WO2012153064A2 - Composition cosmetique ou dermatologique a base d'extraits d'immortelle et son utilisation - Google Patents

Composition cosmetique ou dermatologique a base d'extraits d'immortelle et son utilisation Download PDF

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Jean-Louis Pierrisnard
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    • A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18

Definitions

  • the present invention relates to a cosmetic or dermatological anti-aging composition.
  • the present invention also relates to a method of cosmetic anti-aging treatment.
  • the present invention finds particular application in the cosmetics field.
  • references in brackets ([]) refer to the list of references at the end of the text.
  • the skin is an organ of exchange. Its visual but also tactile aspect occupies a very important place, especially in our western society.
  • the skin is the developer of human aging.
  • UV radiation is major. They are responsible for photoaging. UVA rays are certainly at least as harmful as UVB rays as indicated in Petersen MJ, Hansen C, Craig S. Ultraviolet A irradiation stimulates collagenase production in cultured human fibroblasts. J Invest Dermatol 1992; 99: 440-4. [2].
  • DNA repair mechanisms play a major role in the fight against aging.
  • Several enzymatic systems cooperate to repair mutations spontaneously generated by the body or induced by external aggressions (eg UV radiation).
  • UV radiation is the main factor responsible for extrinsic aging. Its mechanism of action is twofold: either by direct interaction on cellular DNA (interference primarily due to UVB) or indirectly through the active forms of oxygen, which is the main mode of action of UVA ( West MD, The Cellular and Molecular Biology of Skin Aging, Arch Dermatol 1994; 130: 87-95. [4]; Meydani M. Nutrition Interventions in Aging and Aging-Associated Disease Ann Ann Acad Sci 2001; 928: 226-35 [5], Stege H, Roza L, Vink A et al., Enzyme plus light B-radiation ultraviolet therapy to repair immunosuppressive effects. Proc Natl Acad Sci USA 2000; 97: 179-85.
  • UVs By interacting directly with DNA, UVs induce the formation of photo-products (especially thymidine dimers for UVB) that can lead to mutations, the initiation of carcinogenesis, and even cell death.
  • photo-products especially thymidine dimers for UVB
  • the activation of the p53 protein makes it possible to cause death of the keratinocyte by apoptosis phenomenon.
  • UV radiation also increases the expression of metalloproteinases (MPs) in the epidermis and dermis (these enzymes degrade collagen and other macromolecules in the dermal extracellular matrix).
  • MPs metalloproteinases
  • UVA radiation induces the expression of genes in the keratinocytes, responsible for the phenomena of photo-aging and photocarcinogenesis. UVA rays act through active forms of oxygen which induce the formation of ceramides.
  • Intrinsic aging and extrinsic aging thus add up their deleterious effects on all cutaneous structures.
  • the respective part of the changes caused by intrinsic or extrinsic aging is often difficult to individualize because of the existence of sometimes conflicting bibliographic data.
  • the main consequences are a decline in defense, healing, perception and thermo-regulation functions as well as the establishment of a chronic inflammatory state corresponding to an increase in the number of macrophages and persistent dry skin (Harvell JD , Maibach Hl. Percutaneous uptake and inflammation in aged skin: a review., J Am Acad Dermatol 1994; 31: 1015-21.
  • compositions are known in the state of the art. However, these compositions do not make it possible to effectively treat both intrinsic and extrinsic aging, nor do they make it possible to treat the causes of this aging.
  • the present invention is specifically intended to meet this need by providing a cosmetic or dermatological composition
  • a cosmetic or dermatological composition comprising:
  • the present invention also relates to the cosmetic and / or dermatological use of this composition.
  • immortelle is meant a species of flowering plants of the family Asteraceae and genus Helichrysum. In particular, it may be Helicrysum italicum which may be present all around the Mediterranean. It may be for example the immortelle described in French Patent Application No. 01/1 1224.
  • aqueous extract any aqueous extract obtained by any method known to those skilled in the art. For example, it can be obtained by aqueous extraction, by hydrodistillation, hydro-glycerinated or hydro-alcoholic extraction.
  • the aqueous extract of immortelle can be any aqueous extract of immortelle known to those skilled in the art. It may be for example an immortal biological aqueous extract, for example a biological immortelle extract from Corsica Greentech society.
  • the aqueous extract can be obtained for example from a plant and / or part of a plant. It may be for example an aqueous extract obtained from flowers or flower heads, leaves, seeds, roots, stems. It may be for example an extract obtained from whole flowers.
  • the aqueous extract may comprise, for example, from 0.1 to 0.3% of sugars, for example 0.2% by weight of sugars, from 1 to 2 ppm of vitamin E, for example 1.7 ppm. of vitamin E and from 0.2 to 0.5% by weight of polyphenols, for example 0.44% by weight of polyphenols including 50 ppm of caffeic acid.
  • the aqueous extract of immortelle makes it possible in particular to stimulate loricrin, favoring the restructuring of the epidermis and a better surface smoothing.
  • ily extract means an extract rich in fatty acid and / or fat and / or a non-water soluble extract.
  • the oily extract may be any oily extract obtained by any method known to those skilled in the art.
  • it can be obtained by oily extraction by microwaves, by microwave, by supercritical extraction, by maceration in an oily solvent, by oily extraction assisted by ultrasound.
  • It may be, for example, an organic oily extract of immortelle by microwave extraction assisted by ultra sounds according to a process comprising a first step of grinding the immortelle flowering top followed by an ultrasound-assisted extraction and by microwaves, then a clarification and finally a filtration step to recover the oily extract.
  • the oily extract can be obtained from a plant and / or part of a plant. It may be for example an oily extract obtained from flowers or flower heads, leaves, seeds, roots, stems, pericarp.
  • the oily immortelle extract can comprise from 0.1 to 0.3% by weight of sugars, for example 0.2% of sugars, from 0.04 to 0.06% by weight of vitamin E , for example 0.051% of vitamin E, from 99% to 99.9% by weight of fatty acids, for example 99.8% by weight of fatty acids, of which from 80 to 85% of oleic acid, for example 83.4% oleic acid, 6 to 8% linoleic acid (omega-6), for example 7.3% linoleic acid (omega-6), 2 to 5% palmitic acid and from 2 to 4% of stearic acid but is distinguished especially by its content of phytosterols from 0.2% to 0.5%, for example 0.35% of which a majority of beta-sitosterol 0.2% and polyphenols of 0.01 to 0.1%, for example 0.074%.
  • the profile of the sterols can be measured according to any known method, for example according to ISO 1228; the dosage of vitamin E can be measured according to any known method, for example according to standard NF V18-402; the fatty acid profile may be measured according to any known method, for example according to standard NF EN ISO 5508/5509; the profile of the sugars can be measured by any known method, for example by a chromatographic technique such as ion chromatography, the total polyphenol assay can be measured by any known method, for example according to the ISO 14502-1 standard.
  • essential oil means any essential oil obtained by any method known to those skilled in the art. By for example, it can be obtained by hydrodistillation. It may be for example a biological essential oil of immortelle, that is to say from organic farming, for example a biological essential oil of Corsica, for example the company Essences Naturelles Corses.
  • the essential oil can be obtained, for example from a plant and / or part of a plant. It may be for example an oil obtained from flowers or flower heads, leaves, seeds, roots, stems.
  • the organic essential oil of immortelle can comprise from 35 to 50% by weight of neryl acetate.
  • the extracts can be obtained by any of the techniques known to those skilled in the art, for example supercritical or hydroalcoholic extraction.
  • cosmetic composition is intended to mean any cosmetic composition, for example a composition that can be brought into contact with the superficial parts of the human body, for example the epidermis, the hair and capillary systems, the external organs, the teeth and mucous.
  • the aqueous extract of immortelle may be present in the composition, for example at a concentration of 0.01 to 10% by weight relative to the total weight of said composition, for example from 0.01 to 5% by weight relative to the total weight of said composition.
  • the oily immortelle extract may be present in the composition, for example at a concentration of 0.001 to 5% by weight relative to the total weight of said composition, for example from 0.001 to 2% by weight relative to to the total weight of said composition.
  • the essential oil may be present in the composition from 0.001% to 1% by weight relative to the total weight of said composition, for example from 0.001% to 0.5% by weight relative to the total weight of said composition. composition.
  • the sum of the aqueous, oily extract and the essential oil in the composition of the invention may be from 0.01 to 16% by weight. weight relative to the total weight of said composition, for example from 0.01 to 8% by weight relative to the total weight of said composition.
  • composition of the invention comprising the aqueous extract, oily and essential oil of immortelle can strengthen the barrier function of the skin.
  • composition of the invention advantageously allows to promote the cohesion between the dermis and the epidermis, to regenerate and restructure the epidermis for better surface smoothness and a radiant complexion.
  • the cosmetic or dermatological composition of the present invention may further comprise at least one additional active agent chosen, for example from an anti-aging agent, a moisturizing agent, a soothing agent or a mixture of these agents.
  • these agents may be those commonly used in cosmetic and / or dermatological products.
  • anti-aging agents that may be used are, for example, silicon or vitamin C.
  • moisturizing agents which may be used are, for example, glycerine or hyaluronic acid.
  • soothing agents that can be used are, for example, bisabolol or allantoin. This or these agent (s) may be used in the composition of the present invention for example at the concentrations usually used and known to those skilled in the cosmetic or dermatological compositions.
  • the cosmetic composition according to the invention may comprise one or more adjuvants known to those skilled in the art.
  • This may be, for example, one or more adjuvants chosen from among ester-type agents, moisturizing agents, emollient agents, mineral thickeners, organic thickeners, associative or non-associative, water-soluble and fat-soluble organic sunscreens, mineral sunscreens, silicone compounds, perfumes, preservatives, ceramides, and pseudo-ceramides, vitamins and provitamins, proteins, sequestering agents, alkanizing agents, acidifying agents , reducing agents, oxidizing agents, mineral fillers, dyes or any other adjuvant which may be mentioned in the INCI (International Nomenclature Cosmetic Ingredients) dictionary published by the CTFA (Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association).
  • INCI International Nomenclature Cosmetic Ingredients
  • the cosmetic and / or dermatological composition may, for example, be in any form known to those skilled in the art. It may be, for example, an oil-in-water, water-in-oil, water-in-silicone emulsion, a multiple emulsion, a miniemulsion, a microemulsion, a nanoemulsion, a solid emulsion, an aqueous or hydro-alcoholic gel, a cream, a milk, a lotion, an ointment, an oil, a a balm, an ointment of a gel, a mask, a powder, an impregnated support, for example a transdermal patch, an oil, an aqueous or hydroalcoholic lotion and / or a wax.
  • an oil-in-water, water-in-oil, water-in-silicone emulsion a multiple emulsion, a miniemulsion, a microemulsion, a nanoemulsion, a solid emulsion
  • the composition may be in any form known to those skilled in the field of cosmetics and dermatology, without any particular pharmaceutical restriction.
  • the composition may be in any galenical form known to those skilled in the art, for example in the form of an ointment, a cream, an oil, a milk, an ointment or a powder , a stick, a soaked pad, a transdermal patch, a solution, a gel, a spray, a lotion or a suspension.
  • composition according to the present invention may be, for example a composition for the care of the face, of the body, for example compositions for the face and / or the body
  • the composition of the invention may be obtained by any suitable method known to those skilled in the art for the manufacture of a cosmetic and / or dermatological composition. It may be, for example a simple mixture. It may also be, for example, a method comprising a step of incorporating an internal phase into an external phase by means of an emulsifier, for example a rotor-stator type turbine. It may also be for example a method using the Phase Inversion Temperature (TIP) method conventionally used by those skilled in the art to obtain oil-in-water emulsions whose dispersed droplets are particularly fine, for example with a diameter of 0.1 to 1 ⁇ .
  • the composition may be a composition used in the treatment of cutaneous aging, for example wrinkles and fine lines, loss of firmness, loss of radiance, loss of elasticity and dry skin. It may be for example an anti-aging composition.
  • the present invention also relates to an anti-aging cosmetic treatment method comprising the application to the skin of a cosmetic composition comprising:
  • the aqueous extract, the oily extract and the essential oil are as defined above.
  • It may be, for example a simple application to the skin or an application accompanied by a massage of the skin with the composition of the present invention.
  • the application is preferably carried out with a sufficient amount of the composition so that the entire surface of the skin to be treated is treated. It may be for example a conventional application, such as a cream on the skin. For example, it may also be an application for forming a treating mask.
  • the application can be, for example a daily, weekly and bi-monthly application. This may be for example an application once a day, twice a day or more.
  • the present invention makes it possible at the same time to reinforce the barrier function of the skin as well as the cohesion between the dermis and the epidermis, to regenerate and restructure the epidermis for a better smoothing on the surface and a radiant complexion.
  • the present invention advantageously allows to preserve a glowing skin and to fight against the wrinkles on the surface, that is to say in strengthening the stratum corneum and stimulating cell differentiation and cell proliferation, as well as deep wrinkles, that is to say by reinforcing the cohesion between dermis and epidermis.
  • the inventors have clearly demonstrated that the present invention using the aqueous extract, the oily extract and the immortelle essential oil act synergistically on the regeneration and the restructuring of the epidermis as well as on the radiance. and the complexion of the skin.
