WO2012052595A1 - Aminociclitoles bicíclicos y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales - Google Patents
Aminociclitoles bicíclicos y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales Download PDFInfo
- Publication number
- WO2012052595A1 WO2012052595A1 PCT/ES2011/070729 ES2011070729W WO2012052595A1 WO 2012052595 A1 WO2012052595 A1 WO 2012052595A1 ES 2011070729 W ES2011070729 W ES 2011070729W WO 2012052595 A1 WO2012052595 A1 WO 2012052595A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- tetraol
- group
- octahydrobenzo
- compound
- oxazole
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Ceased
Links
- 0 *=C(*[C@]1[C@@]([C@]([C@]2OCc3ccccc3)OCc3ccccc3)OCc3ccccc3)N[C@]1[C@]2OCc1ccccc1 Chemical compound *=C(*[C@]1[C@@]([C@]([C@]2OCc3ccccc3)OCc3ccccc3)OCc3ccccc3)N[C@]1[C@]2OCc1ccccc1 0.000 description 2
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7008—Compounds having an amino group directly attached to a carbon atom of the saccharide radical, e.g. D-galactosamine, ranimustine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/24—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
- C07D235/30—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
- C07D263/52—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D263/54—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles
- C07D263/58—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
- C07H5/04—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to nitrogen
- C07H5/06—Aminosugars
Definitions
- the present invention relates to bicyclic aminociclitols and their use for the treatment of lysosomal diseases such as Gaucher's disease. Also in the present invention the synthesis process of said compounds is described.
- Diseases caused by lysosomal storage disorders are a type of rare congenital diseases, caused by metabolic disorders that cause certain lipids to accumulate in the lysosomes.
- the symptoms of these diseases vary depending on the type of disorder, although they manifest themselves already in the first months or years of life of the sick, who usually die at an early age.
- developmental delay, difficulty in movement, stroke, dementia, deafness, blindness, death in organs (liver, heart, lung, etc.) and abnormal bone growth stand out.
- Sphingolipids are complex lipids derived from sphingosine, an unsaturated alcohol of 18 carbons, which are very abundant in biological membranes and some are precursors of compounds involved in cell signaling processes. In some of the lysosomal diseases the accumulation of sphingolipids occurs, because the enzymes that hydrolyze these molecules have mutations that prevent their proper cellular function.
- Gaucher's disease is one of these diseases classified as lysosomal storage disorders, characterized by the accumulation of sphingolipid glucosylceramide (GlcCer) in lysosomes.
- the disease is caused by the deficient activity of the enzyme glucocerebrosidase, a beta- glucosidase that hydrolyzes GicCer into glucose and ceramide, because said enzyme has several mutated forms.
- the cellular levels of the enzyme mutated and folded incorrectly, are abnormally low due to its premature degradation by specific endoproteases in the endoplasmic reticulum.
- WO2009 / 066069 describes the use of a series of compounds, which act as pharmacological chaperones of certain enzymes folded incorrectly, for the treatment of diseases related to disorders in lysosomal storage.
- the need to use high concentrations of pharmacological chaperones can also induce toxicity and selectivity problems in addition to increasing unwanted unspecific activities.
- the present invention relates to a family of compounds of general formula (I), whereby better efficiencies and greater results against Gaucher disease are achieved. This is due to the fact that with these compounds a greater potentiation of the ⁇ -glucocerebrosidase enzyme (enzyme directly related to Gaucher's disease) in lymphoblasts is achieved, compared to compounds already described in the State of the Art, obtaining very promising results at very low concentrations (nM) in cellular assays, which indicates a greater activity of these new compounds with respect to those described above.
- nM concentrations
- X and W are the same or different and are selected from -O-, -S- and a group -NR-i; Y is a group - NR 2 ;
- Ri and R 2 are identical or different and are selected from H, alkyl C-
- X is a group -NR ⁇
- X is a group -S-.
- W is O.
- W is a -NRi group.
- W is a group -S-.
- Ri is H.
- Ri is a Ci-Ci 8 alkyl group, preferably Cg.
- This alkyl group may be substituted by a cycloalkyl or by an aryl group, the preferred aryl group being a phenyl.
- Ri is a cycloalkyl
- Ri is an aryl group, preferably a phenyl.
- R 2 is H.
- R 2 is a Crds alkyl group, preferably
- R 2 is a cycloalkyl
- R 2 is an aryl group, preferably a phenyl.
- the compound of general formula (I) is selected from the following list:
- the compound of general formula (I) is selected from:
- a second aspect of the present invention relates to a pharmaceutical composition, which comprises a compound of general formula (I) or its salts, solvates or prodrugs, together with one or more pharmaceutically acceptable excipients and at least one pharmaceutically acceptable carrier, adjuvant and / or vehicle.
- the pharmaceutical composition further comprises one or more active ingredients.
- the pharmaceutical composition is presented in a form adapted to parenteral, oral, sublingual, nasal, intrathecal, bronchial, lymphatic, rectal, transdermal or inhaled administration.
- a third aspect of the present invention relates to the use of the compound of general formula (I) or of the pharmaceutical composition for the manufacture of a medicament.
- the use as a medicine of the compound of general formula (I) or of the pharmaceutical composition comprising it is for the treatment and / or prevention of a disease related to lysosomal disorders.
- the medicament is used for the treatment and / or prevention of Gaucher's disease.
- the medicament is presented in a form adapted to parenteral, oral, sublingual, nasal, intrathecal, bronchial, lymphatic, rectal, transdermal or inhaled administration.
- a fourth aspect of the present invention relates to a synthesis process of the compound of general formula (I), which comprises the reaction of a compound of general formula (II) with a compound of general formula (III) to give the compound of general formula (I):
- T and Z are the same or different and are selected from a group -OH, -SH and a group -NHRi.
- X is selected from -O-, -S- and a group -NRi;
- Y is a group - NR 2 ;
- W is selected from -O-, -S- and a group -NR ⁇
- Ri and R 2 are the same or different and are selected from H, C 8 alkyl, a cycloalkyl and an aryl group;
- NCS isoticionate
- T is a -OH group
- T is a -NHRi group.
- T is a group -SH.
- Z is a -OH group
- Z is a -NHRi group.
- Z is a group -SH.
- X is -O-.
- X is a -NRi group
- X is a group -S-;
- W is -O-.
- W is a group -NRi
- W is a group -S-;
- R-i is H.
- Ri is CiC-s alkyl, preferably C 9 .
- This alkyl group may be substituted by a cycloalkyl or by an aryl group, the preferred aryl group being a phenyl.
- Ri is a cycloalkyl
- Ri is a group preferably a phenyl.
- R 2 is H.
- R 2 is a Ci-Ci 8 alkyl group, preferably C 6 -C g , or a group (CH ⁇ Ph.
- R 2 is a cycloalkyl
- R 2 is an aryl group, preferably a phenyl.
- alkyl refers in the present invention to aliphatic, linear or branched chains, having 1 to 18 carbon atoms, for example, methyl, ethyl, n-propyl, ⁇ -propyl, n- butyl, tert-butyl, sec-butyl, n-pentyl, etc.
- the alkyl radicals may be optionally substituted by one or more substituents such as halogen, hydroxyl, azide, carboxylic acid or a substituted or unsubstituted group selected from amine, amido, carboxylic ester, ether, thiol, acylamino or carboxamide, alkoxide, thiol , amino, acylamino, cyano, carboxylate, carboxamide, carboxy ester, aryl or heteroaryl or combinations of these groups.
- substituents such as halogen, hydroxyl, azide, carboxylic acid or a substituted or unsubstituted group selected from amine, amido, carboxylic ester, ether, thiol, acylamino or carboxamide, alkoxide, thiol , amino, acylamino, cyano, carboxylate, carboxamide, carboxy ester, aryl or heteroaryl or combinations of these groups.
- alkyl group When the alkyl group is substituted, it is preferably substituted by one or more amine, amide or ether groups, which in turn may or may not be substituted by alkyl, amide, cycloalkyl or ethers groups and these, in turn, may also be substituted or no.
- cycloalkyl refers to a stable monocyclic or bicyclic radical of 3 to 10 members, which is saturated or partially saturated, and which only consists of carbon and hydrogen atoms, such as cyclohexyl or adamantyl.
- aryl refers, in the present invention, to single or multiple aromatic rings, having between 5 and 18 links in which a proton has been removed from the ring.
- the aryl group has 5 to 7 carbon atoms, even more preferably it is a phenyl.
- the aryl groups are for example, but not limited to phenyl, naphthylo, diphenyl, indenyl, phenanthryl or anthracil.
- the aryl radicals may be optionally substituted by one or more substituents.
- salts preferably pharmaceutically acceptable or substantially pure.
- pharmaceutically acceptable salt is meant, among other things, compounds that have a pharmaceutically acceptable level of purity except for pharmaceutical additives normally considered as such as diluents, vehicles and that do not include material that is considered toxic at normal dosage levels.
- the purity levels for the drugs are preferably between 50% and more preferably 70% and even more preferably 90%. In a preferred embodiment of the present invention the level of purity is about 95% pure with respect to the compound of the invention or its salts.
- the two reactions are typically carried out in solution.
- the salt can precipitate in solution and can be collected by filtration or solutions of the compound of the invention and the desired acid or base can be recovered, as appropriate.
- the salt can be precipitated from a solution and collected by filtration or can be recovered by evaporation of the solvent.
- the degree of ionization in the salt can vary between completely ionized to almost non-ionized.
- Salt by the addition of pharmaceutically acceptable acids refers to those salts that retain the biological effectiveness and properties of free bases, which are not undesirable neither biologically nor otherwise, and which are formed with inorganic acids such as, but not limited to , hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid and the like, and organic acids such as, but not limited to, acetic acid, 2,2-dichloroacetic acid, adipic acid, alginic acid, ascorbic acid, aspartic acid, benzensulfonic acid, benzoic acid, 4-acetamidobenzoic acid, acid Canphonic acid, camphor-10-sulfonic acid, capric acid, caproic acid, caprylic acid, carbonic acid, cinnamic acid, citric acid, cyclamic acid, dodecyl silfuric acid, ethan-1, 2-disulfonic acid, ethanesulfonic acid, 2- hydroxyethanesulfonic acid,
- “Pharmaceutically acceptable base addition salt” refers to those salts that retain the biological effectiveness and properties of free acids, which are not undesirable either biologically or otherwise. These salts are prepared from the addition of an inorganic base or an organic base to the free acid. Salts derived from inorganic bases include, but are not limited to, sodium, potassium, lithium, ammonium, calcium, magnesium, iron, zinc, copper, manganese, aluminum and the like.
- Salts derived from organic bases include, but are not limited to, salts of primary, secondary and tertiary amines, substituted amines that include natural substituted amines, cyclic amines and basic ion exchange resins, such as ammonia, isopropylamine, trimethylamine, diethylamine, triethylamine, tripropylamine, diethanolamine, ethanolamine, deanol, 2- methylaminoethanol, 2-diethylaminoethanol, dicyclohexylamine, lysine, arginine, histidine, caffeine, procalna, hydrabamine, choline, betaine, benetamine, benzathine, ethylenediamine, glucosaline, methylglutamine, tobromine, tobromine purines, piperazine, N-ethylpiperidine, polyamine resins and the like.
- basic ion exchange resins such as ammonia, isopropylamine, trimethyl
- Figure 1 Inhibition (%) on human ⁇ -glucocerebrosidase in fibroblasts after 24 h of incubation at different concentrations of inhibitor.
- (+ Hc, d were obtained by coupling reaction of aminocyclitols 6-13 ⁇ Scheme 1) or diaminocyclitol 14 (Scheme 2) with the appropriate isothiocyanate of general formula R 2 NCS. Subsequent cyclization of the resulting thiourea using an excess of mercury oxide (II) provided the corresponding bicyclic isoureas and guanidine precursors (19-22 and 25).
- Amino alcohols 6-8, 10 and 12 were obtained from chonduritol B epoxide following procedures outlined above (González-Bulnes, P. et al. In Carbohydr. Res. 2007, 342, 1947-1952 and Serrano, P. and col. in J. Org. Chem. 2005, 70, 7829-7840).
- the W-nonyl amino alcohols 9, 11 and 13 were synthesized by reductive amination of the corresponding amino alcohols (8, 10 and 12) with the nonanal aldehyde (Scheme 1).
- Bicyclic isareas 3a-c were found to be inhibitors of a-glucosidases tested, with IC50 values between 0.6 and 0.9 ⁇ for baker's yeast ⁇ -glucosidase and between 6 and 34 ⁇ for rice ⁇ -glucosidase. However, these compounds showed less than 6% inhibition of human lysosomal ct-glucosidase in fibroblasts after 24 h of incubation at 50 ⁇ .
- isoureas 4a-c and guanidines 5c were found to be inhibitors of both almond ⁇ -glucosidase and bovine liver ⁇ -galactosidase with IC50 values of the order of ⁇ and even nM. In contrast, these compounds did not significantly inhibit human lysosomal ⁇ -galactosidase in fibroblasts after 24 h of incubation at 50 ⁇ . It should be noted that only isourea 2d and by-products 27c, d and 28c showed a moderate inhibition (between 64% and 90%) on Glucosylceramida Syntase at 250 ⁇ , indicating this selectivity towards the hydrolytic enzyme.
- Isoureas 1 bc, 3c, 4a-c and guanidines 5c which showed more than 46% inhibition at 50 ⁇ , were also tested at lower concentrations. It is noteworthy that isoureas 4b-c and guanidines 5c, and showed potent inhibition of human ⁇ -glucocerebrosidase at concentrations of order of nM
- ⁇ -glucocerebrosidasa The activities of ⁇ -glucocerebrosidasa in cell lysates were determined after incubating the lymphoblasts in the presence or absence of increasing concentrations of compounds 1c-5c and 5e for 3 days in 12-well plates. After washing the pellet with PBS, it was resuspended in water and lysed by sonication. Briefly, 10 ⁇ _ of the homogenate was incubated at 37 S C with 50 ⁇ _ of the 4-methyl-methyl-spheriferyl ⁇ -D-glucopyranoside substrate (6 mM) in 0.1 M citrate-phosphate buffer, pH 5.2 supplemented with sodium taurocholate (0.25% ) and Triton X-100 (0.1%).
- the reaction was allowed to react for 2 h and the incubation was stopped by adding 150 ⁇ _ of 0.2 M sodium glycine-hydroxide buffer (pH 10.6).
- the 4-methylumbelliferone released was determined by fluorometry (355 nm excitation; 460 nm emission).
- the protein was quantified using the Micro BCA protein test kit (Pierce, Thermo Scientific). Table 2 shows the concentrations of the compounds at which a greater increase in activity on ⁇ -glucocerebrosidase was observed in lymphoblasts of Gaucher patients with the N370S or L444P mutations.
- the cyclols tested demonstrated a significant impact on the enhancement of enzymatic activity, especially against the N370S mutation.
- Compound 1c despite being a good inhibitor of ⁇ -glucocerebrosidase, proved to be the worst pharmacological chaperone against the N370S and L444P mutations, with elevations of residual activity of 1.4 and 1 .1 times, respectively, at a concentration 1 ⁇ . On the contrary, the rest of the compounds increased the activity more than 1 .7 and 1, 3 times at some concentration tested against the N370S and L444P mutations, respectively.
- (+) - 4c 2.1 ⁇ 0.1 (0.2 ⁇ ) 1.5 ⁇ 0.1 (0.01 ⁇ )
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Obesity (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
La presente invención se refiere a aminociclitoles bicíclicos y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales tales como la enfermedad de Gaucher. Además en la presente invención se describe el procedimiento de síntesis de dichos compuestos.
Description
AMINOCICL1TOLES BICiCLiCOS Y SU USO PARA EL TRATAMIENTO DE
ENFERMEDADES LÍSOSOMALES.
La presente invención se refiere a aminociclitoles bicíclicos y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales tales como la enfermedad de Gaucher. Además en la presente invención se describe el procedimiento de síntesis de dichos compuestos.
ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR
Las enfermedades causadas por desórdenes de almacenaje lisosomal, son un tipo de enfermedades raras congénitas, causadas por desórdenes metabólicos que provocan que determinados lípidos se acaben acumulando en los lisosomas. Los síntomas de estas enfermedades, varían dependiendo del tipo de desorden, aunque se manifiestan ya en los primeros meses o años de vida de los enfermos, que suelen morir a una edad temprana. Entre los síntomas habituales, destacan retraso en el desarrollo, dificultad en los movimientos, apoplejía, demencia, sordera, ceguera, defunciones en órganos (hígado, corazón, pulmón etc.) y crecimiento óseo anormal.
Los esfingolípidos, son lípidos complejos derivados de la esfingosina, un alcohol insaturado de 18 carbonos, que son muy abundantes en las membranas biológicas y algunos son precursores de compuestos implicados en procesos de señalización celular. En algunas de las enfermedades lisosomales se produce la acumulación de esfingolípidos, debido a que las enzimas que hidrolizan estas moléculas presentan mutaciones que impiden su correcta función celular.
La enfermedad de Gaucher es una de estas enfermedades clasificadas como desórdenes de almacenaje lisosomal, caracterizada por la acumulación del esfingolípído glucosilceramida (GlcCer) en los lisosomas. La enfermedad es causada por la actividad deficiente de la enzima glucocerebrosidasa, una beta-
glucosidasa que hidroliza GicCer en glucosa y ceramida, debido a que dicha enzima presenta varias formas mutadas. Los niveles celulares de la enzima mutada y plegada incorrectamente, son anormalmente bajos debido a su degradación prematura por acción de endoproteasas específicas en el retículo endoplásmíco. Durante los últimos años se han desarrollado varias estrategias terapéuticas enfocadas a la enfermedad de Gaucher. Entre ellas, el uso de chaperonas farmacológicas, que son inhibidores competitivos de la enzima diana que asisten el plegado y localización correctos de la proteína defectuosa, a concentraciones subínhibitorias, ha llegado a ser un campo de investigación muy activo (Fan, J.-Q. Trends Pharmacol. Sci. 2003, 24, 355-360).
El documento WO2009/066069, describe el uso de una serie de compuestos, que actúan como chaperonas farmacológicas de ciertas enzimas plegadas incorrectamente, para el tratamiento de enfermedades relacionadas con desórdenes en el almacenaje lisosomal.
