WO2009090346A2 - Nouvelles molecules pour la stimulation des defenses naturelles des plantes, et leurs formulations - Google Patents

Nouvelles molecules pour la stimulation des defenses naturelles des plantes, et leurs formulations Download PDF

Info

Publication number
WO2009090346A2
WO2009090346A2 PCT/FR2008/001491 FR2008001491W WO2009090346A2 WO 2009090346 A2 WO2009090346 A2 WO 2009090346A2 FR 2008001491 W FR2008001491 W FR 2008001491W WO 2009090346 A2 WO2009090346 A2 WO 2009090346A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
soligel
ethoxylated
surfactant
composition
combination
Prior art date
Application number
PCT/FR2008/001491
Other languages
English (en)
Other versions
WO2009090346A3 (fr
Inventor
Camille Profizi
Laurence Grare
Cédric Ernenwein
Catherine Santaella
Wafa Achouak
Anthony Bresin
Original Assignee
Agro Industrie Recherches Et Developpements A.R.D.
Centre National De La Recherche Scientifique
Commissariat A L'energie Atomique C.E.A.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Agro Industrie Recherches Et Developpements A.R.D., Centre National De La Recherche Scientifique, Commissariat A L'energie Atomique C.E.A. filed Critical Agro Industrie Recherches Et Developpements A.R.D.
Publication of WO2009090346A2 publication Critical patent/WO2009090346A2/fr
Publication of WO2009090346A3 publication Critical patent/WO2009090346A3/fr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
    • A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
    • A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom

Definitions

  • the present invention relates to novel molecules for stimulating the natural defenses of plants, and their formulations.
  • the stimulation of the plant defense system is an alternative to chemical control in terms of crop protection. It is a question of using the natural mechanisms of elicitation of the defenses of the plants thus allowing the acquisition of a better resistance of the plants to the pathogens.
  • Plants have always been confronted with a great variety of aggressors (bacteria, fungi, nematodes, insects) and have therefore developed defense systems to resist them. Plants do not have mobile defense cells or adaptive immune system. Their defense is based on the innate immunity of each cell and on systemic signals that emanate from the sites of infection (Jones JDG, Dangl JL, 2006. The Plant Immune System, Nature, 444: 323-329).
  • a rapid cell death response is set up to limit the spread of the pathogen (Lamb C, Dixo RA, 1997. The Oxidative Burst in Plant Disease Resistance Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol 48: 251-275). This is a local response: at the aggressor's penetration site, the infected cells self-destruct. This hypersensitive reaction is consistent with biochemical reactions that contribute to the protection of the plant. There are different types of reactions:
  • ROS Reactive Oxygen Species these are oxygen peroxide (H 2 O 2 ), superoxide radical ( 0 O 2 " ) and hydroxyl radical ( 0 OH) (Lamb C, Dixon RA, 1997. The Oxidative Burst in Plant Disease Resistance Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol 48: 251-275);
  • PR Pieris-associated antimicrobial activity
  • van Loon LC 1997. Induced resistance in plant and the role of pathogenesis-related proteins European Journal of Plant Pathology 103: 753-765.
  • Plant Cell 10 1571-158
  • SAR Systemic Acquired Response ISR
  • JLM Soosaar et al. 2005. Mechanisms of plant resistance to viruses.
  • This reaction allows the plant to prepare itself to fight against any possible attack and can last several days or weeks.
  • the systemic response protects the plant during subsequent attack by a pathogen.
  • SAR acquired response
  • ISR systemic response induced
  • This systemic "protection” is therefore of particular agronomic interest since its artificial induction allows the plant to be in a latent defensive state and to react more quickly to pathogen attacks. They are effective under field growing conditions and provide a natural mechanism for biological control of plant pathologies, providing a means of limiting pesticide inputs into the fields (Heil M, Bostock RM, 2002. Induced Systemic Resistance (ISR) Ann Bot, 89 (5): 503-512.).
  • Polysaccharides are polymers made of monosaccharides also called carbohydrates or sugars. Homopolysaccharides which contain a single type of monosaccharide and heteropolysaccharides which are formed of different sugar units are distinguished. These structural distinctions may be accompanied by differences in the properties and functions of these compounds in the living world.
  • homopolysaccharides such as glycogen or starch
  • Heteropolysaccharides are mostly involved as extracellular support and as a template.
  • the cellular envelope which ensures the rigidity of the bacterial cells is formed of a layer of peptidoglycan, a heteropolymer, consisting of sugar chains linked by peptide bonds.
  • the extracellular space is occupied by heteropolysaccharides, such as hyaluronic acid in the joints, which form a matrix maintaining cohesion between the cells and which provide protection, shape and support to cells, tissues and organs.
  • Other heteropolysaccharides interact with proteins to form viscous and lubricating secretions (proteoglycans).
  • the homopolysaccharides are generally released during the attack of the cell by the pathogen and the hydrolysis of the plant cell wall (glycuronic compounds). These compounds will amplify the defense response implemented by the plant during the perception of the pathogen by the receptors.
  • the present invention aims to provide new elicitors of heteropolysaccharide types.
  • the present invention also aims to provide a novel method of stimulating the natural defenses of plants by the use of a heteropolysaccharide, optionally in combination with a surfactant, preferably from the family of alkyl polyglycosides.
  • the present invention relates to the use of a repeating unit compound of formula (I) below:
  • i 0 or 1
  • A represents a uronic sugar, in particular a glucuronic acid or mannuronic acid
  • B represents 1, 2 or 3 glucose units, at least one of the glucose units being optionally substituted, in particular with at least one galactose unit, where appropriate with at least one galactose unit optionally comprising a pyruvate group,
  • C represents a galactose unit or a 6-deoxy-2-epimer of galactose, such as 6-deoxy-L-talose, optionally substituted with 3-deoxy-D-manno-oct-2-ulosonic acid; and / or by at least one acetate group, the bond between group A and group B being of type 1 -> 4 the bond between group B and group C being of type 1 -> 1 or 1 -> 4, said abovementioned units A, B and C may optionally be substituted by at least one acetate group, as an elicitor of the natural defenses of plants against fungal and / or viral and / or bacterial pathogens.
  • the compounds of formula (I) are heteropolysaccharides.
  • Heteropolysaccharides are especially compounds secreted by organisms and which will potentially be perceived as elicitors by the plant cell.
  • the compounds of formula (I) are heteropolysaccharides of molecular weight from about 360 Da to about 1000 kDa, preferably from about 360 Da to about 500 kDa.
  • the compounds of formula (I) may also be present either in a deacetylated form with a molecular weight ranging from about 360 Da to about 500 kDa, or in a hydrolysed form with a molecular weight ranging from about 360 Da to about 70 kDa. or in a hydrolysed and deacetylated form with a molecular weight of from about 360 Da to about 70 kDa.
  • elicitor refers to a substance capable, under certain conditions, of stimulating mechanisms of natural defenses of plants.
  • elicitor is defined by Darvil and Albersheim (Phytoalexins and their elicitors - A Defense against Microbial Infection in Plants, Rev. Plant Physiol 1984, 35, 243-275) as a signal molecule in plants that induces biosynthesis of phytoalexins.
  • the term elicitor is now generalized to substances that, introduced at low concentrations in living beings, initiate or increase the biosynthesis of specific compounds (Radman R. et al., Elicitation of Plant and Microbial Cell Systems, Biotechnology and Applied Biochemistry, 37 (1) pp. 91-102).
  • an elicitor is a substance which, introduced at low concentrations in the plant, induces the biosynthetic pathways of defense compounds, allowing the plant to fight against a subsequent attack of a pathogen, without altering its growth.
