WO2014176654A1

WO2014176654A1 - Composições contendo ativos de extrato seco de própolis e processo de preparação das mesmas

Info

Publication number: WO2014176654A1
Application number: PCT/BR2014/000137
Authority: WO
Inventors: Selma Franco; Lucimar PERES; Mara CARDOSO; Terezinha Svidzinski; Luzmarina HERNANDES; Mauro BAESSO; Joyce PEREIRA
Original assignee: Universidade Estadual De Maringá; Associação Dos Apicultores Orgânicos De Diamante Do Norte-Aapiodinor
Priority date: 2013-04-30
Filing date: 2014-04-30
Publication date: 2014-11-06
Also published as: BR102013010639A2

Abstract

A presente invenção se refere a um processo de obtenção de componentes ativos a partir de extrato seco de própolis e/ ou extratos hidroalcóolicos de própolis para utilização como componente ativo para o preparo de composições farmacêuticas com atividade antifúngica empregadas no tratamento de micoses e os compostos contendo os ativos de extrato seco de própolis e/ ou extratos hidroalcóolicos de própolis e mel.

Description

COMPOS IÇÕES CONTENDO ATI VOS DE EXTRATO SECO DE PRÓPOLIS E PROCESSO DE PREPARAÇÃO DAS MESMAS

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção se refere a um processo de obtenção de componentes ativos a partir de extrato seco de própolis, para utilização como componente ativo para o preparo de composições farmacêuticas com atividade antifúngica empregadas no tratamento de micoses e os compostos contendo os ativos de extrato seco de própolis. Ou seja, com aplicação na indústria farmacêutica (produção de medicamentos) , odontológica (medicamentos para tratamento de doenças periodontais e prevenção de cáries) , alimentícia (conservantes) , produção animal (suplementos alimentares e antibióticos naturais) e veterinária (antibiótico natural). ESTADO DA TÉCNICA

As dermatomicoses são afecções mais comuns que comprometem pele e anexos como as unhas das mãos e pés e pelos que podem afetar a toda população. Embora estas desordens não sejam importantes em relação à morbidade e mortalidade, afetam a qualidade de vida do paciente. Tem consequências clínicas significativas devido a sua natureza infecciosa e, sobretudo prejuízo estético que reflete na autoestima, vaidade e discriminação social. Importante salientar o significativo aumento da prevalência destas afecções, que parece ser uma tendência mundial, a cronicidade e a dificuldade terapêutica dessas micoses que também são fatores agravantes.

Classicamente os agentes das dermatomicoses são os dermatófitos : fungos pertencentes aos três géneros Trichophyton spp, Mícrosporum spp e Epidermophytom floccosun. Porém leveduras dos géneros Cândida spp, Trichosporon spp e Geotrichum spp e fungos filamentosos não dermatófitos como Fusarium spp, Scitalidium spp e Scopulariopsis spp têm sido diagnosticados com certa frequência .

As onicomicoses (OM) são afecções mais comuns que comprometem as unhas das mãos e pés, em seres humanos, e podem afetar a todos indistintamente. As OM têm consequências clinicas significativas devido a sua natureza infecciosa e sobretudo pelo prejuízo estético que reflete na autoestima, vaidade e discriminação social, sendo causas significativas de consultas médicas e até de faltas ao trabalho. Elas representam 20% das doenças das unhas e é uma das mais frequentes causas de onicopatias em todo o mundo. A maioria dos autores diagnostica como agentes etiológicos mais frequentes, os dermatófitos (80 a 90%), seguido pelas leveduras (5 a 17%) e por fim fungos filamentosos não dermatófitos (2 a 12%) .

Em função dos fungos permanecerem restritos à camada mais externa da unha, alguns autores recomendam o tratamento tópico como de primeira escolha. O tratamento tópico é indicado em infecções localizadas e de pouca extensão; em casos de insucesso devem ser prescritas drogas de administração sistémica. No entanto, o tratamento sistémico é mais eficaz, sobretudo para as infecções crónicas.

O tratamento de onicomicoses continua sendo um problema apesar dos inegáveis avanços alcançados no desenvolvimento de novos agentes antifúngicos.

A resistência dos patógenos frente aos agentes terapêuticos usuais tem aumentado nos últimos anos. Atualmente estão disponíveis drogas como a terbinafina e os derivados azólicos, eficazes no tratamento clássico das onicomicoses, porém com custo excessivo, tornando limitante a escolha terapêutica e o seu sucesso.

O tratamento das onicomicoses depende de variáveis relacionadas ao agente, ao hospedeiro e aparentemente a fatores ambientais. A terapêutica disponível inclui medicamentos de uso tópico (nistatina e miconazol) e oral, principalmente os derivados azólicos como fluconazol, itraconazol e cetoconazol.

Inúmeras são as pesquisas realizadas em busca de novos compostos com atividades biológicas a partir de produtos naturais. Considerável número de estudos tem sido realizado para avaliar a evolução de atividades antimicrobianas em extratos e óleos essenciais de plantas medicinais. Muitas plantas são resistentes a diferentes patógenos e essa resistência pode estar relacionada à presença de compostos fungistáticos, naturalmente produzidos .

Própolis é uma resina coletada pelas abelhas e utilizada para vedar a colméia. Inúmeros trabalhos científicos comprovam e/ou sugerem uma série de atividades farmacológicas, tanto para a própolis oriunda de outros países como para a brasileira. Entre as atividades destacam- se: atividade antimicrobiana frente a vários agentes etiológicos, entre outros, bactérias como Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, frente a Cândida albicans (Oliveira et al., 2006, Castro, 2001; Koo, 2000; Nieva et al, 1999; Kujumgiev et al., 1999; Burdock, 1998) . A oxidação, via de regra, é um processo de alteração química, que pode estar ligada aos processos de degradação que são responsáveis pela formação das lesões abertas (queimaduras, feridas, etc.) . Contribui no processo de cicatrização atuando como antioxidante. Uma das substâncias mais estudadas entre os componentes da própolis está o fenetil éster do ácido cafeico (CAPE) , um antioxidante fenólico que inibe a formação de peróxido de hidrogénio intracelular e a formação de bases oxidadas no DNA das células He-La. Foi detectado que o CAPE induz a alteração redox, que está relacionada ao efeito de crescimento diferencial em células transformadas (Jaiswal et al., 1997). A ação antiinflamatória da própolis foi amplamente avaliada (Burdock, 1998) . Os autores observaram que a ação antiinflamatória da própolis é comparável à obtida pela metilprednisolona, quando estes produtos foram ensaiados sobre uveitis de coelhos induzida por endotoxina.