Durante los últimos años, se ha estado trabajando en el desarrollo de nuevos aminociclitoles con aplicabilidad potencial como chaperonas farmacológicas de la enzima glucosilcerebrosidasa (Egido-Gabás, M.; Serrano, P.; Casas, J.; Llebaria, A.; Delgado, A. Org. Biomol. Chem. 2005, 3, 1 195-1201 y Egido- Gabás, M.; Canals, D.; Casas, J.; Llebaria, A.; Delgado, A., ChemMedChem 2007, 2, 992-994). Sin embargo, la exploración de la diversidad química mediante la funcionalízacíón del núcleo de aminocíclítol ha presentado ciertas limitaciones (Serrano, P.; Casas, J.; Zueco, M.; Emeric, G.; Egido-Gabás, M.; Llebaria, A.; Delgado, A. J. Comb. Chem 2007, 9, 43-52). Los resultados más prometedores surgen de la apertura regio- y estereoselectiva del conduritol B epóxído con una serie de aminas alífáticas con diferente longitud de cadena. La presencia de un anillo de triazol en la cadena lateral (Díaz, L.; Bujons, J.; Casas, J.; Llebaria, A.; Delgado, A. J. Med. Chem. 2010, 53, 5248-5255) produce un incremento en la potencia de los inhibidores.
Hasta el momento, los ciclitoles obtenidos muestran una importante actividad sobre el enzima glucocerebrosidasa actuando como inhibidores del mismo, sí bien se han mostrado incapaces de actuar como chaperonas farmacológicas a bajas concentraciones, tanto en células que no presentan mutaciones en el enzima como en células procedentes de pacientes de la enfermedad de Gaucher.
Teniendo en cuenta que los desórdenes en el almacenaje lisosomal están causados por el incorrecto plegamiento o localización intracelular de las enzimas implicadas en el metabolismo de ciertos sustratos como glicolípidos y glicoproteínas, sería deseable obtener compuestos que actuaran como chaperonas farmacológicas y que fueran capaces de conseguir que estas enzimas se plegaran y localizaran correctamente, recuperando así su funcionalidad y evitando la acumulación anormal de estos sustratos en los lisosomas.
Un problema general que existe en el desarrollo de chaperonas farmacológicas, es que los compuestos obtenidos hasta el momento no poseen potencia suficiente para incrementar la actividad enzimática en células en cultivo, y por tanto, se deben dar a dosis muy altas con lo que se reduce la ventana terapéutica entre la recuperación funcional y la inhibición del enzima. La necesidad de utilizar altas concentraciones de chaperonas farmacológicas puede además inducir problemas de toxicidad y selectividad además de aumentar las actividades inespecíficas no deseadas.
Asimismo, al unirse estos compuestos en el centro activo del enzima, la recuperación funcional de glucocerebrosidasas mutadas en posiciones cercanas al centro activo de la enzima (tales como la N370S) es más probable, mientras que las mutaciones de aminoácidos lejanos al centro activo (tales como la L444P) son mas insensibles a los compuestos.
Sería por tanto deseable obtener nuevos compuestos más potentes y selectivos en ensayos celulares, que actuaran a concentraciones menores, de manera selectiva y que fueran activos sobre mutaciones resistentes al rescate funcional de la actividad enzimática mediante chaperonas farmacológicas.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a una familia de compuestos de fórmula general (I), mediante los cuales se consiguen mejores eficiencias y mayores resultados frente a la enfermedad de Gaucher. Ello es debido a que con estos compuestos se consigue una mayor potenciación de la enzima β- glucocerebrosidasa (enzima directamente relacionada con la enfermedad de Gaucher) en linfoblastos, frente a compuestos ya descritos en el Estado de la Técnica llegándose a obtener resultados muy prometedores a concentraciones muy bajas (nM) en ensayos celulares, lo cual indica una mayor actividad de estos nuevos compuestos respecto a los descritos anteriormente.
Por lo tanto un primer aspecto de la presente invención se refiere compuesto de fórmula general (I)
(I) o cualquiera de sus sales, isómeros o solvatos,
donde
X y W son iguales o diferentes y se seleccionan entre -O-, -S- y un grupo -NR-i ;
Y es un grupo - NR2;
Ri y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan entre H, alquilo C-|-Ci8, un cicloalquilo y un grupo arilo; En una realización preferida, X es O.
En otra realización preferida X es un grupo -NR^
En otra realización preferida X es un grupo -S-.
En una realización preferida, W es O.
En otra realización preferida, W es un grupo -NRi .
En otra realización preferida, W es un grupo -S-.
Según una realización preferida, Ri es H.
Según otra realización preferida, Ri es un grupo alquilo C-i-Ci8, preferiblemente Cg. Este grupo alquilo puede estar sustituido por un cicloalquilo o por un grupo arilo, siendo el grupo arilo preferido un fenilo.
Según otra realización preferida, Ri es un cicloalquilo.
Según otra realización preferida, Ri es un grupo arilo, preferiblemente un fenilo. Según una realización preferida, R2 es H.
Según otra realización preferida, R2 es un grupo alquilo Crds, preferiblemente
C-6-Cg, o un grupo (CH2)3Ph.
En otra realización preferida, R2 es un cicloalquilo.
En otra realización preferida, R2 es un grupo arilo, preferiblemente un fenilo.
Según otra realización preferida, el compuesto de fórmula general (I), se selecciona de entre la siguiente lista:
((±)-1 a):
{3aSñ,4Sñ,5/:?S,6Sfí,7fíS,7afíS)-2-(hexilimino)-octahidrobenzo[o(]oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-1 b):
(3aSfí,4S ?,5fíS,6Sfí fíS7afíS)-2-(octilimino)-octahidrobenzo[d]oxazole-
4,5,6,7-tetraol; ((±)-1c):
(3aSfí,4Sfí,5ñS,6Sñ,7/:?S)7añS)-2-(nonilim¡no)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
{(-)-1c):
(3aS,4S,5ñ,6S,7f?,7afí)-2-(nonilim¡no)-octahidrobenzo[ loxazole-4,5,6,7- tetraol;
<(-)-1d):
(3aS,4S!5/:?,6S,7ñ,7añ)-3-nonil-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[c(loxazole- 4,5,6,7-tetraol;
<(±)-2c):
(3afíS,4Sfí,5fíS,6Sfí,7/:?S,7aSfí)-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((+)-2c)
{3afí,4S,5fí,6SJ fí,7aS)-2-(nonil¡mino)-octahidrobenzo[o,joxazole-4, 5,6,7- tetraol; ((+)-2d)
{3a/:?,4S,5ñ,6S,7ñ,7aS)-3-non¡l-2-(non¡limino)-octahidrobenzo[(-/joxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-3a)
{3afíS,4Sñ,5/:?S,6Sfí,7fíS,7afíS)-2-(hexilimino)-octah¡drobenzo[o(]oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-3b):
(3af?S,4Sfí,5f?S,6Sfí7fíS,7afíS)-2-(octilimino)-octahidrobenzo[cloxazole- 4,5,6,7-tetraol;
{(±)-3c):
(3afíS,4Sfí,5ñS,6Sñ,7/:?S)7añS)-2-(nonilim¡no)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
<(-)-3c):
(3afí,4S,5fí,6S7/:?,7a/:?)-2-(non¡limino)-octahidrobenzo[cjoxazole-4, 5,6,7- tetraol;
{(-)-3d):
(3añ,4S,5fí,6S,7fí,7afí)-3-nonil-2-(nonilim¡no)-octahidrobenzo[cloxazole- 4,5,6,7-tetraol;
<(±)-4a):
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7fíS,7aSfí)-2-(hexilimino)-octahidrobenzo[cíjoxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-4b):
{3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7f?S,7aSfí)-2-(octílimino)-octahidrobenzo[dloxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-4c):
{3aSñ,4Sñ,5fíS,6Sfí,7fíS,7aS/:?)-2-(nonil¡mino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((+)-4c):
{3aS,4S,5/:?,6S,7/:?,7aS)-2-{nonilimino)-octahidrobenzo[o(]oxazole-4,5,6,7- tetraol;
((+Hd):
(3aS,4S,5fí,6S fí7aS)-3-nonil-2-(nonil¡mino)-octahidrobenzo[o,]oxazole- 4,5,6,7-tetraol; ((-)-5c):
(3af?,4S,5R,6f?7S aS)-2-(nonilimino)-octahidro-1 H-benzo[d]imidazole-4,5,6,7- tetraol; y
<(-)-5e):
(3afí,4S,5fí,6f?7S aS)-2-(3-fenilpropilimino)-octahidro-1 H-benzo[c imidazole- 4,5,6,7-tetraol.
De manera preferida el compuesto de fórmula general (I), se selecciona de entre:
((±)-4b):
{3aSñ,4Sñ,5/:?S,6Sfí,7fíS,7aS/:?)-2-(octilimino)-octahidrobenzo[d]oxazole- 4,5,6,7-tetraol; ((±)-4c):
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí)7ñS,7aSfí)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((+)-4c):
(3aS,4S!5fí,6S,7fí,7aS)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[c/|oxazole-4!5,6!7- tetraol;
((-)-5c):
(3aft4S,5R,6f?JS7aS)-2-(nonilimino)-octahidro-1 H-benzo[cijimidazole-4,5,6,7- tetraol; y
((-)-5e):
(3af?,4S,5fí,6fí7S aS)-2-(3-fenilpropilimino)-octah¡dro-1 H-benzo[Gjimidazole- 4,5,6,7-tetraol. De manera aún más preferida el compuesto de fórmula general (I), se selecciona de entre:
<(+)-4c):
(3aS,4S,5/:?,6S,7/:?,7aS)-2-(non¡limino)-octahídrobenzo[cíjoxazole-4,5,6,7- tetrao I;
((-)-5c):
{3afí,4S,5fí,6fí,7S aS)-2-(nonil¡mino)-octahidro-1 H-benzo[clímidazole-4,5J6,7- tetraol; y
((-)-5e):
{3a/:?,4S,5ñ,6/:?,7S)7aS)-2-(3-fen¡lpropil¡mino)-octahidro-1 H-benzo[o]imidazole- 4,5,6,7-tetraol. Según otra realización preferida comprende el compuesto de fórmula general (I) para su uso como medicamento.
Un segundo aspecto de la presente invención se refiere a una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de fórmula general (I) o sus sales, solvatos o prodrogas, junto con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables y al menos un transportador farmacéuticamente aceptable, adyuvante y/o vehículo.
De manera preferida, la composición farmacéutica además comprende uno o más principios activos.
Según otra realización preferida, la composición farmacéutica se presenta en una forma adaptada a la administración parenteral, oral, sublingual, nasal, intratecal, bronquial, linfática, rectal, transdérmica o inhalada. Un tercer aspecto de la presente invención se refiere al uso del compuesto de fórmula general (I) o de la composición farmacéutica para la elaboración de un medicamento.
Según una realización preferida, el uso como medicamento del compuesto de fórmula general (I) o de la composición farmacéutica que lo comprende es para el tratamiento y/o prevención de una enfermedad relacionada con trastornos de tipo lisosomal.
De manera preferida el medicamento se usa para el tratamiento y/o prevención de la enfermedad de Gaucher.
Además también de manera preferida, el medicamento se presenta en una forma adaptada a la administración parenteral, oral, sublingual, nasal, intratecal, bronquial, linfática, rectal, transdérmica o inhalada.
Un cuarto aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento de síntesis del compuesto de fórmula general (I), que comprende la reacción de un compuesto de fórmula general (II) con un compuesto de fórmula general (III) ara dar el compuesto de fórmula general (I):
donde;
T y Z son iguales o diferentes y se selecciona entre un grupo -OH, -SH y un grupo -NHRi.
X se selecciona entre -O-, -S- y un grupo -NRi ;
Y es un grupo - NR2;
W se selecciona entre -O-, -S- y un grupo -NR^
Ri y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan entre H, alquilo C Ci8, un cicloalquilo y un grupo arilo;
NCS es isoticionato.
De manera preferida, T es un grupo -OH
Según otra realización preferida, T es un grupo -NHRi.
Según otra realización preferida, T es un grupo -SH. En una realización preferida, Z es un grupo -OH
Según otra realización preferida, Z es un grupo -NHRi.
Según otra realización preferida, Z es un grupo -SH.
En una realización preferida X es -O-.
Según otra realización preferida X es un grupo -NRi;
Según otra realización preferida X es un grupo -S-;
En una realización preferida W es -O-.
Según otra realización preferida W es un grupo -NRi ;
Según otra realización preferida W es un grupo -S-;
En una realización preferida R-i es H.
En otra realización preferida Ri es alquilo C-i-C- s, preferiblemente C9. Este grupo alquilo puede estar sustituido por un cicloalquilo o por un grupo arilo, siendo el grupo arilo preferido un fenilo.
Según otra realización preferida Ri es un cicloalquilo.
Según otra realización preferida Ri es un grupo preferiblemente un fenilo.
Según una realización preferida R2 es H.
En otra realización preferida R2 es un grupo alquilo Ci-C-i8, preferiblemente C6- Cg, o un grupo (CH^Ph.
En otra realización preferida R2 es un cicloalquilo.
En otra realización preferida R2 es un grupo arilo, preferiblemente un fenilo.
En la presente invención el término "alquilo" se refiere en la presente invención a cadenas alifáticas, lineales o ramificadas, que tienen de 1 a 18 átomos de carbono, por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, í-propílo, n-butilo, tert-butilo, sec- butilo, n-pentilo, etc. Los radicales alquilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustítuyentes tales como halógeno, hidroxilo, azida, ácido carboxílico o un grupo sustituido o no sustituido seleccionado de entre amíno, amido, éster carboxílico, éter, tiol, acilamino o carboxamido, alcóxido, tiol, amino, acilamino, ciano, carboxilato, carboxamida, carboxiéster, arilo o heteroarilo o combinaciones de estos grupos. Cuando el grupo alquilo está sustituido, lo está preferentemente por uno o varios grupos amina, amida o éter, que a su vez pueden estar o no sustituidos por grupos alquilo, amida, cicloalquilo o éteres y estos a su vez, pueden estar igualmente sustituidos o no. El término cicloalquilo se refiere a un radical estable monocíclico o bicíclico de 3 a 10 miembros, que está saturado o parcialmente saturado, y que sólo consiste en átomos de carbono e hidrógeno, tal como ciclohexilo o adamantilo.
El término arilo se refiere, en la presente invención, a anillos aromáticos sencillos o múltiples, que tienen de entre 5 a 18 eslabones en los que se ha eliminado un protón del anillo. Preferentemente el grupo arilo tiene de 5 a 7 átomos de carbono, aún más preferiblemente es un fenilo. Los grupos arilo son por ejemplo, pero sin limitarse a fenilo, naftílo, difenilo, indenilo, fenantrilo o antracilo. Los radicales arilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustítuyentes.
Por compuestos de la invención, también nos referimos a sus sales, preferiblemente aceptables farmacéuticamente o de forma sustancialmente
pura. Por sal farmacéuticamente aceptable se entiende, entre otras cosas, compuestos que tengan un nivel de pureza aceptable farmacéuticamente exceptuando aditivos farmacéuticos normalmente considerados como tales como diluyentes, vehículos y que no incluyan material que se considere tóxico en niveles de dosificación normales. Los niveles de pureza para los fármacos son preferiblemente entre un 50% y más preferiblemente un 70% y aún más preferentemente el 90%. En una realización preferente de la presente invención el nivel de pureza está alrededor del 95% de pureza respecto al compuesto de la invención o sus sales.
Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de de la invención se puede preparar mediante uno o más de estos procedimientos:
(i) hacer reaccionar el compuesto de la invención con el ácido deseado
(ii) convertir una sal del compuesto de la invención en otro, mediante reacción con un ácido apropiado o mediante una columna de intercambio iónica adecuada.
Las dos reacciones se llevan a cabo típicamente en solución. La sal puede precipitar en solución y se puede recoger mediante filtración o se puede recuperar soluciones del compuesto de la invención y el ácido o base deseado, según sea apropiado. La sal puede precipitar de una solución y recogerse mediante filtración o se puede recuperar mediante evaporación del disolvente. El grado de ionización en la sal puede variar entre completamente ionizado a casi no ionizado. Sal por adición de ácidos farmacéuticamente aceptable, se refiere a aquellas sales que retienen la efectividad biológica y las propiedades de las bases libres, que no son indeseables ni biológicamente ni de otra manera, y que se forman con ácidos inorgánicos tales como, pero sin limitación, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, acido nítrico, ácido fosfórico y similares, y ácidos orgánicos tales como, pero sin limitación, ácido acético, ácido 2,2- dicloroacético, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido aspártíco, ácido benzensulfónico, ácido benzoico, ácido 4-acetamidobenzoico, ácido
canfónico, ácido canfor-10-sulfónico, ácido cáprico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido carbónico, ácido cinámico, ácido cítrico, ácido ciclámico, ácido dodecilsilfúrico, ácido etan-1 ,2disulfónico, ácido etansulfónico, ácido 2- hidroxietansulfónico, ácido fumárico, ácido galactárico, ácido gentísico, ácido glucoheptónico, ácido glucóníco, ácido glucurónico, ácido glutámico, ácido 2- oxo-glutárico, ácido glicerofosfórico, ácido glicólico, ácido hipúrico, ácido ísobutírico, ácido láctico, ácido lactobióníco, ácido láurico, ácido maleico, ácido oleico, ácido cerótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamoico, ácido propíónico, ácido píroglutámico, ácido pirúvico, ácido salicílíco, ácido 4- aminosalicílico, ácido sebácico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido tíocíánico, ácido p-toluensulfónico, ácido trifluoroacétíco, ácido undecilénico, y similares.