  • Figure 1 shows a bar graph in which the protein expression of Loricrin as a percentage of expression against GAPDH on the diagram and procollagen-lysine 1, 2-oxoglutarate-5-dioxygenase 1 (PLOD1) as a percentage of expression with respect to GAPDH on the diagram in skin explants treated with an oily immortelle extract (H), an aqueous extract of immortelle (A), a mixture of three extracts of immortelle (T) by compared to untreated skin (NT) and the ubiquitous expression of Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH).
  • H oily immortelle extract
  • A aqueous extract of immortelle
  • T a mixture of three extracts of immortelle
  • NT untreated skin
  • GPDH ubiquitous expression of Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase
  • FIG. 2 shows the steps of the oily extraction process.
  • a base mixture was made with various components in a base composition for the facial care described in Table 1 below:
  • compositions comprising an aqueous immortelle extract with 0.01; 0.05; 0.1; 1; 2 and 5% by weight relative to the total weight of each composition;
  • compositions comprising the oily extract obtained by microwave extraction of immortelle with respectively: 0.001; 0.01; 0.05; 0.1; 1 and 2% by weight relative to the total weight of each composition;
  • composition comprising Immortelle essential oil with 0.001, respectively; 0.01; 0.02, 0.2; 0.5 and 1% by weight relative to the total weight of each composition.
  • the aqueous extract used was obtained by aqueous extraction. It is an organic aqueous extract Immortelle de Corse from the company Greentech.
  • the oily extract used was obtained by ultrasound-assisted oily extraction using the method described in FIG. 2.
  • the essential oil used was obtained by hydrodistillation. It is a biological essential oil of Corsican immortelle of the company Corsican Natural Essences.
  • EXAMPLE 2 Effect of an aqueous extract of immortelle or of an oily extract of immortelle or immortelle essential oil and / or of the mixture of the aqueous extract, oily extract and of the essential oil on the regeneration, restructuring of the epidermis, strengthening the barrier function, smoothing the surface of the skin and strengthening the support of the skin
  • the experiments were performed with an aqueous extract of immortelle, an oily extract of immortelle, an essential oil of immortelle and the mixture of the three.
  • the aqueous organic extract of immortelle from Corsica was obtained by aqueous extraction and supplied by Greentech, the oily extract was obtained by internal microwave extraction and the essential oil of immortelle was obtained by hydrodistillation. and provided by the company Essences Naturelles Corses.
  • composition of the invention makes it possible to stimulate the regeneration and the restructuring of the epidermis, to reinforce the barrier function and the radiance of the complexion of the skin.
  • the transcriptome is the set of messenger RNAs (molecules that serve as a template for the synthesis of proteins) resulting from the expression of a part of the genome of a cellular tissue or a cell type.
  • the characterization and quantification of the transcriptome in a given tissue and under given conditions makes it possible to identify the active genes, to determine the mechanisms for regulating gene expression and to define the expression networks of the genes.
  • One of the techniques used to simultaneously measure the level of expression of a large number of different types of messenger RNA is that of the DNA chip. DNA microarrays have made it possible to measure and visualize very quickly the differences in expression between genes, and this at the level of a complete genome.
  • compositions independently comprising an aqueous extract, an oily extract, an immortelle essential oil or a mixture of all three were prepared at the different concentrations presented in Example 1 and used to perform transcriptomic assays.
  • Pongsavee.M Toxicol Ind Health.
  • serum-free DMEM DulbeccoA / ogt modified Eagle's minimal essential medium
  • Table 1 summarizes the concentrations applied for each composition.
  • Table 2 non-toxic maximum concentrations expressed in% for each immortelle extract or the essential oil or the mixture of the aqueous, oily extract and the essential oil of immortelle
  • the chips were then scanned using the Gene Chip GCS3000 scanner (Affymetrix) and the GCOS 1 .4 software. The scanned images were then analyzed using the Expression 1 .0 console (Affymetrix) to convert light intensity measurements into digital data and to standardize this data. Comprehensive data analysis and statistical analysis were performed using Genespring GX 1 1 software (Agilent Technologies) based, in particular, on classification algorithms. Differences in gene expression thus obtained following the application of the various compositions comprising independently the aqueous extract, the oily extract, the essential oil or the mixture of the three on skin explants compared to a non explant. Treaty were collated in Table 3 below. The value of the differential expression of genes expressed between the untreated skin and the skin treated with the various compositions mentioned above has a p-value ⁇ 0.01 (very significant statistical value).
  • Table 3 Difference in expression and gene biological significance following the application of different extracts of immortelle and the complex of 3 on skin explants compared to the same untreated explant.
  • KLK5 protein involved in the mixture extract kallikrein- desquamation aqueous, oily phenomenon
  • Xn represents the stimulation factor relative to the untreated skin.
  • a reverse transcription step was first performed using the Superscript First-Srand Synthesis System for RT-PCR system (Invitrogen Corp, Carlsbad, CA) of the RNAs from the preceding skin explants (Devilard E, Bladou F, Ramuz O , Karsenty G, Dalès JP, Gravis G, Nguyen C, Bertucci F, Xerri L, Birnbaum D.
  • FGFR1 and WT1 are markers of human prostate cancer progression, BMC Cancer, 2006 Nov 30, 6: 272 [21]).
  • the EREG gene codes for epiregulin, a growth factor related to EGF (Shirasawa S, Sugiyama S, Baba I, Inokuchi J, Sekine S, Ogino K,
  • the composition comprising the mixture of the aqueous extract, oily extract and the essential oil of immortelle stimulates the keratinocyte proliferation thus ensuring a better regeneration of the epidermis and a better surface smoothing by promoting cell renewal.
  • the mixture comprising an aqueous extract of immortelle, an oily immortelle extract and immortelle essential oil stimulates keratinocyte differentiation thus making it possible to restructure the epidermis while ensuring a better smoothing of the skin. area.
  • the mixture comprising the aqueous extract, oily and essential oil stimulates the synthesis of epidermal lipids thereby enhancing the barrier function of the skin.
  • the KLK5 gene encodes a chymotrypsin enzyme belonging to the kalikrein family involved in the skin desquamation process (Meyer-Hoffert U, Wu Z, Schröder JM.) Identification of lympho-epithelial Kazal-type inhibitor 2 in human skin as kallikrein-related peptidase 5-specific protease inhibitor, PLoS One 2009; 4 (2): e4372 [19]).
  • the mixture comprising the aqueous extract, oily and essential oil stimulates the desquamation process and thus allows to better smooth the skin surface while ensuring a radiant complexion.
  • the PLOD1 gene encodes an enzyme that stabilizes intermolecular bonds between collagen fibers (Takaluoma K, Hyry M, Lantto J, Sormunen R, Bank RA, Kivirikko Kl, Myllyharju J, Soininen R.
  • the mixture comprising the aqueous extract, oily and essential oil stimulates the proper assembly of the anchoring fibers thereby improving the overall architecture of the skin and its firmness.
  • Table 5 QEN expression of LOR and PLOD1 by RT-QPCR following the application of the aqueous extract, oily or essential oil or mixture of 3 on skin explants compared to the same untreated explant.
  • the expression of the LOR gene is multiplied by 2 (x2) in the aqueous extract, by 4 in the essential oil of immortelle, multiplied by 10 (x10) in the mixture of the three.
  • the expression of the gene is multiplied by 5 (x5) in the mixture of the three, no overexpression was found in the aqueous extract, oily or essential oil separately as well as in the untreated skin.
  • the figure represents protein expression of Loricrin and PLOD1 in skin explants treated with oily immortelle extract, aqueous immortelle extract, the mixture comprising the aqueous, oily extract and the essential oil. immortal to the untreated skin and ubiquitous expression of GAPDH
  • the mixture comprising the aqueous extract, oily and essential oil thus causes a stimulation of the gene expression of LOR and PLOD1 also resulting in overexpression of their protein and their function. This makes it possible to improve the overall architecture of the skin, its firmness and to restructure the epidermis.
  • Example 3 Use and Efficacy Test of the Precious Immortelle Anti-Aging Cream Face Cream and Evaluation of the Cosmetic Gualities of this Composition
  • composition of the invention entitled “Cream Valuable” was applied daily for 28 days by 26 women between 36 and 60 years of age under normal conditions of use to evaluate its cosmetic qualities.
  • composition used included the following compounds:
  • the evaluation of the smoothing effect was made by measuring the cutaneous relief using the PRIMOS COMPACT (registered trademark).
  • the evaluation of the anti-wrinkle effect was made by measuring the cutaneous relief using the PRIMOS COMPACT (registered trademark).
  • the skin is supple 99%
  • the skin is 100% soft
  • the skin is comfortable 100%
  • the skin is more radiant 91%
  • the complexion is cooler 93%
  • the complexion is more rested 93%
  • the texture of the skin looks visibly 87% improved
  • the skin is more beautiful 85%
  • the skin is firmer 81%
  • the skin is smoother 87%
  • the skin appears to be plumped 77%
  • the skin is supple 96%
  • the skin is soft 98%
  • the skin is deeply nourished 92%
  • the skin appears intensely hydrated 89%
  • the skin is comfortable throughout the
  • the skin is more radiant 89%
  • the complexion is fresher 91%
  • the skin texture is improved 83%
  • the skin is more beautiful 83%
  • the skin is firmer 81%
  • the structure of the epidermis is reinforced 77%
  • the skin is fortified 81%
  • the skin is revitalized 83%
  • the skin is more toned 79%
  • the skin is rebuilt in depth 74%
  • the skin is smoother 89%
  • Immortelle Precious Cream has therefore been recognized as being very effective by this clinical study as well as by the users.
  • Example 4 Test of Use and Efficacy of Immortelle Precious Night Cream and evaluation of the cosmetic qualities of this composition
  • the basic composition used comprised the following compounds:
  • “Delta” is the difference (s) between the averages at the considered evaluation time (s) and the initial values
  • P corresponds to the statistical validity threshold, a value of p ⁇ 0.05 is very significant; a value of p is close to the significance when 0.05 ⁇ p ⁇ 0.10; a value of p> 0.10 is not significant.
  • the statistical test used for this analysis is a Student test.
  • the product leaves a non-sticky finish 90%
  • the skin is supple 98%
  • the skin is soft 98%
  • the skin is deeply nourished 94%
  • the skin is intensely hydrated 96%
  • the skin is comfortable 96%
  • the skin is repaired 96%
  • the skin is regenerated 92%
  • the skin is more beautiful 94%
  • the texture of the skin is more beautiful 90%
  • the skin texture is improved 82%
  • the skin is firmer 78%
  • the skin is wrinkled 82%
  • the skin is supple 96%
  • the skin is soft 98%
  • the skin is relaxed 92%
  • the skin is deeply nourished 88%
  • the skin is more comfortable 92%
  • the skin is repaired 84%
  • the skin is regenerated 82%
  • the skin is rebuilt in depth 65%
  • the skin is radiant 80%
  • the skin is more beautiful 84% Skin texture improves 92%
  • the skin is firmer 78%
  • the skin is fortified 80%
  • the skin is revitalized 80%
  • the skin is more toned 78%
  • the skin is wrinkled 71%
  • composition comprising the mixture of the aqueous extract, oily and the essential oil of immortelle has therefore been recognized as being very effective by the users after 4 weeks of applications.
  • composition used included the following compounds:
  • precious fluid This composition is referred to below as "precious fluid”.
  • P corresponds to the statistical validity threshold, a value of p ⁇ 0.05 is very significant; a value of p is close to the significance when 0.05 ⁇ p ⁇ 0.10; a value of p> 0.10 is not significant.
  • the statistical test used for this analysis is a Student test.
  • the Precious Fluid has been recognized as being very effective by users according to Table 1 1. After 4 weeks of use, the actions claimed on the active complex are also validated by the volunteers.
  • the product leaves a non-greasy finish 96%
  • the product leaves a non glossy finish 94%
  • the skin is supple 96%
  • the skin is 100% soft
  • the skin is intensely hydrated 84%
  • the skin is mattified 66%
  • the skin is more radiant 80%
  • the complexion is fresher 84%
  • the skin is more beautiful 76%
  • the skin is firmer 64%
  • the skin is smoother 68%
  • the skin is tightened 64%
  • the skin is supple 98%
  • the skin is soft 98%
  • the skin is velvety 86%
  • the skin is intensely hydrated 76%
  • the skin is mattified 62%
  • the skin is more radiant 78%
  • the complexion is fresher 80%
  • the skin texture is improved 76%
  • the skin is more beautiful 74%
  • the skin is firmer 64%
  • the skin is fortified 64%
  • the skin is revitalized 72%
  • the skin is more toned 64%
  • the skin is smoother 80%
  • the Precious Fluid has therefore been recognized as being very effective by users. After 4 weeks of use, the claimed actions on the active complex are validated by the volunteers as shown in Table 10 above.
  • the Precious Fluid was therefore recognized as being very effective by users after 4 weeks of applications.
  • the composition comprising the mixture of the aqueous extract, oily and the essential oil of immortelle has therefore been recognized as being very effective by the users after 4 weeks of applications.
  • EXAMPLE 6 Effect of an aqueous extract of immortelle or of an oily extract of immortelle or immortelle essential oil and / or of the mixture of the aqueous extract, oily extract and of the essential oil on the regeneration, restructuring of the epidermis, strengthening the barrier function, smoothing the surface of the skin and strengthening the support of the skin
  • the experiments were performed with an aqueous extract of immortelle, an oily extract of immortelle, an essential oil of immortelle and the mixture of the three.
  • the aqueous organic extract of immortelle from Corsica was obtained by aqueous extraction and supplied by Greentech, the oily extract was obtained by internal microwave extraction and the essential oil of immortelle was obtained by hydrodistillation. and provided by the company Essences Naturelles Corses.
