WO2014096078A2 - Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthèse de mélanine - Google Patents

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WO2014096078A2
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longum
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bifidobacterium longum
skin
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Michela ZUCCOLO
Annick Mercenier
Guénolé PRIOULT
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Definitions

  • probiotic microorganisms as an agent promoting the synthesis of melanin
  • the present invention relates to the topical use of the strain of Bifidobacterium longum deposited under the number 1-2618 with the CNCM, to induce the pigmentation of the skin and hair, and to homogenize the complexion.
  • the color of human hair and skin is a function of various factors, such as seasons of the year, ethnicity, gender, and age. It is mainly determined by the concentration and distribution in keratinocytes of melanin produced by melanocytes.
  • Melanin a natural pigment known for its anti-radical and absorbing properties of solar radiation, is a physiological protective agent of the skin, existing in two major forms: eumelanin and pheo-melanin.
  • Melanocytes are the specialized cells that synthesize melanin and then distribute it to keratinocytes through particular organelles, melanosomes.
  • the melanocyte In the epidermis, the melanocyte is involved in the epidermal melanic unit, forming a distribution network between melanocytes and keratinocytes, which consists of a melanocyte surrounded by about 36 neighboring keratinocytes.
  • Melanocytes account for approximately 5 to 10% of basal layer cells of the epidermis. All individuals, regardless of phototype, have approximately the same number of melanocytes for a given skin area. Differences in pigmentation between individuals are not due to the number of melanocytes, but to the nature of the synthesized melanin and the biochemical and functional properties of melanosomes.
  • Melanosomes are highly specialized organelles whose sole function is the synthesis and transfer of melanin. They arise from the endoplasmic reticulum in the form of spherical vacuoles called pre-melanosomes that contain an amorphous protein substrate, but no melanogenic enzymes. During the maturation of the pre-melanosome, the amorphous substrate is organized into a fibrillar structure oriented in the longitudinal axis of the melanosome. There are four stages of development of melanosome corresponding to the intensity of melanization. Melanin is uniformly deposited on the inner fibrillar network of the melanosome and the opacity of the organelle increases to saturation.
  • melanosomes As melanosomes are synthesized in melanosomes, they move from the perinuclear region to the end of the melanocyte dendrites. By phagocytosis, the end of the dendrites is captured by keratinocytes, the membranes are degraded and the melanin content of the melanosomes is redistributed in the keratinocytes. The melanin is thus distributed in the epidermis, ensuring its browning and protection.
  • the pigmentation of hair and hair requires the presence of melanocytes in the bulb of the hair follicle.
  • the hair follicle is a tubular invagination of the epidermis that penetrates to the deep layers of the dermis.
  • the inner part of the bulb is a zone of cellular proliferation where the precursors of the keratinized cells constituting the hair are found.
  • the melanocytes in the bulb of the hair follicle are in an active state, that is, they synthesize melanin. These pigments are transmitted to the keratinocytes intended to form the hair shaft, which will lead to the growth of a pigmented hair or hair.
  • the mechanisms leading to the pigmentation of the skin and keratinous fibers, especially hair and hair, are highly regulated mechanisms, under the influence of multiple hormonal or cellular factors.
  • melanocytes finely regulated by these hormonal or cellular factors, makes it possible to confer on skin and keratin fibers a natural, homogeneous, more or less intense pigmentation, imparting an attractive aesthetic and cosmetic appearance.
  • changes in the physiology of the epidermis and hair follicle can alter the pigmentation of the skin, hair and hair.
  • these modifications may result in dysregulation of melanocyte homeostasis, manifested by disorders of proliferation, maturation or survival, possibly accompanied by an abnormality or an imbalance of the melanogenesis.
  • compositions containing a phosphodiesterase inhibitor (WO 95/17161), prostaglandins (WO 95/1 1003), DNA fragments (WO 95/01773), DNA encoding MSH receptors (WO 94/04674), diacylglycerols (WO 94/04122), tyrosine derivatives (EP 0585018), ballot extracts (WO 93/10804), or xanthine extracts (WO 91/07945) .
  • These different compounds act, directly or indirectly via ⁇ ' ⁇ -MSH or prostaglandins, so as to stimulate the biosynthesis of melanin, with or without UV action.
  • Probiotic microorganisms microorganisms that can have a positive effect on the health of the subject who ingests them, are widely used in the field of cosmetics.
  • application FR 2 756 181 describes the use of cosmetic compositions based on inactivated culture of bacteria of the Bifidobacterium type, mint oil and an acid to eliminate pigment spots.
  • the application EP 1 1 10 555 describes the use of a bacterial agent, for example an extract of Bifidobacterium bacteria, to stabilize and / or regenerate the cutaneous ecosystem of mammals, and treat, inter alia, pityriasis versicolor.
  • a bacterial agent for example an extract of Bifidobacterium bacteria
  • Application FR 2 912 917 describes the use of a conditioned culture medium, obtained by contact with peripheral blood cells stimulated by probiotics, to treat signs of inflammation and / or immune disorders, such as inflammatory hyperpigmentations, vitiligo or canitia.
  • WO 2008/015343 describes the use of yeast extracts to increase melanin synthesis, and treat vitiligo and canitie.
  • the application WO 2007/073122 describes the use of a fermented rice bran with a lactic acid bacteria to whiten the skin by preventing the synthesis of melanin.
  • US 2002/0168388 discloses the use of compositions comprising inactivated bacteria and extracellular plant matrix extract to counter UV radiation-induced damage.
  • compositions comprising probiotics for balancing the immune function of the skin after exposure to stress conditions.
  • the application FR 2 834 718 describes the use of active substances obtained by fermentation of vegetable seeds or fruits with Lactobacillus, Lactococcus or Leuconostoc bacteria to protect the skin from the harmful effects of UV rays and to regulate melanogenesis in the skin and skin. hair.
  • the application FR 2 920 307 describes the use of probiotics to treat the manifestations of discomfort and / or cutaneous signs associated with a surface skin treatment, among which the bleaching of the skin.
  • the application FR 2 920 306 describes the use of a Bifidobacterium lysate to prevent a decrease in and / or enhance the skin barrier function, and thus prevent and / or reduce skin irritations or signs of skin aging.
  • the application FR 2 920 300 describes the use of hesperidin in combination with a probiotic to enhance the barrier function of the skin and thus treat the cutaneous signs of aging.
  • probiotic Bifidobacterium as a pro-pigmenting agent, however, has not been suggested.
  • the inventors have surprisingly shown that the bacterial strain Bifidobacterium longum subsp. longum filed on January 29, 2001 under the number 1-2618 with the CNCM (Paris, France) according to the Treaty of Budapest, allowed to significantly induce cutaneous or capillary pigmentation.
  • this specific probiotic strain induces greater pigmentation than other types of known probiotics such as strains of Propionibacterium freudenreichii or Bacillus coagulans, but also other strains of Bifidobacterium longum.
  • the present invention thus relates to the non-therapeutic cosmetic use of at least one strain of probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum filed on January 29, 2001 under the number 1-2618 with the CNCM (Paris, France) according to the Treaty of Budapest, as agent inducing cutaneous and / or capillary pigmentation, to homogenize the color of the skin and / or the hair , in particular for preventing and / or treating an alteration of the homogeneity of the color of the skin and / or the hair, said at least one strain of probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 being administered topically.
  • probiotic microorganism strain Bifidobacterium longum subsp. longum filed on January 29, 2001 under the number 1-2618 with the CNCM (Paris, France) according to the Budapest Treaty, for its use, as agent inducing cutaneous and / or capillary pigmentation, for the prevention and / or the treatment an alteration of the homogeneity of the color of the skin and / or hair of pathological origin, said probiotic microorganism strain Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 being administered topically.
  • Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 The strain of bacterium Bifidobacterium longum used in the context of the present invention is a probiotic microorganism.
  • Probiotic microorganism means a living microorganism which, when administered in an adequate amount, has a positive effect on the health of its host ("Joint FAOAA HO Expert 10 Consultation on Evaluation of Health and Nutritional Properties of Probiotic in Food Including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria, October 6, 2001”).
  • the microorganism envisaged may be used live, or inactivated, unable to replicate. It is also possible to use a fraction of it or one of the components of this microorganism.
  • the strain of Bifidobacterium longum subsp. longum used in the context of the invention was filed January 29, 2001 with the CNCM (Paris, France), under the number 1-2618, and is for example described in Schell et al. (2002) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 99: 14422-14427.
  • the sequence of its genome is referenced as GenBank AE014295.
  • GenBank references cited above are those that were available on July 3, 2012.
  • the probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 used in the context of the invention can be used in an isolated or purified form, that is to say unmixed with one or more compound (s) likely (s) to be associated (s) in his home environment or in his propagation medium.
  • the probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 used in the context of the invention can be implemented in a living, semi-active, inactivated or dead form.
  • probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 used in the context of the invention can be implemented in a living or inactivated form.
  • the probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 can be used in inactivated or dead form.
  • an "inactivated" microorganism is a microorganism that is no longer capable, temporarily or permanently, of forming colonies in culture.
  • a "dead" microorganism is a microorganism that is no longer capable, definitively, of forming colonies in culture.
  • Dead or inactivated microorganisms may have intact or broken cell membranes.
  • the term “inactivated” also refers to extracts and lysates of microorganisms as detailed below. Obtaining dead or inactivated microorganisms can be carried out by any method known to those skilled in the art.
  • the probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 implemented according to the invention are at least partly inactivated or dead.
  • the term "at least partially inactivated probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618” refers to a preparation of probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 according to the invention comprising at least 80%, in particular at least 85%, more particularly at least 90% or at least 95%, at least 99%, or at least 99.99% of microorganisms probiotics Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 inactivated expressed as colony forming unit (cfu) compared to all probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp.
  • colony forming unit cfu
  • the invention comprises the implementation of a preparation comprising a maximum, preferably 100%, of probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 inactivated.
  • Longum inactivated CNCM I-2618 can be prepared by irradiation, heat treatment or, under certain conditions, lyophilization of a preparation of probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618. These methods are known to those skilled in the art. Other known techniques among which high pressure treatment or extrusion can also be envisaged by the skilled person.
  • the inactivation of probiotic microorganisms by irradiation may include the use of gamma rays, X-rays, or UV exposure.
  • the type of radiation, the intensity, the dose and the exposure time are adjusted by those skilled in the art according to the quantity and the nature of the probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 to inactivate.
  • Thermal inactivation can be achieved by incubating probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 of the invention for a given period of time, for example from 10 s to 90 min at a temperature of 100 to 150 ° C. Depending on the microorganism to be inactivated, it is possible to envisage a longer treatment, for example 2 hours, at 170 ° C.
  • Thermal inactivation can also be performed by autoclaving by subjecting the probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 of the invention at a temperature of 121 ° C for at least 20 minutes and at an atmospheric pressure of 2 bar.
  • thermal inactivation can be performed by subjecting the probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 to a series of freeze-thaw cycles.
  • the inactivation by lyophilization can be carried out by any method known in the art.
  • probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 inactivated by lyophilization can be re-cultured.
  • a probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 suitable for the invention is implemented in an inactivated form obtained by irradiation, in particular by gamma irradiation.
