins 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000719 anti-leukaemic Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 125000000089 arabinosyl group Chemical class C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO1)* 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000305 astragalus gummifer gum Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- 229960000626 benzylpenicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 229920002083 cellular DNA Polymers 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000007958 cherry flavor Substances 0.000 description 1
- 201000006934 chronic myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002817 coal dust Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003603 decitabine Drugs 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000003111 delayed Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000029211 developmental cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 229940038472 dicalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000390 dicalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion media Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000002884 effect on inflammation Effects 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 108091007910 estrogen receptors beta Proteins 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 200000000018 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000001282 iso-butane Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000035786 metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003278 mimic Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial Effects 0.000 description 1
- 235000021281 monounsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical group 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atoms Chemical group N* 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 239000007968 orange flavor Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920000406 phosphotungstic acid polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 230000034190 positive regulation of NF-kappaB transcription factor activity Effects 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000770 pro-inflamatory Effects 0.000 description 1
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible Effects 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I triphosphate(5-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Images
Abstract
Данное изобретение относится к новому соединению-аналогу азацитина следующей формулы (I):
где R представляет собой Н, R5C(O); R1 представляет собой
где пересекающая пунктирная линия обозначает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I); R2 и R3 независимо представляют собой ОН или Н при условии, что R2 и R3 не являются одновременно ОН; R4 представляет собой Н или R5C(O) при условии, что R и R4 не являются одновременно Н; и R5 представляет собой С3-С26 алкенил, или его фармацевтической соли. Эти соединения обладают противораковой и противовоспалительной активностью. Изобретение также относится к фармацевтической композиции на основе этих соединений и к способам лечения. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 6 табл., 8 ил., 15 пр.
Description
По настоящей заявке испрашивается приоритет на основании предварительной заявки на патент США №60/975437, поданной в патентное ведомство США 26 сентября 2007 г., содержание которой полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.
Область техники
Настоящее изобретение относится к аналогам азацитидина и их применению.
Уровень техники
Аналоги нуклеозидов, производные природных нуклеозидов, которые встречаются в качестве строительных блоков ДНК и РНК, являются эффективными в клиническом лечении рака или вирусных заболеваний у человека, хотя раньше подобные соединения рассматривали в качестве противотуберкулезных средств. Такие соединения зарегистрированы на рынке уже в течение более 40 лет, и в настоящее время примерно 35 продуктов применяются ежедневно. Природные нуклеозиды, приведенные в таблице 1 ниже, состоят из азотистых оснований двух классов, а именно пуринов (представлены аденином и гуанином) и пиримидинов (представлены тимином, урацилом и цитозином), а также из моносахарида рибозы или дезоксирибозы.
Таблица 1
Все природные нуклеозиды существуют в так называемой β-D конфигурации, как показано ниже в формуле А. Азотистое основание и гидроксиметильная боковая цепь в цикле сахара находятся по одну и ту же сторону (цис) от плоскости кольца сахара.
Формула A
С целью получения нуклеозидных производных с противораковой или противовирусной активностью были произведены химические модификации в азотистом основании и/или моносахариде. Например, введение в азотистое основание атомов галогена или других функциональных групп, введение дополнительных атомов азота, или же стереохимическая замена кольца моносахарида с рибозы на арабинозу или удаление гидроксильной группы с получением дезоксирибозы может приводить к образованию продуктов, обладающих терапевтическим потенциалом. Во многих продуктах моносахаридное кольцо сохраняется, тогда как в других кольцо сахара может быть трансформировано в цепь. Аналоги нуклеозидов представляют собой небольшие молекулы, имеющие превосходную растворимость в воде.
Многочисленные усилия, направленные на исследования и разработки в области аналогов нуклеозидов, обусловленные всемирной эпидемией СПИД, содействовали накоплению фундаментальной базы знаний и пониманию механизма действия, изменений в профиле активности благодаря химической модификации и т.п., относятся также и к области лечения рака.
Общим недостатком многих лекарственных средств, включая аналоги нуклеозидов, является низкая активность и низкая специфичность при лечении конкретного рассматриваемого заболевания. Некоторые из этих проблем можно отнести к активности, присущей самому лекарственному средству, некоторые можно отнести к определенным механизмам устойчивости (как врожденным, так и приобретенным в ходе лечения, например множественная лекарственная устойчивость (MDR) при лечении рака). Некоторые проблемы можно отнести к замедленному транспорту или клеточному захвату и механизмам активации. Некоторые проблемы можно отнести к быстрой инактивации и/или экскреции лекарственного средства.
Эффективность аналогов нуклеозидов зависит в немалой степени от их способности мимикрировать под природные нуклеозиды и, таким образом, взаимодействовать с вирусными и/или клеточными ферментами, а также препятствовать протеканию ключевых процессов в метаболизме нуклеиновых кислот (или ингибировать их). Для того чтобы привести в действие их противовирусную или противораковую активность, аналоги нуклеозидов следует трансформировать через их моно- и дифосфаты в их соответствующие трифосфаты под действием вирусных и/или клеточных киназ. В общем случае, активным средством является трифосфат, но для некоторых продуктов, например для гемцитабина, даже воздействие дифосфата может быть клинически значимым.
Для того чтобы достичь пораженных заболеванием, раковых или инфицированных вирусом клеток или тканей после энтерального или парентерального введения, аналоги нуклеозидов должны обладать подходящими фармакокинетическими характеристиками. Помимо быстрой экскреции введенного лекарства, многие аналоги нуклеозидов могут быть деактивированы как в кровотоке, так и в тканях. Например, производные цитозина, даже на уровне монофосфата, могут быть быстро деаминированы под действием класса ферментов, называемых деаминазами, до неактивного аналога урацила. Клеточный захват и, таким образом, высокая терапевтическая эффективность многих аналогов нуклеозидов сильно зависит от мембранных белков, осуществляющих транспорт нуклеозидов (называемых концентрирующим и уравновешивающим нуклеозидными переносчиками). Следовательно, объектом поиска являются соединения, которым не требуется такой специфический механизм захвата. Еще один фактор, ограничивающий активность, особенно в сфере лечения рака, представляет собой механизмы клеточного восстановления. Когда монофосфат противоракового нуклеозидного аналога встраивается в клеточную ДНК, он не удаляется из ДНК раковой клетки под действием эндонуклеазы, связанной с белком p53. Тем не менее удаление нуклеозидного аналога из ДНК здоровой клетки является желательным для того, чтобы ограничить побочные эффекты лекарственного средства.
В течение долгих лет были разработаны многие нуклеозидные аналоги, которые в значительной мере преодолевают некоторые или многие факторы, ограничивающие активность. В качестве примера, иллюстрирующего соединение, обладающее высокой специфичностью, можно привести ацикловир (ACV). ACV-монофосфат может образовываться только под действием вирусных киназ, и это означает, что ACV не может быть активирован в неинфицированных клетках. Несмотря на этот факт, ACV не является исключительно активным продуктом. Для того чтобы обойти распространенную скорость-лимитирующую стадию в активации нуклеозидного аналога, т.е. внутриклеточное образование монофосфата нуклеозидного аналога, были разработаны несколько фосфонатов, таких как цидофовир, или даже монофосфатные продукты. Для обеспечения возможности перорального приема или желаемой диспозиции лекарственного средства в организме, были получены конкретные пролекарства, такие как Hepsera.
