WO2020166600A1 - システイン残基を有するヘミアスタリン誘導体 - Google Patents
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- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
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- C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
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Definitions
- the present invention relates to a hemiasterlin derivative having a cysteine residue.
- Hemiasterlin is a natural compound having a tripeptide structure, which is isolated from sponges and is involved in microtubule depolymerization and mitotic arrest in cells (Non-patent Document 1).
- Non-Patent Document 6 Non-Patent Document 6
- An antibody-drug complex is a complex in which an antibody and a drug are bound directly or via an appropriate linker. And, the antibody-drug complex has the characteristics of suppressing the systemic exposure of the drug and enhancing the drug effect on the target cell by delivering the drug to the target cell through the antibody that binds to the antigen expressed on the target cell. ..
- Patent Documents 4, 6 to 8 have reported a complex in which a thiosuccinimide is formed with a hemiasterline derivative having a maleimide group and a cysteine residue of an antibody or the like.
- Non-Patent Document 7 an antibody drug conjugate in which a cysteine residue of an antibody is directly bound to a drug releases intracellular Cys-drug portion of the antibody drug conjugate by metabolism of the antibody. It has been reported (Non-Patent Document 7).
- An object of the present invention is to provide a hemiasterlin derivative that specifically gives cytotoxicity to target cells while suppressing cytotoxicity to normal cells.
- the present inventors have found that the hemiasterlin derivative having a cysteine residue represented by the formula (1) exhibits strong antitumor activity, but has low cytotoxicity to normal cells.
- the present invention has been completed.
- Formula (1) [In the formula, b represents an integer of 1 to 5, X represents -NH- or -CO-, Z represents formula (Z-1), formula (Z-2), formula (Z-3), formula (Z-4), formula (Z-5), formula (Z-6), formula (Z-7 ), formula (Z-8), formula (Z-9), formula (Z-10) or formula (Z-11): (In the formula, n represents an integer of 0 to 2, p represents an integer of 1 to 3, AA represents a glutamic acid residue (Glu), an aspartic acid residue (Asp) or a lysine residue (Lys), and when there are a plurality of AAs, each AA may be the same or different from each other, and , AA are bonded to each other via an amide bond, and the N-terminal nitrogen atom of (AA) n or (AA) p forms an amide bond together with the carbonyl group (a), G represents -O- or -NH
- R 5a and R 5b each independently represent a hydrogen atom or a methyl group
- X is —CO—, Z is the formula (Z-6), the formula (Z-7), the formula (Z-8), the formula (Z-9), the formula (Z-10) or the formula (Z-10).
- R 1 represents a hydrogen atom or (AB) m
- AB is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid residue ( Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue (Phe) ), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a threonine residue (Thr), a tryptophan residue (Trp), a tyrosine residue (Tyr) or a valine residue (Val), and there are a plurality of ABs.
- each AB may be the same as or different from each other, and ABs are bonded to each other via an amide bond
- m represents an integer of 1 to 9
- R 2 represents a hydroxyl group or (AC) g
- AC is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid residue ( Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue (Phe) ), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a threonine residue (Thr), a tryptophan residue (Trp), a tyrosine residue (Tyr) or
- each AC may be the same as or different from each other, and the ACs are bonded to each other via an amide bond, g represents an integer of 1 to 9, However, when R 1 is (AB) m and R 2 is (AC) g , the sum of m and g is an integer of 2 to 10].
- Expression (1) is replaced by Expression (1-1): [In the formula, b represents an integer of 1 to 5, Z is the formula (Z-1), the formula (Z-2), the formula (Z-3), the formula (Z-4) or the formula (Z-5): (In the formula, n represents an integer of 0 to 2, p represents an integer of 1 to 3, AA represents a glutamic acid residue (Glu), an aspartic acid residue (Asp) or a lysine residue (Lys), and when there are a plurality of AAs, each AA may be the same or different from each other, and , AA are bonded to each other via an amide bond, and the N-terminal nitrogen atom of (AA) n or (AA) p forms an amide bond together with the carbonyl group (a), W is the formula (W-1) or the formula (W-2): (In the formula, R 6a and R 6b each independently represent a hydrogen atom or a methyl group, R 7 represents a C 1-6 al
- R 5a and R 5b each independently represent a hydrogen atom or a methyl group
- R 1 represents a hydrogen atom or (AB) m
- AB is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid residue ( Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue (Phe) ), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a threonine residue (Thr), a tryptophan residue (Trp), a tyrosine residue (Tyr) or a valine residue (Val), and there are a
- each AB may be the same as or different from each other, and ABs are bonded to each other via an amide bond
- m represents an integer of 1 to 9
- R 2 represents a hydroxyl group or (AC) g
- AC is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid residue ( Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue (Phe) ), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a threonine residue (Thr), a tryptophan residue (Trp), a tyrosine residue (Tyr) or
- each AC may be the same as or different from each other, and the ACs are bonded to each other via an amide bond, g represents an integer of 1 to 9, However, when R 1 is (AB) m and R 2 is (AC) g , the sum of m and g is an integer of 2 to 10].
- R 7 is a methyl group or an isopropyl group
- Q is the formula (Q-1), the formula (Q-2), the formula (Q-4), the formula (Q-6) or the formula (Q-7), Item 2.
- W is the formula (W-1)
- Q is formula (Q-1) or formula (Q-2)
- R 8a and R 8b are each independently a hydrogen atom, a fluorine atom or a methoxy group
- R 8c , R 8d and R 8e are each independently a hydrogen atom, a fluorine atom, a hydroxyl group, a cyano group, an amino group, a carboxyl group, a methyl group, a trifluoromethyl group or a methoxy group
- R 4 and R 9 are hydroxyl groups, The compound or salt thereof according to item 2 or 3.
- Z is formula (Z-1), formula (Z-2) or formula (Z-3), W is the formula (W-1), Q is formula (Q-1) or formula (Q-2), R 8a and R 8b are hydrogen atoms, R 8c , R 8d and R 8e are hydrogen atoms, R 4 and R 9 are hydroxyl groups, Item 5.
- the compound or salt thereof according to any one of Items 2 to 4.
- Item 6 The compound or salt thereof according to any one of Items 2 to 5, wherein b is 2.
- Expression (1) is replaced by Expression (1-2): [In the formula, b represents an integer of 1 to 5, Z is the formula (Z-6), formula (Z-7), formula (Z-8), formula (Z-9), formula (Z-10) or formula (Z-11): (In the formula, n represents an integer of 0 to 2, p represents an integer of 1 to 3, AA represents a glutamic acid residue (Glu), an aspartic acid residue (Asp) or a lysine residue (Lys), and when there are a plurality of AAs, each AA may be the same or different from each other, and , AA are bound to each other via an amide bond, The N-terminal nitrogen atom of (AA) n or (AA) p forms an amide bond with the carbonyl group (a), G represents -O- or -NH-, W is the formula (W-1) or the formula (W-2): (In the formula, R 6a and R 6b each independently represent a hydrogen atom or a methyl group
- AB is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid residue ( Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue (Phe) ), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a threonine residue (Ala), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a th
- each AB may be the same as or different from each other, and ABs are bonded to each other via an amide bond
- m represents an integer of 1 to 9
- R 2 represents a hydroxyl group or (AC) g
- AC is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid residue ( Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue (Phe) ), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a threonine residue (Thr), a tryptophan residue (Trp), a tyrosine residue (Tyr) or
- each AC may be the same as or different from each other, and the ACs are bonded to each other via an amide bond, g represents an integer of 1 to 9, However, when R 1 is (AB) m and R 2 is (AC) g , the sum of m and g is an integer of 2 to 10].
- Z is formula (Z-6), formula (Z-7), formula (Z-8) or formula (Z-9), R 7 is a methyl group or an isopropyl group, Q is the formula (Q-1), the formula (Q-2), the formula (Q-4), the formula (Q-6) or the formula (Q-7), Item 7.
- Q is the formula (Q-1), the formula (Q-2), the formula (Q-4), the formula (Q-6) or the formula (Q-7), Item 7.
- Z is formula (Z-6) or formula (Z-7)
- W is the formula (W-1)
- Q is formula (Q-1) or formula (Q-2)
- R 8a and R 8b are each independently a hydrogen atom, a fluorine atom or a methoxy group
- R 8c , R 8d and R 8e are each independently a hydrogen atom, a fluorine atom, a hydroxyl group, a cyano group, an amino group, a carboxyl group, a methyl group, a trifluoromethyl group or a methoxy group, Item 7.
- R 8a and R 8b are hydrogen atoms
- R 8c , R 8d and R 8e are hydrogen atoms
- Item 10 A compound or a salt thereof according to any one of items 7 to 9.
- m is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid Residue (Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue Group (Phe), proline residue (Pro), serine residue (Ser), threonine residue (Thr), tryptophan residue (Trp), tyrosine residue (Tyr), valine residue (Val), * 1 ⁇ (Glu)-(Gly), * 1- (Glu)-(Gly)-(Arg), * 1- (Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn), * 1- (Glu)-( Gly)
- m is an alanine residue (Ala), an arginine residue (Arg), an asparagine residue (Asn), an aspartic acid residue (Asp), a cysteine residue (Cys), a glutamine residue (Gln), a glutamic acid Residue (Glu), glycine residue (Gly), histidine residue (His), isoleucine residue (Ile), leucine residue (Leu), lysine residue (Lys), methionine residue (Met), phenylalanine residue A group (Phe), a proline residue (Pro), a serine residue (Ser), a threonine residue (Thr), a tryptophan residue (Trp), a tyrosine residue (Tyr) or a valine residue (Val), (AC) g is a glycine residue (Gly), Item 12. A compound or a salt thereof according to any one of items 1 to 11.
- R 1 is a hydrogen atom
- R 2 is a hydroxyl group
- Item 14 The compound or salt thereof according to any one of Items 1 to 13.
- n is the formula (A-1): (In the formula, AA 1 and AA 2 each independently represent Glu, Asp, or Lys) Is a group represented by Item 15. The compound or salt thereof according to any one of Items 1 to 14.
- n is the formula (A-2): (In the formula, AA 1 and AA 2 each independently represent Glu, Asp, or Lys) Is a group represented by Item 15. The compound or salt thereof according to any one of Items 1 to 14.
- the hemiasterlin derivative of the present invention shows cytotoxic activity specifically against antigen-expressing cells and has low cytotoxicity in normal cells other than antigen-expressing cells, and thus can be an anticancer agent with excellent safety.
- the “C 1-6 alkyl group” means a linear or branched saturated hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms.
- the "C 1-6 alkyl group” is preferably a "C 1-4 alkyl group", more preferably a "C 1-3 alkyl group”, and further preferably a methyl group, an ethyl group or a propyl group.
- an isopropyl group can be mentioned, and particularly preferably, a methyl group or an ethyl group can be mentioned.
- C 1-3 alkyl group examples include a methyl group, an ethyl group, a propyl group and an isopropyl group.
- C 1-4 alkyl group examples include, in addition to those mentioned as specific examples of the “C 1-3 alkyl group”, butyl group, 1,1-dimethylethyl group, 1-methylpropyl group , 2-methylpropyl group and the like.
- C 1-6 alkyl group include, in addition to those mentioned as specific examples of the “C 1-4 alkyl group”, a pentyl group, a 3-methylbutyl group, a 2-methylbutyl group, 2,2- Dimethylpropyl group, 1-ethylpropyl group, 1,1-dimethylpropyl group, hexyl group, 4-methylpentyl group, 3-methylpentyl group, 2-methylpentyl group, 1-methylpentyl group, 3,3-dimethyl Examples thereof include a butyl group, a 2,2-dimethylbutyl group, a 1,1-dimethylbutyl group and a 1,2-dimethylbutyl group.
- the “C 1-6 alkyl ester” means an ester in which R′ of the ester (—COOR′) is the above “C 1-6 alkyl group”.
- the “C 1-6 alkyl ester” is preferably “C 1-4 alkyl ester”, more preferably “C 1-3 alkyl ester”, still more preferably methyl ester, ethyl ester, isopropyl ester.
- tertiary butyl ester may be used, and particularly preferably, methyl ester or ethyl ester may be used.
- C 1-3 alkyl ester examples include methyl ester, ethyl ester, propyl ester or isopropyl ester.
- C 1-4 alkyl ester examples include, for example, those listed as specific examples of “C 1-3 alkyl ester”, butyl ester, tertiary butyl ester and the like.
- C 1-6 alkyl ester include, in addition to those listed as specific examples of “C 1-4 alkyl ester”, pentyl ester, 3-methylbutyl ester, 2-methylbutyl ester, 2 , 2-dimethylpropyl ester, 1-ethylpropyl ester, 1,1-dimethylpropyl ester, hexyl ester, 4-methylpentyl ester, 3-methylpentyl ester, 2-methylpentyl ester, 1-methylpentyl ester, 3, Examples thereof include 3-dimethylbutyl ester, 2,2-dimethylbutyl ester, 1,1-dimethylbutyl ester and 1,2-dimethylbutyl ester.
- the “C 1-6 alkoxy group” means an oxy group substituted with a “C 1-6 alkyl group”.
- the “C 1-6 alkoxy group” is preferably a “C 1-4 alkoxy group”, more preferably a “C 1-3 alkoxy group”, further preferably a methoxy group, an ethoxy group, a propoxy group.
- a 1-methylethoxy group can be mentioned, and particularly preferably, a methoxy group or an ethoxy group can be mentioned.
- C 1-3 alkoxy group examples include methoxy group, ethoxy group, propoxy group and 1-methylethoxy group.
- C 1-4 alkoxy group examples include, in addition to those given as specific examples of the “C 1-3 alkoxy group”, butoxy group, 1,1-dimethylethoxy group, 1-methylpropoxy group. , 2-methylpropoxy group and the like.
- C 1-6 alkoxy group include, in addition to those given as specific examples of the “C 1-4 alkoxy group”, pentyloxy group, 3-methylbutoxy group, 2-methylbutoxy group, 2 ,2-dimethylpropoxy group, 1-ethylpropoxy group, 1,1-dimethylpropoxy group, hexyloxy group, 4-methylpentyloxy group, 3-methylpentyloxy group, 2-methylpentyloxy group, 1-methylpentyloxy group Group, 3,3-dimethylbutoxy group, 2,2-dimethylbutoxy group, 1,1-dimethylbutoxy group, 1,2-dimethylbutoxy group and the like.
- examples of the “halogen atom” include a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom or an iodine atom.
- a fluorine atom or a chlorine atom is preferable, and a fluorine atom is more preferable.
- the compound represented by the formula (1) and a salt thereof (hereinafter, also referred to as “hemiasterline derivative of the present invention”) are as follows.
- b represents an integer of 1 to 5. That is, b is 1, 2, 3, 4, or 5.
- An example of b is an integer of 1 to 4, another example is an integer of 1 to 3, and another example is 2 or 3.
- X represents —NH— or —CO—.
- -NH- is mentioned as one aspect of X
- -CO- is mentioned as another aspect.
- Z is formula (Z-1), formula (Z-2), formula (Z-3), formula (Z-4), formula (Z-5), formula (Z-6), formula (Z Z-7), formula (Z-8), formula (Z-9), formula (Z-10) or formula (Z-11): Represents a group represented by.
- AA represents a glutamic acid residue, an aspartic acid residue or a lysine residue, preferably a glutamic acid residue or an aspartic acid residue.
- the optical activity of an ⁇ -amino acid may include any of DL form, D form and L form, unless otherwise specified.
- “glutamic acid” or "Glu” represents DL-glutamic acid or its residue, D-glutamic acid or its residue, or L-glutamic acid or its residue. Ala... Alanine, Arg... Arginine, Asn... Asparagine, Asp... Aspartic acid, Cys... Cysteine, Gln... Glutamine, Glu... Glutamic acid, Gly... Glycine, His... Histidine, Ile...
- n represents an integer of 0 to 2. That is, n is 0, 1 or 2.
- One aspect of n includes 0 or an integer of 1, another aspect includes 0, another aspect includes 1 or 2, and another aspect includes 1 And 2 is mentioned as another embodiment.
- p represents an integer of 1 to 3. That is, p is 1, 2 or 3.
- 1 or 2 can be mentioned, as another one mode, 2 or 3 can be mentioned, as another one mode, 1 can be mentioned, and as another one mode, 2 can be mentioned.
- 3 is mentioned.
- each AA may be the same as or different from each other, and the AAs are bonded to each other via an amide bond.
- the phrase "AAs are bound to each other via an amide bond” means that the carboxyl group of one amino acid and the amino group of another amino acid are condensed to form an amide bond.
- n is 2 and both AAs are Glu
- the nitrogen atom (d) of one Glu and the carbonyl group (c) of the other Glu form an amide bond as represented by the following formula. May be connected together.
- the N-terminal nitrogen atom of (AA) n or (AA) p forms an amide bond with the carbonyl group (a).
- the N-terminal nitrogen atom of AA forms an amide bond with the carbonyl group (a) means that, for example, when AA is Asp, the nitrogen atom (b) of Asp and the carbonyl group (a) are It means that they are linked by forming an amide bond as represented by the formula.
- AA n is a group represented by formula (A-1) or formula (A-2), wherein n is 2.
- AA 1 and AA 2 each independently represent Glu, Asp or Lys.
- p is 3, a group represented by the formula (A-3) or Formula (A-4).
- AA 1 , AA 2 and AA 3 each independently represent Glu, Asp or Lys.
- W represents formula (W-1) or formula (W- 2): Represents a group represented by.
- R 6a and R 6b each independently represent a hydrogen atom or a methyl group.
- R 7 represents a C 1-6 alkyl group.
- R 7 may be, for example, a methyl group, an ethyl group, a propyl group, an isopropyl group, or the like.
- Q is formula (Q-1), formula (Q-2), formula (Q-3), formula (Q-4), formula (Q- 5), formula (Q-6) or formula (Q-7): Represents a group represented by.
- R 8a and R 8b each independently represent a hydrogen atom, a halogen atom, a C 1-6 alkyl group or a C 1-6 alkoxy group.
- R 8c , R 8d and R 8e are each independently a hydrogen atom, a halogen atom, a hydroxyl group, a cyano group, an amino group, a carboxyl group, a phenyl group or 1 to 3 fluorine atoms.
- the halogen atom may be, for example, a fluorine atom, a chlorine atom or a bromine atom.
- Q may be a group represented by formula (Q-1) or formula (Q-2). Further, R 8a and R 8b may be hydrogen atoms, and R 8c , R 8d and R 8e may be hydrogen atoms.
- R 5a and R 5b are each independently hydrogen. Represents an atom or a methyl group.
- the hydrogen atom may be 1 H or 2 H(D). That is, for example, a deuterium conversion product obtained by converting one or more 1 H of the compound represented by the formula (1) into 2 H(D) is also included in the compound represented by the formula (1). It is, for example, a deuterium conversion product obtained by converting one or more 1 H of the compound represented by the formula (1) into 2 H(D) is also included in the compound represented by the formula (1). It is, for example, a deuterium conversion product obtained by converting one or more 1 H of the compound represented by the formula (1) into 2 H(D) is also included in the compound represented by the formula (1). It
- R 1 represents a hydrogen atom or (AB) m .
- m is an integer of 1 to 9, that is, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 or 9.
- AB represents Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Trp, Thr, Tyr or Val, and when there are plural ABs.
- AB may be the same as or different from each other, and ABs are bonded to each other via an amide bond.
- Examples of m include 1, 2, 3, 4 or 5, another example of 1 includes 1, another example of 2 includes, and another example of m includes , An integer of 1 to 3 is mentioned, and 3 is mentioned as another aspect.
- one embodiment of (AB) m is * 1 -(Glu)-(Gly), * 1 -(Glu)-(Gly)-(Arg), * 1 -(Glu)-( Gly)-(Arg)-(Asn), * 1 -(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe), * 1 -(Glu)-(Gly)-(Arg)-( Asn)-(Phe)-(Ser), * 1- (Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys), * 1- (Glu)-( Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr) or * 1 -(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)- (Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val) may be mentioned.
- R 2 represents a hydroxyl group or (AC) g .
- g is an integer of 1 to 9, that is, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 or 9.
- AC represents Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Trp, Thr, Tyr or Val.
- the ACs may be the same as or different from each other, and the ACs are linked via an amide bond.
- One aspect of g includes 1, 2, 3, 4 or 5, another aspect includes an integer of 1 to 3, and another aspect includes 1 and 2 is mentioned as one aspect, and 3 is mentioned as another aspect.
- R 1 is (AB) m and R 2 is (AC) g
- the sum of m and g is an integer from 2 to 10, that is, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 or 10.
- An example of the sum of n and p is an integer of 2 to 5, another example is 2 or 3, and another example is 2.
- R 3 represents —(CH 2 ) u —COR 9 .
- u is 1 or 2.
- R 9 represents a hydroxyl group or AD, more preferably a hydroxyl group.
- AD represents Glu, Asp, or Lys, and the N-terminal nitrogen atom of AD forms an amide bond with an adjacent carbonyl group.
- R 4 represents a hydroxyl group or AD, more preferably a hydroxyl group.
- AD represents Glu, Asp, or Lys, and the N-terminal nitrogen atom of AD forms an amide bond with the adjacent carbonyl group.
- n 0 or 1. 0 is mentioned as one mode of n, and 1 is mentioned as another one mode.
- the compound represented by the formula (1) can be a compound represented by the formula (1′) by causing isomerization as shown in the following formula. Therefore, the hemiasterlin derivative of the present invention includes the compound represented by the formula (1′).
- the compound represented by the formula (1′) may be competitively produced when the antibody-drug complex is metabolized in vivo to produce the compound represented by the formula (1), and is also represented by the formula (1). It can also occur by causing the above-mentioned isomerization reaction after the compound occurs in vivo. Chemically it causes the above isomerization under acid or base catalysis.
- the compound represented by the formula (1′) is expected to exhibit a microtubule polymerization inhibitory activity and cytotoxicity like the compound represented by the formula (1).
- (1-A) is mentioned as one aspect
- b is 2, 3 or 4
- X is -NH-
- Z is a group represented by formula (Z-1), formula (Z-2) or formula (Z-3)
- W is a group represented by formula (W-1)
- Q is a group represented by formula (Q-1) or formula (Q-2)
- R 8a and R 8b are hydrogen atoms
- R 8c , R 8d and R 8e are hydrogen atoms
- R 6a is a methyl group
- R 6b is a hydrogen atom
- n is 0,
- R 3 is —(CH 2 ) u —COR 9 ;
- u is 1 or 2
- R 9 is a hydroxyl group
- R 4 is a hydroxyl group
- R 1 is a hydrogen atom or (AB) m
- (AB) m is Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gl
- (1-B) is mentioned as one aspect
- b is 2, 3 or 4
- X is -NH-
- Z is a group represented by formula (Z-1), formula (Z-2) or formula (Z-3)
- W is a group represented by formula (W-1)
- Q is a group represented by formula (Q-1) or formula (Q-2)
- R 8a and R 8b are hydrogen atoms
- R 8c , R 8d and R 8e are hydrogen atoms
- R 6a is a methyl group
- R 6b is a hydrogen atom
- n is 0 or 1
- AA is Glu or Asp
- R 3 is —(CH 2 ) u —COR 9 ;
- u is 1 or 2
- R 9 is a hydroxyl group
- R 4 is a hydroxyl group
- R 1 is a hydrogen atom or (AB) m
- (AB) m is Ala,
- (1-C) is mentioned as one aspect
- b is 2, 3, 4 or 5;
- X is -CO-, Z is a group represented by formula (Z-6) or formula (Z-7), W is a group represented by formula (W-1) or formula (W-2), R 7 is an isopropyl group,
- Q is a group represented by formula (Q-1) or formula (Q-2),
- R 8a and R 8b are hydrogen atoms, R 8c , R 8d and R 8e are hydrogen atoms, R 6a is a methyl group, R 6b is a hydrogen atom, n is 0 or 1, AA is Glu or Asp,
- R 3 is —(CH 2 ) u —COR 9 ;
- u is 1 or 2
- R 9 is a hydroxyl group
- R 4 is a hydroxyl group
- R 1 is a hydrogen atom
- R 2 is a hydroxyl group,
- (1-D) is mentioned as one aspect
- b is 2, 3, 4 or 5;
- X is -NH-,
- Z is a group represented by formula (Z-4) or formula (Z-5),
- p is 1, AA is Glu, Asp or Lys,
- R 5a is a methyl group,
- R 5b is a hydrogen atom,
- R 1 is a hydrogen atom,
- R 2 is a hydroxyl group, A compound or salt thereof.
