WO2016104665A1 - ロリクリンの減少抑制・改善剤、トランスグルタミナーゼ３活性化剤および皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤 - Google Patents

ロリクリンの減少抑制・改善剤、トランスグルタミナーゼ３活性化剤および皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤 Download PDF

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WO
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skin
keratinized
sphingomyelin
transglutaminase
loricrin
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知慧 大庭
雅史 森藤
聡美 市川
恵子 河端
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Meiji Co Ltd
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Meiji Co Ltd
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
    • A61K31/688—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols both hydroxy compounds having nitrogen atoms, e.g. sphingomyelins

Definitions

  • the present invention relates to an agent for inhibiting or improving the reduction of loricrin in the keratinized thickened skin layer and an activator of transglutaminase 3 in the keratinized thickened skin layer.
  • the present invention also relates to an agent for promoting the formation of a stratum corneum thickening film and a structure reinforcing agent. They are useful for preventing, suppressing or improving the deterioration of the skin condition.
  • the stratum corneum of the epidermis is composed of stratum corneum cells in which epidermal keratinocytes (keratinocytes) are terminally differentiated, and stratum corneum intercellular lipids surrounding them.
  • the intercellular lipid is composed of ceramide, cholesterol, fatty acid and the like, and a lamellar structure is formed by the lipid layer and the water molecule layer.
  • stratum corneum cells contain natural moisturizing factors such as keratin fibers and amino acids that are components related to moisturizing. It is wrapped in a very tough, insoluble backing structure by cross-linking of various proteins called keratinized thickened membranes (also called keratinous thickened membranes, or cornified envelopes (CE)). It is very stable against various stimuli. Of the proteins constituting the keratinized thickened membrane, loricrin, which is formed in particular in the granular layer, plays a role of strengthening this backing structure.
  • transglutaminase 3 of protein cross-linking adhesion enzyme attaches loricrin to immature keratinized thickened membrane formed by cross-linking reaction of proteins other than loricrin, and serves as a scaffold for keratinized thickened membrane. Complete by forming.
  • the damage (damage) of the skin due to ultraviolet rays induces an abnormal turnover of the skin, and is particularly susceptible to the outermost stratum corneum. It is known that when an incomplete keratinized thickening film is formed due to corneal cell damage or parakeratosis, the barrier function of the epidermal horny layer is reduced and the water retained in the horny layer is lost. Yes.
  • JP 2008-303185 discloses the use of a specific pyrrolidone derivative. Here, it is considered to mature an immature conified envelope.
  • JP 2008-303185 discloses the use of a specific pyrrolidone derivative. Here, it is considered to mature an immature conified envelope.
  • JP 2009-084244 A continuous oral intake of a saturated free fatty acid solution having 10 to 36 carbon atoms has an effect of improving the skin barrier function, an effect of increasing the amount of ceramide, and an effect of increasing the expression of loricrin gene. It is disclosed. However, there is no description or suggestion regarding oral intake of sphingomyelin.
  • Japanese Patent Application Laid-Open No. 2007-117793 discloses pharmaceuticals and foods and drinks containing sphingomyelin as an active ingredient, and various actions such as sialomucin secretion promoting action, antiallergic action and antioxidant action by sphingomyelin are disclosed. Has been. However, there is no description or suggestion about the effect of suppressing the decrease of loricrin by sphingomyelin and the activation effect of transglutaminase 3.
  • Hasegawa et al. Hisegawa T et al., “Dietary glucosylceramide enhances cornified envelope formation via transglutaminase expression and involucrin production”, Lipids (2011) 46, pp.529-535) It has been reported that effects of improving the skin barrier function of mice, increasing the expression of transglutaminase 1, increasing the production of involucrin, promoting the expression of transglutaminase 1 and 3, etc. have been observed. However, it has been confirmed that glucosylceramide is structurally different from sphingomyelin and has a completely different tendency of action from the administration of sphingomyelin.
  • transglutaminase 3 is activated, thereby promoting the formation of keratinized thickening film and strengthening its structure Is not known so far as the present inventors know.
  • the present inventors have unexpectedly found that orally taking sphingolipids, particularly sphingomyelin, suppresses the decrease of loricrin and activates transglutaminase 3.
  • the present inventors suppress the decrease of loricrin and activate transglutaminase 3 to promote the formation of a keratinized thickened film and to strengthen the structure of an immature keratinized thickened film. Pay attention.
  • the deteriorated state of the skin can be improved by these, and among them, it is possible to suppress a decrease in the barrier function of the skin under ultraviolet irradiation.
  • the present invention is based on these findings.
  • keratinized thickening film formation promoting / structural strengthening agent the formation promotion and structural strengthening of keratinized thickening film suppresses / improves the reduction of loricrin in the keratinized keratinized thickening film by sphingomyelin. And activation of transglutaminase 3.
  • the sphingomyelin may be a milk-derived sphingomyelin.
  • composition for oral ingestion or enteral administration comprising an agent for promoting the formation of a keratinized thickening film and for enhancing the structure.
  • composition according to ⁇ 6> may be used for preventing, suppressing, or improving deterioration of skin condition.
  • the deterioration of the skin condition may be a decrease in the barrier function of the skin.
  • the decrease in the barrier function of the skin may be due to irradiation with ultraviolet rays.
  • composition according to any one of the above items ⁇ 6> to ⁇ 9> preferably containing 0.5 to 1500 mg of sphingomyelin per day.
  • a food / beverage product comprising an agent for promoting the formation of a keratinized thickening film and for enhancing the structure.
  • a food or drink comprising the composition according to any one of ⁇ 6> to ⁇ 9>.
  • the food or drink according to ⁇ 11> or ⁇ 12> preferably includes 0.2 to 45000 mg of sphingomyelin per package.
  • the food or drink according to any one of ⁇ 11> to ⁇ 13> may be a functional food, a health nutrition food, a supplement, a food for specified health use, a functional display food, or a food with a disease risk reduction display. .
  • a method for inhibiting or improving the reduction of loricrin comprising orally ingesting or enterally administering sphingomyelin to a subject having a reduced amount of loricrin in the keratinized thickened skin skin.
  • Transglutaminase in a keratinized keratinized thickened skin layer comprising orally ingesting or enterally administering sphingomyelin to a subject having reduced activity of transglutaminase 3 in a keratinized thickened skin skin 3.
  • Sphingomyelin is orally ingested or administered enterally to a subject who wants to promote the formation and strengthening of the keratinized thick film in the horny layer of the skin.
  • the present invention it is possible to suppress / improve the decrease of loricrin in the skin keratinized keratinized thickened film, and to activate transglutaminase 3 in the keratinized keratinized thickened film.
  • the reduction-suppressing / improving agent, activator or formation-promoting / structural-reinforcing agent, and composition of the present invention effectively prevent, inhibit or improve the decrease in skin barrier function under ultraviolet irradiation. Can do.
  • the production promoter and composition of the present invention are taken by the oral or enteral route, and the raw materials are derived from those that have been used as conventional foods, they are safe and simple, and economical. It is also excellent in properties.
  • FIG. 2 (A) shows the transition of the expression level of the loricrin gene
  • FIG. 2 (B) shows the transition of the expression level of the transglutaminase 3 gene.
  • * indicates that there is a significant difference with respect to the control group (P ⁇ 0.05)
  • # indicates that there is a significant difference with respect to day 0 (P ⁇ 0.05).
  • FIG. 3 (C) shows the transition of the expression level of the transglutaminase 1 gene
  • FIG. 3 (D) shows the transition of the expression level of the involucrin gene.
  • * indicates that there is a significant difference with respect to the control group (P ⁇ 0.05)
  • # indicates that there is a significant difference with respect to day 0 (P ⁇ 0.05).
  • the agent for suppressing or improving the reduction of loricrin in the keratinized thickened skin layer of the present invention comprises sphingomyelin as an active ingredient.
  • active ingredient means that the agent for suppressing or improving the decrease according to the present invention exerts the action of suppressing or improving the decrease of loricrin in the keratinized thickened skin layer in the living body. It means to contain a sufficient amount (ie, effective amount) of sphingomyelin.
  • inhibition / improvement of decrease in loricrin means to suppress or improve the decrease of loricrin in the keratinized thickened skin layer, and to suppress or delay the decrease. It may include any meaning of stopping and maintaining the decrease, and suppressing the decrease and starting to increase. Furthermore, prevention of reduction may be included in “inhibition / improvement of reduction of loricrin”.
  • “Loriculin” is a major constituent protein of the lining structure of the keratinized thickening membrane of the skin.
  • the expression of the loricrin gene is used as an index, and the horny layer angle of the skin The reduced state of loricrin in the thickened membrane can be evaluated.
  • the activator of transglutaminase 3 in the skin keratinized thickened membrane of the present invention comprises sphingomyelin as an active ingredient.
  • active ingredient means that the activator according to the present invention is used in an amount sufficient to exert the action of activating transglutaminase 3 in the skin keratinized thickened membrane in the living body (that is, , An effective amount) of sphingomyelin.
  • activation of transglutaminase 3 means that the enzyme activity of transglutaminase 3 in the skin keratinized thickened membrane is activated and the activity is increased from the state in which the activity has decreased, the activity Is used to encompass maintaining a high state.
  • Transglutaminase 3 is an enzyme having a function of attaching loricrin to a keratinized thickened membrane and strengthening the backing structure of the keratinized thickened membrane. For example, as described in Examples described later, transglutaminase 3 Using the expression state of the 3 genes as an index, the activity of transglutaminase 3 in the skin keratinized thickened membrane can be evaluated.
