WO2018021745A1 - 오일이 코팅된 박테리오파지를 포함한 양어용 사료 및 이의 제조 방법 - Google Patents

오일이 코팅된 박테리오파지를 포함한 양어용 사료 및 이의 제조 방법 Download PDF

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bacteriophage
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fish
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윤성준
전수연
권안성
이재환
유승일
강상현
Original Assignee
주식회사 인트론바이오테크놀로지
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    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
    • Y02A40/818—Alternative feeds for fish, e.g. in aquacultures

Definitions

  • the present invention relates to a feed for fish farming including a bacteriophage and a method for producing the same, specifically, to the feed pre-formed, such as pellet-type feed or crumble feed, further added bacteriophage and finally coated with an oil coating It relates to a feed for fish farming having a and a method for producing the same.
  • Bacteriophages are tiny microorganisms that infect bacteria (also called phages). Bacteriophages have the ability to kill bacteria by infecting the bacteria (Infection) and then proliferating inside the cell (Cell), and after the proliferation of the progeny bacteriophages come out of the bacteria to destroy the cell wall of the host bacteria. Bacteriophage bacterial infection is very specific, and the specificity of the bacteriophage that can infect certain bacteria is limited. In other words, certain bacteriophages can only infect certain categories of bacteria, so that certain bacteriophages kill only certain bacteria and do not affect other bacteria.
  • the bacteriophage Due to the bacterial specificity of the bacteriophage, the bacteriophage provides an antimicrobial effect only to the target bacterium and does not affect the flora or bacteria present in the environment or animals.
  • Conventional antibiotics which have been widely used to treat bacteria, have simultaneously affected multiple bacteria. This caused problems such as environmental pollution or disturbance of normal bacterial total body in the animal.
  • bacteriophages operate only on specific bacteria, so the use of bacteriophages does not cause normal bacterial total disturbances in the body. Therefore, the use is very safe compared to the use of antibiotics, and for this reason, the possibility of causing side effects from the use of bacteriophage is relatively low compared to the use of antibiotics.
  • bacteriophages do not harm the animals themselves because they provide bacterial specific antimicrobial activity. Therefore, bacteriophage is a very safe anti-bacterial material.
  • Bacteriophage is a British bacteriologist Twort 1915 became discovered while conducting research on Staphylococcus aureus (Micrococcus) melting the colonies are transparent by any developer.
  • French bacteriologist d'Herelle discovered that some of the filtrates of ill feces dissolve Shigella dysenteriae and found that they independently discovered bacteriophages. In the sense, they named it bacteriophage. Since then, bacteriophages have been found for many pathogenic bacteria such as dysentery, typhoid, and cholera.
  • bacteriophages Because of its ability to kill bacteria, bacteriophages have been expected to be an effective response to bacterial infections since their discovery and many studies have been conducted. However, with the discovery of penicillin by Fleming and the widespread use of antibiotics, the study of bacteriophages remained confined only to some Eastern European countries and the former Soviet Union. However, since 2000, the growth of antibiotic-resistant bacteria (Resistant bacteria) has shown the limitation of the existing antibiotics, and as the possibility of developing an alternative to the existing antibiotics emerged, bacteriophages are attracting attention as anti-bacterial agents. In particular, with the recent tightening of government-wide regulations on the use of antibiotics, interest in bacteriophages is increasing and industrial use cases are gradually increasing.
  • bacteriophages are becoming increasingly diverse, including the medical, livestock, fisheries and agricultural sectors.
  • the use of bacteriophages in the fisheries field is also receiving great attention, and there is one problem to be solved in advance. It is the development of a method for efficiently administering (delivering) bacteriophages to fish. Bacteriophage administration in the form of injections or baths is also possible, but this requires a lot of labor, so it may be necessary to develop a more convenient method of administration.
  • the most convenient and preferred method of administration is the administration of bacteriophage via feed.
  • the types of feed used in the fisheries sector can be broadly divided into raw fish (raw fish-based moist pellets) and blended feeds.
  • raw feed is a feed made by grinding fish such as frozen anchovies, sardines
  • compound feed is a feed prepared by mixing a variety of nutrients such as fish meal.
  • Compound feeds come in a variety of forms, including: 1) powdered feed prepared by pulverizing the raw material into fine powder, and 2) pellet feed and raw material produced by passing a cylindrical cylindrical mold by applying steam to the raw material.
  • Pellet feed such as EP (Extruded pellets) feed
  • EP Extruded pellets
  • Crumble feed which is manufactured by dividing pellet feed finely into sieves and using a sieve
  • the use of blended feed is strongly recommended due to environmental pollution due to the use of raw feed, and accordingly, the use of blended feed is continuously increasing.
  • Bacteriophage application in raw feed is to add the bacteriophage in the production of raw feed in the bacteriophage in the raw feed can be used as a feed.
  • the application of the bacteriophage to the powdered feed in the blended feed may be to include the bacteriophage in the powdered feed by adding the bacteriophage to the powdered feed similar to the raw feed.
  • feeding raw or powdered feed prepared in this way to fish farming does not provide a means to ensure the stability of the bacteriophage contained in the feed, there are many losses in the water of the bacteriophage contained in the feed.
  • the use of bacteriophage in live feed or powdered feed can be said to be easy.
  • the present inventors endeavored to develop a method for producing a pellet feed and crumble feed for fish farming containing bacteriophage without the outflow of the bacteriophage included in the water, the interior of the pre-formed feed (pore) And attaching the bacteriophage to the surface in a subsequent step, and coating the bacteriophage-containing feed thus coated with oil to finally have stability in water to form an oil film.
  • Bacteriophage-containing feed having an oil coating could be prepared, and the present invention was completed by confirming that the feed containing the bacteriophage containing oil-coated is stable in water and effectively enables the administration of bacteriophage to fish.
  • an object of the present invention is to provide a method for producing a pellet-type fish feed and crumble feed containing a bacteriophage with an oil coating, which includes bacteriophage, which is stable in water, and which can effectively administer the bacteriophage to fish.
  • Still another object of the present invention is to provide a pellet-type feed and crumble feed for fish farming, including the bacteriophage having the oil coating.
  • the present invention provides a pellet feed and crumble feed for fish farming, including a bacteriophage having an oil coating, and a method for producing the same.
  • the feed of the present invention is schematically shown as shown in FIG.
  • the pellet feed in the present specification means a feed that is pre-molded, regardless of the shape or size, or uniformity of the shape. That is, if the feed is pre-molded is not particularly limited, the pellet feed and the EP feed described above may be a representative example.
  • the pellet-type feed in the manufacturing method may include a pellet feed and EP feed, but this is only an example and may be applied to the target feed of the present invention without limiting the feed molded in any shape.
  • the biggest feature of the method of including the bacteriophage in the pelleted feed and crumble feed for fish farming is that the bacteriophage is added to the prepared fish-feeding pellet or crumble feed through a subsequent process. The bacteriophages are then attached to gaps (pores) in the feed or to the outer surface.
  • Soaking, spraying, and vacuum spraying can be used as a method for adding bacteriophage to fish or pellet food for fish farming, and for mass production and uniform bacteriophage addition efficiency, etc. Vacuum spraying is most preferred when considered.
  • Vegetable oils and animal oils may be used as the oils used to form the oil coating, but the use of fish oil is more preferable in consideration of application to fish farming.
  • fish oil refers to oils collected from fish, and includes fish oil, cod liver oil and seawater oil. Such fish oil is generally produced by extracting from fish, which are high in unsaturated fatty acids, herring, salmon, cod, mackerel, sardines, sharks, tuna, squid.
  • the fish oil may be manufactured and used directly, or may be used by purchasing a product on sale.
  • Fish oils that can be used in the present invention as the product being sold include Alaska deep sea fish oil omega 3 (manufacturer: Nu-Health), Cod liver oil (manufacturer: Spectrum essentials), Crab and shrimp attractant oil (manufacturer: Pro- Cure) and the like.
  • Coating the feed with the bacteriophage with oil may be done by spraying using an oil spray device or by mixing the oil well after pouring the oil into the feed. The method is also available.
  • the amount of oil used for coating the feed containing the bacteriophage with oil may be arbitrarily applied, but it is generally preferable to apply the feed in the range of 0.5-10% (v / w) of the feed weight, and 1-5% of the feed weight ( most preferably in the range of v / w).
  • the type and number of bacteriophages that may be the object of the production method of the present invention do not need to be particularly limited.
  • One or more of the bacteriophages belonging to the genus Inoviridae, Leviviridae, Microviridae, Plasmaviridae, and Tectiviridae are family of the present invention.
  • Lactococcus Garbier Lactococcus garvieae
  • Bacteriophage Lac-GAP-1 Accession No .: KCTC 12686BP
  • Lactococcus Garbier Lactococcus garvieae
  • Bacteriophage Lac-GAP-2 Accession No .: KCTC 12815BP
  • Vibrio parahemoliticus Vibrio parahaemolyticus
  • Bacteriophage Vib-PAP-1 Accession No .: KCTC 12817BP
  • Vibrio parahemoliticus Vibrio parahaemolyticus
  • Bacteriophage Vib-PAP-2 Accession No .: KCTC 12910BP
  • Vibrio parahemoliticus Vibrio parahaemolyticus
  • Bacteriophage Vib-PAP-5 (Accession No .: KCTC 13029BP)
  • Streptococcus iniese Streptococcus iniese
  • any medium known to be harmful to the bacteriophage may be used, but in general, phosphate buffered saline (PBS buffer; NaCl 8.0 g / L, KCl 0.2 g / L, Na 2 HPO 4 1.44 g / L, KH 2 PO 4 0.24 g / L, pH 7.4; hereafter referred to as 'PBS', Bacteriophage buffer (10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO 4 , 68.5 mM NaCl, pH 7.5; hereinafter referred to as 'BB'), TMG buffer (TMG buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO 4 , 0.1% Gelatin, pH 8.0; hereinafter referred to as 'TMG') and the like.
  • PBS buffer phosphate buffered saline
  • 'BB' Bacteriophage buffer
  • TMG buffer TMG buffer
  • TMG buffer 10 mM Tris-HCl, 10
  • the bacteriophage content (Titer) in the liquid solution including the bacteriophage used in the present production method is not particularly limited, but 1 ⁇ 10 1 pfu / ml to 1 ⁇ 10 30 pfu / ml may be generally used, which is the final feed. It can be easily determined by those skilled in the art in consideration of the purpose of use.
  • the bacteriophage content in the final feed produced by the present production method is also not particularly limited, and usually 1 ⁇ 10 1 pfu / g to 1 ⁇ 10 12 pfu / g is preferable. However, this can be easily set by those skilled in the art according to the purpose of the final feed.
  • the included bacteriophage can be stably maintained in water and can also effectively administer the bacteriophage into the body of a fish. Feed can be prepared. Therefore, the bacteriophage with excellent anti-bacterial ability can be utilized for aquaculture by feed feeding method.
  • 1 is a diagram schematically showing the feed of the present invention.
  • a bacteriophage liquid solution was used to attach the bacteriophage to the feed.
  • various bacteriophages were selected as the target bacteriophages, and also samples mixed with various bacteriophages to show that they are applicable to the mixing of various bacteriophages as well as a single bacteriophage. It was prepared to include. PBS buffer (NaCl 8.0 g / L, KCl 0.2 g / L, Na) to show that the various media commonly used for the production of bacteriophage liquid solutions can be used as the medium used to prepare the bacteriophage liquid solution.
  • 'PBS' Bacteriophage buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO 4 , 68.5 mM NaCl, pH 7.5; hereinafter referred to as 'BB'), bacteriophage liquid using three media, TMG buffer (TMG buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO 4 , 0.1% Gelatin, pH 8.0; referred to as 'TMG' hereinafter) The solutions were prepared.
  • Bacteriophage liquid solution preparation was prepared in a manner that the prepared bacteriophage suspension (Suspension) for each of the media in a conventional manner, and finally by adjusting the bacteriophage concentration in each bacteriophage liquid solution as follows: Bacteriophage liquid solutions were prepared in two concentrations. The types of bacteriophage liquid solutions prepared in this example are shown in the following table.
  • Bacteriophage Liquid Solution Prepared Bacteriophage Liquid Solution
  • Bacteriophage included medium Bacteriophage content (pfu / ml) Sample 1-1-1 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 PBS 1 x 10 8 Sample 1-1-2 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 PBS 1 x 10 9 Sample 1-2-1 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 BB 1 x 10 8 Sample 1-2-2 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 BB 1 x 10 9 Sample 1-3-1 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 TMG 1 x 10 8 Sample 1-3-2 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 TMG 1 x 10 9 Sample 2-1-1 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-2 PBS 1 x 10 8 Sample 2-1-2 Lactococcus Garbier bacteri
  • the bacteriophage liquid solutions thus prepared were used in subsequent examples.
  • bacteriophages were added to the preformed fish farm.
  • the bacteriophage liquid solution prepared in Example 1 was used.
  • one EP feed and one crumble feed were used as pellet feed for pre-molded fish farming.
  • the used EP feed and crumble feed were purchased and used commercially. Of course, they are used as a kind of preformed fish farming, and preformed fish farming can be used without any limitation.
  • Adsorption, spraying, and vacuum spraying were used to attach (add) the bacteriophages to the feed. Feed production method according to each bacteriophage attachment method is as follows.
  • Feed production using the bacteriophage attachment through the adsorption process was carried out as follows.
  • the volume of the bacteriophage liquid solution prepared in Example 1, which is 0.1%, 1%, and 10% by weight, is added to each other, and then mixed well. It was left at room temperature for 5 minutes to be sufficiently absorbed. After 5 minutes left, the food was recovered and then naturally dried at room temperature for 3 hours.
  • Fish oil was applied to the surface of the bacteriophage-containing feed by using an oil spraying device equipped with a nozzle for the naturally-dried bacteriophage-containing feed. The application level at this time was 2% (v / w) of the feed weight.
  • Bacteriophage-containing feed coated with fish oil thus prepared was naturally dried at room temperature for about 1 hour so that the fish oil coated on the surface of the feed formed a film well. Feeds completed by drying were refrigerated until use in subsequent experiments.
  • Feed production using the bacteriophage attachment through the spray process was carried out as follows.
  • the EP feed and crumble feeds were sprayed with the bacteriophage liquid solutions prepared in Example 1 in volumes corresponding to 0.1%, 1%, and 10% by weight of the feed, respectively. And then dried at room temperature for 3 hours.
  • Fish oil was applied to the surface of the feed using an oil spraying device equipped with a nozzle for the feed with naturally dried bacteriophage. The application level at this time was 2% (v / w) of the feed weight.
  • Bacteriophage-containing feed coated with fish oil thus prepared was naturally dried at room temperature for about 1 hour so that the fish oil coated on the surface of the feed formed a film well. Feeds completed by drying were refrigerated until use in subsequent experiments.
  • Feed production using bacteriophage attachment through a vacuum spray process was carried out as follows.
  • the bacteriophage liquid solutions prepared in Example 1 in a volume corresponding to 0.1%, 1%, and 10% by weight were vacuum sprayed, respectively. And then dried at room temperature for 3 hours.
  • Fish oil was applied to the surface of the feed using an oil spraying device equipped with a nozzle for the feed with naturally dried bacteriophage. The application level at this time was 2% (v / w) of the feed weight.
  • Bacteriophage-containing feed coated with fish oil thus prepared was naturally dried at room temperature for about 1 hour so that the fish oil coated on the surface of the feed formed a film well. Feeds completed by drying were refrigerated until use in subsequent experiments.
  • Bacteriophage content in the feed was carried out as follows. To 90 ml of EB buffer (EB buffer; 10 mM Tris-Cl, pH 8.5) was added 10 g of the above prepared feed and mixed well. After standing at room temperature for 2 hours, a crushing process (Homogenization) was performed using a Homogenizer for 1 minute. After crushing, centrifugation was performed at 4,000 rpm for 10 minutes, and then the supernatant was carefully collected. The recovered supernatant was diluted with EB buffer. The bacteriophage content was analyzed by a conventional top agar assay using a decimal dilution.
  • EB buffer 10 mM Tris-Cl, pH 8.5
  • Top agar assay method was as follows. To the top agar assay, add 150 ⁇ l of the overnight culture medium of the suitable host of the bacteriophage to be included in each of 150 ⁇ l of the diluted diluent prepared from each of the above prepared feeds. Samples were prepared. Appropriate host information of the bacteriophages used in this example is as follows.
  • the number of lytic plaques that appeared after midnight culture was counted, and the bacteriophage content in the feed was calculated by considering the amount of feed used to prepare the sample for the top agar assay and the dilution factor applied to the sample preparation for the top agar assay.
  • the results of bacteriophage content in the analyzed feed were as follows.
  • Bacteriophage content in EP feed (0.1% applied) feed Used Bacteriophage Liquid Solution Used Bacteriophage Attachment Process Bacteriophage content in feed (pfu / g) Feed sample E-1-1-1-1-1 Sample 1-1-1 absorption 1.2 ⁇ 10 5 Feed sample E-1-1-1-2-1 Spray 1.3 ⁇ 10 5 Feed sample E-1-1-1-3-1 Vacuum spraying 1.2 ⁇ 10 5 Feed Sample E-1-1-2-1-1 Sample 1-1-2 absorption 1.1 ⁇ 10 6 Feed Sample E-1-1-2-2-1 Spray 1.4 ⁇ 10 6 Feed Sample E-1-1-2-3-1 Vacuum spraying 1.0 ⁇ 10 6 Feed Sample E-1-2-1-1-1 Sample 1-2-1 absorption 1.4 ⁇ 10 5 Feed Sample E-1-2-1-2-1 Spray 1.2 ⁇ 10 5 Feed Sample E-1-2-1-3-1 Vacuum spraying 1.8 ⁇ 10 5 Feed sample E-1-2-2-1-1 Sample 1-2-2 absorption 1.2 ⁇ 10 6 Feed Sample E-1-2-2-2-1 Spray 1.4 ⁇ 10 6 Feed
  • Bacteriophage content in EP feed (1% applied) feed Used Bacteriophage Liquid Solution Used Bacteriophage Attachment Process Bacteriophage content in feed (pfu / g) Feed sample E-1-1-1-1-2 Sample 1-1-1 absorption 9.8 ⁇ 10 5 Feed sample E-1-1-1-2-2 Spray 1.2 ⁇ 10 6 Feed sample E-1-1-1-3-2 Vacuum spraying 1.7 ⁇ 10 6 Feed Sample E-1-1-2-1-2 Sample 1-1-2 absorption 1.3 ⁇ 10 7 Feed Sample E-1-1-2-2-2 Spray 1.2 ⁇ 10 7 Feed Sample E-1-1-2-3-2 Vacuum spraying 1.6 ⁇ 10 7 Feed Sample E-1-2-1-1-2 Sample 1-2-1 absorption 1.3 ⁇ 10 6 Feed sample E-1-2-1-2-2 Spray 2.1 ⁇ 10 6 Feed sample E-1-2-1-3-2 Vacuum spraying 1.7 ⁇ 10 6 Feed sample E-1-2-2-1-2 Sample 1-2-2 absorption 1.2 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-2-2-2-2 Spray 1.3 ⁇ 10 7 Feed sample
  • Bacteriophage content in EP feed (applied 10%) feed Used Bacteriophage Liquid Solution Used Bacteriophage Attachment Process Bacteriophage content in feed (pfu / g) Feed sample E-1-1-1-1-3 Sample 1-1-1 absorption 1.5 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-1-1-2-3 Spray 1.4 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-1-1-3-3 Vacuum spraying 1.6 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-1-2-1-3 Sample 1-1-2 absorption 9.7 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-1-2-2-3 Spray 1.5 ⁇ 10 8 Feed sample E-1-1-2-3-3 Vacuum spraying 1.2 ⁇ 10 8 Feed sample E-1-2-1-1-3 Sample 1-2-1 absorption 1.5 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-2-1-2-3 Spray 1.2 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-2-1-3-3 Vacuum spraying 1.4 ⁇ 10 7 Feed sample E-1-2-2-1-3 Sample 1-2-2 absorption 1.4 ⁇ 10 8 Feed sample E-1-2-2-2-3 Spray 1.3 ⁇ 10 8 Feed sample E-
  • Bacteriophage content in crumbled feed (0.1% applied) feed Used Bacteriophage Liquid Solution Used Bacteriophage Attachment Process Bacteriophage content in feed (pfu / g) Feed sample C-1-1-1-1-1 Sample 1-1-1 absorption 1.4 ⁇ 10 5 Feed Sample C-1-1-1-2-1 Spray 1.2 ⁇ 10 5 Feed Sample C-1-1-1-3-1 Vacuum spraying 1.4 ⁇ 10 5 Feed Sample C-1-1-2-1-1 Sample 1-1-2 absorption 1.7 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-1-2-2-1 Spray 1.3 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-1-2-3-1 Vacuum spraying 1.4 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-2-1-1-1 Sample 1-2-1 absorption 1.6 ⁇ 10 5 Feed Sample C-1-2-1-2-1 Spray 1.3 ⁇ 10 5 Feed Sample C-1-2-1-3-1 Vacuum spraying 1.3 ⁇ 10 5 Feed Sample C-1-2-2-1-1 Sample 1-2-2 absorption 1.6 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-2-2-2-1 Spray 1.2 ⁇ 10 6
  • Bacteriophage content in crumbled feed (1% applied) feed Used Bacteriophage Liquid Solution Used Bacteriophage Attachment Process Bacteriophage content in feed (pfu / g) Feed sample C-1-1-1-1-2 Sample 1-1-1 absorption 1.7 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-1-1-2-2 Spray 1.5 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-1-1-3-2 Vacuum spraying 1.2 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-1-2-1-2 Sample 1-1-2 absorption 1.5 ⁇ 10 7 Feed Sample C-1-1-2-2-2 Spray 1.6 ⁇ 10 7 Feed Sample C-1-1-2-3-2 Vacuum spraying 1.4 ⁇ 10 7 Feed Sample C-1-2-1-1-2 Sample 1-2-1 absorption 1.7 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-2-1-2-2 Spray 1.6 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-2-1-3-2 Vacuum spraying 1.5 ⁇ 10 6 Feed Sample C-1-2-2-1-2 Sample 1-2-2 absorption 1.7 ⁇ 10 7 Feed Sample C-1-2-2-2-2 Spray 1.5 ⁇ 10 7 Feed Sample C-
  • Example 2 The feed prepared in Example 2 was added to saline and fresh water and left at room temperature for 24 hours, and then a certain amount was taken to examine the bacteriophage content in the feed through the method of bacteriophage content presented in Example 2 to include the bacteriophage contained in the feed. The stability of the water was investigated.
  • This study includes feed sample E-10-1-1-1-1, feed sample E-10-1-1-2-1, feed sample E-10-1-1-3-1, feed sample E-10 -1-2-1-1, feed sample E-10-1-2-2-1, feed sample E-10-1-2-3-1, feed sample E-10-2-1-1-1 , Feed sample E-10-2-1-2-1, feed sample E-10-2-1-3-1, feed sample E-10-2-2-1-1, feed sample E-10-2 -2-2-1, feed sample E-10-2-2-3-1, feed sample E-10-3-1-1-1, feed sample E-10-3-1-2-1, feed Sample E-10-3-1-3-1, Feed Sample E-10-3-2-1-1, Feed Sample E-10-3-2-2-1, Feed Sample E-10-3-2 -3-1, feed sample C-10-1-1-1, feed sample C-10-1-1-2-1, feed sample C-10-1-1-3-1, feed sample C -10-1-2-1-1, feed sample C-10-1-2-2-1, feed sample C-10-1-2-3-1, feed sample C-10-2-1-1 -1, feed sample C-10-2-1-2-1, feed sample C-10-2-1-3-1
  • the bacteriophage included in the feed was found to maintain its content stably for at least 24 hours in water. From this, it can be seen that the feed prepared by the manufacturing method of the present invention can be utilized in actual aquaculture. On the other hand, the bacteriophage feed containing no oil coating was not shown, but the loss of the bacteriophage was very severe in the water.
  • Example 2 When feeding the feed prepared in Example 2 was tested whether the bacteriophage contained in the feed is delivered to the body of the fish. Twenty four halibut fry (length: 6-9 cm) were used for this study. Ten flounders were separately bred in two tanks. In one tank, feed sample E-10-3-1-3-1 prepared in Example 2 was fed in an amount equivalent to 5% of the fish body weight, and in another tank, the feed sample prepared in Example 2 was added. C-10-3-1-3-1 was fed to the amount equivalent to 5% of the body weight. The environment of the bath was controlled and the temperature of the laboratory containing the bath was kept constant. Thirty minutes after the feeding, three animals were captured in each feed feeding group, anesthetized with 2-phenoxyethanol, and the intestines were collected.
  • EB buffer 1 ml of EB buffer was added to the 15 ml tube, and 0.05 g of the intestinal tissue was added thereto, followed by grinding for 1 minute using a Homogenizer. After centrifugation (5,000 rpm, 4 ° C., 5 minutes), the supernatant was recovered. The recovered supernatant was filtered using a 0.45 ⁇ m filter. The sample solution thus obtained was subjected to decimal dilution using EB buffer. The bacteriophage concentration in the intestine was examined by performing a conventional top agar assay using a decimal dilution. Top agar assay method was as follows.
  • Appropriate host information of the bacteriophages used in this example is as shown in Example 2 above. 200 ⁇ l of the sample prepared for the top agar assay was added and added to 4 ml of soft agar (Top agar) maintained at 45 ° C. After addition, mix well and immediately pour into TSA plate medium. Then, the mixture was allowed to stand at room temperature for 20 minutes to solidify and then incubated at 37 ° C. overnight. The number of bacteriophages that appeared after midnight culture was counted to calculate the number of bacteriophages per gram of intestine. The results were as follows. The following results are the average of three.
  • Bacteriophage concentration in the intestine (average value) A quick feed Bacteriophage Intestinal concentration (pfu / g) Feed Sample E-10-3-1-3-1 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 2.3 ⁇ 10 2 Vibrio parahemolyticus bacteriophage Vib-PAP-1 9.7 ⁇ 10 1 Streptococcus inier bacteriophage Str-INP-1 4.9 ⁇ 10 2 Streptococcus parauberis bacteriophage Str-PAP-1 1.7 ⁇ 10 2 Ed Ward throughla tarda bacteriophage Edw-TAP-1 5.2 ⁇ 10 2 Eromonas Salmonidada bacteriophage Aer-SAP-1 6.3 ⁇ 10 2 Feed Sample C-10-3-1-3-1 Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-1 4.3 ⁇ 10 2 Vibrio parahemolyticus bacteriophage Vib-PAP-1 5.4 ⁇ 10 2 Streptococcus in
  • the feed sample E-5-3-1-3-1 [feed containing Vibrio parahemolyticus bacteriophage Vib-PAP-5] prepared in Example 2 was used.
  • the bacterial infection prevention effect was investigated.
  • Sea bass was used as fish in this experiment.
  • Perch fry (weight: 5-7 g, body length: 8-10 cm) was divided into two groups of 20 dogs and then divided into two groups. The environment of the bath was controlled and the temperature of the laboratory containing the bath was kept constant.
  • Feed sample E-5-3-1-3-1 prepared in Example 2 was fed to the perch of the experimental group (feed administration containing bacteriophage prepared according to the present invention) from the start of the experiment to the entire feed period.
  • Vibrio parahemoliticus bacteria were fed twice a day by feeding Vibrio parahemoliticus bacteria at a feed level of 1 ⁇ 10 8 cfu / g for 2 days from the 7th day from the start of the test. Induced. From the 9th day from the start of the test (2 days after the induction of the Vibrio parahemolyticus infection), all the test animals were examined for the incidence of Vibrio disease. Vibrio disease incidence was investigated by measuring body color blackening index. The body color blackening index was measured by measuring the dark coloration (DC) score (normal: 0, light blackening: 1, dark blackening: 2) which is commonly used. The results are shown in the following table.
  • DC dark coloration
  • the bacterium can be obtained by using the feed sample E-2-3-2-3-2 [feed containing Lactococcus Garbier bacteriophage Lac-GAP-2] prepared in Example 2.
  • the effect of treatment on infectious disease was investigated. Forty four-month-old halibut fry (length: 6-9 cm) were divided into two groups of 20 per group, followed by 14 days of experiments in separate tanks. The environment of the bath was controlled and the temperature of the laboratory containing the bath was kept constant. Feed containing Lactococcus Garbier bacteria was fed twice a day in a conventional feed manner at a level of 1 ⁇ 10 8 cfu / g for 3 days from the 5th day from the start of the experiment.
  • Example 2 Using the feed sample E-10-3-1-3-1 prepared in Example 2 was investigated whether the specification results when breeding rainbow trout. In particular, the survey was conducted in terms of mortality. A total of 50 rainbow trout were divided into two groups of 25, one each for four weeks. One group was fed the feed sample E-10-3-1-3-1 prepared in Example 2, and the other group was fed a feed of the same composition containing no bacteriophage according to the conventional feeding method. Suddenly. The rainbow trout for this study were five-week-old rainbow trout, and the rainbow trout of each test group were raised in separate tanks at regular intervals. The test results are shown in the following table.

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Abstract

본 발명은 박테리오파지를 포함한 양어용 사료 및 이것을 제조하는 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 양어용 펠릿형 사료나 크럼블 사료와 같이 미리 성형 제조된 사료에 박테리오파지를 추가로 첨가시키고 최종적으로 오일로 코팅하여 오일 피막을 가진 양어용 사료 및 이것의 제조 방법에 관한 것이다.

Description

오일이 코팅된 박테리오파지를 포함한 양어용 사료 및 이의 제조 방법
본 발명은 박테리오파지를 포함한 양어용 사료 및 이것을 제조하는 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 펠릿형 사료나 크럼블 사료와 같이 미리 성형 제조된 사료에 박테리오파지를 추가로 첨가시키고 최종적으로 오일로 코팅하여 오일 피막을 가진 양어용 사료 및 이것의 제조 방법에 관한 것이다.
최근 수산분야는 세균성 질병의 증가 및 항생제 내성균의 증가에 따라 항생제 기반 치료의 효과가 저하되고 있고, 이로 인하여 새로운 항생제 대체제에 대한 요구가 증가하고 있다. 관련하여 자연친화적 항생제 대체제인 박테리오파지(Bacteriophage)에 대한 관심이 크게 증가하고 있다.
박테리오파지는 세균(Bacteria)에 감염하는 아주 작은 미생물로서 보통 파지(Phage)라고 줄여서 부르기도 한다. 박테리오파지는 세균에 감염(Infection)한 후 세균 세포(Cell) 내부에서 증식을 하고, 증식 후 자손 박테리오파지들이 세균 밖으로 나올 때 숙주인 세균의 세포벽을 파괴하는 방식으로 세균을 사멸시키는 능력을 갖고 있다. 박테리오파지의 세균 감염 방식은 매우 특이성(Specificity)이 높아서 특정 세균에 감염할 수 있는 박테리오파지의 종류는 일부로 한정된다. 즉, 특정 박테리오파지는 특정 범주의 세균에만 감염할 수 있고 이로 인하여 특정 박테리오파지는 특정 세균만을 사멸시키며 다른 세균들에는 영향을 주지 않는다. 이러한 박테리오파지의 세균 특이성으로 인하여 박테리오파지는 목적으로 하는 세균에 대해서만 항균효과를 제공하고 환경이나 동물 내에 존재하는 상재균들에는 영향을 초래하지 않는다. 통상적으로 세균 처치에 널리 활용되던 기존의 항생제들은 여러 종류의 세균들에 대하여 동시 다발적으로 영향을 끼쳤다. 이로 인하여 환경 오염이나 동물의 체내 정상 세균총 교란 등의 문제를 초래하곤 하였다. 이와는 달리 박테리오파지는 특정 세균에 대해서만 작동하므로 박테리오파지 사용에 의해서 체내 정상 세균총 교란 등이 발생하지 않는다. 따라서 그 사용이 항생제 사용에 비교하여 매우 안전하다고 할 수 있고, 이러한 이유로 박테리오파지 사용에 따른 부작용 초래 가능성이 항생제 사용에 비교하여 상대적으로 크게 낮다. 또한, 박테리오파지는 세균 특이적 항균력을 제공하기 때문에 동물 자체에는 해를 끼치지 않는다. 따라서 박테리오파지는 매우 안전한 항-세균 소재라 할 수 있다.
박테리오파지는 1915년 영국의 세균학자 Twort가 포도상구균(Micrococcus) 집락이 어떤 것에 의해 투명하게 녹는 현상에 대한 연구를 수행하면서 발견되었다. 또한, 1917년에는 프랑스의 세균학자 d'Herelle이 이질환자 변의 여과액 중에 적리균(Shigella dysenteriae)을 녹이는 작용을 가진 것이 있다는 것을 발견하고 이에 대한 연구를 통해 독립적으로 박테리오파지를 발견하였으며, 세균을 잡아먹는다는 뜻에서 박테리오파지라고 명명하였다. 이후 이질균, 장티푸스균, 콜레라균 등 여러 병원성 세균들에 대한 박테리오파지가 계속적으로 발견되었다.
세균을 사멸시킬 수 있는 특별한 능력으로 인하여 박테리오파지는 발견 이후 세균 감염에 대응하는 효과적 방안으로 기대를 모았으며 관련하여 많은 연구들이 진행되었다. 그러나 Fleming에 의해 페니실린이 발견되고 항생제의 보급이 일반화되면서 박테리오파지에 대한 연구는 일부 동유럽 국가들 및 구소련에 한정되어서만 명맥이 유지되었다. 그런데 2000년 이후에 항생제 내성균(Resistant bacteria)의 증가로 인하여 기존 항생제의 한계성이 나타나고, 기존 항생제의 대체 물질로의 개발 가능성이 부각되면서 다시 박테리오파지가 항-세균제로 주목을 받고 있다. 특히 최근 항생제 사용에 대한 정부 차원의 규제가 전 세계적으로 강화됨에 따라 박테리오파지에 대한 관심이 더욱 높아지고 있으며 산업적 활용 사례도 점차 증가하고 있다.
박테리오파지의 산업적 활용은 의료분야, 축산분야, 수산분야, 농업분야 등 점차 다양해지고 있다. 수산분야에서의 박테리오파지 활용도 크게 주목을 받고 있는데, 이에 있어 선행되어 해결해야 할 하나의 과제가 있다. 바로 어류에게 박테리오파지를 효율적으로 투여(전달)하는 방법의 개발이다. 주사형태나 약욕제 형태로의 박테리오파지 투여도 가능하나 이에는 많은 노동력이 요구되기 때문에 보다 편리하게 활용할 수 있는 투여 방법의 개발이 필요하다 할 수 있다.
이에 가장 편리하면서도 선호되는 투여 방식이 바로 사료를 통한 박테리오파지의 투여이다. 수산분야에서 활용되고 있는 사료의 형태는 생사료(Raw fish-based moist pellet; MP)와 배합사료로 크게 구분할 수 있다. 일반적으로 생사료는 냉동된 멸치, 정어리 등의 물고기를 갈아 만든 사료이고, 배합사료는 어분 등에 여러 영양 성분들을 혼합하여 제조하는 사료이다. 배합사료는 다양한 형태가 있는데, 1) 원료를 분쇄하여 고운 가루형태로 제조한 가루 사료, 2) 원료에 스팀을 가하여 구멍 난 원통모양의 성형틀을 통과시켜 제조하는 펠릿 사료와 원료에 고열 및 고압을 가한 후에 압출성형기(Extruder)를 통과시키면서 압력 저하로 원료가 부풀어 내부에 기공이 발생할 때 적당한 틀을 이용하여 여러 가지 모양으로 제조하는 EP(Extruded pellets) 사료 등과 같은 펠릿형 사료, 3) 보통 치어에 사용하고자 펠릿 사료를 잘게 부순 후에 체를 이용해 직경 크기별로 구분하여 제조하는 크럼블(Crumble) 사료가 그 대표적 예이다. 최근 생사료 사용에 따른 환경오염 문제 등으로 인하여 배합사료의 사용이 적극 권장되고 있으며, 이에 따라 배합 사료의 사용이 지속적으로 증가하고 있는 추세이다.
생사료에의 박테리오파지 적용은 생사료 제조 시에 박테리오파지를 첨가해 주는 방식으로 생사료에 박테리오파지를 포함시키고 이를 사료로 사용할 수 있다. 또한, 배합 사료 중에 가루 사료에의 박테리오파지 적용도 생사료와 유사하게 가루 사료에 박테리오파지를 첨가하는 방식으로 가루 사료에 박테리오파지가 포함되게 할 수 있다. 비록 이러한 방식으로 제조한 생사료나 가루 사료를 양어용 사료로 급이 시에는 사료 내에 포함된 박테리오파지의 물속 안정성을 보장해 줄 수 있는 수단이 없기 때문에 사료 내에 포함된 박테리오파지의 물속에서 손실이 많이 초래되기는 하지만, 생사료나 가루 사료에의 박테리오파지 첨가 사용은 방법적으로 용이하다고 할 수 있다.
그러나 배합 사료 중에 펠릿 사료나 EP 사료와 같은 펠릿형 사료나 크럼블 사료에의 박테리오파지 적용에는 기술적으로 어려움이 있었다. 이러한 사료들의 제조에서는 그 제조과정에서 높은 온도 및 높은 압력이 가해져야 하는데, 특히 가해지는 높은 온도가 박테리오파지를 원료에 직접 첨가하여 제조할 때 이러한 고온 공정이 최종 사료 내의 생존 박테리오파지 수준을 크게 훼손할 수 있기 때문에 박테리오파지를 사료 원료에 직접 첨가하여 펠릿형의 사료를 제조하는 데에는 어려움이 있었다. 보통의 박테리오파지들은 80℃ 이상의 온도에 노출되면 그 생존력이 급격히 낮아진다.
따라서 유망한 항생제 대체 생물소재인 박테리오파지를 수산 양식 분야에 효율적으로 활용하기 위해서는 수산 양식 분야에서 활용이 계속해서 증가하고 있는 양어용 펠릿형 사료나 크럼블 사료에 박테리오파지를 효과적으로 첨가할 수 있는 방법, 더 나아가 첨가된 박테리오파지를 물속에서 안정화 시킬 수 있는 방법의 개발이 필요하다.
이에, 본 발명자들은 물속에서도 포함된 박테리오파지의 유출이 없는 박테리오파지가 포함된 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료를 제조하는 방법을 개발하고자 노력한 끝에, 미리 성형 제조된 사료의 내부 틈(기공; pore) 및 표면에 후속 단계로 박테리오파지를 부착시키고, 이렇게 제조한 박테리오파지 포함 사료에 최종적으로 물속에서의 안정성을 가지게끔 오일(Oil)로 코팅(Coating)을 해 주어 오일 피막(Film)을 형성시켜 주는 방법으로 오일 피막을 가진 박테리오파지 포함 사료를 제조할 수 있었고, 이렇게 제조한 오일 피막을 가진 박테리오파지 포함 사료가 물속에서도 안정하며 효과적으로 어류에게 박테리오파지를 투여하게 한다는 것이 가능함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명의 목적은 박테리오파지를 포함하고 있고 물속에서도 안정적이며 어류에게 박테리오파지를 효과적으로 투여할 수 있게 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 포함 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기의 오일 피막을 가진 박테리오파지 포함 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료를 제공하는 것이다.
본 발명은 오일 피막을 가진 박테리오파지 포함 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료, 및 이의 제조 방법을 제공한다. 본 발명의 사료를 모식적으로 나타내면 도 1과 같다.
본 발명의 오일 피막을 가진 박테리오파지 포함 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료의 제조 방법은,
1) 양어용 사료에 박테리오파지 액상 용액을 투여하여 사료 내의 틈이나 사료 표면에 박테리오파지를 부착시키는 단계;
2) 건조를 실시하는 단계;
3) 오일 코팅을 통하여 사료에 오일 피막이 형성되게 하는 단계; 및
4) 건조를 실시하는 단계로 구성된다.
본 명세서에서의 펠릿형 사료는 미리 성형되어 있는 사료를 의미하며, 그 모양이나 크기, 또는 모양의 균일성 여부는 상관이 없다. 즉, 미리 성형되어 있는 사료라면 특별한 제한은 없지만 앞에서 설명한 펠릿 사료와 EP 사료가 그 대표적인 예라 할 수 있다. 본 제조 방법에 있어 펠릿형 사료로는 펠릿 사료와 EP 사료 등이 포함될 수 있으나 이는 예시에 불과하며 어떤 모양으로 성형된 사료라도 제한 없이 본 발명의 대상 사료로 적용이 가능하다.
본 발명의 제조 방법에 있어 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료에 박테리오파지를 포함시키는 방법의 가장 큰 특징은 제조된 양어용 펠릿형 사료 또는 크럼블 사료에 박테리오파지를 후속공정을 통하여 첨가한다는 것이다. 이때 박테리오파지는 사료 내의 틈(기공)이나 외부 표면에 부착된다.
양어용 펠릿형 사료나 크럼블 사료에 박테리오파지를 첨가시키는 방법으로는 흡착(Soaking), 분무(Spraying), 및 진공분무(Vacuum spraying) 등이 사용될 수 있는데, 대량 생산 및 균일한 박테리오파지 첨가 효율 등을 고려할 때 진공분무가 가장 바람직하다.
오일 피막을 형성하기 위하여 사용가능한 오일로는 식물성 오일 및 동물성 오일이 사용가능하나 양어용 사료로의 활용을 고려할 때 어유(Fish oil)의 사용이 보다 바람직하다. 본 명세서에서의 ‘어유’는 어류에서 채취한 기름을 지칭하며, 어체유, 간유, 해수유 등을 포함한다. 이러한 어유는 일반적으로 불포화 지방산이 높은 어류인 청어, 연어, 대구, 고등어, 정어리, 상어, 다랑어, 오징어 등에서 추출되어 제조된다.
상기한 어유는 직접 제조하여 사용할 수도 있고 판매되고 있는 제품을 구매하여 사용할 수도 있다. 판매되고 있는 제품으로 본 발명에 활용되어질 수 있는 어유로는 Alaska deep sea fish oil omega 3(제조사: Nu-Health), Cod liver oil(제조사: Spectrum essentials), Crab and shrimp attractant oil(제조사: Pro-Cure) 등을 제시할 수 있다.
박테리오파지가 첨가된 사료를 오일로 코팅하는 방법으로는 오일분사장치를 사용하여 분사를 해주는 방법이나 오일을 사료에 부어준 후에 잘 섞어주는 방법 등 사료 표면에 오일 피막이 잘 형성될 수 있게 할 수 있는 어떠한 방법도 활용이 가능하다.
박테리오파지를 포함한 사료를 오일로 코팅할 때에 사용하는 오일의 양은 임의로 적용해도 무방하지만 통상적으로 사료 중량의 0.5-10%(v/w) 범위에서 적용하는 것이 바람직하고, 사료 중량의 1-5%(v/w)의 범위에서 적용하는 것이 가장 바람직하다.
본 발명의 제조 방법에 있어 대상이 될 수 있는 박테리오파지 종류와 수는 특별히 제한할 필요가 없다. 미오비리대(Myoviridae), 시포비리대(Siphoviridae), 포도비리대(Podoviridae), 리포뜨릭스비리대(Lipothrixviridae), 루디비리대(Rudiviridae), 앰풀라비리대(Ampullaviridae), 비카우다비리대(Bicaudaviridae), 클라바비리대(Clavaviridae), 코티코비리대(Corticoviridae), 시스토비리대(Cystoviridae), 푸셀로비리대(Fuselloviridae), 글로불로비리대(Globuloviridae), 구타비루스(Guttavirus), 이노비리대(Inoviridae), 레비비리대(Leviviridae), 미크로비리대(Microviridae), 플라스마비리대(Plasmaviridae) 및 텍티비리대(Tectiviridae) 과(Family)에 속하는 박테리오파지들 중 하나 또는 그 이상의 박테리오파지가 본 발명의 제조 방법에 있어 대상이 될 수 있다. 예로 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-1(수탁번호: KCTC 12686BP), 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-2(수탁번호: KCTC 12815BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-1(수탁번호: KCTC 12817BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-2(수탁번호: KCTC 12910BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-5(수탁번호: KCTC 13029BP), 스트렙토코커스 이니에(Streptococcus iniae) 박테리오파지 Str-INP-1(수탁번호: KCTC 12687BP), 스트렙토코커스 파라우베리스(Streptococcus parauberis) 박테리오파지 Str-PAP-1(수탁번호: KCTC 12568BP), 에드와드시엘라 타르다(Edwardsiella tarda) 박테리오파지 Edw-TAP-1(수탁번호: KCTC 12740BP), 에로모나스 살모니시다(Aeromonas salmonicida) 박테리오파지 Aer-SAP-1(수탁번호: KCTC 12814BP) 등의 박테리오파지가 대상이 될 수 있다. 그러나 이는 예시일 뿐이며 이에 국한되지 않음은 자명하다.
본 제조 방법에서 사용되는 박테리오파지를 포함한 액상 용액의 제조에는 박테리오파지에 해를 끼치지 않는다고 알려진 어떠한 매질도 사용이 가능하나 통상적으로 인산완충식염수(PBS buffer; NaCl 8.0 g/L, KCl 0.2 g/L, Na2HPO4 1.44 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, pH 7.4; 이하 ‘PBS’라 지칭), 박테리오파지 버퍼(Bacteriophage buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO4, 68.5 mM NaCl, pH 7.5; 이하 ‘BB’로 지칭), TMG 버퍼(TMG buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO4, 0.1% Gelatin, pH 8.0; 이하 ‘TMG’라 지칭) 등을 사용할 수 있다. 그러나 이는 예시일 뿐이며 이에 국한되지 않음은 당연하다.
본 제조 방법에서 사용되는 박테리오파지를 포함한 액상 용액에서의 박테리오파지 함량(Titer)은 특별히 제한되지 않으나 1× 101 pfu/㎖ 내지 1× 1030 pfu/㎖가 일반적으로 사용될 수 있고, 이는 최종 제조되는 사료의 사용 목적을 고려하여 당업자가 용이하게 결정할 수 있다.
본 제조 방법을 통하여 제조되는 최종 사료에서의 박테리오파지 함량도 특별한 제한은 없으며 통상적으로 1× 101 pfu/g 내지 1× 1012 pfu/g가 바람직하다. 그러나 이는 최종 사료의 활용 목적에 따라 당업자가 용이하게 설정할 수 있다.
본 발명의 오일 피막을 가진 박테리오파지 포함 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료의 제조 방법을 이용하면 포함된 박테리오파지가 물속에서 안정하게 유지될 수 있고 또한 어류의 체내로 박테리오파지를 효과적으로 투여할 수 있는 양어용 사료를 제조할 수 있다. 따라서 항-세균 능력이 뛰어난 박테리오파지를 사료 급이 방식으로 수산양식에 활용할 수 있게 된다.
도 1은 본 발명의 사료를 모식적으로 나타낸 그림이다.
이하, 실시예에 의거하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하지만, 이들 실시예는 본 발명의 예시일 뿐이며 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 박테리오파지를 포함한 액상 용액 준비
먼저 사료에 박테리오파지를 부착시킬 때에 사용할 박테리오파지 액상 용액을 준비하였다. 본 발명이 박테리오파지 종류에는 상관없이 적용이 가능하다는 것을 보여주기 위하여 대상 박테리오파지로는 다양한 박테리오파지들을 선정하였고, 또한 단일 박테리오파지뿐만 아니라 다양한 박테리오파지들의 혼합에도 적용 가능하다는 것을 보이기 위하여 여러 박테리오파지들이 혼합된 시료들도 포함하여 준비하였다. 박테리오파지 액상 용액 제조에 사용되는 매질로도 박테리오파지 액상 용액 제조에 일반적으로 사용되는 여러 매질들이 사용 가능하다는 점을 보여주기 위하여 인산완충식염수(PBS buffer; NaCl 8.0 g/L, KCl 0.2 g/L, Na2HPO4 1.44 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, pH 7.4; 이하 ‘PBS’라 지칭), 박테리오파지 버퍼(Bacteriophage buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO4, 68.5 mM NaCl, pH 7.5; 이하 ‘BB’로 지칭), TMG 버퍼(TMG buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO4, 0.1% Gelatin, pH 8.0; 이하 ‘TMG’라 지칭)의 3가지 매질들을 사용하여 박테리오파지 액상 용액들을 준비하였다. 박테리오파지 액상 용액 준비는 각기 준비한 박테리오파지 부유액(Suspension)을 상기 매질들에 대하여 투석(Dialysis)을 통상적인 방법으로 실시하는 방식으로 준비하였고, 최종적으로 각 박테리오파지 액상 용액에서의 박테리오파지 농도를 조정하여 다음과 같이 2 가지의 농도들로 박테리오파지 액상 용액들을 준비하였다. 본 실시예에서 준비한 박테리오파지 액상 용액들의 종류는 다음의 표와 같다.
준비한 박테리오파지 액상 용액의 종류
준비한 박테리오파지 액상 용액 포함 박테리오파지 매질 박테리오파지 함량(pfu/ml)
시료 1-1-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 PBS 약 1× 108
시료 1-1-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 PBS 약 1× 109
시료 1-2-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 BB 약 1× 108
시료 1-2-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 BB 약 1× 109
시료 1-3-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 TMG 약 1× 108
시료 1-3-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 TMG 약 1× 109
시료 2-1-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2 PBS 약 1× 108
시료 2-1-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2 PBS 약 1× 109
시료 2-2-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2 BB 약 1× 108
시료 2-2-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2 BB 약 1× 109
시료 2-3-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2 TMG 약 1× 108
시료 2-3-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2 TMG 약 1× 109
시료 3-1-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 PBS 약 1× 108
시료 3-1-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 PBS 약 1× 109
시료 3-2-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 BB 약 1× 108
시료 3-2-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 BB 약 1× 109
시료 3-3-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 TMG 약 1× 108
시료 3-3-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 TMG 약 1× 109
시료 4-1-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-2 PBS 약 1× 108
시료 4-1-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-2 PBS 약 1× 109
시료 4-2-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-2 BB 약 1× 108
시료 4-2-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-2 BB 약 1× 109
시료 4-3-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-2 TMG 약 1× 108
시료 4-3-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-2 TMG 약 1× 109
시료 5-1-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5 PBS 약 1× 108
시료 5-1-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5 PBS 약 1× 109
시료 5-2-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5 BB 약 1× 108
시료 5-2-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5 BB 약 1× 109
시료 5-3-1 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5 TMG 약 1× 108
시료 5-3-2 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5 TMG 약 1× 109
시료 6-1-1 스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 PBS 약 1× 108
시료 6-1-2 스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 PBS 약 1× 109
시료 6-2-1 스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 BB 약 1× 108
시료 6-2-2 스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 BB 약 1× 109
시료 6-3-1 스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 TMG 약 1× 108
시료 6-3-2 스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 TMG 약 1× 109
시료 7-1-1 스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 PBS 약 1× 108
시료 7-1-2 스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 PBS 약 1× 109
시료 7-2-1 스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 BB 약 1× 108
시료 7-2-2 스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 BB 약 1× 109
시료 7-3-1 스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 TMG 약 1× 108
시료 7-3-2 스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 TMG 약 1× 109
시료 8-1-1 에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 PBS 약 1× 108
시료 8-1-2 에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 PBS 약 1× 109
시료 8-2-1 에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 BB 약 1× 108
시료 8-2-2 에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 BB 약 1× 109
시료 8-3-1 에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 TMG 약 1× 108
시료 8-3-2 에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 TMG 약 1× 109
시료 9-1-1 에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 PBS 약 1× 108
시료 9-1-2 에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 PBS 약 1× 109
시료 9-2-1 에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 BB 약 1× 108
시료 9-2-2 에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 BB 약 1× 109
시료 9-3-1 에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 TMG 약 1× 108
시료 9-3-2 에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 TMG 약 1× 109
시료 10-1-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 PBS 약 1× 108
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 약 1× 108
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 약 1× 108
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 약 1× 108
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 약 1× 108
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 약 1× 108
시료 10-1-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 PBS 약 1× 109
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 약 1× 109
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 약 1× 109
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 약 1× 109
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 약 1× 109
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 약 1× 109
시료 10-2-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 BB 약 1× 108
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 약 1× 108
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 약 1× 108
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 약 1× 108
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 약 1× 108
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 약 1× 108
시료 10-2-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 BB 약 1× 109
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 약 1× 109
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 약 1× 109
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 약 1× 109
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 약 1× 109
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 약 1× 109
시료 10-3-1 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 TMG 약 1× 108
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 약 1× 108
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 약 1× 108
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 약 1× 108
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 약 1× 108
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 약 1× 108
시료 10-3-2 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 TMG 약 1× 109
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 약 1× 109
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 약 1× 109
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 약 1× 109
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 약 1× 109
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 약 1× 109
이렇게 준비한 박테리오파지 액상 용액들은 후속의 실시예들에서 사용하였다.
실시예 2: 양어용 사료에 박테리오파지 첨가
다음 단계로 박테리오파지를 미리 성형된 양어용 사료에 첨가시켰다. 박테리오파지 액상 용액으로는 실시예 1에서 준비한 것을 사용하였다. 본 실시예에서는 미리 성형된 양어용 사료로 펠릿형 사료 중에 EP 사료 1종과 크럼블 사료 1종을 사용하였다. 사용한 EP 사료와 크럼블 사료는 상용되는 것을 구입하여 사용하였다. 물론 이들은 미리 성형된 양어용 사료의 한 종류로 사용한 것이며 미리 성형된 양어용 사료는 어떠한 제한 없이 사용이 가능하다. 사료에 박테리오파지를 부착(첨가)시키는 공정으로는 흡착, 분무, 및 진공분무를 사용하였다. 각 박테리오파지 부착 방법에 따른 사료 제조 방법은 다음과 같다.
흡착공정을 통하여 박테리오파지 부착을 적용한 사료 제조는 다음과 같이 실시하였다. EP 사료와 크럼블 사료에 대하여 사료 중량 기준으로 0.1%, 1%, 및 10%에 해당하는 부피의 실시예 1에서 제조된 박테리오파지 액상 용액을 각각 가하여 잘 혼합한 다음에 박테리오파지 액상 용액이 사료 표면에 충분히 흡수될 수 있도록 5분 정도 상온에 방치하였다. 5분의 방치 후에 사료를 회수한 다음에 상온에서 3 시간 자연건조 시켰다. 자연건조한 박테리오파지가 부착된 사료에 대하여 노즐이 장착된 오일분사장치를 이용하여 박테리오파지가 부착된 사료 표면에 어유를 도포하였다. 이때 도포 수준은 사료 중량의 2%(v/w)로 하였다. 이렇게 제조한 어유로 코팅된 박테리오파지 포함 사료는 사료 표면에 도포된 어유가 피막을 잘 형성할 수 있도록 1시간 정도 상온에서 자연건조시켰다. 건조까지 완료한 사료는 후속 실험에 사용하기 전까지 냉장보관하였다.
분무공정을 통하여 박테리오파지 부착을 적용한 사료 제조는 다음과 같이 실시하였다. EP 사료와 크럼블 사료에 대하여 사료 중량 기준으로 0.1%, 1%, 및 10%에 해당하는 부피의 실시예 1에서 제조된 박테리오파지 액상 용액을 각각 분무해 주었다. 그리고는 상온에서 3 시간 자연건조 시켰다. 자연건조한 박테리오파지가 부착된 사료에 대하여 노즐이 장착된 오일분사장치를 이용하여 어유를 사료 표면에 도포하였다. 이때 도포 수준은 사료 중량의 2%(v/w)로 하였다. 이렇게 제조한 어유로 코팅된 박테리오파지 포함 사료는 사료 표면에 도포된 어유가 피막을 잘 형성할 수 있도록 1시간 정도 상온에서 자연건조시켰다. 건조까지 완료한 사료는 후속 실험에 사용하기 전까지 냉장보관하였다.
진공분무공정을 통하여 박테리오파지 부착을 적용한 사료 제조는 다음과 같이 실시하였다. EP 사료와 크럼블 사료에 대하여 사료 중량 기준으로 0.1%, 1%, 및 10%에 해당하는 부피의 실시예 1에서 제조된 박테리오파지 액상 용액을 각각 진공분무해 주었다. 그리고는 상온에서 3 시간 자연건조 시켰다. 자연건조한 박테리오파지가 부착된 사료에 대하여 노즐이 장착된 오일분사장치를 이용하여 어유를 사료 표면에 도포하였다. 이때 도포 수준은 사료 중량의 2%(v/w)로 하였다. 이렇게 제조한 어유로 코팅된 박테리오파지 포함 사료는 사료 표면에 도포된 어유가 피막을 잘 형성할 수 있도록 1시간 정도 상온에서 자연건조시켰다. 건조까지 완료한 사료는 후속 실험에 사용하기 전까지 냉장보관하였다.
이렇게 제조한 사료의 일부를 사용하여 사료 내의 박테리오파지 함량을 조사하였다. 사료 내의 박테리오파지 함량조사는 다음과 같이 실시하였다. EB 완충액(EB buffer; 10 mM Tris-Cl, pH 8.5) 90 ml에 앞에서 제조한 사료 10 g씩을 첨가한 다음에 잘 섞어 주었다. 상온에 2시간 동안 방치한 후에 1분간 세포파쇄기(Homogenizer)를 이용하여 파쇄공정(Homogenization)을 실시하였다. 파쇄 실시 후에 4,000 rpm에서 10분간 원심분리를 실시한 다음에 상층액을 조심스럽게 회수하였다. 회수한 상층액은 EB 완충액을 사용하여 십진희석 하였다. 십진희석한 희석액을 사용하여 통상의 top agar assay를 실시하여 박테리오파지 함량을 분석하였다. Top agar assay 방법은 다음과 같았다. 앞에서 준비한 각각의 사료로부터 준비된 각각의 십진희석액 150 μl씩에 각각에 포함된 분석하고자 하는 박테리오파지의 적합 숙주(Host)의 한밤 배양액 150 μl를 첨가한 다음에 잘 혼합해 주는 방식으로 top agar assay 분석용 시료를 준비하였다. 본 실시예에 사용된 박테리오파지들의 적합 숙주 정보는 다음과 같다.
박테리오파지들의 적합 숙주 정보
박테리오파지 적합 숙주*
락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1(수탁번호: KCTC 12686BP) 락토코커스 가르비에 L0641
락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2(수탁번호: KCTC 12815BP) 락토코커스 가르비에 L0453
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1(수탁번호: KCTC 12817BP) 비브리오 파라헤몰리티쿠스 VP1502
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-2(수탁번호: KCTC 12910BP) 비브리오 파라헤몰리티쿠스 VP1209
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5(수탁번호: KCTC 13029BP) 비브리오 파라헤몰리티쿠스 NE14
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1(수탁번호: KCTC 12687BP) 스트렙토코커스 이니에 S1684
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1(수탁번호: KCTC 12568BP) 스트렙토코커스 파라우베리스 SP #11
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1(수탁번호: KCTC 12740BP) 에드와드시엘라 타르다 JET550
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1(수탁번호: KCTC 12814BP) 에로모나스 살모니시다 AS01
* 본 발명자들에 의해서 분리된 야외 분리주로 16S rDNA sequencing을 통해서 해당 종류의 균주임이 확인되었음.
이렇게 준비한 top agar assay용 시료 중에 200 μl를 취하여 45℃로 유지된 연한천(Soft agar; Top agar) 4 ml에 첨가하였다. 첨가한 후 잘 섞어준 다음에 이를 TSA(Tryptic Soy Agar) 평판배지(카제인 다이제스트, 15 g/L; 소이빈 다이제스트, 5 g/L; NaCl, 5 g/L; 아가, 15 g/L)에 즉시 부었다. 그리고는 상온에 20분 정도 방치하여 고체화시킨 다음에 37℃에서 한밤배양 하였다. 한밤배양 후에 출현한 용균반의 수를 세고, top agar assay용 시료 제조에 사용된 사료의 양과 top agar assay용 시료 제조에서 적용한 희석배수를 고려하여 사료 내의 박테리오파지 함량을 산출하였다. 분석된 사료 내의 박테리오파지 함량 조사 결과는 다음과 같았다.
EP 사료 내 박테리오파지 함량(0.1% 적용)
사료 사용한 박테리오파지 액상 용액 사용한 박테리오파지 부착 공정 사료 내 박테리오파지 함량(pfu/g)
사료 시료 E-1-1-1-1-① 시료 1-1-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-1-1-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 E-1-1-1-3-① 진공분무 1.2× 105
사료 시료 E-1-1-2-1-① 시료 1-1-2 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-1-1-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 E-1-1-2-3-① 진공분무 1.0× 106
사료 시료 E-1-2-1-1-① 시료 1-2-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 E-1-2-1-2-① 분무 1.2× 105
사료 시료 E-1-2-1-3-① 진공분무 1.8× 105
사료 시료 E-1-2-2-1-① 시료 1-2-2 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-1-2-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 E-1-2-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 E-1-3-1-1-① 시료 1-3-1 흡착 1.1× 105
사료 시료 E-1-3-1-2-① 분무 1.0× 105
사료 시료 E-1-3-1-3-① 진공분무 1.2× 105
사료 시료 E-1-3-2-1-① 시료 1-3-2 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-1-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-1-3-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-2-1-1-1-① 시료 2-1-1 흡착 1.3× 105
사료 시료 E-2-1-1-2-① 분무 1.2× 105
사료 시료 E-2-1-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 E-2-1-2-1-① 시료 2-1-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 E-2-1-2-2-① 분무 1.2× 106
사료 시료 E-2-1-2-3-① 진공분무 1.1× 106
사료 시료 E-2-2-1-1-① 시료 2-2-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-2-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 E-2-2-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 E-2-2-2-1-① 시료 2-2-2 흡착 1.3× 106
사료 시료 E-2-2-2-2-① 분무 1.1× 106
사료 시료 E-2-2-2-3-① 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-2-3-1-1-① 시료 2-3-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 E-2-3-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 E-2-3-1-3-① 진공분무 1.2× 105
사료 시료 E-2-3-2-1-① 시료 2-3-2 흡착 1.7× 106
사료 시료 E-2-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-2-3-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-3-1-1-1-① 시료 3-1-1 흡착 2.1× 105
사료 시료 E-3-1-1-2-① 분무 1.6× 105
사료 시료 E-3-1-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 E-3-1-2-1-① 시료 3-1-2 흡착 1.0× 106
사료 시료 E-3-1-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 E-3-1-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 E-3-2-1-1-① 시료 3-2-1 흡착 1.8× 105
사료 시료 E-3-2-1-2-① 분무 1.6× 105
사료 시료 E-3-2-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 E-3-2-2-1-① 시료 3-2-2 흡착 1.9× 106
사료 시료 E-3-2-2-2-① 분무 1.2× 106
사료 시료 E-3-2-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-3-3-1-1-① 시료 3-3-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-3-3-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 E-3-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 E-3-3-2-1-① 시료 3-3-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 E-3-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-3-3-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-4-1-1-1-① 시료 4-1-1 흡착 1.3× 105
사료 시료 E-4-1-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 E-4-1-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 E-4-1-2-1-① 시료 4-1-2 흡착 1.0× 106
사료 시료 E-4-1-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 E-4-1-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 E-4-2-1-1-① 시료 4-2-1 흡착 1.7× 105
사료 시료 E-4-2-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 E-4-2-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 E-4-2-2-1-① 시료 4-2-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 E-4-2-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-4-2-2-3-① 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-4-3-1-1-① 시료 4-3-1 흡착 1.6× 105
사료 시료 E-4-3-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 E-4-3-1-3-① 진공분무 1.2× 105
사료 시료 E-4-3-2-1-① 시료 4-3-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 E-4-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-4-3-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-5-1-1-1-① 시료 5-1-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-5-1-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 E-5-1-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 E-5-1-2-1-① 시료 5-1-2 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-5-1-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 E-5-1-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-5-2-1-1-① 시료 5-2-1 흡착 1.3× 105
사료 시료 E-5-2-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 E-5-2-1-3-① 진공분무 1.1× 105
사료 시료 E-5-2-2-1-① 시료 5-2-2 흡착 1.0× 106
사료 시료 E-5-2-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-5-2-2-3-① 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-5-3-1-1-① 시료 5-3-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 E-5-3-1-2-① 분무 1.6× 105
사료 시료 E-5-3-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 E-5-3-2-1-① 시료 5-3-2 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-5-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-5-3-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-6-1-1-1-① 시료 6-1-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-6-1-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 E-6-1-1-3-① 진공분무 1.2× 105
사료 시료 E-6-1-2-1-① 시료 6-1-2 흡착 1.6× 106
사료 시료 E-6-1-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-6-1-2-3-① 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-6-2-1-1-① 시료 6-2-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-6-2-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 E-6-2-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 E-6-2-2-1-① 시료 6-2-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 E-6-2-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-6-2-2-3-① 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-6-3-1-1-① 시료 6-3-1 흡착 1.3× 105
사료 시료 E-6-3-1-2-① 분무 1.2× 105
사료 시료 E-6-3-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 E-6-3-2-1-① 시료 6-3-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 E-6-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-6-3-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-7-1-1-1-① 시료 7-1-1 흡착 1.6× 105
사료 시료 E-7-1-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 E-7-1-1-3-① 진공분무 1.2× 105
사료 시료 E-7-1-2-1-① 시료 7-1-2 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-7-1-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-7-1-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 E-7-2-1-1-① 시료 7-2-1 흡착 1.8× 105
사료 시료 E-7-2-1-2-① 분무 1.6× 105
사료 시료 E-7-2-1-3-① 진공분무 1.6× 105
사료 시료 E-7-2-2-1-① 시료 7-2-2 흡착 1.0× 106
사료 시료 E-7-2-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-7-2-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-7-3-1-1-① 시료 7-3-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-7-3-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 E-7-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 E-7-3-2-1-① 시료 7-3-2 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-7-3-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 E-7-3-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-8-1-1-1-① 시료 8-1-1 흡착 1.7× 105
사료 시료 E-8-1-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 E-8-1-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 E-8-1-2-1-① 시료 8-1-2 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-8-1-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-8-1-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-8-2-1-1-① 시료 8-2-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-8-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 E-8-2-1-3-① 진공분무 1.1× 105
사료 시료 E-8-2-2-1-① 시료 8-2-2 흡착 1.6× 106
사료 시료 E-8-2-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-8-2-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-8-3-1-1-① 시료 8-3-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 E-8-3-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 E-8-3-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 E-8-3-2-1-① 시료 8-3-2 흡착 1.8× 106
사료 시료 E-8-3-2-2-① 분무 1.7× 106
사료 시료 E-8-3-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 E-9-1-1-1-① 시료 9-1-1 흡착 1.2× 105
사료 시료 E-9-1-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 E-9-1-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 E-9-1-2-1-① 시료 9-1-2 흡착 1.9× 106
사료 시료 E-9-1-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 E-9-1-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 E-9-2-1-1-① 시료 9-2-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 E-9-2-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 E-9-2-1-3-① 진공분무 1.7× 105
사료 시료 E-9-2-2-1-① 시료 9-2-2 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-9-2-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 E-9-2-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-9-3-1-1-① 시료 9-3-1 흡착 1.7× 105
사료 시료 E-9-3-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 E-9-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 E-9-3-2-1-① 시료 9-3-2 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-9-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 E-9-3-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-10-1-1-1-① 시료 10-1-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-1-1-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-1-1-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-1-2-1-① 시료 10-1-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-1-2-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-1-2-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-2-1-1-① 시료 10-2-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-2-1-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-2-1-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-2-2-1-① 시료 10-2-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-2-2-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-2-2-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-3-1-1-① 시료 10-3-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-3-1-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-3-1-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 E-10-3-2-1-① 시료 10-3-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-3-2-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-3-2-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
EP 사료 내 박테리오파지 함량(1% 적용)
사료 사용한 박테리오파지 액상 용액 사용한 박테리오파지 부착 공정 사료 내 박테리오파지 함량(pfu/g)
사료 시료 E-1-1-1-1-② 시료 1-1-1 흡착 9.8× 105
사료 시료 E-1-1-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 E-1-1-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 E-1-1-2-1-② 시료 1-1-2 흡착 1.3× 107
사료 시료 E-1-1-2-2-② 분무 1.2× 107
사료 시료 E-1-1-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 E-1-2-1-1-② 시료 1-2-1 흡착 1.3× 106
사료 시료 E-1-2-1-2-② 분무 2.1× 106
사료 시료 E-1-2-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 E-1-2-2-1-② 시료 1-2-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-1-2-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-1-2-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-1-3-1-1-② 시료 1-3-1 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-1-3-1-2-② 분무 1.4× 106
사료 시료 E-1-3-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 E-1-3-2-1-② 시료 1-3-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-1-3-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-1-3-2-3-② 진공분무 1.2× 107
사료 시료 E-2-1-1-1-② 시료 2-1-1 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-2-1-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-2-1-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-2-1-2-1-② 시료 2-1-2 흡착 1.1× 107
사료 시료 E-2-1-2-2-② 분무 1.2× 107
사료 시료 E-2-1-2-3-② 진공분무 1.0× 107
사료 시료 E-2-2-1-1-② 시료 2-2-1 흡착 1.7× 106
사료 시료 E-2-2-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-2-2-1-3-② 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-2-2-2-1-② 시료 2-2-2 흡착 1.3× 107
사료 시료 E-2-2-2-2-② 분무 1.2× 107
사료 시료 E-2-2-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-2-3-1-1-② 시료 2-3-1 흡착 9.8× 105
사료 시료 E-2-3-1-2-② 분무 1.7× 106
사료 시료 E-2-3-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 E-2-3-2-1-② 시료 2-3-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-2-3-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-2-3-2-3-② 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-3-1-1-1-② 시료 3-1-1 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-3-1-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-3-1-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-3-1-2-1-② 시료 3-1-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 E-3-1-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-3-1-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-3-2-1-1-② 시료 3-2-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 E-3-2-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 E-3-2-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-3-2-2-1-② 시료 3-2-2 흡착 1.0× 107
사료 시료 E-3-2-2-2-② 분무 1.6× 107
사료 시료 E-3-2-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-3-3-1-1-② 시료 3-3-1 흡착 1.3× 106
사료 시료 E-3-3-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 E-3-3-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-3-3-2-1-② 시료 3-3-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 E-3-3-2-2-② 분무 1.6× 107
사료 시료 E-3-3-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-4-1-1-1-② 시료 4-1-1 흡착 2.2× 106
사료 시료 E-4-1-1-2-② 분무 1.6× 106
사료 시료 E-4-1-1-3-② 진공분무 1.8× 106
사료 시료 E-4-1-2-1-② 시료 4-1-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-4-1-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 E-4-1-2-3-② 진공분무 1.7× 107
사료 시료 E-4-2-1-1-② 시료 4-2-1 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-4-2-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-4-2-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-4-2-2-1-② 시료 4-2-2 흡착 1.1× 107
사료 시료 E-4-2-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-4-2-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-4-3-1-1-② 시료 4-3-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 E-4-3-1-2-② 분무 1.4× 106
사료 시료 E-4-3-1-3-② 진공분무 1.6× 106
사료 시료 E-4-3-2-1-② 시료 4-3-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 E-4-3-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-4-3-2-3-② 진공분무 1.7× 107
사료 시료 E-5-1-1-1-② 시료 5-1-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 E-5-1-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 E-5-1-1-3-② 진공분무 1.6× 106
사료 시료 E-5-1-2-1-② 시료 5-1-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-5-1-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-5-1-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 E-5-2-1-1-② 시료 5-2-1 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-5-2-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-5-2-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-5-2-2-1-② 시료 5-2-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 E-5-2-2-2-② 분무 1.2× 107
사료 시료 E-5-2-2-3-② 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-5-3-1-1-② 시료 5-3-1 흡착 1.0× 106
사료 시료 E-5-3-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 E-5-3-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-5-3-2-1-② 시료 5-3-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 E-5-3-2-2-② 분무 1.2× 107
사료 시료 E-5-3-2-3-② 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-6-1-1-1-② 시료 6-1-1 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-6-1-1-2-② 분무 1.1× 106
사료 시료 E-6-1-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-6-1-2-1-② 시료 6-1-2 흡착 1.3× 107
사료 시료 E-6-1-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 E-6-1-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-6-2-1-1-② 시료 6-2-1 흡착 1.3× 106
사료 시료 E-6-2-1-2-② 분무 1.4× 106
사료 시료 E-6-2-1-3-② 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-6-2-2-1-② 시료 6-2-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 E-6-2-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-6-2-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-6-3-1-1-② 시료 6-3-1 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-6-3-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-6-3-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-6-3-2-1-② 시료 6-3-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-6-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 E-6-3-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-7-1-1-1-② 시료 7-1-1 흡착 1.2× 106
사료 시료 E-7-1-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 E-7-1-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 E-7-1-2-1-② 시료 7-1-2 흡착 1.1× 107
사료 시료 E-7-1-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-7-1-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 E-7-2-1-1-② 시료 7-2-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 E-7-2-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-7-2-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-7-2-2-1-② 시료 7-2-2 흡착 1.0× 107
사료 시료 E-7-2-2-2-② 분무 1.6× 107
사료 시료 E-7-2-2-3-② 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-7-3-1-1-② 시료 7-3-1 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-7-3-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-7-3-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-7-3-2-1-② 시료 7-3-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 E-7-3-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-7-3-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-8-1-1-1-② 시료 8-1-1 흡착 1.0× 106
사료 시료 E-8-1-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 E-8-1-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-8-1-2-1-② 시료 8-1-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-8-1-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 E-8-1-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-8-2-1-1-② 시료 8-2-1 흡착 1.8× 106
사료 시료 E-8-2-1-2-② 분무 1.6× 106
사료 시료 E-8-2-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 E-8-2-2-1-② 시료 8-2-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-8-2-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 E-8-2-2-3-② 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-8-3-1-1-② 시료 8-3-1 흡착 1.0× 106
사료 시료 E-8-3-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-8-3-1-3-② 진공분무 1.2× 106
사료 시료 E-8-3-2-1-② 시료 8-3-2 흡착 1.3× 107
사료 시료 E-8-3-2-2-② 분무 1.2× 107
사료 시료 E-8-3-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-9-1-1-1-② 시료 9-1-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 E-9-1-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-9-1-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-9-1-2-1-② 시료 9-1-2 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-9-1-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 E-9-1-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-9-2-1-1-② 시료 9-2-1 흡착 1.1× 106
사료 시료 E-9-2-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 E-9-2-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 E-9-2-2-1-② 시료 9-2-2 흡착 1.6× 107
사료 시료 E-9-2-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 E-9-2-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-9-3-1-1-② 시료 9-3-1 흡착 1.6× 106
사료 시료 E-9-3-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 E-9-3-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 E-9-3-2-1-② 시료 9-3-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 E-9-3-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 E-9-3-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 E-10-1-1-1-② 시료 10-1-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-1-1-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-1-1-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-1-2-1-② 시료 10-1-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-1-2-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-1-2-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-2-1-1-② 시료 10-2-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-2-1-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-2-1-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-2-2-1-② 시료 10-2-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-2-2-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-2-2-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-3-1-1-② 시료 10-3-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-3-1-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-3-1-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 E-10-3-2-1-② 시료 10-3-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-3-2-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-3-2-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
EP 사료 내 박테리오파지 함량(10% 적용)
사료 사용한 박테리오파지 액상 용액 사용한 박테리오파지 부착 공정 사료 내 박테리오파지 함량(pfu/g)
사료 시료 E-1-1-1-1-③ 시료 1-1-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 E-1-1-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 E-1-1-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 E-1-1-2-1-③ 시료 1-1-2 흡착 9.7× 107
사료 시료 E-1-1-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 E-1-1-2-3-③ 진공분무 1.2× 108
사료 시료 E-1-2-1-1-③ 시료 1-2-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 E-1-2-1-2-③ 분무 1.2× 107
사료 시료 E-1-2-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-1-2-2-1-③ 시료 1-2-2 흡착 1.4× 108
사료 시료 E-1-2-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-1-2-2-3-③ 진공분무 1.7× 108
사료 시료 E-1-3-1-1-③ 시료 1-3-1 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-1-3-1-2-③ 분무 1.1× 107
사료 시료 E-1-3-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-1-3-2-1-③ 시료 1-3-2 흡착 1.2× 108
사료 시료 E-1-3-2-2-③ 분무 1.1× 108
사료 시료 E-1-3-2-3-③ 진공분무 1.0× 108
사료 시료 E-2-1-1-1-③ 시료 2-1-1 흡착 9.5× 106
사료 시료 E-2-1-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 E-2-1-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-2-1-2-1-③ 시료 2-1-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 E-2-1-2-2-③ 분무 1.2× 108
사료 시료 E-2-1-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-2-2-1-1-③ 시료 2-2-1 흡착 1.0× 107
사료 시료 E-2-2-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 E-2-2-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-2-2-2-1-③ 시료 2-2-2 흡착 1.7× 108
사료 시료 E-2-2-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-2-2-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-2-3-1-1-③ 시료 2-3-1 흡착 1.7× 107
사료 시료 E-2-3-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-2-3-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-2-3-2-1-③ 시료 2-3-2 흡착 2.2× 108
사료 시료 E-2-3-2-2-③ 분무 1.2× 108
사료 시료 E-2-3-2-3-③ 진공분무 1.6× 108
사료 시료 E-3-1-1-1-③ 시료 3-1-1 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-3-1-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-3-1-1-3-③ 진공분무 1.1× 107
사료 시료 E-3-1-2-1-③ 시료 3-1-2 흡착 1.9× 108
사료 시료 E-3-1-2-2-③ 분무 1.6× 108
사료 시료 E-3-1-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-3-2-1-1-③ 시료 3-2-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 E-3-2-1-2-③ 분무 1.2× 107
사료 시료 E-3-2-1-3-③ 진공분무 1.1× 107
사료 시료 E-3-2-2-1-③ 시료 3-2-2 흡착 1.2× 108
사료 시료 E-3-2-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 E-3-2-2-3-③ 진공분무 1.2× 108
사료 시료 E-3-3-1-1-③ 시료 3-3-1 흡착 1.0× 107
사료 시료 E-3-3-1-2-③ 분무 1.2× 107
사료 시료 E-3-3-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-3-3-2-1-③ 시료 3-3-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 E-3-3-2-2-③ 분무 1.2× 108
사료 시료 E-3-3-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 E-4-1-1-1-③ 시료 4-1-1 흡착 1.7× 107
사료 시료 E-4-1-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 E-4-1-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-4-1-2-1-③ 시료 4-1-2 흡착 1.5× 108
사료 시료 E-4-1-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-4-1-2-3-③ 진공분무 1.6× 108
사료 시료 E-4-2-1-1-③ 시료 4-2-1 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-4-2-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 E-4-2-1-3-③ 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-4-2-2-1-③ 시료 4-2-2 흡착 1.4× 108
사료 시료 E-4-2-2-2-③ 분무 1.6× 108
사료 시료 E-4-2-2-3-③ 진공분무 1.2× 108
사료 시료 E-4-3-1-1-③ 시료 4-3-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 E-4-3-1-2-③ 분무 1.2× 107
사료 시료 E-4-3-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-4-3-2-1-③ 시료 4-3-2 흡착 1.7× 108
사료 시료 E-4-3-2-2-③ 분무 1.2× 108
사료 시료 E-4-3-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 E-5-1-1-1-③ 시료 5-1-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 E-5-1-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 E-5-1-1-3-③ 진공분무 1.2× 107
사료 시료 E-5-1-2-1-③ 시료 5-1-2 흡착 1.2× 108
사료 시료 E-5-1-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 E-5-1-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 E-5-2-1-1-③ 시료 5-2-1 흡착 1.0× 107
사료 시료 E-5-2-1-2-③ 분무 1.2× 107
사료 시료 E-5-2-1-3-③ 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-5-2-2-1-③ 시료 5-2-2 흡착 1.0× 108
사료 시료 E-5-2-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 E-5-2-2-3-③ 진공분무 1.6× 108
사료 시료 E-5-3-1-1-③ 시료 5-3-1 흡착 1.1× 107
사료 시료 E-5-3-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-5-3-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-5-3-2-1-③ 시료 5-3-2 흡착 1.2× 108
사료 시료 E-5-3-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-5-3-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-6-1-1-1-③ 시료 6-1-1 흡착 1.1× 107
사료 시료 E-6-1-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 E-6-1-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-6-1-2-1-③ 시료 6-1-2 흡착 1.5× 108
사료 시료 E-6-1-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-6-1-2-3-③ 진공분무 1.2× 108
사료 시료 E-6-2-1-1-③ 시료 6-2-1 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-6-2-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 E-6-2-1-3-③ 진공분무 1.3× 107
사료 시료 E-6-2-2-1-③ 시료 6-2-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 E-6-2-2-2-③ 분무 1.2× 108
사료 시료 E-6-2-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-6-3-1-1-③ 시료 6-3-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 E-6-3-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-6-3-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-6-3-2-1-③ 시료 6-3-2 흡착 1.2× 108
사료 시료 E-6-3-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 E-6-3-2-3-③ 진공분무 1.3× 108
사료 시료 E-7-1-1-1-③ 시료 7-1-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 E-7-1-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 E-7-1-1-3-③ 진공분무 2.0× 107
사료 시료 E-7-1-2-1-③ 시료 7-1-2 흡착 1.0× 108
사료 시료 E-7-1-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 E-7-1-2-3-③ 진공분무 1.3× 108
사료 시료 E-7-2-1-1-③ 시료 7-2-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 E-7-2-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 E-7-2-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 E-7-2-2-1-③ 시료 7-2-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 E-7-2-2-2-③ 분무 1.7× 108
사료 시료 E-7-2-2-3-③ 진공분무 1.7× 108
사료 시료 E-7-3-1-1-③ 시료 7-3-1 흡착 1.0× 107
사료 시료 E-7-3-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-7-3-1-3-③ 진공분무 1.2× 107
사료 시료 E-7-3-2-1-③ 시료 7-3-2 흡착 1.2× 108
사료 시료 E-7-3-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-7-3-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-8-1-1-1-③ 시료 8-1-1 흡착 2.2× 107
사료 시료 E-8-1-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 E-8-1-1-3-③ 진공분무 1.7× 107
사료 시료 E-8-1-2-1-③ 시료 8-1-2 흡착 1.8× 108
사료 시료 E-8-1-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-8-1-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-8-2-1-1-③ 시료 8-2-1 흡착 1.2× 107
사료 시료 E-8-2-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 E-8-2-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-8-2-2-1-③ 시료 8-2-2 흡착 1.1× 108
사료 시료 E-8-2-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-8-2-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 E-8-3-1-1-③ 시료 8-3-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 E-8-3-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-8-3-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-8-3-2-1-③ 시료 8-3-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 E-8-3-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-8-3-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 E-9-1-1-1-③ 시료 9-1-1 흡착 1.1× 107
사료 시료 E-9-1-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 E-9-1-1-3-③ 진공분무 1.7× 107
사료 시료 E-9-1-2-1-③ 시료 9-1-2 흡착 1.4× 108
사료 시료 E-9-1-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 E-9-1-2-3-③ 진공분무 1.3× 108
사료 시료 E-9-2-1-1-③ 시료 9-2-1 흡착 1.0× 107
사료 시료 E-9-2-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-9-2-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 E-9-2-2-1-③ 시료 9-2-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 E-9-2-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 E-9-2-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 E-9-3-1-1-③ 시료 9-3-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 E-9-3-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 E-9-3-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 E-9-3-2-1-③ 시료 9-3-2 흡착 1.4× 108
사료 시료 E-9-3-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 E-9-3-2-3-③ 진공분무 1.2× 108
사료 시료 E-10-1-1-1-③ 시료 10-1-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-1-1-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-1-1-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-1-2-1-③ 시료 10-1-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-1-2-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-1-2-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-2-1-1-③ 시료 10-2-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-2-1-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-2-1-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-2-2-1-③ 시료 10-2-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-2-2-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-2-2-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-3-1-1-③ 시료 10-3-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-3-1-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-3-1-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 E-10-3-2-1-③ 시료 10-3-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-3-2-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 E-10-3-2-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
크럼블 사료 내 박테리오파지 함량(0.1% 적용)
사료 사용한 박테리오파지 액상 용액 사용한 박테리오파지 부착 공정 사료 내 박테리오파지 함량(pfu/g)
사료 시료 C-1-1-1-1-① 시료 1-1-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-1-1-1-2-① 분무 1.2× 105
사료 시료 C-1-1-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-1-1-2-1-① 시료 1-1-2 흡착 1.7× 106
사료 시료 C-1-1-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 C-1-1-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-1-2-1-1-① 시료 1-2-1 흡착 1.6× 105
사료 시료 C-1-2-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 C-1-2-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 C-1-2-2-1-① 시료 1-2-2 흡착 1.6× 106
사료 시료 C-1-2-2-2-① 분무 1.2× 106
사료 시료 C-1-2-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-1-3-1-1-① 시료 1-3-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-1-3-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 C-1-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-1-3-2-1-① 시료 1-3-2 흡착 1.6× 106
사료 시료 C-1-3-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-1-3-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-2-1-1-1-① 시료 2-1-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-2-1-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 C-2-1-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-2-1-2-1-① 시료 2-1-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-2-1-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 C-2-1-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-2-2-1-1-① 시료 2-2-1 흡착 1.7× 105
사료 시료 C-2-2-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 C-2-2-1-3-① 진공분무 1.7× 105
사료 시료 C-2-2-2-1-① 시료 2-2-2 흡착 1.7× 106
사료 시료 C-2-2-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 C-2-2-2-3-① 진공분무 1.7× 106
사료 시료 C-2-3-1-1-① 시료 2-3-1 흡착 1.6× 105
사료 시료 C-2-3-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-2-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-2-3-2-1-① 시료 2-3-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-2-3-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 C-2-3-2-3-① 진공분무 1.2× 106
사료 시료 C-3-1-1-1-① 시료 3-1-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-3-1-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-3-1-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-3-1-2-1-① 시료 3-1-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-3-1-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-3-1-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-3-2-1-1-① 시료 3-2-1 흡착 1.3× 105
사료 시료 C-3-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-3-2-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-3-2-2-1-① 시료 3-2-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-3-2-2-2-① 분무 1.7× 106
사료 시료 C-3-2-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-3-3-1-1-① 시료 3-3-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-3-3-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-3-3-1-3-① 진공분무 1.7× 105
사료 시료 C-3-3-2-1-① 시료 3-3-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-3-3-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-3-3-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-4-1-1-1-① 시료 4-1-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-4-1-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 C-4-1-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-4-1-2-1-① 시료 4-1-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-4-1-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 C-4-1-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-4-2-1-1-① 시료 4-2-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-4-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-4-2-1-3-① 진공분무 1.6× 105
사료 시료 C-4-2-2-1-① 시료 4-2-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-4-2-2-2-① 분무 1.2× 106
사료 시료 C-4-2-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-4-3-1-1-① 시료 4-3-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-4-3-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-4-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-4-3-2-1-① 시료 4-3-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-4-3-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-4-3-2-3-① 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-5-1-1-1-① 시료 5-1-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-5-1-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-5-1-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-5-1-2-1-① 시료 5-1-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-5-1-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 C-5-1-2-3-① 진공분무 1.7× 106
사료 시료 C-5-2-1-1-① 시료 5-2-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-5-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-5-2-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-5-2-2-1-① 시료 5-2-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-5-2-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 C-5-2-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-5-3-1-1-① 시료 5-3-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-5-3-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-5-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-5-3-2-1-① 시료 5-3-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-5-3-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-5-3-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-6-1-1-1-① 시료 6-1-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-6-1-1-2-① 분무 1.6× 105
사료 시료 C-6-1-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-6-1-2-1-① 시료 6-1-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-6-1-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-6-1-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-6-2-1-1-① 시료 6-2-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-6-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-6-2-1-3-① 진공분무 1.7× 105
사료 시료 C-6-2-2-1-① 시료 6-2-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-6-2-2-2-① 분무 1.8× 106
사료 시료 C-6-2-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-6-3-1-1-① 시료 6-3-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-6-3-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-6-3-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-6-3-2-1-① 시료 6-3-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-6-3-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-6-3-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-7-1-1-1-① 시료 7-1-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-7-1-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-7-1-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-7-1-2-1-① 시료 7-1-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-7-1-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 C-7-1-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-7-2-1-1-① 시료 7-2-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-7-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-7-2-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-7-2-2-1-① 시료 7-2-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-7-2-2-2-① 분무 1.7× 106
사료 시료 C-7-2-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-7-3-1-1-① 시료 7-3-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-7-3-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-7-3-1-3-① 진공분무 1.3× 105
사료 시료 C-7-3-2-1-① 시료 7-3-2 흡착 1.7× 106
사료 시료 C-7-3-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-7-3-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-8-1-1-1-① 시료 8-1-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-8-1-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 C-8-1-1-3-① 진공분무 1.6× 105
사료 시료 C-8-1-2-1-① 시료 8-1-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-8-1-2-2-① 분무 1.4× 106
사료 시료 C-8-1-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-8-2-1-1-① 시료 8-2-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-8-2-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-8-2-1-3-① 진공분무 1.4× 105
사료 시료 C-8-2-2-1-① 시료 8-2-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-8-2-2-2-① 분무 1.5× 106
사료 시료 C-8-2-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-8-3-1-1-① 시료 8-3-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-8-3-1-2-① 분무 1.5× 105
사료 시료 C-8-3-1-3-① 진공분무 1.8× 105
사료 시료 C-8-3-2-1-① 시료 8-3-2 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-8-3-2-2-① 분무 1.6× 106
사료 시료 C-8-3-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-9-1-1-1-① 시료 9-1-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-9-1-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-9-1-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-9-1-2-1-① 시료 9-1-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-9-1-2-2-① 분무 1.3× 106
사료 시료 C-9-1-2-3-① 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-9-2-1-1-① 시료 9-2-1 흡착 1.5× 105
사료 시료 C-9-2-1-2-① 분무 1.4× 105
사료 시료 C-9-2-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-9-2-2-1-① 시료 9-2-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-9-2-2-2-① 분무 1.6× 106
사료 시료 C-9-2-2-3-① 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-9-3-1-1-① 시료 9-3-1 흡착 1.4× 105
사료 시료 C-9-3-1-2-① 분무 1.3× 105
사료 시료 C-9-3-1-3-① 진공분무 1.5× 105
사료 시료 C-9-3-2-1-① 시료 9-3-2 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-9-3-2-2-① 분무 1.6× 106
사료 시료 C-9-3-2-3-① 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-10-1-1-1-① 시료 10-1-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-1-1-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-1-1-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-1-2-1-① 시료 10-1-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-1-2-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-1-2-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-2-1-1-① 시료 10-2-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-2-1-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-2-1-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-2-2-1-① 시료 10-2-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-2-2-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-2-2-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-3-1-1-① 시료 10-3-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-3-1-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-3-1-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 105 이상
사료 시료 C-10-3-2-1-① 시료 10-3-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-3-2-2-① 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-3-2-3-① 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
크럼블 사료 내 박테리오파지 함량(1% 적용)
사료 사용한 박테리오파지 액상 용액 사용한 박테리오파지 부착 공정 사료 내 박테리오파지 함량(pfu/g)
사료 시료 C-1-1-1-1-② 시료 1-1-1 흡착 1.7× 106
사료 시료 C-1-1-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-1-1-1-3-② 진공분무 1.2× 106
사료 시료 C-1-1-2-1-② 시료 1-1-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-1-1-2-2-② 분무 1.6× 107
사료 시료 C-1-1-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-1-2-1-1-② 시료 1-2-1 흡착 1.7× 106
사료 시료 C-1-2-1-2-② 분무 1.6× 106
사료 시료 C-1-2-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-1-2-2-1-② 시료 1-2-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-1-2-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-1-2-2-3-② 진공분무 1.7× 107
사료 시료 C-1-3-1-1-② 시료 1-3-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-1-3-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-1-3-1-3-② 진공분무 1.8× 106
사료 시료 C-1-3-2-1-② 시료 1-3-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-1-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-1-3-2-3-② 진공분무 1.8× 107
사료 시료 C-2-1-1-1-② 시료 2-1-1 흡착 1.6× 106
사료 시료 C-2-1-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-2-1-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 C-2-1-2-1-② 시료 2-1-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-2-1-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-2-1-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-2-2-1-1-② 시료 2-2-1 흡착 1.6× 106
사료 시료 C-2-2-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-2-2-1-3-② 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-2-2-2-1-② 시료 2-2-2 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-2-2-2-2-② 분무 1.6× 107
사료 시료 C-2-2-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-2-3-1-1-② 시료 2-3-1 흡착 1.3× 106
사료 시료 C-2-3-1-2-② 분무 1.6× 106
사료 시료 C-2-3-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-2-3-2-1-② 시료 2-3-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-2-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-2-3-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-3-1-1-1-② 시료 3-1-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-3-1-1-2-② 분무 1.7× 106
사료 시료 C-3-1-1-3-② 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-3-1-2-1-② 시료 3-1-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-3-1-2-2-② 분무 1.6× 107
사료 시료 C-3-1-2-3-② 진공분무 1.2× 107
사료 시료 C-3-2-1-1-② 시료 3-2-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-3-2-1-2-② 분무 1.6× 106
사료 시료 C-3-2-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-3-2-2-1-② 시료 3-2-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-3-2-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-3-2-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-3-3-1-1-② 시료 3-3-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-3-3-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-3-3-1-3-② 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-3-3-2-1-② 시료 3-3-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-3-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-3-3-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-4-1-1-1-② 시료 4-1-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-4-1-1-2-② 분무 1.4× 106
사료 시료 C-4-1-1-3-② 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-4-1-2-1-② 시료 4-1-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-4-1-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-4-1-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-4-2-1-1-② 시료 4-2-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-4-2-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-4-2-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 C-4-2-2-1-② 시료 4-2-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-4-2-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-4-2-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-4-3-1-1-② 시료 4-3-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-4-3-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 C-4-3-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-4-3-2-1-② 시료 4-3-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-4-3-2-2-② 분무 1.6× 107
사료 시료 C-4-3-2-3-② 진공분무 1.3× 107
사료 시료 C-5-1-1-1-② 시료 5-1-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-5-1-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 C-5-1-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-5-1-2-1-② 시료 5-1-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-5-1-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-5-1-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-5-2-1-1-② 시료 5-2-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-5-2-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 C-5-2-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-5-2-2-1-② 시료 5-2-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-5-2-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 C-5-2-2-3-② 진공분무 1.2× 107
사료 시료 C-5-3-1-1-② 시료 5-3-1 흡착 1.3× 106
사료 시료 C-5-3-1-2-② 분무 1.6× 106
사료 시료 C-5-3-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-5-3-2-1-② 시료 5-3-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-5-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-5-3-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-6-1-1-1-② 시료 6-1-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-6-1-1-2-② 분무 1.3× 106
사료 시료 C-6-1-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-6-1-2-1-② 시료 6-1-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-6-1-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-6-1-2-3-② 진공분무 1.3× 107
사료 시료 C-6-2-1-1-② 시료 6-2-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-6-2-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-6-2-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-6-2-2-1-② 시료 6-2-2 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-6-2-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-6-2-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-6-3-1-1-② 시료 6-3-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-6-3-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-6-3-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-6-3-2-1-② 시료 6-3-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-6-3-2-2-② 분무 1.3× 107
사료 시료 C-6-3-2-3-② 진공분무 1.7× 107
사료 시료 C-7-1-1-1-② 시료 7-1-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-7-1-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 C-7-1-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 C-7-1-2-1-② 시료 7-1-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-7-1-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-7-1-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-7-2-1-1-② 시료 7-2-1 흡착 1.3× 106
사료 시료 C-7-2-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-7-2-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-7-2-2-1-② 시료 7-2-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-7-2-2-2-② 분무 1.5× 107
사료 시료 C-7-2-2-3-② 진공분무 1.2× 107
사료 시료 C-7-3-1-1-② 시료 7-3-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-7-3-1-2-② 분무 1.4× 106
사료 시료 C-7-3-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-7-3-2-1-② 시료 7-3-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-7-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-7-3-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-8-1-1-1-② 시료 8-1-1 흡착 1.4× 106
사료 시료 C-8-1-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-8-1-1-3-② 진공분무 1.7× 106
사료 시료 C-8-1-2-1-② 시료 8-1-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-8-1-2-2-② 분무 1.2× 107
사료 시료 C-8-1-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-8-2-1-1-② 시료 8-2-1 흡착 1.6× 106
사료 시료 C-8-2-1-2-② 분무 1.4× 106
사료 시료 C-8-2-1-3-② 진공분무 1.5× 106
사료 시료 C-8-2-2-1-② 시료 8-2-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-8-2-2-2-② 분무 1.7× 107
사료 시료 C-8-2-2-3-② 진공분무 1.2× 107
사료 시료 C-8-3-1-1-② 시료 8-3-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-8-3-1-2-② 분무 1.2× 106
사료 시료 C-8-3-1-3-② 진공분무 1.4× 106
사료 시료 C-8-3-2-1-② 시료 8-3-2 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-8-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-8-3-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-9-1-1-1-② 시료 9-1-1 흡착 1.7× 106
사료 시료 C-9-1-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-9-1-1-3-② 진공분무 1.2× 106
사료 시료 C-9-1-2-1-② 시료 9-1-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-9-1-2-2-② 분무 1.7× 107
사료 시료 C-9-1-2-3-② 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-9-2-1-1-② 시료 9-2-1 흡착 1.3× 106
사료 시료 C-9-2-1-2-② 분무 1.5× 106
사료 시료 C-9-2-1-3-② 진공분무 1.6× 106
사료 시료 C-9-2-2-1-② 시료 9-2-2 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-9-2-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-9-2-2-3-② 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-9-3-1-1-② 시료 9-3-1 흡착 1.5× 106
사료 시료 C-9-3-1-2-② 분무 1.7× 106
사료 시료 C-9-3-1-3-② 진공분무 1.3× 106
사료 시료 C-9-3-2-1-② 시료 9-3-2 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-9-3-2-2-② 분무 1.4× 107
사료 시료 C-9-3-2-3-② 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-10-1-1-1-② 시료 10-1-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-1-1-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-1-1-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-1-2-1-② 시료 10-1-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-1-2-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-1-2-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-2-1-1-② 시료 10-2-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-2-1-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-2-1-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-2-2-1-② 시료 10-2-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-2-2-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-2-2-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-3-1-1-② 시료 10-3-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-3-1-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-3-1-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 106 이상
사료 시료 C-10-3-2-1-② 시료 10-3-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-3-2-2-② 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-3-2-3-② 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 사용한 박테리오파지 액상 용액 사용한 박테리오파지 부착 공정 사료 내 박테리오파지 함량(pfu/g)
사료 시료 C-1-1-1-1-③ 시료 1-1-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 C-1-1-1-2-③ 분무 1.3× 107
사료 시료 C-1-1-1-3-③ 진공분무 1.3× 107
사료 시료 C-1-1-2-1-③ 시료 1-1-2 흡착 1.2× 108
사료 시료 C-1-1-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-1-1-2-3-③ 진공분무 1.7× 108
사료 시료 C-1-2-1-1-③ 시료 1-2-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-1-2-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 C-1-2-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-1-2-2-1-③ 시료 1-2-2 흡착 1.8× 108
사료 시료 C-1-2-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-1-2-2-3-③ 진공분무 1.6× 108
사료 시료 C-1-3-1-1-③ 시료 1-3-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-1-3-1-2-③ 분무 1.7× 107
사료 시료 C-1-3-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-1-3-2-1-③ 시료 1-3-2 흡착 1.4× 108
사료 시료 C-1-3-2-2-③ 분무 1.7× 108
사료 시료 C-1-3-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 C-2-1-1-1-③ 시료 2-1-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-2-1-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 C-2-1-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-2-1-2-1-③ 시료 2-1-2 흡착 1.5× 108
사료 시료 C-2-1-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-2-1-2-3-③ 진공분무 1.3× 108
사료 시료 C-2-2-1-1-③ 시료 2-2-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-2-2-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 C-2-2-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-2-2-2-1-③ 시료 2-2-2 흡착 1.9× 108
사료 시료 C-2-2-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-2-2-2-3-③ 진공분무 1.6× 108
사료 시료 C-2-3-1-1-③ 시료 2-3-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-2-3-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 C-2-3-1-3-③ 진공분무 1.2× 107
사료 시료 C-2-3-2-1-③ 시료 2-3-2 흡착 1.7× 108
사료 시료 C-2-3-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-2-3-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 C-3-1-1-1-③ 시료 3-1-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 C-3-1-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-3-1-1-3-③ 진공분무 1.7× 107
사료 시료 C-3-1-2-1-③ 시료 3-1-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 C-3-1-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-3-1-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 C-3-2-1-1-③ 시료 3-2-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-3-2-1-2-③ 분무 1.7× 107
사료 시료 C-3-2-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-3-2-2-1-③ 시료 3-2-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 C-3-2-2-2-③ 분무 1.6× 108
사료 시료 C-3-2-2-3-③ 진공분무 1.3× 108
사료 시료 C-3-3-1-1-③ 시료 3-3-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-3-3-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 C-3-3-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-3-3-2-1-③ 시료 3-3-2 흡착 1.4× 108
사료 시료 C-3-3-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-3-3-2-3-③ 진공분무 1.7× 108
사료 시료 C-4-1-1-1-③ 시료 4-1-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-4-1-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-4-1-1-3-③ 진공분무 1.3× 107
사료 시료 C-4-1-2-1-③ 시료 4-1-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 C-4-1-2-2-③ 분무 1.7× 108
사료 시료 C-4-1-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 C-4-2-1-1-③ 시료 4-2-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 C-4-2-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-4-2-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-4-2-2-1-③ 시료 4-2-2 흡착 1.5× 108
사료 시료 C-4-2-2-2-③ 분무 1.6× 108
사료 시료 C-4-2-2-3-③ 진공분무 1.3× 108
사료 시료 C-4-3-1-1-③ 시료 4-3-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-4-3-1-2-③ 분무 1.5× 107
사료 시료 C-4-3-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-4-3-2-1-③ 시료 4-3-2 흡착 1.5× 108
사료 시료 C-4-3-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-4-3-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 C-5-1-1-1-③ 시료 5-1-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-5-1-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-5-1-1-3-③ 진공분무 1.2× 107
사료 시료 C-5-1-2-1-③ 시료 5-1-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 C-5-1-2-2-③ 분무 1.3× 108
사료 시료 C-5-1-2-3-③ 진공분무 1.8× 108
사료 시료 C-5-2-1-1-③ 시료 5-2-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-5-2-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-5-2-1-3-③ 진공분무 1.2× 107
사료 시료 C-5-2-2-1-③ 시료 5-2-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 C-5-2-2-2-③ 분무 1.6× 108
사료 시료 C-5-2-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 C-5-3-1-1-③ 시료 5-3-1 흡착 1.2× 107
사료 시료 C-5-3-1-2-③ 분무 1.7× 107
사료 시료 C-5-3-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-5-3-2-1-③ 시료 5-3-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 C-5-3-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-5-3-2-3-③ 진공분무 1.8× 108
사료 시료 C-6-1-1-1-③ 시료 6-1-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 C-6-1-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 C-6-1-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-6-1-2-1-③ 시료 6-1-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 C-6-1-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-6-1-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 C-6-2-1-1-③ 시료 6-2-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-6-2-1-2-③ 분무 1.7× 107
사료 시료 C-6-2-1-3-③ 진공분무 1.5× 107
사료 시료 C-6-2-2-1-③ 시료 6-2-2 흡착 1.7× 108
사료 시료 C-6-2-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-6-2-2-3-③ 진공분무 1.6× 108
사료 시료 C-6-3-1-1-③ 시료 6-3-1 흡착 1.3× 107
사료 시료 C-6-3-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-6-3-1-3-③ 진공분무 1.7× 107
사료 시료 C-6-3-2-1-③ 시료 6-3-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 C-6-3-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-6-3-2-3-③ 진공분무 1.8× 108
사료 시료 C-7-1-1-1-③ 시료 7-1-1 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-7-1-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 C-7-1-1-3-③ 진공분무 1.8× 107
사료 시료 C-7-1-2-1-③ 시료 7-1-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 C-7-1-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-7-1-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 C-7-2-1-1-③ 시료 7-2-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-7-2-1-2-③ 분무 1.7× 107
사료 시료 C-7-2-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-7-2-2-1-③ 시료 7-2-2 흡착 1.4× 108
사료 시료 C-7-2-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-7-2-2-3-③ 진공분무 1.8× 108
사료 시료 C-7-3-1-1-③ 시료 7-3-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-7-3-1-2-③ 분무 1.7× 107
사료 시료 C-7-3-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-7-3-2-1-③ 시료 7-3-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 C-7-3-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-7-3-2-3-③ 진공분무 1.7× 108
사료 시료 C-8-1-1-1-③ 시료 8-1-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-8-1-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-8-1-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-8-1-2-1-③ 시료 8-1-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 C-8-1-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-8-1-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 C-8-2-1-1-③ 시료 8-2-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-8-2-1-2-③ 분무 1.7× 107
사료 시료 C-8-2-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-8-2-2-1-③ 시료 8-2-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 C-8-2-2-2-③ 분무 1.4× 108
사료 시료 C-8-2-2-3-③ 진공분무 1.3× 108
사료 시료 C-8-3-1-1-③ 시료 8-3-1 흡착 1.7× 107
사료 시료 C-8-3-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-8-3-1-3-③ 진공분무 1.4× 107
사료 시료 C-8-3-2-1-③ 시료 8-3-2 흡착 1.7× 108
사료 시료 C-8-3-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-8-3-2-3-③ 진공분무 1.6× 108
사료 시료 C-9-1-1-1-③ 시료 9-1-1 흡착 1.5× 107
사료 시료 C-9-1-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 C-9-1-1-3-③ 진공분무 1.7× 107
사료 시료 C-9-1-2-1-③ 시료 9-1-2 흡착 1.6× 108
사료 시료 C-9-1-2-2-③ 분무 1.5× 108
사료 시료 C-9-1-2-3-③ 진공분무 1.4× 108
사료 시료 C-9-2-1-1-③ 시료 9-2-1 흡착 1.4× 107
사료 시료 C-9-2-1-2-③ 분무 1.4× 107
사료 시료 C-9-2-1-3-③ 진공분무 1.8× 107
사료 시료 C-9-2-2-1-③ 시료 9-2-2 흡착 1.7× 108
사료 시료 C-9-2-2-2-③ 분무 1.6× 108
사료 시료 C-9-2-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 C-9-3-1-1-③ 시료 9-3-1 흡착 1.6× 107
사료 시료 C-9-3-1-2-③ 분무 1.6× 107
사료 시료 C-9-3-1-3-③ 진공분무 1.6× 107
사료 시료 C-9-3-2-1-③ 시료 9-3-2 흡착 1.3× 108
사료 시료 C-9-3-2-2-③ 분무 1.7× 108
사료 시료 C-9-3-2-3-③ 진공분무 1.5× 108
사료 시료 C-10-1-1-1-③ 시료 10-1-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-1-1-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-1-1-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-1-2-1-③ 시료 10-1-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-1-2-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-1-2-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-2-1-1-③ 시료 10-2-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-2-1-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-2-1-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-2-2-1-③ 시료 10-2-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-2-2-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-2-2-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-3-1-1-③ 시료 10-3-1 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-3-1-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-3-1-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 107 이상
사료 시료 C-10-3-2-1-③ 시료 10-3-2 흡착 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-3-2-2-③ 분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
사료 시료 C-10-3-2-3-③ 진공분무 6종 박테리오파지 모두 1.0× 108 이상
크럼블 사료 내 박테리오파지 함량(10% 적용)
사료 내 박테리오파지 함량을 분석한 결과, 목적한 함량대로 박테리오파지가 사료에 포함되었음을 확인할 수 있었다. 이로부터 본 발명의 제조 방법에 의해서 박테리오파지가 실활되지 않고 안정하게 사료에 첨가된다는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 3: 제조한 사료에 포함된 박테리오파지의 물속 안정성 조사
실시예 2에서 제조한 사료를 염수 및 담수에 첨가하여 상온에 24시간 방치한 후에 일정량을 취하여 실시예 2에 제시한 박테리오파지 함량 조사 방법을 통하여 사료 내의 박테리오파지 함량을 조사해 보는 방식으로 사료 내에 포함된 박테리오파지의 물속 안정성을 조사해 보았다. 본 조사에는 사료 시료 E-10-1-1-1-①, 사료 시료 E-10-1-1-2-①, 사료 시료 E-10-1-1-3-①, 사료 시료 E-10-1-2-1-①, 사료 시료 E-10-1-2-2-①, 사료 시료 E-10-1-2-3-①, 사료 시료 E-10-2-1-1-①, 사료 시료 E-10-2-1-2-①, 사료 시료 E-10-2-1-3-①, 사료 시료 E-10-2-2-1-①, 사료 시료 E-10-2-2-2-①, 사료 시료 E-10-2-2-3-①, 사료 시료 E-10-3-1-1-①, 사료 시료 E-10-3-1-2-①, 사료 시료 E-10-3-1-3-①, 사료 시료 E-10-3-2-1-①, 사료 시료 E-10-3-2-2-①, 사료 시료 E-10-3-2-3-①, 사료 시료 C-10-1-1-1-①, 사료 시료 C-10-1-1-2-①, 사료 시료 C-10-1-1-3-①, 사료 시료 C-10-1-2-1-①, 사료 시료 C-10-1-2-2-①, 사료 시료 C-10-1-2-3-①, 사료 시료 C-10-2-1-1-①, 사료 시료 C-10-2-1-2-①, 사료 시료 C-10-2-1-3-①, 사료 시료 C-10-2-2-1-①, 사료 시료 C-10-2-2-2-①, 사료 시료 C-10-2-2-3-①, 사료 시료 C-10-3-1-1-①, 사료 시료 C-10-3-1-2-①, 사료 시료 C-10-3-1-3-①, 사료 시료 C-10-3-2-1-①, 사료 시료 C-10-3-2-2-①, 및 사료 시료 C-10-3-2-3-①을 사용하였다. 그 결과는 다음과 같았다.
사료에 포함된 박테리오파지의 물속 안정성
사료 시료 박테리오파지 0시간 기준 사료 내 박테리오파지 함량 상대치(%)
담수 염수
0시간 24시간 0시간 24시간
E-10-1-1-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 99.4 100 99.2
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 99.6 100 98.9
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.8 100 99.1
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.4 100 98.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.6 100 98.7
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 99.6 100 98.4
E-10-1-1-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.6 100 97.8
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 99.4 100 97.6
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.4 100 98.6
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.4 100 98.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.7 100 98.6
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 99.4 100 99.1
E-10-1-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.4 100 98.7
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.7 100 99.1
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.4 100 98.7
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.2 100 98.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.6 100 97.9
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.5 100 99.6
E-10-1-2-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 97.9 100 98.1
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.7 100 98.6
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.7 100 98.9
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 97.8 100 98.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.9 100 99.7
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.9 100 99.1
E-10-1-2-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 99.2 100 97.2
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.4 100 98.6
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.1 100 99.2
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.3 100 99.0
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.7 100 97.8
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.7 100 99.2
E-10-1-2-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 99.2 100 98.9
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.2 100 99.2
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.3 100 99.4
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.1 100 98.4
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.6 100 98.7
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 99.2 100 99.2
E-10-2-1-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.7 100 98.6
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.7 100 99.0
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.1 100 98.7
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.0 100 98.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.5 100 98.9
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 99.4 100 99.3
E-10-2-1-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.7 100 98.6
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 97.4 100 98.6
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.1 100 98.8
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.8 100 98.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.9 100 98.6
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 99.2 100 98.8
E-10-2-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.6 100 98.5
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 99.2 100 98.7
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.4 100 98.6
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.7 100 98.8
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 99.1 100 98.8
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.8 100 99.1
E-10-2-2-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.5 100 98.4
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.8 100 98.6
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.1 100 98.6
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.3 100 98.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.8 100 98.9
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.2 100 98.5
E-10-2-2-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.4 100 98.5
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.7 100 98.9
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.7 100 99.1
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.4 100 98.5
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.4 100 98.6
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.8 100 98.7
E-10-2-2-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 99.0 100 98.9
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 99.2 100 98.7
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.1 100 98.8
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.7 100 98.8
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.7 100 98.4
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.7 100 98.5
E-10-3-1-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.7 100 98.5
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.6 100 98.7
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.5 100 98.7
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.2 100 98.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.7 100 98.4
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.2 100 98.7
E-10-3-1-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.5 100 98.4
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.5 100 98.7
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.9 100 98.4
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.7 100 98.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.5 100 98.3
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.7 100 98.9
E-10-3-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.1 100 98.4
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.2 100 97.2
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 99.1 100 98.9
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.6 100 98.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.5 100 98.4
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.7 100 98.5
E-10-3-2-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.5 100 98.9
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.8 100 99.0
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.8 100 98.4
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 99.1 100 99.0
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.7 100 98.8
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.7 100 99.1
E-10-3-2-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 99.1 100 98.6
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.7 100 99.1
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.8 100 98.2
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.7 100 98.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.7 100 98.5
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.7 100 98.4
E-10-3-2-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.8 100 98.4
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 98.6 100 98.5
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 98.6 100 98.4
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 98.5 100 98.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 98.6 100 98.5
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 98.7 100 98.6
C-10-1-1-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 94.7 100 95.2
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.6 100 97.9
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.8 100 97.3
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.5 100 94.5
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 97.2 100 96.5
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.2 100 96.5
C-10-1-1-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 94.7 100 95.5
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.2 100 96.4
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 95.6 100 95.2
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 97.5 100 96.4
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 95.8 100 96.2
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 96.5 100 94.7
C-10-1-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 96.5 100 95.8
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 96.2 100 96.5
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 94.8 100 94.5
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 95.5 100 96.2
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 95.4 100 94.8
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 96.4 100 95.7
C-10-1-2-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.7 100 96.5
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 94.8 100 95.4
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.8 100 94.2
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 95.7 100 94.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 97.8 100 96.8
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 97.2 100 96.2
C-10-1-2-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 94.7 100 94.8
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.4 100 94.7
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.4 100 94.5
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.5 100 95.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.5 100 95.4
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 96.4 100 95.5
C-10-1-2-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.5 100 96.7
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 96.4 100 97.5
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.5 100 94.6
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 95.4 100 96.2
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.5 100 94.3
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.4 100 96.7
C-10-2-1-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.5 100 94.4
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.6 100 96.2
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.4 100 95.4
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.2 100 95.6
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 94.6 100 96.2
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.6 100 94.9
C-10-2-1-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.4 100 96.5
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 97.1 100 95.2
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 95.5 100 94.8
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.8 100 95.8
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.8 100 95.4
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 94.6 100 95.5
C-10-2-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 94.8 100 95.4
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.7 100 96.4
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 95.6 100 96.5
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.2 100 97.1
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.4 100 95.6
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 94.8 100 95.7
C-10-2-2-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 98.5 100 98.4
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.9 100 94.7
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.1 100 95.7
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.5 100 94.3
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 95.7 100 95.8
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 96.5 100 94.7
C-10-2-2-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.7 100 94.2
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 94.6 100 95.2
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.2 100 94.8
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.2 100 95.4
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 95.5 100 94.7
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.2 100 96.5
C-10-2-2-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.3 100 94.7
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.4 100 94.6
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.4 100 95.2
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 95.6 100 94.7
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.3 100 97.3
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.2 100 94.6
C-10-3-1-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.4 100 94.9
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 96.5 100 94.6
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 95.6 100 95.9
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 94.5 100 95.4
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.3 100 97.1
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 94.3 100 95.4
C-10-3-1-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.4 100 95.5
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 94.6 100 94.2
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 95.4 100 96.7
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 94.5 100 96.4
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 95.6 100 94.9
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.5 100 94.6
C-10-3-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.4 100 96.1
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 96.3 100 98.4
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 95.4 100 94.7
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.4 100 95.5
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.4 100 97.2
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.5 100 94.5
C-10-3-2-1-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 96.2 100 94.8
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.7 100 95.4
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.7 100 94.5
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.7 100 95.8
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.4 100 94.5
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 96.5 100 94.8
C-10-3-2-2-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 99.1 100 98.6
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 96.8 100 95.4
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.2 100 94.5
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 96.5 100 94.5
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 96.5 100 95.6
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.4 100 95.6
C-10-3-2-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 100 95.7 100 94.7
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 100 95.4 100 94.5
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 100 96.7 100 95.3
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 100 95.5 100 96.5
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 100 94.7 100 95.9
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 100 95.4 100 95.8
위의 표에서 알 수 있듯이 사료에 포함된 박테리오파지는 물속에서도 최소 24시간까지는 안정적으로 그 함량을 유지하고 있음을 확인할 수 있었다. 이로부터 본 발명의 제조 방법으로 제조된 사료가 실제 수산 양식에 활용될 수 있음을 확인할 수 있었다. 한편, 결과는 제시하지 않았지만 오일 코팅을 실시하지 않은 박테리오파지 포함 사료는 물속에서 박테리오파지의 유실이 매우 심하였다.
실시예 4: 사료에 포함된 박테리오파지의 어체로의 전달 조사
실시예 2에서 제조한 사료를 급이할 때 사료 내에 포함된 박테리오파지가 어류의 체내로 전달되는지를 시험하였다. 본 시험에는 생후 4개월의 넙치 치어(체장: 6~9 cm) 20마리를 사용하였다. 넙치는 10마리씩 2개의 수조에 분리 사육하였다. 하나의 수조에는 실시예 2에서 제조한 사료 시료 E-10-3-1-3-①을 어체중의 5%에 해당하는 양으로 급이하였고, 또 다른 수조에는 실시예 2에서 제조한 사료 시료 C-10-3-1-3-①을 어체중의 5%에 해당하는 양으로 급이하였다. 수조의 주위환경은 통제하였고, 수조가 있는 실험실의 온도는 일정하게 유지시켰다. 사료 급이 후 30분경과 시점에 각 사료 급이군마다 3마리를 포획하고 이들을 2-phenoxyethanol로 마취시킨 후 창자를 채취하여 창자 내의 박테리오파지 농도를 다음의 방법으로 조사하였다.
15 ml 튜브에 1 ml의 EB 완충액을 첨가하고, 여기에 창자 조직 0.05 g을 첨가한 다음에 1분 정도 세포파쇄기(Homogenizer)를 사용하여 잘게 갈아 주었다. 이를 원심분리(5,000 rpm, 4℃, 5분)한 다음에 상층액을 회수하였다. 회수한 상층액을 0.45 μm 필터를 사용하여 여과를 실시해 주었다. 이렇게 하여 얻어진 시료 용액은 EB 완충액을 사용하여 십진희석 하였다. 십진희석한 희석액을 사용하여 통상의 top agar assay를 실시하여 창자 내의 박테리오파지 농도를 조사하였다. Top agar assay 방법은 다음과 같았다. 앞에서 준비한 각각의 창자 시료로부터 준비된 각각의 십진희석액 150 μl에 각각에 포함된 분석하고자 하는 박테리오파지의 적합숙주의 한밤 배양액 150 μl를 첨가한 다음에 잘 혼합해 주어 top agar assay 분석용 시료를 준비하였다. 본 실시예에 사용된 박테리오파지들의 적합 숙주 정보는 앞의 실시예 2에 제시한 것과 같다. 이렇게 준비한 top agar assay용 시료 중에 200 μl를 취하여 45℃로 유지된 연한천(Soft agar; Top agar) 4 ml에 첨가하였다. 첨가한 후 잘 섞어준 다음에 이를 TSA 평판배지에 즉시 부었다. 그리고는 상온에 20분 정도 방치하여 고체화시킨 다음에 37℃에서 한밤배양하였다. 한밤배양 후에 출현한 용균반의 수를 세어 창자 g 당의 박테리오파지 수를 산출하였다. 그 결과는 다음과 같았다. 다음의 결과는 3마리의 평균치이다.
창자 내 박테리오파지 농도(평균치)
급이한 사료 박테리오파지 창자 내 농도(pfu/g)
사료 시료 E-10-3-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 2.3× 102
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 9.7× 101
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 4.9× 102
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 1.7× 102
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 5.2× 102
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 6.3× 102
사료 시료 C-10-3-1-3-① 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-1 4.3× 102
비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-1 5.4× 102
스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Str-INP-1 2.2× 102
스트렙토코커스 파라우베리스 박테리오파지 Str-PAP-1 5.7× 102
에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 Edw-TAP-1 2.2× 102
에로모나스 살모니시다 박테리오파지 Aer-SAP-1 5.2× 102
이 결과로부터 본 발명의 방법에 따라 제조한 사료를 어류에 급이할 때 사료 내에 포함된 박테리오파지가 효율적으로 어류의 체내로 전달됨을 확인할 수 있었다.