  • an elicitor compound makes it possible to preserve the plants from the pathogens without causing a detrimental impact on the development of said plants, and therefore on the yield of biomass production.
  • plants refers to the plant as a whole including its root apparatus, vegetative apparatus, seeds, seeds and fruits.
  • vegetative apparatus a plant including its root apparatus, vegetative apparatus, seeds, seeds and fruits.
  • fruits a plant including its root apparatus, vegetative apparatus, seeds, seeds and fruits.
  • peas - protein crops
  • oilseeds sunflower, rapeseed
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (I) in which i is equal to 1.
  • the present invention also relates to the use as defined above of compounds of following formula (1-1): A-B-C
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (1-1), characterized in that C represents a galactose unit, said galactose unit being (possibly) optionally substituted with at least one group acetate.
  • the present invention also relates to the use as defined above of compounds of following formula (I-1): A-B-C wherein A represents a uronic sugar, B is as defined above and C represents a galactose.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (I-1), characterized in that B represents: a glucose unit which is unsubstituted by a galactose unit, said glucose unit being optionally substituted with at least one acetate group, or
  • Three glucose units at least one of these three units being optionally substituted by at least one galactose unit.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (I-1), characterized in that B represents a glucose unit unsubstituted by a galactose unit, said glucose unit being optionally substituted with at least one an acetate group.
  • the present invention relates to the use as defined above, characterized in that the repetitive unit of the compound is the following:
  • R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 6 , R 7 and R 8 represent, independently of one another, H or an acyl group comprising from 1 to 6 carbon atoms, in particular a group acetyl.
  • the polysaccharide unit of formula (II) mentioned above consists of units comprising 3 sugars, including 2 neutral sugars and 1 acidic sugar, namely mannuronic acid, glucose and galactose.
  • the present invention also relates to the use of a compound as defined above, in which at least 12.5% of all the groups R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 and R 6 , R 7 and R 8 represents an acetyl group, and in particular wherein at least 12.5% of all of R 1, R 2, R 3, R 4, R 5, R k 6, R 7 and R 8 is an acetyl group.
  • the present invention also relates to the use of a compound as defined above, wherein at least from about 43% to about 56%, and preferably from about 43.75% to about 56.25% of all the groups R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 6 , R 7 and R 5 represent an acetyl group.
  • the compounds as defined above can be in the form of a double helix.
  • the present invention also relates to the use of a compound as defined above, in which at least 10%, and preferably at least 12.5%, of all the groups R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 6 , R 7 and R 8 represents a hydrogen atom.
  • the present invention also relates to the use of a compound as defined above, in which at least 60% of all the groups R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 6 and R 7 and R 8 represents a hydrogen atom.
  • This compound corresponds to the deacetylated form of the compound of the invention.
  • the present invention also relates to the use as defined above, characterized in that the repetitive unit of the compound is the following:
  • This repeating unit corresponds to a compound of formula (I) in which A represents mannuronic acid, B represents glucose and C represents galactose.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (I-1), characterized in that B represents three glucose units, at least one of these three units being optionally substituted by at least one unit galactose.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (1-1), characterized in that B represents three glucose units, at least of these three units being optionally substituted by at least one galactose unit and characterized in that the glucose units are connected to one another by means of type 1 - ⁇ 4 and / or 1 - ⁇ 6 bonds.
  • a single glucose unit is substituted by at least one galactose unit.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (1-1), characterized in that B represents the following reason:
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (I-1), characterized in that B represents the following reason:
  • the present invention relates to the use as defined above, characterized in that the repetitive unit of the compound is the following:
  • Soligel ® can be hydrolyzed with or without acetate groups. According to one particular embodiment, the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (I) in which i is equal to 0.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (1-2), characterized in that B represents two glucose units.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (1-2). characterized in that B represents two glucose units, and in that the glucose units are connected to each other by a 1 - ⁇ 4 type bond.
  • the present invention relates to the use as defined above of compounds of formula (1-2), characterized in that C represents 6-deoxy-L-talose, substituted by 3-deoxy-D-manno acid. -oct-2-ulosonic and by at least one acetate group.
  • the present invention also relates to the use as defined above of a compound with a repeating unit of the following formula: ⁇ -K ⁇ 2 i. 3 ⁇
  • ⁇ -L-6dTalp represents 6-deoxy-L-talose and ⁇ Kdop represents 3-deoxy-D-manno-oct-2-ulosonic acid.
  • the present invention also relates to the use as defined above, characterized in that the elicitor is used in combination with a surfactant.
  • the present invention also relates to the use as defined above, characterized in that the elicitor is used in combination with at least one surfactant, and with at least one phytosanitary molecule especially chosen from the following compounds: a fungicide, an insecticide, a herbicide and a growth regulator or stimulator.
  • a fungicide is a phytosanitary product designed exclusively to kill or limit the development of plant parasitic fungi 2 main families of fungicides are contact fungicides that act on enzymatic mechanisms involved in the production of plant energy and fungicides. systemic fungicides that act on biosynthetic phenomena and are therefore more specific).
  • An insecticide is an active substance or a preparation with the property of killing insects.
  • the main chemical families of insecticides are organophosphorus compounds, carbamates, synthetic pyrethroids, organochlorines and benzoyl ureas.
  • the modes of action of insecticides may be based on disturbance of the nervous system, cellular respiration, cuticle placement, or moulting disturbance.
  • insecticide covers pesticides that are toxic to insects and related arthropods (mites). It groups products destroying adult or larval forms or eggs.
  • translaminar There are products acting by contact and systemic products, plus products in intermediate mode, called translaminar.
  • a herbicide or Phytocide is an active substance or a preparation with the property of killing plants.
  • weed killer is a synonym for herbicide.
  • herbicides are used to control weeds, or weeds, intended to destroy or limit the growth of plants, whether herbaceous or woody. They can be used, according to their mode of action, in pre or post-emergence.
  • a growth regulator or stimulator is an active substance or a preparation which, applied to all or part of a plant, acts on the physiological mechanisms, in particular cell differentiation or elongation, without harming the plant of a point agronomic view.
  • Growth regulators consist of growth hormones such as auxin and gibberellin contained in growth substances that act primarily on cell division. They are used in agriculture to fight against the phenomena of elongation and lodging, in order to strengthen the stems of crops (cereals, cruciferous, vines %) which allows the crop to better withstand the damage caused by inclement weather.
  • growth hormones such as auxin and gibberellin contained in growth substances that act primarily on cell division. They are used in agriculture to fight against the phenomena of elongation and lodging, in order to strengthen the stems of crops (cereals, cruciferous, vines %) which allows the crop to better withstand the damage caused by inclement weather.
  • Phyteurop's Arvest or Brief C Syngenta's Moddus ...
  • the present invention also relates to the use as defined above, characterized in that the mass ratio between the surfactant and the compound of formula (I) varies from about 1 to 10,000, especially 1 to 600.
  • the present invention also relates to the use as defined above, characterized in that the surfactant is chosen from:
  • - wetting surfactants ionic or nonionic, especially those of the family of organosilicone (as Sylgard ® from Dow Corning, Zipper ® and Breakthru ® S240 Goldschmidt Chemical), those of the family organofluorine (such as DuPont Zonyl), the alkyl polyglycosides or APGs (such as Agnique ® PG 8105 or PG 8107-U from Cognis), C8 to C18 ethoxylated alcohols, C8 to C18 ethoxylated alkylphenols (such as Triton ® X144).
