WO2020030835A1 - Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles - Google Patents

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WO2020030835A1
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receptacle
wall
volatile compounds
culture chamber
receptacles
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PCT/ES2019/070475
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Samuel ÁLVAREZ GARCÍA
Pedro Antonio Casquero Luelmo
Santiago Gutiérrez Martín
Sara Mayo Prieto
Óscar GONZÁLEZ LÓPEZ
Guzmán Carro Huerga
Víctor Suárez Villanueva
Álvaro RODRÍGUEZ GONZÁLEZ
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Universidad De León
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12M1/00Apparatus for enzymology or microbiology
    • C12M1/22Petri dishes

Definitions

  • the present invention relates to a culture chamber for competitive microbiological tests by means of volatile compounds.
  • the culture chamber object of the invention is applicable in the field of microbiological analysis techniques, and more specifically to that of culture plates or Petri dishes.
  • the culture plates also known as Petri dishes, are containers of various sizes (with diameters that vary between 50 mm and 150 mm), generally shallow and circular, but may however have other shapes and / or sizes.
  • Petri dishes are the fundamental element used in the cultivation of microorganisms in solid medium.
  • a Petri dish consists of two basic elements: a base where the corresponding culture medium is located, and a cover that covers the previous one.
  • Petri dishes subdivided are plates with one or more partitions that divide the surface of the same into several parts where microorganisms can be grown without coming into contact. These systems limit the growth space for each strain, preventing them from being grown individually in the center of the plate and are not viable for measuring the radial growth of microorganism colonies. There is also risk of cross contamination, either through spores or because the mycelium is capable of exceeding the separation wall.
  • the object of the invention is a culture chamber for competing microbiological tests by means of volatile compounds comprising: a first receptacle, a second receptacle, and a centerpiece between the first receptacle and the second receptacle.
  • the receptacles comprise an outer wall and a perimeter wall perpendicular to the outer wall, and the centerpiece comprises an intermediate wall with at least one hole, and two side walls projecting from the perimeter of the intermediate wall in opposite directions.
  • the side walls of the central part surround the perimeter walls of the receptacles and the perimeter walls of the receptacles rest on the intermediate wall.
  • the intermediate wall of the central part comprises a first face facing the first receptacle and a second face facing the second receptacle, where the first face and the second Face are smooth.
  • the central part comprises an internal flange on at least one of the faces of the intermediate wall, such that the inner flange and the side wall form a housing for the end of the outer wall of a receptacle.
  • the intermediate wall comprises a plurality of flanges on the first face and / or on the second face where the external wall of a receptacle is supported.
  • the culture chamber for competitive microbiological tests by means of volatile compounds comprises a membrane or filter covering the hole in the middle wall of the central part, where the membrane or filter is porous allowing the passage of air and volatile compounds, and blocking the passage of larger elements.
  • the culture chamber for competing microbiological tests by means of volatile compounds object of the invention comprises a first flange located on the outer wall of the first receptacle, and a second flange of slightly different diameter located on the outer wall of the second receptacle, such that the walls external to a first receptacle and a second receptacle, the first flange fits into the second flange preventing relative movement between two stacked culture plates.
  • the culture chamber for competing microbiological tests by means of volatile compounds object of the invention comprises at least one partition in at least one receptacle, such that the partition divides the interior of said receptacle into independent parts.
  • Figure 1 shows an exploded view of the culture chamber object of the invention.
  • Figure 2 shows a sectional view of the culture chamber object of the mounted invention.
  • Figure 3 shows sections of two embodiments of the joining means between the two receptacles and the centerpiece and a third section showing the tabs to provide a culture chamber with aeration.
  • Figure 4 shows in detail the central hole of the horizontal intermediate wall of the intermediate element, with a variant in which said hole is open, and another variant with said hole covered by a membrane or filter.
  • Figure 5 shows two stacked crop plates.
  • the culture chamber object of the invention comprises a first receptacle (1) and a second receptacle (2) and a centerpiece (3) that is located between the first receptacle (1) and the second receptacle (2).
