WO2017104850A1 - ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤 - Google Patents

ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤 Download PDF

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健吾 藤井
宮内 浩文
洋平 佐藤
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    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor

Definitions

  • the present technology relates to a growth-promoting and / or decrease-inhibiting agent used to promote or suppress the growth of Bifidobacterium (also referred to as “Bifidobacterium”) and / or lactic acid bacteria, and to promote and / or decrease the growth. It relates to a suppression method.
  • the present technology also relates to an oral composition containing a Bifidobacterium and / or lactic acid bacterium together with the growth promoting and / or decrease inhibitor.
  • Bifidobacterium is an intestinal resident bacteria of mammals (including humans) and is not pathogenic in itself, but rather antagonizes pathogenic enterobacteria in terms of lactic acid production and auxotrophy. It is known that these bacteria have an action of inhibiting the growth in the intestinal tract.
  • the intestinal flora (intestinal flora) in the infant's large intestine is dominated by Bifidobacterium, but the flora changes with age. Specifically, Bifidobacterium bacteria decrease from adolescence to middle age, and spoilage bacteria such as Clostridium bacteria and Escherichia coli increase markedly. As a result, the intestinal environment deteriorates and adversely affects the health of the host (person). For this reason, in order to maintain health for a long time as a person ages, it is extremely important to keep the intestinal flora in a state in which useful bacteria such as Bifidobacterium are always dominant.
  • lactic acid bacteria are usually contained in dairy products such as yogurt and fermented foods such as pickles, and when they are eaten by mammals (including humans), they enter the intestine and normal balance of enteric bacteria is normal. Or exert an intestinal regulating action.
  • dairy products such as yogurt and fermented foods such as pickles
  • enteric bacteria normally exerts an intestinal regulating action.
  • lactic acid bacteria have a function to suppress allergic diseases such as hay fever, atopic dermatitis, asthma, and can be expected to have an effect of suppressing the reduction of good cholesterol in blood and lowering the value of neutral fat. Is also shown.
  • growth promoters substances that promote the growth of Bifidobacterium and lactic acid bacteria (hereinafter simply referred to as “growth promoters”) have been sought, and many growth promoters have been developed and proposed. .
  • oligosaccharides such as fructooligosaccharide, galactooligosaccharide, xylo-oligosaccharide, isomaltoligosaccharide, and soybean oligosaccharide; N-acetylglucosamine, lactulose, Sugars such as raffinose, thendellose, cyclodextrin, and konjac mannan (Patent Documents 1 to 4, Non-Patent Documents 1 to 3); Soymilk and Soymilk Extract (Patent Documents 5 to 6); Tea Extract (Patent Documents) 7); calcium phosphate (patent document 8); bovine lactoferrin, bovine apolactophyrin, bovine lactophilin iron (patent document 9) and the like.
  • oligosaccharides such as fructooligosaccharide, galactooligosaccharide, xylo-oligosaccharide, isomaltoligosacc
  • JP 60-41449 A Japanese Patent Laid-Open No. 3-183454 JP-A-57-138385 Japanese Patent Laid-Open No. 10-175867 Japanese Patent Publication No. 45-9822 JP 59-179064 A Japanese Patent Laid-Open No. 1-191680 JP 2005-130804 A JP-A-8-38044
  • Bifidobacterium genus bacteria and lactic acid bacteria may be reduced when the growth is promoted or the number of bacteria remains unchanged depending on the environment in which they exist. Therefore, the present technology provides a technology that can promote growth in an environment where Bifidobacterium and lactic acid bacteria grow or have no change in the number of bacteria, and can suppress the decrease in a decreasing environment. Main purpose.
  • the present inventors coexisted cyanobacteria belonging to the genus Arthrospira or Spirulina with Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria. And found that Spirulina has the effect of promoting the growth of Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria.
  • an agent for promoting and / or reducing the growth of Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria comprising as an active ingredient Arthrospira cyanobacteria and / or Spirulina cyanobacteria.
  • the proliferation promoting and / or decrease suppressing agent according to the present technology may further contain at least one selected from the group consisting of proteins and carbohydrates.
  • milk protein and / or plant protein can be selected as the protein.
  • saccharide sugar, at least 1 sort (s) selected from the group which consists of a monosaccharide, a disaccharide, and an oligosaccharide can be selected.
  • An oral composition comprising at least one bacterium selected from the group consisting of Bifidobacterium and lactic acid bacteria is provided.
  • the oral composition according to the present technology may further contain at least one selected from the group consisting of proteins and carbohydrates.
  • milk protein and / or plant protein can be selected as the protein.
  • sugar at least 1 sort (s) selected from the group which consists of a monosaccharide, a disaccharide, and an oligosaccharide can be selected.
  • the oral composition can be used for improving gut microbiota, immune regulation, diarrhea, constipation, obesity, or prevention and / or treatment of inflammatory bowel disease.
  • At least one bacterium selected from the group consisting of Bifidobacterium and lactic acid bacteria, and Arthrospira cyanobacteria and / or Spirulina cyanobacteria coexist.
  • a method for promoting the growth and / or suppressing the decrease of Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria comprising the steps of:
  • at least one selected from the group consisting of proteins and carbohydrates can be allowed to coexist.
  • milk protein and / or plant protein can be selected as the protein.
  • sugar at least 1 sort (s) selected from the group which consists of a monosaccharide, a disaccharide, and an oligosaccharide can be selected.
  • the present technology it is possible to promote growth in an environment where Bifidobacterium bacteria and lactic acid bacteria grow or have no change in the number of bacteria, and to suppress the decrease in a decreasing environment.
  • the effect described here is not necessarily limited, and may be any effect described in the present technology.
  • Growth Promotion and / or Reduction Inhibitor Growth promotion and / or reduction inhibitors according to the present technology are Arthrospira cyanobacteria and / or Spirulina ( Spirulina) a preparation containing cyanobacteria as an active ingredient, and at least one bacterium selected from the group consisting of Bifidobacterium and lactic acid bacteria (hereinafter simply referred to as “Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria”) Alternatively, it has an effect of promoting the growth of “bifidobacterium / lactic acid bacterium”).
  • the growth promoter of the present technology may contain at least one selected from the group consisting of proteins and carbohydrates in addition to Arthrospira cyanobacteria and / or Spirulina cyanobacteria. Good.
  • the present technology will be described in detail.
  • Bifidobacterium spp. Bifidobacterium spp. Targeted by the present technology include, for example, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium longum, Bifidobacteria Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium animalis (Bifidobacterium animalis) and the like. These Bifidobacterium bacteria may be used alone or in any combination of two or more.
  • Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium infantis are preferable. Bifidobacterium longum and Bifidobacterium breve are more preferable.
  • Lactic acid bacteria Lactococcus lactis subsp. Cremoris (Lactococcus lactis subsp. Cremoris) (Lactococcus lactis subsp. Cremoris) Streptococcus salivarius subsp. Thermophilus (hereinafter also referred to as Streptococcus bacterium, Enterococcus bacterium); Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris (Leuconostock bacteria); Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus delbu Bulgaricus (Lactobacillus delbrueckii subsp.
  • Lactobacillus delbrueckii subsp. Lactis Lactobacillus delbrueckii subsp. Lactis
  • Lactobacillus gasseri Lactobacillus gasseri
  • Lactobacillus helcilactus L Talam Lactobacillus plantarum
  • Lactobacillus brevis Lactobacillus brevis
  • Lactobacillus casei subspices rhamnosus Lactobacillus casei subsp.
  • Lactobacillus paracasei Lactobacillus paracasei
  • Tetragenococcus halophilus above, Tetragenococcus spp.
  • Pediococcus pentosaseus above, Pegococcus pentosaseus Iokokkasu bacteria belonging to the genus
  • lactic acid bacteria may be used alone or in any combination of two or more.
  • Lactobacillus gasseri, Lactobacillus acidophilus, and Lactobacillus paracasei are preferable. More preferred is Lactobacillus gasseri.
  • Spirulina is a cyanobacteria belonging to the genus Arthrospira or Spirulina.
  • cyanobacteria include, for example, Arthrospira (Spirulina) platensis, Arthrospira (Spirulina) maxima, Spirulina subsalsa, Spirulina major (Spirulina major) ), Spirulina geitleri, Spirulina siamese, Spirulina princeps, Spirulina laxissima, Spirulina curta (Spirulina curta, Spirulina curta (Spirulina curta) Includes Spirulina Aldaria. These Spirulina may be used alone or in any combination of two or more.
  • Spirulina contains calcium (400-1200 mg: content in 100 g of spirulina, the same applies hereinafter), potassium (800-2000 mg), iron (50-150 mg), in addition to protein, chlorophyll, carotene, vitamin B group, and the like. It is known to contain a lot of minerals such as zinc (1-3 mg) and copper (0.3-0.6 mg) (for example, Ikuo Saiki “Ultimate Complete Food Spirulina”, Takanawa Publishing Co., Ltd., (December 20, 1996, pages 62-65).
  • the form of Spirulina blended in the growth promoting / decreasing inhibitor of the present technology is not particularly limited, and algal bodies cultured in a liquid medium (also referred to as “wet algal bodies”) or crushed algal bodies, for example, Further, a crushed product by ultrasonic waves, a crushed product crushed by a homogenizer or the like, or a dried alga body obtained by drying them may be used. Further, the dried alga body may be pulverized and prepared in a powder state. Preferably, it is in the form of a dry alga body, more preferably an algal body in a dry powder state.
  • the dried alga bodies of Spirulina can be prepared by drying Spirulina obtained by cultivating itself (see, for example, JP-A-2006-25668), but can also be obtained commercially. (For example, Spirulina Institute, Inc.)
  • a solvent extract such as spirulina algal or wet algal water, hot water, or an organic solvent may be used.
  • spirulina alga bodies or wet algal bodies are liquefied by crushing such alga bodies or a part thereof, preferably using a homogenizer, ultrasonic crushing, water, Extract with a solvent such as water or an organic solvent.
  • 1 to 500 parts by mass of the solvent is used to heat and reflux at a temperature below the boiling point of the solvent while stirring or shaking, or ultrasonically at room temperature.
  • the method of extracting is mentioned.
  • the extract can be separated from insolubles by an appropriate method such as filtration or centrifugation to obtain a crude extract.
  • organic solvent examples include alcohols such as methanol, ethanol and butanol; esters such as methyl acetate, ethyl acetate, propyl acetate and butyl acetate; ketones such as acetone and methyl isobutyl ketone; ethers such as diethyl ether and petroleum ether; Hydrocarbons such as hexane, cyclohexane, toluene, and benzene; halogenated hydrocarbons such as carbon tetrachloride, dichloromethane, and chloroform; heterocyclic compounds such as pyridine; glycols such as ethylene glycol; polyalcohols such as polyethylene glycol; nitriles such as acetonitrile Examples thereof include a solvent and a mixed solution of these solvents. These solvents may be anhydrous or may be in a water-containing state.
  • the growth promoting / decreasing agent of the present technology may be composed of 100% by mass of Spirulina, and may contain other components in addition to Spirulina as described above. For this reason, the content ratio of spirulina in the growth promoting / decreasing inhibitor of the present technology can be appropriately adjusted within a range of 0.01 to 100% by mass.
  • the growth promoting / decreasing inhibitor of the present technology is a ratio such that the final concentration of Spirulina is 0.0001 to 100% by mass, depending on the final form of a pharmaceutical, quasi-drug, food or drink, etc. described later. And preferably in a proportion of 0.1 to 100% by mass.
  • the amount taken per day is the growth promoting / decreasing amount of this technology.
  • the amount of spirulina contained in the inhibitor can be generally 10 mg to 20 g / day, preferably 30 mg to 10 g / day, more preferably 1 to 6 g / day.
  • the intake may be divided into two or more times a day.
  • a protein in addition to spirulina, a protein can be added to the growth promoting / decreasing inhibitor of the present technology. By blending the protein, the effect of promoting the growth and / or suppressing the decrease of Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria is further improved, as shown in the Examples described later.
  • proteins that can be used in the growth promoting / decrease suppressing agent of the present technology can be freely selected and used.
  • proteins derived from milk such as casein and whey protein and proteins derived from plants such as soybean protein can be mentioned.