A busca por alternativas terapêuticas voltadas para o apiterápico passa pelo conhecimento da resina a ser utilizada, por otimizar o processo de obtenção do extrato, pela obtenção de formas farmacêuticas adequadas ao tratamento e com a qualidade necessária para obter a eficiência no tratamento. Aliada a estes requisitos há ainda, a necessidade de validação da técnica analítica e padronização dos extratos líquido, seco e da tintura.

Existe uma enorme difusão e popularidade das terapias de origem vegetal em todo o mundo, que são, em geral, muito menos onerosas, e são indicadas como complementares nos serviços de saúde. Podem ser a primeira escolha para diversas afecções, antes de recorrer a outros medicamentos mais agressivos.

As plantas medicinais produzem uma variedade de componentes com inúmeras propriedades que podem inibir o crescimento de patógenos ou matá-los. As abelhas Apis melífera L., conhecidas como abelhas europa-africanizadas, coletam a resina contendo estas substâncias das plantas e as utiliza para defesa da colmeia e, propicia assim, a resina própolis como ótima opção para o desenvolvimento de novos medicamentos com ações antimicrobiana, anti-inflamatória e cicatrizante .

Como é do conhecimento geral, a própolis trata-se de um forte adesivo formado pela mistura de substâncias obtidas de plantas pelas abelhas, através da coleta de resina, principalmente, dos brotos e exsudatos . A composição química da própolis é complexa, consistindo basicamente de graxas, resinas, água, compostos inorgânicos, compostos fenólicos e óleos essenciais.

A própolis possui inúmeras ações farmacológicas, as quais variam de acordo com a composição química que, por sua vez, é diversificada em função da flora existente ao redor do apiário. Dentre estas se destacam as ações antioxidante, antiviral, antiinfamatória, antimicrobiana, antitumoral e cicatrizante .

Atualmente o processamento da própolis baseia-se, principalmente, na dissolução extrativa do material com etanol (77%, V/V) . Por este processo as substâncias ativas são extraídas, assim como certa quantidade de cera de abelhas e do material resinoso.

Normalmente, o extrato de própolis é administrado por via oral ou incorporado às fórmulas farmacêuticas de uso externo, geralmente na concentração de 4%.

Os inconvenientes das soluções extrativas etanólicas de própolis são o odor e o sabor desagradáveis, as dificuldades de manuseio, acondicionamento, armazenamento e transporte. Todas estas características inviabilizam, na maioria das vezes, a incorporação do extrato em produtos alimentícios e formas farmacêuticas ou veterinárias. Esses problemas conduzem, muitas vezes, à evaporação do extrato etanólico de própolis e incorporação, posteriormente, em formas farmacêuticas e cosméticas.

Desta maneira, este processo pode ser desfavorável se for considerado o risco de degradação térmica de componentes ( flavonóides, por exemplo) e dificuldades na dissolução de todos os compostos do extrato em um novo solvente .

Atualmente, a obtenção de um extrato seco de própolis é realizada por um processo que consiste na retirada do álcool do extrato hidroetanólico de própolis e incorporação de adjuvantes de secagem.

As substâncias contidas em preparações que se encontram sob a forma liquida apresentam maior propensão à instabilidade. Este fato já é de conhecimento de longa data, pois quanto mais liquida uma preparação, maior sua entropia (ATKINS, 2003) . Com a elevação da entropia, haverá maior choque entre as partículas o que poderá gerar maior alteração química entre as moléculas, portando do fármaco.

O extrato na forma de pó apresenta inúmeras vantagens em relação à forma líquida, além da maior estabilidade química, ainda ocupa menor espaço para o armazenamento e o transporte, maior concentração e facilidade de padronização dos princípios ativos, o que propiciará exatidão de dose, maior qualidade e aumentar o valor agregado do produto.

Os melhores métodos para a secagem são a liofilização e a nebulização. 0 primeiro método utiliza temperaturas muito baixas, onde os extratos congelam e são sublimados com ajuda do vácuo. Já a nebulização utiliza temperaturas bem elevadas com tempo de contato muito curto (MOISAN, 1968) .

A secagem dos extratos de própolis é solução adequada para a manutenção dos seus constituintes ativos. O maior desafio da secagem dos extratos de própolis é devido às suas características químicas, por se apresentar como gomoresina. É uma mistura complexa, formada por material resinoso e balsâmico coletada pelas abelhas dos ramos, flores, pólen, brotos e exsudados de árvores. Após a coleta da resina, na colméia as abelhas adicionam secreções salivares (GHISABERTI, 1979; MARCUCCI, 1996) . OBJETIVOS DA INVENÇÃO

De acordo com o acima descrito, os objetivos do presente invento são:

- Apresentar um processo para a obtenção de extratos secos e padronizados de uma gomoresina, mais particularmente extratos secos da própolis coletada e elaborada pelas abelhas da espécie Apis melífera L., extraindo os componentes ativos da própolis com a utilização de etanol em seus extratos, possibilitando a obtenção destes elementos em seu estado sólido, facilitando assim seu manuseio, armazenamento, transporte, e acondicionamento. A ausência de etanol nos extratos facilita sobremaneira, a incorporação dos ditos componentes ativos em diversas preparações e formas farmacêuticas e/ou alimentícias, bem como evita a degradação térmica de seus componentes, como os flavonoides e ácidos fenólicos simples.

Provêr uma composição farmacêutica adequada para tratar onicómicoses e dermatomicose, bem como o fornecimento de um cosmético com propriedades antissépticas que emprega uma quantidade farmacologicamente ativa de extrato seco de própolis e mel orgânicos, além de excipientes farmaceuticamente aceitáveis e certificados como orgânicos e o processo utilizado na preparação das ditas composições.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS A fim de melhor demonstrar o alcance da invenção, são apresentadas a seguir diversas figuras ilustrativas das atividades e propriedades identificadas tanto na planta empregada na presente invenção - Própolis orgânica, quanto no extrato dela obtido, em que:

- A FIGURA 1 - Demonstra o crescimento de cada isolado fúngico, tendo como referência o seu respectivo controle positivo onde a CIM considerada foi a menor concentração do extrato de própolis capaz de inibir 100% o agente fúngico. Os gráficos 1 e 2, mostram a atividade microbiológica das diferentes formulações nos tempos determinados para avaliar um dos aspectos do controle de qualidade. No tempo zero (creme recém-produzido) houve redução do número de UFC/mL para todas as formulações testadas. Porém, redução significativa (p<0,05) em relação aos controles foi observada somente para as formulações 1 (p=0, 003) e 5 (p=0,0021), gráfico 1. Ambas as formulações mantiveram comportamento semelhante no tempo 120 dias. Neste tempo, a formulação 5 também reduziu o número de UFC/mL significativamente (p=0,05), em relação ao controle positivo, dados representados no gráfico 2.