- (1-E) is mentioned as one aspect
- b is 2, 3, 4 or 5;
- X is -CO-,
- Z is a group represented by formula (Z-8) or formula (Z-9),
- G is —O— or —NH—,
- p is 1, AA is Glu, Asp or Lys,
- R 5a is a methyl group,
- R 5b is a hydrogen atom,
- R 1 is a hydrogen atom,
- R 2 is a hydroxyl group, A compound or salt thereof.
- the antibody-drug complex is a complex in which an antibody part derived from an antibody molecule and a drug part derived from a drug molecule are directly covalently bonded, as shown below.
- the “antibody drug complex” may be referred to as “ADC”.
- the drug-antibody ratio q means the number of drug molecules per antibody molecule in one molecule of the antibody drug complex, that is, per molecule of the antibody drug complex.
- the antibody-drug conjugate obtained by chemical synthesis is often a mixture of a plurality of antibody-drug conjugate molecules that can have different drug-antibody ratios q.
- the overall drug-antibody ratio in such a mixture of antibody-drug conjugates is defined as the "average drug-antibody ratio" or "average DAR.” ".
- Q is 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8.
- One aspect of q includes an integer of 2 to 8, another aspect includes an integer of 2 to 6, and another aspect includes an integer of 4 to 8.
- One aspect of the average DAR includes 2 to 8, another aspect includes 3.5 to 4.5, and another aspect includes 1 to 2, 2 to 3, 3 to 4, 4 to 5, 5 to 6, 6 to 7 or 7 to 8.
- the average DAR can be determined by a method usually used for determination of the average DAR, such as SDS-PAGE, mass spectrometry, ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), HPLC (high performance liquid chromatography). Hydrophobic Interaction Column Chromatography (HIC) HPLC, reverse phase HPLC, electrophoresis, etc. to separate, purify and isolate a specific DAR antibody drug complex from a mixture of a plurality of antibody drug complexes having different DARs. Characterization can be done.
- the “antibody” may be an antibody containing at least a variable domain of a heavy chain and a variable domain of a light chain, and even a complete antibody is a fragment of a complete antibody and an antigen-binding fragment having an antigen recognition site. May be A complete antibody has two full-length light chains and two full-length heavy chains, with each light and heavy chain linked by a disulfide bond. Complete antibodies include IgA, IgD, IgE, IgM and IgG, with IgG including IgG 1 , IgG 2 , IgG 3 and IgG 4 as subtypes. Further, the antibody is preferably a monoclonal antibody. The antibody portion and the drug portion are bound to each other via a sulfhydryl group obtained by reducing the disulfide bond in the antibody.
- the antibody mAb is not particularly limited as long as it is an antibody that can recognize an antigen existing on the surface of target cells.
- the target cell may be a cell that requires treatment with a hemiasterlin derivative, and is preferably a cancer cell.
- the antigen present on the surface of the target cell is preferably an antigen specific to the target cell, which is not expressed in normal cells or has a small expression level.
- mAb examples include the above-listed known antibodies, and in another aspect, brentuximab, trastuzumab, inotuzumab, gemtuzumab, grembatumumab, labetuzumab, sacituzumab, rifatuzumab, indusatumab, poratuzumab, poratuzumab, poratuzumab, , Indatsukishimabu, milatuzumab, Robarupitsuzumabu, Anetsumabu, Chisotsumabu, Rorubotsuzumabu (lorvotuzumab), rituximab, Depatsukishizumabu, Denintsuzumabu, Enhorutsumabu, Terusotsuzumabu, Bandorutsuzumabu, Sofitsuzumabu, Borusetsuzumabu, Mirubetsukishimabu (mirvetuxim
- brentuximab trastuzumab, Inotsuzumabu, gemtuzumab, labetuzumab, Poratsuzumabu, Korutsukishimabu, Indatsukishimabu, Anetsumabu, rituximab, Denintuzumab, laprituximab, vadastuximab, grembatumumab, cetuximab, alemtuzumab or depatuxizumab can be mentioned.
- brentuximab, trastuzumab, rituximab or anti-encryptn antibody can be mentioned, and in another embodiment, blentuzumab or blentuzumab. And preferably brentuximab.
- anti-CD166 antibody anti-CD19 antibody, anti-CD19 antibody CD20 antibody, anti-CD22 antibody, anti-CD25 antibody, anti-CD27 antibody, anti-CD30 antibody, anti-CD33 antibody, anti-CD37 antibody, anti-CD40 antibody, anti-CD41 antibody, anti-CD44v6 antibody, anti-CD51 antibody, anti-CD52 antibody, anti-CD56 antibody , Anti-CD70 antibody, anti-CD74 antibody, anti-CD79 antibody, anti-CD79b antibody, anti-CEACAM5 antibody, anti-c-Met antibody, anti-DLL3 antibody, anti-DPEP3 antibody, anti-EGFR antibody, anti-EGFRvIII antibody, anti-ENPP3 antibody, anti-EpCAM antibody , Anti-EphA4 antibody, anti-FGFR2 antibody, anti-CD166 antibody, anti-CD19 antibody, anti-CD19 antibody CD20 antibody, anti-CD22 antibody, anti-CD25 antibody, anti-CD27 antibody, anti-CD30 antibody, anti-CD33 antibody, anti-CD37 antibody, anti-CD
- anti-CD19 antibody anti-CD20 antibody, anti-CD22 antibody, anti-CD30 antibody, anti-CD33 antibody, anti-CD52 antibody, anti-CD70 antibody, anti-CD79b antibody, anti-CEACAM5 antibody, anti-EGFR antibody, anti-EGFRvIII Antibodies, anti-gpNMB antibody, anti-HER2 antibody, anti-mesothelin antibody, anti-CD138 antibody, anti-CD38 antibody, or anti-GD2 antibody can be mentioned.
- Anti-AMG595 antibody means an anti-EGFRvIII antibody obtained by the method described in Mol. Cancer Ther., 2015, 14, 1614-1624.
- preparation and analysis of an antibody drug complex can be performed by any technique known to those skilled in the art. Examples of such a method include those described in Antibody-Drug Conjugates (edited by Laurent Ducry, published by Humana Press, 2013).
- An antibody-drug complex can be formed, for example, by reducing a disulfide bond in an antibody to a sulfhydryl group and reacting this sulfhydryl group with a hemiasterline derivative.
- Non-Patent Document 7 describes that metabolism of an antibody causes intracellular release of a Cys-drug portion of an antibody-drug complex.
- the antibody-drug complex is specifically delivered into a cell expressing a specific antigen by the uptake into the cell using an antibody-antigen reaction, and then the active metabolite is released by the mechanism described above to release the active metabolite. It is estimated that the drug will exert its medicinal effect alone. Since the antibody-drug complex can be taken up specifically in cancer cells, it can be expected to exert a strong drug effect on cancer cells.
- the antibody-drug complex may be decomposed by the protease contained in blood before being delivered to the target cell, and the active metabolite may be released in blood.
- the active metabolite released into the blood also acts on normal cells. Therefore, unintended systemic exposure results and side effects are likely to occur, which is not preferable.
- the active metabolite is released by the above-mentioned mechanism, and as a result, the active metabolite is extracellularly or in the blood due to cell death or the like. May be released to.
- the active metabolite released into blood also acts on normal cells. Therefore, unintended systemic exposure results and side effects are likely to occur, which is not preferable.
- the active metabolite corresponding to the hemiasterlin derivative of the present invention acts on normal cells even if it is released into the blood before or after reaching the target cells, as reported in Non-Patent Document 7. Since it is difficult to do and is rapidly metabolized and excreted, it can be expected that side effects due to systemic exposure are few.
- the hemiasterline derivative of the present invention is expected to be highly safe because it exerts a drug effect in a cancer cell-specific manner by being produced from the metabolism of an antibody drug complex, and has little effect on normal cells. ..
- the “salt” is a suitable salt of the hemiasterline derivative of the present invention and a salt acceptable as a medicinal raw material, and preferably a pharmaceutically acceptable salt.
- the “salt” include organic acid salts (for example, acetate, trifluoroacetate, maleate, fumarate, citrate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, formate or p salt).
- An acid addition salt such as a toluene sulfonate) and an inorganic acid salt (eg hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, sulphate, nitrate or phosphate etc.), an amino acid (eg arginine, Aspartic acid or glutamic acid), a metal salt such as an alkali metal salt (eg sodium salt or potassium salt) and an alkaline earth metal salt (eg calcium salt or magnesium salt), an ammonium salt, or an organic base salt ( For example, a trimethylamine salt, a triethylamine salt, a pyridine salt, a picoline salt, a dicyclohexylamine salt, an N,N′-dibenzylethylenediamine salt, etc.) and the like can be appropriately selected by those skilled in the art.
- an amino acid eg arginine, Aspartic acid or glutamic acid
- a metal salt such as an alkali metal salt (eg sodium salt
- the pharmaceutically acceptable salt includes an acid addition salt and a base addition salt.
- the acid addition salt inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, hydroiodide, nitrate and phosphate, or citrate, oxalate, phthalate, Fumarate, maleate, succinate, malate, acetate, formate, propionate, benzoate, trifluoroacetate, methanesulfonate, benzenesulfonate, p-toluenesulfonate
- salts and organic acid salts such as camphorsulfonate.
- Examples of the base addition salt include inorganic base salts such as sodium salt, potassium salt, calcium salt, magnesium salt, barium salt and aluminum salt, or trimethylamine, triethylamine, pyridine, picoline, 2,6-lutidine, ethanolamine, diethanolamine. , Triethanolamine, tromethamine [tris(hydroxymethyl)methylamine], tert-butylamine, cyclohexylamine, dicyclohexylamine, N,N-dibenzylethylamine and the like organic base salts.
- examples of the “pharmaceutically acceptable salt” also include salts with basic amino acids or acidic amino acids (amino acid salts) such as arginine, lysine, ornithine, aspartic acid and glutamic acid.
- the salt of the hemiasterline derivative of the present invention when the desired compound is obtained in the form of a salt, it may be purified as it is, and when it is obtained in a free form, it is suitable. It may be dissolved or suspended in an organic solvent, and an acid or a base may be added to form a salt by a usual method.
- the hemiasterline derivative of the present invention may exist in the form of a hydrate and/or a solvate with various solvents (ethanol solvate, etc.), and these hydrates and/or solvates may also be present in the present invention. Included in hemiasterlin derivatives. Furthermore, the present invention includes all forms of crystalline forms of the hemiasterlin derivatives of the present invention.
- optical isomers based on optically active centers atropisomers based on axial or planar chirality caused by the constraint of intramolecular rotation, all other stereoisomers, tautomers All possible isomers are included in the scope of the present invention, including body isomers, geometric isomers, and the like.
- optical isomers and atrope isomers can be obtained as racemates, and when optically active starting materials and intermediates are used, they can be obtained as optically active isomers.
- the corresponding starting material, intermediate or final racemate is subjected to physical separation by a known separation method such as a method using an optically active column or a fractional crystallization method. It can be optically or chemically resolved into an optical antipode.
- a known separation method such as a method using an optically active column or a fractional crystallization method.
- the diastereomer method two kinds of diastereomers are formed from a racemate by a reaction using an optically active resolving agent. Since the different diastereomers generally have different physical properties, they can be optically resolved by a known method such as fractional crystallization.
- the method for producing the hemiasterline derivative of the present invention will be described below.
- the hemiasterlin derivative of the present invention represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production methods AP or T.
- X is —NH—
- Z is a group represented by formula (Z-1)
- W is a group represented by formula (W-1)
- Q is represented by formula (Q-1).
- R 6a is a methyl group
- R 6b is a hydrogen atom or a methyl group
- R 3 is —(CH 2 ) u —COOH
- the compound represented by formula (1) is For example, it can be produced by the following production method.
- R 1 , R 2 , R 8a , R 8b , AA, u, b and n are as defined in Item 1, and R a , R b , R x , R y and R Z are , Each independently represents a C 1-6 alkyl group or a benzyl group, and P X represents a protecting group for an amino group.
- the protecting group for the amino group represented by P X is the protecting group described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter GM Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999). Etc. can be used.
- Compound a1 can be produced by the method described in J. Med. Chem., 2007, 50, 4329-4339, or can be purchased as a commercial product.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in Tetrahedron Lett., 1997, 38, 317-320, or can be purchased as a commercial product.
- Compound a2 can be produced by reacting compound a1 with various methylating reagents in the presence of a suitable base in a suitable solvent.
- the methylating reagent include methyl halide and the like, and preferably methyl iodide, methyl bromide, methyl chloride and the like.
- the base is preferably potassium hexamethyldisilazide. Tetrahydrofuran is preferably used as the solvent.
- the reaction time is generally 5 minutes to 48 hours, preferably 10 minutes to 2 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 100°C, preferably -78°C to 10°C. This step can be performed according to the method described in J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199 and the like.
- Step A-2 Compound a3 can be produced from compound a2 according to the method described in step A-1 above.
- Compound a4 can be produced by reacting compound a3 with a suitable reducing agent in a suitable solvent.
- the reducing agent is appropriately selected from the reducing agents used in ordinary organic synthesis reactions, and preferably diisobutylaluminum hydride is used. Diethyl ether is preferably used as the solvent.
- the reaction time is generally 5 minutes to 48 hours, preferably 10 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 100°C, preferably -78°C to 50°C. This step can be performed according to the method described in J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199 and the like.
- Compound a5 can be produced by oxidizing compound a4 with a suitable oxidizing agent in a suitable solvent.
- the oxidizing agent can be appropriately selected from the oxidizing agents used in ordinary organic synthetic reactions, and preferably tetrapropylammonium perruthenate is mentioned.
- the solvent is preferably dichloromethane.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally ⁇ 78° C. to 100° C., preferably ⁇ 78° C. to 50° C. This step can be performed according to the method described in J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199 and the like.
- Compound a6 can be produced by subjecting the aldehyde of compound a5 to ⁇ -aminocyanation in a suitable solvent.
- the solvent preferably includes toluene and dichloromethane.
- the reaction time is generally 5 minutes to 96 hours, preferably 24 hours to 72 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C to 200°C, preferably 0°C to 100°C. This step can be performed according to the method described in Org. Lett. 2002, 4, 695-697 and the like.
- Compound a7 can be produced by using compound a6 in the presence or absence of a suitable base in a suitable solvent with a suitable oxidizing agent.
- the oxidizing agent can be appropriately selected from the oxidizing agents used in ordinary organic synthesis reactions, but hydrogen peroxide is preferable.
- the base is preferably potassium carbonate.
- the solvent is preferably methanol.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C-200°C, preferably 0°C-60°C. This step can be performed according to the method described in J. Org. Chem. 2001, 66, 7355-7364 and the like.
- Compound a8 can be produced by reducing compound a7 in a suitable solvent in the presence of a suitable catalyst with a reducing agent.
- the reducing agent can be appropriately selected from the reducing agents used in ordinary organic synthesis reactions, and preferably hydrogen, a salt of formic acid such as ammonium formate, or hydrazine.
- the catalyst include transition metals such as palladium, nickel, rhodium, cobalt, and platinum, salts thereof or complexes thereof, or those obtained by supporting the above transition metals on a carrier such as a polymer.
- the solvent preferably includes ethanol or methanol.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C to 200°C, preferably 0°C to 100°C. This step can be performed according to the method described in J. Org. Chem. 2001, 66, 7355-7364 and the like.
- Step A-8 Compound a9 can be produced by protecting the amino group of compound a8 with a protecting group P X. This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- Compound a11 can be produced by reacting compound a9 with various acylating reagents (for example, compound a10) in the presence or absence of a suitable base in a suitable solvent.
- the acylating reagent include carboxylic acid halides and carboxylic acid anhydrides, and preferably di-tertbutyl dicarbonate.
- the base is preferably diisopropylethylamine. Chloroform is preferably used as the solvent.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C to 200°C, preferably 0°C to 50°C.
- Compound a12 can be produced by reacting compound a11 with a suitable alkali metal alkoxide in a suitable solvent.
- the alkali metal alkoxides can be appropriately selected from the alkali metal alkoxides used in ordinary organic synthesis reactions, and preferably lithium methoxide or lithium ethoxide.
- the solvent preferably includes methanol or ethanol.
- the reaction time is usually 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 6 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 200°C, preferably -78°C to 50°C.
- Compound a13 can be produced by reacting compound a12 with various methylating reagents in the presence of a suitable base in a suitable solvent.
- the methylating reagent include methyl halide and the like, and preferably methyl iodide, methyl bromide, methyl chloride and the like.
- the base is preferably sodium hydride. Tetrahydrofuran is preferably used as the solvent.
- the reaction time is generally 5 minutes to 48 hours, preferably 10 minutes to 2 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 100°C, preferably -78°C to 10°C.
- Compound a14 can be produced by hydrolyzing the ester of compound a13 in the presence of a suitable base in a suitable solvent.
- the base is preferably lithium hydroxide.
- Water or methanol is preferably used as the solvent.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C-200°C, preferably 0°C-100°C.
- Compound a16 can be produced by condensing compound a14 and compound a15 in a suitable solvent in the presence of a suitable base using various condensing agents.
- the condensing agent various condensing agents used in ordinary organic synthetic reactions can be used, but preferably (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide or bromotripyrrolidinophosphonium hexafluoro
- a carbonyl activating reagent such as 1-hydroxybenzotriazole may be used together to improve the efficiency of the condensation reaction, and the base is preferably diisopropylethylamine.
- the solvent is preferably N,N-dimethylformamide
- the reaction time is usually 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours
- the reaction temperature is usually -78°C.
- the temperature is 200° C., preferably 0° C. to 100° C. This step can be performed according to the method described in Tetrahedron Lett., 1997, 38, 317-320 and the like.
- Step A-14 Compound a17 can be produced by hydrolyzing the ester of compound a16 according to the method described in Step A-12 above. This step can be performed according to the method described in Tetrahedron Lett., 1997, 38, 317-320 and the like.
- Compound a18 can be produced by reacting compound a17 with N-hydroxysuccinimide in a suitable solvent in the presence of a suitable base using various condensing agents.
- the condensing agent various condensing agents used in ordinary organic synthetic reactions can be used, but preferably (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide or bromotripyrrolidinophosphonium hexafluoro
- a carbonyl activating reagent such as 1-hydroxybenzotriazole may be used together to improve the reaction efficiency, and the base is preferably diisopropylethylamine.
- the solvent is preferably N,N-dimethylformamide
- the reaction time is usually 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours
- the reaction temperature is usually ⁇ 78° C. to 200 hours. 0° C., preferably 0° C. to 100° C.
- Compound a19 can be produced by reacting compound a18 with an ester of an amino acid or peptide in the presence of a suitable base in a suitable solvent.
- the base is preferably diisopropylethylamine.
- the solvent is preferably N,N-dimethylformamide.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C to 200°C, preferably 0°C to 100°C.
- Compound a20 can be produced by condensing compound a19 and an aminoalkylmaleimide compound according to the method described in the above Step A-13.
- Step A-18 Compound a21 can be produced by deprotecting the protecting group P X of the amino group of compound a20 and hydrolyzing the ester (—COOR b ). This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999). In addition, when (AA) n has an ester or a protected amino group, hydrolysis of the ester and deprotection of the amino-group-protecting group can be carried out in this deprotecting step, if necessary.
- Compound A1 can be produced by reacting compound a21 with a cysteine derivative in a suitable solvent.
- a suitable solvent water, dimethyl sulfoxide and dimethylformamide are preferably used.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C to about 200°C, preferably 0°C to 40°C.
- Compound a22 can be produced by reacting compound a21 with formaldehyde in a suitable solvent with a suitable reducing agent.
- the solvent is preferably acetonitrile.
- the reducing agent various reducing agents used in ordinary organic synthesis reactions can be used, but sodium triacetoxyborohydride is preferably used.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C to about 200°C, preferably 0°C to 100°C.
- Step A-21 Compound A2 can be produced from compound a22 according to the method described in Step A-19 above.
- Manufacturing method B X is —NH—, Z is a group represented by formula (Z-1), W is a group represented by formula (W-1), and Q is represented by formula (Q-2).
- R 8c , R 8d and R 8e are hydrogen atoms, R 6a is a methyl group, R 6b is a hydrogen atom or a methyl group, and R 3 is —(CH 2 ) u —COOH.
- the compound represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production method.
- R 1 , R 2 , AA, u, b and n are as defined in Item 1, and R a , R b and R x represent a C 1-6 alkyl group or a benzyl group.
- P X means an amino-group protecting group.
- the compound b1 can be purchased, for example, as a commercial product.
- the compound b11 can be produced, for example, by the method described in Tetrahedron Lett., 1997, 38, 317-320, or can be purchased as a commercial product.
- Compound b2 can be produced by reacting compound b1 with benzene in the presence of various Lewis acids.
- the Lewis acid include boron halides, aluminum halides, gallium halides, iron halides, titanium halides, and the like, with aluminum chloride and iron chloride being preferred.
- the reaction time is usually 5 minutes to 48 hours, preferably 30 minutes to 4 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 200°C, preferably 50°C to 150°C. This step can be performed according to the method described in J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199 and the like.
- Step B-2 The compound b3 is produced by reacting the compound b2 with various carboxylic acid halides in the presence of a suitable base in a suitable solvent, and then reacting with an alkali metalized 4-alkyl-2-oxazolidinone.
- the base is preferably triethylamine or diisopropylethylamine. Tetrahydrofuran is preferably used as the solvent.
- the carboxylic acid halide include carboxylic acid chloride and the like, preferably pivaloyl chloride and the like.
- Examples of the alkali metalized 4-alkyl-2-oxazolidinone include 4-alkyl-2-oxazolidinone lithium, 4-alkyl-2-oxazolidinone sodium and the like, preferably 4-isopropyl-2-oxazolidinone lithium.
- the reaction time is generally 5 minutes to 48 hours, preferably 10 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 100°C, preferably -78°C to 50°C. This step can be performed according to the method described in J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199 and the like.
- Compound b4 can be produced by reacting compound b3 with various azidating reagents in the presence of a suitable base in a suitable solvent.
- the azidating reagent include sodium azide, trimethylsilyl azide, diphenylphosphoric acid azide and the like, and preferably trimethylsilyl azide.
- the base is preferably potassium hexamethyldisilazide. Tetrahydrofuran is preferably used as the solvent.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 200°C, preferably -78°C to 75°C. This step can be performed according to the method described in J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199 and the like.
- Step B-4 Compound b5 can be produced from compound b4 according to the method described in step A-7 above.
- Compound b6 can be produced from compound b5 according to the method described in step A-8 above.
- Step B-6 Compound b7 can be produced by using compound b6 in the presence of a suitable base in a suitable solvent with a suitable oxidizing agent.
- the base is preferably lithium hydroxide.
- the solvent preferably includes methanol, tetrahydrofuran or water.
- the oxidizing agent can be appropriately selected from the oxidizing agents used in ordinary organic synthesis reactions, but hydrogen peroxide is preferable.
- the reaction time is generally 5 minutes to 72 hours, preferably 30 minutes to 24 hours.
- the reaction temperature is generally 0°C-200°C, preferably 0°C-60°C. This step can be performed according to the method described in J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199 and the like.
- Compound b8 can be produced by reacting compound b7 with various alkylating reagents in the presence of a suitable base in a suitable solvent.
- the alkylating reagent include alkyl halide and the like, preferably alkyl iodide, alkyl bromide, alkyl chloride and the like.
- the base is preferably sodium carbonate or potassium carbonate.
- the solvent is preferably N,N-dimethylformamide.
- the reaction time is generally 5 minutes to 48 hours, preferably 10 minutes to 2 hours.
- the reaction temperature is generally -78°C to 100°C, preferably -10°C to 25°C. This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- Step B-8 Compound b9 can be produced from compound b8 according to the method described in step A-11 above.
- Step B-9 Compound b10 can be produced from compound b9 according to the method described in step A-12 above.
- Step B-10 Compound b12 can be produced from compound b10 and compound b11 according to the method described in the above step A-13.
- Step B-11 Compound b13 can be produced by hydrolyzing the ester of compound b12 according to the method described in step A-12 above.
- Step B-12 Compound b14 can be produced from compound b13 according to the method described in step A-15 above.
- Step B-13 Compound b15 can be produced from compound b14 according to the method described in step A-16 above.
- Step B-14 Compound b16 can be produced from compound b15 according to the method described in step A-17 above.
- Step B-15 Compound b17 can be produced from compound b16 according to the method described in step A-18 above.
- Step B-16 Compound B1 can be produced from compound b17 according to the method described in the above step A-19.
- Step B-17 Compound b18 can be produced from compound b17 according to the method described in step A-20 above.
