TW201639550A - 兜甲蛋白減少之抑制／改善劑、轉麩胺醯胺酶３活化劑及皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進／構造強化劑 - Google Patents

Abstract

本發明係關於以鞘磷脂(Sphingomyelin)作為有效成分之皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、轉麩胺醯胺酶3活化劑及皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑、組成物及飲食品。依據本發明，可抑制或改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少，且可實現皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活化化，進而藉此可實現促進、構造強化皮膚角質層角化肥厚膜之形成。而且藉由該等作用，可安全且簡易地經濟地預防、抑制或改善皮膚之障蔽功能降低。

Description

兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、轉麩胺醯胺酶3活化劑及皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑 [相關申請案參考]

本申請案係基於先前之日本國專利申請之特願2014-264578號(申請日：2014年12月26日)者，並主張其優先權之利用者，其揭示內容全體藉由參考併入本發明中。

本發明係關於皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、及皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化劑。且本發明有關皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑。該等於皮膚狀態之惡化之預防、抑制或改善方面有用。

表皮之角質層係由表皮角化細胞(keratinocytes)終末分化(terminal differentiation)之角質層細胞與包圍其之角質細胞間脂質所構成。細胞間脂質係由神經醯胺、膽固醇、脂肪酸等構成，藉由脂質層與水分子層形成層狀構 造。

另一方面，角質層細胞包含與保濕有關連之成分之角蛋白纖維或胺基酸等之天然保濕因子。而且，此藉由所稱之角化肥厚膜(角質肥化膜，亦稱為角化包膜(cornified envelope)(CE))之各種蛋白質之交聯，被非常強韌之不溶性底層結構包裹，對於物理或化學刺激非常安定。構成角化肥厚膜之蛋白質中，尤其是於顆粒層所形成之兜甲蛋白扮演強化該底層構造之角色。該構造係藉由使蛋白質交聯接著酵素之轉麩胺醯胺酶3對於以兜甲蛋白以外之蛋白質之交聯反應所形成之未成熟角化肥化膜附著兜甲蛋白，形成成為角化肥厚膜之支架之地基而完成。

皮膚因紫外線之損傷(damage)而誘發皮膚之轉換率異常，尤其於最外層之角質層容易受其影響。已知因角質細胞之損傷或不全角化而形成不完全之角化肥化膜時，表皮角質層之障蔽機能降低，保持於角質層中之水分會流失。

基於角化包膜(角化肥化膜)之形成成熟/促進之觀點，於例如日本特開2008-303185號公報中揭示特定之吡咯啶酮之使用。此處係探討使未成熟之角化包膜成熟化。然而，就本發明人等所知，關於藉由抑制兜甲蛋白因皮膚損傷等之減少，並使轉麩胺醯胺酶3活化，而促進角化肥厚膜之形成，強化其構造之檢討不太有進展。而且，就本發明人等所知，因此關於經口攝取鞘脂質中之鞘磷脂迄今尚未知。

於日本特開2009-084244號公報中，揭示藉由碳數10~36之飽和游離脂肪酸溶液之連續經口攝取，確認到皮膚障蔽機能之改善效果、神經醯胺輛之增加效果、兜甲蛋白基因之表現增加效果。然而，其中針對經口攝取鞘磷脂並未有任何記載或教示。

日本特開2007-117793號公報中，揭示含有鞘磷脂作為有效成分之醫藥及飲食品，並揭示因鞘磷脂之唾液黏蛋白(sialomucin)分泌促進作用、抗過敏作用、抗氧化作用等各種作用。然而，其中針對抑制鞘磷脂減少之作用或轉麩胺醯胺酶3活化作用，並未有任何記載或教示。

於Hasegawa等人之文獻(Hasegawa T et al.,“Dietary glucosylceramide enhances cornified envelope formation via transglutaminase expression and involucrin production”,Lipids(2011)46,pp.529-535)中報導對小鼠投予源自魔芋之鞘脂質的糖質神經醯胺時，觀察到小鼠之皮膚障蔽機能之改善、轉麩胺醯胺酶1之表現上升、外皮蛋白(involucrin)之產生上升、轉麩胺醯胺酶1及3之表現促進等之作用。然而，糖質神經醯胺係構造與鞘磷脂不同者，且確認到與鞘磷脂投予時之作用傾向全然不同。亦即，投予鞘磷脂時，實際上確認到轉麩胺醯胺酶1及外皮蛋白之維持或降低(本發明之實施例)，此與投予糖質神經醯胺時為全然相反之結果。

