WO2010027294A1 - Композиция для лечения диспластических процессов шейки матки - Google Patents

Композиция для лечения диспластических процессов шейки матки Download PDF

Info

Publication number
WO2010027294A1
WO2010027294A1 PCT/RU2009/000412 RU2009000412W WO2010027294A1 WO 2010027294 A1 WO2010027294 A1 WO 2010027294A1 RU 2009000412 W RU2009000412 W RU 2009000412W WO 2010027294 A1 WO2010027294 A1 WO 2010027294A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
gallate
suppository
dna
cervical
epigallocatexin
Prior art date
Application number
PCT/RU2009/000412
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Всеволод Иванович КИСЕЛЕВ
Original Assignee
Kiselev Vsevolod Ivanovich
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kiselev Vsevolod Ivanovich filed Critical Kiselev Vsevolod Ivanovich
Priority to EA201100417A priority Critical patent/EA018383B1/ru
Publication of WO2010027294A1 publication Critical patent/WO2010027294A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/02—Suppositories; Bougies; Bases therefor; Ovules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0034—Urogenital system, e.g. vagina, uterus, cervix, penis, scrotum, urethra, bladder; Personal lubricants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • composition for the treatment of cervical dysplastic processes Composition for the treatment of cervical dysplastic processes
  • the invention relates to medicine, the pharmaceutical industry and relates to new drugs used to treat dysplastic processes of the cervix and rectal mucosa.
  • Cervical Dysplasia JTTTTM 3 or Cervical Intraepithelial Neoplasia (CIN) are classified as precancerous diseases.
  • Dysplasia is an atypia of the cervical epithelium with a violation of its “lamination”, but without involving the surface layer and stroma in the process.
  • epithelial dysplasia a deviation from the norm of reproduction, development, and differentiation of cells of the squamous multilayer epithelium covering the cervix is characteristic.
  • Three main forms of dysplasia are distinguished: mild (CIN I), moderate (CIN II) and severe (CIN III).
  • the risk group for cervical cancer includes women with a history of: 1) an early onset of sexual activity (up to 16 years - the cervical epithelium is thinned and easily injured, which can lead to injury and the development of a pathological process);
  • STDs inflammatory and sexually transmitted diseases
  • the pathogenetic factors of DTTM include the presence of inflammatory processes, imbalance of sex hormones and past injuries of the cervix.
  • infection with the human papillomavirus (HPV) is considered to be the main factor in the pathogenesis of DTTM.
  • High-oncogenic risk HCVH DNA (predominantly 16 and 18 types) is found in more than 80% of samples of moderate and severe cervical squamous dysplasia.
  • Human papillomavirus infection (PVI) is the most common sexually transmitted infection. According to statistics, more than 50% of the sexually active population is infected with HPV during their lifetime.
  • PVI tumorigenic infections that can cause benign hyperplasia
  • some types of PVI initiate the development of malignant tumors of the anogenital region: cervical, vulvar, vaginal and other cancers of high-risk HPV DNA (mainly 16 and 18 types) are found in 90% of cases of invasive cancer.
  • Cervical cancer Cervical cancer
  • Cervical cancer is the second most common cancer among women. About half a million new cases of the disease are registered annually in the world and 270,000 of them are fatal. The standardized incidence and mortality rate for cervical cancer is 16.2 and 9 per 100,000 population, respectively. In Russia, from cervical cancer (which is 4.8% of all malignant diseases in women) more than 6 thousand patients die each year (in the age group of 20 to 40 years, PIIIM is the main cause of death), the incidence rate is approximately twice as high.
  • Exophytic forms include genital, papillary and papule-shaped formations that are diverse in appearance and size, often complicated by the addition of a secondary bacterial infection and accompanied by not only psychological, but also physical suffering of the patient.
  • Endophytic forms are various morphological changes in the squamous epithelium without external growths.
  • Genital warts are also the cause of recurrent respiratory papillomatosis in children, due to the vertical transmission of the virus from the infected mother to the baby. It should be noted that in recent years the number of diagnoses of colorectal cancer, also caused by human papilloma viruses, has significantly increased. This type of pathology is especially widespread among men with non-traditional sexual orientation. In most cases of oncological pathology, the formation of condylomas of the rectal mucosa is preceded, which is accompanied by bleeding during an act of defecation, inflammatory processes and anal fissures.
  • the papilloma virus When infecting epithelial tissues, the papilloma virus uses a whole set of mechanisms that subordinate the vital activity of the infected cell to its interests.
  • HPV DNA is known to encode the synthesis of two proteins, E6 and E7, which induce the transition of differentiated cells to the S phase of the cell cycle.
  • E6 and E7 genes At the stage of active reproduction of the virus, expression of the E6 and E7 genes is regulated by the protein product of the E2 gene, a repressor of the transcription of these genes.
  • a key event in the malignancy of cells is the integration of the virus into the genome of the host cell, which is accompanied by a deletion of the E2 gene.
  • E6 and E7 Cell cycle and differentiation are controlled by oncogenic proteins E6 and E7, inactivating the "key" proteins that regulate cell proliferative activity - the proapoptotic p53 protein and retinoblastoma protein (pRB). It was found that the E7 protein is able to form a stable complex with the pRB protein, causing its degradation, which leads to the release of the transcription factor E2F, which stimulates the transcription of genes necessary for DNA replication in the S phase of the cell cycle.
  • E6 and E7 inactivating the "key” proteins that regulate cell proliferative activity - the proapoptotic p53 protein and retinoblastoma protein (pRB). It was found that the E7 protein is able to form a stable complex with the pRB protein, causing its degradation, which leads to the release of the transcription factor E2F, which stimulates the transcription of genes necessary for DNA replication in the S phase of the cell cycle.
  • E7 affects the activity of a number of other cell-cycle regulatory proteins, such as A- and E-cyclins, cdk2-kinase, and cyclin-dependent kinase inhibitors p21 and p27 (Kiselev V.I., Human papillomaviruses in the development of cancer uterine cervix, Monograph, Dimitrade Graphic Group ® , Moscow, 2004).
  • estradiol the most active estrogen
  • the main pool of endogenous estrogen is utilized through the P-450 cytochrome monooxygenase system localized in the liver. catalyzing the formation of its hydroxy derivatives, which facilitates their solubility and subsequent excretion from the body through the kidneys and biliary tract.
  • the enzymatic system of cytochromes P-450 provides the conversion of estradiol into two main metabolites: l- ⁇ -hydroxyestron (l- ⁇ -OHEl) and 2-hydroxyestrone (2-OHE1) (Fig. 1).
  • lb ⁇ -ONEl belongs to the category of “aggressive” hormones that cause a long-term carcinogenic effect (S Vintagehpeider J., Kinne D., Frasshia A. et al., Abpormal oxidolism of esradialo bacelpact. USA, 1982, v. 79, p. 3047-3051).
  • 2-OHE1 has moderate functions and, in contrast to l ⁇ -OHEl, on the contrary, normalizes cell growth. With an increase in the level of 2-OHE1, a tendency is observed for the death of tumor cells and the prevention of their further formation.
  • HPV-infected human keratinocytes exhibit proliferative activity in vitro, but do not have a tumor phenotype under microscopic examination.
  • exogenous l- ⁇ -OHEl to the culture medium transforms the cells into typically cancerous cells (Aubort K, Wodworth G, DiRalo J, Vardlo L, Theptestophep HPV, TestoPeterogens, TestoPerbus, Peroxidus and Chebepilobacterium. p. 867-869).
  • “ ⁇ -flavored bone” is formed, in which the virus, through the formation of an “aggressive” form of estradiol, creates favorable conditions for tumor development, stimulating the synthesis of E7 oncoprotein.