- Step B-18 Compound B2 can be produced from compound b18 according to the method described in Step A-19 above.
- Manufacturing method C X is —NH—, Z is a group represented by formula (Z-1), W is a group represented by formula (W-1), R 6a is a methyl group, and R 6b Is a hydrogen atom or a methyl group, and R 3 is —(CH 2 ) u —COOH, the compound represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production method.
- R 1 , R 2 , AA, u, b and n are as defined in Item 1, and R b and P X are as defined above.
- the compound c1 represents the compound a18 of the production method A or the compound b14 of the production method B.
- Step C-1 Compound c2 can be produced from compound c1 according to the method described in step A-16 above.
- Step C-2 Compound c3 can be produced from compound c2 according to the method described in step A-15 above.
- Step C-3 Compound c4 can be produced from compound c3 according to the method described in step A-16 above.
- Step C-4 Compound c5 can be produced from compound c4 according to the method described in step A-17 above.
- Step C-5 Compound c6 can be produced from compound c5 according to the method described in step A-18 above.
- Step C-6 Compound C1 can be produced from compound c6 according to the method described in Step A-19 above.
- Step C-7 Compound c7 can be produced from compound c6 according to the method described in step A-20 above.
- Step C-8 Compound C2 can be produced from compound c7 according to the method described in step A-19 above.
- Manufacturing method D X is —NH—, Z is a group represented by formula (Z-1), W is a group represented by formula (W-1), R 6a is a methyl group, and R 6b Is a hydrogen atom or a methyl group, R 3 is —(CH 2 ) u —COR 9 , R 9 is AD, and n is 1, the compound represented by the formula (1) is, for example, Can be manufactured by the following manufacturing method.
- R 1 , R 2 , Q, AA, AD, u and b are as defined in item 1
- P Y is a protecting group of an amino group
- R a , R b and P X has the same meaning as above.
- Examples of the protecting group for the amino group represented by P Y include those described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter GM Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999). Etc. can be used.
- the compound d1 can be purchased, for example, as a commercial product.
- the compound d6 represents the compound a18 of the production method A or the compound b14 of the production method B.
- Compound d2 can be produced by condensing compound d1 with aspartic acid diester or glutamic acid diester according to the method described in the above step A-13.
- Compound d3 can be produced by hydrolyzing the ester of compound d2 according to the method described in step A-12 above.
- the compound d4 can be produced by condensing the compound d3 and (AD) according to the method described in the above step A-13.
- Compound d5 can be produced by hydrolyzing the ester of compound d4 and deprotecting the amino-group protecting group according to the method described in Step A-18 above. Further, when (AD) has an ester or a protected amino group, hydrolysis of the ester and deprotection of the amino protecting group can be carried out in this deprotection step, if necessary.
- Compound d7 can be produced from compound d5 and compound d6 according to the method described in step A-16 above.
- Compound d10 can be produced from compound d9 according to the method described in step A-20 above.
- Compound D2 can be produced from compound d10 according to the method described in step A-19 above.
- Manufacturing method E X is —NH—, Z is a group represented by formula (Z-2) or formula (Z-3), W is a group represented by formula (W-1), and R 6a is When it is a methyl group, R 6b is a hydrogen atom or a methyl group, and R 4 is a hydroxyl group, the compound represented by formula (1) can be produced, for example, by the following production method.
- R 1 , R 2 , Q, AA, b and n are as defined in item 1, s represents 1 or 2, and R b and P X have the same meanings as above.
- Compound e1 represents compound a18 of production method A or compound b14 of production method B.
- Step E-1 Compound e2 can be produced from compound e1 according to the method described in step A-16 above.
- Step E-2 Compound e3 can be produced from compound e2 according to the method described in step A-17 above.
- Step E-3 Compound e4 can be produced from compound e3 according to the method described in step A-18 above.
- Step E-4 Compound E1 can be produced from compound e4 according to the method described in step A-19 above.
- Step E-5 Compound e5 can be produced from compound e4 according to the method described in step A-20 above.
- Step E-6 Compound E2 can be produced from compound e5 according to the method described in Step A-19 above.
- Manufacturing method F X is —NH—, Z is a group represented by formula (Z-2) or formula (Z-3), W is a group represented by formula (W-1), and R 6a is When it is a methyl group, R 6b is a hydrogen atom or a methyl group, and R 4 is a hydroxyl group, the compound represented by formula (1) can be produced, for example, by the following production method.
- R 1 , R 2 , Q, AA, b and n are as defined in Item 1, and s, R b and P X are as defined above.
- the compound f1 represents the compound a18 of the production method A or the compound b14 of the production method B.
- Step F-1 Compound f2 can be produced from compound f1 according to the method described in step A-16 above.
- Compound f3 can be produced from compound f2 according to the method described in step A-15 above.
- Compound f4 can be produced from compound f3 according to the method described in step A-16 above.
- Compound f5 can be produced from compound f4 according to the method described in step A-17 above.
- Compound f6 can be produced from compound f5 according to the method described in step A-18 above.
- Compound F1 can be produced from compound f6 according to the method described in Step A-19 above.
- Compound F2 can be produced from compound f7 according to the method described in Step A-19 above.
- Manufacturing method G X is —NH—
- Z is a group represented by formula (Z-2) or formula (Z-3)
- W is a group represented by formula (W-1)
- R 6a is When it is a methyl group
- R 6b is a hydrogen atom or a methyl group
- R 4 is AD
- the compound represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production method.
- R 1 , R 2 , Q, AA, AD, b and n are as defined in item 1, and s, R a , R b , P X and P Y are as defined above. .
- the compound g1 can be purchased as a commercial product, for example.
- the compound g6 represents the compound a18 of the production method A or the compound b14 of the production method B.
- Compound g2 can be produced by condensing compound g1 with aspartic acid diester or glutamic acid diester according to the method described in the above step A-13.
- Step G-2 Compound g3 can be produced by hydrolyzing the ester of compound g2 according to the method described in step A-12 above.
- Step G-3 Compound g4 can be produced from compound g3 and (AD) according to the method described in the above step A-13.
- Step G-4 Compound g5 can be produced by subjecting the ester of compound g4 to hydrolysis and deprotecting the amino protecting group according to the method described in Step A-18 above. Further, when (AD) has an ester or a protected amino group, hydrolysis of the ester and deprotection of the protecting group of the amino group can be carried out in this deprotection step, if necessary.
- Step G-5 Compound g7 can be produced from compound g5 and compound g6 according to the method described in step A-16 above.
- Step G-6 Compound g8 can be produced from compound g7 according to the method described in step A-17 above.
- Step G-7 Compound g9 can be produced from compound g8 according to the method described in step A-18 above.
- Step G-8 Compound G1 can be produced from compound g9 according to the method described in step A-19 above.
- Step G-9 Compound g10 can be produced from compound g9 according to the method described in step A-20 above.
- Step G-10 Compound G2 can be produced from compound g10 according to the method described in Step A-19 above.
- Manufacturing method H X is —C(O)—, Z is a group represented by formula (Z-6), W is a group represented by formula (W-1), and R 6a is a methyl group. , R 6b is a hydrogen atom or a methyl group, the compound represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production method.
- R 1 , R 2 , Q, AA, b and n are as defined in Item 1, and R x , P X and P Y are as defined above.
- the compound h1 represents the compound a18 of the production method A or the compound b14 of the production method B.
- the compound h5 can be purchased, for example, as a commercial product.
- Step H-1 Compound h2 can be produced from compound h1 according to the method described in step A-16 above.
- Step H-2 Compound h3 can be produced by condensing compound h2 and a lysine derivative according to the method described in the above Step A-13.
- Step H-4 Compound h6 can be produced from compound h4 and compound h5 according to the method described in step A-16 above.
- Manufacturing method I X is —C(O)—, Z is a group represented by formula (Z-7), W is a group represented by formula (W-1), and R 6a is a methyl group. , R 6b is a hydrogen atom or a methyl group, the compound represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production method.
- R 1 , R 2 , Q, AA, b and n are as defined in Item 1, and R x , P X and P Y are as defined above.
- the compound i1 represents the compound a18 of the production method A or the compound b14 of the production method B.
- Compound i5 can be purchased, for example, as a commercial product.
- Step I-1 Compound i2 can be produced from compound i1 according to the method described in step A-16 above.
- Step I-2 Compound i3 can be produced by condensing compound i2 and a lysine derivative according to the method described in the above Step A-13.
- Step I-3 Compound i4 can be produced from compound i3 according to the method described in Step A-18 above.
- Step I-4 Compound i6 can be produced from compound i4 and compound i5 according to the method described in the above step A-16.
- Step I-5 Compound I1 can be produced from compound i6 according to the method described in the above step A-19.
- Step I-6 Compound i7 can be produced from compound i6 according to the method described in step A-20 above.
- Step I-7 Compound I2 can be produced from compound i7 according to the method described in Step A-19 above.
- the compound j6 is the group represented by the formula (1), wherein X is —NH—, Z is the group represented by the formula (Z-1), the formula (Z-2), or the formula (Z-3), and W Is a group represented by Formula (W-1), and Q is Formula (Q-1), Formula (Q-2), Formula (Q-3), Formula (Q-4), Formula (Q-5 Or a compound J1 which is a group represented by the formula (Q-6).
- Compound j6 can be produced, for example, by the following production method.
- compound J1 can be produced from compound j6 according to the production method described in steps A-16 to A-21 of production method A. (In the formula, R 1 , R 2 , R 6a, and b are as defined in Item 1, and R a represents a C 1-6 alkyl group.)
- the compound j1 can be purchased, for example, as a commercial product.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in production method A.
- Step J-1 Compound j2 can be produced, for example, according to the method described in Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Compound j3 can be produced, for example, according to the method described in Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Compound j4 can be produced, for example, according to the method described in Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Step J-4 Compound j5 can be produced from compound j4 according to the step A-14 of production method A.
- Step J-5 Compound j6 can be produced from compound j5 according to the step A-15 of production method A.
- the compound represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production method. .. (In the formula, R 1 , R 2 , AA, b, Q, p and R 5a are as defined in Item 1, and P x represents a protecting group for an amino group.)
- the compound k1 represents the compound a18 of the production method A or the compound b14 of the production method B.
- Compound k2 can be produced from compound k1 according to the method described in A-16 above.
- Step K-2 Compound k3 can be produced from compound k2 according to the method described in A-18 above.
- Step K-3 Compound k4 can be produced from compound k3 according to the method described in A-13 or A-16 above.
- Step K-4 Compound K1 can be produced from compound k4 according to the method described in A-19 above.
- the compound represented by the formula (1) can be produced, for example, by the following production method. .. (In the formula, R 1 , R 2 , AA, b and p are as defined in Item 1, P x represents a protecting group for an amino group, and R a represents a C 1-6 alkyl group. )
- the compound 11 can be purchased as a commercial product, for example.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in production method A.
- Compound 12 can be produced by protecting the amino group of compound 11 with a protecting group P x . This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- Compound 14 can be produced from compound 13 according to the method described in step A-14 above.
- Compound 16 can be produced by deprotecting the protecting group P x of compound 15. This step is a method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter GM Wuts, published by John Wiley & Sons, Inc., 1999), Tetrahedron Lett. 45 (2004) 495-499, etc. It can be carried out according to.
- (AA) p has an ester or a protected amino group
- hydrolysis of the ester and deprotection of the amino-group protecting group can be carried out in this deprotecting step, if necessary.
- Compound 17 can be produced from compound 16 according to the method described in Step A-13 or Step A-16.
- the compound m7 is the group represented by the formula (1), wherein X is —NH—, Z is a group represented by the formula (Z-1), the formula (Z-2), or the formula (Z-3), and W Is a group represented by the formula (W-1), and Q is a production intermediate of a compound Ma1 in which Q is a group represented by the formula (Q-7).
- the compound m7 can be produced, for example, by the following production method.
- compound Ma1 can be produced from compound m7 according to the production method described in steps A-16 to A-21 of production method A. (In the formula, R 1 , R 2 , R 6a, and b are as defined in Item 1, and R a represents a C 1-6 alkyl group.)
- the compound m1 can be purchased, for example, as a commercial product.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in Production method A.
- Compound m2 can be produced, for example, according to the method described in Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Step M-2 Compound m3 can be produced, for example, according to the method described in Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Step M-3 The compound m4 can be produced, for example, according to the method described in J. Med. Chem. 2004, 47, 4774-4786.
- Step M-4 Compound m5 can be produced, for example, according to the method described in Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Compound m6 can be produced from compound m5 according to the step A-14 of production method A.
- X is —NH—
- Z is a group represented by the formula (Z-1), the formula (Z-2) or the formula (Z-3)
- W is It is a production intermediate for compound N1, which is a group represented by formula (W-2).
- the compound n5 can be produced, for example, by the following production method.
- compound N1 can be produced from compound n5 according to the production method described in production method A, steps A-16 to A-19. (In the formula, R 1 , R 2 , R 7 and b are as defined in Item 1, and R a represents a C 1-6 alkyl group.)
- the compound n1 can be purchased, for example, as a commercial product.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in production method A.
- Compound n2 can be produced, for example, according to the method described in WO2003/082268 and the like.
- Compound n5 can be produced from compound n4 according to the step A-15 of production method A.
- the compound represented by formula (1) can be produced, for example, by the following production method. can do.
- R 1 , R 2 , AA, R 5a , b and p are as defined in Item 1, and EL represents a chlorine atom, a bromine atom, an iodine atom, a trifluoromethylsulfonyl group or a tosyl group.
- R zz represents a hydrogen atom or —COOR a
- P x represents an amino-group protecting group
- P z represents a carboxyl-group protecting group
- R a represents a C 1-6 alkyl group.
- the compound o1 can be produced by the method described in WO 2004/026293, WO 2016/123582 or the like, or can be purchased as a commercial product.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in production method A.
- Compound o2 can be produced from compound o1 according to the method described in, for example, WO 2004/026293, Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Compound o5 can be produced from compound o4 by, for example, the method described in WO 2004/026293.
- Compound o6 can be produced from compound o5, for example, by the method described in WO 2004/026293 or the like.
- Compound o7 can be produced from compound o6, for example, by the method described in WO 2004/026293 or the like.
- Compound o8 can be produced by protecting the carboxyl group of compound o7 with a protecting group P Z. This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- Compound o10 can be produced from compound o9 according to the method described in step A-13 above.
- Compound o11 can be produced from compound o10 according to the method described in step A-14 above.
- Compound o12 can be produced from compound o11 according to the method described in step A-15 above.
- Compound o14 can be produced from compound o13 by deprotecting the protecting group P z . This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- Compound O1 can be produced from compound o15 according to the method described in step A-19 above.
- Compound o17 can be produced from compound o16 according to the method described in step O-13 above.
- Compound O2 can be produced from compound o18 according to the method described in step A-19 above.
- the compound p1 can be purchased, for example, as a commercial product.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in production method A.
- the compound p2 can be produced from the compound p1 according to, for example, the method described in WO 2004/026293 or the like.
- Compound p3 can be produced by deprotecting the protecting group P z from compound p2. This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- the compound p4 can be produced from the compound p3 according to, for example, the method described in WO 2004/026293 or the like.
- Step P-4 Compound p5 can be produced by protecting the amino group and hydroxyl group of compound p4 with protecting group P x and protecting group P z , respectively. This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- the compound p6 can be produced by deprotecting the protecting group P z from the compound p5. This step is the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter GM Wuts, published by John Wiley & Sons, Inc., 1999), Tetrahedron Lett. 45 (2004) 495-499, etc. It can be carried out according to.
- Step P-6 Compound p7 can be produced from compound p6 according to the method described in step A-13.
- Step P-7 Compound p8 can be produced from compound p7 according to the method described in step A-18 above.
- Step P-8 Compound p9 can be produced by condensing compound p8 according to the method described in step A-13 above.
- (AA) p has an ester or a protected amino group
- the hydrolysis of the ester and the deprotection of the amino-protecting group can also be carried out.
- Step P-9 Compound p10 can be produced from compound p9 and a succinimide derivative by condensation according to the method described in step A-16 above.
- Step P-10 Compound P1 can be produced from compound p10 according to the method described in step A-19 above.
- Step P-11 Compound p11 can be produced from compound p10 according to the method described in step A-20 above.
- Step P-12 Compound P2 can be produced from compound p11 according to the method described in step A-19 above.
- the compound t1 can be produced, for example, by the method described in WO 2004/026293, WO 2016/123582 or the like, or can be purchased as a commercial product.
- Compound a15 can be produced, for example, by the method described in production method A.
- Compound t2 can be produced from compound t1 according to the method described in WO 2004/026293, Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322 and the like.
- Compound t4 can be produced from compound t3, for example, by the method described in WO2016/123582 and the like.
- Compound t5 can be produced by protecting the amino group of compound t4 with a protecting group P y . This step can be carried out according to the method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Inc., 1999).
- [T-8 step] Compound t9 can be produced by deprotecting the protecting groups P x and P y of compound t8.
- This step is a method described in Protective Groups in Organic Synthesis (Theodora W. Greene, Peter GM Wuts, published by John Wiley & Sons, Inc., 1999), Tetrahedron Lett. 45 (2004) 495-499, etc. It can be carried out according to.
- (AA) p has an ester or a protected amino group
- hydrolysis of the ester and deprotection of the amino-group protecting group can be carried out in this deprotecting step, if necessary.
- Compound T2 can be produced from compound t11 according to the method described in step A-19 above.
- the production method of the hemiasterline derivative of the present invention is shown above.
- the hemiasterline derivative of the present invention can be produced by a method other than these, for example, by appropriately combining methods known to those skilled in the art.
- alkali bicarbonates such as sodium bicarbonate and potassium bicarbonate
- Alkali carbonates such as sodium carbonate and potassium carbonate
- metal hydrides such as sodium hydride and potassium hydride
- alkali metal hydroxides such as sodium hydroxide and potassium hydroxide
- alkali such as sodium methoxide and sodium t-butoxide
- Metal alkoxides organic metal bases such as butyllithium and lithium diisopropylamide; triethylamine, diisopropylethylamine, pyridine, 4-dimethylaminopyridine (DMAP), 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene( And organic bases such as DBU).
- the appropriate solvent used in each step of each of the above-mentioned production methods should be appropriately selected depending on the reaction and the kind of the raw material compound, but for example, alcohols such as methanol, ethanol, isopropanol; acetone, methyl ketone, etc.
- Ketones methylene chloride, chloroform, and other halogenated hydrocarbons; tetrahydrofuran (THF), dioxane, and other ethers; toluene, benzene, and other aromatic hydrocarbons; hexane, heptane, and other aliphatic hydrocarbons; acetic acid Esters such as ethyl and propyl acetate; Amides such as N,N-dimethylformamide (DMF) and N-methyl-2-pyrrolidone; Sulfoxides such as dimethyl sulfoxide (DMSO); Nitriles such as acetonitrile; Distilled water etc. These solvents may be used alone or in admixture of two or more. Depending on the type of reaction, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, pyridine may be used as a solvent.
- organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine
- the hemiasterline derivative of the present invention can be separated and purified by a method known to those skilled in the art. For example, extraction, partitioning, reprecipitation, column chromatography (for example, silica gel column chromatography, ion exchange column chromatography or preparative liquid chromatography), recrystallization and the like can be mentioned.
- column chromatography for example, silica gel column chromatography, ion exchange column chromatography or preparative liquid chromatography
- recrystallization solvent examples include alcohol solvents such as methanol, ethanol and 2-propanol; ether solvents such as diethyl ether; ester solvents such as ethyl acetate; aromatic hydrocarbon solvents such as benzene and toluene; acetone. And the like; halogen-based solvents such as dichloromethane and chloroform; hydrocarbon-based solvents such as hexane; aprotic solvents such as dimethylformamide and acetonitrile; water; and mixed solvents thereof.
- alcohol solvents such as methanol, ethanol and 2-propanol
- ether solvents such as diethyl ether
- ester solvents such as ethyl acetate
- aromatic hydrocarbon solvents such as benzene and toluene
- acetone acetone.
- halogen-based solvents such as dichloromethane and chloroform
- hydrocarbon-based solvents such as hexane
- the method described in Volume 1 of Experimental Chemistry Course (edited by The Chemical Society of Japan, Maruzen) can be used.
- the molecular structure of the hemiasterlin derivative of the present invention is determined by referring to the structure derived from each raw material compound, and a spectroscopic method such as a nuclear magnetic resonance method, an infrared absorption method, or a circular dichroism spectrum analysis method. Alternatively, it can be easily performed by mass spectrometry.
- the intermediate or final product in the above-mentioned production method is to appropriately convert the functional group, and in particular, to extend various side chains by using an amino group, a hydroxyl group, a carbonyl group, a halogen atom or the like as a foothold, and At that time, the above-mentioned functional group can be protected or deprotected as necessary to lead to another compound included in the present invention.
- the conversion of the functional group and the extension of the side chain can be performed by a general method that is usually performed (see, for example, Comprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, John Wiley& Sons Inc. (1999)).
- the hemiasterline derivative of the present invention may have asymmetry or may have a substituent having an asymmetric carbon, and such compounds have optical isomers.
- the optical isomer can be produced according to a conventional method. Examples of the production method include a method of using a raw material having an asymmetry point and a method of introducing an asymmetry at an intermediate stage. For example, in the case of an optical isomer, an optical isomer can be obtained by using an optically active raw material or performing optical resolution or the like at an appropriate stage of the production process.
- optical resolution method examples include, for example, when the hemiasterline derivative of the present invention has a basic functional group, in an inert solvent (for example, alcohol solvent such as methanol, ethanol and 2-propanol; ether such as diethyl ether).
- an inert solvent for example, alcohol solvent such as methanol, ethanol and 2-propanol; ether such as diethyl ether.
- System solvent ester solvent such as ethyl acetate; hydrocarbon solvent such as toluene; aprotic solvent such as acetonitrile; or a mixed solvent of two or more kinds selected from the above solvents
- an optically active acid for example, Monocarboxylic acids such as mandelic acid, N-benzyloxyalanine and lactic acid; dicarboxylic acids such as tartaric acid, o-diisopropylidene tartaric acid and malic acid; sulfonic acids such as camphorsulfonic acid and bromocamphorsulfonic acid
- a diastereomeric method of forming a salt may be mentioned.
- the hemiasterline derivative of the present invention or its synthetic intermediate has an acidic functional group such as carboxyl
- it is an optically active amine (eg, organic amine such as 1-phenylethylamine, quinine, quinidine, cinchonidine, cinchonine, strychnine). It is also possible to perform optical resolution by forming a salt with.
- the temperature for forming the salt includes a range from -50°C to the boiling point of the solvent, preferably 0°C to the boiling point, and more preferably room temperature to the boiling point of the solvent. In order to improve the optical purity, it is desirable to once raise the temperature to around the boiling point of the solvent. When the precipitated salt is collected by filtration, it can be cooled if necessary to improve the yield.
- the amount of the optically active acid or amine used is in the range of about 0.5 to about 2.0 equivalents, preferably about 1 equivalent, relative to the substrate.
- the crystals are placed in an inert solvent (eg, alcohol solvent such as methanol, ethanol, 2-propanol; ether solvent such as diethyl ether; ester solvent such as ethyl acetate; hydrocarbon solvent such as toluene).
- an inert solvent eg, alcohol solvent such as methanol, ethanol, 2-propanol; ether solvent such as diethyl ether; ester solvent such as ethyl acetate; hydrocarbon solvent such as toluene.
- a high-purity optically active salt can also be obtained by recrystallization from an aprotic solvent such as acetonitrile; or a mixed solvent of two or more kinds selected from the above solvents).
- the optically resolved salt can be treated with an acid or a base by a usual method to obtain a free form.
- the compounds of Reference Examples and Examples may be obtained as an acid addition salt such as a TFA salt by a method such as treatment after the reaction.
- Me is a methyl group
- Et is an ethyl group
- Boc is a tert-butoxycarbonyl group
- Fmoc is a 9-fluorenylmethyloxycarbonyl group
- trt is a trityl group
- Ph is a phenyl group
- Bn is Bn. It means a benzyl group.
- TFA is trifluoroacetic acid
- THF is tetrahydrofuran
- TCEP is tris(2-carboxyethyl)phosphine
- Tris-HCl is trishydroxymethylaminomethane hydrochloride
- PBS is phosphate buffered saline
- TBS is Tris buffered saline
- HEPES means 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid
- PIPES means piperazine-1,4-bis(2-ethanesulfonic acid).
- the measurement conditions for obtaining the average drug-antibody ratio are as follows, and the retention time is indicated by Rt (min).
