WO2010150564A1

WO2010150564A1 - ベンズアルデヒド化合物

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Publication number: WO2010150564A1
Application number: PCT/JP2010/051730
Authority: WO
Inventors: 橋本祐一; 大金賢司
Original assignee: 国立大学法人東京大学
Priority date: 2009-06-23
Filing date: 2010-02-01
Publication date: 2010-12-29
Also published as: JP2011006334A

Abstract

　変異型ロドプシンに対してフォールディング促進作用を有し、網膜色素変性症の予防及び／又は治療のための医薬の有効成分として有用な式(I)〔R¹はアルデヒド基；R²及びR³は水素原子、水酸基、アルキル基など；L¹、L²、及びL³は-C(R⁴)(R⁵)-（R⁴及びR⁵は水素原子、水酸基、ハロゲン原子など）、-O-、-N(R⁶)-（R⁶は水素原子又はアルキル基）、又は-C(＝Q)-［＝Qは＝O、＝Sなど）、又は＝C(R⁸)(R⁹)（R⁸及びR⁹は水素原子又はアルキル基）］；Xは-CH₂-、-CH₂-CH₂-など；Y及びZは-O-、-CH₂-などを示す〕で表される化合物又はその塩。

Description

ベンズアルデヒド化合物

　本発明は、変異型ロドプシンに対してフォールディング促進作用を有し、網膜色素変性症の予防及び／又は治療のための医薬の有効成分として有用な新規ベンズアルデヒド化合物に関する。

　タンパク質が生体内で機能を発揮するためには、適切な折りたたみ構造をとる必要がある。折りたたみの異常、すなわちフォールディングの異常に起因する疾患は多数知られているが、未だ有効な治療法がないものが多い。ロドプシンの変異によりおこる網膜色素変性症もその一つである。通常、ロドプシンのような膜タンパク質は、翻訳後に小胞体（ＥＲ）でフォールディングし、その後細胞膜へ輸送される。一方、変異型ロドプシンはミスフォールドしやすく、ＥＲの品質管理機構により「不良品」として認識・トラップされ、膜移行せずにＥＲに蓄積する。この蓄積したロドプシンが凝集し、細胞死（網膜の変性）を引き起こすと考えられている（Ｍｅｎｄｅｓ，Ｈ．Ｆ．ｅｔ　ａｌ．，ＴＲＥＮＤＳ　ｉｎ　Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，１１，ｐｐ．１７７−１８５，２００５）。

　近年、難治性疾患疾患に多くみられるフォールディング異常を修正する手だてとして、リガンドのフォールディング促進作用の有用性が明らかになりつつある。例えば、バソプレシンＶ_２受容体のフォールディング異常により起こる腎性尿崩症の臨床症状は、Ｖ_２受容体アンタゴニストの投与により緩和することが示されている。この作用は受容体及びその下流のシグナル伝達を介した作用ではなく、アンタゴニストがフォールディング中間体に結合し、フォールディングを促進したことによる作用であるとされており、リガンドによるフォールディング異常の修正作用の有用性を示していると考えられている。

　桿体細胞で光受容体として機能するロドプシンに関しては、内在性リガンドである１１−ｃｉｓ−レチナールがフォールディング異常を示す変異型ロドプシン（Ｔ１７Ｍ）のフォールディングを促進（結果として局在異常を修正）すること、並びにモデルマウス（Ｌｉ，Ｔ．ｅｔ　ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，ｐｐ．１１９３３−１１９３８，１９９８）及び臨床試験（Ｂｅｒｓｏｎ，Ｅ．Ｌ．ｅｔ　ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．，１１１，ｐｐ．７６１−７７２，１９９３；Ｂｅｒｓｏｎ，Ｅ．Ｌ．，Ｉｎｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｃｌｉｎ．，４０，ｐｐ．９３−１１１，２０００）において前駆体であるビタミンＡがロドプシン変異による網膜色素変性症に対して有効であることが示されている。

　しかしながら、高用量のビタミンＡ投与は脂溶性が高いことによる蓄積性、催奇形性、その他レチノイドとしての多様な生理作用などの副作用を引き起こす可能性があり、１１−ｃｉｓ−レチナールはその構造に由来する化学的不安定性及び毒性などの問題点を有している。従って、ビタミンＡや１１−ｃｉｓ−レチナールの問題点を回避し、変異型ロドプシンに対して高いフォールディング促進作用を有する医薬の提供が望まれている。

　なお、網膜色素変性症に対して有効性を期待される化合物として、フォールディング異常を示す変異ロドプシン（Ｐ２３Ｈ）に対して成熟と膜移行を促進する９−ｃｉｓ−レチナールが報告されており（Ｓａｌｉｂａ，Ｒ．Ｓ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．，１１５，ｐｐ．２９０７−２９１８）、同様の作用を有する化合物として１１−ｃｉｓ−レチナールを７員環でｃｉｓ固定した１１−ｃｉｓ−７−ｒｉｎｇ−レチナール（Ｎｏｏｒｗｅｚ，Ｓ．Ｍ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７８，ｐｐ．１４４４２−１４４５０，２００３；Ｎｏｏｒｗｅｚ，Ｓ．Ｍ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７９，１６２７８−１６２８４，２００４）などが知られている。

Ｍｅｎｄｅｓ，Ｈ．Ｆ．ｅｔ　ａｌ．，ＴＲＥＮＤＳ　ｉｎ　Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，１１，ｐｐ．１７７−１８５，２００５Ｌｉ，Ｔ．ｅｔ　ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，ｐｐ．１１９３３−１１９３８，１９９８Ｂｅｒｓｏｎ，Ｅ．Ｌ．ｅｔ　ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．，１１１，ｐｐ．７６１−７７２，１９９３Ｂｅｒｓｏｎ，Ｅ．Ｌ．，Ｉｎｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｃｌｉｎ．，４０，ｐｐ．９３−１１１，２０００Ｓａｌｉｂａ，Ｒ．Ｓ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．，１１５，ｐｐ．２９０７０２９１８Ｎｏｏｒｗｅｚ，Ｓ．Ｍ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７８，ｐｐ．１４４４２−１４４５０，２００３Ｎｏｏｒｗｅｚ，Ｓ．Ｍ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７９，１６２７８−１６２８４，２００４