  • the receptacles (1, 2) in the preferred embodiment of the invention, are in the form of revolution, and it is the element in which the nutrient medium for cultivation is placed.
  • the centerpiece (3) in the preferred embodiment of the invention, also has a revolution shape and a diameter slightly larger than the diameter of the receptacles (1, 2).
  • the receptacles (1, 2) comprise an outer wall (4) which, in the preferred embodiment of the invention, is circular and smooth in its inner face, and also comprises a perimeter wall (5) that arises perpendicular to the wall external (4).
  • the central part (3) comprises an intermediate wall (6) and two side walls (7) that project from the perimeter of the intermediate wall (6) in opposite directions.
  • the intermediate wall (6) comprises a first face (8) towards the first receptacle (1) and a second face (9) towards the second receptacle (2).
  • the central part (3) can comprise an internal flange (10) on at least one of the faces (8, 9) of the intermediate wall (6) of so that the internal flange (10) and the side wall (7) form a housing (1 1) for the end of the perimeter wall (5) of a receptacle (1, 2) thus locking both elements.
  • the intermediate wall (6) houses a hole (13), which is circular in the preferred embodiment of the invention.
  • the diameter of the hole (13) in the preferred embodiment of the invention is approximately one third of the diameter of the intermediate wall (6).
  • the intermediate wall (6) houses more than one hole (13) that has other shapes and sizes different from that proposed in the preferred embodiment, while allowing free exchange gas between both receptacles (1, 2) of the culture chamber and limit the possibilities of cross contamination of microorganisms in culture.
  • the orifice (13) of the culture chamber object of the invention may be covered by a membrane or a filter (14), which are porous so as to allow the passage of air and volatile compounds, but block the passage of elements of larger size, such as fungal spores.
  • a membrane or a filter (14) which are porous so as to allow the passage of air and volatile compounds, but block the passage of elements of larger size, such as fungal spores.
  • These elements, membrane or filter (14) can be industrially adhered to the contour of the hole (13), to a part or all of some of the faces (8, 9) of the intermediate wall (6) of the piece central or can also be fixed by mechanical means to any of the faces (8, 9) of the intermediate wall (6).
  • the dimensions of the perimeter wall (5) of both receptacles (1, 2) are identical, although there are alternative embodiments in which the dimensions of the perimeter wall (5) of each receptacle (1, 2) They are different from each other.
  • the dimensions of the external wall (4) of the receptacles (1, 2) are identical, although there are alternative embodiments in which the dimensions of the two external walls (4) are different.
  • the dimensions of the two side walls (7) of the centerpiece (3) are identical, although there are alternative embodiments in which the dimensions of the two side walls (7) are different.
  • the dimensions of the intermediate wall (6) of the central part (3) are slightly larger than the dimensions of the external walls (4) of the receptacles (1, 2), considering that, in the preferred embodiment of the invention, the said walls (4, 6) are circular, the diameter of the intermediate wall (6) is greater than the diameter of the external walls (4).
  • the perimeter wall (5) of the receptacles (1, 2) has a greater height than the side walls (7) of the intermediate piece.
  • the central part (3) fits and rests on the second receptacle (2) while allowing the first receptacle (1) to fit and rest on it, so that the perimeter wall (5) ) of each receptacle (1, 2) fits into one of the side walls (7) of the centerpiece (3), in addition the perimeter walls (5) of the receptacles (1, 2) rest on the intermediate wall (6 ) of the central part (3), so that the receptacles (1, 2) are facing each other and generate an inner chamber composed of the volume of both receptacles (1, 2) arranged symmetrically and partially communicated through the hole (13 ) of the intermediate wall (6) of the central part (3).
  • the fit between the centerpiece (3) and the receptacles (1, 2) gives stability to the culture chamber as a whole and holds the components together when the culture chamber is not being manipulated.
  • the intermediate wall (6) of the central part (3) is parallel to the external walls (4) of the receptacles (1, 2).
  • the present culture chamber is made of transparent plastic materials known in the manufacture of other culture plates.
  • the culture chamber in alternative embodiments, is made of glass or any other materials suitable for its function.
