WO2011154639A2 - Modulateurs de edn3 et/ou ednrb dans le traitement du melasma - Google Patents

Modulateurs de edn3 et/ou ednrb dans le traitement du melasma Download PDF

Info

Publication number
WO2011154639A2
WO2011154639A2 PCT/FR2011/051217 FR2011051217W WO2011154639A2 WO 2011154639 A2 WO2011154639 A2 WO 2011154639A2 FR 2011051217 W FR2011051217 W FR 2011051217W WO 2011154639 A2 WO2011154639 A2 WO 2011154639A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
expression
gene
ednrb
edn3
activity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/FR2011/051217
Other languages
English (en)
Other versions
WO2011154639A3 (fr
Inventor
Itaru Suzuki
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Galderma Research and Development SNC
Original Assignee
Galderma Research and Development SNC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Galderma Research and Development SNC filed Critical Galderma Research and Development SNC
Publication of WO2011154639A2 publication Critical patent/WO2011154639A2/fr
Publication of WO2011154639A3 publication Critical patent/WO2011154639A3/fr
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6881—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from skin
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/575—Hormones
    • G01N2333/5754—Endothelin, vasoactive intestinal contractor [VIC]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/20—Dermatological disorders
    • G01N2800/207—Pigmentation disorders
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/56—Staging of a disease; Further complications associated with the disease