  • Table 12 Difference in gene expression and biological significance of the genes following the application of a composition comprising the aqueous extract, the oily extract, and the immortelle essential oil on skin explants compared to the same explant untreated.
  • Protein 2C rich protein rich in proline extract Involved in aqueous formation,
  • Xn represents the stimulation factor relative to the untreated skin.
  • TGM3 and TGM1 encode enzymes that catalyze protein bridging reactions between involucrine and loricrin, the expression of which is stimulated by the mixture comprising the immortelle essential oil mixture, the aqueous extract immortelle and immortelle oily extract essentially, thus forming a particularly stable and insoluble macromolecular protein complex (Russell, LJ, DiGiovanna, JJ, Rogers, GR, Steinert, PM, Hashem, N., Compton, JG, and Bay, SJ (1995) Mutations in the gene for transglutaminase 1 in autosomal recessive lamellar ichthyosis, Nat Genet, 9 (3): 279-83 [24]).
  • the ELF3 E74 gene encodes a transcription factor that stimulates the expression of genes of the SPRR2 family (Oettgen P, Kas K, Dube A, Gu X, Grall F, Thamrongsak U, Akbarali Y, Finger E, Boltax J , Endress G, Munger K, Kunsch C, Libermann TA, Characterization of ESE-2, a novel ESE-1 -related Ets transcription factor that is restricted to glandular epithelium and differentiated keratinocytes, J Biol Chem, 1999 Oct 8, 274 (41). ): 29439-52 [26]).
  • the mixture comprising an aqueous extract of immortelle, an oily immortelle extract and immortelle essential oil stimulates keratinocyte terminal differentiation, thus making it possible to restructure the epidermis while ensuring better smoothing. of surface. This reinforces and confirms the results obtained in example 2 above.
  • EXAMPLE 7 Use and Efficacy Test of the Balm Cream Face Care Immortelle and Evaluation of the Cosmetic Gualities of this Composition
  • 51 women between 35 and 60 years old were recruited for this study to test the anti-wrinkle activity of this balm cream. eyes as well as the cosmetic qualities of this composition.
  • the composition was applied twice a day for 28 days by 51 women under normal conditions of use. All these volunteers had wrinkles / fine lines.
  • composition used included the following compounds:
  • eye balm This composition is referred to below as "eye balm”.
  • the evaluation of the firmness of the skin was made by measuring the cutaneous relief by clinical scoring.
  • the physician in charge of the study performed a visual assessment at the beginning and end of the study on a scale that ranged from skin to firm skin.
  • the evaluation of the roughness of the skin was done by clinical scoring.
  • the doctor in charge of the study carried out a visual evaluation at the beginning and at the end of the study of the roughness of the skin according to a scale of rough skin with smooth skin.
  • “Delta” is the difference (s) between the averages at the considered evaluation time (s) and the initial values
  • P corresponds to the statistical validity threshold, a value of p ⁇ 0.0001 is very significant; a value of p is close to the significance when 0.05 ⁇ p ⁇ 0.10; a value of p> 0.10 is not significant.
  • the statistical test used for this analysis is a Student test.
  • the eye balm After 28 days of use, the eye balm has a significant effect on firmness and skin smoothing.
  • the eye balm has also been recognized as being very effective by users according to Table 14. After 4 weeks of use, the actions claimed on the active complex have been validated by volunteers.
  • the product leaves a non-sticky finish 96%
  • the application provides a freshness effect 84%
  • the product leaves a velvety finish 86%
  • the skin is supple 90%
  • the skin is 93% soft
  • the skin is velvety 96%
  • the skin is deeply nourished 84%
  • the eye contour is fresher 67%
  • the eye contour is decongested 74%
  • the eye contour is firmer 70%
  • the eye contour is smoothed 76%
  • the skin is supple 92%
  • the skin is soft 92%
  • the skin is velvety 80%
  • the skin is deeply nourished 73%
  • the skin is more comfortable 78%
  • the skin is soothed 72%
  • the skin is more radiant 62%
  • the eye contour is cooler 65%
  • the product reduces fatigue marks 65%
  • the eye contour is firmer 66%
  • the structure of the skin is firmed 73%
  • the eye contour is smoothed 72%
  • the skin looks firm 61%
  • composition comprising the mixture of the aqueous extract, oily and the essential oil of immortelle has therefore been recognized as being very effective by the users after 4 weeks of applications.
  • composition comprising an oily, aqueous extract and an essential oil of immortelle.
  • ESE-2 a novel ESE-1 -related Ets transcription factor that is restricted to glandular epithelium and differentiated keratinocytes. J Biol Chem. 1999 Oct 8; 274 (41): 29439-52.

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Abstract

La présente invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique anti-âge. En particuliers, la présente invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant au moins un extrait aqueux d'immortelle, au moins un extrait huileux d'immortelle, et au moins de l'huile essentielle d'immortelle. La présente invention a également pour objet l'utilisation cosmétique de la composition dans un traitement anti- âge et un procédé de traitement cosmétique anti-âge comprenant l'application sur la peau d'une composition cosmétique de l'invention. La présente invention permet de répondre parfaitement aux besoins quotidiens de la peau afin de lutter efficacement contre les signes de l'âge.

Description

COMPOSITION COSMETIQUE OU DERMATOLOGIQUE A BASE D'EXTRAITS D'IMMORTELLE ET SON UTILISATION
DESCRIPTION
Domaine technique
La présente invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique anti-âge.
La présente invention se rapporte également à une méthode de traitement cosmétique anti-âge.
La présente invention trouve notamment une application dans le domaine cosmétique.
Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentées à la fin du texte.
Etat de la technique
La peau est un organe d'échange. Son aspect visuel mais aussi tactile occupe une place très importante, particulièrement dans notre société occidentale. La peau est le révélateur du vieillissement humain.
Le vieillissement cutané peut entraîner une altération de perception de l'image corporelle avec, à terme, des symptômes dysmorphophobiques ou dépressifs tel que décrit dans Koblenzer CS. Psychologie aspects of aging and the skin. Clinics Dermatol 1996;14:171 -7. [1 ]. Par ailleurs, les personnes ayant des signes de vieillissement cutané sont souvent perçues par notre société comme étant en mauvaise santé et incapables d'initiatives (Koblenzer CS. Psychologie aspects of aging and the skin. Clinics Dermatol 1996;14:171 -7. [1 ]). Ainsi, la demande thérapeutique afin de prévenir le vieillissement cutané est aujourd'hui de plus en plus forte. Pour y répondre, une meilleure connaissance de sa physiopathologie, mais aussi de ses conséquences cliniques, est nécessaire. Comme tous les autres organes, la peau est soumise au vieillissement. Les facteurs chronologiques, génétiques et les facteurs endocriniens ( Pierard GE. The quandary of climacteric skin ageing. Dermatology 1996;193:273-4. [3]), par exemple les bouleversements post-ménopausiques chez la femme, déterminent le vieillissement cutané intrinsèque.
La peau est également soumise à des agressions extrinsèques qui, au fil du temps, amplifient le phénomène de vieillissement intrinsèque. Le rôle des rayons ultraviolets (UV) est majeur. Ils sont responsables du photovieillissement. Les rayons UVA sont certainement au moins aussi nocifs que les rayons UVB tel qu'indiqué dans Petersen MJ, Hansen C, Craig S. Ultraviolet A irradiation stimulâtes collagenase production in cultured human fibroblasts. J Invest Dermatol 1992;99:440-4. [2].
Les facteurs environnementaux, au premier rang desquels le tabac et l'alcool, contribuent aussi au vieillissement cutané. Les autres rayonnements (infrarouges, rayons-X, rayons gamma, mais aussi probablement la lumière visible), la gravité interviennent dans une moindre mesure.
Al Le vieillissement intrinsèque :
Les mécanismes biologiques sont liés à un déséquilibre entre phénomènes de dégradation cellulaire (formes actives de l'oxygène, produits terminaux de la glycation etc.) et systèmes de réparation (anti-oxydants, enzymes de réparation de l'ADN, enzymes protéosomales, protéases, protéinases, phospholipases et acyltransférases, enzymes impliquées dans la stabilité des liaisons etc.). Les mécanismes de réparation de l'ADN jouent un rôle majeur dans la lutte contre le vieillissement. Plusieurs systèmes enzymatiques coopèrent pour réparer les mutations spontanément générées par l'organisme ou induites par des agressions extérieures (ex : rayonnement UV).
B/ Le vieillissement extrinsèque :
Le rayonnement UV est le principal facteur responsable du vieillissement extrinsèque. Son mécanisme d'action est double : soit par interaction directe sur l'ADN cellulaire (interférence due en priorité aux UVB) soit de façon indirecte par le biais des formes actives de l'oxygène qui est le mode d'action principal des UVA (West MD. The cellular and molecular biology of skin aging. Arch dermatol 1994;130:87-95. [4]; Meydani M. Nutrition interventions in aging and age-associated disease. Ann N Y Acad Sci 2001 ;928:226-35 [5] ; Stege H, Roza L, Vink A et al. Enzyme plus light therapy to repair immunosuppressive effects on human skin damaged by ultraviolet B-radiation. Proc Natl Acad Sci USA 2000; 97:179-85. [6] ; Jurkiewicz BA, Buettner GR. Ultraviolet light-induced free radical formation in the skin: An électron paramagnetic résonance study. Photochem Photobiol 1994; 59:1 -4. [7]; Grether-Beck S, Oliazola-Horn S, Schmitt H et al. Activation of transcriptor factor AP-2 médiates UVA radiation- and singlet oxygen- induced expression of the human intercellular adhésion molecule-1 gene. Proc Natl Acad Sci USA 1996; 93:14586-91 . [8]).
En interagissant directement avec l'ADN, les UV induisent la formation de photo-produits (notamment des dimères de thymidine pour les UVB) pouvant conduire à des mutations, à l'initiation d'une carcinogenèse, voire à la mort cellulaire. Lorsque les doses d'UV reçues sont trop importantes, l'activation de la protéine p53 permet d'entraîner la mort du kératinocyte par phénomène d'apoptose.
Les radiations UV augmentent aussi l'expression de métalloprotéinases (MP) dans l'épiderme et le derme (ces enzymes dégradent le collagène et les autres macromolécules de la matrice extracellulaire dermique).
Une exposition solaire de 5 à 15 minutes seulement, à midi, entraîne la production de collagénase, de stromélysine-1 et de gélatinase de 92kDa. La collagénase hydrolyse les fibres collagènes, puis la stromélysine- 1 et la gélatinase de 92kd finissent ensuite de les dégrader. Le rôle spécifique du rayonnement UVA est aujourd'hui mieux connu. Il induit notamment l'expression de gènes dans les kératinocytes, responsables des phénomènes de photo-vieillissement et de photocarcinogénèse. Les rayons UVA agissent par le biais des formes actives de l'oxygène qui induisent entre autres la formation de céramides. Ces céramides entraînent à leur tour l'expression des protéines d'adhésion ICAM-1 et activent le facteur de transcription AP-2 qui joue probablement un rôle central dans le phénomène de photo- vieillissement (Fisher GJ, Wang ZQ, Datta SC, Varani J, Kang S, Voorhees
JJ. Pathophysiology of prématuré skin aging induced by ultraviolet light. N Engl J Med 1997;337:1419-28. [9]). Un autre mode d'action des UVA impliquerait des mutations de l'ADN mitochondrial (ADNmt) également induites par les radicaux libres. Les mécanismes d'action des autres facteurs extrinsèques sont encore mal connus. Le tabac aggraverait les effets des rayonnements UV par l'induction de MP de type 1 qui diminuerait la teneur en collagène de la matrice extracellulaire dermique (Lanmann C, Bergmann J, Harisson G, Young AR. Matrix metalloproteinase-1 and skin aging in smokers. Lancet 2001 ;357:935-7. [10]). Une autre hypothèse suggère que la perte en fibres élastiques et non pas en collagène serait responsable des rides faciales chez les fumeurs (Fenske NA, Lober CW. Structural and functional changes of normal aging skin. J Am Acad Dermatol 1986;15:571 - 85. [1 1 ]).
C/Conséquences histologiques, cliniques et fonctionnelles
Le vieillissement intrinsèque et le vieillissement extrinsèque additionnent donc leurs effets délétères sur toutes les structures cutanées. La part respective des modifications entraînées par le vieillissement intrinsèque ou extrinsèque est souvent difficilement individualisable de part l'existence de données bibliographiques parfois contradictoires. Avec l'âge, les différentes structures cutanées sont modifiées à la fois sur le plan morphologique et fonctionnel. Les principales conséquences sont un déclin des fonctions de défense, de cicatrisation, de perception et de thermo-régulation ainsi que l'installation d'un état inflammatoire chronique correspondant à une augmentation du nombre de macrophages et d'une sécheresse cutanée persistante (Harvell JD, Maibach Hl. Percutaneous absorption and inflammation in aged skin: a review. J Am Acad Dermatol 1994;31 :1015-21 .
[12] ).