  • organosilicone as Sylgard ® from Dow Corning, Zipper ® and Breakthru ® S240 Goldschmidt Chemical
  • the alkyl polyglycosides or APGs such as Agnique ® PG 8105 or PG 8107-U from Cognis
  • C8 to C18 ethoxylated alcohols C8 to C18 ethoxy
  • ICI ethoxylated fatty amines
  • ethoxylated tristyryl phenol sucroesters
  • C8 to C18 alcohol sulphates alkyl benzene, toluene or xylene sulphonates, sodium sulphates and the like.
  • ethoxylated C 8 to C 18 alkylphenol, and ethoxylated C 8 to C 18 alkylphenol phosphonates
  • emulsifying surfactants such as APG containing 14 to 22 carbon atoms on the alkyl chain (as Xyliance ® Soliance), ethoxylated fatty alcohols and ethoxylated fatty acids (such as Alkamuls A Rhodia), castor oils ethoxylates (such as Rhodia's Alkamul 14R), ethoxylated or unethoxylated sorbitan esters (such as those provided by Oléon), ethoxylated and propoxylated alkylaryls, ethoxy-propoxylated copolymers, alkylaryl polyoxyethylene glycol phosphates, alkylaryls sulfonates and sulfated lignins.
  • APG containing 14 to 22 carbon atoms on the alkyl chain
  • ethoxylated fatty alcohols and ethoxylated fatty acids such as Alkamuls A Rhodia
  • castor oils ethoxylates such as Rh
  • the present invention also relates to the use as defined above, characterized in that the elicitor is used in combination with an additional compound or a mixture of additional compounds, said additional compound being chosen from:
  • an organic solvent or an oil chosen from: vegetable oils, esters of vegetable fatty acids such as rapeseed methyl ester or methyl oleate, mineral oils such as paraffin oils or white spirit, aromatic oils of petroleum origin, xylene, alcohols, ketones, DMF, N-methyl pyrrolidone, N-octyl pyrrolidone and chlorinated derivatives such as monochlorobenzene, and / or a polymer or mixture of polymers chosen from: polydimethylsiloxane-alkylated oxide copolymers, alkylated phenyl-ethoxylated / propoxylated block polymers, alkylated polyvinylpyrrolidones, xanthan gums, carboxymethylcelluloses and alginates, and / or or or or
  • a preservative chosen from: methyl, ethyl, propyl and butyl esters of p-hydroxybenzoic acid, sodium benzoate, 2-bromo-2-nitropropane-l, 3-diol (such as Bronopol ® of BASF), isothiazolones (such as Rohm and Haas Kathon ® CG) or any chemical agent which prevents the proliferation of bacteria or molds, and / or
  • an antifoam chosen from polysiloxanes SE2, SE9 or SE25 (from WACKER).
  • the present invention also relates to the use of a composition
  • a composition comprising:
  • composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor varies from about 1 to 10,000, in particular from about 1 to 600.
  • the present invention also relates to the use of a composition
  • a composition comprising:
  • At least one phytosanitary molecule especially chosen from the following compounds: a fungicide, an insecticide, a herbicide and a growth regulator or stimulator.
  • said composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor ranges from about 1 to 10,000, especially from about 1 to 600.
  • the elicitor of the invention may be applied alone or in combination with a phytosanitary molecule, such as a fungicide to complete its action.
  • the phytosanitary molecules are preferably used at doses ranging from about 1 g to about 5 kg per hectare of active ingredients (elicitor s: 0.2 g to 5 kg / ha).
  • the present invention relates to the use of a composition as defined above characterized in that the surfactant is chosen from:
  • - wetting surfactants especially those of the family of organosilicone (as Sylgard ® from Dow Corning, Zipper ® and Breakthru ® S240 Goldschmidt Chemical), those of the family organofluorine (such as Zonyl ® Dupont) alkyl polyglycosides or APGs (such as Agnique ® PG 8105 or PG 8107-U from Cognis), C8 to C18 ethoxylated alcohols, C8 to C16 ethoxylated alkyl phenols (such as Triton ® X141 from ICI), ethoxylated fatty amines (such as Agnique ® TAM 15 from Cognis), ethoxylated tristyryl phenol, sucroesters, C8 to C18 alcohol sulphates, alkyl benzene, toluene or xylene sulphonates, sodium sulphates and the like.
  • organosilicone as Sylgard
  • emulsifying surfactants such as APG containing 14 to 22 carbon atoms on the alkyl chain (as Xyliance ® Soliance), ethoxylated fatty alcohols and ethoxylated fatty acids (such as Alkamuls A Rhodia), castor oils ethoxylates (such as Rhodia's Alkamul 14R), ethoxylated or unethoxylated sorbitan esters (such as those provided by Oléon), ethoxylated and propoxylated alkylaryls, ethoxy-propoxylated copolymers, alkylaryl polyoxyethylene glycol phosphates, alkylaryls sulfonates and sulfated lignins.
  • APG containing 14 to 22 carbon atoms on the alkyl chain
  • ethoxylated fatty alcohols and ethoxylated fatty acids such as Alkamuls A Rhodia
  • castor oils ethoxylates such as Rh
  • wetting surfactant is meant a surfactant compound to facilitate the wetting of a solid with a liquid, that is to say, spreading of the liquid on the solid. By decreasing the surface tension, the wetting surfactants allow a greater spread of the liquid.
  • emulsifying surfactant is meant a surfactant compound to facilitate the mixing of two immiscible liquids.
  • One of the liquids is dispersed in the second liquid in the form of small droplets
  • foaming surfactant is meant a surfactant compound to facilitate the formation of foam, that is to say the dispersion of a large volume of gas in a small volume of liquid. This type of surfactant is adsorbed at the water-air interface.
  • the compositions containing the elicitor of the invention will contain a wetting agent (or surfactant) chosen from alkyl polyglycosides (or APG).
  • APGs will be preferred because they considerably increase the wetting power of the preparations, that is to say that they increase the retention of phytosanitary slurries on the leaves of the treated plants and thereby increase the exchange surface between the sprayed drop and the cuticular area and thus promote the penetration of assets to the cells of the plant.
  • the wetting character of the APG is referenced for example by US Pat. Nos. 4,888,325 and 5,385,750.
  • the APG are derived from renewable substances and are completely biodegradable and form with the elicitor of the present application environmentally attractive preparations.
  • the APGs have the general formula R (OG) n in which R is a linear or branched aliphatic radical, with or without unsaturation (s), containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 4 to 18 carbon atoms and from more preferably from 5 to 14 carbon atoms.
  • G represents the same or different radicals of oses chosen preferably from hexoses and pentoses, such as glucose, fructose, mannose, galactose, sorbose, as well as ribose, xylose, Farabinose, xylulose.
  • O represents an oxygen atom
  • n represents the degree of polymerization or Dp giving the average number of saccharide units bonded to the R part (n is generally between 1 and 18, preferably between 1 and 5 and more preferably between 1 and 3).
  • the APGs may be prepared according to US Pat. No. 3,219,656 and preferably according to the patents FR 2 723 858 and FR 2 744 648 in the name of the applicant.
  • the emulsifiers useful for the preparations of the invention will for example those prepared according to patents FR 2 789 330, FR 2 767 069 and FR 2 869 242 of the applicant.
  • At least one polymer or mixture of polymers chosen from: polydimethylsiloxane-alkylated oxide copolymers, phenyl block polymers, ethoxylated / propoxylated alkyls, alkylated polyvinylpyrrolidones, xanthan gums, carboxymethylcelluloses and alginates, and / or
  • At least one preserving agent chosen from: methyl, ethyl, propyl and butyl esters of p-hydroxybenzoic acid, sodium benzoate, 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol (such as Bronopol ® from BASF) 5 isothiazolones (such as Rohm and Haas Kathon ® CG) or any chemical agent which prevents the proliferation of bacteria or molds, and / or
  • At least one antifoam chosen from polysiloxanes SE2, SE9 or SE25 (from WACKER).
