WO2009150359A1 - Dispositif de coloration de lames pour examens au microscope - Google Patents

Dispositif de coloration de lames pour examens au microscope Download PDF

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WO2009150359A1
WO2009150359A1 PCT/FR2009/050920 FR2009050920W WO2009150359A1 WO 2009150359 A1 WO2009150359 A1 WO 2009150359A1 FR 2009050920 W FR2009050920 W FR 2009050920W WO 2009150359 A1 WO2009150359 A1 WO 2009150359A1
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chamber
enclosure
staining
blades
cowling
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Alain Truchaud
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Alain Truchaud
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    • G01N35/025—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor using a plurality of sample containers moved by a conveyor system past one or more treatment or analysis stations having a carousel or turntable for reaction cells or cuvettes

Definitions

  • the present invention relates to a device for staining slides for microscope examinations.
  • a known device provides for spraying the dyes on the slides carrying the sample to be observed. This type of technique requires a micronized spray.
  • Another technique consists in carrying out a capillary coloration between a plate and each blade brought into contact with said plate.
  • a so-called flow technique which consists of flowing the dye composition on the slide, but it encounters a slowness incompatible with the needs of an analysis laboratory and this technique remains reserved for research.
  • the solution to achieve a constant and optimal quality is the soaking but in micro unit bath which is filled with the reagent dye, the liquid of rinsing, then emptied after each use. This does not prevent some contamination during the transition from one bath to another but there is no cumulative pollution since each micro bath is discarded after single use.
  • the necessary containers are very specific and the treatment therefore involves blade-by-blade treatment. It is not possible to treat a lot of slides.
  • the object of the present invention is to propose a device which ensures the quality of treatment in micro unit bath but with a possibility of batch processing to reach a sufficient rate.
  • This type of device is intended to meet the expectations of small medical analysis laboratories, health organizations in developing countries that are poorly equipped, or that makes it possible to offset a one-time overflow of treatment capacities. automated equipment of the organizations that are equipped with it, or which provides a very temporary replacement in case of intervention or maintenance on this automated equipment for example.
  • FIG. 1 a schematic view of the device in perspective
  • FIG. 2 a sectional view of the device
  • FIG. 3 a detailed view of an embodiment of the retention of the blades
  • FIG. 4 is a diagrammatic view from above of a cowling according to the present invention
  • FIGS. 5A to 5E views of a block diagram of implementation
  • FIG. 6 a perspective view of the housing according to the present invention.
  • Figure 1 there is shown the blade staining device L according to the invention.
  • the motor means 12 are advantageously of the type comprising a motor 18 with a shaft 20 for driving the enclosure 14.
  • the motor 18 is incrementally displaced from the step-by-step type, but can also be rotated at a relatively fast speed. high of the order of a few hundred revolutions per minute.
  • the enclosure 14 is shown in detail in FIG. 2. This enclosure is cylindrical and comprises means 22 for detachably fixing the casing 16.
  • These removable fastening means of the cowling 16 comprise a central axis 24 with an end 26 provided with a thread 28 for receiving a screw V fixing.
  • the thread is inverted with respect to the direction of rotation in order to prevent any unwanted loosening. It is also provided a washer R of recovery of clamping forces on the one hand and positioning blades on the other hand as will be explained further.
  • annular relief 30 defines a first chamber C1 said processing blades and a second chamber C2 said receiving treatment reagents, these two chambers being concentric.
  • This annular relief has the particularity of being of a height less than the distance separating the bottom of the enclosure from the cover leaving a passage 32.
  • the notion of inside and outside is considered from the center towards the periphery of the device for the rest of the description.
  • the inner wall 34 of this relief on the side of the first chamber C1, has a gentle slope of an angle ⁇ relative to the vertical, 15 ° to give an order of ideas. In an improved manner, the inner peripheral angle of this relief 30 is soft rounded leave also that is to say with a large radius.
  • the outer wall 36 of the relief 30, on the side of the second chamber C2 is also inclined, with an angle ⁇ , chosen with a value less than that of the angle ⁇ , close to the vertical, 10 ° to give a d-order. idea.
  • the peripheral angle between the relief 30 and said wall 36 is rounded leave but with a tight leave, small radius.
  • This first chamber comprises alveoli Al to An, in this case Al to A8, regularly distributed angularly. These cells are defined by identical radial walls. To give an order of ideas, each cell has a very small volume of the order of a few ml.
  • the chamber C2 is delimited by the outer wall 36 of the relief 30 and by an inner peripheral wall 38. This room has no cells.
  • This outer peripheral wall 38 is inclined inward with a negative angle ⁇ , substantially identical to the angle ⁇ , so that the inner 36 and outer 38 walls, defining the second chamber CZ, are substantially parallel.
  • the inner wall 38 is of a height equal to that of the axis 24 surmounted by its washer R so that the cowling 16 is flat on the one hand on the washer R itself resting on the axis 24 and on the other hand on the periphery of the enclosure 14.
  • the device according to the invention provides a housing 40, monolithic, shaped to the profile of the enclosure 14, removable and disposable, with a central hole for the passage of the barrel of the screw V.
  • This housing is advantageously made from a waterproof material such as a thermoplastic polymer sheet or biodegradable material, very low thickness, thermoformed and conjugated profile of that of the inner part of the enclosure manufacturing games and mechanical constraints of realization close.
  • a waterproof material such as a thermoplastic polymer sheet or biodegradable material
  • thermoforming is carried out with the wall 38C having a positive angle during manufacture because it is necessary to avoid any undercut that would prevent the removal of the casings thus formed out of the thermoforming cavity. Nevertheless, during the installation, this wall 38C of this casing 40 can be very slightly deformed inwards to come to stick to the profile of the enclosure and to press against the wall 38.
  • This housing comprises an improved 42C balcony, also come forming and intended to bear on the periphery of the enclosure.
  • a peripheral flange 44C ensures the centering of the cowling as will be indicated below when describing the implementation.
  • the housing 40 identically comprises cells AlC, A2C A8C.
  • the casing 40 also contributes to maintaining the blades L by their small lower side through fingerprints 46C, preferably also from thermoforming.
  • fingerprints 46C preferably also from thermoforming.
  • these indentations 46C show the presence of protruding ribs 48C, radially oriented so as to maintain said blades in its lower angles, within each cell, and limit the surface contact with each blade. In this way, each blade L undergoes coloration over most of its surface and the central examination area is perfectly colored, without any obstacle.
  • the cowling 16 is particular because it provides several functions, including protection against possible contamination from the outside and against any risk of projection during the movements.
  • This c ⁇ pot ⁇ ge 16 also ensures a mechanical retention of the blades L being provided with housings 50 for receiving the small upper side of each blade.
  • Each housing 50 may be deeper because the maintenance is on the marking zone 52 of the blade, sintered glass generally, which area is not examined and which undergoes no coloring.
  • each blade is immobilized radially and tangentially by its two small upper and lower sides in the cell Al .... A8 which receives it.
  • the cowling also has holes 54 for passage, able to pass cannulas 56 injection / sampling. These holes are arranged so as to allow at least access to each room Cl and C2 and access to each alveole Al .... A8 of the room Cl, to the right of each blade L.
  • the injection / sampling cannulas are successively distributed to ensure the different operations. Referring to FIG. 4, it is possible to reach, through the various holes, the two chambers C1 and C2 in particular, in order to inject reagents into the cells of the chamber C1 through the injection cannulas 58. , 60 and 62, for injecting hot air and drying through the cannula 64, for injecting a washing composition through the cannula 66 and for drawing spent reagents from the chamber C2 through the cannula 68.
  • the operation of the device according to the present invention is now described in detail, more particularly with reference to FIGS. 5A to 5E.
  • the operator has L blades to be stained. To make the device operational, it places in the open enclosure a new housing 40.
  • the operator positions one or more blades in this housing, depending on the capacity of the device and the needs.
  • Each blade bearing the sample to be stained is pre-positioned in part
  • the stepper motor has a hole 54 allowing access to an alveole A1 of the chamber C1, in front of the cannula 58, 60 or 62 to ensure the injection of a reagent, R1 for example, Figure 5A. It is noted that the distribution of the reagents is often provided by peristaltic pumps which we know that the flow is of low precision especially if one wishes a fast filling so with a strong section and at the same time an accurate distributed volume.
  • the angled slope £> facilitates the passage, constituting an evacuation ramp and the leaves having suitable roundings also ensure that the fluid net does not peel off the relief at the top and flows directly to the bottom of the chamber C2 .
  • Those skilled in the art will adapt the speed, the slopes and other leaves to obtain this result depending on the architecture chosen, the materials used as / ec their wettability coefficients and dimensions, without no inventive effort but only from known calculations and / or current tests.
  • the duration is very short because the reagent R1 is quickly evacuated, especially since the quantity is very small. Note that the blades being arranged with their plane radially oriented, do not offer resistance to flow.
  • the operator controls firstly the suction of the reagent R1 of the chamber CZ through the cannula 68 and secondly controls the injection of, for example, the reagent R3 into the alveoli Al. A8 of the chamber Cl. These two operations, although very fast, can be performed in masked time.
  • the stepper motor At the end of the complete cycle, the c ⁇ pot ⁇ ge is removed, the stained slides are removed for the examination phase.
  • the single-use casing 40 is removed and replaced by a new casing.
  • the device is ready for operation again without any trace of reagents and other pollutions from previous slides.
  • the device according to the invention therefore makes it possible to work with new micro-baths, without pollution, with very small volumes of reagents, therefore economic.
  • Several L blades can be processed simultaneously, which improves the performance of single micro bath devices for the treatment of a single blade.
  • the work is performed for a part in masked time and can be automated in a simple and programmable manner such as the coloring time or the transfer time of the chamber C1 to CZ 1 which makes the operation even faster. It is found that the reagent volume is self-regulating as indicated above, but also that the soaking level of the blades is determined by the height of the relief 30 and it corresponds exactly to the examination zone without contaminating the zone of frit or frosted glass that receives identification information from each blade. There are also situations in which, depending on the reagents and associated protocols, the staining time is very short.
  • draining cannulas such as the cannula 68, but this time arranged one to the right of each hole 54, which opens into an alveole Al .... A8 of the chamber C1 so as to it can be sucked very rapidly most of the reagent from each cell, the residue being removed by centrifugation immediately after removal of the emptying cannula concerned.
  • crankcase can be produced at compatible prices and the volumes of reagents are reduced.

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Abstract

L'objet de l'invention est un dispositif de coloration de lames L pour examen au microscope comprenant une embase incluant des moyens moteur, surmontée d'une enceinte (14) close par un capotage (16), apte à recevoir lesdites lames L et à être mise en rotation par lesdits moyens moteur, caractérisé en ce qu'il comprend un carter (40) amovible disposé dans l'enceinte (14).

Description

DISPOSITIF DE COLORATION DE LAMES POUR EXAMENS AU
MICROSCOPE
La présente invention concerne un dispositif de coloration de lames pour examens au microscope.
On connaît de nombreux dispositifs qui permettent de colorer les lames destinées à des examens au microscope. Un dispositif connu prévoit de pulvériser les colorants sur les lames portant l'échantillon à observer. Ce type de technique nécessite une pulvérisation micronisée.
Une autre technique consiste à réaliser une coloration par capillarité entre une platine et chaque lame mise en contact avec ladite platine. II existe aussi une technique dite d'écoulement qui consiste à faire écouler la composition colorante sur la lame mais on se heurte à une lenteur incompatible avec les besoins d'un laboratoire d'analyses et cette technique reste réservée à la recherche.
De plus lors de l'écoulement, la chambre est souillée par la composition écoulée. Une solution intéressante qui est mise en oeuvre dans de nombreux automates est le trempage des lames dans des bains avec des rinçages intermédiaires et des séchages adaptés.
Il peut subsister jusqu'à 8% à 10% de la composition du bain précédent lors du trempage dans le bain suivant, ce qui conduit à une dégradation rapide des qualités dudit bain.
La solution pour atteindre une qualité constante et optimale est le trempage mais en micro bain unitaire qui est empli du réactif colorant, du liquide de rinçage, puis vidé après chaque usage. Ceci n'évite pas une certaine contamination lors du passage d'un bain à l'autre mais il n'y a pas de pollution cumulée puisque chaque micro bain est jeté après mono usage. Les contenants nécessaires sont très spécifiques et le traitement implique donc un traitement lame par lame. Il n'est pas possible de traiter un lot de lames.
Le but de la présente invention est de proposer un dispositif qui assure la qualité de traitement en micro bain unitaire mais asec une possibilité de traitement de lots pour atteindre une cadence suffisante. Ce type de dispositif a pour vocation de répondre à l'attente des laboratoires d'analyses médicales de petite taille, des organismes de santé des pays en voie de développement qui sont faiblement équipés, ou qui permet de pallier un dépassement ponctuel des capacités de traitement des matériels automatisés des organismes qui en sont équipés, ou encore qui assure un remplacement très temporaire en cas d' intervention ou d'une maintenance sur ce matériel automatisé par exemple.
Ce dispositif recherché et apte à répondre à cette demande spécifique doit également requérir une maintenance extrêmement réduite, doit être d'un coût de fonctionnement très réduit, d'une grande fiabilité et d'un coût d'achat également réduit pour le rendre accessible au plus grand nombre. Le dispositif recherché doit aussi être ouvert c'est-à-dire utilisable as/ec des réactifs adaptés mais non dédiés ou contrôlés par ledit dispositif. Le dispositif selon la présente invention est maintenant décrit en regard des dessins annexés, selon un mode de réalisation schématique donné uniquement à titre d'exemple. Ces dessins comportent les figures qui suivent, représentant :
- figure 1 : une vue schématique du dispositif en perspective,
- figure 2 : une vue en coupe du dispositif, - figure 3 : une vue de détail d'un mode de réalisation du maintien des lames,
- figure 4 : une vue schématique de dessus d'un capotage selon la présente invention, - figures 5A à 5E: des vues d'un synoptique de mise en œuvre,
- figure 6 : une vue en perspective du carter selon la présente invention. Sur la figure 1, on a représenté le dispositif de coloration de lames L selon l'invention.
Les moyens 12 moteur sont avantageusement du type comprenant un moteur 18 avec un arbre 20 d'entraînement de l'enceinte 14. Le moteur 18 est à déplacement incrémental du type pas à pas mais susceptible également de permettre une mise en rotation à une vitesse relativement élevée de l'ordre de quelques centaines de tours par minute. L'enceinte 14 est représentée en détail sur la figure 2. Cette enceinte est cylindrique et comprend des moyens 22 de fixation amovible du capotage 16.
Ces moyens de fixation amovible du capotage 16 comprennent un axe 24 central avec une extrémité 26 munie d'un taraudage 28 destiné à recevoir une vis V de fixation. Avantageusement, le filetage est inversé par rapport au sens de rotation afin d'éviter tout desserrage intempestif. Il est également prévu une rondelle R de reprise des efforts de serrage d'une part et de positionnement des lames d'autre part comme il sera expliqué plus avant.
A la périphérie de cet axe 24, un relief 30 annulaire définit une première chambre Cl dite de traitement des lames et une seconde chambre C2 dite de réception des réactifs de traitement, ces deux chambres étant concentriques. Ce relief 30 annulaire présente la particularité d'être d'une hauteur inférieure à la distance séparant le fond de l'enceinte du couvercle laissant un passage 32. La notion d' intérieur et d'extérieur est considérée du centre vers la périphérie du dispositif pour toute la suite de la description. La paroi 34 intérieure de ce relief, du côté de la première chambre Cl, présente une pente douce d'un angle β par rapport à la verticale, 15° pour donner un ordre d'idées. De façon perfectionnée, l'angle périphérique intérieur de ce relief 30 est à congé arrondi doux également c'est-à-dire avec un rayon important. La paroi 36 extérieure du relief 30, du côté de la seconde chambre C2, est également inclinée, avec un angle θ, choisi avec une valeur inférieure à celle de l'angle β, proche de la verticale, 10° pour donner un ordre d' idée. L'angle périphérique entre le relief 30 et ladite paroi 36 est à congé arrondi mais avec un congé serré, de petit rayon. Cette première chambre comprend des alvéoles Al à An, en l'occurrence Al à A8, régulièrement réparties angulairement. Ces alvéoles sont définies par des parois radiales, identiques. Pour donner un ordre d'idées, chaque alvéoles dispose d'un volume très réduit de l'ordre de quelques ml. La chambre C2 est délimitée par la paroi extérieure 36 du relief 30 et par une paroi 38 périphérique intérieure. Cette chambre ne comporte pas d'alvéoles. Cette paroi 38 périphérique extérieure est inclinée vers l' intérieur avec un angle δ négatif, sensiblement identique à l'angle θ, si bien que les parois intérieure 36 et extérieure 38, définissant la seconde chambre CZ, sont sensiblement parallèles. La paroi 38 intérieure est d'une hauteur égale à celle de l'axe 24 surmonté de sa rondelle R de sorte que le capotage 16 porte à plat d'une part sur la rondelle R elle-même en appui sur l'axe 24 et d'autre part sur la périphérie de l'enceinte 14. Le dispositif selon l'invention prévoit un carter 40, monolithique, conformé au profil de l'enceinte 14, amovible et à usage unique, avec un trou central permettant le passage du fût de la vis V.
Ce carter est avantageusement réalisé à partir d'un matériau étanche tel qu'une feuille polymère thermoplastique ou en matériau biodégradable, de très faible épaisseur, thermoformée et de profil conjugué de celui de la partie intérieure de l'enceinte aux jeux de fabrication et aux contraintes mécaniques de réalisation près.
Les parties du carter correspondant à celles de l'enceinte seront référencées avec les mêmes nombres, auxquels sera associé un suffixe Ç.
On note que le thermoformage est réalisé avec la paroi 38C ayant un angle positif lors de la fabrication car il faut éviter toute contre dépouille qui interdirait le retrait des carters ainsi formés hors de l'empreinte de thermoformage. Néanmoins, lors de la mise en place, cette paroi 38C de ce carter 40 peut être très légèrement déformée vers l' intérieur pour venir coller au profil de l'enceinte et se plaquer sur la paroi 38.
Ce carter comporte de façon perfectionnée un balcon 42C, également venu de formage et destiné à venir en appui sur la périphérie de l'enceinte. Une aile périphérique 44C assure le centrage du capotage comme il sera indiqué ci-après lors de la description de la mise en oeuvre.
Le carter 40 comporte de façon identique des alvéoles AlC, A2C A8C.
Le carter 40 contribue également au maintien des lames L par leur petit côté inférieur grâce à des empreintes 46C, de façon préférentielle également venus de thermoformage. Ainsi sur la figure 3, on constate dans ces empreintes 46C la présence de nervures 48C en saillie, orientées radialement de façon à maintenir lesdites lames dans ses angles inférieurs, au sein de chaque alvéole, et limiter le contact surfacique avec chaque lame. De la sorte, chaque lame L subit une coloration sur la majeure partie de sa surface et la zone centrale d'examen est parfaitement colorée, sans aucun obstacle.
Le capotage 16 est particulier car il assure plusieurs fonctions, notamment une protection contre une éventuelle souillure de l'extérieur et contre tout risque de projection lors des mises en mouvements. Ce cαpotαge 16 assure également un maintien mécanique des lames L en étant muni de logements 50 destinés à recevoir le petit côté supérieur de chaque lame. Chaque logement 50 peut être plus profond car le maintien porte sur la zone de marquage 52 de la lame, en verre fritte généralement, zone qui n'est pas examinée et qui ne subit aucune coloration.
Ainsi, chaque lame est immobilisée radialement et tangentiellement par ses deux petits côtés inférieur et supérieur dans l'alvéole Al....A8 qui la reçoit. Le capotage comporte aussi des trous 54 de passage, aptes à laisser passer des canules 56 d'injection/prélèvement. Ces trous sont agencés de sorte à permettre au moins l'accès à chaque chambre Cl et C2 et l'accès à chaque alvéole Al....A8 de la chambre Cl, au droit de chaque lame L.
Les canules d'injection/prélèvement sont réparties successivement pour assurer les différentes opérations. Si l'on se reporte à la figure 4, on constate la possibilité d'atteindre à travers les différents trous les deux chambres Cl et C2 notamment, pour injecter dans les alvéoles de la chambre Cl des réactifs à travers les canules d' injection 58, 60 et 62, pour injecter de l'air chaud et assurer un séchage à travers la canule 64, pour injecter une composition de lavage à travers la canule 66 et pour aspirer les réactifs usagés de la chambre C2 à travers la canule 68.
Le fonctionnement du dispositif selon la présente invention est maintenant décrit en détail, plus particulièrement en regard des figures 5A à 5E. L'opérateur dispose de lames L à colorer. Pour rendre opérationnel le dispositif, il place dans l'enceinte ouverte un carter 40 neuf.
Une fois le carter en place, selon les besoins, l'opérateur positionne une ou plusieurs lames dans ce carter, en fonction de la capacité du dispositif et des besoins. Chaque lame portant l'échantillon à colorer est pré positionnée en partie
Inférieure entre les nervures 48.
Une fois les lames en place, l'opérateur met en place le capotage 16 asec la rondelle R et visse la vis V. Cette manipulation assure l' immobilisation des lames. Le dispositif étant prêt, soit manuellement, soit par commande à travers un automatisme simple, le moteur pas à pas présente un trou 54 permettant l'accès à une alvéole Al de la chambre Cl, devant la canule 58, 60 ou 62 pour assurer l'injection d'un réactif, Rl par exemple, figure 5A. On note que la distribution des réactifs est souvent assurée par des pompes péristaltiques dont on sait que le débit est d'une faible précision surtout si l'on souhaite un remplissage rapide donc asec une forte section et en même temps un volume distribué précis.
Pour résoudre ces contraintes antagonistes, on constate qu'il suffit dans le cas du présent dispositif de prévoir une distribution d'un volume en léger excès puisque de toutes les façons, le trop plein de réactif est évacué par-dessus le relief 30, de l'alvéole Al de la chambre Cl vers la chambre CZ1 voir figure 5A. Chaque lame L est soumise au trempage dans son micro bain de réactif durant le temps nécessaire de coloration, lié au type de réactif, voir figure 5B. Immédiatement après, le moteur 18 des moyens moteur 12 est mis en marche pour générer une rotation à vitesse élevée V du type 100 tours/min afin de provoquer le déplacement du réactif de chaque alvéole Al A8 de la chambre Cl vers la chambre C2, sous V effet de la force centrifuge, figure 5C.
La pente à angle £> facilite le passage, constituant une rampe d'évacuation et les congés ayant des arrondis adaptés assurent également que le filet fluide ne se décolle pas du relief en partie supérieure et s'écoule directement vers le fond de la chambre C2. L'homme de l'art adaptera la vitesse, les pentes et autres congés pour obtenir ce résultat en fonction de l'architecture retenue, des matériaux utilisés as/ec leurs coefficients de mouillabilité et des dimensions, sans aucun effort inventif mais uniquement à partir de calculs connus et/ou de tests courants.
La durée est très brève car le réactif Rl est rapidement évacué, surtout que la quantité est très réduite. On note que les lames étant disposées avec leur plan orienté radialement, n'offrent pas de résistance à l'écoulement.
De même, le réactif attaché par capillarité à chaque lame est également évacué par la force centrifuge tangentielle et ceci rapidement également car les microgouttelettes traversent la lame sur la largeur seulement. La quantité de réactif qui subsiste dans chaque alvéole Al....AQ de Cl est tout à fait négligeable.
Le réactif Rl usagé est maintenant transféré dans la chambre CZ. On note que durant la rotation, la contre-pente d'angle δ de la paroi extérieure de cette chambre CZ et sa hauteur ont interdit toute projection du réactif transféré hors de cette chambre CZ dont le volume est également très supérieur à celui des volumes unitaires cumulés des alvéoles.
L'opérateur, en fonction des besoins, commande d'une part l'aspiration du réactif Rl de la chambre CZ à travers la canule 68 et d'autre part commande l' injection par exemple du réactif R3 dans les alvéoles Al... A8 de la chambre Cl. Ces deux opérations, bien que très rapides, peuvent être effectuées en temps masqué.
Les lames sont soumises au temps de coloration, figure 5B et les cycles peuvent se poursuivre. Suivant les besoins, une phase de rinçage et/ou une phase de séchage est intercalée.
Les différents déplacements sont aisément réalisables et de façon très précise grâce au moteur pas à pas. En fin de cycle complet, le cαpotαge est retiré, les lames colorées sont retirées pour la phase d'examen.
Le carter 40 à usage unique est retiré et remplacé par une carter neuf. Le dispositif est de nouveau prêt à fonctionner sans aucune trace des réactifs et autres pollutions issues des lames précédentes.
Le dispositif selon l'invention permet donc de travailler avec des micro bains neufs, sans pollution, avec de très petits volumes de réactifs, donc économiques. Plusieurs lames L peuvent être traitées simultanément, ce qui améliore le rendement des dispositifs à micro bain unique pour le traitement d'une unique lame.
Le travail est effectué pour une partie en temps masqué et peut être automatisé de façon simple et programmable comme la durée de coloration ou le temps de transfert de la chambre Cl à CZ1 ce qui rend l'opération encore plus rapide. On constate que le volume de réactif est auto régulé comme indiqué ci-avant mais aussi que le niveau de trempage des lames est déterminé par la hauteur du relief 30 et celui-ci correspond exactement à la zone d'examen sans venir souiller la zone de verre fritte ou dépoli qui reçoit les informations d' identification de chaque lame. Il existe aussi des situations dans lesquelles, en fonction des réactifs et des protocoles associés, le temps de coloration est très court.
Dans ce cas, il est possible d'adjoindre des canules de vidange telles que la canule 68, mais disposées cette fois une au droit de chaque trou 54, qui débouche dans une alvéole Al....A8 de la chambre Cl de façon à pouvoir aspirer très rapidement la majeure partie du réactif de chaque alvéole, le reliquat étant évacué par centrifugation immédiatement après retrait de la canule de vidange concernée.
De ce fait, le trempage en bain est interrompu rapidement au moins pour la zone qui sera examinée. Néanmoins une canule ne pouvant retirer intégralement ce réactif, selon la présente invention, la centrifugation va éliminer la quasi-totalité de ce réactif, évitant la pollution du réactif suivant par le réactif précédent. On note également que le dispositif selon la présente invention évite le bouchage de tubulures ou de buses puisque les canules sont d'un diamètre suffisamment important.
De même, les réactifs restant sous forme liquide, sans pulvérisation, les souillures de l'embase et de l'environnement sont inexistantes. Un tel dispositif est tout à fait adapté, comme cela est recherché par une partie du marché, aux établissements de petite taille ou en substitution momentanée à d' installations importantes.
De même, les coûts d'exploitation se trouvent réduits car le carter peut être produit à des prix compatibles et les volumes de réactifs sont réduits.

Claims

REVENDICATIONS
1. Dispositif de coloration de lames L pour examen au microscope comprenant une embase (10) incluant des moyens (12) moteur, surmontée d'une enceinte (14) close par un capotage (16), apte à recevoir lesdites lames L et à être mise en rotation par lesdits moyens (12) moteur, caractérisé en ce qu'il comprend un carter (40) amovible disposé dans l'enceinte (14).
2. Dispositif de coloration de lames selon la revendication 1, caractérisé en ce que le carter (40) amovible est de profil conjugué de celui de l'enceinte.
3. Dispositif de coloration de lames selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'enceinte (14) comprend une première et une seconde chambres, Cl et C2, concentriques, séparées par un relief (30), de façon à pouvoir transférer le contenu de la première chambre Cl vers la seconde chambre C2 sous l'effet de la force centrifuge générée par la mise en rotation de cette enceinte par les moyens (12) moteur.
4. Dispositif de coloration de lames selon la revendication 3, caractérisé en ce que le relief (30) comprend une pente (34) intérieure avec une pente £> douce et une pente (36) extérieure avec une pente θ raide.
5 Dispositif de coloration de lames selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la chambre C2 comprend une paroi (38) périphérique extérieure en contrepente.
6. Dispositif de coloration de lames selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le carter (40), de profil conjugué de celui de l'enceinte (14), comprend des alvéoles (AlC....A8C) munies chacune d'une empreinte (46C) comprenant des nervures (48) en saillie, orientées radialement de façon à maintenir lesdites lames dans ses angles inférieurs et à limiter le contact surfacique avec chaque lame.
7. Dispositif de coloration de lames selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le capotage (16) de l'enceinte (14) comprend des logements (50) destinés à recevoir le petit côté supérieur de chaque lame de façon à assurer également un maintien mécanique des lames L
8. Dispositif de coloration de lames selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le capotage (16) de l'enceinte (14) comprend des trous (54) de passage, aptes à laisser passer des canules (56) d' injection/prélèvement associées audit capotage.
9. Dispositif de coloration de lames selon la revendication 8, caractérisé en ce que les canules (56) d' injection/prélèvement associées audit capotage comprennent au moins une canule (58,60,62) d'injection d'un réactif de coloration dans la chambre Cl et au moins une canule (68) d'aspiration.
10. Dispositif de coloration de lames selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le carter (40) amovible est du type à usage unique, réalisé en un matériau étanche.
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