　本発明の課題は、変異型ロドプシンに対してフォールディング促進作用を有し、網膜色素変性症の予防及び／又は治療のための医薬の有効成分として有用な新規化合物を提供することにある。

　本発明者らは上記の課題を解決すべく、変異型ロドプシンのフォールディング促進による局在異常修正活性を指標として新規な化合物を鋭意探索した結果、下記の一般式（Ｉ）で表される化合物が変異型ロドプシンに対して所望のフォールディング促進作用を有しており、網膜色素変性症の予防及び／又は治療に有効であることを見出した。本発明は上記の知見を基にして完成されたものである。

　すなわち、本発明により、下記の一般式（Ｉ）：

〔式中、Ｒ^１はアルデヒド基又はアルデヒド等価基を示し；Ｒ^２及びＲ^３はそれぞれ独立にベンゼン環上の任意の位置に存在する水素原子、水酸基、炭素数１~６のアルキル基、又は炭素数１~６のアルコキシ基を示し；Ｌ^１、Ｌ^２、及びＬ^３はそれぞれ独立に−Ｃ（Ｒ^４）（Ｒ^５）−（Ｒ^４及びＲ^５はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、ハロゲン原子、又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ^６）−（Ｒ^６は水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、又は−Ｃ（＝Ｑ）−［＝Ｑは＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ−Ｒ^７（Ｒ^７は水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、又は＝Ｃ（Ｒ^８）（Ｒ^９）（Ｒ^８及びＲ^９はそれぞれ独立に水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）］を示し；Ｘは−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し；Ｙ及びＺはそれぞれ独立に−Ｏ−、−ＣＨ_２−、又は−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−（Ｒ^１０及びＲ^１１はそれぞれ独立に水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示すが、Ｒ^１０及びＲ^１１が同時に水素原子であることはない）を示すが、Ｙ及びＺのうち少なくとも１つは−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−を示す〕で表される化合物又はその塩が提供される。

　本発明の好ましい態様によれば、Ｒ^１がアルデヒド基であり、Ｒ^２及びＲ^３が水素原子である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩；Ｘが−ＣＨ_２−ＣＨ_２−である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩；Ｙ及びＺがそれぞれ独立に−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩；及びＹ及びＺが−Ｃ（ＣＨ_３）_２−である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩が提供される。

　また、本発明の別の好ましい態様によれば、−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基が−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＮＨ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｏ−、−Ｏ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＮＨ−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−ＮＨ−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＮＨ−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＮＨ−　−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＮＨ−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、並びに上記の基において１個の水素原子が水酸基に置き換えられた基、及び上記の基において１個又は２個の水素原子がメチル基で置き換えられた基からなる群から選ばれる基である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩が提供される。

　さらに好ましい態様によれば、本発明により、−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基が−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯ−からなる群から選ばれる基である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩；−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基が−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−ＣＨ_２−Ｏ−、及び−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−からなる群から選ばれる基である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩；及び−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基が−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−からなる群から選ばれる基である上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩が提供される。

　別の観点からは、上記一般式（Ｉ）で表される化合物又は生理的に許容されるその塩を有効成分として含む医薬が提供される。この医薬は、フォールディング異常を示す変異型ロドプシンに対してフォールディングを促進することにより網膜色素変性症の予防及び／又は治療に有用である。

　また、本発明により、フォールディング異常を示す変異型ロドプシンに対するフォールディング促進剤であって、上記一般式（Ｉ）で表される化合物又は生理的に許容されるその塩を含む促進剤が提供される。

　さらに本発明により、網膜色素変性症の予防及び／又は治療のための医薬の製造のための上記式（Ｉ）で表される化合物又は生理的に許容されるその塩の使用；及び網膜色素変性症の予防及び／又は治療方法であって、上記式（Ｉ）で表される化合物又は生理的に許容されるその塩の予防及び／又は治療有効量を患者に投与する工程を含む方法が提供される。

　本発明により提供される上記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩はフォールディング異常を示す変異型ロドプシンに対してフォールディング促進作用を有していることから、網膜色素変性症の予防及び／又は治療のための医薬の有効成分として有用である。

ＨＡタグ導入によりロドプシンの局在に影響を与えないことを確認した結果を示した図である。緑はロドプシン、赤はＰＤＩ（ｐｒｏｔｅｉｎ　ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ　ｉｓｏｍｅｒａｓｅ；ＥＲの酵素）に対する抗体で染色した結果を示す。ＨＡタフを導入したＰ２３Ｈ変異ロドプシンに対して９−ｃｉｓ−レチナールの局在異常修正作用を確認した結果を示した図である。膜上のロドプシンを赤、細胞内も含めた全ロドプシンを緑で表している。上から順に、ＷＴ（ＤＭＳＯ　０．５％）、Ｐ２３Ｈ（ＤＭＳＯ　０．５％）、Ｐ２３Ｈ（９−ｃｉｓ−レチナール５μＭ）を示す。左から、緑：ａｎｔｉ−ｒｈｏｄｏｐｓｉｎ（ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄ）、赤：ａｎｔｉ−ＨＡ（ｎｏｎ−ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄ）、重ね合わせ（緑＋赤＝黄）を示す。９６ｗｅｌｌプレートを用いて膜上のロドプシン量を発光量を指標にして評価した結果を示した図である。左図は、９−ｃｉｓ−レチナールによりＰ２３Ｈロドプシンの膜移行量が増加することを示し、右図は野生型（ＷＴ）とＰ２３Ｈ変異体のそれぞれの膜上発現量を示す。９６ｗｅｌｌプレートを用いた評価系で例１で合成した本発明の化合物の評価を行った結果を示した図である。９６ｗｅｌｌプレートを用いた評価系で例１で合成した本発明の化合物の評価を行った結果を示した図である。

　Ｒ^１はアルデヒド基又はアルデヒド等価基を示す。アルデヒド等価基の種類は特に限定されないが、例えば、ジメチルアセタール、ジエチルアセタール、エチレンジオキシアセタールなどのアセタール、ホウ酸（−Ｂ（ＯＨ）_２）及びそのエステル（例えば−Ｂ（ＯＲ^２０）（ＯＲ^２１）（Ｒ^２０及びＲ^２１はそれぞれ独立に炭素数１~６のアルキル基など）、及びケトン（例えば−ＣＯ−Ｒ^２２（Ｒ^２２は炭素数１~６のアルキル基、好ましくは１個又は２個以上のフッ素原子などで置換された炭素数１~６のアルキル基）などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。