- Figura 2 - Demonstra o perfil cromatográfico da tintura de própolis orgânica G - Diamante do Norte, PR. Picos marcadores de qualificação e quantificação como segue: 1) PI - ácido cafeico; P2 - ácido p-cumárico; P3 diidrocanferida; P4 - drupanina, P5 - apigenina; P6 Fenetiléster do ácido cafeico (CAPE) P7 - pinocembrina, P8 - crisina; P9 - galangina; PIO - acacetina; Pll - artepillin C.

- Figura 3 - Perfil cromatográfico do extrato seco de própolis orgânica - Diamante do Norte, PR. Picos marcadores de qualificação e quantificação como segue: 1) PI - ácido cafeico; P2 - ácido p-cumárico; P3 diidrocanferida; P4 - drupanina, P5 - apigenina; P6 Fenetiléster do ácido cafeico (CAPE) ; P7 - pinocembrina, P8 - crisina; P9 - galangina; PIO - acacetina; Pll - artepillin C.

- Figura 4 - Perfil cromatográfico do extrato hidroetanólico de própolis obtido por meio da cromatografia liquida de alta eficiência. Esta figura mostra o perfil do extrato hidroetanólico de própolis o qual pode ser utilizado para comparar com os extratos secos obtidos utilizando três agentes de secagem em diferentes concentrações.

- Figura 5 - Perfil cromatográfico do extrato seco de própolis ESPOAG obtido por meio da cromatografia liquida de alta eficiência. Nesta figura é possível visualizar um aumento nas bases das áreas de todos picos, com maior ênfase com relação aos ácidos fenólicos simples, com tempo de retenção entre 2,678 a 9,761 minutos, quando se utiliza o agente de secagem ESPOAG, comparando com a Figura 4. Com relação aos ácidos fenólicos ramificados e flavonóide parece haver manutenção das áreas .

- Figura 6 - Perfil cromatográfico do extrato seco de própolis ESPOPC 392 obtido por meio da cromatografia líquida de alta eficiência.

- Figura 7 - Perfil cromatográfico do extrato seco de própolis ESPOCM 05 obtido por meio da cromatografia líquida de alta eficiência. Esta elevação das áreas base pode ser observado também quando se utiliza o segundo agente de secagem ESPOCM 05, mantendo as áreas correspondentes aos ácidos fenólicos ramificados e flavonóides com tempo de retenção entre 13,089 a 28,471 minutos. Pode ser observado que não há tão grande acréscimo na área dos ácidos fenólicos simples e parece ocorrer a proteção química das substâncias de maior interesse, que são os ácidos fenólicos ramificados e flavonóides. Perfil semelhante observa-se na Figura 8, mas com menor intensidade a proteção química, sendo neste caso o mesmo agente de secagem em menor concentração. Este resultado demonstra que a maior concentração do agente ESPOMC05 é a mais adequada para a secagem dos extratos orgânicos de própolis, o que pode ser observado nas Tabelas 7 e 8. Para os extratos secos foi utilizado aproximadamente a mesma concentração (lOmg de extrato seco) , assim a comparação da intensidade entre os cromatogramas dos extratos secos pode ser efetuada. Nas Figuras 5, 6, 7 e 8 pode ser detectado que o agente de secagem ESPOPC 392, não protege os componentes da própolis, enquanto o ESPOCM 05 parece proteger bem os componentes químicos da própolis durante o processo de secagem.

- Figura 8 - Perfil cromatográfico do extrato seco de própolis ESPOCM 025 obtido por meio da cromatografia líquida de alta eficiência.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO Sob um primeiro aspecto, a invenção trata-se de uma composição farmacêutica voltada para o tratamento de onicomicoses e dermatomicoses, contendo extratos hidroalcoólico e seco de própolis orgânica em concentrações variando entre 5 e 40% (p/p) e mel orgânico na faixa entre 1 a 10%.

Mais preferivelmente as composições farmacêuticas podem conter extratos hidroalcoólicos e seco de própolis em uma faixa de concentração de 10 a 30% (p/p) e mel variando entre 1 a 5%, sendo a própolis e o mel certificados como orgânicos.

São empregados excipientes farmacêuticos adequados à forma farmacêutica escolhida para cada uma das afecções a serem tratadas.

Uma forma líquida da composição farmacêutica utiliza-se de solventes hidroalcoólicos de Cl a CIO átomos de carbono, tal como, por exemplo o etanol. O etanol é empregado diluído em água na proporção de 70% (V/V) .

Adicionalmente, a invenção trata ainda de um processo de obtenção de extratos hidroalcoólicos das resinas, uma gomoresina, preferencialmente, a própolis.

O processo de obtenção de extratos de própolis tem início a partir do processo de extração vegetal com o emprego de procedimentos físicos para a dissolução da resina, na presença de um solvente orgânico que efetuará a extração de um liquido consistindo no extrato bruto de própolis, uma gomoresina coletada pelas abelhas dos caules, brotos e flores de diversas plantas.

Preferencialmente, para a obtenção do extrato é utilizada a gomoresina de própolis; o procedimento físico empregado para a dissolução da resina é a turboextração e, o solvente orgânico empregado pode ser um álcool contendo entre 1 e 10 átomos de carbono, tal como o etanol, o isopropanol, o butanol e o pentanol. Mais preferencialmente ainda a turboextração é o processo físico escolhido e, o solvente orgânico é o etanol. O etanol pode ser empregado em diferentes diluições, porém, preferencialmente emprega-se o álcool a 70% (peso/peso) .

Ao extrato bruto é adicionado de 40 a 60% de água, preferencialmente, 50% de água, mais um agente de secagem certificado como orgânico ou a mistura deles, escolhidos dentre, celulose microcristalina, pectina cítrica, e alginato de sódio.

O extrato bruto é então concentrado pela remoção parcial do solvente orgânico até a concentração de 12% deste álcool. A concentração do extrato ocorre por evaporação sob condições controladas de temperatura e pressão, em uma faixa de temperatura de 35-55°C e sob pressão reduzida (vácuo) .

Preferencialmente pode ser utilizado um evaporador rotatório sob temperatura suficiente para gerar a evaporação parcial do solvente orgânico empregado. O extrato bruto concentrado da própolis é então nebulizado em spray dryer. A etapa seguinte consiste na avaliação quanto aos parâmetros tecnológicos e atividade terapêutica fungicida.

A avaliação da atividade antifúngica in vitro dos extratos da própolis sobre agentes de onicomicoses foi determinada através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e da Concentração Fungicida Mínima (CFM) .

Para complementação da avaliação do controle de qualidade, a atividade antifúngica das formulações de cremes 1 (Cl), 2 (C2) , 3 (C3), 4 (C4) e 5 (C5) foram testadas frente à cepa padrão de levedura Cândida albicans ATCC 90028, nos tempos zero e 120 dias sob condições estressantes de 40°C e 75% de umidade relativa do ar após a preparação das formulações.