В дополнение к структурным изменениям, произведенным в нуклеозидных аналогах для достижения повышенной клинической применимости, были осуществлены дальнейшие модификации для улучшения активности. Существует несколько примеров модифицированных нуклеозидных аналогов, получаемых в результате присоединения липидной части (патенты США №6153594, 6548486, 6316425 и 6384019; заявки на европейский патент № EP-A-56265 и EP-A-393920; и WO 99/26958). Присоединения липидной части можно достичь путем присоединения жирных кислот, например, посредством сложноэфирной, амидной, карбонатной или карбаматной связи. Можно получить более совершенные продукты, такие как фосфолипидные производные аналогов нуклеозидов. См. Eur. J. Pharm. Sci. 11b Suppl. 2: 15-27 (2000); европейский патент №545966; канадский патент №2468099; и патенты США №6372725 и 6670341. В указанных документах описывается, что такие аналоги имеют противовирусную активность, особенно подходящую для лечения и профилактики инфекций, вызванных ДНК, РНК или ретровирусами. Они также подходят для лечения злокачественных опухолей. Липидные производные аналогов нуклеозидов могут служить нескольким целям. Их можно рассматривать как пролекарство, которое не является субстратом для деаминаз, предохраняя таким образом нуклеозидные аналоги от деактивации во время транспорта в кровотоке. Липидные производные также могут быть более эффективно транспортированы через клеточную мембрану, что приведет к повышенной внутриклеточной концентрации нуклеозидного аналога. Липидные препараты могут быть также более подходящими для применения в дермальных препаратах, пероральных продуктах (см. патент США №6576636 и WO 01/18013), или конкретных композициях, таких как липосомы (см. патент США №5223263), разработанных для воздействия на опухоли.
Было показано, что в случае нуклеозидных аналогов с сохраненной β-D конфигурацией моносахаридного кольца или нуклеозидных аналогов с нециклической боковой цепью противовирусная или противораковая активность может быть наиболее эффективно улучшена путем получения производных мононенасыщенных ω-9 C18 и C20 жирных кислот. См. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Vol., 53-61 (1999); Cancer Research 59: 2944-2949 (1999); Gene Therapy, 5: 419-426 (1998); Antiviral Research, 45: 157-167 (2000); и Biochemical Pharmacology, 67: 503-511 (2004). Желательно, чтобы мононенасыщенные производные были не только более активными, чем полиненасыщенные аналоги, но и чтобы они легче подвергались кристаллизации и были более устойчивыми к окислению липидной цепи. Таким образом, указанные производные являются более предпочтительными соединениями с точки зрения химического и фармацевтического производства. Было также показано, что мононенасыщенные жирные кислоты ω-9 C18 и C20 подходят для улучшения терапевтической активности большого числа биологически активных веществ ненуклеозидной природы (см. европейский патент №0977725).
Сравнительно новой подгруппой нуклеозидных аналогов являются так называемые аза-C производные. У соединений этого класса CH-группа в положении 5 в пиримидиновом основании заменена атомом азота, как показано ниже в формуле B.
Формула B
Потенциальными мишенями для реактивации с помощью новых химиотерапевтических средств являются гены-супрессоры опухолей, которые были выключены вследствие абберантного метилирования ДНК. Производные аза-цитидина и 5-аза-2'-дезоксицитидина (5-аза-C, 5-аза-CdR, Децитабин), которые являются сильными ингибиторами метилирования ДНК и противолейкемическими средствами, могут реактивировать выключенный ген-супрессор опухолей. При высоких концентрациях эти соединения цитотоксичны, но при более низких концентрациях гипометилирование приводит к дифференцировке клеточных линий. Эти соединения требуют метаболической активации посредством дезоксицитидинкиназы и осуществляют ингибировние ДНК-метилтрансферазы. Одним из препятствий для их лечебного действия является их быстрая in vivo инактивация с участием цитидиндеаминазы (CD). Неустойчивость в водных растворах, а также совокупность побочных эффектов ограничивают клиническую активность указанных соединений.
Настоящее изобретение направлено на преодоление этих и других недостатков в данной области техники.
Краткое описание изобретения
Один из аспектов настоящего изобретения направлен на соединение согласно формуле (I)
где R представляет собой H, R5C(O); R1 представляет собой
где пересекающая пунктирная линия изображает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I), R2 и R3 независимо представляют собой OH или H, при условии что R2 и R3 не являются одновременно OH, R4 представляет собой H или R5C(O), при условии, что R и R4 не являются одновременно H, R5 представляет собой C3-C26 алкенил; или фармацевтическую соль указанного соединения.
Другой аспект настоящего изобретения направлен на фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы (I) и фармацевтический эксципиент, разбавитель и/или носитель.
Еще один аспект настоящего изобретения направлен на способ лечения неопластического синдрома у пациентов. Данный способ включает отбор пациента с неопластическим синдромом и введение ему соединения формулы (I), как описано выше, или фармацевтической соли этого соединения, в условиях, эффективных для лечения неопластического синдрома у пациента.
Еще один аспект настоящего изобретения направлен на способ лечения воспалительного синдрома у пациентов. Данный способ включает отбор пациента с воспалительным синдромом и введение ему соединения формулы (I), как описано выше, или фармацевтической соли этого соединения, в условиях, эффективных для лечения воспалительного синдрома у пациента.
Неустойчивость Аза-C в буферном растворе и плазме крови хорошо известна (см. Israili et al., Cancer Research 36, 1453-1461 (1976); Rudek et al., J. Clin. Oncol., 23:17, 3906-3911 (2005); Rustum et al., J. Chromat., 421:12, 387-91 (1987); Zhao et al., J. Chromat B, 813, 81-88 (2004), полностью включенные в настоящую заявку посредством ссылки). Сообщалась средняя величина конечного периода полувыведения для Аза-C, составляющая 1,50±2,30 часа в клинических образцах плазмы крови (см. Rudek et al., J. Clin. Oncol., 23:17, 3906-3911 (2005), данный источник полностью включен в настоящую заявку посредством ссылки). В исследованиях in vitro была отмечена потеря 20% Аза-C даже при -60°C после 4,5 дней хранения, и потеря 10% в течение 0,5 часа при хранении при комнатной температуре (см. Zhao et al., J. Chromat B, 813, 81-88 (2004), данный источник полностью включен в настоящую заявку посредством ссылки). Предполагают, что первичная неустойчивость Аза-C обусловлена быстрым (первая стадия является обратимой) раскрытием цикла 5-Аза-пиримидинового кольца с последующим распадом муравьиной кислоты (см. Chan et al., J. Pharma Sci., 68;7, 807-12 (1979), данный источник полностью включен в настоящую заявку посредством ссылки). Предполагается, что прочие пути распада обусловлены деаминированием аминогруппы в 4 положении и гидролизом гликозидной связи с образованием D-рибозы и 5-азацитозина. Было неожиданно обнаружено, что предпочтительные липидные производные Аза-C имеют значительно лучший профиль устойчивости в плазме по сравнению с самим Аза-C. Соединения стабильны (доля остающегося от исходного ≥94%) в контрольной матрице человеческой плазмы при комнатной температуре в течение по меньшей мере 4 часов в экспериментальных условиях, и в постэкстракционном супернатанте после осаждения плазменных белков не было обнаружено значимых продуктов деградации. Устойчивость в плазме предпочтительных липидных соединений была изучена далее в условиях хранения при 37°C. Было показано, что возможность раскрытия кольца Аза-фрагмента или иного распада соединения существенно снижается, если к Аза-C присоединена липидная боковая цепь.