  • casein that can be used include various commercially available caseins and caseinates. More specifically, lactate casein, sulfate casein, casein hydrochloride, sodium caseinate, potassium caseinate, calcium caseinate, magnesium caseinate, or any mixture thereof can be used.
  • purified by the conventional method from cow's milk, skim milk, whole fat milk powder, and skim milk powder can also be utilized.
  • whey protein As whey protein, whey (eg, whey powder, desalted whey powder, etc.) separated from commercially available products or from milk, skim milk, etc. by a known method, or separated and purified whey protein concentrate, whey protein isolated Or mixtures of these in any proportions. These proteins can be used in a purified form as a protein, but can also be used in the form of a raw material containing these proteins.
  • Raw materials containing milk-derived proteins include raw milk, milk, buffalo milk, goat milk, sheep milk, horse milk, concentrated milk, skim concentrated milk, skim milk powder, whey protein concentrate (WPC), and whey protein isolate.
  • WPI milk protein concentrate
  • MCI micellar casein isolate
  • MPI milk protein isolate
  • “Milk” in this technology includes raw milk, milk, special milk, and raw goat milk stipulated in the “Ministry of Health, Labor and Welfare Ordinance on Component Standards for Milk and Dairy Products” (hereinafter simply referred to as “Ministerial Ordinance for Milk”).
  • Ministerial Ordinance for Milk In addition to pasteurized goat milk, partially skimmed milk, skimmed milk and processed milk (mammalian mother's milk), soy milk, almond milk, and milk derived from plants such as coconut milk (milk) are included. These may be used alone or in combination with the growth promoter of the present technology, or two or more thereof may be combined arbitrarily.
  • breast milk and soy milk of the above mammals more preferably raw milk derived from cattle, cow milk, special cow milk, partially skimmed milk, skimmed milk and processed milk; and soy milk.
  • raw milk, milk, special milk, raw goat milk, pasteurized goat milk, partially skimmed milk, skimmed milk and processed milk is as defined by a ministerial ordinance such as milk.
  • the average composition of milk is 3.3% protein, 3.8% lipid, 4.8% carbohydrate, minerals (potassium, calcium, phosphate, magnesium, sodium, citrate, phosphorus, iron) Etc.) 0.37% by weight, vitamins (vitamins A, B1, B2, C and E) and water, about 67 kilocalories per 100 grams.
  • About 80% by mass of the protein contained in milk is casein (casein micelle).
  • the remaining 20% by mass is whey protein, which includes proteins such as ⁇ -lactoglobulin, ⁇ -lactoglobulin, immunoglobulin, serum albumin, and lactoferrin.
  • carbohydrate contained in milk examples include lactose (disaccharide), glucose, galactose (above, monosaccharide), and other oligosaccharides. Most carbohydrates are lactose and occupy 50 mass% of solid content of skim milk powder. Most of the remaining 50% by mass of skim milk powder (solid content) is protein.
  • raw materials containing plant-derived proteins include soy milk, almond milk, and coconut milk.
  • Soy milk is made by soaking soybeans in water and adding the water to the soup.
  • Almond milk is made by crushing almonds soaked in water with a mixer, adding water, and rinsing them with gauze.
  • Coconut milk is a sweet milky ingredient obtained from solid endosperm that is layered inside mature coconut seeds.
  • the product for example, dairy product etc.
  • which processed the raw material containing protein further can also be mix
  • the dairy product means an edible product obtained by artificially processing the aforementioned milk (preferably raw milk and soy milk).
  • dairy products prepared from raw milk include cream, butter, butter oil, cheese, concentrated whey, ice cream (ice cream, lacto ice, ice milk), concentrated milk, defatted concentrated milk, sugar-free milk, sugar-free Skim milk, sweetened milk, sweetened skim milk, whole milk powder, skim milk powder, cream powder, whey powder, buttermilk powder, sweetened powdered milk, adjusted powdered milk, fermented milk, lactic acid bacteria beverage (non-fat milk solid content 3% or more And dairy drinks).
  • the definition of each of these components shall be based on the ordinance of milk.
  • non-fat milk whey, concentrated whey, cottage cheese, non-fat concentrated milk, sugar-free skim milk, sweetened skim milk, non-fat concentrated milk, sugar-free skim milk, sweetened skim milk, non-fat dry milk, whey powder
  • Powdered milk whole powdered milk, skim milk powder, cream powder, whey powder, buttermilk powder, sweetened powdered milk, adjusted powdered milk
  • skim milk powder and whey powder are examples of milk powder.
  • the blending amount is not particularly limited, and can be freely set according to the amount of Spirulina or the purpose of use. In the present technology, it is particularly preferable to add 1 to 10000 parts by mass, and more preferably 50 to 300 parts by mass with respect to 100 parts by mass of Spirulina.
  • a sugar in addition to Spirulina, a sugar can be added to the growth promoting / decreasing inhibitor of the present technology.
  • a saccharide By adding a saccharide, the effect of promoting the growth and / or suppressing the decrease of Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria is further improved, as shown in the Examples described later.
  • one or two or more carbohydrates that can be used in the fields of medicine, food, etc. can be freely selected and used. it can.
  • monosaccharides such as glucose, fructose, galactose, rhamnose and fucose
  • disaccharides such as lactose, sucrose, maltose and trehalose
  • trisaccharides such as raffinose
  • lactulose fructooligosaccharides, galactooligosaccharides
  • examples thereof include oligosaccharides such as mannan oligosaccharide, isomaltoligosaccharide, and xylooligosaccharide; polysaccharides such as N-acetylglucosamine, dextrin and soybean oligosaccharide.
  • Lactulose is obtained by alkaline isomerization of lactose by a known method and can be obtained commercially, but can also be produced according to the method described in Japanese Patent Publication No. Sho 52-21063.
  • the amount of the saccharide is not particularly limited, and can be freely set according to the amount of Spirulina or the purpose of use.
  • 1 to 20000 parts by mass is preferably added to 100 parts by mass of Spirulina, more preferably 80 to 500 parts by mass.
  • the growth promoting / decreasing inhibitor of this technology is free of one or more other components that can be used in the fields of medicine, food, etc., as long as the effects of this technology are not impaired. Can be selected and used.
  • components include carriers and additives used to formulate spirulina.
  • components such as an excipient, a pH adjuster, a colorant, and a corrigent can be used.
  • the component which has the effect of prevention, improvement, and / or treatment of the well-known disease or symptom discovered in the future according to the objective suitably.
  • the preparation carrier various organic or inorganic carriers can be used depending on the dosage form.
  • the carrier in the case of a solid preparation include excipients, binders, disintegrants, lubricants, stabilizers, and flavoring agents.
  • excipient examples include sugar derivatives such as lactose, sucrose, glucose, mannitol and sorbit; starch derivatives such as corn starch, potato starch, ⁇ -starch, dextrin and carboxymethyl starch; crystalline cellulose and hydroxypropylcellulose Cellulose derivatives such as hydroxypropylmethylcellulose, carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose calcium; gum arabic; dextran; pullulan; silicate derivatives such as light anhydrous silicic acid, synthetic aluminum silicate, magnesium magnesium magnesium silicate; phosphate derivatives such as calcium phosphate; Examples thereof include carbonate derivatives such as calcium carbonate; sulfate derivatives such as calcium sulfate.
  • sugar derivatives such as lactose, sucrose, glucose, mannitol and sorbit
  • starch derivatives such as corn starch, potato starch, ⁇ -starch, dextrin and carboxymethyl starch
  • crystalline cellulose and hydroxypropylcellulose Cellulose derivatives such
  • binder examples include gelatin, polyvinyl pyrrolidone, macrogol and the like in addition to the excipients described above.
  • disintegrant examples include, in addition to the above excipients, chemically modified starch or cellulose derivatives such as croscarmellose sodium, carboxymethyl starch sodium, and crosslinked polyvinylpyrrolidone.
  • lubricant examples include talc; stearic acid; stearic acid metal salts such as calcium stearate and magnesium stearate; colloidal silica; waxes such as pea gum and gallow; boric acid; glycol; carboxyl such as fumaric acid and adipic acid Acids; sodium carboxylic acid salts such as sodium benzoate; sulfates such as sodium sulfate; leucine; lauryl sulfates such as sodium lauryl sulfate and magnesium lauryl sulfate; silicic acids such as anhydrous silicic acid and silicic acid hydrate; starch derivatives, etc. Can be mentioned.
  • the stabilizer examples include paraoxybenzoates such as methylparaben and propylparaben; alcohols such as chlorobutanol, benzyl alcohol and phenylethyl alcohol; benzalkonium chloride; acetic anhydride; sorbic acid and the like.
  • flavoring agent examples include sweeteners, acidulants, and fragrances.
  • a carrier used in the case of a liquid for oral administration a solvent such as water, a flavoring agent and the like can be mentioned.
  • the growth promoting / decreasing inhibitor of the present technology exclusively promotes the growth of Bifidobacterium / lactic acid bacteria, suppresses the decrease, increases the number of bacteria, or the bacteria. It is used for the purpose of improving the survivability.
  • proliferation promotion means acting on a Bifidobacterium / lactic acid bacterium (live bacteria) in a viable environment to promote its growth.
  • decrease suppression means that in an environment where survival or growth (proliferation) is suppressed, the Bifidobacterium / lactic acid bacterium is promoted to proliferate to kill ( It means that the decrease in the number of viable cells due to (inactivation) can be suppressed, and the number of cells remaining in the living state (viable cell count) can be maintained or increased (improved survival rate).
  • the number of viable bacteria of the genus Bifidobacterium / lactic acid can be determined based on a standard method.
  • the method for measuring the number of viable bacteria include a colony counting method using a TOS propionic acid agar medium (Yakult Pharmaceutical Co., Ltd.) as a method for measuring Bifidobacterium.
  • An example of a method for measuring lactic acid bacteria is a colony counting method using a BCP-added plate count agar medium “Eiken” (Eiken Chemical Co., Ltd.).
  • the growth-promoting / decrease-inhibiting agent of the present technology promotes the growth of Bifidobacterium / lactic acid bacteria or suppresses the decrease, thereby improving the gut microbiota, immune regulation, diarrhea, constipation, obesity, Or since it is useful for prevention and / or treatment of inflammatory bowel disease, it can be used in the form of pharmaceuticals or quasi-drugs, foods and drinks, and feeds based on these uses.
  • the pharmaceutical product When blended with a pharmaceutical product, the pharmaceutical product can be appropriately formulated into a desired dosage form according to an administration method such as oral administration or parenteral administration.
  • the dosage form is not particularly limited, but for oral administration, for example, solid preparations such as powders, granules, tablets, troches and capsules; liquid preparations such as solutions, syrups, suspensions and emulsions.
  • parenteral administration it can be formulated into, for example, suppositories, sprays, inhalants, ointments, patches, injections and the like.
  • the formulation can be appropriately performed by a known method depending on the dosage form.
  • the growth promoting / decreasing inhibitor according to the present technology utilizes the excellent growth promoting / decreasing inhibitory effect of Bifidobacterium / lactic acid bacteria, It can be used as an active ingredient in functional foods, foods for the sick, enteral nutrition foods, special purpose foods, functional health foods, foods for specified health use, functional indication foods, functional nutrition foods, etc. .
  • the growth promoting / decreasing inhibitor according to the present technology can be prepared by adding to a known food or drink, or can be mixed in a raw material for food or drink to produce a new food or drink.
  • the food and drink may be in the form of liquid, paste, solid, powder, etc., in addition to tablet confectionery, liquid food, etc., for example, flour products, instant foods, processed agricultural products, processed fishery products, processed livestock products, milk -Dairy products, fats and oils, basic seasonings, compound seasonings / foods, frozen foods, confectionery, beverages, commercial products other than these.
  • Examples of the flour product include bread, macaroni, spaghetti, noodles, cake mix, fried flour, bread crumbs and the like.
  • Examples of the instant foods include instant noodles, cup noodles, retort / cooked food, cooking canned food, microwave food, instant soup / stew, instant miso soup / soup, canned soup, freeze-dried food, other instant foods, etc.
  • Examples of the processed agricultural products include canned agricultural products, canned fruits, jams and marmalades, pickles, boiled beans, dried agricultural products, and cereals (cereal processed products).