Formulação Cl (lOOg) : Plantec HE20 4,00g, Plantec

Mango Butter l,00g, Plantec Shea Butter 2,00g, Óleo de Sementes de uvas 12,00g, MEG l,00g, Ácido esteárico 3, OOg, Amaze XT 0,10g, Tocoferol 0, lOg, Ácido benzóico 0,20g, H₂0 75, 96g, Extrato seco de própolis 0,1 a l,0g (preferencialmente 0,20g), Mel 1,00 a 2, OOg

(preferencialmente l,00g), Essência q.s.

Formulação C2 (lOOg) : Ácido Esteárico 6, 0g, MEG 2,63g, Óleo de semente de uvas 10, Og, Cera de Abelhas 2,0g, Hidróxido de sódio 25% 1,0 ml, Tocoferol 0,lg, H₂0 q.s.p 100%, Extrato seco de própolis 0,1 a l,0g (preferencialmente 0,20g), Mel 1,00 a 2, OOg (preferencialmente l,00g), Essência q.s.

Formulação C3 (lOOg) : Ácido esteárico 6, Og, MEG 2,65g, Álcool cetílico l,0g, Óleo de Semente de uvas 10, Og, Cera de Abelhas 2,0g, Hidróxido de sódio 1,0 ml, H₂0 q.s.p lOOg, Tocoferol 0, lg, Extrato seco de própolis 0,1 a l,0g (preferencialmente 0,20g), Mel 1,00 a 2, OOg

(preferencialmente l,00g, Essência q.s.

Formulação C4 (lOOg) : Plantec HE 20 3,9g, Lecitina 2, 0g, Ácido esteárico 3,2g, MEG 1, lg, Álcool cetílico 1, Og, Óleo de semente de uva 12g, Manteiga de cacau 2,0g, Amaze XT 0,lg, H₂0 q.s.p lOOg, Tocoferol 0,lg, Extrato seco de própolis 0,1 a l,0g (preferencialmente 0,20g), Mel 1,00 a 2, OOg (preferencialmente l,00g, Essência q.s. Formulação C5 (100g) : Ácido esteárico 6, 12g, Monoestearato de glicerila (MEG) 3,06g, Óleo de sementes de uvas l,02g, Plantec Shea Butter 2,02g, Cera de Abelhas l,01g, Plantaren 2000 5, lg, Tocoferol 0, lg, Ácido benzóico 0,2g, Água 79,73g, Extrato seco de própolis 0, 0, 1 a l,0g (preferencialmente 0, 0,20g g) , Mel 1,00 a 2,00g (preferencialmente l,00g), Essência q.s.

Leveduras foram pré-cultivadas em Sabouraud Dextrose Ágar (SDA) por 24h e, a seguir foi preparada uma suspensão salina (NaCl 0,85%) esterilizada com concentração de 2 a 5xl0³ Unidade formadora de colónias (UFC/mL) . ΙΟΟΟμΙ, dessa suspensão foi adicionada a lg de cada formulação de creme, e a mistura incubada por 48h a 35°C, sob agitação em shaker (Nova Ética, Br) a 100 rpm. Como controle positivo foi realizado o teste com suspensão de leveduras na ausência de qualquer formulação, além de controle negativo, presença das formulações sem exposição aos microrganismos, ambos os testes foram submetidos às mesmas condições.

Após o período de incubação, as misturas foram diluídas 1:10, e semeado com alça calibrada de 10μL em placas de Petri (90xl5mm) contendo SDA, e incubadas à 35°C, para avaliação de UFC/mL.

A concentração inibitória Mínima (CIM) foi determinada pelo método de microdiluição em caldo, seguindo as normas de padronização preconizadas pelo National Committee for Clinicai Laboratory Standards publicadas no documento M-27A10 com algumas modificações.

A CIM foi considerada a menor concentração do extrato de própolis capaz de inibir 100% o crescimento de cada isolado fúngico, tendo como referência o seu respectivo controle positivo (Figura 1) .

Para determinação da CFM foram transferidas alíquotas dos cultivos que não apresentaram crescimento no ensaio para determinação da CIM, para um meio Sabouraud Dextrose Agar contra o meio isento de droga. A menor concentração que impediu o crescimento dos fungos foi considerada a CFM.

A presente invenção provê ainda o uso de composições farmacêuticas contendo extratos hidroalcoólicos ou extratos secos de própolis para a inibição do crescimento ou morte de fungos dermatófitos, tais como: Trichophyton spp, Microsporum spp e Epidermophytom floccosun, assim como afecções causadas por leveduras, tal como Cândidas.

A preparação farmacêutica pode apresentar-se em forma de tintura, extrato seco, loções, géis, pomadas, cremes, sabonetes para uso tópico; ou tintura, granulados, cápsulas e comprimidos de uso oral.

Para melhor compreensão dos objetos reivindicados, seguem os exemplos ilustrativos a seguir, que não devem ser considerados delimitantes dos direitos do depositante.

EXEMPLO 1

Exemplo de uma composição farmacêutica preferida para o tratamento de leveduras de onicomicoses .

- entre 1000 a 1500 ug/ml, preferencialmente,

1250μg/ml de extratos hidroalcoólicos de própolis;

excipientes e/ou diluentes, eluentes e outros adjuvantes farmacêuticos aceitáveis.

EXEMPLO 2

Exemplo de uma composição farmacêutica preferida para o tratamento de dermatófitos .

entre 500 a 800 μg/ml, preferencialmente, 625μg/ml de extratos hidroalcoólicos de própolis;

EXEMPLO 3

Exemplo de uma composição farmacêutica preferida para o tratamento Cândida albicans . entre 500 a 800 μg/ml, preferencialmente, 625pg/ml de extratos hidroalcoólicos de própolis;

O processo de preparação do extrato seco de própolis da presente invenção será abaixo descrito em etapas.

Processo de produção de extratos secos de própolis caracterizado por compreender as seguintes etapas:

a) Coletar o material de partida, própolis orgânica, no Apiário, onde o Apiário deve seguir as normas para produtos orgânicos conforme estabelecido pelo Instituto Biodinâmico (IBD), certificador de produtos orgânicos. Para o desenvolvimento da presente invenção a própolis orgânica foi coletada, para emprego como material de partida dos extratos a serem utilizados nas composições da presente invenção, no Apiário Experimental, em Diamante do Norte da Universidade Estadual de Maringá (UEM) .

b) Identificar a própolis coletada por análise cromatográfica liquida com detecção no ultravioleta e com fotodiiodo para a caracterização de parâmetros tecnológicos para o material de partida. Foram estabelecidos parâmetros tecnológicos para a própolis (n=3) tais como: perda por dessecação (PD), teor de flavonóides totais (FT) , teor de polifenóis totais (PT) e teor de ceras (TC) ; teor de extrativos em água (TE) ; e fração extraivel em etanol 96 °GL (FEE) . Os resultados obtidos na caracterização estão descritos na Tabela 1.