  • the formation promotion / structure strengthening agent for skin keratinized thickening film of the present invention comprises sphingomyelin as an active ingredient.
  • active ingredient means that the formation promoting / structural strengthening agent according to the present invention can promote the formation of the keratinized and thickened skin keratinized layer and / or the effect of strengthening the structure. And a sufficient use amount (ie, an effective amount) of sphingomyelin.
  • promoting formation / strengthening of skin keratinized thickened film means promoting the formation of skin keratinized thickened film, maturing immature keratinized thickened film, Used to include strengthening the structure of keratinized thick films.
  • the formation promotion / structural strengthening of keratinized thickening film is to suppress the reduction of loricrin in the keratinized thickening skin skin by sphingomyelin. This is due to the improvement and activation of transglutaminase 3.
  • sphingomyelin is one of sphingolipids.
  • the sphingolipid is naturally derived, for example, milk, goat milk, sheep milk, horse milk and other milk-derived, egg yolk-derived, rice, corn, cereal-derived, konjac-derived, Examples include beet-derived, preferably milk-derived, and more preferably milk-derived. Therefore, the sphingomyelin that can be used in the present invention is of natural origin, preferably of milk, and more preferably of milk, similar to the sphingolipid described above. Sphingomyelin can be prepared from natural raw materials by a conventional method, but a commercially available product may be used.
  • the sphingomyelin is milk-derived sphingomyelin.
  • the milk-derived sphingomyelin that can be used in the present invention is preferably myrylstilsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C14: 0), tricosanylsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C23: 0), palmitylsphingo.
  • Sylphosphorylcholine (d18: 1-C16: 0), tricosenoylsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C23: 1), stearylsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C18: 0), lignocerylsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C24: 0), arachidylsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C20: 0), nerbonylsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C24: 1), behenylsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C22: 0) And one or more molecular species selected from the group consisting of serotilsphingosylphosphorylcholine (d18: 1-C26: 0). More preferably, the milk-derived sphingomyelin contains three or more molecular species selected from the above group, and even more preferably contains five or more molecular species selected
  • the reduction-suppressing / improving agent, activator or formation promoting / structural strengthening agent of the present invention is preferably for oral intake (ie, oral intake agent) or enteral administration (ie, enteral administration agent).
  • the reduction-suppressing / improving agent, activator, or formation-accelerating / structural-strengthening agent of the present invention is preferably used for skin with deteriorated condition or skin with reduced barrier function.
  • the barrier function in the reduced state of the skin barrier function, such as the reduction of loricrin in the keratinized thickening film of the skin, by suppressing and improving the reduction of loricrin,
  • the barrier function can be maintained or improved.
  • transglutaminase 3 is reduced in a state where the skin barrier function is reduced such that the activity of transglutaminase 3 in the keratinized thick film of skin is reduced.
  • skin barrier function By activating, skin barrier function can be maintained or improved.
  • the suppression and improvement of loricrin in the stratum corneum thickened skin and the activation of transglutaminase 3 promote the formation of the keratinized thickened membrane and strengthen the structure. Can improve the reduced skin.
  • the reduction-suppressing / improving agent, activator or formation-accelerating / structural strengthening agent according to the present invention is more preferably used for skin with deteriorated condition or skin with reduced barrier function.
  • Sphingomyelin an active ingredient in the present invention, can suppress and improve the decrease of loricrin in the keratinized thickened skin skin, and also activates transglutaminase 3 in the keratinized thickened skin skin (Examples described later). Thereby, formation of a keratinized thick film can be accelerated
  • the deterioration of the skin condition includes, for example, a decrease in the barrier function of the skin, a drying of the skin, a skin roughness, a decrease in the amount of moisture in the stratum corneum, and atopic dermatitis.
  • Reduction of the barrier function of the skin includes maintenance of the barrier function.
  • the reduction in the skin barrier function is preferably a reduction in the skin barrier function under the irradiation of ultraviolet rays.
  • prevention, suppression or improvement of an exacerbated state is used in a sense encompassing adjustment, delay of progression, mitigation, prevention of onset, prevention of recurrence, etc. of such a state.
  • treatment, prevention, or improvement of a condition that can be treated, prevented, or improved can be achieved by suppressing or improving the decrease of loricrin or activating transglutaminase 3.
  • the sphingomyelin is orally ingested or enterally administered to a subject having a reduced amount of loricrin in the keratinized thickened skin keratoplasty.
  • sphingomyelin is orally ingested or enterally administered to a subject whose transglutaminase 3 activity has decreased in the keratinized and thickened skin corneum.
  • a method for preventing, suppressing or improving the deterioration of the skin condition is provided.
  • sphingomyelin is orally ingested or enterally administered to a subject who wants to promote the formation of a keratinized thick film in the stratum corneum and to strengthen the structure.
  • Deteriorating skin condition including suppressing or improving loricrin in the keratinized thickened skin layer and activating transglutaminase 3 to promote the formation and strengthen the structure of the keratinized thickened skin layer.
  • sphingomyelin for suppressing or improving the reduction of loricrin in the keratinized and thickened skin corneum.
  • sphingomyelin for activating transglutaminase 3 in the keratinized and keratinized thick film of skin.
  • a sphingomyelin is provided for promoting the formation of a keratinized thickened skin layer and / or strengthening its structure.
  • sphingomyelin for suppressing or improving the reduction of loricrin in the keratinized thickened skin skin layer.
  • use of sphingomyelin in the manufacture of a composition for oral ingestion or enteral administration for suppressing or improving the reduction of loricrin in the keratinized thickened skin skin layer Is provided.
  • the use can be a non-therapeutic use.
  • sphingomyelin for the activation of transglutaminase 3 in the keratinized keratinous thickened membrane.
  • use of sphingomyelin in the manufacture of a composition for oral ingestion or enteral administration for the activation of transglutaminase 3 in a keratinized thickened skin skin layer Is provided.
  • the use can be a non-therapeutic use.
  • sphingomyelin to promote the formation of and / or strengthen the structure of the keratinized keratinized thick film.
  • a composition pharmaceutical for oral ingestion or enteral administration for promoting the formation of a keratinized thickened skin layer and / or strengthening its structure
  • sphingomyelin in the manufacture of can be a non-therapeutic use.
  • compositions and Food / Beverage As described above, according to the present invention, the composition for oral intake or enteral administration, comprising the reduction inhibitor / ameliorator, activator or formation promoter / structure enhancer of the present invention. Is provided. Moreover, according to this invention, the food / beverage products which comprise the reduction
  • compositions and foods and drinks include, for example, adding the reduction suppressing / improving agent, activator or formation promoting / structural strengthening agent of the present invention according to the present invention to the composition and material components of the food and drinks. It can manufacture with the manufacturing method which consists of these.
  • composition for oral intake or enteral administration of the present invention is preferably used for prevention, suppression or improvement of skin condition deterioration. That is, according to the present invention, a composition for preventing, suppressing or improving deterioration of the skin condition is provided.
  • composition for preventing, suppressing or improving deterioration of the skin condition of the present invention is a pharmaceutical composition as one preferred embodiment.
  • the pharmaceutical composition is prepared as an oral preparation or a parenteral preparation according to a conventional method using additives that are acceptable for formulation.
  • an oral preparation is preferable.
  • oral preparations take the form of solid preparations such as tablets, powders, fine granules, granules, capsules, pills, sustained-release preparations, and liquid preparations such as solutions, suspensions, and emulsions. Can do.
  • Additives that are acceptable for formulation include, for example, excipients, stabilizers, preservatives, wetting agents, emulsifiers, lubricants, sweeteners, colorants, fragrances, buffers, antioxidants, pH Examples thereof include regulators.
  • Arbitrary ingredients can be added to the food and drink of the present invention as required.
  • optional components that can be added there are no particular restrictions, but usually ingredients to be blended in foods and drinks, sweeteners, acidulants, vegetable and fruit juices and their extracts, vitamins, minerals, Nutrients such as amino acids, useful microorganisms such as lactic acid bacteria, bifidobacteria and propionic acid bacteria and their cultures, functional sugars such as oligosaccharides, royal jelly, collagen, ceramide, glucosamine, astaxanthin and polyphenols
  • filler, a sour agent, a coloring agent, an emulsifier, a preservative, etc. can be mix
  • the food and drink are other than the pharmaceutical composition and are not particularly limited as long as they are ingestible forms such as solutions, suspensions, emulsions, powders, and solid molded products.
  • dairy products such as milk drinks, yogurts, lactic acid bacteria drinks, fermented milk, ice creams, creams, cheeses; soft drinks, fruit juice drinks, vegetable drinks, soy milk drinks, coffee drinks, tea drinks Jelly drinks, cocoa, smoothie powdered drinks and sports powdered drinks, nutrition-enriched powdered drinks, cosmetic powdered foods, powdered soup, steamed bread, concentrated drinks, alcoholic drinks, etc .
  • bread, pasta , Flour products such as noodles, cake mix, fried flour, bread crumbs
  • confectionery such as chocolate, gum, candy, cookies, gummi, snacks, Japanese confectionery, jelly, pudding, etc .
  • the food and drink are milk drinks (which may include processed milk), fermented milk, soft drinks, jelly drinks, tablets, cosmetic powdered foods, powdered drinks, liquid foods, liquids.
