WO2013104871A1 - Compositions contenant de l'agmatine et leurs utilisations dans la preparation de medicaments ou de substances nutraceutiques - Google Patents

Compositions contenant de l'agmatine et leurs utilisations dans la preparation de medicaments ou de substances nutraceutiques Download PDF

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agmatine
spermine
polyamines
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Jacques-Philippe Moulinoux
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Nutrialys Medical Nutrition Sa
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    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Definitions

  • the present invention relates to novel agmatine-containing compositions and their uses in the preparation of medicaments or nutraceuticals.
  • polyamines are organic molecules composed only of carbon, nitrogen and hydrogen atoms and containing at least two amino functions. These polycationic aliphatic amines include putrescine, spermidine and spermine in eukaryotes. Cadaverine, another polyamine, is present only in prokaryotes.
  • Polyamines are synthesized from L-arginine or L-methionine. Their pathway of biosynthesis and catabolism is based on a limited number of enzymes.
  • the synthesis of putrescine from ornithine (arginine degradation product) involves Ornithine Decarboxylase (ODC).
  • ODC Ornithine Decarboxylase
  • the second route of synthesis of putrescine from agmatine involves agmatinase.
  • Spermidine synthetase (SpdS) allows the synthesis of spermidine from putrescine, which in turn will be supported by spermine synthetase (SpmS) to form spermine.
  • S S AT Spermidine / spermine Nl-acetyltransferase
  • SSAT allows a fine regulation of the intracellular levels of the different polyamines which can be toxic for the cell.
  • SAMdc S-adenosylmethionine decarboxylase
  • a daily ration of 2000 kcal brings from 14.5 to 51 ⁇ g of logically active organic polyamines / kcal. This corresponds to a contribution of 29 to 102 mg of logically active organic polyamines / day or to a contribution of 29 to 102 mg of logically active organic polyamines for 2000 kcal.
  • Logically “active” organic polyamines, or their analogues (organic chemicals structurally similar to polyamines) or their derivatives (chemical substances structurally bound to a polyamine, and which it is theoretically possible to obtain from it) bio logically "active” can be identified in particular according to at least one of the following methods: 1) In culture:
  • a logically "active" organic polyamine or one of its biologically logically “active” analogues or derivatives must be able to participate in cellular metabolism physiological polyamine, or even be able to interfere with it or dysregulate.
  • a logically “active” organic polyamine or one of its biologically logically “active” analogues or derivatives must therefore be able to associate or even be recognized by the transport system or systems intended to internalize it in a living cell.
  • the addition of a radiolabeled logically “active” biological polyamine or one of its radiolabeled “logically active” biological analogues or derivatives to the culture medium makes it possible to verify its internalization.
  • a logically "active" organic polyamine or one of its biologically logically “active” analogues or derivatives must be able to suppress the inhibition of cell proliferation caused by the inhibition of the endogenous anabolism of polyamines (eg by ⁇ -DFMO , alpha-difluoromethylornithine).
  • a logically “active” organic polyamine, or one of its biologically logically “active” analogues or derivatives, including synthesis, by dysregulating the natural metabolism of polyamines must be able to modulate the level of cell proliferation.
  • the exogenous supply (gastrointestinal tract) of bio-logically "active" polyamines must suppress the beneficial anti-cancer effects caused by the lack of bio-logically "active” polyamines induced by the reduction of endogenous sources. and exogenous biologically logically "active" polyamines, this exogenous supply being coupled or not with anticancer drugs.
  • putrescine, spermidine and spermine possess the properties of logically active organic polyamines as defined above and are therefore considered as such in the present invention.
  • Polyamines are essential compounds for cell growth and differentiation.
  • the inventors have shown that a diet depleted of polyamines makes it possible to potentiate the effects of irreversible inhibitors of ODC on tumor growth (EP 0 703 731 B1).
  • This depletion is achieved either by inducing the expression of SSAT or stabilization of its messenger RNA by an analogue of spermine, in particular by N J N 12 -. Diethylnorspermine (DENSPM) (Parry L et al, 1995, Biochem J 305: 451-458), either by inhibiting ODC using reversible or irreversible inhibitors such as ⁇ -
  • DiFluoroMethylOrnithine (WO 2002/15895), or by blocking the transport of polyamines at cell membranes.
  • polyamine transporter Although no particular gene has been identified as the polyamine transporter, three distinct polyamine transport systems have been demonstrated in mammals (Igarashi et al., 2010, Plant Physiology and
  • the antizyme a protein involved in the degradation of ODC, is capable of modulating the entry or exit of polyamines from the cell according to a mechanism that has not yet been elucidated.
  • a mechanism of endocytosis of polyamines mediated by glypican-1 and caveolin-1 has also been reported.
  • studies have demonstrated the presence of a protein complex consisting of SLC3A2 and y + LAT proteins capable of excreting putrescine from the cell and returning the arginine in exchange.
  • Inhibitors of polyamine anabolic enzymes and inhibitors of polyamine transport play an important role in the endogenous synthesis of polyamines by the cells of the body.
  • the bacteria of the intestinal flora constitute the second source of endogenous synthesis of polyamines.
  • the use of antibiotics targeting these bacteria allows a reduction of this other endogenous source of polyamines.
  • Agmatine derived from arginine decarboxylation by arginine decarboxylase (ADC), is a precursor to putrescine. Maintenance of agmatine homeostasis is provided by the liver. The study of tissue distribution agmatine in rats shows that agmatine is present at variable levels in most tissues of the body. The highest levels of agmatine are found in the stomach, intestines, aorta and spleen. Agmatine is also found, to a lesser extent, in other tissue compartments, including the liver, lungs, kidneys and brain (Raasch et al, 1995, Ann NY Sci., Jul 12: 763: 330-4). The ubiquitous tissue of agmatine confers various physiological functions.
  • Agmatine is considered a neurotransmitter or neuromodulator in mammals. Agmatine is able to bind to different types of receptors, including imidazoline receptors, receptors involved in the control of blood pressure. Thus, intravenous injection of agmatine at doses of 1 to 100 mg / kg leads to a decrease in blood pressure through inhibition of norepinephrine release (Raasch et al., 2002, British Journal of Pharmacology 135, 663-672).
  • Agmatine is also an N-methyl-D-aspartate receptor antagonist
  • NMDA NMDA
  • ⁇ 2-adrenergic receptors involved in the perception of chronic pain (NMDA) and ⁇ 2-adrenergic receptors involved in the perception of chronic pain (Regunathan S, 2006, A.A.P.S Journal, 8 (3): E479-E484).
  • Agmatine has an anti-allodynic effect which allows animals injected with 0.3 nmol of agmatine to regain normal pain perception (EP 1 014 959 B1).
  • the Courteix team has shown that intrathecal injection of agmatine suppresses tactile or thermal allodynia as well as hyperalgesia in diabetic rats (Courteix et al., 2007, J. Pharmacol Exp Ther. , 322 (3): 1237-1245).
  • Agmatine is also involved in the proliferation of cancer cells. Satriano's team has shown that agmatine, by inhibiting ODC in a dose-dependent manner, blocks the synthesis of polyamines in renal cells, thus preventing their proliferation (WO 1998/13037).
  • samples taken from tissues derived from colon carcinoma showed lower agmatine levels than adjacent healthy tissues (Molderings et al., 2004, Cancer, 101: 858-868). This is the direct consequence of a inhibition of ADC expression in neoplastic tissues (Haenisch et al., 2008, Am J Physiol, Gastrointest, Liver Physiol., 295: Gl 104-G1110).
  • Agmatine also acts directly on the cell cycle.
  • the in vitro treatment of hepatocarcinoma cell lines with doses of agmatine ranging from 10 ⁇ to 1 ⁇ M leads to the arrest of cancer cells in the G2 / M phase of the cell cycle, without, however, leading to their apoptosis (Gardini et al. 2003, Journal of Hepathology, 39: 793-799).
  • This cytoprotective effect of agmatine was confirmed on cell models of colon cancer (Mayeur et al., 2005, BBA, 745: 111-123) and in retinal ganglion cells where apoptosis was induced by TNF- ⁇ or by hypoxia (US 2010/0130783).
  • One of the aims of the invention is to provide compositions for their uses in the treatment of pathologies related to cellular hyperproliferation, in particular in the treatment of cancer.
  • Another object of the invention is to provide new compositions containing agmatine more effective than the compositions described in the prior art in the treatment of pathologies related to cell hyperproliferation, particularly in the treatment of cancer.
  • Another object of the invention is to propose compositions that can be administered to patients together with an anti-cancer treatment. (chemotherapeutic) leading to a synergistic effect in terms of cancer treatment.
  • the present invention relates to compositions comprising a mixture of cadaverine, putrescine, spermine and spermidine at a concentration ranging from 0.31 to 0.63 nmoles per gram of composition, said composition also comprising agmatine at a concentration ranging from 120 to 17100 nmoles per gram of composition.
  • concentration of agmatine is greater than that of the organic polyamines logically active in the compositions of the present invention.
  • the overall level of the bio logically active polyamines of the compositions of the present invention is much lower than that present in foods constituting a "medium" food ration.
  • compositions comprising on the one hand a mixture depleted in cadaverine, putrescine, spermidine and spermine and agmatine at a concentration higher than that provided by an average food ration composed solely of food.
  • Food means any substance or product, processed, partially processed or unprocessed, intended to be ingested by humans (Regulation EC No. 178/2002, Article 2). Foods are typically divided into six groups that include: milk and milk products, fish and meat, fats, grains and derivatives, fruits and vegetables, and carbohydrates and their derivatives.
  • agmatine is meant the precursor of putrescine corresponding to the formula
  • An "average” daily food ration of 2000 kcal consisting exclusively of food provides about 1.3 mg of agmatine.
  • Agmatine does not possess any of the characteristics enabling the identification of a logically active organic polyamine in vitro and is not considered as such in the present invention.
  • mixture of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine is meant the combination of the four natural polyamines corresponding respectively to the formulas NH 2 - (CH 2 ) 5 -NH 2 , NH 2 - (CH 2 ) 4 -NH 2 , NH 2 - (CH 2 ) 3 -NH- (CH 2 ) 4 -NH 2 and NH 2 - (CH 2 ) 2 ) 3 -NH- (CH 2 ) 4 -NH- (CH 2 ) 3 -NH 2 in a composition potentially containing other excipients.
  • concentrations of the different polyamines are expressed in nano moles
  • nmol per gram of composition.
  • concentration of agmatine can vary from 120 to 17100 nanomoles.
  • compositions of the present invention may be ingested by a mammal.
  • mammal means a human being or an animal, said animal may be a pet or a farm animal.
  • compositions of the invention have an efficacy that may depend on the stage of the anticancer treatment followed by the patient.
  • compositions are used as the sole exogenous source of logically active bio-polyamines (putrescine, spermine and spermidine) and agmatine.
  • logically active bio-polyamines putrescine, spermine and spermidine
  • the control of the concentrations of these different elements is total.
  • the patient's diet contains the lowest level of logically active organic polyamines.
  • the patient receives, through the compositions of the invention, a diet rich in agmatine.
  • compositions of the present invention When the compositions of the present invention are combined with foods, the control of logically active organic polyamine concentrations becomes more difficult. Also, in order not to thwart the effects of the compositions of the present invention, it appears necessary that the foods are selected on the basis of their content of logically active organic polyamines. Therefore, the foods chosen should contain the lowest possible levels of logically active organic polyamines. The goal is that the level of logically active organic polyamines provided by the compositions of the invention is the least modified by the introduction of foods into the diet of the patient.
  • the agmatine intake of the compositions of the invention being greater than that of an average diet consisting solely of food, agmatine contained in the food will have little impact on the overall concentration of agmatine in the patient's diet consisting of a mixture of compositions of the invention and foods.
  • the concentration of agmatine of the compositions of the invention varies from 120 to 1450 nmol per gram of composition.
  • the concentration of agmatine of the compositions of the invention varies from 1450 to 3000 nmol per gram of composition.
  • the concentration of agmatine of the compositions of the invention varies from 3000 to 6000 nmoles per gram of composition.
  • the concentration of agmatine of the compositions of the invention varies from 6000 to 17100 nmol per gram of composition.
  • the putrescine concentration of the compositions of the invention varies from 0.19 to 0.32 nmol per gram of composition.
  • the cadaverine concentration of the compositions of the invention ranges from 0.02 to 0.08 nmol per gram of composition.
  • the spermine concentration of the compositions of the invention ranges from 0.009 to 0.03 nmol per gram of composition.
  • the spermidine concentration of the compositions of the invention ranges from 0.09 to 0.20 nmol per gram of composition.
  • compositions of the invention constitute the sole or the main food source of the patients
  • these compositions can be enriched with lipids, proteins, carbohydrates, vitamins, minerals and electrolytes in a quantity allowing the patient not to suffer from malnutrition or deficiencies.
  • compositions of the invention contain as a percentage of dry weight relative to the total dry weight: 10% to 35% of lipids, 8% to 30% of proteins, 35% to 80% of carbohydrates, up to 10% of a mixture of vitamins, minerals and electrolytes.
  • food source is meant all forms of diet, that is to say all foods that may constitute the diet of a human or animal, a diet consisting of meal replacement, or any other food source that keeps the human or animal alive.
  • vitamins and minerals having a defined role in the body.
  • the vitamins can be selected from a group consisting of vitamin A, vitamin B1, B6, vitamin B, vitamin C, vitamin D3, vitamin K1, riboflavin, pantothenic acid, niacin, folic acid, biotin, choline, inositol.
  • the minerals and electrolytes may be selected from a group consisting of sodium, potassium, calcium, phosphorus, magnesium, iron, zinc, copper, manganese, chlorides, iodine, selenium, chromium, molybdenum.
  • the choice of vitamins, minerals and electrolytes should not be restricted by the lists listed above. Those skilled in the art can adapt the proportions of each of these constituents allowing the patient to receive a balanced diet, meeting his daily nutritional needs.
  • Polyamines in the body come from three main sources: cell proliferation (physiological and tumoral), diet and intestinal bacteria.
  • cell proliferation physiological and tumoral
  • diet a diet and intestinal bacteria.
  • ODC ornithine decarboxylase
  • spermidine-spermine Nl-acetyltransferase spermine oxidase
  • Specific inhibitor denotes a molecule capable of blocking, totally or partially, directly or indirectly, reversibly or not, the active site of at least one of the enzymes involved in the synthesis of polyamines in the human body, or animal.
  • the role of the inhibitor of polyamine biosynthesis is to stop or significantly reduce the endogenous production of polyamines in the organism treated with the product according to the present invention. Joint implementation of an inhibitor of polyamine biosynthesis and polyamine depleted food intake reduces the amount of bioavailable polyamines in the body.
  • the compositions of the invention optionally contain an inhibitor of the intracellular synthesis of polyamines in a proportion of at most 15% by weight relative to the total dry weight of the composition.
  • the inhibitor of the intracellular synthesis of polyamines of the compositions of the invention is an inhibitor of ornithine decarboxylase, spermidine-spermine Nl-acetyltransferase or spermine oxidase.