"Sal por adición de bases farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que retienen la efectividad biológica y las propiedades de los ácidos libres, que no son indeseables ni biológicamente ni de otra manera. Estas sales se preparan a partir de la adición de una base inorgánica o de una base orgánica al ácido libre. Las sales derivadas de bases inorgánicas incluyen, pero sin limitación, sales de sodio, de potasio, de litio, de amonio, de calcio, de magnesio, de hierro, de zinc, de cobre, de manganeso, de aluminio y similares. Las sales derivadas de bases orgánicas incluyen, pero sin limitación, sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas que incluyen aminas sustituidas naturales, aminas cíclicas y resinas básicas de intercambio iónico, tales como amoníaco, isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamína, tripropilamina, dietanolamina, etanolamina, deanol, 2- metilaminoetanol, 2-dietilaminoetanol, diciclohexilamina, lisina, arginina, hístidína, cafeína, procalna, hidrabamína, colina, betaína, benetamina, benzatina, etilendiamina, glucosalina, metilglucamina, teobromina, trietanolamina, trometamina, purinas, piperazina, N-etilpiperidina, resinas de poliamina y similares.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos y dibujos se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención.
DESCRIPCIÓN DE LA FIGURA
Figura 1. Inhibición (%) sobre la β-glucocerebrosidasa humana en fibroblastos después de 24h de incubación a distintas concentraciones de inhibidor.
EJEMPLOS
A continuación se ilustra la invención mediante unos ensayos realizados, que pone de manifiesto la especificidad y efectividad de los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención.
EJEMPLO 1. Síntesis de los compuestos de la invención.
1.1 Materiales v procedimientos
Los ciclitoles bícíclicos 1 -5 descritos en esta invención:
(±)-la-c (±)-2c (±)-3a-c
<-Mc,d (+)-2c,d
(-)-3c,d
(±)-4a-c (-)-5c,e
(+Hc,d fueron obtenidos por reacción de acoplamiento de los aminociclitoles 6-13 {Esquema 1 ) o el diaminociclitol 14 (Esquema 2) con el isotíocíanato apropiado de fórmula general R2NCS. La posterior ciclación de la tiourea resultante utilizando un exceso de óxido de mercurio (II) proporcionó los precursores de isoureas y guanidínas bicíclicas correspondientes (19-22 y 25).
Los aminoalcoholes 6-8, 10 y 12 se obtuvieron a partir del epóxido de conduritol B siguiendo procedimientos reseñados anteriormente (González- Bulnes, P. y col. en Carbohydr. Res. 2007, 342, 1947-1952 y Serrano, P. y col. en J. Org. Chem. 2005, 70, 7829-7840). Los W-nonil aminoalcoholes 9, 11 y 13 se sintetizaron por aminación reductora de los correspondientes aminoalcoholes (8, 10 y 12) con el aldehido nonanal (Esquema 1 ).
(±)-15a,c (±)- 6c (±)-17a-c (±)-18a-c
(+)-15c (+)-16c,d (+)-17c (+)-18c,d
(-)-15d ( )-17d
c
(±)-19a,c (±)-20c (±)-21a-c (+)-22a-c
( )-19c,d (+)-20c,d ( )-21c,d { )-22c,d
Esquema 1. Reactivos y condiciones: a) C8H17CHO, NaBH3CN, MeOH; b) RNCS, THF, 45 SC; c) HgO, tolueno, 1 15 SC; d) C8H17NCO, CH2CI2; e) Tf20, piridina, CH2CI2, -40QC.
Para la síntesis de la isourea (±)-19b se siguió una secuencia de reacción alternativa {Esquema 1 ). La reacción de acoplamiento del aminoalcohol (±)-6 con octilisocianato seguida del tratamiento con anhídrido trifluorometanosulfónico de la urea resultante 26 permitió obtener la isourea bicíclica (±)-19b.
24c,e
Esquema 2. Reactivos y condiciones: a) RNCS, THF, 45 SC; b) HgO, tolueno, 115 eC
El tratamiento de las isoureas 19-22 y guanidinas 25 con BCI3 a baja temperatura o la hidrogenólisis en presencia del catalizador de Pd(OH)2 permitió la obtención de los requeridos ciclitoles bicíclícos 1-5 después de la eliminación de los grupos bencilo, junto con los subproductos 27 y 28, como se describe en el Esquema 3.
(±)-20c (±)-2c
(+)-20c,d (+)-2c,d
(±)-22a-c (+)-28a-c (±)-4a-c
(-)-22c,d (+)-28c (+)-4c,d
Esquema 3. Reactivos y condiciones: a) Pd(OH)2, EtOH, H2 (2 atm), 60 eC; b) BCI3> CH2CI2> -409C; c) Pd/C, MeOH, H2 (2 atm). 1.2. Caracterización estructural.
Se realizó la caracterización estructural de los compuestos preparados y usados en esta invención mediante espectrometría de masas, rotación óptica y espectroscopia de RMN de 1H y 13C. Se presenta a continuación algunos de los resultados:
Método general para la síntesis de (+)-9, (-)-11 v (-)-13 por aminación reductora.
Una solución del aminoalcohol (+)-8, (+)-10 o (-)-12 (0.14 mmol) en metanol (5 mL) se trata sucesivamente con cianoborohidruro sódico (18 mg, 0.29 mmol), ácido acético (10 μί) y nonanal (0.16 mmol). La reacción se deja bajo atmósfera de argón y en agitación durante 4h. Pasado este tiempo, se añade agua (0.2 mL) y se evapora el disolvente. El residuo obtenido se resuspende en éter (20 mL) y se lava con agua (15 mL). La fase acuosa se extrae con éter (3 x 20 mL). Los extractos combinados se lavan con una disolución saturada de cloruro de sodio, se secan sobre sulfato de magnesio y se eliminan los disolventes a presión reducida. El crudo obtenido se purifica mediante cromatografía en columna utilizando como eluyente mezclas de hexano/acetato de etilo de polaridad creciente (de 4:1 a 3:1 ). (1 S,2S,3/?,4f?,5S,6S)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6-nonilaminociclohexanol ((+)-9).
[a] « +28 (c 1 .0, CHCI3); IR (film):
31 10, 3097, 2947, 2924, 2853, 1490,
1454, 1362, 1086, 1070, 1028 ατϊ1 ; 1 H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.93 (t, 3H, J=6.9 Hz), 1 .19-1 .38 (m, 12H), 1 .39-1 .47 (m, 2H), 2.40-2.49 (m, 2H), 3.24 (t, 1 H, J=3.9 Hz), 3.84 (t, 1 H, J=9.0 Hz), 3.90 (t, 1 H, J=9.1 Hz), 3.99-4.03 (m, 2H), 4.07 (t, 1 H, J=3.3 Hz), 4.62-4.91 (m, 8H), 7.27-7.41 (m, 20H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.3, 22.8, 27.4, 29.5, 29.71 , 29.75, 29.8, 32.0, 48.7, 58.3, 68.2, 72.7, 73.4, 75.7, 75.8, 79.6, 80.1 , 81 .7, 81 .9, 127.6-128.6, 138.4, 138.6, 139.12, 139.13. HRMS calculado para C43H56N05: 666.4158 [M+H]+. Encontrado: 666.4175.
(1 fí,2S,3fí,4fí,5S,6S)-2,3,4,5-tetrabencíloxi-6-nonilaminociclohexanol ((-)-11 )- [a] -14.5 (c 1 .0, CHCI3); IR (film): υ=3300, 3085, 3065, 3026, 2947, 2923, 2850, 1496, 1454, 1362, 1086, 1070, 1027 cm"1 ; 1 H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.92 (t, 3H, J=6.8 Hz, CH3), 1 .25-1 .38 (m, 12H, 6xCH2), 1 .46-1 .55 (m, 2H, CH2), 2.76-2.88 (m, 2H, N CH2), 3.33-3.37 (m, 1 H, H-6), 3.51 -3.55 (m, 2H, H-1 , H-3), 3.59-3.61 (m, 1 H, H-5), 3.90 (dt, 1 H, J=1 .8, 9.1 Hz, H-2), 3.97 (dt, 1 H, J=2.0, 9.0 Hz, H-4), 4.65-4.97 (m, 8H, 4xPhCH20), 7.26-7.41 (m, 20H, Ph); 13C RMN
(δ, 100 MHz, CDCI3): 14.3 (CH3), 22.8 (CH2), 27.4 (CH2), 29.5 (CH2), 29.7 (CH2), 29.8 (CH2), 30.8 (CH2), 32.0 (CH2), 50.8 (NCH2), 57.7 (C6), 72.3 (C1 ), 72.6 (PhCH20), 75.4 (PhCH20), 75.6 (PhCH20), 75.7 (PhCH20), 81 .0 (C5), 81 .8 (C2), 81 .9 (C4), 83.4 (C3), 127.7-128.7 (CHar), 138.2 (Car), 138.7 (Car), 138.8 (Car). HRMS calculado para C43H56N05: 666.4158 [M+H]+. Encontrado: 666.4180.
(1 S,2S53fí,4f?,5S,6ñ)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6-nonilaminociclohexanol ((-)-13).
[a] « -20.2 (c 1 ,0, CHCI3); IR (film): υ=3300, 3087, 3058, 3028, 2947, 2924, 2853, 1496, 1454, 1362, 1086, 1070, 1028 cm" ; 1 H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.93 (t, 3H, J=7.0 Hz, CH3), 1 .28-1 .44 (m, 14H, 7xCH¿>), 2.41 -2.45 (m, 1 H, CH2), 2.47 (dd, 1 H, J=2.4, 10.0 Hz, H-6), 2.61 -2.66 (m, 1 H, CH2), 3.47 (dd, 1 H, J=2.8, 9.6 Hz, H-2), 3.59 (t, 1 H, J=9.4 Hz, H-4), 3.70 (t, 1 H, J=9.7 Hz, H-5), 4.08 (t, 1 H, J=9.5 Hz, H-3), 4.15 (t, 1 H, J=2.5 Hz, H-1 ), 4.61 -5.05 (m, 8H, 4xPhCH20), 7.30-7.46 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.3 (CH3), 22.8 (CH2), 27.3 (CH2), 29.4 (CH2), 29.6 (CH2), 29.7 (CH2), 30.1 (CH2), 32.0 (CH2), 47.3 (NCH2), 60.9 (C6), 65.4 (C1 ), 72.6 (PhCH20), 75.8 (PhCH20), 76.1 (PhCH20), 80.1 (C5), 81 .2 (C2), 81 .7 (C3), 85.0 (C4), 127.7-128.7 (CHar), 138.4 (Car), 138.5 (Car), 138.7 (Car), 138.9 (Car); HRMS calculado para C43H56N05: 666.4158 [M+H]+. Encontrado: 666.4175.
Método general para la preparación de las tioureas 15-18, 23 y 24.
A una disolución del aminoalcohol (6-13) o diamino derivado 4 (0.22 mmol) en THF (6 mL), se añade el isotíocíanato apropiado (0.44 mmol para 6-13 y 0.22 para 14). La mezcla resultante se agita a 45 -C durante 18 h y se elimina el disolvente a presión reducida. Se obtiene un aceite que se purifica por cromatografía en columna utilizando una mezcla de hexano y acetato de etilo de polaridad creciente como eluyente. 1 -hexil-3-((1 fíS,2Sfí,3fíS,4fíS,5Sfí,6fíS)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((±)-15a).
IR (film): υ=3333, 3030, 2922, 2854, 1558, 1362, 1044 cm"1. HRMS calculado para C41 H51N205S: 683.3519 [M+H]+. Encontrado: 683.3527.
1 -nonil-3-((1 f?S,2SR,3RS,4/?S,5S/?,6 ?S)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((±)-15c).
IR (film): υ=3313, 3092, 3031 , 2924, 2854, 1559, 1454, 1360, 1064, 1027, 697 cm"1. HRMS calculado para C44H57N205S: 725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.4000.
1 -nonil-3-((1 fí,2S,3fí,4fí,5S,6fí)-2,3,4,5-tetraben^
((+)-15c).
[a] 5 +29 (c 0.2, CHCI3); Los datos espectroscópicos de IR son idénticos a los
(±)«15c. HRMS calculado para C44H57N205S: 725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.3993. 1 ,3-dinonil-1 -((1 fí,2S,3fí,4fí,5S,6fí)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((-)-15d).
[a] ^ -13.9 (c 1 .0, CHCI3); IR (film): υ=3313, 3091 , 3064, 3034, 2925, 2854, 1524, 1454, 1357, 1065, 1028, 697 cm"1. HRMS calculado para C53H75N2O5S: 851 .5397 [M+H]+. Encontrado: 851.5375.
1 -nonil-3-((1 Sfí,2Sfí,3fíS,4fíS,5Sfí,6Sfí)-2,3,4,5-tetrabencíloxi-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((±)-16c).
IR (film): υ=3285, 3091 , 3063, 3031 , 2925, 2854, 1549, 1455, 1071 , 696 cm"1. HRMS calculado para C44H57N205S: 725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.3990.
1 -nonil-3-((1 S,2S,3ñ,4fí,5S,6S)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6-hidroxiciclohexil)tiourea ((+)-16c).
[a] ¾5 +3.1 (c 1 .0, CHCI3). Los datos espectroscópicos de IR son idénticos a los de (±)-16c. HRMS calculado para C44H57N205S: 725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.3991 .
1 ,3-dinonil-1 -{(1 S,2S,3ñ,4/:?,5S,6S)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((+)-16d).
[a] ^ +4.2 (c 1 .0, CHCI3). IR (film): υ=3288, 3090, 3064, 3034, 2925, 2854, 1525,
1454, 1065, 698 cm"1. HRMS calculado para C53H75N2O5S: 851 .5397 [M+H]+. Encontrado: 851 .5383.
1 -hex: -3-{^ SR,2SR,3RSARS,5SR,6RS)-2,3A etrabenc \ox:\-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((±)-17a).
IR (film): υ=3276, 3064, 3031 , 2926, 2856, 1549, 1071 , 696 cm"1. HRMS calculado para C4i H51N205S: 683.3519 [M+H]+. Encontrado: 683.3525.
1 -octil-3-((1 Sf?,2Sf?,3fíS,4fíS,5Sfí,6fíS)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6- hidroxíciclohexíl)tiourea ((±)-17b).
IR (film): υ=3270, 3064, 3031 , 2925, 2855, 1549, 1071 , 696 cm"1. HRMS calculado para
71 1 .3832 [M+H]+. Encontrado: 71 1 .3773.
1 -noníl-3-((1 Sfí,2Sfí,3f?S,4fíS,5Sfí,6fíS)-2,3,4,5-tetrabenciloxí-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((±)-17c).
IR (film): υ=3275, 3063, 3031 , 2925, 2854, 1549, 1071 , 696 cm"1. HRMS calculado para
725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.3999.
1 -noníl-3-((1 S,2S,3fí,4fí,5S,6fí)-2,3,4,5-te^
((+)-17c).
[a] « +25.1 (c 1 .0, CHCI3); Los datos espectroscópicos de IR son idénticos a los de (±)-17c. HRMS calculado para C44H57N205S: 725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.4003.
1 ,3-dinonil-1 -((1 S,2S,3fí,4ñ,5S,6fí)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((-)-17d).
[a] « -8.4 (c 0.8 CHCI3); IR (film): υ=3300, 3090, 3062, 3030, 2925, 2854, 1539, 1072, 1068, 696 cm"1. HRMS calculado para C53H75N2O5S: 851 .5397 [M+H]+. Encontrado: 851 .5389.
1 -heñ\-3-{^ RS,2SR,3RSARS,5SR,6SR)-2,3A etiabená\ox:\-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((±)-18a).
IR (film): υ=3318, 3091 , 3063, 3031 , 2926, 2857, 1550, 1070, 696 cm"1. HRMS calculado para C41 H51 N2O5S: 683.35 9 [M+H]+. Encontrado: 683.35 6.
1 -octil-3-((1 f?S,2Sfí,3ñS,4ñS,5Sñ,6S/:?)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6- hidroxíciclohexíl)tiourea ((±)-18b).
IR (film): υ=3316, 3088, 3063, 3031 , 2925, 2855, 1550, 1086, 1069, 696 cm"1. HRMS calculado para C43H55N2O5S: 71 1 .3832 [M+H]+. Encontrado: 71 1 .3861 .
1 -nonil-3-((1 f?S,2Sfí,3f?S,4fíS,5Sfí,6S/¾-2,3 A5-tetrabenciloxi-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((±)-18c).
IR (film): υ=3305, 3088, 3063, 3030, 2926, 2854, 1549, 1097, 1070, 696 cm-1. HRMS calculado para C44H57N2O5S: 725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.4016.
1 -noníl-3-((1 fí,2S,3fí,4fí,5S,6S)-2,3,4,5-tetrabenciloxi-6-hidroxiciclohexil)t^^
((+)-"! 8c).
[a] +18.6 (c 0.6, CHCI3); Los datos espectroscópicos de IR son idénticos a los de (+)-18c. HRMS calculado para C44H57N205S: 725.3988 [M+H]+. Encontrado: 725.4008.
1 ,3-dinonil-1 -((1 f?,2S,3fí,4fí,5S,6S)-2,3,4,5-tetrabenciloxí-6- hidroxiciclohexil)tiourea ((+)-18d).
[a] ¿5 +7.7 (c 1 .0, CHCI3); IR (film): υ=3308, 3090, 3064, 3032, 2925, 2854, 1534, 1098, 1068, 696 cm"1. HRMS calculado para
851 .5397 [M+H]+. Encontrado: 851 .5397.
Una mezcla de 1 -((1 fí,2S,3S,4fí,5fl,6S)-2-amino-3,4,5,6- tetrabenciloxiciclohexil)-3-noniltiourea (23c) y 1 -((1 S,2fí,3S,4fí,5fí,6S)-2-amino- 3,4,5, 6-tetrabenciloxíciclohexíl)-3-noniltiourea (24c).
HRMS calculado para C44H58N304S: 724.4148 [M+H]+. Encontrado: 724.4127.
Una mezcla de 1 -((1 fí,2S,3S,4ft,5fí,6S)-2-amino-3,4,5,6- tetrabenciloxiciclohexil)-3-(3-fenilpropil)tiourea (23e) y S,2fí,3S,4fí,5fí,6S)- 2-amino-3,4,5,6-tetrabenciloxiciclohexil)-3-(3-fenilpropil)tiourea (24e).
HRMS calculado para C44H5oN304S: 716.3522 [M+H]+. Encontrado: 716.3539.
Preparación de 1 -octil-3-({1 flS,2S^3fíS,4ftS,5Sfí,6fíS)-2,3,4,5-tetrabenciloxi- 6-hídroxicíclohexil)urea ((±)-26).