如此，關於藉由經口攝取鞘磷脂，而抑制兜 甲蛋白之減少、使轉麩胺醯胺酶3活化，藉此促進角化肥厚膜之形成，而強化其構造，就本發明人等所知，係迄今未知者。

本發明人等如今意外地發現藉由經口攝取鞘脂質尤其是鞘磷脂，可抑制兜甲蛋白之減少，使轉麩胺醯胺酶3活化。本發明人等著眼於藉由抑制兜甲蛋白之減少，使轉麩胺醯胺酶3活化，而促進角化肥厚膜之形成且強化未成熟狀態之角化肥厚膜之構造。進而發現，藉此可改善皮膚之惡化狀態，其中可抑制紫外線照射下之皮膚障蔽機能之降低。本發明係基於該等見解而完成者。

因此，本發明之目的係提供皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑及皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化劑。又本發明之目的係提供皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑。進而本發明之目的亦係提供可安全且簡易、經濟地預防、抑制或改善因紫外線照射下等引起之皮膚障蔽機能之降低之組成物及飲食品。

亦即，依據本發明，提供以下發明。

<1>一種皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑，係以鞘磷脂作為有效成分。

<2>一種皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化劑，係以鞘磷脂作為有效成分。

<3>一種皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑，係以鞘磷脂作為有效成分。

<4>如前述<1>之角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑，其中角化肥厚膜之形成促進/構造強化係藉由鞘磷脂而抑制/改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少及藉由轉麩胺醯胺酶3之活化者。

<5>如前述<1>~<4>中任一項之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑，其中鞘磷脂係源自乳之鞘磷脂。

<6>一種經口攝取用或經腸投予用組成物，其係包含如前述<1>或<5>之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、如前述<2>或<5>之轉麩胺醯胺酶3之活化劑、或如前述<3>~<5>中任一項之角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑而成。

<7>如前述<6>之組成物，其係用於預防、抑制或改善皮膚狀態之惡化。

<8>如前述<7>之組成物，其中皮膚狀態之惡化係皮膚之障蔽機能之降低。

<9>如前述<7>或<8>之組成物，其中皮膚之障蔽機能之降低係因紫外線照射所致者。

<10>如前述<6>~<9>中任一項之組成物，其包含每日0.5~1500mg可攝取量之鞘磷脂。

<11>一種飲食品，其係包含如前述<1>或<5>之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、如前述<2>或<5>之轉麩 胺醯胺酶3之活化劑、或如前述<3>~<5>中任一項之角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑而成。

<12>一種飲食品，其係包含如前述<6>~<9>中任一項之組成物而成。

<13>如前述<11>或<12>之飲食品，其包含每一包裝形態可攝取0.2~45000mg之量之鞘磷脂。

<14>如前述<11>~<13>中任一項之飲食品，其係機能性食品、健康營養食品、補充品、特定保健用食品、機能性顯示食品或附疾病風險減低顯示之食品。

<15>一種兜甲蛋白減少之抑制/改善方法，其包含對皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之量降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。

<16>一種皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活化方法，其包含對皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活性降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。

<17>一種皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化方法，其包含對期望皮膚角質層之角化肥厚膜之形成促進/構造強化之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂，而進行抑制或改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少，使轉麩胺醯胺酶3活化。

依據本發明，可抑制/改善皮膚角質層角化肥 厚膜之兜甲蛋白減少，且可使皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化。藉由抑制兜甲蛋白之減少、使轉麩胺醯胺酶3活化，而可促進角化肥厚膜之形成，且可強化未成熟狀態之角化肥厚膜之構造。尤其，本發明之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑及組成物，可有效地進行紫外線照射下之皮膚障蔽機能降低之預防、抑制或改善。進而，本發明之產生促進劑及組成物為經口或經腸路徑攝取者，且由於原料係源自以往作為食品之具有使用經驗者，故為安全且簡易，且經濟性亦優異者。

圖1係顯示實施例之試驗流程之概念圖。

圖2係顯示實施例中兜甲蛋白基因之表現量之推移與轉麩胺醯胺酶3基因之表現量之推移的圖表。其中，圖2(A)顯示兜甲蛋白基因之表現量之推移，圖2(B)顯示轉麩胺醯胺酶3基因之表現量之推移。又，圖中，*係表示對於對照群具有有意義差(P<0.05)，#表示對於第0天具有有意義差(P<0.05)。