  • the oncoprotein E7 on the one hand, activates the mechanisms of pathological cell proliferation, and on the other - blocks antiviral immunological protection (Fig. 2).
  • E7 protein Another important property of the E7 protein is its ability to induce the expression of type 2 cyclooxygenase (COX-2) (Subbarcoma K. and Dannenberg AJ., Cyclooxygenase-2 trispertybum humaparillomavirus 16 Eppropepto Exhapge, Sapser Res, 2007, 67 (8), 3976-3985).
  • COX-2 type 2 cyclooxygenase
  • irreversible neoplasia requires: 1) the induction of metabolic mechanisms for the conversion of estradiol to lb ⁇ -OHEl, which plays a key role in the cancerous degeneration of HPV-infected cells; 2) active expression of the oncogenes of the E6 and E7 virus, stimulated by the interaction of the hormone-receptor complex with the HPV DNA promoter;
  • a tool was developed based on the composition for the prevention and treatment of dysplasia and cervical cancer and laryngeal papillomatosis, including indol-3-carbinol
  • BC in an effective amount and a suitable pharmaceutical carrier in the form of vaginal suppositories (RF patent 2196568, publ. 2003.01.20).
  • DIM diindolylmethane
  • Indole-3-Carbinol and Diindollylmethane induce apoptosis of human servisal sapper sells and in murine HPV 16-trapsegelis reperalstivic servisal serumelium, J. Nutrit, 2001, 131, 3294-3302).
  • DIM DIM stimulates IFN ⁇ -dependent signaling cascades by activating the expression of IFN ⁇ receptors, as well as other IFN-responsive regulatory proteins (Ribu JE, Hué L., Cháterger U., Bjéldapes E. L. et al., Assistiop apd rotheptiatiop of ipterferop- ⁇ sigpaipip bu 3.3'-diindolylmethane ip MCF-7 brést sapsercells, MoI. Pharmacol., 2006, 69, 430-439).
  • a solution may be indicated regarding a dosage form in the form of vaginal suppositories containing methindole (3,3'-diindolylmethane), a lipophilic base including solid confectionery fat, polyvinylpyrrolidone and butylhydroxyanisole, taken in a specific ratio (as an active substance) RF JVfe 2318510, publ. 2008.03.10).
  • methindole 3,3'-diindolylmethane
  • a lipophilic base including solid confectionery fat, polyvinylpyrrolidone and butylhydroxyanisole, taken in a specific ratio (as an active substance) RF JVfe 2318510, publ. 2008.03.10).
  • the tool is intended for the treatment of genital warts and neoplastic diseases of the reproductive organs.
  • Clinical studies have shown its effectiveness in CIN I and CIN II. Morphological and clinical signs of cervical dysplasia disappeared with a two-week
  • vaginal suppositories containing DIM were not effective in patients with severe dysplasia (CIN III). In our opinion, this is due to a deeper degree of cell malignancy, which is already less dependent on the expression of human papillomavirus genes and acquires an irreversible character due to disturbances in the cell genome, mainly due to the epigenetic mechanisms of inactivation of tumor growth suppressor genes resulting from promoter hypermethylation areas of these genes.
  • a key mechanism for epigenetic regulation is DNA methylation. It consists in the covalent attachment of a methyl group at the C5 position of cytosine in the CpG dinucleotide (cytosine-phosphorus-guanosine). Dinucleotide combinations of CpG can be localized both in the regulatory (promoter) regions of genes and throughout the rest of the DNA molecules. Approximately 50% of mammalian genes contain CpG dinucleotide as part of their promoters. If CpG is in an unmethylated state, active expression of the corresponding gene is observed. The addition of a methyl group to CpG cytosine, in contrast, inhibits gene expression and translates them into silent status.
  • Methylation of cytosines in the CpG pair is carried out using a special enzyme, DNA methyl transferase (DNMT), or rather, a family of three isoenzymes - DNMTl, DNMT3a, DNMT3b. It was shown that in vitro and ipvivo conditions, the expression level and activity of DNMTl are specifically increased in many malignant tumors (Fapg JY, Chepg ZH, Chep Y.X. et al, Expresiopt Dpmtl, demepth IP Humap Gastrifresh Sapser, World J. Gastroepterol, 2004, 10, 3394-3398), (Mizupo S., Shijiwa T., Okamura T.
  • DNMT DNA methyl transferase
  • DNMT especially isoforms of DNMTl
  • inhibition of DNMT blocks the hypermethylation of newly synthesized DNA chains, resulting in a decrease in the overall level of genome methylation and re-expression of silent genes (Clark SJ., Melki J., DNA metulapi ap gepe silsepsi is th Canal guilt why raptu, Opsogepe, 2002, 21, 5380-5387).
  • epigallocatexin-3-gallate the most active of green tea catechins - is an effective inhibitor of the DNA methyltransferase enzyme, the main cellular enzyme that methylates the cytosine residues in the DNA molecule
  • EGCG epigallocatexin-3-gallate
  • Teorolurhepol (-) - epigallocatechin-3-gallate inhibits DNA mettul-apferes ap-reptivates metepulati-silseped gepes ip sapper cell, 2003, 7570-75, 7563.
  • EGCG (5-50 ⁇ M) in a dose-dependent manner effectively suppresses the activity of DNA methyl transferase, resulting in demethylation of CpG dinucleotides and reactivation of methylated “silent” (transcriptionally inactive) genes involved in carcinogenesis, namely, the tumor suppressor gene plb, retinoid receptor gene (RAR), methylguanine methyltransferase (MGMT) gene, and hMLHl gene responsible for DNA repair (Fig. 3).
  • methylated “silent” transcriptionally inactive
  • EGCG is not only a demethylating agent, but also inhibits COX-2, an important role of which in the development of cervical dysplasia was mentioned earlier (Guapg Repg, Dan A Dihop et. Al, Greater terapolurhepol-Epigallocatechip-3-gallate inhibits cyclooxygepase-2exper Ipolop sarciogepsis, Molesulasarciphesis, 2006, 45, 309-319).
  • the new tool is made in the form of a vaginal or rectal suppository containing 3,3'-diindolylmethane and epigallocatexin-3-gallate as active substances, as well as a catalyst for the inhibitory activity of epigallocatexin-3-gallate in relation to DNA-methyltransferases, which is Mg-transtransferase a pharmaceutically acceptable magnesium salt, a lipophilic base containing solid fat, polyvinylpyrrolidone and butylhydroxyanisole and / or butylhydroxytoluene at the following content, wt.%: 3, 3'-Diindolylmethane 1,0-10,0
  • any of the bases of this type known in the field of pharmacy can be used: butyrol, an alloy of cocoa butter with hydrogenated oil and paraffin, cooking oil mixed with paraffin, witepsol, etc.
  • magnesium salts such as magnesium asparaginate, magnesium fumarate, magnesium succinate, etc. can be used as a catalyst for the inhibitory activity of epigallocatexin-3-gallate with respect to DNA methyl transferases.
  • magnesium chloride especially preferably 6-hydrous chloride, is used.
  • PVP polyvinylpyrrolidone
  • diindolylmethane is contained in an amount of 0.01-0.6 g per candle, epigallocatexin-3-gallate is 0.01-0.4 g, magnesium salt is 0.01-0.02 g.
  • Figure 1 Estradiol metabolism
  • Figure 2 The role of estrogens in the carcinogenesis of cervical epithelial cells infected with HPV
  • Figure 3 Epigenetic regulation of gene activity.
  • composition of the pharmaceutical composition in the form of vaginal suppositories in wt.%.
  • composition of the pharmaceutical composition in the form of vaginal suppositories in wt.%.
  • composition of the pharmaceutical composition in the form of vaginal suppositories, in wt.%.
  • Each group was divided into three subgroups, one of which was prescribed treatment with vaginal suppositories containing DIM, the other subgroup used for the treatment of suppositories containing DIM in combination with EGCG and the third suppository in Example 2.
  • the course of treatment lasted for 14 days, one suppository through day.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицины, фармацевтической промышленности и касается новых средств, используемых для лечения диспластических процессов шейки матки и слизистой прямой кишки. Лекарственное средство для лечения диспластических процессов шейки матки и слизистой прямой кишки, в форме суппозитория, характеризующееся тем, что содержит 3,3 '-дииндолилметан, эпигaллoкaтexин-3-гaллaт, а также катализатор ингибирующей активности эпигaллoкaтexин-3-гaллaтa в отношении ДНК-метилтрансфераз, представляющий собой катионы Mg2+ в виде фармацевтически приемлемой соли магния, липофильную основу, содержащую твердый жир, поливинилпирролидон и бутилгидроксианизол и/или бутилгидрокситолуол. Средство оказывает эффективное действие при тяжелых формах диспластических поражений.