c) Obter uma tintura de própolis adicionando 10 % (p/p) de própolis a uma parte de álcool, tal como etanol 70% (p/p) , num béquer previamente pesado, permanecendo em repouso por 2 horas.

d) Submeter a tintura à turboextraçâo durante 10 minutos, com monitoramento da temperatura com intervalos de repouso para resfriar o copo do turboextrator em banho de gelo, se necessário. Após o término da extração, o turboextrator deve ser resfriado para diminuir a quantidade de cera na tintura.

e) Após decantar, proceder a filtração sob vácuo com papel de filtro grosso.

f) Acondicionar a tintura em frasco de vidro âmbar, com batoque interno e tampa de rosca. A tintura obtida foi denominada G (10%) .

g) Caracterizar a tintura G por análise cromatográfica liquida com detecção no ultravioleta e com fotodiiodo para a caracterização de parâmetros tecnológicos para o material de partida. Foram estabelecidos parâmetros tecnológicos para a própolis (n=3) tais como: perda por dessecação (PD), teor de flavonóides totais (FT) , teor de polifenóis totais (PT) e teor de ceras (TC) ; teor de extrativos em água (TE) ; e- fração extraivel em etanol 96 °GL (FEE) . Os resultados obtidos na caracterização estão descritos nas Tabelas 2 e 3 e na Figura 2.

h) À tintura G acima adicionar de 40 a 60% de água, preferencialmente, 50% de água, mais um agente de secagem certificado como orgânico ou a mistura deles, escolhidos dentre, celulose microcristalina, pectina cítrica, e alginato de sódio nas concentrações de acordo com a tabela 4. Retirar o álcool da tintura em evaporador rotatório, tal como o evaporador da marca Buchi modelo RT210 até que a sua porcentagem não ultrapassasse 12% do volume total restante. Geram-se amostras de acordo com o agente de secagem, dando-se o nome a cada amostra de acordo com o agente de secagem, sendo a nomeclatura de cada amostra ESPOCM, ESPOPC e ESPOAG respectivamente .

i) Secar os extratos em atomizador Spray-dryer, tal como o atomizador da marca Labmaq, modelo LM MSD

1.0. Para a secagem adicionar excipientes inertes, a quantidade foi calculada em porcentagem sobre a quantidade de tintura conforme a (Tabela 4) , as condições de secagem são: (vazão do ar de 10 a 30 mL/minuto; temperatura entre 80°C e 150°C e fluxo de alimentação da amostra entre 0,5 e 3,0 L/hora) para efeito de comparação entre os excipientes (agentes de secagem) . São obtidos extratos secos com as características descritas nas tabelas 5 e

Figura 3.

Tabela 1. Controle de qualidade da propolis coletada no Apiário Diamante do Norte (n=3) , etapa B do processo de produção do extrato seco de propolis.

Tabela 2. Valores obtidos para a tintura de Propolis G (n=3)

Valor médio s CV

TF %(p/p) 1, 80 0, 5118 28,41 pH 5, 28 0, 0071 0, 13

Densidade g/ml 0, 8809 0, 0001 0, 01

RS %(p/p) 3, 01 0, 0071 0, 24

TA % (V/V) 63, 87 0, 00 0, 01 TF=teor de flavonóides totais (detecção por ultravioleta) , pH=Valores de pH, densidade relativa (D) , RS= Resíduo seco, TA = teor alcoólico

Tabela 3. Teor de flavonóides da tintura por substância marcadora quantificados em apigenina por meio da cromatografia líquida de alta eficiência.

Tabela 4. Comparação entre excipientes utilizados para a obtenção do extrato seco de própolis orgânico. Condições secagem: vazão do ar = 30 L/minuto; temperatura = 90 °C fluxo de alimentação da amostra = 2,8 L/hora.

Tabela 5. Teor de flavonóides por marcador, quantificados em apigenina por meio da cromatografia líquida de alta eficiência do extrato seco de própolis obtido ao final do processo .

CONCENTRAÇÃO DE FLAVONOIDES EM RELAÇÃO AO EXTRATO SECO

Flavonoides Média mg/g ES s CV%

Dihidrocanferida 7, 92 0, 35 4, 40

Apigenina 7, 47 0, 06 0, 83 Pinocembrina 3, 21 0, 05 1, 47

Crisina 2,34 0, 00 0, 20

Galangina 2, 33 0, 06 2, 65

Acacetina 4, 33 0, 06 1, 27

Tabela 6. Teor de flavonoides por marcador, quantificados em apigenina por meio da cromatografia líquida de alta eficiência para lOOg das formulações em creme abaixo descritas .

As Tabelas 7 e 8 apresentam o teor dos marcadores, de flavonoides, dihidrocanferida, apigenina, pinocembrina, crisina, galangina e acacetina. Mostram ainda o teor de ácidos fenólicos simples (soma dos das áreas dos picos entre os tempos de retenção 2,7 a 10 minutos e o teor de ácidos fenólicos ramificados (drupanina, CAPE e Artepillin C) , ambos os grupos quantificados em Artepillin C.

Tabela 7. Teor de flavonoides dos estratos secos orgânicos (ESPOCM 0,25) paraflavonoides em apigenina e para os ácidos fenólicos simples e ramificados em Artepillin C por meio da cromatografia líquida de alta eficiência utilizando os marcadores dihidrocanferida, apigenina, pinocembrina, crisina, galangina e acacetina (n=3) .

ESPOCM 0,25%

Média

Flavonoides (mg/g ES) s CV%

Dihidrocanferida 0, 98 0, 0263 2, 67

Apigenina 1, 53 0, 0508 3, 32

Pinocembrina 0, 30 0, 0049 1, 65

Crisina+Galangina 0,29 0, 0110 3, 82

Acacetina 0, 98 0, 0182 1,86 Média

(mg/g ES) s CV%

Ácidos fenólicos simples

totais 6, 20 0, 3623 5, 84

Ácidos fenólicos Média

ramificados (mg/g ES) s CV

Drupanina 1, 37 1, 3724 1, 33

Cape 0, 94 0, 9613 0, 92

Artepillin C 1, 93 1, 9288 1, 97

Totais 4, 24 4, 2331 4, 19

A comparação entre os extratos obtidos com concentrações diferentes de agente de secagem mostra que a maior concentração protege mais os composto de interesse cerca de 10 vezes a dihidrocanferida, 5 vezes a apigenina, quase 20 vezes a pinocembrina e 5 vezes a acacetina.

Tabela 8. Teor de flavonoides dos estratos secos orgânicos (ESPOCM 0,50%) paraflavonoides em apigenina e para os ácidos fenólicos simples e ramificados em Artepillin C por meio da cromatografia liquida de alta eficiência utilizando os marcadores dihidrocanferida, apigenina, pinocembrina, crisina, galangina e acacetina (n=6) .