Быстрый распад Аза-C является препятствием для клинического применения Аза-C. Повышенная устойчивость в плазме крови липидных производных по сравнению с самим Аза-C может обеспечить высокий и устойчивый уровень липидного производного в плазме пациента. Это может привести к лучшему распределению в ткани/органе/опухоли и подверженности клетки действию лекарства, а также усвоению лекарственного средства, чем для самого Аза-C, с одной стороны, и, следовательно, к лучшей подверженности ДНК опухолевых клеток действию Аза-C после внутриклеточного гидролиза Аза-C-5'-сложноэфирной связи.
В вариантах реализации настоящего изобретения посредством модификации азацитидина и дезоксицитидина (например, 5-аза-2'-дезоксицитидина) предложены новые молекулы со свойствами, неожиданно отличающимися от свойств азацитидина и дезоксицитидина (например, 5-аза-2'-дезоксицитидина). Это обеспечивает серию соединений, имеющих активность значительно большую, чем противораковая активность азацитидина и дезоксицитидина (например, 5-аза-2'-дезоксицитидина), которая ограничена гематологическими злокачественными образованиями. Эти новые соединения обладают противораковым действием, направленным против широкого спектра солидных опухолей, включая рак молочной железы и шейки матки. Эти соединения проявляют также неожиданную активность против тех видов рака, которые устойчивы к лечению, и, таким образом, они могут быть полезны в терапии солидных опухолей в тех случаях, когда текущий выбор терапевтических средств ограничен. Варианты реализации настоящего изобретения терапевтически применимы при лечении рака в тех случаях, когда варианты и эффективность лечения ограничены, и указанные варианты реализации восполняют неудовлетворенную потребность.
Предложенные соединения демонстрируют более ранее проявление активности после ограниченного времени воздействия, и поэтому эффективно лишь краткосрочное лечение с их использованием в клинической ситуации. Это приводит к более короткому, менее частому терапевтическому воздействию и снижению связанных с лекарственным средством токсических эффектов, по сравнению с исходным лекарственным средством. Таким образом, обеспечивается повышенный терапевтический индекс.
При изменении структуры за счет введения липидного (включая как сложные эфиры, так и амиды) компонента сохраняется азольное цитидиновое кольцо и, следовательно, воздействие молекулы на эпигенетические механизмы. Эпигенетическая модуляция предоставляет важный механизм изменения экспрессии генов при раке и воспалении. Указанные новые соединения являются активными при меньших концентрациях, чем азацитидин и, таким образом, являются более активными. Эти соединения с измененным спектром активности могут модулировать эпигенетические мишени в солидных опухолях и при воспалительных заболеваниях.
Эпигенетические механизмы важны в провоспалительных состояниях, которые включают, но не ограничиваются ими, воспалительные состояния легких, соединительных тканей, желудочно-кишечного тракта и сосудистой системы. Данные соединения путем воздействия на эпигенетические механизмы могут снижать или обращать развитие воспалительных процессов, ответственных за эти заболевания.
Краткое описание чертежей
На фиг.1A-B изображены диаграммы сравнительной цитотоксической активности 5-азацитидин 5'-элаидат (CP) и 5-Аза-C на лейкемических и солидно-опухолевых клеточных линиях. Цитотоксичность определяли в ходе анализа WST-1. Рассчитывали IC50 в программной среде CalcySyn. Клетки обрабатывали в течение 24 часов (фиг.1A) или клетки обрабатывали в течение 24, 48 и 72 часов (фиг.1B).
На фиг.2A-B показаны диаграммы индукции апоптоза под действием 5-азацитидин 5'-элаидат в лейкемических клетках. На фиг.2A клетки HL60, K562 и U937 не подвергались обработке или обрабатывались с помощью 5-азацитидин 5'-элаидат (CP) (0,5-4 мкм) в течение 24 часов. Процент апоптотических клеток определяли с помощью флуоресцентного микроскопа после окрашивания с помощью акридин оранжа и этидиумбромида. На фиг.2B как HL60, так и K562 не подвергались обработке или обрабатывались с помощью 5-азацитидин 5'-элаидат (1, 2 или 4 мкм) в течение 24 часов. Процент апоптотических клеток определяли с помощью проточной цитометрии с применением окрашивания Аннексином-V и PI.
На фиг.3 показаны графики эффекта обработки 5-азацитидин 5'-элаидатом (CP) на клеточный цикл. Клетки культивировали в течение одинакового периода времени перед тем, как анализировать содержание ДНК с помощью проточной цитометрии. Численные значения на графике представляют популяцию регулируемых клеток, имеющих суб-G1 ДНК области.
На фиг.4А-В показаны графики дифференцировки, включающие действие 5-азацитидин 5'-элаидат и 5-АзаС. K562 и U937 подвергали воздействию 5-азацитидин 5'-элаидат (CP) или 5-АзаС (0,125-1 мкм) в течение 14 дней. После начальной обработки в день 0 клетки подвергались воздействию новой порции лекарственных средств в день 4, день 7 и день 10. Дифференцировку оценивали с помощью окрашивания NBT (U937) (фиг.4A) или бензидином (K562) (фиг.4B).
Фиг.5 представляет собой диаграмму, отображающую стимулированную липополисахаридом (LPS) NFκB люциферазную активность, измеренную в клетках U937, подвергавшихся воздействию сложного эфира кислоты и Аза-C или 5'-Аза-C-5'-элаидик.
Подробное описание изобретения
Один из аспектов настоящего изобретения направлен на соединение согласно формуле (I)
где R представляет собой H, R5C(O); R1 представляет собой
где пересекающая пунктирная линия изображает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I), R2 и R3 независимо представляют собой OH или H, при условии что R2 и R3 не являются одновременно OH, R4 представляет собой H или R5C(O), при условии что R и R4 не являются одновременно H, R5 представляет собой C3-C26 алкенил или его фармацевтическую соль.
В конкретном варианте реализации R5 может представлять C9-C26 алкенил.
В предпочтительном варианте реализации R представляет собой R5C(O), R1 представляет собой , R2 представляет собой H, R3 представляет собой OH, R4 представляет собой H и R5 представляет собой CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-.
В более широком аспекте настоящее изобретение направлено на соединение согласно формуле (I)′
где R представляет собой H, R5C(O), R5CH2OC(O) или R5CH2NHC(O), R1 представляет собой
где пересекающая пунктирная линия изображает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I)', R2 и R3 независимо представляют собой OH или H, при условии что R2 и R3 не являются одновременно OH, R4 представляет собой H, R5C(O), R5CH2OC(O) или R5CH2NHC(O), при условии что R и R4 не являются одновременно H, и R5 представляет собой C3-C26 алкенил или его фармацевтическую соль.
В предпочтительном варианте реализации соединения согласно формуле (I)' k равно 7, а n равно 7. В некоторых вариантах реализации R1 представляет собой
где пересекающая пунктирная линия изображает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I)'. В некоторых вариантах реализации R представляет собой R5C(O), k равно 7, m равно 0, n равно 7, R2 представляет собой H, а R3 представляет собой OH. В некоторых вариантах реализации R5 представляет собой C9-C26 алкенил.