Description

Композиция для лечения диспластических процессов шейки матки
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Изобретение относится к области медицины, фармацевтической промышленности и касается новых средств, используемых для лечения диспластических процессов шейки матки и слизистой прямой кишки.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Дисплазии шейки матки (JTTTTM)3 или цервикальные интраэпителиальные неоплазии (CIN), относят к предраковым заболеваниям. Дисплазия - это атипия эпителия шейки матки с нарушением ее "слоистости", но без вовлечения в процесс поверхностного слоя и стромы. Для эпителиальных дисплазии характерно отклонение от нормы размножения, развития, дифференцировки клеток плоского многослойного эпителия, покрывающего шейку матки. Выделяют три основные формы дисплазии: легкую (CIN I), умеренную (CIN II) и тяжелую (CIN III).
К группе риска по ДШМ относятся женщины, имеющие в анамнезе: 1) раннее начало половой жизни (до 16 лет - эпителий шейки матки истончен и легко раним, что может привести к травмированию и развитию патологического процесса);
2) частая смена половых партнеров;
3) воспалительные заболевания и заболевания, передающиеся половым путем (ЗППП), наличие хронических вирусных инфекций генитального тракта (в частности, вирус герпеса второго типа).
4) травматизация во время абортов, родов, диагностических выскабливаний; 5) пристрастие к курению.
К патогенетическим факторам ДТТТМ относят наличие воспалительных процессов, нарушение баланса половых гормонов и перенесенные травмы шейки матки. Однако главным фактором патогенеза ДТТТМ считается инфицирование вирусом папилломы человека (ВПЧ). ДНК ВГГЧ высокой степени онкогенного риска (преимущественно 16 и 18 типов) обнаруживают в более чем 80% образцов умеренной и тяжелой дисплазии плоского эпителия шейки матки. Папилломавирусная инфекция (ПВИ) является наиболее распространенным инфекционным заболеванием, передающимся половым путем. Согласно статистике более 50% сексуально активного населения в течение жизни инфицируется ВПЧ. Повышенный биологический и медицинский интерес к ПВИ объясняется тем, что она относится к опухолеродным инфекциям, способным вызвать доброкачественную гиперплазию, а некоторые типы ПВИ - инициировать развитие злокачественных опухолей аногенитальной области: рак шейки матки, вульвы, влагалища и пр. ДНК ВПЧ высокой степени онкогенного риска (преимущественно 16 и 18 типов) обнаруживают в 90% случаев инвазивного рака.
Рак шейки матки (РШМ) занимает второе место по распространенности среди злокачественных новообразований у женщин. Ежегодно в мире регистрируется около полумиллиона новых случаев данного заболевания и 270 000 из них заканчивается смертельным исходом. Стандартизированный показатель заболеваемости и смертности от РШМ составляет 16,2 и 9 на 100 000 населения, соответственно. В России от РШМ (что составляет 4,8% от всех злокачественных заболеваний у женщин) ежегодно умирает более 6 тыс. больных (в возрастной категории от 20 до 40 лет PIIIM является основной причиной смерти), показатель заболеваемости - приблизительно вдвое выше.
Не меньшей по значимости медицинской проблемой являются доброкачественные проявления ПВИ, к которым относятся экзофитные и эндофитные поражения различных участков эпителия вульвы, влагалища и шейки матки, а также окружающих кожных покровов и слизистых оболочек, включая анальное отверстие.
Экзофитные формы (генитальные кондиломы) включают в себя разнообразные по внешнему виду и размеру остроконечные, папиллярные и папулообразные образования, нередко осложняющиеся присоединением вторичной бактериальной инфекции и сопровождающиеся не только психологическими, но и физическими страданиями пациента. Частота генитальных кондилом (генитальных бородавок), являющихся следствием инфицирования доброкачественными ВПЧ-типами, по данным Минздрава РФ (2001г.) составляет 26 на 100 000 населения.
Эндофитные формы (субклиническая ПВИ) представляют собой различные морфологические изменения плоского эпителия без наружных разрастаний.
Генитальные кондиломы являются также причиной возвратного респираторного папилломатоза у детей, что обусловлено вертикальной трансмиссией вируса от инфицированной матери к ребенку. Следует отметить, что в последние годы значительно увеличилось количество диагнозов рака прямой кишки, также обусловленного вирусами папилломы человека. Особенное распространение этот вид патологии получил среди мужчин с нетрадиционной сексуальной ориентацией. В большинстве случаев онкологической патологии предшествует образование кондилом слизистой прямой кишки, которое сопровождается кровотечениями при акте дефекации, воспалительными процессами и трещинами анального отверстия.
Основными методами лечения генитальных кондилом и предраковых неопластических заболеваний, обусловленных ВПЧ, в настоящее время являются химическая деструкция, хирургическое иссечение или аблация. Данные методы нередко сопровождаются осложнениями, требуют применения дорогостоящего медицинского оборудования и далеко не всегда оказываются эффективными. При этом огромное число молодых женщин с невыраженной клинической картиной вагинального кондиломатоза, не подлежащие деструктивному лечению, являются носителями инфекции и представляют опасность для половых партнеров и будущего ребенка.
При инфицировании эпителиальных тканей вирус папилломы использует целый набор механизмов, подчиняющих своим интересам жизнедеятельность инфицированной клетки. Известно, что ДНК ВПЧ кодирует синтез двух белков E6 и E7, индуцирующих переход дифференцированных клеток в S-фазу клеточного цикла. На стадии активной репродукции вируса экспрессия генов E6 и E7 регулируется белковым продуктом гена E2 - репрессором транскрипции этих генов. Ключевым событием в малигнизации клеток является интеграция вируса в геном клетки-хозяина, которая сопровождается делецией гена E2.
Контроль клеточного цикла и дифференцировки осуществляется посредством онкогенных белков E6 и E7, инактивирующих "ключевые" белки-регуляторы пролиферативной активности клеток — проапоптотический белок p53 и белок ретинобластомы (рRВ). Установлено, что белок E7 способен образовывать стабильный комплекс с белком рRВ, вызывая его деградацию, что приводит к высвобождению транскрипционного фактора E2F, который стимулирует транскрипцию генов, необходимых для репликации ДНК в S-фазе клеточного цикла. Кроме того, E7 влияет на активность целого ряда других белков- регуляторов клеточного цикла, таких как А- и Е-циклины, cdk2- киназа и ингибиторы циклин-зависимой киназы p21 и p27 (Киселев В. И., Вирусы папилломы человека в развитии рака шейки матки, Монография, Из-во «Димитpeйд График Гpyпп®», Москва, 2004).