  • both receptacles (1, 2) are identical, have a revolution shape and are shallow, there are alternative embodiments in which the dimensions of the receptacles (1, 2) are not identical , and the shape may vary, since both the receptacles (1, 2) and the centerpiece (3) can have a square, rectangular shape, etc.
  • both the first face (8) and the second face (9) of the intermediate wall (6) of the central part (3) are smooth, and therefore a continuous contact with the end of the perimeter walls (5) of the receptacles (1, 2) thus limiting the gas exchange with the outside of the culture chamber (non-ventilated plates).
  • the first face (8) and / or the second face (9) can have tabs (12) that prevent continuous contact and, therefore, form gaps through which a certain gas exchange with the outside (ventilated plates).
  • smooth faces and faces are combined with tabs (12) so that either of the two receptacles (1, 2) can be independently ventilated. This gives great versatility to the present invention, allowing to vary the culture conditions and select those most suitable for each specific experiment.
  • the culture chamber object of the invention comprises stacking means, which allow two or more culture plates to be stacked.
  • Said stacking means comprise a first flange (16) located on the outer wall (4) of the first receptacle (1) and a second flange (17) of slightly different diameter than the first flange (16) located on the outer wall (4).
  • the first flange (16) fits into the second flange (17) and is prevented the relative movement between two stacked culture plates.

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Abstract

Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles,que comprende un primer receptáculo (1), un segundo receptáculo (2), y una pieza central (3)entre el primer receptáculo (1)y el segundo receptáculo (2),donde los receptáculos (1, 2) comprenden una pared externa (4) y una pared perimetral (5) perpendicular a la pared externa (4), y donde la pieza central (3) comprende una pared intermedia (6) con al menos un orificio (13), y dos paredes laterales (7) que se proyectan desde el perímetro de la pared intermedia (6) en sentidos opuestos, tal que las paredes laterales (7) de la pieza central (3) rodean las paredes perimetrales (5) de los receptáculos (1, 2) y las paredes perimetrales (5) de los receptáculos (1, 2) se apoyan en la pared intermedia (6).

Description

CÁMARA DE CULTIVO PARA ENSAYOS MICROBIOLÓGICOS DE COMPETENCIA
MEDIANTE COMPUESTOS VOLÁTILES
DESCRIPCIÓN
Campo de la invención
La presente invención se refiere a una cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles. La cámara de cultivo objeto de la invención es de aplicación en el campo de las técnicas de análisis microbiológicos, y más concretamente al de las placas de cultivo o placas Petri.
Antecedentes de la invención
Las placas de cultivo, también conocidas como placas Petri, son recipientes de diversos tamaños (con diámetros que varían entre los 50 mm y los 150 mm), generalmente poco profundos y circulares, pudiendo presentar sin embargo otras formas y/o tamaños.
Las placas Petri son el elemento fundamental empleado en el cultivo de microorganismos en medio sólido.
En la actualidad los materiales más habituales en la fabricación de estas placas son materiales plásticos, existiendo no obstante placas Petri de vidrio u otros materiales.
Una placa Petri se compone de dos elementos básicos: una base donde se sitúa el medio de cultivo correspondiente, y una tapa que cubre a la anterior.
Las formas en las que se ajustan o encajan estos dos elementos son variadas, pudiendo mantenerse sueltas una respecto a la otra o fijarse entre ellas mediante diversos elementos de anclaje (apriete mecánico o enclavamiento mecánico mediante rotación o enganche), evitando en este último caso la contaminación de los cultivos por apertura o caídas accidentales. Además, el cierre puede ser completo, generando así un espacio estanco en el interior y evitando o limitando el intercambio de gases con el exterior de la placa (placas no ventiladas), o pueden existir diversos salientes o protuberancias en alguno de los dos elementos que generan un espacio suficiente entre los mismos para que exista un determinado intercambio o flujo de gases entre el interior y el exterior de la placa (placas ventiladas). Para el cultivo de microorganismos es de vital importancia la gestión de los flujos gaseosos y sus aplicaciones, entre las que se encuentran:
- aportar la necesaria concentración de oxígeno para aquellos microorganismos aerobios o limitar la misma para aquellos anaerobios;
- regular el secado del medio una vez este es depositado en la placa Petri, evitando la condensación de humedad en el caso de las placas ventiladas o evitando el excesivo secado en aquellos cultivos de larga duración en las placas no ventiladas; y
- regular la salida al exterior de compuestos volátiles producidos por los microorganismos en cultivo.