A una disolución del aminoalcohol (±)-6 (1 15 mg, 0.21 mmol) en diclorometano {4 mL), se añade octilisocianato (73 μΙ_, 0.41 mmol). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 6 h y se elimina el disolvente a presión reducida. Se obtiene un aceite que se purifica por cromatografía en columna utilizando una mezcla de hexano/acetato de etilo de polaridad creciente como eluyente (de 2:1 a 1 :1 ).
IR (film): υ=3332, 3085, 3063, 3029, 2925, 2854, 1653, 1629, 1585, 1454, 1067, 1049, 695 cm"1 ; 1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.88 (t, 3H, J=7.0 Hz), 1 .19-1.34 (m, 12H), 2.82-2.90 (m, 1 H), 2.99-3.05 (m, 1 H), 3.33-3.38 (m, 2H), 3.45-3.53 (m, 3H), 3.62 (t, 1 H, J=8.6 Hz), 4.59-4.97 (m, 8H), 7.23-7.36 (m, 20H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.3, 22.8, 27.0, 29.39, 29.44, 30.0, 32.0, 40.7, 57.1 , 74.1 , 75.2, 75.7, 75.9, 76.0, 80.9, 82.6, 83.7, 83.9, 127.8-128.8, 138.1 , 138.4, 138.6, 138.8, 160.5. HRMS calculado para C43H55N206: 695.4060 [M+H]+. Encontrado: 695.4044.
Método general para la preparación de las isoureas bicíclicas 19-22 y 25.
A una disolución de la tiourea (0.20 mmol) en tolueno se añadió óxido de mercurio (131 mg, 0.60 mmol, 3 equív). La mezcla de reacción se calentó a 1 15 eC durante 24 h bajo atmósfera de argón. Se controló la reacción por CCF y, si todavía quedaba producto de partida, se añadió HgO (3 equiv) y se calentó de nuevo la mezcla de reacción a 1 15 9C durante 24h. Pasado este tiempo, se dejó enfriar la reacción hasta temperatura ambiente, se filtró sobre Celíte y ésta se lavó varias veces con diclorometano. Se eliminaron los disolventes a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna
utilizando una mezcla de hexano y acetato de etilo de polaridad creciente como eluyente.
/V-((3aS ?,4S ?,5fíSs6Sfí,7S/?,7afíS)-4,5s6,7-tetrabenciloxi- hexahidrobenzo[í¾oxazol-2{3H)-ilideno)hexan-1 -amina ((±)-19a).
IR (film): υ=3305, 3090, 3061 , 3032, 2925, 2855, 1717, 1654, 1455, 1362, 1274, 1097, 1067, 1027, 697 cm"1 ; 1 H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.91 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1 .19-1 .38 (m, 6H, 3xCH2), 1 .55-1 .63 (m, 2H, CH2), 3.21 -3.30 (m, 2H, HCH2), 3.51 (dd, 1 H, J=10.5, 12.2 Hz, H-3a), 3.63-3.74 (m, 3H, H-4, H5, H-6), 3.84 (dd, 1 H, J=12.2, 10.3 Hz, H-7a), 3.91 -3.96 (m, 1 H, H-7), 4.70- 4.95 (m, 7H, PhCH^O), 5.14 (d, 1 H, J=1 1 .5 Hz, PhC^O), 7.21 -7.47 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.7 (CH2), 26.6 (CH2), 30.0 (CH2), 31 .6 (CH2), 43.1 (NCH2), 68.0 (C3a), 73.1 (2xPhCH20), 76.1 (PhCH20), 76.2 (PhCH20), 80.6 (C7), 81 .4 (C4), 83.5 (C7a), 84.9 (C6 o C5), 85.8 (C6 o C5), 127.5-128.5 (CHar), 138.3 (Car), 138.5 (Car), 138.6 (Car), 138.9 (Car), 163.0 (C2). HRMS calculado para C4i H49N205: 649.3641 [M+H]+. Encontrado: 649.3648.
^-((SaSfí^Sfí^fíS^SfíJSfíJa^^^^J-tetrabenciloxi- hexahidrobenzo[Gdoxazol-2(3H)-¡l¡deno)nonan-1 -amina ((±)-19c).
IR (film): υ=3327, 3089, 3063, 3030, 2925, 2855, 1715, 1653, 1454, 1357, 1274, 1066, 1028, 697 cm"1 ; H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.91 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1 .25-1 .39 (m, 12H, 6xCH2), 1 .55-1 .63 (m, 2H, CH2), 3.23-3.32 (m, 2H, HCH2), 3.51 (dd, 1 H, J=10.5, 12.2 Hz, C-3a), 3.63-3.74 (m, 3H, H-4, H-5, H-6), 3.84 (dd, 1 H, J=12.2, 10.3 Hz, H-7a), 3.91 -3.96 (m, 1 H, H-7), 4.72-4.96 (m, 7H, PhCZ-^O), 5.15 (d, 1 H, J=1 1 .8 Hz, PhCH¿0), 7.21 -7.47 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.3 (CH3), 22.8 (CH2), 26.9 (CH2), 29.40 (CH2), 29.43 (CH2), 29.7 (CH2), 30.0 (CH2), 32.0 (CH2), 43.2 (CH2), 67.6 (C3a), 73.1 (PhCH20), 73.2 (PhCH20), 76.0 (PhCH20), 76.1 (PhCH20), 80.5 (C7), 81 .3 (C4), 83.7 (C7a), 84.7 (C5 o C6), 85.6 (C5 o C6), 127.6-128.5 (CHar), 138.2 (Car), 138.4 (Car), 138.5 (Car), 138.8 (Car), 163.0 (C2). HRMS calculado para C44H55N205: 691 .41 1 1 [M+ H]+. Encontrado: 691 .4122.
/V-((3aS,4S)5/:?,6S,7S,7a/:?)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-hexahidrobenzo[cloxazol- 2{3f/)-ilideno)nonan-1 -amina 9c).
[a]¾5-4.6 (c 1.0, CHCI3). Los datos espectroscópicos de IR y RMN son idénticos a los de (±)-19c. HRMS calculado para C44H55N205: 691.4111 [M+ H]+. Encontrado: 691.4127.
W-((3aS,4S,5f?,6S,7S,7a/:)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-3-nonil- hexahidrobenzo[d]oxazol-2(3H)-il¡deno)nonan-1 -amina 9d).
[a] ¿5 -19.6 (c 1.0, CHCI3); IR (film): υ=3089, 3066, 3030, 2924, 2854, 1708, 1454, 1356, 1066, 696 cm'1; 1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.90 (dt, 6H, J=6.7, 7.1 Hz), 1.25-1.39 (m, 24H), 1.42-1.67 (m, 4H), 3.05-3.15 (m, 1H), 3.17-3.30 (m, 3H), 3.31-3.46 (m, 1H), 3.64-3.80 (m, 3H), 3.82-3.93 (m, 2H), 4.61-5.00 (m, 8H), 7.21-7.46 (m, 20H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2, 22.82, 22.83, 25.9, 27.1, 27.7, 29.4, 29.5, 29.73, 29.75, 29.8, 29.9, 32.06, 32.1, 45.8, 46.7, 59.5, 73.4, 74.3, 75.59, 75.64, 78.7, 80.5, 82.2, 84.0, 85.6, 127.5-128.6, 138.0, 138.2 (2), 138.4, 154.5. HRMS calculado para C53H73N2O5: 817.5519 [M+ H]+. Encontrado: 817.5547.
W-((3afíS,4Sfí,5ñS,6S/:?,7Sñ,7aSfí)-4,5,6,7-tetrabenciloxi- hexahidrobenzo[<¾oxazol-2{3H)-ilideno)nonan-1 -amina ((±)-20c).
IR (film): υ=3330, 3082, 3064, 3024, 2926, 2854, 1670, 1559, 1087, 1067, 1027, 696 cm"1;1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.90 (t, 3H, J=6.8 Hz), 1.16-1.41 (m, 12H), 1.51-1.61 (m, 2H), 3.20-3.30 (m, 2H), 3.78-3.81 (m, 1H), 3.86-3.88 (m, 1H), 4.26-4.28 (m, 1H), 4.34-4.50 (m, 6H), 4.63 (d, 2H, J=12.2 Hz), 4.72 (d, 1H, J=12.1 Hz), 4.82 (d, 1H, J=13.2 Hz), 4.90 (d, 1H, =12.1 Hz), 7.15-7.43 (m, 20H); 3C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.3, 22.8, 26.9, 29.40, 29.45, 29.6, 29.9, 32.0, 43.0, 61.0, 72.2, 72.3, 72.4, 75.4, 77.0, 77.4, 78.2, 79.5, 127.4-128.5, 137.8, 138.0, 138.4, 138.9, 161.5. HRMS calculado para C44H55N2O5: 691.4111 [M+H]+. Encontrado: 691.4136.
A/-((3afí,4S,5fí,6S,7S,7aS)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-hexahidrobenzo[cíjoxazol- 2(3H)-ilideno)nonan-1 -amina ((+)-20c).
[α] ^ +4.8 (c 1 .0, CHC ); Los datos espectroscopios de IR y RMN son idénticos a los de (±)-20c. HRMS calculado para C44H55N205: 691 .41 1 1 [M+H]+. Encontrado: 691 .4091 . ^-((Safí^S^fí.eSJSJa^^^^J-tetrabenciloxÍ-S-nonil- hexahidrobenzo[d]oxazol-2(3 -/)-ilideno)nonan-1 -amina ((+)-20d).
[a] « +14.3 (c 1 .0, CHCI3); IR (film): υ=3082, 3065, 3029, 2925, 2854, 1709,
1455, 1087, 1065, 1027, 696 cm" ; H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.81 -0.95 (m, 6H), 1 .16-1 .39 (m, 24H), 1.45-1 .61 (m, 4H), 2.96-3.07 (m, 1 H), 3.13-3.33 {m, 3H), 3.80-3.87 (m, 2H), 3.92-3.98 (m, 1 H), 3.99-4.08 (m, 1 H), 4.19-4.24 (m, 1 H), 4.31 -4.82 (m, 9H), 7.15-7.39 {m, 20H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2, 22.8, 26.7, 27.3, 27.7, 29.46, 29.51 , 29.69, 29.72, 29.82, 29.84, 32.06, 32.09, 44.7, 46.6, 56.0, 72.0, 72.40, 72.43, 72.9, 74.5, 75.3, 75.5, 77.8, 127.7- 128.6, 137.8, 138.0, 138.6, 161 .5. HRMS calculado para C53H73N2O5: 817.5519 [M+H]+. Encontrado: 817.5546.
N-{{3aRSASR,5RS,6SR,7SR,7aRS)-4,5,6,7-tetrabenc\\ox\- hexahídrobenzo[d]oxazol-2(3H)-ilideno)hexan-1 -amina ((±)-21a).
IR (film): υ=3330, 3064, 3031 , 2924, 2854, 1670, 1560, 1087, 1069, 1027, 696 cm"1 ; 1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.89 (t, 3H, ¿=7.0 Hz, CH3), 1 .21 -1 .38 (m, 6H, 3xCH2), 1 .46-1 .51 (m, 2H, CH2), 3.23 (t, 2H, ¿=7.1 Hz, NCH2), 3.57 (dd, 1 H, ¿=4.5, 10.5 Hz, H-4), 3.78-3.84 (m, 2H, H-5, H-6), 4.30 (dd, 1 H, ¿=7.0, 10.4 Hz, H-7), 4.32 (dd, 1 H, ¿=2.9, 8.9 Hz, H-3a), 4.40-4.50 (m, 2H, PhCWsO), 4.57 (dd, 1 H, ¿=7.2, 9.0 Hz, H-7a), 4.60-4.85 (m, 6H, 3xPhCHíO), 7.25-7.41 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.7 (CH2), 26.5 (CH2), 29.8 (CH2), 31 .5 (CH2), 43.1 (NCH2), 62.3 (C3a), 72.2 (PhCH20), 73.4 (PhCH20), 73.7 (PhCH20), 74.1 (PhCH20), 76.4 (C5 o C6), 79.9 (C7), 81 .7 (C5 o C6), 82.3 (C4), 84.1 (C7a), 127.7-128.6 (CHar), 137.7 (Car), 138.3 (Car), 138.5 (Car), 138.6 (Car), 161 .8 (C2). HRMS calculado para C41 H49N205: 649.3641 [M+H]+. Encontrado: 641 .3640.
N-{{3aRSASR,5RS,6SR,7SR,7aRS)-4,5,6 -tetrabenc \ox\- hexahídrobenzo[c ]oxazol-2(3H)-ílideno)octan-1 -amina ((±)-21 b).
IR (film): υ=3330, 3082, 3064, 3031 , 2925, 2855, 1669, 1560, 1087, 1068, 1027, 696 cnr1 ; 1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.89 (t, 3H, ¿=6.9 Hz, CH3), 1 .21 -1.39 (m, 10H, 5xCH2), 1 .49-1 .57 (m, 2H, CH2), 3.23 (t, 2H, ¿=7.1 Hz, CH2), 3.57 (dd, 1 H, ¿=4.5, 10.5 Hz, H-4), 3.76-3.84 (m, 2H, H-5, H-6), 4.30 (dd, 1 H, ¿=7.1 , 10.5 Hz, H-7), 4.32 (dd, 1 H, ¿=2.6, 9.1 Hz, H-3a), 4.40-4.50 (m, 2H, PhCHiO), 4.58 (dd, 1 H, ¿=7.6, 8.7 Hz, H-7a), 4.60-4.85 (m, 6H, 3xPhCH20), 7.20-7.41 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.8 (CH2), 26.6 (CH2), 29.2 (CH2), 29.26 (CH2), 29.32 (CH2), 31 .9 (CH2), 43.1 (NCH2), 58.8 (C3a), 72.3 (PhCH20), 73.5 (PhCH20), 74.0 (PhCH20), 74.1 (PhCH20), 75.6 (C5 o C6), 78.8 (C7), 80.6 (C5 o C6), 81 .8 (C4), 85.4 (C7a), 127.9-128.7 (CHar), 137.3 (Car), 137.5 (Car), 138.1 (2xCar), 161 .9 (C2). HRMS calculado para C43H53N205: 677.3954 [M+H]+. Encontrado: 677.401 1 .
/V-((3afíS,4Sfí,5fíS,6Sfí,7Sfí,7afíS)-4,5,6,7-tetrabenciloxí- hexahidrobenzo[d]oxazol-2(3H)-ilideno)nonan-1 -amina ((±)-21c).
IR (film): υ=3330, 3082, 3064, 3024, 2924, 2854, 1670, 1560, 1087, 1068, 1027, 696 ατϊ1 ; Η RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.90 (t, 3H, ¿=6.9 Hz, CH3), 1 .19-1.39 (m, 12H, 6xCH2), 1 .48-1 .57 (m, 2H, CH2), 3.23 (t, 2H, ¿=7.1 Hz, HCH2), 3.57 (dd, 1 H, ¿=4.5,10.5 Hz, H-4), 3.78-3.85 (m, 2H, H-5, H-6), 4.31 (dd, 1 H, ¿=7.0, 10.4 Hz, H-7), 4.33 (dd, 1 H, ¿=2.2, 8.4 Hz, H-3a), 4.40-4.51 (m, 2H, PhCH¿0), 4.58 (dd, 1 H, ¿=7.6, 8.7 Hz, H-7a), 4.60-4.84 (m, 6H, 3xPhCH20), 7.21 -7.43 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 75 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.8 (CH2), 27.0 (CH2), 29.4 (CH2), 29.5 (CH2), 29.7 (CH2), 30.0 (CH2), 32.0 (CH2), 43.3 (NCH2), 64.2 (C3a), 72.2 (PhCH20), 73.3 (PhCH20), 73.6 (PhCH20), 74.1 (PhCH20), 75.6 (C5 o C6) 80.4 (C7), 82.1 (C5 o C6), 82.5 (C4), 83.7 (C7a), 127.6-128.6 (CHar), 137.9 (Car), 138.68 (Car), 138.72 (Car), 138.9 (Car), 161 .5 (C2). HRMS calculado para C44H55N205: 691 .41 1 1 [M+H]+. Encontrado: 691 .41 14.
/V-((3añ,4S,5ñ,6S,7S,7añ)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-hexahidrobenzo[d]oxazol- 2{3H)-ilideno)nonan-1 -amina ((-)-21 c).
[α] -17.7 (c 1 .0, CHCI3). Los datos espectroscópicos de IR y RMN son idénticos a los de (±)-21c. HRMS calculado para C44H55N205: 691 .41 1 1 [M+H]+. Encontrado: 691 .41 17.
W-((3a ?,4S,5fí,6S57S,7afl)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-3-nonil- hexahídrobenzo[d]oxazol-2(3H)-il¡deno)nonan-1 -amina ((-)-21 d).
[a] ¿5 -25.3 (c 1 .0, CHCI3); IR (film): υ=3087, 3061 , 3030, 2925, 2852, 1706, 1452, 1359, 1068, 696 cm"1 ; 1 H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.87-0.94 (m, 6H), 1 .14-1.38 (m, 24H), 1.43-1 .60 (m, 4H), 1 .97-2.1 1 (m, 1 H), 2.68-2.81 (m, 1 H), 3.24 (t, 2H, J=7.2 Hz), 3.62 (dd, 1 H, J=10.4, 4.9 Hz), 3.68 (t, 1 H, J=2.9 Hz), 3.91 (dd, 1 H, J=3.2, 4.5 Hz), 3.93-4.02 (m, 1 H), 4.19-4.28 (m, 1 H), 4.38-4.88 (m, 9H), 7.21 -7.43 (m, 20H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2, 22.82, 27.5, 29.4, 29.4, 29.5, 29.7, 29.8, 29.8, 32.0, 32.1 , 43.3, 46.0, 56.5, 72.5, 73.0, 74.0, 74.4, 77.3, 80.2, 82.0, 127.8-128.7, 137.8, 138.4, 153.2. HRMS calculado para C53H73N2O5: 817.5519 [M+H]+. Encontrado: 817.5555.
W-((3aSfí,4Sfí,5ñS,6S/:?,7Sñ,7aSfí)-4,5,6,7-tetrabenciloxi- hexahidrobenzo[í¾oxazol-2(3H)-ilideno)hexan-1 -amina ((±)-22a).