Известно, что в патогенезе вирусной инфекции, приводящей к повышению пролиферативной активности инфицированных клеток доброкачественного характера (а иногда и с их злокачественным перерождением) значительную роль играет уровень и активность женских половых гормонов - эстрогенов (Киселев В. И., Дмитриев Г.A., Кубанова A.A., Взаимосвязь вирусных инфекций, передаваемых половым путем, и онкологических заболеваний урогенитального тракта, Вестник дерматологии и венерологии, 2000, JVfeб, cтp.20-23).
При этом относительное постоянство пролиферативной клеточной активности в эстроген - чувствительных тканях контролируется с помощью специальных метаболических механизмов, конвертирующих эстрадиол (наиболее активный эстроген) в биологически активные его производные. Основной пул эндогенного эстрогена утилизируется посредством локализованной в печени монооксигеназной системы цитохромов P-450, катализирующей образование его гидроксипроизводных, что облегчает их растворимость и последующее выведение из организма через почки и желчевыводящие пути. Ферментативная система цитохромов P-450 обеспечивает конверсию эстрадиола в два основных метаболита: lбα-гидроксиэстрон (lбα-ОНЕl) и 2- гидроксиэстрон (2-OHE1) (фиг. 1). lбα-ОНЕl относится к категории "агрессивных" гормонов, вызывающих длительный канцерогенный эффект (Sсhпеidеr J., Kinne D., Frассhiа А. еt аl., Аbпоrmаl охidаtivе mеtаbоlism оf еsrаdiоl iп wоmеп with brеаst сапсеr, Рrос. Nаtl. Асаd. Sсi. USA, 1982, v.79, р. 3047-3051). Показано, что этот эффект обусловлен образованием прочных ковалентных связей lбα-ОНЕl, являющегося агонистом эстрогена, с ядерными эстрогеновыми рецепторами (Swапесk GE, Fishman J, Соvаlепt biпdiпg оf thе епdоgепоus еstrоgеп 16 аlрhаhуdrохуеstrопе tо еstrаdiоl rесерtоr iп hшпап brеаst сапсеr сеlls: сhаrасtеrizаtiоп апd iпtrапuсlеаr lосаlizаtiоп, Рrос. Nаtl. Асаd. Sсi. USA, 1988, v.85 (21), р. 7831-7835).
2-OHE1 обладает умеренными функциями и, в отличие от lбα-ОНЕl, напротив, нормализует клеточный рост. При повышении уровня 2-OHE1 наблюдается тенденция к гибели опухолевых клеток и профилактике их дальнейшего образования.
Изучение функций этих двух метаболитов позволило выявить однозначную связь между уровнем lбα-ОНЕl и риском развития опухолей в эстроген-зависимых тканях и заключить, что соотношение 2-OHE1 к lбα-ОНЕl является одновременно универсальным биомаркером и надежным диагностическим критерием при определении риска и прогноза развития эстроген- зависимых опухолей.
Давно было отмечено, что тканевые изменения в цервикальном канале, вызванные ВПЧ, локализованы главным образом в эстроген - чувствительных зонах. Более того, было установлено, что там, где наблюдается активная экспрессия белков ВПЧ, отмечен высокий уровень синтеза lбα-ОНЕl сравнимый с таковым в раковых клетках молочной железы.
Следует подчеркнуть, что в норме эпителиальные клетки шейки матки не способны обеспечивать превращение эстрадиола в lбα-гидроксиэстрон. Таким образом, активная репродукция ВПЧ индуцирует образование "агрессивного" метаболита в инфицированных клетках (Киселев В. И., Вирусы папилломы человека в развитии рака шейки матки, Монография, Из-во «Димитpeйд График Гpyпп®», Москва, 2004).
В то же время было показано, что ВПЧ-инфицированные кератиноциты человека проявляют пролиферативную активность iп vitrо, но при этом не имеют опухолевого фенотипа при микроскопическом исследовании. Добавление в культуральную среду экзогенного lбα-ОНЕl превращает клетки в типично раковые (Аubоrп К, Wооdwоrth G, DiРаоlо J, Вrаdlоw L, Тhе iпtеrасtiоп bеtwееп HPV iпfесtiоп апd еstrоgеп mеtаbоlism iп сеrviсаl саrсiпоgепеsis. Iпt. J. Сапсеr, 1991, v. 49, р. 867-869).
Таким образом, формируется «πopoчный кpyг», при котором вирус через образование "агрессивной" формы эстрадиола создает благоприятные условия для развития опухоли, стимулируя синтез онкобелка E7. В свою очередь, онкобелок E7, с одной стороны, активирует механизмы патологической пролиферации клеток, а с другой — блокирует противовирусную иммунологическую защиту (фиг. 2).
Еще одним важным свойством белка E7 является его способность индуцировать экспрессию циклооксигеназы 2-го типа (ЦOГ-2) (Subbаrаmаiаh К. and Dannenberg AJ. , Cyclooxygenase-2 trапsсriрtiоп is rеgulаtеd bу humап рарillоmаvirus 16 E6 апd E7 опсорrоtеiп: Еvidепсе оf соrерrеssоr/соасtivаtоr ехсhапgе, Сапсеr Rеs, 2007, 67(8), 3976-3985). В последние годы доказана исключительно важная роль этого фермента в малигнизации эпителиальных клеток шейки матки (Кulkаrпi S., Rаdеr J. S. еt аl, Cyclooxigenase-2 is оvеrехрrеssеd iп humап сеrviсаl сапсеr, Сliпiсаl Сапсеr Rеsеаrсh, 2001, vol.7, pρ.429-434), (Fеrrапdiпа G., Lаuriоlа L. еt аl, Iпсrеаsеd Cyclooxigeпase-2 ехрrеssiоп is аssосiаtеd with сhеmоthеrару rеsistепсе апd рооr survivаl iп сеrviсаl сапсеr раtiепts, J оf Сliпiсаl Опсоlоgу, 2002, v.20,4, pp.973-981). Однако многолетние клинические наблюдения показывают, что вирусная инфекция - необходимый, но недостаточный элемент в развитии опухолевых процессов шейки матки. По разным данным, лишь от 1% до 4% случаев ВОТ инфекции эпителия шейки матки развиваются по пути малигнизации и приводят к раку. Это означает, что для индукции канцерогенеза необходимы еще какие-то метаболические нарушения эпителия, инфицированного ВПЧ.
В последние годы накапливаются данные о том, что гиперметилирование генов-супрессоров опухолевого роста может служить благоприятным фоном для инициации канцерогенеза (Моmраrlеr R.L., Сапсеr ерigепеtiсs, Опсоgепе, 2003, v.22, pp.6479- 6483). Дело в том, что онкогенного потенциала ВПЧ недостаточно для инициации необратимых процессов канцерогенеза эпителия шейки матки, если вирус инфицирует здоровый эпителий, не имеющий признаков генетических нарушений. Этим и объясняется тот факт, что в большинстве случаев инфицирования наблюдаются умеренные процессы дисплазии (CIN I) и (CIN II), которые с большой вероятностью разрешаются спонтанно, без врачебного вмешательства. В случае, если вирусная инфекция поражает эпителий с определенными генетическими нарушениями, например, дефектами в экспрессии генов - супрессоров опухолевого роста, то процессы малигнизации приобретают злокачественный характер, что приводит к развитию рака iп sitи (Кекеева T.B., Жевлова А.И.и др., Аномальное метилирование генов - супрессоров опухолевого роста и микросателлитная нестабильность в предраковых состояниях шейки матки, Молекулярная биология, 2006, тoм.40, Ш 2, с. 224-230).
Для формирования необратимой неоплазии необходимы: 1) индукция метаболических механизмов конверсии эстрадиола в lбα-ОНЕl, играющего ключевую роль в раковом перерождении ВПЧ-инфицированных клеток; 2) активная экспрессия онкогенов E6 и E7 вируса, стимулируемая взаимодействием комплекса гормон-рецептор с промотором ДНК ВПЧ;