실시예 5: 제조한 사료의 세균 감염 예방 효과
박테리오파지 첨가 목적이 세균성 질환의 예방 및 치료에 있기 때문에 실시예 2에서 제조한 사료 시료 E-5-3-1-3-①[비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-5를 포함한 사료]를 이용하여 세균 감염 예방 효과를 조사하였다. 본 실험에서는 시험대상 어류로 농어(Sea bass)를 사용하였다. 농어 치어(체중: 5~7 g, 체장: 8~10 cm) 20마리를 한 그룹을 10마리로 하여 총 두 그룹으로 나눈 후 수조에서 분리 사육하면서 14일간 실험을 실시하였다. 수조의 주위환경은 통제하였고, 수조가 있는 실험실의 온도는 일정하게 유지시켰다. 실험 개시일로부터 시험 전체 기간 동안에 걸쳐 실험군(본 발명에 따라 제조한 박테리오파지 포함 사료 투여)의 농어들에게는 실시예 2에서 제조한 사료 시료 E-5-3-1-3-①을 통상적인 사료 급이 방식에 따라 급이하였다. 반면에 대조군(일반 사료 투여)의 농어들에게는 박테리오파지가 포함되지 않은 동일 조성의 사료를 동일한 방식으로 급이하였다. 시험개시일로부터 7일째가 되는 날부터 2일간 1× 108 cfu/g 수준으로 비브리오 파라헤몰리티쿠스 균을 급이하는 사료에 포함시켜 하루 2회씩 급이하여 비브리오 파라헤몰리티쿠스 균 감염을 유도하였다. 시험 개시일로부터 9일째가 되는 날(비브리오 파라헤몰리티쿠스 균 감염 유도 후 2일째)부터는 매일 모든 시험동물들을 대상으로 비브리오병 발생 상태를 조사하였다. 비브리오병 발생 상태 조사는 체색 흑화지수를 측정하는 방식으로 실시하였다. 체색 흑화지수 측정은 통상 사용되는 Dark Coloration(DC) score(정상: 0, 연한 흑화: 1, 진한 흑화: 2)를 측정하는 방식으로 실시하였다. 그 결과는 다음의 표와 같았다.
예방 효과: 체색 흑화지수 측정 결과(평균치)
DC score(mean)
날짜 D9 D10 D11 D12 D13 D14
대조군(일반 사료 투여) 0.9 1.2 1.4 1.7 1.3 1.5
실험군(본 발명에 따라 제조한 박테리오파지 포함 사료 투여) 0.3 0.1 0 0 0 0
이 결과로부터 본 발명의 사료가 세균의 감염 예방에 매우 효과적이라는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 6: 제조한 사료의 세균 감염 질환 치료 효과
박테리오파지 첨가 목적이 세균성 질환의 치료도 있기 때문에 실시예 2에서 제조한 사료 시료 E-2-3-2-3-②[락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-2를 포함한 사료]를 이용하여 세균 감염 질환에 대한 치료 효과를 조사하였다. 생후 4개월의 넙치 치어(체장: 6~9 cm) 40마리를 한 그룹 당 20마리씩으로 하여 총 두 그룹으로 나눈 후 수조에서 분리 사육하면서 14일간 실험을 실시하였다. 수조의 주위환경은 통제하였고, 수조가 있는 실험실의 온도는 일정하게 유지시켰다. 실험 개시일로부터 5일째 되는 날부터 3일간 1× 108 cfu/g 수준으로 락토코커스 가르비에 균을 포함하고 있는 사료를 하루 2회씩 통상적인 사료 급이 방식으로 급이하였다. 락토코커스 가르비에 균을 포함하고 있는 사료 급이 마지막 날부터 연쇄구균증의 임상증상을 보이는 개체가 두 수조 모두에서 확인되었다. 3일간의 락토코커스 가르비에 균을 포함하고 있는 사료 급이 시행 다음날(시험 개시일로부터 8일째가 되는 날)부터 실험군(본 발명에 따라 제조한 박테리오파지 포함 사료 투여)의 넙치들에게는 실시예 2에서 제조한 사료 시료 E-2-3-2-3-②를 통상적인 사료 급이 방식에 따라 급이하였다. 반면에 대조군(일반 사료 투여)의 넙치들에게는 박테리오파지가 포함되지 않은 동일 조성의 사료를 동일한 방식으로 급이하였다. 시험 개시일로부터 8일째가 되는 날부터는 매일 모든 시험동물들을 대상으로 연쇄구균증 발생 상태를 조사하였다. 연쇄구균증 발생 상태 조사는 체색 흑화지수를 측정하는 방식으로 실시하였다. 체색 흑화지수 측정은 통상 사용되는 Dark Coloration(DC) score(정상: 0, 연한 흑화: 1, 진한 흑화: 2)를 측정하는 방식으로 실시하였다. 그 결과는 다음의 표와 같았다.
치료 효과: 체색 흑화지수 측정 결과(평균치)
DC score(mean)
날짜 D8 D9 D10 D11 D12 D13 D14
대조군(일반 사료 투여) 0.75 1.40 1.55 1.65 1.40 1.10 0.95
실험군(본 발명에 따라 제조한 박테리오파지 포함 사료 투여) 0.80 0.45 0.25 0.15 0.05 0 0
이 결과로부터 본 발명의 사료가 세균 감염 질환의 치료에도 매우 효과적이라는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 7: 본 발명에 따라 제조한 사료의 사양 개선 효과
실시예 2에서 제조한 사료 시료 E-10-3-1-3-①을 이용하여 무지개 송어 사육 시의 사양 결과 개선 여부에 대하여 조사해 보았다. 특히 본 조사는 폐사율 관점에서 실시되었다. 총 50 마리의 무지개 송어를 25 마리씩 한 그룹으로 총 2개 그룹으로 나누어 4주간 시험을 실시하였다. 하나의 그룹에는 실시예 2에서 제조한 사료 시료 E-10-3-1-3-①을 급이하였고 다른 하나의 그룹은 박테리오파지가 포함되지 않은 동일 조성의 사료를 통상적인 사료 급이 방식을 따라 급이하였다. 본 시험에 대상이 된 무지개 송어는 5주령의 무지개 송어 치어였으며, 각 시험 그룹의 무지개 송어는 일정 간격을 두고 위치한 격리된 각각의 수조에서 사육되었다. 시험 결과가 다음의 표에 제시되어 있다.
무지개 송어 사양 시험에서의 폐사율
그룹 폐사개체수/시험개체수 폐사율(%)
대조군(일반 사료 투여) 9/25 36.0
실험군(본 발명에 따라 제조한 박테리오파지 포함 사료 투여) 1/25 4.0
이상의 결과로 본 발명에 따라 제조된 사료의 급이가 무지개 송어 사육에서의 폐사율 감소에 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 이로부터 본 발명에 따라 제조된 사료의 급이가 무지개 송어의 사양 결과 개선에 효과적이라는 결론을 내릴 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (37)

  1. 사료의 내부 틈 및 표면에 박테리오파지가 부착되고, 그 위에 오일 피막을 가지는 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  2. 제1항에 있어서, 상기 사료는 미리 성형되어 제조된 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  3. 제1항에 있어서, 상기 박테리오파지는 미오비리대(Myoviridae), 시포비리대(Siphoviridae), 포도비리대(Podoviridae), 리포뜨릭스비리대(Lipothrixviridae), 루디비리대(Rudiviridae), 앰풀라비리대(Ampullaviridae), 비카우다비리대(Bicaudaviridae), 클라바비리대(Clavaviridae), 코티코비리대(Corticoviridae), 시스토비리대(Cystoviridae), 푸셀로비리대(Fuselloviridae), 글로불로비리대(Globuloviridae), 구타비루스(Guttavirus), 이노비리대(Inoviridae), 레비비리대(Leviviridae), 미크로비리대(Microviridae), 플라스마비리대(Plasmaviridae) 및 텍티비리대(Tectiviridae) 과(Family)에 속하는 박테리오파지들 중 하나 또는 그 이상의 박테리오파지를 함유하고 있는 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  4. 제3항에 있어서, 상기 박테리오파지는 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-1(수탁번호: KCTC 12686BP), 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-2(수탁번호: KCTC 12815BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-1(수탁번호: KCTC 12817BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-2(수탁번호: KCTC 12910BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-5(수탁번호: KCTC 13029BP), 스트렙토코커스 이니에(Streptococcus iniae) 박테리오파지 Str-INP-1(수탁번호: KCTC 12687BP), 스트렙토코커스 파라우베리스(Streptococcus parauberis) 박테리오파지 Str-PAP-1(수탁번호: KCTC 12568BP), 에드와드시엘라 타르다(Edwardsiella tarda) 박테리오파지 Edw-TAP-1(수탁번호: KCTC 12740BP), 에로모나스 살모니시다(Aeromonas salmonicida) 박테리오파지 Aer-SAP-1(수탁번호: KCTC 12814BP) 중 하나 또는 그 이상의 박테리오파지를 함유하고 있는 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  5. 제1항에 있어서, 상기 오일이 식물성 오일 또는 동물성 오일인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  6. 제5항에 있어서, 상기 동물성 오일이 어유(Fish oil)인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  7. 제6항에 있어서, 상기 어유는 어체유, 간유, 해수유인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  8. 제6항에 있어서, 상기 어유는 불포화 지방산이 높은 어류인 청어, 연어, 대구, 고등어, 정어리, 상어, 다랑어, 오징어에서 추출되어 제조된 것인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  9. 제6항에 있어서, 상기 어유는 제품 Alaska deep sea fish oil omega 3, 제품 Cod liver oil, 제품 Crab and shrimp attractant oil인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료.
  10. 1) 양어용 사료에 박테리오파지 액상 용액을 투여하여 사료 내의 틈이나 사료 표면에 박테리오파지를 부착시키는 단계;
    2) 건조를 실시하는 단계;
    3) 오일 코팅을 통하여 사료에 오일 피막이 형성되게 하는 단계; 및
    4) 건조를 실시하는 단계를 포함하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  11. 제10항에 있어서, 상기 사료는 미리 성형되어 제조된 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  12. 제10항에 있어서, 상기 사료 내의 틈이나 사료 표면에 박테리오파지를 부착시키기 위하여 박테리오파지 액상 용액을 투여하는 방법이 흡착, 분무, 또는 진공분무인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  13. 제10항에 있어서, 상기 사료 내의 틈이나 사료 표면에 부착되는 박테리오파지는 미오비리대(Myoviridae), 시포비리대(Siphoviridae), 포도비리대(Podoviridae), 리포뜨릭스비리대(Lipothrixviridae), 루디비리대(Rudiviridae), 앰풀라비리대(Ampullaviridae), 비카우다비리대(Bicaudaviridae), 클라바비리대(Clavaviridae), 코티코비리대(Corticoviridae), 시스토비리대(Cystoviridae), 푸셀로비리대(Fuselloviridae), 글로불로비리대(Globuloviridae), 구타비루스(Guttavirus), 이노비리대(Inoviridae), 레비비리대(Leviviridae), 미크로비리대(Microviridae), 플라스마비리대(Plasmaviridae) 및 텍티비리대(Tectiviridae) 과(Family)에 속하는 박테리오파지들 중 하나 또는 그 이상인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 박테리오파지는 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-1(수탁번호: KCTC 12686BP), 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-2(수탁번호: KCTC 12815BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-1(수탁번호: KCTC 12817BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-2(수탁번호: KCTC 12910BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-5(수탁번호: KCTC 13029BP), 스트렙토코커스 이니에(Streptococcus iniae) 박테리오파지 Str-INP-1(수탁번호: KCTC 12687BP), 스트렙토코커스 파라우베리스(Streptococcus parauberis) 박테리오파지 Str-PAP-1(수탁번호: KCTC 12568BP), 에드와드시엘라 타르다(Edwardsiella tarda) 박테리오파지 Edw-TAP-1(수탁번호: KCTC 12740BP), 에로모나스 살모니시다(Aeromonas salmonicida) 박테리오파지 Aer-SAP-1(수탁번호: KCTC 12814BP) 중 하나 또는 그 이상인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  15. 제10항에 있어서, 상기 오일이 식물성 오일 또는 동물성 오일인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 동물성 오일이 어유(Fish oil)인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 어유는 어체유, 간유, 해수유인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  18. 제16항에 있어서, 상기 어유는 불포화 지방산이 높은 어류인 청어, 연어, 대구, 고등어, 정어리, 상어, 다랑어, 오징어에서 추출되어 제조된 것인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  19. 제16항에 있어서, 상기 어유는 제품 Alaska deep sea fish oil omega 3, 제품 Cod liver oil, 제품 Crab and shrimp attractant oil인 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료의 제조방법.
  20. 사료의 내부 틈 및 표면에 박테리오파지가 부착되고, 그 위에 오일 피막을 가지는 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료를 어류에 투여하는 단계를 포함하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  21. 제20항에 있어서, 상기 사료는 미리 성형되어 제조된 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  22. 제20항에 있어서, 상기 박테리오파지는 미오비리대(Myoviridae), 시포비리대(Siphoviridae), 포도비리대(Podoviridae), 리포뜨릭스비리대(Lipothrixviridae), 루디비리대(Rudiviridae), 앰풀라비리대(Ampullaviridae), 비카우다비리대(Bicaudaviridae), 클라바비리대(Clavaviridae), 코티코비리대(Corticoviridae), 시스토비리대(Cystoviridae), 푸셀로비리대(Fuselloviridae), 글로불로비리대(Globuloviridae), 구타비루스(Guttavirus), 이노비리대(Inoviridae), 레비비리대(Leviviridae), 미크로비리대(Microviridae), 플라스마비리대(Plasmaviridae) 및 텍티비리대(Tectiviridae) 과(Family)에 속하는 박테리오파지들 중 하나 또는 그 이상인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  23. 제22항에 있어서, 상기 박테리오파지는 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-1(수탁번호: KCTC 12686BP), 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-2(수탁번호: KCTC 12815BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-1(수탁번호: KCTC 12817BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-2(수탁번호: KCTC 12910BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-5(수탁번호: KCTC 13029BP), 스트렙토코커스 이니에(Streptococcus iniae) 박테리오파지 Str-INP-1(수탁번호: KCTC 12687BP), 스트렙토코커스 파라우베리스(Streptococcus parauberis) 박테리오파지 Str-PAP-1(수탁번호: KCTC 12568BP), 에드와드시엘라 타르다(Edwardsiella tarda) 박테리오파지 Edw-TAP-1(수탁번호: KCTC 12740BP), 에로모나스 살모니시다(Aeromonas salmonicida) 박테리오파지 Aer-SAP-1(수탁번호: KCTC 12814BP) 중 하나 또는 그 이상인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  24. 제20항에 있어서, 상기 오일이 식물성 오일 또는 동물성 오일인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  25. 제24항에 있어서, 상기 동물성 오일이 어유(Fish oil)인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  26. 제25항에 있어서, 상기 어유는 어체유, 간유, 해수유인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  27. 제25항에 있어서, 상기 어유는 불포화 지방산이 높은 어류인 청어, 연어, 대구, 고등어, 정어리, 상어, 다랑어, 오징어에서 추출되어 제조된 것인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  28. 제25항에 있어서, 상기 어유는 제품 Alaska deep sea fish oil omega 3, 제품 Cod liver oil, 제품 Crab and shrimp attractant oil인 것을 특징으로 하는, 어류의 세균성 질병을 예방 또는 치료하는 방법.
  29. 사료의 내부 틈 및 표면에 박테리오파지가 부착되고, 그 위에 오일 피막을 가지는 것을 특징으로 하는, 오일 피막을 가진 박테리오파지 함유 양어용 사료를 어류에 투여하는 단계를 포함하는, 어류 사양방법.
  30. 제29항에 있어서, 상기 사료는 미리 성형되어 제조된 양어용 펠릿형 사료 및 크럼블 사료인 것을 특징으로 하는, 어류 사양방법.
  31. 제29항에 있어서, 상기 박테리오파지는 미오비리대(Myoviridae), 시포비리대(Siphoviridae), 포도비리대(Podoviridae), 리포뜨릭스비리대(Lipothrixviridae), 루디비리대(Rudiviridae), 앰풀라비리대(Ampullaviridae), 비카우다비리대(Bicaudaviridae), 클라바비리대(Clavaviridae), 코티코비리대(Corticoviridae), 시스토비리대(Cystoviridae), 푸셀로비리대(Fuselloviridae), 글로불로비리대(Globuloviridae), 구타비루스(Guttavirus), 이노비리대(Inoviridae), 레비비리대(Leviviridae), 미크로비리대(Microviridae), 플라스마비리대(Plasmaviridae) 및 텍티비리대(Tectiviridae) 과(Family)에 속하는 박테리오파지들 중 하나 또는 그 이상인 것을 특징으로 하는, 어류 사양방법.
  32. 제31항에 있어서, 상기 박테리오파지는 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-1(수탁번호: KCTC 12686BP), 락토코커스 가르비에(Lactococcus garvieae) 박테리오파지 Lac-GAP-2(수탁번호: KCTC 12815BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-1(수탁번호: KCTC 12817BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-2(수탁번호: KCTC 12910BP), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 박테리오파지 Vib-PAP-5(수탁번호: KCTC 13029BP), 스트렙토코커스 이니에(Streptococcus iniae) 박테리오파지 Str-INP-1(수탁번호: KCTC 12687BP), 스트렙토코커스 파라우베리스(Streptococcus parauberis) 박테리오파지 Str-PAP-1(수탁번호: KCTC 12568BP), 에드와드시엘라 타르다(Edwardsiella tarda) 박테리오파지 Edw-TAP-1(수탁번호: KCTC 12740BP), 에로모나스 살모니시다(Aeromonas salmonicida) 박테리오파지 Aer-SAP-1(수탁번호: KCTC 12814BP) 중 하나 또는 그 이상인 것을 특징으로 하는, 어류 사양방법.
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  37. 제34항에 있어서, 상기 어유는 제품 Alaska deep sea fish oil omega 3, 제품 Cod liver oil, 제품 Crab and shrimp attractant oil인 것을 특징으로 하는, 어류 사양방법.
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