Другой аспект настоящего изобретения направлен на фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (I), а также фармацевтический эксципиент, разбавитель и/или носитель.
Предложенные согласно настоящему изобретению средства можно вводить перорально, парентерально, например, подкожно, внутривенно, внутримышечно, интраперитонеально, путем закапывания в нос или посредством приложения к слизистым оболочкам, например, к слизистым носа, горла и бронхиол. Их можно вводить отдельно или же совместно с фармацевтическими носителями, и они могут быть в твердой или жидкой форме, например, в форме таблеток, капсул, порошков, растворов, суспензий или эмульсий.
Предложенные согласно настоящему изобретению активные средства можно вводить перорально, например, вместе с инертным разбавителем или вместе с усваиваемым съедобным носителем, или же их можно заключить в капсулы, имеющие твердую или мягкую оболочку, или их можно прессовать в таблетки, или их можно вводить непосредственно с пищей в соответствии с режимом питания. В случае перорального терапевтического введения эти активные вещества можно вводить вместе с эксципиентом и применять в форме таблеток, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов и т.п. Подобные композиции и препараты должны содержать по меньшей мере 0,1% активного средства. Доля средства в этих композициях может, конечно, варьироваться и может предпочтительно находиться в пределах от примерно 2% до примерно 60% от веса дозированной формы. Количество действующего вещества в подобных терапевтически применимых композициях является таким, чтобы составлять подходящую дозу. Предпочтительные композиции согласно настоящему изобретению готовят таким образом, чтобы стандартная лекарственная форма для перорального приема содержала от примерно 1 до 250 мг действующего вещества.
Таблетки, капсулы и т.п. могут содержать также связующее вещество, например трагакантовую камедь, гуммиарабик, кукурузный крахмал или желатин; эксципиенты, такие как фосфат дикальция; разрыхлитель, например кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота; смазывающее вещество, например, стеарат магния; и подсластитель, например, сахарозу, лактозу или сахарин. Если стандартной лекарственной формой является капсула, то в дополнение к вышеуказанным типам материалов она может содержать жидкий носитель, например, жирные масла.
Могут присутствовать многие другие материалы в качестве оболочки или для модификации физической формы стандартной лекарственной формы. Например, таблетки могут быть покрыты шеллаком, сахаром или тем и другим. Сироп может содержать, в дополнение к активному ингредиенту, сахарозу в качестве подсластителя, метил и пропилпарабены в качестве консервантов, краситель и ароматизатор, например, со вкусом вишни или апельсина.
Указанные активные средства можно также вводить парентерально. Растворы или суспензии этих активных средств можно приготовить в воде, подходящим образом смешав с поверхностно-активным веществом, таким как гидроксипропилцеллюлоза. Дисперсии также могут быть приготовлены в глицерине, жидких пропиленгликолях и также в их масляных смесях. Примерами масел могут служить масла нефтяного, животного, растительного, синтетического происхождения, например, арахисовое масло, соевое масло или минеральное масло. В общем случае, предпочтительными жидкими носителями, в частности, в случае растворов для инъекций, являются вода, солевой раствор, водный раствор декстрозы и родственных сахаров, а также гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. При обычных условиях хранения и применения такие препараты содержат консервант для предотвращения роста микроорганизмов.
Фармацевтические формы, подходящие для применения для инъекций, включают стерильные водные растворы или суспензии, а также стерильные порошки для приготовления стерильных растворов или дисперсий для инъекций для немедленного использования. Во всех случаях форма должна быть стерильной и обладать текучестью в такой мере, чтобы ее легко можно было вводить шприцом. Она должна быть стабильной в условиях производства и хранения и должна быть защищена от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), подходящую смесь из этих компонентов или растительные масла.
Предложенные согласно настоящему изобретению средства можно также вводить непосредственно в дыхательные пути в форме аэрозоля. Для применения в виде аэрозоля предложенные согласно настоящему изобретению средства в виде раствора или суспензии могут быть упакованы в герметизированный аэрозольный контейнер вместе с подходящими газами-вытеснителями, например, углеводородными газами-вытеснителями, такими как пропан, бутан или изобутан, вместе с подходящими адъювантами. Вещества согласно настоящему изобретению можно также вводить в негерметизированной форме, например, с помощью распылителя или пульверизатора.
Следующий аспект настоящего изобретения направлен на способ лечения неопластического синдрома у пациента. Данный способ включает отбор пациента с неопластическим синдромом и введение указанному пациенту соединения формулы (I), как описано выше, или его фармацевтической соли в условиях, эффективных для лечения неопластического синдрома у пациента.
В некоторых вариантах реализации неопластический синдром представляет собой рак. Раковое заболевание может представлять собой солидную опухоль или гематологический рак или злокачественную опухоль. Раковое заболевание может представлять лейкемию, лимфому, множественную миелому или миелодиспластический синдром.
В некоторых вариантах реализации солидная опухоль может представлять рак ткани, например, тканей груди, яичника, простаты, мозга, мочевого пузыря и легких.
Следующий аспект настоящего изобретения направлен на способ лечения воспалительного синдрома у пациента. Данный способ включает отбор пациента с воспалительным синдромом и введение указанному пациенту соединения формулы (I), как описано выше, или его фармацевтической соли в условиях, эффективных для лечения воспалительного синдрома у пациента.
В некоторых вариантах реализации воспалительный синдром представляет воспалительное состояние легких, соединительной ткани, желудочно-кишечного тракта или сосудистой системы.
В материалах настоящей заявки, если не определено иное, научные и технические термины, используемые в связи с настоящей заявкой, имеют свои обычные значения, хорошо известные среднему специалисту в данной области техники. Далее, если в контексте не указано иное, термины в единственном числе включают их множественную форму, и термины во множественном числе включают их форму в единственном числе.
Примеры
Пример 1 - Реагенты, клеточные линии и клеточная культура
5-азацитидин 5'-элаидат (CP или CP-4200) был получен от компании Clavis Pharma AS, реагент для клеточной пролиферации WST-1 был получен от Roche Applied Science (Манхайм, Германия), PI и набор для определения апоптоза Annexin V-FITC apoptosis kit был заказан у BD Biosciences, Пало-Альто, CA, 5-азацитидин (5-АзаС), этидиумбромид (EB), акридиновый оранжевый (AO), нитросиний тетразолий (NBT), форбол 12-миристат 13-ацетат (TPA) были заказаны у Sigma Chemical Co (Сент-Луис, MO).
Линии человеческих промиелоцитных лейкемических клеток HL60, человеческой гистоцитной лимфомы U937, человеческой хронической миелогенной лейкемии K562, T-клетки линии Jurkat человека, аденокарциномы молочной железы MCF-7, карциномы мочевого пузыря 5637, карциномы простаты DU-145 были заказаны у American Type Culture Collection. Все клеточные линии, за исключением Jurkat, содержались в среде RPMI 1640 (Gibco, Глазго, Соединенное Королевство), включающей также 10% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сыворотки (FCS), 100 Ед/мл пенициллина 100 мг/мл стрептомицина в атмосфере 5% CO2 при 37°C. Клетки линии Jurkat культивировали в среде RPMI 1640, включающей также 1,5 г/л бикарбоната натрия, 4,5 г/л глюкозы, 10 мМ пируват натрия и 10% FCS, 100 Ед/мл пенициллина и 100 мг/мл стрептомицина.