ESPOMC 0 , 50%

Média

Flavonoides (mg/g ES) s cv%

Dihidrocanferida 9, 47 0, 418 4, 42

Apigenina 7,25 0, 095 1, 32

Pinocembrina 5, 93 0, 067 1,14

Crisina+Galangina 18, 73 11, 084 59, 17

Acacetina 4,9 0, 019 0, 40

Média

(mg/g ES) s CV

Ácidosfenólicos simples

totais 18, 99 0, 6762 3,56

Ácidosfenólicos Média

ramificados (mg/g ES) s CV%

Drupanina 3, 41 0, 1396 4, 10

Cape 2, 42 0, 1091 4,51

Artepillin C 5, 60 0, 1093 1, 95

totais 11, 43 0,2272 1, 99 Com base nos extratos secos de própolis gerados através do processo descrito acima, foram desenvolvidas as seguintes formulações em creme, em loção e em sabonete.

EXEMPLO 4 - formulação Cl em creme para lOOg

Plantec HE20 4, 00

Plantec Mango Butter 1, 00

Plantec Shea Butter 2, 00

Óleo de Sementes de uvas 12, 00

MEG 1, 00

Ácido esteárico 3, 00

Amaze XT 0,10

Tocoferol 0, 10

Ácido benzóico 0,20

H₂0 75, 96

Extrato seco de própolis 0, la 1, 0 preferencialmente 0,20

Mel 1, 00 a 2, 00

preferencialmente 1,00

Essência qs

EXEMPLO 5 - formulação C1CE em creme para lOOg

Plantec HE20 2, 55

Plantec Mango Butter 11, 38

Plantec Shea Butter 2, 13

MEG 1, 38

Ácido esteárico 0, 57

Alginato de sódio 0, 11

Tocoferol 0,23

Água destilada 80, 00

Extrato seco de própolis 0, la 1,0 preferencialmente 0,20

Mel 1, 00 a 2,00

preferencialmente 1,00

Essência qs EXEMPLO 6 - formulação CIDE em creme para

Plantec HE20 4, 08

Plantec Mango Butter 0, 83

Plantec Shea Butter 1,75

Óleo de Sementes de uvas 12, 74

MEG 1, 22

Alginato de sódio 3, 16

Tocoferol 0,10

Ácido benzóico 0, 24

H₂0 74,24

Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0

preferencialmente 0,20 Mel 1,00 a 2,00 preferencialmente 1,00

Essência qs

EXEMPLO 7 - formulação CUBE em creme para lOOg

Plantec HE20 3, 35

Plantec Mango Butter 1, 18

Plantec Shea Butter 2, 52

Óleo de Sementes de uvas 11, 31

MEG 0, 38

Plantaren 2000 1, 38

Goma xantana 0, 54

Tocoferol 0, 12

Ácido Benzóico 0, 22

¾0 77, 36

Extrato seco de própolis 0, 1 a 1,0

preferencialmente 0,20

Mel 1, 00 a 2,00 preferencialmente 1,00

Essência qs

EXEMPLO 8 - formulação CllCE em creme para lOOg

Plantec HE20 3, 33

Plantec Mango Butter 1,18 Plantec Shea Butter 2, 52 Óleo de Sementes de uvas 11, 32