Los ensayos de competencia entre microorganismos se han convertido en herramientas imprescindibles para la caracterización in vitro de cepas con capacidad de control biológico y para la detección de compuestos bioactivos producidos por las mismas. Estos experimentos se pueden desarrollar en medio sólido (rutinariamente en placas Petri) o líquido (empleando otras técnicas y materiales). De forma general, existen tres tipos de ensayos in vitro de competencia entre microorganismos en medio sólido:
- experimentos de competencia directa, en los que las cepas de microorganismos entran en contacto directo;
- experimentos de competencia a través de compuestos solubles, en los que cepas de microorganismos se enfrenta únicamente a compuestos solubles producidos por otras cepas sin existir contacto físico directo entre las mismas; y
- experimentos de competencia a través de volátiles, en los que cepas de microorganismos se enfrentan únicamente a compuestos volátiles producidos por otras cepas sin existir contacto físico directo entre las mismas.
En la bibliografía científica se han descrito los siguientes medios para realizar este tipo de experimentos de competencia a través de compuestos volátiles:
- placas Petri subdivididas, son placas con uno o más tabiques que dividen la superficie de la misma en varias partes donde pueden cultivarse microorganismos sin que entren en contacto. Estos sistemas limitan el espacio de crecimiento para cada cepa, impidiendo que puedan cultivarse individualmente en el centro de la placa y no son viables para medir el crecimiento radial de las colonias de microorganismos. También existe riesgo de contaminación cruzada, ya sea a través de esporas o bien porque el micelio es capaz de sobrepasar el tabique de separación.
- introducción de las placas Petri abiertas dentro de recipientes más grandes.
Este sistema es complejo, supone un gasto extra y dificulta mucho la manipulación y la toma de medidas durante el periodo en que se desarrolla el experimento.
- disposición de dos placas Petri enfrentadas, donde cada una de las cepas se cultiva en el centro de una placa Petri (de rutina) y posteriormente, tras retirar las tapas de las mismas, se unen los límites superiores de ambas placas enfrentadas mediante algún tipo de adhesivo plástico. De este modo ambos cultivos quedan enfrentados en un espacio cerrado (una especie de cámara formada por el volumen de las dos placas), creciendo uno en la parte interna inferior (generalmente el microorganismo productor de volátiles) y otro en la parte interna superior de la cámara (generalmente el microorganismo sobre el que se evalúa el efecto de los compuestos). Este es uno de los sistemas más empleados para la evaluación de la actividad de los volátiles producidos por hongos de control biológico. Permite una cierta manipulación del material una vez se ha iniciado el experimento, realizar medidas del crecimiento de las colonias y tomar fotografías de las mismas.
Sin embargo, la opción de disponer dos placas Petri enfrentadas plantea una serie de problemas, derivados todos ellos de la no existencia de un dispositivo comercial específico diseñado para llevar a cabo este tipo de experimentos:
- existencia de contaminación cruzada: por esporas, crecimiento de micelio sobre las paredes de las placas (llegando a contaminar el cultivo enfrentado) o por contacto entre las partes aéreas de los micelios. El experto medio en análisis microbiológicos comprende que estas contaminaciones distorsionan los resultados del experimento. Se puede colocar una membrana intermedia para evitar la contaminación, sin embargo la disposición de la misma es compleja y difícil de sistematizar dado que no hay estructuras específicas de anclaje o sujeción.
- dificultad en la disposición enfrentada de las placas ya que no existen placas Petri diseñadas para esta función, por lo que no encajan de forma adecuada y esto dificulta el manejo y la propia reproducibilidad del experimento, además no existe forma de asegurar que el encaje haya sido perfecto o, por el contrario, hayan quedado pequeños espacios sin contacto entre los bordes de ambas placas.