Пример 2 - Анализ цитотоксичности
Цитотоксичность липида 5-азацитидина определяли в ходе колориметрического анализа, основанного на расщеплении соли тетразолия WST-1 (4-[3-(4-лодофенил)-2-(4-нитрофенил)-2H-5-тетразолио]-1,3-бензолдисульфонат) митохондриальными дегидрогеназами в жизнеспособных клетках. Клетки высевали при исходной концентрации 1×106/мл (клетки HL60) или 1,25×105/мл (U937, K562 и Jurkat) в среде, не содержащей или содержащей различные концентрации липида 5-азацитидина в 96-луночных плоскодонных микропланшетах и культивировали в течение от 24 до 72 часов. Клетки MCF-7, DU-145 и 5637 (1×104/мл) высевали в чашки и оставляли для адгезии и роста на 24 часа. Добавляли различные концентрации липида 5-азацитидина, после чего культуры поддерживали еще в течение от 24 до 72 часов. Культуры инкубировали с реагентом WST-1 в течение 1 часа. Образование формазана измеряли с помощью ридера микропланшетов (Bio-Tek Instruments, Elx 800) при 450 нм с длиной волны сравнения 650 нм. Ингибирование роста определяли путем сравнения с необработанными клетками (%). Значения IC50 определяли с помощью программы CalcuSyn (Biosoft).
Пример 3 - Количественная оценка апоптотических клеток
Апоптотические клетки определяли с помощью морфологических критериев и флуоресцентно-активированного клеточного сортинга (FACS) после окрашивания Аннексином V-FITC. Для морфологического анализа добавляли 1 мкл готового раствора, содержащего 100 мкг/мл AO и 100 мкг/мл EB к 25 мкл клеточной суспензии. Апоптотические клетки и апоптотические тельца анализировали с помощью флуоресцентной микроскопии. Процент апоптотических клеток определяли после того, как насчитывали общее число всех клеток, равное 300. Для анализа FACS, от 2×105 до 5×106 клеток промывали с помощью PBS, а затем метили с помощью Аннексина V-FICS и пропидиумйодида (PI) в связывающем среду реагенте, согласно инструкциям, приложенным производителем к набору для определения апоптоза Annexin V-FITC apoptosis detection kit. Флуоресцентные сигналы FITC и PI детектировали, соответственно, при 518 нм и 620 нм на FACSCAN (Becton Dickinson, Сан-Хосе, Калифорния). Запись значений флуоресценции Аннексина V-FITC отображалась по оси X, а запись значений флуоресценции PI отображалась на оси Y. Данные обрабатывали с помощью программы CellQuest (Becton Dickinson). Для каждого анализа была произведена запись 10000 клеточных событий.
Пример 4 - Клеточный цикл
Клетки осаждали в ходе центрифугирования и промывали дважды с помощью PBS, фиксировали с помощью 70% (об./об.) холодного спирта (-20°C) и хранили при 4°C в течение по меньшей мере 24 часов. Клетки промывали с помощью PBS. Сгусток клеток окрашивали с помощью окрашивающего раствора PI/RNase. Клеточную суспензию инкубировали в темноте при комнатной температуре в течение 30 мин. Содержание ДНК определяли с помощью проточной цитометрии FACSCalibur (Becton Dickinson, Mount View, CA). Процентное содержание клеток в стадиях Sub-G1, G1, S и G2/M клеточного цикла определяли с помощью программы, вычерчивающей диаграммы ДНК (Becton Dickinson). Записывали минимум 10000 событий на образец.
Пример 5 - Синтез сложного эфира Аза-C-5'-олеиновой кислоты
Олеиновую кислоту (1,77 ммоль, 500 мг) растворяли в толуоле (3 мл). Добавляли сначала DMF (10 мкл), а затем оксалилхлорид (3,6 ммоль, 457 мг) в течение 10 мин при комнатной температуре. Через 3 часа удаляли толуол в вакууме.
Аза-C (1,75 ммоль, 427 мг) суспендировали в DMA (6 мл), добавляли HCl (1 M в Et2O, 2,0 ммоль, 2,0 мл) и через 5 мин при комнатной температуре удаляли Et2O в вакууме. Получаемый мутный раствор охлаждали на водно-ледяной бане и добавляли хлорид кислоты, растворенный в DMA (2 мл), в течение 2 ч. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, пока температура не достигала медленно комнатной температуры, а затем ее нагревали при 30°C в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь делили между насыщенным водным NaHCO3 и EtOAc (25 мл каждого). Водную фазу экстрагировали с помощью дополнительных 3×25 мл EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали с помощью соляного раствора и сушили (MgSO4). После удаления растворителей в вакууме неочищенный маслянистый продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, CH2Cl2 с 2,5, 5 и 10% MeOH). Выход: 110 мг (13%).
Пример 6 - Синтез сложного эфира 5-азацитидин 5'-элаидиновой кислоты
5-азацитидин (4,1 ммоль, 1,00 г) суспендировали в сухом DMA (15 мл) и медленно добавляли раствор HCl в диэтиловом эфире (4,9 ммоль, 1 M, 4,9 мл) при комнатной температуре с образованием прозрачного раствора. Эфир далее удаляли в вакууме, что приводило к образованию слегка мутного раствора. Раствор элаидилхлорида (4,8 ммоль, 1,44 г) в сухом DMA (8 мл) добавляли в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь далее нагревали в течение ночи при 30°C, охлаждали до комнатной температуры и гасили с помощью метанола (0,05 мл). По истечении по меньшей мере 1 ч реакционную смесь концентрировали при приблизительно 10-2 мбар, а остаток делили между насыщенным водным NaHCO3 и этилацетатом. Водную фазу экстрагировали этилацетатом. Органические фазы далее объединяли, промывали (солевым раствором), сушили (Na2SO4) и концентрировали в вакууме. После очистки с помощью флэш-хроматографии (SiO2, CH2Cl2 с 0-10% метанолом) было получено 0,9 г (43%) продукта.
Пример 7 - In vitro эффект 5-азацитидин 5'-элаидата на опухолевые клетки
Сравнивали цитотоксическую активность 5-азацитидин 5'-элаидата и 5-АзаС по отношению к линиям лейкемических клеток и клеток солидных опухолей. По сравнению с 5-АзаС, цитотоксический эффект 5-азацитидин 5'-элаидата был выше во всех изученных клеточных линиях. По сравнению с солидными опухолями, лейкемические клеточные линии были более чувствительны как к 5-азацитидин 5'-элаидату (CP), так и к 5-АзаС, см. таблицу 2 (ниже) и фиг.1A-B.