　一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物においてベンゼン環上に存在するアルデヒド基の位置は特に限定されないが、ベンゼン環に結合する−Ｌ^３−で表される基に対してパラ位であることが好ましい。このアルデヒド基を適宜の保護基で保護してアルデヒド等価基に変換することにより、一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物をプロドラッグとして利用することができるが、このようにアルデヒド等価基を有する化合物も本発明の範囲に包含されることを理解すべきである。

　Ｒ^２及びＲ^３はそれぞれ独立にベンゼン環上の任意の位置に存在する水素原子、水酸基、炭素数１~６のアルキル基、又は炭素数１~６のアルコキシ基を示す。本明細書において「アルキル基」は直鎖状、分枝鎖状、環状、又はそれらの組み合わせからなるアルキル基を包含する。アルキル部分を有する他の置換基（アルコキシ基など）のアルキル部分についても同様である。Ｒ^２及びＲ^３としては水素原子が好ましい。

　Ｘは−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示すが、Ｘとしては−ＣＨ_２−ＣＨ_２−が好ましい。Ｙ及びＺはそれぞれ独立に−Ｏ−、−ＣＨ_２−、又は−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−を示すが、Ｙ及びＺのうち少なくとも１つは−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−を示す。Ｒ^１０及びＲ^１１はそれぞれ独立に水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示すが、Ｒ^１０及びＲ^１１が同時に水素原子であることはない。好ましくはＹ及びＺがそれぞれ独立に−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−を示す場合であり、さらに好ましいのはＹ及びＺが共に−Ｃ（ＣＨ_３）_２−を示す場合である。Ｙ及びＺが共に−Ｃ（ＣＨ_３）_２−を示す場合において、Ｘが−ＣＨ_２−ＣＨ_２−である場合が特に好ましい。

　Ｌ^１、Ｌ^２、及びＬ^３はそれぞれ独立に−Ｃ（Ｒ^４）（Ｒ^５）−（Ｒ^４及びＲ^５はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、ハロゲン原子（ハロゲン原子はフッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子のいずれであってもよい）、又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ^６）−（Ｒ^６は水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、又は−Ｃ（＝Ｑ）−［＝Ｑは＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ−Ｒ^７（Ｒ^７は水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、又は＝Ｃ（Ｒ^８）（Ｒ^９）（Ｒ^８及びＲ^９はそれぞれ独立に水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）］を示す。Ｒ^４及びＲ^５は好ましくは水素原子、水酸基、又は炭素数１~６のアルキル基を示し、さらに好ましくは水素原子、水酸基、又はアルキル基を示し、特に好ましくは水素原子又は水酸基を示す。Ｒ^６は好ましくは水素原子又はメチル基を示し、より好ましくは水素原子を示す。＝Ｑは好ましくは＝Ｏ又は＝Ｃ（Ｒ^８）（Ｒ^９）を示す。Ｒ^７は好ましくは炭素数１~６のアルキル基、より好ましくはメチル基を示す。Ｒ^８及びＲ^９は好ましくは共に水素原子を示す。

　−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基の具体例としては、例えば、−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＮＨ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｏ−、−Ｏ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＮＨ−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−　−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−ＮＨ−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＮＨ−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＮＨ−　−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＮＨ−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−などの基のほか、上記の基において１個の水素原子が水酸基に置き換えられた基、及び上記の基において１個又は２個の水素原子がメチル基で置き換えられた基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。

　−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基として、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯ−からなる群から選ばれる基を挙げることができ、さらに好ましくは−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基として−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−ＣＨ_２−Ｏ−、及び−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−からなる群から選ばれる基を挙げることができる。特に好ましくは、−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基として−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−からなる群から選ばれる基を用いることができる。

　一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物は、置換基の種類に応じて１個または２個以上の不斉炭素を有する場合があるが、これらの不斉炭素に基づく任意の光学異性体、光学異性体の任意の混合物、ラセミ体、２個以上の不斉炭素に基づくジアステレオ異性体、ジアステレオ異性体の任意の混合物などは、いずれも本発明の範囲に包含される。さらに、遊離化合物又は塩の形態の化合物の任意の水和物又は溶媒和物も本発明の範囲に包含される。

　一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物は、塩の形態、例えば酸付加塩の形態で存在する場合があるが、本発明の範囲には任意の塩が包含される。酸付加塩としては、塩酸塩若しくは臭化水素酸塩などの鉱酸塩、又はｐ−トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、シュウ酸塩、若しくは酒石酸塩などの有機酸塩を挙げることができるが、これらに限定されることはない。

　上記一般式（Ｉ）で表される化合物のうち好ましい化合物を以下に示すが、本発明の範囲は下記の具体例に限定されることはない。下記の化合物のうち、（Ａ）群の化合物については−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基の例を示し、（Ｂ）群の化合物については−Ｘ−Ｙ−Ｚ−で表される環構造の例を示し、（Ｃ）群の化合物についてはアルデヒド等価基の例を示してあり、（Ｄ）群の化合物についてはＲ^２及びＲ^３で表される基の例を示す。従って、好ましい化合物は、（Ａ）群の化合物についての−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基、（Ｂ）群の化合物についての−Ｘ−Ｙ−Ｚ−で表される環構造、アルデヒド基又は（Ｃ）群の化合物についてのアルデヒド等価基、及びＲ^２及びＲ^３が水素原子である場合又は（Ｄ）群の化合物についてのＲ^２及びＲ^３で表される基の組み合わせから選択されることを理解すべきである。

　本明細書の実施例には、上記一般式（Ｉ）に包含される上記の好ましい化合物の製造方法が具体的に説明されている。従って、これらの製造方法において用いられた出発原料、反応試薬、及び反応条件などを適宜選択し、必要に応じてこれらの製造方法に適宜の修飾ないし改変を加えることにより、本発明の範囲に包含される化合物はいずれも製造可能である。もっとも、本発明の化合物の製造方法は、実施例に具体的に説明された方法に限定されることはない。

　一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物又はその塩は、以下の実施例に具体的に示されるように、フォールディング異常を示す変異型ロドプシンのフォールディングを促進する活性を有しており、その作用に基づいて、フォールディング異常を示す変異型ロドプシンのフォールディング異常に起因して発症する網膜色素変性症の予防及び／又は治療に有効性を示すという特徴がある。