- imposibilidad de regular la entrada de aire o intercambio de gases con el exterior, en estos experimentos con placas enfrentadas no es posible hacer uso de estas diferentes disposiciones debido a que han de descartarse las tapas, y los bordes de las bases se deben unir con algún tipo de adhesivo.
- gasto innecesario de material al descartarse las tapas de las placas empleadas por carecer de uso en este tipo de experimentos.
La presente patente/modelo de utilidad se dirige a solucionar los citados problemas generados en la puesta a punto y desarrollo de los experimentos de competencia entre microorganismos a través de compuestos volátiles. Se describe una novedosa cámara de cultivo especialmente diseñada para la realización de estos experimentos
Descripción de la invención
Es objeto de la invención una cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles que comprende: un primer receptáculo, un segundo receptáculo, y una pieza central entre el primer receptáculo y el segundo receptáculo.
Los receptáculos comprenden una pared externa y una pared perimetral perpendicular a la pared externa, y la pieza central comprende una pared intermedia con al menos un orificio, y dos paredes laterales que se proyectan desde el perímetro de la pared intermedia en sentidos opuestos. En la placa objeto de la invención las paredes laterales de la pieza central rodean las paredes perimetrales de los receptáculos y las paredes perimetrales de los receptáculos se apoyan en la pared intermedia.
En la cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles objeto de la invención la pared intermedia de la pieza central comprende una primera cara enfrentada con el primer receptáculo y una segunda cara enfrentada con el segundo receptáculo, donde la primera cara y la segunda cara son lisas.
En otra realización de la cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles objeto de la invención la pieza central comprende un reborde interno en al menos una de las caras de la pared intermedia, tal que el reborde interno y la pared lateral configuran un alojamiento para el extremo de la pared externa de un receptáculo.
En otra realización de la cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles objeto de la invención la pared intermedia comprende una pluralidad de pestañas en la primera cara y/o en la segunda cara donde se apoya la pared externa de un receptáculo.
En otra realización la cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles comprende una membrana o filtro cubriendo el orificio de la pared intermedia de la pieza central, donde la membrana o filtro son porosos permitiendo el paso del aire y compuestos volátiles, y bloqueando el paso de elementos de mayor tamaño.
La cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles objeto de la invención comprende un primer reborde situado en la pared externa del primer receptáculo, y un segundo reborde de diámetro ligeramente diferente situado en la pared externa del segundo receptáculo, tal que las paredes externas de un primer receptáculo y un segundo receptáculo, el primer reborde encaja en el segundo reborde impidiendo el movimiento relativo entre dos placas de cultivo apiladas.
En otra realización la cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles objeto de la invención comprende al menos un tabique en al menos un receptáculo, tal que el tabique divide en partes independientes el interior de dicho receptáculo.
Breve descripción de los dibujos
Para complementar la descripción que seguidamente se va a realizar y con objeto de ayudar a una mejor comprensión de las características de la invención, se acompaña a la presente memoria descriptiva de un juego de dibujos en base a los que se comprenderán más fácilmente las innovaciones y ventajas del dispositivo objeto de la invención.
La figura 1 muestra una vista en explosión de la cámara de cultivo objeto de la invención. La figura 2 muestra una vista en sección de la cámara de cultivo objeto de la invención montada.
La figura 3 muestra secciones de dos formas de realización de los medios de unión entre los dos receptáculos y la pieza central y una tercera sección mostrando las pestañas para proporcionar una cámara de cultivo con aireación.
La figura 4 muestra en detalle el orificio central de la pared intermedia horizontal del elemento intermedio, con una variante en la que dicho orificio está abierto, y otra variante con dicho orificio cubierto por una membrana o filtro.
La figura 5 muestra dos placas de cultivos apiladas.
Las distintas referencias numéricas que se encuentran reflejadas en las figuras corresponden a los siguientes elementos:
1. primer receptáculo,
2. segundo receptáculo,
3. pieza central,
4. pared externa,
5. pared perimetral,
6. pared intermedia,
7. pared lateral,
8. primera cara,
9. segunda cara,
10. reborde interno,
1 1. alojamiento,
12. pestañas,
13. orificio,
14. membrana o filtro,
15. tabique,
16. primer reborde, y
17. segundo reborde.