Таблица 2 | ||||
24 часа (мкМ) | 48 часов (мкМ) | 72 часа (мкМ) | ||
U937 | CP | 0,44 | 0,60 | 0,87 |
5-АзаС | 1,63 | 2,37 | 4,77 | |
K562 | CP | 1,26 | 0,92 | 0,42 |
5-АзаС | 8,27 | 15,51 | 5,83 | |
HL60 | CP | 3,19 | 3,60 | 2,68 |
5-АзаС | 7,28 | 4,92 | 4,71 | |
Jurkat | CP | 1,19 | 0,88 | 0,84 |
5-АзаС | 9,5 | 5,32 | 4,77 | |
MCF-7 | CP | 19,1 | 9,32 | 9,99 |
5-АзаС | >160 | 93,7 | 53,00 | |
DU145 | CP | 6,79 | 6,31 | 5,88 |
5-АзаС | 20,94 | 7,11 | 7,20 | |
5637 | CP | 9,39 | 5,95 | 3,52 |
5-АзаС | 24,56 | 6,72 | 5,21 | |
Таблица 2. Сравнительная цитотоксическая активность 5-азацитидин 5'-элаидата (CP) и 5-АзаС по отношению к линиям лейкемических клеток и клеток солидных опухолей. (Значения IC50). Клетки обрабатывали в течение 24, 48 и 72 часов и определяли цитотоксичность в ходе анализа WST-1. IC50 рассчитывали с помощью программы CalcuSyn. |
Поразительным результатом является раннее проявление активности в случае 5-азацитидин 5'-элаидата, чего не наблюдалось для азацитидина.
Пример 8 - Индукция апоптоза в лейкемических клетках
Клетки HL60, K562 и U937 не обрабатывали или обрабатывали 5-азацитидин 5'-элаидатом (0,5-4 мкМ) в течение 24 ч. Процентное содержание апоптотических клеток определяли с помощью флуоресцентного микроскопа после окрашивания с помощью акридинового оранжевого и этидиумбромида (см. фиг. 2A). В другой серии экспериментов HL60 и K562 не обрабатывали или обрабатывали 5-азацитидин 5'-элаидатом (1, 2 или 4 мкМ) в течение 24 часов. Процентное содержание апоптотических клеток определяли с помощью проточной цитометрии с применением окрашивания Аннексином-V и PI. Оба способа продемонстрировали, что 5-азацитидин 5'-элаидат индуцировал концентрационно-зависимое увеличение числа апоптотических клеток (см. фиг.2A и 2B).
Пример 9 - Протекание клеточного цикла
Изучали эффект от воздействия 5-азацитидин 5'-элаидата на клеточный цикл. Клетки культивировали в течение указанного периода времени, после чего их анализировали на состав ДНК с помощью проточной цитометрии. Численные значения на графике представляют популяцию клеток, дающих сигнал выше порогового значения с содержанием суб-G1 ДНК. Наиболее значительные изменения наблюдались через 24 часа обработки. По сравнению с контролем (8,3%) процентное содержание в суб-G1 фазы (апоптотические клетки) возрастало вплоть до 33,6% в клетках, обработанных 2 мкМ 5-азацитидин 5'-элаидатом, и уменьшалось в G1, S и G2/M фазе. Результаты обобщены на фиг.3 и в таблице 3, ниже. Эти результаты подтвердили индукцию апоптоза под действием 5-азацитидин 5'-элаидата и продемонстрировали, что действие 5-азацитидин 5'-элаидата на клеточный цикл имело концентрационно-зависимый характер.
Таблица 3 | ||||||
Процентное содержание клеток | ||||||
24 часа | Доза (мкМ) | Sub G1 | G1 | S | G2/M | |
1 | Контроль | 0 | 8,26 | 38,61 | 33,35 | 12,7 |
2 | cp | 0,5 | 9,41 | 43,66 | 28,15 | 11,05 |
3 | 1 | 21,02 | 36,17 | 18,98 | 8,82 | |
4 | 2 | 33,59 | 23,45 | 9,14 | 2,64 | |
48 часов | ||||||
1 | Контроль | 0 | 4,8 | 41,1 | 31,14 | 18,34 |
2 | cp | 0,5 | 15,14 | 34,79 | 42,96 | 2,53 |
3 | 1 | 14,34 | 28,07 | 30,06 | 17,91 | |
4 | 2 | 24,34 | 22,51 | 15,62 | 7,78 | |
72 часа | ||||||
1 | Контроль | 0 | 9,28 | 47,72 | 27,39 | 14,64 |
2 | cp | 0,25 | 10,88 | 40,14 | 28,13 | 18,25 |
3 | 0,5 | 10,54 | 38,72 | 29,18 | 18,82 | |
4 | 1 | 10,75 | 40,67 | 28,77 | 18,26 | |
Таблица 3. Эффект от воздействия 5-азацитидина 5'-элаидата (CP) на клеточный цикл. Клетки культивировали в течение указанного периода времени, после чего их анализировали на состав ДНК с помощью проточной цитометрии. Указанные числа представляют процентное отношение клеток в разных фазах. |
Пример 10 - Индукция дифференциации
Изучали дифференциацию на основе морфологии. Поскольку одиночное воздействие (96 часов) не имело эффекта, клетки подвергались воздействию 5-азацитидин 5'-элаидата или 5-АзаС в течение 11 (клетки HL60) или 14 (клетки U937 и K562) дней. После начальной обработки в день 0 клетки подвергались воздействию новых порций лекарства в день 4, 7 и 10. Дифференциацию оценивали с помощью исследования изменения нитросинего тетразолия (U937 и HL60) или с помощью окрашивания бензидином (K562). Несмотря на то, что 5-азацитидин 5'-элаидат был несколько более эффективен, оба реагента не вызывали существенной дифференциации. См. фиг.4A-B.
Пример 11 - Метаболическая стабильность сложного эфира 5-аза-5'-элаидиновой кислоты в пуле человеческой плазмы
Сложный эфир 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты помещали в пулированную человеческую плазму при пяти уровнях концентрации (0,1; 1; 3; 10 и 30 мкМ, соответственно). Смесь инкубировали на водяной бане с шейкером при 37°C. Отбирались тройные (n=3) аликвоты (100 мкл) инкубирующегося раствора через соответствующие периоды инкубации (0, 15, 30, 60 и 120 минут), и немедленно осаждали плазменный белок с помощью ацетонитрила, содержащего 0,1% муравьиную кислоту (300 мкл). Отрицательные контроли готовили с тестируемым соединением и Аза-C в буфере для анализа (PBS, pH 7,4) при одной концентрации инкубации (1 мкМ). После центрифугирования супернатант непосредственно вводили для анализа LC-MS-MS. См. таблицу 4.