  • the food or drink is a milk beverage, fermented milk, soft drink, jelly drink, tablet, powdered food for beauty, and according to a more preferred embodiment, the food or drink is Milk beverage (which may include processed milk), fermented milk.
  • the food or drink is a functional food, a health nutrition food, a supplement, a food for specified health use, a functional display food, or a food with a disease risk reduction display.
  • the indication of disease risk reduction is the indication of food and drink that may reduce the disease risk, and is based on the standards established by the FAO / WHO Joint Food Standards Committee (Codex Committee). , Or with reference to the standard, it can be a defined or recognized display.
  • the food and drink of the present invention are, for example, foods suitable for consumers who expect improvement or alleviation of skin condition deterioration, foods suitable for improvement of skin condition deterioration, that is, so-called foods for specific health use or functions It can be provided as sex indication food.
  • a food or drink on which a function for preventing, suppressing, or improving deterioration of the skin state is displayed can be provided.
  • the sphingomyelin can be adjusted to an effective amount that can be ingested by an adult (weight: 60 kg) per day at 0.5 to 1500 mg, preferably 1 to 1000 mg, more preferably 5 to 500 mg.
  • the sphingomyelin content can be measured by a conventional method. For example, it can be measured by using liquid chromatography and using AQUASIL SP100 (4.6 ⁇ 250 mm, Senshu Kagaku) as a column.
  • the mobile phase for example, a solution in which 0.5 mM phosphate-citrate buffer (pH 3.0) and methanol are mixed at a ratio of 5 to 95 may be used.
  • the measurement time can be set to 20 minutes
  • the flow rate of the mobile phase can be set to 0.6 mL / min
  • the column temperature can be set to 40 ° C.
  • the absorbance can be detected at 205 nm.
  • the standard substance for example, sphingomyelin (derived from milk, manufactured by Nagara Science Co., Ltd.) can be used, and can be quantified by the area ratio.
  • the content of active ingredients in foods and drinks and compositions can be specified per packaging form.
  • the content of sphingomyelin is 5 to 1500 mg, preferably 6
  • the sphingomyelin content is 0.5 to 1500 mg, preferably 1 to 1000 mg, more preferably 5 to 500 mg.
  • the amount (content) per packaging form is not limited to a single intake, and may include intakes for multiple doses or multiple days (for example, for 30 days).
  • the sphingomyelin content is 5 to 45000 mg, preferably 6 to 30000 mg, more preferably 7 to 15000 mg.
  • the sphingomyelin content is 0.5 to 45000 mg, preferably 1 It can be contained in an amount of ⁇ 30000 mg, more preferably 5 to 15000 mg.
  • the conventional general milk drink and fermented milk contain 20 mg of phospholipid per gram of lipid, whereas the milk drink and fermented milk of the present invention contain 25 to 3000 mg of phospholipid per gram of lipid. , Preferably 30 to 2500 mg, more preferably 40 to 2000 mg, and still more preferably 50 to 1500 mg.
  • the conventional general milk drink and fermented milk contain 6 mg of sphingomyelin per gram of lipid, while the milk drink and fermented milk of the present invention contain 7 to 1500 mg of sphingomyelin per gram of lipid. Contained, preferably 8 to 1250 mg, more preferably 9 to 1000 mg, and still more preferably 10 to 750 mg.
  • a milk drink or fermented milk with an intentionally increased sphingomyelin content can be used.
  • lipid is contained in a normal amount (for example, lipid is contained at 3% by weight), sphingomyelin is contained at 0.2 to 60 mg / g, preferably 0.25 to 50 mg / g. g, more preferably 0.3 to 40 mg / g, and still more preferably 0.35 to 30 mg / g.
  • lipid when lipid is contained in a small amount (for example, low fat containing 1% by weight of lipid), sphingomyelin is contained at 0.05 to 60 mg / g, preferably 0. 0.1 to 50 mg / g, more preferably 0.15 to 40 mg / g, and still more preferably 0.2 to 30 mg / g.
  • sphingomyelin is contained at 0.02 to 60 mg / g.
  • it can be contained at 0.04 to 50 mg / g, more preferably 0.06 to 40 mg / g, and still more preferably 0.08 to 30 mg / g.
  • a milk drink or fermented milk containing additional sphingomyelin is provided, and a composition or food or drink containing such a milk drink or fermented milk is further provided. Is done. Examples of such a composition or food and drink include yogurt.
  • a yogurt containing additional sphingomyelin can be provided, which is not only a sphingomyelin that can be naturally contained in yogurt, but additionally adding sphingomyelin to yogurt, Yogurt that intentionally increases the concentration of sphingomyelin.
  • additional sphingomyelin is not a sphingomyelin that can be naturally contained in yogurt, but a sphingo added separately when adding yogurt intentionally with increased sphingomyelin concentration. Myelin.
  • the agent for suppressing or improving loricrin reduction according to the present invention the activator of transglutaminase 3 according to the present invention, or the agent for promoting the formation of keratinized thickening film or the structure reinforcing agent according to the present invention.
  • a yogurt comprising is provided.
  • a yogurt having an effect of suppressing or improving the reduction of loricrin comprising additional sphingomyelin.
  • a yogurt having an activation effect on transglutaminase 3 is provided, which comprises additional sphingomyelin.
  • a yogurt containing an additional sphingomyelin and having an action of promoting the formation of a keratinized thick film and strengthening the structure is provided.
  • sphingomyelin is orally administered or administered enterally to a subject having a reduced amount of loricrin in the keratinized thickened skin keratinized layer.
  • An improvement method is provided.
  • the amount of loricrin means the amount of loricrin present in the skin keratinized thickened membrane, and can be evaluated by, for example, the expression level of the loricrin gene.
  • the sphingomyelin is orally ingested or enterally administered to a subject having reduced activity of transglutaminase 3 in the keratinized thickened skin keratin layer.
  • a method for activating transglutaminase 3 in a keratinized thickened membrane is provided.
  • the activity of transglutaminase 3 can be evaluated by, for example, the expression level of the transglutaminase 3 gene.
  • the sphingomyelin is orally ingested or enterally administered to a subject where it is desired to promote the formation and strengthening of the keratinized thick film in the horny layer of the skin.
  • a method for promoting the formation and strengthening of the keratinized keratinized thickened skin layer comprising suppressing and improving the decrease of loricrin in the keratinized thickened membrane and activating transglutaminase 3.
  • the above method excludes medical use.
  • the subject is preferably a human or a non-human mammal.
  • the method preferably reduces loricrin for a subject with reduced amount of loricrin in the cutaneous keratinized thickened membrane, preferably continuously ingesting or enterally administering sphingomyelin for more than 2 days
  • Inhibition / improvement method method of activating transglutaminase 3 in skin keratinized thickened film for subjects with decreased activity of transglutaminase 3 in skin keratinized thickened film, or skin keratinized thickened film It can be a formation promotion / structure strengthening method.
  • ⁇ Experiment method> Deterioration of skin barrier function by ultraviolet irradiation Hairless mice (Hos: HR-1, female, 8 weeks old) were grouped, and one week later, under the condition of 20 mJ / cm 2 , ultraviolet rays (UV -B) was irradiated. In the test, individuals were required for each measurement and skin collection, so a total of 48 mice were used, and each group was divided into 8 mice.
  • the expression of loricrin gene and transglutaminase 3 gene was determined for a predetermined group before irradiation (day 0), on irradiation day 1, and on irradiation day 2, in accordance with the flow of FIG. The amount was quantified. At this time, the expression levels of the transglutaminase 1 gene and the involucrin gene were also quantified.
  • the synthesized cDNA was subjected to RT-PCR, the primer was TaqmanGene Expression Assay (Applied Biosystems), and 7500 real-time PCR® System (Applied Biosystems) was used as the target gene for each sample, Loricrin (Lorrisrin). ID: Mm01962650_s1), transglutaminase 3 (Transglutaminase 3) (Assay ID: Mm00436999_m1), transglutaminase 1 (Transglutaminase 1) (Assay ID: Mm00498375_m1), mol 52 The NA expression level was measured.
  • GPDH glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
  • Quantification was performed by the ⁇ Ct method, and the ratio of the target gene expression level of each group to the target gene expression level of the control day 0 group was calculated as the relative expression level.
  • Test results Changes in gene expression related to the promotion of keratinized thickening film formation and structural enhancement were evaluated based on the expression levels of loricrin gene and transglutaminase 3 gene.
  • the expression level of loricrin gene when the expression level of loricrin gene is high in the 0, 1, 2 day group of sphingomyelin intake compared to the control 0, 1, 2 day group, the decrease in loricrin expression is suppressed. means. Moreover, if the expression level of the transglutaminase 3 gene is higher in the 0, 1, 2 day group of the sphingomyelin intake compared to the control 0, 1, 2 day group, the increase in the expression of the transglutaminase 3 gene is increased. It means being promoted.
  • the expression level of the transglutaminase 1 gene is lower in the 0, 1 and 2 day groups of sphingomyelin intake than the control 0, 1 and 2 day groups, This means that the increase in the expression of the transglutaminase 1 gene was suppressed.
  • the involucrin gene expression level was low, the increase in involucrin gene expression was suppressed compared to the control 0, 1 and 2 day groups. Means that.
  • the expression level of the loricrin gene was higher in the first day group of sphingomyelin intake than in the first day group of control (1 day after irradiation with ultraviolet rays).
  • FIG. 2 (B) compared to the control day 1 group (1 day after UV irradiation) and the control day 2 group (2 days after UV irradiation), the first day group ingested the sphingomyelin group and the sphingomyelin group In the ingestion day 2 group, the expression level of the transglutaminase 3 gene was high.
  • FIG. 3 (A) compared to the control 1, 2 and 3 day group (control group) (after UV irradiation 1, 2 and 3 days), in the sphingomyelin intake 1, 2 and 3 day group, In each case, the expression level of the transglutaminase 1 gene was low.
  • FIG. 3 (B) compared to the control 1, 2 and 3 day group (SM group) (after UV irradiation 1, 2 and 3 days), in the sphingomyelin intake 1, 2 and 3 day group, Each of the involucrin gene expression levels were low.
  • transglutaminase 1 gene and involucrin gene were not promoted by ingestion of sphingomyelin, oral ingestion of sphingomyelin promotes the formation of keratinized thickening film and strengthens the structure. It was suggested that it contributes specifically to the promotion of expression of related specific genes (here, loricrin gene and transglutaminase 3 gene).