　ロドプシンは桿体細胞で光受容体として機能するが、ロドプシンという用語はアポ型のオプシンに１１−ｃｉｓ−レチナール（ｒｅｔｉｎａｌ）がリジン（Ｌｙｓ）との共有結合を介して結合したホロ型を意味している。ロドプシンに光が当たると１１−ｃｉｓ−レチナール部分がｔｒａｎｓ体へと異性化し、その結果として起こる構造変化によって活性型となり、Ｇタンパク質であるＧｔ（ｔｒａｎｓｄｕｃｉｎ）を活性化することで下流へシグナルを伝達する。続いて活性型ロドプシン内のｔｒａｎｓ−レチナールとＬｙｓのイミン（イミニウム）は加水分解され、オプシンとａｌｌ−ｔｒａｎｓ−レチナールに分離する。このオプシンに新たに合成された１１−ｃｉｓ−レチナールが結合することでロドプシンが再生する。

　網膜色素変性症は、遺伝性、進行性の網膜変性疾患であり、桿体細胞の変性とそれに続く錐体細胞の変性を特徴としている［Ｈａｒｔｏｎｇ，Ｄ．ｅｔ　ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，３６８，ｐｐ．１７９５−１８０９，２００６；　Ｋｅｎｎａｎ，Ａ．ｅｔ　ａｌ．，ＴＲＥＮＤＳ　ｉｎ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２１，ｐｐ．１０３−１１０，２００５］。多くの場合に桿体細胞から先に変性が生じることから、初期には夜盲、視野狭窄が起こり、錐体細胞が失われるにつれて視力の低下を引き起こす。頻度は４，０００−８，０００人に一人と言われており、患者の半数にははっきりとした遺伝傾向が認められる［難病情報センターｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎａｎｂｙｏｕ．ｏｒ．ｊｐ／ｓｉｋｋａｎ／１１４．ｈｔｍ（Ｕｐｄａｔｅｄ　ｏｎ　７　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ　２００７）］。そのうち常染色体劣性の形式が最も多く（３０％程度）、常染色体優性がそれに続く（１５％）。この疾患のほとんどは単一遺伝子の変異によるが、どの遺伝子が変異を起こしているかは非常に多様で、上位４５の遺伝子で６０％が説明できる程度である。

　常染色体優性網膜色素変性症の原因として最も多いのが、その２５％を占めるロドプシンの変異である。１９９０年にＤｒｙｊａらが初めてロドプシンのＰ２３Ｈ（２３番のＰｒｏがＨｉｓへ置換）変異が網膜色素変性症を引き起こしうることを示して以来（Ｄｒｙａ　Ｔ．Ｐ．ｅｔ　ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４３，ｐｐ．３６４−３６６，１９９０）、１００を超える数の原因変異が報告されているが（Ｓｔｏｊａｎｏｖｉｃ，Ａ．ｅｔ　ａｌ．，Ｒｃｅｐｔｏｒｓ　ａｎｄ　Ｃｈａｎｎｅｌｓ，８，ｐｐ．３３−５０，２００２）、その多くはミスフォールドを起こしてトラフィッキング異常を生じるものと考えられている。網膜色素変性症の病態の本質は桿体細胞と錐体細胞の変性（アポトーシス）であると考えられている（Ｃｈａｎｇ，Ｇ．Ｑ．ｅｔ　ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｎ，１１，ｐｐ．５９５−６０５，１９９３；Ｐｏｒｔｅｒａ−Ｃａｉｌｌｉａｕ，Ｃ．ｅｔ　ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９１，ｐｐ．９７４−９７８，１９９４）。この機序については、大きく分けて変異体が機能を獲得する機序（ｇａｉｎ　ｏｆ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ）と変異体が野生型を抑制する機序（ｄｏｍｉｎａｎｔ　ｎｅｇａｔｉｖｅ）の２つが提案されている（Ｍｅｎｄｅｓ，Ｈ．Ｆ．ｅｔ　ａｌ．，ＴＲＥＮＤＳ　ｉｎ　Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，１１，ｐｐ．１７７−１８５，２００５）。

　変異体が機能を獲得する機序のうち、一つの可能性はミスフォールドしたロドプシンにより引き起こされる生体応答（ＵＰＲ，Ｕｎｆｏｌｄｅｄ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ：Ｒｕｔｋｏｗｓｋｉ，Ｄ．Ｔ．ｅｔ　ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ．，１４，ｐｐ．２０−２８，２００４）によるものである。これは生体がミスフォールドしたタンパク質を認識し、新たな転写翻訳全般を抑制することでミスフォールドしたタンパク質のさらなる蓄積を防ぐという本来防御的役割を担う応答であるが、これによってストレスが緩和されないとアポトーシスを起こすと考えられている。もう一つの可能性はミスフォールドしたロドプシンが凝集し、この凝集体が障害を起こす機序であり、凝集しやすいＰ２３Ｈロドプシンによって引き起こされるユビキチン・プロテアソーム系の機能低下が視細胞変性の機序ではないかとの説がある（Ｉｌｌｉｎｇ，Ｍ．Ｅ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７７，３４１５０−３４１６０，２００２）。変異体が野生型を抑制する機序については、Ｐ２３Ｈロドプシンが凝集するときに野生型も一緒に凝集することが示されており（Ｓａｌｉｂａ、Ｒ．Ｓ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｓｃｉ．，１１５，２９０７−２９１８，２００２）、フォールディング異常のある変異体であるＰ２３Ｈ（及びＧ１８８Ｒ）が野生型の成熟および膜移行を抑制することも示されていることから（Ｒａｊａｎ，Ｒ．Ｓ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，ｐｐ．１２８４−１２９１，２００５）、フォールディングに異常のある変異を遺伝子座の片方に持つことで野生型ロドプシンが成熟及び膜移行しなくなることが示唆されている。