  • 2618 may be used in whole form, that is to say substantially in its native form, or in the form of extracts or lysates comprising fractions and / or metabolites of this microorganism .
  • fraction refers to a fragment or component of said microorganism having an induction efficiency of melanin synthesis by analogy with said whole microorganism.
  • the term "metabolite” refers to any substance derived from the metabolism of microorganisms, and in particular secreted by microorganisms
  • Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 considered according to the invention and also having an induction efficiency of melanin synthesis.
  • extract means a preparation containing inactivated microorganisms whose cell structure has not been destroyed or dissolved. Biological cells are generally not fragmented.
  • An extract or a lysate suitable for the invention can be prepared from bacteria Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 at the end of the growth phase.
  • a probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 suitable for the invention can be prepared in the form of a lysate.
  • a lysate in the sense of the invention commonly refers to a material obtained at the end of the destruction or dissolution of biological cells by a so-called cell lysis phenomenon thus causing the release of the intracellular biological constituents naturally contained in the cells of the microorganism under consideration and of fragments of cell membrane components.
  • the term "lysate” is used interchangeably to designate the entirety of the lysate obtained by inactivation of the microorganism concerned or only a fraction thereof.
  • the lysate used is therefore formed in all or part of the intracellular biological constituents and constituents of the cell walls and membranes of the probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 of interest.
  • This cellular inactivation for obtaining an extract or a lysate can be accomplished by various technologies, such as, for example, osmotic shock, thermal shock, ultrasound, or else under mechanical stress of centrifugation type, or combinations of these different technologies.
  • this lysate can be obtained according to the technology described in US Pat. No. 4,464,362, and in particular according to the following protocol.
  • a probiotic microorganism considered is cultured anaerobically in a suitable culture medium, for example according to the conditions described in US 4,464,362 and EP 0 043 128.
  • the culture medium can be inactivated by pasteurization, for example at a temperature of 60 to 65 ° C for 30 minutes.
  • the microorganisms may be collected by a conventional separation technique, for example membrane filtration, centrifuged and optionally resuspended in a sterile solution of NaCl at a physiological concentration.
  • a lysate In the case of a lysate, it can then be obtained by ultrasonic disintegration of such a medium in order to release the cytoplasmic fractions, the cell wall fragments and certain products resulting from the metabolism of these microorganisms. Then all components in their natural distribution can be stabilized in a weakly acidic aqueous solution.
  • a lysate having a concentration of about 0.1 to 50%, in particular from 1 to 20% and in particular about 5% by weight of active material (s) relative to its total weight.
  • the centrifugation can be applied at the end of fermentation (at the beginning of the stationary phase) before the heat treatment. It is also possible to recover the microorganisms and the supernatant and subsequently carry out the heat treatment, the assembly can then be dried.
  • an extract or a lysate of Bifidobacterium longum subsp. longum Preferably, an extract or a lysate of Bifidobacterium longum subsp. longum
  • CNCM 1-2618 used in the context of the invention is obtained by thermal shock.
  • the culture medium containing the microorganisms can be centrifuged.
  • the microorganism concentrate can then be inactivated by heat treatment, for example at temperatures of 71.7 ° C to 147 ° C for 3 seconds up to several minutes.
  • the bacterial concentration typically contains a portion of the metabolites produced during growth as well as the thermally treated bacterial walls.
  • the solution typically has a concentration of the order of 10 to 55%, in particular 12 to 20% and in particular about 15% by weight of active material (s) relative to its total weight.
  • the heat treatment applied can be carried out directly (direct contact between the product and the heat source such as steam) or indirectly (the product and the heat source are separated by a physical barrier). In the case of direct heat treatment, the treatment times may be shorter, of the order of a few seconds (from 1 to 15 s).
  • the culture medium containing the microorganisms (before or after centrifugation) can be concentrated by evaporation.
  • the heat treatment may be applied before and / or after the evaporation step.
  • the extract or lysate may be used in a variety of forms, such as a solution or in a powder form, preferably in the form of a solution. Storage in liquid form may require the application of a stabilizing treatment such as ultra-high temperature (UHT) treatment. Any method of stabilizing liquids known to those skilled in the art can be considered for the solution or suspension of Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618. A probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I-
  • 2618 used in the context of the invention may be formulated in a composition in a proportion of at least 0.0001% expressed by dry weight, in particular in a proportion of 0.0001 to 20% and more particularly in a proportion of 0.001 to 15%. %, in particular from 0.01 to 10%, and especially from 0.1 to 2% relative to the total dry weight of the composition containing it.
  • a probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM I-2618 used in the context of the invention is in particular formulated in a composition intended to be administered topically.
  • a composition for topical application according to the invention may generally comprise from 10 3 to 10 12 cfu / g, in particular from 10 5 to 10 10 cfu / g and more particularly from 10 7 to 10 9 cfu / g microorganisms Bifidobacterium longum subsp. live CNCM 1-2618 per gram of support or equivalent doses calculated for microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 inactivated or dead or for fractions of microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 or for metabolites produced.
  • microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 in inactivated or even dead form, especially in the form of a lysate or a cell extract, typically containing cell fragments and metabolites.
  • a microorganism Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 can also be included in a composition in the form of fractions of cellular components or in the form of metabolites, particularly in the form of an extract or in the form of a lysate.
  • the microorganism (s) Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, metabolite (s) or fraction (s) can also be introduced in the form of a freeze-dried powder, a culture supernatant and / or if appropriate in a form concentrated.
  • the contents of metabolites in the compositions correspond substantially to the contents that may be produced by the equivalent October 3 to October 15 cfu, particularly October 5 to October 15 cfu, more particularly 10 July at 10 12 cfu of microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 live per gram of support.
  • the expression of the amount of metabolites or fractions of an "ufc" microorganism, or of dead microorganisms, is intended to designate the quantity of this microorganism necessary for the production of said quantity of metabolites or fractions of microorganisms.
  • said at least one strain of Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 is formulated in a cosmetic composition further comprising a cosmetically acceptable vehicle.
  • a cosmetically acceptable vehicle is meant here a medium without odor or unpleasant appearance, and which does not generate tingling, tugging or redness unacceptable to the user, during administration, particularly when applied topically to the skin or its annexes.
  • the cosmetically acceptable vehicle will be adapted to the topical route of administration of the composition, in particular to the nature of the support to which the composition is to be applied, as well as to the form in which the composition is intended to be packaged, in particular solid or fluid at ambient temperature and atmospheric pressure.
  • the cosmetic composition used in the context of the invention may be in any of the galenical forms normally used for the mode of administration by the topical route.
  • a composition intended for topical administration can be an aqueous, hydroalcoholic or oily solution, a solution or dispersion of the lotion or serum type, a liquid or semi-liquid consistency emulsion of the milk type, obtained by dispersion of a fatty phase.
  • a suspension or an emulsion in an aqueous phase (O / W) or conversely (W / O), a suspension or an emulsion, of soft, semi-solid or solid consistency, of the cream type or of the aqueous or anhydrous gel type, a multiple emulsion (E / H / E or H / E / H), a microemulsion, a nanoemulsion, a microcapsule preparation, a microparticle preparation, or an ionic and / or nonionic type vesicular dispersion, or a wax / aqueous phase dispersion.
  • transdermal system allowing active or passive release of the active (s) by transdermy, for example patch or patch gel (hydrogel), or by injection.
  • compositions are prepared according to the usual methods.
  • a cosmetic composition used in the context of the invention may constitute a composition for treating or caring for the skin or the scalp, keratinous fibers such as the hair, the eyelashes or the eyebrows, or a sun protection or tanning composition. artificial, or a cleanser or makeup remover of the skin, hair, eyebrows or eyelashes, a deodorant product or a perfume compound.
  • the cosmetic composition used in the context of the invention is a sun protection or artificial tanning composition.
  • Such a composition may then be unstained or weakly colored, and may optionally contain additional cosmetic active agents, in particular as indicated below. It can then be used as a skin or lip care base, for example in the form of a lip balm, protecting the lips from the cold and / or the sun and / or wind, as a day or night care cream for the skin of the face and / or the body.
  • It may also be in the form of shampoo treatment or not, dye or not, or conditioner.
  • a cosmetic composition used in the context of the invention may also constitute a colored cosmetic composition and in particular a makeup composition for the skin, keratinous fibers, in particular the hair or the eyelashes, and / or mucous membranes, in particular such a composition.
  • a makeup composition for the skin, keratinous fibers, in particular the hair or the eyelashes, and / or mucous membranes, in particular such a composition.
  • it may be a colored makeup composition (beige or green) intended to correct the color of the complexion.
  • a composition administered topically may in particular constitute a cleaning cream, protection, treatment or care, a lotion, a gel or a mousse for the care of the skin or hair, such as a lotion for cleaning or disinfection, a composition for the bath or a deodorant composition.
  • a cosmetic composition used in the context of the invention may also consist of a solid preparation constituting a soap or a cleaning cake.
  • a cosmetic composition used in the context of the invention may be advantageously formulated to be administered on the scalp, the hair and the eyelashes, and in particular be prepared in the form of a solution. , a cream, a gel, an emulsion, a foam or in the form of an aerosol composition also containing a propellant under pressure.
  • a topical cosmetic composition used in the context of the invention may advantageously be formulated in any pharmaceutical form suitable for hair care, in particular in the form of a hair care lotion, for example a daily application. or bi-weekly, a shampoo, especially anti-dandruff, a conditioner, especially for weekly or bi-weekly application, a detangler, a cream or a hair gel, a treatment lotion, a dyeing composition (in particular oxidation) optionally in the form of a coloring shampoo, a restructuring lotion for hair, a permanent composition, a lotion or an anti-fall gel, a pest control shampoo, or a treatment shampoo, especially anti-seborrhoeic, a scalp care product including anti-irritant, anti-aging, restructuring, or blood circulation activator, a liquid soap or solid clearing and p e scalp daily application, a shaping product of the hairstyle, such as a lacquer, a styling product or a styling gel, a treatment mask, a cream or a foaming gel for cleaning
  • a cosmetic composition used in the context of the invention may be in the form of a mascara, pigmented or not, to be applied to the brush on the eyelashes or still on the hair of beard or mustache.
  • a cosmetic composition used in the context of the invention may be in the form of a hair cream or a hair lotion, a shampoo or a hair conditioner, a hair conditioner or a hair conditioner. hair mascara or eyelashes.
  • the proportion of the fatty phase may range from 5 to 80% by weight, and preferably from 10 to 50% by weight relative to the total weight of the composition.
  • the oils, emulsifiers and coemulsifiers used in the emulsion composition are chosen from those conventionally used in the cosmetics field.
  • the emulsifier and the coemulsifier may be present in the cosmetic composition in a proportion ranging from 0.3 to 30% by weight, and preferably from 0.5 to 30% by weight.
  • the fatty phase may represent more than 90% of the total weight of the composition.
  • the dosage forms dedicated to topical administration may also contain adjuvants customary in the cosmetic field, such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active agents, preservatives, antioxidants, solvents, perfumes, fillers, filters, odor absorbers and dyestuffs.
  • adjuvants customary in the cosmetic field such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active agents, preservatives, antioxidants, solvents, perfumes, fillers, filters, odor absorbers and dyestuffs.