3) индукция множественных повреждений хромосомной ДНК в инфицированной клетке, завершающая процесс опухолевой трансформации;
4) гиперметилирование генов-супрессоров опухолевого роста, в результате которого нарушается их экспрессия и утрачивается механизм контроля над процессами малигнизации эпителиальных клеток
В связи с появлением вирусной концепции цервикального канцерогенеза принципиально изменились и подходы к лечению диспластических процессов шейки матки и прилегающих областей.
В частности было разработано средство на основе композиция для профилактики и лечения дисплазий и рака шейки матки и папилломатоза гортани, включающей индoл-3 -карбинол
(ВС) в эффективном количестве и подходящий фармацевтический носитель в виде вагинальных свечей (патент РФ 2196568, опубл. 2003.01.20).
Соединение 13 С обладает широким спектром противоопухолевой активности. Однако индoл-3 -карбинол является нестабильным соединением. Поэтому более перспективным представляется дииндолилметан (DIM), представляющий собой димер, образующийся из индoл-3 -карбинола (13 С) в кислой среде. Экспериментально доказано, что практически все механизмы, индуцируемые 13 С iп vitrо и iп vivо, характерны и для DIM .
В одном из последних экспериментальных исследований была показана способность DIM вызывать апоптоз цервикальных ВПЧ-инфицированных кератиноцитов человека в условиях iп vitrо. При этом на одной из трех исследованных клеточных линий цервикального рака DIM демонстрировал в несколько раз большую эффективность, чем IЗС. Величина LD5O составляла 50-60 мкМ для DIM и 200 мкМ для IЗС. Но так же, как и его метаболический предшественник - 13 С, DIM не вызывал апоптотических изменений в нормальных (нетрансформированных) кератиноцитах (Сhеп D.Z., Qi M., Auborn K., Саrtеr Т.Н. Indole-3-Carbinol and Diindollylmethane induce apoptosis of human сеrviсаl сапсеr сеlls and in murine HPV 16- trапsgепiс рrепеорlаstiс сеrviсаl ерithеlium, J. Nutrit, 2001, 131, 3294- 3302).
Недавно также было описано еще одно важное свойство DIM - его иммуномодулирующая активность. Было показано, что в условиях iп vitrо в опухолевых клетках DIM стимулирует IFNγ- зависимые сигнальные каскады посредством активации экспрессии рецепторов IFNγ, а также других IFN-респонсивных регуляторных белков (Ribу J.E., Хuе L., Сhаttеrji U., Вjеldапеs Е.L. еt аl., Асtivаtiоп апd роtепtiаtiоп оf iпtеrfеrоп-γ sigпаliпg bу 3,3'-diindolylmethane iп MCF-7 brеаst сапсеr сеlls, MoI. Рhаrтасоl., 2006, 69, 430-439).
Имея в виду высокую противовирусную и противоопухолевую активность IFNγ, данное свойство может иметь большое клиническое значение при использовании DIM для лечения цервикальных дисплазий, обусловленных ВПЧ.
В качестве ближайшего аналога может быть указано решение, касающееся лекарственной формы в виде вагинальных суппозиториев, содержащих в качестве активной субстанции метиндол (3,3'-дииндoлилмeтaн), липофильную основу, включающую твердый кондитерский жир, поливинилпирролидон и бутилгидроксианизол, взятые в определенном соотношении (Патент РФ JVfe 2318510, опубл. 2008.03.10). Средство предназначено для лечения генитальных кондилом и неопластических заболеваний репродуктивных органов. Клинические исследования показали его эффективность при CIN I и CIN II. Морфологические и клинические признаки цервикальных дисплазий исчезали при двухнедельном курсе препарата (по 1 свече 1 раз в день). Положительная динамика сопровождалась иррадикацией ДНК ВПЧ в пробах цервикального эпителия анализируемого полимеразной цепной реакцией (ПЦР).
Однако в процессе клинических испытаний было установлено, что вагинальные суппозитории, содержащие DIM, обладали недостаточной эффективностью у пациенток с тяжелой дисплазией (CIN III). По нашему мнению, это обусловлено более глубокой степенью малигнизации клеток, которая уже в меньшей степени зависит от экспрессии генов вируса папилломы человека и приобретает необратимый характер за счет нарушений клеточного генома, в основном благодаря эпигенетическим механизмам инактивации генов -супрессоров опухолевого роста наступающей в следствии гиперметилирования промоторных областей этих генов.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ Таким образом, задачей настоящего изобретения являлся поиск более эффективного средства на основе дииндолилметана.
Ключевым механизмом эпигенетической регуляции является метилирование ДНК. Оно заключается в ковалентном присоединении метильной группы по C5-пoлoжeнию цитозина в составе динуклеотида CpG (цитозин-фосфор-гуанозин). Динуклеотидные сочетания CpG могут быть локализованы как в регуляторных (промоторных) участках генов, так и на всем остальном протяжении молекул ДНК. Примерно 50% генов млекопитающих в составе своих промоторов содержат динуклеотид CpG. Если CpG находится в неметилированном состоянии, наблюдается активная экспрессия соответствующего гена. Присоединение метильной группы к цитозину CpG, напротив, подавляет экспрессию генов и переводит их в статус "молчащих". Метилирование цитозинов в составе пары CpG осуществляется при помощи специального фермента — ДНК-метилтрансферазы (DNMT), а точнее, семейства из трех изоферментов - DNMTl, DNМТЗа, DNМТЗb. Показано, что в условиях iп vitrо и iп vivо уровень экспрессии и активность DNMTl специфично повышены при многих злокачественных опухолях (Fапg J.Y., Сhепg Z.H., Сhеп Y.Х. еt аl, Ехрrеssiоп оf Dпmtl, dеmеthуlаsе, MeCP2 апd mеthуlаtiоп оf tumоr-rеlаtеd gепеs iп humап gаstriс сапсеr, Wоrld J. Gаstrоепtеrоl, 2004, 10, 3394-3398), (Мizuпо S., Сhijiwа Т., Оkаmurа T. еt аl, Ехрrеssiоп оf DNA mеthуltrапsfеrаsеs DNMTl, ЗА, апd ЗВ iп пirmаl hеmаtороiеsis апd iп асutе апd сhrопiс mуеlоgепоus lеukеmiа, Вlооd, 2001, 97, 1172-1179), (Раtrа S.K., Раtrа А., Zhао H., Dаhiуа R., DNA mеtуltrапsfеrаsе апd dеmеthуlаsе iп humап рrоstаtе сапсеr, MoI. Саrсiпоg, 2002, 33, 163-171). Повышенный уровень DNМТ-опосредованного ДНК- метилирования связывается с повышенной опухолеобразующей (малигнизирующей) активностью клеток млекопитающих. Напротив, ингибирование DNMT (особенно изоформы DNMTl) блокирует гиперметилирование вновь синтезированных ДНК- цепей, в результате чего происходит снижение общего уровня метилирования генома и реэкспрессия "молчащих" генов (Сlаrk SJ., Меlki J., DNA mеthуlаtiоп апd gепе silепсiпg iп сапсеr: whiсh is thе guiltу раrtу, Опсоgепе, 2002, 21, 5380-5387).