　このように網膜色素変性症はフォールディングに異常を呈する変異ロドプシンにより引き起こされる疾患であり、フォールディングに異常を呈する変異ロドプシンのフォールディングを促進することにより、予防及び／又は治療可能な疾患であると考えられる。本明細書において用いられる「フォールディングに異常を呈する変異ロドプシン」の用語については、先に説明したとおりロドプシンのミスフォールドを起こす変異は極めて多様であることが知られていることから（Ｓｔｏｊａｎｏｖｉｃ，Ａ．ｅｔ　ａｌ．，Ｒｃｅｐｔｏｒｓ　ａｎｄ　Ｃｈａｎｎｅｌｓ，８，ｐｐ．３３−５０，２００２）、この用語をいかなる意味においても限定的に解釈してはならず、最も広義に解釈しなければならない。また、上記の説明から、フォールディングに異常を呈する変異ロドプシンに対してフォールディングを促進する作用を有する本発明の医薬が網膜色素変性症の予防及び／又は治療に有効性を示すことは当業者に容易に理解されることは言うまでもない。なお、本明細書において「予防」の用語は網膜色素変性症の発症予防を含めて解釈すべきである。

　本発明の医薬は、上記の一般式（Ｉ）で表される化合物又は生理学的に許容されるその塩の１種又は２種以上を有効成分として含んでいる。本発明の医薬としては上記物質それ自体を投与してもよいが、好ましくは、当業者に周知の方法によって製造可能な経口用又は非経口用の医薬組成物として投与することができる。経口投与に適する医薬用組成物としては、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、及びシロップ剤等を挙げることができ、非経口投与に適する医薬組成物としては、例えば、注射剤、点滴剤、点眼剤、又は経粘膜吸収剤等を挙げることができる。

　上記の医薬組成物の製造に用いられる製剤用添加物としては、例えば、賦形剤、崩壊剤ないし崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、基剤、溶解剤ないし溶解補助剤、等張化剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、噴射剤、及び粘着剤等を挙げることができるが、これらは医薬組成物の形態に応じて当業者が適宜選択することができ、２種以上を組み合わせて用いてもよい。

　本発明の医薬の投与量は特に限定されず、患者の体重や年齢、症状、投与経路など通常考慮すべき種々の要因に応じて、適宜増減することができる。例えば、経口投与の場合には成人一日あたり０．０１~１，０００ｍｇ程度の範囲で用いることができる。

　以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例の範囲に限定されることはない。
例１
（ａ）合成の一般的手法
^１Ｈ及び^１３Ｃ　ＮＭＲスペクトルはＪＥＯＬ　ＪＮＭ−Ａ５００（５００ＭＨｚ）で測定し、ケミカルシフトは重クロロホルムのプロトン及び炭素（それぞれδ　７．２６ｐｐｍ，７７．０ｐｐｍ）を標準とした数値で示した。
（ｂ）ＯＧ５２６

　テトラヒドロフラン（ＴＨＦ，１５ｍＬ）に水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ，３０９ｍｇ，８．１ｍｍｏｌ）を懸濁してｐ−シアノベンズアルデヒド（２６８ｍｇ，２．０５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、加熱還流下で３時間反応させた。反応液に０℃でゆっくりＮａ_２ＳＯ_４・１０Ｈ_２Ｏを加え、続いて酢酸エチルを加えて室温で１時間攪拌した。得られた白色懸濁物をセライト濾過し、濾液を濃縮して粗ベンジルアミン（ＯＧ５２４）を白色固体として得た。得られた粗ベンジルアミンは精製せずに次工程に用いた。

　化合物ＯＧ２６１（２２７ｍｇ，０．９９７ｍｍｏｌ）を無水ジクロルメタン（１０ｍＬ）に溶解してオキザリルクロリド（９２μＬ，１．０７ｍｍｏｌ）で処理し、数滴のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を０℃で加えて室温で１時間攪拌した。この混合物に無水ジクロルメタン（１０ｍＬ）に溶解した上記工程で得られた化合物ＯＧ５２４及びトリエチルアミン（０．１５ｍＬ，１．０７ｍｍｏｌ）を０℃で加え、反応混合物を室温に戻して終夜攪拌した。氷冷水を加えて反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、希塩酸、及び食塩水で順次洗浄し、乾燥後に濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル２：１→１：３）で精製して目的物を白色結晶として得た（ＯＧ５２５，３４１ｍｇ，０．９７０ｍｍｏｌ，９９％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　７．８０（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．３４（ｍ，ｔｏｔａｌ　５Ｈ），６．３３（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），４．７０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６９（ｓ，４Ｈ），１．６３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

　ＯＧ５２５（３４０ｍｇ，０．９６７ｍｍｏｌ）、ジクロルメタン（２０ｍＬ）、及びＭｎＯ_２（２．１ｇ，２４ｍｍｏｌ）の混合物を室温で終夜攪拌し、反応混合物をセライト濾過して濾液を濃縮した。得られた残渣を再結晶して（熱ヘキサン／ジクロルメタン）目的物を白色固体として得た（ＯＧ５２６，２５６ｍｇ，０．７３２ｍｍｏｌ，７６％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　１０．００（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．４９（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．３２Ｈｚ，１Ｈ），６．４９（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），１．７０（ｓ，４Ｈ），１．３１（ｓ，６Ｈ），１．２９（ｓ，６Ｈ）．

（ｃ）ＯＧ５４１

　テレフタル酸モノメチルエステル塩化物（１．９０ｇ，９．５４ｍｍｏｌ）をジクロルメタン（２０ｍＬ）に溶解し、アンモニア水（４ｍＬ，過剰量）を加えて室温で終夜攪拌した。反応混合物に１規定希塩酸を加えてジクロルメタンで抽出し、有機層を水及び食塩水で順次洗浄した後、乾燥及び濃縮して目的物を白色粉末として得た（ＯＧ５２８，１．４５ｇ，８．１０ｍｍｏｌ，８５％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　８．１２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），６．１０（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），５．６６（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ）．

　無水ジクロルメタン（２０ｍＬ）にＯＧ３４０（３３２ｍｇ，１．７６ｍｍｏｌ）を溶解し、ジクロロメチルメチルエーテル（０．３２０ｍＬ，３．５３ｍｍｏｌ）及びＴｉＣｌ_４（０．４０ｍＬ，３．６ｍＬ）を−７８℃で加え、得られた暗色溶液を室温に戻して終夜攪拌した。０℃で氷冷した希塩酸を加えて反応を停止し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を水及び食塩水で順次洗浄し、乾燥して濃縮した。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル７：１）で精製してアルデヒド体を得た。得られたアルデヒド体（３３７ｍｇ）及びＯＧ５２８（２８７ｍｇ，１．６０ｍｍｏｌ）を無水トルエン（１８ｍＬ）溶解してトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，８．０ｍｍｏｌ）及びトリエチルシラン（１．３ｍＬ，８．０ｍｍｏｌ）を加えてアルゴン下で８時間加熱還流した。この溶液を水及び酢酸エチルに分配し、有機層を重曹水及び食塩水で順次洗浄し、乾燥して濃縮した。得られた残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル３：１→２：１）で精製して目的物を得た（ＯＧ５３７，２６３ｍｇ，０．６９３ｍｍｏｌ，２ｓｔｅｐｓ　３９％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　８．０９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），１．６９（ｓ，４Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