Definitions

  • the invention relates to the identification and use of modulator compounds of EDN3 and / or EDNRB for the treatment of melasma. It also relates to methods of in vitro diagnosis or prognosis in vitro of this pathology.
  • pigmentation results from the synthesis and distribution of melanin pigments in the skin, hair follicles or eyes.
  • Pigmentation is genetically predefined but it is regulated by many internal or external factors.
  • melanins produced by melanocytes as well as the number of melanocytes, their tyrosinasic activity and their ability to export melanins to keratinocytes, the size of melanosomes that contain melanin grains, will condition the color of human skin.
  • pathologies related to excessive pigmentation include melasma.
  • Melasma is an acquired hyperpigmentation that is generally symmetrical with the photo-exposed areas of the face (forehead, cheeks, temples) and sometimes the neck. Elemental lesions are small, irregularly-shaped macules, ranging in color from light brown to black, and increasing after sun exposure.
  • Melasma affects mainly women (90% of cases), especially during pregnancy. Some consider it to be a physiological modification in pregnant women as well as the hyperpigmentation of areoles, genital mucosa and the white line, or linea fusca, whose treatment is similar to that of melasma.
  • the clinical and pathological features are identical in both sexes. There are three different clinical presentations: the most common centrofacial melasma, the malar melasma and the mandibular.
  • melanic origin may be at the epidermal and / or dermal level. The number of melanocytes is not modified, but melanin production by the basal cell melanocytes is increased.
  • Wood The light examination of Wood is very useful, it allows to distinguish three types of melasma according to the pigment distribution: - the epidermal type (70% of cases) where hyperpigmentation is accentuated;
  • Hydroquinone, tretinoin and azelaic acid are the three agents with scientifically recognized activity in melasma. This therapeutic arsenal is limited, therefore for many years, in the cosmetic or pharmaceutical industry, compositions for treating melasma have been sought, and in particular for modulating the amount of melanin in the skin.
  • EDN3 and / or EDNRB gene is expressed in YYY (cells in which EDN3 and / or EDNRB are expressed preferentially) and that its expression is EDN3 and / or EDNRB-induced. gene or its expression product, to treat melasma.
  • the protein encoded by this gene is a member of the endothelin family.
  • Endothelins are derived from endothelial vasoactive peptides involved in a variety of biological functions.
  • the active form of this protein is a 21 amino acid peptide transformed based on the precursor protein.
  • the active peptide is an endothelin B receptor ligand (EDNRB).
  • EDNRB endothelin B receptor ligand
  • the interaction of this endothelin with EDNRB is essential for the development of derived peak neuron cell lines, such as enteric melanocytes and neurons. Mutations in this gene and EDNRB have been associated with Hirschsprung's disease (HSCR) and Waardenburg syndrome (WS), which are congenital disorders involving neural crest cells. Four variants coding for three distinct isoforms were observed.
  • EDNRB gene description The human and protein DNA sequences of EDN3 are reproduced in the appendix, respectively SEQ ID No.2 (sequence NM 0001 14 (Genbank)), and SEQ ID No. 1. EDNRB gene description
  • the protein encoded by this gene is a G-protein coupled receptor that activates a secondary phosphatidylinositol-calcium messenger system. Its ligand, endothelin, consists of a family of three potent vasoactive peptides: ET1, ET2, ET3 and. Studies suggest that multigene disease, Hirschsprung type 2 diseases, is due to mutations in the endothelin-type B receptor gene. Three transcription variants encoding two different isoforms have been found for this gene. Although both isoforms bind to ET1, they exhibit different responses on binding, suggesting that they may be functionally distinct.
  • EDRNB human DNA and protein sequences of EDRNB are reproduced in the appendix (SEQ ID No.4 (sequence NM 0001 (Genbank)) and SEQ ID No.3, respectively.
  • An object of the invention relates to an in vitro method for diagnosing or monitoring the evolution of melasma in a subject, comprising comparing the expression or the activity of the EDN3 and / or EDNRB protein, the expressing its gene or the activity of at least one of its promoters in a biological sample of a subject relative to a control subject.
  • the expression of the protein can be determined by an assay of this EDN3 protein and / or EDNRB by immunohistochemical assay, for example by ELISA assay. Another method, especially for measuring the expression of the gene, is to measure the amount of corresponding mRNA by any method as described above. An assay of the activity of EDN3 and / or EDNRB can also be envisaged.
  • control is a "healthy” subject.
  • control subject refers to the same subject at a different time, which preferably corresponds to the beginning of treatment (To).
  • This measurement of the difference in the expression or activity of EDN3 and / or EDNRB, the expression of its gene or the activity of at least one of its promoters makes it possible in particular to monitor the efficacy of treatment, in particular treatment with a modulator of EDN3 and / or EDNRB, as envisaged above or by another treatment of melasma.
  • follow-up can reassure the patient as to the appropriateness, or necessity, of continuing this treatment.
  • Another aspect of the present invention relates to an in vitro method for determining susceptibility of a subject to develop melasma, comprising comparing the expression or activity of EDN3 and / or EDNRB, expression of of its gene or the activity of at least one of its promoters, in a biological sample of a subject relative to a control subject.
  • the expression of the protein can be determined by an EDN3 and / or EDNRB assay, by an immunohistochemical test or an immunoassay, for example by ELISA assay.
  • Another method, especially for measuring the expression of the gene is to measure the amount of corresponding mRNA by any method as described above.
  • An assay of EDN3 and / or EDNRB factor activity may also be considered.
  • the tested subject is here an asymptomatic subject, having no hair disorder related to alopecia.
  • the subject "control” in this method means a "healthy" reference subject or population. The detection of this susceptibility allows the establishment of a preventive treatment and / or increased monitoring of the signs related to alopecia.
  • the biological sample tested may be any sample of biological fluid or a sample of a biopsy.
  • the sample may be a preparation of skin cells, obtained for example by hair removal or biopsy.
  • Another object of the invention is an in vitro method for screening candidate compounds for the preventive and / or curative treatment of melasma, comprising determining the ability of a compound to modulate the expression or activity of EDN3 and or EDNRB or the expression of its gene or the activity of at least one of its promoters, said modulation indicating the utility of the compound for the preventive or curative treatment of melasma.
  • the method therefore makes it possible to select the compounds capable of modulating the expression or the activity of EDN3 and / or EDNRB, or the expression of its gene, or the activity of at least one of its promoters. More particularly, the invention relates to an in vitro method for screening candidate compounds for the preventive and / or curative treatment of melasma, comprising the following steps:
  • EDN3 and / or EDNRB measuring the expression or the activity of EDN3 and / or EDNRB, the expression of its gene or the activity of at least one of its promoters, in the biological samples or reaction mixtures; d. selection of compounds for which modulation of the expression or activity of EDN3 and EDNRB, the expression of its gene or the activity of at least one of its promoters is measured in the sample or the mixture treated in b), relative to the untreated sample or mixture.
  • Modulation means any effect on the level of expression or activity of EDN3 and / or EDNRB, the expression of its gene or the activity of at least one of its promoters, that is, possibly inhibition, but preferably stimulation, partial or complete.
  • the compounds tested in step d) above preferably induce the expression or the activity of EDN3 and / or EDNRB, the expression of its gene or the activity of at least one of its promoters.
  • expression of a protein means the amount of that protein
  • protein activity is meant its biological activity;
  • promoter activity is meant the ability of this promoter to trigger the transcription of the coded DNA sequence downstream of this promoter (and thus indirectly the synthesis of the corresponding protein).