  • alpha-difluoromethylornithine is a useful compound, well known to those skilled in the art (Fabian et al., 2002, Clin Cancer Res, 8 (10), 3105- 3117 / Levin et al, 2003, Clin Cancer Res., 9 (3), 981-990 / Meyskens et al., 2008, Cancer Prev Res., 1 (1), 32-38).
  • This example should in no way restrict the choice of an inhibitor of the endogenous synthesis of polyamines to this compound alone.
  • spermidine-spermine Nl-acetyltransferase or spermine oxidase may be used.
  • the amounts of inhibitors will be adapted by the skilled person on the basis of the biological activity data of these compounds and his general knowledge.
  • the transport of the polyamines between the cell and the extracellular medium also allows a fine regulation of the intracellular content of polyamines.
  • the joint implementation of an inhibitor of the transport of polyamines and a dietary intake depleted polyamines reduces the amount of bioavailable polyamines in the body.
  • compositions of the present invention are optionally enriched with at least one polyamine transport inhibitor, in a proportion of at most 15% by weight relative to the total dry weight of the composition.
  • the compositions of the present invention contain at least one inhibitor of the intracellular synthesis of polyamines, in particular chosen from the inhibitors of ornithine decarboxylase, spermidine-spermine Nl-acetyltransferase or spermine oxidase, and / or at least one polyamine transport inhibitor, at most 15% by weight relative to the total dry weight of the composition.
  • at least one inhibitor of the intracellular synthesis of polyamines in particular chosen from the inhibitors of ornithine decarboxylase, spermidine-spermine Nl-acetyltransferase or spermine oxidase, and / or at least one polyamine transport inhibitor, at most 15% by weight relative to the total dry weight of the composition.
  • compositions of the invention optionally contain at least one antibiotic.
  • This antibiotic may belong to the group of intestinal antiseptics, such as Ercefuryl ® .
  • This antibiotic can also, in addition to its bacteriostatic or bactericidal effect, have an antiparasitic effect, such as Flagyl ® .
  • antibiotics may lead to reduce the intake of certain vitamins, especially those provided by the intestinal flora of the patient. In this case, it may be necessary to supplement the composition in these vitamins so as not to cause vitamin deficiencies in the patient in case of prolonged administration of the composition.
  • deficits is meant a lack of nutrients that can alter the physical or mental condition of a human or an animal.
  • compositions of the invention may be enriched with vitamins.
  • compositions of the present invention contain at least one antibiotic, and / or are enriched with vitamins.
  • the carbohydrates of the compositions of the invention belong to the group comprising glucose polymers, maltodextrins, sucrose, modified starches, glucose monohydrate, dehydrated glucose syrup, glycerol monostearate and mixtures thereof.
  • the proteins of the compositions of the invention belong to the group comprising soluble milk proteins, soy proteins, serum peptides, egg white powder, potassium caseinate, non-phosphorylated peptides, casein peptides, mixed caseinate, soy isolate and mixtures thereof.
  • the lipids of the compositions of the invention belong to the group comprising butter oil, peanut oil, medium chain triglycerides, grape seed oil, soy evening primrose oil and mixtures thereof.
  • the lipids of the compositions of the invention consist of a mixture of at least one oil of animal origin, at least one vegetable oil and glycerol stearate.
  • the carbohydrates belong to the group comprising glucose polymers, maltodextrins, sucrose, modified starches, glucose monohydrate, dehydrated glucose syrup, glycerol monostearate. and mixtures thereof, and / or wherein the proteins belong to the group comprising milk solubility proteins, soy proteins, serum peptides, powdered egg white, potassium caseinate, non-phosphorylated peptides, casein peptides, mixed caseinate, soy isolate and mixtures thereof, and / or wherein the lipids belong to the group consisting of butter oil, peanut oil, medium chain triglycerides, grape seed oil, soybean oil, evening primrose oil and mixtures thereof and / or in which the lipids consist of a mixture of at least one oil of animal origin, at least one oins an oil of plant origin and glycerol stearate.
  • the proteins belong to the group comprising milk solubility proteins, soy proteins, serum peptides, powdered egg white, potassium caseinate, non-phosphoryl
  • compositions used according to the present invention must be able to constitute all or part of the patient's diet. In this sense they must provide an energy ration that can meet the nutritional needs of the patient.
  • compositions of the invention constitute the daily food ration of a human being and comprise:
  • compositions of the invention are a submultiple of a daily food ration of a human being and comprise:
  • an inhibitor of the intracellular synthesis of polyamines in a proportion of less than 50 ⁇ g and preferably in a proportion of 1 / x to 10 ⁇ g per day,
  • X being an integer from 2 to 8 and corresponding to the number of rations to be ingested by the patient to meet his daily nutritional requirements.
  • the daily food ration is adapted according to the category and mass of the animal, whether it is a pet or a farm animal.
  • the distribution of carbohydrates, lipids and proteins as well as the need for vitamins, minerals and electrolytes in the daily food ration of an animal are well known to those skilled in the art.
  • Concerning the intracellular synthesis inhibitor of polyamines, the dose is adapted according to the mass of the animal and possibly on the basis of data obtained in humans.
  • compositions used according to the present invention may constitute the daily food ration or a sub-multiple of a daily dietary ration of an animal and will have to satisfy the daily nutritional requirements of an animal.
  • compositions used according to the present invention constitute the daily dietary ration of a mouse and comprise:
  • an inhibitor of the intracellular synthesis of polyamines at a rate of less than 300 mg and preferably at a rate of 40 to 200 mg per day.
  • compositions used according to the present invention may be a submultiple of a daily food ration of a mouse and include:
  • vitamins, minerals and electrolytes in sufficient quantities to partially meet the daily nutritional requirements of an animal and optionally an inhibitor of the intracellular synthesis of polyamines at a rate of less than 300 mg / mg and preferably at a rate of 40 / X to 200 / X mg per day.
  • X being an integer from 2 to 8 and corresponding to the number of rations to be ingested by the patient to meet his daily nutritional requirements.
  • compositions of the present invention are given as an indication and may serve as a basis for the skilled person who can adapt them, thanks to his general knowledge, to other animals.
  • the compositions of the invention may be in solid, liquid or semi-liquid form. Their formulation is adapted according to the ability of the patient to absorb an oral diet but also enterally or parenterally.
  • the compositions of the invention may be in the form of beverages, creams, prepared dishes, desserts or biscuits for oral use; - freeze-dried or spray-dried or dehydrated powder for reconstitution with water of products in the form of beverages, creams, ready meals, desserts or biscuits for oral use;
  • compositions of the invention are in a dry form to dissolve extemporaneously in a neutral vehicle.
  • compositions of the invention include a neutral vehicle making them ready for use.
  • neutral vehicle an aqueous solution for producing a more or less liquid composition, facilitating the ingestion of the latter by the patient.
  • the compositions of the invention will have a viscosity range extending from that of water to that of milk drinks for a temperature of 4 ° C to 40 ° C, at normal atmospheric pressure.
  • compositions of the invention can be used directly as a medicament.
  • drug is meant any substance that when ingested by the patient, provides a benefit in terms of welfare, improvement of biomarkers, regression or remission of pathology.
  • Medical product means any substance or combination of substances presented as possessing curative or preventive properties with regard to human or animal diseases, as well as any product which may be administered to humans or animals, with a view to establishing a diagnosis to restore, correct or modify their organic functions (Article L5111-1 of the French Code of Public Health).
  • a medicament generally consists of at least one active principle, that is to say a molecule conferring its therapeutic effects and excipients.
  • the compositions of the invention may also be included in the formulation of pharmaceutical preparations.
  • compositions of the invention can be used in the preparation of a medicament.
  • compositions of the invention may be used as a supplement or a food substitute.
  • compositions of the invention may be used as a nutraceutical supplement.
  • the metabolism of polyamines plays a key role in cell proliferation. Knowing that a disturbance in the physiology of cell division is almost always harmful, it seems appropriate to analyze the effects of a disruption of the metabolism of polyamines in the context of pathologies involving processes of cellular hyperproliferation, and in particular as part of cancer treatment.
  • compositions of the invention can be used in the treatment, in a patient, of pathologies related to cellular hyperproliferation.
  • compositions of the invention can be used in the treatment, in a patient, of cancer.
  • compositions of the invention can be used in the treatment, in a patient, of pathologies related to cellular hyperproliferation, or in the treatment of cancer.
  • compositions of the invention may be used in the treatment of pathologies related to cellular hyperproliferation or in the treatment of cancer, said treatment being carried out by administering a unit dose ranging from 3.7 mg to 370 mg of agmatine.
  • unit dose is meant the specific amount of agmatine ingested by the patient in one dose.
  • the unit dose is the appropriate presentation of a specified amount of agmatine in a single dose container for administration to the patient.
  • compositions of the invention can serve as a basis for a diet which can include several phases in which the exogenous supply of polyamines and agmatine is:
  • totally is meant that the patient's diet is restricted to the compositions of the invention. No food other than the compositions of the invention enter the diet of the patient. During this phase, the control of polyamine and agmatine intake is maximal.
  • compositions of the invention By “majority”, it is meant the possibility of introducing into the patient's diet a breakfast comprising foods reduced in polyamine content. The rest of the daily food ration is provided by the compositions of the invention.
  • compositions of the invention By “partially” is meant the possibility of introducing into the patient's diet a breakfast and at least one solid meal comprising foods reduced in polyamine content. The rest of the daily food ration is provided by the compositions of the invention.
  • compositions used according to the present invention are administered to the patient according to the following scheme:
  • patient reaction is meant its physiological ability to benefit from a depleted polyamine diet and enriched with agmatine. The benefit can be appreciated especially from the regression of the tumor mass. The improvement or disappearance of any sign of the disease can be assessed by clinical examination, biological or imaging tests performed routinely in the context of cancer. These criteria vary depending on the type of cancer. Three hypotheses are possible:
  • the second dose of the composition will contain at most the same levels of polyamines and agmatine as the first dose
  • the second dose of the composition will contain at least the same levels of polyamines and agmatine as the first dose
  • the second dose of the composition will contain polyamine and agmatine levels which are higher or lower than those of the first dose.
  • the first period of time varies from 7 to 14 days, in particular 7 days.
  • the second period of time varies from 14 to 21 days, in particular 14 days.
  • the third period of time varies from 28 to 63 days, in particular 63 days.
  • the first, second, and third time periods constitute a complete cycle of patient treatment.
  • the administration of the compositions of the invention may be carried out for one, two or more cycles. The renewal of these cycles is left to the discretion of the practitioner.
  • the first dose of agmatine varies from 3.7 mg to 2.9 g of agmatine / day
  • the second dose of agmatine varies from 3.7 mg to 2.9 g of agmatine / day
  • the third dose of agmatine ranges from 3.7 mg to 2.9 g agmatine / day.
  • These doses correspond to the doses of agmatine provided by 1 to 8 rations of a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine and enriched in agmatine of the dose 18.4 mg / kg of food at the dose 1840 mg / kg of food.
  • compositions of the present invention provide a daily amount of agmatine 3 times to 2230 times higher than that contained in an average food ration. According to another particular embodiment of the invention:
  • the first dose of polyamines varies from 9 ⁇ g to 146 ⁇ g of polyamines per day
  • the second dose of polyamines varies from 9 ⁇ g to 146 ⁇ g of polyamines per day, and
  • the third dose of polyamines ranges from 9 ⁇ g to 146 ⁇ g of polyamines per day.
  • These doses correspond to the doses of agmatine provided by 1 to 8 rations of a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine and enriched in agmatine of the dose 18.4 mg / kg of food at the dose 1840 mg / kg of food.
  • compositions of the present invention provide a daily amount of polyamines 260 times to 4200 times lower than that contained in an average food ration.
  • the first dose of agmatine varies from 3.7 mg to 2.9 g of agmatine / day and the first dose of polyamines varies from 9 ⁇ g to 146 ⁇ g of polyamines per day,
  • the second dose of agmatine varies from 3.7 mg to 2.9 g of agmatine / day and the second dose of polyamines varies from 9 ⁇ g to 146 ⁇ g of polyamines per day, and
  • the third dose of agmatine varies from 3.7 mg to 2.9 g of agmatine / day and the third dose of polyamines varies from 9 ⁇ g to 146 ⁇ g of polyamines per day.
  • compositions comprising:
  • the total amount of agmatine ingested per day by the patient does not exceed 11400 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 5000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 1000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 80 nanomoles per kcal of ingested composition.
  • compositions comprising:
  • the total amount of bio logically active polyamines ingested per day by the patient does not exceed 0.42 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 0 , 30 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 0.25 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 0.21 nanomoles per kcal of ingested composition.
  • compositions comprising:
  • the total amount of agmatine ingested per day by the patient does not exceed 11400 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 5000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 1000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 80 nanomoles per kcal of ingested composition and the total amount of logically active organic polyamines ingested per day by the patient not exceeding 0.42 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 0 , 30 nanomole per kcal of ingested composition, in particular 0.25 nanomole per
  • compositions of the invention may be used as a second therapeutic agent.
  • compositions of the invention may be administered to the patient before and / or during and / or after the anti-cancer treatment.
  • the present invention also relates to a combination of a composition comprising:
  • the total amount of agmatine ingested per day by the patient not exceeding 11400 nanomoles per kcal of composition ingested, in particular 5000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 1000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 80 nanomoles per kcal of ingested composition.
  • the present invention also relates to a combination of a composition comprising:
  • the total amount of logically bioactive organic polyamines ingested per day by the patient not exceeding 0.42 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 0.30 nanomole per kcal of ingested composition, in particular 0.25 nanomole per kcal of ingested composition, in particular 0.21 nanomole per kcal of ingested composition.
  • the present invention also relates to a combination of a composition comprising:
  • the total amount of agmatine ingested per day by the patient does not exceed 11400 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 5000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 1000 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 80 nanomoles per kcal of ingested composition and the total amount of logically active organic polyamines ingested per day by the patient not exceeding 0.42 nanomoles per kcal of ingested composition, in particular 0.30 nanomole per kcal of ingested composition, in particular 0.25 nanomole per kcal of ingested composition, in particular 0.21 nanomole per kcal of ingested composition.
  • the present invention also relates to a combination of a composition comprising:
  • Figure 1-A Four groups of five mice are fed with different diets 6 days after the transplant took place. The start of treatment is indicated by the arrow on the graph.
  • the curve shown by black circles represents the mice fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmo / g of food).
  • the curve represented by empty circles represents the mice fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food), and a drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the curve represented by black squares represents the mice fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmo / g of food).
  • the curve represented by empty squares represents the mice fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and a drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • Figure 1-B Six groups of five mice are fed with different diets 6 days after the transplant took place. The start of treatment is indicated by the arrow on the graph.
  • the curve represented by black circles represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food (0.350 nmol / g of food), and enriched with agmatine (18.4 mg / kg of food, ie 141 nmol / g of food).