圖3係顯示實施例中轉麩胺醯胺酶1基因之表現量之推移與外皮蛋白基因之表現量之推移之圖表。其中，圖3(C)顯示轉麩胺醯胺酶1基因之表現量之推移，圖3(D)顯示外皮蛋白基因之表現量之推移。又，圖中，*係表示對 於對照群具有有意義差(P<0.05)，#表示對於第0天具有有意義差(P<0.05)。

以下針對本發明之實施形態加以說明。

皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑

本發明之皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑係如前述，以鞘磷脂作為有效成分者。

此處，所謂「作為有效成分」意指本發明之減少之抑制/改善劑含有於生體內之皮膚角質層角化肥厚膜發揮抑制或改善兜甲蛋白之減少之作用之充分使用量(亦即有效量)的鞘磷脂。

又，此處所謂「兜甲蛋白減少之抑制/改善」意指抑制或改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少，亦可包含抑制或延遲減少之進行、停止及維持減少、抑制減少並轉為增加之任一意義。進而，「兜甲蛋白減少之抑制/改善」亦包含減少之預防。

「兜甲蛋白」係皮膚角化肥厚膜之底層構造之主要構成蛋白質，例如後述之實施例所記載般，可以兜甲蛋白基因之表現狀態作為指標，評價皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少狀態。

轉麩胺醯胺酶3之活化劑

本發明之皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活化劑係如前述，以鞘磷脂作為有效成分者。

此處，所謂「作為有效成分」意指本發明之活化劑含有於生體內之皮膚角質層角化肥厚膜發揮使轉麩胺醯胺酶3活化之作用之充分使用量(亦即有效量)的鞘磷脂。

又，此處，所謂「轉麩胺醯胺酶3之活化」係包含使皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之酵素活性活化、於活性降低之狀態後提高活性、與使活性維持高的狀態之意義使用。

「轉麩胺醯胺酶3」係使兜甲蛋白附著於角化肥厚膜，維持使角化肥厚膜之底層構造強化之作用的酵素，可以例如如後述實施例記載般，以轉麩胺醯胺酶3基因之表現狀態為指標，評價皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活性。

皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑

本發明之皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑係如前述以鞘磷脂為有效成分者。

此處，所謂「作為有效成分」意指本發明之形成促進/構造強化劑含有顯示促進皮膚角質層角化肥厚膜之形成及/或強化其構造之效果之充分使用量(亦即有效量)的鞘磷脂。

且，此處所謂「皮膚角質層角化肥厚膜之形 成促進/構造強化」係以包含促進皮膚角質層角化肥厚膜之形成、使未成熟之角化肥厚膜成熟化、及強化角化肥厚膜之構造之意義使用。

依據本發明之較佳形態，關於角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑，係角化肥厚膜之形成促進/構造強化係藉由鞘磷脂抑制/改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白與藉由轉麩胺醯胺酶3之活化者。

鞘磷脂

本說明書中，鞘磷脂係鞘脂質之一。此處鞘脂質為源自天然者，舉例為例如源自牛乳、山羊乳、羊乳、馬乳等之乳者、源自蛋黃者、源自米、玉米、穀物者、源自摩芋、源自甜菜等，較佳為源自乳者，更好為源自牛乳者。因此，本發明中可使用之鞘磷脂與前述鞘脂質同樣，為源自天然者，較好為源自乳者，更好為源自牛乳者。鞘磷脂亦可由天然原料利用慣用方法調製，亦可使用市售品。

依據本發明之較佳樣態，鞘磷脂係源自乳之鞘磷脂。

本發明中可使用之源自乳之鞘磷脂較好為包含自下述所組成之群選擇之一種以上之分子種者：肉豆蔻基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C14：0)、二十三碳烯基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C23：0)、棕櫚基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C16：0)、二十三碳烯醯基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C23：1)、硬脂基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C18：0)、木蠟基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C24：0)、花生基 鞘磷醯膽鹼(d18：1-C20：0)、二十四碳烯基(nervonyl)鞘磷醯膽鹼(d18：1-C24：1)、山萮基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C22：0)、及蠟基鞘磷醯膽鹼(d18：1-C26：0)。前述源自乳之鞘磷脂更好為包含自前述之群選擇之3種以上之分子種者，又更好為包含自前述之群選擇之5種以上之分子種者。

本發明之減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑較好為經口攝取用(亦即經口攝取劑)或經腸投予用(亦即經腸投予劑)。

本發明之減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑較好用於狀態惡化之皮膚、障蔽機能降低之皮膚。