Descripción detallada de la invención La cámara de cultivo objeto de la invención comprende un primer receptáculo (1) y un segundo receptáculo (2) y una pieza central (3) que se sitúa entre el primer receptáculo (1) y el segundo receptáculo (2).
Los receptáculos (1 , 2), en la realización preferente de la invención, tienen forma de revolución, y es el elemento en el que se coloca el medio nutritivo para el cultivo. La pieza central (3), en la realización preferente de la invención, también tiene forma de revolución y un diámetro ligeramente superior al diámetro de los receptáculos (1 , 2).
Los receptáculos (1 , 2) comprenden una pared externa (4) que, en la realización preferente de la invención, es de forma circular y lisa en su cara interna, y también comprenden una pared perimetral (5) que surge perpendicular a la pared externa (4).
La pieza central (3) comprende una pared intermedia (6) y dos paredes laterales (7) que se proyectan desde el perímetro de la pared intermedia (6) en sentidos opuestos. La pared intermedia (6) comprende una primera cara (8) hacia el primer receptáculo (1) y una segunda cara (9) hacia el segundo receptáculo (2).
Para fijar la pieza central (3) y los receptáculos (1 , 2) la pieza central (3) puede comprender un reborde interno (10) en al menos una de las caras (8, 9) de la pared intermedia (6) de modo que el reborde interno (10) y la pared lateral (7) configuran un alojamiento (1 1) para el extremo de la pared perimetral (5) de un receptáculo (1 , 2) quedando así enclavados ambos elementos.
Además, la pared intermedia (6) aloja un orificio (13), que es circular en la realización preferente de la invención. El diámetro del orificio (13) en la realización preferente de la invención, es aproximadamente de un tercio del diámetro de la pared intermedia (6). Sin embargo, es posible que en lugar de alojar un único orificio (13) la pared intermedia (6) aloje más de un orificio (13) que tenga otras formas y tamaños diferentes al propuesto en la realización preferente, mientras que permita el libre intercambio gaseoso entre ambos receptáculos (1 , 2) de la cámara de cultivo y limite las posibilidades de contaminación cruzada de los microorganismos en cultivo.
El orificio (13) de la cámara de cultivo objeto de la invención, puede estar cubierto por una membrana o un filtro (14), que son porosos de modo que permite el paso del aire y compuestos volátiles, pero bloquea el paso de elementos de mayor tamaño, como las esporas fúngicas. Estos elementos, membrana o filtro (14), pueden presentarse adheridos de forma industrial al contorno del orificio (13), a una parte o la totalidad de alguna de las caras (8, 9) de la pared intermedia (6) de la pieza central o también puede fijarse por medios mecánicos a cualquiera de las caras (8, 9) de la pared intermedia (6).
En la realización preferente de la invención, las dimensiones de la pared perimetral (5) de ambos receptáculos (1 , 2) son idénticas, aunque existen realizaciones alternativas en las que las dimensiones de la pared perimetral (5) de cada receptáculo (1 , 2) son distintas entre sí.
En la realización preferente de la invención, las dimensiones de la pared externa (4) de los receptáculos (1 , 2) son idénticas, aunque existen realizaciones alternativas en las que las dimensiones de las dos paredes externas (4) son distintas.
En la realización preferente de la invención, las dimensiones de las dos paredes laterales (7) de la pieza central (3) son idénticas, aunque existen realizaciones alternativas en las que las dimensiones de las dos paredes laterales (7) son distintas.
Las dimensiones de la pared intermedia (6) de la pieza central (3) son ligeramente superiores a las dimensiones de las paredes externas (4) de los receptáculos (1 , 2), considerando que, en la realización preferente de la invención, las citadas paredes (4, 6) son circulares, el diámetro de la pared intermedia (6) es mayor que el diámetro de las paredes externas (4). Igualmente, en la realización preferente de la invención, la pared perimetral (5) de los receptáculos (1 , 2) tiene mayor altura que las paredes laterales (7) de la pieza intermedia.