  • Examples of the processed fishery products include canned fishery products, fish hams and sausages, fishery paste products, fishery delicacies, and tsukudani.
  • Examples of the processed livestock products include canned livestock products / pastes, livestock meat hams / sausages, and the like.
  • milk / dairy products include processed milk, milk beverages, yogurts, lactic acid bacteria beverages, cheese, ice creams, prepared milk powders, creams, and other dairy products.
  • Examples of the fats and oils include butter, margarines, and vegetable oils.
  • Examples of the basic seasonings include soy sauce, miso, sauces, tomato processed seasonings, mirins, vinegars, etc.
  • the mixed seasonings and foods include cooking mixes, curry ingredients, and sauces , Dressings, noodle soups, spices, and other complex seasonings.
  • raw material frozen food, semi-cooked frozen food, cooked frozen food, etc. are mentioned, for example.
  • confectionery examples include caramel, candy, chewing gum, chocolate, cookies, biscuits, cakes, pie, snacks, crackers, Japanese confectionery, rice confectionery, bean confectionery, dessert confectionery, and other confectionery.
  • beverage examples include carbonated beverages, natural fruit juices, fruit juice beverages, soft drinks with fruit juice, fruit beverages, fruit beverages with fruit granules, vegetable beverages, soy milk, soy milk beverages, coffee beverages, tea beverages, powdered beverages, and concentrated beverages.
  • commercially available foods other than the above include baby foods, sprinkles, and tea paste.
  • the food and drink defined in the present disclosure can be provided and sold as a food and drink displaying specific uses (particularly health uses) and functions.
  • the “display” act includes all acts for informing the consumer of the use, and if the expression can remind the user of the use, the purpose of the display, the content of the display, the display Regardless of the target object / medium, etc., all fall under the “display” act of this disclosure.
  • the “display” is performed by an expression that allows the consumer to directly recognize the use. Specifically, it is the act of transferring, displaying, importing, displaying, or importing products that are related to food or drinks or products that describe the use, on advertisements, price lists, or transaction documents. For example, an act of describing and displaying the above uses or distributing them, or describing the above uses in information including the contents and providing them by an electromagnetic (Internet or the like) method can be given.
  • the display content is preferably a display approved by the government or the like (for example, a display that is approved based on various systems determined by the government and is performed in a mode based on such approval).
  • “Indications” include health foods, functional foods, foods for the sick, enteral nutritional foods, special purpose foods, health functional foods, foods for specified health use, functional labeling foods, nutritional functional foods, and pharmaceutical departments.
  • the display as a foreign article etc. is also mentioned.
  • indications approved by the Consumer Affairs Agency for example, indications approved by food systems for specific health use, functional indication food systems, systems similar to these, and the like. More specifically, indication as food for specified health use, indication as conditional health food, indication as functional indication food, indication to affect body structure and function, indication of reduced disease risk, etc. Can be mentioned.
  • a typical example of this is the indication of food for specified health use (particularly indication of health use) as stipulated in the Enforcement Regulations of the Health Promotion Act (Ministry of Health, Labor and Welfare Ordinance No. 86 of April 30, 2003) These are the functions stipulated in the Food Labeling Act (Act No. 70 of 2013), the labeling as a labeling food and the like.
  • the growth promoting / decreasing inhibitor according to the present technology uses the excellent growth promoting / decreasing inhibitory effect of Bifidobacterium / lactic acid bacteria as an active ingredient of animal feed, It can be used.
  • the growth promoting / decreasing inhibitor according to the present technology can be prepared by adding to a known feed, or can be mixed in the feed raw material to produce a new feed.
  • Examples of the raw material of the feed include cereals such as corn, wheat, barley, and rye; bran such as bran, wheat straw, rice bran, and defatted rice bran; Animal feeds such as whey, fish meal and bone meal; yeasts such as beer yeast; mineral feeds such as calcium phosphate and calcium carbonate; fats and oils; amino acids;
  • examples of the form of the feed include pet animal feed (pet food, etc.), livestock feed, fish feed, and the like.
  • the oral composition according to the present technology is a composition comprising at least Spirulina and at least one bacterium selected from the group consisting of Bifidobacterium and lactic acid bacteria. Moreover, at least 1 sort (s) selected from the group which consists of protein and carbohydrate can be contained as needed.
  • the oral composition can be used for the prevention and / or treatment of intestinal microbiota improvement, immune regulation, diarrhea, constipation, obesity, inflammatory bowel disease and the like.
  • the content of Bifidobacterium / lactic acid bacteria in the oral composition is not particularly limited, and can be freely set according to the purpose of use.
  • 1 g of oral composition contains Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria (total amount when both are included), usually 1 ⁇ 10 4 cfu / g or more, preferably 1 ⁇ 10 6 to 1 It can be contained in a range of ⁇ 10 12 cfu / g.
  • Bifidobacterium / lactic acid bacterium, spirulina, protein, saccharide, and other components are the same as those described above for the growth promoting and / or decreasing inhibitor, and thus the description thereof is omitted here.
  • Bifidobacterium / lactic acid bacteria growth promotion and / or reduction suppression method Bifidobacterium bacteria / lactic acid bacteria growth promotion and / or reduction suppression method (hereinafter simply referred to as “proliferation promotion / reduction suppression method”) of the present technology Is a method having a step of allowing Spirulina to coexist with at least one bacterium selected from the group consisting of Bifidobacterium and lactic acid bacteria. Moreover, at least 1 sort (s) selected from the group which consists of protein and carbohydrate can also coexist as needed.
  • Bifidobacterium / lactic acid bacterium, spirulina, protein, saccharide, and other components are the same as the growth-promoting and / or decrease-inhibiting agent and oral composition described above, so the explanation is omitted here. To do.
  • Example described below shows an example of a typical example of the present technology, and the scope of the present technology is not interpreted narrowly.
  • Bifidobacterium longum Bifidobacterium longum
  • Bifidobacterium breve Bifidobacterium breve
  • FERM BP-11175 Bifidobacterium breve FERM BP-11175
  • NITE National Institute of Technology and Evaluation
  • spirulina spirulina powder obtained from Spirulina Laboratories Co., Ltd. was used (hereinafter the same).
  • each experimental material (1-1) Preparation of Bifidobacterium genus dry powder Various Bifidobacterium genus bacteria were inoculated into a medium containing protein, amino acid and sugar source, and the temperature was 32-41 ° C. After culturing for 5 to 24 hours, cells (wet cells) were collected from the culture solution by centrifugation.
  • Bifidobacterium bacteria powder dry powders of various Bifidobacterium bacteria (hereinafter referred to as “Bifidobacterium bacteria powder”).
  • Example 2 In Experimental Example 2, the effect of Spirulina on the growth of lactic acid bacteria was examined.
  • Lactobacillus gasseri Lactobacillus gasseri
  • Lactobacillus gazeri a fungus that has been deposited with the National Institute of Technology and Evaluation Technology under the deposit number “NITE BP-01669” and can be obtained commercially (the same shall apply hereinafter) ).
  • each experimental material (1-1) Preparation of dry powder of lactic acid bacteria After inoculating lactic acid bacteria in a medium containing protein, amino acid, and sugar source and culturing at 32 to 41 ° C. for 5 to 24 hours, The cells (wet cells) were collected from the culture solution by centrifugation. Freeze drying is performed for 18 to 96 hours using a freeze dryer (manufactured by Kyowa Vacuum Co., Ltd.), and the cell mass after the completion of freeze drying is physically pulverized to dry powder of lactic acid bacteria (hereinafter referred to as “lactic acid bacteria powder”). Got.
  • lactic acid bacteria were also cultivated in the presence of spirulina, as in the case of Experimental Example 1, and the effects of promoting the growth of bacteria and increasing the survival were found. In addition, the same effect was confirmed also after 8 hours after culture
  • Example 9 Spirulina powder 3 g and sugar (lactose or glucose) were dissolved in 100 mL of tap water to prepare a Spirulina solution having a sugar concentration of 5% by weight. This Spirulina solution was sterilized by autoclaving at 90 ° C. for 10 minutes.
  • Example 11 Spirulina powder 3 g and skim milk powder were dissolved in 100 mL of tap water to prepare a spirulina solution having a skim milk powder concentration of 10% by weight. This Spirulina solution was sterilized by autoclaving at 90 ° C. for 10 minutes.
  • an aqueous solution (Comparative Examples 7 and 8) having a protein concentration of 3% by weight in which protein (casein or whey protein) is dissolved in tap water and sugar (lactose or glucose), respectively.
  • lactose is the main carbohydrate constituting milk, so that the viability of the Bifidobacterium genus by the milk shown in Comparative Examples 2 and 4 of Experimental Example 1 is high. The increase is thought to be due to components other than fat and sugar contained in milk.
  • Example 12 From the comparison between Example 12 and Comparative Example 12, it was found that even when soymilk was used as a base, the survival of Bifidobacterium was increased by using Spirulina. Moreover, as shown in Comparative Example 13, the growth of Bifidobacterium bacteria is promoted by using lactose in the soymilk base, but by using spirulina in combination with this, as shown in Example 13 It was found that the growth of the bacteria was greatly promoted and the survival was significantly increased.
  • Example 18 As shown in Table 5, it was found that the effect of promoting the growth of Bifidobacterium increased in a spirulina concentration-dependent manner. In Example 18, it is considered that there was a growth peak between 8 and 16 hours after culturing.
  • Example 19 and 20 Spirulina powder 3 g and sugar (lactose) were dissolved in 100 mL of a phosphate buffer solution to prepare a Spirulina-phosphate buffer solution having a sugar concentration of 5% by weight. This spirulina-phosphate buffer solution was sterilized by autoclaving at 90 ° C. for 10 minutes.
  • this technique can also take the following structures.
  • the Arthrospira cyanobacteria and / or the Spirulina cyanobacteria are cultured in a liquid medium, algal bodies or wet algal bodies, crushed algal bodies, and dried products (crushed)
  • the growth promoting and / or reducing inhibitor according to (1) which is contained in one or more forms selected from a solvent extract of algal bodies or wet algal bodies.
  • the proliferation promoting and / or reducing inhibitor according to (1) or (2) further comprising at least one selected from the group consisting of proteins and carbohydrates.
  • Arthrospira cyanobacteria and / or Spirulina cyanobacteria An oral composition comprising at least one bacterium selected from the group consisting of Bifidobacterium and lactic acid bacteria.
  • the Arthrospira cyanobacteria and / or the Spirulina cyanobacteria are cultured in a liquid medium, algal bodies or wet algal bodies, crushed algal bodies, and dried products (crushed)
  • the oral composition according to (6) which is contained in one or more forms selected from algal bodies or solvent extracts of wet algal bodies.
  • the oral composition according to (6) or (7) further comprising at least one selected from the group consisting of proteins and carbohydrates.
  • the oral composition according to (8), wherein the protein is milk protein and / or plant protein.
  • Bifido having a step of coexisting at least one bacterium selected from the group consisting of Bifidobacterium and lactic acid bacteria, and Arthrospira cyanobacteria and / or Spirulina cyanobacteria A method for promoting growth and / or suppressing decrease of bacteria belonging to the genus Bacteria and / or lactic acid bacteria.
  • the Arthrospira cyanobacteria and / or the Spirulina cyanobacteria are cultured in a liquid medium, algal bodies or wet algal bodies, crushed algal bodies, and dried products (crushed)
  • (25) A method for promoting growth and / or suppressing decrease of Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria, comprising administering Arthrospira cyanobacteria and / or Spirulina cyanobacteria to an application subject.
  • (26) A method for promoting and / or suppressing the growth of Bifidobacterium and / or lactic acid bacteria, comprising administering the growth promoting and / or decreasing inhibitor according to (1) to an application target.
  • (27) The improvement method of an intestinal microflora using the method of (26).
  • (28) An immunomodulation method using the method of (25) or (26).
  • (29) A method for preventing and / or treating diarrhea, constipation, obesity, or inflammatory bowel disease using the method of (25) or (26).