MEG 0, 38

Plantaren 2000 1, 39

Amaze XT 0,47

Tocoferol 0, 12

Ácido Benzóico 0, 22

H₂0 77,43

Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0

preferencialmente 0,20 Mel 1,00 a 2, 00 preferencialmente 1,00

Essência qs

EXEMPLO 9 — formulação C5 em creme para

Ácido esteárico 6, 12

Álcool cetilico 1,0

Monoestearato de glicerila 3, 06

Óleo de sementes de uvas 10, 2

Plantec Shea Butter 2, 02

Cera de Abelhas 1, 01

Plantaren 2000 5,1

Tocoferol 0,1

Ácido benzóico 0,2

Água 79, 73

Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0 preferencialmente 0,20

Mel 1, 00 a 2, 00

preferencialmente 1,00

Essência qs

EXEMPLO 10 - formulação C13E em loção para lOOg

Ácido esteárico 2,19

Monoestearato de glicerila (MEG) 2,07

Óleo de sementes de uvas 7,94

Plantec Shea Butter 4,09 Cera de Abelhas 2, 51 Plantaren 2000 0, 79

Tocoferol 0.1

Alginato de sódio 1, 24

Ácido benzóico 0, 19

Água 77,24

Extrato seco de própol 0,1 a 1,0 preferencialmente 0,20 Mel 1, 00 a 2, 00

preferencialmente 1,00

Essência qs

EXEMPLO 11 - formulação C14E em loção para lOOg

Ácido esteárico 2,20

Monoestearato de glicerila (MEG) 2, 08

Óleo de sementes de uvas 7, 99

Plantec Shea Butter 4, 12

Cera de Abelhas 2, 53

Plantaren 2000 0, 79

Tocoferol 0, 10

Goma xantana 0, 63

Ácido benzóico 0,19

Água 79, 36

Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0 preferencialmente 0,20

Mel 1,00 a 2,00

preferencialmente 1,00

Essência qs

EXEMPLO 12 - formulação C16E em loção para lOOg

Ácido esteárico 3,74

Monoestearato de glicerila (MEG) 2,08

Óleo de sementes de uvas 7,62

Plantec Shea Butter 4,21

Plantaren 2000 2,36 Tocoferol 0,10 Alginato de sódio 2,48

Ácido benzóico 0,21

Água 75,56

Extrato seco de propolis 0,1 a 1,0 preferencialmente 0,20 Mel 1,00 a 2,00

preferencialmente 1,00 Essência qs

EXEMPLO 13 - formulação SP2C de sabonete de propolis e mel orgânicos para lOOg

Ácido esteárico vegetal 9,24

Manteiga de Karité 8, 80

Lanolina 3, 87

Ácido benzóico 0, 30

Glicerina 5, 80

NaOH 5, 43

Água 6, 11

Álcool de cereais 29, 48

Plantaren 2000^® 14, 09

Tintura de propolis 6, 00 a 8, 00

Mel 2, 00 a 4,00

Essência qs

EXEMPLO 15 - formulação SP4C de sabonete de propolis e mel orgânicos para lOOg

Ácido esteárico vegetal 11, 01

Gordura vegetal 7, 36

Óleo de sementes de uvas 6, 59

Lanolina 2, 09

Ácido benzóico 0, 43

Glicerina 13, 24

NaOH 5, 54

Água 5, 54

Álcool de cereais 22, 75 Plantaren 2000^® 6,38

Plantaren 1200^® 5,83

Tintura de propolis 6,00 a 8,00

Mel 2,00 a 4,00 Essência qs

EXEMPLO 16 - formulação SP4D de sabonete de propolis e mel orgânicos para lOOg

Ácido esteárico vegetal 11,06

Gordura vegetal 7,69

Óleo de sementes de uvas 7,54

Lanolina 2 , 32

Ácido benzóico 0,44

Glicerina 7,42

NaOH 6,02

Água 6,01

Álcool de cereais 23,59

Plantaren 2000^® 6, 90

Plantaren 1200^® 6, 94

Tintura de propolis 6,00 a 8,00 Mel 2,00 a 4,00

Essência qs

EXEMPLO 17 - formulação SP4F de sabonete de propolis e mel orgânicos para lOOg

Ácido esteárico vegetal 10,75 Gordura vegetal 8,87

Óleo de sementes de uvas 7,33

Lanolina 2,27

Ácido benzóico 0, 43

Glicerina 6,43

NaOH 5,86

Água 5,74

Álcool de cereais 22,88

Plantaren 2000^® 6,76

Plantaren 1200^® 6,74 Tintura de própolis 6,00 a 8,00

Mel 2,00 a 4,00

Óleo de amêndoas doces 2, 25

Essência qs

EXEMPLO 18 - formulação SP5C de sabonete de própolis e i orgânicos para lOOg

Ácido esteárico vegetal 11,22

Manteiga de Karité 5, 23

Óleo de amêndoas 11-, 14

Lanolina 2, 59

Ácido benzóico 0, 48

Plantaren 1200^® 6, 57

Plantaren 2000^® 6, 64

Glicerina 5,79

Hidróxido de sódio 4,47

Água 7, 04

Álcool de cereais 25, 27

Tintura de própolis 6, 00 a 8, 00

Mel 2, 00 a 4,00

Óleo de abacate 3, 00

Essência qs

EXEMPLO 20 - formulação SP6 de sabonete de própolis e mel orgânicos para lOOg

Ácido esteárico vegetal 12, 17

Manteiga de Karité 5, 35

Óleo de amêndoas 11,89

Lanolina 2,74

Ácido benzóico 0, 55

Plantaren 1200^® 6, 65

Plantaren 2000^® 6, 71

Hidróxido de sódio 4, 84

Água 7,24

Álcool de cereais 27,28

Tintura de própolis 6, 00 a 8, 00 Mel 2, 00 a 4, 00

Óleo de abacate 3, 00

Essência qs

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição farmacêutica para o tratamento de onicomicoses e dermatomicoses caracterizada por conter extratos hidroalcoólico e/ou extratos secos de própolis orgânica em concentrações variando entre 5 e 40% (p/p) _/ mel orgânico na faixa entre 1 a 10% e excipientes farmacêuticos adequados à forma farmacêutica escolhida para cada uma das afecções a serem tratadas.

2. Composição de acordo com a reivindicação 1 caracterizada por conter extratos hidroalcoólicos e/ou extratos secos de própolis em uma faixa de concentração de 10 a 30% (p/p) e/ou 0,1 a 1% para o extrato seco e mel variando entre 1 a 5%, sendo a própolis e o mel certificados como orgânicos .

3. Composição liquida de acordo com a reivindicação 1 caracterizada por conter solventes hidroalcoólicos de Cl a CIO átomos de carbono.

4. Composição liquida de acordo com a reivindicação 3 caracterizada por o solvente ser escolhido dentre o etanol, o isopropanol, o butanol e o pentanol.

5. Composição liquida de acordo com a reivindicação 3 caracterizada por o solvente ser preferencialmente o etanol .

6. Composição liquida de acordo com a reivindicação 5 caracterizada por o etanol empregado ser diluído em água na proporção de 70% (V/V) .

7. Composição de acordo com a reivindicação 1 para o tratamento de leveduras de onicomicoses caracterizada por conter entre 1000 a 1500 μg/ml, preferencialmente, 1250 g/ml de extratos hidroalcoólicos de própolis mais excipientes e/ou diluentes, eluentes e outros adjuvantes farmacêuticos aceitáveis.

8. Composição de acordo com a reivindicação 1 para o tratamento de dermatófitos caracterizada por conter entre500 a 800 μg/ml_/ preferencialmente, 625pg/ml de extratos hidroalcoólicos de própolis mais excipientes e/ou diluentes, eluentes e outros adjuvantes farmacêuticos aceitáveis.

. Composição de acordo com a reivindicação 1 para o tratamento de Cândida albicans caracterizada por conter entre 500 a 800 μg/ml, preferencialmente, 625pg/ml de extratos hidroalcoólicos de própolis mais excipientes e/ou diluentes, eluentes e outros adjuvantes farmacêuticos aceitáveis.

0. Processo de produção de extratos secos de própolis para a produção de compostos de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por compreender as seguintes etapas:

a. Coletar o material de partida, própolis orgânica, no Apiário, onde o Apiário deve seguir as normas para produtos orgânicos conforme estabelecido pelo Instituto Biodinâmico (IBD), certificador de produtos orgânicos. b. Identificar a própolis coletada por análise cromatográfica liquida com detecção no ultravioleta e com fotodiiodo para a caracterização de parâmetros tecnológicos para o material de partida com parâmetros tecnológicos para a própolis (n=3) tais como: perda por dessecação (PD) , teor de flavonóides totais (FT) , teor de polifenóis totais (PT) e teor de ceras (TC) ; teor de extrativos em água (TE) ; e fração extraivel em etanol 96 °GL (FEE) .

c. Obter uma tintura de própolis adicionando 10 % (p/p) de própolis a uma parte de álcool, tal como etanol 70% (p/p) , num béquer previamente pesado, permanecendo em repouso por 2 horas .

d. Submeter a tintura à turboextração durante 10 minutos, com monitoramento da temperatura com intervalos de repouso para resfriar o copo do turboextrator em banho de gelo, se necessário. Após o término da extração, o turboextrator deve ser resfriado para diminuir a quantidade de cera na tintura.

Após decantar, proceder a filtração sob vácuo com papel de filtro grosso.

Acondicionar a tintura em frasco de vidro âmbar, com batoque interno e tampa de rosca. A tintura é denominada G (10%) .

Caracterizar a tintura G por análise cromatográfica liquida com detecção no ultravioleta e com fotodiiodo para a caracterização de parâmetros tecnológicos para o material de partida com parâmetros tecnológicos para a própolis (n=3) tais como: perda por dessecação (PD), teor de flavonóides totais (FT) , teor de polifenóis totais (PT) e teor de ceras (TC) ; teor de extrativos em água (TE) / e fração extraível em etanol 96 °GL (FEE) .