如後述之實施例所示，依據本發明，如皮膚之角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之皮膚障蔽機能之降低狀態下，藉由抑制/改善兜甲蛋白減少，可保有或改善皮膚障蔽機能。同樣地，如後述之實施例所示，依據本發明，如皮膚之角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活性降低之皮膚障蔽機能之降低狀態下，藉由使轉麩胺醯胺酶3活化，可保有或改善皮膚障蔽機能。再者，藉由抑制/改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少與轉麩胺醯胺酶3之活化，而促進角化肥厚膜之形成/強化構造，藉此，可改善狀態惡化之皮膚、障蔽機能降低之皮膚。

因此，本發明之減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑更好用於狀態惡化之皮膚、障蔽機能降低之皮膚。

用途

本發明中之有效成分的鞘磷脂可抑制/改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少，且可使皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化(後述之實施例)。藉此，可促進角化肥厚膜之形成，且強化未成熟狀態之角化肥厚膜之構造。進而，本發明中之有效成分的鞘磷脂具有預防、抑制或改善皮膚狀態之惡化之效果。

此處，所謂皮膚狀態之惡化包含例如皮膚之障蔽機能降低、皮膚之乾燥、皮膚粗糙、角質層之水分量降低、異位性皮膚炎等。皮膚之障蔽機能降低亦包含障蔽機能之維持。且，皮膚障蔽機能之降低較好為紫外線照射下之皮膚障蔽機能之降低。

又，此處，惡化狀態之「預防、抑制或改善」係以包含該等狀態之調節、進展之延遲、緩和、發病預防、復發預防等之意義使用。

依據本發明之另一樣態，藉由抑制/改善兜甲蛋白之減少或轉麩胺醯胺酶3之活化，可實現欲治療、預防或改善之狀態之治療、預防或改善。

依據本發明之較佳另一樣態，提供皮膚狀態之惡化之預防、抑制或改善方法，包含對皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之量降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。

又，依據本發明之較佳另一樣態，提供皮膚 狀態之惡化之預防、抑制或改善方法，包含對皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活性降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。

依據本發明之較佳另一樣態，提供皮膚狀態之惡化之預防、抑制或改善方法，包含對期望皮膚角質層之角化肥厚膜之形成促進/構造強化之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂，而進行抑制或改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少，使轉麩胺醯胺酶3活化，使皮膚角質層之角化肥厚膜之形成促進/構造強化。

依據本發明之另一樣態，提供用以抑制或改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之鞘磷脂。

依據本發明之另一樣態，提供用以使皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化之鞘磷脂。

依據本發明之另一樣態，提供用以促進皮膚角質層角化肥厚膜之形成及/或強化其構造之鞘磷脂。

依據本發明之較佳另一樣態，提供鞘磷脂之使用，係用以抑制/改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少。又依據本發明之進而較佳另一樣態，提供鞘磷脂之使用，係用於製造用以抑制/改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少之經口攝取用或經腸投予用組成物。此處，前述之用途可為非治療使用。

依據本發明之較佳另一樣態，提供鞘磷脂之使用，係用以使皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化。又依據本發明之進而較佳另一樣態，提供鞘磷脂之 使用，係用於製造用以使皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化之經口攝取用或經腸投予用組成物。此處，前述之用途可為非治療使用。

依據本發明之較佳另一樣態，提供鞘磷脂之使用，係用以促進皮膚角質層角化肥厚膜之形成及/或強化其構造。又依據本發明之進而較佳另一樣態，提供鞘磷脂之使用，係用於製造用以促進皮膚角質層角化肥厚膜之形成及/或強化其構造之經口攝取用或經腸投予用組成物醫藥。此處，前述之使用可為非治療使用。

組成物及飲食品

如前述，依據本發明，提供包含本發明之減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑之經口攝取用或經腸投予用組成物。且，依據本發明，提供包含本發明之減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑之飲食品。

如此之組成物及飲食品可藉由例如包含將本發明之減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑添加於組成物及飲食品之材料成分中之製造方法而製造。

本發明之經口攝取用或經腸投予用組成物較好用於預防、抑制或改善皮膚狀態之惡化。亦即，依據本發明，提供皮膚狀態惡化之預防、抑制或改善用組成物。

本發明之皮膚狀態惡化之預防、抑制或改善 用組成物之一較佳樣態係醫藥組成物。

本發明中，所謂醫藥組成物可併用用以製劑化所容許之添加劑，依據常用方法，作為經口製劑或非經口製劑而調製者。基於簡易性之方面，較好為經口製劑。經口製劑時，可為錠劑、散劑、細粒劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、緩釋劑等之固體製劑、溶液、懸浮液、乳濁劑等之液狀製劑之形態。用以製劑化所容許之添加劑舉例為例如賦形劑、安定劑、防腐劑、濕潤劑、乳化劑、滑澤劑、甜味劑、著色劑、香料、緩衝劑、抗氧化劑、pH調整劑等。