  • the curve represented by empty circles represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (18.4 mg / kg of food (141 nmoles / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the curve represented by black squares represents the mice fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food) and enriched with agmatine (184 mg / kg of food is 1410 nmol / g of food).
  • the curve represented by empty squares represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (184 mg / kg of feed (1410 nmol / g food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the curve represented by black diamonds represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food) and enriched with agmatine (1840 mg / kg d food is 14100 nmol / g of food).
  • the curve represented by empty diamonds represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (1840 mg / kg of feed (14100 nmol / g food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • Figure 2 Evolution of pulmonary metastatic spread
  • This figure represents the percentage of pulmonary metastatic invasion (on the ordinate) of male C57BL / 6 mice, as a function of the diet (on the abscissa) given to the mice that had been transplanted to a solid tumor of Lewis carcinoma cells.
  • the percentage of pulmonary metastatic invasion is measured 19 days after the transplant took place.
  • mice Ten groups of mice are fed different diets.
  • the first group (represented by a black column) is fed with a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmoles / g of food).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of mice in this group is 27%.
  • the second group (represented by a white column) is fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food), and a drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 11%.
  • the third group (represented by a column containing discontinuous vertical lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 6%.
  • the fourth group (represented by a column containing horizontal discontinuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and a water of drink containing neomycin (2 mg / ml).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 7%.
  • the fifth group (represented by a column containing vertical continuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched with agmatine (18.4 mg / kg of food or 141 nmol / g of food).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 9%.
  • the sixth group (represented by a column containing horizontal continuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine ( 18.4 mg / kg feed, ie 141 nmoles / g feed) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 15%.
  • the seventh group (represented by a column containing left-handed continuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched agmatine (184 mg / kg feed or 1410 nmol / g feed).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 6%.
  • the eighth group (represented by a column containing straight lines pointing to the right) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of feed or 0.350 nmol / g of feed), enriched with agmatine (184 mg / kg feed, ie 1410 nmol / g food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 4%.
  • the ninth group (represented by a column containing small dots) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched with agmatine ( 1840 mg / kg of food (14100 nmol / g of food).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 4%.
  • the tenth group (represented by a column containing large dots) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (1840 mg / kg of food (14100 nmol / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the average value of pulmonary metastatic invasion of the mice of this group is 6%.
  • FIG. 3A Four groups of five mice are fed different diets 6 days after the transplant took place.
  • the black column represents the mice fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food).
  • the white column represents mice fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food), and a drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the column containing vertical discontinuous features represents the mice fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food).
  • the column containing horizontal discontinuous lines represents mice fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and a drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • FIG. 3B Six groups of five mice are fed with different diets 6 days after the transplant took place.
  • the column containing vertical continuous lines represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched with agmatine (18.4 mg / kg of food is 141 nmol / g of food).
  • the column containing horizontal continuous lines represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of feed or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (18.4 mg / ml). kg of food (141 nmoles / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the column containing continuous lines pointing to the left represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food) and enriched with agmatine (184 mg / ml). kg of food (1410 nmol / g of food).
  • the column containing straight lines pointing to the right represents the mice fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (184 mg / ml). kg of food (1410 nmol / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the column containing small dots represents the mice fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food) and enriched in agmatine (1840 mg / kg of food is 14100 nmol / g of food).
  • the column containing large dots represents the mice fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched in agmatine (1840 mg / kg of feed (14100 nmol / g food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • This figure represents the mass of the spleen in mg (ordinate) of male C57BL / 6 mice, as a function of the diet (in abscissas) given to the mice which have received or not the transplantation of a solid tumor of Lewis carcinoma cells. .
  • the mass of the spleen is measured 19 days after the transplant took place.
  • mice Ten groups of five mice that have been transplanted to a solid tumor of Lewis carcinoma cells are fed different diets.
  • the first group (represented by a black column) is fed with a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food).
  • the average value of the splenic mass of mice in this group is 171 mg.
  • the second group (represented by a white column) is fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food), and a drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the mean value of the splenic mass of mice in this group is 151 mg.
  • the third group (represented by a column containing discontinuous vertical lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food).
  • the mean value of the splenic mass of mice in this group is 88 mg.
  • the fourth group (represented by a column containing horizontal discontinuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and a water of drink containing neomycin (2 mg / ml).
  • the mean value of the splenic mass of mice in this group is 63 mg.
  • the fifth group (represented by a column containing vertical continuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched with agmatine (18.4 mg / kg of food or 141 nmol / g of food).
  • the mean value of the splenic mass of mice in this group is 111 mg.
  • the sixth group (represented by a column containing horizontal continuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine ( 18.4 mg / kg feed, ie 141 nmoles / g feed) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the mean value of the splenic mass of mice in this group is 69 mg.
  • the seventh group (represented by a column containing left-handed continuous lines) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched agmatine (184 mg / kg feed or 1410 nmol / g feed).
  • the average value of the splenic mass of mice in this group is 92 mg.
  • the eighth group (represented by a column containing straight lines pointing to the right) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of feed or 0.350 nmol / g of feed), enriched with agmatine (184 mg / kg feed, ie 1410 nmol / g food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the average value of the splenic mass of mice in this group is 105 mg.
  • the ninth group (represented by a column containing small dots) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched with agmatine ( 1840 mg / kg of food (14100 nmol / g of food).
  • the average value of the splenic mass of mice in this group is 92 mg.
  • the tenth group (represented by a column containing large dots) is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (1840 mg / kg of food (14100 nmol / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the mean value of the splenic mass of mice in this group is 124 mg.
  • the eleventh group (represented by a gray column), corresponding to the mice not receiving a graft, is fed with a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food) .
  • the mean value of the splenic mass of mice in this group is 61 mg.
  • mice Male C57BL / 6 mice, 9 weeks old and weighing 20g (January breeding, Genest St Isle, France) are acclimated 1 week before the start of the study. Animal handling is carried out in accordance with the ethical guidelines for experimentation and according to the recommendations of the European Biomedical Research Association.
  • the animals are enclosed at 5 individuals per cage under standardized conditions (21 ⁇ 1 ° C, 60% relative humidity, cycles of 12 hours of light, 12 hours of darkness), and have access to food and feed. water ad libitum.
  • Lewis lung carcinoma cells (3LL) were obtained from the ECACC (European Collection of Cell Cultures) and grafted by intramuscular injection into the hind paws of male C57BL / 6 mice according to the method previously described (Hergueux J. et al. al., Cell BioL Exp., 1983, 51 (4), 181-191) to produce tumor cells. After 20 days, the tumor cells are collected and dispersed in PBS, counted and diluted to reach 0.5 ⁇ 10 6 cells / 100 ⁇ l, before being grafted into the right hind paw of the mice. The grafted mice are randomly distributed in the cages in groups of 5 individuals.
  • the tumor becomes palpable a few days after the transplant has taken place.
  • the animals are sacrificed 19 days after the tumor transplant.
  • RPCPSdS Pule Diet in Cadaverine Putrescine Spermidine Spermine
  • This polyamine-depleted food contains less than 51 ⁇ g of polyamines / kg of food or 0.350 nmol / g of food.
  • Rodent feed containing a normal level of polyamines corresponds to a standard commercial feed (UAR, standard feed mill).
  • the products are distributed to the animals according to their profile and their nutritional needs.
  • a mouse consumes about 2 grams per day of feeding.
  • the treatment is set up 6 days after the transplant, when the tumor is palpable and is administered 7 days out of 7 and includes the ad libitum intake of the normal diet or test solutions as well as the drinking water.
  • mice C57BL / 6 mouse
  • tumor model Lewis carcinoma
  • the growth of the tumor is quantified at 6, 8, 11, 14 and 18 days after the graft has taken place by measuring the volume of the tumor, according to the method previously described (Moulinoux et al., Int J. Cancer, 1984, 34 (2), 277-281).
  • mice are divided into ten groups and different diets are administered to each group.
  • the first group is fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food).
  • the second group is fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food) and a drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the third group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food).
  • the fourth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and supplemented with neomycin (2 mg / ml).
  • the fifth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched in agmatine (18.4 mg / kg of food is 141 nmol / g of food).
  • the sixth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (18.4 mg / kg of food or nmoles / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the seventh group is fed with a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched with agmatine (184 mg / kg of food or 1410 nmol / g of food).
  • the eighth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (184 mg / kg of food or 1410 nmol / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • the ninth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched in agmatine (1840 mg / kg of food or 14100 nmol / g of food).
  • the tenth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched in agmatine (1840 mg / kg of food or 14100 nmol / g of food) and drinking water containing neomycin (2 mg / ml).
  • Neomycin is diluted in drinking water (0.2% w / v) when the animals are fed a diet in a solid form of kibble type, or with a diet in a liquid or semi-liquid form, especially under the form of solutes.
  • Neomycin has no effect on the evolution of tumor volume when administered in drinking water on the basis of a diet containing a normal level of polyamines.
  • the depleted diet of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine causes a 20% decrease in tumor growth on day 19. This decrease is 35% when neomycin is added to this depleted diet of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine ( Figure 1-A).
  • Neomycin supplemented with a diet containing a normal level of polyamines causes a 60%> decrease in metastatic invasion compared to that observed in mice that did not receive this antibiotic.
  • the depleted diet of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine caused a 79% decrease in metastatic invasion compared to that observed in mice fed a diet containing a normal level of polyamines.
  • the addition of neomycin to a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine does not bring any additional benefit.
  • the level of polyamines is measured in the tumor formed at the site of inoculation of Lewis carcinoma cells.
  • the tumor was washed and the cells that compose it are dispersed using a Polytron ® homogenizer in the presence of 0.2 M perchloric acid. After incubation for at least 16 h at 4 ° C, the cells are centrifuged for 15 minutes at 3500 rpm at 4 ° C. The supernatant which contains the polyamines is taken and used for the determination of the polyamines.
  • the polyamines are assayed according to the method previously described (Seiler N et al., 1996, Cancer Research, 56, 5624-5630). The three main polyamines present in mammals (putrescine, spermidine and spermine) were measured for the ten groups of mice each receiving a distinct diet. The results are shown in Figure 3.
  • Neomycin causes a 17% decrease in putrescine, a 7% increase in spermine level and has no effect on spermidine levels based on a normal diet.
  • neomycin causes a 17% increase in putrescine level, a 24% increase in spermidine level and a 5% decrease in spermine spermine level on the basis of a cadaverine depleted diet, putrescine. spermidine and spermine.
  • the depleted diet of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine induces an increase of 17% and 24%, respectively, in tumor levels of putrescine and spermidine. This diet has no effect on the tumor rate of spermine.
  • Agmatine supplementation of the depleted cadaverine, putrescine, spermidine and spermine regimen induces decreases in tumor levels of putrescine, spermidine and spermine.
  • the tumor levels of putrescine, spermidine and spermine respectively decrease by 35%, 10% and 31% relative to the tumor levels of these two polyamines in the mice. received a diet containing a normal level of polyamines.
  • the tumor levels of putrescine, spermidine and spermine respectively decreased by 14%, 12% and 24% relative to the tumor levels of these two polyamines in the mice fed a diet. containing a normal level of polyamines.
  • the tumoral levels of putrescine, spermidine and spermine respectively decrease by 50%, 10% and 16% relative to the tumor levels of these two polyamines in the mice fed a diet. containing a normal level of polyamines.
  • the spleen is taken from the mice and weighed using a precision balance.
  • mice In addition to the ten groups of mice each having a distinct diet, as previously described, an eleventh group of animals was included for this study. These are male C57BL / 6 mice with the same basic physiological characteristics as the mice in the other ten groups but who did not undergo a Lewis carcinoma cell transplant. The mice of this eleventh were fed with the diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food). The splenic mass of these healthy mice (61 mg) serves as a reference for an animal with no sign of inflammation.
  • mice transplanted with Lewis carcinoma cells and placed on a diet containing a normal level of polyamines have a spleen mass three times higher (171 mg) than healthy mice fed the same diet.
  • Neomycin causes a decrease in splenic mass in group 2, 4 and 6 mice. Conversely, in group 8 and 10 mice fed a cadaverine, putrescine, spermidine and spermine depleted diet and enriched with agmatine. at doses of 184 mg / kg of feed and 1840 mg / kg of feed respectively, neomycin causes an increase in splenic mass.
  • the depleted diet of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine induces a decrease of about 50% of the splenic mass in these mice compared with the grafted mice which have received a diet containing a normal level of polyamines.
  • mice Male C57BL / 6 mice, 9 weeks old and weighing 20g (January breeding, Genest St Isle, France) are acclimated 1 week before the start of the study. Animal handling is carried out in accordance with the ethical guidelines for experimentation and according to the recommendations of the European Association for Biomedical Research.
  • the animals are enclosed at 5 individuals per cage under standardized conditions (21 ⁇ 1 ° C, 60% relative humidity, cycles of 12 hours of light, 12 hours of darkness), and have access to food and feed. water ad libitum.
  • Lewis lung carcinoma cells (3LL) were obtained from the ECACC (European Collection of Cell Cultures) and grafted by intramuscular injection into the hind paws of male C57BL / 6 mice according to the method previously described (Hergueux J. et al. al., Cell BioL Exp., 1983, 51 (4), 181-191) to produce tumor cells. After 20 days, the tumor cells are collected and dispersed in PBS, counted and diluted to reach 0.5 ⁇ 10 6 cells / 100 ⁇ l, before being grafted into the right hind paw of the mice. The grafted mice are randomly distributed in the cages in groups of 5 individuals.
  • the animals are sacrificed 19 days after the tumor cell transplant.
  • the depleted diet of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine is called RPCPSdS (Poor Diet in Cadaverine Putrescine Spermidine Spermine) and is in the form of solutes.
  • This polyamine-depleted food contains less than 51 ⁇ g of polyamines / kg of food.
  • the rodent feed containing a normal level of polyamines (125 mg of polyamines per kilogram of food or 861 nmol of polyamines per g of feed) corresponds to a standard commercial feed (UAR, standard feed mill).
  • the products are distributed to the animals according to their profile and their nutritional needs.
  • a mouse consumes about 2 grams per day of feeding.
  • the treatment is set up 6 days after the transplant, when the tumor is palpable and is administered 7 days out of 7 and includes the ad libitum intake of the normal diet or test solutions as well as the drinking water.
  • mice C57BL / 6 mouse
  • tumor model Lewis carcinoma
  • the growth of the tumor is quantified at 6, 8, 11, 14 and 18 days after the graft has taken place by measuring the volume of the tumor, according to the method previously described (Moulinoux et al., Int J. Cancer, 1984, 34 (2), 277-281).
  • mice are divided into fifteen groups of five mice and different diets are administered to each group.
  • the first group is fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food).
  • the second group is fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food) and a dose of cyclophosphamide of 9 mg.kg -1 " week " 1 .
  • the third group is fed a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food or 861 nmol / g of food) and a dose of cyclophosphamide of 90 mg.kg- 1 week -1 .
  • the fourth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food).
  • the fifth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food) and a dose of cyclophosphamide 9 mg.kg "1 .week " 1 .
