WO2020105859A1 - 백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물 - Google Patents

백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물

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WO2020105859A1
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skin
extract
moisturizing
lotion
wrinkles
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채성욱
임아랑
송광훈
김윤희
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Korea Institute of Oriental Medicine KIOM
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Korea Institute of Oriental Medicine KIOM
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    • A23V2200/318—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat

Definitions

  • the present invention relates to a composition for improving skin wrinkles and moisturizing skin, which includes a white migraine extract as an active ingredient.
  • the skin is an organ that is always in contact with the external environment. It mainly protects the human body from external physical damage and chemicals, prevents bacteria, fungi, and viruses from invading the skin, and serves as a protective barrier to prevent moisture loss. Looking at the structure of the skin, it is composed of three layers of epidermis, dermis, and subcutaneous skin, and the epidermis is the thinnest of the three layers and plays an important role in moisturizing and protecting the skin. In particular, the skin is elastic and softened by moisture present in the stratum corneum of the epidermis, but it is known to contain more than 10% moisture to maintain the elasticity of the stratum corneum.
  • MMPs collagen degrading enzymes
  • matrix metalloproteinases matrix metalloproteinases
  • the stratum corneum of the skin existing as the outermost layer separating the human body from the outside contains about 10 to 20% of moisture and gives the skin flexibility, elasticity, and moisturization through moisture retention.
  • lipid components such as free fatty acids, glycerolipids and ceramides, and natural moisturizing factor (NMF), a hydrophilic hygroscopic substance, play an important role in skin flexibility and water retention.
  • NMF natural moisturizing factor
  • the moisture content of the stratum corneum is lowered (usually less than 10%)
  • the skin becomes dry and it is a direct or indirect cause of itchiness, atopy, and dermatitis. Therefore, by providing a barrier that suppresses moisture loss even in a dry environment, the importance of making a healthy and elastic skin by increasing the moisture retention of the stratum corneum is increasing.
  • the present invention has been derived by the above-described needs, the present invention provides a composition for skin wrinkle improvement and skin moisturizing, which includes the extract of Baekpyundu as an active ingredient, the Baekpyundubu extract has little cytotoxicity, and is used for UV irradiation.
  • the present invention was completed by confirming that the expression of the promoted MMP-1 was significantly suppressed and the content of hyaluronic acid capable of enhancing skin moisturization was enhanced.
  • the present invention provides a cosmetic composition for improving skin wrinkles or moisturizing skin, which contains a white migraine extract as an active ingredient.
  • the present invention provides a health functional food composition for improving skin wrinkles or moisturizing skin containing the white migraine extract as an active ingredient.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of skin wrinkles containing the white migraine extract as an active ingredient.
  • the present invention relates to a composition for improving skin wrinkles and moisturizing skin comprising a white migraine extract as an active ingredient, the white migraine extract has little cytotoxicity, significantly suppresses the expression of MMP-1 enhanced by ultraviolet irradiation, and , It has the effect of enhancing the content of hyaluronic acid, which can promote skin moisturization.
  • #### means that the cell viability of the UVB irradiated group was statistically significantly reduced compared to the control group that did not process anything, meaning that p ⁇ 0.0001, **, ***, **** are extracts of Baekpyeondu And treated with UVB, the cell viability of the experimental group was statistically significantly increased compared to that of the UVB irradiated group, ** is p ⁇ 0.01, *** is p ⁇ 0.001, **** is p ⁇ 0.0001.
  • Figure 3 is a result of confirming the change in the expression level of MMP-1 according to the treatment of Baekpyeon extract of the present invention.
  • #### means that the MMP-1 expression level of the UVB irradiation group was statistically significantly increased compared to the control group that did not process anything, meaning that p ⁇ 0.0001, **, **** treated the white migraine extract
  • the expression level of MMP-1 in the experimental group irradiated with UVB was statistically significantly decreased compared to the expression level of MMP-1 in the UVB irradiated group, ** means p ⁇ 0.01, **** means p ⁇ 0.0001 .