本發明之飲食品中，根據需要可添加任意成分。此等任意之可添加成分並未特別限制，可調配通常飲食品中所調配之成分、甜味料、酸味料、蔬菜或水果或堅果之汁或其萃取物、維他命、礦物質、胺基酸等之營養素、乳酸菌、比菲氏菌、丙酸菌等之有用微生物或其培養物、寡糖等之具有機能性之糖類、蜂王漿、膠原蛋白、神經醯胺、葡萄糖胺、蝦青素、多酚等之既有機能性材料、香料、pH調整劑、賦形劑、酸味料、著色料、乳化劑、保存劑等。

本發明中，所謂飲食品為醫藥組成物以外者，只要為溶液、懸浮液、乳濁劑、粉末、固體成形物等之可經口攝取之形態則未特別限制。具體而言舉例為例如乳飲料、優格類、乳酸菌飲料、發酵乳、冰淇淋類、乳脂類、奶酪類等之乳製品；清涼飲料、果汁飲料、蔬菜飲 料、豆乳飲料、咖啡飲料、茶飲料、果凍飲料、可可、冰沙等之粉末飲料或運動粉末飲料、營養強化之粉末飲料、美容用之粉末食品、湯粉末、饅頭、與濃縮飲料、酒精飲料等之飲料類；麵包、義大利麵、麵、蛋糕抹醬、油炸粉、麵包粉等之小麥粉製品；巧克力、口香糖、飴、餅乾、軟糖、零食、日本糕點、果凍、布丁等之點心糕點等之糕點類；加工調味料、風味調味料、調理醬等之調味料；咖哩、義大麵醬、濃湯、燉菜湯、和風食品之蒸煮袋食品；加工油脂、奶油、人造奶油、抹醬、美乃滋等之油脂類；冷凍乾燥食品等之速食食品類；農產罐頭、果醬/橘皮果醬類、醃漬物、煮豆、營養麥片、菜粥等之農產加工品；水產加工品；畜產加工品；比薩、燉飯、焗烤、小菜、炸類等冷凍食品；流動食品，進而為動物飼料、片劑、口腔內使用之化妝品等。

依據本發明之一較佳樣態，飲食品為乳飲料(亦可包含加工乳)、發酵乳、清涼飲料、果凍飲料、片劑、美容用粉末食品、粉末飲料、流動食品、液狀調製乳粉，依據更佳之樣態，飲食品為乳飲料、發酵乳、清涼飲料、果凍飲料、片劑、美容用之粉末食品，依據又更佳之樣態，飲食品為乳飲料(亦包含加工乳)、發酵乳。

又，飲食品亦包含如機能性食品、健康營養食品、補充品、健康食品、特定保健用食品、機能性顯示食品、營養機能食品、生病者用食品、嬰幼兒用調製粉乳、妊娠產婦或授乳婦用粉乳、或附疾病風險減低顯示之 食品般之分類者。依據本發明之一較佳樣態，飲食品為機能性食品、健康營養食品、補充品、特定保健用食品、機能性顯示食品或附疾病風險減低顯示之食品。

又，此處，所謂疾病風險減低顯示為具有減低疾病風險之可能性之飲食品之顯示，可為基於FAO/WHO聯合食品規格委員會(Codex委員會)訂定之規格或參考其規格所訂定之顯示或認可之顯示。

因此，本發明之飲食品可作為例如期待皮膚狀態惡化之改善或緩和之適於消費者之食品、適於皮膚狀態惡化之改善之食品，亦即所謂特定保健用食品或機能性顯示食品而提供。

依據本發明之另一樣態，提供顯示預防、抑制或改善皮膚狀態惡化之機能之飲食品。

飲食品及組成物中之有效成分含量，由於可隨飲食品或組成物之種類、形態或預防/改善目的而變化，故難以一概規定，但本發明之組成物中，可為調整為成人(體重：60kg)每1天為鞘磷脂0.5~1500mg，較好1~1000mg，更好5~500mg之可攝取之有效量者。

鞘磷脂之含量可藉由慣用方法測定，但例如可使用液體層析儀，使用AQUASIL SP100(4.6X250mm，SENSHU科學公司)作為管柱予以測定。

此時，作為移動相，宜使用例如以5比95之比例混合0.5mM磷酸-檸檬酸緩衝液(pH3.0)與甲醇而成之溶液。測定時間設定為20分鐘，移動相流速設定為 0.6mL/分鐘，管柱溫度設定為40℃，吸光度設為205nm予以檢測。作為標準物質可使用例如鞘磷脂(源自乳，長良科學公司)，由面積比予以定量。