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Abstract

　本発明は、スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤、トランスグルタミナーゼ３の活性化剤およびに皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤、組成物、および飲食品に関する。本発明によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制もしく改善することができ、また、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化を図ること出来、さらにそれらにより、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進し、構造強化を図ることができる。そしてこれらの作用により、皮膚のバリア機能の低下を、安全かつ簡易で、経済的に予防、抑制または改善することができる。

Description

ロリクリンの減少抑制・改善剤、トランスグルタミナーゼ３活性化剤および皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤 関連出願の参照
　本願は、先行する日本国特許出願である特願２０１４－２６４５７８号（出願日：２０１４年１２月２６日）に基づくものであって、その優先権の利益を主張するものであり、その開示内容全体は参照することによりここに組み込まれる。
　本発明は、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤、および皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤に関する。また本発明は、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤に関する。これらは、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善に有用である。
　表皮の角層は、表皮角化細胞（ケラチノサイト）が終末分化した角層細胞と、それをとりまく角層細胞間脂質から構成されている。細胞間脂質は、セラミド、コレステロール、脂肪酸などから構成され、脂質層と水分子層とによって、ラメラ構造を形成している。
　一方、角層細胞は、保湿に関連する成分のケラチン線維やアミノ酸などの天然保湿因子を含んでいる。そして、それは、角化肥厚膜（角質肥厚膜、またはコーニファイドエンベロープ（ＣＥ）とも呼ぶ）という様々なタンパク質の架橋によって、非常に強靭な不溶性の裏打ち構造に包まれており、物理的や化学的な刺激に対して、非常に安定的である。角化肥厚膜を構成するタンパク質のうち、特に顆粒層で形成されているロリクリンは、この裏打ち構造を強化する役割を担っている。この構造では、タンパク質架橋接着酵素のトランスグルタミナーゼ３が、ロリクリン以外のタンパク質の架橋反応で形成された未熟な角化肥厚膜に対して、ロリクリンを付着させ、角化肥厚膜の足場となる土台を形成することによって完成する。
　皮膚の紫外線による損傷（ダメージ）は、皮膚のターンオーバーの異常を誘発し、特に最外層の角層では、その影響を受け易い。角層細胞の損傷や不全角化によって、不完全な角化肥厚膜が形成されると、表皮角層のバリア機能を低下させ、角層中に保持された水分が失われることが知られている。
　コーニファイドエンベロープ（角化肥厚膜）の形成・成熟促進という観点からは、例えば、特開２００８－３０３１８５号公報に、特定のピロリドン誘導体の使用について開示されている。ここでは、未熟なコーニファイドエンベロープを成熟化させることが検討されている。しかしながら、本発明者らの知るかぎり、皮膚損傷などによるロリクリンの減少を抑制して、トランスグルタミナーゼ３を活性化することで、角化肥厚膜の形成を促進して、その構造を強化することについては、あまり検討が進んでいない。そして、本発明者らの知るかぎり、そのために、スフィンゴ脂質、その中でも、スフィンゴミエリンを経口摂取することについては、これまで知られていない。
　特開２００９－０８４２４４号公報には、炭素数１０～３６の飽和遊離脂肪酸溶液の連続経口摂取によって、皮膚のバリア機能の改善効果、セラミド量の増加効果、ロリクリン遺伝子の発現増加効果が認められたことが開示されている。しかしながら、ここには、スフィンゴミエリンを経口摂取することについては、何ら記載も示唆もされていない。
　特開２００７－１１７７９３号公報には、スフィンゴミエリンを有効成分として含有する医薬および飲食品が開示されており、スフィンゴミエリンによるシアロムチン分泌促進作用、抗アレルギー作用、抗酸化作用等の種々の作用が開示されている。しかしながら、ここには、スフィンゴミエリンによるロリクリンの減少抑制作用や、トランスグルタミナーゼ３の活性化作用については、何ら記載も示唆もされていない。
　Hasegawaらの文献（Hasegawa T et al., “Dietary glucosylceramide enhances cornified envelope formation via transglutaminase expression and involucrin production”, Lipids (2011) 46, pp.529-535）には、こんにゃく由来のスフィンゴ脂質であるグルコシルセラミドをマウスに投与した際に、マウスの皮膚バリア機能の改善、トランスグルタミナーゼ１の発現上昇、インボルクリンの産生上昇、トランスグルタミナーゼ１および３の発現促進等の作用が観察されたことが報告されている。しかしながら、グルコシルセラミドでは、スフィンゴミエリンとは構造的に異なるものであり、また、スフィンゴミエリンの投与の場合とは作用の傾向が全く異なることが確認されている。すなわち、スフィンゴミエリンの投与の場合には、トランスグルタミナーゼ１およびインボルクリンの維持もしくは低下が実際に確認されており（本発明の実施例）、これは、グルコシルセラミドの投与の場合とは全く反対の結果である。
　このように、スフィンゴミエリンを経口摂取することによって、ロリクリンの減少が抑制され、トランスグルタミナーゼ３が活性化され、それにより、角化肥厚膜の形成が促進されて、その構造が強化されることについては、本発明者らの知るかぎり、これまで知られていない。
　本発明者らは今般、スフィンゴ脂質、特にスフィンゴミエリンを経口摂取することによって、ロリクリンの減少が抑制され、トランスグルタミナーゼ３が活性化されることを予想外にも見出した。本発明者らは、ロリクリンの減少を抑制し、トランスグルタミナーゼ３を活性化することで、角化肥厚膜の形成が促進され、また未熟な状態の角化肥厚膜の構造が強化されることに着目した。さらに、これらによって、皮膚の悪化した状態が改善され、その中でも、紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の低下を抑制できることも見出した。本発明は、これら知見に基づくものである。
　よって、本発明は、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤、および皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤の提供をその目的とする。また、本発明は、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤の提供をその目的とする。さらに本発明は、紫外線の照射下などによる皮膚のバリア機能の低下を、安全かつ簡易で、経済的に予防、抑制または改善するための組成物、および飲食品の提供もその目的とする。
　すなわち、本発明によれば、以下の発明が提供される。
　＜１＞　スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤。
　＜２＞　スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤。
　＜３＞　スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤。
　＜４＞　前記＜１＞の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤において、角化肥厚膜の形成促進・構造強化が、スフィンゴミエリンによる皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化によるものであるのがよい。
　＜５＞　前記＜１＞～＜４＞のいずれかの減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤において、スフィンゴミエリンは、乳由来のスフィンゴミエリンであるのがよい。
　＜６＞　前記＜１＞または＜５＞のロリクリンの減少抑制・改善剤、前記＜２＞または＜５＞のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または前記＜３＞～＜５＞のいずれかの角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、経口摂取用または経腸投与用組成物。
　＜７＞　前記＜６＞の組成物において、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善のために用いられるのがよい。
　＜８＞　前記＜７＞の組成物において、皮膚の状態の悪化が、皮膚のバリア機能の低下であるのがよい。
　＜９＞　前記＜７＞または＜８＞の組成物において、皮膚のバリア機能の低下が、紫外線の照射によるものであるのがよい。
　＜１０＞　前記＜６＞～＜９＞のいずれかの組成物において、１日当たり０．５～１５００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含むのがよい。
　＜１１＞　前記＜１＞または＜５＞のロリクリンの減少抑制・改善剤、前記＜２＞または＜５＞のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または前記＜３＞～＜５＞のいずれかの角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、飲食品。
　＜１２＞　前記＜６＞～＜９＞のいずれかの組成物を含んでなる、飲食品。
　＜１３＞　前記＜１１＞または＜１２＞の飲食品において、一包装形態当たり０．２～４５０００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含むのがよい。
　＜１４＞　前記＜１１＞～＜１３＞のいずれかの飲食品において、機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、特定保健用食品、機能性表示食品または疾病リスク低減表示付き食品であるのがよい。
　＜１５＞　スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、ロリクリンの減少抑制・改善方法。
　＜１６＞　スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法。
　＜１７＞　スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制もしくは改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化することを含む、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法。