  • the compounds tested can be of any type. They can be of natural origin or have been produced by chemical synthesis. It can be a library of structurally defined chemical compounds, compounds or uncharacterized substances, or a mixture of compounds.
  • the biological samples are cells transfected with a reporter gene operably linked to all or part of the promoter of the DE EDN3 gene and / or EDNRB, and the step c) described above consists in measuring the expression of said reporter gene.
  • the reporter gene may in particular code for an enzyme which, in the presence of a given substrate, leads to the formation of colored products, such as CAT (chloramphenicol acetyltransferase), GAL (beta galactosidase), or GUS (beta glucuronidase). It may also be the gene for luciferase or GFP (Green Fluorescent Protein).
  • the assay of the protein encoded by the reporter gene, or of its activity, is carried out conventionally, by colorimetric, fluorometric or chemiluminescence techniques, among others.
  • the biological samples are cells expressing the gene encoding the transcription factor EDN3 and / or EDNRB, and the step c) described above consists in measuring the expression of said gene.
  • the cell used here can be of any type. It can be a cell expressing the EDN3 gene and / or EDNRB endogenously, for example a liver cell, a cell of prostate, or even better, a skin cell. Organs of human or animal origin can also be used.
  • It may also be a cell transformed with a heterologous nucleic acid, encoding the EDN3 gene and / or EDNRB, preferably human or mammalian.
  • a wide variety of host cell systems can be used, such as, for example, Cos-7, CHO, BHK, 3T3, HEK293 cells.
  • the nucleic acid can be stably or transiently transfected by any method known to those skilled in the art, for example by calcium phosphate, DEAE-dextran, liposome, virus, electroporation, or microinjection.
  • expression of the EDN3 and / or EDNRB gene can be determined by measuring the rate of transcription of said gene, or its rate of translation.
  • transcription rate of a gene is meant the amount of corresponding mRNA produced.
  • translation rate of a gene is meant the amount of corresponding protein produced.
  • the expression of the gene can be measured by real-time PCR or by RNase protection.
  • RNase protection is meant the detection of a known mRNA from the poly (A) RNAs of a tissue that can be done by means of specific hybridization with a labeled probe.
  • the probe is a labeled complementary RNA (for example radioactive or enzymatic) of the messenger to look for. It can be constructed from a known mRNA whose cDNA, after RT-PCR, has been cloned into a phage.
  • RNA-poly (A) of the tissue where the sequence is to be searched is incubated with this probe under slow hybridization conditions in a liquid medium.
  • RNA hybrids are formed between the desired mRNA and the antisense probe.
  • the hybridized medium is then incubated with a mixture of ribonucleases specific for single-stranded RNA, so that only the hybrids formed with the probe can resist this digestion.
  • the digestion product is then deproteinized and repurified, before being analyzed by electrophoresis.
  • the labeled hybrid RNAs are detected for example by autoradiography or chemiluminescence.
  • the translation rate of the gene is evaluated for example by immunological assay of the product of said gene.
  • the antibodies used for this purpose may be of polyclonal or monoclonal type. Their production is based on conventional techniques.
  • a polyclonal anti-Early growth response antibody 1 can, inter alia, be obtained by immunizing an animal such as a rabbit or a mouse, using the entire protein. The antiserum is removed and then exhausted according to methods known to those skilled in the art.
  • a monoclonal antibody can, among other things, to be obtained by the classical method of Kohler and Milstein (Nature (London), 256: 495-497 (1975)). Other methods of preparing monoclonal antibodies are also known.
  • monoclonal antibodies can be produced by expression of a cloned nucleic acid from a hybridoma.
  • Antibodies can also be produced by the phage display technique, by introducing antibody cDNAs into vectors, which are typically filamentous phages that have V gene libraries on the surface of the phage. (for example fUSE5 for E.coli).
  • the immunoassay can be carried out in solid phase or in homogeneous phase; in a time or in two stages; sandwich method or competitive method, by way of non-limiting examples.
  • the capture antibody is immobilized on a solid phase.
  • solid phase it is possible to use microplates, in particular polystyrene microplates, or particles or solid beads, paramagnetic beads.
  • ELISA assays immunoassays, or any other detection technique can be used to reveal the presence of the antigen-antibody complexes formed.
  • the characterization of antigen / antibody complexes, and more generally isolated or purified but also recombinant proteins (obtained in vitro and in vivo) can be performed by mass spectrometry analysis. This identification is made possible thanks to the analysis (determination of the mass) of the peptides generated by the enzymatic hydrolysis of the proteins (trypsin in general).
  • the proteins are isolated according to methods known to those skilled in the art, prior to enzymatic digestion.
  • Peptide analysis in the form of a hydrolyzate
  • HPLC nano-HPLC
  • the determination of the mass of the peptides thus separated is carried out by ionization of the peptides and either by direct coupling to the mass spectrometer (electrospray mode ESI) or after deposition and crystallization in the presence of a matrix known to those skilled in the art ( analysis in MALDI mode).
  • the proteins are then identified through the use of appropriate software (eg Mascot).
  • the EDN3 and / or EDNRB gene can be produced according to standard techniques using Cos-7, CHO, BHK, 3T3 and HEK293 cells. It can also be produced using microorganisms such as bacteria (e.g. E. coli or B. subtilis), yeasts (e.g. Saccharomyces, Pichia) or insect cells, such as Sf9 or Sf21.
  • bacteria e.g. E. coli or B. subtilis
  • yeasts e.g. Saccharomyces, Pichia
  • insect cells such as Sf9 or Sf21.
  • the subject of the invention is also the use of an EDN3 and / or EDNRB modulator obtainable according to one of the methods described above for the preparation of a medicinal product intended for preventive and / or curative treatment.
  • melasma a method of preventive and / or curative treatment of melasma is described herein comprising administering a therapeutically effective amount of an EDN3 and / or EDNRB modulator to a patient in need of such treatment.
  • such modulators are activators (or inducers) of EDN3 and / or EDNRB.
  • the invention comprises the use of EDN3 and EDNRB inducing compounds, such as those identified by the screening method described above, for the preventive and / or curative treatment of melasma.
  • the modulator compounds are formulated in pharmaceutical compositions, in association with a pharmaceutically acceptable carrier. These compositions may be administered, for example, enterally, parenterally, or topically. Preferably, the pharmaceutical composition is applied topically. Orally, the pharmaceutical composition can be in the form of tablets, capsules, dragees, syrups, suspensions, solutions, powders, granules, emulsions, suspensions of microspheres or nanospheres or lipid vesicles or polymers for controlled release. Parenterally, the pharmaceutical composition may be in the form of solutions or suspensions for infusion or for injection.
  • the pharmaceutical composition is more particularly intended for the treatment of the skin, the mucous membranes and the scalp and may be in the form of ointments, creams, milks, ointments, powders, soaked swabs, solutions, gels, sprays, lotions or suspensions. It may also be in the form of suspensions of microspheres or nanospheres or lipid or polymeric vesicles or polymeric patches or hydrogels allowing controlled release.
  • This composition for topical application may be in anhydrous form, in aqueous form or in the form of an emulsion.
  • the pharmaceutical composition is in the form of a gel, a cream or a lotion.
  • the composition may comprise a modulator content of EDN3 and / or EDNRB ranging from 0.001 to 10% by weight, especially from 0.01 to 5% by weight relative to the total weight of the composition.
  • the pharmaceutical composition may further contain inert additives or combinations of these additives, such as:
  • preserving agents such as esters of parahydroxybenzoic acid; stabilizing agents;
  • UV-A and UV-B filters are UV-A and UV-B filters
  • antioxidants such as alpha-tocopherol, butylhydroxyanisole or butylhydroxytoluene, superoxide dismutase, ubiquinol or certain metal chelators.