IR (film): υ=3337, 3082, 3061 , 3028, 2926, 2856, 1718, 1671 , 1455, 1094, 1069, 1024, 697 cm"1 ; 1 H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.86 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1 .20-1 .34 (m, 6H, 3xCH2), 1 .43-1 .52 (m, 2H, CH2), 3.14 (t, 2H, J=7.2 Hz, HCH2), 3.74 (t, 1 H, J=5.2 Hz, H-5), 3.88 (t, 1 H, J=5.0 Hz, H-4), 3.90 (dd, 1 H, J=4.8, 8.2 Hz, H-6), 4.02 (dd, 1 H, J=3.4, 8.1 Hz, H-7), 4.23 (dd, 1 H, J=4.5, 8.7 Hz, H-3a), 4.53-4.82 (m, 9H, H-7a, 4xPhCH20), 7.25-7.41 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.7 (CH2), 26.5 (CH2), 29.7 (CH2), 31 .6 (CH2), 43.1 (NCH2), 67.1 (C3a), 72.7 (PhCH20), 72.8 (PhCH20), 73.3 (PhCH20), 73.7 (PhCH20), 77.1 (C7), 78.8 (C7a), 79.6 (C4), 81 .0 (C6), 82.5 (C5), 127.6-128.5 (CHar), 138.3 (2xCar), 138.6 (2xCar), 160.9 (C2). HRMS calculado para C4i H49N205: 649.3641 [M+H]+. Encontrado: 649.3670.
N-{{3aSRASR,5RS,6SR,7SR,7aSR)-4,5,6 -tetrabenc \ox\- hexahídrobenzo[c ]oxazol-2(3H)-ílideno)octan-1 -amina ((±)-22b).
IR (film): υ=3330, 3088, 3063, 3030, 2926, 2855, 1719, 1672, 1454, 1093, 1069, 1028, 697 cnV1 ; 1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.89 (t, 3H, J=7.0 Hz, CH3), 1 .19-1 .35 (m, 10H, 5xCH2), 1 .43-1 .51 (m, 2H, CH2), 3.14 (t, 2H, J=7.1 Hz, CH2), 3.73 (t, 1 H, J=5.2 Hz, H-5), 3.88 (t, 1 H, J=5.0 Hz, H-4), 3.90 {dd, 1 H, J=5.0, 8.3 Hz, H-6), 4.01 (dd, 1 H, J=3.4, 8.2 Hz, H-7), 4.23 (dd, 1 H, J=4.6, 8.7 Hz, H-3a), 4.53-4.83 (m, 9H, H-7a, 4xPhCH≤0), 7.25-7.37 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.8 (CH2), 26.9 (CH2), 29.4 (2xCH2), 29.8 (CH2), 31 .9 (CH2), 43.1 (NCH2), 67.2 (C3a), 72.7 (PhCH20), 72.8 (PhCH20), 73.3 (PhCH20), 73.8 (PhCH20), 77.1 (C7), 78.7 (C7a), 79.7 (C4), 81 .0 (C6), 82.5 (C5), 127.6-128.5 (CHar), 138.3 (Car), 138.58 (Car), 138.60 (Car), 160.9 (Car). HRMS calculado para C43H53N205: 677.3954 [M+H]+. Encontrado: 677.3946.
/V-((3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7Sfí,7aSfí)-4,5,6,7-tetrabenciloxí- hexahidrobenzo[d]oxazol-2(3H)-ilideno)nonan-1 -amina ((±)-22c).
IR (film): υ=3330, 3086, 3063, 3030, 2926, 2854, 1718, 1671 , 1454, 1092, 1069, 1028, 696 cnf1 ; H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.89 (t, 3H, J=7.0 Hz, CH3), 1 .20-1 .34 (m, 12H, 6xCH2), 1 .41 -1 .51 (m, 2H, CH2), 3.14 (t, 2H, J=7.2 Hz, HCH2), 3.73 (t, 1 H, J=5.2 Hz, H-5), 3.87 (t, 1 H, J=5.0 Hz, H-4), 3.89 (dd, 1 H, J=4.9, 8.2 Hz, H-6), 4.01 (dd, 1 H, J=3.4, 8.2 Hz, H-7), 4.22 (dd, 1 H, J=4.6, 8.7 Hz, H-3a), 4.52-4.82 (m, 9H, H-7a, 4xPhCH¿0), 7.25-7.41 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.8 (CH2), 26.9 (CH2), 29.37 (CH2), 29.40 (CH2), 29.6 (CH2), 29.8 (CH2), 32.0 (CH2), 43.1 (NCH2), 67.3 (C3a), 72.7 (PhCH20), 72.8 (PhCH20), 73.2 (PhCH20), 73.7 (PhCH20), 77.1 (C7), 78.7 (C7a), 79.7 (C4), 81 .0 (C6), 82.5 (C5), 127.6-128.5 (CHar), 138.3 (Car), 138.57 (Car), 138.59 (Car), 160.8 (C2). HRMS calculado para C^Hss^Os: 691 .4 1 [M+H]+. Encontrado: 691 .4120.
W-((3aS,4S,5f?,6S,7S,7aS)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-hexahidrobenzo[^oxazol- 2(3H)-ilideno)nonan-1 -amina ((-)-22c).
[α] -2.4 (c0.8, CHCI3). Los datos espectroscópicos de IR y RMN son idénticos a ios de (±)-22c. HRMS calculado para C44H55N205: 691.4111 [M+H]+. Encontrado: 691.4140.
/V-((3aS,4S,5ñ,6S,7S,7aS)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-3-non¡l- hexahidrobenzo[<¾oxazol-2(3H)-ilideno)nonan-1 -amina ((-)-22d).
[a] « -10.5 (c 1.0, CHCI3); IR (film):
3063, 3030, 2924, 2854, 1708, 1454, 1359, 1068, 696 crn1; 1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.87-0.94 (m, 6H), 1.04-1.38 (m, 24H), 1.41-1.61 (m, 4H), 3.00-3.11 (m, 1H), 3.24-3.32 (m, 2H), 3.48-3.60 (m, 1H), 3.63 (dd, 1H, J=6.0, 7.6 Hz), 3.73-3.82 (m, 1H), 3.87 (t, 1H, J=5.8 Hz), 3.89-3.97 (m, 2H), 4.55-5.01 (m, 9H), 7.21-7.43 (m, 20H); 3C RMN <δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2, 22.82, 22.84, 26.8, 27.0, 29.4, 29.5, 29.67, 29.74, 29.8, 29.9, 32.06, 32.1, 43.9, 46.7, 58.9, 73.1, 73.6, 74.0, 74.1, 77.4, 80.1, 81.0, 83.5, 127.7-128.6, 138.2, 138.3, 153.2. HRMS calculado para
817.5519 [M+H]+. Encontrado: 817.5549.
A/-((3afí,4S,5fí,6/:?,7S,7aS)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-hexahídro-1H- benzo[dpmidazol-2(3f/)-ilideno)nonan-1 -amina ((-)«25c).
[a] £-21.7 (c 1.0, CHCI3); IR (film): υ=3330, 3082, 3064, 3030, 2925, 2855, 1682, 1454, 1088, 1068, 1028, 696 crn-1; 1H RMN {δ, 400 MHz, CDCI3): 0.88 (t, 3H, J=6.8 Hz), 1.17-1.36 (m, 12H), 1.41-1.52 (m, 2H), 3.01 (t, 2H, J=6.9 Hz), 3.56 (t, 1H, J=7.2 Hz), 3.75-3.86 {m, 4H), 4.11 (dd, 1H, J=3.8, 7.7 Hz), 4.62- 4.83 (m, 8H), 7.18-7.39 (m, 20H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2, 27.8, 27.1, 29.4, 29.5, 29.7, 30.2, 32.0, 43.3, 59.9, 62.8, 73.3, 73.7, 73.9, 74.0, 77.4, 78.3, 81.7, 82.0, 83.6, 127.6-128.5, 138.66, 138.75, 138.8, 139.1, 160.7. HRMS calculado para C44H56N304: 690.4271 [M+H]+. Encontrado: 690.4284.
3-fenil-N-((3añ,4S,5ñ,6ñ,7S,7aS)-4,5,6,7-tetrabenciloxi-hexahidro-1H- benzo[cdímidazol-2(3f/)-ilideno)propan-1 -amina ((-)-25e).
[a] £-16.4 (c 1.0, CHCI3); IR (film): υ=3330, 3082, 3069, 3030, 2924, 2853, 1682, 1454, 1088, 1069, 1027, 696crn1;1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 1.83 (p, 2H, J=7.2 Hz), 2.64 (t, 2H, J=7.7 Hz), 2.94-3.10 (m, 2H), 3.59 (t, 1H, J=6.9 Hz), 3.74-3.91 (m, 4H), 4.13 (d, 1H, J=5.2 Hz), 4.62-4.83 (m, 8H), 7.13-7.41 (m,
25H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 31 .5, 33.2, 42.7, 59.1 , 62.0, 73.4, 73.8, 73.9, 77.4, 78.0, 81 .4, 81.6, 83.4, 126.0, 127.6-128.5, 138.5, 138.6, 138.7, 139.0, 141 .6, 160.2. HRMS calculado para C44H48N304: 682.3645 [M+H]+. Encontrado: 682.3633.
N-{{3aSRASR,5RS,6SR,7SR,7aRS)-4,5,6,7- .etrabenc\\ox\- hexahídrobenzo[d]oxazol-2(3H)-il¡deno)octan-1 -amina ((±)-19b).
A una disolución de (+)-26 (130 mg, 0.19 mmol) en diclorometano (3 mL) a -40 9C bajo atmósfera de argón, se añadieron pirídína (60 μί, 0.74 mmol) y anhídrido tríflico (42 μΙ_, 0.25 mmol). La mezcla resultante se agitó a -40 eC durante 1 h, se diluyó con diclorometano (15 mL), se lavó con aHC03 (15 mL). La fase acuosa resultante se extrae con diclorometano (3 x 15 mL). Los extractos combinados se lavan con una disolución saturada de cloruro de sodio, se secan sobre sulfato de magnesio y se eliminan los disolventes a presión reducida. El crudo obtenido se purifica mediante cromatografía en columna utilizando como eluyente mezclas de hexano/acetato de etilo de polaridad creciente (de 10:1 a 1 :1 ).
IR (film): υ=3318, 3089, 3063, 3031 , 2924, 2854, 1707, 1654, 1454, 1357, 1065, 1027, 696 cm"1 ; 1H RMN (δ, 500 MHz, CDCI3): 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1 .17-1 .42 (m, 10H, 5xCH2), 1 .51 -1 .63 (m, 2H, CH2), 3.21 -3.30 (m, 2H, NCH2), 3.51 (dd, 1 H, J=10.5, 12.2 Hz, H-3a), 3.62-3.73 (m, 3H, H-4, H-5, H-6), 3.84 (dd, 1 H, J=12.2, 10.3 Hz, H-7a), 3.90-3.96 (m, 1 H, H-7), 4.71 -4.96 (m, 7H, PhCH¿0), 5.15 (d, 1 H, J=1 1.6 Hz, PhCH¿0), 7.21 -7.47 (m, 20H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CDCI3): 14.2 (CH3), 22.8 (CH2), 27.0 (CH2), 29.37 (CH2), 29.43 (CH2), 30.2 (CH2), 32.0 (CH2), 43.3 (NCH2), 68.3 (C3a), 73.09 (PhCH20), 73.14 (PhCH20), 75.9 (PhCH20), 76.0 (PhCH20), 80.9 (C7), 81 .7 (C4), 83.7 (C7a), 85.0 (C6 o C5), 85.9 (C6 o C5), 127.5-128.5 (CHar), 138.5 (Car), 138.8 (Car), 138.9 (Car), 139.2 (Car), 162.9 (C2). HRMS calculado para C43H53N205: 677.3954 [M+ H]+. Encontrado: 677.3924.
Método general para las reacciones de Q-desbencilación por hidroqenólisis: Síntesis de 1a-c
Una disolución de las isoureas 1a-c (0.12 mmol) en etanol (3 mL) se hidrogenó {2 atm) y 60 QC en presencia de Pd(OH)2 al 20% (65 mg) durante 18 h. Pasado este tiempo la mezcla de reacción se filtró a través de Celite y ésta se lavó varias veces con metanol. Se eliminaron los disolventes a presión reducida obteniéndose los productos deseados.
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7/:?S,7afíS)-2-(hexilimino)-octahidrobenzo[cíjoxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-1a).
1 H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.91 (t, 3H, J=6.9 Hz), 1 .26-1 .41 (m, 6H), 1.48- 1 .58 (m, 2H), 3.10-3.16 (m, 2H), 3.20-3.32 (m, 3H), 3.42-3.46 (m, 1 H), 3.62 (dd, 1 H, J=10.3, 12.3 Hz), 3.72-3.76 (m, 1 H); 1H RMN (δ, 500 MHz, D20): 0.79-0.90 (m, 3H, CH3), 1 .20-1.38 (m, 6H, 3 CH2), 1 .51 -1 .64 (m, 2H, CH2), 3.24-3.49 (m, 4H, CH2, H-5, H-6), 3.71 -3.82 (m, 2H, H-4, H-3), 3.96-4.06 (m, 1 H, H-7), 4.28- 4.43 (m, 1 H, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.6 (CH2), 32.7 (CH2), 43.6 (NCH2), 68.6 (C3a), 73.8 (C7), 74.8 (C4), 79.0 (C5 o C6), 80.1 (C5 o C6), 84.6 (C7a), 165.4 (C2). HRMS calculado para Ci3H25N205: 289.1763 [M+H]+. Encontrado: 289.1757.
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí)7ñS,7afíS)-2-(octilimino)-octahidrobenzo[ /joxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-1 b).
H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=6.8 Hz, CH3), 1 .24-1 .41 (m, 10H, 5xCH2), 1 .48-1 .58 (m, 2H, CH2), 3.10-3.16 (m, 2H, CH2), 3.20-3.32 (m, 3H, H- 3a, H-5, H-6), 3.42-3.46 (m, 1 H, H-4), 3.62 (dd, 1 H, J=10.3, 12.3 Hz, H-2), 3.72- 3.76 (m, 1 H, H-7); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.5 (CH3), 23.7 (CH2), 28.0 (CH2), 30.4 (CH2), 30.5 (CH2), 30.7 (CH2), 33.0 (CH2), 43.6 (NCH2), 68.5 (C3a), 73.8 (C7), 74.8 (C4), 79.0 (C5 o C6), 80.1 (C5 o C6), 84.7 (C7a), 165.4 (C2). HRMS calculado para Ci5H29N205: 317.2076 [M+ H]+. Encontrado: 317.2057.
{3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7f?S,7afíS)-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-1c).
1 H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.92 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1 .24-1 .41 (m, 12H, 6xCH2), 1 .50-1 .60 (m, 2H, CH2), 3.15-3.19 (m, 2H, CH2), 3.20-3.36 (m, 3H, H- 3a, H-5, H-6), 3.44-3.52 (m, 1 H, H-4), 3.70-3.80 (m, 2H, H-2, H-7); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.5 (CH3), 23.7 (CH2), 27.9 (CH2), 30.4 (CH2), 30.5 (CH2), 30.6 (CH2), 30.7 (CH2), 33.1 (CH2), 43.7 (NCH2), 68.1 (C3a), 73.7 (C7), 74.6 (C4), 79.0 (C5 o C6), 80.1 (C5 o C6), 84.8 (C7a), 165.5 (C2). HRMS calculado para Ci6H31N2O5: 331 .2233 [M+ H]+. Encontrado: 331 .2223.
(3aS,4S,5fí,6S,7fí,7afí)-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[d]oxazole-4,5,6,7-tetraol ((-He).
[α - 7 (c 0.5, MeOH); Los datos espectroscópicos de IR y RMN son idénticos a los de (±)-1c. HRMS calculado para C16H3iN205: 331 .2233 [M+H]+. Encontrado: 331 .2217. Método general para las reacciones de O-desbencilación con BC½: Síntesis de 1d, 2c,d, 27a-d, 3a-c, 28a-c, 4a-d, 5c,e
Una disolución de las ísoureas o guanidinas O-bencilados (0.12 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL) bajo atmósfera de argón a -78 SC se trató con 10 equivalentes de una disolución 1 M de tricloruro de boro en n-heptano. La mezcla de reacción se deja a -78 QC durante 2 h y a -40 eC durante 5h. A continuación, se vuelve a enfriar a -78 9C y se adicionan, gota a gota, 2 mL de metanol. Se eliminan los disolventes a presión reducida y el crudo obtenido se purifica por cromatografía en columna sobre sílica gel utilizando como eluyente una mezcla de diclorometano/metanol de polaridad creciente (de 15:1 a 8:1 ) ó se precipita en AcOEt.
(3aS,4S,5/:?,6S,7/:?,7a/:?)-3-nonil-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[(-/joxazole- 4,5,6,7-tetraol ((-)-1d).
[a] £ -12 (c 1 .0, MeOH); 1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 6H, J=6.5 Hz), 1 .22-1.43 (m, 24H), 1 .56-1 .81 (m, 4H), 3.35 (t, 2H, J=6.0 Hz), 3.41 (t, 2H, J=7.1 Hz), 3.51 -3.70 (m, 2H), 3.71 -3.84 (m, 2H), 3.85-3.94 (m, 1 H), 4.28 (t, 1 H, J=10.5 Hz); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4, 23.7, 27.6, 28.1 , 30.3, 30.4,
30.57, 30.62, 33.0, 44.5, 45.7, 63.5, 72.3, 72.9, 78.2, 79.6, 85.5, 163.5. HRMS calculado para C25H49N205: 457.3641 [M+ H]+. Encontrado: 457.3643.
{3afíS,4Sfí,5fíS,6Sfí,7f?S,7aSfí)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-2c).