- the measurement condition used for the measurement is additionally indicated by E.
- a 30% aqueous hydrogen peroxide solution (32.5 mL) and an aqueous lithium hydroxide solution (1 mol/L, 119 mL) were added, and the temperature was raised to 25° C. and the mixture was stirred for 3 hours.
- An aqueous sodium hydrogensulfate solution (1.5 mol/L, 470 mL) was added at 0°C, the temperature was raised to 25°C, and the mixture was stirred for 1 hour.
- the pH was adjusted to 3 with an aqueous citric acid solution (1 mol/L), and the mixture was extracted with tert-butyl methyl ether.
- the organic layer was washed with saturated saline, and the organic layer was dried over anhydrous magnesium sulfate.
- N-(tert-butoxycarbonyl)-N, ⁇ , ⁇ -trimethyl-L-phenylalanyl-N-[ (3S,4E)-6-Ethoxy-2,5-dimethyl-6-oxohex-4-en-3-yl]-N,3-dimethyl-L-valinamide (307 mg) to N-(tert-butoxycarbonyl) -N, ⁇ , ⁇ -trimethyl-L-phenylalanyl-N-[(3S,4E)-5-carboxy-2-methylhex-4-en-3-yl]-N,3-dimethyl-L-valine amide (286 mg
- Reference example 22 4-(4-(((S)-1-(((S,E)-5-carboxy-2-methylhex-4-en-3-yl)(methyl)amino)-3,3-dimethyl-1 -Oxabutan-2-yl)amino)-2-methyl-3-(methylamino)-4-oxobutan-2-yl)benzoic acid
- Reference example 100 Di-tert-butyl ((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-((2-(2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrole-1- Iyl)ethyl)carbamoyl)phenyl)-3-methyl-2-(methylamino)butanamide)-N,3,3-trimethylbutanamide)-2,5-dimethylhex-2-enoyl)-D-glutamic acid
- Reference example M2 N- ⁇ (2E,4S)-2,5-Dimethyl-4-[methyl(N, ⁇ , ⁇ ,1-tetramethyl-L-tryptophyl-3-methyl-L-valyl)amino]hex-2-enoyl ⁇ -D- ⁇ -Glutamyl-N 6 -[6-(2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl)hexanoyl]-L-lysine
- a mixed solution of Reference Example 4 (7.2 mg), N-succinimidyl 6-maleimidohexanoate (2.8 mg), N,N-diisopropylethylamine (2.3 mg) and N,N-dimethylformamide (1 mL) was added, The mixture was stirred at 25°C for 18 hours.
- the antibody solution was cooled to 0° C., it was treated with a PD-10 desalting column pre-equilibrated with a phosphate buffered physiological aqueous solution to obtain a phosphate buffered physiological aqueous solution of reduced brentuximab. After cooling this to 0° C., a 1 mmol/L DMSO solution (6.6 mL) of Reference Example M4 diluted 10-fold with a phosphate buffered physiological aqueous solution was added, mixed thoroughly, and incubated at 4° C. for 17 hours.
- the average DAR of the obtained ADC was measured by reducing or non-reducing SDS-PAGE or HPLC-HIC.
- the average DAR is qualitatively or quantitatively measured by ultraviolet-visible absorption spectroscopy (UV-Vis), reducing or non-reducing SDS-PAGE, HPLC-HIC, SEC, RP-HPLC, LC-MS, etc. can do.
- UV-Vis ultraviolet-visible absorption spectroscopy
- reducing or non-reducing SDS-PAGE HPLC-HIC
- SEC RP-HPLC
- LC-MS etc.
- Reference example ADC2 to ADC46 A corresponding antibody and a modifying agent (compound of Reference Example) were used and reacted and treated in the same manner as in Reference Example ADC1 to obtain ADCs shown in Table 12 below.
- the Rt(min) of the ADC of the example in Table 12 above is the peak of the ADC having a DAR of 8 observed by HPLC-HIC analysis (measurement condition E).
- the Rt(min) of the ADC of Comparative Example 3 is the peak of the ADC having a DAR of 8.
- Comparative Example compound 1 in Table 12 above represents the following compound disclosed in WO 2014/057436 (Patent Document 8).
- Example MM1 (3S,6S,9S,10E,14R)-14-(3- ⁇ [2-(3- ⁇ [(2R)-2-amino-2-carboxyethyl]sulfanyl ⁇ -2,5-dioxopyrrolidine- 1-yl)ethyl]amino ⁇ -3-oxopropyl)-6-tert-butyl-8,11-dimethyl-4,7,12-trioxo-3-(2-phenylpropan-2-yl)-9- (Propan-2-yl)-2,5,8,13-tetraazapentadeca-10-en-15-oic acid Cysteine (1.73 mg) was added to an aqueous solution (1.0 mL) of Reference Example M4 (10 mg), and the mixture was stirred at 4°C for 1 hr.
- Example MM2 to MM47 Reaction and treatment were carried out in the same manner as in Example MM1 using the corresponding raw material compounds to obtain the compounds shown in Table 13 below.
- Example MM48 to MM67 The corresponding starting materials were used and reacted and treated in the same manner as in Example MM1 to obtain the compounds shown in Table 14 below.
- Example MM68 to MM70 The corresponding starting materials were used and reacted and treated in the same manner as in Example MM1, to give the compounds shown in Table 15 below.
- Comparative compound 2 represents the following compound obtained by reacting and treating in the same manner as in Example MM1 using the compound disclosed in WO 2014/057436 (Patent Document 8).
- Test Example 1 Evaluation of microtubule polymerization inhibitory activity using pig tubulin (1) Using a tubulin polymerization inhibition assay kit (catalog number: BK006P) purchased from Cytoskeleton, the polymerization inhibitory activity of the compound of Example at a concentration of 9.1 ⁇ M was evaluated according to the protocol attached to the kit. To summarize the protocol, 10 ⁇ L of 80 mM PIPES pH 6.9, 2 mM MgCl, 0.5 mM EGTA, and 5% DMSO buffer of the compound to be evaluated were added to a 96-well microplate at a concentration of 3 mg/mL in pigs.
- BK006P tubulin polymerization inhibition assay kit
- Tubulin 80 mM PIPES pH 6.9, 2 mM MgCl, 0.5 mM EGTA, 1 mM GTP, and 100 ⁇ L of 10.2% glycerol solution were added to each.
- the absorbance at 340 nm was measured at 37° C. using a microplate reader. The absorbance at 340 nm increases as the polymerization of tubulin progresses. The results are shown in Figure 1.
- Examples MM1 and MM47 exhibited microtubule polymerization inhibition activity in the microtubule polymerization inhibition evaluation test.
- Test Example 2 Evaluation of microtubule polymerization inhibitory activity using porcine tubulin (2) Using a tubulin polymerization inhibition assay kit (catalog number: BK006P) purchased from Cytoskeleton, the polymerization inhibitory activity of the compound of Example at a concentration of 9.1 ⁇ M was evaluated according to the protocol attached to the kit. 10 ⁇ L of 80 mM PIPES pH 6.9, 2 mM MgCl, 0.5 mM EGTA, and 5% DMSO buffer of the compound to be evaluated were added to a 96-well microplate, and 3 mg/mL of porcine tubulin 80 mM PIPES pH 6 was added thereto.
- BK006P tubulin polymerization inhibition assay kit
- the tubulin polymerization inhibitory activity was evaluated by the ratio of polymerized tubulin 60 minutes after the start of the assay. Specifically, the absorbance of the polymerized tubulin in the well to which the compound was added was divided by the absorbance of the polymerized tubulin in the well to which the compound was not added, and the value was multiplied by 100 to obtain the microtubule polymerization rate ( %) was calculated. The results are shown in Table 16.
- a lower value for the microtubule polymerization rate indicates that the compound strongly inhibits microtubule polymerization.
- Test Example 3 Cytotoxicity test (1) Human lymphoma cell line Karpas-299 cells (European Collection of Authenticated Cell Cultures, hereinafter ECACC) were cultured in RPMI1640 (GIBCO) containing 10% fetal bovine serum (MP Biomedicals) (hereinafter referred to as "medium”). did. The cells were prepared in a medium so as to have a concentration of 2 ⁇ 10 5 cells/mL, and 50 ⁇ L of each was added to a 96-well cell culture microplate. 50 ⁇ L of the compound of Example or the compound of Comparative Example, which had been diluted 4-fold in 8 steps with the medium, was added to the microplate. These were cultured at 37° C. under 5% CO 2 for 4 days.
- IC 50 (nM) antilog (LOG 10 (a ⁇ b) ⁇ (ed) ⁇ (cd)+LOG 10 b) a: concentration of test substance a b: Concentration b of test substance c: Cell viability when a test substance of concentration a was added d: Cell viability when a test substance of concentration b was added e: Among cell viability when a test substance of each concentration was added , Intermediate value between maximum and minimum (a and b are concentrations that exceed the cell viability e, and represent a>b).
- the compounds of Comparative Examples showed strong cytotoxicity to Karpas-299 cells.
- the compounds of Examples showed weak cytotoxicity to Karpas-299 cells.
- Test Example 4 Lysosomal metabolism test of ADC Using human liver lysosomes (catalog number: H0610.L) and 10x catalytic buffer (catalog number: K5200) purchased from SEKISUI XenoTech, a protocol recommended by SEKISUI XenoTech is used according to a protocol recommended by SEKISUI XenoTech. ADC metabolism studies were evaluated. To a 1.5 mL Eppendorf tube, 70 ⁇ L of ultrapure water, 20 ⁇ L of 10 ⁇ catalytic buffer, 100 ⁇ L of human liver lysosomes diluted 10-fold with ultrapure water were added, and a phosphate buffered saline of the compound to be evaluated was added thereto.
- the hemiasterline derivative of the present invention is produced by the metabolism of the antibody part of ADC by lysosome.
- Test Example 5 Metabolic test of anti-CD30 ADC using cells RPMI1640 containing 10% fetal calf serum (MP Biomedicals) containing human lymphoma cell line Karpas-299 cells (European Collection of Authenticated Cell Cultures, hereinafter referred to as ECACC). (GIBCO) (hereinafter, referred to as "medium”).
- the cells were prepared in a medium to 2 ⁇ 10 6 cells/mL, 3 mL was added to the cell culture plate, and then 1.5 ⁇ L of Reference Example ADC1 having a concentration of 30 mg/mL was added. This was cultured at 37° C. under 5% CO 2 for 1 day.
- the cell suspension was separated into a cell pellet and a culture medium by centrifugation (2000 g for 5 minutes). After adding 4 mL of acetonitrile to the collected culture solution, it was incubated at 25° C. for 18 hours. After the incubation, the acetonitrile suspension was centrifuged (2500 g for 5 minutes) to collect the supernatant, which was adjusted to about pH 4 with acetic acid and then freeze-dried to obtain a white solid.
- Test Example 6 ADC cytotoxicity test Karpas-299 cells (ECACC) that are CD30 antigen positive and HER2 antigen negative are RPMI1640 (GIBCO) containing 10% fetal calf serum (MP Biomedicals) (hereinafter, in this test) , "Medium A”).
- RPMI1640 containing 10% fetal calf serum
- MP Biomedicals fetal calf serum
- SK-BR-3 cells which are CD30 antigen negative and HER2 antigen positive, were transferred to McCoy's 5A (GIBCO) containing 10% fetal bovine serum (MP Biomedicals) (hereinafter, referred to as “medium B” in this test). )).
- Karpas-299 cells and SK-BR-3 cells were prepared in medium A or medium B at 2 ⁇ 10 6 cells/mL, and 50 ⁇ L of each was added to a 96-well cell culture microplate. After the addition, the SK-BR-3 cells were cultured overnight at 37° C. under 5% CO 2 . 50 ⁇ L each of ADC diluted 4-fold in 8 steps with medium A or medium B was added to a microplate, and at 37° C. and 5% CO 2 , Karpas-299 cells were added for 4 days, and SK-BR-3 cells were added with 3 cells. Each was cultured for a day. After culturing, the microplate was taken out of the incubator and allowed to stand at room temperature for 10 minutes.
- the antibody drug conjugate of brentuximab which is a CD30 antigen-specific antibody, showed strong cytotoxic activity against Karpas-299 cells, which are CD30 antigen-positive cells, but not CD30 antigen-negative. It showed weak cytotoxic activity against SK-BR-3 cells.
- the antibody drug conjugate of trastuzumab which is a HER2 antigen-specific antibody, showed strong cytotoxic activity against HER2-antigen-positive cells, SK-BR-3 cells, and HER2-antigen-negative cells, Karpas-299 cells. On the other hand, it showed weak cytotoxic activity.
- the compound has weak cytotoxicity, it selectively showed strong cytotoxic activity by being produced by metabolism of the antibody drug complex in the antigen-positive cells that specifically bind to the antibody. That is, it was shown that the Example compounds selectively show strong cytotoxic activity against positive cells that specifically bind to the antibody when present in the cells by metabolism of the antibody drug complex.
- Test Example 7 Efficacy test of antibody drug conjugate in Karpas-299 tumor type using CB-17 SCID mouse This test is a typical test for evaluating the antitumor effect of drugs.
- the Karpas human undifferentiated giant cell lymphoma model is prepared by subcutaneously implanting 5 ⁇ 10 6 cells into CB-17 SCID mice. In the tumor model, treatment was initiated after the tumor reached a mean volume of 90-110 mm 3 . Mice obtained by dissolving Reference Example ADC in phosphate-buffered saline are injected once intravenously. Tumor volume is calculated using the formula: 0.5 (longest dimension x vertical dimension 2 ). Mice were excluded from the study when their tumors were approximately 2000 mm 3 and the mean tumor size is not plotted thereafter. The method of this test is described in Hamblett K. J. et. al. Clin. Cancer Res., 2004, 10, 7063-7070 and the like.
- Test Example 8 Toxicity (safety) test of drug or antibody drug complex using mouse or rat This test is a typical test for evaluating toxicity (safety) of drug or antibody drug complex. Toxicity is a single or repeated tail vein administration of a drug or antibody drug complex to mice or Sprague-Dawley rats, followed by general symptom observation, hematological examination, blood biochemical examination, bone marrow examination, autopsy, organ It can be confirmed by performing weight, histopathological examination and the like. This test is described in Asakura Shoten (2009), edited by Toxology, The Japan Society of Toxicology Educational Committee.
- the example compound showed lower activity than the comparative example compound in the cytotoxicity test.
- the example compound did not lose the tubulin polymerization inhibitory activity derived from the hemiasterlin structure.
- the antibody-drug complex that gives the Example compound by the protease expressed in the target cells showed high activity in the cytotoxicity test. Therefore, according to the antibody-drug complex containing the Example compound as a part of the structure, even if the drug part containing the antibody part is generated in the whole body blood from the metabolism of the antibody-drug complex and released outside the cell. It was suggested that the compound of Example was suppressed from causing cytotoxicity to normal cells, and side effects could be reduced.
- the hemiasterlin derivative of the present invention selectively exhibits cytotoxic activity in antigen-expressing cells, and has low cytotoxicity in normal cells, and thus can be an anticancer agent with excellent safety. There is expected.
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Abstract
Description
[項1]
式(1):
bは1~5の整数を表し、
Xは、-NH-又は-CO-を表し、
Zは、式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)、式(Z-5)、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)又は式(Z-11):
nは0~2の整数を表し、
pは1~3の整数を表し、
AAは、グルタミン酸残基(Glu)、アスパラギン酸残基(Asp)又はリシン残基(Lys)を表し、AAが複数ある場合、それぞれのAAは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AA同士はアミド結合を介して結合しており、(AA)n又は(AA)pのN末端窒素原子はカルボニル基(a)と共にアミド結合を形成しており、
Gは、-O-又は-NH-を表し、
Wは、式(W-1)又は式(W-2):
R6a及びR6bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表し、
R7は、C1-6アルキル基を表し、
Qは、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)又は式(Q-7):
R8a及びR8bは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、C1-6アルキル基又はC1-6アルコキシ基を表し、
R8c、R8d及びR8eは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、フェニル基、1~3個のフッ素原子で置換されていてもよいC1-6アルキル基、C1-6アルコキシ基又はC1-6アルキルエステル基を表す)
で表される基を表す)
で表される基を表し、
R3は、-(CH2)u-COR9を表し、
uは1又は2を表し、
R4及びR9は、それぞれ独立して、水酸基又はADを表し、
ADは、Glu、Asp又はLysを表し、ADのN末端窒素原子は隣接するカルボニル基と共にアミド結合を形成しており、
ただし、R4又はR9がADであるとき、nは0又は1であり、
R5a及びR5bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表す)
で表される基を表し、
ただし、Xが-NH-であるとき、Zは、式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)又は式(Z-5)であり、Xが-CO-であるとき、Zは、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)又は式(Z-11)であり、
R1は、水素原子又は(AB)mを表し、
ABは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ABが複数ある場合、それぞれのABは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AB同士はアミド結合を介して結合しており、
mは1~9の整数を表し、
R2は、水酸基又は(AC)gを表し、
ACは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ACが複数ある場合、それぞれのACは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AC同士はアミド結合を介して結合しており、
gは1~9の整数を表し、
ただし、R1が(AB)m且つR2が(AC)gであるとき、mとgの和は2~10の整数である]
で表される、化合物又はその塩。
式(1)が、式(1-1):
bは1~5の整数を表し、
Zは、式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)又は式(Z-5):
nは0~2の整数を表し、
pは1~3の整数を表し、
AAは、グルタミン酸残基(Glu)、アスパラギン酸残基(Asp)又はリシン残基(Lys)を表し、AAが複数ある場合、それぞれのAAは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AA同士はアミド結合を介して結合しており、(AA)n又は(AA)pのN末端窒素原子はカルボニル基(a)と共にアミド結合を形成しており、
Wは、式(W-1)又は式(W-2):
R6a及びR6bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表し、
R7は、C1-6アルキル基を表し、
Qは、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)又は式(Q-7):
R8a及びR8bは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、C1-6アルキル基又はC1-6アルコキシ基を表し、
R8c、R8d及びR8eは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、フェニル基、1~3個のフッ素原子で置換されていてもよいC1-6アルキル基、C1-6アルコキシ基又はC1-6アルキルエステル基を表す)
で表される基を表す)
で表される基を表し、
R3は、-(CH2)u-COR9を表し、
uは1又は2を表し、
R4及びR9は、それぞれ独立して、水酸基又はADを表し、
ADは、Glu、Asp又はLysを表し、ADのN末端窒素原子は隣接するカルボニル基と共にアミド結合を形成しており、
ただし、R4又はR9がADであるとき、nは0又は1であり、
R5a及びR5bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表す)
で表される基を表し、
R1は、水素原子又は(AB)mを表し、
ABは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ABが複数ある場合、それぞれのABは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AB同士はアミド結合を介して結合しており、
mは1~9の整数を表し、
R2は、水酸基又は(AC)gを表し、
ACは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ACが複数ある場合、それぞれのACは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AC同士はアミド結合を介して結合しており、
gは1~9の整数を表し、
ただし、R1が(AB)m且つR2が(AC)gであるとき、mとgの和は2~10の整数である]
で表される、項1に記載の化合物又はその塩。
R7が、メチル基又はイソプロピル基であり、
Qが、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)又は式(Q-7)である、
項2に記載の化合物又はその塩。
pが1であり、
Wが、式(W-1)であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)であり、
R8a及びR8bが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子又はメトキシ基であり、
R8c、R8d及びR8eが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、メチル基、トリフルオロメチル基又はメトキシ基であり、
R4及びR9が、水酸基である、
項2又は3に記載の化合物又はその塩。
Zが、式(Z-1)、式(Z-2)又は式(Z-3)であり、
Wが、式(W-1)であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)であり、
R8a及びR8bが、水素原子であり、
R8c、R8d及びR8eが、水素原子であり、
R4及びR9が、水酸基である、
項2~4のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
bが2である、項2~5のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
式(1)が、式(1-2):
bは1~5の整数を表し、
Zは、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)又は式(Z-11):
nは0~2の整数を表し、
pは1~3の整数を表し、
AAは、グルタミン酸残基(Glu)、アスパラギン酸残基(Asp)又はリシン残基(Lys)を表し、AAが複数ある場合、それぞれのAAは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AA同士はアミド結合を介して結合しており、
(AA)n又は(AA)pのN末端窒素原子はカルボニル基(a)と共にアミド結合を形成しており、
Gは、-O-又は-NH-を表し、
Wは、式(W-1)又は式(W-2):
R6a及びR6bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表し、
R7は、C1-6アルキル基を表し、
Qは、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)又は式(Q-7):
R8a及びR8bは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、C1-6アルキル基又はC1-6アルコキシ基を表し、
R8c、R8d及びR8eは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、フェニル基、1~3個のフッ素原子で置換されていてもよいC1-6アルキル基、C1-6アルコキシ基又はC1-6アルキルエステル基を表す)
で表される基を表す)
で表される基を表し、
R5a及びR5bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表す)
で表される基を表し、
R1は、水素原子又は(AB)mを表し、
ABは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ABが複数ある場合、それぞれのABは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AB同士はアミド結合を介して結合しており、
mは1~9の整数を表し、
R2は、水酸基又は(AC)gを表し、
ACは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ACが複数ある場合、それぞれのACは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AC同士はアミド結合を介して結合しており、
gは1~9の整数を表し、
ただし、R1が(AB)m且つR2が(AC)gであるとき、mとgの和は2~10の整数である]
で表される、項1に記載の化合物又はその塩。
Zが、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)又は式(Z-9)であり、
R7が、メチル基又はイソプロピル基であり、
Qが、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)又は式(Q-7)である、
項7に記載の化合物又はその塩。
Zが、式(Z-6)又は式(Z-7)であり、
Wが、式(W-1)であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)であり、
R8a及びR8bが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子又はメトキシ基であり、
R8c、R8d及びR8eが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、メチル基、トリフルオロメチル基又はメトキシ基である、
項7又は8に記載の化合物又はその塩。
R8a及びR8bが、水素原子であり、
R8c、R8d及びR8eが、水素原子である、
項7~9のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
bが3である、項7~10のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
(AB)mが、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)、バリン残基(Val)、*1-(Glu)-(Gly)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)又は*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val)であり、
ここで*1末端はシステイン残基とアミド結合していることを表し、
(AC)gが、グリシン残基(Gly)又はプロリン残基(Pro)である、
項1~11のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
(AB)mが、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)であり、
(AC)gが、グリシン残基(Gly)である、
項1~11のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
R1が、水素原子であり、
R2が、水酸基である、
項1~13のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
nが0又は1である、項1~14のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
Ala…アラニン、Arg…アルギニン、Asn…アスパラギン、Asp…アスパラギン酸、Cys…システイン、Gln…グルタミン、Glu…グルタミン酸、Gly…グリシン、His…ヒスチジン、Ile…イソロイシン、Leu…ロイシン、Lys…リシン、Met…メチオニン、Phe…フェニルアラニン、Pro…プロリン、Ser…セリン、Trp…トリプトファン、Thr…トレオニン、Tyr…チロシン、Val…バリン
(1-A)
式(1)において、
bが、2、3又は4であり、
Xが、-NH-であり、
Zが、式(Z-1)、式(Z-2)又は式(Z-3)で表される基であり、
Wが、式(W-1)で表される基であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)で表される基であり、
R8a及びR8bが、水素原子であり、
R8c、R8d及びR8eが、水素原子であり、
R6aが、メチル基であり、
R6bが、水素原子であり、
nが、0であり、
R3が、-(CH2)u-COR9であり、
uが、1又は2であり、
R9が、水酸基であり、
R4が、水酸基であり、
R1が、水素原子又は(AB)mであり、
(AB)mが、Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr、Val、*1-(Glu)-(Gly)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)又は*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val)であり、
R2が、水酸基、Gly又はProである、
化合物又はその塩。
(1-B)
式(1)において、
bが、2、3又は4であり、
Xが、-NH-であり、
Zが、式(Z-1)、式(Z-2)又は式(Z-3)で表される基であり、
Wが、式(W-1)で表される基であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)で表される基であり、
R8a及びR8bが、水素原子であり、
R8c、R8d及びR8eが、水素原子であり、
R6aが、メチル基であり、
R6bが、水素原子であり、
nが、0又は1であり、
AAが、Glu又はAspであり、
R3が、-(CH2)u-COR9であり、
uが、1又は2であり、
R9が、水酸基であり、
R4が、水酸基であり、
R1が、水素原子又は(AB)mであり、
(AB)mが、Ala、Arg、Asn、Asp、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr、Val又は*1-(Glu)-(Gly)であり、
R2が、水酸基である、
化合物又はその塩。
(1-C)
式(1)において、
bが、2、3、4又は5であり、
Xが、-CO-であり、
Zが、式(Z-6)又は式(Z-7)で表される基であり、
Wが、式(W-1)又は式(W-2)で表される基であり、
R7が、イソプロピル基であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)で表される基であり、
R8a及びR8bが、水素原子であり、
R8c、R8d及びR8eが、水素原子であり、
R6aが、メチル基であり、
R6bが、水素原子であり、
nが、0又は1であり、
AAが、Glu又はAspであり、
R3が、-(CH2)u-COR9であり、
uが、1又は2であり、
R9が、水酸基であり、
R4が、水酸基であり、
R1が、水素原子であり、
R2が、水酸基である、
化合物又はその塩。
(1-D)
式(1)において、
bが、2、3、4又は5であり、
Xが、-NH-であり、
Zが、式(Z-4)又は式(Z-5)で表される基であり、
pが、1であり、
AAが、Glu、Asp又はLysであり、
R5aが、メチル基であり、
R5bが、水素原子であり、
R1が、水素原子であり、
R2が、水酸基である、
化合物又はその塩。
(1-E)
式(1)において、
bが、2、3、4又は5であり、
Xが、-CO-であり、
Zが、式(Z-8)又は式(Z-9)で表される基であり、
Gが、-O-又は-NH-であり
pが、1であり、
AAが、Glu、Asp又はLysであり、
R5aが、メチル基であり、
R5bが、水素原子であり、
R1が、水素原子であり、
R2が、水酸基である、