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

L'invention concerne une méthode in vitro de criblage de composés candidats pour le traitement préventif ou curatif du melasma, comprenant la détermination de la capacité d'un composé à moduler l'expression ou l'activité de EDN3 et/ou EDNRB, ainsi que l'utilisation de modulateurs de l'expression ou de l'activité de EDN3 et/ou EDNRB pour le traitement du melasma. L'invention concerne aussi des méthodes de diagnostic ou pronostic in vitro de cette pathologie.

Description

Modulateurs de EDN3 et/ou EDNRB dans le traitement du melasma
L'invention concerne l'identification et l'utilisation de composés modulateurs de EDN3 et/ou EDNRB, pour le traitement du melasma. Elle concerne aussi des méthodes de diagnostic in vitro ou pronostic in vitro de cette pathologie.
Art antérieur et description de la situation
Chez l'homme, la pigmentation résulte de la synthèse et de la distribution des pigments mélaniques dans la peau, les follicules pileux ou les yeux.
La pigmentation est génétiquement prédéfinie mais elle est régulée par de nombreux facteurs internes ou externes.
Les mélanines produites par les mélanocytes ainsi que le nombre de mélanocytes, leur activité tyrosinasique et leur capacité à exporter les mélanines vers les kératinocytes, la taille des mélanosomes qui contiennent des grains de mélanine, vont conditionner la couleur de la peau humaine. Parmis les pathologies liées à une pigmentation excessive, on peut citer le melasma.
Le mélasma est une hyperpigmentation acquise généralement symétrique des zones photo- exposées de la face (front, joues, tempes) et parfois du cou. Les lésions élémentaires sont de petites macules au contour irrégulier, dont la couleur va du brun clair au noir et s'accentue après exposition solaire.
Le mélasma touche principalement les femmes (90 p. 100 des cas), surtout durant la grossesse. Certains le considèrent d'ailleurs comme une modification physiologique chez la femme enceinte au même titre que l'hyperpigmentation des aréoles, des muqueuses génitales et de la ligne blanche abdominale, ou linea fusca, dont le traitement est similaire à celui du mélasma. Les caractéristiques cliniques et anatomopathologiques sont identiques dans les deux sexes. On distingue trois présentations cliniques différentes : le mélasma centrofacial le plus fréquent, le mélasma malaire et le mandibulaire. A l'examen anatomopathologique, on retrouve une hyperpigmentation d'origine mélanique pouvant se situer au niveau épidermique et/ou dermique. Le nombre de mélanocytes n'est pas modifié, mais la production de mélanine par les mélanocytes des assises basales est augmentée.
L'examen en lumière de Wood est très utile, il permet de distinguer trois types de mélasma en fonction de la distribution pigmentaire : — le type épidermique (70 p. 100 des cas) où l'hyperpigmentation est accentuée ;
— le type dermique (10 p. 100 des cas) où l'hyperpigmentation est estompée ;
— le type mixte (20 p. 100 des cas) où l'on retrouve un mélange des deux images.
Chez les patients de phototype VI, cet examen est non contributif. Cette distinction a toute son importance dans la décision thérapeutique car le pigment dermique résiste à tous les traitements dépigmentants classiques.
L'hydroquinone, la trétinoïne et l'acide azélaïque sont les trois agents ayant une activité scientifiquement reconnue dans le mélasma. Cet arsenal thérapeutique est limité, par conséquent on recherche ainsi depuis de nombreuses années, dans l'industrie cosmétique ou pharmaceutique, des compositions permettant traiter le melasma, et notamment de moduler la quantité de mélanine dans la peau.
La demanderesse a maintenant trouvé que le gène EDN3 et/ou EDNRB était exprimé dans YYY (cellules où est exprimé EDN3 et/ou EDNRB de manière préférentielle) et que son expression était induite EDN3 et/ou EDNRB, Elle propose dès lors de cibler ce gène ou son produit d'expression, pour traiter le melasma.
Descriptif du gène EDN3
La protéine codée par ce gène est un membre de la famille de l'endothéline. Les endothélines sont dérivé de l'endothélium peptides vasoactifs impliqués dans une variété de fonctions biologiques. La forme active de cette protéine est un peptide 21 acides aminés transformés à base de la protéine précurseur. Le peptide actif est un ligand du récepteur de l'endothéline de type B (EDNRB). L'interaction de ce endothéline avec EDNRB est essentiel pour le développement de lignées cellulaires de neurones crête dérivés, tels que les mélanocytes et les neurones entériques. Des mutations dans ce gène et EDNRB ont été associés à la maladie de Hirschsprung (HSCR) et le syndrome de Waardenburg (WS), qui sont des affections congénitales impliquant cellules de la crête neurale. Quatre variantes codant pour trois isoformes distincts ont été observées.
Les séquences ADN humain et protéiques de EDN3 sont reproduites en annexe, respectivement SEQ ID No.2 (séquence NM 0001 14 (Genbank)), et SEQ ID No. l . Descriptif du gène EDNRB
La protéine codée par ce gène est un récepteur couplé aux protéines G qui actionne un système messager secondaire phosphatidylinositol-calcium. Son ligand, l'endothéline, se compose d'une famille de trois puissants peptides vasoactifs: ET1, ET2, ET3 et. Des études suggèrent que la maladie multigénique, Hirschsprung type 2 maladies, est due à des mutations dans le gène récepteur de l'endothéline de type B. Trois variantes transcription codant pour deux isoformes différentes ont été trouvées pour ce gène. Bien que les deux isoformes se lient à ET1, ils présentent des réponses différentes lors de la liaison, ce qui suggère qu'ils peuvent être fonctionnellement distinctes.