À tintura G acima adicionar de 40 a 60% de água, preferencialmente, 50% de água, mais um agente de secagem certificado como orgânico ou a mistura deles, escolhidos dentre, celulose microcristalina, pectina cítrica, e alginato de sódio nas concentrações de acordo com a tabela 4. Retirar o álcool da tintura em evaporador rotatório, tal como o evaporador da marca Buchi modelo RT210 até que a sua porcentagem não ultrapassasse 12% do volume total restante. Geram-se amostras de acordo com o agente de secagem, dando-se o nome a cada amostra de acordo com o agente de secagem, sendo a nomeclatura de cada amostra ESPOCM, ESPOPC e ESPOAG respectivamente.

Secar os extratos em atomizador Spray-dryer, tal como o atomizador da marca Labmaq, modelo LM MSD 1.0. Para a secagem adicionar excipientes inertes, a quantidade foi calculada em porcentagem sobre a quantidade de tintura conforme a (Tabela 4), as condições de secagem são: (vazão do ar de 10 a 30 mL/minuto; temperatura entre 80°C e 150°C e fluxo de alimentação da amostra entre 0,5 e 3,0 L/hora) para efeito de comparação entre os excipientes (agentes de secagem) . São^' obtidos extratos secos com as características descritas nas tabelas 5 e Figura 3.

1. Formulação em creme de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Plantec HE20 4,00%, Plantec Mango Butter 1,00%, Plantec Shea Butter 2,00%, Óleo de Sementes de uvas 12,00%, MEG 1,00%, Ácido esteárico 3,00%, Amaze XT 0,10%, Tocoferol 0,10%, Ácido benzóico 0,20%, H₂0 75,96%, Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0%, preferencialmente 0,20%, Mel 1,00 a 2,00%, preferencialmente 1,00%, e essência q.s.

2. Formulação em creme de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Plantec HE20 2,55%, Plantec Mango Butter 1,38%, Plantec Shea Butter 2,13%, MEG 1,38%, Ácido esteárico 0,57%, Alginato de sódio 0,11%, Tocoferol 0,10%, Água 80,00%, Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0%, preferencialmente 0,20%, Mel 1,00 a 2,00%, preferencialmente 1,00%, e essência q.s.

3. Formulação em creme de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Plantec HE20 4,08%, Plantec Mango Butter 0,83%, Plantec Shea Butter 1,75%, Óleo de Sementes de uvas 12,74%, MEG 1,22%, Alginato de sódio 3,16%, Tocoferol 0,10%, Ácido benzóico 0,24%, H₂0 74,24%, Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0%, preferencialmente 0,20%, Mel 1,00 a 2,00%, preferencialmente 1,00%, essência q.s.

4. Formulação em creme de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Plantec HE20 3,35%, Plantec Mango Batter 1,18%, Plantec Shea Butter 2,52%, Óleo de Sementes de uvas 11,31%, MEG 0,38%, Plantaren 2000 1,38%, Goma xantana 0,54%, Tocoferol 0,12%, Ácido Benzóico 0,22%, H₂0 77,36%, Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0%, preferencialmente 0,20%, Mel 1,00 a 2,00%, preferencialmente 1,00%, e essência q.s.

5. Formulação em creme de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Plantec HE20 3,33%, Plantec Mango Butter 1,18%, Plantec Shea Butter 2,52%, Óleo de Sementes de uvas 11,32%, MEG 0,38%, Plantaren 2000 1,39%, aze XT 0,47%, Tocoferol 0,12%, Ácido Benzóico 0,22%, H₂0 77,43%, Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0%, preferencialmente 0,20%, Mel 1,00 a 2,00%, preferencialmente 1,00, e essência q.s.

6. Formulação em creme de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Ácido esteárico 6,12%, %, Álcool cetilico 1,0%, Monoestearato de glicerila (MEG) 3,06%, Óleo de sementes de uvas 10,2%, Plantec Shea Butter 2,02%, Cera de Abelhas 1,01%, Plantaren 2000 5,1%, Tocoferol 0,1%, Ácido benzóico 0,2%, Água 79,73%, Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0%, preferencialmente 0,20%, Mel 1,00 a 2,00%, preferencialmente 1,00%, e essência q.s.

7. Formulação em loção de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Ácido esteárico 2,19%, Monoestearato de glicerila (MEG) 2,07%, Óleo de sementes de uvas 7,94%, Plantec Shea Butter 4,09%, Cera de 7Abelhas 2,51%, Plantaren 2000 0, 79%, Tocoferol 0,1%, Alginato de sódio 1,24%, Ácido benzóico 0,19%, Água 77,24%, Extrato seco de própolis 0,1 a 1,0%, preferencialmente 0,20%, Mel 1,00 a 2,00%, preferencialmente 1,00%, e essência q.s.

2. Formulação em sabonete de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Ácido esteárico vegetal 11,06%, Gordura vegetal 7,69%, Óleo de sementes de uvas 7,54%, Lanolina 2,32%, Ácido benzóico 0,44%, Glicerina 7,42%, NaOH 6,02%, Água 6,01%, Álcool de cereais 23,59%, Plantaren 2000^® 6,90%, Plantaren 1200^® 6,94%, Tintura de propolis 6,00 a 8,00%, Mel 2,00 a 4,00%, e essência q.s.

3. Formulação em sabonete de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Ácido esteárico vegetal 10,75%, Gordura vegetal 8,87%, Óleo de sementes de uvas 7,33%, Lanolina 2,27%, Ácido benzóico 0,43%, Glicerina 6,43%, NaOH 5,86%, Água 5,74%, Álcool de cereais 22,88%, Plantaren 2000^® 6,76%, Plantaren 1200^® 6,74%, Tintura de propolis 6,00 a 8,00%, Mel 2,00 a 4,00%, Óleo de amêndoas doces 2,25%, e essência q.s.

4. Formulação em sabonete de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Ácido esteárico vegetal 11,22%, Manteiga de Karité 5,23%, Óleo de amêndoas 11,14%, Lanolina 2,59%, Ácido benzóico 0,48%, Plantaren 1200^® 6,57%, Plantaren 2000^® 6,64%, Glicerina 5,79%, Hidróxido de sódio 4,47%, Água 7,04%, Álcool de cereais 25,27%, Tintura de propolis 6,00 a 8,00%, Mel 2,00 a 4,00%, Óleo de abacate 3,00%, e essência q.s.

5. Formulação em sabonete de acordo com a composição da reivindicação 1 caracterizada por conter Ácido esteárico vegetal 12,17%, Manteiga de Karité 5,35%, Óleo de amêndoas 11,89%, Lanolina 2,74%, Ácido benzóico 0,55%, Plantaren 1200^® 6, 65%, Plantaren 2000^® 6,71%, Hidróxido de sódio 4,84%, Água 7,24%, Álcool de cereais 27,28%, Tintura de propolis 6,00 a 8,00%, Mel 2,00 a 4,00%, Óleo de abacate 3,00%, e essência q.s.