1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz), 1.23-1.43 (m, 12H), 1.59-1.68 (m, 2H), 3.21-3.33 (m, 2H), 3.93-3.96 (m, 1H), 4.02-4.05 (m, 1H), 4.33-4.37 (m, 1H), 4.41-4.45 (m, 1H), 4.56 (d, 1 H, J=12.8 Hz), 5.15 (d, 1H, J=12.0 Hz); 1H RMN (δ, 500 MHz, D20): 0.88 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.15-1.43 (m, 12H, 6xCH2), 1.57-1.71 (m, 2H, CH2), 3.27-3.47 (m, 2H, CH2), 4.02-4.06 (m, 1H, H-5), 4.11-4.15 (m, 1H, H-6), 4.42-4.48 (m, 1H, H-4), 4.52 (d, 1H, J=14.2 Hz, H-3a), 4.55-4.60 (m, 1H, H-7), 5.11 (d, 1H, J=12.9 Hz, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.2 (2xCH2), 30.3 (CH2), 30.5 (CH2), 33.0 (CH2), 44.0 (NCH2), 56.7 (C3a), 71.1 (C7), 71.9 (C4), 75.3 (C5), 76.4 (C6), 84.5 (C7a), 164.4 (C2). HRMS calculado para C 6H3iN205: 331.2233 [M+H]+. Encontrado: 331.2229.
(3afí,4S,5fí,6S,7fí,7aS)-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[dloxazole-4,5,6,7-tetraol (W-2c).
[a]^+8.8 (c 1.0, MeOH); Los datos espectroscopios de IR y RMN son idénticos a los de (±)-2c. HRMS calculado para C6H31N205: 331.2233 [M+H]+. Encontrado: 331.2220.
(3afí,4S,5fí,6S,7fí,7aS)-3-nonil-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[cjoxazole- 4,5,6,7-tetraol ((+)-2d).
[α] £+12.5 (c 1.0, MeOH); 1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.83-0.94 (m, 6H), 1.21-1.44 (m, 24H), 1.59-1.75 (m, 4H), 3.38-3.56 (m, 4H), 3.96-4.00 (m, 1H), 4.04-4.09 {m, 1H), 4.35-4.39 (m, 1H), 4.45-4.50 (m, 1H), 4.53 (dd, 1H, J=2.2, 13.3 Hz), 5.15 (dd, 1H, J=2.3, 13.2 Hz); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4, 23.7, 27.6, 27.8, 30.26, 30.32, 30.39, 30.44, 30.56, 30.58, 33.0, 44.1, 44.4, 59.0, 70.7, 71.1, 75.2, 76.5, 83.4, 162.6. HRMS calculado para C25H49N2O5: 457.3641 [M+H]+. Encontrado: 457.3626.
(3afíS,4Sfí,5Sfí,6Sfí,7/:?S)7afíS)-4-(bencilox¡)-2-(hexilimino)- octahidrobenzo[ajoxazole-5,6,7-triol ((±)-27a).
1 H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.89 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1 .19-1 .36 (m, 6H, 3xCH2), 1 .45-1 .55 (m, 2H, CH2), 3.15-3.25 (m, 2H, NCH2), 3.38 (dd, 1 H, J=5.7, 10.6 Hz, H-6), 3.66 (t, 1 H, J=3.3 Hz, H-4), 3.91 (dd, 1 H, J=3.5, 5.5 Hz, H-5), 4.09 (dd, 1 H, J=7.1 , 10.6 Hz, H-7), 4.48 (dd, 1 H, J=3.3, 8.5 Hz, H-3a), 4.56 (d, 1 H, J=1 1 .6 Hz, PhC½0), 4.81 (d, 1 H, J=1 1 .5 Hz, PhC/^O), 4.85-4.90 (m, 1 H, H-7a), 7.25-7.38 (m, 5H, Ph); 3C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.3 (CH3), 23.6 (CH2), 27.3 (CH2), 32.5 (CH2), 44.0 (NCH2), 57.7 (C3a), 72.4 (C7), 73.7 (PhCH20), 74.4 (C5), 75.9 (C6), 80.6 (C4), 87.9 (C7a), 128.6 (CHar), 128.9 (CHar), 129.5 (CHar), 139.2 (Car), 163.5 (C2). HRMS calculado para C20H31N2O5: 379.2233 [M+H]+. Encontrado: 379.2240.
(3añS,4Sfí,5ñS,6Sñ,7fíS,7añS)-2-(hexilimino)-octahidrobenzo[cloxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-3a).
1 H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.92 (t, 3H, J=6.8 Hz, CH3), 1 .25-1 .44 (m, 6H, 3xCH2), 1 .56-1 .66 (m, 2H, CH2), 3.26-3.34 (m, 3H, NCH2, H-6), 3.66 (t, 1 H, J=5.6 Hz, H-5), 3.76-3.80 (m, 1 H, H-7), 4.00-4.05 (m, 1 H, H-4), 4.42-4.43 (m, 1 H, H-3a), 4.87-4.95 (m, 1 H, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.2 (CH2), 32.9 (CH2), 44.0 (NCH2), 58.7 (C3a), 71 .7 (C4), 72.9 (C6), 75.6 (C5), 76.5 (C7), 87.8 (C7a), 163.4 (C2). HRMS calculado para C 3H25N205: 289.1763 [M+H]+. Encontrado: 289.1764.
(3af?S,4Sfí,5Sf?,6Sfí,7fíS,7a/:?S)-4-(benciloxi)-2-(octilimino)- octahidrobenzo[c joxazole-5,6,7-tríol ((±)-27b).
1 H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=7.0 Hz, CH3), 1 .20-1 .36 (m, 10H, 5xCH2), 1 .45-1 .55 (m, 2H, CH2), 3.1 5-3.25 (m, 2H, HCH2), 3.38 (dd, 1 H, J=5.6, 10.6 Hz, H-6), 3.68 (t, 1 H, J=2.9 Hz, H-4), 3.91 (dd, 1 H, J=3.4, 5.5 Hz, H-5), 4.1 1 (dd, 1 H, J=7.1 , 10.5 Hz, H-7), 4.50 (dd, 1 H, J=2A, 8.4 Hz, H-3a), 4.56 (d, 1 H, J=1 1 .5 Hz, PhCA/gO), 4.82 (d, 1 H, J=1 1 .5 Hz, PhCH^O), 4.85-4.90 (m, 1 H, H-7a), 7.25-7.38 (m, 5H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.2 (CH2), 30.3 (CH2), 32.9 (2xCH2), 44.0 (NCH2), 57.2
(C3a), 72.3 (C7), 73.7 (PhCH20), 74.3 (C5), 75.9 (C6), 80.5 (C4), 88.2 (C7a), 128.6 (CHar), 128.9 (CHar), 129.5 (CHar), 139.2 (Car), 163.5 (C2). HRMS calculado para C22H35N2O5: 407.2546 [M+H]+. Encontrado: 407.2539 (3añS,4Sfí,5ñS,6Sñ,7fíS,7añS)-2-(octilimino)-octahidrobenzo[c|oxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-3b).
1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.91 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.23-1.44 (m, 10H, 5xCH2), 1.56-1.68 (m, 2H, CH2), 3.26-3.34 (m, 3H, NCH2, H-6), 3.67 (t, 1H, J=5.5 Hz, H-5), 3.81 (t, 1H, J=4.2 Hz, H-7), 4.04 (dd, 1H, J=7.2, 9.9 Hz, H-4), 4.44 (d, 1H, J=5.7 Hz, H-3a), 4.87-4.95 (m, 1H, H-7a); H RMN (δ, 500 MHz, D20): 0.88 (t, 3H, J=6.7 Hz, CH3), 1.19-1.41 (m, 10H, 5xCH2), 1.57-1.66 (m, 2H, CH2), 3.29-3.38 (m, 2H, CH2), 3.39-3.45 (m, 1H, H-6), 3.65 (t, 1H, J=8.3 Hz, H-5), 3.86 (dd, 1H, J=7.7, 10.0 Hz, H-7), 3.93 (dd, 1H, J=4.6, 8.1 Hz, H-4), 4.57 (dd, 1H, J=4.9, 7.1 Hz, H-3a), 4.95-5.05 (m, 1H, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.2 (2xCH2), 30.3 (CH2), 32.9 (CH2), 44.0 (NCH2), 58.7 (C3a), 71.7 (C4), 72.9 (C6), 75.6 (C5), 76.5 (C7), 87.8 (C7a), 163.4 (C2). HRMS calculado para C^g^Os: 317.2076 [M+H]+. Encontrado: 317.2045. (3afíS,4Sfí,5Sf?,6Sfí,7fíS,7afíS)-4-(benciloxi)-2-(non¡limino)- octahidrobenzo[c|oxazole-5,6,7-triol ((±)-27c).
1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=6.5 Hz, CH3), 1.17-1.41 (m, 12H, 6xCH2), 1.45-1.55 (m, 2H, CH2), 3.15-3.26 (m, 2H, NCH2), 3.40 (dd, 1H, J=5.6, 10.4 Hz, H-6), 3.66-3.73 (m, 1H, H-4), 3.88-3.94 (m, 1H, H-5), 4.11 (dd, 1H, J=7.1, 10.3 Hz, H-7), 4.50 (d, 1H, J=8.6 Hz, H-3a), 4.57 (d, 1H, J=11.5 Hz, PhCZ-^O), 4.82 (d, 1H, J 1.5 Hz, PhCH^O), 4.91 (t, 1H, J=7.6 Hz, H-7a), 7.25- 7.42 (m, 5H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.2 (2xCH2), 30.3 (CH2), 33.0 (2xCH2), 44.0 (NCH2), 57.2 (C3a), 72.3 (C7), 73.7 (PhCH20), 74.3 (C5), 75.9 (C6), 80.5 (C4), 88.2 (C7a), 128.6 (CHar), 128.9 (CHar), 129.5 (CHar), 139.2 (Car), 163.5 (C2). HRMS calculado para C23H37N2O5: 421.2702 [M+H]+. Encontrado: 421.2698.
(3afíS,4Sfí,5ñS,6Sñ,7/:?S)7añS)-2-(nonilim¡no)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-3c).
1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.22-1.44 (m, 12H, 6xCH2), 1.55-1.68 (m, 2H, CH2), 3.26-3.34 (m, 3H, CH2, H-6), 3.68 (t, 1H, J=5.0 Hz, H-5), 3.81 (t, 1H, J=4.2 Hz, H-7), 4.05 (dd, 1H, J=7.6, 9.4 Hz, H-4), 4.44 {d, 1H, J=5.7 Hz, H-3a), 4.87-4.95 (m, 1H, H-7a); 13C RMN {δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.3 (CH2), 30.4 (CH2), 30.6 (C 2), 33.0 (2xCH2), 44.0 (NCH2), 58.7 (C3a), 71.7 (C4), 72.8 (C6), 75.6 (C5), 76.5 (C7), 87.8 (C7a), 163.4 (C2). HRMS calculado para Ci6H3iN205: 331.2233 [M+H]+. Encontrado: 331.2214.
{3a/?,4S,5S,6SJRJa/?)-4-(benciloxi)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[.joxazole- 5,6,7-triol ((-)-27c).
[a]«-4.5 (c 1.0, MeOH); Los datos espectroscópicos de RMN son idénticos a los de (±)-27c. HRMS calculado para C23H37N205: 421.2702 [M+H]+. Encontrado: 421.2689.
{3afí,4S,5ñ,6S,7ñ,7afí)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[cloxazole-4,5,6,7-tetraol {(-)-3c).
[a]«-29.6 (c 0.6, MeOH); Los datos espectroscópicos de RMN son idénticos a los de (±)-3c. HRMS calculado para Ci6H3iN2O5: 331.2233 [M+H]+. Encontrado: 331.2235.
{3afí,4S,5S,6S,7fí,7a/:?)-4-(benciloxi)-3-nonil-2-(nonilímino)- octahidrobenzo[cí|oxazole-5,6,7-triol ((-)-27d).
[a]«-1l.4 (d.O, MeOH); 1H RMN {δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 6H, J=6.5 Hz),
1.21-1.37 (m, 24H), 1.47-1.63 (m, 4H), 2.86-2.94 (m, 1H), 3.26-3.36 (m, 3H), 3.42 (dd, 1H, J=5.1, 10.9 Hz), 3.78-3.81 (m, 1H), 4.02-4.07 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H, J=7.1, 10.8 Hz), 4.44 (d, 1H, J=11.4 Hz), 4.48 (dd, 1H, J=2.8, 8.9 Hz), 4.81 (d, 1H, J=11.4 Hz), 4.90 (t, 1H, J=7.9 Hz), 7.27-7.42 (m, 5H); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4, 23.7, 27.5, 27.8, 30.24, 30.26, 30.30, 30.34, 30.48, 30.53, 30.56, 32.97, 32.99, 43.8, 44.3, 59.6, 71.8, 72.8, 73.8, 76.1, 77.7, 87.2, 129.32,
129.35 (2), 129.7 (2), 138.7, 161.5. HRMS calculado para C32H55N2O5: 547.4111 [M+H]+. Encontrado: 547.4135.
{3afí,4S,5fí,6S,7fí,7afí)-3-nonil-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[cloxazole- 4,5,6,7-tetraol ((-)-3d).
[a] « -15.2 (d.O, MeOH); 1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 6H, J=6.3 Hz),
1.19-1.45 (m, 24H), 1.57-1.79 (m, 4H), 3.34-3.41 (m, 4H), 3.47-3.55 (m, 1H), 3.77-3.83 (m, 1H), 3.91-3.96 (m, 1H), 4.25 (dd, 1H, J=7.3, 10.6 Hz), 4.41 (d, 1H, J=8.7 Hz), 4.89 (t, 1H, J=8.0 Hz); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4, 23.7, 27.5, 27.7, 27.8, 30.27, 30.33, 30.5, 30.6, 33.0, 44.0, 44.3, 60.5, 70.2, 72.0, 76.3, 77.8, 87.1, 161.6. HRMS calculado para C25H49N2O5: 457.3641 [M+H]+. Encontrado: 457.3624.
{3aSfí,4Sfí,5Sfí,6Sfí,7f?S,7aSfí)-4-(benciloxi)-2-(hexilimino)- octah¡drobenzo[ ]oxazole-5,6,7-triol ((±)-28a).
1H RMN {δ, 500 MHz, CD3OD): 0.92 (t, 3H, J=6.8 Hz, CH3), 1.29-1.39 {m, 6H, 3xCH2), 1.55-1.60 (m, 2H, CH2), 3.21 (dt, 2H, J=1.9, 6.8 Hz, NCH2), 3.61-3.67 (m, 3H, H-4, H-5, H-6), 3.97 (dd, 1H, J=3.6, 7.4 Hz, H-7), 4.14 (dd, J=5.8, 7.7 Hz, H-3a), 4.74 (d, 1H, J=11.4 Hz, PhOW^O), 4.84 (d, 1H, J=11.4 Hz, PhCH¿0), 4.95-5.01 (m, 1H, H-7a), 7.26-7.43 (m, 5H, Ph); 1H RMN (δ, 500 MHz, D20): 0.93 (t, 3H, J=6.8 Hz, CH3), 1.31-1.43 (m, 6H, 3xCH2), 1.58-1.67 (m, 2H, CH2), 3.21-3.31 (m, 2H, HCH2), 3.65 (t, 1H, J=7.9 Hz, H-4), 3.69 (t, 1H, J=8.4 Hz, H- 5), 3.73 (t, 1H, J=8.3 Hz, H-6), 4.08 (dd, 1H, J=3.7, 9.1 Hz, H-7), 4.21 (t, 1H, J=6.6 Hz, H-3a), 4.86 (d, 1H, J=11.3 Hz, PhCH≤0), 4.93 (d, 1H, J=11.3 Hz, PhCHsO), 5.10-5.16 (m, 1H, H-7 a), 7.46-7.58 (m, 5H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.6 (CH2), 27.4 (CH2), 30.2 (CH2), 32.6 (CH2), 43.8 (NCH2), 62.5 (C3a), 71.1 (C7), 74.3 (C6), 75.3 (C5), 76.5 (PhCH20), 82.7 (C4), 84.2 (C7a), 128.7 (CHar), 129.1 (CHar), 129.3 (CHar), 139.7 (Car), 163.4 (C2). HRMS calculado para C20H31N2O5: 379.2233 [M+H]+. Encontrado: 379.2214.
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7ñS,7aSfí)-2-(hexilim¡no)-octahidrobenzo[cloxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-4a).
1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.92 (t, 3H, J=6.7 Hz, CW3), 1.25-1.44 {m, 6H, 3xCH2), 1.55-1.66 (m, 2H, CH2), 3.23-3.33 (m, 2H, CH2), 3.34-3.38 (m, 1H, H- 5), 3.66 (t, 1H, J=6.1 Hz, H-6), 3.81 (dd, 1H, J=7.5, 9.0 Hz, H-4), 3.95-4.05 (m, 1H, H-7), 4.09-4.12 (m, 1H, H-3a), 5.11-5.24 (m, 1H, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.3 (CH3), 23.6 (CH2), 27.3 (CH2), 32.5 (CH2), 44.0 (NCH2), 61.5 (C3a), 71.4 (C7), 74.5 (C6), 75.8 (C5), 76.6 (C4), 84.5 (C7a), 163.2 (C2). HRMS calculado para C13H25N205: 289.1763 [M+H]+. Encontrado: 289.1739.
(3aSfí,4Sfí,5Sfí!6Sfí,7/:?S,7aSfí)-4-(benciloxi)-2-(octilímino)- octahidrobenzo[cf|oxazole-5,6,7-triol ((±)-28b).
1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.91 (t, 3H, J=6.8 Hz, CH3), 1.24-1.53 (m, 10H, 5xCH2), 1.52-1.65 (m, 2H, CH2), 3.24 (t, 2H, J=7.0 Hz, HCH2), 3.64-3.71 (m, 3H, H-4, H-5, H-6), 3.98 (dd, 1H, J=3.6, 7.2 Hz, H-7), 4.16-4.22 (m, 1H, H-3a), 4.75 (d, 1H, J=11.5 Hz, PhCH^O), 4.86 (d, 1H, J=11.4 Hz, PhCH≤0), 4.99-5.06 (m, 1H, H-7a), 7.26-7.43 (m, 5H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 {CH3), 23.7 (CH2), 27.7 (CH2), 30.1 (CH2), 30.33 (CH2), 30.35 (CH2), 33.0 (CH2), 43.8 (NCH2), 61.8 (C3a), 71.0 (C7), 74.3 (C6), 75.5 (C5), 76.5 (PhCH20), 82.3 (C4), 84.4 (C7a), 128.7 (CHar), 129.1 (CHar), 129.3 (CHar), 139.7 (Car), 163.4 (C2). HRMS calculado para C22H35N205: 407.2546 [M+H]+. Encontrado: 407.2544.