　本発明によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制・改善することができ、また皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３を活性化することができる。ロリクリンの減少を抑制し、トランスグルタミナーゼ３を活性化することで、角化肥厚膜の形成が促進され、また未熟な状態の角化肥厚膜の構造が強化されることとなる。特に、本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤、および組成物は、紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の低下の予防、抑制または改善を効果的に行うことができる。さらに、本発明の産生促進剤および組成物は、経口または経腸ルートで摂取するものであり、また、原料は従来食品として使用経験のあるものを由来とするため、安全かつ簡易であり、経済性にも優れたものである。
実施例の試験の流れを示す概念図である。 実施例におけるロリクリン遺伝子の発現量の推移とトランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量の推移を示したグラフである。このうち、図２（Ａ）は、ロリクリン遺伝子の発現量の推移を示し、図２（Ｂ）は、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量の推移を示す。また、図中、＊は、対照群に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示し、＃は、０日目に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示す。 実施例におけるトランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量の推移とインボルクリン遺伝子との発現量の推移を示したグラフである。このうち、図３（Ｃ）は、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量の推移を示し、図３（Ｄ）は、インボルクリン遺伝子の発現量の推移を示す。また、図中、＊は、対照群に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示し、＃は、０日目に対して有意差あり（Ｐ＜０．０５）を示す。
　以下、本発明の実施形態について説明する。
皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤
　本発明の皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤は、前記したように、スフィンゴミエリンを有効成分とするものである。
　ここで、「有効成分とする」とは、本発明による減少抑制・改善剤が、ロリクリンの減少を抑制するか、または改善する作用を、生体内の皮膚角層角化肥厚膜において奏するのに充分な使用量（すなわち、有効量）のスフィンゴミエリンを含有することをいう。
　また、ここで、「ロリクリンの減少抑制・改善」とは、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制するか、または改善することを意味し、減少の進行を抑えるか、または遅延させること、減少を停止させ維持すること、減少を抑え増加に転じさせることのいずれの意味を含んでいても良い。さらに、「ロリクリンの減少抑制・改善」には、減少の予防も包含されていてもよい。
　「ロリクリン」は、皮膚の角化肥厚膜の裏打ち構造の主要な構成タンパク質であり、例えば、後述する実施例に記載されているように、ロリクリン遺伝子の発現状態を指標にして、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少状態を評価することができる。
トランスグルタミナーゼ３の活性化剤
　本発明の皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤は、前記したように、スフィンゴミエリンを有効成分とするものである。
　ここで、「有効成分とする」とは、本発明による活性化剤が、トランスグルタミナーゼ３を活性化させる作用を、生体内の皮膚角層角化肥厚膜において奏するのに充分な使用量（すなわち、有効量）のスフィンゴミエリンを含有することをいう。
　また、ここで、「トランスグルタミナーゼ３の活性化」とは、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の酵素活性が活性化され、活性が低下していた状態から活性が高められること、活性が高い状態を維持することを包含する意味で使用される。
　「トランスグルタミナーゼ３」は、角化肥厚膜にロリクリンを付着させ、角化肥厚膜の裏打ち構造を強化する働きを持つ酵素であり、例えば、後述する実施例に記載されているように、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現状態を指標にして、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性を評価することができる。
皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤
　本発明の皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤は、前記したように、スフィンゴミエリンを有効成分とするものである。
　ここで、「有効成分とする」とは、本発明による形成促進・構造強化剤が、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進し、および／または、その構造を強化する効果を示しうるのに充分な使用量（すなわち、有効量）のスフィンゴミエリンを含有することをいう。
　また、ここで、「皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化」とは、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進すること、未成熟の角化肥厚膜を成熟化させること、角化肥厚膜の構造を強化することを含む意味で使用される。
　本発明の好ましい態様によれば、角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤において、角化肥厚膜の形成促進・構造強化は、スフィンゴミエリンによる皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化によるものである。
スフィンゴミエリン
　本明細書において、スフィンゴミエリンは、スフィンゴ脂質の一つである。ここで、スフィンゴ脂質は、天然由来のものであり、例えば、牛乳、ヤギ乳、羊乳、馬乳などの乳由来のもの、卵黄由来のもの、米、トウモロコシ、穀物由来のもの、コンニャク由来、ビート由来などが挙げられ、好ましくは、乳由来のものであり、より好ましくは牛乳由来のものである。したがって、本発明において使用可能なスフィンゴミエリンは、前記したスフィンゴ脂質と同様に、天然由来のものであり、好ましくは乳由来のものであり、より好ましくは牛乳由来のものである。スフィンゴミエリンは、天然原料より慣用の方法によって調製することもできるが、市販品を使用しても良い。
　本発明の好ましい態様によれば、スフィンゴミエリンは、乳由来のスフィンゴミエリンである。
　本発明で使用可能な乳由来のスフィンゴミエリンは、好ましくは、ミリルスチルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C14:0）、トリコサニルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C23:0）、パルミチルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C16:0）、トリコセノイルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C23:1）、ステアリルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C18:0）、リグノセリルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C24:0）、アラキジルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C20:0）、ネルボニルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C24:1）、ベヘニルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C22:0）、およびセロチルスフィンゴシルホスホリルコリン（d18:1-C26:0）からなる群より選択される１以上の分子種を含むものである。前記乳由来のスフィンゴミエリンは、より好ましくは、前記した群から選択される３以上の分子種を含むものであり、さらにより好ましくは、前記した群から選択される５以上の分子種を含むものである。
　本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤は、好ましくは、経口摂取用（すなわち、経口摂取剤）または経腸投与用（すなわち、経腸投与剤）である。
　本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤は、好ましくは、状態の悪化した皮膚、バリア機能が低下した皮膚に用いられる。
　後述する実施例で示されているように、本発明によれば、皮膚の角化肥厚膜のロリクリンが減少したような皮膚バリア機能の低下状態において、ロリクリンの減少抑制・改善することによって、皮膚バリア機能を保つか、または改善することができる。同様に、後述する実施例で示されているように、本発明によれば、皮膚の角化肥厚膜のトランスグルタミナーゼ３の活性が低下したような皮膚バリア機能の低下状態において、トランスグルタミナーゼ３を活性化することによって、皮膚バリア機能を保つか、または改善することができる。さらに、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化により、角化肥厚膜の形成が促進・構造が強化され、それにより、状態の悪化した皮膚、バリア機能が低下した皮膚を改善することができる。
　このため、本発明による減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤は、より好ましくは、状態の悪化した皮膚、バリア機能が低下した皮膚に用いられる。
用途
　本発明における有効成分であるスフィンゴミエリンは、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少を抑制・改善することができ、また、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３を活性化することができる（後述する実施例）。これにより、角化肥厚膜の形成を促進し、また、未熟な状態の角化肥厚膜の構造を強化することができる。さらに、本発明における有効成分であるスフィンゴミエリンは、皮膚の状態の悪化の予防、抑制もしくは改善効果を有する。