化合物又はその塩。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-1)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、Qが式(Q-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基であり、R3が-(CH2)u-COOHである場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物a2は、化合物a1を、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、種々のメチル化試薬を反応させることにより製造することができる。メチル化試薬としては、例えば、ハロゲン化メチル等が挙げられ、好ましくはヨウ化メチル、臭化メチル、塩化メチル等が挙げられる。塩基としては、好ましくはカリウムヘキサメチルジシラジドが挙げられる。溶媒としては、好ましくはテトラヒドロフランが挙げられる。反応時間は、通常5分~48時間であり、好ましくは10分~2時間である。反応温度は、通常-78℃~100℃であり、好ましくは-78℃~10℃である。本工程は、J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a3は、化合物a2より、上記A-1工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物a4は、化合物a3を、適当な溶媒中で、適当な還元剤と反応させることにより製造することができる。還元剤としては、通常の有機合成反応に用いられる還元剤から適宜選択されるが、好ましくは水素化ジイソブチルアルミニウムが挙げられる。溶媒としては、好ましくはジエチルエーテルが挙げられる。反応時間は、通常5分~48時間であり、好ましくは10分~24時間である。反応温度は、通常-78℃~100℃であり、好ましくは-78℃~50℃である。本工程は、J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a5は、化合物a4を、適当な溶媒中、適当な酸化剤を用いて酸化することにより製造することができる。酸化剤としては、通常の有機合成反応に用いられる酸化剤から適宜選択することができるが、好ましくは過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムが挙げられる。溶媒としては、好ましくはジクロロメタンが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常-78℃~100℃であり、好ましくは、-78℃~50℃である。本工程は、J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a6は、化合物a5のアルデヒドを、適当な溶媒中、α-アミノシアノ化することにより製造することができる。溶媒としては、好ましくはトルエン及びジクロロメタンが挙げられる。反応時間は、通常5分~96時間であり、好ましくは24時間~72時間である。反応温度は、通常0℃~200℃であり、好ましくは0℃~100℃である。本工程は、Org. Lett. 2002, 4, 695-697等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a7は、化合物a6を、適当な塩基存在下又は非存在下、適当な溶媒中で、適当な酸化剤を用いて製造することができる。酸化剤としては、通常の有機合成反応で用いられる酸化剤から適宜選択することができるが、好ましくは過酸化水素が挙げられる。塩基としては、好ましくは炭酸カリウムが挙げられる。溶媒としては、好ましくはメタノールが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~200℃であり、好ましくは0℃~60℃である。本工程は、J. Org. Chem. 2001, 66, 7355-7364等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a8は、化合物a7を、適当な溶媒中、適当な触媒存在下で、還元剤を用いて還元することにより製造することができる。還元剤としては、通常の有機合成反応で用いられる還元剤から適宜選択することができるが、好ましくは水素、ギ酸アンモニウム等のギ酸の塩又はヒドラジンが挙げられる。触媒としては、パラジウム、ニッケル、ロジウム、コバルト、白金等の遷移金属、その塩若しくはその錯体又は上記遷移金属をポリマー等の担体に担持させたものが挙げられる。溶媒としては、好ましくはエタノール又はメタノールが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~200℃であり、好ましくは0℃~100℃である。本工程は、J. Org. Chem. 2001, 66, 7355-7364等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a9は、化合物a8のアミノ基を保護基PXで保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物a11は、化合物a9と種々のアシル化試薬(例えば、化合物a10)を、適当な塩基存在下又は非存在下、適当な溶媒中で、反応させることにより製造することができる。アシル化試薬としては、例えば、カルボン酸ハロゲン化物、カルボン酸無水物等が挙げられ、好ましくはジ-tertブチルジカルボネートが挙げられる。塩基としては、好ましくはジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。溶媒としては、好ましくはクロロホルムが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~200℃であり、好ましくは0℃~50℃である。
化合物a12は、化合物a11を、適当な溶媒中、適当なアルカリ金属アルコキシド類と反応させることにより製造することができる。アルカリ金属アルコキシド類としては、通常の有機合成反応で用いられるアルカリ金属アルコキシド類から適宜選択することができるが、好ましくはリチウムメトキシド又はリチウムエトキシドが挙げられる。溶媒としては、好ましくはメタノール又はエタノールが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~6時間である。反応温度は、通常-78℃~200℃であり、好ましくは-78℃~50℃である。
化合物a13は、化合物a12に、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、種々のメチル化試薬を反応させることにより製造することができる。メチル化試薬としては、例えば、ハロゲン化メチル等が挙げられ、好ましくはヨウ化メチル、臭化メチル、塩化メチル等が挙げられる。塩基としては、好ましくは水素化ナトリウムが挙げられる。溶媒としては、好ましくはテトラヒドロフランが挙げられる。反応時間は、通常5分~48時間であり、好ましくは10分~2時間である。反応温度は、通常-78℃~100℃であり、好ましくは-78℃~10℃である。
化合物a14は、化合物a13のエステルを、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、加水分解することにより製造できる。塩基としては、好ましくは水酸化リチウムが挙げられる。溶媒としては、好ましくは水又はメタノールが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~200℃、好ましくは0℃~100℃である。
化合物a16は、化合物a14と化合物a15を、適当な溶媒中、適当な塩基存在下で、種々の縮合剤を用いて、縮合することにより製造することができる。縮合剤としては、通常の有機合成反応に用いられる種々の縮合剤を使用することができるが、好ましくは(1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド又はブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートが挙げられる。また、必要に応じて、縮合反応の効率を向上させるために、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール等のカルボニル活性化試薬を共に用いることができる。塩基としては、好ましくはジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。溶媒としては、好ましくはN,N-ジメチルホルムアミドが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常-78℃~200℃であり、好ましくは0℃~100℃である。本工程は、Tetrahedron Lett., 1997, 38, 317-320等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a17は、化合物a16のエステルを、上記A-12工程に記載の方法に準じて加水分解することにより、製造することができる。本工程は、Tetrahedron Lett., 1997, 38, 317-320等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物a18は、化合物a17とN-ヒドロキシスクシンイミドを、適当な溶媒中、適当な塩基存在下で、種々の縮合剤を用いて反応させることにより製造することができる。縮合剤としては、通常の有機合成反応に用いられる種々の縮合剤を使用することができるが、好ましくは(1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド又はブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートが挙げられる。また、必要に応じて、反応の効率を向上させるために、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール等のカルボニル活性化試薬を共に用いることができる。塩基としては、好ましくはジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。溶媒としては、好ましくはN,N-ジメチルホルムアミドが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常-78℃~200℃であり、好ましくは0℃~100℃である。
化合物a19は、化合物a18を、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、アミノ酸又はペプチドのエステル体と反応させることにより製造することができる。塩基としては、好ましくはジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。溶媒としては、好ましくはN,N-ジメチルホルムアミドが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~200℃であり、好ましくは0℃~100℃である。
化合物a20は、化合物a19とアミノアルキルマレイミド化合物を、上記A-13工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。
化合物a21は、化合物a20のアミノ基の保護基PXの脱保護及びエステル(-COORb)の加水分解により製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
また、(AA)nがエステル又は保護されたアミノ基を有する場合、必要に応じて、本脱保護工程でエステルの加水分解及びアミノ基の保護基の脱保護を行なうこともできる。
化合物A1は、化合物a21とシステイン誘導体を、適当な溶媒中で反応させることで製造することができる。溶媒としては、好ましくは水、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミドが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~約200℃であり、好ましくは0℃~40℃である。
化合物a22は、化合物a21とホルムアルデヒドを、適当な溶媒中で、適当な還元剤とともに反応させることで製造することができる。溶媒としては、好ましくはアセトニトリルが挙げられる。還元剤としては、通常の有機合成反応に用いられる種々の還元剤を使用することができるが、好ましくは水素化トリアセトキシホウ素ナトリウムが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~約200℃であり、好ましくは0℃~100℃である。
化合物A2は、化合物a22より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-1)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、Qが式(Q-2)で表される基であり、R8c、R8d及びR8eが水素原子であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基であり、R3が-(CH2)u-COOHである場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物b2は、化合物b1に、種々のルイス酸存在下、ベンゼンを反応させることにより製造することができる。ルイス酸としては、例えば、ハロゲン化ホウ素、ハロゲン化アルミニウム、ハロゲン化ガリウム、ハロゲン化鉄、ハロゲン化チタン等が挙げられ、好ましくは塩化アルミニウム、塩化鉄等が挙げられる。反応時間は、通常5分~48時間であり、好ましくは30分~4時間である。反応温度は、通常-78℃~200℃であり、好ましくは50℃~150℃である。本工程は、J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物b3は、化合物b2を、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、種々のカルボン酸ハロゲン化物と反応させた後、アルカリ金属化4-アルキル-2-オキサゾリジノンを反応させることにより製造することができる。塩基としては、好ましくはトリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。溶媒としては、好ましくはテトラヒドロフランが挙げられる。カルボン酸ハロゲン化物としては、例えば、カルボン酸塩化物等が挙げられ、好ましくはピバロイルクロライド等が挙げられる。アルカリ金属化4-アルキル-2-オキサゾリジノンとしては、4-アルキル-2-オキサゾリジノンリチウム、4-アルキル-2-オキサゾリジノンナトリウム等が挙げられ、好ましくは4-イソプロピル-2-オキサゾリジノンリチウムが挙げられる。反応時間は、通常5分~48時間であり、好ましくは10分~24時間である。反応温度は、通常-78℃~100℃であり、好ましくは-78℃~50℃である。本工程は、J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物b4は、化合物b3を、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、種々のアジド化試薬と反応させることにより製造することができる。アジド化試薬としては、例えば、アジ化ナトリウム、トリメチルシリルアジド、ジフェニルリン酸アジド等が挙げられ、好ましくはトリメチルシリルアジドが挙げられる。塩基としては、好ましくはカリウムヘキサメチルジシラジドが挙げられる。溶媒としては、好ましくはテトラヒドロフランが挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常-78℃~200℃であり、好ましくは-78℃~75℃である。本工程は、J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物b5は、化合物b4より、上記A-7工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b6は、化合物b5より、上記A-8工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b7は、化合物b6を、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、適当な酸化剤を用いることにより製造することができる。塩基としては、好ましくは水酸化リチウムが挙げられる。溶媒としては、好ましくはメタノール、テトラヒドロフラン又は水が挙げられる。酸化剤としては、通常の有機合成反応で用いられる酸化剤から適宜選択することができるが、好ましくは過酸化水素が挙げられる。反応時間は、通常5分~72時間であり、好ましくは30分~24時間である。反応温度は、通常0℃~200℃であり、好ましくは0℃~60℃である。本工程は、J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199等に記載されている方法に準じて行うことができる。
化合物b8は、化合物b7に、適当な塩基存在下、適当な溶媒中で、種々のアルキル化試薬を反応させることにより製造することができる。アルキル化試薬としては、例えば、ハロゲン化アルキル等が挙げられ、好ましくはヨウ化アルキル、臭化アルキル、塩化アルキル等が挙げられる。塩基としては、好ましくは炭酸ナトリウム、炭酸カリウムが挙げられる。溶媒としては、好ましくはN,N-ジメチルホルムアミドが挙げられる。反応時間は、通常5分~48時間であり、好ましくは10分~2時間である。反応温度は、通常-78℃~100℃であり、好ましくは-10℃~25℃である。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物b9は、化合物b8より、上記A-11工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b10は、化合物b9より、上記A-12工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b12は、化合物b10と化合物b11より、上記A-13工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b13は、化合物b12のエステルを、上記A-12工程に記載の方法に準じて加水分解することにより、製造することができる。
化合物b14は、化合物b13より、上記A-15工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b15は、化合物b14より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b16は、化合物b15より、上記A-17工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b17は、化合物b16より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物B1は、化合物b17より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物b18は、化合物b17より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物B2は、化合物b18より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-1)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基であり、R3が-(CH2)u-COOHである場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物c2は、化合物c1より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物c3は、化合物c2より、上記A-15工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物c4は、化合物c3より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物c5は、化合物c4より、上記A-17工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物c6は、化合物c5より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物C1は、化合物c6より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物c7は、化合物c6より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物C2は、化合物c7より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-1)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基であり、R3が-(CH2)u-COR9であり、R9がADであり、nが1である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物d2は、化合物d1とアスパラギン酸ジエステル又はグルタミン酸ジエステルを、上記A-13工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。
化合物d3は、化合物d2のエステルを、上記A-12工程に記載の方法に準じて加水分解することにより、製造することができる。
化合物d4は、化合物d3と(AD)を、上記A-13工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。
化合物d5は、化合物d4のエステルの加水分解及びアミノ基の保護基の脱保護を、上記A-18工程に記載の方法に準じて行うことにより、製造することができる。また、(AD)がエステル又は保護されたアミノ基を有する場合、必要に応じて、本脱保護工程でエステルの加水分解及びアミノの保護基の脱保護を行なうこともできる。
化合物d7は、化合物d5と化合物d6より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物d8は、化合物d7より、上記A-17工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物d9は、化合物d8より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物D1は、化合物d9より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物d10は、化合物d9より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物D2は、化合物d10より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-2)又は式(Z-3)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基であり、R4が水酸基である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物e2は、化合物e1より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物e3は、化合物e2より、上記A-17工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物e4は、化合物e3より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物E1は、化合物e4より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物e5は、化合物e4より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物E2は、化合物e5より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-2)又は式(Z-3)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基であり、R4が水酸基である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物f2は、化合物f1より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物f3は、化合物f2より、上記A-15工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物f4は、化合物f3より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物f5は、化合物f4より、上記A-17工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物f6は、化合物f5より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物F1は、化合物f6より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物f7は、化合物f6より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物F2は、化合物f7より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-2)又は式(Z-3)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基であり、R4がADである場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物g2は、化合物g1とアスパラギン酸ジエステル又はグルタミン酸ジエステルを、上記A-13工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。
化合物g3は、化合物g2のエステルを、上記A-12工程に記載の方法に準じて加水分解することにより、製造することができる。
化合物g4は、化合物g3と(AD)より、上記A-13工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物g5は、化合物g4のエステルの加水分解及びアミノの保護基の脱保護を、上記A-18工程に記載の方法に準じて行うことにより、製造することができる。また、(AD)がエステル又は保護されたアミノ基を有する場合、必要に応じて、本脱保護工程でエステルの加水分解及びアミノ基の保護基の脱保護を行なうこともできる。
化合物g7は、化合物g5と化合物g6より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物g8は、化合物g7より、上記A-17工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物g9は、化合物g8より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物G1は、化合物g9より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物g10は、化合物g9より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物G2は、化合物g10より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-C(O)-であり、Zが式(Z-6)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物h2は、化合物h1より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物h3は、化合物h2とリシン誘導体を、上記A-13工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。
化合物h4は、化合物h3より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物h6は、化合物h4と化合物h5より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物H1は、化合物h6より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物h7は、化合物h6より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物H2は、化合物h7より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-C(O)-であり、Zが式(Z-7)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、R6aがメチル基であり、R6bが水素原子又はメチル基である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物i2は、化合物i1より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物i3は、化合物i2とリシン誘導体を、上記A-13工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。
化合物i4は、化合物i3より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物i6は、化合物i4と化合物i5より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物I1は、化合物i6より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物i7は、化合物i6より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物I2は、化合物i7より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物j6は、式(1)において、Xが-NH-であり、Zが式(Z-1)、式(Z-2)、又は式(Z-3)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり、Qが式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)又は式(Q-6)で表される基である化合物J1の、製造中間体である。化合物j6は、例えば、下記の製法によって製造することができる。また、化合物J1は、化合物j6より、製造法AのA-16工程からA-21工程に記載の製造法に準じて、製造することができる。
化合物j2は、例えば、Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物j3は、例えば、Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物j4は、例えば、Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物j5は、化合物j4より、製造法AのA-14工程に準じて製造することができる。
化合物j6は、化合物j5より、製造法AのA-15工程に準じて製造することができる。
Xが-C(O)-であり、Zが式(Z-10)で表される基である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物k2は、化合物k1より、上記A-16に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物k3は、化合物k2より、上記A-18に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物k4は、化合物k3より、上記A-13又はA-16に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物K1は、化合物k4より、上記A-19に記載されている方法に準じて製造することができる。
Xが-C(O)-であり、Zが式(Z-11)で表される基である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物l2は、化合物l1のアミノ基を、保護基Pxで保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物l3は、化合物l2より、上記A-13工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物l4は、化合物l3より、上記A-14工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物l5は、化合物l4より、上記A-13工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物l6は、化合物l5の保護基Pxを脱保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法、Tetrahedron Lett.45 (2004) 495-499等に準じて行うことができる。また、(AA)pがエステル又は保護されたアミノ基を有する場合、必要に応じて、本脱保護工程でエステルの加水分解及びアミノ基の保護基の脱保護を行なうこともできる。
化合物l7は、化合物l6より、上記A-13又は上記A-16工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物L1は、化合物l7より、上記A-19工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物m7は、式(1)において、Xが-NH-であり、Zが式(Z-1)、式(Z-2)、又は式(Z-3)で表される基であり、Wが式(W-1)で表される基であり,Qが式(Q-7)で表される基である化合物Ma1の製造中間体である。化合物m7は、例えば、下記の製法によって製造することができる。また、化合物Ma1は、化合物m7より、製造法AのA-16工程からA-21工程に記載の製造法に準じて、製造することができる。
化合物m2は、例えば、Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物m3は、例えば、Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物m4は、例えば、J. Med. Chem. 2004, 47, 4774-4786等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物m5は、例えば、Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物m6は、化合物m5より、製造法AのA-14工程に準じて製造することができる。
化合物m7は、化合物m6より、製造法AのA-15工程に準じて製造することができる。
化合物n5は、式(1)において、Xが-NH-であり、Zが式(Z-1)、式(Z-2)又は式(Z-3)で表される基であり、Wが式(W-2)で表される基である化合物N1の、製造中間体である。化合物n5は、例えば、下記の製法によって製造することができる。また、化合物N1は、化合物n5より、製造法AのA-16工程からA-19工程に記載の製造法に準じて、製造することができる。
化合物n2は、例えば、国際公開第2003/082268号等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物n3は、化合物n2より、A-13工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物n4は、化合物n3より、A-14工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物n5は、化合物n4より、製造法AのA-15工程に準じて製造することができる。
Xが-NH-であり、Zが式(Z-4)又は式(Z-5)で表される基である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物o2は、化合物o1より、例えば、国際公開第2004/026293号、Bioorg. Med. Chem.Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物o3は、化合物o2より、上記A-8工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o4は、化合物o3より、上記A-11工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o5は、化合物o4より、例えば、国際公開第2004/026293号に記載されている方法等により製造できる。
化合物o6は、化合物o5より、例えば、国際公開第2004/026293号等に記載されている方法により製造できる。
化合物o7は、化合物o6より、例えば、国際公開第2004/026293号等に記載されている方法により製造できる。
化合物o8は、化合物o7のカルボキシル基を保護基PZで保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物o9は、化合物o8より、上記A-12工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o10は、化合物o9より、上記A-13工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o11は、化合物o10より、上記A-14工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o12は、化合物o11より、上記A-15工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o13は、化合物o12より、上記A-16工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o14は、化合物o13より、保護基Pzを脱保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物o15は、化合物o14より、上記A-17工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物O1は、化合物o15より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o16は、化合物o13より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o17は、化合物o16より、上記O-13工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物o18は、化合物o17より、上記O-14工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物O2は、化合物o18より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-C(O)-であり、Zが式(Z-8)又は式(Z-9)で表される基であり、Gが-O-である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物p2は、化合物p1より、例えば国際公開第2004/026293号等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物p3は、化合物p2より、保護基Pzを脱保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物p4は、化合物p3より、例えば国際公開第2004/026293号等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物p5は、化合物p4のアミノ基及び水酸基を、保護基Px及び保護基Pzでそれぞれ保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物p6は、化合物p5より、保護基Pzを脱保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法やTetrahedron Lett.45 (2004) 495-499等に準じて行うことができる。
化合物p7は、化合物p6より、A-13工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物p8は、化合物p7より、上記A-18工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物p9は、化合物p8より、上記A-13工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。また、(AA)pがエステル又は保護されたアミノ基を有する場合、縮合反応後、必要に応じて、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて、エステルの加水分解及びアミノ基の保護基の脱保護を行なうこともできる。
化合物p10は、化合物p9とスクシンイミド誘導体から、上記A-16工程に記載の方法に準じて縮合することにより、製造することができる。
化合物P1は、化合物p10より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物p11は、化合物p10より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物P2は、化合物p11より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
Xが-C(O)-であり、Zが式(Z-8)又は式(Z-9)で表される基であり、Gが-NH-である場合、式(1)で表される化合物は、例えば、下記の製法によって製造することができる。
化合物t2は、化合物t1より、例えば国際公開第2004/026293号、Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 (2004) 5317-5322等に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物t3は、化合物t2より、上記A-8工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物t4は、化合物t3より、例えば、国際公開第2016/123582号等に記載されている方法により製造できる。
化合物t5は、化合物t4のアミノ基を保護基Pyで保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法等に準じて行うことができる。
化合物t6は、化合物t5より、上記A-13工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物t7は、化合物t6より、上記A-14工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物t8は、化合物t7より、上記A-13工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物t9は、化合物t8の保護基Px及びPyを脱保護することにより製造することができる。本工程は、Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年)に記載されている方法、Tetrahedron Lett.45 (2004) 495-499等に準じて行うことができる。また、(AA)pがエステル又は保護されたアミノ基を有する場合、必要に応じて、本脱保護工程でエステルの加水分解及びアミノ基の保護基の脱保護を行なうこともできる。
化合物t10は、化合物t9より、上記A-13又はA-16工程に記載されている方法に準じて製造することができる。
化合物T1は、化合物t10より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物t11は、化合物t10より、上記A-20工程に記載の方法に準じて製造することができる。
化合物T2は、化合物t11より、上記A-19工程に記載の方法に準じて製造することができる。
検出機器:島津 LCMS-IT-TOF
Column:Phenomenex Kinetex(1.7μm C18,50mm×2.10mm)
Solvent:A液:0.1% HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分;A/B=1:99
0.0-1.4分 Linear gradient from A 1% to 95%
1.4-1.6分;A/B=95:5
1.6-2.0分;A/B=1:99
Flow rate:1.2mL/分
UV:220/254nm
カラム温度:40℃
検出機器:島津 LCMS-IT-TOF
Column:Phenomenex Kinetex(1.7μm C18,50mm×2.10mm)
Solvent:A液:0.1% HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分;A/B=10:90
0.0-1.4分 Linear gradient from A 10% to 90%
1.4-1.6分;A/B=90:10
1.6-2.0分;A/B=10:90
Flow rate:1.2mL/分
UV:220/254nm
カラム温度:40℃
検出機器:島津 LCMS-IT-TOF
Column:Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
Solvent:A液:0.1 % HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分;A/B=1:99
0.0-1.4分 Linear gradient from A 1% to 95%
1.4-1.6分;A/B=95:5
1.6-2.0分;A/B=1:99
Flow rate:1.2mL/分
UV:220/254nm
カラム温度:40℃
検出機器:島津 LCMS-IT-TOF
Column:Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
Solvent:A液:0.1% HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分;A/B=10:90
0.0-1.4分 Linear gradient from A 10% to 90%
1.4-1.6分;A/B=90:10
1.6-2.0分;A/B=10:90
Flow rate:1.2mL/分
UV:220/254nm
カラム温度:40℃
検出機器:ACQUITY(登録商標)SQdetecter(ウォーターズ社)
HPLC:ACQUITY(登録商標)system
Column:Waters ACQUITY UPLC(登録商標)BEH C18(1.7μm,2.1mm×30mm)
Solvent:A液:0.06%ギ酸/CH3CN、B液:0.06%ギ酸/H2O
Gradient Condition:0.0-1.3min Linear gradient from A 2% to 96%
Flow rate:0.8mL/分
UV:220/254nm
カラム温度:25℃
検出機器:島津 LCMS-IT-TOF
Column:Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
Solvent:A液:0.1% HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分;A/B=10:90
0.0-1.4分 Linear gradient from A 10% to 95%
1.4-1.6分;A/B=95:5
1.6-2.0分;A/B=10:90
Flow rate:1.2mL/分
UV:220/254nm
カラム温度:40℃
検出機器:島津 LCMS-IT-TOF
Column:Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
Solvent:A液:0.1% HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分;A/B=40:60
0.0-1.4分 Linear gradient from A 40% to 95%
1.4-1.6分;A/B=95:5
1.6-2.0分;A/B=5:95
Flow rate:1.2mL/分
UV:220/254nm
カラム温度:40℃
HPLC:Shimadzu LC-10A series
Column:nonporous TSKgel Butyl-NPR column(TosohBioscience,2.5μm,35mm×4.6mm)
Solvent:A液:1.5mol/L硫酸アンモニウム,25mmol/Lリン酸ナトリウム水溶液(pH6.95)、B液:25%イソプロパノール/25 mmol/Lリン酸ナトリウム水溶液(pH6.95)
Gradient Condition:
0.0分;A/B=100:0
0.0-12.0分 Linear gradient from B 0% to 100%
12.1-18.0分;A/B=100:0
Flowrate:0.8mL/分
UV:230nm
カラム温度:25℃
tert-ブチル(6S,9S,12S,13E,17R)-9-tert-ブチル-17-(3-{[2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロ-ル-1-イル)エチル]アミノ}-3-オキソプロピル)-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4、7、10、15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキソ-5,8,11,16-テトラアザオクタデカ-13-エン-18-カルボン酸エステル
窒素雰囲気下、-78℃のインドール-3-酢酸メチルエステル(3.8g)のテトラヒドロフラン(87mL)溶液にカリウムヘキサメチルジシラジド(1mol/Lテトラヒドロフラン溶液、65.5mL)を滴下した後、0℃で2時間撹拌した。反応液を-78℃に冷却後、ヨウ化メチル(23g)を滴下した後、0℃で3時間撹拌した。反応終了後、水を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりメチル 2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパノエート(3.95g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.60 (3H, d, J =7.1 Hz),3.67 (3H, s), 3.76 (3H, s), 4.02 (1H, q, J = 7.1 Hz), 7.00 (1H, s),7.12 (1H, t,J = 7.8 Hz), 7.23 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.29 (1H, d, J = 7.8 Hz),7.66(1H, d, J= 7.8Hz).