  • the amounts of these various adjuvants are those conventionally used in the cosmetics field, and for example from 0.01% to 20% of the total weight of the composition.
  • adjuvants depending on their nature, can be introduced into the fatty phase and / or into the aqueous phase.
  • oils such as, for example, hydrogenated polyisobutene and petrolatum oil, vegetable oils such as, for example, a liquid fraction of shea, sunflower oil and apricot kernels, animal oils such as perhydrosqualene, synthesis including Purcellin oil, isopropyl myristate and ethyl hexyl palmitate, unsaturated fatty acids and fluorinated oils such as perfluoropolyethers.
  • fatty alcohols fatty acids such as, for example, stearic acid and, for example, waxes such as paraffin wax, carnauba wax and beeswax.
  • silicone compounds such as silicone oils and, for example, cyclomethicone and dimethicone, waxes, resins and silicone gums.
  • emulsifiers that can be used in the cosmetic compositions used in the context of the invention, mention may be made, for example, of glycerol stearate, polysorbate 60, cetylstearyl alcohol / cetylstearyl alcohol mixture oxyethylenated with 33 moles of ethylene oxide.
  • solvents that may be used in the cosmetic compositions used in the context of the invention, mention may be made of lower alcohols, in particular ethanol and isopropanol, and propylene glycol.
  • the cosmetic composition used in the context of the invention may also advantageously contain a thermal and / or mineral water, in particular chosen from Vittel water, the waters of the Vichy basin and the Roche Posay water.
  • hydrophilic gelling agents As hydrophilic gelling agents, mention may be made of carboxylic polymers such as carbomer, acrylic copolymers such as copolymers of acrylates / alkyl acrylates, polyacrylamides and in particular the mixture of polyacrylamide, C13-14 Isoparaffin and Laureth-7 sold under the name of Sepigel 305 ® by the company SEPPIC, polysaccharides such as cellulose derivatives such as hydroxyalkylcelluloses, and in particular hydroxypropylcellulose and hydroxyethylcellulose, natural gums such as guar, locust bean and xanthan and clays.
  • carboxylic polymers such as carbomer, acrylic copolymers such as copolymers of acrylates / alkyl acrylates, polyacrylamides and in particular the mixture of polyacrylamide, C13-14 Isoparaffin and Laureth-7 sold under the name of Sepigel 305 ® by the company SEPPIC
  • polysaccharides such as cellulose
  • lipophilic gelling agents mention may be made of modified clays such as bentones, metal salts of fatty acids such as aluminum stearates and hydrophobic silica, or else ethylcellulose and polyethylene.
  • the cosmetic composition as defined above further comprises an additional cosmetic active.
  • such additional asset may be intended to exert a cosmetic effect, care or hygiene on the skin, hair, eyelashes, hair and / or scalp.
  • the additional active agents are chosen by those skilled in the art so that they do not interfere with the effect of the probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 of the invention.
  • a probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 as defined above in the section "Bifidobacterium longum subsp length CNCM 1-2618", can be advantageously used with, as additional active ingredient, a non-probiotic microorganism, in particular the strain Vitreoscilla filiformis.
  • non-probiotic microorganism can be used in living, semi-active, inactivated or dead form, in particular as defined in the section "Bifidobacterium longum subsp length CNCM 1-2618" above.
  • Vitreoscilla filiformis as described in particular in the patent application FR 0 625 782, can be used in a living form or in a fractionated or complete lysate form with its culture medium after evapo-concentration of the H 2 composition. 0.
  • the cosmetic composition used in the context of the invention may further comprise all the usual cosmetic additives such as water, solvents, oils, waxes, pigments, fillers, surfactants, cosmetic active agents, UV filters, polymers, gelling agents, preservatives and perfumes.
  • cosmetic additives such as water, solvents, oils, waxes, pigments, fillers, surfactants, cosmetic active agents, UV filters, polymers, gelling agents, preservatives and perfumes.
  • the cosmetic composition used in the context of the invention further comprises UV filters.
  • the inventors have observed that the application of probiotic microorganisms of the Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I-2618 regulates melanocyte homeostasis by promoting melanin synthesis, more effectively than other probiotic microorganisms such as Propionibacterium freudenreichii or Bacillus coagulans, or other strains of Bifidobacterium longum.
  • probiotic microorganisms of the Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I-2618 regulates melanocyte homeostasis by promoting melanin synthesis, more effectively than other probiotic microorganisms such as Propionibacterium freudenreichii or Bacillus coagulans, or other strains of Bifidobacterium longum.
  • probiotic microorganisms of the Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I-2618 regulates melanocyte homeostasis by promoting melanin synthesis,
  • the present invention relates more particularly to the non-therapeutic cosmetic use of a strain of Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, as defined in the section "Bifidobacterium longum subsp length CNCM 1-2618" above, optionally formulated in a cosmetic composition as defined in the section "Cosmetic composition” above, as agent inducing cutaneous pigmentation and / or capillary, for physiologically inducing pigmentation and thus in particular preventing and / or treating an alteration of the homogeneity of the color of the skin and / or the hair, said probiotic microorganism strain Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 being administered topically.
  • the cosmetic composition used in the context of the invention can in particular be used in healthy subjects, typically subjects that do not have any alterations in the homogeneity of the skin color and / or the hair of origin. pathological.
  • tanning agent advantageously as a tanning agent independent of sunlight and / or UV rays, or to accelerate and / or intensify the tan.
  • the cosmetic composition used in the context of the invention may also be used to prevent and / or cosmetically treat a cutaneous and / or capillary pigmentation defect resulting from an imbalance in melanocyte homeostasis.
  • the imbalance of melanocyte homeostasis may be an imbalance in proliferation and / or maturation and / or survival of melanocytes.
  • Proliferation, maturation and survival concern the different life stages of a cell in a tissue of an organism, ie its division from a stem cell or a mother cell, its differentiation allowing it to acquisition of characters specific to the tissue in which it fits, such as the expression of the different enzymes and proteins necessary for melanogenesis, and its maintenance until its senescence and apoptosis.
  • Dysregulation of these steps may result in an imbalance in the distribution of melanocytes in the epidermis or in the follicle, or an imbalance in melanogenesis affecting, for example, the natural color of the epidermis, hair or hair.
  • the pigmentation defects concerned by the invention result from an imbalance of melanogenesis.
  • the imbalance of melanocyte homeostasis resulting in the pigmentation defects concerned by the invention may also be associated with skin aging or scalp, and in particular be aggravated by this aging.
  • the pigmentation disorders concerned by the invention may relate to the epidermis, the scalp, the hair, the hairs or the eyelashes.
  • Canitia is a natural hair whitening that occurs with age, and is primarily associated with a decrease in melanin in the hair shaft. More specifically, canities are linked to a specific and progressive rarefaction of hair melanocytes, affecting both the hair bulb melanocytes and the melanocyte precursor cells.
  • the implementation of the invention makes it possible to reduce or even to slow down or delay the appearance of the white hair and the graying of the hair.
  • the present invention makes it possible to stimulate, or even reactivate, melanogenesis, in order to delay, reduce or even reduce canities.
  • composition used in the context of the invention may also be used in subjects having alterations in the homogeneity of the color of the skin and / or the hair, in particular subjects with skin pigmentation defects and / or or cosmetic capillary related to an accumulation, in particular heterogeneous melanin, to homogenize the color of the skin and / or hair.
  • Such cutaneous and / or capillary pigmentation defects related to a heterogeneous accumulation of melanin include melasma, acne pigment sequelae, post-inflammatory pigmentation, depigmentations due to burns or surgery and benign facial dyschromias.
  • compositions used in the context of the invention make it possible to reduce the observed dyschromias and to homogenize the color of the skin, in particular by increasing or improving the pigmentation of the skin around the hyperpigmented areas and / or by increasing or improving the pigmentation of the skin in hypopigmented areas.
  • the alteration of the homogeneity of the skin and / or hair targeted by the present invention is selected from the group consisting of canities, melasma, acne pigment sequelae, post-inflammatory pigmentation, depigmentation due to burns or surgery and benign facial dyschromias.
  • the present invention also relates to a non-therapeutic cosmetic treatment method for physiologically inducing the pigmentation of the skin and / or the hair, and thus to homogenize the color of the skin and / or the hair, and in particular to prevent and / or treat a alteration of the homogeneity of the skin color and / or hair, in which a cosmetically effective amount of a strain of Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, as defined in the section "Bifidobacterium longum subsp length CNCM I-2618" above, optionally formulated in a cosmetic composition as defined in the section "Cosmetic composition" above.
  • cosmetically effective amount is meant here a sufficient amount of agents used in the context of the invention to treat and / or prevent said cosmetic disorder, which does not generate unacceptable side effects for the user.
  • This strain of Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618, optionally formulated in a cosmetic composition, is administered topically.
  • the application of the cosmetic composition is for example in the form of a mask, on the skin, the scalp or the hair.
  • strain of Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 optionally formulated in a cosmetic composition, implemented in the context of the invention may in particular be applied to the face or the body.
  • the present invention also relates to a method for preventing and / or treating an alteration of the color homogeneity of the skin and / or hair of pathological origin in a subject, comprising topical administration in a subject. subject who requires a therapeutically effective amount of a probiotic microorganism strain Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 as defined in the section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618" above.
  • the present invention also relates to the use of a strain of
  • Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 as defined in the section "Bifidobacterium longum subsp length CNCM 1-2618" above, for the manufacture of a pharmaceutical composition, administrable topically, for the prevention and / or treatment of an alteration of the homogeneity of the color of the skin and / or hair of pathological origin.
  • alteration of the homogeneity of the color of the skin and / or hair of pathological origin refers to an alteration of the homogeneity of the skin and / or hair color observed during dermatological conditions, resulting from a deficit or absence of melanin or a heterogeneous distribution of melanin, in particular dyspigmentation.
  • dispigmentation is meant an abnormality of pathological origin in the formation or distribution of melanin at the cutaneous or capillary level.
  • the cutaneous and / or capillary diseases of pigmentation deviate from the cosmetic field by the degree of severity and the intensity of the symptoms by which they manifest themselves.
  • the probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 defined above will make it possible to homogenize the skin color, in particular by increasing and / or improving the pigmentation of the skin in depigmented or hypopigmented areas.
  • Such alterations include in particular the alterations in the homogeneity of the skin color associated with vitiligo.
  • the probiotic microorganisms Bifidobacterium longum subsp. Longum CNCM 1-2618 defined above will help to homogenize the color of the skin, in particular by increasing and / or improving the pigmentation of the skin around the hyperpigmented areas.
  • Such alterations include, in particular, alterations in the homogeneity of the skin color or complexion associated, inter alia, with actinic lentigines or with the dermatitis of the meadows.
  • the alterations in the homogeneity of the color of the skin and / or hair of pathological origin are chosen from actinic lentigo, meadow dermatitis and vitiligo.
  • the ingredients are mixed before being shaped in the order and under conditions easily determined by those skilled in the art.
  • compositions of the invention are adjusted by those skilled in the art so as not to substantially affect the properties required for the compositions of the invention.