Les séquences ADN humain et protéiques de EDRNB sont reproduites en annexe (respectivement SEQ ID No.4 (séquence NM 0001 15 (Genbank)) et SEQ ID No.3.
Applications diagnostiques
Un objet de l'invention concerne une méthode in vitro de diagnostic ou de suivi de l'évolution du melasma chez un sujet, comprenant la comparaison de l'expression ou de l'activité de la protéine EDN3 et/ou EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, dans un échantillon biologique d'un sujet par rapport à un sujet contrôle.
L'expression de la protéine peut être déterminée par un dosage de cette protéine EDN3 et/ou EDNRB par un test immunohistochimique, par exemple par dosage ELISA. Une autre méthode, notamment pour mesurer l'expression du gène, est de mesurer la quantité d'ARNm correspondant, par toute méthode telle que décrit plus haut. Un dosage de l'activité de EDN3 et/ou EDNRB peut être également envisagé.
Dans le cadre d'un diagnostic, le sujet « contrôle » est un sujet « sain ».
Dans le cadre d'un suivi de l'évolution du melasma, le « sujet contrôle » fait référence au même sujet à un temps différent, qui correspond de préférence au début du traitement (To). Cette mesure de la différence de l'expression ou d'activité de EDN3 et/ou EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, permet notamment de suivre l'efficacité d'un traitement, notamment un traitement par un modulateur de EDN3 et/ou EDNRB, tel qu'envisagé plus haut ou par un autre traitement du melasma. Un tel suivi peut conforter le patient quant au bien fondé, ou à la nécessité, de poursuivre ce traitement.
Un autre aspect de la présente invention concerne une méthode in vitro de détermination d'une susceptibilité d'un sujet à développer le melasma, comprenant la comparaison de l'expression ou de l'activité de EDN3 et/ou EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, dans un échantillon biologique d'un sujet par rapport à un sujet contrôle. Là encore, l'expression de la protéine peut être déterminée par un dosage EDN3 et/ou EDNRB, par un test immunohistochimique ou immunoessai, par exemple par dosage ELISA. Une autre méthode, notamment pour mesurer l'expression du gène, est de mesurer la quantité d'ARNm correspondant par toute méthode telle que décrit plus haut. Un dosage de l'activité du facteur de EDN3 et/ou EDNRB peut être également envisagé.
Le sujet testé est ici un sujet asymptomatique, ne présentant aucun trouble capillaire lié à une alopécie. Le sujet « contrôle », dans cette méthode, signifie un sujet ou une population de référence « saine ». La détection de cette susceptibilité permet la mise en place d'un traitement préventif et/ou d'une surveillance accrue des signes liés à l'alopécie.
Dans ces méthodes de diagnostic ou pronostic in vitro, l'échantillon biologique testé peut être n'importe quel échantillon de liquide biologique ou un échantillon d'une biopsie. De préférence l'échantillon peut être néanmoins une préparation de cellules de la peau, obtenues par exemple par épilation de cheveux ou biopsie.
Méthodes de criblage
Un autre objet de l'invention est une méthode in vitro de criblage de composés candidats pour le traitement préventif et/ou curatif du melasma, comprenant la détermination de la capacité d'un composé à moduler l'expression ou l'activité de EDN3 et/ou EDNRB ou l'expression de son gène ou l'activité d'au moins un de ses promoteurs, ladite modulation indiquant l'utilité du composé pour le traitement préventif ou curatif du melasma. La méthode permet donc de sélectionner les composés capables de moduler l'expression ou l'activité de EDN3 et/ou EDNRB, ou l'expression de son gène, ou l'activité d'au moins un de ses promoteurs. Plus particulièrement, l'invention concerne une méthode in vitro de criblage de composés candidats pour le traitement préventif et/ou curatif du melasma, comprenant les étapes suivantes :
a. préparation d'au moins deux échantillons biologiques ou mélanges réactionnels ;
b. mise en contact d'un des échantillons ou mélanges réactionnels avec un ou plusieurs des composés à tester ;
c. mesure de l'expression ou de l'activité de EDN3 et/ou EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, dans les échantillons biologiques ou mélanges réactionnels ; d. sélection des composés pour lesquels une modulation de l'expression ou de l'activité de EDN3 ET EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, est mesurée dans l'échantillon ou le mélange traité en b), par rapport à l'échantillon ou au mélange non traité. Par « modulation », on entend tout effet sur le niveau d'expression ou d'activité de EDN3 et/ou EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, à savoir éventuellement une inhibition, mais de préférence une stimulation, partielle ou complète.
Ainsi, les composés testés à l'étape d) ci-dessus induisent de préférence l'expression ou l'activité de EDN3 et/ou EDNRB, l'expression de son gène ou l'activité d'au moins un de ses promoteurs.
Dans l'ensemble du présent texte, à moins qu'il ne soit spécifié autrement, par « expression d'une protéine », on entend la quantité de cette protéine ;
Par « activité d'une protéine », on entend son activité biologique ; Par « activité d'un promoteur », on entend la capacité de ce promoteur à déclencher la transcription de la séquence d'ADN codée en aval de ce promoteur (et donc indirectement la synthèse de la protéine correspondante).