  • Formula 1 Soligel hydrolysis deacetylated (Elacaps) 7g / L + agrisurfactant S810 (ARD) 128 g / L + Bronopol (Proctetol BN, BASF) 0.14 g / L
  • Formula 2 Deacetylated hydrolysis soligel (Elacaps) 60g / L + Agrisurfactant S810 (ARD) 25.6g / L + Bronopol (Proctetol BN, BASF) 0.14g / L
  • the present invention notably comprises the use of a composition comprising a combination of 2, 3, 4, 5 or 6 polysaccharides selected from:
  • a composition comprising a combination of Soligel and of deacetylated Soligel, or a composition comprising a combination of Soligel and Soligel hydrolysis, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel and
  • Soligel hydrolysis or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel and Elacaps, or a composition comprising a combination of Soligel hydrolysis and Elacaps, or a composition comprising a combination of Soligel and MWA, or a composition comprising a combination of Soligel and ALV104, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel and MWA, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel and ALV104 or a composition comprising a combination of hydrolyzed Soligel and MWA, or a composition comprising a combination of hydrolyzed Soligel and ALV104, or a composition comprising a combination of Elacaps and MWA, or a composition comprising a combination of Elacaps and ALV104, or a composition comprising a combination of MWA and ALV104, or a composition comprising a combination of Soligel, Deacetylated Soligel and Sol
  • compositions comprising a combination of Soligel, ALV104 and MWA, or a composition comprising a combination of Deacetylated Soligel, Soligel Hydrolysis and Elacaps, or a composition comprising a combination of Deacetylated Soligel, Soligel Hydrolysis and MWA.
  • compositions comprising a combination of deacetylated Soligel, hydrolyzed Soligel and ALV104, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel, Elacaps and MWA, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel, Elacaps and ALV104, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel, MWA and ALV104, or a composition comprising a combination of Soligel hydrolysis, Elacaps and MWA, or a composition comprising a combination of hydrolyzed Soligel, Elacaps and ALV104, or a composition comprising a combination of Soligel hydrolysis, MWA and ALV104, or a composition comprising a combination of Elacaps, of MWA and ALV104, or a composition comprising a combination of Soligel, Deacetylated Soligel, Soligel Hydrolysis and Elacaps, or a composition comprising a
  • the present invention notably comprises the use of a composition comprising:
  • a surfactant as defined above, such as a wetting, emulsifying or foaming surfactant.
  • a composition comprising a combination of Soligel, of deacetylated Soligel and a surfactant, or a composition comprising a combination of Soligel, Soligel hydrolysis and a surfactant, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel, hydrolyzed Soligel and a surfactant, or a composition comprising a combination of deacetylated Soligel, Elacaps and a surfactant, or a composition comprising a combination of hydrolyzed Soligel, of Elacaps and a surfactant, or a composition comprising a combination of Soligel, MWA and a surfactant, or a composition comprising a combination of Soligel, ALV104 and a surfactant, not
  • a composition comprising Soligel, Elacaps and a surfactant is used.
  • the present invention relates to the use of a composition as defined above, comprising:
  • At least one wetting surfactant said composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor varies from approximately 1 to 10,000, in particular approximately 1 to 600.
  • the present invention relates to the use of a composition as defined above, comprising:
  • composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor varies from about 1 to 10,000, in particular from about 1 to 600.
  • the present invention relates to the use of a composition as defined above, comprising:
  • At least one emulsifying surfactant chosen from ethoxylated or caprylic ethoxylated capric acid mono- or oligoglyceride, said composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor varies from approximately 1 to 10,000, in particular about 1 to 600.
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising:
  • composition being characterized in that the mass ratio between the wetting surfactant and the elicitor varies from approximately 1 to 600.
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising:
  • At least one emulsifying surfactant provided that said emulsifying surfactant is different from ethoxylated or ethoxylated capric acid or ethoxylated capric acid or oligoglyceride, said composition being characterized in that the mass ratio between the emulsifying surfactant and the elicitor ranges from about 1 to 600.
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising:
  • At least one phytosanitary molecule chosen in particular from the following compounds: a fungicide, an insecticide, a herbicide and a growth regulator or stimulator, said composition being characterized in that the mass ratio between the wetting surfactant and the elicitor varies. from about 1 to 600.
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising:
  • At least one emulsifying surfactant provided that said emulsifying surfactant is different from ethoxylated or caprylic ethoxylated capric acid mono- or oligoglyceride, and
  • At least one phytosanitary molecule chosen in particular from the following compounds: a fungicide, an insecticide, a herbicide and a growth regulator or stimulator, said composition being characterized in that the mass ratio between the emulsifying surfactant and the elicitor varies. from about 1 to 600.
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising a repeating unit elicitor of formula (I), a surfactant and a phytosanitary molecule as defined above, further comprising:
  • At least one polymer or mixture of polymers chosen from: polydimethylsiloxane-alkylated oxide copolymers, phenyl block polymers, ethoxylated / propoxylated alkyls, alkylated polyvinylpyrrolidones, xanthan gums, carboxymethylcelluloses and alginates, and / or
  • At least one preserving agent chosen from: methyl, ethyl, propyl and butyl esters of p-hydroxybenzoic acid, sodium benzoate, 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol (such as Bronopol ® from BASF), isothiazolones (such as Rohm and Haas' KATHON ® CG) or any chemical agent that prevents bacterial growth or mold, and / or
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising a repeating unit elicitor of formula (I), a surfactant and a phytosanitary molecule as defined above, further comprising:
  • At least one preserving agent chosen from: methyl, ethyl, propyl and butyl esters of p-hydroxybenzoic acid, sodium benzoate, 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol (such as Bronopol ® from BASF), isothiazolones (such as Rohm and Haas' KATHON ® CG) or any chemical agent that prevents bacterial growth or mold, and / or
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising a combination of 2, 3, 4, 5 or 6 polysaccharides selected from Soligel, Deacetylated Soligel, Soligel hydrolyzed, Soligel hydrolyzed and deacetylated (this compound is also called Elacaps), the compounds of formula (1-2) as defined above, and in particular the compound of formula (1-2), characterized in that C represents 6-deoxy-L-talose, substituted by 3-deoxy acid -D-manno-oct-2-ulosonic and by at least one acetate group, this compound is also called MWA, the compound of formula (I) in which A represents mannuronic acid, B represents glucose and C represents galactose this compound is also named ALV 104.
  • compositions of the invention include: a combination of Soligel and deacetylated Soligel, or a combination of Soligel and Soligel hydrolysis, or a combination of deacetylated Soligel and Soligel hydrolysis, or a combination of deacetylated Soligel and Elacaps, or a combination of Soligel Hydrolysis and Elacaps, or a combination of Soligel and MWA, or a combination of Soligel and ALV104, or a combination of Deacetylated Soligel and MWA, or a combination of Deacetylated Soligel and ALV104 or a combination of hydrolyzed Soligel and MWA, or a combination of Soligel hydrolysis and ALV104, or a combination of Elacaps and MWA, or a combination of Elacaps and ALV104, or a combination of MWA and ALV104, or a combination of Soligel, Deacetylated Soligel and Soligel Hydrolysis, or
  • MWA or a combination of Deacetylated Soligel, Soligel Hydrolysis, Elacaps and ALV104, or a combination of Deacetylated Soligel, Soligel Hydrolysis, MWA and ALV104, or a combination of Deacetylated Soligel, Elacaps, of MWA and ALV104, or a combination of Soligel hydrolysis, Elacaps, MWA and ALV104, or a combination of deacetylated Soligel, Soligel hydrolysis, Elacaps,
  • MWA and ALV104 or a combination of Soligel, Soligel Hydrolysis, Elacaps, MWA and ALV104, ⁇
  • Soligel and Elacaps are used.