  • the sixth group is fed with a depleted diet cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 mg / kg food or 0.350 nmole / g of food) and cyclophosphamide dose of 90 mg.kg "1. Week" 1 .
  • the seventh group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched in agmatine (18.4 mg / kg of food is 141 nmol / g of food).
  • the eighth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (184 mg / kg of food or 1410 nmol / g of food).
  • the ninth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), and enriched in agmatine (1840 mg / kg of food or 14100 nmol / g of food).
  • the tenth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched in agmatine (18.4 mg / kg of food or nmoles / g of food) and a dose of cyclophosphamide of 9 mg.kg- 1 week -1 .
  • the eleventh group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (184 mg / kg of food or 1410 nmol / g of food) and a dose of cyclophosphamide of 9 mg.kg- 1 week -1 .
  • the twelfth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched in agmatine (1840 mg / kg of food or 14100 nmol / g of food) and a dose of cyclophosphamide of 9 mg.kg- 1 week -1 .
  • the thirteenth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (18.4 mg / kg of food or nmoles / g of food) and a dose of cyclophosphamide of 90 mg.kg- 1 week -1 .
  • the fourth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (184 mg / kg of food or 1410 nmol / g of food) and cyclophosphamide dose of 90 mg.kg "1. week" 1.
  • the fifteenth group is fed a diet depleted of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine (51 ⁇ g / kg of food or 0.350 nmol / g of food), enriched with agmatine (1840 mg / kg of food or 14100 nmol / g of food) and cyclophosphamide dose of 90 mg.kg "1. week" 1.
  • Cyclophosphamide (Cytoxan ®) administered to 90 mg.kg "1. Week" 1 has an anti-proliferative effect significant regardless of the power supplied. The percentage inhibition is of the order of 81 to 90%.
  • a low dose of cyclophosphamide 9 mg.kg "1.
  • Week" 1 associated with a depleted diet cadaverine, putrescine, spermidine and spermine can increase the antitumor efficacy of 25% compared to a diet containing a normal level of polyamines (125 mg / kg of food, ie 861 nmol / g of food) combined with 9 mg.kg- 1 week- 1 of cyclophosphamide.
  • This depleted diet of cadaverine, putrescine, spermidine and spermine enriched with agmatine makes it possible to increase, in a dose-dependent manner, the antitumor effect of cyclophosphamide at 9 mg.kg- 1 week- 1 from 5 to 14%, depending on the doses. agmatine.
  • This same scheme can be increased in a dose dependent manner the antitumor effect of cyclophosphamide at 90 mg.kg "1. Week” 1 of 1 to 10%, depending on the doses of agmatine.
  • compositions of the present invention can also be verified with other models of human solid or liquid tumors, including leukemia by the HL60 line (Novak et al., Leukemia Research 35 (2011): 1248-1253).
  • breast cancers by the MCF7 line Wang et al., Biochemistry and Molecular Biology Reports 32 (1999): 173-180
  • prostate cancers by the DU145 line Choi et al., Acta Pharmacologica Sinica 26 (2005)).
  • DU145 line Choi et al., Acta Pharmacologica Sinica 26 (2005)).
  • intestinal cancers by Colo320, Colo205E, Cxi, SW480 (Molderings et al, Cancer 101 (2004): 858-68).
  • the above-mentioned cell lines are given as examples of certain types of cancer and must in no way restrict the scope of the present invention.

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Abstract

La présente invention porte sur des nouvelles compositions comprenant un mélange de cadavérine, putrescine, spermine et spermidine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, ladite composition comprenant également de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition, et leurs utilisations dans le traitement chez un patient de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire.

Description

COMPOSITIONS CONTENANT DE L'AGMATINE ET LEURS UTILISATIONS DANS LA PREPARATION DE MEDICAMENTS OU DE SUBSTANCES NUTRACEUTIQUES La présente invention porte sur de nouvelles compositions contenant de l'agmatine, et leurs utilisations dans la préparation de médicaments ou de substances nutraceutiques.
Chez les procaryotes et les eucaryotes les polyamines sont des molécules organiques composées uniquement d'atomes de carbone, d'azote et d'hydrogène et contenant au moins deux fonctions aminés. Ces aminés aliphatiques polycationiques incluent la putrescine, la spermidine et la spermine chez les eucaryotes. La cadavérine, autre polyamine, est présente uniquement chez les procaryotes.
Les polyamines sont synthétisées à partir de la L-arginine ou de la L-méthionine. Leur voie de biosynthèse et de catabolisme repose sur un nombre restreint d'enzymes. La synthèse de putrescine à partir d'ornithine (produit de dégradation de l'arginine) fait intervenir l'Ornithine DéCarboxylase (ODC). La seconde voie de synthèse de la putrescine à partir d'agmatine fait intervenir l'agmatinase. La spermidine synthétase (SpdS) permet la synthèse de la spermidine à partir de la putrescine, qui à son tour va être pris en charge par la spermine synthétase (SpmS) pour former la spermine. La spermidine/spermine Nl-acétyltransférase (S S AT) constitue l'enzyme clé du catabolisme des polyamines qui permet la rétroconversion de la spermine en spermidine et de la spermidine en putrescine. La SSAT permet une régulation fine des niveaux intracellulaires des différentes polyamines qui peuvent s'avérer toxiques pour la cellule. La spermidine et la spermine peuvent également être synthétisées à partir de la méthionine par l'action de la S-adénosylméthionine-Décarboxylase (SAMdc).
Les données de la littérature montrent qu'une ration alimentaire journalière de 2000 kcal (kilo calories) apporte une dose de polyamines bio logiquement « actives » qui varie de 200 000 à 700 000 nanomoles (nmol). Cela signifie qu'une ration alimentaire journalière fournit un apport de 100 à 350 nmol de polyamines bio logiquement actives par kilocalorie (Bardocz et al., 1995, Br. J. Nutr., 73(6) :819-828). Cet écart dépend de la nature des aliments consommés qui contiennent des quantités variables de polyamines. Pour pouvoir convertir en grammes (g) des quantités de polyamines bio logiquement actives exprimées en nanomoles, il est nécessaire de considérer une masse moléculaire moyenne pour l'ensemble des polyamines bio logiquement actives. Cette masse moléculaire moyenne des polyamines bio logiquement actives est une approximation et est estimée à 145,24 g/mol.
Ainsi, une ration journalière de 2000 kcal, apporte de 14,5 à 51 μg de polyamines bio logiquement actives/kcal. Ceci correspond à un apport de 29 à 102 mg de polyamines bio logiquement actives/jour ou encore à un apport de 29 à 102 mg de polyamines bio logiquement actives pour 2000 kcal.
II peut s'avérer nécessaire de considérer, non plus le pool de polyamines bio logiquement actives dans son ensemble mais le taux de chacune des polyamines considérées isolément. Les aliments peuvent être répartis en trois classes suivant leur teneur en polyamines (www.guerir.org/magazine/guide-nutritionnel-mitriajys.pdf). Cette répartition permet d'estimer de manière approximative les taux de chacune des polyamines (cadavérine, putrescine, spermidine et spermine) pour chaque catégorie d'aliments. Ainsi, une ration alimentaire journalière « moyenne » apporte respectivement environ 10,8 mg de putrescine, environ 4,4 mg de cadavérine, environ 15,7 mg de spermidine et environ 6,7 mg de spermine pour 2000 kcal. Cela correspond à un taux global de polyamines (cadavérine, putrescine, spermidine et spermine) d'environ 37,6 mg pour une ration alimentaire « moyenne » journalière de 2000 kcal. Par conséquent, la putrescine représente 28,7%, la cadavérine représente 11,7%, la spermidine représente 41,8%, et la spermine représente 17,8% du taux global des polyamines de la susdite ration alimentaire.
Les polyamines bio logiquement « actives », ou leurs analogues (substances chimiques organiques structurellement similaires aux polyamines) ou leurs dérivés (substances chimiques liées structurellement à une polyamine, et qu'il est théoriquement possible d'obtenir à partir de celle-ci) bio logiquement « actifs » peuvent être identifiées notamment selon au moins une des méthodes suivantes : 1) En culture :
Une polyamine bio logiquement « active » ou l'un de ses analogues ou dérivés bio logiquement « actifs » doit pouvoir participer au métabolisme cellulaire physiologique des polyamines, voire être capable d'interférer avec ce dernier ou encore de le dysréguler.
a. Une polyamine bio logiquement « active » ou l'un de ses analogues ou dérivés bio logiquement « actifs » doit donc pouvoir s'associer voire être reconnue par le ou les systèmes de transport visant à l'internaliser dans une cellule vivante. L'adjonction d'une polyamine bio logiquement « active » radiomarquée ou d'un de ses analogues ou dérivés bio logiquement « actifs » radiomarqué au milieu de culture permet de vérifier son internalisation.
b. Une polyamine bio logiquement « active » ou l'un de ses analogues ou dérivés bio logiquement « actifs » doit pouvoir supprimer l'inhibition de la prolifération cellulaire provoquée par l'inhibition de l'anabolisme endogène des polyamines (ex: par Γα-DFMO, alpha-difluorométhylornithine).
c. Une polyamine bio logiquement « active », ou l'un de ses analogues ou dérivés bio logiquement « actifs » y compris de synthèse, en dysrégulant le métabolisme naturel des polyamines doit pouvoir moduler le niveau de la prolifération cellulaire.
2) In vivo :
Chez l'animal porteur de tumeur greffée, l'apport exogène (tractus gastro- intestinal) de polyamines bio logiquement «actives» doit supprimer les effets anticancéreux bénéfiques provoqués par la carence en polyamines bio logiquement «actives» induite par la diminution des sources endogènes et exogènes de polyamines bio logiquement «actives», cet apport exogène étant couplé ou non à des médicaments anticancéreux.
Ainsi, chez les eucaryotes, la putrescine, la spermidine et la spermine possèdent les propriétés des polyamines bio logiquement actives telles que définies ci-dessus et sont donc considérées comme telle dans la présente invention.
Les polyamines sont des composés essentiels pour la croissance et la différentiation cellulaire. Les inventeurs ont montré qu'un régime alimentaire appauvri en polyamines permettait de potentialiser les effets d'inhibiteurs irréversibles de l'ODC sur la croissance tumorale (EP 0 703 731 Bl).
Par ailleurs, des études ont montré que les cellules cancéreuses contiennent des taux plus élevés de polyamines que ceux observés dans les cellules saines (WO 1997/11691). La déplétion en polyamines a été utilisée en stratégie anticancéreuse.
Cette déplétion est obtenue soit en induisant l'expression de la SSAT ou la stabilisation de son ARN messager par un analogue de la spermine, notamment par le NJN12- diéthylnorspermine (DENSPM) (Parry L et al, 1995, Biochem. J. 305: 451-458), soit en inhibant l'ODC à l'aide d'inhibiteurs réversibles ou irréversibles comme α-
DiFluoroMéthylOrnithine (α-DFMO) (WO 2002/15895), soit en bloquant le transport des polyamines au niveau des membranes cellulaires.
Bien qu'aucun gène en particulier n'ait été identifié comme étant le transporteur des polyamines, trois systèmes distincts de transport des polyamines ont été mis en évidence chez les mammifères (Igarashi et al., 2010, Plant Physiology and
Biochemistry, 48, 506-512). L'antizyme, protéine impliquée dans la dégradation de l'ODC, est capable de moduler l'entrée ou la sortie des polyamines de la cellule selon un mécanisme non encore élucidé à ce jour. Un mécanisme d'endocytose des polyamines médié par le glypican-1 et la cavéoline-1 a également été rapporté. Plus récemment, des études ont mis en évidence la présence d'un complexe protéique constitué des protéines SLC3A2 et y+LAT capable d'excréter la putrescine de la cellule et d'y faire rentrer l'arginine en échange.
Le développement d'inhibiteurs du transport des polyamines fait l'objet de nombreuses recherches. Différentes classes de molécules ont été développées, notamment des analogues de la spermine (Burns M.R., 2009, J. Med. Chem., 52, 1983-
1993) ou des dimères de polyamines (US 2005/0267220 Al), éventuellement liés à un noyau anthracène (WO 2010/148390).
Les inhibiteurs des enzymes de l'anabolisme des polyamines et les inhibiteurs du transport des polyamines interviennent essentiellement sur la synthèse endogène des polyamines par les cellules de l'organisme.
Les bactéries de la flore intestinale constituent la seconde source de synthèse endogène des polyamines. L'utilisation d'antibiotiques ciblant ces bactéries permet une réduction de cette autre source endogène de polyamines.
L'agmatine, issue de la décarboxylation de l'arginine par l'arginine décarboxylase (ADC) constitue un précurseur de la putrescine. La maintenance de l'homéostasie de l'agmatine est assurée par le foie. L'étude de la distribution tissulaire de l'agmatine chez le rat montre que l'agmatine est présente, à des taux variables, dans la plupart des tissus de l'organisme. Les taux d'agmatine les plus élevés sont retrouvés dans l'estomac, les intestins, l'aorte et la rate. L'agmatine est également retrouvé, dans une moindre concentration, dans d'autres compartiments tissulaires et notamment le foie, les poumons, les reins et le cerveau (Raasch et al, 1995, Ann. N. Y. Acad. Sci. Jul 12;763:330-4). L'omniprésence tissulaire de l'agmatine lui confère des fonctions physiologiques variées.
L'agmatine est considérée comme étant un neurotransmetteur ou un neuromodulateur chez les mammifères. L'agmatine est capable de se lier à différents types de récepteurs, notamment aux récepteurs aux imidazolines, récepteurs impliqués dans le contrôle de la pression artérielle. Ainsi, l'injection intraveineuse d'agmatine à des doses de 1 à 100 mg/kg conduit à une diminution de la pression artérielle par le biais d'une inhibition du relargage de la noradrénaline (Raasch et al., 2002, British Journal of Pharmacology 135, 663-672).
L'agmatine est également un antagoniste aux récepteurs N-méthyl-D-aspartate
(NMDA) et a2-adrénergique, récepteurs impliqués dans la perception des douleurs chroniques (Regunathan S, 2006, A.A.P.S Journal, 8(3) : E479-E484). L'agmatine possède un effet anti-allodynique qui permet aux animaux ayant reçu une injection de 0,3 nmole d'agmatine de retrouver une perception normale de la douleur (EP 1 014 959 Bl). Par ailleurs, l'équipe de Courteix a montré qu'une injection intrathécalle d'agmatine supprime l'allodynie tactile ou thermique ainsi que l'hyperalgésie chez des rats diabétiques (Courteix et al., 2007, J. Pharmacol. Exp. Ther., 322(3) : 1237-1245). Plus récemment, une étude clinique réalisée sur des patients souffrant de hernie discale montre que l'absorption pendant 14 jours de 2,67g/jour de sulfate d'agmatine provoque une perception atténuée de la douleur chez ces patients (WO 2010/030470).
L'agmatine est en outre impliquée dans la prolifération des cellules cancéreuses. L'équipe de Satriano a montré que l'agmatine, en inhibant l'ODC de manière dose- dépendante, bloque la synthèse des polyamines dans les cellules rénales, empêchant ainsi leur prolifération (WO 1998/13037).