Таблица 4 | ||||||
Метаболическая стабильность сложного эфира 5-Аза-5'-элаидиновой кислоты в пуле человеческой плазмы | ||||||
Концентрация (мкМ) | % оставшегося от исходного (среднее ± ст. откл., n=3) | Время полужизни (мин) | ||||
0 мин | 15 мин | 30 мин | 60 мин | 120 мин | ||
0,1 | 100 | 95,8±3,0 | 95,0±2,0 | 92,1±3,4 | 59,0±1,6 | 161 |
1 | 100 | 93,3±1,1 | 88,9±1,1 | 79,8±2,6 | 52,5±3,1 | 130 |
3 | 100 | 99,0±3,5 | 96,0±3,0 | 85,4±3,4 | 56,6±1,6 | 141 |
10 | 100 | 96,0±2,0 | 93,1±0,0 | 77,1±3,1 | 39,1±1,7 | 86 |
30 | 100 | 97,7±3,5 | 90,4±2,6 | 78,5±1,7 | 47,4±1,1 | 109 |
Пример 12 - Цитотоксичность Аза-C и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты
Цитотоксичность Аза-C и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты определяли в линии раковых клеток молочной железы MT-3 в адриабластин-резистентной линии клеток MT-3/ADR. Для MT-3/ADR характерна избыточная экспрессия MDR-1/p-гликопротеина. Клетки высевали на 96-луночных планшетах по 5×103 клеток на лунку, в среде RPMI 1640 с 2 мМ глутамином и 10% FBS. Клетки инкубировали в течение 24 часов. Исследуемые соединения растворяли в ДМСО и далее разводили средой непосредственно перед использованием. Для анализа одной концентрации использовали шесть лунок. Клетки инкубировали с исследуемым соединением в течение 24 часов. Добавляли по 20 мкл свежеприготовленного раствора MTT в каждую лунку и инкубировали 4 часа. Величины IC50 определяли из кривых роста, представленных графически на основе 8 различных концентраций в диапазоне от 0,01 мкМ до 100 мкМ. Результаты представлены в таблице 5. Одинаковые активности были получены для Аза-C и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты на линии раковых клеток молочной железы MT-3, но в случае резистентной линии клеток MT-3/ADR активность Аза-C исчезала. Активность не наблюдалась в тестированном интервале концентраций вплоть до 100 мкМ, в то время как 5-Аза-C-5'-элаидиновая кислота была активна с одинаковым значением IC50 как в резистентной линии клеток, так и в нерезистентной линии MT-3. Это может быть очень важным в лечении резистентного рака. См. таблицу 5.
Таблица 5 | ||
Цитотоксический эффект Аза-С и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты на линии клеток карциномы молочной железы MT-3, имеющие или не имеющие мультилекарственную резистентность | ||
Аза-C IC50 (мкМ) |
5-Аза-C-5'-элаидиновая кислота IC50 (мкМ) |
|
MT-3 карцинома молочной железы | 12,62±2,35 | 17,03±15,75 |
MT-3/ADR резистентная карцинома молочной железы | >100 | 14,82±12,76 |
Пример 13 - Влияние ингибирования нуклеозидного переносчика Аза-C и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты
Оценивали влияние ингибирования нуклеозидного переносчика на цитотоксическую активность в мутантных клетках карциномы шейки матки Hela для Аза-С и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты. Использовали дипиридамол в качестве ингибитора уравновешивающих нуклеозидных переносчиков hENT1 и hENT2. Клетки высевали на 96-луночных планшетах по 5×103 клеток на лунку, в среде RPMI 1640 с 2 мМ глутамином и 10% FBS. Клетки преинкубировали в течение 24 часов. Добавляли дипиридамол (10 мкМ) к клеткам за 30 минут перед добавлением исследуемых соединений. Исследуемые соединения растворяли в ДМСО и далее разводили средой непосредственно перед использованием. Для анализа одной концентрации использовали шесть лунок. Клетки инкубировали с исследуемым соединением в течение 72 часов. Добавляли по 20 мкл свежеприготовленного раствора MTT в каждую лунку и инкубировали 4 часа. Величины IC50 определяли из кривых роста, представленных графически на основе 8 различных концентраций в диапазоне от 0,01 мкМ до 100 мкМ. Результаты представлены в таблице 6. Активность Аза-C снизилась в 3 раза в результате добавления ингибитора нуклеозидного транспорта дипиридамола, указывая на то, что приток и отток Аза-C частично зависят от нуклеозидных переносчиков hENT1 и hENT2. Цитотоксическая активность 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты не только сохранилась, но возросла в 50 раз, когда нуклеозидные переносчики hENT1 и hENT2 были блокированы с помощью дипиридамола. Увеличение активности в клетках, где нуклеозидные переносчики блокированы с помощью дипиридамола, является неожиданным и может означать еще большую активность у пациентов с резистентностью к терапии, вызванной дефицитом нуклеозидных переносчиков. См. таблицу 6.
Таблица 6 | ||
Цитотоксическая активность Аза-С и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты в мутантных клетках карциномы шейки матки Hela с добавлением (или без него) ингибитора нуклеозидного транспорта | ||
Азацитидин IC50 (мкМ) | 5-Аза-C-5'-элаидиновая кислота IC50 (мкМ) |
|
Hela | 4,32 | 12,00 |
Hela с дипиридамолом | 12,77 | 0,23 |
Пример 14 - Активация ядерного фактора транскрипции -κB (NFκB)
Определяли активацию ядерного фактора транскрипции -κB (NFκB) для оценки влияния на воспаление. NFκB участвует в регуляции большого числа как иммунных, так и воспалительных реакций, процессов развития, клеточного роста и апоптоза.
Использовали гены-репортеры NFκB-люциферазы для определения влияния Аза-С и 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты на NFκB-индуцированную люциферазную активность в линии клеток моноцитов человека U937, устойчиво трансфецированных репортером люциферазы, содержащим три NFκB-связывающих сайта. Индукцию NFκB проводили с применением липополисахарида (LPS) с концентрацией 1 мкг/мл в течение 30 минут перед добавлением к среде Аза-С или 5-Аза-C-5'-элаидиновой кислоты в концентрации 10 нМ. Клетки культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 10% фетальную телячью сыворотку. Перед стимуляцией с помощью LPS клетки переносили в среду, содержащую только 2% фетальную сыворотку коровы. Люциферазную активность измеряли с помощью отображения в Системе отображения IVIS 100 (Xenogen Corp., USA) через 1,3 или 6 часов. LPS-стимуляция возрастала со временем в течение 6 часов, что наблюдалось для контрольных клеток, обработанных DMSO. Воздействие 10 нМ Аза-C еще более увеличивало LPS-индуцированную активацию NFκB, по сравнению с обработанным DMSO контролем. 5-азацитидин-5'-элаидат не отличался от контроля DMSO в плане LPS-стимулированной активности NFκB. Как правило, положительная стимуляция NFκB, наблюдаемая для азацитидина, не является позитивной, но хорошо, что стимуляция LPS не возрастает далее под воздействием 5-аза-C-5'-элаидиновой кислоты. См. фиг.5.
Пример 15 - Экспрессия гена рецептора эстрогена β (ERβ) в линии раковых клеток молочной железы после обработки с помощью азацитидина или 5-азацитидин 5'-элаидата
Экспрессия гена (определенная по уровню РНК) рецептора эстрогена бета определяли с помощью количественной ПЦР в реальном времени (TaqMan). Клетки карциномы молочной железы MCF-7 выращивали в среде с недостатком эстрогена (не содержащая феноловый красный среда RPMI с 2% глутамином и 10% фетальной сывороткой коровы, обработанной нагруженной декстраном угольной пылью). Клетки высевали в колбы 25 см2 и оставляли для адгезии на 24 часа перед обработкой с помощью 1 мкМ азацитидина или 5-азацитидин 5'-элаидата. Один необработанный образец был включен в качестве контроля. Клетки были собраны через 5 дней от начала воздействия соединений; их собирали путем трипсинизации, промывали и подвергали ударной заморозке в жидком азоте.