В 2003 г. было показано, что эпигaллoкaтexин-3-гaллaт (EGCG) — самый активный из катехинов зеленого чая - является эффективным ингибитором фермента ДНК-метилтрансферазы, основного клеточного фермента осуществляющего метилирование остатков цитозина в молекуле ДНК (Fапg M.Z., Wапg Y., Ai N. еt аl, Теа роlурhепоl (-)-epigallocatechin-З-gallate inhibits DNA mеthуltrапsfеrаsе апd rеасtivаtеs mеthуlаtiоп-silепсеd gепеs iп сапсеr сеll liпеs, Сапсеr Rеs, 2003, 63, 7563-7570). EGCG (5-50 мкМ) дозо- зависимым образом эффективно подавляет активность ДНК- метилтрансферазы, в результате чего происходит деметилирование СрG-динуклеотидов и реактивация метилированных "молчащих" (транскрипционно неактивных) генов, вовлеченных в процессы канцерогенеза, а именно, гена супрессора опухолевого роста рlб, гена ретиноидных рецепторов (RAR), гена метилгуанин- метилтрансферазы (MGMT) и гена hМLНl, ответственного за репарацию ДНК (фиг. 3).
EGCG не только является деметилирующим агентом, но также ингибирует ЦOГ-2, о важной роли которой в развитии дисплазий шейки матки упоминалось ранее (Guапg Репg, Dan A Diхоп еt. Al, Grееп tеа роlурhепоl- Epigallocatechiп-3-gallate inhibits cyclooxygeпase-2 ехрrеssiоп iп соlоп саrсiпоgепеsis, Моlесulаr саrсiпоgепеsis, 2006, 45, 309-319).
Нами неожиданно было обнаружено, что ингибирующую активность EGCG в отношении ДНК-метилтрансфераз можно на порядок усилить добавлением катиона Mg2+ .
Таким образом, вышеуказанная задача была решена новым лекарственным средством для лечения диспластических процессов шейки матки и слизистой прямой кишки. Новое средство выполнено в виде суппозитория вагинального или ректального, содержащего в качестве активных субстанций 3,3'-дииндoлилмeтaн и эпигaллoкaтexин-3-гaллaт, а также катализатор ингибирующей активности эпигaллoкaтexин-3-гaллaтa в отношении ДНК- метилтрансфераз, представляющий собой катионы Mg в виде фармацевтически приемлемой соли магния, липофильную основу, содержащую твердый жир, поливинилпиролидон и бутилгидроксианизол и/или бутилгидрокситолуол при следующем содержании, мacc.%: З,3'-Дииндoлилмeтaн 1,0-10,0
Эпигaллoкaтexин-3-гaллaт 1,0-8,0
Поливинилпирролидон 0,5-1,2
Бутилгидроксианизол и/или бутилгидрокситолуол 0,3-0,5 Соль магния 0,1-2,0
Липофильная основа остальное
В качестве липофильной основы, содержащей твердый жир, могут быть использованы любые известные в области фармации основы данного типа: бутирол, сплав масло какао с гидрогенизированным маслом и парафином, кулинарный жир в смеси с парафином, витепсол и т.п.
В качестве катализатора ингибирующей активности эпигaллoкaтexин-3-гaллaтa в отношении ДНК-метилтрансфераз могут быть использованы фармацевтически приемлемые соли магния, такие как магния аспарагинат, магния фумарат, магния сукцинат и др. Предпочтительно использование магния хлорида, особенно предпочтительно магния хлористого 6-вoднoгo.
Бутилгидроксианизол и бутилгидрокситолуол проявляют эффективное антиоксидантное действие и являются известными консервантами. Введение их в суппозиторную массу дает дополнительный эффект воздействия на пораженную слизистую.
Включение ПВП в липофильную основу обеспечивает также благоприятное действие на слизистую оболочку. Способ приготовления суппозиториев заключается в том, что расплавляют компоненты липофильной основы, часть ее отдельно растирают с действующим веществом до получения гомогенной взвеси, к охлажденной оставшейся части основы добавляют поливинилпирролидон (ПВП) и бутилгидроксианизол и/или бутилгидрокситолуол, и затем полученную взвесь перемешивают до однородного состояния и формуют свечи методом выливания в формы.
Предпочтительно дииндолилметан содержится в количестве 0,01-0,6 г. на свечу, эпигaллoкaтexин-3-гaллaт- 0,01-0,4 г., магния coль-0,01-0,02 г.
ПЕРЕЧЕНЬ ЧЕРТЕЖЕЙ
Изобретение поясняется следующими рисунками: Фигура 1 - Метаболизм эстрадиола, Фигура 2 — Роль эстрогенов в канцерогенезе эпителиальных клеток шейки матки, инфицированных ВПЧ, Фигура 3 - Эпигенетическая регуляция активности генов.
ПРИМЕРЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ Изобретение может быть проиллюстрировано следующими примерами: Пример 1.
Состав фармацевтической композиции в виде вагинальных суппозиториев в мacc.%.
Дииндолилметан 2,0 Эпигaллoкaтexин-3-гaллaт 10,0
Поливинилпирролидон 1,2
Бутилгидроксианизол 0,3
Магний хлористый 2,0 Твердый жир типа А остальное
Пример 2.
Состав фармацевтической композиции в виде вагинальных суппозиториев в мacc.%. Дииндолилметан 10,0
Эпигaллoкaтexин-3-гaллaт 2,0
Поливинилпирролидон 1,0
Бутилгидроксианизол 0,5
Магний хлористый 0,1 витепсол остальное
Пример 3.
Состав фармацевтической композиции в виде вагинальных суппозиториев, в мacc.%.
Дииндолилметан 3,0 Эпигaллoкaтexин-3-гaллaт 3,0
Поливинилпирролидон 0,5 бутилгидрокситолуол 0,3
Магний аспарагинат 1,0
Основа из кулинарного жира и парафина 1 : 1 остальное
Пример 4.
Исследование клинической эффективности разработанной фармацевтической композиции у пациенток с дисплазией шейки матки. Для клинических исследований были отобраны две группы пациенток с диагнозом дисплазии шейки матки. В первую группу отбирали пациенток с легкой (CIN I) и умеренной формами дисплазий (CIN II) (таблица 1), во вторую группу — пациенток с тяжелой формой дисплазий (CIN III) (таблица 2).
Таблица 1
Figure imgf000020_0001
Таблица 2
Figure imgf000020_0002
Все диагнозы были подтверждены морфологическими исследованиями. У всех пациенток в цервикальных соскобах были обнаружены методом ПНР вирусы папилломы человека высокого онкогенного риска типы 16 или 18.
Каждая из групп делилась на три подгруппы, одной из которых назначалось лечение вагинальными суппозиториями, содержащими DIM, другая подгруппа применяла для лечения суппозитории, содержащие DIM в комбинации с EGCG и третья свечи по примеру 2. Курс лечения продолжался в течение 14 дней по одной свече через день.
Через месяц после начала лечения пациенток обследовали с помощью кольпоскопии, провели морфологические исследования клеток шейки матки и лабораторный анализ ПНР на наличие ДНК ВГТЧ lб и 18 типов. Пример 5.
Исследование клинической эффективности применения предлагаемой фармацевтической композиции для лечения пациентов с диагнозом кондиломы прямой кишки.
Для клинического исследования были отобраны 20 пациентов проктологическокого отделения с диагнозом "рецидивирующие кондиломы прямой кишки". Пациенты предъявляли жалобы на боли при акте дефекации, следы крови в стуле. При визуальном осмотре слизистой прямой кишки выявлены кондиломы размером 0.2-0.5 см., слизистая воспалена. У некоторых больных обнаружены трещины анального отверстия. Пациентам назначена монотерапия ректальными суппозиториями по примеру 1, по 1 свече утром и вечером в течение 14 дней. После проведенного курса лечения у 16 пациентов наступило полное клиническое выздоровление, которое сопровождалось исчезновением кондилом и всех признаков воспалительного процесса. У 4 пациентов после проведенного лечения наблюдалось уменьшение числа кондилом и отсутствие признаков воспаления.