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Abstract

属細菌や乳酸菌が増殖したり菌数に変化がない環境下においては増殖を促進させ、減少する環境下においては減少を抑制させ得る技術を提供すること。 アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類を有効成分とする、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤を提供する。また、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、ビフィドバクテリウム属細菌および乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、を含む経口組成物を提供する。更に、ビフィドバクテリウム属細菌及び乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、を共存させる工程を有する、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法を提供する。

Description

ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤
 本技術はビフィドバクテリウム属細菌(「ビフィズス菌」とも称する)および/または乳酸菌の増殖を促進または減少を抑制するために用いられる増殖促進および/または減少抑制剤、並びに増殖促進および/または減少抑制方法に関する。また本技術は、当該増殖促進および/または減少抑制剤とともにビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌を含有する経口組成物に関する。
 ビフィドバクテリウム属細菌は、哺乳類(ヒトを含む)の腸管内常在菌であり、それ自体に病原性はなく、むしろ乳酸産生や栄養要求性等の点から病原性腸内細菌に拮抗し、これらの菌の腸管内での増殖を阻害する作用があることが知られている。
 一般に、乳児の大腸内の腸内フローラ(腸内菌叢)はビフィドバクテリウム属細菌が優勢であるが、その菌叢は加齢とともに変動する。具体的には、青年期から壮年期にかけてビフィドバクテリウム属細菌は減少し、クロストリジウム属細菌や大腸菌などの腐敗菌が顕著に増加する。その結果、腸内環境は悪化し、宿主(人)の健康に悪影響がもたらされる。このため、人が年をとっても長く健康を維持するためには、腸内フローラをビフィドバクテリウム属細菌等の有用菌が常に優勢な状態に維持しておくことが極めて重要である。
 一方、乳酸菌は、通常、ヨーグルト等の乳製品や漬け物等の発酵食品に含まれており、これを哺乳類(ヒトを含む)が食することでその腸内に入り、腸内細菌のバランスを正常化したり、整腸作用を発揮する。また最近では、乳酸菌には、花粉症やアトピー性皮膚炎、ぜんそくなどのアレルギー疾患を抑える働きがあること、血中の善玉コレステロールの低下を抑え、中性脂肪の値を低下させる効果が期待できることも示されている。
 こうしたことから、従来よりビフィドバクテリウム属細菌や乳酸菌の増殖を促進する物質(以下、単に「増殖促進剤」とも称する)が求められており、数多くの増殖促進剤が開発され提案されている。
 現在、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進剤として知られているものとして、例えばフラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、及び大豆オリゴ糖などのオリゴ糖;N-アセチルグルコサミン、ラクチュロース、ラフィノース、セアンデロース、シクロデキストリン、及びコンニャクマンナン等の糖質(以上、特許文献1~4、非特許文献1~3);豆乳及び豆乳抽出物(特許文献5~6);茶抽出物(特許文献7);リン酸カルシウム(特許文献8);牛ラクトフェリン、牛アポラクトフィリン及び牛ラクトフィリン鉄(特許文献9)などを挙げることができる。
特開昭60-41449号公報 特開平3-183454号公報 特開昭57-138385号公報 特開平10-175867号公報 特公昭45-9822号公報 特開昭59-179064号公報 特開平1-191680号公報 特開2005-130804号公報 特開平8-38044号公報
「ビフィズス菌」、77頁、1979年、株式会社ヤクルト 「化学と生物」、21巻、291頁、1983年、学会出版センター 「理研腸内フローラシンポジウム、腸内フローラと栄養」、89頁、1983年、学会出版センター。
 前述の通り、従来から、ビフィドバクテリウム属細菌や乳酸菌の増殖を促進する物質の更なる開発が望まれている。ビフィドバクテリウム属細菌や乳酸菌は、その存在環境によって、増殖が促進される場合、菌数に変化がない場合、減少する場合がある。
 そこで、本技術では、ビフィドバクテリウム属細菌や乳酸菌が増殖したり菌数に変化がない環境下においては増殖を促進させ、減少する環境下においては減少を抑制させ得る技術を提供することを主目的とする。
 本発明者らは、前記課題を解決すべく、鋭意検討を重ねた結果、アルスロスピラ属(Arthrospira)あるいはスピルリナ属(Spirulina)に属する藍藻類をビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌と共存させることでその増殖が有意に促進され菌数が増加すること、つまりスピルリナにビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖を促進する作用があることを見出した。
 即ち、本技術では、まず、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類を有効成分とする、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤を提供する。
 本技術に係る増殖促進および/または減少抑制剤には、さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有させることもできる。
 この場合、上記タンパク質としては、乳タンパク質および/または植物タンパク質を選択することができる。
 また、上記糖質としては、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種を選択することができる。
 本技術では、次に、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、
 ビフィドバクテリウム属細菌および乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、を含む経口組成物を提供する。
 本技術に係る経口組成物には、さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有させることができる。
 この場合、上記タンパク質としては、乳タンパク質および/または植物タンパク質を選択することができる。
 また、上記糖質としては、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種を選択することができる。
 さらに、前記経口組成物は、腸内細菌叢の改善、免疫調節、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患の予防及び/又は治療に用いることができる。
 本技術では、更に、ビフィドバクテリウム属細菌及び乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、を共存させる工程を有する、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法を提供する。
 本技術に係る増殖促進および/または減少抑制方法では、さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を共存させることもできる。
 この場合、上記タンパクとしては、乳タンパク質および/または植物タンパク質を選択することができる。
 また、上記糖質としては、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種を選択することができる。
 本技術によれば、ビフィドバクテリウム属細菌や乳酸菌が増殖したり菌数に変化がない環境下においては増殖を促進させ、減少する環境下においては減少を抑制させることができる。なお、ここに記載された効果は、必ずしも限定されるものではなく、本技術中に記載されたいずれかの効果であってもよい。
 以下、本技術を実施するための好適な実施形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本開示の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。なお、本明細書において、数値範囲を「下限~上限」で表現するものに関しては、上限は「以下」であっても「未満」であってもよく、下限は「以上」であっても「超」であってもよい。
1.増殖促進および/または減少抑制剤
 本技術に係る増殖促進および/または減少抑制剤(以下、単に「増殖促進・減少抑制剤」とも称する)は、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類を有効成分とする製剤であって、ビフィドバクテリウム属細菌および乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌(以下、単に「ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌」または「ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌」と称する)の増殖を促進する作用効果を有することを特徴とする。また本技術の増殖促進剤は、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類に加えて、タンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有していてもよい。
 以下、本技術について詳細に説明する。
 (1)ビフィドバクテリウム属細菌
 本技術が対象とするビフィドバクテリウム属細菌としては、例えばビフィドバクテリウム・ラクティス(Bifidobacterium lactis)、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)、ビフィドバクテリウム・インファンティス(Bifidobacterium infantis)、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)、ビフィドバクテリウム・アニマリス(Bifidobacterium animalis)などが挙げられる。これらのビフィドバクテリウム属細菌は一種単独を対象にしてもよいし、また二種以上を任意に組み合わせて対象とすることもできる。制限はされないものの、好ましくは、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、およびビフィドバクテリウム・インファンティスを挙げることができる。より好ましくはビフィドバクテリウム・ロンガム、およびビフィドバクテリウム・ブレーベである。
 (2)乳酸菌
 本技術が対象とする乳酸菌としては、例えばラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラクティス(Lactococcus lactis subsp. lactis)、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・クレモリス(Lactococcus lactis subsp. cremoris)(以上、ラクトコッカス属細菌);ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラス(Streptococcus salivarius subsp. thermophilus)(以上、ストレプトコッカス属細菌、エンテロコッカス属細菌とも称する);リューコノストック・メセンテロイデス・サブスピーシーズ・クレモリス(Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris)(以上、リューコノストック属細菌);ラクトバシラス・アシドフィラス(Lactobacillus acidophilus)、ラクトバシラス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバシラス・デルブルギ・サブスピーシーズ・ブルガリカス(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus)、ラクトバシラス・デルブルギ・サブスピーシーズ・ラクティス(Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis)、ラクトバシラス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)、ラクトバシラス・ヘルベティカス(Lactobacillus helveticus)、ラクトバシラス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)、ラクトバシラス・ブレビス(Lactobacillus brevis)、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズラムノーサス(Lactobacillus casei subsp. rhamnosus)、ラクトバシラス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)(以上、ラクトバシラス属細菌);テトラジェノコッカス・ハロフィルス(Tetragenococcus halophilus)(以上、テトラジェノコッカス属細菌)、およびペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaseus)(以上、ペディオコッカス属細菌)などが挙げられる。これらの乳酸菌は一種単独を対象としてもよいし、また二種以上を任意に組み合わせて対象とすることもできる。制限はされないものの、好ましくはラクトバシラス・ガセリ、ラクトバシラス・アシドフィラス、およびラクトバシラス・パラカゼイを挙げることができる。より好ましくはラクトバシラス・ガセリである。
 (3)アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類(以下、「スピルリナ」とも称する)
 スピルリナ(Spirulina)は、アルスロスピラ属(Arthrospira)あるいはスピルリナ属(Spirulina)に属する藍藻類である。これらの藍藻類には、例えばアルスロスピラ(スピルリナ)・プラテンシス(Arthrospira(Spirulina) platensis)、アルスロスピラ(スピルリナ)・マキシマ(Arthrospira(Spirulina) maxima)、スピルリナ・サブサルサ(Spirulina subsalsa)、スピルリナ・メジャー(Spirulina major)、スピルリナ・ゲイトレリ(Spirulina geitleri)、スピルリナ・サイアミーゼ(Spirulina siamese)、スピルリナ・プリンセプス(Spirulina princeps)、スピルリナ・ラキシシマ(Spirulina laxissima)、スピルリナ・クルタ(Spirulina curta)、スピルリナ・スピルリノイデス(Spirulina spirulinoides)、スピルリナ・アルダリア等が含まれる。これらのスピルリナは一種単独で使用してもよいし、また二種以上を任意に組み合わせて使用することもできる。