　ここで、皮膚の状態の悪化とは、例えば、皮膚のバリア機能の低下、皮膚の乾燥、皮膚のかさつき、角層の水分量の低下、アトピー性皮膚炎などが包含される。皮膚のバリア機能の低下には、バリア機能の維持も包含される。また、皮膚のバリア機能の低下は、好ましくは、紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の低下である。
　また、ここで、悪化した状態の「予防、抑制または改善」は、そのような状態の、調節、進行の遅延、緩和、発症予防、再発予防などを包含する意味で使用される。
　本発明の別の態様によれば、ロリクリンの減少を抑制・改善、またはトランスグルタミナーゼ３の活性化により、治療、予防または改善しうる状態の治療、予防または改善を図ることができる。
　本発明の好ましい別の一つの態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善方法が提供される。
　また　本発明の好ましい別の一つの態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善方法が提供される。
　本発明の好ましいさらに別の一つの態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制もしくは改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化して、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化することを含む、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善方法が提供される。
　本発明の別の態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制または改善をするための、スフィンゴミエリンが提供される。
　本発明の別の態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３を活性化するための、スフィンゴミエリンが提供される。
　本発明の別の態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進するか、および／またはその構造を強化するための、スフィンゴミエリンが提供される。
　本発明の好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善のための、スフィンゴミエリンの使用が提供される。また本発明のさらに好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善のための経口摂取用または経腸投与用組成物の製造における、スフィンゴミエリンの使用が提供される。ここで、前記の使用は、非治療的使用であることができる。
　本発明の好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化のための、スフィンゴミエリンの使用が提供される。また本発明のさらに好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化のための経口摂取用または経腸投与用組成物の製造における、スフィンゴミエリンの使用が提供される。ここで、前記の使用は、非治療的使用であることができる。
　本発明の好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進するか、および／またはその構造を強化するための、スフィンゴミエリンの使用が提供される。また本発明のさらに好ましい別の一つの態様によれば、皮膚角層角化肥厚膜の形成を促進するか、および／またはその構造を強化するための経口摂取用または経腸投与用組成物医薬の製造における、スフィンゴミエリンの使用が提供される。ここで、前記の使用は、非治療的使用であることができる。
組成物および飲食品
　前記したように、本発明によれば、本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤を含んでなる、経口摂取用または経腸投与用組成物が提供される。また、本発明によれば、本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤を含んでなる、飲食品が提供される。
　このような組成物および飲食品は、例えば、本発明による本発明の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤を、組成物および飲食品の材料成分に添加することを含んでなる製造方法によって製造することができる。
　本発明の経口摂取用または経腸投与用組成物は、好ましくは、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善のために用いられる。すなわち、本発明によれば、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善用組成物が提供される。
　本発明の皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善用組成物は、一つの好ましい態様としては、医薬組成物である。
　本発明において、医薬組成物とは、製剤化のために許容されうる添加剤を併用して、常法に従い、経口製剤または非経口製剤として調製したものである。簡易性の点からは、経口製剤であることが好ましい。経口製剤の場合には、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、徐放剤などの固形製剤、溶液、懸濁液、乳濁液などの液状製剤の形態をとることができる。製剤化のために許容されうる添加剤としては、例えば、賦形剤、安定剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、滑沢剤、甘味料、着色料、香料、緩衝剤、酸化防止剤、ｐＨ調整剤などが挙げられる。
　本発明の飲食品には、必要に応じて、任意の成分を加えることができる。このような任意の添加可能な成分としては、特段の制限はないが、通常、飲食品に配合される成分、甘味料、酸味料、野菜や果物や種実の汁やそのエキス、ビタミン、ミネラル、アミノ酸などの栄養素、乳酸菌、ビフィズス菌、プロピオン酸菌などの有用な微生物やその培養物、オリゴ糖などの機能性をもつ糖類、ローヤルゼリー、コラーゲン、セラミド、グルコサミン、アスタキサンチン、ポリフェノールなどの既存の機能性素材、香料、ｐＨ調整剤、賦形剤、酸味料、着色料、乳化剤、保存料などを配合することができる。
　本発明において、飲食品とは、医薬組成物以外のものであって、溶液、懸濁液、乳濁液、粉末、固体成形物など、経口摂取可能な形態であればよく特に限定されない。具体的には、例えば、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料、発酵乳、アイスクリーム類、クリーム類、チーズ類などの乳製品；清涼飲料、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、ゼリー飲料、ココア、スムージーなどの粉末飲料やスポーツ粉末飲料、栄養強化の粉末飲料、美容用の粉末食品、粉末スープ、蒸しパンのもと、濃縮飲料、アルコール飲料などの飲料類；パン、パスタ、麺、ケーキミックス、唐揚げ粉、パン粉などの小麦粉製品；チョコレート、ガム、飴、クッキー、グミ、スナック、和菓子、ゼリー、プリンなどのデザート菓子などの菓子類；加工調味料、風味調味料、調理ミックスなどの調味料；カレー、バスタソース、ポトフ、シチュー、和風食品のレトルト食品；加工油脂、バター、マーガリン、スプレッド、マヨネーズなどの油脂類；フリーズドライ食品などの即席食品類；農産缶詰、ジャム・マーマレード類、漬け物、煮豆、シリアル、雑炊などの農産加工品；水産加工品；畜産加工品；ピッツア、ドリア、グラタン、惣菜、フライなど冷凍食品；流動食、さらには動物の飼料、タブレット、口腔内に使用する化粧品などが挙げられる。
　本発明の一つの好ましい態様によれば、飲食品は、乳飲料（加工乳を含んでもよい）、発酵乳、清涼飲料、ゼリー飲料、タブレット、美容用の粉末食品、粉末飲料、流動食、液状の調製粉乳であり、より好ましい態様によれば、飲食品は、乳飲料、発酵乳、清涼飲料、ゼリー飲料、タブレット、美容用の粉末食品であり、さらに好ましい態様によれば、飲食品は、乳飲料（加工乳を含んでもよい）、発酵乳である。
　また、飲食品には、機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、健康食品、特定保健用食品、機能性表示食品、栄養機能食品、病者用食品、乳幼児用調製粉乳、妊産婦もしくは授乳婦用粉乳、または疾病リスク低減表示を付した飲食品のような分類のものも包含される。本発明の一つの好ましい態様によれば、飲食品は、機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、特定保健用食品、機能性表示食品、または疾病リスク低減表示付き食品である。
　なお、ここで、疾病リスク低減の表示とは、疾病リスクを低減する可能性のある飲食品の表示であって、ＦＡＯ／ＷＨＯ合同食品規格委員会（コーデックス委員会）の定める規格に基づいて、またはその規格を参考にして、定められた表示または認められた表示であることができる。
　よって、本発明の飲食品は、例えば、皮膚状態の悪化の改善または緩和を期待する消費者に適した食品、皮膚の状態悪化の改善に適した食品、すなわち、所謂、特定保健用食品もしくは機能性表示食品として提供することができる。
　本発明の別の態様によれば、皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善をする機能が表示された飲食品が提供されうる。
　飲食品および組成物における有効成分の含有量は、組成物の種類、形態や、予防・改善の目的などによって変化させることができるため、一律に規定することは難しいが、本発明の組成物では、成人（体重：６０ｋｇ）が１日当たり、スフィンゴミエリンを、０．５～１５００ｍｇ、好ましくは１～１０００ｍｇ、より好ましくは５～５００ｍｇで摂取可能な有効量に調整されたものであることができる。
　スフィンゴミエリンの含量は、慣用の方法により測定することができるが、例えば、液体クロマトグラフィーを用い、カラムとして、ＡＱＵＡＳＩＬ　ＳＰ１００（４．６Ｘ２５０ｍｍ、センシュー科学社）を用いて測定することができる。
　このとき、移動相として、例えば、０．５ｍＭリン酸－クエン酸緩衝液（ｐＨ３．０）とメタノールを５対９５の割合で混合させた溶液を用いるとよい。測定時間を２０分間に設定し、移動相の流速を０．６ｍＬ／分、カラム温度を４０℃に設定し、吸光度を２０５ｎｍとして検出することができる。標準物質として、例えば、スフィンゴミエリン（乳由来、長良サイエンス社製）を用いることができ、面積比により定量することができる。
　本発明の別の態様では、飲食品および組成物における有効成分の含量は、一包装形態当たりで規定することもでき、例えば、飲食品の場合、スフィンゴミエリンの含量は５～１５００ｍｇ、好ましくは６～１０００ｍｇ、より好ましくは７～５００ｍｇで含むものであり、また、組成物の場合、スフィンゴミエリンの含有量は０．５～1５００ｍｇ、好ましくは１～１０００ｍｇ、より好ましくは５～５００ｍｇで含むものであることができる。また、一包装形態当たりの量（含量）は、１回の摂取量に限らず、複数回分または複数日分（例えば、３０日分）の摂取量を包括してもよく、例えば、飲食品の場合、スフィンゴミエリンの含量は５～４５０００ｍｇ、好ましくは６～３００００ｍｇ、より好ましくは７～１５０００ｍｇで含むものであり、また、組成物の場合、スフィンゴミエリンの含量は０．５～４５０００ｍｇ、好ましくは１～３００００ｍｇ、より好ましくは５～１５０００ｍｇで含むものであることができる。