Claims

Формула изобретения
1. Лекарственное средство для лечения диспластических процессов шейки матки и слизистой прямой кишки, в форме суппозитория, характеризующееся тем, что содержит 3,3'- дииндолилметан, эпигaллoкaтexин-3-гaллaт, а также катализатор ингибирующей активности эпигaллoкaтexин-3-гaллaтa в отношении
ДНК-метилтрансфераз, представляющий собой катионы Mg2+ в виде фармацевтически приемлемой соли магния, липофильную основу, содержащую твердый жир, поливинилпирролидон и бутилгидроксианизол и/или бутилгидрокситолуол при следующем содержании, мacc.%:
3,3'- Дииндолилметан 1,0-10,0
Эпигaллoкaтexин-3 -галлат 1,0-8,0
Поливинилпирролидон 0,5-1,2 Бутилгидроксианизол 0,3-0,5
Соль магния 0,1-2,0
Липофильная основа остальное
2. Лекарственное средство по п.l, характеризующееся тем, что указанный суппозиторий представляет собой вагинальный суппозиторий.
3. Лекарственное средство по п.l, характеризующееся тем, что указанный суппозиторий представляет собой ректальный суппозиторий.
4. Лекарственное средство по любому из п.п. 1-3, характеризующееся тем, что катализатор ингибирующей активности эпигaллoкaтexин-3-гaллaтa в отношении ДНК- метилтрансфераз представляет собой магний хлористый.
PCT/RU2009/000412 2008-09-04 2009-08-18 Композиция для лечения диспластических процессов шейки матки WO2010027294A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201100417A EA018383B1 (ru) 2008-09-04 2009-08-18 Композиция для лечения диспластических процессов шейки матки

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008135764/15A RU2395281C2 (ru) 2008-09-04 2008-09-04 Фармацевтическая композиция для лечения диспластических процессов шейки матки
RU2008135764 2008-09-04

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2010027294A1 true WO2010027294A1 (ru) 2010-03-11

Family

ID=41797309

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2009/000412 WO2010027294A1 (ru) 2008-09-04 2009-08-18 Композиция для лечения диспластических процессов шейки матки

Country Status (4)

Country Link
EA (1) EA018383B1 (ru)
RU (1) RU2395281C2 (ru)
UA (1) UA95583C2 (ru)
WO (1) WO2010027294A1 (ru)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2533381A (en) * 2014-12-18 2016-06-22 Nordic Labs Ltd Novel treatment of STIs
GB2542106A (en) * 2015-04-01 2017-03-15 Nordic Labs Ltd Novel treatment of STIs
WO2017200413A1 (ru) * 2016-05-16 2017-11-23 Нордик Лабз Лимитед Средства для лечения инфекционных заболеваний, передаваемых половым путём
CN108969602A (zh) * 2018-09-29 2018-12-11 南京依美生物科技有限公司 一种治疗人乳头状瘤病毒阳转阴的中药组合物及制备方法