依據本發明之另一樣態，飲食品及組成物中之有效成分含量亦可以每一包裝形態而規定，例如於飲食品時，鞘磷脂含量以5~1500mg，較好為6~1000mg，更好為7~500mg含有者，且組成物時，鞘磷脂含量以0.5~1500mg，較好為1~1000mg，更好為5~500mg含有者。且，每一包裝形態之量(含量)不限於1次之攝取量，亦可包括複數次量或複數日量(例如30日量)之攝取量，例如飲食品時，鞘磷脂含量以5~45000mg，較好為6~30000mg，更好為7~15000mg含有者，且組成物時，鞘磷脂含量以0.5~45000mg，較好為1~30000mg，更好為5~15000mg含有者。

以往之一般乳飲料、發酵乳，脂質每1g以20mg含有磷脂質，但本發明之乳飲料、發酵乳，可為脂質每1g以25~3000mg含有磷脂質，較好以30~2500mg，更好以40~2000mg，進而更好以50~1500mg含有者。且以往之一般乳飲料、發酵乳，脂質每1g以6mg含有鞘磷脂，但本發明之乳飲料、發酵乳，可為脂質每1g以7~1500mg含有鞘磷脂，較好以8~1250mg，更好以9~1000mg，進而更好以10~750mg含有者。

亦即，本發明之一較佳樣態中，可使用刻意提高鞘磷脂含量之乳飲料或發酵乳。

本發明之乳飲料、發酵乳係以通常量含有脂質(例如以3重量%含有脂質)，以0.2~60mg/g含有鞘磷脂，較好以0.25~50mg/g，更好以0.3~40mg/g，進而更好以0.35~30mg/g含有者。

另一方面，本發明之乳飲料、發酵乳，以少量含有脂質(例如以1重量%含有脂質)時，可以0.05~60mg/g含有鞘磷脂，較好以0.1~50mg/g，更好以0.15~40mg/g，進而更好以0.2~30mg/g含有者。

而且，本發明之乳飲料、發酵乳、清涼飲料、果凍飲料、片劑、美容用粉末食品幾乎不含脂質(無脂肪)時，可以0.02~60mg/g含有鞘磷脂，較好以0.04~50mg/g，更好以0.06~40mg/g，進而更好以0.08~30mg/g含有者。

因此，依據本發明之一進而較佳樣態，提供含有追加之鞘磷脂之乳飲料或發酵乳，進而提供含有此種乳飲料或發酵乳之組成物或飲食品。作為此種組成物或飲食品，舉例為例如優格。

例如，為優格時，可提供含有追加之鞘磷脂之優格，此意指並非僅於優格中本來所含之鞘磷脂，而是對優格另外添加鞘磷脂，意指刻意提高鞘磷脂濃度之優格。此時，此處所謂「追加之鞘磷脂」意指並非優格中本來所含之鞘磷脂，而是製作刻意提高鞘磷脂濃度之優格時所追加且另外追加之鞘磷脂。

因此，依據本發明之另一較佳樣態，提供包 含本發明之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、本發明之轉麩胺醯胺酶3之活化劑或本發明之角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑之優格。

又，依據本發明之另一較佳樣態，提供包含追加之鞘磷脂之具有兜甲蛋白減少之抑制/改善作用之優格。

依據本發明之另一較佳樣態，提供包含追加之鞘磷脂之具有轉麩胺醯胺酶3之活化作用之優格。

依據本發明之另一較佳樣態，提供包含追加之鞘磷脂之具有角化肥厚膜之形成促進/構造強化作用之優格。

依據本發明之另一樣態，提供兜甲蛋白減少之抑制/改善方法，包含對皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之量降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。

此處所謂兜甲蛋白之量意指皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白存在量，例如可藉由兜甲蛋白基因之表現量而評價。

依據本發明之另一樣態，提供皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活化方法，其包含對皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活性降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。

此處所謂轉麩胺醯胺酶3之活性例如可藉由轉麩胺醯胺酶3基因之表現量而評價。

依據本發明之另一樣態，提供皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化方法，其包含對期望皮膚 角質層之角化肥厚膜之形成促進/構造強化之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂，而進行抑制或改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少，使轉麩胺醯胺酶3活化。