Sur le plan morphohistologique, le vieillissement cutané intrinsèque se manifeste par une atrophie du derme, c'est-à-dire une réduction du nombre de fibroblastes et cellules mastocytaires, et de l'épiderme. Au niveau de l'épiderme, le renouvellement (turn-over) de l'épiderme passe de 21 jours à 40 jours d'où l'impact négatif sur la cicatrisation et la réparation tissulaire (Grove GL, Kligman AM. Age-associated changes in human epidermal cell renewal. J Gerontol 38:137-42. [13]). Les kératinocytes voient leur taille diminuer et leur nombre se réduire. Le renouvellement cellulaire se ralentit et la cohésion entre le derme et l'épiderme s'atténue. Au niveau du derme, les fibres de collagène se brisent, leur renouvellement naturel devient plus difficile, l'élastine perd de son élasticité. Le derme perd peu à peu de sa densité, il s'amincie, les rides et ridules apparaissent.
Le vieillissement extrinsèque entraine quand à lui une réduction à la fois du nombre des fibres de collagène et impacte leur qualité. Il provoque l'accumulation de fibres élastiques de mauvaise qualité, réduisant ainsi l'élasticité de la peau. Comme le vieillissement intrinsèque, il ralentit la prolifération des cellules. Enfin, il réduit l'uniformité de la pigmentation, ce qui donne à la peau un aspect plus terne et âgé.
De nombreuses compositions anti-âges sont connues dans l'état de la technique. Toutefois, ces compositions ne permettent pas de traiter efficacement à la fois le vieillissement intrinsèque et extrinsèque, ni ne permettent de traiter les causes de ce vieillissement.
Il existe donc un réel besoin de trouver un nouveau composé, composition et/ou un moyen de traitement efficace du vieillissement cutané et/ou des causes à l'origine de ce vieillissement palliant l'ensemble des défauts, inconvénients et obstacles de l'art antérieur cités ci-dessus.
Exposé de l'invention
La présente invention a précisément pour but de répondre à ce besoin en fournissant une composition cosmétique ou dermatologique comprenant :
au moins un extrait aqueux d'immortelle,
au moins un extrait huileux d'immortelle, et
au moins de l'huile essentielle d'immortelle.
La présente invention se rapporte également à l'utilisation cosmétique et/ou dermatologique de cette composition.
Les inventeurs à l'origine de la présente sont en effet les tout premiers à avoir mis en évidence, de manière tout à fait inattendue, que cette composition constituée de trois extraits d'immortelle permet en outre, avantageusement et de manière cumulée de :
- stimuler la prolifération et la différenciation des kératinocytes,
- stimuler la desquamation et la consolidation de la fonction barrière et de la jonction dermo-épidermique (JDE). En outre, Les travaux réalisés par les inventeurs dans le cadre de l'invention ont permis de caractériser chacun de ces extraits et de mettre en évidence leur complémentarité et synergie d'action.
Dans la présente par « immortelle » on entend une espèce de plantes à fleurs de la famille des Asteraceae et du genre Helichrysum. En particulier, il peut s'agir de VHélicrysum italicum qui peut être présente tout autour de la Méditerranée. Il peut s'agir par exemple de l'immortelle décrite dans la demande de brevet français n°01/1 1224.
Dans la présente par « extrait aqueux » on entend tout extrait aqueux obtenu par tout procédé connu de l'homme du métier. Par exemple, il peut être obtenu par extraction aqueuse, par hydrodistillation, extraction hydro- glycérinée ou hydro-alcoolique.
Selon l'invention, l'extrait aqueux d'immortelle peut être tout extrait aqueux d'immortelle connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'un extrait aqueux biologique Immortelle, par exemple un extrait d'immortelle biologique de Corse de la société Greentech.
Dans la présente, l'extrait aqueux peut être obtenu par exemple à partir d'une plante et/ou d'une partie d'une plante. Il peut s'agir par exemple d'un extrait aqueux obtenu à partir de fleurs ou sommités fleuries, feuilles, graines, racines, tiges. Il peut s'agir par exemple d'un extrait obtenu à partir de fleurs entières.
Selon l'invention l'extrait aqueux peut comprendre par exemple de 0,1 à 0,3 % de sucres, par exemple 0,2% en poids de sucres, de 1 à 2 ppm de vitamine E, par exemple 1 ,7 ppm de vitamine E et de 0,2 à 0,5% en poids de polyphénols, par exemple 0,44% en poids de polyphénols dont 50ppm d'acide caféique.
Avantageusement, selon l'invention, l'extrait aqueux d'immortelle permet notamment de stimuler la loricrine, favorisant la restructuration de l'épiderme et un meilleur lissage de surface.
Dans la présente par « extrait huileux » on entend un extrait riche en acide gras et/ou en matière grasse et/ou un extrait non hydrosoluble.
Selon l'invention, l'extrait huileux peut être tout extrait huileux obtenu par tout procédé connu de l'homme du métier. Par exemple, il peut être obtenu par extraction huileuse par micro-ondes, par hyperfréquence, par extraction supercritique, par macération dans un solvant huileux, par extraction huileuse assistée par ultra sons. Il peut s'agir par exemple d'un extrait huileux biologique d'immortelle par extraction micro-ondes assistée par ultra sons selon un procédé comprenant une première étape de broyage de la sommité fleurie d'immortelle suivie d'une extraction assistée par ultrasons et par micro-ondes, puis une clarification et enfin une étape de filtration afin de récupérer l'extrait huileux.
Dans la présente, l'extrait huileux peut être obtenu à partir d'une plante et/ou d'une partie d'une plante. Il peut s'agir par exemple d'un extrait huileux obtenus à partir de fleurs ou sommités fleuries, feuilles, graines, racines, tiges, péricarpes.
Dans la présente, l'extrait huileux d'immortelle peut comprendre de 0,1 à 0,3% en poids de sucres, par exemple 0,2% de sucres, de 0,04 à 0,06% en poids de vitamine E, par exemple 0,051 % de vitamine E, de 99% à 99,9% en poids d'acides gras, par exemple 99,8% en poids d'acides gras, dont de 80 à 85% d'acide oléique, par exemple 83,4% d'acide oléique, de 6 à 8% d'acide linoléique (oméga-6), par exemple 7,3% d'acide linoléique (oméga-6), de 2 à 5% d'acide palmitique et de 2 à 4% d'acide stéarique mais se distingue surtout par sa teneur en phytostérols de 0,2% à 0,5%, par exemple 0,35% dont une majorité de béta-sitostérol 0,2% et en polyphénols de 0,01 à 0,1 %, par exemple 0,074%.
Dans la présente, le profil des stérols peut être mesuré selon tout procédé connu, par exemple selon la norme ISO 1228 ; le dosage de la Vitamine E peut être mesuré selon tout procédé connu, par exemple selon la norme NF V18-402 ; le profil des acides gras peut être mesuré selon tout procédé connu, par exemple selon la norme NF EN ISO 5508/5509 ; le profil des sucres peut être mesuré par tout procédé connu, par exemple par une technique chromatographique telle que la chromatographie ionique, le dosage des polyphénols totaux peut être mesuré par tout procédé connu, par exemple selon la norme ISO 14502-1 .
Dans la présente par « huile essentielle » on entend toute huile essentielle obtenue par tout procédé connu de l'homme du métier. Par exemple, elle peut être obtenue par hydrodistillation. Il peut s'agir par exemple d'une huile essentielle biologique d'immortelle, c'est-à-dire issue de l'agriculture biologique, par exemple une huile essentielle biologique de Corse, par exemple de la société Essences Naturelles Corses.
Dans la présente, l'huile essentielle peut être obtenue, par exemple à partir d'une plante et/ou d'une partie d'une plante. Il peut s'agir par exemple d'une huile obtenue à partir de fleurs ou sommités fleuries, feuilles, graines, racines, tiges.
Dans la présente, l'huile essentielle biologique d'immortelle peut comprendre de 35 à 50 % en poids d'acétate de néryle.
Quelle que soit la nature de l'extrait d'immortelle, les extraits peuvent être obtenus par l'une quelconque des techniques connues de l'homme du métier, par exemple par voie supercritique ou par extraction hydroalcoolique.
Dans la présente par composition cosmétique on entend toute composition à visée cosmétique, par exemple une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les organes externes, les dents et les muqueuses.
Selon l'invention, l'extrait aqueux d'immortelle peut être présent dans la composition par exemple à une concentration de 0,01 à 10% en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple de 0,01 à 5% en poids par rapport au poids total de ladite composition.
Selon l'invention, l'extrait huileux d'immortelle peut être présent dans la composition par exemple à une concentration de 0,001 à 5% en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple de 0,001 à 2% en poids par rapport au poids total de la dite composition.
Selon l'invention, l'huile essentielle peut être présente dans la composition de 0,001 % à 1 % en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple de 0,001 à 0,5% en poids par rapport au poids total de ladite composition.
Selon l'invention, la somme de l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle dans la composition de l'invention peut être de 0,01 à 16% en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple de 0,01 à 8% en poids par rapport au poids total de ladite composition.
Avantageusement, la composition de l'invention comprenant l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle permet de renforcer la fonction barrière de la peau. En outre, la composition de l'invention permet avantageusement de favoriser la cohésion entre le derme et l'épiderme, de régénérer et restructurer l'épiderme pour un meilleur lissage en surface et un teint éclatant.
Selon l'invention, quel que soit l'extrait ou le mélanges d'extraits utilisés, la composition cosmétique ou dermatologique de la présente invention peut comprendre en outre au moins un agent actif additionnel choisi, par exemple parmi un agent anti-âge, un agent hydratant, un agent apaisant ou un mélange de ces agents. Ces agents peuvent être ceux couramment utilisés dans les produits cosmétiques et/ou dermatologiques. Des exemples d'agents anti-âges utilisables sont par exemple le silicium ou la vitamine C. Des exemples d'agents hydratants utilisables sont par exemple la glycérine ou l'acide hyaluronique. Des exemples d'agents apaisants utilisables sont par exemple le bisabolol ou l'allantoïne. Ce ou ces agent(s) peuvent être utilisé(s) dans la composition de la présente invention par exemple aux concentrations usuellement utilisées et connues de l'homme du métier dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques.
La composition cosmétique selon l'invention peut comprendre un ou plusieurs adjuvants connus de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'un ou plusieurs adjuvant(s) choisi(s) parmi des agents de type esters, des agents hydratants, des agents émollients, des agents épaississants minéraux, des agents épaississants organiques, associatifs ou non, des filtres solaires organiques hydrosolubles et liposolubles, des filtres solaires minéraux, des composés siliconés, des parfums, des conservateurs, des céramides, et pseudo-céramides, des vitamines et les provitamines, des protéines, des agents séquestrants, des agents alcanisants, des agents acidifiants, des agents réducteurs, des agents oxydants, des charges minérales, des colorants ou tout autre adjuvant pouvant être cité dans le dictionnaire INCI (International Nomenclature Cosmetic Ingrédients) publié par le CTFA (Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association).
Selon l'invention, la composition cosmétique et/ou dermatologique peut, par exemple, se présenter sous toute forme connue de l'homme du métier. Il peut s'agir, par exemple d'une émulsion huile-dans-l'eau, eau-dans- l'huile, eau dans silicone, d'une émulsion multiple, d'une mini-émulsion, d'une microémulsion, d'une nano-émulsion, d'une émulsion solide, d'un gel aqueux ou hydro-alcoolique, d'une crème, d'un lait, d'une lotion, d'une pommade, d'une huile, d'un baume, d'un onguent d'un gel, d'un masque, d'une poudre, d'un support imbibé, par exemple un patch transdermique, d'une huile, d'une lotion aqueuse ou hydroalcoolique et/ou une cire.
Selon l'invention, la composition peut être sous toute forme connue de l'homme du métier dans les domaines de la cosmétique et de la dermatologie, sans aucune restriction galénique particulière.
La composition peut être sous toute forme galénique connue de l'homme du métier, par exemple sous la forme d'un onguent, d'une crème, d'une huile, d'un lait, d'une pommade, d'une poudre, d'un stick, d'un tampon imbibé, d'un patch transdermique, d'une solution, d'un gel, d'un spray, d'une lotion ou d'une suspension.
La composition selon la présente invention peut être, par exemple une composition pour le soin du visage, du corps, par exemple des compositions pour le visage et/ou le corps
La composition de l'invention peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l'homme du métier pour la fabrication d'une composition cosmétique et/ou dermatologique. Il peut s'agir, par exemple d'un simple mélange. Il peut s'agir également, par exemple, d'un procédé comprenant une étape d'incorporation d'une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-stator. Il peut s'agir également par exemple d'un procédé utilisant la Température d'Inversion de Phase (TIP), procédé classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 μιτι. Selon l'invention, la composition peut être une composition utilisée dans le traitement du vieillissement cutanée, par exemple des rides et ridules, de la perte de fermeté, de la perte d'éclat, de la perte d'élasticité et des peaux sèches. Il peut s'agir par exemple d'une composition anti-âge.
La présente invention a également pour objet un procédé de traitement cosmétique anti-âge comprenant l'application sur la peau d'une composition cosmétique comprenant :
au moins un extrait aqueux d'immortelle,
au moins un extrait huileux d'immortelle, et
- au moins de l'huile essentielle d'immortelle.
L'extrait aqueux, l'extrait huileux et l'huile essentielle sont tels que définis ci-dessus.
Pour cette application, on peut, par exemple, utiliser les formes galéniques décrites ci-dessus. L'application sur la peau peut donc être réalisée en fonction de la forme galénique utilisée.
Il peut s'agir, par exemple d'une simple application sur la peau ou d'une application accompagnée d'un massage de la peau avec la composition de la présente invention.