  • the present invention notably comprises a composition comprising:
  • a surfactant as defined above, such as a wetting, emulsifying or foaming surfactant.
  • compositions of the invention include: a combination of Soligel, deacetylated Soligel and a surfactant, or a combination of Soligel, Soligel hydrolysis and a surfactant, or a combination of deacetylated Soligel, Soligel hydrolysis and a surfactant, or a combination of deacetylated Soligel, Elacaps and a surfactant, or a combination of hydrolyzed Soligel, Elacaps and a surfactant, or a combination of Soligel, MWA and a surfactant, or a combination of Soligel, ALV104 and a surfactant, or combination of deacetylated Soligel, MWA and a surfactant, or a combination of deacetylated Soligel, ALV104 and a surfactant, or a combination of Soligel hydrolysis, MWA and a surfactant, or a combination thereof hydrolyzed Soligel, ALV104 and a surfact
  • surfactant or a combination of deacetylated Soligel, Elacaps, MWA and a surfactant, or a combination of deacetylated Soligel, Elacaps, ALV104 and a surfactant, or a combination of deacetylated Soligel, MWA , ALV104 and a surfactant, or a combination of Soligel hydrolysis, Elacaps, MWA and a surfactant, or a combination of Soligel hydrolysis, Elacaps, ALV104 and an agent.
  • surfactant or a combination of Soligel hydrolyzed, MWA, ALV104 and a surfactant, or a combination of Elacaps, MWA, ALV104 and a surfactant, or a combination of Soligel, Soligel deacetylated, Soligel hydrolyzed, Elacaps and a surfactant, or a combination of Soligel, Deacetylated Soligel, Soligel hydrolyzed, MWA and a surfactant, or a combination of Soligel, Deacetylated Soligel, Soligel hydrolysis, ALV104 and a surfactant, or a combination of Soligel, Soligel desacety elacaps, MWA and a surfactant, or a combination of Soligel, deacetylated Soligel, Elacaps, ALV104 and a surfactant, or a combination of Soligel, deacetylated Soligel, MWA, ALV 104 and
  • Soligel, Elacaps and a surfactant are used.
  • the present invention relates to a composition
  • a composition comprising:
  • B represents 1 or 2 glucose units, at least one of the glucose units being optionally substituted, in particular by at least one galactose unit, the where appropriate by at least one galactose unit including, where appropriate, a pyruvate group,
  • C represents a 6-deoxy-2-epimeric galactose unit, such as 6-deoxy-L-talose, optionally substituted with 3-deoxy-D-manno-oct-2-ulosonic acid, and or by at least one acetate group,
  • composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor varies from approximately 1 to 600.
  • the present invention relates to a composition as defined above, comprising: •
  • or B represents 1 or 2 glucose units, at least one of the glucose units being optionally substituted, in particular with at least one galactose unit, where appropriate with at least one galactose unit optionally comprising a pyruvate group,
  • C represents a 6-deoxy-2-epimeric galactose unit, such as 6-deoxy-L-talose, optionally substituted with 3-deoxy-D-manno-oct-2-ulosonic acid, and or by at least one acetate group,
  • At least one phytosanitary molecule chosen especially from the following compounds: a fungicide, an insecticide, a herbicide and a growth regulator or stimulator, said composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor varies from about 1 to 600.
  • the surfactant is chosen from: J4
  • - wetting surfactants especially those of the family of organosilicone, those of the family organofluorine, alkyl polyglycosides or APG 5 ethoxylated alcohols C8 to Cl 8, alkyl phenol ethoxylated C 8 -C 16, ethoxylated fatty amines, ethoxylated tristyryl phenols, sucroesters, C 8 -C 18 alcohol sulphates, alkyl benzene, toluene or xylene sulphonates, C 8 -C 18 ethoxylated alkyl phenol sulphates, and C8 to C16 ethoxylated alkyl phenol phosphonates, and
  • emulsifying surfactants such as APGs containing from 14 to 22 carbon atoms on the alkyl chain, ethoxylated fatty alcohols and ethoxylated fatty acids, ethoxylated castor oils, ethoxylated or non-ethoxylated sorbitan esters, and ethoxylated alkylaryls, and propoxylates, ethoxy-propoxylated copolymers, alkylaryl polyoxyethylene glycol phosphate esters, alkylarylsulfonates and sulfated lignins.
  • APGs containing from 14 to 22 carbon atoms on the alkyl chain ethoxylated fatty alcohols and ethoxylated fatty acids
  • ethoxylated castor oils ethoxylated or non-ethoxylated sorbitan esters
  • ethoxylated alkylaryls propoxylates
  • the present invention relates to a composition as defined above, comprising:
  • or B represents 1 or 2 glucose units, at least one of the glucose units being optionally substituted, in particular with at least one galactose unit, where appropriate with at least one galactose unit optionally comprising a pyruvate group,
  • C represents a 6-deoxy-2-epimeric galactose unit, such as 6-deoxy-L-talose, optionally substituted with 3-deoxy-D-manno-oct-2-ulosonic acid, and or by at least one acetate group,
  • At least one phytosanitary molecule chosen especially from the following compounds: a fungicide, an insecticide, a herbicide and a growth regulator or stimulator, said composition being characterized in that the mass ratio between the surfactant and the elicitor ranges from about 1 to 600,
  • At least one polymer or mixture of polymers chosen from: polydimethylsiloxane-alkylated oxide copolymers, alkylated phenyl-ethoxylated / propoxylated block polymers, alkylated polyvinylpyrrolidones, xanthan gums, carboxymethylcelluloses and alginates, and or
  • At least one preserving agent chosen from: methyl, ethyl, propyl and butyl esters of p-hydroxybenzoic acid, sodium benzoate, 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol (such as Bronopol ® from BASF), isothiazolones (such as Rohm and Haas' KATHON ® CG) or any chemical agent that prevents bacterial growth or mold, and / or
  • At least one antifoam chosen from polysiloxanes SE2, SE9 or SE25
  • the present invention also relates to a method for treating plants, in particular vines, and cereals, in particular wheat, or rapeseed, for potentiating and stimulating their natural defenses, that is to say, capable of ensuring preventive protection against pathogens (fungal and / or viral and / or bacterial), said method comprising the application, especially to the leaves or to the seeds, of a composition containing an elicitor as defined herein above and repetitive unit of formula (I).
  • the present invention also relates to a method for treating plants, in particular vines, cereals, in particular wheat, or rapeseed, for the potentiation and stimulation of their natural defenses, that is to say, to ensure preventive protection against pathogens (fungal and / or viral and / or bacterial), said method comprising the application, in particular on the leaves or on the seeds, of a composition as defined above comprising a repeating unit elicitor of formula (I) as defined above and at least one surfactant LEGEND OF FIGURES
  • Figure 1 relates to the observation of plant growth, after application of different treatments.
  • the amount of dry matter (in g) is measured over time, namely 19 days (white columns) or 33 days (black columns) after application of said treatments.