Les composés testés peuvent être de tout type. Ils peuvent être d'origine naturelle ou avoir été produits par synthèse chimique. Il peut s'agir d'une banque de composés chimiques structurellement définis, de composés ou de substances non caractérisés, ou d'un mélange de composés.
Différentes techniques peuvent être mises en œuvre pour tester ces composés et identifier les composés d'intérêt thérapeutique, modulateurs de l'expression ou de l'activité de EDN3 et/ou EDNRB.
Selon un premier mode de réalisation, les échantillons biologiques sont des cellules transfectées avec un gène rapporteur lié de manière opérante à tout ou partie du promoteur du gène DE EDN3 et/ou EDNRB, et l'étape c) décrite ci-dessus consiste à mesurer l'expression dudit gène rapporteur.
Le gène rapporteur peut notamment coder pour une enzyme qui, en présence d'un substrat donné, conduit à la formation de produits colorés, telle que CAT (chloramphenicol acétyltransférase), GAL (beta galactosidase), ou GUS (beta glucuronidase). Il peut également s'agir du gène de la luciférase ou de la GFP (Green Fluorescent Protein). Le dosage de la protéine codé par le gène rapporteur, ou de son activité, est réalisé classiquement, par des techniques colorimétriques, fluorométriques, ou de chimioluminescence, entre autres.
Selon un deuxième mode de réalisation, les échantillons biologiques sont des cellules exprimant le gène codant pour le facteur de transcription DE EDN3 et/ou EDNRB, et l'étape c) décrite ci-dessus consiste à mesurer l'expression dudit gène.
La cellule utilisée ici peut être de tout type. Il peut s'agir d'une cellule exprimant le gène EDN3 et/ou EDNRB de manière endogène, comme par exemple une cellule de foie, une cellule de prostate, ou encore mieux une cellule de la peau,. On peut également utiliser des organes d'origine humaine ou animale.
Il peut également s'agir d'une cellule transformée par un acide nucléique hétérologue, codant pour le gene EDN3 et/ou EDNRB, de préférence humaine ou de mammifère.
Une grande variété de systèmes de cellules hôtes peut être utilisée, telle que par exemples les cellules Cos-7, CHO, BHK, 3T3, HEK293. L'acide nucléique peut être transfecté de manière stable ou transitoire, par toute méthode connue de l'homme du métier, par exemple par phosphate de calcium, DEAE-dextran, liposome, virus, électroporation, ou microinjection. Dans ces méthodes, l'expression du gène EDN3 et/ou EDNRB peut être déterminée en mesurant le taux de transcription dudit gène, ou son taux de traduction.
Par taux de transcription d'un gène, on entend la quantité d'ARNm correspondant produite. Par taux de traduction d'un gène, on entend la quantité de protéine correspondante produite.
L'homme du métier est familier avec les techniques permettant la détection quantitative ou semi-quantitative de l'ARNm d'un gène d'intérêt. Les techniques basées sur l'hybridation de l'ARNm avec des sondes nucléotidiques spécifiques sont les plus usuelles (Northern Blot, RT- PCR, protection à la Rnase). Il peut être avantageux d'utiliser des marqueurs de détection, tels que des agents fluorescents, radioactifs, enzymatiques or autres ligands (par exemple, avidine/biotine).
En particulier, l'expression du gène peut être mesurée par PCR en temps réel ou par protection à la RNase. Par protection à la RNase, on entend la détection d'un ARNm connu parmi les ARN-poly(A) d'un tissu qui peut se faire à l'aide d'une hybridation spécifique avec une sonde marquée. La sonde est un ARN complémentaire marqué (par exemple radioactif ou enzymatique) du messager à rechercher. Elle peut être construite à partir d'un ARNm connu dont l'ADNc, après RT-PCR, a été cloné dans un phage. De l'ARN-poly(A) du tissu où la séquence est à rechercher est incubé avec cette sonde dans des conditions d'hybridation lente en milieu liquide. Il se forme des hybrides ARN:ARN entre l'ARNm recherché et la sonde antisens. Le milieu hybridé est alors incubé avec un mélange de ribonucléases spécifiques de l'ARN simple brin, de telle sorte que seuls les hybrides formés avec la sonde peuvent résister à cette digestion. Le produit de digestion est ensuite déprotéïnisé et repurifié, avant d'être analysé par électrophorèse. Les ARN hybrides marqués sont détectés par exemple par autoradiographie ou chimioluminescence.
Le taux de traduction du gène est évalué par exemple par dosage immunologique du produit dudit gène. Les anticorps utilisés à cet effet peuvent être de type polyclonal ou monoclonal. Leur production relève de techniques conventionnelles. Un anticorps polyclonal anti-Early growth response 1 peut, entre autres, être obtenu par immunisation d'un animal tel qu'un lapin ou une souris, à l'aide de la protéine entière. L'antisérum est prélevé puis épuisé selon des méthodes en soi connues par l'homme du métier. Un anticorps monoclonal peut, entre autres, être obtenu par la méthode classique de Kôhler et Milstein (Nature (London), 256: 495- 497 (1975)). D'autres méthodes de préparation d'anticorps monoclonaux sont également connues. On peut, par exemple, produire des anticorps monoclonaux par expression d'un acide nucléique clone à partir d'un hybridome. On peut également produire des anticorps par la technique d'expression sur phage ("phage display"), en introduisant des ADNc d'anticorps dans des vecteurs, qui sont typiquement des phages filamenteux qui présentent des banques de gènes V à la surface du phage (par exemple fUSE5 pour E.coli).
Le dosage immunologique peut être réalisé en phase solide ou en phase homogène; en un temps ou en deux temps; en méthode sandwich ou en méthode compétitive, à titre d'exemples non limitatifs. Selon un mode de réalisation préféré, l'anticorps de capture est immobilisé sur une phase solide. On peut utiliser, à titre d'exemples non limitatifs de phase solide, des microplaques, en particulier des microplaques de polystyrène, ou des particules ou des billes solides, des billes paramagnétiques.