  • the Figure is a set of histograms showing the melanin level, in percent relative to the control, quantified in co-cultures of primary keratinocytes (NHEK) and primary melanocytes (NHEM) incubated for 72 h with culture medium alone ( control), from ⁇ to 200 ⁇ (IBMX) as a positive control, a lysate or extract of Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 (B. longum CNCM 1-2618 1%), a lysate of Bifidobacterium longum Repair Complex CLR ® (B. longum CLR 1%), a lysate of Propionibacterium freudenreichii (P. freundenreichii 0.2%) and a lysate of Bacillus coagulans (B. coagulans 0.2 mg / ml).
  • This example demonstrates the pro-pigmenting activity of the probiotic microorganism Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618.
  • NHEM Primary human melanocytes
  • NHEK normal human epidermal keratinocytes
  • IBMX positive control, 200 ⁇ l
  • a lysate or extract of Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 1%
  • a comparative lysate from another strain of Bifidobacterium longum Repair Complex CLR ® 1%
  • an extract from Propionibacterium freudenreichii 0.2%)
  • a Bacillus coagulans extract (2 mg / ml).
  • the cells were incubated for 72 h, all experimental conditions having been performed in triplicate. After 72 hours of incubation, the cells were lysed with a 0.5 N NaOH solution in order to extract the melanin. The optical density of the samples was measured at 405 nm, with reference to an exogenous melanin range (standard melanin curve 0.39 to 100 ⁇ g / ml). The results are expressed as a percentage of relative stimulation compared with the control grown in standard co-culture medium. They were analyzed with Student's statistical test:
  • the inventors have thus shown that the incubation of NHEK / NHEM co-cultures with lysates of probiotic microorganisms made it possible to significantly increase melanin production by melanocytes compared with untreated cocultures (see FIG. .
  • B. longum Repair Complex CLR ® an increase of about 1, 4 times. It should be noted that the increase observed with B. longum subsp. longum CNCM 1-2618 is even greater than that obtained with the IBMX positive control.
  • Example 2 Topical compositions according to the invention
  • compositions for topical use particularly suited to the implementation of the present invention. Unless otherwise indicated, the values below are expressed as percentage by weight relative to the weight of the composition.
  • Example 2A Lotion for the face
  • Example 2B Milk for facial care (sleep repairer)
  • Example 2C Gel for the facial care (to be stored at 4 ° C.)
  • Hydroxypropylcellulose (Klucel H ® sold by HERCULES) 1, 00
  • Example 2D Gel for facial care (to be stored at 4 ° C)
  • Hydroxypropylcellulose (Klucel H sold by HERCULES) 1.00 Full culture inactivated and evapoconcentrated

Landscapes

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Abstract

La présente invention concerne l'utilisation, par voie topique, de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I-2618, comme agent pro-pigmentant, notamment dans la prévention et/ou le traitement d'altérations de la couleur de la peau et/ou des cheveux et pour homogénéiser le teint.

Description

Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthèse de mélanine
La présente invention concerne l'utilisation par voie topique de la souche de Bifidobacterium longum déposée sous le numéro 1-2618 auprès de la CNCM, pour induire la pigmentation de la peau et des cheveux, et homogénéiser le teint.
La couleur des cheveux et de la peau humaine est fonction de différents facteurs, tels que les saisons de l'année, l'origine ethnique, le sexe et l'âge. Elle est principalement déterminée par la concentration et la distribution, dans les kératinocytes, de la mélanine produite par les mélanocytes. La mélanine, pigment naturel reconnu pour ses propriétés anti-radicalaires et absorbantes des rayonnements solaires, est un agent protecteur physiologique de la peau, existant sous deux formes majoritaires : l'eumélanine et la phéo-mélanine.
Les mélanocytes sont les cellules spécialisées qui synthétisent la mélanine puis la distribuent aux kératinocytes par l'intermédiaire d'organelles particulières, les mélanosomes.
Dans l'épiderme, le mélanocyte est impliqué dans l'unité mélanique épidermique, formant un réseau de distribution entre mélanocytes et kératinocytes, qui est constitué par un mélanocyte entouré d'environ 36 kératinocytes voisins. Les mélanocytes comptent pour environ 5 à 10% des cellules de la couche basale de l'épiderme. Tous les individus, sans distinction de phototype, ont approximativement le même nombre de mélanocytes pour une zone cutanée donnée. Les différences de pigmentation entre les individus ne sont pas dues au nombre de mélanocytes, mais à la nature de la mélanine synthétisée et aux propriétés biochimiques et fonctionnelles des mélanosomes.
Les mélanosomes sont des organelles hautement spécialisées dont l'unique fonction est la synthèse et le transfert de mélanine. Ils naissent du réticulum endoplasmique sous forme de vacuoles sphériques appelées pré-mélanosomes qui contiennent un substrat protéinique amorphe, mais pas d'enzymes mélanogènes. Au cours de la maturation du pré-mélanosome, le substrat amorphe s'organise en une structure fibrillaire orientée dans l'axe longitudinal du mélanosome. On distingue quatre stades du développement du mélanosome correspondant à l'intensité de la mélanisation. La mélanine est déposée uniformément sur le réseau fibrillaire interne du mélanosome et l'opacité de l'organelle augmente jusqu'à saturation. Au fur et à mesure de la synthèse de la mélanine dans les mélanosomes, ceux-ci se déplacent de la région périnucléaire vers l'extrémité des dendrites des mélanocytes. Par phagocytose, l'extrémité des dendrites est capturée par les kératinocytes, les membranes sont dégradées et le contenu en mélanine des mélanosomes est redistribué dans les kératinocytes. La mélanine est ainsi répartie dans l'épiderme, assurant son brunissement et sa protection.
Pour ce qui est de la couleur des cheveux et des poils, elle repose notamment sur la présence en quantités et ratios variables de deux groupes de mélanines : les eumélanines (pigments bruns à noirs) et les phéo-mélanines (pigments rouges à jaunes). La pigmentation du cheveu et des poils requiert la présence de mélanocytes au niveau du bulbe du follicule pileux. Le follicule pileux est une invagination tubulaire de l'épiderme qui s'enfonce jusqu'aux couches profondes du derme. La partie intérieure du bulbe est une zone de prolifération cellulaire où se trouvent les précurseurs des cellules kératinisées constituant le cheveu. Les mélanocytes au niveau du bulbe du follicule pileux sont dans un état actif, c'est-à-dire qu'ils synthétisent de la mélanine. Ces pigments sont transmis aux kératinocytes destinés à former la tige pilaire, ce qui conduira à la pousse d'un cheveu ou d'un poil pigmenté.
Les mécanismes conduisant à la pigmentation de la peau et des fibres kératiniques, notamment des poils et des cheveux, sont des mécanismes hautement régulés, sous la dépendance de multiples facteurs hormonaux ou cellulaires.
L'homéostasie des mélanocytes, finement régulée par ces facteurs hormonaux ou cellulaires, permet de conférer à la peau et aux fibres kératiniques une pigmentation naturelle, homogène, plus ou moins intense, conférant un aspect esthétique et cosmétique attractif.
Or, dans la plupart des populations, l'obtention d'une coloration brune de la peau et le maintien d'une coloration constante de la chevelure sont des aspirations importantes. Le maintien d'un teint bronzé et d'une chevelure naturellement pigmentée sont des facteurs fortement impliqués dans l'obtention d'un aspect cosmétique attractif.
Par ailleurs, des modifications de la physiologie de l'épiderme et du follicule pileux, notamment liées à l'âge, peuvent altérer la pigmentation de la peau, des cheveux et des poils. En particulier, ces modifications peuvent se traduire par une dysrégulation de l'homéostasie des mélanocytes, se manifestant par des troubles de la prolifération, de la maturation ou de la survie, le cas échéant accompagné d'une anomalie ou d'un déséquilibre de la mélanogenèse.
Il existe d'autre part des maladies de la pigmentation comme par exemple le vitiligo qui est une maladie auto-immune se caractérisant par l'apparition sur la peau de plaques blanches liées à un défaut de pigmentation. Il existe donc un réel besoin de produit facilitant et/ou améliorant la pigmentation de la peau et/ou des poils et/ou des cheveux, et utilisable par voie topique.
De nombreuses solutions ont été proposées dans le domaine de la coloration artificielle par apport de colorants exogènes, tels que la DHA, censés donner à la peau et/ou aux poils et/ou aux cheveux une coloration la plus proche possible de ce qu'elle est naturellement ou, dans le domaine de la coloration naturelle, par stimulation des voies naturelles de pigmentation, par exemple en utilisant des actifs stimulant la mélanogenèse avec ou sans action des UV.
Il a ainsi été proposé d'utiliser des compositions contenant un inhibiteur de phosphodiestérases (WO 95/17161 ), des prostaglandines (WO 95/1 1003), des fragments d'ADN (WO 95/01773), de l'ADN codant des récepteurs de MSH (WO 94/04674), des diacylglycérols (WO 94/04122), des dérivés de tyrosine (EP 0585018), des extraits de ballote (WO 93/10804), ou des extraits de xanthine (WO 91/07945). Ces différents composés agissent, directement ou indirectement par l'intermédiaire de Ι'α-MSH ou des prostaglandines, de façon à stimuler la biosynthèse de la mélanine, avec ou sans action des UV.
D'excellents résultats sont certes obtenus par les solutions proposées dans l'état de la technique, mais les composés utilisés présentent souvent des effets secondaires non négligeables ou sont des mélanges complexes qui ne présentent pas de spécificité.
La découverte de substances alternatives ayant un effet sur la pigmentation de la peau et/ou des poils et/ou des cheveux reste donc un objectif majeur de la recherche.
En particulier, il existe toujours un besoin de disposer d'actifs alternatifs, en particulier cosmétiques, pouvant de préférence être administrés par voie topique, qui induisent physiologiquement la pigmentation.
II existe encore un besoin de disposer d'actifs alternatifs favorisant la mélanogenèse.
Il existe encore un besoin de disposer d'actifs alternatifs permettant de réguler la synthèse ou l'accumulation de mélanine dans l'épiderme.
Il existe encore un besoin de disposer d'actifs alternatifs permettant d'augmenter les dépôts de mélanine dans les cheveux et/ou les poils.
Il existe encore un besoin de disposer d'actifs alternatifs pour faciliter et/ou améliorer la pigmentation de la peau et/ou des poils et/ou des cheveux dans le domaine de la dermatologie et de la cosmétique.
Il existe encore un besoin de disposer d'actifs alternatifs utiles pour prévenir et/ou limiter et/ou stopper le développement de la canitie, voire maintenir la pigmentation naturelle des cheveux et/ou des poils gris ou blancs. La présente invention a notamment pour objet de satisfaire ces besoins.
Les microorganismes probiotiques, des microorganismes pouvant avoir un effet positif sur la santé du sujet qui les ingère, sont largement utilisés dans le domaine de la cosmétique.
Ainsi, la demande FR 2 756 181 décrit l'utilisation de compositions cosmétiques à base de culture inactivée de bactéries de type Bifidobacterium, d'huile de menthe et d'un acide pour éliminer les tâches pigmentaires.
La demande EP 1 1 10 555 décrit l'utilisation d'un agent bactérien, par exemple d'un extrait de bactéries Bifidobacterium, pour stabiliser et/ou régénérer l'écosystème cutané des mammifères, et traiter, entre autres, le pityriasis versicolor.
La demande FR 2 912 917 décrit l'utilisation d'un milieu de culture conditionné, obtenu par contact avec des cellules du sang périphérique stimulées par des probiotiques, pour traiter des signes de l'inflammation et/ou des désordres immunitaires, tels que les hyperpigmentations inflammatoires, le vitiligo ou la canitie.
La demande WO 2008/015343 décrit l'utilisation d'extraits de levure pour augmenter la synthèse de mélanine, et traiter le vitiligo et la canitie.
La demande WO 2007/073122 décrit l'utilisation d'un son de riz fermenté avec une bactérie lactique pour blanchir la peau en empêchant la synthèse de mélanine.
La demande US 2002/0168388 décrit l'utilisation de compositions comprenant des bactéries inactivées et un extrait de matrice extracellulaire de plante pour contrer les dommages induits par les radiations UV.
La demande WO 02/28402 décrit l'utilisation de compositions comprenant des probiotiques pour équilibrer la fonction immunitaire de la peau après exposition à des conditions de stress.
La demande FR 2 834 718 décrit l'utilisation de substances actives obtenues par fermentation de semences végétales ou de fruits avec les bactéries Lactobacillus, Lactococcus ou Leuconostoc pour protéger la peau des effets nocifs des rayons UV et pour réguler la mélanogenèse dans la peau et les cheveux.
La demande FR 2 920 307 décrit l'utilisation de probiotiques pour traiter les manifestations d'inconfort et/ou de signes cutanés associées à un traitement cutané de surface, parmi lesquels le blanchiment de la peau.
La demande FR 2 920 306 décrit l'utilisation d'un lysat de Bifidobacterium pour prévenir une diminution de et/ou renforcer la fonction barrière cutanée, et ainsi prévenir et/ou diminuer des irritations cutanées ou les signes du vieillissement cutané. La demande FR 2 920 300 décrit l'utilisation d'hespéridine en combinaison avec un probiotique pour renforcer la fonction barrière de la peau et ainsi traiter les signes cutanés du vieillissement.
L'utilisation du probiotique Bifidobacterium comme agent pro-pigmentant n'a cependant pas été suggérée.
Or les inventeurs ont ici montré de manière surprenante que la souche bactérienne Bifidobacterium longum subsp. longum déposée le 29 janvier 2001 sous le numéro 1-2618 auprès de la CNCM (Paris, France) selon le Traité de Budapest, permettait d'induire de manière significative la pigmentation cutanée ou capillaire. En particulier, cette souche de probiotique spécifique permet d'induire une pigmentation plus importante que d'autres types de probiotiques connus tels que les souches de Propionibacterium freudenreichii ou de Bacillus coagulans, mais aussi que d'autres souches de Bifidobacterium longum.
La présente invention concerne donc l'utilisation cosmétique non-thérapeutique d'au moins une souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum déposée le 29 janvier 2001 sous le numéro 1-2618 auprès de la CNCM (Paris, France) selon le Traité de Budapest, comme agent induisant la pigmentation cutanée et/ou capillaire, pour homogénéiser la couleur de la peau et/ou des cheveux, en particulier pour prévenir et/ou traiter une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux, ladite au moins une souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 étant administrée par voie topique.
Elle concerne également une souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum déposée le 29 janvier 2001 sous le numéro 1-2618 auprès de la CNCM (Paris, France) selon le Traité de Budapest, pour son utilisation, comme agent induisant la pigmentation cutanée et/ou capillaire, pour la prévention et/ou le traitement d'une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux d'origine pathologique, ladite souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 étant administrée par voie topique. Description détaillée de l'invention
Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 La souche de bactérie Bifidobacterium longum utilisée dans le cadre de la présente invention est un microorganisme probiotique.
On entend par "microorganisme probiotique" un microorganisme vivant, qui, lorsqu'il est administré en quantité adéquate, a un effet positif sur la santé de son hôte ("Joint FAOAA HO Expert 10 Consultation on Evaluation of Health and Nutritional Properties of Probiotic in Food Including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria, 6 octobre 2001 ").
Au sens de la présente invention, le microorganisme envisagé peut être utilisé vivant, ou inactivé, incapable de se répliquer. On peut également utiliser une fraction de celui-ci ou l'un des composants de ce microorganisme.
La souche de Bifidobacterium longum subsp. longum utilisée dans le cadre de l'invention a été déposée le 29 janvier 2001 auprès de la CNCM (Paris, France), sous le numéro 1-2618, et est par exemple décrite dans Schell et al. (2002) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 99:14422-14427. La séquence de son génome est référencée sous le numéro GenBank AE014295.
Dans le contexte de l'invention, les références GenBank citées ci-dessus sont celles qui étaient disponibles le 3 juillet 2012.
Selon une variante de l'invention, le microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 utilisé dans le cadre de l'invention peut être mis en œuvre sous une forme isolée ou purifiée, c'est-à-dire non mélangée à un ou des composé(s) susceptible(s) de lui être associé(s) dans son milieu d'origine ou dans son milieu de propagation.
Selon une variante de l'invention, le microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 utilisé dans le cadre de l'invention peut être mis en œuvre sous une forme vivante, semi-active, inactivée ou morte.
En particulier, le microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 utilisé dans le cadre de l'invention peut être mis en œuvre sous une forme vivante ou inactivée.
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 peut être mis en œuvre sous forme inactivée ou morte.
Au sens de l'invention, un microorganisme "inactivé" est un microorganisme qui n'est plus capable, temporairement ou définitivement, de former des colonies en culture.
Au sens de l'invention, un microorganisme "mort" est un microorganisme qui n'est plus capable, définitivement, de former des colonies en culture.
Les microorganismes morts ou inactivés peuvent avoir les membranes cellulaires intactes ou rompues. Ainsi le terme "inactivé" désigne également les extraits et les lysats de microorganismes comme détaillés ci-après. L'obtention de microorganismes morts ou inactivés peut être effectuée par toute méthode connue de l'homme du métier. Selon un mode de réalisation avantageux, les microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 mis en œuvre selon l'invention sont au moins en partie inactivés ou morts.
Par "microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 au moins en partie inactivés", on désigne une préparation de microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 conformes à l'invention comprenant au moins 80 %, en particulier au moins 85 %, plus particulièrement au moins 90 %, voire au moins 95 %, au moins 99 %, ou au moins 99,99 % de microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 inactivés exprimés en unité formant colonie (ufc) par rapport à la totalité des microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 vivants non inactivés contenus dans la préparation initiale avant d'être soumise à un procédé d'inactivation. Le taux d'inactivation obtenu dépend des conditions d'application de la méthode d'inactivation qui sont ajustées par l'homme du métier selon le taux d'inactivation à obtenir. Selon un mode de réalisation, l'invention comprend la mise en œuvre d'une préparation comprenant un maximum, de préférence 100%, de microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 inactivés.
Un microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I- 2618 inactivé convenant à l'invention peut être préparé par irradiation, traitement thermique ou, sous certaines conditions, par lyophilisation d'une préparation de microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618. Ces méthodes sont connues de l'homme du métier. D'autres techniques connues parmi lesquelles le traitement haute pression ou l'extrusion peuvent également être envisagées par l'homme du métier.
Plus particulièrement, l'inactivation de microorganismes probiotiques par irradiation peut comprendre la mise en œuvre de rayons gamma, de rayons X ou une exposition aux UV. Le type de rayonnement, l'intensité, la dose et le temps d'exposition sont ajustés par l'homme du métier selon la quantité et la nature des microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 à inactiver.
L'inactivation thermique peut être réalisée en incubant les microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 de l'invention pendant une période de temps donnée, par exemple de 10 s à 90 min à une température de 100 à 150 °C. Selon le microorganisme à inactiver, on peut envisager un traitement plus long, par exemple 2 h, à 170° C.
L'inactivation thermique peut également être opérée par autoclavage en soumettant les microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 de l'invention à une température de 121 °C, pendant au moins 20 minutes et à une pression atmosphérique de 2 bars.
Alternativement, l'inactivation thermique peut être effectuée en soumettant les microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 à une série de cycles de congélation-décongélation.
L'inactivation par lyophilisation peut être effectuée par toute méthode connue dans le domaine. Avantageusement, des microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 inactivés par lyophilisation peuvent être remis en culture.
De préférence, un microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 convenant à l'invention est mis en œuvre sous une forme inactivée obtenue par irradiation, notamment par irradiation gamma.
Un microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I-
2618 selon l'invention peut être mis en œuvre sous forme entière, c'est-à-dire pour l'essentiel dans sa forme native, ou sous forme d'extraits ou de lysats comprenant des fractions et/ou des métabolites de ce microorganisme.
Au sens de l'invention, le terme "fraction" désigne un fragment ou composant dudit microorganisme doté d'une efficacité d'induction de la synthèse de mélanine par analogie audit microorganisme entier.
Au sens de l'invention, le terme "métabolite" désigne toute substance issue du métabolisme des microorganismes, et notamment sécrétée par les microorganismes
Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 considérés selon l'invention et dotée également d'une efficacité d'induction de la synthèse de mélanine.
Au sens de l'invention, on entend par "extrait" une préparation contenant des microorganismes inactivés dont la structure cellulaire n'a pas subi de destruction ou de dissolution. Les cellules biologiques ne sont dans l'ensemble pas fragmentées.
Un extrait ou un lysat convenant à l'invention peut être préparé à partir de bactéries Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 en fin de phase de croissance.
Selon un mode de réalisation, un microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 convenant à l'invention peut être préparé sous forme d'un lysat.
Un lysat au sens de l'invention désigne communément un matériau obtenu à l'issue de la destruction ou dissolution de cellules biologiques par un phénomène dit de lyse cellulaire provoquant ainsi la libération des constituants biologiques intracellulaires naturellement contenus dans les cellules du microorganisme considéré et de fragments de composants de membrane cellulaire. Au sens de la présente invention, le terme "lysat" est utilisé indifféremment pour désigner l'intégralité du lysat obtenu par inactivation du microorganisme concerné ou seulement une fraction de celui-ci. Le lysat mis en œuvre est donc formé en tout ou partie des constituants biologiques intracellulaires et des constituants des parois et membranes cellulaires du microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 d'intérêt.
On peut avantageusement utiliser dans le cadre de l'invention :
- un extrait contenant des microorganismes inactivés de la souche de microorganisme concernée, ou
- un lysat obtenu par lyse ou inactivation du microorganisme concerné.
Cette inactivation cellulaire pour l'obtention d'un extrait ou d'un lysat peut être accomplie par différentes technologies, telles que par exemple un choc osmotique, un choc thermique, par ultrasons, ou encore sous contrainte mécanique de type centrifugation, ou des combinaisons de ces différentes technologies.
Plus particulièrement, ce lysat peut être obtenu selon la technologie décrite dans le brevet US 4,464,362, et notamment selon le protocole suivant.
Un microorganisme probiotique considéré est cultivé anaérobiquement dans un milieu de culture adéquat, par exemple selon les conditions décrites dans US 4,464,362 et EP 0 043 128. Lorsque la phase stationnaire du développement est atteinte, le milieu de culture peut être inactivé par pasteurisation, par exemple à une température de 60 à 65°C pendant 30 min. Les microorganismes peuvent abrs être recueillis par une technique de séparation conventionnelle, par exemple filtration membranaire, centrifugés et éventuellement remis en suspension dans une solution stérile de NaCI à une concentration physiologique. Dans le cas d'un lysat, celui-ci peut ensuite être obtenu par désintégration aux ultrasons d'un tel milieu afin de libérer les fractions cytoplasmiques, les fragments de paroi cellulaire et certains produits issus du métabolisme de ces microorganismes. Puis tous les composants dans leur distribution naturelle peuvent être stabilisés dans une solution aqueuse faiblement acide.
On peut ainsi obtenir un lysat possédant une concentration de l'ordre de 0,1 à 50%, en particulier de 1 à 20% et notamment environ 5% en poids de matière(s) active(s) par rapport à son poids total.
Selon une alternative possible à la technologie décrite ci-dessus, la centrifugation peut être appliquée en fin de fermentation (en début de phase stationnaire) avant le traitement thermique. Il est également envisageable de récupérer les microorganismes et le surnageant et de réaliser ultérieurement le traitement thermique, l'ensemble pouvant ensuite être séché. De préférence, un extrait ou un lysat de Bifidobacterium longum subsp. longum
CNCM 1-2618 utilisé dans le cadre de l'invention est obtenu par choc thermique. Typiquement, lorsque la phase stationnaire du développement de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 est atteinte, le milieu de culture contenant les microorganismes peut être centrifugé. Le concentré de microorganismes peut ensuite être inactivé par traitement thermique, par exemple à des températures de 71 ,7°C à 147°C pendant 3 s jusqu'à plusieurs minutes. La concentration bactérienne contient typiquement une partie des métabolites produits pendant la croissance ainsi que les parois bactériennes traitées thermiquement. La solution possède typiquement une concentration de l'ordre de 10 à 55%, en particulier de 12 à 20% et notamment environ 15% en poids de matière(s) active(s) par rapport à son poids total. Le traitement thermique appliqué peut être effectué de façon directe (contact direct entre le produit et la source de chaleur comme la vapeur) ou indirecte (le produit et la source de chaleur sont séparés par une barrière physique). Dans le cas de traitement thermique direct, les temps de traitement peuvent être plus courts, de l'ordre de quelques secondes (de 1 à 15 s). Le milieu de culture contenant les microorganismes (avant ou après centrifugation) peut être concentré par évaporation. Le traitement thermique peut être appliqué avant et/ou après l'étape d'évaporation.
L'extrait ou le lysat peut être mis en œuvre sous différentes formes, tel que sous la forme d'une solution ou sous une forme pulvérulente, de préférence sous la forme d'une solution. La conservation sous forme liquide peut nécessiter l'application d'un traitement de stabilisation tel qu'un traitement à ultra haute température (UHT). Toute méthode de stabilisation des liquides connue de l'homme de métier peut être envisagée pour la solution ou suspension de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618. Un microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I-
2618 utilisé dans le cadre de l'invention peut être formulé dans une composition à raison d'au moins 0,0001 % exprimé en poids sec, en particulier à raison de 0,0001 à 20 % et plus particulièrement à raison de 0,001 à 15 %, en particulier de 0,01 à 10 %, et notamment de 0,1 à 2 % par rapport au poids sec total de la composition le contenant. Un microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I- 2618 utilisé dans le cadre de l'invention est en particulier formulé dans une composition destinée à être administrée par voie topique.
D'une manière générale, une composition à application topique selon l'invention peut comprendre généralement de 103 à 1012 ufc/g, en particulier de 105 à 1010 ufc/g et plus particulièrement de 107 à 109 ufc/g de microorganismes Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 vivants par gramme de support ou à des doses équivalentes calculées pour les microorganismes Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 inactivés ou morts ou pour des fractions de microorganisme Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 ou pour des métabolites produits.
Il peut être avantageux de mettre en œuvre des microorganismes Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 sous forme inactivée, voire morte, se présentant notamment sous la forme d'un lysat ou d'un extrait cellulaire, contenant typiquement des fragments cellulaires et des métabolites.
Un microorganisme Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 peut également être inclus dans une composition sous forme de fractions de composants cellulaires ou sous la forme de métabolites, en particulier sous la forme d'un extrait ou sous la forme d'un lysat. Le ou le(s) microorganisme(s) Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, métabolite(s) ou fraction(s) peu(ven)t également être introduit(s) sous la forme d'une poudre lyophilisée, d'un surnageant de culture et/ou le cas échéant sous une forme concentrée.
Lorsqu'une composition comprend des métabolites, les teneurs en métabolites dans les compositions correspondent sensiblement aux teneurs susceptibles d'être produites par l'équivalent de 103 à 1015 ufc, en particulier 105 à 1015 ufc, et plus particulièrement 107 à 1012 ufc de microorganismes Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 vivants par gramme de support.
L'expression de la quantité de métabolites ou de fractions d'un microorganisme en "ufc", ou de microorganismes morts, vise à désigner la quantité de ce microorganisme nécessaire à la production de ladite quantité de métabolites ou de fractions de microorganismes.
Composition cosmétique
Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, ladite au moins une souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, telle que définie à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618' ci-dessus, est formulée dans une composition cosmétique comprenant en outre un véhicule cosmétiquement acceptable. Par "véhicule cosmétiquement acceptable", on entend ici un milieu sans odeur ou aspect désagréable, et qui ne génère pas de picotement, de tiraillement ou de rougeur inacceptable pour l'utilisateur, lors de son administration, en particulier lors de son application topique sur la peau ou ses annexes.
Le véhicule cosmétiquement acceptable sera adapté à la voie d'administration topique de la composition, en particulier à la nature du support sur lequel doit être appliquée la composition, ainsi qu'à la forme sous laquelle la composition est destinée à être conditionnée, notamment solide ou fluide à température ambiante et pression atmosphérique.
La composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées pour le mode d'administration par voie topique.
Une composition destinée à une administration par voie topique peut être une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse, une solution ou dispersion du type lotion ou sérum, une émulsion de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, obtenue par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (H/E) ou inversement (E/H), une suspension ou une émulsion, de consistance molle, semi-solide ou solide, du type crème ou du type gel aqueux ou anhydre, une émulsion multiple (E/H/E ou H/E/H), une microémulsion, une nano-émulsion, une préparation de microcapsules, une préparation de microparticules, ou une dispersion vésiculaire de type ionique et/ou non ionique, ou une dispersion cire/phase aqueuse.
Elle peut également se présenter sous la forme d'un système transdermique permettant une libération active ou passive du/des actif(s) par transdermie, par exemple de type patch ou gel patch (hydrogel), ou par injection.
Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles.
Une composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut constituer une composition de traitement ou de soin de la peau ou du cuir chevelu, des fibres kératiniques comme les cheveux, les cils ou les sourcils, ou une composition de protection solaire ou de bronzage artificiel, ou encore un produit nettoyant ou démaquillant de la peau, des cheveux, des sourcils ou des cils, un produit déodorant ou encore un composé parfumant. De préférence, la composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention est une composition de protection solaire ou de bronzage artificiel.
Une telle composition peut être alors non colorée ou faiblement colorée, et peut contenir éventuellement des actifs cosmétiques additionnels, notamment comme indiqué ci-après. Elle peut alors être utilisée comme base de soin pour la peau ou les lèvres, par exemple sous forme d'un baume à lèvres, protégeant les lèvres du froid et/ou du soleil et/ou du vent, comme une crème de soin de jour ou de nuit pour la peau du visage et/ou du corps.
Elle peut également se présenter sous forme de shampooing traitant ou non, colorant ou non, ou d'après-shampooing.
Une composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut également constituer une composition cosmétique colorée et notamment une composition de maquillage de la peau, des fibres kératiniques, notamment les cheveux ou les cils, et/ou des muqueuses, en particulier une telle composition peut être un fond de teint, un blush, un fard à joues ou à paupières, un composé anti-cernes en stick, un rouge à lèvres ou un brillant à lèvres, présentant éventuellement des propriétés de soin ou de traitement. De préférence, il pourra s'agir d'une composition de maquillage colorée (beige ou verte) destinée à corriger la couleur du teint.
Une composition administrée par voie topique peut notamment constituer une crème de nettoyage, de protection, de traitement ou de soin, une lotion, un gel ou une mousse pour le soin de la peau ou des cheveux, comme une lotion de nettoyage ou de désinfection, une composition pour le bain ou une composition déodorante.
Une composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut également consister en une préparation solide constituant un savon ou un pain de nettoyage.
Selon un mode de réalisation de l'invention, une composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut être avantageusement formulée pour être administrée sur le cuir chevelu, les cheveux et les cils, et en particulier être préparée sous forme d'une solution, d'une crème, d'un gel, d'une émulsion, d'une mousse ou encore sous forme d'une composition pour aérosol contenant également un agent propulseur sous pression.
Selon un mode de réalisation, une composition cosmétique par voie topique utilisée dans le cadre de l'invention peut avantageusement être formulée sous toute forme galénique convenant au soin capillaire, notamment sous forme d'une lotion de soin capillaire, par exemple d'application journalière ou bi-hebdomadaire, d'un shampoing, notamment antipelliculaire, d'un après-shampoing, en particulier d'application hebdomadaire ou bi-hebdomadaire, d'un démêlant, d'une crème ou d'un gel capillaire, d'une lotion traitante, d'une composition de teinture (notamment d'oxydation) éventuellement sous forme de shampooing colorant, d'une lotion restructurante pour cheveux, d'une composition de permanente, d'une lotion ou d'un gel antichute, d'un shampoing antiparasitaire, ou d'un shampoing traitant, notamment anti-séborrhéique, d'un produit de soin du scalp notamment anti-irritant, anti-âge, restructurant, ou activateur de la circulation sanguine, d'un savon liquide ou solide de nettoyage du cuir chevelu d'application journalière, d'un produit de mise en forme de la coiffure, comme une laque, un produit de mise en pli ou un gel coiffant, d'un masque traitant, d'une crème ou d'un gel moussant de nettoyage des cheveux, ou d'un mascara capillaire à appliquer au pinceau ou au peigne.
Selon un mode de réalisation, pour une application sur les cils ou les poils, une composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut se présenter sous forme d'un mascara, pigmenté ou non, à appliquer à la brosse sur les cils ou encore sur les poils de barbe ou de moustache.
Selon un mode de réalisation particulier, une composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut se présenter sous forme d'une crème ou d'une lotion capillaire, d'un shampooing ou d'un après-shampooing capillaire, d'un mascara capillaire ou pour les cils.
Lorsqu'une composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention est une émulsion, la proportion de la phase grasse peut aller de 5 à 80% en poids, et de préférence de 10 à 50% en poids par rapport au poids total de la composition. Les huiles, les émulsionnants et les coémulsionnants utilisés dans la composition sous forme d'émulsion sont choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine cosmétique.
L'émulsionnant et le coémulsionnant peuvent être présents, dans la composition cosmétique, en une proportion allant de 0,3 à 30% en poids, et de préférence de 0,5 à
20% en poids par rapport au poids total de la composition.
Lorsque la composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention est une solution ou un gel huileux, la phase grasse peut représenter plus de 90% du poids total de la composition.
De façon connue, les formes galéniques dédiées à une administration topique peuvent contenir également des adjuvants habituels dans le domaine cosmétique, tels que les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les parfums, les charges, les filtres, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans le domaine cosmétique, et par exemple de 0,01 à 20% du poids total de la composition.
Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse et/ou dans la phase aqueuse.
Comme matières grasses utilisables dans les compositions cosmétiques mises en œuvre dans la cadre de l'invention, on peut citer les huiles minérales comme par exemple le polyisobutène hydrogéné et l'huile de vaseline, les huiles végétales comme par exemple une fraction liquide du beurre de karité, l'huile de tournesol et d'amandes d'abricot, les huiles animales comme par exemple le perhydrosqualène, les huiles de synthèse notamment l'huile de Purcellin, le myristate d'isopropyle et le palmitate d'éthyl hexyle, les acides gras insaturés et les huiles fluorées comme par exemple les perfluoropolyéthers. On peut aussi utiliser des alcools gras, des acides gras comme par exemple l'acide stéarique et comme par exemple des cires notamment de paraffine, de carnauba et la cire d'abeilles. On peut aussi utiliser des composés siliconés comme les huiles siliconées et par exemple les cyclométhicone et diméthicone, les cires, les résines et les gommes siliconées.
Comme émulsionnants utilisables dans les compositions cosmétiques mises en œuvre dans le cadre de l'invention, on peut citer par exemple le stéarate de glycérol, le polysorbate 60, le mélange alcool cétylstéarylique/alcool cétylstéarylique oxyéthyléné à 33 moles d'oxyde d'éthylène vendu sous la dénomination Sinnowax AO® par la société HENKEL, le mélange de PEG-6/PEG-32/Glycol Stéarate vendu sous la dénomination de Tefose® 63 par société GATTEFOSSE, le PPG-3 myristyl éther, les émulsionnants siliconés tels que le cétyldiméthicone copolyol et le mono- ou tristéarate de sorbitane, le stéarate de PEG-40, le monostéarate de sorbitane oxyéthyléné (20OE).
Comme solvants utilisables dans les compositions cosmétiques mises en œuvre dans le cadre de l'invention, on peut citer les alcools inférieurs, notamment l'éthanol et l'isopropanol, le propylène glycol.
La composition cosmétique utilisée dans le cadre de l'invention peut également contenir de façon avantageuse une eau thermale et/ou minérale, notamment choisie parmi l'eau de Vittel, les eaux du bassin de Vichy et l'eau de la Roche Posay.
Comme gélifiants hydrophiles, on peut citer les polymères carboxyliques tel que le carbomer, les copolymères acryliques tels que les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides et notamment le mélange de polyacrylamide, C13-14 Isoparaffine et Laureth-7 vendu sous le nom de Sepigel 305® par la société SEPPIC, les polysaccharides comme les dérivés cellulosiques tels que les hydroxyalkylcelluloses et en particulier les hydroxypropylcellulose et hydroxyéthylcellulose, les gommes naturelles telles que les guar, caroube et xanthane et les argiles.
Comme gélifiants lipophiles, on peut citer les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d'acides gras comme les stéarates d'aluminium et la silice hydrophobe, ou encore l'éthylcellulose et le polyéthylène.
Dans un mode de réalisation particulièrement préféré de l'invention, la composition cosmétique telle que définie ci-dessus comprend en outre un actif cosmétique additionnel.
Avantageusement, un tel actif additionnel peut être destiné à exercer un effet cosmétique, de soin ou d'hygiène sur la peau, les cheveux, les cils, les poils et/ou le cuir chevelu. Les actifs additionnels sont choisis par l'homme du métier de telle sorte qu'ils ne nuisent pas à l'effet des microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 de l'invention.
Selon une variante de réalisation, un microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, tel que défini ci-dessus à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618', peut être avantageusement mis en œuvre avec, à titre d'actif additionnel, un microorganisme non probiotique, en particulier la souche Vitreoscilla filiformis.
Un tel microorganisme non probiotique peut être mise en œuvre sous forme vivante, semi-active, inactivée ou morte, notamment comme défini à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618' ci-dessus. En particulier, un microorganisme de type Vitreoscilla filiformis, tel que décrit notamment dans la demande de brevet FR 0 625 782, peut être mis en œuvre sous une forme vivante ou sous une forme de lysat fractionné ou complet avec son milieu de culture après évapo- concentration de la composition en H20.
La composition cosmétique mise en œuvre dans le cadre de l'invention peut en outre comprendre tous les additifs cosmétiques usuels tels que l'eau, les solvants, les huiles, les cires, les pigments, les charges, les tensioactifs, les actifs cosmétiques, les filtres UV, les polymères, les gélifiants, les conservateurs et les parfums. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir ce ou ces éventuels composés complémentaires, et/ou leur quantité, de manière telle que les propriétés avantageuses des constituants actifs de la composition selon l'invention ne soient pas, ou substantiellement pas, altérées par l'adjonction envisagée. De préférence, la composition cosmétique mise en œuvre dans le cadre de l'invention comprend en outre des filtres UV.
Utilisation cosmétique non-thérapeutique
De manière surprenante, les inventeurs ont observé que l'application de microorganismes probiotiques de type Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I- 2618 régule l'homéostasie des mélanocytes, en favorisant la synthèse de mélanine, de manière plus efficace que d'autres microorganismes probiotiques tels que Propionibacterium freudenreichii ou Bacillus coagulans, ou que d'autres souches de Bifidobacterium longum. Ainsi la pigmentation naturelle de la peau, des poils et des cheveux s'en trouve renforcée. La pigmentation cutanée ou capillaire ainsi obtenue est avantageusement homogène.
La présente invention concerne plus particulièrement l'utilisation cosmétique non- thérapeutique d'une souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, telle que définie à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618' ci- dessus, éventuellement formulée dans une composition cosmétique telle que définie à la section "Composition cosmétique" ci-dessus, comme agent induisant la pigmentation cutanée et/ou capillaire, pour induire physiologiquement la pigmentation et ainsi en particulier prévenir et/ou traiter une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux, ladite souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 étant administrée par voie topique.
La composition cosmétique mise en œuvre dans le cadre de l'invention peut en particulier être utilisée chez des sujets sains, typiquement des sujets ne présentant pas d'altérations de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux d'origine pathologique.
Elle peut, en particulier chez des sujets sains, être utilisée comme agent de bronzage, avantageusement comme agent de bronzage indépendant de la lumière du soleil et/ou des rayons UV, ou pour accélérer et/ou intensifier le bronzage.
Elle peut également, en particulier chez ces sujets sains, être utilisée pour rendre le teint et/ou la couleur du teint plus homogène.
La composition cosmétique mise en œuvre dans le cadre de l'invention peut également être utilisée pour prévenir et/ou traiter cosmétiquement un défaut de pigmentation cutanée et/ou capillaire résultant d'un déséquilibre de l'homéostasie des mélanocytes.
Le déséquilibre de l'homéostasie des mélanocytes peut être un déséquilibre de la prolifération et/ou de la maturation et/ou de la survie des mélanocytes.
La prolifération, la maturation et la survie concernent les différents stades de vie d'une cellule d'un tissu d'un organisme, i.e. sa division à partir d'une cellule souche ou d'une cellule mère, sa différentiation lui permettant l'acquisition de caractères propres au tissu dans lequel elle s'inscrit, comme par exemple l'expression des différentes enzymes et protéines nécessaires à la mélanogenèse, et son maintien jusqu'à sa sénescence et à l'apoptose. Une dysrégulation de ces étapes peut se traduire par un déséquilibre de la répartition des mélanocytes dans l'épiderme ou dans le follicule, ou un déséquilibre de la mélanogenèse affectant par exemple la couleur naturelle de l'épiderme, des cheveux ou des poils.
Dans un mode de réalisation particulier, les défauts de pigmentation concernés par l'invention résultent d'un déséquilibre de la mélanogenèse.
Le déséquilibre de l'homéostasie des mélanocytes se traduisant par les défauts de pigmentation concernés par l'invention peuvent également être associés au vieillissement cutané ou du cuir chevelu, et en particulier être aggravés par ce vieillissement. Les troubles de la pigmentation concernés par l'invention peuvent concerner l'épiderme, le cuir chevelu, les cheveux, les poils ou les cils.
A titre de défauts de pigmentation capillaire cosmétiques visés par l'invention, on peut en particulier citer la canitie.
La canitie est un blanchiment naturel des cheveux qui apparaît avec l'âge, et est principalement associée à une diminution de mélanine dans la tige pilaire. Plus précisément, la canitie est liée à une raréfaction spécifique et progressive des mélanocytes des cheveux, affectant à la fois les mélanocytes du bulbe pileux et les cellules précurseurs de mélanocytes. Avantageusement, la mise en œuvre de l'invention permet de réduire, voire de freiner ou retarder l'apparition des cheveux blancs et le grisonnement de la chevelure. Avantageusement, la présente invention permet de stimuler, voire de réactiver, la mélanogenèse, afin de retarder, de réduire, voire de diminuer la canitie.
La composition mise en œuvre dans le cadre de l'invention peut également être utilisée chez des sujets présentant des altérations de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux, en particulier des sujets présentant des défauts de pigmentation cutanée et/ou capillaire cosmétiques liés à une accumulation, notamment hétérogène, de mélanine, pour homogénéiser la couleur de la peau et/ou des cheveux.
De tels défauts de pigmentation cutanée et/ou capillaire liés à une accumulation hétérogène de mélanine incluent le mélasma, les séquelles pigmentaires d'acné, la pigmentation post-inflammatoire, les dépigmentations dues aux brûlures ou à la chirurgie et les dyschromies bénignes du visage.
Dans ces applications, les compositions mises en œuvre dans le cadre de l'invention permettent de diminuer les dyschromies observées et d'homogénéiser la couleur de la peau, en particulier en augmentant ou améliorant la pigmentation de la peau autour des zones hyperpigmentées et/ou en augmentant ou améliorant la pigmentation de la peau au niveau des zones hypopigmentées.
De préférence, l'altération de l'homogénéité de la peau et/ou des cheveux visée par la présente invention est sélectionnée dans le groupe constitué de la canitie, le mélasma, les séquelles pigmentaires d'acné, la pigmentation post-inflammatoire, les dépigmentations dues aux brûlures ou à la chirurgie et les dyschromies bénignes du visage.
La présente invention concerne également un procédé de traitement cosmétique non-thérapeutique pour induire physiologiquement la pigmentation de la peau et/ou des cheveux, et ainsi homogénéiser la couleur de la peau et/ou des cheveux, et en particulier prévenir et/ou traiter une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux, dans laquelle on administre à un sujet par voie topique une quantité cosmétiquement efficace d'une souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, telle que définie à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM I- 2618' ci-dessus, éventuellement formulée dans une composition cosmétique telle que définie dans la section "Composition cosmétique" ci-dessus.
Par "quantité cosmétiquement efficace", on entend ici une quantité suffisante des agents utilisés dans le cadre de l'invention afin de traiter et/ou prévenir ledit désordre cosmétique, qui ne génère pas d'effets secondaires inacceptables pour l'utilisateur.
Cette souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, éventuellement formulée dans une composition cosmétique, est administrée par voie topique.
Avantageusement, l'application de la composition cosmétique se fait par exemple sous forme de masque, sur la peau, le cuir chevelu ou les cheveux.
La souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618, éventuellement formulée dans une composition cosmétique, mise en œuvre dans le cadre de l'invention peut en particulier être appliquée sur le visage ou sur le corps.
Applications thérapeutiques
La présente invention concerne également une méthode de prévention et/ou de traitement d'une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux d'origine pathologique chez un sujet, comprenant l'administration par voie topique chez un sujet qui en a besoin d'une quantité thérapeutiquement efficace d'une souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 telle que définie à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618' ci-dessus.
La présente invention concerne également l'utilisation d'une souche de
Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 telle que définie à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618' ci-dessus, pour la fabrication d'une composition pharmaceutique, administrable par voie topique, destinée à la prévention et/ou au traitement d'une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux d'origine pathologique.
Tel qu'utilisé dans le cadre des modes de réalisation de l'invention associés à une utilisation thérapeutique des microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 définis à la section "Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618' ci-dessus, le terme "altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux d'origine pathologique" fait référence à une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux observée lors d'affections dermatologiques, résultant d'un déficit ou d'une absence de mélanine ou d'une répartition hétérogène de mélanine, en particulier une dyspigmentation.
On entend par "dyspigmentation", une anomalie d'origine pathologique dans la formation ou la distribution de mélanine au niveau cutané ou capillaire.
Les maladies cutanées et/ou capillaires de la pigmentation s'écartent du champ cosmétique par le degré de gravité et l'intensité des symptômes par lesquels elles se manifestent.
Dans le cas d'altérations résultant d'un déficit ou d'une absence de mélanine, les microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 définis ci-dessus permettront d'homogénéiser la couleur de la peau, en particulier en augmentant et/ou améliorant la pigmentation de la peau au niveau des zones dépigmentées ou hypopigmentées.
De telles altérations incluent en particulier les altérations de l'homogénéité de la couleur de la peau associées au vitiligo.
Dans le cas d'altérations résultant d'un excès de mélanine, les microorganismes probiotiques Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 définis ci-dessus permettront d'homogénéiser la couleur de la peau, en particulier en augmentant et/ou améliorant la pigmentation de la peau autour des zones hyperpigmentées.
De telles altérations incluent en particulier les altérations de l'homogénéité de la couleur de la peau ou du teint associées entre autre aux lentigos actiniques ou à la dermite des prés.
Selon un mode de réalisation, les altérations de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux d'origine pathologique sont choisies parmi le lentigo actinique, la dermite des prés et le vitiligo.
Dans la description et dans les exemples suivants, sauf indication contraire, les pourcentages sont des pourcentages en poids et les plages de valeurs libellées sous la forme "entre ... et ..." incluent les bornes inférieure et supérieure précisées.
Les ingrédients sont mélangés, avant leur mise en forme, dans l'ordre et dans des conditions facilement déterminées par l'homme du métier.
La teneur et la nature des ingrédients mis en œuvre dans les compositions de l'invention sont ajustées par l'homme du métier de manière à ne pas affecter substantiellement les propriétés requises pour les compositions de l'invention.
Les exemples ci-après sont présentés à titre illustratif et non limitatif du domaine de l'invention. Brève description de la figure
La Figure est un ensemble d'histogrammes montrant le niveau de mélanine, en pourcentage par rapport au témoin, quantifié dans des co-cultures de kératinocytes primaires (NHEK) et mélanocytes primaires (NHEM) incubées pendant 72 h avec un milieu de culture seul (témoin), de ΙΊΒΜΧ à 200 μΜ (IBMX) comme contrôle positif, un lysat ou extrait de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 (B. longum CNCM 1-2618 1 %), un lysat de Bifidobacterium longum Repair Complex CLR® (B. longum CLR 1 %), un lysat de Propionibacterium freudenreichii (P. freundenreichii 0,2%) et un lysat de Bacillus coagulans (B. coagulans 0,2 mg/ml).
Exemples
Exemple 1 : Induction de la synthèse de mélanine par Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618
Cet exemple démontre l'activité pro-pigmentante du microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618.
Matériel et méthodes
Des mélanocytes humains primaires (NHEM) on été ensemencés en plaques 24- puits en présence (co-culture) de kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) puis cultivés pendant 24 h. Les cellules ont ensuite été traitées avec rien (témoin négatif),
IBMX (témoin positif, 200 μΜ), un lysat ou extrait de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 (1 %), un lysat comparatif d'une autre souche de Bifidobacterium longum (Repair Complex CLR® 1 %), un extrait de Propionibacterium freudenreichii (0,2%) ou un extrait de Bacillus coagulans (2 mg/ml).
Après traitement, les cellules ont été incubées pendant 72 h, toutes les conditions expérimentales ayant été réalisées en triplicat. Après 72 h d'incubation, les cellules ont été lysées par une solution de NaOH 0,5 N afin d'extraire la mélanine. La densité optique des échantillons a été mesurée à 405 nm, en référence à une gamme de mélanine exogène (courbe de mélanine standard 0,39 à 100 Mg/ml). Les résultats sont exprimés en pourcentage de stimulation relative par rapport au témoin cultivé en milieu de co-culture standard. Ils ont été analysés avec le test statistique de Student :
* : 0,01 < p < 0,05 significatif ;
** : 0,001 < p < 0,01 très significatif ;
*** : p < 0,001 extrêmement significatif
Résultats
Les inventeurs ont ainsi montré que l'incubation de co-cultures NHEK/NHEM avec des lysats de microorganismes probiotiques permettait d'augmenter de manière significative la production de mélanine par les mélanocytes par rapport à des co-cultures non-traitées (voir Figure).
Ils ont en outre montré, de manière surprenante, que l'utilisation spécifique de lysats ou d'extraits de souches de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 permettait d'accroître de manière encore plus importante la production de mélanine par rapport à l'utilisation de lysats d'autres probiotiques tels que P. freudenreichii ou B. coagulans et même par rapport à des lysats d'autres souches de Bifidobacterium longum.
En effet, l'incubation des co-cultures NHEK/NHEM avec des lysats de B. longum subsp. longum CNCM 1-2618 induit une augmentation de la production de mélanine d'environ 1 ,7 fois par rapport à un contrôle non-traité, tandis que les lysats de P. freudenreichii et de B. coagulans ne permettent d'atteindre qu'une augmentation d'environ 1 ,1 fois et le lysat de
B. longum Repair Complex CLR® une augmentation d'environ 1 ,4 fois. Il est à noter que l'augmentation observée avec B. longum subsp. longum CNCM 1-2618 est même supérieure à celle obtenue avec le contrôle positif IBMX.
Ainsi ces résultats démontrent que le microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 peut être utilisé de manière très efficace comme agent pro-pigmentant.
Exemple 2 : Compositions topiques selon l'invention
Cet exemple décrit des compositions destinées à un usage topique particulièrement adaptées à la mise en œuvre de la présente invention. Sauf indication contraire, les valeurs ci-dessous sont exprimées en pourcentage en poids par rapport au poids de la composition. Exemple 2A : Lotion pour le visage
Poudre lyophilisée de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618
Gluconate de magnésium 3,00
Lactate de calcium 2,00
Antioxydant 0,05
Isopropanol 40,0
Conservateur 0,30 Eau qsp 100 %
Exemple 2B : Lait pour le soin du visage (réparateur de sommeil)
Poudre lyophilisée de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 1 ,00 Stéarate de glycérol 1 ,00 Alcool cétylstéarylique/alcool cétylstéarylique oxyéthyléné
à 30 moles OE (Sinnowax AO® vendu par HENKEL) 3,00
Alcool cétylique 1 ,00
Diméthicone (DC 200 Fluid® vendu par DOW CORNING) 1 ,00 Huile de vaseline 6,00
Myristate d'isopropyle (Estol IMP 1514® vendu par UNICHEMA) 3,00
Antioxydant 0,05
Glycérine 20,00
Conservateur 0,30 Eau qsp 100 %
Exemple 2C : Gel pour le soin du visage (à conserver à 4 °C)
Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 10 2 ufc
Hydroxypropylcellulose (Klucel H® vendu par HERCULES) 1 ,00
Vitamine E 2,50
Antioxydant 0,05
Isopropanol 40,00
Conservateur 0,30
Eau qsp 100 % Exemple 2D : Gel pour le soin du visage (à conserver à 4 °C)
Lysat aqueux de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618
Hydroxypropylcellulose (Klucel H vendu par HERCULES) 1 ,00 Culture complète inactivée et evapoconcentrée
(evapoconcentrat) de Vitreoscilla filiformis 0,30
Vitamine E 2,50
Antioxydant 0,05
Isopropanol 40,00
Conservateur 0,30 Eau qsp 100 %

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation cosmétique non-thérapeutique d'au moins une souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum déposée le 29 janvier 2001 auprès de la CNCM (Paris, France) sous le numéro 1-2618, comme agent induisant la pigmentation cutanée et/ou capillaire, pour homogénéiser la couleur de la peau et/ou des cheveux, ladite au moins une souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 étant administrée par voie topique.
2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 , dans laquelle ladite souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 est sous forme vivante ou inactivée.
3. Utilisation cosmétique selon la revendication 2, dans laquelle ladite souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 est inactivée et se présente sous la forme d'un lysat ou d'un extrait cellulaire contenant des fragments cellulaires et des métabolites.
4. Utilisation cosmétique selon la revendication 2 ou 3, dans laquelle le microorganisme Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 est inactivé par traitement thermique.
5. Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, pour prévenir et/ou traiter une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux.
6. Utilisation cosmétique selon la revendication 5, dans laquelle l'altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux est sélectionnée dans le groupe constitué de la canitie, le mélasma, les séquelles pigmentaires d'acné, la pigmentation post-inflammatoire, les dépigmentations dues aux brûlures ou à la chirurgie et les dyschromies bénignes du visage.
7. Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle ladite souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 est formulée dans une composition cosmétique comprenant en outre un véhicule cosmétiquement acceptable.
8. Utilisation cosmétique selon la revendication 7, dans laquelle la composition cosmétique comprend en outre un actif cosmétique additionnel.
9. Souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum déposée le 29 janvier 2001 auprès de la CNCM (Paris, France) sous le numéro 1-2618, pour son utilisation comme agent induisant la pigmentation cutanée et/ou capillaire, pour la prévention et/ou le traitement d'une altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux d'origine pathologique, ladite souche de microorganisme probiotique Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 étant administrée par voie topique.
10. Souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 pour son utilisation selon la revendication 9, ladite altération de l'homogénéité de la couleur de la peau et/ou des cheveux étant sélectionnée dans le groupe constitué du lentigo actinique, de la dermite des prés et du vitiligo.
11. Souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 pour son utilisation selon la revendication 9 ou 10, ladite souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 étant sous forme inactivée, de préférence sous forme d'un extrait ou d'un lysat.
12. Souche de Bifidobacterium longum subsp. longum CNCM 1-2618 pour son utilisation selon la revendication 1 1 , ladite souche étant inactivée par traitement thermique.
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