窒素雰囲気下、-78℃のメチル 2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパノエート(3.94g)のテトラヒドロフラン(200mL)溶液にカリウムヘキサメチルジシラジド(1mol/Lテトラヒドロフラン溶液、27.7mL)を滴下した後、0℃で2時間撹拌した。反応液を-78℃に冷却後、ヨウ化メチル(15.4g)を滴下した後、0℃で3時間撹拌した。反応終了後、水を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりメチル 2-メチル-2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパノエート(3.59g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.66 (6H,s), 3.61 (3H,s), 3.73 (3H,s), 6.91 (1H,s), 7.06 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.19 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.27 (1H,d, J = 8.0 Hz), 7.61 (1H, d, J =7.9 Hz).
窒素雰囲気下、-78℃のメチル 2-メチル-2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパノエート(3.59g)のジエチルエーテル(169mL)及びジクロロメタン(47mL)溶液に水素化ジイソブチルアルミニウム(1mol/L n-ヘキサン溶液、38.8mL)を滴下した後、0℃で1時間撹拌した。反応終了後、水を加えた後、25℃の反応混合物を、飽和酒石酸カリウムナトリウム水溶液を加えた後、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより2-メチル-2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-1-オール(3.14g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.42 (6H,s), 3.74 (3H,s), 3.77 (2H,s), 6.87 (1H,s), 7.07 (1H,t, J = 7.9 Hz), 7.20 (1H,t, J = 7.9 Hz), 7.29(1H,d, J = 8.0 Hz), 7.75 (1H,d,J = 8.0 Hz).
窒素雰囲気下、2-メチル-2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-1-オール(3.14g)、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム(271mg)、N-メチルモルホリン-N-オキシド(3.26g)及びモレキュラーシーブ4A(7.7g)のジクロロメタン(110mL)混合溶液を、25℃で1時間撹拌した。反応終了後、セライトにて濾過後、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより2-メチル-2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパナール(2.4g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.53 (6H,s), 3.77 (3H,s), 6.94 (1H,s), 7.07 (1H,t, J = 8.0 Hz), 7.22 (1H,t, J = 8.0 Hz), 7.30 (1H,d, J = 8.0 Hz), 7.53(1H,d, J = 8.0 Hz), 9.47 (1H,s).
窒素雰囲気下、2-メチル-2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパナール(2.4g)及び(R)-(-)-2-フェニルグリシノール(1.63g)のトルエン(47mL)溶液を1.5時間加熱還流し、ディーン・スターク装置で水を留去した後、溶媒を留去した。窒素雰囲気下、残渣に0℃のジクロロメタン(69mL)を加えた後、トリメチルシリルシアニド(2.36g)を加え、25℃で96時間撹拌した。反応溶液にフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウム(1mol/Lテトラヒドロフラン溶液、1mL)を加え、さらに30分間撹拌した後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより(2S)-2-{[(1R)-2-ヒドロキシ-1-フェニルエチル]アミノ}-3-メチル-3-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)ブタンニトリル(2.74g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.64 (3H,s), 1.65 (3H,s), 3.49-3.55 (1H,m), 3.73 (1H,dd, J = 10.9, 4.2 Hz), 3.79 (1H,s), 3.80 (3H,s), 4.05 (1H,dd, J = 7.9, 3.6 Hz), 6.96-7.00 (2H,m), 7.11(2H,d, J = 8.0 Hz), 7.21-7.40 (6H,m).
(2S)-2-{[(1R)-2-ヒドロキシ-1-フェニルエチル]アミノ}-3-メチル-3-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)ブタンニトリル(2.74g)、ジメチルスルホキシド(6.16g)及び炭酸カリウム(10.9g)のメタノール(50mL)及び水(2.1mL)懸濁液に30%過酸化水素水(8.94mL)を0℃で加えた後、45℃で1.5時間撹拌した。反応終了後、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を、水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することによりNα-[(1R)-2-ヒドロキシ-1-フェニルエチル]-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(2.32g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.49 (3H,s),1.51 (3H, s), 2.06-2.14 (1H, br), 2.37 (1H,dd, J = 6.0, 6.0 Hz), 3.44-3.50 (1H, m),3.50-3.54 (1H, m), 3.56-3.63(m, 2H), 3.75 (3H, s), 5.52 (1H, brs), 6.14 (1H, brs), 6.71-6.73 (2H, m), 6.81-6.85(2H, m), 6.97-7.00 (2H, m), 7.10-7.18 (2H, m), 7.24-7.28 (2H, m).
Nα-[(1R)-2-ヒドロキシ-1-フェニルエチル]-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(2.32g)のメタノール(65mL)溶液に水酸化パラジウム/炭素(2.8g)を加え、水素雰囲気下、室温にて3時間攪拌した。セライトにて濾過後、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することによりβ,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(1.27g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6):1.24 (2H, brs), 1.28 (3H, s), 1.42(3H, s), 3.68 (1H, s), 3.71 (3H, s), 6.93-7.00 (2H, m), 7.06 (1H, s), 7.11 (1H,t, J = 7.7 Hz), 7.29 (1H, brs), 7.36 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.88 (1H, d, J = 8.2Hz).
β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(1.27g)、炭酸水素ナトリウム(522mg)、ジ-tert-ブチルジカルボネート(1.35g)、テトラヒドロフラン(13mL)、クロロホルム(13mL)及び水(6.5mL)の混合液を25℃にて16時間攪拌した。反応終了後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することによりNα-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(1.80g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.33 (3H, s), 1.47 (9H, s),1.50 (3H, s), 3.73 (3H, d, J = 1.3 Hz), 4.51 (1H, brs), 4.86 (1H, brs), 5.02(1H, brd, J = 8.2 Hz), 5.59 (1H, brd, J = 6.4 Hz), 6.83 (1H, d, J = 1.8 Hz),7.15 (1H, t, J = 7.3 Hz), 7.21-7.25 (1H, m), 7.30 (1H, d, J = 8.2 Hz), 8.05(1H, brd, J = 7.3 Hz).
LC-MS:346 (M+H)+ (1.211 min, 測定条件A).
Nα-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(1.79g)、ジ-tert-ブチルジカルボネート(2.8g)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.68g)、4-ジメチルアミノピリジン(0.19g)及びクロロホルム(20mL)の混合液を25℃にて2.5時間撹拌した。反応終了後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりN,N,Nα-トリス(tert-ブトキシカルボニル)-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(1.99g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.08-1.58 (33H, m), 3.70(3H, s), 4.67-4.90 (0.2H, m), 5.25-5.45 (0.8H, m), 6.00-6.03 (1H, m), 6.81-6.87(1H, m), 7.04-7.09 (1H, m), 7.13-7.18 (1H. m), 7,21-7,27 (1H, m), 7.91-7.94(1H, m).
LC-MS:546 (M+H)+ (1.630 min, 測定条件A)
窒素雰囲気下、N,N,Nα-トリス(tert-ブトキシカルボニル)-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンアミド(2.29g)のメタノール溶液(21mL)に、リチウムメトキシド(176mg)を0℃で加えた後、25℃にて2時間撹拌した。反応終了後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりメチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンエート(927mg)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3): 1.17-1.59 (15H, m), 3.45 and 3.58 (3H, 2brs), 3.71(3H, s), 4.56-4.73 (1.2H, m), 5.06 (0.8H, brd, J = 7.3 Hz), 6.81-6.82 (1H, m),7.05-7.10 (1H, m), 7.16-7.21 (1H, m), 7.24-7.29 (1H, m), 7.73-7.80 (1H, m).
LC-MS: 361 (M+H)+ (1.379 min, 測定条件A).
窒素雰囲気下、メチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β,1-トリメチル-L-トリプトファンエート(927mg)のN,N-ジメチルホルムアミド溶液(13mL)に、60%含有水素化ナトリウム(168mg)を0℃で加えた後、25℃にて15分撹拌した。反応懸濁液を0℃にした後、ヨウ化メチル(1.1g)を加え、その後、25℃にて1時間撹拌した。反応終了後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりメチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトファナート(915mg)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.42 (9H, s), 1.52 and 1.64 (6H, 2s), 2.80 and 2.86(3H, 2s), 3.46 (3H, s), 3.71 (3H, s), 5.27 and 5.52 (1H, 2s), 6.85 (1H, s),7.07-7.27(3H, m), 7.78 and 7.92 (1H, 2d, J = 7.88 Hz).
LC-MS: 397 (M+Na)+ (1.406 min, 測定条件B)
メチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトファナート(639mg)の水(11mL)-メタノール(44mL)溶液に、1mol/L水酸化リチウム(13.5mL)を加え、60℃にて24時間撹拌した。反応終了後、1mol/Lシュウ酸水溶液を加え、反応溶液をpH4にした後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することによりN-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトファン(610mg)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.43 (9H, s), 1.53 (3H, s), 1.63 (3H, s), 2.76 and2.89 (3H, 2s), 3.71 (3H, s), 5.36 and 5.44 (1H, 2s), 6.85 and 6.87 (1H, 2s),7.02-7.11 (1H, m), 7.18 (1H, t, J = 7.3 Hz), 7.24-7.27 (1H, m), 7.81 and 7.96 (1H,2d, J = 7.9 Hz).
LC-MS: 361 (M+H)+, 359 (M-H)-(1.300 min, 測定条件A).
N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトファン(500mg)、エチル(2E,4S)-2,5-ジメチル-4-[メチル(3-メチル-L-バリル)アミノ]ヘキサ-2-エノエート(520mg)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(399mg)、1-ヒドロキシ-1H-ベンゾトリアゾール・1水和物(425mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(5mL)の混合液を、25℃にて16時間撹拌した。反応終了後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりN-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-N-[(3S,4E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(759mg)を得た。
LC-MS: 655 (M+H)+ (1.714 min, 測定条件A)
N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-N-[(3S,4E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(127mg)の水(1.55mL)-メタノール(4.65mL)溶液に、1mol/L水酸化リチウム(1.65mL)を加え、25℃にて24時間撹拌した。反応終了後、1mol/Lシュウ酸水溶液を加え、反応溶液をpH4にした後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することによりN-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-N-[(3S,4E)-5-カルボキシ-2-メチルヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(93mg)を得た。
LC-MS: 627 (M+H)+ (1.508 min, 測定条件A)
N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-N-[(3S,4E)-5-カルボキシ-2-メチルヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(185mg)、N-ヒドロキシスクシンイミド(97mg)、ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート(391mg)、4-ジメチルアミノピリジン(102mg)、N、N-ジイソプロピルエチルアミン(108mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(2.8mL)の混合液を、25℃にて4時間撹拌した。反応終了後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することによりN-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ]-2、5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル}-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(166mg)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3): 8.27 and 7.96 (1H, 2d, J = 7.9 Hz), 7.16-7.04 (4H,m), 6.88 (1H, d, J = 9.1 Hz), 6.17 and 6.09 (1H, 2d, J = 8.5 Hz), 5.96 and 5.66(1H, 2s), 5.07 (1H, t, J = 9.3 Hz), 4.45 and 3.87 (1H, 2d, J = 8.6 Hz), 3.74and 3.73 (3H, 2s), 2.99 (3H, s), 2.95 (3H, s), 2.83 (4H, brs), 1.97 (3H, s),1.92-1.86 (1H, m), 1.57-1.42 (14H, m), 0.89 (3H, d, J = 6.1 Hz), 0.83-0.80 (3H,m), 0.48 and 0.41 (9H, 2s).
LC-MS: 724 (M+H)+ (1.573 min, 測定条件A)
N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ]-2、5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル}-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(30mg)、D-グルタミン酸 α-tert-ブチルエステル塩酸塩(10.7mg)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(49.7mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(1.0mL)の混合液を、25℃にて3時間撹拌した。反応終了後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することにより(6S,9S,12S,13E,17R)-17-(tert-ブトキシカルボニル)-9-tert-ブチル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4、7,10,15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザイコサ-13-エン-20-カルボン酸(14.2mg)を得た。
LC-MS 834 (M+Na)+ (1.574 min, 測定条件D)
(6S,9S,12S,13E,17R)-17-(tert-ブトキシカルボニル)-9-tert-ブチル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4、7,10,15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザイコサ-13-エン-20-カルボン酸(14mg)、N-(2-アミノエチル)マレイミド塩酸塩(3.0mg)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(6.6mg)、1-ヒドロキシ-1H-ベンゾトリアゾール・1水和物(5.2mg)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(4.4mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(0.5mL)の混合液を、25℃にて2時間撹拌した。反応終了後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することにより参考例1(11.6mg)を得た。
LC-MS: 934 (M+H)+ (1.597 min, 測定条件D)
N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニル-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ]-2、5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル}-N,3-ジメチル-L-バリンアミド
3-メチル-2-ブテン酸(15g)のベンゼン(100mL)溶液に、10℃にて塩化アルミニウム(24.1g)を加え、30分撹拌した後、40℃で1時間撹拌した。0℃に冷却後、氷水を加え、tert-ブチルメチルエーテルで抽出し、ある程度濃縮し、有機層を飽和炭酸水素化ナトリウム水溶液で抽出した。水層を濃塩酸でpH2にし、tert-ブチルメチルエーテルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、3-メチル-3-フェニルブタン酸(26.3g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.46 (6H, s), 2.65 (2H, s),7.20 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.31 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.37 (2H, d, J = 7.2 Hz).
3-メチル-3-フェニルブタン酸(17.2g)のTHF溶液(900mL)に、-78℃でトリエチルアミン(23.7mL)及びピバロイルクロリド(15.3mL)を加えた。0℃に昇温して1時間撹拌した。別途、(S)-イソプロピルオキサゾリジノン(19.5g)のTHF溶液(760mL)に、-78℃でn-ブチルリチウム(1.64mol/Lヘキサン溶液89.8mL)を加え、30分撹拌し、リチウム塩を調製した。先の反応液を-78℃にし、リチウム塩を滴下し、1時間撹拌した後、0℃に昇温し、さらに30分撹拌した後、水を加え、tert-ブチルメチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:tert-ブチルメチルエーテル)で精製し、(4S)-3-(3-メチル-3-フェニルブタノイル)-4-(プロパン-2-イル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン(27.0g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):0.723 (3H, d, J = 6.8 Hz),0.80 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.49 (s, 6H), 2.13-2.18 (m, 1H), 3.36 (s, 3H),3.99-4.09 (m, 2H), 4.20-4.23 (m, 1H), 7.16-7.20 (m, 1H), 7.28-7.32 (m, 2H),7.38-7.40 (m, 2H).
(4S)-3-(3-メチル-3-フェニルブタノイル)-4-(プロパン-2-イル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン(27.0g)のTHF懸濁液(560mL)を-78℃に冷却し、カリウムヘキサメチルジシラジド(1.06mol/Lテトラヒドロフラン溶液、99.5mL)を加え、1.5時間撹拌した。-78℃の2,4,6-トリイソプロピルベンゼンスルホニルアザイド(40g)のTHF溶液(330mL)を加え、10分後、酢酸(24.5mL)を加え、40℃に昇温し、1時間撹拌した。飽和食塩水を加え、tert-ブチルメチルエーテルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:クロロホルム)にて精製し、(4S)-3-[(2S)-2-アジド-3-メチル-3-フェニルブタノイル]-4-(プロパン-2-イル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン(16.4g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):0.80 (3H, d, J = 6.8 Hz),0.84 (3H, d, J = 7.2 Hz), 1.54 (3H, s), 1.56 (3H, s), 2.28-2.33 (1H, m),3.54-3.59 (1H, m), 3.87-3.90 (1H, m), 3.95-3.98 (1H, m), 5.66 (1H, s),7.23-7.420 (5H, m).
(4S)-3-[(2S)-2-アジド-3-メチル-3-フェニルブタノイル]-4-(プロパン-2-イル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン(16.4g)の酢酸エチル溶液(1200mL)に、ジ-tert-ブチルジカルボネート(24.0g)及び10%Pd-C(11.6g、50%ウェット)を加え、水素雰囲気下、2時間撹拌した。セライトろ過し、酢酸エチルで洗浄した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:tert-ブチルメチルエーテル)にて精製し、tert-ブチル{(2S)-3-メチル-1-オキソ-1-[(4S)-2-オキソ-4-(プロパン-2-イル)-1,3-オキサゾリジン-3-イル]-3-フェニルブタン-2-イル}カルバメート(16.1g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):0.77 (3H, d, J = 6.8 Hz),0.82 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.42 (3H, s), 1.43 (9H, s), 1.48 (3H, s), 2.20-2.29(1H, m), 3.45 (1H, t, J = 8.8 Hz), 3.80-3.83 (1H, m), 3.89-3.92 (1H, dd, J =2.0 Hz, J = 8.4 Hz), 5.16 (1H, brs), 6.13 (1H, d, J = 9.6 Hz), 7.21-7.26 (1H,m), 7.29-7.33 (2H, m). 7.42 (2H, d, J = 7.2 Hz).
tert-ブチル{(2S)-3-メチル-1-オキソ-1-[(4S)-2-オキソ-4-(プロパン-2-イル)-1,3-オキサゾリジン-3-イル]-3-フェニルブタン-2-イル}カルバメート(16.1g)のTHF(468mL)及び水(117mL)溶液に、0℃にて30%過酸化水素水(32.5mL)及び水酸化リチウム水溶液(1mol/L,119mL)を加え、25℃に昇温し、3時間撹拌した。0℃にて硫酸水素ナトリウム水溶液(1.5mol/L,470mL)を加え、25℃に昇温し、1時間撹拌した。クエン酸水溶液(1mol/L)でpH3にし、tert-ブチルメチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、N-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β-ジメチル-L-フェニルアラニン(14.2g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.38 (9H, s), 1.44 (3H, s),1.46 (3H, s), 4.56 (1H, brd, J = 11.6 Hz), 4.94 (1H, brd, J = 14.4 Hz),7.21-7.38 (5H, m).
N-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β-ジメチル-L-フェニルアラニン(14.2g)のN,N-ジメチルホルムアミド溶液(84mL)に、炭酸ナトリウム(8.44g)及びヨウ化メチル(9.91mL)を加え、25℃で15時間撹拌した。0℃に冷却後、冷水を加え、tert-ブチルメチルエーテルで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:tert-ブチルメチルエーテル)で精製し、メチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β-ジメチル-L-フェニルアラニンエステル(11.1g)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3):1.36 (9H, s), 1.37 (3H, s),1.41 (3H, s), 3.48 (3H, brs), 4.49 (1H, brd, J = 9.8 Hz), 4.98 (1H, brd, J =9.1 Hz), 7.18-7.22 (1H, m), 7.27-7.33 (4H, m).
参考例1-k)と同様の手法で、メチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-β,β-ジメチル-L-フェニルアラニンエステル(307mg)からメチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニンエステル(245mg)を得た。
LC-MS: 344 (M+Na)+ (1.589 min, 測定条件C)
参考例1-l)と同様の手法で、メチル N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニンエステル(235mg)からN-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニン(195mg)を得た。
LC-MS: 330 (M+Na)+ (1.420 min, 測定条件C)
参考例1-m)と同様の手法で、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニン(195mg)からN-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニル-N-[(3S,4E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(307mg)を得た。
LC-MS: 624 (M+Na)+ (1.797 min, 測定条件C)
参考例1-n)と同様の手法で、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニル-N-[(3S,4E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(307mg)からN-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニル-N-[(3S,4E)-5-カルボキシ-2-メチルヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(286mg)を得た。
LC-MS: 596 (M+Na)+, 572 (M-H)-(1.596 min, 測定条件C)
参考例1-o)と同様の手法で、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β-トリメチル-L-フェニルアラニル-N-[(3S,4E)-5-カルボキシ-2-メチルヘキサ-4-エン-3-イル]-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(286mg)から参考例2(227mg)を得た。
LC-MS: 693 (M+Na)+ (1.658 min, 測定条件C)
ジ-tert-ブチル(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-9-tert-ブチル-28-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15,20,25-ヘキサオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16、21、26-ヘキサアザオクタコサ-13-エン-17、22-カルボン酸ジエステル
参考例1-o)と同様の手法で、(6S,9S,12S,13E,17R)-17-(tert-ブトキシカルボニル)-9-tert-ブチル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4、7,10,15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザイコサ-13-エン-20-カルボン酸(90.2mg)からtert-ブチル(6S,9S,12S,13E,17R)-9-tert-ブチル-17-{3-[(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ]-3-オキソプロピル}-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザオクタデカ-13-エン-18-カルボン酸エステル(51.8mg)を得た。
LC-MS: 931 (M+Na)+ (1.662 min, 測定条件D)
参考例1-p)と同様の手法で、tert-ブチル(6S,9S,12S,13E,17R)-9-tert-ブチル-17-{3-[(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ]-3-オキソプロピル}-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザオクタデカ-13-エン-18-カルボン酸エステル(51.8mg)から(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-17,22-ビス(tert-ブトキシカルボニル)-9-tert-ブチル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15,20-ペンタオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16,21-ペンタアザペンタコサ-13-エン-25-カルボン酸(40mg)を得た。
LC-MS: 1019 (M+Na)+ (1.422 min, 測定条件D)
参考例1-q)と同様の手法で、(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-17,22-ビス(tert-ブトキシカルボニル)-9-tert-ブチル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15,20-ペンタオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16,21-ペンタアザペンタコサ-13-エン-25-カルボン酸(40mg)から参考例3(14mg)を得た。
LC-MS: 1141 (M+Na)+ (1.618 min, 測定条件D)
N-{(2E,4S)-2,5-ジメチル-4-[メチル(N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-3-メチル-L-バリル)アミノ]ヘキサ-2-エノイル}-D-γ-グルタミル-L-リシン
N-(tert-ブトキシカルボニル)-N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ]-2、5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル}-N,3-ジメチル-L-バリンアミド(160mg)、α-エチル D-グルタミン酸エステル・トリフルオロ酢酸塩(122mg)、N、N-ジイソプロピルエチルアミン(100mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(2.2mL)の混合液を、25℃にて6時間撹拌した。反応終了後、1mol/Lシュウ酸水溶液でpH4にし、クロロホルムで抽出した。有機層を水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することにより(6S,9S,12S,13E,17R)-9-tert-ブチル-17-(エトキシカルボニル)-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザイコサ-13-エン-20-カルボン酸(155mg)を得た。
1H-NMR(400 MHz, CDCl3): 8.26 and 7.97 (1H, 2d, J = 7.9 Hz), 7.32-7.05 (4H,m), 6.71 (1H, t, J = 6.7 Hz), 6.45 (1H, d, J = 8.6 Hz), 6.31-6.26 (1H, m), 5.95and 5.63 (1H, 2s), 4.94-4.82 (1H, m), 4.64-4.59 (1H, m), 4.51 and 4.41 (1H, 2d,J = 9.1 Hz), 4.21 (2H, q, J = 7.3 Hz), 3.75 and 3.74 (3H, 2s), 3.00 (3H, s),2.97 and 2.95 (3H, 2s), 2.52-2.38 (2H, m), 2.29-2.20 (1H, m), 2.10-2.00 (1H,m), 1.98-1.90 (1H, m), 1.90 (3H, s), 1.57-1.45 (14H, m), 1.28 (3H, t, J = 7.3Hz), 0.88 (3H, d, J = 6.1 Hz), 0.82 (3H, d, J = 6.7 Hz), 0.53 and 0.46 (9H,2s).