　ＯＧ５３７（１７４ｍｇ，０．４５９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１０ｍＬ）にＬｉＢＨ_４（１８０ｍｇ，８．２ｍｍｏｌ）を０℃で加えて終夜攪拌した。０℃でメタノール及び塩化アンモニウム水溶液をゆっくりと加えて反応を停止し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を水及び食塩水で順次洗浄し、乾燥及び濃縮して、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル１：１→１：２）で精製して目的物を白色泡状物として得た（ＯＧ５４０，１１２ｍｇ，０．３１９ｍｍｏｌ，６９％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　７．７８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３１−７．２８（ｍ，ｔｏｔａｌ　２Ｈ），７．１３（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），４．７６（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），１．６９（ｓ，４Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

　ＯＧ５４０（１７８ｍｇ，０．５０６ｍｍｏｌ）、ＭｎＯ_２（１．０８ｇ，１２．４ｍｍｏｌ）、及びジクロルメタン（１０ｍＬ）の混合物を室温で終夜攪拌し、セライト濾過した後に母液を濃縮した。得られた残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル３：１→２：１）により精製して目的物を淡黄色泡状物として得た（ＯＧ５４１，１３８ｍｇ，０．３９５ｍｍｏｌ，７８％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　１０．０８（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３６（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），１．６９（ｓ，４Ｈ），１．２９（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

（ｄ）ＯＧ５５５

　ＯＧ２６１（１４２ｍｇ，０．６１２ｍｍｏｌ）、ｐ−キシレン−α，α’−ジオール（１０３ｍｇ，０．７４６ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（２０ｍｇ，０．１６４ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ，１５０ｍｇ，０．７８２ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（０．１０ｍＬ，０．７２ｍｍｏｌ）を無水ジクロルメタン（１０ｍＬ）に加えて室温で終夜攪拌した。反応混合物を水及びジクロルメタンに分配して有機層を希塩酸及び食塩水で洗浄し、乾燥して濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル２：１）で精製して目的物を黄色油状物として得た（ＯＧ５３９，１３３ｍｇ，０．３７７ｍｍｏｌ，６２％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　８．０３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），５．３５（ｓ，２Ｈ），４．７１（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，２Ｈ），１．６９（ｓ，４Ｈ），１．６４（ｂｒ　ｓ，１Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

　ＯＧ５４１の合成と同様にして目的物を得た（ＯＧ５４４，９８ｍｇ，０．２８０ｍｍｏｌ，７５％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　１０．０３（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），１．７０（ｓ，４Ｈ），１．３１（ｓ，６Ｈ），１．３０（６Ｈ）．

（ｅ）ＯＧ５４５

　６−（ブロモエチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，１，４，４−テトラメチルナフタレン（１１８ｍｇ，０．４２０ｍｍｏｌ）、テレフタルアルデヒド酸（８８ｍｇ，０．５８６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２８０ｍｇ，２．０３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に懸濁して室温で終夜攪拌した。反応混合物を水及び酢酸エチルに分配して、有機層を水及び食塩水で洗浄し、乾燥して濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル１５：１→９：１）で精製して目的物を淡黄色油状物として得た（ＯＧ５４５，１０６ｍｇ，０．３０３ｍｍｏｌ，７２％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　１０．１０（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄｄ，Ｊ＝７．９，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．３４（ｓ，２Ｈ），１．７０（ｓ，４Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ），１．２９（ｓ，６Ｈ）．

（ｆ）ＯＧ５４９

　ｐ−キシレン−α，α’−ジオール（３０９ｍｇ，２．２４ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解して０℃でＮａＨ（油中６０％，９４ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ）を加えて室温で３０分攪拌した。この混合物に無水ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解した６−（ブロモメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，１，４，４−テトラメチルナフタレン（１７３ｍｇ，０．６１５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で３時間攪拌した。水を加えて反応を停止し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を水及び食塩水で順次洗浄し、乾燥して濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル２：１）で精製して目的物を透明オイルとして得た（ＯＧ５４７，１３５ｍｇ，０．３９９ｍｍｏｌ，６５％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　７．３８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１３（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．８Ｈｚ，１Ｈ），４．７０（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），４．５６（ｓ，２Ｈ），４．５０（ｓ，２Ｈ），１．６８（ｓ，４Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ）．

　ＯＧ５４１の製造と同様にして目的物を得た（ＯＧ５４９，７２ｍｇ，０．２１４ｍｍｏｌ，５４％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　１０．０１（ｓ，１Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６３（ｓ，２Ｈ），４．５４（ｓ，２Ｈ），１．６９（ｓ，４Ｈ），１．２９（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

（ｇ）ＯＧ５５１

　ＯＧ３４０（１６４ｍｇ，０．８７１ｍｍｏｌ）及びブロモアセチルクロリド（０．０８５ｍＬ，１．０２ｍｍｏｌ）を無水ジクロルメタン（１０ｍＬ）に溶解してＡｌＣｌ_３（１６０ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で２時間攪拌した。氷冷した１規定塩酸をゆっくり加えて反応を停止し、反応混合物をジクロルメタンで抽出した。有機層を重曹水及び食塩水で順次洗浄した後、乾燥して濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル７：１）で精製して目的物をオレンジ色油状物として得た（ＯＧ５５０，２３５ｍｇ，０．７６０ｍｍｏｌ，８７％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　７．９７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），４．４２（ｓ，２Ｈ），１．７１（ｓ，４Ｈ），１．３２（ｓ，６Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ）．

　ＤＭＦ（６ｍＬ）にＯＧ５５０（２３４ｍｇ，０．７５７ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１０１ｍｇ，０．８２７ｍｍｏｌ）、及び炭酸カリウム（２７３ｍｇ，１．９８ｍｍｏｌ）を加えて終夜攪拌した。塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止し、反応混合物を酢酸エチルで抽出して、有機層を水及び食塩水で順次洗浄した後、乾燥して濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル３：１）で精製して目的物を得た（ＯＧ５５１，２００ｍｇ，０．５７１ｍｍｏｌ，７５％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　９．８９（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ），１．７２（ｓ，４Ｈ），１．３２（ｓ，６Ｈ），１．３１（ｓ，６Ｈ）．

（ｈ）ＯＧ５５７

　無水ジクロルメタン（１５ｍＬ）にＯＧ３４０（１．０３ｇ，５．４９ｍｍｏｌ）及びアセチルクロリド（０．５９ｍＬ，８．３０ｍｍｏｌ）を溶解し、ＡｌＣｌ_３（１．０１ｇ，７．５８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた後に４時間加熱還流した。０℃で氷冷水を加えて反応を停止し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄した後、乾燥して濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル５：１）で精製して目的物をオレンジ色油状物として得た（ＯＧ５４８，１．１０ｇ，４．７７ｍｍｏｌ，８７％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　７．９４（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ），１．７１（ｓ，４Ｈ），１．３２（ｓ，６Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ）．

　エタノール（６ｍＬ）及び水酸化ナトリウム水溶液（２Ｎ，２ｍＬ）にＯＧ５４８（１１９ｍｇ，０．５１７ｍｍｏｌ）及びテレフタルアルデヒド酸（１０９ｍｇ，０．７２７ｍｍｏｌ）を溶解して室温で終夜攪拌した。希塩酸を加えて酸性化して酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄した後に乾燥して濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製した後、得られた生成物をジクロルメタン（２ｍＬ）に溶解してトリエチルシラン（０．４０ｍＬ，２．５ｍｍｏｌ）及びＴＦＡ（０．２０ｍＬ）を加え、終夜攪拌した。反応混合物をジクロルメタンで希釈して水及び食塩水で順次洗浄した後、乾燥して濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル２：１）で精製して目的物を淡黄色油状物として得た（ＯＧ５５４，２４８ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ，８３％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　８．０２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），２．０１−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．６７（ｓ，４Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ）．
ＭＳ（ＦＡＢ）：　ｍ／ｚ　３３３（Ｍ＋Ｈ−Ｈ_２Ｏ）^＋．

　ＯＧ５５４（２４８ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解してＬＡＨ（４５ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）を０℃で加え、４時間加熱還流した。反応混合物に０℃でＮａ_２ＳＯ_４・１０Ｈ_２Ｏを加えて１時間攪拌した後、得られた白色懸濁物をセライトで濾過し、母液を濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル５：２）で精製して目的物を透明オイルとして得た（ＯＧ５５６，１３２ｍｇ，０．３９２ｍｍｏｌ，９１％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　７．２９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．０９（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｓ，２Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），２．５９（ｔ，７．６Ｈｚ，２Ｈ），１．９８−１．９１（ｍ，２Ｈ），１．６７（ｓ，４Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ）．

　ＯＧ５４１の製造と同様にして目的物を得た（Ｇ５５７，９０ｍｇ，０．２６９ｍｍｏｌ，７０％）。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：　δ　９．９８（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．８Ｈｚ，１Ｈ），２．７４（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），２．６１（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），２．０１−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．６７（ｓ，４Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ）．

例２：試験例
　変異型ロドプシンとしては、頻度が高く、フォールディング異常を起こすロドプシン変異として最初に見つかったＰ２３Ｈ（２３番ＰｒｏのＨｉｓへの置換）変異体を用いた。この変異体は正常に細胞膜まで輸送されずにＥＲに蓄積すること、１１−ｃｉｓ−レチナー及び９−ｃｉｓ−レチナールにより変異体が細胞膜へ発現することが知られている。本発明の化合物について、この局在異常の修正を以下の２つの方法で評価した。（１）免疫染色・蛍光顕微鏡による細胞内の局在の確認；及び（２）膜上のロドプシンのみに抗体を結合させ、抗体についている酵素活性により結合した抗体量、すなわちロドプシン量の定量。

　膜上のロドプシンのみを定量するためには、ロドプシンの細胞外領域に対する抗体が必要となる。そこで、ロドプシンの細胞外側領域となるＮ末端にタグを導入した。ロドプシンのＮ末端にタグを入れた報告例はないが、同じＧＰＣＲであるバソプレシンＶ_２受容体では局在に影響を与えることなくＨＡ（ｈｅｍａｇｌｕｔｉｎｉｎ）タグ（９ａ．ａ．，ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ）が導入可能であることが示されている（Ｓｃｈ▲ｏ▼ｎｅｂｅｇ，Ｔ．ｅｔ　ａｌ．，ＥＭＢＯ　Ｊ．，１５，ｐｐ．１２８３−１２９１，１９９６）。タグの挿入部位によっては局在異常を起こすことが知られているため、タグ導入によりロドプシン局在に影響がないかどうかを蛍光顕微鏡で確認した。ＨＡタグの有無にかかわらず、野生型ロドプシンは主に細胞膜に局在しており、Ｐ２３Ｈ変異体は細胞内（主にＥＲ）に局在していることが確認され、局在に関してタグ導入による影響はほとんどなかった（図１）。

　タグを導入したＰ２３Ｈ変異体を用いて９−ｃｉｓ−レチナールの局在異常修正作用（Ｓａｌｉｂａ，Ｒ．Ｓ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．，１１５，ｐｐ．２９０７−２９１８，２００２；Ｍｅｎｄｅｓ，Ｈ．Ｆ．ｅｔ　ａｌ．，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．，１７，ｐｐ．３０４３−３０５４，２００８）が再現できるかどうかを確認した。図２は膜上のロドプシンを赤、細胞内も含めた全ロドプシンを緑で表している。上から順に、ＷＴ（ＤＭＳＯ　０．５％）、Ｐ２３Ｈ（ＤＭＳＯ　０．５％）、Ｐ２３Ｈ（９−ｃｉｓ−レチナール５μＭ）を示す。野生型では発現しているロドプシンの大部分が膜上に存在することがわかる（上段の赤・緑）。一方、Ｐ２３Ｈロドプシンは大部分が細胞内にあり（中段の緑）、膜上にはほとんど発現していない（中段の赤）。Ｐ２３Ｈを９−ｃｉｓ−レチナール（５μＭ）で処理すると、膜上に発現しているロドプシンの量が増えることがわかる（下段の赤）。従って、９−ｃｉｓ−レチナールによりＰ２３Ｈ変異体の膜移行が促進されていることが確認できた。

　つぎに、９６ｗｅｌｌプレートを用いて膜上のロドプシン量を評価する系（Ｃｅｌｌ　ＥＬＩＳＡ）の構築を行った。ポリリジンでコートした９６ｗｅｌｌプレートにＨＥＫ２９３細胞（５−８×１０^３ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ）をまき、５％ウシ胎児血清、ペニシリン、及びストレプトマイシンを添加したダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ）で加湿した５％ＣＯ_２インキュベーター中で３７℃で培養し、１６−２０時間後にリン酸カルシウム沈殿法によりトランスフェクトした。２時間後に細胞を被検化合物（ＤＭＳＯ最終濃度０．１％として５％ＦＢＳを含むＤＭＥＭで希釈）で処理し、２０時間インキュベートした後に細胞を固定して（ＰＢＳ中４％ホルムアルデヒドで室温にて３０分処理）、ブロック化（１％ＢＳＡ＋ＰＢＳ中０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で室温にて１時間処理）した後、８０００倍希釈したＨＲＰ−共役抗ＨＡポリクローナル抗体（Ａ１９０−１０８Ｐ，Ｂｅｔｈｙｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）で１．５時間室温で反応した。０．１％ＢＳＡを含むＰＢＳで３回洗浄した後、化学発光ＨＲＰ基質（ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ　ＥＬＳＡ　Ｐｉｃｏ　ｃｈｅｍｉｌｕｎｅｓｃｅｎｔ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ，ＰＩＥＲＣＥ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）を加えて室温で１０分振盪した。その後に化学発光を測定し（Ｐｅｒｋｉｎ　Ｅｌｍｅｒ　ｗａｌｌａｃ　１４２０　ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ　ｃｏｕｎｔｅｒ）、相対発光を（被検化合物処理ウェル−ウェル平均バックグラウンド）／（ＤＭＳＯ処理ウェル平均−ウェル平均バックグラウンド）として求めた。ＨＲＰの量と発光量はこの評価系で用いる範囲で直線的であり、発光量から膜上にあるロドプシン量を定量できる。

　この系を用いて、９−ｃｉｓ−レチナールによりＰ２３Ｈロドプシンの膜移行量が増えるかどうか調べたところ、蛍光顕微鏡での観察結果と同様に、膜移行量が増加していることが確認できた（図３の左図）。１００μＭでの発光量低下は細胞毒性によるものである。３０μＭ程度から発光量の低下がみられることから、正確なＥＣ_５０は算出できないものの、この評価系により９−ｃｉｓ−レチナールのＥＣ_５０は数μＭから数十μＭ程度であると結論された。図３の右図には野生型（ＷＴ）とＰ２３Ｈ変異体のそれぞれの膜上発現量を示した。Ｐ２３Ｈ変異体はＷＴに比べ、１５％程度の膜上発現量であると考えられるが、これが９−ｃｉｓ−レチナールにより３０％程度まで上昇する。一方、ＷＴにおいては特に膜上発現量の上昇は認められなかった。縦軸の値は、トランスフェクションしていない場合の発光量を差し引き、ＤＭＳＯ処理時の発現量に対する比率で示した。

　上記の９６ｗｅｌｌプレートを用いた評価系で例１で合成した本発明の化合物の評価を行った。結果を図４及び５に示す。この結果、本発明の化合物は９−ｃｉｓ−レチナールと同様にロドプシン変異体に対して膜移行量を増加させることが示された。

Claims

　下記の一般式（Ｉ）：

〔式中、Ｒ^１はアルデヒド基又はアルデヒド等価基を示し；Ｒ^２及びＲ^３はそれぞれ独立にベンゼン環上の任意の位置に存在する水素原子、水酸基、炭素数１~６のアルキル基、又は炭素数１~６のアルコキシ基を示し；Ｌ^１、Ｌ^２、及びＬ^３はそれぞれ独立に−Ｃ（Ｒ^４）（Ｒ^５）−（Ｒ^４及びＲ^５はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、ハロゲン原子、又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ^６）−（Ｒ^６は水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、又は−Ｃ（＝Ｑ）−［＝Ｑは＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ−Ｒ^７（Ｒ^７は水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）、又は＝Ｃ（Ｒ^８）（Ｒ^９）（Ｒ^８及びＲ^９はそれぞれ独立に水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示す）］を示し；Ｘは−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し；Ｙ及びＺはそれぞれ独立に−Ｏ−、−ＣＨ_２−、又は−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−（Ｒ^１０及びＲ^１１はそれぞれ独立に水素原子又は炭素数１~６のアルキル基を示すが、Ｒ^１０及びＲ^１１が同時に水素原子であることはない）を示すが、Ｙ及びＺのうち少なくとも１つは−Ｃ（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）−を示す〕で表される化合物又はその塩。
　Ｒ^１がアルデヒド基であり、Ｒ^２及びＲ^３が水素原子である請求項１に記載の化合物又はその塩。
　Ｘが−ＣＨ_２−ＣＨ_２−であり、Ｙ及びＺが−Ｃ（ＣＨ_３）_２−である請求項１又は２に記載の化合物又はその塩。
　−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基が−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＮＨ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｏ−、−Ｏ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＮＨ−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−　−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−ＮＨ−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＮＨ−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＮＨ−−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｃ（＝ＣＨ_２）−ＣＨ_２−Ｃ（＝ＣＨ_２）−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＯ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＨ_２−ＮＨ−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、並びに上記の基において１個の水素原子が水酸基に置き換えられた基、及び上記の基において１個又は２個の水素原子がメチル基で置き換えられた基からなる群から選ばれる基である請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
　−Ｌ^１−Ｌ^２−Ｌ^３−で表される基が−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｏ−、及び−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−からなる群から選ばれる基である請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
　請求項１ないし５のいずれか１項に記載の化合物又は生理的に許容されるその塩を有効成分として含む医薬。
　フォールディング異常を示す変異型ロドプシンに起因する網膜色素変性症の予防及び／又は治療のための請求項６に記載の医薬。