  • Control is a group that does not process anything
  • UVB is a group that does not treat the white migraine extract of the present invention of the present invention, and irradiates only ultraviolet rays.
  • #### means that the hyaluronic acid content of the UVB irradiated group was statistically significantly reduced compared to the control group not treated with anything, which means p ⁇ 0.0001, and **, ***, **** are white migraine Hyaluronic acid content of the experimental group treated with the extract and irradiated with UVB was statistically significantly increased compared to the UVB irradiated group, ** is p ⁇ 0.01, *** is p ⁇ 0.001, **** is p ⁇ 0.0001 It means
  • the present invention relates to a cosmetic composition for improving skin wrinkles or moisturizing skin containing an extract of Baekpyundu as an active ingredient.
  • the Baekpyeondu extract may be prepared by a method including the following steps, but is not limited to this:
  • step (3) Concentrating the filtered extract of step (2) under reduced pressure and drying to prepare an extract.
  • the extraction solvent may be a conventional extraction solvent known in the art.
  • Preferred extraction solvents include water, C 1 to C 4 anhydrous or hydrous lower alcohols (eg methanol, ethanol, propanol, butanol, normal-propanol, iso-propanol and normal-butanol, etc.), mixed solvents of the lower alcohol and water , Acetone, ethyl acetate, chloroform, 1,3-butylene glycol, hexane, diethyl ether, or butyl acetate is used, more preferably water or ethanol, even more preferably water.
  • C 1 to C 4 anhydrous or hydrous lower alcohols eg methanol, ethanol, propanol, butanol, normal-propanol, iso-propanol and normal-butanol, etc.
  • any conventional method known in the art such as filtration, hot water extraction, immersion extraction, reflux cooling extraction, and ultrasonic extraction can be used as the extraction method.
  • water is added in a volume of 5 to 10 times based on the weight of bag migraine, and heated at 90 to 110 ° C for 2-3 hours to extract. After filtering the extraction solution with filter paper, it is preferable to use by lyophilization, but is not limited thereto.
  • the reduced pressure concentration in step (3) is preferably a vacuum reduced pressure concentrator or a vacuum rotary evaporator, but is not limited thereto.
  • the drying is preferably dried under reduced pressure, vacuum drying, boiling drying, spray drying or freeze drying, but is not limited thereto.
  • wrinkle formation is caused by a decrease in collagen, and the decrease in collagen may be caused by excessive oxidative stress or ultraviolet irradiation.
  • the Baekpyeondu extract may reduce the expression level of MMP-1 protein or increase the content of hyaluronic acid, but is not limited thereto.
  • the cosmetic composition according to an embodiment of the present invention is an external ointment for skin, cream, softening lotion, nutrient makeup, pack, essence, hair tonic, shampoo, conditioner, hair conditioner, hair treatment, gel, skin lotion, skin softener, skin Toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisture cream, hand cream, foundation, nutrition essence, sunscreen, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion and body It may have any one formulation selected from the group consisting of cleansers, but is not limited thereto.
  • the cosmetic composition composed of each of these formulations may contain various bases and additives necessary and appropriate for the formulation of the formulation, and the types and amounts of these components can be easily selected by those skilled in the art.
  • the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a paste, cream or gel, animal fibers, plant fibers, wax, paraffin, starch, tragacanth, cellulose derivatives, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide as carrier components Etc. can be used.
  • lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, or polyamide powder may be used as a carrier component, and in the case of a spray, additionally chlorofluoro Propellants such as hydrocarbon, propane-butane or dimethyl ether.
  • a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, and propylene Glycols, 1,3-butylglycol oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan.
  • liquid diluents such as water, ethanol or propylene glycol
  • suspensions such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester
  • Microcrystalline cellulose aluminum metahydroxide, bentonite, agar or trakant, etc.
  • the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a surfactant-containing cleansing agent, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, acethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate as a carrier component , Fatty acid amide ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linoline derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like.
  • the cosmetic composition of the present invention may further contain excipients including fluorescent materials, fungicides, oleogenic agents, moisturizers, fragrances, fragrance carriers, proteins, solubilizers, sugar derivatives, sunscreens, vitamins, plant extracts, etc. .
  • the present invention relates to a health functional food composition for improving skin wrinkles or moisturizing the skin, which contains a white migraine extract as an active ingredient.
  • the health functional food composition of the present invention When used as a food additive, the health functional food composition may be added as it is or used with other foods or food ingredients, and may be suitably used according to a conventional method.
  • the mixing amount of the active ingredient can be appropriately used depending on the purpose of use (prevention or improvement).
  • the health functional food composition of the present invention in the manufacture of food or beverage is added in an amount of 15 parts by weight or less, preferably 10 parts by weight or less with respect to the raw material.
  • the amount may be below the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount above the above range.
  • the type of the health functional food There are no particular restrictions on the type of the health functional food.
  • foods to which the health functional food composition can be added are meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gum products, dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea Drinks, alcoholic beverages, and vitamin complexes are included, and all foods in the ordinary sense are included.
  • the health functional food composition of the present invention may be prepared as a food, particularly a functional food.
  • the functional food of the present invention includes ingredients that are conventionally added during food production, and includes, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, and seasonings.
  • natural carbohydrate or flavoring agent may be included as an additional component in addition to the active ingredient.
  • the natural carbohydrates include monosaccharides (e.g., glucose, fructose, etc.), disaccharides (e.g., maltose, sucrose, etc.), oligosaccharides, polysaccharides (e.g., dextrin, cyclodextrin, etc.), or sugar alcohols ( Xylitol, sorbitol, erythritol, etc.) are preferred.
  • the flavoring agent may be a natural flavoring agent (eg, tau martin, stevia extract, etc.) and a synthetic flavoring agent (eg, saccharin, aspartame, etc.).
  • the proportion of the components to be added is not particularly important, but it is generally selected from the range of 0.01 to 0.1 parts by weight with respect to 100 parts by weight of the health functional food composition of the present invention.
  • the present invention relates to a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of skin wrinkles containing the white migraine extract as an active ingredient.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent.
  • the pharmaceutically acceptable carrier contained in the pharmaceutical composition of the present invention is commonly used in the preparation, saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol, lactose, and deck Strath, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, syrup, methyl cellulose, methylhydroxybenzoate, propyl Hydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, and the like, but is not limited thereto.
  • compositions of the present invention may be administered orally or parenterally, and parenteral administration may be administered by injection or application to the skin.
  • suitable dosages of the pharmaceutical compositions of the invention may be variously prescribed by factors such as formulation method, mode of administration, patient's age, weight, sex, morbidity, food, time of administration, route of administration, rate of excretion, and response sensitivity. Can be.
  • HaCaT cells were cultured in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) containing 37%, 10% FeBS (Fetal bovine serum) and 1% penicillin-streptomycin (PS, Gibco) at 37 ° C and 5% CO 2 conditions.
  • DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium
  • FeBS Fetal bovine serum
  • PS penicillin-streptomycin
  • the cultured HaCaT cells (human keratinocyte cell lines) were treated by diluting each sample for 24 hours at each concentration, and then treated with MTS assay (CellTiter Aqueous One Solution Cell proliferation assay kit 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -5- (3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophynyl) -2H-tetrazolium, inner salt; MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) technique for cell viability at 490 nm with a microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale , CA, USA).
  • MTS assay CellTiter Aqueous One Solution Cell proliferation assay kit 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -5- (3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophynyl) -2H-tetrazolium, inner salt; MTS, Promega Co. Madison, WI, USA
  • MTS assay CellTiter Aqueous One Solution Cell proliferation assay kit, 3- (4,5) -Dimethylthiazol-2-yl) -5- (3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophynyl) -2H-tetrazolium, inner salt; MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) technique to improve cell viability at 490nm It was tested by measuring with a plate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA).
  • the white migraine extract of the present invention was treated by concentration (10, 50, 100 and 200 ⁇ g / ml), respectively. Then, ultraviolet (UV) irradiation, supernatant of the culture was collected and centrifuged at 13,000 rpm for 5 minutes. Subsequently, the supernatant was taken and subjected to a fluorescence assay using an ELISA kit to quantitatively analyze the expression level of MMP-1.
  • UV ultraviolet
  • the content of hyaluronic acid was decreased by ultraviolet irradiation, but it was confirmed that the content of hyaluronic acid was increased in a concentration-dependent manner in each of the experimental groups treated with the extract of hyaluronic acid in the present invention. .

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Abstract

본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물에 관한 것이다. 상세하게는 백편두 추출물은 세포 독성이 거의 없으며, 자외선 조사에 의해 증진된 MMP-1의 발현을 현저하게 억제하고, 피부 보습을 증진시킬 수 있는 히알루론산의 함량을 증진시키는 것이다. 따라서 본 발명의 조성물은 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물; 피부주름 개선 또는 피부 보습용 건강기능식품 조성물; 또는 피부주름의 예방 또는 치료용 약학 조성물로 사용할 수 있다.

Description

백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물
본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부의 환경과 항상 접하고 있는 기관으로 주로 외부의 물리적 손상 및 화학물질로부터 인체를 보호하고, 세균, 곰팡이, 바이러스 등이 피부로 침범하는 것을 방지하며, 수분 손실을 막는 보호장벽 역할을 한다. 피부의 구조를 보면 표피, 진피, 피하지방의 3개 층으로 구성되고 표피는 3개 층 중 가장 얇은 층으로 피부의 보습 및 보호를 담당하는 중요한 기능을 한다. 특히 표피의 각질층에 존재하는 수분에 의하여 피부가 탄력 있고 부드럽게 되는데, 각질층의 탄력이 유지되려면 10% 이상의 수분함유가 필수적인 것으로 알려져 있다.
최근 들어, 환경오염 등의 이유로 강한 자외선에 노출되는 경우가 많아졌고, 이에 의한 피부의 수분 손실이 증가하면서 피부 노화가 가속화되고, 피부의 손상에 의한 관련 질병의 발병률이 증가함에 따라, 자외선에 노출된 피부의 보습 유지 및 주름개선 효과를 오랫동안 지속시켜주는 조성물에 대한 요구는 점점 증가하는 추세이다.
광노화된 피부에서는 거칠어짐, 탄력 손실, 주름 발생 및 불규칙한 색소 침착 등과 같은 외관상의 특징이 관찰되며, 이 중 광노화의 주된 연구 분야는 피부 주름의 변화에 대한 것이다. 상기 광노화에 의한 피부 주름 형성에 관해 피부의 주요 구성성분인 콜라겐(collagen)의 합성, 분해 및 수분 함유량 등의 기초적인 생리 대사 변화에 대한 연구 결과가 다수 보고되고 있다. 특히 자외선에 의해 활성 산소종(reactive oxygen species) 생성이 증가되고 피부의 효소적, 비효소적 항산화 방어체계가 붕괴되어 콜라겐의 분해 증가 및 생합성을 감소시켜 진피층 내의 콜라겐이 현저하게 감소된다. 상기 콜라겐 감소에 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐 분해 효소(MMPs; matrix metalloproteinases)로, 이는 세포외기질(extracellular matrix)과 기저막(basement membrane)의 분해에 관여한다. 상기 효소는 자외선에 의해 활성이 증가되며 이를 억제함으로써 자외선에 의해 유도되는 피부 두께 증가 및 주름 형성이 감소된다는 연구 결과들이 보고되어 있다. 따라서 광노화의 예방 및 치료를 위해서는 MMPs를 조절하는 것이 효과적인 방법으로 알려져 있다.
한편, 인체와 외부를 구분하는 최외각층으로 존재하는 피부의 각질층은 약 10~20% 정도의 수분을 함유하고 수분유지를 통해 피부의 유연성, 탄력성 및 보습감을 부여한다. 각질층에는 자유지방산, 글리세롤리피드, 세라마이드 등의 지질 성분과 친수성의 흡습성 물질인 천연보습인자 NMF(Natural Moisturizing Factor)가 피부의 유연성과 수분유지에 중요한 역할을 한다. 그러나 각질층의 수분 함유량이 저하될 경우(보통 10% 이하) 피부가 건조해지고 가려움, 아토피, 피부염 등의 직,간접적인 원인이 된다. 따라서 건조한 환경에서도 수분손실을 억제해주는 장벽을 마련함으로써 각질층의 충분한 수분유지를 도모하여 건강하고 탄력있는 피부를 만드는 것에 관한 중요성은 점점 더 커지고 있다.
한편, 백편두는 예부터 민간요법으로 건위화습(健胃化濕), 화중소서(和中消暑)에 효능이 있다고 전해지고 있으며, 한국등록특허 제0316269호에 제비콩 잎 메탄올 추출물이 생리활성을 증가시키는 효능에 대해 개시하고 있고, 한국등록특허 제0929979호에 백편두를 포함하는 한약재 조성물이 항암제 투여로 유도된 간장과 신장의 독성을 감소시키는 효과에 대해 개시하고 있으나, 본 발명의 백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물에 대한 연구는 보고된 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물을 제공하고, 백편두 추출물이 세포 독성이 거의 없으며, 자외선 조사에 의해 증진된 MMP-1의 발현을 현저하게 억제하고, 피부 보습을 증진시킬 수 있는 히알루론산의 함량을 증진시키는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름의 개선 또는 피부 보습용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선 및 피부 보습용 조성물에 관한 것으로, 백편두 추출물은 세포 독성이 거의 없으며, 자외선 조사에 의해 증진된 MMP-1의 발현을 현저하게 억제하고, 피부 보습을 증진시킬 수 있는 히알루론산의 함량을 증진시키는 효과가 있는 것이다.
도 1은 본 발명의 백편두 추출물의 농도별(10, 50, 100, 200, 250 및 500㎍/㎖) 처리에 따른 HaCaT 세포의 세포 생존률(%)을 확인한 MTS 어세이 결과이다.
도 2는 UVB 조사에 따른 세포 손상에 대하여, 본 발명의 백편두 추출물의 HaCaT 세포의 세포 보호 효과를 확인한 것으로, HaCaT 세포(사람 각질형성 세포주)에 24시간 동안 각각의 시료를 농도별(10, 50, 100 및 200㎍/㎖)로 처리하고, 자외선(UV Crosslinker, UltR5 Lum)을 30분 동안 조사한 후 실시한 MTS 어세이 결과이다. ####은 UVB 조사군의 세포 생존률이 아무것도 처리하지 않은 Control 군에 비해 통계적으로 유의미하게 감소했다는 것으로, p<0.0001임을 의미하고, **, ***, ****은 백편두 추출물을 처리하고 UVB를 조사한 실험군의 세포 생존률이 UVB 조사군의 세포 생존률에 비교하여 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, **은 p<0.01, ***은 p<0.001, ****은 p<0.0001임을 의미한다.
도 3은 본 발명의 백편두 추출물 처리에 따른 MMP-1의 발현량 변화를 확인한 결과이다. ####은 UVB 조사군의 MMP-1 발현량이 아무것도 처리하지 않은 Control 군에 비해 통계적으로 유의미하게 증가했다는 것으로, p<0.0001임을 의미하고, **, ****은 백편두 추출물을 처리하고 UVB를 조사한 실험군의 MMP-1 발현량이 UVB 조사군의 MMP-1 발현량에 비교하여 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, **은 p<0.01, ****은 p<0.0001임을 의미한다.
도 4는 UV 조사 및 본 발명의 백편두 추출물의 농도별 처리에 따른 히알루론산(HA) 함량 변화를 분석한 결과이다. Control은 아무것도 처리하지 않는 군이고, UVB는 본 발명의 본 발명의 백편두 추출물을 처리하지 않고, 자외선만을 조사한 군이다. ####은 UVB 조사군의 히알루론산 함량이 아무것도 처리하지 않은 Control 군에 비해 통계적으로 유의미하게 감소했다는 것으로, p<0.0001임을 의미하고, **, ***, ****은 백편두 추출물을 처리하고 UVB를 조사한 실험군의 히알루론산 함량이 UVB 조사군에 비해 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, **은 p<0.01, ***은 p<0.001, ****은 p<0.0001임을 의미한다.