En la cámara de cultivo objeto de la invención la pieza central (3) encaja y descansa sobre el segundo receptáculo (2) a la vez que permite al primer receptáculo (1) encajar y descansar sobre ella, de modo que la pared perimetral (5) de cada receptáculo (1 , 2) encaja en una de las paredes laterales (7) de la pieza central (3), además las paredes perimetrales (5) de los receptáculos (1 , 2) se apoyan sobre la pared intermedia (6) de la pieza central (3), de modo que los receptáculos (1 , 2) se encuentran enfrentados y generan una cámara interior compuesta por el volumen de ambos receptáculos (1 , 2) dispuestos simétricamente y parcialmente comunicados a través del orificio (13) de la pared intermedia (6) de la pieza central (3). El encaje entre la pieza central (3) y los receptáculos (1 , 2) da estabilidad a la cámara de cultivo en conjunto y mantiene unidos los componentes cuando no se está manipulando la cámara de cultivo.
La pared intermedia (6) de la pieza central (3) es paralela a las paredes externas (4) de los receptáculos (1 , 2).
En la realización preferente de la invención, la presente cámara de cultivo está fabricada en materiales plásticos transparentes conocidos en la fabricación de otras placas de cultivo. Sin embargo, la cámara de cultivo, en realizaciones alternativas, está realizada en vidrio o cualesquiera otros materiales adecuados a su función.
Aunque en la realización preferente de la invención, las dimensiones de ambos receptáculos (1 , 2) son idénticas, tienen forma de revolución y son poco profundos, existen realizaciones alternativas en las que las dimensiones de los receptáculos (1 , 2) no son idénticas, y la forma puede variar, ya que tanto los receptáculos (1 , 2) como la pieza central (3) pueden tener forma cuadrada, rectangular, etc.
En la realización preferente de la invención tanto la primera cara (8) como la segunda cara (9) de la pared intermedia (6) de la pieza central (3) son lisas, y por tanto se genera un contacto continuo con el extremo de las paredes perimetrales (5) de los receptáculos (1 , 2) limitando así el intercambio gaseoso con el exterior de la cámara de cultivo (placas no ventiladas). Sin embargo, en realizaciones alternativas, la primera cara (8) y/o la segunda cara (9) pueden presentar pestañas (12) que impidan un contacto continuo y que, por tanto, formen huecos a través de los cuales se produce un determinado intercambio gaseoso con el exterior (placas ventiladas). Existen realizaciones en las que se combinan caras lisas y caras con pestañas (12) de manera que se puede dar ventilación a cualquiera de los dos receptáculos (1 , 2) independientemente. Esto da gran versatilidad a la presente invención, permitiendo variar las condiciones de cultivo y seleccionar aquellas más adecuadas para cada experimento concreto.
Aunque en la realización preferente de la invención, las caras internas de ambos receptáculos (1 , 2) son lisas, en realizaciones alternativas pueden aparecer uno o varios tabiques (15) que subdividen en dos o más partes independientes el interior de uno o de ambos receptáculos (1 , 2) permitiendo varios cultivos independientes en el mismo receptáculo (1 , 2). La cámara de cultivo objeto de la invención comprende unos medios de apilado, que permiten apilar dos o más placas de cultivo. Dichos medios de apilado, comprenden un primer reborde (16) situado en la pared externa (4) del primer receptáculo (1) y un segundo reborde (17) de diámetro ligeramente diferente al primer reborde (16) situado en la pared externa (4) del segundo receptáculo (2), de modo que enfrentado las paredes externas (4) de un primer receptáculo (1) y un segundo receptáculo (2), el primer reborde (16) encaja en el segundo reborde (17) y se impide el movimiento relativo entre dos placas de cultivo apiladas.