又，此處，較好前述方法為醫療用途除外者。又，前述對象較好為人類或人類以外之哺乳類。

而且，前述方法為較好以2天以上持續經口攝取或經腸投予鞘磷脂之用以對皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之量降低之對象之兜甲蛋白減少之抑制/改善方法、用以對皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活性降低之對象之皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活化方法、或皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化方法。

[實施例]

以下中，藉由下述實施例更詳細說明本發明，但本發明不限於該等。

試驗：鞘磷脂對紫外線照射下之皮膚障蔽機能惡化之影響

對裸毛小鼠照射紫外線(GL20SE，三共電氣股份有限公司)，使皮膚障蔽機能惡化，評價鞘磷脂之連續經口攝取之影響。

<實驗方法>

(1)紫外線照射之皮膚障蔽機能之惡化

將裸毛小鼠(Hos：HR-1，雌性，8週齡)分群後，於1週後，以20mJ/cm²之條件照射紫外線(UV-B)。

試驗由於於各測定及皮膚採集之個體為必要，故合計使用48隻小鼠，各群小鼠以每群8隻進行分群。

(2)群構成及試驗順序

使用於前述(1)作成之紫外線照射模型動物之試驗系，評價藉由鞘磷脂(純度98%，長良科學公司製)之經口攝取(經口投予)對皮膚之基因表現之影響。

供於試驗之各群設為如下條件。

(i)對照第0天群

(ii)對照第1天群

(iii)對照第2天群

(iv)鞘磷脂攝取第0天群

(v)鞘磷脂攝取第1天群

(vi)鞘磷脂攝取第2天群

於對照第0、1、2天群，攝取通常飼料，以10mL/kg-BW/day經口投予溶劑(乙醇之5%水溶液)。且於鞘磷脂攝取第0、1、2天群，以10mL/kg-BW/day經口投予鞘磷脂(純度98%，長良科學公司製)：146mg/10mL-溶劑(乙醇之5%水溶液)。

試驗具體而言係依循圖1之流程，於照射前(第0天)、照射第1天及照射第2天，針對特定群，定量 兜甲蛋白基因與轉麩胺醯胺酶3基因之表現量。此時，亦定量轉麩胺醯胺酶1基因與外皮蛋白基因。

(兜甲蛋白、轉麩胺醯胺酶3、轉麩胺醯胺酶1及外皮蛋白之各基因表現量之定量法)

使用RNeasy Fibirous Tissue Minikit(QIAGENE公司)自各個體採集之皮膚樣品進行總RNA之萃取，使用RivertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(Thermo SCIENTIFIC公司)，自皮膚萃取之1.5μg當量之總RNA，進行互補DNA(cDNA)合成及逆轉錄反應。

合成之cDNA藉由RT-PCR法，引子使用TaqmanGene Expression Assay(Applied Biosystems公司)，藉由7500 Realtime PCR System(Applied Biosystems公司製)，進行各樣品之標的基因的兜甲蛋白(Loricrin)(Assay ID：Mm01962650_s1)、轉麩胺醯胺酶3(Transglutaminase 3)(Assay ID：Mm00436999_m1)、轉麩胺醯胺酶1(Transglutaminase 1)(Assay ID：Mm00498375_m1)、及外在蛋白(Involcrin)(Mm00515219_s1)之mRNA表現量之測定。

同時，進行作為內部標準之甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH))(Assay ID：Mm99999915_g1)之mRNA表現量之測定。

定量化係依據△△Ct法進行，算出各群之皮膚樣品之標的基因表現量相對於對照第0天群之標的基因 表現量之各群之標的基因表現量之比率作為相對表現量。

具體而言，使用如下述之計算式，算出相對表現量。

△Ct=(各個體樣品之標的基因之Ct值)-(各個體樣品之GAPDH基因之Ct值)

△△Ct=(各個體樣品之標的基因之△Ct值)-(對照第0天群之△Ct平均值)

基因表現量=2-△△Ct

相對表現量=(各個體樣品之標的基因之2-△△Ct)/(對照第0天群之2-△△Ct平均值)

(3)試驗結果

藉由兜甲蛋白基因與轉麩胺醯胺酶3基因之表現量，評價角化肥厚膜之形成之促進或構造強化相關之基因表面之變化。

此處，與對照第0、1、2天群相比，於鞘磷脂攝取第0、1、2天群中，兜甲蛋白之表現量若為高值，則意指抑制了兜甲蛋白表現之降低。與對照第0、1、2天群相比，於鞘磷脂攝取第0、1、2天群中，轉麩胺醯胺酶3基因之表現量若為高值，則意指促進了轉麩胺醯胺酶3基因表現之上升。