　従来の一般的な乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、リン脂質が２０ｍｇで含まれるが、本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、リン脂質が２５～３０００ｍｇで含まれ、好ましくは３０～２５００ｍｇ、より好ましくは４０～２０００ｍｇ、さらに好ましくは、５０～１５００ｍｇで含まれるものであることができる。また、従来の一般的な乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、スフィンゴミエリンが６ｍｇで含まれるが、本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質の１ｇ当たり、スフィンゴミエリンが７～１５００ｍｇで含まれ、好ましくは８～１２５０ｍｇ、より好ましくは９～１０００ｍｇ、さらに好ましくは、１０～７５０ｍｇで含まれるものであることができる。
　すなわち、本発明の一つの好ましい態様において、スフィンゴミエリン含量が意図的に高められた乳飲料や発酵乳を使用することができる。
　本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質を通常量で含む（例えば、脂質を３重量％で含む）、スフィンゴミエリンが０．２～６０ｍｇ／ｇで含まれ、好ましくは０．２５～５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは０．３～４０ｍｇ／ｇ、さらに好ましくは、０．３５～３０ｍｇ／ｇで含まれるものであることができる。
　一方、本発明の乳飲料、発酵乳では、脂質を少量で含む（例えば、脂質を１重量％で含む低脂肪の）場合、スフィンゴミエリンが０．０５～６０ｍｇ／ｇで含まれ、好ましくは０．１～５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは０．１５～４０ｍｇ／ｇ、さらに好ましくは、０．２～３０ｍｇ／ｇで含まれるものであることができる。
　そして、本発明の乳飲料、発酵乳、清涼飲料、ゼリー飲料、タブレット、美容用の粉末食品では、脂質を殆ど含まない（無脂肪の）場合、スフィンゴミエリンが０．０２～６０ｍｇ／ｇで含まれ、好ましくは０．０４～５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは０．０６～４０ｍｇ／ｇ、さらに好ましくは、０．０８～３０ｍｇ／ｇで含まれるものであることができる。
　従って、本発明の一つのさらに好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、乳飲料や発酵乳が提供され、さらに、このような乳飲料や発酵乳を含む組成物もしくは飲食品が提供される。このような組成物もしくは飲食品としては、例えば、ヨーグルトが挙げられる。
　例えば、ヨーグルトの場合、追加的なスフィンゴミエリンを含むヨーグルトが提供されることができ、これは、ヨーグルトに本来的に含まれうるスフィンゴミエリンのみではなく、ヨーグルトに対してスフィンゴミエリンを別途加えて、意図的にスフィンゴミエリンの濃度を高めたヨーグルトを意味する。このとき、ここでいう「追加的なスフィンゴミエリン」とは、ヨーグルトに本来的に含まれうるスフィンゴミエリンではなく、意図的にスフィンゴミエリンの濃度を高めたヨーグルトを作る際に加えられる、別途加えるスフィンゴミエリンをいう。
　よって、本発明の別の好ましい態様によれば、本発明によるロリクリンの減少抑制・改善剤、本発明によるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または本発明による角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、ヨーグルトが提供される。
　また本発明の別の一つの好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、ロリクリンの減少抑制・改善作用を有するヨーグルトが提供される。
　本発明の別の一つの好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、トランスグルタミナーゼ３の活性化作用を有するヨーグルトが提供される。
　本発明の別の一つの好ましい態様によれば、追加的なスフィンゴミエリンを含む、角化肥厚膜の形成促進・構造強化作用を有するヨーグルトが提供される。
　本発明の別の態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、ロリクリンの減少抑制・改善方法が提供される。
　ここで、ロリクリンの量とは、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの存在量を意味し、例えば、ロリクリン遺伝子の発現量で評価することができる。
　本発明の別の態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法が提供される。
　ここで、トランスグルタミナーゼ３の活性は、例えば、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量で評価することができる。
　本発明の別の態様によれば、スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制および改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化することを含む、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法が提供される。
　なお、ここで、好ましくは、前記方法は、医療用途を除いたものである。また、前記の対象とは、好ましくは、ヒト、またはヒト以外の哺乳類である。
　そして、前記方法は、好ましくはスフィンゴミエリンを２日以上で継続して経口摂取させるか、または経腸投与する、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象のためのロリクリンの減少抑制・改善方法、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象のための皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法、または皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法であることができる。
　以下において、本発明を下記の実施例によって詳細に説明するが、本発明は、これらに限定されるものではない。
試験：　紫外線の照射下における皮膚のバリア機能の悪化におけるスフィンゴミエリンの影響
　ヘアレスマウスに、紫外線（ＧＬ２０ＳＥ、三共電気株式会社製）を照射して、皮膚のバリア機能を悪化させ、スフィンゴミエリンの連続経口摂取の影響を評価した。
＜実験方法＞
　（１）紫外線の照射による皮膚のバリア機能の悪化
　ヘアレスマウス（Ｈｏｓ：ＨＲ－１、雌、８週齢）を群分けしてから、１週間後に、２０ｍＪ／ｃｍ２の条件で、紫外線（ＵＶ－Ｂ）を照射した。
　試験では、各測定と皮膚の採取に個体が必要となるため、合計で４８匹のマウスを用い、各群のマウスを８匹ずつとし、群わけした。
　（２）群構成および試験手順
　前記（１）で作成した紫外線照射モデル動物の試験系を用いて、スフィンゴミエリン（純度９８％、長良サイエンス社製）の経口摂取（経口投与）による皮膚の遺伝子発現への影響を評価した。
　試験に供した各群は、下記のような条件とした。
　群分けの日から９日間で経口投与した。
　　(i)　対照０日目群
　　(ii)　対照１日目群
　　(iii)　対照２日目群
　　(iv)　スフィンゴミエリン摂取０日目群
　　(v)　スフィンゴミエリン摂取１日目群
　　(vi)　スフィンゴミエリン摂取２日目群
　対照０、１、２日目群では、通常飼料を摂取し、溶媒（エタノールの５％水溶液）を１０ｍＬ／ｋｇ－ＢＷ／ｄａｙで経口投与した。また、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群では、スフィンゴミエリン（純度：９８％、長良サイエンス社）：１４６ｍｇ／１０ｍＬ－溶媒（エタノール５％水溶液）を１０ｍＬ／ｋｇ－ＢＷ／ｄａｙで経口投与した。
　試験は、具体的には、図１の流れに沿って、照射前（０日目）、照射１日目、および照射２日目に、所定の群について、ロリクリン遺伝子とトランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量を定量した。このとき、トランスグルタミナーゼ１遺伝子とインボルクリン遺伝子の発現量も定量した。
　（ロリクリン、トランスグルタミナーゼ３、トランスグルタミナーゼ１およびインボルクリンの各遺伝子の発現量の定量法）
　各個体から採取した皮膚サンプルよりＲＮｅａｓｙ Ｆｉｂｉｒｏｕｓ Ｔｉｓｓｕｅ Ｍｉｎｉ ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）を用いて総ＲＮＡの抽出を行い、皮膚から抽出した１．５μｇ当量の総ＲＮＡから、ＲｉｖｅｒｔＡｉｄ Ｆｉｒｓｔ Ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ社）を用いて、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）合成と逆転写反応を行った。
　合成したｃＤＮＡは、ＲＴ－ＰＣＲ法により、プライマーはＴａｑｍａｎＧｅｎｅ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ａｓｓａｙ（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いて、７５００リアルタイムＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製）により、各サンプルのターゲット遺伝子であるロリクリン（Ｌｏｒｉｃｒｉｎ）(Ａｓｓａｙ　ＩＤ： Ｍｍ０１９６２６５０＿ｓ１)、トランスグルタミナーゼ３（Ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ　３）(Ａｓｓａｙ　ＩＤ：Ｍｍ００４３６９９９＿ｍ１)、トランスグルタミナーゼ１（Ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ　１）(Ａｓｓａｙ　ＩＤ： Ｍｍ００４９８３７５＿ｍ１)、および、インボルクリン（Ｉｎｖｏｌｃｒｉｎ）(Ｍｍ００５１５２１９＿ｓ１)のｍＲＮＡ発現量の測定を行った。
　同時に、内部標準として、グリセルアルデヒド－３－リン酸デヒドロゲナーゼ（ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ－３－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＧＡＰＤＨ））(Ａｓｓａｙ　ＩＤ： Ｍｍ９９９９９９１５＿ｇ１)のｍＲＮＡ発現量の測定をした。
　定量化はΔΔＣｔ法にて行い、各群の皮膚サンプルのターゲット遺伝子発現量を対照０日目群のターゲット遺伝子発現量に対する、各群のターゲット遺伝子発現量の比率を相対発現量として算出した。
　具体的には、下記のような計算式を使用して、相対発現量を算出した。
 
