BR102022003965A2 - Extrato dos frutos do araçá (psidium cattleianum sabine) amarelo e vermelho: processo de obtenção e suas aplicações - Google Patents

Abstract

Extrato dos frutos do araçá (Psidium cattleianum Sabine) amarelo e vermelho: processo de obtenção e suas aplicações A presente invenção refere-se ao extrato dos frutos de araçá amarelo e vermelho para uso na prevenção e tratamento de doenças promovidas por microrganismos, em especial do gênero Cândida spp, além do uso como antioxidante natural em alimentos. Os compostos bioativos presentes nestes extratos dos frutos de araçá amarelo e vermelho conferem a presente invenção potente efeito antimicrobiano, antifúngico, antioxidante, com grande potencial para aplicação em fármacos fitoterápicos e/ou nutracêuticos.

Description

[001] A presente invenção se insere no campo da Biologia, mais precisamente na área de alimentos e saúde, e descreve o extrato dos frutos do araçá amarelo e vermelho com potente efeito antimicrobiano e antifúngico, em especial do gênero Cândida. Os compostos bioativos presentes nestes extratos dos frutos de araçá amarelo e vermelho conferem a presente invenção potente efeito antimicrobiano, antifúngico, antioxidante, com grande potencial para aplicação em fármacos fitoterápicos e/ou nutracêuticos, além do uso como antioxidante natural em alimentos.

[002] O Araçá (Psidium catteianum Sabine) é uma planta pertencente à família Myrtaceae. A espécie é caracterizada como uma pequena árvore/arbusto perene frutífera (1 a 4 m de altura) cujos diâmetros de fruto se situam entre 2,2 cm a 5 cm, com forma ovóide ou oblonga, pesando menos de 20 g, com número elevado de sementes. Psidium catteianum Sabine é uma planta nativa do Brasil, podendo ser encontrada do estado da Bahia até o Rio Grande do Sul, é também possível achar alguns exemplares no Uruguai, Havaí e ilhas do caribe devido ao fruto se adaptar bem ao clima.

[003] Os frutos podem apresentar três variedades com casca nas cores amarelo, vermelho ou creme; e polpa branca e em alguns casos vermelha, no entanto raras, sendo a prospecção morfológica demostra que 80% das frutas têm polpa creme, 11% branco e 9% vermelho pálido. Apesar das diferentes características de cor entre as variedades, as características comuns são de núcleo com uma polpa translúcida cheia de sementes.

[004] O araçá é uma fruta suculenta, assim podendo ser consumido tanto in natura quanto em seus derivados tecnológicos, sucos ou geleias as principais características do fruto é acidez, com polpa carnosa e toque picante. Muitos estudos demostram que o araçá é um fruto que apresenta um alto teor de ácido ascórbico além de muitos antioxidantes, principalmente os compostos fenólicos, polifenóis, flavonoides, carotenoides e terpenóides. Estes compostos bioativos são capazes de proteger os sistemas biológicos contra o excesso de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, desta forma prevenindo o desenvolvimento de doenças degenerativas, como aterosclerose, câncer, doenças cardiovasculares, diabetes, entre outras. Além disso, a planta apresenta atividade potencial para vários fins como: antimicrobiano, principalmente antifúngico.

[005] A candidíase vulvovaginal (VVC) é a doença infecciosa mais comum do trato genital. O microrganismo Candida albicans é o mais frequentemente encontrado em caso de infecções fúngicas oportunistas. A C. albicans torna-se um microrganismo oportunista quando há uma desregulação da microbiota vulvovaginal, diminuindo outros microrganismos presentes.

[006] Para avaliar a capacidade antioxidante in vivo dos extratos foi utilizado o modelo alternativo Caenorhabdtis elegans como modelo animal para este estudo.

[007] O artigo intitulado: Araçá (Psidium cattleianum Sabine) fruit extracts with antioxidant and antimicrobial activities and antiproliferative effect on human cancer cells. Medina e colaboradores 2011; publicado na revista Food Chemistry se refere ao extrato dos frutos de araçá amarelo e vermelho utilizando diferentes tipos de solventes e descrevendo alguns compostos bioativos presentes nestes diferentes tipos de extratos. O trabalho também descreve uma atividade antimicrobiana dos extratos frente a um microrganismo patogênico S. enteritidis (ATCC 13076). Ainda, os autores relatam um efeito antiproliferativo frente a linhagens de câncer de mama e cólon com ensaios in vitro.

[008] Outro artigo intitulado: Psidium cattleianum fruits: A review on its composition and bioactivity. Pereira, et al., 2018; também publicado na revista Food Chemistry, se refere a uma revisão da literatura abrangendo a composição fitoquímica e de compostos biotivos dos frutos do araçá e descreve os poucos trabalhos na literatura que apresentam atividades in vitro e in vivo dos frutos. Ressalta sua atividade antioxidante, antidiabética, anticâncer, antimicrobiana, antinflamatória e anti-aging dos frutos de araçá.

[009] A Figura 1 descreve a caracterização in vitro dos extratos de araçá amarelo e vermelho quanto ao teor de compostos fenólicos totais, flavonóides totais e carotenóides totais, além da atividade antioxidante in vitro utilizando os métodos de DPPH e FRAP. Os resultados são expressos em média ± desvio padrão. Nesta tabela podemos observar que o extrato dos frutos amarelos apresenta maior conteúdo de compostos fenólicos totais e flavonoides totais quando comparados aos frutos vermelhos que apresentam maior concentração de carotenoides.

[010] A Figura 2 descreve a caracterização de nutrientes dos frutos de araçá amarelo e vermelho quanto ao conteúdo de umidade, cinzas, proteínas, lipídios e outras características físico-químicas dos frutos.

[011] A Figura 3 demonstra os dados de grupos de compostos fenólicos presentes nos extratos de araçá amarelo e vermelho analisados em HPLC-DAD.

[012] A Figura 4 apresenta os dados de Concentração Inibitória Mínima (MIC) e Concentração Mínima Fungicida (MCF) dos microrganismos avaliados frente a exposição aos extratos de araçá amarelo e vermelho; e o controle de referência fluconazol. Nesta figura observa-se que os extratos de araçá amarelo e, em especial, de araçá vermelho apresentam ação antifúngica inclusive em gêneros de Candida albicans e não albicans.

[013] A Figura 5 apresenta os resultados do número de animais que apresentam candidíase positiva e negativa com o tratamento com os extratos de araçá amarelo e vermelho; e com o medicamento de referência clotrimazol. Também é possível observar a porcentagem de cura dos animais.

[014] A Figura 6 demonstra a sobrevivência (A e B) e a reprodução (C e D) nos C. elegans tratados com os extratos de araçá amarelo (A e C) e vermelho (B e D). Observa-se que os C. elegans tratados com extrato de araçá amarelo e vermelho não apresentaram sinais de toxicidade até o limite de concentração máximo possível de avaliação neste modelo. Pode-se concluir que os extratos não apresentam toxicidade nem na sobrevivência, nem na reprodução dos vermes, sendo seguros para uso em modelos animais.

[015] A Figura 7 apresenta os resultados de longevidade no C. elegans tratado com extrato de araçá amarelo (A) e vermelho (B).

[016] A Figura 8 apresenta os resultados de sobrevivência dos C. elegans tratados com extratos de araçá amarelo (A e B) e vermelho (C e D) tratados com o estressor peróxido de hidrogênio, a fim de demonstrar o efeito protetor ou de reversão dos danos causados pelo estressor. Pode-se observar que os extratos de araçá amarelo e vermelho apresentam efeito antioxidante capaz de prevenir e reverter o efeito de agentes estressores como peróxido de hidrogênio em C. elegans.

[017] A Figura 9 apresenta os resultados de sobrevivência dos C. elegans tratados com extratos de araçá amarelo (A) e vermelho (B) tratados com o estressor juglone, a fim de demonstrar o efeito protetor dos danos causados pelo estressor. Pode-se observar que os extratos de araçá amarelo e vermelho apresentam efeito antioxidante capaz de prevenir e reverter o efeito de agentes estressores como juglone em C. elegans.

[018] A Figura 10 demonstra os resultados de longevidade utilizando a cepa de C. elegans mev-1, a qual possui um defeito na cadeia de transporte de elétrons o que promove uma menor longevidade devido ao aumento no estresse oxidativo. C. elegans tratados com extratos de araçá amarelo (A) e vermelho (B). Pode-se observar o efeito antioxidante dos extratos de araçá amarelo e vermelho, uma vez que estes foram capazes de prolongar a vida de uma cepa de C. elegans com defeitos genéticos que aumentam o estresse oxidativo nos vermes.

[019] A presente invenção refere-se a uma composição compreendendo os extratos dos frutos de araçá amarelo e vermelho (individuais ou em composição) e veículos farmacêuticos aceitáveis e necessários para elaboração de formas farmacêuticas tradicionais ou aplicando processos de nano ou microencapsulação para uso no tratamento de infecções microbianas e/ou fúngicas; uso como antioxidante natural em formas farmacêuticas ou alimentícias; além dos mecanismos de ação envolvidos nestas atividades biológicas.

[020] Os veículos farmacêuticos aceitáveis podem ser selecionados de forma a permitir o desenvolvimento de formas farmacêuticas adequadas e com estabilidade e disponibilidade dos princípios ativos de forma satisfatória, tanto em formas farmacêuticas tradicionais quanto em micro e nanoformulações.

[021] Para atingir os objetivos da presente invenção, os extratos dos frutos de araçá amarelo e vermelho líquidos ou secos previamente (liofilização neste caso, ou qualquer outra forma de secagem que mantenha os compostos bioativos), obtido para fins de composição alimentícia e/ou farmacêutica e/ou fitoterápica e/ou nutracêutica, foi extraído de forma convencional (neste caso maceração ou qualquer outra forma de extração) a partir de solvente alcoólico, neste caso etanol, seguido de etapas de homogeneização, centrifugação e evaporação, sem, entretanto, restringir a forma de obtenção dos referidos extratos.

Claims (9)

1. [001] Extrato dos frutos do araçá caracterizado pelo fato de possuir efeito antimicrobiano, antifúngico, além do uso como antioxidante natural em alimentos.
2. [002] Extrato dos frutos do araçá caracterizado por sua obtenção compreender as etapas de: a) Trituração dos frutos de araçá (Psidium cattleianum Sabine) amarelo e vermelho (polpa, casca e sementes); b) Processo de homogeneização com solução etanólica (95°GL) em béquer protegido da luz, utilizando-se um misturador ultra-turrax por 30 minutos; c) Centrifugação por 5 minutos a 3000 rpm seguido de novo processo de homogeneização como descrito acima e nova centrifugação; d) Os sobrenadantes são unidos e evaporados em rotaevaporador com temperatura máxima de 40°C; e) O extrato seco é ressuspenso em água e liofilizado para obtenção do pó, sendo que o processo de secagem pode ser outro, de forma que mantenha a temperatura em no máximo 40°C para proteção dos compostos bioativos.
3. [003] Extrato dos frutos do araçá caracterizado por apresentar em sua composição compostos fenólicos como flavonóides e antocianinas, além de carotenóides e outros.
4. [004] Extrato dos frutos do araçá caracterizado por ser utilizado nas concentrações de 5 a 1250 μg de equivalentes de ácido clorogênico/mL.
5. [005] Extrato dos frutos do araçá caracterizado por ser utilizada em formas farmacêuticas tradicionais ou micro e nanoformulações.
6. [006] Extrato dos frutos do araçá caracterizado pelo seu uso na prevenção e tratamento de doenças promovidas por microrganismos e seus mecanismos de ação, em especial do gênero Cândida spp.
7. [007] Extrato dos frutos do araçá caracterizado por ser obtido para fins de composição alimentícia e/ou farmacêutica e/ou fitoterápica e/ou nutracêutica.
8. [008] Extrato dos frutos do araçá caracterizado por ser utilizado como composto ativo no tratamento de infecções microbianas e fúngicas, tanto de forma tópica como sistêmica.
9. [009] Extrato dos frutos do araçá caracterizado por ser desenvolvido em forma líquida e demais variações, como sólido, em pó, na forma de gel ou ainda seus gases.