另一方面，轉麩胺醯胺酶1基因之表現量，與對照第0、1、2天群相比，於鞘磷脂攝取第0、1、2天群中，轉麩胺醯胺酶1基因之表現量若為低值，則意指抑 制了轉麩胺醯胺酶1基因表現之上升。且，與對照第0、1、2天群相比，於鞘磷脂攝取第0、1、2天群中，外皮蛋白基因之表現量若為低值，則意指抑制了外皮蛋白基因表現之上升。

結果如圖2及3所示。

如由圖2(A)所了解，與對照第1天群(紫外線照射1天後)相比，鞘磷脂攝取第1天群中，兜甲蛋白基因之表現量為高值。

如由圖2(B)所了解，與對照第1天群(紫外線照射1天後)及對照第2天群(紫外線照射2天後)相比，鞘磷脂攝取第1天群與鞘磷脂攝取第2天群中，轉麩胺醯胺酶3基因之表現量為高值。

如由圖3(A)所了解，與對照第1/2/3天群(對照群)(紫外線照射1/2/3天後)，鞘磷脂攝取第1/2/3天群中，各轉麩胺醯胺酶1基因之表現量均為低值。

如由圖3(B)所了解，與對照第1/2/3天群(SM群)(紫外線照射1/2/3天後)，鞘磷脂攝取第1/2/3天群中，各外皮蛋白基因之表現量均為低值。

由該等結果教示藉由經口投予鞘磷脂，可抑制紫外線照射引起之兜甲蛋白基因之表現降低，並且促進轉麩胺醯胺酶3基因之表現上升，且進行角化肥厚膜之形成之促進或構造之強化。

又，藉由經口攝取鞘磷脂，由於並未促進轉麩胺醯胺酶1基因或外皮蛋白基因之表現上升，故教示鞘 磷脂之經口攝取有助於特異地促進與角化肥厚膜之形成之促進或構造之強化相關連之特異基因(此處為兜甲蛋白基因或轉麩胺醯胺酶3基因)之表現促進。

Claims (17)

1. 一種皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑，係以鞘磷脂(Sphingomyelin)作為有效成分。
2. 一種皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3活化劑，係以鞘磷脂作為有效成分。
3. 一種皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑，係以鞘磷脂作為有效成分。
4. 如請求項3之角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑，其中角化肥厚膜之形成促進/構造強化係藉由鞘磷脂而抑制/改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之減少及藉由轉麩胺醯胺酶3之活化者。
5. 如請求項1~4中任一項之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、活化劑或形成促進/構造強化劑，其中鞘磷脂係源自乳之鞘磷脂。
6. 一種經口攝取用或經腸投予用組成物，其係包含如請求項1或5之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、如請求項2或5之轉麩胺醯胺酶3之活化劑、或如請求項3~5中任一項之角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑而成。
7. 如請求項6之組成物，其係用於預防、抑制或改善皮膚狀態之惡化。
8. 如請求項7之組成物，其中皮膚狀態之惡化係皮膚之障蔽機能之降低。
9. 如請求項7或8之組成物，其中皮膚之障蔽機能之降低係因紫外線照射所致者。
10. 如請求項6~9中任一項之組成物，其包含每日0.5~1500mg可攝取量之鞘磷脂。
11. 一種飲食品，其係包含如請求項1或5之兜甲蛋白減少之抑制/改善劑、如請求項2或5之轉麩胺醯胺酶3之活化劑、或如請求項3~5中任一項之角化肥厚膜之形成促進/構造強化劑而成。
12. 一種飲食品，其係包含如請求項6~9中任一項之組成物而成。
13. 如請求項11或12之飲食品，其包含每一包裝形態0.2~45000mg可攝取量之鞘磷脂。
14. 如請求項11~13中任一項之飲食品，其係機能性食品、健康營養食品、補充品、特定保健用食品、機能性顯示食品或附疾病風險減低顯示之食品。
15. 一種兜甲蛋白減少之抑制/改善方法，其包含對皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白之量降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。
16. 一種皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活化方法，其包含對皮膚角質層角化肥厚膜之轉麩胺醯胺酶3之活性降低之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂。
17. 一種皮膚角質層角化肥厚膜之形成促進/構造強化方法，其包含對期望皮膚角質層之角化肥厚膜之形成促進/構造強化之對象經口攝取或經腸投予鞘磷脂，而進行抑制或改善皮膚角質層角化肥厚膜之兜甲蛋白減少，使轉麩胺醯胺酶3活化。