  • Column “A” corresponds to treatment with water;
  • column “B” corresponds to treatment with salicylic acid at a concentration of 5 mM;
  • column “C” corresponds to treatment with Soligel ® at a concentration of 37 g / ha;
  • column “D” corresponds to treatment with Soligel ® at a concentration of 3.7 g / ha;
  • column “E” corresponds to treatment with Iodus ® at a concentration of 37 g / ha and
  • column “F” corresponds to treatment with Iodus ® at a concentration of 3.7 g / ha.
  • Figures 2A and 2B show the infection index (ratio of the number of leaves showing a symptom of the disease to the total number of leaves) with a 95% confidence interval depending on the nature and concentration of the disease. elicitor, said index being measured 4 days (white columns) or 7 days (black columns) after infection.
  • Columns "A” correspond to treatment with water;
  • column “B” corresponds to treatment with Soligel ® at a concentration of 12 mg / L;
  • column “C” corresponds to a treatment with Soligel ® at a concentration of 1.2 mg / L and
  • column “D” corresponds to treatment with Soligel ® at a concentration of 0.12 mg / L.
  • Figure 2A concerns the infection with Pseudomonas syringae DC3000 8 days after the deposit of the candidate elicitors
  • Figure 2B concerns the infection with Botrytis cinerea 7 days after the filing of the candidate elicitors.
  • Figures 3A and 3B show the expression of defense genes in the leaves of A. thaliana in response to the deposition of different candidate molecules, expression analyzed by mRNA extraction and semi-quantitative RT-PCR.
  • UBQ5 and EF1 has constitutive genes were used as a control to normalize the amount of cDNA template.
  • Figure 4 shows the "necrosis” index (necrotic leaves) in wheat after different treatments (with a 95% confidence index), followed by infection with Mycosphaereila graminicola. This index is measured 15 days after infection (white columns) and 21 days after infection (black columns).
  • Figure 5 shows the "necrosis” index (necrotic leaves) in wheat after different treatments (with a 95% confidence index), followed by infection with Mycosphaerella graminicola. This index is measured 15 days after infection (white columns) and 21 days after infection (black columns).
  • Figure 6 shows the leaf retention (in mg / g) of Soligel® at different concentrations (white symbol 1.5 gl "1 , gray symbol 0.4g.! " 1 and black symbol 0.0015g.l “ ! )
  • C8 / C10 AlkylPolyGlycoside symbolized by a triangle Agrisurfactant S810 ARD
  • C10 / C12 AlkylPolyPentoside symbolized by a round Agrisurfactant FxI 0/12 plus
  • APP C810 symbolized by a diamond Alkyl polypentosides C8 / C10)
  • Agrimul PG2069 symbolized by a square (Cognis)
  • the results are processed by analysis of variance (ANOVA).
  • Figure 7 shows the index of "non-stiffness” (white columns) and "pycnid” (black columns) in wheat after different treatments (with a 95% confidence index). This index is measured 21 days after infection.
  • Column “A” corresponds to the water indicator;
  • column “B” corresponds to Soligel ® alone at a concentration of 37 g / ha;
  • column “C” corresponds to the surfactant alone S 8/10 ® (ARD) at 0.06% w / v;
  • column “D” corresponds to Soligel ® at a concentration of 37 g / ha in combination with the surfactant S8 / 10 ® at 0.06%;
  • column “E” corresponds to APP surfactant alone C8 / C10 ® (ARD) at 0.06% and
  • column “F” corresponds to Soligel ® at a concentration of 37 g / ha in combination with surfactant APP C8 / C10 ® at 0.06%.
  • FIGS. 8A, 8B, 8C, 8D and 8E respectively represent the index of "non-rigidity" (8A), the “chlorosis” index (8B), the “necrosis” index (8C), the index of "pycnid” (8D) and the average number of leaves (8E) in wheat after different treatments (with a 95% confidence index). These measurements are carried out 15 days (white columns), 21 days (black columns) and 28 days after infection (gray columns) by Mycosphaerella graminocola.
  • Figures 9A, 9B, 9C, 9D and 9E respectively show the index "no rigidity" (9A), the index of "chlorosis” (9B) 5 index “necrosis” (9C), the index of "pycnid” (9D) and the average number of leaves (9E) in wheat after different treatments (with a 95% confidence index). These measurements are carried out 15 days (white columns), 21 days (black columns), 28 days after infection (gray columns) and 35 days (hatched columns) with Mycosphaerella graminicola.
  • Figures 10A and 10B show the intensity of septoria on wheat (variety Caphorn) treated in experimental plots. Based on a strategy with 2 fungicide interventions (with BASF Opus agro brought to 0.5L / ha) we wanted to check if it was possible to substitute a conventional fungicide intervention by an elicitor treatment. We tested 2 doses of Soligel at different stages of wheat culture as shown in the test protocol against:
  • Figure 2A shows the infection index depending on the nature and concentration of the elicitor. We do not observe a significant difference at 95% between plants elicited by water and Soligel® at 12.20 and 0.12 mg.l '1 . Only Soligel® at 1.22 mg.l -1 significantly reduces the infection index by a factor of 2 compared with water, four days post-infection.
  • Botrytis cinerea is deposited on pits made all the leaves, using a sterile needle. The leaves are considered infected as soon as the necrosis has spread around the sting on which the pathogen has been deposited. Infection index is calculated based on the number of infected leaves on the total number of leaves.
  • Figure 2B shows the infection indices of Botrytis cinerea 7 days after infection for A. thaliana seedlings treated with different potential elicitors or water.
  • Soligel® at 12.2 and 1.22 mg.l "1 controls the development of B. cinerea with 95-100% leaves with no lesion extension.
  • the PDF1.2 gene as representative of the concomitant activation of the jasmonic acid and ethylene pathways
  • the PAD3 gene as representative of the synthesis of camalexin, a phytoalexin specific to A. thaliana.
  • the second control consists in using, during the PCRs on the cDNAs, "discriminant" primers so that a difference in size of the amplifiât is obtained according to whether the cDNA or gDNA is amplified, because in the case of the GDNA the introns are amplified.
  • "discriminant" primers so that a difference in size of the amplifiât is obtained according to whether the cDNA or gDNA is amplified, because in the case of the GDNA the introns are amplified.
  • the elicitor potential of Soligel ® has been studied at different concentrations: 3700 mg / L, 370 mg / L, 12.2 mg / L, 1.22 mg / L and 0.122 mg / L.
  • FIG. 3A groups the expression of the PR-I, PDF1.2 and PAD3 genes in the leaves, 24 hours after the deposit of the various treatments studied.
  • Soligel® at 12.2 and 1.22 mg.l -1 strongly induces the expression of PR-I ( Figure 3A), just like the positive control 5 mM SA, and we observe a very weak expression.
  • P DF 1.2 and PAD3.1 Regarding the highest concentrations of Soligel®, we observe a modification of the response, oriented towards the single expression of PDF 1.2 strong at 370 mg.l "1 and very weak at 3700 mg.l '1 .
  • the induction of marker genes, and more particularly of the PR-I gene, is concentration dependent on Soligel®.
  • chlorosis which translates as a leaf blade palpation in the form of a spot or more spread throughout the leaf, the "necrosis” which is manifested by a stain yellow-brown-brown (depending on the age of the necrosis) which is usually small and delimited, the presence of pycnidia characterized by the presence of small black dots in relief and which are observed late.
  • Infection indices for a symptom are calculated by performing for each plant (9 to 12 plants indexed per treatment) the ratio between the number of leaves with this symptom and the total number of leaves. For each condition, at least two independent experiments were performed.
  • Soligel® and wort were tested at different rates as potential elicitors and for their ability to induce wheat protection against M. graminicola.