 スピルリナは、蛋白質、クロロフィル、カロチン、およびビタミンB群等に加えて、カルシウム(400~1200mg:スピルリナ100g中の含有量、以下同様。)、カリウム(800~2000mg)、鉄(50~150mg)、亜鉛(1~3mg)、および銅(0.3~0.6mg)等のミネラルを多く含むことが知られている(例えば、済木育夫「究極の完全食品 スピルリナ」、株式会社高輪出版社、1996年12月20日、62-65頁参照)。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤に配合されるスピルリナの形態は特に問わず、液体培地中で培養した状態の藻体(「湿藻体」ともいう。)、または藻体の破砕物、例えば、超音波による破砕物や均質機等で破砕した破砕物であっても、また、それらを乾燥した乾燥藻体であってもよい。さらにその乾燥藻体は粉砕され粉末状態に調製されたものであってもよい。好ましくは乾燥藻体の形態であり、より好ましくは乾燥粉末状態の藻体である。なお、スピルリナの乾燥藻体は、自ら培養栽培して得られたスピルリナを乾燥して調製することもできるが(例えば、特開2006-25668号公報など参照)、商業的に入手することもできる(例えば、株式会社スピルリナ研究所など)。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤に配合されるスピルリナの他の形態としては、スピルリナの藻体または湿藻体の水、熱水、有機溶媒等の溶媒抽出物であってもよい。各種抽出物の抽出方法としてはスピルリナの藻体または湿藻体に対し、このような藻体又はその一部を、好ましくはホモジナイザー、超音波破砕等を用いて破砕して液状化し、水、熱水又は有機溶媒等の溶媒で抽出する。さらに好ましく、スピルリナの藻体または湿藻体1質量部に対し、前記溶媒1~500質量部を用いて、撹拌又は振盪しながら、溶媒の沸点以下の温度で加熱還流するか、常温で超音波抽出する方法が挙げられる。
 抽出液は、濾過又は遠心分離等の適当な方法により、不溶物を分離して粗抽出物を得ることができる。
 なお、前記有機溶媒としては、メタノール、エタノール、ブタノール等のアルコール;酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル等のエステル;アセトン、メチルイソブチルケトン等のケトン;ジエチルエーテル、石油エーテル等のエーテル;ヘキサン、シクロヘキサン、トルエン、ベンゼン等の炭化水素;四塩化炭素、ジクロロメタン、クロホルム等のハロゲン化炭化水素;ピリジン等の複素環化合物、エチレングリコール等のグリコール;ポリエチレングリコール等のポリアルコール;アセトニトリル等のニトリル溶媒、及びこれらの溶媒の混合液等が挙げられる。また、これらの溶媒は無水であってもよく、含水状態であってもよい。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤はスピルリナ100質量%からなるものであってもよいし、上記するように、スピルリナに加えて他の成分を含有することもできる。このため、本技術の増殖促進・減少抑制剤におけるスピルリナの含有割合は、0.01~100質量%の範囲で適宜調整することができる。
 また、本技術の増殖促進・減少抑制剤は、後述する医薬品または医薬部外品や飲食品等、その最終形態に応じて、スピルリナの最終濃度が0.0001~100質量%となるような割合で、好ましくは0.1~100質量%となるような割合で使用することができる。
 また、生体腸内のビフィドバクテリウム属細菌を増殖する目的で、本技術の増殖促進・減少抑制剤を経口的に摂取する場合、1日あたり摂取する量は、本技術の増殖促進・減少抑制剤に含まれるスピルリナの量に換算して、通常10mg~20g/日、好ましくは30mg~10g/日、より好ましくは1~6g/日を挙げることができる。なお、当該摂取量は1日2回以上に分けて服用してもよい。
 (4)タンパク質
 前述するように、本技術の増殖促進・減少抑制剤には、スピルリナに加えて、タンパク質を配合することができる。タンパク質を配合することにより、後述する実施例に示す通り、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制の効果がより優れたものとなる。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤に用いることができるタンパク質としては、医療、食品等の分野において用いることが可能なタンパク質を、1種又は2種以上、自由に選択して用いることができる。具体的には、例えば、カゼインやホエイタンパク質などの乳由来のタンパク質や大豆タンパク質などの植物由来のタンパク質が挙げられる。
 カゼインとしては、例えば、市販の各種カゼイン、カゼイネート等を利用することができる。より具体的には、乳酸カゼイン、硫酸カゼイン、塩酸カゼイン、ナトリウムカゼイネート、カリウムカゼイネート、カルシウムカゼイネート、マグネシウムカゼイネート又はこれらの任意の混合物等が挙げられる。また、牛乳、脱脂乳、全脂粉乳、脱脂粉乳から常法により精製したカゼイン等を利用することもできる。
 ホエイタンパク質としては、市販品又は牛乳、脱脂乳等から公知の方法により分離されたホエイ(例えば、ホエイ粉末、脱塩ホエイ粉末等)又は、分離精製した乳清蛋白質濃縮物、乳清蛋白質単離物、若しくはこれらの任意の割合の混合物を用いることができる。
 これらのタンパク質は、タンパク質として精製された形態で用いることもできるが、これらのタンパク質を含む原料の形態で用いることもできる。
 乳由来のタンパク質を含む原料としては、生乳、牛乳、水牛乳、やぎ乳、羊乳、馬乳、濃縮乳、脱脂濃縮乳、脱脂粉乳、乳清蛋白質濃縮物(WPC)、乳清蛋白質分離物(WPI)、乳蛋白質濃縮物(MPC)、ミセラカゼインアイソレート(MCI)、ミルクプロテインアイソレート(MPI)等が挙げられる。
 本技術でいう「乳」には「乳および乳製品の成分規格等に関する厚生労働省令」(以下、単に「乳等省令」と称する)で規定されている生乳、牛乳、特別牛乳、生山羊乳、殺菌山羊乳、部分脱脂乳、脱脂乳および加工乳の他(以上、哺乳動物の母乳)、豆乳、アーモンドミルク、およびココナッツミルク等の植物由来の乳(ミルク)が含まれる。これらは一種単独で本技術の増殖促進剤に配合することもできるし、また二種以上を任意に組み合わせて配合することもできる。好ましくは上記哺乳動物の母乳および豆乳であり、より好ましくは牛に由来する生乳、牛乳、特別牛乳、部分脱脂乳、脱脂乳および加工乳;並びに豆乳である。なお、上記「生乳、牛乳、特別牛乳、生山羊乳、殺菌山羊乳、部分脱脂乳、脱脂乳および加工乳」の定義は乳等省令によるものとする。
 ちなみに牛乳の平均的組成は、タンパク質3.3質量%、脂質3.8質量%、炭水化物4.8質量%、ミネラル(カリウム、カルシウム、リン酸塩、マグネシウム、ナトリウム、クエン酸塩、リン、鉄等)0.37質量%、ビタミン(ビタミンA,B1、B2,CおよびE)、および水分であり、100グラム当り約67キロカロリーである。牛乳に含まれるタンパク質の約80質量%はカゼイン(カゼインミセル)である。残りの20質量%は乳漿蛋白(ホエイプロテイン)であり、この中には、β-ラクトグロブリン、α-ラクトグロブリン、免疫グロブリン、血清アルブミン、およびラクフェリン等のタンパク質が含まれる。牛乳に含まれる炭水化物としては、乳糖(二糖)、グルコース、ガラクトース(以上、単糖)、その他のオリゴ糖を挙げることができる。炭水化物の多くは乳糖であり、脱脂粉乳の固形分のうち50質量%を占める。脱脂粉乳(固形分)の残り50質量%の多くはタンパク質である。
 植物由来のタンパク質を含む原料としては、豆乳、アーモンドミルク、ココナッツミルクなどを挙げることができる。
 豆乳は、大豆を水に浸してすりつぶし、水を加えて煮つめた汁を漉したものである。
 アーモンドミルクは、水に浸したアーモンドをミキサーなどで砕き、水を加えてガーゼなどで滓を漉したものである。
 ココナッツミルクは、成熟したココナッツの種子の内側に、層状に形成される固形胚乳から得られる甘い乳状の食材である。
 また、本技術の増殖促進・減少抑制剤には、タンパク質を含む原料を更に加工した製品(例えば、乳製品等)を配合することもできる。
 乳製品とは、前述する乳(好ましくは生乳および豆乳)を人為的に加工した可食性製品を意味する。例えば生乳から調製される乳製品としては、クリーム、バター、バターオイル、チーズ、濃縮ホエイ、アイスクリーム類(アイスクリーム、ラクトアイス、アイスミルク)、濃縮乳、脱脂濃縮乳、無糖れん乳、無糖脱脂れん乳、加糖れん乳、加糖脱脂れん乳、全粉乳、脱脂粉乳、クリームパウダー、ホエイパウダー、バターミルクパウダー、加糖粉乳、調整粉乳、発酵乳、乳酸菌飲料(無脂乳固形分3%以上を含むものに限る)および乳飲料を挙げることができる。これら各成分の定義は乳等省令によるものとする。なかでも好ましくは脱脂乳(ホエイ、濃縮ホエイ、カッテージチーズ、脱脂濃縮乳、無糖脱脂れん乳、加糖脱脂れん乳、脱脂濃縮乳、無糖脱脂れん乳、加糖脱脂れん乳、脱脂粉乳、ホエイパウダー)、粉乳(全粉乳、脱脂粉乳、クリームパウダー、ホエイパウダー、バターミルクパウダー、加糖粉乳、調整粉乳)であり、より好ましくは脱脂粉乳、ホエイパウダーである。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤にタンパク質を配合する場合、その配合量は特に限定されず、スピルリナの量や使用目的等に応じて、自由に設定することができる。本技術では特に、スピルリナ100質量部に対して1~10000質量部配合することが好ましく、50~300質量部配合することがより好ましい。
 (5)糖質
 前述するように、本技術の増殖促進・減少抑制剤には、スピルリナに加えて、糖質を配合することができる。糖質を配合することにより、後述する実施例に示す通り、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制の効果がより優れたものとなる。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤に用いることができる糖質としては、医療、食品等の分野において用いることが可能な糖質を、1種又は2種以上、自由に選択して用いることができる。具体的には、例えば、グルコース、フルクトース、ガラクトース、ラムノースおよびフコース等の単糖;乳糖(ラクトース)、スクロース、マルトースおよびトレハロース等の二糖;ラフィノース等の三糖;ラクチュロース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、マンナンオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、キシロオリゴ糖等のオリゴ糖;N-アセチルグルコサミン、デキストリン、大豆オリゴ糖等の多糖類を挙げることができる。好ましくは単糖、二糖およびオリゴ糖であり、より好ましくはグルコース、および乳糖を挙げることができる。なお、ラクチュロースは、乳糖を公知の方法でアルカリ異性化したものであり、商業的に入手することができるが、特公昭52-21063号公報に記載の方法に従って製造することもできる。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤に糖質を配合する場合、その配合量は特に限定されず、スピルリナの量や使用目的等に応じて、自由に設定することができる。本技術では特に、スピルリナ100質量部に対して1~20000質量部配合することが好ましく、80~500質量部配合することがより好ましい。
 (6)その他の成分
 本技術の増殖促進・減少抑制剤には、本技術の効果を損なわない限り、医療、食品等の分野において使用可能なその他の成分を、1種又は2種以上、自由に選択して用いることができる。
 他の成分としては、スピルリナを製剤化するために使用される担体及び添加剤を挙げることができる。具体的には、例えば、賦形剤、pH調整剤、着色剤、矯味剤等の成分を用いることができる。また、公知の又は将来的に見出される疾患や症状の予防、改善及び/又は治療の効果を有する成分を、適宜目的に応じて併用することも可能である。
 前記製剤担体としては、剤形に応じて、各種有機又は無機の担体を用いることができる。固形製剤の場合の担体としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
 前記賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体;トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α-デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体;結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体;アラビアゴム;デキストラン;プルラン;軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体;リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体;炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体;硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられる。
 前記結合剤としては、例えば、上記賦形剤の他、ゼラチン;ポリビニルピロリドン;マクロゴール等が挙げられる。
 前記崩壊剤としては、例えば、上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプン又はセルロース誘導体等が挙げられる。
 前記滑沢剤としては、例えば、タルク;ステアリン酸;ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩;コロイドシリカ;ピーガム、ゲイロウ等のワックス類;硼酸;グリコール;フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類;安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩;硫酸ナトリウム等の硫酸塩類;ロイシン;ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩;無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類;デンプン誘導体等が挙げられる。
 前記安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類;クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類;塩化ベンザルコニウム;無水酢酸;ソルビン酸等が挙げられる。
 前記矯味矯臭剤としては、例えば、甘味料、酸味料、香料等が挙げられる。
 なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
 (7)用途
 本技術の増殖促進・減少抑制剤は、もっぱらビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の増殖を促進し、又は、減少を抑制し、当該細菌の菌数を増加させるか、又は当該細菌の生残性を向上させる目的で使用される。
 本技術において「増殖促進」(増殖促進作用)とは、生存可能な環境下にあるビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌(生菌)に作用して、その増殖を促進することをいう。
 本技術において「減少抑制」(減少抑制作用)とは、生存または生育(増殖)が抑制された環境下において、当該ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌に対して増殖促進を図ることで、死滅(不活性化)による生菌数の減少を抑え、生きた状態で残存する菌体数(生菌数)を維持または増やすことができること(生残率の向上)をいう。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤が有するこうした増殖促進作用および減少抑制作用は、本技術の増殖促進・減少抑制剤の存在下でビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌(生菌)を培養した場合に、培養前後のビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の生菌数をもとに下式で算出される生残率(%)が、本技術の増殖促進・減少抑制剤非存在下でビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌(生菌)を培養した場合に算出される生残率(%)(対照生残率)と比較して、高いことを指標として判断することができる。ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の具体的な培養方法や条件は後述する実験例に記載する方法を参考にすることができる。
[数1]    
      生残率(%)=[培養後の生菌数/培養前の生菌数]×100
 なお、生残率(%)の算出にあたり、ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の生菌数の求め方は定法に基づいて実施することができる。生菌数の測定法としては、ビフィドバクテリウム属細菌測定法として、TOSプロピオン酸寒天培地(ヤクルト薬品工業株式会社)を使用したコロニー計数法が挙げられる。乳酸菌測定法として、BCP加プレートカウント寒天培地”栄研”(栄研化学株式会社)を使用したコロニー計数法が挙げられる。
 本技術の増殖促進・減少抑制剤は、ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の増殖を促進し、又は、減少を抑制することにより、腸内細菌叢の改善、免疫調節、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患等の予防及び/又は治療に有用であるので、これらの用途に基づく医薬品又は医薬部外品、飲食品、及び飼料等の形態で用いることができる。
 (7-1)医薬品、医薬部外品
 本技術に係る増殖促進・減少抑制剤は、その優れたビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の増殖促進・減少抑制効果を利用して、ヒト若しくは動物用の医薬品、医薬部外品等の有効成分として、これらに配合して使用可能である。
 医薬品に配合する場合、該医薬品は、経口投与や非経口投与などの投与方法に応じて、適宜所望の剤形に製剤化することができる。その剤形は特に限定されないが、経口投与の場合、例えば、散剤、顆粒剤、錠剤、トローチ剤、カプセル剤等の固形製剤;溶液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等に製剤化することができる。非経口投与の場合、例えば、座剤、噴霧剤、吸入剤、軟膏剤、貼付剤、注射剤等に製剤化することができる。本開示では、経口投与の剤形に製剤化することが好ましい。
 なお、製剤化は剤形に応じて、適宜、公知の方法により実施できる。
 (7-2)飲食品
 本技術に係る増殖促進・減少抑制剤は、その優れたビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の増殖促進・減少抑制効果を利用して、ヒト若しくは動物用の健康食品、機能性食品、病者用食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品、特定保健用食品、機能性表示食品、栄養機能食品等の有効成分として、これらに配合して使用可能である。
 本技術に係る増殖促進・減少抑制剤は、公知の飲食品に添加して調製することもできるし、飲食品の原料中に混合して新たな飲食品を製造することもできる。
 前記飲食品は、液状、ペースト状、固体、粉末等の形態を問わず、錠菓、流動食等のほか、例えば、小麦粉製品、即席食品、農産加工品、水産加工品、畜産加工品、乳・乳製品、油脂類、基礎調味料、複合調味料・食品類、冷凍食品、菓子類、飲料、これら以外の市販品等が挙げられる。
 前記小麦粉製品としては、例えば、パン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等が挙げられる。
 前記即席食品類としては、例えば、即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品、その他の即席食品等が挙げられる。
 前記農産加工品としては、例えば、農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル(穀物加工品)等が挙げられる。
 前記水産加工品としては、例えば、水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等が挙げられる。
 前記畜産加工品としては、例えば、畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等が挙げられる。
 前記乳・乳製品としては、例えば、加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリーム、その他の乳製品等が挙げられる。
 前記油脂類としては、例えば、バター、マーガリン類、植物油等が挙げられる。
 前記基礎調味料としては、例えば、しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等が挙げられ、前記複合調味料・食品類として、調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その他の複合調味料等が挙げられる。
 前記冷凍食品としては、例えば、素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等が挙げられる。
 前記菓子類としては、例えば、キャラメル、キャンディー、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子、その他の菓子等が挙げられる。
 前記飲料としては、例えば、炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料、その他の嗜好飲料等が挙げられる。
 上記以外の市販食品としては、例えば、ベビーフード、ふりかけ、お茶潰けのり等が挙げられる。
 また、本開示で定義される飲食品は、特定の用途(特に保健の用途)や機能が表示された飲食品として提供・販売されることも可能である。
 「表示」行為には、需要者に対して前記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、前記用途を想起・類推させうるような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、全て本開示の「表示」行為に該当する。
 また、「表示」は、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により行われることが好ましい。具体的には、飲食品に係る商品又は商品の包装に前記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引き渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的(インターネット等)方法により提供する行為等が挙げられる。
 一方、表示内容としては、行政等によって認可された表示(例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示等)であることが好ましい。また、そのような表示内容を、包装、容器、カタログ、パンフレット、POP等の販売現場における宣伝材、その他の書類等へ付することが好ましい。
 また、「表示」には、健康食品、機能性食品、病者用食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品、特定保健用食品、機能性表示食品、栄養機能食品、医薬用部外品等としての表示も挙げられる。この中でも特に、消費者庁によって認可される表示、例えば、特定保健用食品制度、機能性表示食品制度、これらに類似する制度にて認可される表示等が挙げられる。より具体的には、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、機能性表示食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク低減表示等を挙げることができる。この中でも典型的な例としては、健康増進法施行規則(平成15年4月30日日本国厚生労働省令第86号)に定められた特定保健用食品としての表示(特に保健の用途の表示)、食品表示法(平成25年法律第70号)に定められた機能・BR>ォ表示食品としての表示及びこれらに類する表示である。
 (7-3)飼料
 本技術に係る増殖促進・減少抑制剤は、その優れたビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の増殖促進・減少抑制効果を利用して、動物用の飼料の有効成分として、使用可能である。本技術に係る増殖促進・減少抑制剤は、公知の飼料に添加して調製することもできるし、飼料の原料中混合して新たな飼料を製造することもできる。
 前記飼料の原料としては、例えば、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦等の穀類;ふすま、麦糠、米糠、脱脂米糠等の糠類;コーングルテンミール、コーンジャムミール等の製造粕類;脱脂粉乳、ホエー、魚粉、骨粉等の動物性飼料類;ビール酵母等の酵母類;リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料;油脂類;アミノ酸類;糖類等が挙げられる。また、前記飼料の形態としては、例えば、愛玩動物用飼料(ペットフード等)、家畜飼料、養魚飼料等が挙げられる。
2.経口組成物
 本技術に係る経口組成物は、スピルリナと、ビフィドバクテリウム属細菌および乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、を少なくとも含む組成物である。また、必要に応じて、タンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有させることができる。前記経口組成物は、腸内細菌叢の改善、免疫調節、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患等の予防及び/又は治療に用いることができる。
 経口組成物中のビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の含有量は特に限定されず、使用目的等に応じて自由に設定することができる。本技術では、特に、経口組成物1g中にビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌(両者を含む場合は総量)を、通常1×10cfu/g以上、好ましくは1×10~1×1012cfu/gの範囲で含むことができる。
 なお、ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌、スピルリナ、タンパク質、糖類、その他の成分の詳細については、前述した増殖促進および/または減少抑制剤と同一であるため、ここでは説明を割愛する。
3.ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法
 本技術のビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法(以下、単に「増殖促進・減少抑制方法」ともいう)は、ビフィドバクテリウム属細菌及び乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、スピルリナと、を共存させる工程を有する方法である。また、必要に応じて、さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を共存させることもできる。
 なお、ビフィドバクテリウム属細菌/乳酸菌、スピルリナ、タンパク質、糖類、その他の成分の詳細については、前述した増殖促進および/または減少抑制剤や経口組成物と同一であるため、ここでは説明を割愛する。
 以下、実施例に基づいて本技術を更に詳細に説明する。なお、以下に説明する実施例は、本技術の代表的な実施例の一例を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。
<実験例1>
 実験例1では、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナの影響を調べた。
 なお、ビフィドバクテリウム属細菌として、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)と、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)を用いた。より具体的には、ビフィドバクテリウム・ロンガムとしては、「BAA-999」(Bifidobacterium longum ATCC BAA-999)という寄託番号でアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ATCC)に寄託されており、商業的に入手することが可能な(http://www.atcc.org/products/all/BAA-999.aspx)菌を、ビフィドバクテリウム・ブレーベとしては、「FERM BP-11175」(Bifidobacterium breve FERM BP-11175)という寄託番号で独立行政法人製品評価技術基盤機構(NITE)に寄託されており、商業的に入手することが可能な菌を、それぞれ用いた(以下同じ)。
 また、スピルリナとして、株式会社スピルリナ研究所から入手したスピルリナ粉末を用いた(以下同じ)。
 (1)各実験材料の調製
(1-1)ビフィドバクテリウム属細菌乾燥粉末の調製
 各種ビフィドバクテリウム属細菌を、蛋白質、アミノ酸、糖源を含有する培地に接種し、32~41℃で5~24時間培養を行った後、培養液から遠心分離により菌体(湿菌体)を集菌した。凍結乾燥機(共和真空社製)を用いて、ビフィドバクテリウム・ロンガムについては18~96時間、ビフィドバクテリウム・ブレーベについては120時間の凍結乾燥を行い、凍結乾燥終了後の菌体塊を物理的に粉砕して各種ビフィドバクテリウム属細菌乾燥粉末(以下、「ビフィドバクテリウム属細菌末」という。)を得た。
(1-2)スピルリナ溶液の調製
 スピルリナ粉末3gを水道水又は牛乳100mLに溶解し、スピルリナ溶液を調製し、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 (2)実験方法
 試験管に入れた10mL量の各スピルリナ溶液(滅菌済)に、10mLあたりの菌数が1.0×10cfu(1.0×10cfu/mL)となるように生理食塩水で希釈調整した各種ビフィドバクテリウム属細菌末を接種し、37℃で8時間および16時間培養した。培養後、培養物中の菌数(cfu/mL)とpHを測定し、培養前の菌数とpHと比較し、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナの影響を評価した。なお、比較のため、上記スピルリナ溶液に代えて、水道水又は牛乳を用いて、同様に実験を行った。
 (3)実験結果
 実施例1~4および比較例1~4の結果を表1に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
 実施例1及び3と比較例1及び3との対比からわかるように、いずれのビフィドバクテリウム属細菌についても、スピルリナの存在下で培養することで、菌増殖が促進されて生残性が上昇することが判明した。
 また、比較例2及び比較例4に示すように、牛乳にはビフィドバクテリウム属細菌の生残性を上昇させる効果があるものの、牛乳にスピルリナを組み合わせることで、ビフィドバクテリウム属細菌の菌増殖がさらに一層促進されて、菌数が格段に増加することが判明した。
<実験例2>
 実験例2では、乳酸菌の増殖性に対するスピルリナの影響を調べた。
 なお、乳酸菌として、ラクトバシラス・ガゼリ(Lactobacillus gasseri)を用いた。より具体的には、ラクトバシラス・ガゼリとして、「NITE BP-01669」という寄託番号で独立行政法人製品評価技術基盤機構に寄託されており、商業的に入手することができる菌を用いた(以下同じ)。
 (1)各実験材料の調製
(1-1)乳酸菌乾燥粉末の調製
 乳酸菌を、蛋白質、アミノ酸、糖源を含有する培地に接種し、32~41℃で5~24時間培養を行った後、培養液から遠心分離 により菌体(湿菌体)を集菌した。凍結乾燥機(共和真空社製)を用いて18~96時間の凍結乾燥を行い、凍結乾燥終了後の菌体塊を物理的に粉砕して乳酸菌乾燥粉末(以下、「乳酸菌末」という。)を得た。
(1-2)スピルリナ溶液の調製
 スピルリナ粉末3gを水道水又は牛乳100mLに溶解し、スピルリナ溶液を調製し、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 (2)実験方法
 試験管に入れた10mL量の各スピルリナ溶液(滅菌済)に、10mLあたりの菌数が1.0×10cfu(1.0×10cfu/mL)となるように生理食塩水で希釈調整した乳酸菌末を接種し、37℃で8時間培養した。培養後、培養物中の菌数(cfu/mL)とpHを測定し、培養前の菌数とpHと比較し、乳酸菌の増殖性に対するスピルリナの影響を評価した。なお、比較のため、上記スピルリナ溶液に代えて、水道水又は牛乳を用いて、同様に実験を行った。
 (3)実験結果
 実施例5~6および比較例5~6の結果を表2に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
 表2に示す通り、乳酸菌についても、前記実験例1と同様に、スピルリナの存在下で培養することで、菌増殖が促進されて生残性が上昇する効果が判明した。なお、培養後8時間以降も同様の効果が確認された。
<実験例3>
 実験例3では、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナとタンパク質および/または糖質との併用の影響を調べた。
 なお、ビフィドバクテリウム属細菌として、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を用いた。
 (1)各実験材料の調製
(1-1)ビフィドバクテリウム属細菌末の調製
 実験例1と同様の方法により、ビフィドバクテリウム属細菌末を調整した。
(1-2)スピルリナ溶液の調製
 [実施例7および8]
 スピルリナ粉末3gおよびタンパク質(カゼイン又はホエイタンパク質)を水道水100mLに溶解し、タンパク質濃度3重量%のスピルリナ溶液を調製した。このスピルリナ溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 [実施例9及び10]
 スピルリナ粉末3gおよび糖(乳糖又はグルコース)を水道水100mLに溶解し、糖濃度5重量%のスピルリナ溶液を調製した。このスピルリナ溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 [実施例11]
 スピルリナ粉末3gおよび脱脂粉乳を水道水100mLに溶解し、脱脂粉乳濃度10重量%のスピルリナ溶液を調製した。このスピルリナ溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 (2)実験方法
 試験管に入れた10mL量の各スピルリナ溶液(滅菌済)に、10mLあたりの菌数が1.0×10cfu(1.0×10cfu/mL)となるように生理食塩水で希釈調整したビフィドバクテリウム属細菌末を接種し、37℃で8時間および16時間培養した。培養後、培養物中の菌数(cfu/mL)とpHを測定し、培養前の菌数とpHと比較し、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナ、タンパク質及び糖質の影響を評価した。なお、比較のため、上記スピルリナ溶液に代えて、タンパク質(カゼイン又はホエイタンパク質)をそれぞれ水道水に溶解したタンパク質濃度3重量%の水溶液(比較例7及び8)、糖(乳糖またはグルコース)をそれぞれ水道水に溶解した糖濃度5重量%の水溶液(比較例9及び10)、および脱脂粉乳を水道水に溶解した脱脂粉乳濃度10重量%の水溶液(比較例11)を用いて、同様に実験を行った。
 (3)実験結果
 実施例7~11および比較例7~11の結果を表3に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
 表3に示す通り、ビフィドバクテリウム属細菌を、ホエイ、乳糖(二糖)またはグルコース(単糖)の存在下で培養すると、菌増殖が抑制されて生残性が低下するのに対して(比較例8~10)、これらにスピルリナを組み合わせることで、実施例8~10に示すように、ビフィドバクテリウム属細菌の菌増殖が促進されて、菌数が格段に増加することが判明した。また、カゼインについても、スピルリナと組み合わせることで、ビフィドバクテリウム属細菌の生残性が上昇することが分かった。更に、脱脂粉乳にスピルリナを組み合わせることで、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖が一層促進されて、菌数がさらに増加することが判明した。なお、上記糖質のうち、乳糖は牛乳を構成する主要な糖質であることから、前記実験例1の比較例2や4で示された牛乳によるビフィドバクテリウム属細菌の生残性の上昇は牛乳に含まれる脂肪と糖質以外の成分によるものと考えられる。
<実験例4>
 実験例4では、牛乳の代わりに豆乳を用いた場合に、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナの影響を調べた。
 なお、ビフィドバクテリウム属細菌として、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を用いた。
 (1)各実験材料の調製
(1-1)ビフィドバクテリウム属細菌末・乳酸菌末の調製
 実験例1と同様の方法により、ビフィドバクテリウム属細菌末を調整した。
(1-2)スピルリナ溶液の調製
 [実施例12]
 スピルリナ粉末3gを豆乳100mLに溶解し、スピルリナ溶液を調製した。このスピルリナ溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 [実施例13]
 スピルリナ粉末3gおよび糖質(乳糖)を豆乳100mLに溶解し、糖質濃度5重量%のスピルリナ溶液を調製した。このスピルリナ溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 (2)実験方法
 試験管に入れた10mL量の各スピルリナ溶液(滅菌済)に、10mLあたりの菌数が1.0×10cfu(1.0×10cfu/mL)となるように生理食塩水で希釈調整したビフィドバクテリウム属細菌末を接種し、37℃で8時間および16時間培養した。培養後、培養物中の菌数(cfu/mL)とpHを測定し、培養前の菌数とpHと比較し、ビフィドバクテリウム属細菌または乳酸菌の増殖性に対する豆乳及び糖質の影響を評価した。なお、比較のため、上記スピルリナ溶液に代えて、豆乳(比較例12)及び糖(乳糖)を豆乳に溶解した糖濃度5重量%の水溶液(比較例13)を用いて、同様に実験を行った。
 (3)実験結果
 実施例12~13および比較例12~13の結果を表4に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
 実施例12と比較例12との比較から、豆乳をベースに用いた場合であっても、スピルリナを用いることでビフィドバクテリウム属細菌の生残性が上昇することが判明した。また、比較例13に示すように、豆乳ベースに乳糖を用いることで、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖が促進されるが、これに、スピルリナを併用することで、実施例13に示すように、菌増殖が大きく促進されて大幅に生残性が上昇することが判明した。
<実験例5>
 実験例5では、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナ濃度の影響を調べた。
 なお、ビフィドバクテリウム属細菌として、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を用いた。
 (1)各実験材料の調製
(1-1)ビフィドバクテリウム属細菌末の調製
 実験例1と同様の方法により、ビフィドバクテリウム属細菌末を調整した。
(1-2)スピルリナ溶液の調製
 スピルリナ粉末を牛乳100mLに下記表5に示す濃度になるようにそれぞれ溶解し、各スピルリナ溶液を調製した。このスピルリナ溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 (2)実験方法
 試験管に入れた10mL量の各スピルリナ溶液(滅菌済)に、10mLあたりの菌数が1.0×10cfu(1.0×10cfu/mL)となるように生理食塩水で希釈調整したビフィドバクテリウム属細菌末を接種し、37℃で8時間および16時間培養した。培養後、培養物中の菌数(cfu/mL)とpHを測定し、培養前の菌数とpHと比較し、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナの濃度の影響を評価した。
 (3)実験結果
 実施例14~18の結果を表5に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
 表5に示す通り、スピルリナの濃度依存的に、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進効果が高くなることが判明した。なお、実施例18では、培養後8時間から16時間の間に増殖のピークがあったと考えられる。
<実験例6>
 実験例6では、水道水に代えてリン酸緩衝液を用いて、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナおよび糖の影響を調べた。
 なお、ビフィドバクテリウム属細菌として、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を用いた。
 (1)各実験材料の調製
(1-1)ビフィドバクテリウム属細菌末の調製
 実験例1と同様の方法により、ビフィドバクテリウム属細菌末を調整した。
(1-2)リン酸緩衝液の調製
 0.2Mリン酸二水素ナトリウム溶液と0.2Mリン酸水素二ナトリウム溶液とを混合し、pHを7に調整した。
(1-3)スピルリナ-リン酸緩衝溶液の調製
 [実施例21]
 スピルリナ粉末3gをリン酸緩衝溶液100mLに溶解し、スピルリナ-リン酸緩衝溶液を調製した。このスピルリナ-リン酸緩衝溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 [実施例19及び20]
 スピルリナ粉末3gおよび糖(乳糖)をリン酸緩衝溶液100mLに溶解し、糖濃度5重量%のスピルリナ-リン酸緩衝溶液を調製した。このスピルリナ-リン酸緩衝溶液を、90℃で10分間オートクレーブ殺菌を行い、滅菌した。
 (2)実験方法
 試験管に入れた10mL量の各スピルリナ-リン酸緩衝溶液(滅菌済)に、10mLあたりの菌数が1.0×10cfu(1.0×10cfu/mL)となるように生理食塩水で希釈調整したビフィドバクテリウム属細菌末を接種し、37℃で8時間および16時間培養した。培養後、培養物中の菌数(cfu/mL)とpHを測定し、培養前の菌数とpHと比較し、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖性に対するスピルリナ-リン酸緩衝溶液をおよびスピルリナ-リン酸緩衝溶液+糖の影響を評価した。なお、比較のため、上記スピルリナ-リン酸緩衝溶液に代えて、リン酸緩衝溶液(比較例14)及び糖(乳糖)をリン酸緩衝溶液に溶解した糖濃度5重量%のリン酸緩衝溶液(比較例15)を用いて、同様に実験を行った。
 (3)実験結果
 実施例19~20及び比較例14~15の結果を表6に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
 比較例14および15に示すように、ビフィドバクテリウム属細菌をリン酸緩衝液の存在下で培養すると、水道水の存在下よりはよいものの、依然として生残性は低いままであり、これにさらに糖(乳糖)を併用するとさらに生残性が低下することが判明した。一方、これにスピルリナを組み合わせると、ビフィドバクテリウム属細菌の生残性が増加し(実施例19)、特にスピルリナに乳糖を併用することでビフィドバクテリウム属細菌の増殖が促進され菌数が大幅に増加することが確認された(実施例20)。
 なお、本技術は、以下のような構成もとることができる。
(1)
 アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類を有効成分とする、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤。
(2)
 前記アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/または前記スピルリナ属(Spirulina)藍藻類を、液体培地中で培養した状態の藻体または湿藻体、藻体の破砕物、およびこれらの乾燥物(粉砕した粉末も含む)、並びに、藻体または湿藻体の溶媒抽出物から選ばれる1種または2種以上の形態で含有する、(1)に記載の増殖促進および/または減少抑制剤。
(3)
 さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有する、(1)または(2)に記載の増殖促進および/または減少抑制剤。
(4)
 上記タンパク質が、乳タンパク質および/または植物タンパク質である、(3)に記載の増殖促進および/または減少抑制剤。
(5)
 上記糖質が、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種である(3)または(4)に記載の増殖促進および/または減少抑制剤。
(6)
 アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、
 ビフィドバクテリウム属細菌および乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、を含む経口組成物。
(7)
 前記アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/または前記スピルリナ属(Spirulina)藍藻類を、液体培地中で培養した状態の藻体または湿藻体、藻体の破砕物、およびこれらの乾燥物(粉砕した粉末も含む)、並びに、藻体または湿藻体の溶媒抽出物から選ばれる1種または2種以上の形態で含有する、(6)に記載の経口組成物。(8)
 さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有する、(6)または(7)に記載の経口組成物。
(9)
 上記タンパク質が、乳タンパク質および/または植物タンパク質である、(8)に記載の経口組成物。
(10)
 上記糖質が、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種である(8)または(9)に記載の経口組成物。
(11)
 腸内細菌叢の改善、免疫調節、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患の予防及び/又は治療に用いられる、(6)から(10)のいずれか一項に記載の経口組成物。
(12)
 ビフィドバクテリウム属細菌及び乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、を共存させる工程を有する、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法。
(13)
 前記アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/または前記スピルリナ属(Spirulina)藍藻類を、液体培地中で培養した状態の藻体または湿藻体、藻体の破砕物、およびこれらの乾燥物(粉砕した粉末も含む)、並びに、藻体または湿藻体の溶媒抽出物から選ばれる1種または2種以上の形態で含有する、(12)に記載の増殖促進および/または減少抑制方法。
(14)
 さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を共存させる、(12)または(13)に記載の増殖促進および/または減少抑制方法。
(15)
 上記タンパク質が、乳タンパク質および/または植物タンパク質である、(14)に記載の増殖促進および/または減少抑制方法。
(16)
 上記糖質が、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種である(14)または(15)に記載の増殖促進および/または減少抑制方法。
(17)
 ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤のための、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類の使用。
(18)
 ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制用経口組成物のための、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類の使用。
(19)
 腸内細菌叢の改善、免疫調節、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患の予防及び/又は治療に用いられる、(18)に記載の使用。
(20)
 ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤の製造ための、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類の使用。(21)

 ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制用経口組成物の製造ための、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類の使用。(22)
 アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類の、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤への使用。
(23)

 アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類の、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制用経口組成物への使用。(24)

 腸内細菌叢の改善、免疫調節、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患の予防及び/又は治療に用いられる、(23)に記載の使用。(25)
 アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類を適用対象に投与する、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法。
(26)
 (1)に記載の増殖促進および/または減少抑制剤を適用対象に投与する、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法。
(27)
 (25)又は(26)の方法を用いる、腸内細菌叢の改善方法。
(28)
 (25)又は(26)の方法を用いる、免疫調節方法。
(29)
 (25)又は(26)の方法を用いる、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患の予防及び/又は治療方法。

Claims (13)

  1.  アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類を有効成分とする、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制剤。
  2.  さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有する、請求項1に記載の増殖促進および/または減少抑制剤。
  3.  上記タンパク質が、乳タンパク質および/または植物タンパク質である、請求項2に記載の増殖促進および/または減少抑制剤。
  4.  上記糖質が、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種である請求項2または3に記載の増殖促進および/または減少抑制剤。
  5.  アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、
     ビフィドバクテリウム属細菌および乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、を含む経口組成物。
  6.  さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を含有する、請求項5に記載の経口組成物。
  7.  上記タンパク質が、乳タンパク質および/または植物タンパク質である、請求項6に記載の経口組成物。
  8.  上記糖質が、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種である請求項6または7に記載の経口組成物。
  9.  腸内細菌叢の改善、免疫調節、下痢、便秘、肥満、又は炎症性腸疾患の予防及び/又は治療に用いられる、請求項5から8のいずれか一項に記載の経口組成物。
  10.  ビフィドバクテリウム属細菌及び乳酸菌からなる群から選択される少なくとも1種の細菌と、アルスロスピラ属(Arthrospira)藍藻類および/またはスピルリナ属(Spirulina)藍藻類と、を共存させる工程を有する、ビフィドバクテリウム属細菌および/または乳酸菌の増殖促進および/または減少抑制方法。
  11.  さらにタンパク質および糖質からなる群から選択される少なくとも1種を共存させる、請求項10に記載の増殖促進および/または減少抑制方法。
  12.  上記タンパク質が、乳タンパク質および/または植物タンパク質である、請求項11に記載の増殖促進および/または減少抑制方法。
  13.  上記糖質が、単糖、二糖およびオリゴ糖からなる群から選択される少なくとも1種である請求項11または12に記載の増殖促進および/または減少抑制方法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022164535A (ja) * 2021-04-16 2022-10-27 ビオフェルミン製薬株式会社 酸化マグネシウム配合組成物

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6998193B2 (ja) * 2017-12-08 2022-02-10 森永乳業株式会社 新規ビフィドバクテリウム属細菌及び当該細菌を含む組成物
JP7131937B2 (ja) * 2018-03-28 2022-09-06 森永乳業株式会社 スピルリナ含有緑色飲料及びその製造方法
KR102135195B1 (ko) * 2018-10-08 2020-07-17 아주대학교산학협력단 테트라제노코커스 할로필러스를 포함하는 베체트병 또는 헤르페스 바이러스 감염증의 예방 또는 치료용 조성물
BR112022014252A2 (pt) * 2020-01-23 2022-09-20 Gervais Danone Sa Processo para a preparação de uma composição fermentada à base de plantas, composição à base de plantas e composição fermentada à base de plantas
JP7601332B2 (ja) * 2020-06-04 2024-12-17 江南化工株式会社 便秘解消組成物
CN111534434B (zh) * 2020-06-28 2022-07-05 江南大学 一种冻干保护剂及其在冻干青春双歧杆菌中的应用
KR102540263B1 (ko) * 2020-12-24 2023-06-07 주식회사 한국인삼공사 인삼 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 장내 미생물 균총 개선용 조성물

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1243747A (zh) * 1997-08-15 2000-02-09 北京建昊高科技股份有限公司 一种肠道微生态有益菌促生组合物
WO2002045732A1 (en) * 2000-12-05 2002-06-13 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Proliferation promoters for enteric bifidobacteria
JP2003199531A (ja) * 2001-11-01 2003-07-15 Fuyuki Mitsuyama 発酵食品と腸内有用菌物質
JP2004081206A (ja) * 2002-06-26 2004-03-18 Dainippon Ink & Chem Inc スピルリナの処理方法
JP2006298779A (ja) * 2005-04-15 2006-11-02 Kanehide Bio Kk 乳酸菌培養により得られる抗アレルギー剤
JP2006298778A (ja) * 2005-04-15 2006-11-02 Kanehide Bio Kk 乳酸菌培養により得られる免疫活性賦活剤
JP2009511506A (ja) * 2005-10-24 2009-03-19 ネステク ソシエテ アノニム 食物繊維製剤及び投与方法
JP2015533484A (ja) * 2012-09-11 2015-11-26 ティラビスコ アーベー プレバイオティックチラコイド組成物

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008002058A1 (en) * 2006-06-26 2008-01-03 B.M.Tech World Co., Ltd. Method of preparing powder kimchi and kimchi composition using the same
US7923044B2 (en) * 2008-07-15 2011-04-12 Paradise Herbs & Essentials, Inc. Composition for high-ORAC value dietary supplement
US8257694B2 (en) * 2009-05-14 2012-09-04 Product Partners, Llc Nutritional compositions for reducing oxidative damage
MX2014010048A (es) * 2012-02-22 2015-03-19 Algal Scient Corp Composiciones alimenticias para animales y metodos de uso de las mismas.

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1243747A (zh) * 1997-08-15 2000-02-09 北京建昊高科技股份有限公司 一种肠道微生态有益菌促生组合物
WO2002045732A1 (en) * 2000-12-05 2002-06-13 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Proliferation promoters for enteric bifidobacteria
JP2003199531A (ja) * 2001-11-01 2003-07-15 Fuyuki Mitsuyama 発酵食品と腸内有用菌物質
JP2004081206A (ja) * 2002-06-26 2004-03-18 Dainippon Ink & Chem Inc スピルリナの処理方法
JP2006298779A (ja) * 2005-04-15 2006-11-02 Kanehide Bio Kk 乳酸菌培養により得られる抗アレルギー剤
JP2006298778A (ja) * 2005-04-15 2006-11-02 Kanehide Bio Kk 乳酸菌培養により得られる免疫活性賦活剤
JP2009511506A (ja) * 2005-10-24 2009-03-19 ネステク ソシエテ アノニム 食物繊維製剤及び投与方法
JP2015533484A (ja) * 2012-09-11 2015-11-26 ティラビスコ アーベー プレバイオティックチラコイド組成物

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DE CARIE GZ. ET AL.: "Effect of Spirulina platensis biomass on the growth of lactic acid bacteria in milk", WORLD J MICROBIOL BIOTECH., vol. 16, 2000, pages 563 - 565 *
LIANG B. ET AL.: "Promoting effect of Spirulina platensis on growth of intestinal microbiota in vitro", CHINESE J MARINE DRUGS., vol. 18, no. 3, 1999, pages 7 - 10 *
NOBORU TSUCHIHASHI ET AL.: "Effects of Spirulina (Spirulina plantensis) on Cecum Contents in Rats", BULLETIN OF CHIBA COLLEGE OF HEALTH SCIENCE, vol. 5, no. 2, 1986, pages 27 - 30 *
VARGA L. ET AL.: "Influence of a Spirulina platensis biomass on the microflora of fermented ABT milks during storage (R1", J DAIRY SCI., vol. 85, 2002, pages 1031 - 1038, XP026990469 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022164535A (ja) * 2021-04-16 2022-10-27 ビオフェルミン製薬株式会社 酸化マグネシウム配合組成物
JP7825390B2 (ja) 2021-04-16 2026-03-06 ビオフェルミン製薬株式会社 酸化マグネシウム配合組成物

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