Общую РНК экстрагировали из примерно 106 клеток MCF-7, подвергавшихся ударной заморозке. Определяли концентрацию и чистоту РНК и транскрибировали РНК в кДНК с помощью реагентов обратной транскрипции (N808-0234). Проводили количественную оценку в реальном времени по стандартным протоколам с использованием стандартных заранее перемешанных реагентов для ПЦР. Смеси праймер-зонд, ER β (ID Hs00230957_m1) и гидроксиметилбилан-синтазу конститутивных генов HMBS (ID Hs00609297_m1) заказывали в Applied Biosystems. Генную экспрессию рассчитывали с помощью сравнительного дельта-дельта Ct метода. Индукция экспрессии ER β была 5,26-кратной после воздействия 5-азацитидин 5'-элаидата, по сравнению лишь с 2,51-кратной после воздействия азацитидина. См. таблицу 7. Это может быть очень существенно для гормон-рефракторной опухоли, при которой можно восстановить чувствительность к гормону. См. таблицу 7.
Таблица 7 | |||||
Ct ER β | Ct HMBS | дельта | Дельта дельта |
x-кратная индукция гена ERβ | |
Необработанные | 35,36 | 25,91 | 9,45 | ||
1 мкМ 5'Аза-C-5'-элаидиновая кислота | 32,97 | 25,92 | 7,06 | -2,40 | 5,26 |
1 мкМ аза-C | 34,31 | 26,18 | 8,13 | -1,32 | 2,51 |
Несмотря на то, что в настоящей заявке приведены и подробно обсуждаются предпочтительные варианты реализации, для специалиста в данной области техники очевидно, что различные возможные модификации, дополнения, замены и т.п. также находятся в рамках настоящего изобретения, охарактеризованного в пунктах нижеследующей формулы изобретения.
Claims (15)
1. Соединение формулы (I)
где
R представляет собой Н или R5C(О);
R1 представляет собой
или
где пересекающая пунктирная линия обозначает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I);
R2 и R3 независимо представляют собой ОН или Н при условии, что R2 и R3 не являются одновременно ОН;
R4 представляет собой Н или R5C(O) при условии, что R и R4 не являются одновременно Н; и
R5 представляет собой С3-С26 алкенил,
или фармацевтическая соль указанного соединения.
где
R представляет собой Н или R5C(О);
R1 представляет собой
или
где пересекающая пунктирная линия обозначает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I);
R2 и R3 независимо представляют собой ОН или Н при условии, что R2 и R3 не являются одновременно ОН;
R4 представляет собой Н или R5C(O) при условии, что R и R4 не являются одновременно Н; и
R5 представляет собой С3-С26 алкенил,
или фармацевтическая соль указанного соединения.
2. Соединение по п.1, где R5 представляет собой С9-С26 алкенил.
4. Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения состояния, выбранного из неопластического состояния и воспалительного состояния, содержащая соединение по п.1 и фармацевтический наполнитель, разбавитель и/или носитель.
5. Способ лечения неопластического состояния у пациента, включающий отбор пациента с неопластическим состоянием, введение указанному пациенту соединения формулы
где
R представляет собой Н или R5C(O);
R1 представляет собой
или
где пересекающая пунктирная линия обозначает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I);
R2 и R3 независимо представляют собой ОН или Н, при условии что R2 и R3 не являются одновременно ОН;
R4 представляет собой Н или R5C(O), при условии что R и R4 не являются одновременно Н; и
R5 представляет собой С3-С26 алкенил,
или фармацевтической соли указанного соединения в условиях, эффективных для лечения указанного неопластического состояния у пациента.
где
R представляет собой Н или R5C(O);
R1 представляет собой
или
где пересекающая пунктирная линия обозначает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I);
R2 и R3 независимо представляют собой ОН или Н, при условии что R2 и R3 не являются одновременно ОН;
R4 представляет собой Н или R5C(O), при условии что R и R4 не являются одновременно Н; и
R5 представляет собой С3-С26 алкенил,
или фармацевтической соли указанного соединения в условиях, эффективных для лечения указанного неопластического состояния у пациента.
6. Способ по п.5, где R5 представляет собой С9-С26 алкенил.
7. Способ по п.5, где указанное неопластическое состояние представляет собой раковое заболевание.
8. Способ по п.7, где раковое заболевание представляет собой солидную опухоль, или гематологический рак, или злокачественное образование.
9. Способ по п.7, где указанное раковое заболевание представляет собой лейкемию, лимфому, множественную миелому или миелодиспластический синдром.
10. Способ по п.8, где солидная опухоль представляет собой рак ткани, выбранной из группы тканей, состоящей из ткани молочной железы, яичника, простаты, мозга, мочевого пузыря и легких.
12. Способ лечения воспалительного состояния у пациента, включающий отбор пациента с воспалительным состоянием и введение указанному пациенту соединения формулы
где
R представляет собой Н или R5C(O);
R1 представляет собой
или
где пересекающая пунктирная линия обозначает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I);
R2 и R3 независимо представляют собой ОН или Н при условии, что R2 и R3 не являются одновременно ОН;
R4 представляет собой Н или R5C(О) при условии, что R и R4 не являются одновременно Н; и
R5 представляет собой С3-С26 алкенил,
или фармацевтической соли указанного соединения в условиях, эффективных для лечения указанного воспалительного состояния.
где
R представляет собой Н или R5C(O);
R1 представляет собой
или
где пересекающая пунктирная линия обозначает образовавшуюся связь, присоединяющую R1 к молекуле формулы (I);
R2 и R3 независимо представляют собой ОН или Н при условии, что R2 и R3 не являются одновременно ОН;
R4 представляет собой Н или R5C(О) при условии, что R и R4 не являются одновременно Н; и
R5 представляет собой С3-С26 алкенил,
или фармацевтической соли указанного соединения в условиях, эффективных для лечения указанного воспалительного состояния.
13. Способ по п.12, где R5 представляет собой С9-С26 алкенил.
14. Способ по п.12, где указанное воспалительное состояние представляет воспалительное состояние легких, соединительной ткани, желудочно-кишечного тракта или сосудистой системы.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US97543707P | 2007-09-26 | 2007-09-26 | |
US60/975,437 | 2007-09-26 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2010116154A RU2010116154A (ru) | 2011-11-10 |
RU2487883C2 true RU2487883C2 (ru) | 2013-07-20 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US8158605B2 (en) | Azacytidine analogues and uses thereof | |
US20230000893A1 (en) | Antiviral Agents and Nucleoside Analogs for Treatment of Zika Virus | |
CA3087192A1 (en) | Combined modalities for nucleosides and/or nadph oxidase (nox) inhibitors as myeloid-specific antiviral agents | |
CA3214726A1 (en) | Nucleosides and nucleotides analogs as antiviral agents | |
US11248016B2 (en) | Glycolipids and pharmaceutical compositions thereof for use in therapy | |
US20140031309A1 (en) | Beta-L-N4 Hydroxycytosine Deoxynucleosides and their use as Pharmaceutical Agents in the Prophylaxis or Therapy of Viral Diseases | |
US10500224B2 (en) | Mutual prodrug comprising short chain fatty acids and zebularine or 1'-cyano-cytarabine for cancer treatment | |
RU2487883C2 (ru) | Аналоги азацитидина и их применение | |
JP6431520B2 (ja) | フッ化ピリミジン類縁体及びその使用方法 | |
US20190054103A1 (en) | Method of treatment of tp53 wild-type tumors with 2',2'-difluoro-5-aza-2'-deoxycytidine or prodrugs thereof | |
US9493500B2 (en) | Fluorinated pyrimidine analogs and methods of use thereof |