  • the elicitor effect of the candidate treatments was compared to treatments with water or PIodus40 (Go ⁇ mar®) a commercial elicitor based on laminarin, recommended in wheat.
  • the two-leaf wheat plants were treated with Soligel® (37 g.ha- 1 , 3.7 g.ha- 1 ), Iodus40 (37 g.ha- 1 , 3.7 g-ha). "1 ), the fermentation rate of Soligel® (at an equivalent concentration in EPS of 1.86 g.ha “ 1 , 0.37 g.ha “1 , 0.037 g.ha “ 1 ) or water then seven days post-treatment they were infected with the strain M. graminicola CBS 100332.
  • Soligel shows an eliciting capacity in protecting wheat against M. graminicola. However, this protection is transient.
  • the wheat leaf consists of a layer of wax that makes it very hydrophobic and causes the drops of vaporized aqueous solutions to roll on its surface.
  • Soligel® is a polysaccharide with viscosity and adhesion properties. In order to demonstrate the impact of the polysaccharide concentration on the adhesion of Soligel® solutions to wheat leaves, we compared the leaf retention of Soligel® solution at 0.4 gl ⁇ and at 1, 5 gl " ⁇ to that of water.
  • S810® agrisurfactant produced by ARD, which is an alkyl polyglycoside synthesized from wheat bran (70% glucose and 30% pentose) and caprylic and caprylic alcohols of vegetable origin with 8 to 10 carbons in the carbon chain
  • S The agrisurfactant FxlO12® plus also manufactured by ARD, which a C 10 / Cl 2 alkyl polypentoside containing 10 with 12 carbons in the carbon chain
  • S Agrimul PG2067® (Cognis) which is a glucose-based alkyl polyglycoside with 8 to 10 carbons in the carbon chain, and marketed as a phytosanitary product adjuvant
  • SL 'APP C8 / C10 ® produced by ARD in the laboratory from the hydrolysis of straw, which is composed exclusively of xylose with 10 carbons in the carbon chain,
  • Soligel® concentrations produced by ARD in the laboratory from the hydrolysis of straw, which is composed exclusively of xylose with 10 carbons in the
  • Figure 6 shows the leaf retention values on wheat leaves of Soligel® at different concentrations depending on the nature and concentration of adjuvant.
  • Agrisurfactant S810® significantly increases the leaf retention of Soligel® even at the highest concentration (1.5 gl- 1 ) At the lowest concentration of Soligel® (1.5 mg.l- 1 ) the addition of surfactants such as ragrisurfactant C810®, APP C8 / C10® and Agrimul PG2067® increases leaf retention to reach a limit value of about 1 mg.g- 1 .
  • Figure 7 shows the indices of non-rigidity, formation of pycnidia for different treatments 21 days after challenge.
  • Soligel® formulations - S810® agrisurfactant or APP C8 / C10® significantly reduce the pycnidia formation index and the leaf subsidence symptom compared to the individual compounds or compared to the control treatment .
  • the surfactants S810®, APP C8 / C10® thus have a synergistic action with Soligel®.
  • Figure 9 shows the evolution from 2 to 4 weeks post-infection, indices of non-rigidity (9A), chlorosis (9B), necrosis (9C) and formation of pycnidia (9D) as well as the average number of leaves per plant for seedlings elicited at the 2-3 leaf stage and infected with M. graminicola 7 days later.
  • Soligel® (3.7 g / ha) significantly improves the non-rigidity indices and transiently reduces the formation of pycnidia.
  • Soligel® and the deacetylated Soligel® have no effect on growth, whereas Soligel® hydrolysis and hydrolysed / deacetylated Soligel® allow a significant increase in the average number of leaves per plant. plant. It should be noted that the development of M. graminicola also does not affect the growth of infected plants compared to reference plants (SESP).
  • SESP reference plants
  • In vitro culture of A. thaliana is performed under sterile conditions in square and translucent culture dishes (12.5 cm, Gremer®).
  • the seeds are sterilized by soaking in a solution of calcium hypochlorite at 2% (w / v), ethanol at 95% (v / v) and Tween20 at 1% (w / v) for 5 min with stirring. by reversal several times.
  • the seeds are then rinsed three times with 95% ethanol (v / v), dried at room temperature under a laminar flow hood until the ethanol is completely evaporated, and then sterilized at 4 ° C. to be sown.
  • the seeds are then deposited on a sterile gelled and nutrient medium which is Hoagland / 2 medium (Arnon DI, Hoagland DR (1940) Crop production in artificial culture solutions and in soils with special reference to factors influencing yields and absorption of organic nutrients. Soil ScL, 50: 463-483- Table I) supplemented with Phytagel® at 0.7 g / L.
  • the boxes are closed with Micropore® and placed vertically in a culture chamber.
  • the plants are grown on soil sterilized by irradiation in 5.75 cm x 5.75 cm pots. A layer of coarse sand is deposited on the surface of the potting soil to prevent the formation of algae.
  • the watering is done daily by immersion, with an alternation of 3 days of city water and 1 day of nutrient solution Co ⁇ c-Lesaint (Table 1). The contribution of CO 2 is that of the atmospheric conditions.
  • the culture conditions in phytotron are 14 hours of day at 21 ° C., under a luminous intensity of 150 ⁇ mol of photons.m ⁇ s ' 1 for box cultures.
  • the phytotron culture conditions are 1Oh night at 18 ° C, 14h day at 21 0 C 5 220 ⁇ mol photons.m ⁇ .s "1 and 50 to 60% relative humidity.
  • DYAA Dextrose 1% Yeast Extract Asparagine Agar
  • Triticum aestivum The plants of Triticum aestivum are grown on soil sterilized by irradiation in 5.75 cm x 5.75 cm pots.
  • the seeds are deposited on the surface of the previously compacted soil, one seed per pot, then they are covered with a thin layer of potting soil and a layer of coarse sand to prevent the formation of algae.
  • Phase I Wheats are grown and elicited in a regulated culture chamber
  • Phase II the seedlings are distributed in sealed and translucent boxes and infected with the Septoria leaf pathogen.
  • the dishes are placed in the culture chambers and are ventilated by a sterile airflow (incoming and outgoing) in order to avoid the accumulation of COa and to reduce the effect of tight.
  • the wheats were grown with a photoperiod of 8h of day and 16h of night, under light conditions of 250 ⁇ mol.m ⁇ .s "1 , in an atmosphere containing 360 ppm of CO 2 which is equivalent to the amount of Atmospheric CO 2
  • the presence of water at the bottom of the boxes allows the water supply of the plants and the maintenance of high humidity to promote the development of the infection.
  • Botrytis cinerea agrr. is grown in Petri dishes on DYAA medium, at an average temperature of 22 ° C and in ambient light.
  • a spore suspension of A. brassicicola, B. cinerea mushrooms is prepared by scraping the surface of the mycelium of a mushroom culture on DYAA medium in the presence of 0.2 ⁇ m filtered city water.
  • a culture of P. syringae in exponential growth phase is centrifuged at 1500 g for 10 min, washed with 1 mM MgCl 2 and taken up in 15 ml of 1 mM MgCl 2 .
  • Inoculation of the different pathogens of _4. thaliana is performed 4 to 8 days after deposit of the candidate elicitors, by depositing drops of 10 .mu.l of a suspension of 5.10 5 spores. mi "1 or 10 7 bacteria-ml " 1 on the maximum of leaves.
  • the inoculation was made by 1 drop of 10 ⁇ l placed on either side of the central rib of the leaf, on the maximum of leaves, at the level of punctures made using the tip of a sterile toothpick or needle.