ΔＣｔ＝（各個体サンプルのターゲット遺伝子のＣｔ値）―（各個体サンプルのＧＡＰＤＨ遺伝子のＣｔ値）
 
ΔΔＣｔ＝（各個体サンプルのターゲット遺伝子のΔＣｔ値）―（対照０日目群のΔＣｔ平均値）
 
遺伝子発現量＝２－ΔΔＣｔ
 
相対発現量＝（各個体サンプルのターゲット遺伝子の２－ΔΔＣｔ）／（対照０日目群の２－ΔΔＣｔ平均値）
 
（３）試験結果
　ロリクリン遺伝子とトランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量により、角化肥厚膜の形成の促進や構造の強化に関連した遺伝子の発現の変化を評価した。
　ここで対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、ロリクリン遺伝子の発現量が高値であれば、ロリクリンの発現の低下が抑制されたことを意味する。また、対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量が高値であれば、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現の上昇が促進されたことを意味する。
　一方、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量は、対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量が低値であれば、トランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現の上昇が抑制されたことを意味する。また、対照０、１、２日目群に比べて、スフィンゴミエリン摂取０、１、２日目群において、インボルクリン遺伝子の発現量が低値であれば、インボルクリン遺伝子の発現の上昇が抑制されたことを意味する。
　結果は、図２および３に示されたとおりであった。
　図２（Ａ）から分かるとおり、対照１日目群（紫外線の照射１日後）に比べて、スフィンゴミエリン摂取１日目群において、ロリクリン遺伝子の発現量は高値であった。
　図２（Ｂ）から分かるとおり、対照１日目群（紫外線の照射１日後）と　対照２日目群（紫外線の照射２日後）に比べて、スフィンゴミエリン群摂取１日目群と　スフィンゴミエリン群摂取２日目群において、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現量は高値であった。
　図３（Ａ）から分かるとおり、対照１・２・３日目群（control群）（紫外線の照射１・２・３日後）に比べて、スフィンゴミエリン摂取１・２・３日目群において、それぞれトランスグルタミナーゼ１遺伝子の発現量は低値であった。
　図３（Ｂ）から分かるとおり、対照１・２・３日目群（ＳＭ群）（紫外線の照射１・２・３日後）に比べて、スフィンゴミエリン摂取１・２・３日目群において、それぞれインボルクリン遺伝子の発現量は低値であった。
　これらの結果から、スフィンゴミエリンを経口摂取することにより、紫外線照射によるロリクリン遺伝子の発現の低下が抑制されると共に、トランスグルタミナーゼ３遺伝子の発現の上昇が促進され、角化肥厚膜の形成の促進や構造の強化がなされることが示唆された。
　また、スフィンゴミエリンを経口摂取することにより、トランスグルタミナーゼ１遺伝子やインボルクリン遺伝子の発現の上昇は促進されなかったことから、スフィンゴミエリンの経口摂取が、角化肥厚膜の形成の促進や構造の強化に関連した特異的な遺伝子（ここではロリクリン遺伝子やトランスグルタミナーゼ３遺伝子）の発現促進に特異的に寄与することが示唆された。
 

Claims (17)

  1. 　スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善剤。
  2. 　スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化剤。
  3. 　スフィンゴミエリンを有効成分とする、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤。
  4. 　角化肥厚膜の形成促進・構造強化が、スフィンゴミエリンによる皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制・改善とトランスグルタミナーゼ３の活性化によるものである、請求項３に記載の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤。
  5. 　スフィンゴミエリンが、乳由来のスフィンゴミエリンである、請求項１～４のいずれか一項に記載の減少抑制・改善剤、活性化剤または形成促進・構造強化剤。
  6. 　請求項１または５に記載のロリクリンの減少抑制・改善剤、請求項２または５に記載のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または請求項３～５のいずれか一項に記載の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、経口摂取用または経腸投与用組成物。
  7. 　皮膚の状態の悪化の予防、抑制または改善のために用いられる、請求項６に記載の組成物。
  8. 　皮膚の状態の悪化が、皮膚のバリア機能の低下である、請求項７に記載の組成物。
  9. 　皮膚のバリア機能の低下が、紫外線の照射によるものである、請求項７または８に記載の組成物。
  10. 　１日当たり０．５～１５００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含む、請求項６～９のいずれか一項に記載の組成物。
  11. 　請求項１または５に記載のロリクリンの減少抑制・改善剤、請求項２または５に記載のトランスグルタミナーゼ３の活性化剤、または請求項３～５のいずれか一項に記載の角化肥厚膜の形成促進・構造強化剤を含んでなる、飲食品。
  12. 　請求項６～９のいずれか一項に記載の組成物を含んでなる、飲食品。
  13. 　一包装形態当たり０．２～４５０００ｍｇ摂取可能な量のスフィンゴミエリンを含む、請求項１１または１２に記載の飲食品。
  14. 　機能性食品、健康栄養食品、サプリメント、特定保健用食品、機能性表示食品または疾病リスク低減表示付き食品である、請求項１１～１３のいずれか一項に記載の飲食品。
  15. 　スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの量が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、ロリクリンの減少抑制・改善方法。
  16. 　スフィンゴミエリンを、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性が低下した対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することを含む、皮膚角層角化肥厚膜におけるトランスグルタミナーゼ３の活性化方法。
  17. 　スフィンゴミエリンを、皮膚角層における角化肥厚膜の形成促進・構造強化が望まれる対象に、経口摂取させるか、または経腸投与することによって、皮膚角層角化肥厚膜におけるロリクリンの減少抑制もしくは改善を行い、トランスグルタミナーゼ３を活性化することを含む、皮膚角層角化肥厚膜の形成促進・構造強化方法。
     
     
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007507492A (ja) * 2003-10-02 2007-03-29 ドゥサン コーポレーション 皮膚を保護するための組成物

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DUAN,JINGJING ET AL.: "Dietary sphingolipids improve skin barrier functions via the upregulation of ceramide synthases in the epidermis", EXPERIMENTAL DERMATOLOGY, vol. 21, no. 6, 2012, pages 448 - 452 *
GONDRAN, C. ET AL.: "Studies of transglutaminase isoforms modulation in normal human keratinocytes and skin", JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY, vol. 129, no. Suppl.2, 2009, pages S64 *
HARUTA-ONO YUKO ET AL.: "Investigation into the dosage of dietary sphingomyelin concentrate in relation to the improvement of epidermal function in hairless mice", ANIM SCI J, vol. 83, no. 1-2, 2012, pages 178 - 183 *
HATTORI, FUMIHIRO ET AL.: "Possible roles of host defense protein S 100A7 /psoriasin in skin barrier functions", JOURNAL OF DERMATOLOGICAL SCIENCE, vol. 69, no. 2, 2013, pages e48 - e49, XP028971685, DOI: doi:10.1016/j.jdermsci.2012.11.450 *
KOJI URAZONO ET AL.: "Shigaisen (UAB) Shosha ni yoru Hifu Shogai ni Taisuru Sphingomyelin Noshukubutsu no Eikyo", THE JAPANESE SOCIETY OF NUTRITION AND FOOD SCIENCE TAIKAI KOEN YOSHISHU, vol. 68th, 30 April 2014 (2014-04-30), pages 296 *
YUKO HARUTA: "Effect of bovine milk and dairy products on skin health", BULLETIN OF JAPAN DAIRY TECHNICAL ASSOCIATION, vol. 63, 12 March 2014 (2014-03-12), pages 38 - 51 *

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