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7f?S,7aSfí)-2-(octílimino)-octahidrobenzo[dloxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-4b).
1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.91 (t, 3H, J=7.0 Hz, CH3), 1.24-1.42 (m, 10H, 5xCH2), 1.55-1.66 (m, 2H, CH2), 3.19-3.30 (m, 2H, CH2), 3.35 (dd, 1H, J=6.0, 9.2 Hz, H-5), 3.65 (t, 1H, J=6.1 Hz, H-6), 3.80 (dd, 1H, J=7.5, 9.0 Hz, H-4), 3.95-4.02 (m, 1H, H-7), 4.09 (t, 1H, J=7.7 Hz, H-3a), 5.11-5.21 (m, 1H, H-7a); 1H RMN (δ, 500 MHz, D20): 0.88 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.24-1.40 (m, 10H, 5xCH2), 1.58-1.68 (m, 2H, CH2), 3.27-3.38 (m, 2H, HCH2), 3.40-3.44 (t, 1H, J=9.1 Hz, H-5), 3.61 (dd, 1H, J=8.0, 9.6 Hz, H-4), 3.64 (t, 1H, J=9.0 Hz, H-6), 4.05 (dd, 1H, J=4.3, 9.3 Hz, H-7), 4.12 (t, 1H, J=7.5 Hz, H-3a), 5.14-5.23 (m, 1H, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.5 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2),
30.3 (CH2), 30.4 (CH2), 33.0 (CH2), 44.0 (NCH2), 61 .5 (C3a), 71 .5 (C7), 74.5 (C6), 75.9 (C5), 76.6 (C4), 84.6 (C7a), 163.3 (C2). HRMS calculado para C15H29N2O5: 317.2076 [M+H]+. Encontrado: 317.2046. (3aSfí,4Sfí,5Sñ!6Sñ,7fíS,7aS/:?)-4-(benciloxi)-2-(nonilim¡no)- octahidrobenzo[cfjoxazole-5,6,7-triol ((±)-28c).
1 H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=7.0 Hz, CH3), 1 .20-1 .39 (m, 12H, 6xCH2), 1 .54-1 .63 (m, 2H, CH2), 3.22 (t, 2H, J=7.0 Hz, HCH2), 3.61 -3.67 (m, 3H, H-4, H-5, H-6), 3.98 (dd, 1 H, J=3.6, 7.1 Hz, H-7), 4.14-4.20 (m, 1 H, H-3a), 4.74 (d, 1 H, J=1 1 .4 Hz, PhCH^O), 4.85 (d, 1 H, J=1 1 .4 Hz, PhCH≤0), 4.95-5.05 (m, 1 H, H-7a), 7.26-7.43 (m, 5H, Ph); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.7 (CH2), 30.2 {CH2), 30.39 (CH2), 30.42 (CH2), 30.6 (CH2), 33.0 (CH2), 43.8 (NCH2), 62.0 (C3a), 71 .0 (C7), 74.3 (C6), 75.4 (C5), 76.5 (PhCH20), 82.5 (C4), 84.3 (C7a), 128.7 (CHar), 129.1 (CHar), 129.3 (CHar), 139.7 (Car), 163.4 (C2). HRMS calculado para C23H37N205: 421 .2702 [M+H]+. Encontrado: 421 .2682.
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7/:?S,7aSfí)-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol ((±)-4c)
1 H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1 .25-1 .42 (m, 12H, 6xCH2), 1 .57-1 .65 (m, 2H, CH2), 3.25-3.30 (m, 2H, NCH2), 3.34-3.38 (m, 1 H, H- 5), 3.66 (t, 1 H, J=6.0 Hz, H-6), 3.81 (t, 1 H, J=8.3 Hz, H-4), 3.97-4.04 (m, 1 H, H- 7), 4.09-4.14 (m, 1 H, H-3a), 5.13-5.24 (m, 1 H, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.7 (CH2), 27.6 (CH2), 30.3 (CH2), 30.4 (CH2), 30.6 (CH2), 33.0 (CH2), 44.0 (NCH2), 61 .4 (C3a), 71 .4 (C7), 74.5 (C6), 75.8 (C5), 76.5 (C4), 84.5 (C7a), 163.2 (C2). HRMS calculado para Ci6H3iN205: 331 .2233 [M+H]+. Encontrado: 331 .2223.
(3aS,4S,5S,6S,7fí,7aS)-4-(benciloxi)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[d]oxazole- 5,6,7-triol ((+)-28c).
[α 5+10.7 (c 0.9, MeOH); Los datos espectroscópicos de RMN son idénticos a los de (±)-28c. HRMS calculado para C23H37 2O5: 421.2702 [M+H]+. Encontrado: 421.2704. {3aS,4S,5/:?,6S,7/:?,7aS)-2-{nonilimino)-octahidrobenzo[o(]oxazole-4,5,6,7-tetraol <(+)-4c).
[α] «+16.2 (c 0.9, MeOH); Los datos espectroscópicos de RMN son idénticos a los de (±)-4c. HRMS calculado para C16H31N2O5: 331.2233 [M+H]+. Encontrado: 331.2235.
{3aS,4S,5/:?,6S,7fí,7aS)-3-nonil-2-(nonilimíno)-octahídrobenzo[ |oxazoie- 4,5,6,7-tetraol ((+)-4d).
[aj¾'+8.4 (c 1.0, MeOH); 1H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 6H, J=6.8 Hz), 1.23-1.42 (m, 24H), 1.57-1.83 (m, 4H), 3.31-3.34 (m, 1H), 3.36-3.44 (m, 2H), 3.53-3.62 (m, 2H), 3.64 (t, 1H, J=5.9 Hz), 3.95 (dd, 1H, J=7.5, 9.6 Hz), 3.98 {dd, 1H, J=3.8, 5.4 Hz), 4.17 (t, 1H, J=7.9 Hz), 5.16 (dd, 1H, J=3.4, 8.4 Hz); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4, 23.7, 27.5, 27.6, 30.32, 30.34, 30.56, 30.58, 33.0, 44.3, 45.0, 64.0, 71.8, 73.1, 75.8, 76.6, 83.0, 161.1. HRMS calculado para C-25H49N2O5: 457.3641 [M+H]+. Encontrado: 457.3658.
{3afí,4S,5fí,6fí,7S,7aS)-2-(nonilímino)-octahidro-1H-benzo[cimidazole-4,5,6,7- tetraol ((-)-5c).
[aj«-14.5 (d.O, MeOH); H RMN {δ, 500 MHz, CD3OD): 0.90 (t, 3H, J=6.8 Hz), 1.22-1.42 (m, 12H), 1.55-1.64 (m, 2H), 3.17-3.28 (m, 3H), 3.42-3.56 (m, 2H), 3.71-3.83 (m, 2H), 4.15-4.27 (m, 1H); 1H RMN (δ, 500 MHz, D2O): 1.05 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.40-1.56 (m, 12H, 6xCH2), 1.73-1.83 (m, 2H, CH2), 3.44 (t, 2H, J=6.9 Hz, CH2), 3.52 (t, 1H, J=9.6 Hz, H-5), 3.71 (dd, 1H, J=8.6, 9.5 Hz, H-4), 3.76 (t, 1H, J=9.3 Hz, H-6), 4.02 (t, 1H, J=7.3 Hz, H-3a), 4.07 (dd, 1H, J=4.9, 9.3 Hz, H-7), 4.47 (t, 1H, J=5.3 Hz, H-7a); 13C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 14.4 (CH3), 23.6 (CH2), 27.6 (CH2), 30.2 (CH2), 30.3 (2xCH2), 30.5 (CH2), 33.0 (CH2), 44.0 (NCH2), 60.0 (C3a), 60.9 (C7a), 71.6 (C7), 74.9 (C6), 75.2 (C5), 76.1 (C4),
160.9 (C2). HRMS calculado para Ci6H32N304: 330.2393 [M+H]+. Encontrado: 330.2386.
{3afí,4S,5fí,6fí,7S,7aS)-2-(3-fen¡lpropilímino)-octahidro-1 H-benzo[d]innidazole- 4,5,6,7-tetraol ((-)-5e).
[aj « -8.2 (c 1 .0, MeOH); H RMN (δ, 500 MHz, CD3OD): 1 .90-1 .96 (m, 2H), 2.70
(t, 2H, J=7.7 Hz), 3.18-3.30 (m, 3H), 3.47-3.59 (m, 2H), 3.73-3.83 (m, 2H), 4.1 7- 4.26 (m, 1 H), 7.14-7.34 (m, 5H); 1 H RMN (δ, 500 MHz, D20): 2.1 1 -2.17 (m, 2H), 2.91 (t, 2H, J=7.3 Hz), 3.45 (t, 2H, J=6.7 Hz), 3.50 (t, 1 H, J=9.7 Hz), 3.66 (t, 1 H, J=9.0 Hz), 3.73 (t, 1 H, J=9.0 Hz), 3.98 (t, 1 H, J=7.3 Hz), 4.04 (dd, 1 H, J=4.9, 8.8 Hz), 4.38-4.48 (m, 1 H), 7.42-7.63 (m, 5H); 3C RMN (δ, 100 MHz, CD3OD): 31 .8, 33.6, 43.4, 60.0, 60.9, 71 .6, 75.0, 75.2, 76.1 , 127.2, 129.39, 129.42, 129.6, 142.3, 160.9. HRMS calculado para C16H24N304: 322.1767 [M+H]+. Encontrado: 322.1771 .
EJEMPLO 2. Ensayos biológicos.
2.1 . Actividad inhibidora sobre qlicosidasas y Glucosilceramida Sintasa (GCS). Se estudió la selectividad de los compuestos 1 -5 y los subproductos 27-28 sobre la β-glucocerebrosidasa (GCase), sobre un panel de glícosidasas comercialmente disponibles y se determinó la actividad sobre la Glucosilceramida Sintasa en homogeneizados de células A549 como se describe en Egido-Gabás, M. y col. en Org. Biomol. Chem. 2005, 3, 1 195-1201 . Se recoge un resumen de los datos de inhibición (% actividad o los valores de IC50) en la Tabla 1 .
Con la excepción de las isoureas 1 a, 1 d, 2c-d, 3a-d y 4d (con valores de IC50 superiores a 1 .9 μΜ), los compuestos 1 -5 resultaron ser unos inhibidores muy potentes de la GCase, con valores de IC50 del orden de nanomolar. Las isoureas 1 d-4d presentaron una menor inhibición sobre esta enzima que las correspondientes isoureas 1 c-4c. Como era de esperar, los subproductos 27 y
28, que tienen uno de los grupos hidroxilo protegido en forma de éter bencílico resultaron ser peores inhibidores que las correspondientes isoureas con todos los grupos hidroxilo desprotegidos. Es destacable que ninguno de los compuestos mencionados arriba presentó una actividad significativa sobre la a- galactosidasa a 100 μΜ.
Las isoureas bícíclicas 3a-c resultaron ser inhibidores de las a-glucosidasas testadas, con valores de IC50 entre 0.6 y 0.9 μΜ para la α-glucosidasa de levadura de panadero y entre 6 y 34 μΜ para la α-glucosidasa de arroz. Sin embargo, estos compuestos mostraron menos de un 6% de inhibición de la ct- glucosídasa lísosomal humana en fibroblastos después de 24 h de incubación a 50 μΜ.
Por otro lado, las isoureas 4a-c y las guanidinas 5c,e resultaron ser inhibidores tanto de la β-glucosidasa de almendra como de la β-galactosidasa de hígado bovino con valores de IC50 del orden de μΜ e incluso nM. Por el contrario, estos compuestos no inhibieron significativamente la β-galactosidasa lisosomal humana en fibroblastos después de 24 h de incubación a 50 μΜ. Cabe destacar que únicamente la isourea 2d y los subproductos 27c,d y 28c mostraron una moderada inhibición (entre un 64% y un 90%) sobre la Glucosilceramída Sintasa a 250 μΜ, indicando esto una selectividad hacia la enzima hídrolítica.
a-glucosidasa
a-g!ucosidasa β-glucosidasa β-galactosidasa
GCase (levadura de GCS
(arroz) (almendra) (hígado bovino) panadero)
% actividad
Inhibidor ΙΟ50/μΜ IC50/^M IC50 ΙμΜ IC50 /juM IC50 ΙμΜ
(250 μΜ)
(±)-1a 6.44 NI NI NI NI NI
(±)-1b 0.60 NI NI NI 15%1D1 NI
(±)-1c 0.22 NI NI NI NI NI
(-)-1c 0.12 NI NI 40%1O) 58%lD1 NI
(-)-1d 11.1 NI NI NI NI 41%
(±)-2c 2.9 NI NI NI 63%tDi 43%
(+)-2c 1.86 NI NI NI NI 57%
(+)-2d 60 NI NI NI 65%lD| 10%1C1
(±)-3a 12.9 0.9 33.9 NI 48%lDi NI
(±)-3b 2.46 0.8 22.9 NI 16%tDi NI
(±)-3c 0.71 0.8 12.9 NI 15%1D1 NI
(■)-3c 6.00 0.6 6.3 NI 53%lD| 65%
{-)-3d 10.4 NI NI NI NI 65%lcJ
(±)-4a 0.098 NI NI 15.7 0.14 56%
(±)-4b 0.017 NI NI 9.2 0.04 NI
(±)-4c 0.009 NI NI 9.8 0.02 NI
(+)-4c 0.008 NI NI 6.9 0.01 NI
(+)-4d 6.8 NI NI NI NI 41%
(-)-5c 0.012 52%1K| NI 60%lD1 0.06 NI
(-)-5e 0.045 31 %lDJ NI 5.2 0.18 NI
(±)-27a 64.4 NI NI NI NI NI
(±)-27b 6.36 41%1D) NI NI NI NI
(±)-27c 1.34 1.9 36.2 NI 27%1D1 NI
(-)-27c 17.3 57 NI NI NI 33%
(-)-27d 157.4 NI NI NI NI 36%1C1
(±)-28a 3.88 46%1D) NI NI 51%tDi NI
(±)-28b 0.74 NI NI NI 19%tDi NI
(±)-28c 1.74 NI NI NI 26%'D) NI
(+)-28c 0.35 NI101 NI NI 3.7 33%
Tabla 1. Actividad inhibidora sobre glicosidasasíal y Glucosilceramida Sintasa (GCS).
[a] Ninguno de los compuestos mostró actividad frente a la enzima a- galactosidasa (grano café verde), [b] % actividad a 100 μΜ. [c] No se detectó inhibición a 50 μΜ. [d] NI: No se detectó inhibición a 100 μΜ para a- glucosidasa, β-glucosidasa, a-galactosídasa, β-galactosídasa y a 250 μΜ para GCS.
2.2 Actividad inhibidora de algunos de los compuestos sobre la β- qlucocerebrosidasa humana en fibroblastos Para estudiar la inhibición de los ciclitoles 1 -5 sobre la enzima β- glucocerebrosidasa humana, se incubaron fibroblastos durante 24h en ausencia o presencia de los inhibidores a 50 μΜ y se empleó un "ensayo de enzima intacta" descrito por Sawkar y col. (Sawkar, A. R.; Cheng, W. C; Beutler, E.; Wong, C. H.; Balch, W. E.; Kelly, J. W. Proc. Nati. Acad. Sci. U S A 2002, 99, 15428-15433) para determinar la actividad enzimátíca medíante la adición del sustrato (β-D-glucopíranósído de 4-metílumbeliferilo) a células intactas seguido de la cuantificación de la 4-metilumbeliferona liberada. Previamente se estudiaron la citotoxicidad de los inhibidores. Las isoureas 1d- 4d presentaron cierta citotoxicidad, con valores de LD50 entre 13 y 15 μΜ, por lo que fueron testados a 5 μΜ. Sin embargo, el resto de compuestos no presentaron citotoxicidad a concentraciones inferiores a 300 μΜ.
Como era de esperar, la capacidad inhibidora aumenta con la lipofilia de la cadena en cada una de las seríes. Los /V-noníl derivados (+)-2c y (-)-3c mostraron moderada inhibición (33% y 46%, respectivamente) a 50 μΜ, mientras que la isourea («)-1 c presentó una fuerte inhibición (87%) a la misma concentración.
Las isoureas 1 b-c, 3c, 4a-c y las guanidinas 5c,e que mostraron mas de un 46% de inhibición a 50 μΜ, fueron también testadas a concentraciones más bajas. Es destacable que las isoureas 4b-c y las guanidinas 5c,e mostraron
potente inhibición de la β-glucocerebrosidasa humana a concentraciones orden de nM
Se recoge un resumen de la inhibición (%) sobre la β-glucocerebrosidasa humana en la Figura 1 .
2.3. Potenciación in vitro de la actividad de la β-glucocerebrosidasa en linfoblastos de pacientes de Gaucher con las mutaciones N370S o L444P en presencia de algunas chaperonas farmacológicas.
Se determinaron las actividades de la β-glucocerebrosídasa en lisados celulares después de incubar los linfoblastos en presencia o en ausencia de concentraciones crecientes de los compuestos 1c-5c y 5e durante 3 días en placas de 12 pocilios. Después de lavar el pellet con PBS, se resuspendió en agua y se lísó mediante sonicación. Brevemente, se incubaron a 37 SC 10 μΙ_ del homogeneizado con 50 μΙ_ del sustrato β-D-glucopiranósido de 4- metilumbeliferilo (6 mM) en tampón citrato-fosfato 0.1 M, pH 5.2 suplementado con taurocolato de sodio (0,25%) y Tritón X-100 (0.1 %). Se dejó reaccionar durante 2 h y se paró la incubación añadiendo 150 μΙ_ de tampón glicina- hidróxido de sodio 0.2 M (pH 10.6). Se determinó la 4-metilumbeliferona liberada mediante fluorometría (excitación 355 nm; emisión 460 nm). La proteína fue cuantificada medíante el kit de ensayo de proteína Micro BCA (Pierce, Thermo Scientific). En la Tabla 2 se indican las concentraciones de los compuestos a las que se observó un mayor incremento de la actividad sobre la β-glucocerebrosidasa en linfoblastos de pacientes de Gaucher con las mutaciones N370S o L444P. Los ciclitoles testados demostraron un impacto significativo sobre la potenciación de la actividad enzímática, especialmente frente a la mutación N370S.