Des dosages ELISA, des immunoessais, ou toute autre technique de détection peuvent être mis en oeuvre pour révéler la présence des complexes antigènes-anticorps formés.
La caractérisation des complexes antigène/anticorps, et plus généralement des protéines isolées ou purifiées mais également recombinantes (obtenues in vitro et in vivo) peut être réalisée par analyse en spectrométrie de masse. Cette identification est rendue possible grâce à l'analyse (détermination de la masse) des peptides générée par l'hydrolyse enzymatique des protéines (trypsine en générale). De façon générale, les protéines sont isolées selon les méthodes connues de l'homme du métier, préalablement à la digestion enzymatique. L'analyse des peptides (sous forme d'hydrolysat) est effectuée par séparation des peptides par HPLC (nano-HPLC) basé sur leurs propriétés physico-chimique (phase inverse). La détermination de la masse des peptides ainsi séparés est réalisée par ionisation des peptides et soit par couplage direct au spectromètre de masse (mode electrospray ESI) soit après dépôt et cristallisation en présence d'une matrice connue de l'homme de l'art (analyse en mode MALDI). Les protéines sont ensuite identifiées grâce à l'utilisation d'un logiciel approprié (par exemple Mascot).
Le gene EDN3 et/ou EDNRB peut être produit selon des techniques usuelles en utilisant les cellules Cos-7, CHO, BHK, 3T3, HEK293. Il peut également être produit à l'aide de microorganismes tels que des bactéries (par exemple E. coli ou B. subtilis), des levures (par exemple Saccharomyces, Pichia) ou des cellules d'insecte, telles que Sf9 ou Sf21.
Modulateurs du facteur de transcription
L'invention a également pour objet l'utilisation d'un modulateur de EDN3 et/ou EDNRB susceptible d'être obtenu selon l'une des méthodes décrites ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement préventif et/ou curatif du melasma. Il est ainsi décrit ici une méthode de traitement préventif et/ou curatif du melasma, méthode comprenant l'administration d'une quantité thérapeutiquement efficace d'un modulateur de EDN3 et/ou EDNRB, à un patient nécessitant un tel traitement. De préférence, de tels modulateurs sont des activateurs (ou inducteurs) de EDN3 et/ou EDNRB.
L'invention comprend l'utilisation de composés inducteurs de EDN3 ET EDNRB, tels que ceux identifiés par la méthode de criblage décrite plus haut, pour le traitement préventif et/ou curatif du melasma.
Les composés modulateurs sont formulés au sein de compositions pharmaceutiques, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Ces compositions peuvent être administrées par exemple par voie entérale, parentérale, ou topique. De préférence, la composition pharmaceutique est appliquée par voie topique. Par voie orale, la composition pharmaceutique peut se présenter sous forme de comprimés, de gélules, de dragées, de sirops, de suspensions, de solutions, de poudres, de granules, d'émulsions, de suspensions de microsphères ou nanosphères ou de vésicules lipidiques ou polymériques permettant une libération contrôlée. Par voie parentérale, la composition pharmaceutique peut se présenter sous forme de solutions ou suspensions pour perfusion ou pour injection.
Par voie topique, la composition pharmaceutique est plus particulièrement destinée au traitement de la peau, des muqueuses et du cuir chevelu et peut se présenter sous forme d'onguents, de crèmes, de laits, de pommades, de poudres, de tampons imbibés, de solutions, de gels, de sprays, de lotions ou de suspensions. Elle peut également se présenter sous forme de suspensions de microsphères ou nanosphères ou de vésicules lipidiques ou polymériques ou de patchs polymériques ou d'hydrogels permettant une libération contrôlée. Cette composition pour application topique peut se présenter sous forme anhydre, sous forme aqueuse ou sous la forme d'une émulsion. Dans une variante préférée, la composition pharmaceutique se présente sous la forme d'un gel, d'une crème ou d'une lotion.
La composition peut comprendre une teneur en modulateur de EDN3 et/ou EDNRB allant de 0,001 à 10 % en poids, notamment de 0,01 à 5 % en poids par rapport au poids total de la composition. La composition pharmaceutique peut en outre contenir des additifs inertes ou des combinaisons de ces additifs, tels que :
- des agents mouillants;
- des agents d'amélioration de la saveur;
- des agents conservateurs tels que les esters de l'acide parahydroxybenzoïque; - des agents stabilisants;
- des agents régulateurs d'humidité;
- des agents régulateurs de pH;
- des agents modificateurs de pression osmotique;
- des agents émulsionnants;
- des filtres UV-A et UV-B ;
- et des antioxydants, tels que l'alpha-tocophérol, le butylhydroxyanisole ou le butylhydroxytoluene, la Super Oxyde Dismutase, I'Ubiquinol ou certains chélatants de métaux.
Les figures et exemples suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée.
Données expérimentales
ProbeSet 208399_s_at 204271_s_at
GENE_SYMBOL EDN3 EDNRB
UNIGENE Hs.1408 Hs.82002
patient 1 (fold
0,907636293 0,89932481
induction)
patient 3 (fold
1 ,625863288 1 ,350419408
induction)
patient 4 (fold
1 ,312722518 1 ,204278623
induction)
patient 5 (fold
2,230254991 2,002457573
induction)
patient 10 (fold
1 ,2416189 1 ,08014464
induction) patient 12 (fold
1 ,442050763 2,142297017
induction)
géométrie mean
of
6 1 ,406313134 1 ,375644419
patients (fold
induction)