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2454232C2 (ru) * 2010-09-16 2012-06-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "РОНЦ им. Н.Н. Блохина" РАМН) Применение производных трииндолилметана в качестве противоопухолевых средств
RU2456987C1 (ru) * 2011-03-21 2012-07-27 Сергей Владимирович Енгашев Способ получения желатиновых капсул на основе 3,31- дииндолилметана
RU2601621C2 (ru) * 2015-03-18 2016-11-10 Общество с ограниченной ответственностью "Фармацевтический завод иммунных лекарственных средств" Натрия дезоксирибонуклеата суппозитории, ректальные и вагинальные
RU2601893C1 (ru) * 2015-11-30 2016-11-10 Всеволод Иванович Киселев Лекарственное средство на основе индол-3-карбинола с повышенной эпигенетической активностью

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2185070C2 (ru) * 1995-03-14 2002-07-20 Индена С.П.А. Полифенольные фракции чая, их применение и содержащие их композиции
RU2196568C1 (ru) * 2001-08-08 2003-01-20 Киселев Всеволод Иванович Фармацевтическая композиция для профилактики и лечения дисплазий и рака шейки матки и папилломатоза гортани, а также способ профилактики и лечения этих заболеваний на ее основе
RU2301666C2 (ru) * 2002-01-11 2007-06-27 Маттиас Рат Обладающий питательными свойствами фармацевтический состав на основе полифенолов и его использование при лечении рака
RU2315594C1 (ru) * 2006-09-01 2008-01-27 Всеволод Иванович Киселев Антиэстрогенное и антипролиферативное средство для лечения и профилактики заболеваний женской репродуктивной системы
RU2318510C1 (ru) * 2006-04-19 2008-03-10 Всеволод Иванович Киселев Суппозитории вагинальные на основе 3,3`-дииндолилметана (метиндола)

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2185070C2 (ru) * 1995-03-14 2002-07-20 Индена С.П.А. Полифенольные фракции чая, их применение и содержащие их композиции
RU2196568C1 (ru) * 2001-08-08 2003-01-20 Киселев Всеволод Иванович Фармацевтическая композиция для профилактики и лечения дисплазий и рака шейки матки и папилломатоза гортани, а также способ профилактики и лечения этих заболеваний на ее основе
RU2301666C2 (ru) * 2002-01-11 2007-06-27 Маттиас Рат Обладающий питательными свойствами фармацевтический состав на основе полифенолов и его использование при лечении рака
RU2318510C1 (ru) * 2006-04-19 2008-03-10 Всеволод Иванович Киселев Суппозитории вагинальные на основе 3,3`-дииндолилметана (метиндола)
RU2315594C1 (ru) * 2006-09-01 2008-01-27 Всеволод Иванович Киселев Антиэстрогенное и антипролиферативное средство для лечения и профилактики заболеваний женской репродуктивной системы

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2533381A (en) * 2014-12-18 2016-06-22 Nordic Labs Ltd Novel treatment of STIs
GB2542106A (en) * 2015-04-01 2017-03-15 Nordic Labs Ltd Novel treatment of STIs
WO2017200413A1 (ru) * 2016-05-16 2017-11-23 Нордик Лабз Лимитед Средства для лечения инфекционных заболеваний, передаваемых половым путём
GB2565492A (en) * 2016-05-16 2019-02-13 Nordic Labs Ltd Means for treating sexually-transmitted infectious diseases
US20200179337A1 (en) * 2016-05-16 2020-06-11 Aktsionernoe Obschestvo "Veles Farma" Means for treating sexually transmitted infections
CN108969602A (zh) * 2018-09-29 2018-12-11 南京依美生物科技有限公司 一种治疗人乳头状瘤病毒阳转阴的中药组合物及制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
RU2395281C2 (ru) 2010-07-27
EA201100417A1 (ru) 2011-10-31
EA018383B1 (ru) 2013-07-30
UA95583C2 (ru) 2011-08-10
RU2008135764A (ru) 2010-03-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2010027294A1 (ru) Композиция для лечения диспластических процессов шейки матки
Van de Nieuwenhof et al. Review of squamous premalignant vulvar lesions
Léonard et al. A clinical and pathological overview of vulvar condyloma acuminatum, intraepithelial neoplasia, and squamous cell carcinoma
Wang et al. Treatment of HPV infection‐associated cervical condylomata acuminata with 5‐aminolevulinic acid‐mediated photodynamic therapy
Sendagorta-Cudós et al. Genital infections due to the human papillomavirus
US10251884B2 (en) Treatment of cancer and benign proliferative disorders
Riva et al. Extended carbon dioxide laser vaporization in the treatment of subclinical papillomavirus infection of the lower genital tract
Malek et al. Human papillomavirus infection and intraepithelial, in situ, and invasive carcinoma of penis
Lai et al. Medical and surgical approaches to vulvar intraepithelial neoplasia
Anisimov et al. Inhibitory effect of melatonin on 7, 12-dimethylbenz [a] anthracene-induced carcinogenesis of the uterine cervix and vagina in mice and mutagenesis in vitro
Yang et al. Bladder cancer cell viability inhibition and apoptosis induction by baicalein through targeting the expression of anti-apoptotic genes
RU2318510C1 (ru) Суппозитории вагинальные на основе 3,3`-дииндолилметана (метиндола)
CN104353058A (zh) 商陆抗病毒蛋白冻干粉复合剂及其制备方法
Sand et al. Presence of human papilloma viruses in intraosseous ameloblastoma
Wang et al. The effect of local photodynamic therapy with 5-aminolevulinic acid in treating different grades of cervical intraepithelial neoplasia
Tang et al. Therapeutic effects of topical photodynamic therapy with 5-aminolevulinic acid on cervical high-grade squamous intraepithelial lesions
Nelson et al. Vulvar intraepithelial neoplasia (VIN) and condylomata
RU2552332C1 (ru) Способ лечения плоскоклеточных интраэпителиальных поражений шейки матки
Yorganci et al. A case report of multicentric verrucous carcinoma of the female genital tract
JP2017070310A (ja) 上皮細胞におけるヒトパピローマウイルスゲノムの特異的なメチル化に関連する化合物および方法
Simon et al. Human papillomavirus infection in couples with female low-grade intraepithelial cervical lesion
RU2701525C1 (ru) Способ комбинированной терапии дисплазии шейки матки, ассоциированной с вирусами папилломы человека
Kirby et al. Genital human papillomavirus infections
Chituku et al. The Development of Locoregional Therapies as a Strategy for Reducing Cervical Cancer Mortality in Low to Middle Income Countries.
WO2007025186A2 (en) Hydrazone agents to treat cutaneous lesions

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 09811764

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: a201011132

Country of ref document: UA

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 201100417

Country of ref document: EA

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 09811764

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1