Claims

REIVINDICACIONES
1. Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles, caracterizada por que comprende:
un primer receptáculo (1),
un segundo receptáculo (2), y
una pieza central (3) entre el primer receptáculo (1) y el segundo receptáculo (2), donde los receptáculos (1 , 2) comprenden una pared externa (4) y una pared perimetral (5) perpendicular a la pared externa (4), y donde la pieza central (3) comprende una pared intermedia (6) con al menos un orificio (13), y dos paredes laterales (7) que se proyectan desde el perímetro de la pared intermedia (6) en sentidos opuestos, tal que las paredes laterales (7) de la pieza central (3) rodean las paredes perimetrales (5) de los receptáculos (1 , 2) y las paredes perimetrales (5) de los receptáculos (1 , 2) se apoyan en la pared intermedia (6) de la pieza central (3).
2. Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles según la reivindicación 1 , caracterizada por que la pared intermedia (6) de la pieza central (3) comprende una primera cara (8) enfrentada con el primer receptáculo (1) y una segunda cara (9) enfrentada con el segundo receptáculo (2), donde la primera cara (8) y la segunda cara (9) son lisas.
3. Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles según la reivindicación 1 , caracterizada por que la pared intermedia (6) de la pieza central (3) comprende una primera cara (8) enfrentada con el primer receptáculo (1) y una segunda cara (9) enfrentada con el segundo receptáculo (2), donde al menos una de las caras (8, 9) comprende una pluralidad de pestañas (12) donde se apoya la pared perimetral (5) de un receptáculo (1 , 2), facilitando así el intercambio gaseoso con el exterior. .
4. Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada por que la pieza central (3) comprende un reborde interno (10) en al menos una de las caras (8, 9) de la pared intermedia (6), tal que el reborde interno (10) y la pared lateral (7) configuran un alojamiento (1 1) para el extremo de la pared perimetral (5) de uno o ambos receptáculos (1 , 2) quedando así enclavados.
5. Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada por que comprende una membrana o filtro (14) cubriendo el orificio (13) de la pared intermedia (6) de la pieza central (3), donde la membrana o filtro (14) es porosa permitiendo el paso del aire y compuestos volátiles, y bloqueando el paso de elementos de mayor tamaño.
6. Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada por que comprende:
un primer reborde (16) situado en la pared externa (4) del primer receptáculo (1), y
un segundo reborde (17) situado en la pared externa (4) del segundo receptáculo (2),
donde enfrentado las paredes externas (4) de un primer receptáculo (1) y un segundo receptáculo (2), el primer reborde (16) encaja en el segundo reborde (17) impidiendo el movimiento relativo entre dos placas de cultivo apiladas.
7. Cámara de cultivo para ensayos microbiológicos de competencia mediante compuestos volátiles según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada por que comprende al menos un tabique (15) en al menos un receptáculo (1 , 2), tal que el tabique (15) divide en partes independientes el interior de dicho receptáculo (1 , 2).
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116606721B (zh) * 2023-05-26 2024-03-19 重庆师范大学 一种检测挥发性有机物抑菌活性的专用培养皿

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN203144398U (zh) * 2013-03-19 2013-08-21 河南科技学院 一种培养皿
CN104689861A (zh) * 2015-02-11 2015-06-10 中国水稻研究所 一种生物培养装置
CN204874519U (zh) * 2015-07-17 2015-12-16 四川农业大学 一种挥发性物质抑菌活性测定用培养皿

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3165450A (en) * 1963-03-11 1965-01-12 St Luke S Hospital Res Foundat Anaerobic culturing device
US4326028A (en) * 1980-09-10 1982-04-20 Brown Lewis R Antibiotic testing vessel
IT1289659B1 (it) * 1996-11-12 1998-10-15 Tappital Srl Piastra a tenuta per terreno di coltura doppio
CA2813810C (en) * 2010-10-08 2017-10-03 Naturin Viscofan Gmbh Cell culture insert

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN203144398U (zh) * 2013-03-19 2013-08-21 河南科技学院 一种培养皿
CN104689861A (zh) * 2015-02-11 2015-06-10 中国水稻研究所 一种生物培养装置
CN204874519U (zh) * 2015-07-17 2015-12-16 四川农业大学 一种挥发性物质抑菌活性测定用培养皿

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