La actividad de la β-glucocerebrosidasa en Usados obtenidos a partir de linfoblastos de pacientes de Gaucher con las mutaciones N370S se incrementó hasta 2.1 veces en el caso más favorable (isourea (+)-4c). Sin embargo, se observó un débil incremento en la actividad residual hasta 1 .5 veces para la mutación L444P en el caso más favorable (isourea (+)-4c).
El compuesto 1c, a pesar de ser un buen inhibidor de la β-glucocerebrosidasa, resultó ser la peor chaperona farmacológica frente a las mutaciones N370S y L444P, con elevaciones de actividad residual de 1.4 y 1 .1 veces, respectivamente, a una concentración 1 μΜ. Por el contrario, el resto de compuestos incrementaron la actividad más de 1 .7 y 1 .3 veces a alguna concentración testada frente a las mutaciones N370S y L444P, respectivamente. Las isoureas 2c y 3c a concentraciones del orden de μΜ (10 o 5 μΜ) fueron eficaces frente a la mutación N370S, con elevaciones de actividad residual entre 1 .7 y 1 .8 veces, mientras que los compuestos (+)-4c, (-)-5c y (-)-5e incrementaron la actividad residual entre 1 .7 y 2.1 veces a concentraciones del orden de nM (entre 50 y 200 nM). Es destacable que estos tres últimos compuestos resultaron ser los más eficaces de las series frente a las mutaciones N370S y L444P, con elevaciones de la actividad residual alrededor de 1 .4 veces a una concentración de 10 nM en las dos mutaciones. Los resultados anteriores apoyan el concepto terapéutico de los solicitantes que los potentes inhibidores cíclitoles con estructura bicíclica pueden servir como chaperonas farmacológicas eficaces para potenciar la actividad enzimática muíante de pacientes con enfermedad de Gaucher.
Chaperona N370S L444P farmacológica (concentración)181 (concentración)131
(-)--lc 1.4 ±0.1 (1 μΜ) 1.1 ±0.1 (1 μΜ)
(+)-2c 1.710.2 (10μΜ) 1.3 ±0.1 (1 μΜ)
(±)-3c 1.7 ±0.1 (5μΜ) NDtDJ
(-)-3c 1.8 ±0.1 (10 μΜ) 1.4 ±0.1 (0.1 μΜ)
(±)-4c 1.7 ±0.1 (0.2 Μ) D[b¡
(+)-4c 2.1 ±0.1 (0.2 μΜ) 1.5 ±0.1 (0.01 μΜ)
(")-5c 1.8 ±0.1 (0.1 μΜ) 1.4 ±0.1 (0.01 μΜ)
(-)-5e 1.9 ±0.1 (0.05 μΜ) 1.4 ±0.1 (0.01 μΜ)
Tabla 2. Potenciaciones de actividad sobre la β-glucocerebrosidasa en linfoblastos de pacientes de Gaucher con las mutaciones N370S o L444P en presencia de algunas chaperonas farmacológicas.
[a] Se incubaron los linfoblastos de pacientes de Gaucher con las mutaciones N370S y L444P durante 3 días con las chaperonas farmacológicas antes de determinar la actividad. Se presentan los valores observados para el mayor incremento de la actividad residual de la β-glucocerebrosidasa. Los datos entre paréntesis corresponden a las concentraciones de las chaperonas farmacológicas, [b] ND: No determinado.
Claims
1 . Compuesto de fórmula general (I):
(
o cualquiera de sus sales, isómeros o solvatos,
donde
X y W son iguales o diferentes y se seleccionan entre -O-, -S- y un grupo -NRi ; Y es un grupo - NR2; y
Ri y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan entre H, alquilo C Ci8, un cicloalquilo y un grupo arilo.
2. El compuesto según la reivindicación 1 , donde X es un grupo -O-.
3. El compuesto según la reivindicación 1 , donde X es -NR1.
4. El compuesto según la reivindicación 1 , donde X es -S-,
5. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde W es un grupo -O-.
6. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde W es un grupo -NRL
7. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde W es un grupo -S-.
8. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, donde Ri es H.
9. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, donde Ri es un grupo alquilo CrCi8.
10. El compuesto según la reivindicación 9, donde Ri es un grupo alquilo Cg.
1 1 . El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 9 ó 10, donde Ri está sustituido por un cicloalquilo o por un grupo arilo.
12. El compuesto según la reivindicación 1 1 , donde el grupo arilo es un fenilo.
13. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, donde Ri es un cicloalquilo o un grupo arilo.
14. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, donde R2 es H.
15. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, donde R2 es un grupo alquilo C Cie-
16. El compuesto según la reivindicación 1 5, donde R2 es un grupo alquilo C6- Cg, o un grupo {CH2)3Ph.
17. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 15 ó 16, donde R2 está sustituido por un cicloalquilo o un grupo arilo.
18. El compuesto según la reivindicación 17, donde el grupo arilo es un fenilo.
19. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, donde F½ es un cicloalquílo o un grupo arílo.
20. El compuesto de fórmula general (I), según la reivindicación 1 , que se selecciona de entre la siguiente lista:
((±)-1a):
{3aSñ,4Sñ,5/:?S,6Sfí,7fíS,7afíS)-2-(hexilimino)-octahidrobenzo[o(]oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-1 b):
(3aSfí,4Sfí,5fíS,6Sfí,7fíS,7afíS)-2-(octilimino)-octahidrobenzo[c/|oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-1c):
(3aSfí,4Sfí,5f?S,6S/:?,7fíS,7a/:?S)-2-(nonilimíno)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
{(■)-1c):
(3aS,4S,5/?,6S,7^,7af?)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[cloxazole-4, 5,6,7- tetraol;
<(-)-1d):
(3aS,4S,5/:?,6S,7ñ,7añ)-3-nonil-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[c(loxazole- 4,5,6,7-tetraol;
<(±)-2c):
(3afíS,4Sfí,5fíS,6Sfí,7/:?S,7aSfí)-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol; ((+)-2c)
{3afí,4S,5fí,6S,7fí, 7aS)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[Qfjoxazole-4, 5,6,7- tetraol; (W-2d)
(3af?,4S,5fí,6S7fí aS)-3-nonil-2-(nonilim¡no)-octahidrobenzo[d]oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
{(±)-3a)
(3afíS,4Sfí,5ñS,6SñJfíS7añS)-2-(hexilimino)-octahidrobenzo[c ioxazole- 4,5,6,7-tetraol;
<(±)-3b):
(3afíS,4Sfí,5ñS,6Sf?JfíS7añS)-2-(octilimino)-octahidrobenzo[cf|oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
{(±)-3c):
(3añS,4Sfí,5ñS!6Sñ,7fíS,7añS)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
{(-)-3c):
(3afí,4S,5fí,6SJfí7afí)-2-(nonilim¡no)-octahidrobenzo[c |oxazole-4,5,6,7- tetraol;
((-)-3d):
{3afí,4S,5fí,6SJfí,7afí)-3-nonil-2-(nonilímino)-octahidrobenzo[cloxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-4a):
{3aSñ,4Sñ,5/:?S,6Sfí,7fíS,7aS/:?)-2-(hexilimino)-octah¡drobenzo[o(]oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±)-4b):
{3aSñ,4Sñ,5fíS,6Sfí,7fíS,7aS/:?)-2-(oct¡limino)-octahidrobenzo[d]oxazole- 4,5,6,7-tetraol; ((±)-4c):
(3aSfí,4Sfí,5f?S,6S/:?,7fíS,7aSf?)-2-(nonilimíno)-octahidrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol; ((+)-4c):
(3aS,4S,5ñ,6S,7fí, 7aS)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[. joxazole-4, 5,6,7- tetraol;
<(+Hd):
(3aS,4S,5ñ,6S,7ñ,7aS)-3-nonil-2-(nonil¡mino)-octahidrobenzo[d]oxazole- 4,5,6,7-tetraol;
<(-)-5c):
(3añ,4S,5fí,6ñ,7S,7aS)-2-(nonilimino)-octahidro-1 /-/-benzo[climidazole-4 tetraol; y
<(-)-5e):
(3afí,4S,5fí,6fí,7S,7aS)-2-(3-fenílpropilimino)-octahidro-1 H-benzo[c imidazole- 4,5,6,7-tetraol.
21 . El compuesto de fórmula general (I), según la reivindicación 20, que se selecciona de entre la siguiente lista:
((±Hb):
(3aSfí,4Sfí,5f?S,6Sfí,7fíS,7aS/:?)-2-(octilimíno)-octahídrobenzo[c loxazole- 4,5,6,7-tetraol;
((±Hc):
(3aSfí,4Sfí,5f?S,6Sfí,7fíS,7aS/:?)-2-(nonilimino)-octahídrobenzo[^oxazole- 4,5,6,7-tetraol; (3aS,4S,5 ?,6S,7fí,7aS)-2-(nonilimino)-octahidrobenzo[dloxazole-4,5,6,7- tetraol; ((-)-5c):
(3af?,4S,5R,6f?7S aS)-2-(nonilimino)-octahidro-1 H-benzo[d]imidazole-4,5,6,7- tetraol; y
<(-)-5e):
(3afí,4S,5fí,6f?7S aS)-2-(3-fenilpropilimino)-octahidro-1 H-benzo[c imidazole- 4,5,6,7-tetraol.
22. El compuesto de fórmula general (I), según cualquiera de las reivindicaciones 20 ó 21 , que se selecciona de entre la siguiente lista:
((+)-4c):
{3aS,4S,5/:?,6S,7/:?,7aS)-2-{nonilimino)-octahidrobenzo[o(]oxazole-4,5,6,7- tetraol; ((-)-5c):
(3afí,4S,5fí,6fí,7S,7aS)-2-(non¡limino)-octahidro-1 H-benzo[climidazole-4)5,6,7- tetraol; y
((-)-5e):
(3aft4S,5R,6f?JS7aS)-2-(3-fenilpropilimino)-octahidro-1 H-benzo[climidazole- 4,5,6,7-tetraol.
23. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 para su uso como medicamento.
24. Composición farmacéutica, que comprende un compuesto de fórmula general (I) o sus sales, solvatos o prodrogas, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, junto con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables y al menos un transportador farmacéuticamente aceptable, adyuvante y/o vehículo.
25. Composición farmacéutica según la reivindicación 24, donde además comprende uno o más principios activos.
26. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 24 ó 25, donde dicha composición se presenta en una forma adaptada a la administración parenteral, oral, sublingual, nasal, intratecal, bronquial, linfática, rectal, transdérmica o inhalada.
27. Uso del compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 o de la composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 24 a 26, para la elaboración de un medicamento.
28. Uso según la reivindicación 27, donde el medicamento se utiliza para el tratamiento y/o prevención de una enfermedad relacionada con trastornos de tipo lisosomal.
29. Uso según la reivindicación 28, donde la enfermedad es la enfermedad de Gaucher.
30. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 27 a 29, donde el medicamento se presenta en una forma adaptada a la administración parenteral, oral, sublingual, nasal, intratecal, bronquial, linfática, rectal, transdérmica o inhalada.
31 . Procedimiento de síntesis del compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, que comprende la reacción de un compuesto de fórmula general (II) con un compuesto de fórmula general (III):
o cualquiera de sus sales, isómeros o solvatos,
donde;
T y Z son iguales o diferentes y se selecciona entre un grupo -OH, -SH o un grupo -NHRi ;
Bn es bencilo;
X se selecciona entre -O-, -S- y un grupo -NR^
Y es un grupo - NR2;
W se selecciona entre -O-, -S- y un grupo -NRi ;
Ri y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan entre H, alquilo C Ci8, un cicloalquilo y un grupo arilo; y
NCS es isotícionato.
32. El procedimiento según la reivindicación 31 , donde T es un grupo -OH.
33. El procedimiento según la reivindicación 31 , donde T es un grupo -NHRi .
34. El procedimiento según la reivindicación 31 , donde T es un grupo -SH.
35. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 34 donde Z es un grupo -OH.
36. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 34, donde Z es un grupo -NHRi .
37. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 34, donde Z es un grupo -SH.
38. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 37, donde X es -O-.
39. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 37, donde X es un grupo -NF^.
40. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 37, donde X es un grupo -S-.
41. El procedimiento según la reivindicación 39, donde Ri es H.
42. El procedimiento según la reivindicación 39, donde Ri es un grupo alquilo
43. El procedimiento según la reivindicación 42, donde Ri es un grupo alquilo c9.
44. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 42 ó 43, donde Ri está sustituido por un cicloalquilo o por un grupo arilo.
45. El procedimiento según la reivindicación 44, donde el grupo arilo es un fenilo.
46. El procedimiento según la reivindicación 39, Ri es un cicloalquilo o un grupo arilo.
47. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 46 donde R2 es H.
48. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 46, donde R2 es un grupo alquilo C-|-Ci8.
49. El procedimiento según la reivindicación 48, donde R2 es un grupo alquilo C-6-C9, o un grupo (CH2)3P .
50. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 48 o 49, donde R2 está sustituido por un cicloalquilo o por un grupo arilo.
51 . El procedimiento según ia reivindicación 50, donde el grupo arilo es un fenilo.
52. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 47 donde R2 es un cicloalquilo o un grupo arilo.
53. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 52, donde W es -O-.
54. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 52, donde W es un grupo -NRT .
55. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 52, donde X es un grupo -S-.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ESP201031553 | 2010-10-22 | ||
| ES201031553A ES2380968B1 (es) | 2010-10-22 | 2010-10-22 | Aminociclitoles bicíclicos y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2012052595A1 true WO2012052595A1 (es) | 2012-04-26 |
Family
ID=45974737
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/ES2011/070729 Ceased WO2012052595A1 (es) | 2010-10-22 | 2011-10-21 | Aminociclitoles bicíclicos y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| ES (1) | ES2380968B1 (es) |
| WO (1) | WO2012052595A1 (es) |
-
2010
- 2010-10-22 ES ES201031553A patent/ES2380968B1/es not_active Withdrawn - After Issue
-
2011
- 2011-10-21 WO PCT/ES2011/070729 patent/WO2012052595A1/es not_active Ceased
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| EGIDO-GABAS, M. ET AL.: "Aminocyclitols as pharmacological chaperones for glucocerebrosidase, a defective enzyme in Gaucher disease", CHEM. MED. CHEM, vol. 2, 2007, pages 992 - 994 * |
| EGIDO-GABAS, M. ET AL.: "New aminocyclitols as modulators of glucosylceramide metabolism", ORG.BIOMOL. CHEM., vol. 3, 2005, pages 1195 - 1201, XP009124552, DOI: doi:10.1039/b411473f * |
| KAMEDA, Y. ET AL.: "Valiolamine, a new alfa-glucosidase inhibitin aminocyclitol produced by streptomyces hygroscopicus", THE JOURNAL OF ANTIBIOTICS, vol. 37, no. 11, 1984, pages 1301 - 1307 * |
| SANCHEZ-OLLE, G. ET AL.: "Promising results of the chaperone effect caused by iminosugars and aminocyclitol derivatives on mutant glucoerebrosidases causing Gaucher disease", BLOOD CELLS MOLECULES AND DISEASES, vol. 42, 2009, pages 159 - 166 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2380968A1 (es) | 2012-05-22 |
| ES2380968B1 (es) | 2013-04-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2540810T3 (es) | Proceso para preparar compuestos azabicíclicos | |
| CA2990668C (en) | IONIZABLE COMPOUNDS AND RELATED COMPOSITIONS AND USES | |
| ES2324746T3 (es) | Compuestos de ciclopentano y ciclopenteno sustituidos utiles como inhibidores de neuraminidasa. | |
| ES2548252T3 (es) | Método de preparación de un inhibidor de monooxigenasa del citocromo P450 e intermedios que intervienen | |
| PT86366B (pt) | Processo para a preparacao de derivados do acido fosfinico e de composicoes farmaceuticas que os contem | |
| BR112013002914B1 (pt) | Composto e composição farmacêutica compreendendo o mesmo | |
| US10407447B2 (en) | Pantothenate derivatives for the treatment of neurological disorders | |
| CA3085382A1 (en) | Glucosamine derivatives for the prevention or treatment of joint disorders | |
| ES3000719T3 (en) | Dihydroisoquinolinyl derivatives | |
| PT98227A (pt) | Processo de preparacao de 1,4-diamino-2-3-di-hidroxi-butanos substituidos e de composicoes farmaceuticas que os contem | |
| EP4704905A1 (en) | Lymphatic system-targeting compounds | |
| ES2537089T3 (es) | Purificación de imino- y amino-azúcares | |
| ES2380968B1 (es) | Aminociclitoles bicíclicos y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales. | |
| WO2020023794A1 (en) | Pegylated prodrugs of phenolic trpv1 agonists | |
| ES2379914B1 (es) | Aminociclohexanos polihidroxilados y su uso para el tratamiento de enfermedades lisosomales. | |
| ES2999070T3 (en) | A substituted tetrahydroisoquinoline derivative as a d1 positive allosteric modulator | |
| CN113461691A (zh) | 一种的西他列汀杂质及其制备方法与其检测方法 | |
| ES3056637T3 (en) | Compound and method for preparation of lisdexamfetamine | |
| ES3004257T3 (en) | Prodrugs of 2-(3,5-dichloro-1-methyl-indazol-4-yl)-1-[(1s,3r)-3-(hydroxymethyl)-5-(1-hydroxy-1-methyl-ethyl)-1-methyl-3,4-dihydro-1h-isoquinolin-2-yl]ethanone | |
| ES2812233T3 (es) | Compuestos terapéuticos y síntesis | |
| US20150203517A1 (en) | Prodrugs of Compounds that Enhance Antifungal Activity and Compositions of Said Prodrugs | |
| WO2025011557A1 (en) | Functionalized auristatins, pharmaceutical compositions, and therapeutic applications | |
| CN120359230A (zh) | 磷酰胺酯单糖、药物组合物及诊断和治疗应用 | |
| KR102961556B1 (ko) | 프로드러그 화합물 및 이의 제조 방법과 용도 | |
| WO2025036407A1 (en) | Aldh-activable funtionalized monosaccarides, pharmaceutical compositions, and diagnostic and therapeutic applications |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 11833902 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |
|
| NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |
|
| 122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 11833902 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |