CA2596450A1 - Procede et dispositif jetable pour la separation par centrifugation de sang - Google Patents

Abstract

Selon ce procédé de séparation par centrifugation d'un volume déterminé d'un liquide physiologique, notamment du sang, au stade initial du processus de centrifugation, on forme un écoulement dudit liquide avec une épaisseur voisine de la taille des plus grosses particules (L3) contenues dans ce liquide dans une proportion < 1% en volume, on ralentit ensuite le débit de ce liquide pour en augmenter l'épaisseur et amener lesdites plus grosses particules (L3) à la surface de la phase (L1) dudit liquide dont la masse volumique est la plus élevée la plus proche de l'axe de centrifugation, on ménage à l'extérieur de cette surface, un volume mort (32) de contenance sensiblement égale au volume desdites plus grosses particules (L3) et on évacue au moins ladite phase (L2) dont la masse volumique est la plus faible.

Description

PROCEDE ET DISPOSITIF JETABLE POUR LA SEPARATION PAR
CENTRIFUGATION DE SANG

La présente invention se rapporte à un procédé pour la séparation par centrifugation en continu de sang et à un dispositif jetable pour la séparation en continu par centri-fugation d'un volume déterminé de sang, comprenant une en-ceinte de centrifugation circulaire montée en rotation autour de son axe de révolution, un canal d'entrée pour le sang à centrifuger dont l'ouverture de distribution se situe à proximité du fond de ladite enceinte de centrifugation, un passage de sortie pour au moins le constituant séparé dudit sang présentant la masse volumique la plus faible, dont l'ouverture de collection se situe à proximité de l'extrémi-té de ladite enceinte opposée audit fond, ledit liquide for-mant un écoulement axial contre la paroi latérale circulaire de ladite enceinte entre lesdites ouvertures de distribution et de collection, laquelle se trouve dans une zone de con-centration dudit constituant séparé pour le retirer en con-tinu.
Le EP 0 257 755 et le EP 0 664 159 se rapportent tous deux à un bol de centrifugation pour plasmaphérèse du type susmentionné.
Lors de la séparation du sang à l'aide d'un dispositif du type de celui décrit dans le EP 0 257 755 ou dans le EP 0 664 159, on obtient essentiellement le plasma riche en pla-quettes (PRP) et les globules rouges concentrée (RBC) . Les leucocytes constituent une très faible proportion du sang complet, de l'ordre de 0,3% en volume contre 40% pour les RBC. Leur taille peut être importante, de l'ordre de 12 m, par rapport à celle des globules rouges qui est de l'ordre de 7 m, mais leur masse volumique pl= 1,08 est très peu

2 inférieure à celle des globules rouges %,= 1,095, en sorte qu'en sédimentation dynamique, leur vitesse de sédimentation est plus élevée que celle des RBC. De ce fait, dès le début de la centrifugation, elles sont précipitée rapidement vers la paroi de centrifugation de l'enceinte de centrifugation.
Compte tenu de la viscosité des RBC, de leur proportion et de la faible différence des masses volumiques respectives des leucocytes et des RBC, les leucocytes ont beaucoup de peine pour revenir à la surface de la couche de RBC au cours de la séparation des composants du sang par centrifugation, étant donné que les leucocytes restent le plus souvent pri-sonnières sous la couche de globules rouges.

C'est la raison pour laquelle, compte tenu de leur grande taille, les leucocytes sont séparées par filtration des RBC et du PRP après séparation de ces composants par centrifugation. Cette opération supplémentaire augmente donc le coût de l'opération de séparation du sang, le coût du dispositif jetable, ainsi que la perte de RBC dans le filtre à leucocytes.

Le but de la présente invention est de remédier, au moins partiellement à ces inconvénients.
A cet effet, la présente invention a tout d'abord pour objet un procédé de séparation par centrifugation d'un volu-me déterminé d'un liquide physiologique, notamment du sang, selon la revendication 1. Elle a aussi pour objet un dispo-sitif jetable pour la séparation par centrifugation d'un li-quide physiologique, notamment du sang selon la revendica-tion 3.

Le procédé et le dispositif selon la présente invention apportent une simplification importante des opérations de séparation de liquides physiologiques, notamment du sang en permettant d'effectuer la déleucocytation des composants sé-

3 parés au cours de l'opération de séparation par centrifuga-tion du liquide.
Avantageusement, les conduits d'alimentation et de sor-tie des composants séparés du dispositif selon l'invention sont fixes et les deux composants principaux RBC et PRP sor-tent du dispositif en continu.
De préférence, la face interne de la paroi latérale de l'enceinte de centrifugation comporte un segment annulaire s'évasant dans le sens de l'écoulement axial dudit liquide pour provoquer une accélération locale de cet écoulement et une réduction correspondante de l'épaisseur de la couche dudit liquide. Cette zone d'accélération de l'écoulement, provoquant une réduction d'épaisseur, a pour but de permet-tre aux leucocytes de masse volumique très légèrement infé-rieure à celle des globules rouges, mais de taille sensible-ment supérieure de se dégager de la masse de globules rou-ges, en sorte qu'après la zone de séparation, lorsque la vi-tesse d'écoulement diminue et que la couche de liquide aug-mente, les leucocytes se retrouvent à l'interface entre les globules rouges et le PRP. En outre, cette zone d'accéléra-tion permet aussi d'éjecter les plaquettes des globules rou-ges en cours de concentration, augmentant de ce fait, le rendement plaquettaire du PRP.
Les dessins annexés illustrent, schématiquement et à
titre d'exemple, une forme d'exécution du procédé de sépara-tion par centrifugation et du dispositif jetable pour la séparation d'un liquide physiologique, notamment du sang, objets de la présente invention.

La figure 1 est une vue en élévation de face d'un sépa-rateur centrifuge utilisant ce dispositif jetable pour la mise en oeuvre de ce procédé;
la figure 2 est une vue en perspective partielle de la figure 1;

-- __ ~

4 la figure 3 est une vue en coupe axiale du dispositif jetable des figures 1 et 2;
la figure 4 est une vue partielle, agrandie, de la figure 3;
la figure 5 est une vue en perspective d'un élément du dispositif des figures 1 et 2;
la figure 6 est une vue partielle, en coupe axiale, d'une variante du dispositif jetable selon la figure 3.
Le boîtier du séparateur centrifuge destiné à utiliser le dispositif selon la présente invention et illustré sché-matiquement par la figure 1 comporte deux enceintes allon-gées de centrifugation 1, 2 de forme tubulaire. La première enceinte tubulaire de centrifugation 1, objet de la présente invention, comporte un conduit d'alimentation 3 qui est con-necté à un élément axial fixe 4 d'entrée et de sortie de l'enceinte de centrifugation 1. Ce conduit d'alimentation 3 est relié à un dispositif de pompage 5 qui comporte deux pompes 6 et 7 déphasées de 180 l'une par rapport à l'autre pour assurer un débit continu d'un liquide physiologique, notamment de sang. Un détecteur d'air 10 est disposé le long du conduit d'alimentation 3.
Deux conduits de sortie 8, 9 sont connectés à l'élément axial fixe 4, pour permettre la sortie en continu de deux constituants de densités différentes du liquide physiologi-que. Dans le cas du sang, le conduit de sortie 8 est destiné
à la sortie des globules rouges concentrées RBC et le con-duit 9 à la sortie du plasma riche en plaquettes PRP. Ce conduit de sortie 9 comporte une valve 11 et se divise en deux branches 9a, 9b. La branche 9a sert à récupérer le con-centré plaquettaire et est contrôlée par une valve 12. Les valves 11 et 12 fonctionnent en logique OU exclusif soit pour faire passer le PRP de l'enceinte 1 à l'enceinte 2, soit pour vider le concentré plaquettaire de l'enceinte 2 vers la sortie 9a. La branche 9b sert à conduire le PRP vers un dispositif de pompage 13 comportant deux pompes 14 et 15 déphasées de 1800 et servant à assurer l'alimentation conti-nue de la seconde enceinte tubulaire de centrifugation 2 par

5 un conduit d'alimentation 16 connecté à un élément axial fixe 17 de la seconde enceinte tubulaire de centrifugation 2. Un conduit de sortie 24 pour le plasma pauvre en pla-quettes PPP est aussi connecté à l'élément axial fixe 17.
La figure 2 représente le mode d'entraînement et de guidage de l'enceinte sensiblement tubulaire de centrifuga-tion 1. L'ensemble des éléments d'entraînement et de guidage de l'enceinte tubulaire de centrifugation est situé sur un même support 18 relié au boîtier du séparateur centrifuge par une suspension anti-vibrations 19 de type silentbloc.'Le support 18 présente une paroi verticale dont l'extrémité
inférieure se termine par un bras horizontal de support 18a auquel est fixé un moteur d'entraînement 20. L'axe d'entraî-nement 20a de ce moteur 20 présente une forme polygonale, tel qu'un profil Torx", complémentaire d'un évidemment axial ménagé dans un petit élément tubulaire la qui fait saillie sous le fond de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1.
L'accouplement entre l'arbre d'entraînement du moteur 20 et l'élément tubulaire la doit être réalisé avec une très gran-de précision, pour assurer un guidage extrêmement précis de cette extrémité de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1.
L'extrémité supérieure de l'enceinte tubulaire de cen-trifugation 1 comporte un élément cylindrique de guidage axial lb de diamètre sensiblement plus faible que celui de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1, qui fait saillie sur sa face supérieure. La face cylindrique de cet élément lb est destinée à venir en prise avec trois galets de centrage 21. Un de ces galets 21 est solidaire d'un bras 22 dont une extrémité est montée pivotante sur une partie hori-

6 zontale supérieure du support 18. Ce bras 22 est soumis à la force d'un ressort (non représenté) ou tout autre moyen ap-proprié, destiné à lui communiquer un couple tendant à le faire tourner dans le sens des aiguilles de la montre, en sorte qu'il appuie de manière élastique contre la surface cylindrique de l'élément cylindrique de guidage axial lb. De ce fait, l'enceinte tubulaire de centrifugation peut être mise en place et enlevée du support 18 en faisant pivoter le bras 22 dans le sens contraire à celui des aiguilles de la montre. Un dispositif de verrouillage de la position angu-laire du bras 22, correspondant à celle dans laquelle son galet 21 appuie contre la surface cylindrique de l'élément cylindrique de guidage axial lb, est prévu pour éviter d'avoir une précontrainte trop forte du ressort associé au bras 22.
La portée entre l'élément cylindrique de guidage axial lb et l'extrémité supérieure de l'enceinte tubulaire 1 sert, en coopération avec les galets de centrage 21, de butée axiale, empêchant le désaccouplement entre l'axe d'entraîne-ment 20a du moteur 20 et l'évidemment axial de l'élément tubulaire la faisant saillie sous le fond le l'enceinte tubulaire 1.

Avantageusement, on pourrait aussi légèrement incliner les axes de rotation des galets de guidage 21 de quelques degrés angulaires, < 2 dans des plans respectifs tangents à

un cercle coaxial à l'axe de rotation de l'enceinte tubulai-re de centrifugation 1, passant par les axes de rotation respectifs des trois galets, dans un sens choisi, en fonc-tion du sens de rotation des galets, dans lequel ceux-ci in-duisent sur l'enceinte tubulaire 1 une force dirigée.vers le bas.
Un élément élastique de centrage et de fixation 23 de l'élément fixe axial 4 d'entrée et de sortie de l'enceinte

7 tubulaire de centrifugation est solidaire de la partie hori-zontale supérieure 18b du support 18. Cet élément 23 compor-te deux branches élastiques symétriques, de formes semi-cir-culaires et qui se terminent chacune par une partie recour-bée vers l'extérieur, destinée à transmettre à ces branches élastiques des forces permettant de les écarter l'une de l'autre, lors de l'introduction latérale de l'élément fixe axial 4 d'entrée et de sortie entre elles.
Comme on peut le constater, tous les éléments de posi-tionnement et de guidage des parties fixe et tournante de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1 sont solidaires du support 18, en sorte que la précision est fonction de la précision du support 18 lui-même, qui peut être fabriqué
avec des tolérances très faible, d'autant plus qu'il ne s'a-git pas d'une pièce compliquée à fabriquer. Les autre fac-teurs qui contribuent à garantir une grande précision sont la distance axiale relativement grande, due à la forme tubu-laire allongée de l'enceinte de centrifugation, entre le guidage inférieur et le guidage supérieur. Enfin, le fait de travailler sur une surface cylindrique de guidage lb de petit diamètre permet de réduire, d'une part les erreurs dues au retrait de la matière plastique injectée dans la-quelle les enceintes de centrifugation 1, 2 sont fabriquées, le retrait étant proportionnel à la dimension, contrairement à ce que l'on a dans le cas d'une pièce usinée et d'autre part les erreurs de mal rond.

Cette précision du guidage de l'enceinte tubulaire de centrifugation permet de former des écoulements de très fai-ble épaisseur sur la paroi latérale de cette enceinte de centrifugation 1. Ceci, permet donc d'avoir un faible volume de liquide séjournant dans l'enceinte, ce qui constitue un facteur apte à réduire le risque d'hémolyse et d'activation des plaquettes, ce risque étant certes fonction des forces WO 2006/081699 , PCT/CH2006/000061

8 appliquées, mais aussi du temps pendant lequel les compo-sants du sang sont soumis à ces forces. C'est ainsi que l'on ne peut pas fixer un seuil de force, puisque pour une force donnée, le risque d'hémolyse peut être pratiquement nul pour une certaine durée, alors qu'il peut être beaucoup plus im-portant avec la même force, mais pour une durée sensiblement plus longue.

De préférence, l'enceinte tubulaire de centrifugation 1 a un diamètre compris entre 10 et 50 mm, de préférence 30 mm et est entraînée à une vitesse de rotation comprise entre 5000 et 100'000 t/min, de sorte que la vitesse tangentielle à laquelle le liquide est soumis n'excède pas de préférence 26 m/s. La longueur axiale de l'enceinte tubulaire de cen-trifugation 1 est comprise avantageusement entre 40 et 200 mm, de préférence 90 mm. De tels paramètres permettent d'as-surer un débit de liquide compris entre 20 et 400 ml/min (notamment pour la dialyse), de préférence 100 ml/min, cor-respondant à un temps de séjour du liquide de 0,5 à 60 s, de préférence 5 s dans l'enceinte tubulaire.

Nous allons examiner maintenant plus en détail la con-ception de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1 destinée à être associée au séparateur centrifuge qui vient d'être décrit. On peut préciser ici que tout ce qui a été expliqué
dans la description qui précède, en ce qui concerne les di-mensions, l'entraînement, le positionnement et le guidage de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1 s'applique égale-ment à l'enceinte tubulaire de centrifugation 2. Par contre, cette dernière ne comportant qu'une sortie 24 pour le PPP, est intérieurement de conception plus simple que l'enceinte tubulaire 1.

Comme illustré par la figure 4, l'enceinte tubulaire 1 est réalisée à partir de deux parties, l'enceinte tubulaire le proprement dite et un élément de fermeture lf, qui se

9 PCT/CH2006/000061 terminent toutes deux par des collerettes annulaires d'as-semblage respectives lc, ld soudées l'une à l'autre. L'es-pace interne de la partie tubulaire le est délimité par la paroi essentiellement cylindrique de cette enceinte. A pro-ximité du fond de l'enceinte tubulaire le, sa paroi latérale cylindrique présente un segment conique lg (figure 3) dont le rôle sera expliqué par la suite.

L'élément fixe axial 4 d'entrée et de sortie pénètre dans cette enceinte tubulaire 1 par une ouverture axiale ménagée au centre de l'élément cylindrique de guidage axial lb. L'étanchéité entre cette ouverture axiale solidaire de l'enceinte de centrifugation 1 et l'élément fixe axial 4 est réalisée par un joint tubulaire 25 dont un segment est fixé
sur une portion cylindrique de cet élément fixe axial 4 d'entrée et de sortie, tandis qu'un autre segment est intro-duit dans un espace annulaire 26 de l'élément cylindrique de guidage axial lb et prend appui sur une surface convexe de la paroi tubulaire 27 séparant l'ouverture axiale traversant l'élément cylindrique de guidage axial lb de l'espace annu-laire 26. Cette étanchéité sert à préserver la stérilité du liquide contenu dans l'enceinte de centrifugation. Comme illustré sur cette figure 4, la partie du joint tubulaire 25 qui prend appui sur la paroi tubulaire 27 subit une légère déformation radiale pour assurer l'étanchéité.

On peut constater que le diamètre sur lequel frotte le joint tubulaire 25 est petit et est de préférence < 10 mm, en sorte que l'échauffement est limité à des valeurs accep-tables. On peut aussi constater, d'après les dimensions pos-sibles susmentionnées données pour l'enceinte tubulaire de centrifugation 1, que la distance axiale entre les moyens de centrage et de guidage supérieur 21 et inférieur 20a de cette enceinte 1, est supérieure à cinq fois le diamètre de l'élément cylindrique de guidage axial lb. Compte tenu de la - - _ _~

précision avec laquelle l'enceinte tubulaire 1 est guidée et la précision que peut atteindre le positionnement relatif de l'élément fixe axial 4 d'entrée et de sortie, le joint n'a pratiquement pas à compenser de défaut de concentricité de 5 l'enceinte tubulaire 1 en rotation, comme c'est le cas des dispositifs connus de l'état de la technique travaillant en écoulement semi-continu. Ceci contribue également à réduire l'échauffement du joint tubulaire tournant 25 et permet donc d'augmenter la vitesse de rotation de l'enceinte tubulaire

10 de centrifugation 1.

L'élément fixe axial 4 d'entrée et de sortie comporte une partie tubulaire 3a qui prolonge le conduit d'alimenta-tion 3 connecté à cet élément fixe axial 4 jusqu'à proximité
du fond de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1 pour y amener le sang ou un autre liquide physiologique à séparer.
Les conduits de sortie 8 et 9 connectés à l'élément fixe axial 4 d'entré et de sortie comportent chacun un seg-ment axial 8a, respectivement 9a qui pénètre dans l'enceinte tubulaire et débouche dans la partie de l'élément fixe axial 4 d'entrée et de sortie qui se situe au voisinage de l'ex-trémité supérieure de l'enceinte tubulaire de centrifugation 1. L'extrémité de collection de chacun de ces conduits de sortie 8a, 9a est formée par une fente circulaire. Chacune de ces fentes est ménagée entre deux disques 28, 29, respec-tivement 30, 31, solidaires de l'élément fixe axial 4 d'en-trée et de sortie.

Les diamètres de ces quatre disques 28 à 31 sont de préférence sensiblement identiques. Les ouvertures de col-lection circulaires ménagées entre les disques 28, 29, res-pectivement 30, 31 sont séparées l'une de l'autre par un barrage tubulaire 32, illustré séparément par la figure 5.
Il comporte une paroi tubulaire 32a concentrique et paral-lèle à la paroi latérale de l'enceinte de centrifugation le.

11 Comme on peut le constater en particulier sur la figure 4, l'écartement radial entre cette paroi tubulaire 32a et la paroi latérale de l'enceinte tubulaire le, ainsi que l''é-paisseur de cette paroi tubulaire 32a sont choisies pour que cette paroi tubulaire 32a se trouve entièrement dans l'é-paisseur formée par la phase L1 du liquide séparé par cen-trifugation présentant la masse volumique la plus élevée, correspondant aux RBC. L'extrémité de cette paroi tubulaire 32a la plus éloignée du fond de l'enceinte de centrifugation 1 présente une partie annulaire 32b se referme en direction de la partie fixe axiale 4, dans l'espace situé entre les disques 29 et 30.

Cette partie annulaire 32b présente un rebord annulaire interne 32c qui s'étend en direction du fond de l'enceinte de centrifugation 1. Le diamètre de ce rebord annulaire 32c est choisi pour se situer dans l'épaisseur formée par la phase L2 du liquide séparé par centrifugation présentant la masse volumique la plus faible correspondant au PRP.

De ce fait, les leucocytes qui se trouvent au voisinage de l'interface des phases L1, L2 du liquide séparé par cen-trifugation n'ont qu'une possibilité, celle de se déposer au fond de l'espace annulaire de stockage ménagé entre la paroi tubulaire 32a du barrage 32 et le rebord annulaire interne 32c. Ces leucocytes L3 s'accumulent en repoussant au fur et à mesure les RBC vers l'extrémité ouverte du barrage 32. Le volume de l'espace annulaire ainsi ménagé entre la paroi tu-bulaire 32a et le rebord annulaire 32c est choisi pour con-tenir au moins le volume de leucocytes contenu dans un volu-me déterminé de sang à centrifuger, par exemple 450 ml, ce qui est la contenance habituelle du sang pris sur un don-neur, ce volume étant évidemment légèrement variable d'un individu à un autre.

12 Comme on peut le constater, la portion cylindrique for-mée par le rebord annulaire 32c se situe vis-à-vis de l'ou-verture de collection circulaires ménagée entre les disques 30 et 31, isolant ainsi cette ouverture des phases de li-quide autres que la phase L2 destinée à être aspirée par cette ouverture de collection circulaire. Ceci évite donc les risques de re-mélange que pourraient provoquer les re-mous engendrés par cette aspiration.

Les deux ouvertures de collection ménagées respective-ment entre les disques 28, 29 et 30, 31 doivent être sépa-rées pour leur permettre d'avoir sensiblement les mêmes dia-mètres. A cet effet, le diamètre du bord interne de la par-tie 32f s'étendant radialement vers le centre de ladite en-ceinte tubulaire 1 doit être inférieur à ceux des disques 28 à 31.

La fixation du barrage 32 est obtenue par pincement d'une partie annulaire 32d entre les collerettes d'assembla-ge lc, ld. Cette partie annulaire 32d est reliée au barrage tubulaire proprement dit par des bras 32e (figure 5) qui mé-nagent entre eux des ouvertures pour le passage des RBC vers l'ouverture de collection circulaire ménagée entre les disques 28 et 29.

Comme on peut le constater, le diamètre de la paroi la-térale de l'élément de fermeture lf de l'enceinte tubulaire 1 est inférieur à celui de la paroi latérale de l'enceinte tubulaire proprement dite le, du fait que le barrage tubu-laire 32 est tout entier logé dans la partie le de cette en-ceinte 1. De ce fait on réduit le volume de RBC immobilisé
dans l'enceinte de centrifugation 1.

Le rôle de la partie conique lg (figure 3) de l'encein-te tubulaire 1 est de réduire localement l'épaisseur de l'é-coulement de liquide à centrifuger en accélérant son débit.
Grâce à cette zone tronconique lg où l'épaisseur de la cou-

13 che de liquide est très faible, son épaisseur étant voisine de la taille des leucocytes qui ont souvent de la peine à
émerger de la couche de globules rouges en raison de leur masse volumique très voisine de leur taille sensiblement plus grosse que celle des globules rouges et de la viscosité
de ces dernières, n'ont plus à traverser une épaisseur rela-tivement grande de globules rouges, en sorte que, lorsque l'épaisseur de la couche de liquide augmente une fois le liquide dans la zone tubulaire cylindrique, sous l'effet de la force centrifuge qui s'exerce sur l'écoulement tubulaire axial de liquide, les leucocytes restent à l'interface qui se forme entre les RBC et le PRP.

Cette partie conique lg a aussi pour effet d'éjecter les plaquettes des globules rouges en cours de concentra-tion, ce qui permet d'augmenter le rendement plaquettaire du PRP.

Lorsque cet écoulement avance en direction des ouver-tures de collection circulaires des conduits de sortie 8 et 9, entraîné par le PRP, l'interface entre les phases RBC et PRP pénètre à l'intérieur du barrage 32 où les leucocytes sont piégées dans la zone de stockage annulaire délimitée entre la paroi tubulaire 32a et le rebord annulaire 32c.

La figure 6 illustre une variante de la forme du fond de l'enceinte de centrifugation tubulaire 1. Le fond de cette enceinte l' est relié à la partie conique 1'g par une surface annulaire arrondie l'h. Le rôle de cette surface l'h est de réduire la transition entre l'écoulement radial du liquide et son écoulement axial, de manière à diminuer les risques d'hémolyse. A la limite, dans le cas d'une enceinte de centrifugation de grand diamètre, comme c'est le cas de la majorité d' entre elles, la surface arrondie l'h pourrait avoir un rayon suffisamment grand pour permettre de rempla-cer la surface conique l'g étant donné que cette surface ar-

14 rondie l'h permettrait d'atteindre le même but, à savoir l'accélération du débit et l'amincissement localisé de l'é-paisseur de la couche.

Il est à relever que dans tous les cas, l'amincissement de la couche de l'écoulement de liquide destiné à empêcher les leucocytes d'être emprisonnées sous la couches de RBC
nécessite un guidage suffisamment précis de l'enceinte de centrifugation, tel que le permet la conception de la formes d'exécution de l'enceinte décrite précédemment et sa varian-te. En effet, si la précision de ce guidage axial de l'en-ceinte était inférieure à l'épaisseur de la couche de li-quide amincie à une épaisseur voisine de la taille des leu-cocytes, le décentrage de l'enceinte de centrifugation ne permettrait alors pas d'obtenir une couche d'écoulement de liquide annulaire ou tubulaire amincie continue.

Claims (13)

1. Procédé de séparation en continu par centrifugation d'un volume déterminé de sang, caractérisé en ce que, au stade initial du processus de centrifugation, on choisit un débit et un angle d'écoulement axial dudit sang pour que son épaisseur soit voisine de la taille des leucocytes, on change ensuite l'angle d'écoulement axial pour ralentir son débit et augmenter son épaisseur pour amener les leucocytes à l'interface entre la phase (L1) du sang dont la masse volumique est la plus élevée et celle (L2) dont la masse volumique est la moins élevée, on ménage, au voisinage dudit interface, un volume mort ouvert dans le sens de l'écoule-ment axial, de contenance sensiblement égale au volume des-dites leucocytes et on évacue au moins la phase (L2) du sang dont la masse volumique est la plus faible.

2. Procédé selon la revendication 1, selon lequel on évacue aussi la phase (L1) du sang présentant la masse volu-mique la plus élevée.

3. Dispositif jetable pour la séparation en continu par centrifugation d'un volume déterminé de sang, comprenant une enceinte de centrifugation circulaire (1) montée en rotation autour de son axe de révolution, un canal d'entrée (3) pour le sang à centrifuger dont l'ouverture de distribution se situe à proximité du fond de ladite enceinte de centrifuga-tion (1), un passage de sortie (8, 9) pour au moins le cons-tituant séparé (L2) dudit sang présentant la masse volumique la plus faible, dont l'ouverture de collection (30, 31) se situe à proximité de l'extrémité de ladite enceinte (1) op-posée audit fond, ledit liquide formant un écoulement axial contre la paroi latérale circulaire de ladite enceinte (1) entre lesdites ouvertures de distribution et de collection, laquelle se trouve dans une zone de concentration dudit constituant séparé pour le retirer en continu, caractérisé
en ce que ladite enceinte (1) présente une paroi tubulaire (1e) et un barrage tubulaire (32a), concentrique à ladite paroi tubulaire (1e) et s'étendant entre cette paroi tubu-laire (1e) et ladite ouverture de collection circulaire (30-31) pour l'évacuation de la phase (L2) du sang séparé pré-sentant la masse volumique la plus faible et en ce qu'une poche annulaire de stockage (32c) ouverte vers le fond de cette enceinte, dont le diamètre du bord interne est supé-rieur à celui de ladite ouverture de collection circulaire (30-31) de ladite phase (L2) présentant la masse volumique la plus faible et dont le volume correspond sensiblement au volume de leucocytes dudit volume déterminé de sang, est formée à l'intérieur dudit barrage tubulaire (32a) pour recueillir les leucocytes (L3).

4. Dispositif selon la revendication 3, dans lequel la limite interne de ladite poche annulaire de stockage (32c) présente un rebord circulaire qui se situe autour de ladite ouverture de collection circulaire (30-31) de ladite phase (L2) présentant la masse volumique la plus faible.

5. Dispositif selon la revendication 3, dans lequel la longueur de ladite enceinte de centrifugation tubulaire (1) est supérieure à son diamètre.

6. Dispositif selon l'une des revendications 3 à 5, comprenant un élément axial fixe (4) d'entrée et de sortie autour de l'axe duquel ladite enceinte de centrifugation (1) en matière plastique est montée en rotation, un joint tour-nant (25) entre ledit élément axial fixe (4) et ladite en-ceinte de centrifugation (1) ledit élément axial fixe d'en-trée et de sortie (4) comportant un second passage de sortie (8) pour au moins un second des constituants séparés, dont l'ouverture de collection (28-29) se situe, par rapport à
l'ouverture de collection circulaire (30-31) de la phase (L2) du sang séparé présentant la masse volumique la plus faible, à une distance axiale s'étendant à l'opposé du fond de l'enceinte de centrifugation, les deux ouvertures de col-lection (28-29, 30-31) étant séparées l'une de l'autre par ledit barrage tubulaire (32a).

7. Dispositif selon l'une des revendications 3 à 6, dans lequel la face interne de la paroi latérale de ladite enceinte (1) comporte un segment annulaire (1g) s'évasant dans le sens de l'écoulement axial dudit liquide pour provo-quer une accélération locale de cet écoulement et une réduc-tion correspondante de l'épaisseur de la couche dudit liqui-de.

8. Dispositif selon la revendication 7, dans lequel ledit segment annulaire (1g) s'évasant dans le sens de l'é-coulement axial dudit liquide se situe au voisinage du fond de ladite enceinte.

9. Dispositif selon la revendication 6, dans lequel l'extrémité de ladite enceinte tubulaire de centrifugation (1) opposée à son fond comporte un resserrement cylindrique (1b) à travers lequel passe ledit élément axial fixe (4) et dans lequel ledit joint tournant (25) est disposé.

10. Dispositif selon la revendication 9, dans lequel la surface externe dudit resserrement cylindrique (lb) est des-tinée à venir en prise avec des premiers moyens de guidage dudit réceptacle, le fond de ladite enceinte tubulaire de centrifugation (1) présentant des moyens (la) pour venir en prise avec des seconds moyens de guidage, d'appui et d'en-traînement de cette enceinte tubulaire (1).

11. Dispositif selon l'une des revendications 3 à 10, dans lequel ledit conduit fixe de sortie (9) dont l'ouver-ture de collection (30, 31) se situe dans la zone de concen-tration d'au moins un des constituants séparés (L2) présen-tant la masse volumique la plus faible est relié à une se-conde enceinte de centrifugation (2).

12. Dispositif selon la revendication 6, dans lequel les ouvertures de collection (28-29; 30-31) desdits passages de sortie (8, 9) sont deux ouvertures circulaires de mêmes diamètres, le diamètre du bord interne (32f) de ladite par-tie dudit barrage s'étendant radialement vers le centre de ladite enceinte tubulaire (1) étant inférieur à ceux des-dites ouvertures de collection (28-29; 30-31).

13. Dispositif selon l'une des revendications précéden-tes, dans lequel le fond de ladite enceinte (1') est relié à
sa paroi latérale de centrifugation par une surface annulai-re arrondie (1' h).