Claims

REVENDICATIONS
1. Méthode in vitro de criblage de composés candidats pour le traitement préventif et/ou curatif du melasma, comprenant la détermination de la capacité d'un composé à moduler l'expression ou l'activité de EDN3 et/ou EDNRB ou l'expression de son gène ou l'activité d'au moins un de ses promoteurs.
2. Méthode in vitro de criblage de composés candidats pour le traitement préventif et/ou curatif du melasma selon la revendication 1 , comprenant les étapes suivantes :
a. Préparation d'au moins deux échantillons biologiques ou mélanges réactionnels ;
b. Mise en contact d'un des échantillons ou mélanges réactionnels avec un ou plusieurs des composés à tester ;
c. Mesure de l'expression ou de l'activité de la protéine EDN3 et/ou EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, dans les échantillons biologiques ou mélanges réactionnels ;
d. Sélection des composés pour lesquels une modulation de l'expression ou de l'activité de la protéine EDN3 et/ou EDNRB, ou une modulation de l'expression de son gène ou une modulation de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, est mesurée dans l'échantillon ou le mélange traité en b) par rapport à l'échantillon ou au mélange non traité.
3. Méthode selon la revendication 2, caractérisée en ce que les composés sélectionnés à l'étape d) activent l'expression ou l'activité de la protéine EDN3 et/ou EDNRB, ou l'expression de son gène ou l'activité d'au moins un de ses promoteurs.
4. Méthode selon la revendication 2 ou 3, caractérisée en ce que les échantillons biologiques sont des cellules transfectées avec un gène rapporteur lié de manière opérante à tout ou partie du promoteur du gène EDN3 et/ou EDNRB, et en ce que l'étape c) consiste à mesurer l'expression dudit gène rapporteur.
5. Méthode selon la revendication 2 ou 3, caractérisée en ce que les échantillons biologiques sont des cellules exprimant le gène EDN3 et/ou EDNRB, et en ce que l'étape c) consiste à mesurer l'expression dudit gène.
6. Méthode selon la revendication 4 ou 5, dans laquelle les cellules sont des cellules transformées par un acide nucléique hétérologue codant pour EDN3 et/ou EDNRB.
Méthode selon l'une des revendications 2 à 7, dans laquelle l'expression du gène est déterminée en mesurant le taux de transcription dudit gène.
Méthode selon l'une des revendications 2 à 7, dans laquelle l'expression du gène est déterminée en mesurant le taux de traduction dudit gène.
9. Utilisation d'un modulateur de EDN3 et/ou EDNRB susceptible d'être obtenu selon l'une des revendications 1 à 9 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement préventif et/ou curatif du melasma.
10. Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que le modulateur est un activateur du gène EDN3 et/ou EDNRB.
11. Méthode in vitro de diagnostic ou de suivi de l'évolution du melasma chez un sujet, comprenant la comparaison de l'expression ou de l'activité de la protéine EDN3 et/ou EDNRB, ou de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, dans un échantillon biologique d'un sujet par rapport à un échantillon biologique d'un sujet contrôle.
12. Méthode selon la revendication 13, dans laquelle l'expression de la protéine est déterminée par un dosage de cette protéine par un immunoessai.
13. Méthode selon la revendication 14, dans laquelle l'immunoessai est un dosage ELISA.
14. Méthode selon la revendication 13, dans laquelle l'expression du gène est déterminée par mesure de la quantité d'ARNm correspondant.
15. Méthode in vitro de détermination d'une susceptibilité d'un sujet à développer une alopécie, comprenant la comparaison de l'expression ou de l'activité de la protéine
EDN3 et/ou EDNRB, de l'expression de son gène ou de l'activité d'au moins un de ses promoteurs, dans un échantillon biologique d'un sujet par rapport à un échantillon biologique d'un sujet contrôle.
PCT/FR2011/051217 2010-06-11 2011-05-27 Modulateurs de edn3 et/ou ednrb dans le traitement du melasma Ceased WO2011154639A2 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US34421510P 2010-06-11 2010-06-11
US61/344,215 2010-06-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2011154639A2 true WO2011154639A2 (fr) 2011-12-15
WO2011154639A3 WO2011154639A3 (fr) 2012-03-22

Family

ID=44503973

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2011/051217 Ceased WO2011154639A2 (fr) 2010-06-11 2011-05-27 Modulateurs de edn3 et/ou ednrb dans le traitement du melasma

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2011154639A2 (fr)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101362951B1 (ko) * 2007-04-26 2014-02-28 동국대학교 산학협력단 기미 형성 예지방법 및 기미 형성 예지용 진단 키트
US20100278784A1 (en) * 2007-05-15 2010-11-04 Puretech Ventures Methods and compositions for treating skin conditions
CN101795703B (zh) * 2007-06-27 2015-05-06 里兰斯坦福初级大学理事会 肽酪氨酸酶抑制剂及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KÔHLER, MILSTEIN, NATURE (LONDON, vol. 256, 1975, pages 495 - 497

Also Published As

Publication number Publication date
WO2011154639A3 (fr) 2012-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2737993A1 (fr) Modulateurs de fzd2 dans le traitement de l'alopecie
FR2938341A1 (fr) Modulateurs de la monoglyceride lipase dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
EP2046974A2 (fr) Modulateurs de sc4mol dans le traitement de l'acné ou de l'hyperséborrhée
CA2656838A1 (fr) Modulateurs du transporteur abcd3 dans le traitement de l'acne ou de l'hyperseborrhee
FR2938333A1 (fr) Modulateurs de cidea dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
EP2044435A2 (fr) Modulateurs de scarb-1 dans le traitement de l'acné ou de l'hyperséborrhée
WO2011154639A2 (fr) Modulateurs de edn3 et/ou ednrb dans le traitement du melasma
WO2011154640A2 (fr) Modulateurs de trmp1, mmp2, mia ou ptgs1 dans le traitement du melasma
EP2242849A2 (fr) Modulateurs de egr1 dans le traitement de l'alopécie
FR2938342A1 (fr) Ciblage de modulateurs de ces1 et/ou ces3 dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
FR2938334A1 (fr) Modulateurs de l'adfp dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
CA2656891A1 (fr) Modulateurs de elovl5 dans le traitement de l'acne ou de l'hyperseborrhee
EP2331705A1 (fr) Modulateurs de lgr5 dans le traitement de l'alopecie
CN114269945B (zh) 鉴定纤维化过程的调节物的方法
CA2737983A1 (fr) Modulateurs de sox dans le traitement de l'alopecie
FR2938336A1 (fr) Modulateurs de gos2 dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
FR2938337A1 (fr) Modulateurs de mcam dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
FR2938339A1 (fr) Modulateurs de la pctp dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
FR3006890A1 (fr) Utilisation cosmetique de la dermicidine, analogues ou fragments de celle-ci pour la prevention et/ou le traitement et le diagnostic de la peau grasse et des desordres esthetiques cutanes qui y sont associes
FR2938343A1 (fr) Ciblage de modulateurs de cyp2b15 et/ou gpd1 pour le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee
FR2938340A1 (fr) Modulateurs de la carnitine octanoyltransferase dans le traitement de l'acne, d'une dermatite seborrheique ou de l'hyperseborrhee

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 11726463

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 11726463

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2