Par ailleurs, des prélèvements réalisés sur des tissus provenant de carcinome du colon ont mis en évidence un taux d'agmatine inférieur à celui des tissus sains adjacents (Molderings et al., 2004, Cancer, 101 : 858-868). Ceci est la conséquence directe d'une inhibition de l'expression de l'ADC dans les tissus néoplasiques (Haenisch et al., 2008, Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol., 295 : Gl 104-G1110).
L'agmatine agit également directement sur le cycle cellulaire. Le traitement in vitro de lignées cellulaires d'hépatocarcinomes par des doses d'agmatine variant de 10 μιη à ImM conduit à l'arrêt des cellules cancéreuses en phase G2/M du cycle cellulaire, sans toutefois entraîner leur apoptose (Gardini et al., 2003, Journal of Hepathology, 39 : 793-799). Cet effet cytoprotecteur de l'agmatine a été confirmé sur des modèles cellulaires de cancer du colon (Mayeur et al., 2005, B.B.A., 745 : 111-123) et dans des cellules de ganglion rétinien où l'apoptose avait été induite par le TNF-α ou par l'hypoxie (US 2010/0130783).
Enfin, un système de transport spécifique de l'agmatine a été mis en évidence au niveau de la mitochondrie, suggérant un effet régulateur de l'agmatine sur la fonction mitochondriale (Alvi et al., 2006, Biochem. J., 396: 337-345 ; Agostinelli et al., 2010, Amino Acids, 38 : 393-403).
Dans le cadre du traitement du cancer, l'accroissement de la survie ou de la durée de vie des patients demeure une préoccupation majeure. Il existe par conséquent un réel besoin de mise au point de nouvelles compositions susceptibles de participer au traitement de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, et notamment au traitement du cancer.
De manière surprenante, les inventeurs ont mis en évidence un effet bénéfique de l'agmatine sur le métabolisme des cellules cancéreuses qui permet de la distinguer des polyamines bio logiquement actives participant à l'homéostasie cellulaire. L'un des buts de l'invention est de fournir des compositions pour leurs utilisations dans le traitement de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, notamment dans le traitement du cancer.
Un autre but de l'invention est de fournir de nouvelles compositions contenant de l'agmatine plus efficaces que les compositions décrites dans l'art antérieur dans le cadre du traitement de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, notamment dans le traitement du cancer.
Un autre but de l'invention est de proposer des compositions susceptibles d'être administrées aux patients conjointement à un traitement anti-cancéreux (chimiothérapeutique) conduisant à un effet synergique en termes de traitement du cancer.
La présente invention concerne des compositions comprenant un mélange de cadavérine, putrescine, spermine et spermidine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, ladite composition comprenant également de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition. Ainsi la concentration en agmatine est supérieure à celle des polyamines bio logiquement actives dans les compositions de la présente invention. Par ailleurs, le taux global des polyamines bio logiquement actives des compositions de la présente invention est très inférieur à celui présent dans les aliments constituant une ration alimentaire «moyenne».
De manière surprenante, les inventeurs ont montré pour la première fois in vivo l'existence d'un effet synergique dans le traitement de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, reposant sur l'association de compositions comprenant d'une part un mélange appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine et d'autre part de l'agmatine à une concentration supérieure à celle apportée par une ration alimentaire moyenne composée uniquement d'aliments. Par « aliment », on désigne toute substance ou produit, transformé, partiellement transformé ou non transformé, destiné à être ingéré par l'être humain (Règlement CE n° 178/2002, article 2). Les aliments sont classiquement répartis en six groupes qui comprennent : le lait et les produits laitiers, le poisson et les viandes, les lipides, les céréales et les dérivés, les fruits et les légumes et les glucides et leurs dérivés.
Par « agmatine », on désigne le précurseur de la putrescine correspondant la formule
Figure imgf000008_0001
Une ration alimentaire journalière « moyenne » de 2000 kcal constituée exclusivement d'aliments apporte environ 1,3 mg d' agmatine. L'agmatine ne disposant d'aucune des caractéristiques permettant l'identification d'une polyamine bio logiquement active in vitro n'est pas considérée comme telle dans la présente invention.
Par « mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine », on désigne la combinaison des quatre polyamines naturelles correspondant respectivement aux formules NH2-(CH2)5-NH2, NH2-(CH2)4-NH2, NH2-(CH2)3-NH-(CH2)4-NH2 et NH2- (CH2)3- NH-(CH2)4- NH-(CH2)3-NH2 dans une composition contenant potentiellement d'autres excipients. Les concentrations des différentes polyamines sont exprimées en nano moles
(nmol) par gramme de composition. Les termes nano moles, nmoles et nmol sont équivalents et peuvent être utilisés indifféremment ci-après. A titre d'exemple, cela signifie que dans un gramme de composition, la concentration en agmatine peut varier de 120 à 17100 nanomoles.
Les compositions de la présente invention peuvent être ingérées par un mammifère. Par « mammifère », on désigne un être humain ou un animal, ledit animal pouvant être un animal de compagnie ou un animal d'élevage.
Les compositions de l'invention présentent une efficacité qui pourra dépendre du stade du traitement anticancéreux suivi par le patient.
Cette efficacité peut être optimum lorsque les compositions sont utilisées comme l'unique source exogène de polyamines bio logiquement actives (putrescine, spermine et spermidine) et d'agmatine. Dans ce cas, le contrôle des concentrations de ces différents éléments est total. En effet, le régime alimentaire du patient contient un taux de polyamines bio logiquement actives le plus bas qui soit. Parallèlement, le patient reçoit par le biais des compositions de l'invention une ration alimentaire fortement enrichie en agmatine.
Lorsque les compositions de la présente invention sont associées avec des aliments, le contrôle des concentrations en polyamines bio logiquement actives devient plus délicat. Aussi, afin de ne pas contrecarrer les effets des compositions de la présente invention, il apparaît nécessaire que les aliments soient sélectionnés sur la base de leur teneur en polyamines bio logiquement actives. Par conséquent, les aliments choisis doivent contenir des taux de polyamines bio logiquement actives les plus bas possibles. Le but est que le taux de polyamines bio logiquement actives apporté par les compositions de l'invention soit le moins modifié par l'introduction d'aliments dans le régime alimentaire du patient.
A l'inverse, l'apport en agmatine des compositions de l'invention étant supérieur à celui d'une ration alimentaire moyenne composée uniquement d'aliments, l'agmatine contenue dans les aliments aura peu d'impact sur la concentration globale d'agmatine dans le régime alimentaire du patient constitué d'un mélange de compositions de l'invention et d'aliments. Selon un mode de réalisation particulier, la concentration en agmatine des compositions de l'invention varie de 120 à 1450 nmoles par gramme de composition.
Selon un mode de réalisation plus particulier, la concentration en agmatine des compositions de l'invention varie de 1450 à 3000 nmoles par gramme de composition.
Selon un mode de réalisation encore plus particulier, la concentration en agmatine des compositions de l'invention varie de 3000 à 6000 nmoles par gramme de composition.
Selon un autre mode de réalisation, la concentration en agmatine des compositions de l'invention varie de 6000 à 17100 nmoles par gramme de composition. Avantageusement, la concentration en putrescine des compositions de l'invention varie de 0,19 à 0,32 nmole par gramme de composition.
Plus avantageusement, la concentration en cadavérine des compositions de l'invention varie de 0,02 à 0,08 nmole par gramme de composition.
Plus avantageusement, la concentration en spermine des compositions de l'invention varie de 0,009 à 0,03 nmole par gramme de composition.
Encore plus avantageusement, la concentration en spermidine des compositions de l'invention varie de 0,09 à 0,20 nmole par gramme de composition.
Lorsque les compositions de l'invention constituent l'unique ou la principale source alimentaire des patients, ces compositions peuvent être enrichies avec des lipides, des protéines, des glucides, des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantité permettant au patient de ne pas souffrir de dénutrition ou de carences.
Les compositions de l'invention contiennent en pourcentage de poids sec par rapport au poids sec total : 10 % à 35 % de lipides, 8 % à 30 % de protéines, 35 % à 80 % de glucides, jusqu'à 10 % d'un mélange constitué de vitamines, de minéraux et d'électrolytes. Par « source alimentaire », on désigne toutes formes de régime alimentaire, c'est- à-dire l'ensemble des aliments pouvant constituer l'alimentation d'un humain ou d'un animal, un régime alimentaire composé de substituts de repas, ou toute autre source de nourriture permettant de maintenir l'humain ou l'animal en vie.
Par « mélange constitué de vitamines, de minéraux et d'électrolytes», on désigne les vitamines et minéraux exerçant un rôle défini dans l'organisme. Les vitamines peuvent être choisies dans un groupe constitué de la vitamine A, la vitamine Bl, B6, B12, la vitamine C, la vitamine D3, la vitamine Kl, la riboflavine, l'acide pantothénique, la niacine, l'acide folique, la biotine, la choline, l'inositol. Les minéraux et électrolytes peuvent être choisis parmi un groupe constitué du sodium, potassium, calcium, phosphore, magnésium, fer, zinc, cuivre, manganèse, chlorures, iode, sélénium, chrome, molybdène. Le choix des vitamines, minéraux et électrolytes ne doit pas être restreint par les listes citées ci-dessus. L'homme de l'art peut adapter les proportions de chacun de ces constituants permettant au patient de recevoir une alimentation équilibrée, répondant à ses besoins nutritionnels journaliers.
Les polyamines de l'organisme sont issues de trois sources principales : la prolifération cellulaire (physiologique et tumorale), l'alimentation et les bactéries intestinales. Afin de contrôler au maximum l'apport en polyamines dans l'organisme, il peut s'avérer nécessaire de limiter non seulement l'apport exogène par le biais d'une alimentation parfaitement contrôlée mais également d'inhiber la synthèse endogène des polyamines en utilisant des inhibiteurs spécifiques de l'ornithine décarboxylase (ODC), de la spermidine-spermine Nl-acétyltransférase ou de la spermine oxydase, enzymes clés du métabolisme des polyamines.
Par « inhibiteur spécifique », on désigne une molécule capable de bloquer, totalement ou partiellement, directement ou indirectement, de manière réversible ou non, le site actif d'au moins une des enzymes intervenant dans la synthèse des polyamines dans l'organisme humain, ou animal. Le rôle de l'inhibiteur de la biosynthèse des polyamines est d'arrêter ou de réduire signifïcativement la production endogène de polyamines dans l'organisme traité avec le produit selon la présente invention. La mise en œuvre conjointe d'un inhibiteur de la biosynthèse des polyamines et d'un apport alimentaire appauvrie en polyamines permet de réduire la quantité de polyamines biodisponibles dans l'organisme. Les compositions de l'invention contiennent éventuellement un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines à raison d'au plus 15 % en poids par rapport au poids sec total de la composition. Selon un mode de réalisation plus particulier, l'inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines des compositions de l'invention est un inhibiteur de l'ornithine décarboxylase, de la spermidine-spermine Nl-acétyltransférase ou de la spermine oxydase.
Parmi les inhibiteurs de l'ODC, l'alpha-difluorométhylornithine (a-DFMO) constitue un composé utilisable, bien connu de l'homme du métier (Fabian et al., 2002, Clin Cancer Res, 8(10), 3105-3117 / Levin et al, 2003, Clin. Cancer Res., 9(3), 981- 990 / Meyskens et al., 2008, Cancer Prev. Res., 1(1), 32-38). Cet exemple ne doit en aucun cas restreindre le choix d'un inhibiteur de la synthèse endogène des polyamines à ce seul composé.
D'autres composés susceptibles d'inhiber l'ornithine décarboxylase, la spermidine-spermine Nl-acétyltransférase ou la spermine oxydase pourront être utilisés. Les quantités d'inhibiteurs seront adaptées par l'homme du métier sur la base des données d'activité biologique de ces composés et de ses connaissances générales. Le transport des polyamines entre la cellule et le milieu extracellulaire permet également une régulation fine du contenu intracellulaire en polyamines. La mise en œuvre conjointe d'un inhibiteur du transport des polyamines et d'un apport alimentaire appauvri en polyamines permet de réduire la quantité de polyamines biodisponibles dans l'organisme.
Les compositions de la présente invention sont éventuellement enrichies avec au moins un inhibiteur du transport des polyamines, à raison d'au plus 15 % en poids par rapport au poids sec total de la composition.
Selon un mode de réalisation particulier, les compositions de la présente invention contiennent au moins un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines, notamment choisi parmi les inhibiteurs de l'ornithine décarboxylase, de la spermidine-spermine Nl-acétyltransférase ou de la spermine oxydase, et/ou au moins un inhibiteur du transport des polyamines, à raison d'au plus 15 % en poids par rapport au poids sec total de la composition. Dans le but de diminuer encore plus la synthèse endogène de polyamines, il peut être envisagé d'avoir recours à des antibiotiques afin de limiter les apports en polyamines par les bactéries de la flore intestinale.
Selon un mode de réalisation particulier, les compositions de l'invention contiennent éventuellement au moins un antibiotique.
Cet antibiotique peut appartenir au groupe des antiseptiques intestinaux, tel que l'Ercéfuryl®. Cet antibiotique peut également, en plus de son effet bactériostatique ou bactéricide, avoir un effet antiparasitaire, tel que le Flagyl®.
L'utilisation d'antibiotiques peut conduire à diminuer l'apport en certaines vitamines notamment celles apportées par la flore intestinale du patient. Dans ce cas, il peut s'avérer nécessaire de compléter la composition en ces vitamines afin de ne pas provoquer de carences vitaminiques chez le patient en cas d'administration prolongée de la composition.
Par « carences », on désigne un manque en nutriments pouvant altérer la condition physique ou mentale d'un humain ou d'un animal.
Selon un mode de réalisation particulier, les compositions de l'invention peuvent être enrichies en vitamines.
Selon un mode de réalisation plus particulier, les compositions de la présente invention contiennent au moins un antibiotique, et/ou sont enrichies en vitamines.
De façon avantageuse, les glucides des compositions de l'invention appartiennent au groupe comprenant les polymères de glucose, les maltodextrines, le saccharose, les amidons modifiés, le glucose monohydrate, le sirop de glucose déshydraté, le monostéarate de glycérol et leurs mélanges.
De façon avantageuse, les protéines des compositions de l'invention appartiennent au groupe comprenant les protéines solubles du lait, les protéines de soja, les peptides de sérum, le blanc d'œuf en poudre, le caséinate de potassium, les peptides non phosphorylés, les peptides de caséine, le caséinate mixte, l'isolât de soja et leurs mélanges. De façon avantageuse, les lipides des compositions de l'invention appartiennent au groupe comprenant l'huile de beurre, l'huile d'arachide, les triglycérides à chaîne moyenne, l'huile de pépins de raisin, l'huile de soja, l'huile d'onagre et leurs mélanges. Selon un mode de réalisation particulier, les lipides des compositions de l'invention sont constitués par un mélange d'au moins une huile d'origine animale, d'au moins une huile d'origine végétale et de stéarate de glycérol.