L'application est de préférence réalisée avec une quantité suffisante de la composition afin que toute la surface de la peau à traiter soit traitée. Il peut s'agir par exemple d'une application classique, comme une crème sur la peau. Il peut s'agir par exemple aussi d'une application pour former un masque traitant.
L'application peut être, par exemple une application quotidienne, hebdomadaire et bi-mensuelle. Il peut s'agir par exemple d'une application une fois par jour, deux fois par jour ou plus.
Avantageusement, la présente invention permet à la fois de renforcer la fonction barrière de la peau ainsi que la cohésion entre le derme et l'épiderme, de régénérer et restructurer l'épiderme pour un meilleur lissage en surface et un teint éclatant.
En outre, la présente invention permet avantageusement de préserver une peau éclatante et de lutter contre les rides en surface, c'est-à-dire en renforçant la couche cornée et en stimulant la différentiation cellulaire et la prolifération cellulaire, ainsi que les rides profondes, c'est-à-dire en renforçant la cohésion entre derme et épiderme.
De plus, les inventeurs ont clairement démontré que la présente invention utilisant l'extrait aqueux, l'extrait huileux et l'huile essentielle d'immortelle agissent de façon synergique sur la régénération et la restructuration de l'épiderme ainsi que sur l'éclat et le teint de la peau.
D'autres caractéristiques et avantages apparaîtront encore à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, donnés à titre illustratif et non limitatif.
Brève description des figures
La figure 1 représente un diagramme en bâton dans lequel l'expression protéique de la Loricrine en pourcentage d'expression par rapport à la GAPDH sur le diagramme et de la procollagen-lysine 1 , 2-oxoglutarate 5- dioxygénase 1 (PLOD1 ) en pourcentage d'expression par rapport à la GAPDH sur le diagramme dans des explants de peau traités avec un extrait huileux d'immortelle (H), un extrait aqueux d'immortelle (A), un mélange de trois extraits d'immortelle (T) par rapport à la peau non traitée (NT) et à l'expression ubiquitaire de la Glycéraldehyde 3-phosphate déhydrogénase (GAPDH).
La figure 2 représente les étapes du procédé d'extraction huileuse.
EXEMPLES
Exemple 1 : Exemple de composition selon l'invention pour le soin du visage
Un mélange de base a été réalisé avec différents composants dans une composition de base pour le soin du visage décrite dans le tableau 1 ci- dessous :
Tableau 1 : Exemple d'une composition de base pour le visage Quantité en % par rapport
Ingrédients au poids total de la
composition (%)
Stéarate de sucrose 0,5 à 6%
Distéarate de sucrose 0,5 à 6%
3 à 20%
Triglycéride caprylique/caprique
Glycérine 0,5 à 10%
Gomme xanthane 0,1 à 0,5%
Parfum Qs
Conservateurs Qs
Eau qsp 100%
A partir de cette composition de base, pour le soin du visage, 18 compositions différentes ont été fabriquées en ajoutant les différents extraits et/ou huiles essentielle d'immortelle dans les proportions indiquées ci- dessous :
Six compositions comprenant un extrait aqueux d'immortelle avec respectivement : 0,01 ; 0,05; 0,1 ; 1 ; 2 et 5% en poids par rapport au poids total de chaque composition ;
Six compositions comprenant l'extrait huileux obtenu par extraction aux micro-ondes d'immortelle avec respectivement : 0,001 ; 0,01 ; 0,05; 0,1 ; 1 et 2% en poids par rapport au poids total de chaque composition ;
Six composition comprenant de l'Huile essentielle d'immortelle avec respectivement : 0,001 ; 0,01 ; 0,02, 0,2 ; 0,5 et 1 % en poids par rapport au poids total de chaque composition.
L'extrait aqueux utilisé a été obtenu par extraction aqueuse. Il s'agit d'un extrait aqueux biologique Immortelle de Corse de la société Greentech.
L'extrait huileux utilisé a été obtenu par extraction huileuse par microondes assistée par ultra sons selon procédé décrit dans la figure 2.
L'huile essentielle utilisée a été obtenue par hydrodistillation. Il s'agit d'une huile essentielle biologique d'immortelle de Corse de la société Essences Naturelles Corses. Exemple 2 : Effet d'un extrait aqueux d'immortelle ou d'un extrait huileux d'immortelle ou de l'huile essentielle d'immortelle et/ou du mélange de l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle sur la régénération, restructuration de l'épiderme, le renforcement la fonction barrière, le lissage de la surface de la peau et le renforcement du soutien de la peau
Les expériences ont été réalisées avec un extrait aqueux d'immortelle, un extrait huileux d'immortelle, une huile essentielle d'immortelle et le mélange des trois. L'extrait aqueux bio d'immortelle de Corse a été obtenu par extraction aqueuse et fourni par la société Greentech, l'extrait huileux a été obtenu par extraction micro-ondes en interne et l'huile essentielle d'immortelle a été obtenue par hydrodistillation et fournie par la société Essences Naturelles Corses.
Cet exemple démontre clairement par une analyse transcriptomique ex-vivo par Puces à ADN que la composition de l'invention permet de stimuler la régénération et la restructuration de l'épiderme, de renforcer la fonction barrière et l'éclat du teint de la peau.
Le transcriptome est l'ensemble des ARN messager (molécules servant de matrice pour la synthèse des protéines) issu de l'expression d'une partie du génome d'un tissu cellulaire ou d'un type de cellule. La caractérisation et la quantification du transcriptome dans un tissu donné et dans des conditions données permettent d'identifier les gènes actifs, de déterminer les mécanismes de régulation d'expression des gènes et de définir les réseaux d'expression des gènes. Une des techniques utilisées pour mesurer simultanément le niveau d'expression d'un grand nombre de types différents d'ARN messager est celle de la puce à ADN. Les puces à ADN ont permis de mesurer et de visualiser très rapidement les différences d'expression entre les gènes et ceci à l'échelle d'un génome complet.
1. Matériel et méthode
1.1 Préparation des échantillons Des compositions comprenant indépendamment un extrait aqueux, un extrait huileux, une huile essentielle d'immortelle ou le mélange des trois ont été préparées aux différentes concentrations présentées dans l'exemple 1 et utilisées afin d'effectuer des analyses transcriptomiques. Après avoir réalisé un test de viabilité cellulaire tel que décrit dans l'article de Pongsavee.M (Toxicol Ind Health.) [15] qui a permis de déterminer pour chaque composition la concentration maximale non toxique diluée à appliquer^ explants de peau provenant de lifting du visage d'une patiente âgée de 55 ans ont été incubés indépendamment en présence de ces compositions pendant 24h dans du DMEM (DulbeccoA/ogt modified Eagle's minimal essential médium) sans sérum à 37°C en atmosphère humide à 5% de CO2. Un explant de peau non traité a été incubé dans les mêmes conditions. Le tableau 1 récapitule les concentrations appliquées pour chaque composition. Tableau 2 : concentrations maximales non toxiques exprimées en % pour chaque extrait d'immortelle ou l'huile essentielle ou le mélange de l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle
Figure imgf000017_0001
1.2 Extraction des ARN totaux et amplification linéaire
Après incubation, les explants de peaux ont été broyés puis les ARN totaux issus de chaque explant ont été extraits en utilisant le RNeasy Kit (Qiagen, Hilden, Germany). Les ARN totaux ont été ensuite quantifiés puis la qualité a été vérifiée en utilisant le BlOanalyzer 2100 avec le RNA 6000 Nano LabChip Kit (Agilent Technologies, Boblingen, Germany). Un RIN entre 7,5 et 10 a attesté de la bonne qualité des ARN totaux issus de chaque explant préalablement incubé ou non avec les différentes compositions précitées 1.3 Mesure de l'expression génique sur puce oligonucléotide et acquisition des data :
Les puces oligonucléotides Affymetrix Human Gene 1 .0 ST Whole Génome ont été utilisées pour chaque analyse d'expression génique (GeneChip HU Gene 1 .0, Affymetrix, Santa Clara, USA).
Une documentation complète ainsi que le protocole expérimental utilisé est décrit dans la publication de Seitz G, Bonin M, Fuchs J et al. Inhibition of glutathione-S-transferase as a treatment strategy for multidrug résistance in childhood rhabdomyosarcoma. International Journal of Oncology 2010 36:491-500. [14]) et est disponible sur le site : http://media.affymetrix.com/support/technical/datasheets/gene_1_0_st_datas heet.pdf.
Plus simplement, les cycles de rétrotranscription et d'amplification des ARN totaux en ARNc puis en ADNc ont été réalisés à l'aide des kits Ambion WT Expression (Ambion, Applied Biosystem, USA) et du kit GeneChip WT terminal Labelling and Hybridization User (Affymetrix). L'hybridation des puces et les mesures ont été réalisées par les Microarray Facility Tubingen.
Les Puces ont ensuite été scannées en utilisant le scanner GCS3000 Gene Chip (Affymetrix) et le software GCOS 1 .4. Les images scannées ont été ensuite analysées en utilisant la console Expression 1 .0 (Affymetrix) afin de convertir des mesures d'intensité lumineuse en données numériques et de normaliser ces données. L'analyse complète des données et une analyse statistique ont été réalisées grâce au logiciel Genespring GX 1 1 (Agilent Technologies) sur la base, en particulier, d'algorithmes de classification. Des différences d'expression de gènes ainsi obtenues suite à l'application des différentes compositions comprenant indépendamment soit l'extrait aqueux, l'extrait huileux, l'huile essentielle ou le mélange des trois sur des explants de peau par rapport à un explant non traité ont été rassemblées dans le tableau 3 ci-dessous. La valeur de l'expression différentielle de gènes exprimés entre la peau non traitée et la peau traitée avec les différentes compositions précitées présente une p-value < 0,01 (valeur statistique très significative).
Tableau 3 : différence d'expression qénique et signification biologique des gènes suite à l'application des différents extraits d'immortelle et du complexe des 3 sur explants de peau par rapport à un même explant non traité.
STATUT : stimulation par
GENES dbEST FONCTIONS
rapport à la peau non traitée
X4 avec HE Immortelle x2 avec extrait aqueux
Loricrine, protéine majeure
Immortelle de l'enveloppe cornée -
LOR Loricrin NM_ 000427.2
consolidant la barrière
X8 avec le cutanée
mélange extrait aqueux, huileux et huile essentielle d'immortelle
X 2 avec HE Immortelle précurseurs qui régulent la
S100A9 S100 X8 avec le
différentiation des
calcium binding NM_ 002965.3 mélange extrait p rote in A9 kératinocytes en fonction du
aqueux, huileux flux calcique
et huile essentielle d'immortelle
X 5 avec HE Immortelle précurseurs qui régulent la
S100A7 S100 X10 avec le
différentiation des
calcium binding NM_ 002963.3 mélange extrait p rote in A7 kératinocytes en fonction du
aqueux, huileux flux calcique
et huile essentielle d'immortelle
PLOD1
X4 avec le procollagen- stabilise des liaisons
mélange extrait lysine 1 , 2- intermoléculaires et
aqueux, huileux oxoglutarate NM _000302.2 renforcement de
et huile 5- l'architecture globale du
essentielle dioxygenase derme/épiderme
d'immortelle 1 X 10 avec le
stimule la prolifération des
mélange extrait kératinoyctes donnant un
EREG aqueux, huileux
NM_001432.2 pool de cellules plus
epiregulin et huile
important qui vont ensuite se
essentielle différencier
d'immortelle
X8 avec le enzyme impliqué dans la
mélange extrait
ACER1 synthèse des céramides qui
aqueux, huileux alkaline NM_133492.2 avec les shingolipides sont
et huile ceramidase 1 impliqués dans la fonction
essentielle barrière de la peau
d'immortelle
X6 avec le permet la synthèse des mélange extrait
LIPM lipase,
Shingolipides permettant au aqueux, huileux family NM_001 128215.1
stratum corneum dé jouer et huile member M
son rôle de fonction barrière essentielle d'immortelle
X8 avec le permet la synthèse des mélange extrait
LIPF lipase,
Shingolipides permettant au aqueux, huileux family NM_004190.3
stratum corneum dé jouer et huile member F
son rôle de fonction barrière essentielle d'immortelle
X10 avec le permet la synthèse des mélange extrait
LIPK lipase,
Shingolipides permettant au aqueux, huileux family NM_001080518.1
stratum corneum dé jouer et huile member K
son rôle de fonction barrière essentielle d'immortelle ce gène code pour une X3,5 avec le
KLK5 protéine impliquée dans la mélange extrait kallikrein- desquamation phénomène aqueux, huileux
BT006867.1
related essentiel pour éviter et huile peptidase 5 l'accumulation de cellules essentielle
mortes en surface d'immortelle
X2 avec le perméabilité de la barrière
SGPL1 mélange extrait
renforcée et action antisphingosine- aqueux, huileux
NM_003901.3 microbienne/contrôle de la
1 -phosphate et huile
prolifération des
lyase 1 essentielle
kératinocytes
d'immortelle
Dans le tableau précité, Xn représente le facteur de stimulation par rapport à la peau non traitée.
Dans le tableau 3 ci-dessus, seule la stimulation a été indiquée, l'absence de stimulation en présence de l'extrait huileux, aqueux ou l'huile essentielle n'a pas été indiquée.
1.4 Validation des données d'expression génique par PCR en temps réel Afin de valider au niveau génique, par une autre méthode, ces données, une expérience de QPCR a été réalisée sur deux gènes cibles LOR et PLOD1 impliqués respectivement dans la fonction barrière et l'architecture globale entre le derme et l'épiderme. Pour cela, des amorces en position 3' et 5 'de chaque gène ont été sélectionnées puis synthétisées afin d'amplifier chaque gène pris séparément. Le tableau 4 regroupe la séquence et les caractéristiques de ces amorces.
Tableau 4 : séquence et caractéristiques des amorces permettant d'amplifier LOR et PLOD1
Figure imgf000021_0001
Une étape de rétrotranscription a été tout d'abord réalisée en utilisant le système Superscript First-Srand Synthesis System for RT-PCR (Invitrogen Corp, Carlsbad, CA) des ARN issus des explants de peau précédant (Devilard E, Bladou F, Ramuz O, Karsenty G, Dalès JP, Gravis G, Nguyen C, Bertucci F, Xerri L, Birnbaum D. FGFR1 and WT1 are markers of human prostate cancer progression. BMC Cancer. 2006 Nov 30;6:272.[21 ]).
Les expériences de PCR en temps réel ont été réalisées en utilisant le LightCycler 2.0 Détection (Roche Diagnostic, Suisse) en triplicate avec la GAPDH comme gène de référence et contrôle interne. Le kit d'amplification utilisé dans cette expérience est le FastStart DNA Master plus SYBR Green I Master Mix (Roche Diagnostics, Suisse) (Archambaud C, Sansoni A, Mingueneau M, Devilard E, Delsol G, Malissen B, Malissen M. STAT6 deletion converts the Th2 inflammatory pathology afflicting Lat(Y136F) mice into a lymphoproliferative disorder involving Th1 and CD8 effector T cells. J Immunol. 2009 Mar 1 ;182(5):2680-9.[22]). 1.5 Expression des protéines Loricrine et Plodl dans les explants de peau traités avec les différents extraits d'immortelle ainsi que le complexe des trois par rapport à un explant non traité.
Afin de démontrer qu'il existe une parfaite corrélation entre ARN et protéine, une expérience de Western Blot (Hohl D, Mehrel T, Lichti U, Turner ML, Roop DR, Steinert PM. Characterization of human loricrin. Structure and function of a new class of epidermal cell envelope proteins. J Biol Chem. 1991 Apr 5;266(10):6626-36.[23]) a été réalisée en utilisant des Anticorps anti Loricrine humaine (sc-133757, Santa Cruz, CA, USA) à la concentration de 1/200 et Plodl humaine (157H00005351 -A01 , Abnova, Taipei, TAIWAN) à la concentration de 1/500 avec des anticorps anti Gapdh (SC-47724, Santa Cruz, CA, USA) comme contrôle interne à la concentration de 1/500.
2. RESULATS
2.1 Profil d'expression génique (« gene profiling »)
2.1.1. Impact sur la prolifération cellulaire du complexe composé d'un extrait aqueux d'immortelle, d'un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle sur la peau.
Les résultats des analyses d'expression de gènes indiqués dans le tableau 3 ont permis de montrer que l'expression du gène EREG est multipliée par 10 en présence du mélange de l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle par rapport à la peau non traitée et par rapport à chaque extrait pris séparément.
Aucune surexpression de ce gène n'a été détectée dans la peau non traitée ainsi que dans la peau traitée respectivement avec indépendamment soit l'extrait aqueux, soit l'extrait huileux ou l'huile essentielle. Ainsi, il existe un réel effet synergique lors du mélange de l'extrait aqueux, l'extrait huileux et l'huile essentielle d'immortelle.
Le gène EREG code pour l'épireguline, un facteur de croissance apparenté à l'EGF (Shirasawa S, Sugiyama S, Baba I, Inokuchi J, Sekine S, Ogino K,
Kawamura Y, Dohi T, Fujimoto M, Sasazuki T. Dermatitis due to epiregulin deficiency and a critical rôle of epiregulin in immune-related responses of keratinocyte and macrophage. Proc Natl Acad Sci U S A. 2004 Sep 21 ;101 (38):13921 -6 [16] entraînant la prolifération des kératinocytes, signal transmis via ses récepteurs spécifiques : le récepteur épidermique de facteur de croissance (EGFR) et l'Erbb4. Cela donne lieu à un pool de cellules kératinocytaires plus important qui vont ensuite se différencier.
De ce fait, la composition comprenant le mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle stimule la prolifération kératinocytaire assurant ainsi une meilleure régénération de l'épiderme et un meilleur lissage de surface en favorisant le renouvellement cellulaire. 2.1.2. Impact sur la différenciation épidermique du complexe composé d'un extrait aqueux d'immortelle, d'un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle sur la peau.
Les résultats des analyses d'expression génique (tableau 3) permettent de montrer que plusieurs gènes impliqués dans les différents stades de la différenciation épidermique sont surexprimés en présence du mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle par rapport à l'extrait aqueux ou huileux ou l'huile essentielle d'immortelle pris séparément et par rapport à la peau non traitée.
Ainsi, il existe un réel effet synergique lié au mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle. En effet, l'expression des gènes S100A9 et S100A7 a été respectivement multipliée par 8 et par 10 dans le complexe par rapport à l'huile essentielle d'immortelle où l'expression de ce gène a été multipliée par 2 pour S100A9 et 5 pour S100A7. Aucune stimulation de l'expression de ces gènes n'a été retrouvée dans la peau traitée uniquement avec l'extrait aqueux ou avec l'extrait huileux d'immortelle, ces gènes régulant la différenciation kératinocytaire en fonction du taux calcique dans les cellules.
De plus, le gène codant pour la loricrine (Kim BE, Howell MD, Guttman E, Gilleaudeau PM, Cardinale IR, Boguniewicz M, Krueger JG, Leung DY. TNF-α Down régulâtes Filaggrin and Loricrin through c-Jun N-terminal Kinase:
Rôle for TNF-α Antagonists to Improve Skin Barrier. J Invest Dermatol. 201 1 Feb 24 [17]), protéine essentielle à la formation de l'enveloppe cornée et dont sa composition en acides aminés confère une structure particulièrement insoluble essentielle à la fonction barrière de l'épiderme, voit son expression génique multipliée par 8 avec le mélange par rapport à la peau non traitée. L'expression génique du gène LOR a été multipliée par 2 avec l'extrait aqueux d'immortelle et par 4 avec l'Huile essentielle par rapport à la peau non traitée. De ce fait, il existe un réel effet synergique du mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle qui permet de consolider le stratum cornéum, de renforcer la fonction barrière.
Ainsi, tel que démontré ici, le mélange comprenant un extrait aqueux d'immortelle, un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle stimule la différenciation kératinocytaire permettant ainsi de restructurer l'épiderme tout en assurant un meilleur lissage de surface.
2.1.3. Impact sur la fonction barrière cutanée du complexe composé d'un extrait aqueux d'immortelle, d'un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle sur la peau.
Les résultats des analyses d'expression de gènes regroupés dans le tableau 3 ont permis de montrer que l'expression des gènes LIPM, LIPF, LIPK et ACER1 impliqués dans la synthèse des lipides épidermiques constituant un véritable ciment intercellulaire a été multipliée par 10 pour LIPK et par 6 pour LIPM, LIPF et ACER1 en présence du mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle par rapport à la peau non traitée et par rapport à l'extrait aqueux, huileux ou de l'huile essentielle pris séparément.
Aucune surexpression de ces gènes n'a été détectée dans la peau non traitée ainsi que dans la peau traitée respectivement avec soit l'extrait aqueux, soit l'extrait huileux ou l'huile essentielle.
Ainsi, il existe un réel effet synergique du mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle. Ces gènes codent pour des enzymes impliqués dans la synthèse des sphingolipides et céramides (Jungersted JM, H0gh JK, Hellgren Ll, Jemec GB, Agner T. Skin barrier response to occlusion of healthy and irritated skin: différences in trans- epidermal water loss, erythema and stratum corneum lipids. Contact Dermatitis. 2010 Dec;63(6):313-9 [18]), permettant de renforcer la fonction barrière de la peau en maintenant l'intégrité de ce ciment intercellulaire.
Tel que démontré ici, le mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle stimule la synthèse des lipides épidermiques permettant ainsi de renforcer la fonction barrière de la peau.
2.1.4. Impact sur la desquamation du complexe composé d'un extrait aqueux d'immortelle, d'un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle sur la peau.
Les résultats des analyses d'expression de gènes regroupés dans le tableau 3 ont permis de montrer que l'expression du gène KLK5 est multipliée par 3,5 en présence du mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle par rapport à la peau non traitée et par rapport à chaque extrait pris séparément.
Aucune surexpression de ces gènes n'a été détectée dans la peau non traitée ainsi que dans la peau traitée respectivement avec soit l'extrait aqueux, soit l'extrait huileux ou l'huile essentielle. De ce fait, il existe un réel effet synergique du mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle. Le gène KLK5 code pour une enzyme chymotrypsique appartenant à la famille des kalikréines impliquée dans le processus de desquamation de la peau (Meyer-Hoffert U, Wu Z, Schrôder JM. Identification of lympho-epithelial Kazal-type inhibitor 2 in human skin as a kallikrein-related peptidase 5-specific protease inhibitor. PLoS One. 2009;4(2):e4372 [19]).
Tel que démontré ici, le mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle stimule le processus de desquamation et permet ainsi de mieux lisser la peau en surface tout en assurant un teint radieux.
2.1.5. Impact sur la cohésion cutanée du complexe composé d'un extrait aqueux d'immortelle, d'un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle sur la peau.
Les résultats des analyses d'expression de gènes regroupés dans le tableau 3 ont permis de montrer que l'expression du gène PLOD1 est multipliée par 4 en présence du mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle par rapport à la peau non traitée et par rapport à chaque extrait pris séparément.
Aucune surexpression de ces gènes n'a été détectée dans la peau non traitée ainsi que dans la peau traitée respectivement avec soit l'extrait aqueux, soit l'extrait huileux ou l'huile essentielle. De ce fait, il existe un réel effet synergique du mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle. Le gène PLOD1 code pour une enzyme qui stabilise les liaisons intermoléculaires entre fibres de collagène (Takaluoma K, Hyry M, Lantto J, Sormunen R, Bank RA, Kivirikko Kl, Myllyharju J, Soininen R. Tissue-specific changes in the hydroxylysine content and cross-links of collagens and altérations in fibril morphology in lysyl hydroxylase 1 knock-out mice. J Biol Chem. 2007 Mar 2;282(9):6588-96 [20]) et fibres d'ancrage constituantes de la matrice extracellulaire et de la jonction dermoépidermique.
Tel que démontré ici, le mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle stimule le bon assemblage des fibres d'ancrage permettant ainsi d'améliorer l'architecture globale de la peau et sa fermeté. 2.2 PCR en temps réel
Les résultats de PCR en temps réel permettant de valider sur les gènes LOR et PLOD1 les données de micro-array sont regroupées dans le tableau 5.
Tableau 5 : expression qénique de LOR et PLOD1 par RT-QPCR suite à l'application de l'extrait aqueux, huileux ou de l'huile essentielle ou du mélange des 3 sur explants de peau par rapport à un même explant non traité.
Figure imgf000026_0001
Dans le tableau 5 ci-dessus « ns » signifie : non significatif
L'expression du gène LOR est multipliée par 2 (x2) dans l'extrait aqueux, par 4 dans l'huile essentielle d'immortelle, multipliée par 10 (x10) dans le mélange des trois. Pour PLOD1 , l'expression du gène est multipliée par 5 (x5) dans le mélange des trois, aucune surexpression ne fut retrouvée dans l'extrait aqueux, huileux ou de l'huile essentielle séparément ainsi que dans la peau non traitée.
Les résultats obtenus lors de cette expérience sont identiques à ceux obtenus lors de l'expérience sur puces à ADN ce qui confirme et valide les données de micro-arrays.
2.3 Expression protéique
Les résultats des expériences de Western Blot sont reproduits sur la figure 1 .
La figure représente expression en protéines de la Loricrine et PLOD1 dans les explants de peau traités avec l'extrait huileux d'immortelle, l'extrait aqueux d'immortelle, le mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle d'immortelle par rapport à la peau non traitée et à l'expression ubiquitaire de la GAPDH
Une surexpression de la Loricrine ainsi que PLOD1 a été retrouvée dans la peau traitée par rapport à la peau non traitée et par rapport à chaque extrait pris séparément. Il existe donc une corrélation entre l'expression génique et protéique.
Tel que démontré ici, le mélange comprenant l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle entraine donc une stimulation de l'expression génique de LOR et PLOD1 se traduisant également par une surexpression de leur protéine et de leur fonction. Ceci permet d'améliorer l'architecture globale de la peau, sa fermeté et de restructurer l'épiderme.
Exemple 3 : Test d'usage et d'efficacité du soin visage crème Précieuse Immortelle anti-âge et évaluation des gualités cosmétigues de cette composition
Pour répondre parfaitement et de façon spécifique au vieillissement avec perte d'éclat, de fermeté et apparition de rides et ridules tel que démontré précédemment les inventeurs ont mis au point un complexe d'actifs synergiques assurant à la fois un effet lissant, raffermissant, restructurant et antiride. De ce fait, la composition de l'invention intitulée « Crème Précieuse » a été appliquée de manière quotidienne pendant 28 jours par 26 femmes entre 36 et 60 ans dans les conditions normales d'utilisation afin d'évaluer ses qualités cosmétiques.
La composition utilisée comprenait les composés suivants :
Figure imgf000028_0001
Tous ces volontaires présentaient des rides / ridules ainsi qu'un manque d'éclat et d'élasticité au niveau du visage.
Sur le plan des performances, l'ensemble des résultats obtenus est indiqué dans le tableau 6 ci-dessous :
Tableau 6 : propriétés cosmétiques de la crème de soin visage Crème Précieuse Immortelle
induit un effet lissant significatif caractérisé par une diminution de la
Effet lissant rugosité moyenne (Ra) de moins de
10% en moyenne. Un effet lissant a été mesuré chez 69% des volontaires induit un effet antiride significatif caractérisé par une diminution du relief moyen (Rz) : moins 8% en moyenne. Un effet antiride a été mesuré chez 65 %
Effet antirides des volontaires.
Une diminution significative de l'amplitude maximale du relief (Rt) de 9 % en moyenne. Un effet antiride a été mesuré chez 73 % des volontaires. A induit une amélioration visuelle significative de l'aspect de la peau.
Le scorage réalisé par le clinicien a montré :
- une diminution significative du nombre de ridules et de rides : respectivement moins 6 % et moins 7 % en moyenne.
Scorage visuel Une amélioration de ces paramètres a été observée chez 78 % des volontaires pour les ridules et 77 % des volontaires pour les rides.
- une amélioration significative de l'effet lissant de 28 % en moyenne. Une amélioration de ce paramètre a été observée chez 96 % des volontaires.
L'évaluation de l'effet lissant a été faite en mesurant le relief cutané à l'aide du PRIMOS COMPACT (marque déposée).
L'évaluation de l'effet antirides a été faite en mesurant le relief cutané à l'aide du PRIMOS COMPACT (marque déposée).
L'évaluation de l'aspect visuel a été faite par scorage dermatologique.
L'étude a été réalisée après 28 jours d'utilisation quotidienne du produit par 27 volontaires.
Tableau 7 : appréciation des propriétés cosmétiques de la crème de soin visage Crème Précieuse Immortelle par volontaires
Evaluation de l'efficacité par appréciation des volontaires (% de satisfaction, réponses "oui tout à fait" / "oui" / "oui
un peu")
RESULTATS IMMEDIATS
La peau est souple 99%
La peau est douce 100%
La peau est confortable 100%
La peau est plus éclatante 91 %
Le teint est plus frais 93% Le teint est plus reposé 93%
La texture de la peau paraît visiblement 87% améliorée
La peau est plus belle 85%
La peau est plus ferme 81 %
Les rides et ridules sont immédiatement
76% lissées
Les rides sont réduites 76%
La peau est plus lisse 87%
La peau semble retendue 81 %
La peau parait plus jeune 78%
La peau semble repulpée 77%
La peau semble plus rebondie 75%
Le visage resplendit de jeunesse 72%
APRES 4 SEMAINES
La peau est souple 96%
La peau est douce 98%
La peau est nourrie en profondeur 92%
La peau semble intensément hydratée 89%
La peau est confortable tout au long de la
96% journée
La peau est plus éclatante 89%
Le teint est plus frais 91 %
Le teint est plus reposé 91 %
La texture de la peau paraît visiblement
87% améliorée
Le grain de peau est amélioré 83%
La peau est plus belle 83%
La peau est plus ferme 81 %
La peau semble restructurée 79%
La peau retrouve son maintien 77%
La structure de l'épiderme est renforcée 77%
Le relâchement cutané est réduit 74%
La peau est fortifiée 81 %
La peau est revitalisée 83%
La peau est plus tonique 79%
La peau est reconstruite en profondeur 74%
Les rides et ridules sont immédiatement 71 % lissées
Les rides sont réduites 63%
Les rides sont réparées 63%
Les rides d'expression sont atténuées 64%
Les rides profondes sont corrigées 60%
Les rides profondes sont moins marquées 70%
La peau est plus lisse 89%
La peau semble retendue 79%
La peau parait plus jeune 73%
La longueur des rides diminue 68%
La profondeur des rides diminue 61 %
Les rides sont comblées de l'intérieur 63%
La peau semble repulpée 69%
La peau semble plus rebondie 68%
Le visage resplendit de jeunesse 70%
Tel que présentés dans le tableau 7, des effets lissants et antirides ont été démontrés par ces études. La composition de l'invention, Crème Précieuse Immortelle a donc été reconnue comme étant très efficace par cette étude clinique ainsi que par les utilisatrices.
Exemple 4 : Test d'Usage et d'efficacité de la Crème Nuit Précieuse Immortelle et évaluation des qualités cosmétiques de cette composition
Afin de valider l'efficacité et l'action de la composition de l'invention, 49 femmes âgées entre 35 et 60 ans (moyenne d'âge est de 49,7 ans) ont été recrutées pour cette étude afin de tester l'activité antiride de cette crème nuit ainsi que les qualités cosmétiques de cette composition.
La composition de base utilisée comprenait les composés suivants :
Quantité en % par rapport
Ingrédients au poids total de la
composition
Glyceryl stéarate & PEG-100
5
stéarate
Alcool cétylique 1
Caprylic/capric tryglycéhde 16 Glycérine 5
Gomme xanthane 0,1
Parfum Q.S.
Conservateurs Q.S.
Eau Q.S.P. 100%
Huile essentielle d'immortelle 0,02%
Extrait aqueux d'immortelle 1 %
Extrait huileux d'immortelle 0,5%
Cette composition est désignée ci-dessous « crème nuit précieuse ».
De ce fait, la composition de la Crème Nuit Précieuse a été appliquée de manière quotidienne pendant 28 jours par 49 femmes dans les conditions normales d'utilisation. Tous ces volontaires présentaient des rides / ridules. Sur le plan des performances antirides, l'ensemble des résultats figure dans le tableau 8 ci-dessous :
Tableau 8 : propriétés antirides de la Crème Nuit Précieuse Immortelle
Figure imgf000032_0001
Dans le tableau ci-dessus :
« N » correspond au nombre de sujets
« J0 » correspond au premier jour de traitement,
« J28 » correspond au 28eme jour de traitement,
« # » correspond aux variations par rapport aux valeurs initiales,
« Delta » correspond au(x) différence(s) entre les moyennes au(x) temps d'évaluation considéré(s) et les valeurs initiales,
« p » correspond au seuil de validité statistique, une valeur de p<0.05 est très significative ; une valeur de p est proche de la significativité lorsque 0,05 < p < 0,10 ; une valeur de p > 0,10 est non significative. Le test statistique utilisé pour cette analyse est un test de Student.
Sur le plan des performances, l'ensemble des résultats figure dans le tableau 9 ci-dessous :
Tableau 9 : Jugement global de la « crème nuit précieuse Immortelle »
A L'APPLICATION
La texture s'applique facilement 96%
La texture pénètre rapidement 96%
Le produit laisse un fini non gras 92%
Le produit laisse un fini non collant 90%
Le produit laisse un fini non brillant 98%
La peau est souple 98%
La peau est douce 98%
La peau est immédiatement délassée 94%
AU REVEIL
Les sensations de tiraillement disparaissent 96%
La peau est nourrie en profondeur 94%
La peau est intensément hydratée 96%
La peau est confortable 96%
La peau est réparée 96%
La peau est régénérée 92%
La peau semble renforcée 92% La peau est éclatante 86%
Le teint est frais 92%
Le teint est reposé 94%
La peau est plus belle 94%
La texture de la peau parait améliorée 94%
La texture de la peau est plus belle 90%
Le grain de peau est amélioré 82%
La peau est plus ferme 78%
La peau semble restructurée 80%
Les traits sont moins marqués 88%
La peau est défroissée 82%
Les rides et ridules sont immédiatement lissées 61 %
Les rides sont réduites 65%
Au réveil, la peau est plus lisse 82%
Au réveil, la peau semble retendue 71 %
Au réveil, la peau parait plus jeune 67%
Au réveil, la peau semble repulpée 73%
Au réveil, la peau semble plus rebondie 69%
APRES 4 SEMAINES, NUIT APRES NUIT
La peau est souple 96%
La peau est douce 98%
La peau est délassée 92%
Les sensations de tiraillement disparaissent 90%
La peau est nourrie en profondeur 88%
La peau est plus confortable 92%
La peau est réparée 84%
La peau est régénérée 82%
L'épiderme semble profondément réparé 69%
La peau est reconstruite en profondeur 65%
L'épiderme semble renforcé 73%
La peau est éclatante 80%
Le teint est frais 78%
Le teint est reposé 84%
La peau est plus belle 84% La texture de la peau s'améliore 92%
La peau est plus ferme 78%
La peau semble restructurée 73%
La peau retrouve son maintien 73%
Le relâchement cutané est réduit 78%
La peau est fortifiée 80%
La peau est revitalisée 80%
La peau est plus tonique 78%
Les traits sont moins marqués 76%
La peau est défroissée 71 %
Les rides et ridules sont lissées 69%
Un jugement positif en tant que crème nuit précieuse et appréciation favorable des volontaires pour les critères suivants (en % des volontaires interrogés - réponses "oui tout à fait" / "oui" / "oui un peu").
La composition comprenant le mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle a donc été reconnue comme étant très efficace par les utilisateurs après 4 semaines d'applications.
Exemple 5 : Test d'Usage et d'efficacité du Fluide Précieux Immortelle et évaluation des qualités cosmétiques de cette composition
Afin de valider l'efficacité et l'action des concentrés actifs spécifiques, 50 femmes âgées entre 35 et 60 ans (moyenne d'âge est de 51 ans) ont été recrutées pour cette étude afin de tester l'activité antiride de cette crème nuit ainsi que les qualités cosmétiques de cette composition. De ce fait, la composition du Fluide Précieux a été appliquée de manière quotidienne pendant 28 jours par 50 femmes dans les conditions normales d'utilisation. Tous ces volontaires présentaient des rides / ridules.
La composition utilisée comprenait les composés suivants :
Quantité en % par rapport au
Ingrédients
poids total de la composition
Glycéryl stéarate & PEG-100 stéarate 1
Alcool cétylique 1 ,5
Caprylic/capric tryglycéhde 15
Glycérine 5 Gomme xanthane 0,1
Parfum Q.S.
Conservateurs Q.S.
Eau Q.S.P. 100%
Huile essentielle d'immortelle 0,02%
Extrait aqueux d'immortelle 1 %
Extrait huileux d'immortelle 0,5%
Cette composition est désignée ci-dessous « fluide précieux».
Sur le plan des performances antirides, l'ensemble des résultats figure dans le tableau 10 ci-dessous :
Tableau 10 : propriétés antirides du Fluide Précieux Immortelle
Figure imgf000036_0001
Dans le tableau ci-dessus :
« N » correspond au nombre de sujets
« J0 » correspond au premier jour de traitement, « J28 » correspond au 28eme jour de traitement,
« # » correspond aux variations par rapport aux valeurs initiales, « Delta » correspond au(x) différence(s) entre les moyennes au(x) temps d'évaluation considéré(s) et les valeurs initiales,
« p » correspond au seuil de validité statistique, une valeur de p<0.05 est très significative ; une valeur de p est proche de la significativité lorsque 0,05 < p < 0,10 ; une valeur de p > 0,10 est non significative. Le test statistique utilisé pour cette analyse est un test de Student.
Sur le plan des performances, le Fluide Précieux a été reconnu comme étant très efficace par les utilisateurs selon le tableau 1 1 . Après 4 semaines d'utilisation, les actions revendiquées sur le complexe actif sont également validées par les volontaires.
Tableau 1 1 : Jugement global du Fluide Précieux Immortelle
A L'APPLICATTION
La texture s'applique facilement 100%
La texture pénètre rapidement 98%
Le produit laisse un fini non gras 96%
Le produit laisse un fini non collant 98%
Le produit laisse un fini non brillant 94%
RESULTATS IMMEDIATS
La peau est souple 96%
La peau est douce 100%
La peau est intensément hydratée 84%
La peau est matifiée 66%
La peau est plus éclatante 80%
Le teint est plus frais 84%
Le teint est plus reposé 72%
La texture de la peau paraît visiblement améliorée 68%
La peau est plus belle 76%
La peau est plus ferme 64%
La peau est plus lisse 68%
La peau est retendue 64%
La peau semble repulpée 54% APRES 4 SEMAINES
La peau est souple 98%
La peau est douce 98%
La peau est veloutée 86%
La peau est intensément hydratée 76%
La peau est matifiée 62%
La peau est plus éclatante 78%
Le teint est plus frais 80%
Le teint est plus reposé 74%
La texture de la peau paraît visiblement améliorée 72%
Le grain de peau est amélioré 76%
La peau est plus belle 74%
La peau est plus ferme 64%
La peau semble restructurée 58%
La peau retrouve son maintien 62%
Le relâchement cutané est réduit 62%
La peau est fortifiée 64%
La peau est revitalisée 72%
La peau est plus tonique 64%
La peau est plus lisse 80%
La peau semble retendue 70%
La peau parait plus jeune 66%
La peau semble repulpée 60%
Le Fluide Précieux a donc été reconnu comme étant très efficace par les utilisateurs. Après 4 semaines d'utilisation, les actions revendiquées sur le complexe actif sont validées par les volontaires comme le montre le tableau 10 ci-dessus.
Un jugement positif en tant que Fluide Précieux antirides pour peau normale et mixte et appréciation favorable des volontaires pour les critères suivants (en % des volontaires interrogés - réponses "oui tout à fait" / "oui" / "oui un peu").
Le Fluide Précieux a donc été reconnu comme étant très efficace par les utilisateurs après 4 semaines d'applications. La composition comprenant le mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle a donc été reconnue comme étant très efficace par les utilisateurs après 4 semaines d'applications. Exemple 6 : Effet d'un extrait aqueux d'immortelle ou d'un extrait huileux d'immortelle ou de l'huile essentielle d'immortelle et/ou du mélange de l'extrait aqueux, huileux et de l'huile essentielle sur la régénération, restructuration de l'épiderme, le renforcement la fonction barrière, le lissage de la surface de la peau et le renforcement du soutien de la peau
Les expériences ont été réalisées avec un extrait aqueux d'immortelle, un extrait huileux d'immortelle, une huile essentielle d'immortelle et le mélange des trois. L'extrait aqueux bio d'immortelle de Corse a été obtenu par extraction aqueuse et fourni par la société Greentech, l'extrait huileux a été obtenu par extraction micro-ondes en interne et l'huile essentielle d'immortelle a été obtenue par hydrodistillation et fournie par la société Essences Naturelles Corses.
Dans cet exemple la mesure de l'expression génique de gènes particulier a été étudiée selon le procédé décrit dans l'exemple 2 précité. En particulier, la préparation des échantillons, l'extraction des ARN totaux, l'amplification linéaire et la mesure de l'expression génique sur puce oligonucléotide et acquisition des données ont été réalisées selon les procédés décrits dans l'exemple 2 précité.
Des différences d'expression de gènes ainsi obtenues suite à l'application d'une composition comprenant indépendamment un extrait aqueux, un extrait huileux, une huile essentielle d'immortelle ou un mélange des trois sur des explants de peau par rapport à un explant non traité ont été rassemblées dans le tableau 12 ci-dessous. La valeur de l'expression différentielle de gènes exprimés entre la peau non traitée et la peau traitée avec les différentes compositions précitées présente une p-value < 0,01
(valeur statistique très significative). Tableau 12 : différence d'expression génique et signification biologique des gènes suite à l'application d'une composition comprenant l'extrait aqueux, l'extrait huileux, et l'huile essentielle d'immortelle sur explants de peau par rapport à un même explant non traité.
STATUT : stimulation
GENES dbEST FONCTIONS par rapport à la peau non traitée
X4 avec le mélange
Liaison (« crosslink ») entre
extrait
TGM3 l'involucrine et la loricrine
aqueux, Transglutaminase NM 003245.3 pour former l'enveloppe
huileux et cornée assurant son
huile insolubilité
essentielle d'immortelle
X2 avec le mélange
Liaison (« crosslink ») entre
extrait
TGM1 l'involucrine et la loricrine
aqueux, Transglutam NM 000359.2 pour former l'enveloppe
huileux et 1 cornée assurant son
huile insolubilité
essentielle d'immortelle
X5 avec le mélange
Facteur de transcription extrait
ELF3 E74 du
induisant spécifiquement aqueux, type facteur 3 AF517841.1
l'expression des gènes de la huileux et (« ELF3 E74 like- famille SPRR2 huile factor 3 »)
essentielle d'immortelle
X15 avec le
Petite protéine mélange 2C riche en extrait proline Impliqué dans la formation aqueux,
BC120937.1
(«small proline- cornée huileux et rich protein 2 C huile (SPRR2C) » essentielle d'immortelle
X16 avec le
Petite protéine mélange 2D riche en extrait proline Impliqué dans la formation aqueux,
NM 006945.4
(«small proline- cornée huileux et rich protein 2D huile (SPRR2D) » essentielle d'immortelle Dans le tableau 12 précité, Xn représente le facteur de stimulation par rapport à la peau non traitée.
Dans le tableau 12 ci-dessus, seule la stimulation a été indiquée, l'absence de stimulation en présence de l'extrait huileux, aqueux ou l'huile essentielle n'a pas été indiquée.
Les résultats obtenus dans le tableau 12 précité montre clairement l'impact sur la différenciation épidermique du mélange composé d'un extrait aqueux d'immortelle, d'un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle sur la peau.
Les résultats des analyses d'expression génique, tableau 12 précité permettent de montrer que plusieurs gènes impliqués dans les stades terminaux de différenciation épidermique sont surexprimés en présence du mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle par rapport à l'extrait aqueux ou huileux ou l'huile essentielle d'immortelle pris séparément et par rapport à la peau non traitée. Ainsi, il existe un réel effet synergique lié au mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle. En effet, l'expression des gènes TGM3 et TGM1 a été respectivement multipliée par 4 et par 2 par le mélange comprenant l'huile essentielle d'Immortelle, l'extrait aqueux d'immortelle et l'extrait huileux d'immortelle. Aucune stimulation de l'expression de ces gènes n'a été retrouvée dans la peau traitée uniquement avec, l'huile essentielle d'Immortelle ou avec l'extrait aqueux ou avec l'extrait huileux d'immortelle (résultats non présentés). Ces deux gènes TGM3 et TGM1 codent pour des enzymes catalysant des réactions de pontages protéiques entre l'involucrine et la loricrine dont l'expression est stimulée par 8 par le mélange comprenant le mélange comprenant l'huile essentielle d'Immortelle, l'extrait aqueux d'immortelle et l'extrait huileux d'immortelle essentiellement, formant ainsi un complexe protéique macromoléculaire particulièrement stable et insoluble (Russell, L. J., DiGiovanna, J. J., Rogers, G. R., Steinert, P. M., Hashem, N., Compton, J. G., and Baie, S. J. (1995). Mutations in the gene for transglutaminase 1 in autosomal récessive lamellar ichthyosis. Nat Genêt, 9(3):279-83 [24]). Ces enzymes ont donc un rôle important dans la différenciation terminale de l'épiderme permettant de consolider le stratum corneum et de renforcer la fonction barrière. De plus, l'expression des gènes SPRR2C, SPRR2D et ELF3 E74 a été respectivement multipliée par 15, par 16 et par 5 par le mélange comprenant l'huile essentielle d'Immortelle, l'extrait aqueux d'immortelle et l'extrait huileux d'immortelle. Aucune stimulation de l'expression de ces gènes n'a été retrouvée dans la peau traitée uniquement avec, l'huile essentielle d'Immortelle ou avec l'extrait aqueux ou avec l'extrait huileux d'immortelle. Les gènes SPRR2C et SPRR2D (de Koning HD, van den Bogaard EH, Bergboer JG, Kamsteeg M, van Vlijmen-Willems IM, Hitomi K, Henry J, Simon M, Takashita N, Ishida- Yamamoto A, Schalkwijk J, Zeeuwen PL. Expression profile of cornified envelope structural proteins and keratinocyte differentiation-regulating proteins during skin barrier repair. Br J Dermatol. 2012 Feb 13. [25]) sont des constituants de l'enveloppe cornée et présentent une importante homologie de séquences avec la loricrine et l'involucrine. Le gène ELF3 E74 code pour un facteur de transcription entraînant la stimulation de l'expression des gènes de la famille SPRR2 (Oettgen P, Kas K, Dube A, Gu X, Grall F, Thamrongsak U, Akbarali Y, Finger E, Boltax J, Endress G, Munger K, Kunsch C, Libermann TA. Characterization of ESE-2, a novel ESE-1 -related Ets transcription factor that is restricted to glandular epithelium and differentiated keratinocytes. J Biol Chem. 1999 Oct 8;274(41 ):29439-52. [26]).
Ainsi, tel que démontré ici, le mélange comprenant un extrait aqueux d'immortelle, un extrait huileux d'immortelle et de l'huile essentielle d'immortelle stimule la différenciation terminale kératinocytaire permettant ainsi de restructurer l'épiderme tout en assurant un meilleur lissage de surface. Ceci renforce et confirme les résultats obtenus dans l'exemple 2 précité.
Exemple 7 : Test d'usage et d'efficacité du soin visage crème baume veux Immortelle et évaluation des gualités cosmétigues de cette composition Afin de valider l'efficacité et l'action des concentrés actifs spécifiques, 51 fennnnes âgées entre 35 et 60 ans (moyenne d'âge était de 50 ans) ont été recrutées pour cette étude afin de tester l'activité antiride de cette crème baume yeux ainsi que les qualités cosmétiques de cette composition. De ce fait, la composition a été appliquée de manière biquotidienne pendant 28 jours par 51 femmes dans les conditions normales d'utilisation. Tous ces volontaires présentaient des rides / ridules.
La composition utilisée comprenait les composés suivants :
Figure imgf000043_0001
Cette composition est désignée ci-dessous « baume yeux».
Sur le plan des performances une mesure de l'aspect visuel de la peau a été effectuée.
L'évaluation de la fermeté de la peau a été faite en mesurant le relief cutané par scorage clinique. Le médecin en charge de l'étude a effectué une évaluation visuelle en début et en fin d'étude selon une échelle qui s'étend de peau relâchée à peau ferme. L'évaluation de la rugosité de la peau a été faite par scorage clinique. Le médecin en charge de l'étude a effectué une évaluation visuelle en début et en fin d'étude de la rugosité de la peau selon une échelle de peau rugueuse à peau lisse.
Les résultats obtenus figurent dans le tableau 13 ci-dessous. Tableau 13 : propriétés antirides de la baume veux
Figure imgf000044_0001
Dans le tableau 13 ci-dessus :
« N » correspond au nombre de sujets
« J0 » correspond au premier jour de traitement,
« J28 » correspond au 28eme jour de traitement,
« # » correspond aux variations par rapport aux valeurs initiales,
« Delta » correspond au(x) différence(s) entre les moyennes au(x) temps d'évaluation considéré(s) et les valeurs initiales,
« p » correspond au seuil de validité statistique, une valeur de p<0,0001 est très significative ; une valeur de p est proche de la significativité lorsque 0,05 < p < 0,10 ; une valeur de p > 0,10 est non significative. Le test statistique utilisé pour cette analyse est un test de Student.
Après 28 jours d'utilisation, le baume yeux présente un effet significatif au niveau de la fermeté et du lissage cutané.
Sur le plan des performances, le baume yeux a également été reconnu comme étant très efficace par les utilisateurs selon le tableau 14. Après 4 semaines d'utilisation, les actions revendiquées sur le complexe actif ont donc été validées par les volontaires.
Sur le plan des performances, l'ensemble des résultats figure dans le tableau 14 ci-dessous : Tableau 14 : Jugement global de la « baume veux »
A L'APPLICATION
La texture s'applique facilement 100%
La texture pénètre rapidement 96%
Le produit laisse un fini non gras 88%
Le produit laisse un fini non collant 96%
L'application fournit un effet de fraîcheur 84%
Le produit laisse un fini velouté 86%
RESULTAT IMMEDIAT
La peau est souple 90%
La peau est douce 93%
La peau est veloutée 96%
La peau est nourrie en profondeur 84%
Le regard est plus lumineux 73%
Le contour de l'œil est plus frais 67%
Le produit réduit les marques de fatigue 70%
Les cernes sont atténuées 63%
Les poches semblent réduites 65%
Le contour de l'œil est décongestionné 74%
Le regard est revigoré 73%
Le contour de l'œil est plus ferme 70%
Le contour de l'œil est lissé 76%
Les ridules sont réduites 70%
APRES 4 SEMAINES
La peau est souple 92%
La peau est douce 92%
La peau est veloutée 80%
La peau est nourrie en profondeur 73%
La peau est plus confortable 78%
La peau est apaisée 72%
La peau est plus radieuse 62% Le contour de l'œil est plus frais 65%
Le produit réduit les marques de fatigue 65%
Les cernes sont atténuées 65%
Le regard est revigoré 63%
Le contour de l'œil est plus ferme 66%
La structure de la peau est raffermie 73%
Le contour de l'œil est lissé 72%
Les ridules sont réduites 69%
Les rides d'expressions sont réduites 69%
Les rides de la patte d'oie sont réduites 67%
La peau semble ferme 61 %
La regard semble revitalisé 61 %
Un jugement positif en tant que baume yeux et une appréciation favorable des volontaires pour les critères suivants (en % des volontaires interrogés - réponses "oui tout à fait" / "oui" / "oui un peu") ont été observés.
La composition comprenant le mélange de l'extrait aqueux, huileux et l'huile essentielle d'immortelle a donc été reconnue comme étant très efficace par les utilisateurs après 4 semaines d'applications.
Cet exemple démontre donc clairement l'effet anti-âge d'une composition comprenant un extrait huileux, aqueux et une huile essentielle d'immortelle.
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Claims

REVENDICATIONS
1 . Composition cosmétique ou dermatologique comprenant :
au moins un extrait aqueux d'immortelle,
- au moins un extrait huileux d'immortelle, et
au moins de l'huile essentielle d'immortelle.
2. Composition selon la revendication 1 dans laquelle la concentration de l'extrait aqueux d'immortelle est de 0,01 % à 10% en poids rapport au poids total de la composition.
3. Composition selon la revendication 1 ou 2 dans laquelle la concentration en extrait huileux est de 0,001 % à 5% en poids rapport au poids total de la composition.
4. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 dans laquelle la concentration en huile essentielle d'immortelle est de 0,001 % à 1 % en poids rapport au poids total de la composition.
5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, ladite composition étant sous l'une des formes choisies parmi une crème, un lait, une lotion, une huile, un baume, un onguent un gel, un masque.
6. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, ladite composition étant une composition anti-âge.
7. Utilisation cosmétique d'une composition selon la revendication 1 dans un traitement anti-âge.
8. Procédé de traitement cosmétique anti-âge comprenant l'application sur la peau d'une composition cosmétique selon la revendication 1 .
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