본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 백편두 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다:
(1) 백편두 건조 분말에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
(2) 단계 (1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
(3) 단계 (2)의 여과한 추출물을 감압 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.
상기 단계 (1)에서 추출용매는 당 업계에 공지된 통상적인 추출용매를 사용할 수 있다. 바람직한 추출용매로는 물, C 1~C 4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올 및 노말-부탄올 등), 상기 저급 알코올과 물의 혼합용매, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜, 헥산, 디에틸에테르, 또는 부틸아세테이트를 이용되며, 더 바람직하게는 물 또는 에탄올이고, 더욱더 바람직하게는 물이다.
상기 제조방법에 있어서, 추출방법은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당 업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다.
상기 물을 용매로 이용하여 추출하는 열수 추출인 경우, 백편두 중량에 대하여 5~10배 부피만큼 물을 넣고, 90~110℃에서 2~3시간 동안 가열하여 추출하는 것이다. 추출 용액을 여과지로 여과한 후, 동결건조하여 사용하는 것이 바람직하지만 이에 한정하지 않는다.
또한, 에탄올 추출을 하는 경우, 백편두 중량에 대하여 5~10배 부피만큼 70%(v/v) 에탄올을 넣고, 20~25℃의 상온에서 22~24시간 동안 침지하여 추출하는 것이다. 추출 용액을 여과지로 여과한 후, 동결건조하여 사용하는 것이 바람직하지만 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 (3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결 건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명에서 주름 생성은 콜라겐의 감소로 인해 발생하는 것이며, 상기 콜라겐의 감소는 과도한 산화 스트레스나 자외선 조사가 원인일 수 있다.
상기 백편두 추출물은 MMP-1 단백질의 발현량을 감소시키거나 히알루론산의 함량을 증가시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 화장료 조성물은 피부 외용 연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형으로 이루어진 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 아세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습제, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당 유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름의 개선 또는 피부 보습용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 건강기능식품 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등), 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 상기 성분들 이외에 항산화제, 완충액, 정균제, 희석제, 계면활성제, 결합제, 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제 또는 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 주사 또는 피부에 도포하는 방법으로 투여할 수 있는 것이다. 본 발명의 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다.
이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
실시예 1. 백편두 추출물의 제조
(1) 백편두 열수 추출물의 제조
백편두 200g에 대하여 2ℓ의 물을 가하고, 90~100℃의 온도에서 2~3시간 동안 가열 후, 추출물을 여과하였다. 이후에 동결건조기를 이용하여 감압 건조하여 수득한 백편두 열수 추출물을 실험에 사용하기 위하여 10%(v/v) DMSO에 녹여 사용하였다.
(2) 백편두 에탄올 추출물의 제조
백편두 200g에 대하여 2ℓ의 70%(v/v) 에탄올을 가하고, 20~25℃의 상온에서 22~24시간 동안 침지한 후, 추출물을 여과하였다. 이후에 감압농축기로 농축하고 동결건조기를 이용하여 감압 건조하여 수득한 백편두 에탄올 추출물을 실험에 사용하기 위하여 10%(v/v) DMSO에 녹여 사용하였다.
실시예 2. 백편두 추출물의 처리에 따른 세포 생존율 분석
HaCaT 세포는 37℃, 5%의 CO 2 조건으로, 10%의 FBS(Fetal bovine serum)과 1%의 페니실린-스트렙토마이신(PS, Gibco)이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)에서 배양하였다.
상기 배양한 HaCaT 세포(사람 각질형성 세포주)에 24시간 동안 각각의 시료를 농도별로 희석하여 처리하고 MTS 어세이(CellTiter Aqueous One Solution Cell proliferation assay kit 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophynyl)-2H-tetrazolium, inner salt; MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) 기법으로 세포 생존능을 490nm에서 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 측정하여 시험하였다.
그 결과 도 1에 개시한 바와 같이, 본 발명의 백편두 열수 추출물을 처리하여도 아무것도 처리하지 않은 대조군을 기준으로 세포 생존율(%)의 변화가 거의 없어, 본 발명의 백편두 열수 추출물은 세포독성이 거의 없다는 것을 확인하였다.
실시예 3. 자외선 조사에 따른 세포 보호 효과 확인
HaCaT 세포에 24시간 동안 각각의 시료를 농도별로 희석하여 처리하고 자외선(UV Crosslinker, Ultra Lum)을 30분 동안 조사한 후, MTS 어세이(CellTiter Aqueous One Solution Cell proliferation assay kit, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophynyl)-2H-tetrazolium, inner salt; MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) 기법으로 세포 생존능을 490nm에서 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) 로 측정하여 시험하였다.
그 결과, 도 2에 개시한 바와 같이 UVB 조사에 의해 세포 생존률(%)이 약 50% 정도 감소한 것을 확인할 수 있었고, UV 조사 후, 본 발명의 50. 100 및 200㎍/㎖의 백편두 열수 추출물을 처리한 경우, UVB 조사만 한 것에 비해 통계적으로 유의한 세포생존률(%)의 증가를 확인하여 본 발명의 백편두 열수 추출물이 50㎍/㎖ 이상의 농도에서는 세포보호 효과가 있을 것으로 판단하였다.
실시예 4. MMP -1 단백질의 발현량 변화 분석
HaCaT 세포에 24시간 동안 각각의 시료를 처리하고 자외선(UV Crosslinker, Ultra Lum)을 20mJ/cm 2로 조사한 후, MMP-1 ELISA kit(R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)를 이용하여 MMP-1의 발현량을 측정하였다.
상세하게는 96웰 플레이트에 HaCaT 세포를 도말한 후, 본 발명의 백편두 열수 추출물을 각각 농도별(10, 50, 100 및 200㎍/㎖)로 처리하였다. 이후, 자외선(UV) 조사하고, 배양물의 상등액을 수집하고 13,000rpm으로 5분 동안 원심분리하였다. 이후 상등액을 취해 ELISA 키트를 이용한 형광 어세이를 수행하여 MMP-1의 발현량을 정량분석하였다.
그 결과, 도 3에 개시한 바와 같이 자외선을 조사하지 않은 음성대조군(Control)에 비해, 자외선을 조사한 군에서 MMP-1의 발현량이 현저하게 증가한 것을 확인하였고, 본 발명의 백편두 열수 추출물의 처리군에서 MMP-1의 발현량이 자외선 조사군에 비해 현저하게 감소하는 것을 확인하였다.
실시예 5. 히알루론산( Hyaluronic Acid; HA)의 함량 변화 분석
상기 HaCaT 세포에 24시간 동안 각각의 시료를 처리하고 자외선(UV Crosslinker, Ultra Lum)을 20 mJ/cm 2로 30분간 조사한 후, 배양물의 상등액을 수집하여 히알루론산 ELISA 키트(R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)를 이용하여 HA의 함량을 측정하였다. 반응물은 흡광 어세이를 수행하였다.
그 결과, 도 4에 개시한 바와 같이, 자외선 조사에 의해, 히알루론산의 함량은 감소하였으나, 본 발명의 백편두 열수 추출물을 처리한 각각의 실험군에서는 히알루론산의 함량이 농도 의존적으로 증가한 것을 확인하였다.

Claims (7)

  1. 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 백편두 추출물의 추출용매는 C 1~C 4의 저급알코올, 물 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 백편두 추출물은 MMP-1 단백질의 발현량을 감소시키는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 백편두 추출물은 히알루론산의 함량을 증가시키는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 화장료 조성물.
  6. 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름의 개선 또는 피부 보습용 건강기능식품 조성물.
  7. 백편두 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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