Selon un mode de réalisation plus particulier, dans les compositions de la présente invention les glucides appartiennent au groupe comprenant les polymères de glucose, les maltodextrines, le saccharose, les amidons modifiés, le glucose monohydrate, le sirop de glucose déshydraté, le monostéarate de glycérol et leurs mélanges, et/ou dans laquelle les protéines appartiennent au groupe comprenant les protéines so lubies du lait, les protéines de soja, les peptides de sérum, le blanc d'œuf en poudre, le caséinate de potassium, les peptides non phosphorylés, les peptides de caséine, le caséinate mixte, l'isolât de soja et leurs mélanges, et/ou dans laquelle les lipides appartiennent au groupe comprenant l'huile de beurre, l'huile d'arachide, les triglycérides à chaîne moyenne, l'huile de pépins de raisin, l'huile de soja, l'huile d'onagre et leurs mélanges et/ou dans laquelle les lipides sont constitués par un mélange d'au moins une huile d'origine animale, d'au moins une huile d'origine végétale et de stéarate de glycérol.
Afin de contrôler l'apport en source exogène de polyamines et d'agmatine, les compositions utilisées selon la présente invention doivent pouvoir constituer toute ou partie de l'alimentation du patient. En ce sens elles doivent apporter une ration énergétique susceptible de satisfaire aux besoins nutritionnels du patient.
Lorsque le patient est un être humain, les compositions de l'invention constituent la ration journalière alimentaire d'un être humain et comprennent:
- de 75 g à 500 g de glucides,
- de 20 g à 185 g de lipides,
- de 20 g à 225 g de protéines,
- des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantités suffisantes pour répondre aux besoins nutritionnels journaliers d'un être humain, - et éventuellement un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines à raison de moins de 50 g et préférentiellement à raison de 1 à 10 g par jour.
Selon un mode de réalisation particulier, les compositions de l'invention sont un sous-multiple d'une ration journalière alimentaire d'un être humain et comprennent :
- de 75/X g à 500 X g de glucides,
- de 20/X g à 185/X g de lipides,
- de 20/X g à 225/X g de protéines,
- des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantités suffisantes pour répondre partiellement aux besoins nutritionnels journaliers d'un être humain,
- et éventuellement un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines à raison de moins de 50/X g et préférentiellement à raison de 1/X à 10/X g par jour,
et X étant un entier compris entre 2 et 8 et correspondant au nombre de rations devant être ingérées par le patient pour satisfaire ses besoins nutritionnels journaliers.
Lorsque le patient est un animal, la ration journalière alimentaire est adaptée en fonction de la catégorie et de la masse de l'animal, qu'il s'agisse d'un animal de compagnie ou d'un animal d'élevage. La répartition en glucides, lipides et protéines ainsi que les besoin en vitamines, minéraux et électrolytes de la ration journalière alimentaire d'un animal sont bien connus de l'homme du métier. Concernant l'inhibiteur de synthèse intracellulaire des polyamines, la dose est adaptée en fonction de la masse de l'animal et éventuellement sur la base des données obtenues chez l'homme.
Les compositions utilisées selon la présente invention peuvent constituer la ration journalière alimentaire ou un sous-multiple d'une ration journalière alimentaire d'un animal et devront satisfaire les besoins nutritionnels journaliers d'un animal.
A titre d'exemple, lorsque le patient est une souris, les compositions utilisées selon la présente invention constituent la ration journalière alimentaire d'une souris et comprennent:
- de 0,6 g à 1,8 g de glucides,
- de 0,04 g à 1,2 g de lipides,
- de 0,01 g à 0,6 g de protéines, - des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantités suffisantes pour répondre aux besoins nutritionnels journaliers d'un animal,
- et éventuellement un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines à raison de moins de 300 mg et préférentiellement à raison de 40 à 200 mg par jour.
Tout comme pour l'être humain, les compositions utilisées selon la présente invention peuvent être un sous-multiple d'une ration journalière alimentaire d'une souris et comprendre :
- de O,6/X g à l,8 X g de glucides,
- de 0,04/X g à 1,2/X g de lipides,
- de 0,01/X g à 0,6/X g de protéines,
- des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantités suffisantes pour répondre partiellement aux besoins nutritionnels journaliers d'un animal, - et éventuellement un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines à raison de moins de 300/X mg et préférentiellement à raison de 40/X à 200/X mg par jour.
et X étant un entier compris entre 2 et 8 et correspondant au nombre de rations devant être ingérées par le patient pour satisfaire ses besoins nutritionnels journaliers.
Les proportions des constituants des compositions de la présente invention données dans le cadre de l'alimentation d'une souris, sont données à titre indicatif et peuvent servir de base à l'homme du métier qui peut les adapter, grâce à ses connaissances générales, à d'autres animaux. Les compositions de l'invention peuvent se présenter sous forme solide, liquide ou semi-liquide. Leur formulation est adaptée en fonction de la capacité du patient à absorber une alimentation par voie orale mais également par voie entérale ou parentérale. Ainsi, les compositions de l'invention peuvent se présenter sous formes de - boissons, crèmes, plats préparés, entremets ou biscuits pour une utilisation par voie orale ; - poudre lyophilisée ou séchée par atomisation ou déshydratée pour une reconstitution avec de l'eau de produits sous forme de boissons, crèmes, plats préparés, entremets ou biscuits pour une utilisation par voie orale ;
- poudre lyophilisée ou séchée par atomisation ou déshydratée pour un enrichissement d'aliments classiques ;
- liquide conditionné dans des poches stériles pour une utilisation par voie entérale ;
- liquide et par composés (lipidique, protéique, glucidique et vitamines et minéraux) dans des poches stériles séparées pour une utilisation par voie parentérale.
Selon un mode de réalisation particulier, les compositions de l'invention se présentent sous une forme sèche à dissoudre extemporanément dans un véhicule neutre.
Selon un mode de réalisation plus particulier, les compositions de l'invention incluent un véhicule neutre les rendant prêtes à l'emploi.
Par « véhicule neutre », on désigne une solution aqueuse permettant de réaliser une composition plus ou moins liquide, facilitant l'ingestion de cette dernière par le patient. Ainsi, les compositions de l'invention auront une gamme de viscosité s'étendant de celle de l'eau à celle de boissons lactées pour une température comprise de 4°C à 40°C, à la pression atmosphérique normale.
Les compositions de l'invention peuvent être utilisées directement en tant que médicament.
Par « médicament », on désigne toute substance qui une fois ingérée par le patient, lui procure un bénéfice en termes de bien-être, d'amélioration des marqueurs biologiques, de régression ou de rémission de la pathologie. On entend par médicament toute substance ou composition présentée comme possédant des propriétés curatives ou préventives à l'égard des maladies humaines ou animales, ainsi que tout produit pouvant être administré à l'homme ou à l'animal, en vue d'établir un diagnostic médical ou de restaurer, corriger ou modifier leurs fonctions organiques (Article L5111-1 du Code Français de Santé Publique). Un médicament est généralement constitué d'au moins un principe actif, c'est-à-dire d'une molécule lui conférant ses effets thérapeutiques et d'excipients. Les compositions de l'invention peuvent également entrer dans la formulation de préparations pharmaceutiques.
Les compositions de l'invention peuvent être utilisées dans la préparation d'un médicament.
Les compositions de l'invention peuvent être utilisées en tant que complément ou substitut alimentaire.
Les compositions de l'invention peuvent être utilisées en tant que complément nutraceutique.
Le métabolisme des polyamines joue un rôle clé dans la prolifération cellulaire. Sachant qu'une perturbation dans la physiologie de la division cellulaire est presque toujours nuisible, il parait pertinent d'analyser les effets d'une perturbation du métabolisme des polyamines dans le cadre de pathologies mettant en jeu des processus d'hyperprolifération cellulaire, et notamment dans le cadre du traitement du cancer.
Les compositions de l'invention peuvent être utilisées dans le traitement, chez un patient, de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire.
Les compositions de l'invention peuvent être utilisées dans le traitement, chez un patient, du cancer.
Selon un mode de réalisation particulier, les compositions de l'invention peuvent être utilisées dans le traitement, chez un patient, de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, ou dans le traitement du cancer.
Les compositions de l'invention peuvent être utilisées dans le traitement de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire ou dans le traitement du cancer, ledit traitement s'effectue en administrant une dose unitaire variant de 3,7 mg à 370 mg d'agmatine.
Par « dose unitaire », on désigne la quantité spécifique d'agmatine ingérée par le patient en une prise. La dose unitaire est la présentation appropriée d'une quantité déterminée d'agmatine dans un récipient unidose, destinée à l'administration au patient.
Afin de contrôler au maximum l'apport exogène en polyamines et d'agmatine, les compositions de l'invention peuvent servir de base à un régime alimentaire qui peut comprendre plusieurs phases au cours desquelles l'apport exogène en polyamines et d'agmatine est :
- totalement apporté par les compositions utilisées selon l'invention,
- majoritairement apporté par les compositions utilisées selon l'invention, - partiellement apporté par les compositions utilisées selon l'invention.
Par « totalement », on désigne le fait que l'alimentation du patient est restreinte aux compositions de l'invention. Aucun aliment autre que les compositions de l'invention n'entrent dans le régime alimentaire du patient. Lors de cette phase, le contrôle de l'apport en polyamines et d'agmatine est maximal.
Par « majoritairement », on désigne la possibilité d'introduite dans le régime alimentaire du patient un petit déjeuner comprenant des aliments à teneur réduite en polyamines. Le reste de la ration alimentaire journalière est apportée par les compositions de l'invention.
Par « partiellement », on désigne la possibilité d'introduite dans le régime alimentaire du patient un petit déjeuner et au moins un repas solide comprenant des aliments à teneur réduite en polyamines. Le reste de la ration alimentaire journalière est apportée par les compositions de l'invention.
Selon un mode de réalisation particulier, les compositions utilisées selon la présente invention sont administrées au patient selon le schéma suivant:
(i) administration d'une première dose de la composition de l'invention pendant une première période de temps, et consécutivement,
(ii) administration d'une seconde dose de la composition de l'invention pendant une seconde période de temps, la seconde dose est ajustée en fonction de la réaction du patient à la première dose, et consécutivement,
(iii) administration d'une troisième dose de la composition de l'invention pendant une troisième période de temps, la troisième dose est ajustée en fonction de la réaction du patient à la seconde dose. Par « réaction du patient », on désigne sa capacité physiologique à tirer bénéfice d'un régime appauvri en polyamines et enrichi en agmatine. Le bénéfice peut être apprécié à partir notamment de la régression de la masse tumorale. L'amélioration ou la disparition de tout signe de la maladie peut être évaluée par un examen clinique, des examens biologiques ou d'imagerie réalisés de façon usuelle dans le cadre du cancer. Ces critères varient en fonction du type de cancer. Trois hypothèses sont envisageables :
- soit l'état physiologique du patient s'améliore après administration d'une première dose de la composition et dans ce cas, la seconde dose de la composition contiendra au plus les mêmes taux de polyamines et d'agmatine que la première dose,
- soit l'état physiologique du patient ne présente aucune d'amélioration après administration d'une première dose de la composition et dans ce cas, la seconde dose de la composition contiendra au moins les mêmes taux de polyamines et d'agmatine que la première dose,
- soit l'état physiologique du patient s'est dégradé après administration d'une première dose de la composition et dans ce cas, la seconde dose de la composition contiendra des taux de polyamines et d'agmatine soit supérieurs soit inférieurs à ceux de la première dose.
Le même type de raisonnement s'applique pour l'administration de la troisième dose. Ainsi, le praticien dispose d'une grande latitude dans le schéma d'administration des compositions de l'invention.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, la première période de temps varie de 7 à 14 jours, notamment 7 jours.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, la seconde période de temps varie de 14 à 21 jours, notamment 14 jours.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, la troisième période de temps varie de 28 à 63 jours, notamment 63 jours.
La première, la seconde et la troisième période de temps constitue un cycle complet de traitement du patient. L'administration des compositions de l'invention peut s'effectuer pendant un, deux ou plusieurs cycles. Le renouvellement de ces cycles est laissé à l'appréciation du praticien.
Selon un autre mode de réalisation particulier de l'invention :
- la première dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j,
- la seconde dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j, et - la troisième dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j.
Ces doses correspondent aux doses d'agmatine apportées par 1 à 8 rations d'un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine et enrichie en agmatine de la dose 18,4 mg/kg d'aliment à la dose 1840 mg/kg d'aliment.
Les compositions de la présente invention apportent une quantité journalière d'agmatine de 3 fois à 2230 fois plus élevée que celle contenue dans une ration alimentaire moyenne. Selon un autre mode de réalisation particulier de l'invention :
- la première dose de polyamines varie de 9 μg à 146 μg de polyamines/j,
- la seconde dose de polyamines varie de 9 μg à 146 μg de polyamines /j, et
- la troisième dose de polyamines varie de 9 μg à 146 μg de polyamines /j.
Ces doses correspondent aux doses d'agmatine apportées par 1 à 8 rations d'un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine et enrichie en agmatine de la dose 18,4 mg/kg d'aliment à la dose 1840 mg/kg d'aliment.
Les compositions de la présente invention apportent une quantité journalière de polyamines de 260 fois à 4200 fois plus basse que celle contenue dans une ration alimentaire moyenne.
Selon un autre mode de réalisation particulier de l'invention :
- la première dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j et la première dose de polyamines varie de 9 μg à 146 μg de polyamines/j,
- la seconde dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j et la seconde dose de polyamines varie de 9 μg à 146 μg de polyamines /j, et
- la troisième dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j et la troisième dose de polyamines varie de 9 μg à 146 μg de polyamines /j.
Ces doses correspondent aux doses d'agmatine apportées par 1 à 8 rations d'un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine et enrichie en agmatine de la dose 18,4 mg/kg d'aliment à la dose 1840 mg/kg d'aliment. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne également des compositions comprenant :
un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, - de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition,
pour leur utilisation dans la prévention ou le traitement chez un patient de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, la quantité totale d'agmatine ingérée par jour par le patient ne dépassant pas 11400 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 5000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 1000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 80 nanomoles par kcal de composition ingérée.
Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne également des compositions comprenant :
un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition,
pour leur utilisation dans la prévention ou le traitement chez un patient de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, la quantité totale de polyamines bio logiquement actives ingérées par jour par le patient ne dépassant pas 0,42 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 0,30 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 0,25 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 0,21 nanomoles par kcal de composition ingérée.
Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne également des compositions comprenant :
un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition, pour leur utilisation dans la prévention ou le traitement chez un patient de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, la quantité totale d'agmatine ingérée par jour par le patient ne dépassant pas 11400 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 5000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 1000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 80 nanomoles par kcal de composition ingérée et la quantité totale de polyamines bio logiquement actives ingérées par jour par le patient ne dépassant pas 0,42 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,30 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,25 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,21 nanomole par kcal de composition ingérée.
Afin de potentialiser les effets d'un premier traitement anti-cancéreux, les compositions de l'invention peuvent être utilisées comme second agent thérapeutique.
Les compositions de l'invention peuvent être administrées au patient avant et/ou pendant et/ou après le traitement anti-cancéreux.
Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne également une combinaison d'une composition comprenant :
un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, - de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition,
et d'un agent chimiothérapique pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps pour le traitement de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, la quantité totale d'agmatine ingérée par jour par le patient ne dépassant pas 11400 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 5000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 1000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 80 nanomoles par kcal de composition ingérée.
Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne également une combinaison d'une composition comprenant :
un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition,
et d'un agent chimiothérapique pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps pour le traitement de pathologies liées à rhyperprolifération cellulaire, la quantité totale de polyamines bio logiquement actives ingérées par jour par le patient ne dépassant pas 0,42 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,30 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,25 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,21 nanomole par kcal de composition ingérée.
Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne également une combinaison d'une composition comprenant :
un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition,
et d'un agent chimiothérapique pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps pour le traitement de pathologies liées à rhyperprolifération cellulaire, la quantité totale d'agmatine ingérée par jour par le patient ne dépassant pas 11400 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 5000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 1000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 80 nanomoles par kcal de composition ingérée et la quantité totale de polyamines bio logiquement actives ingérées par jour par le patient ne dépassant pas 0,42 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,30 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,25 nanomole par kcal de composition ingérée, notamment 0,21 nanomole par kcal de composition ingérée.
Selon un mode de réalisation plus particulier, la présente invention concerne également une combinaison d'une composition comprenant :
un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition, et d'un agent chimiothérapique pour son utilisation dans la prévention ou le traitement, chez un patient, de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire.
Description des figures
Figures 1-A et 1-B : Evolution du volume tumoral
Ces figures représentent les variations de volume de tumeurs (en cm3, indiqués en ordonnées) en fonction du nombre de jours (indiqués en abscisses) écoulés après la greffe de ladite tumeur chez des souris C57BL/6 mâles. Les souris sont greffées avec une tumeur solide de cellules du carcinome pulmonaire de Lewis.
Figure 1-A : Quatre groupes de cinq souris sont alimentés avec des régimes alimentaires différents 6 jours après que la greffe a eu lieu. Le début de traitement est indiqué par la flèche sur le graphique.
La courbe matérialisée par des cercles noirs représente les souris alimentées avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmo les/g d'aliment).
La courbe matérialisée par des cercles vides représente les souris alimentées avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
La courbe matérialisée par des carrés noirs représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmo le/g d'aliment).
La courbe matérialisée par des carrés vides représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
Figure 1-B : Six groupes de cinq souris sont alimentés avec des régimes alimentaires différents 6 jours après que la greffe a eu lieu. Le début de traitement est indiqué par la flèche sur le graphique.
La courbe matérialisée par des cercles noirs représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmo les/g d'aliment).
La courbe matérialisée par des cercles vides représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
La courbe matérialisée par des carrés noirs représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment) et enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment).
La courbe matérialisée par des carrés vides représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
La courbe matérialisée par des losanges noirs représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment) et enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment).
La courbe matérialisée par des losanges vides représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). Figure 2 : Evolution de la dissémination métastasique pulmonaire
Cette figure représente le pourcentage d'envahissement métastasique pulmonaire (en ordonnées) de souris C57BL/6 mâles, en fonction du régime alimentaire (en abscisses) donné aux souris ayant reçu la greffe d'une tumeur solide de cellules du carcinome de Lewis. Le pourcentage d'envahissement métastasique pulmonaire est mesuré 19 jours après que la greffe a eu lieu.
Dix groupes de souris sont alimentés avec des régimes alimentaires différents.
Le premier groupe (représenté par une colonne noire) est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 27 %.
Le second groupe (représenté par une colonne blanche) est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 11 %.
Le troisième groupe (représenté par une colonne contenant des traits discontinus verticaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 6 %.
Le quatrième groupe (représenté par une colonne contenant des traits discontinus horizontaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 7 %.
Le cinquième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus verticaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 9 %.
Le sixième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus horizontaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 15 %.
Le septième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus orientés à gauche) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 6 %. Le huitième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus orientés à droite) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 4 %.
Le neuvième groupe (représenté par une colonne contenant des petits points) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 4 %.
Le dixième groupe (représenté par une colonne contenant des gros points) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne d'envahissement métastasique pulmonaire des souris de ce groupe est de 6 %.
Figures 3-A et 3-B : Evolution des taux tumoraux de polyamines
Ces figures représentent les taux tumoraux de putrescine, spermidine et spermine
(en ordonnées) de souris C57BL/6 mâles, en fonction du régime alimentaire (en abscisses) donné aux souris ayant reçues la greffe d'une tumeur solide de cellules du carcinome de Lewis. Les taux tumoraux de putrescine, spermidine et spermine sont mesurés 19 jours après que la greffe a eu lieu.
Figure 3-A : Quatre groupes de cinq souris sont alimentés avec des régimes alimentaires différents 6 jours après que la greffe a eu lieu.
La colonne noire représente les souris alimentées avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment).
La colonne blanche représente les souris alimentées avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La colonne contenant des traits discontinus verticaux représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/ kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment).
La colonne contenant des traits discontinus horizontaux représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
Figure 3-B : Six groupes de cinq souris sont alimentés avec des régimes alimentaires différents 6 jours après que la greffe a eu lieu.
La colonne contenant des traits continus verticaux représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment).
La colonne contenant des traits continus horizontaux représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
La colonne contenant des traits continus orientés à gauche représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment) et enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment).
La colonne contenant des traits continus orientés à droite représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg /ml).
La colonne contenant des petits points représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment) et enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment). La colonne contenant des gros points représente les souris alimentées avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
Figure 4 : Evolution de la masse splénique
Cette figure représente la masse de la rate en mg (en ordonnées) de souris C57BL/6 mâles, en fonction du régime alimentaire (en abscisses) donné aux souris ayant reçues ou non la greffe d'une tumeur solide de cellules du carcinome de Lewis. La masse de la rate est mesurée 19 jours après que la greffe a eu lieu.
Dix groupes de cinq souris ayant reçu la greffe d'une tumeur solide de cellules du carcinome de Lewis sont alimentés avec des régimes alimentaires différents. Un onzième groupe de cinq souris n'ayant pas reçu de greffe et placé sous un régime alimentaire contenant un taux normal de polyamines, permet d'établir une valeur moyenne de référence de la masse splénique chez les souris ayant servi à cette étude.
Le premier groupe (représenté par une colonne noire) est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 171 mg.
Le second groupe (représenté par une colonne blanche) est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 151 mg.
Le troisième groupe (représenté par une colonne contenant des traits discontinus verticaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 88 mg.
Le quatrième groupe (représenté par une colonne contenant des traits discontinus horizontaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 63 mg. Le cinquième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus verticaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 111 mg.
Le sixième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus horizontaux) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 69 mg.
Le septième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus orientés à gauche) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 92 mg.
Le huitième groupe (représenté par une colonne contenant des traits continus orientés à droite) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 105 mg.
Le neuvième groupe (représenté par une colonne contenant des petits points) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 92 mg.
Le dixième groupe (représenté par une colonne contenant des gros points) est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 124 mg. Le onzième groupe (représenté par une colonne grise), correspondant aux souris n'ayant pas reçu de greffe, est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment). La valeur moyenne de la masse splénique des souris de ce groupe est de 61 mg.
Partie expérimentale
Exemple 1 : Effet du régime alimentaire appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine, et enrichi en agmatine 1 - Modèle animal
1.1 - Souche murine
Des souris mâles C57BL/6, âgées de 9 semaines et pesant 20g (élevage Janvier, Le Genest St Isle, France) sont acclimatées 1 semaine avant le début de l'étude. La manipulation des animaux est réalisée en accord avec les directives éthiques pour l'expérimentation et selon les recommandations de l'Association Européenne de Recherche Biomédical.
Les animaux sont enfermés à raison de 5 individus par cage dans des conditions standardisées (21 ± 1°C ; 60% d'humidité relative, cycles de 12h de lumière, 12h d'obscurité), et ont accès à de la nourriture et à de l'eau à volonté.
1.2 - Modèle tumoral
Les cellules de carcinome pulmonaire de Lewis (3LL) ont été obtenues auprès de l'ECACC (European collection of cell cultures) et greffées par injection intramusculaire dans les pattes postérieures de souris mâles C57BL/6 selon la méthode précédemment décrite (Hergueux J. et al., Exp. Cell BioL, 1983, 51(4), 181-191) pour produire des cellules tumorales. Après 20 jours, les cellules tumorales sont collectées et dispersées dans du PBS, comptées et diluées pour atteindre 0,5 x lO6 cellules / 100 μί, avant d'être greffées dans la patte arrière droite des souris. Les souris greffées sont réparties aléatoirement dans les cages par groupe de 5 individus.
La tumeur devient palpable quelques jours après que la greffe a eu lieu. Les animaux sont sacrifiés 19 jours après la greffe de tumeur.
2 - Alimentation La nourriture appauvrie en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine est appelée RPCPSdS (Régime Pauvre en Cadavérine Putrescine Spermidine Spermine), et se présente sous la forme de solutés. Cette nourriture appauvrie en polyamines contient moins de 51 μg de polyamines/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment.
La nourriture pour rongeur contenant un taux normal de polyamines (125 mg de polyamines par kilogramme d'aliment soit 861 nmoles par g d'aliment) correspond à une alimentation standard du commerce (UAR, usine d'alimentation standard).
Les produits sont distribués aux animaux selon leur profil et leur besoin nutritionnel. Une souris consomme environ 2 grammes par jour d'alimentation.
Le traitement est mis en place 6 jours après la greffe, lorsque la tumeur est palpable et est administré 7 jours sur 7 et comprend l'apport ad libitum de l'alimentation normale ou des solutés à tester ainsi que l'eau de boisson.
3 - Résultats
3.1 - Croissance tumorale
Le modèle animal (souris C57BL/6) et le modèle tumoral (carcinome de Lewis) sont décrits précédemment. Les souris sont greffées avec 0,5 x lO6 cellules tumorales, par injection intramusculaire.
La croissance de la tumeur est quantifiée 6, 8, 11 , 14 et 18 jours après que la greffe a eu lieu par mesure du volume de la tumeur, selon la méthode précédemment décrite (Moulinoux et al, Int J. Cancer, 1984, 34(2), 277-281).
Les souris sont divisées en dix groupes et des régimes alimentaires différents sont administrés à chaque groupe. Le premier groupe est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment).
Le deuxième groupe est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
Le troisième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment). Le quatrième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et supplémenté en néomycine (2 mg/ml).
Le cinquième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment).
Le sixième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
Le septième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment).
Le huitième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg/ml).
Le neuvième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment).
Le dixième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment) et une eau de boisson contenant de la néomycine (2 mg / ml).
La néomycine est diluée dans l'eau de boisson (0,2% m/v) que les animaux soient nourris avec une alimentation sous une forme solide de type croquette, ou avec une alimentation sous une forme liquide ou semi-liquide, notamment sous la forme de solutés.
L'évolution du volume des tumeurs (en cm3) est indiquée sur les figures 1-A pour les animaux des groupes 1 à 4 et sur la figure 1-B pour les animaux des groupes 5 à 10. La néomycine n'a aucun effet sur l'évolution du volume tumoral lorsqu'elle est administrée dans l'eau de boisson sur la base d'un régime contenant un taux normal de polyamines.
Le régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine provoque une diminution de 20% de la croissance tumorale à J19. Cette diminution atteint 35% lorsque la néomycine est ajoutée à ce régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (Figure 1-A).
Une supplémentation en agmatine du régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine augmente l'effet antitumorale de ce régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine de respectivement 8%, de 3% et de 13% pour les doses d'agmatine de 18,4, de 184 et de 1840 mg/kg d'aliment (figure 1-B).
3.2 - Envahissement métastasique pulmonaire
Immédiatement après le sacrifice des animaux, les poumons sont prélevés, conservés dans du formol à 10% et les métastases pulmonaires sont visualisées à l'aide d'une loupe binoculaire. La dissémination métastasique est exprimée en pourcentage d'envahissement par rapport à la surface totale des poumons. Le pourcentage d'envahissement métastasique a été mesuré chez les souris des dix groupes précédemment décrits, ayant reçu chacun une alimentation distinctes. Les résultats sont illustrés à la figure 2.
La néomycine apportée en complément d'un régime contenant un taux normal de polyamines provoque une diminution de 60%> de l'envahissement métastasique par rapport à celui observé chez les souris n'ayant pas reçu cet antibiotique.
Le régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine provoque une diminution de 79% de l'envahissement métastasique par rapport à celui observé chez les souris ayant reçu d'un régime contenant un taux normal de polyamines. L'ajout de néomycine à un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine n' entraine aucun bénéfice supplémentaire.
Une supplémentation en agmatine du régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine ne semble apporter aucun bénéfice supplémentaire en termes de processus métastasique. 3.3 - Taux tumoraux de polyamines
Le taux de polyamines est mesuré dans la tumeur formée au site d'inoculation des cellules de carcinome de Lewis. La tumeur est lavée puis les cellules qui la composent sont dispersées à l'aide d'un homogénéisateur de type Polytron®, en présence d'acide perchlorique 0,2M. Après une incubation d'au moins 16h à 4°C, les cellules sont centrifugées 15 minutes à 3500 rpm à 4°C. Le surnageant qui contient les polyamines est prélevé et sert au dosage des polyamines. Les polyamines sont dosées selon la méthode précédemment décrite (Seiler N et al, 1996, Cancer Research, 56, 5624-5630). Les trois principales polyamines présentes chez les mammifères (putrescine, spermidine et spermine) ont été dosées pour les dix groupes de souris ayant reçu chacun une alimentation distincte. Les résultats sont illustrés à la figure 3.
La néomycine provoque une diminution de 17% du taux de putrescine, une augmentation de 7% du taux de spermine et est sans effet sur le taux de spermidine sur la base d'un régime alimentaire normal.
A l'inverse, la néomycine provoque une augmentation de 17% du taux de putrescine, une augmentation de 24% du taux de spermidine et une diminution de 5% spermine du taux de spermine sur la base d'un régime appauvri en cadavérine, putrescine spermidine et spermine.
Le régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine induit une augmentation respectivement de 17% et de 24% des taux tumoraux de putrescine et spermidine. Ce régime n'a aucun effet sur le taux tumoral de spermine.
Une supplémentation en agmatine du régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine induit des diminutions des taux tumoraux de putrescine, spermidine et spermine.
A la dose de 18,4 mg d'agmatine /kg d'aliment, les taux tumoraux de putrescine, spermidine et spermine diminuent respectivement de 35%, 10% et 31% par rapport aux taux tumoraux de ces deux polyamines chez les souris ayant reçu un régime contenant un taux normal de polyamines.
A la dose 184 mg d'agmatine /kg d'aliment, les taux tumoraux de putrescine, spermidine et spermine diminuent respectivement de 14%, 12% et 24% par rapport aux taux tumoraux de ces deux polyamines chez les souris ayant reçu un régime contenant un taux normal de polyamines. A la dose 1840 mg d'agmatine /kg d'aliment, les taux tumoraux de putrescine, spermidine et spermine diminuent respectivement de 50%, 10% et 16% par rapport aux taux tumoraux de ces deux polyamines chez les souris ayant reçu un régime contenant un taux normal de polyamines.
3.4 - Masse splénique
Après avoir procéder à l'euthanasie des animaux, la rate est prélevée sur les souris et pesée à l'aide d'une balance de précision.
En plus des dix groupes de souris ayant reçu chacun un régime alimentaire distinct, comme précédemment décrit, un onzième groupe d'animaux a été inclus pour cette étude. Il s'agit de souris mâles C57BL/6 présentant les mêmes caractéristiques physiologiques de base que les souris des dix autres groupes mais qui n'ont pas subi de greffe de cellules de carcinome de Lewis. Les souris de ce onzième ont été alimentées avec le régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment). La masse splénique de ces souris saines (61 mg) sert de référence pour un animal ne présentant aucun signe d'inflammation.
Les souris ayant reçu une greffe de cellules de carcinome de Lewis et qui sont placées sous un régime contenant un taux normal de polyamines, présentent une masse splénique trois fois supérieure (171 mg) à celle des souris saines nourries avec le même régime alimentaire.
La néomycine provoque une diminution de la masse splénique chez les souris des groupes 2, 4 et 6. A l'inverse, pour les souris des groupes 8 et 10 ayant reçu un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine et enrichi en agmatine à des doses respectives de 184 mg/kg d'aliment et 1840 mg/kg d'aliment, la néomycine provoque une augmentation de la masse splénique.
Le régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine induit une diminution de l'ordre de 50%> de la masse splénique chez ces souris en comparaison avec les souris greffées ayant reçu un régime contenant un taux normal de polyamines.
L'ajout d'agmatine au régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine est sans effet supplémentaire sur la masse splénique, quelle que soit la dose d'agmatine ajoutée. Exemple 2 : Effet du régime alimentaire appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine, et enrichi en agmatine en association avec un anticancéreux 1 - Modèle animal
1.1 - Souche murine
Des souris mâles C57BL/6, âgées de 9 semaines et pesant 20g (élevage Janvier, Le Genest St Isle, France) sont acclimatées 1 semaine avant le début de l'étude. La manipulation des animaux est réalisée en accord avec les directives éthique pour l'expérimentation et selon les recommandations de l'Association Européenne de Recherche Biomédical.
Les animaux sont enfermés à raison de 5 individus par cage dans des conditions standardisées (21 ± 1°C ; 60% d'humidité relative, cycles de 12h de lumière, 12h d'obscurité), et ont accès à de la nourriture et à de l'eau à volonté.
1.2 - Modèle tumoral
Les cellules de carcinome pulmonaire de Lewis (3LL) ont été obtenues auprès de l'ECACC (European collection of cell cultures) et greffées par injection intramusculaire dans les pattes postérieures de souris mâles C57BL/6 selon la méthode précédemment décrite (Hergueux J. et al., Exp. Cell BioL, 1983, 51(4), 181-191) pour produire des cellules tumorales. Après 20 jours, les cellules tumorales sont collectées et dispersées dans du PBS, comptées et diluées pour atteindre 0,5 x lO6 cellules / 100 μί, avant d'être greffées dans la patte arrière droite des souris. Les souris greffées sont réparties aléatoirement dans les cages par groupe de 5 individus.
La tumeur devient palpable quelques jours après que la greffe a eu lieu. Les animaux sont sacrifiés 19 jours après la greffe de cellules tumorales.
2 - Alimentation
La nourriture appauvrie en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine est appelée RPCPSdS (Régime Pauvre en Cadavérine Putrescine Spermidine Spermine) et se présente sous la forme de solutés. Cette nourriture appauvrie en polyamines contient moins de 51 μg de polyamines /kg d'aliment. La nourriture pour rongeur contenant un taux normal de polyamines (125 mg de polyamines par kilogramme d'aliment soit 861 nmoles de polyamines par g d'aliment) correspond à une alimentation standard du commerce (UAR, usine d'alimentation standard).
Les produits sont distribués aux animaux selon leur profil et leur besoin nutritionnel. Une souris consomme environ 2 grammes par jour d'alimentation.
Le traitement est mis en place 6 jours après la greffe, lorsque la tumeur est palpable et est administré 7 jours sur 7 et comprend l'apport ad libitum de l'alimentation normale ou des solutés à tester ainsi que l'eau de boisson.
3 - Résultats
3.1 - Croissance tumorale
Le modèle animal (souris C57BL/6) et le modèle tumoral (carcinome de Lewis) sont décrits précédemment. Les souris sont greffées avec 0,5 x lO6 cellules tumorales, par injection intramusculaire dans l'une des pattes arrières.
La croissance de la tumeur est quantifiée 6, 8, 11 , 14 et 18 jours après que la greffe a eu lieu par mesure du volume de la tumeur, selon la méthode précédemment décrite (Moulinoux et al, Int J. Cancer, 1984, 34(2), 277-281).
Les souris sont divisées en quinze groupes de cinq souris et des régimes alimentaires différents sont administrés à chaque groupe.
Le premier groupe est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment).
Le deuxième groupe est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 9 mg.kg"1. semaine"1.
Le troisième groupe est alimenté avec un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 90 mg.kg"1. semaine"1.
Le quatrième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment).
Le cinquième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 9 mg.kg"1. semaine"1. Le sixième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 90 mg.kg"1. semaine"1.
Le septième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment).
Le huitième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment).
Le neuvième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), et enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment).
Le dixième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 9 mg.kg"1. semaine"1.
Le onzième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 9 mg.kg"1. semaine"1.
Le douzième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 9 mg.kg"1. semaine"1.
Le treizième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (18,4 mg/kg d'aliment soit 141 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 90 mg.kg"1. semaine"1.
Le quartozième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (184 mg/kg d'aliment soit 1410 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 90 mg.kg"1. semaine"1. Le quinzième groupe est alimenté avec un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine (51 μg/kg d'aliment soit 0,350 nmole/g d'aliment), enrichi en agmatine (1840 mg/kg d'aliment soit 14100 nmoles/g d'aliment) et une dose de cyclophosphamide de 90 mg.kg"1. semaine"1.
L'évolution du volume des tumeurs (en cm3) est indiquée dans le tableau 1 pour les animaux des groupes 1 à 9.
Tableau 1 : Evolution du volume tumoral
Figure imgf000042_0001
S'agissant des groupes 10, 11 et 12, on observe une amélioration de 5 à 30 % par rapport au groupe 5.
S'agissant des groupes 13, 14 et 15, on observe une amélioration de 1 à 10 % par rapport au groupe 6.
La cyclophosphamide (Endoxan®) administrée à 90 mg.kg"1. semaine"1 possède un effet anti-prolifératif important quelle que soit l'alimentation fournie. Le pourcentage d'inhibition est de l'ordre de 81 à 90 %.
Une faible dose de cyclophosphamide (Endoxan®) de 9 mg.kg"1. semaine"1 associé à un régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine permet d'augmenter l'efficacité antitumorale de 25 % par rapport à un régime contenant un taux normal de polyamines (125 mg/kg d'aliment soit 861 nmoles/g d'aliment) associé à 9 mg.kg"1. semaine"1 de cyclophosphamide.
Ce régime appauvri en cadavérine, putrescine, spermidine et spermine enrichi en agmatine permet d'augmenter de façon dose-dépendante l'effet antitumorale de la cyclophosphamide à 9 mg.kg"1. semaine"1 de 5 à 14 %, selon les doses d'agmatine.
Ce même régime permet d'augmenter de façon dose-dépendante l'effet antitumorale de la cyclophosphamide à 90 mg.kg"1. semaine"1 de 1 à 10 %, selon les doses d'agmatine.
Ces régimes permettent de potentialiser l'effet antitumoral de la cyclophospamide à une faible dose permettant ainsi de limiter ses effets secondaires.
Des effets antiprolifératifs avec les compositions de la présente invention peuvent être également vérifiés avec d'autres modèles de tumeurs liquides ou solides humaines, notamment les leucémies par la lignée HL60 (Novak et al., Leukemia Research 35 (2011): 1248-1253), les cancers du sein par la lignée MCF7 (Wang et al. Biochemistry and Molecular Biology Reports 32 (1999): 173-180), les cancers de la prostate par la lignée DU145 (Choi et al., Acta Pharmacologica Sinica 26 (2005):616- 622), les cancers de l'intestin par les lignées Colo320, Colo205E, Cxi, SW480 (Molderings et al, Cancer 101 (2004): 858-68). Les lignées cellulaires pré-citées sont données à titre d'exemples de certains types de cancer et ne doivent en aucun cas restreindre la portée de la présente invention.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition comprenant un mélange de cadavérine, putrescine, spermine et spermidine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, ladite composition comprenant également de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition.
2. Composition selon la revendication 1, dans laquelle la concentration en putrescine varie de 0,19 à 0,32 nmole par gramme de composition, et/ou la concentration en cadavérine varie de 0,02 à 0,08 nmole par gramme de composition, et/ou la concentration en spermine varie de 0,009 à 0,03 nmole par gramme de composition, et/ou la concentration en spermidine varie de 0,09 à 0,20 nmole par gramme de composition.
3. Composition selon la revendication 1 ou 2, laquelle contient en pourcentage de poids sec par rapport au poids sec total : 10 % à 35 % de lipides, 8 % à 30 % de protéines, 35 % à 80 % de glucides, jusqu'à 10 % d'un mélange constitué de vitamines, de minéraux et d'électrolytes.
4. Composition selon l'une des revendications 1 à 3, laquelle contient au moins un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines, notamment choisi parmi les inhibiteurs de l'ornithine décarboxylase, de la spermidine-spermine Nl- acétyltransférase ou de la spermine oxydase, et/ou au moins un inhibiteur du transport des polyamines, à raison d'au plus 15 % en poids par rapport au poids sec total de la composition.
5. Composition selon l'une des revendications 1 à 4, laquelle contient au moins un antibiotique, et/ou est enrichie en vitamines.
6. Composition selon l'une des revendications 3 à 5, dans laquelle les glucides appartiennent au groupe comprenant les polymères de glucose, les maltodextrines, le saccharose, les amidons modifiés, le glucose monohydrate, le sirop de glucose déshydraté, le monostéarate de glycérol et leurs mélanges, et/ou dans laquelle les protéines appartiennent au groupe comprenant les protéines solubles du lait, les protéines de soja, les peptides de sérum, le blanc d'œuf en poudre, le caséinate de potassium, les peptides non phosphorylés, les peptides de caséine, le caséinate mixte, l'isolât de soja et leurs mélanges, et/ou dans laquelle les lipides appartiennent au groupe comprenant l'huile de beurre, l'huile d'arachide, les triglycérides à chaîne moyenne, l'huile de pépins de raisin, l'huile de soja, l'huile d'onagre et leurs mélanges et/ou dans laquelle les lipides sont constitués par un mélange d'au moins une huile d'origine animale, d'au moins une huile d'origine végétale et de stéarate de glycérol.
7. Composition selon l'une des revendications 1 à 6, laquelle composition constitue la ration journalière alimentaire d'un être humain et en ce qu'elle comprend:
- de 75 g à 500 g de glucides,
- de 20 g à 185 g de lipides,
- de 20 g à 225 g de protéines,
- des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantités suffisantes pour répondre aux besoins nutritionnels journaliers d'un être humain,
- et éventuellement un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines, ou, laquelle composition est un sous-multiple d'une ration journalière alimentaire d'un être humain et en ce qu'elle comprend :
- de 75/X g à 500 X g de glucides,
- de 20/X g à 185/X g de lipides,
- de 20/X g à 225/X g de protéines,
- des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantités suffisantes pour répondre partiellement aux besoins nutritionnels journaliers d'un être humain,
- et éventuellement un inhibiteur de la synthèse intracellulaire des polyamines, et X étant un entier compris entre 2 et 8 et correspondant au nombre de rations devant être ingérées par le patient pour satisfaire ses besoins nutritionnels journaliers.
8. Composition selon l'une des revendications 1 à 7, laquelle composition se présente sous une forme sèche à dissoudre extemporanément dans un véhicule neutre.
9. Composition selon l'une des revendications 1 à 8 pour son utilisation en tant que médicament.
10. Préparation pharmaceutique comprenant une composition selon l'une des revendications 1 à 9.
11. Composition selon l'une des revendications 1 à 8 pour son utilisation en tant que complément ou substitut alimentaire, ou en tant que complément nutraceutique.
12. Composition selon l'une des revendications 1 à 9 pour son utilisation dans le traitement, chez un patient, de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, ou dans le traitement du cancer.
13. Composition pour son utilisation selon la revendication 12, dans laquelle le traitement s'effectue en administrant une dose unitaire variant de 3,7 mg à 370 mg d'agmatine.
14. Composition pour son utilisation selon la revendication 12, dans laquelle la composition est administrée au patient selon le schéma suivant:
(i) administration d'une première dose de la composition de l'invention pendant une première période de temps, et consécutivement,
(ii) administration d'une seconde dose de la composition de l'invention pendant une seconde période de temps, la seconde dose est ajustée en fonction de la réaction du patient à la première dose, et consécutivement,
(iii) administration d'une troisième dose de la composition de l'invention pendant une troisième période de temps, la troisième dose est ajustée en fonction de la réaction du patient à la seconde dose.
15. Composition pour son utilisation selon la revendication 14, dans laquelle :
- la première période de temps varie de 7 à 14 jours, notamment 7 jours, et/ou
- la seconde période de temps varie de 14 à 21 jours, notamment 14 jours, et/ou
- la troisième période de temps varie de 28 à 63 jours, notamment 63 jours.
16. Composition pour son utilisation selon la revendication 14, dans laquelle :
- la première dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j,
- la seconde dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j, et
- la troisième dose d'agmatine varie de 3,7 mg à 2,9 g d'agmatine/j.
17. Composition comprenant :
- un mélange de cadavérine, putrescine, spermidine et spermine à une concentration variant de 0,31 à 0,63 nmole par gramme de composition, de l'agmatine à une concentration variant de 120 à 17100 nmoles par gramme de composition,
pour son utilisation dans la prévention ou le traitement chez un patient de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire, la quantité totale d'agmatine ingérée par jour par le patient ne dépassant pas 11400 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 5000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 1000 nanomoles par kcal de composition ingérée, notamment 80 nanomoles par kcal de composition ingérée.
18. Combinaison d'une composition selon la revendication 17 et d'un agent chimiothérapeutique pour son utilisation dans la prévention ou le traitement, chez un patient, de pathologies liées à l'hyperprolifération cellulaire.
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