LC-MS 784 (M+H)+, 782 (M-H)- (1.472 min, 測定条件A)
参考例1-m)と同様の手法で、(6S,9S,12S,13E,17R)-9-tert-ブチル-17-(エトキシカルボニル)-2,2,5,11,14-ペンタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15-テトラオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザイコサ-13-エン-20-カルボン酸(20mg)から17-エチル 22-メチル(6S,9S,12S,13E,17R、22S)-9-tert-ブチル-2,2,5,11,14,30,30-ヘプタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15,20,28-ヘキサオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3,29-ジオキサ-5,8,11,16,21,27-ヘキサアザヘントリアコンタ-13-エン-17,22-ジカルボン酸エステル(13mg)を得た。
LC-MS: 1026 (M+H)+ (1.597 min, 測定条件D)
17-エチル 22-メチル(6S,9S,12S,13E,17R、22S)-9-tert-ブチル-2,2,5,11,14,30,30-ヘプタメチル-6-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,10,15,20,28-ヘキサオキソ-12-(プロパン-2-イル)-3,29-ジオキサ-5,8,11,16,21,27-ヘキサアザヘントリアコンタ-13-エン-17,22-ジカルボン酸エステル(13mg)のクロロホルム溶液(1.0mL)にトリフルオロ酢酸(0.2mL)を加えて、25℃で1時間撹拌した。反応終了後、反応液をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;メタノール:クロロホルム)で精製することにより14-エチル 19-メチル(3S,6S,9S,10E,14R、19S)-23-アミノ-6-tert-ブチル-8,11-ジメチル-3-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,12,17-テトラオキソ-9-(プロパン-2-イル)-2,5,8,13,18-ペンタアザトリコサ-10-エン-14,19-ジカルボン酸エステル(10mg)を得た。
LC-MS: 826 (M+H)+, 824 (M-H)- (0.978 min, 測定条件D)
参考例1-n)と同様の手法で製造を行い、逆相カラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;0.1%TFAアセトニトリル:水)で精製することにより14-エチル 19-メチル(3S,6S,9S,10E,14R、19S)-23-アミノ-6-tert-ブチル-8,11-ジメチル-3-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,12,17-テトラオキソ-9-(プロパン-2-イル)-2,5,8,13,18-ペンタアザトリコサ-10-エン-14,19-ジカルボン酸エステル(10mg)から参考例4(7.2mg)を得た。
LC-MS: 784 (M+H)+, 782 (M-H)- (0.889 min, 測定条件D)
BOC-D-グルタミン酸 α-tert-ブチルエステル(2.061g)、1-(2-アミノ-エチル)-ピロール-2,5-ジオン ハイドロクロリド(1.20g)、2-(1H-ベンゾ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロフォスフェイト(V)(3.87g)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(3.47mL)及びN,N-ジメチルホルムアミド(10mL)の混合液を、室温にて1時間攪拌した。反応終了後、酢酸エチルを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で生成することによりtert-ブチル N2-(tert-ブトキシカルボニル)-N5-(2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)エチル)-D-グルタミネート(2.8g)を得た。
LC-MS:426(M+H)+(1.030min、測定条件F)
tert-ブチル N2-(tert-ブトキシカルボニル)-N5-(2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)エチル)-D-グルタミネート(51.8mg)、TFA(1mL)の混合液を室温にて1時間20分攪拌した。反応液を氷冷後、減圧濃縮し、参考例5(56.3mg)を得た。得られた化合物は、精製せずに次の反応に用いた。
LC-MS:326(M+H)+(0.496min、測定条件F)
LC-MS:270(M+H)+(0.254min、測定条件F)
N-α-(tert-ブトキシカルボニル)-D-グルタミン酸 γ-メチルエステル(261mg)、D-グルタミン酸 ジ-tert-ブチルエステルハイドロクロリド(295mg)、O-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩(456mg)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.446mL)及びN,N-ジメチルホルムアミド(4mL)の混合物を室温にて2時間攪拌した。反応終了後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を、水及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより、(ジ-tert-ブチル ((R)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-メトキシ-5-オキソペンタノイル)-D-グルタメート(502mg)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3):1.42 (18H, s), 1.44 (9H, s), 1.84-1.94 (2H, m), 2.12 (2H, dtt, J = 22.5, 8.4, 3.0 Hz), 2.26 (2H, dtd, J = 25.2, 10.0, 4.5 Hz), 2.43 (2H, tdd, J = 24.8, 14.2, 7.5 Hz), 3.67 (3H, s), 4.14 (1H, t, J = 6.1 Hz), 4.43 (1H, td, J = 7.9, 4.9 Hz), 5.23 (1H, d, J = 7.3 Hz), 6.81 (1H, d, J = 7.3 Hz).
ジ-tert-ブチル ((R)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-メトキシ-5-オキソペンタノイル)-D-グルタメート(502mg)、1mol/L水酸化リチウム水溶液(0.999mL)及びメタノール(5mL)混合物を室温にて16時間攪拌した。反応終了後、1mol/Lクエン酸水溶液を加え、酸性(pH4)とし、メタノールを減圧留去したのちクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することにより、(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(((R)-1,5-ジ-tert-ブトキシ-1,5-ジオキソペンタン-2-イル)アミノ)-5-オキソペンタン酸(393mg)を得た。
LC-MS:489(M+H)+(1.417min、測定条件G)
(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(((R)-1,5-ジ-tert-ブトキシ-1,5-ジオキソペンタン-2-イル)アミノ)-5-オキソペンタン酸(205mg)、1-(2-アミノ-エチル)-ピロール-2,5-ジオン ハイドロクロリド(89mg)、2-(1H-ベンゾ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロフォスフェイト(V)(191mg)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.187mL)及びN,N-ジメチルホルムアミド(3mL)の混合液を室温にて16時間攪拌した。反応終了後、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することにより、ジ-tert-ブチル N2-(tert-ブトキシカルボニル)-N5-(2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジハイドロ-1H-ピロール-1-イル)エチル)-D-グルタミニル-D-グルタメート(13mg)を得た。
LC-MS:611(M+H)+(1.638min、測定条件G)
ジ-tert-ブチル N2-(tert-ブトキシカルボニル)-N5-(2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジハイドロ-1H-ピロール-1-イル)エチル)-D-グルタミニル-D-グルタメート(13mg)を実施例M1と同様に反応及び処理することで、参考例7を合成した。合成した参考例7は精製することなく、そのまま次の反応に用いた。
文献(Bioorg Med Chem Lett. 2004 Nov 1;14(21):5317-22.、J Med Chem. 2004 Sep 9;47(19):4774-86.、国際公開第2003/082268号及び国際公開第2016/123582号)に記載の方法に従い、下表1に示す化合物を得た。
LC-MS:488(M+H)+(0.68min、測定条件F)
LC-MS:499(M+H)+(0.99min、測定条件F)
(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-([1,1’-ビフェニル]-3-イル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノン酸
LC-MS:550(M+H)+(0.88min、測定条件F)
4-(4-(((S)-1-(((S,E)-5-カルボキシ-2-メチルヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキサブタン-2-イル)アミノ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)安息香酸
エチル (9S,12S,E)-6-(2-(4-(tert-ブトキシカルボニル)フェニル)プロパン-2-イル)-9-(tert-ブチル)-12-イソプロピル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザペンタデク-13-エン-15-オエート(400mg)、TFA(2mL)及びクロロホルム(8mL)の混合液を室温にて4時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキサブタン-2-イル)アミノ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキサブタン-2-イル)安息香酸(376mg)を得た。得られた化合物は、精製せずに次の反応に用いた。
LC-MS:546(M+H)+(1.15min、測定条件F)
4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキサブタン-2-イル)アミノ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキサブタン-2-イル)安息香酸(55.2mg)、メタノール(3mL)及び水(1mL)の混合液を氷冷下攪拌しながら、水酸化リチウム(16.98mg)を加えた。室温にて2日間攪拌した。溶媒を減圧留去した。残渣を逆相HPLC(移動相は0.1%TFA水/0.035%TFA アセトニトリル溶媒)することにより参考例22(21.1mg)を得た。
LC-MS:518(M+H)+(1.18min、測定条件F)
(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-(tert-ブトキシカルボニル)フェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エン酸
LC-MS:574(M+H)+(1.29min、測定条件G)
(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-(4-(tert-ブトキシカルボニル)フェニル)-3-メチル-2-(メトキシアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノン酸
4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキソブタン-2-イル)アミノ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)安息香酸(104.0mg)及びトルエン(1mL)の混合液に、N,N-ジメチルフルオロアミド-ジ-tert-ブチルアセテート(0.456mL)を加え、14時間加熱還流した後に、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにて精製することにより、tert-ブチル 4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキソブタン-2-イル)アミノ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)ベンゾエート(21.0mg)を得た。
LC-MS:602(M+H)+(1.47min、測定条件F)
tert-ブチル 4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキソブタン-2-イル)アミノ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)ベンゾエート(10.5mg)、メタノール(3mL)及び水(1.000mL)の混合液に水酸化リチウム(4.39mg)を加えて、室温にて2日間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を逆相HPLC(移動相は0.1%TFA水/0.035%TFA アセトニトリル溶媒)にて精製し、参考例24(7.0mg)を得た。
LC-MS:574(M+H)+(1.49min、測定条件F)
4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-5-カルボキシ-2-メチルヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキソブタン-2-イル)アミノ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)安息香酸
LC-MS:518(M+H)+(1.08min、測定条件F)
窒素雰囲気下、3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-オキソブタン酸(54.9g)の無水テトラヒドロフラン(480mL)溶液を氷冷し、メチルアミン(280mL)(2mol/Lテトラヒドロフラン溶液)を滴下した。室温にて1時間攪拌した後、ボラン-ピリジン錯体(27.5mL)を滴下して、55℃で2時間半攪拌した。氷冷下、メタノール(240mL)を滴下した後、室温にて2時間攪拌した。溶媒を減圧留去した後、テトラヒドロフランを加え懸濁液を吸引濾過した。粉末をテトラヒドロフランで洗浄し、3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタン酸(40.7g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, D2O):1.21 (3H, s), 1.24 (3H, s), 2.04 (3H, s), 3.06 (1H, s), 6.52 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.11 (2H, d, J = 8.8).
窒素雰囲気下、3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタン酸(10.2g)の1,4-ジオキサン/水(1:1)(160mL)の懸濁液に、ジ-tert-ブチルカーボネート(39.9g)及び炭酸カリウム(25.4g)を加え、40℃で終夜攪拌した。反応液に酢酸エチル及び水を加え、1mol/L硫酸水素カリウム水溶液でpH2~3とした後、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)にて精製することにより、2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(4-((tert-ブトキシカルボニル)オキシ)フェニル)-3-メチルブタン酸(15.7g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6):1.38 (12H, s), 1.48 (12H, s), 2.64 (3H, s), 7.09 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.40 (2H, d, J = 8.8).
窒素雰囲気下、2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(4-((tert-ブトキシカルボニル)オキシ)フェニル)-3-メチルブタン酸(15.7g)をジクロロメタン(370mL)に溶解し、28%ナトリウムメトキシドメタノール溶液(15.8g)とメタノール(14mL)を加え、室温で1時間半攪拌した。反応液に酢酸エチル及び4%硫酸水素カリウム水溶液を加え抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)にて精製することにより、(S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチルブタン酸(153.7mg)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6):1.36 (12H, s), 1.42 (3H, s), 2.60 (3H, s), 6.66 (2H, d, J = 8.0 Hz), 7.15 (2H, d, J = 8.4).
(S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチルブタン酸(153.7mg)、エチル (S,E)-4-((S)-2-アミノ-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノエート塩酸塩(117.6mg)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.172mL),1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(129mg)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(103mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(5mL)の懸濁液を室温にて17時間攪拌した。溶媒を減圧留去した後に、クロロホルムを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより、エチル (9S,12S,E)-9-(tert-ブチル)-6-(2-(4-ヒドロキシフェニル)プロパン-2-イル)-12-イソプロピル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザペンタデク-13-エン-15-オエート(206.3mg)を得た。
LC-MS:618(M+H)+(1.69min、測定条件F)
エチル (9S,12S,E)-9-(tert-ブチル)-6-(2-(4-ヒドロキシフェニル)プロパン-2-イル)-12-イソプロピル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザペンタデク-13-エン-15-オエート(189.2mg)及びクロロホルム(4mL)混合液にTFA(1mL)を加え室温にて1時間攪拌した後に、溶媒を減圧留去した。残渣にクロロホルムを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより、エチル(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノエート(110.1mg)を得た。
LC-MS:518(M+H)+(1.09min、測定条件F)
エチル (4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノエート(110.1mg)、メタノール(3mL)及び水(1mL)の混合液に氷冷下、水酸化リチウム(35.7mg)を加え室温にて2日間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を逆相HPLC(移動相は0.1%TFA水/0.035%TFA アセトニトリル溶媒)で精製することにより参考例26(113.2mg)を得た。
LC-MS:490(M+H)+(1.03min、測定条件F)
((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸
(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノン酸 トリフルオロ酢酸塩(21.4mg)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(22.91mg)、ジメチル D-グルタメート 塩酸塩(15.01mg)、3-(((エチルイミノ)メチレン)アミノ)-N,N-ジメチルプロパン-1-アミン塩酸塩(13.59mg)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(9.58mgl)及びN,N-ジメチルホルムアミド(1mL)の混合物を室温にて15時間攪拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム/メタノール)で精製することにより、ジメチル ((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタメート(21.6mg)を得た。
LC-MS:647(M+H)+(1.21min、測定条件F)
ジメチル ((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-ヒドロキシフェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタメート(21.6mg)、メタノール(3mL)及び水(1mL)の混合液に室温にて水酸化リチウム(5.61mg)を加え攪拌した。溶媒を減圧留去した。残渣を高速液体クロマトグラフィーにて精製し、参考例27(15.8mg)を得た。
LC-MS:619(M+H)+(1.04min、測定条件F)
N6-(tert-ブトキシカルボニル)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(5-フルオロ-1-メチル-1H-インドール-3-イル)-3-メチルブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エナミド)-4-カルボキシブタノイル)リジン
(6S,9S,12S,17R,E)-9-(tert-ブチル)-17-(エトキシカルボニル)-6-(2-(5-フルオロ-1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル)-12-イソプロピル-2,2,5,11,14-ペンタメチル-4,7,10,15-テトラオキソ-3-オキサ-5,8,11,16-テトラアザイコス-13-エン-20-オイック酸(54.5mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(2mL)の混合液に氷冷下、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾール[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェイト(31.0mg)を加え30分攪拌した。N-(tert-ブトキシカルボニル)-L-リジン メチルエステル塩酸塩(24.20mg)及びN-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.028mL)を加え室温にて17時間攪拌した後に、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することにより、メチル N6-(tert-ブトキシカルボニル)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(5-フルオロ-1-メチル-1H-インドール-3-イル)-3-メチルブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エナミド)-5-エトキシ-5-オキソペンタノイル)リジネート(71mg)を得た。
LC-MS:1067(M+Na)+(1.557min、測定条件G)
メチル N6-(tert-ブトキシカルボニル)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(5-フルオロ-1-メチル-1H-インドール-3-イル)-3-メチルブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エナミド)-5-エトキシ-5-オキソペンタノイル)リジネート(71mg)、メタノール(4mL)及び1mol/L水酸化リチウム水溶液(4mL)の混合液を60℃で17時間攪拌した。反応液に飽和クエン酸水溶液を加え酸性としたのち、酢酸エチルで抽出した。有機層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をODSカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;水:アセトニトリル)で精製することにより参考例28(49.0mg)を得た。
LC-MS:1024(M+Na)+(1.416min、測定条件G)
ジ-tert-ブチル ((S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-2-カルボキシアミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタメート
D-ピぺコリン酸(3.10g)、ジ-tert-ブチルジカーボネート(7.86g)、5mol/L水酸化ナトリウム水溶液(19.20mL)、テトラヒドロフラン(10mL)及び水(10mL)の混合液を室温にて8時間攪拌した後に、溶媒を減圧留去した。ジエチルエーテルにて水相を洗浄後、0.1mol/L塩酸水にて水相を中性(pH7)とし、ジエチルエーテルで抽出した。無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、(R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-2-カルボン酸(4.16g)を得た。
LC-MS:228(M-H)-(1.51min、測定条件F)
(R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-2-カルボン酸(432.3mg)、エチル (S,E)-4-((S)-2-アミノ-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノエート(393mg)、o-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェイト(953mg)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.659mL)及びN,N-ジメチルホルムアミド(3mL)の懸濁液を室温にて15時間攪拌した後に、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより、tert-ブチル (R)-2-(((S)-1-(((S,E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキソブタン-2-イル)カルバモイル)ピペリジン-1-カルボキシレート(658mg)を得た。
LC-MS:546(M+Na)+(1.51min、測定条件F)
tert-ブチル (R)-2-(((S)-1-(((S,E)-6-エトキシ-2,5-ジメチル-6-オキソヘキサ-4-エン-3-イル)(メチル)アミノ)-3,3-ジメチル-1-オキソブタン-2-イル)カルバモイル)ピペリジン-1-カルボキシレート(508.1mg)、メタノール(8mL)、水(2mL)及び水酸化リチウム(204mg)の混合液を室温にて4日間攪拌した後に、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、(((S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-2-カルボキシアミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノン酸を得た。得られた化合物は精製することなくそのまま次の反応に用いた。
LC-MS:518(M+Na)+(1.19min、測定条件F)
(S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-2-カルボキシアミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノン酸(481mg)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.501mL)、3-(((エチルアミノ)メチレン)アミノ)-N,N-ジメチルプロパン-1-アミン塩酸塩(372mg),1H-ベンゾ[d][1,2,3]トリアゾール-1-オール(262mg)、D-グルタミン酸ジ-tert-ブチルエステル塩酸塩(287mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(10mL)の混合液を室温にて20時間攪拌した後に、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより参考例29(673.0mg)を得た。
LC-MS:759(M+Na)+(1.35min、測定条件H)
参考例1のA15中間体、参考例2及び参考例53を原料化合物として用い、参考例1の工程p)と同様に反応及び処理をし、下表2に示す化合物を得た。
対応する原料化合物を用いて、参考例1と同様に反応及び処理をし、下表3に示す化合物を得た。
対応する原料化合物を用いて、参考例3の工程c)と同様に反応及び処理をし、下表4に示す化合物を得た。
対応する原料化合物を用いて、参考例M1と同様に反応及び処理をし、下表5に示す化合物を得た。
対応する原料化合物及び参考例5を用いて、参考例1の工程m)と同様に反応及び処理をし、下表6に示す化合物を得た。
対応する原料化合物を用いて、参考例1の工程o)と同様に反応及び処理をし、下表7に示す化合物を得た。
対応する原料化合物を用いて、実施例M1と同様に反応及び処理をし、下記表8に示す化合物を得た。
(R)-4-((R)-4-((R)-4-アミノ-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタナミド)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタナミド)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタン酸
参考例3-a)と同様の手法で、(R)-4-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタン酸(500mg)から1-(tert-ブチル) 5-(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル) (((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)-D-グルタミン酸(520mg)を得た。
LC-MS:523(M+H)+(1.324min、測定条件G)
参考例3-b)と同様の手法で、1-(tert-ブチル) 5-(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル) (((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)-D-グルタミン酸(520mg)から(R)-4-((R)-4-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタナミド)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタン酸(428.7mg)を得た。
LC-MS:611(M+H)+(1.551min、測定条件G)
参考例3-a)と同様の手法で、(R)-4-((R)-4-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタナミド)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタン酸(100mg)から1-(tert-ブチル) 5-(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)((R)-4-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタノイル)-D-グルタミン酸(33mg)を得た。
LC-MS:708(M+H)+(1.598min、測定条件G)
参考例3-b)と同様の手法で、1-(tert-ブチル) 5-(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)((R)-4-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタノイル)-D-グルタミン酸(33mg)から(5R,10R,15R)-5,10,15-トリス(tert-ブトキシカルボニル)-1-(9H-フルオレン-9-イル)-3,8,13-トリオキソ-2-オキサ-4,9,14-トリアザオクタデカン-18-オイック酸(16.6mg)を得た。
LC-MS:796(M+H)+(1.119min、測定条件F)
(5R,10R,15R)-5,10,15-トリス(tert-ブトキシカルボニル)-1-(9H-フルオレン-9-イル)-3,8,13-トリオキソ-2-オキサ-4,9,14-トリアザオクタデカン-18-オイック酸(16.6mg)のピペリジン(0.3mL)及びN,N-ジメチルホルムアミド(1.5mL)の混合液を25℃にて7時間攪拌した後に、反応溶液を逆相カラムクロマトグラフィー(溶出溶媒;0.1%TFAアセトニトリル:水)で精製することにより参考例97(7.5mg)を得た。
LC-MS:574(M+H)+(0.698min、測定条件F)
対応する原料化合物を用いて、参考例2と同様に反応及び処理をし、下記表9に示す化合物を得た。
参考例98及び参考例5を用いて、参考例1の工程m)と同様に反応及び処理をし、下表10に示す化合物を得た。
ジ-tert-ブチル ((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-((2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)エチル)カルバモイル)フェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸
2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-3-(4-(tert-ブトキシカルボニル)フェニル)-3-メチルブタン酸(1.48g)、炭酸ナトリウム(0.77g)及びN,N-ジメチルホルムアミド(7mL)の懸濁液に臭化ベンジル(0.647mL)を加え、室温にて17時間攪拌した。反応液に酢酸エチル加えた。有機層を水及び飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することにより、tert-ブチル 4-(4-(ベンジルオキシ)-3-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-2-メチル-4-オキソブタン-2-イル)ベンゾエート(1.78g)を得た。
LC-MS:520(M+Na)+(1.778min、測定条件G)
tert-ブチル 4-(4-(ベンジルオキシ)-3-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)-2-メチル-4-オキソブタン-2-イル)ベンゾエート(1.78g)及びクロロホルム(40mL)の混合液にトリフルオロ酢酸(10mL)を加え、室温にて5時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、4-(4-(ベンジルオキシ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)安息香酸 トリフルオロ酢酸塩を得た。得られた化合物は精製せず次の反応に用いた。
LC-MS:342(M+H)+(1.05min、測定条件F)
4-(4-(ベンジルオキシ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)安息香酸 トリフルオロ酢酸塩、炭酸ナトリウム(379mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(9mL)の懸濁液にヨードメタン(0.169mL)を加え室温にて攪拌した。反応液に酢酸エチル加えた。有機層を水及び飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりメチル 4-(4-(ベンジルオキシ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)ベンゾエート(362.3mg)を得た。
LC-MS:356(M+H)+(1.08min、測定条件F)
メチル 4-(4-(ベンジルオキシ)-2-メチル-3-(メチルアミノ)-4-オキソブタン-2-イル)ベンゾエート(362.3mg)、パラジウム-炭素(85.5mg)及び酢酸エチル(10mL)の懸濁液を水素雰囲気下、室温にて10時間攪拌した。反応液を濾紙により濾過後、溶媒を減圧留去し、3-(4-(メトキシカルボニル)フェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタン酸を得た。得られた化合物は精製せず参考例100-g)の反応に使用した。
LC-MS:266(M+H)+(0.82min、測定条件F)
(S,E)-4-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノン酸(220.2mg)、ジ-tert-ブチルD-グルタミン酸塩酸塩(254mg)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.300mL)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(220mg)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(175mg)及びN,N-ジメチルホルムアミドの混合液を室温にて17時間攪拌した。反応液に酢酸エチル加えた。有機層を水及び飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。ジ-tert-ブチル ((S,E)-4-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸(232.4mg)を得た。
LC-MS:626(M+H)+(1.76min、測定条件F)
ジ-tert-ブチル ((S,E)-4-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸(232.4mg)及び酢酸エチル(3.7mL)の混合液に氷冷下、塩酸(13.54mg)酢酸エチル溶液を加え、室温にて1時間20分攪拌した。反応液を氷冷し、28%アンモニア水を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、ジ-tert-ブチル ((S,E)-4-((S)-2-アミノ-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸(62.2mg)を得た。得られた化合物は精製せず次の反応に用いた。
LC-MS:526(M+H)+(1.14min、測定条件F)
3-(4-(メトキシカルボニル)フェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタン酸(31.4mg)、ジ-tert-ブチル ((S,E)-4-((S)-2-アミノ-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸(62.2mg)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(45.4mg)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(32.0mg)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.062mL)及びN,N-ジメチルホルムアミド(2mL)の懸濁液を室温にて17時間攪拌した。溶媒を減圧留去した。残渣に酢酸エチルを加え、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;ヘキサン:酢酸エチル)で精製することによりジ-tert-ブチル ((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-(メトキシカルボニル)フェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸(60.1mg)を得た。
LC-MS:774(M+H)+(1.341min、測定条件G)
tert-ブチル ((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-(メトキシカルボニル)フェニル)-3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-D-グルタミン酸(56.3mg)、メタノール(4mL)及び水(1mL)の混合液に氷冷下、水酸化リチウム(9.17mg)を加え、室温にて17時間攪拌した。溶媒を減圧留去した。残渣を逆相HPLC(移動相は0.1%TFA水/0.035%TFA アセトニトリル溶媒)で精製することにより4-((7R,12S,15S,E)-7-(tert-ブトキシカルボニル)-15-(tert-ブチル)-12-イソプロピル-2,2,10,13,19-ペンタメチル-18-(メチルアミノ)-4,9,14,17-テトラオキソ-3-オキサ-8,13,16-トリアザイコス-10-エン-19-イル)安息香酸(14.8mg)を得た。
LC-MS:759(M+H)+(1.334min、測定条件G)
4-((7R,12S,15S,E)-7-(tert-ブトキシカルボニル)-15-(tert-ブチル)-12-イソプロピル-2,2,10,13,19-ペンタメチル-18-(メチルアミノ)-4,9,14,17-テトラオキソ-3-オキサ-8,13,16-トリアザイコス-10-エン-19-イル)安息香酸(14.8mg)、3-(((エチルイミノ)メチレン)アミノ)-N,N-ジメチルプロパン-1-アミン 塩酸塩(7.48mg)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(5.97mg)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.014mL)、1-(2-アミノエチル)-ピロール-2,5-ジオン 塩酸塩(6.86mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド(2mL)の混合液を室温にて3時間攪拌した。酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出溶媒;クロロホルム:メタノール)で精製することにより参考例100(9.00mg)を得た。
LC-MS:881(M+H)+(1.287min、測定条件G)
(3S,6S,9S,10E,14R)-6-tert-ブチル-14-(3-{[2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロ-ル-1-イル)エチル]アミノ}-3-オキソプロピル)-8,11-ジメチル-3-[2-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)プロパン-2-イル]-4,7,12-トリオキソ-9-(プロパン-2-イル)-2,5,8,13-テトラアザペンタデカ-10-エン-15-カルボン酸
LC-MS: 778 (M+H)+, 776 (M-H)-(1.081 min, 測定条件D)
N-{(2E,4S)-2,5-ジメチル-4-[メチル(N,β,β,1-テトラメチル-L-トリプトフイル-3-メチル-L-バリル)アミノ]ヘキサ-2-エノイル}-D-γ-グルタミル-N6-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサノイル]-L-リシン
LC-MS: 977 (M+H)+, 975 (M-H)- (1.061 min, 測定条件D)
対応する原料化合物を用いて、参考例M1、参考例M2又は参考例1の工程p)と同様に反応及び処理し、下表11に示す化合物を得た。
N2-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-(ジメチルアミノ)-3-メチル-3-フェニルブタナミド)-N,3,3-トリメチルブタナミド)-2,5-ジメチルヘキサ-2-エノイル)-N5-(2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロロ-1-イル)エチル)-D-グルタミン
LC-MS:739(M+H)+(1.007min、測定条件G)
ブレンツキシマブ-参考例M4複合体(平均薬物抗体比:8.00)
(3S,6S,9S,10E,14R)-14-(3-{[2-(3-{[(2R)-2-アミノ-2-カルボキシエチル]スルファニル}-2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)エチル]アミノ}-3-オキソプロピル)-6-tert-ブチル-8,11-ジメチル-4,7,12-トリオキソ-3-(2-フェニルプロパン-2-イル)-9-(プロパン-2-イル)-2,5,8,13-テトラアザペンタデカ-10-エン-15-オイック アシド
LC-MS: 846 (M+H)+, 844 (M-H)-(0.855 min, 測定条件B)
対応する原料化合物を用いて実施例MM1と同様に反応及び処理し、下表13に示す化合物を得た
対応する原料化合物を用いて実施例MM1と同様に反応及び処理し、下表14に示す化合物を得た
対応する原料化合物を用いて実施例MM1と同様に反応及び処理し、下表15に示す化合物を得た。
以下に、本発明ヘミアスタリン誘導体の特定の実施例に係る薬理試験結果を示し、これらの薬理作用を説明するが、本発明はこれらの試験例で示される化合物に限定されるものではない。
Cytoskeleton社より購入したチューブリン重合阻害アッセイキット(カタログ番号:BK006P)を用い、キットに付属するプロトコールに従って、濃度9.1μMの実施例の化合物の重合阻害活性を評価した。プロトコールを要約すると、96穴マイクロプレートに、評価対象の化合物の80mM PIPES pH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA、及び5%DMSO緩衝液を、10μLずつ添加し、これらに3mg/mLのブタチューブリン 80mM PIPES pH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA、1mM GTP、及び10.2%glycerol溶液を100μLずつ添加した。チューブリンの重合する様子を経時的に調べるため、340nmの吸光度を、マイクロプレートリーダーを用いて、37℃にて測定した。チューブリンの重合が進むにつれて340nmの吸光度が上昇する。結果を図1に示す。
Cytoskeleton社より購入したチューブリン重合阻害アッセイキット(カタログ番号:BK006P)を用い、キットに付属するプロトコールに従って、濃度9.1μMの実施例の化合物の重合阻害活性を評価した。96穴マイクロプレートに、評価対象の化合物の80mM PIPES pH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA、及び5%DMSO緩衝液を、10μLずつ添加し、これらに3mg/mLのブタチューブリン 80mM PIPES pH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA、1mM GTP、及び10.2%glycerol溶液を100μLずつ添加した。チューブリンが重合する様子を経時的に調べるため、340nmの吸光度を、マイクロプレートリーダーを用いて、37℃にて測定した。チューブリンの重合が進むにつれて、340nmの吸光度は上昇する。
ヒトリンパ腫細胞株であるKarpas-299細胞(European Collection of Authenticated Cell Cultures、以下、ECACC)を、10%のウシ胎児血清(MP Biomedicals)を含むRPMI1640(GIBCO)(以下、「培地」という)で培養した。細胞を培地で2×105cells/mLになるように調製し、96穴細胞培養用マイクロプレートに50μLずつ添加した。培地で8段階に4倍希釈した実施例の化合物又は比較例化合物を、マイクロプレートに50μLずつ添加した。これらを37℃、5%CO2下で4日間培養した。培養後、マイクロプレートをインキュベーターから取り出し室温で10分間静置した。各ウェルに50μLのCellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(Promega)を添加し、撹拌した。この混合物を暗所で20分インキュベートした。マイクロプレートルミノメーターを用いて各ウェルにおける発光を計測することにより、細胞生存率を算出した。また、細胞生存率の値からIC50値を計算した。結果を表17に示す。
IC50(nM)=antilog(LOG10(a÷b)×(e-d)÷(c-d)+LOG10b)
a:被検物質の濃度a
b:被検物質の濃度b
c:濃度aの被検物質を添加した時の細胞生存率
d:濃度bの被検物質を添加した時の細胞生存率
e:各濃度の被験物質を添加した時の細胞生存率の中で、最大と最小の中間値
(a、bは細胞生存率eをまたぐ濃度で、a>bを表す。)
細胞生存率(%)=a’÷b’×100
a’:被検物質を添加したウェルの発光量の平均値(n=6)
b’:被検物質を添加しなかったウェルの発光量の平均値(n=6)
(nは被験物質1濃度当りに実施した評価の数を表す。)
SEKISUI XenoTech社より購入したhuman liver lysosomes(カタログ番号:H0610.L)及び10x catabolic buffer(カタログ番号:K5200)を用い、SEKISUI XenoTech社が推奨するプロトコールに従って、参考例ADCの代謝試験を評価した。1.5mLエッペンドルフチューブに、超純水を70μL、10x catabolic bufferを20μL、超純水で10倍希釈したhuman liver lysosomesを100μL添加し、これに評価対象の化合物のリン酸緩衝生理食塩水を、10μL添加した。反応溶液を37℃で16時間インキュベートした後、アセトニトリルを200μL添加し、25℃でさらに16時間インキュベートした後、これをLC-MSにて分析した。分析条件は以下のとおりである。検出した化合物の結果を表18に示す。
(分析条件)
質量分析装置:6500Qtrap(AB Sciex社)又はOrbitrap Elite(サーモフィッシャーサイエンティフィック社)
Spray Voltage:3500V
Capillary温度:400℃
HPLC:Ultimate3000 UPLC(サーモフィッシャーサイエンティフィック社)
Column:InertSustain C18(GLサイエンス社、3μm、2.1mm×100mm)
Solvent:A液:0.1% HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分-1.5分;A/B=5:95
1.5-11.0分 Linear gradient from A 5% to 95%
11.0-12.0分;A/B=95:5
12.0-15.0分;A/B=5:95
Flow rate:0.2mL/分
カラム温度:40℃
ヒトリンパ腫細胞株であるKarpas-299細胞(European Collection of Authenticated Cell Cultures、以下、ECACC)を、10%のウシ胎児血清(MP Biomedicals)を含むRPMI1640(GIBCO)(以下、「培地」という)で培養した。細胞を培地で2×106cells/mLになるように調製し、細胞培養用プレートに3mL添加した後、濃度30mg/mLの参考例ADC1を1.5μL添加した。これを37℃、5%CO2下で1日間培養した。培養後、細胞懸濁液を遠心分離(2000gで5分間)で、細胞ペレットと培養液に分離した。回収した培養液にアセトニトリル4mLを添加した後、25℃で18時間インキュベートした。インキュベート後、アセトニトリル懸濁液を遠心分離(2500gで5分間)で上清を回収し、これを酢酸で約pH4にした後、凍結乾燥させ、白色の固体を得た。一方、細胞ペレットに対して、リン酸緩衝生理食塩水3mLで2回洗浄した後、トリス緩衝生理食塩水0.3mL及びアセトニトリル0.6mLを添加し、これを25℃で18時間インキュベートした。インキュベート後、アセトニトリル懸濁液を遠心分離(2500gで5分間)で上清を回収し、これを酢酸で約pH4にした後、凍結乾燥させ、固体を得た。得られたサンプルを0.1%ギ酸/10%アセトニトリル水溶液(3mL)に溶かし、そのうち5μLをLC-MSにて分析した。分析条件は以下のとおりである。検出した化合物の結果を表19に示す。
(分析条件)
質量分析装置:Q-Exactive(サーモフィッシャーサイエンティフィック社)
Spray Voltage:3500V
Capillary温度:400℃
HPLC:Ultimate3000 UPLC(サーモフィッシャーサイエンティフィック社)
Column:AcquityUPLC HSS T3 column(ウォーターズ社,1.8μm,2.1mm×50mm)
Solvent:A液:0.1% HCOOH/CH3CN、B液:0.1% HCOOH/H2O
Gradient Condition:
0.0分;A/B=10:90
0.0-2.0分 Linear gradient from A 10% to 90%
2.0-6.0分;A/B=90:10
6.0-8.0分;A/B=10:90
Flow rate:0.2mL/分
カラム温度:40℃
CD30抗原陽性かつHER2抗原陰性であるKarpas-299細胞(ECACC)を、10%のウシ胎児血清(MP Biomedicals)を含むRPMI1640(GIBCO)(以下、この試験において、「培地A」という)で培養した。また、CD30抗原陰性かつHER2抗原陽性であるSK-BR-3細胞(ATCC)を、10%のウシ胎児血清(MP Biomedicals)を含むMcCoy’s5A(GIBCO)(以下、この試験において、「培地B」という)で培養した。Karpas-299細胞及びSK-BR-3細胞を培地A又は培地Bで2×106cells/mLになるように調製し、96穴細胞培養用マイクロプレートに50μLずつ添加した。SK-BR-3細胞は、添加後、37℃、5%CO2下で一晩培養した。培地A又は培地Bで8段階に4倍希釈したADCを、マイクロプレートに50μLずつ添加し、37℃、5%CO2下で、Karpas-299細胞を4日間、SK-BR-3細胞を3日間それぞれ培養した。培養後、マイクロプレートをインキュベーターから取り出し、室温で10分間静置した。各ウェルに50μLのCellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(Promega)を添加し、撹拌した。この混合物を暗所で20分インキュベートした。マイクロプレートルミノメーターを用いて発光を計測することにより、ADCの濃度ごとに細胞生存率を算出した。IC50値は、試験例3に記載の方法に従い算出した。結果を表20に示す。
本試験は、薬物の抗腫瘍作用を評価する代表的な試験である。Karpasヒト未分化巨大細胞のリンパ腫モデルは、CB-17SCIDマウスに、5×106個の細胞を皮下移植することにより作製する。当該腫瘍モデルにおいて、腫瘍が90~110mm3平均体積に達した後に、治療を開始した。マウスに、参考例ADCをリン酸緩衝生理食塩水に溶かしたものを、1回静脈内注射する。腫瘍体積は、式:0.5(最長寸法×垂直寸法2)を使用して計算する。その腫瘍が約2000mm3になったとき、マウスを試験から除外し、平均腫瘍サイズはそれ以降プロットしない。なお、本試験の方法は、Hamblett K. J. et. al. Clin. Cancer Res., 2004, 10, 7063-7070等に記載されている。
本試験は、薬物又は抗体薬物複合体の毒性(安全性)を評価する代表的な試験である。毒性は、マウス又はSprague-Dawleyラットに、薬物又は抗体薬物複合体を、単回又は反復尾静脈内投与し、一般症状観察、血液学的検査、血液生化学的検査、骨髄検査、剖検、臓器重量、病理組織学的検査等を実施することによって、確認することができる。なお本試験は、新版トキシコロジー、日本トキシコロジー学会教育委員会 編、朝倉書店 (2009)に記載されている。
Claims (19)
- 式(1):
bは1~5の整数を表し、
Xは、-NH-又は-CO-を表し、
Zは、式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)、式(Z-5)、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)又は式(Z-11):
nは0~2の整数を表し、
pは1~3の整数を表し、
AAは、グルタミン酸残基(Glu)、アスパラギン酸残基(Asp)又はリシン残基(Lys)を表し、AAが複数ある場合、それぞれのAAは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AA同士はアミド結合を介して結合しており、(AA)n又は(AA)pのN末端窒素原子はカルボニル基(a)と共にアミド結合を形成しており、
Gは、-O-又は-NH-を表し、
Wは、式(W-1)又は式(W-2):
R6a及びR6bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表し、
R7は、C1-6アルキル基を表し、
Qは、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)又は式(Q-7):
R8a及びR8bは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、C1-6アルキル基又はC1-6アルコキシ基を表し、
R8c、R8d及びR8eは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、フェニル基、1~3個のフッ素原子で置換されていてもよいC1-6アルキル基、C1-6アルコキシ基又はC1-6アルキルエステル基を表す)
で表される基を表す)
で表される基を表し、
R3は、-(CH2)u-COR9を表し、
uは1又は2を表し、
R4及びR9は、それぞれ独立して、水酸基又はADを表し、
ADは、Glu、Asp又はLysを表し、ADのN末端窒素原子は隣接するカルボニル基と共にアミド結合を形成しており、
ただし、R4又はR9がADであるとき、nは0又は1であり、
R5a及びR5bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表す)
で表される基を表し、
ただし、Xが-NH-であるとき、Zは、式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)又は式(Z-5)であり、Xが-CO-であるとき、Zは、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)又は式(Z-11)であり、
R1は、水素原子又は(AB)mを表し、
ABは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ABが複数ある場合、それぞれのABは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AB同士はアミド結合を介して結合しており、
mは1~9の整数を表し、
R2は、水酸基又は(AC)gを表し、
ACは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ACが複数ある場合、それぞれのACは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AC同士はアミド結合を介して結合しており、
gは1~9の整数を表し、
ただし、R1が(AB)m且つR2が(AC)gであるとき、mとgの和は2~10の整数である]
で表される、化合物又はその塩。 - 式(1)が、式(1-1):
bは1~5の整数を表し、
Zは、式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)又は式(Z-5):
nは0~2の整数を表し、
pは1~3の整数を表し、
AAは、グルタミン酸残基(Glu)、アスパラギン酸残基(Asp)又はリシン残基(Lys)を表し、AAが複数ある場合、それぞれのAAは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AA同士はアミド結合を介して結合しており、(AA)n又は(AA)pのN末端窒素原子はカルボニル基(a)と共にアミド結合を形成しており、
Wは、式(W-1)又は式(W-2):
R6a及びR6bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表し、
R7は、C1-6アルキル基を表し、
Qは、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)又は式(Q-7):
R8a及びR8bは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、C1-6アルキル基又はC1-6アルコキシ基を表し、
R8c、R8d及びR8eは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、フェニル基、1~3個のフッ素原子で置換されていてもよいC1-6アルキル基、C1-6アルコキシ基又はC1-6アルキルエステル基を表す)
で表される基を表す)
で表される基を表し、
R3は、-(CH2)u-COR9を表し、
uは1又は2を表し、
R4及びR9は、それぞれ独立して、水酸基又はADを表し、
ADは、Glu、Asp又はLysを表し、ADのN末端窒素原子は隣接するカルボニル基と共にアミド結合を形成しており、
ただし、R4又はR9がADであるとき、nは0又は1であり、
R5a及びR5bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表す)
で表される基を表し、
R1は、水素原子又は(AB)mを表し、
ABは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ABが複数ある場合、それぞれのABは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AB同士はアミド結合を介して結合しており、
mは1~9の整数を表し、
R2は、水酸基又は(AC)gを表し、
ACは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ACが複数ある場合、それぞれのACは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AC同士はアミド結合を介して結合しており、
gは1~9の整数を表し、
ただし、R1が(AB)m且つR2が(AC)gであるとき、mとgの和は2~10の整数である]
で表される、請求項1に記載の化合物又はその塩。 - R7が、メチル基又はイソプロピル基であり、
Qが、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)又は式(Q-7)である、
請求項2に記載の化合物又はその塩。 - pが1であり、
Wが、式(W-1)であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)であり、
R8a及びR8bが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子又はメトキシ基であり、
R8c、R8d及びR8eが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、メチル基、トリフルオロメチル基又はメトキシ基であり、
R4及びR9が、水酸基である、
請求項2又は3に記載の化合物又はその塩。 - Zが、式(Z-1)、式(Z-2)又は式(Z-3)であり、
Wが、式(W-1)であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)であり、
R8a及びR8bが、水素原子であり、
R8c、R8d及びR8eが、水素原子であり、
R4及びR9が、水酸基である、
請求項2~4のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。 - bが2である、請求項2~5のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
- 式(1)が、式(1-2):
bは1~5の整数を表し、
Zは、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)又は式(Z-11):
nは0~2の整数を表し、
pは1~3の整数を表し、
AAは、グルタミン酸残基(Glu)、アスパラギン酸残基(Asp)又はリシン残基(Lys)を表し、AAが複数ある場合、それぞれのAAは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AA同士はアミド結合を介して結合しており、
(AA)n又は(AA)pのN末端窒素原子はカルボニル基(a)と共にアミド結合を形成しており、
Gは、-O-又は-NH-を表し、
Wは、式(W-1)又は式(W-2):
R6a及びR6bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表し、
R7は、C1-6アルキル基を表し、
Qは、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)又は式(Q-7):
R8a及びR8bは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、C1-6アルキル基又はC1-6アルコキシ基を表し、
R8c、R8d及びR8eは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、フェニル基、1~3個のフッ素原子で置換されていてもよいC1-6アルキル基、C1-6アルコキシ基又はC1-6アルキルエステル基を表す)
で表される基を表す)
で表される基を表し、
R5a及びR5bは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基を表す)
で表される基を表し、
R1は、水素原子又は(AB)mを表し、
ABは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ABが複数ある場合、それぞれのABは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AB同士はアミド結合を介して結合しており、
mは1~9の整数を表し、
R2は、水酸基又は(AC)gを表し、
ACは、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)を表し、ACが複数ある場合、それぞれのACは互いに同一であっても異なっていてもよく、また、AC同士はアミド結合を介して結合しており、
gは1~9の整数を表し、
ただし、R1が(AB)m且つR2が(AC)gであるとき、mとgの和は2~10の整数である]
で表される、請求項1に記載の化合物又はその塩。 - Zが、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)又は式(Z-9)であり、
R7が、メチル基又はイソプロピル基であり、
Qが、式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)又は式(Q-7)である、
請求項7に記載の化合物又はその塩。 - Zが、式(Z-6)又は式(Z-7)であり、
Wが、式(W-1)であり、
Qが、式(Q-1)又は式(Q-2)であり、
R8a及びR8bが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子又はメトキシ基であり、
R8c、R8d及びR8eが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、カルボキシル基、メチル基、トリフルオロメチル基又はメトキシ基である、
請求項7又は8に記載の化合物又はその塩。 - R8a及びR8bが、水素原子であり、
R8c、R8d及びR8eが、水素原子である、
請求項7~9のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。 - bが3である、請求項7~10のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
- (AB)mが、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)、バリン残基(Val)、*1-(Glu)-(Gly)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)又は*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val)であり、
ここで*1末端はシステイン残基とアミド結合していることを表し、
(AC)gが、グリシン残基(Gly)又はプロリン残基(Pro)である、
請求項1~11のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。 - (AB)mが、アラニン残基(Ala)、アルギニン残基(Arg)、アスパラギン残基(Asn)、アスパラギン酸残基(Asp)、システイン残基(Cys)、グルタミン残基(Gln)、グルタミン酸残基(Glu)、グリシン残基(Gly)、ヒスチジン残基(His)、イソロイシン残基(Ile)、ロイシン残基(Leu)、リシン残基(Lys)、メチオニン残基(Met)、フェニルアラニン残基(Phe)、プロリン残基(Pro)、セリン残基(Ser)、トレオニン残基(Thr)、トリプトファン残基(Trp)、チロシン残基(Tyr)又はバリン残基(Val)であり、
(AC)gが、グリシン残基(Gly)である、
請求項1~11のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。 - R1が、水素原子であり、
R2が、水酸基である、
請求項1~13のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。 - nが0又は1である、請求項1~14のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
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