  • Mycosphaerella graminicola is grown in Petri dishes on DYAA medium, at a temperature of 22 ° C and in ambient light. Pieces of Mycosphaerella graminicola taken from the tube of the mycoteque are deposited on filters (Cyclopore® polycarbonate, Whatman®) previously sterilized and placed on the solid culture medium ( Figure 54 and 55). Thus, 3 weeks after culturing, the culture-carrying Mycosphaerella graminicola filter is transferred into PDB (Difco®, Table I). The culture is placed under stirring by inversion (30 rpm / min) at a temperature of 22 0 C and in the ambient light for ten days.
  • Inoculation is done with the liquid culture of M. graminicola. Before the challenge, the culture is observed under a microscope in order to check the stage and to evaluate the quantity of free spores which varies from 11 to 4 spores.ml "1 to 1.10 6 spores.ml " 1 .
  • the plants of Triticum aestivum L. are distributed in translucent boxes (3 to 10 plants per dish according to the experiments) with 1 cm of water and infected by spraying 1 ml of the culture of M. graminicola on the whole plant so to inoculate all the leaves.
  • the dishes are closed and placed in culture cells under a luminous intensity of 220 ⁇ mol photons.m “ .s " 1 , 8h day at 19 ° C and 14h night at 12 ° C inside the boxes .
  • Renewing the air in the boxes is done by diaphragm pumps that obtain air from the cells.
  • Sterile polycarbonate filters are placed on each box at the inlet and outlet of the ventilation circuit to prevent contaminations in the enclosure. The contribution of CO 2 is that of the atmospheric conditions.
  • the elicitors tested are Soligel® and its derivatives, developed by ARD.
  • the solutions of elicitors are prepared with tap water (without heating the solution), sterilized by filtration on 0.2 ⁇ m sterile membrane, at 3700 mg.l -1 , 370 mg.l -1 , 12, 2 mg.l -1 , 1.22 mg.l- 1 and 0.12 mg.l- 1 .
  • Positive control solutions are 5mM salicylic acid (SigmaUltra,> 99%) and 50 ⁇ M MeJa (Sigma).
  • the elicitation of the plants is carried out 15 days after sowing the seeds, by depositing a drop of 10 ⁇ l of candidate elicitor on 2 opposite leaves of the rosette.
  • the elicitors tested are Soligel® and its derivatives, formulated or unformulated, developed by ARD and commercial Iodus 40 developed by PhytoGo ⁇ mar.
  • the eliciting solutions are prepared with 0.2 ⁇ m filter-sterilized city water at 12.2 mg.l -1 , 1.22 mg.l -1 and 0.12 mg.l -1. If the mass of deposited elicitor is reported to a treatment of 1 l.ha "1 , knowing that the surface of a pot is 33 cm2 and that 1 ml / pot is applied, the effective concentrations of 37 g.ha- 1 , 3.7 g.ha- 1 and 0.37 g-ha- 1 . When the candidate elicitor is formulated, a surfactant (Agrisurfactant S810® or APP C8 / C10, ARD) is added to 0.06% w / v.
  • a surfactant Agrisurfactant S810® or APP C8 / C10, ARD
  • the elicitation of the plants is carried out 15 days after sowing seeds, stage 2-3 leaves (20 on the Zadok scale), by spraying the whole plant with 1 ml of the candidate elicitor solution.
  • control plants were treated according to the same protocol with distilled water or city water sterilized by filtration on 0.2 microns.
  • the tested solutions are added with a blue dye: the Chicago Sky Blue 6B (Acros Organics®) at 0.4%.
  • a blue dye the Chicago Sky Blue 6B (Acros Organics®) at 0.4%.
  • Two hours after spraying using a mechanical sprayer equipped with an agricultural spray nozzle to deliver 189 l.ha “1 ), the aerial parts of the plants are cut and" washed "by hand shaking (Twisting / stirring in the solution 30 times for 30 seconds) in 50 ml of 0.25% Triton X100 (Acros Organics®)
  • the washing solution is recovered and reading of the Optical Density is carried out at 618 nm in order to Determine the concentration of dye in the washing solutions
  • the cut aerial parts are then placed at 104 ° C, the solids are obtained after 48 hours.
  • the results are expressed in mg of dye retained per gram of dry mass.
  • the efficiency is calculated by considering the mass of dye retained per gram of biomass as defined above on the mass of dye sprayed per gram of biomass.
  • brassicicola is deposited in the center of the box.
  • the dishes are incubated at 30 ° C. for P. syringae and alternately day-night at 20-23 ° C. for B. cinerea and A. brassicicola.
  • the development of P. s syringae on an elicitor spot or on water is evaluated 72 hours after deposition, while observation of the growth of B. cinerea and A. brassicicola is made after one week of growth.
  • the protection index of the plants by the different elicitors is determined at the macroscopic level 3 and 8j post-challenge. Leaves showing symptoms of infection (chlorosis, necrosis) or healthy leaves are counted in relation to the total number of leaves. The protection index is calculated by reporting healthy leaves on the total number of leaves.
  • Each wheat plant is indexed according to the following formula on the total number of leaves of the plant, the number of leaves with a symptom "non-rigidity”, the number of leaves with a symptom “chlorosis”, the number of leaves with a symptom “ necrosis ", the number of leaves with a symptom 3o
  • the indexation of the disease consists of assigning, for each leaf, a percentage representing the extent of the disease on the leaf as a percentage of area.
  • the maximum score indicating complete contamination triggering drying and subsequently death of the leaf is 100%. Indexing is done by at least two people.
  • RNAs are extracted from 100 to 300 mg of leaf tissue by the Trizol® technique (Invitrogen, Life Technologies) Trizol® is a solution containing phenol and isothiocyanate of guanidine allowing the extraction of total RNAs from cells or tissues in a single step The addition of chloroform followed by centrifugation separates the solution into an aqueous phase, containing the RNAs, and an organic phase.
  • RNA-free TM kit DNA-free TM kit, Ambion
  • RNAs are purified and concentrated by deposition on a column (RNeasy MinElute Cleanup Kit, Qiagen®) and are eluted in 14 ⁇ l of RNase Free water.
  • each RNA solution is used to carry out a PCR with the primers of the EF1-a or UBQ5 gene with the amplification conditions mentioned in the table.
  • the amplifiers (5 .mu.l) are deposited on a 2.0% agarose gel in an IX TBE buffer. The migration is under 100V.
  • the quality and quantity of the extracted RNAs are characterized by spectrophotometry (Eppendorf® biophotometer). The integrity and quantity of the RNAs are verified in denaturing conditions by electrophoresis on 1% agarose gel in TBE IX medium.
  • PADS At3g26830 5'-GACAATCTCCGGTGAATCTTG-3 1472 bp 570 bp 58 CTGATCAGCTCGGTCATTCCC 5'-3 '
  • RT-PCR Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction
  • RNase-free water is supplemented with 2 ⁇ l of reaction buffer, 2 ⁇ l of a mixture of dNTPs (at a final concentration of 20 mM dATP, dGTP, dTTP and dCTP), 2 ⁇ l of a solution of oligodT 18 at 10 ⁇ M, 4 U of Omniscript reverse transcriptase and 10 U of RNase inhibitor (RNase Inhibitor, Promega®).
  • the single-stranded cDNA is synthesized at 37 ° C for 60 min.
  • the synthesized single-strand cDNAs are used as a template to amplify known genes, using specific primers. Beforehand, normalization of these matrices with a gene having constitutive expression (EFi-a and UBQ5) is necessary. Choosing the optimal number of cycles
  • Two ⁇ l of cDNA, at 1/8 dilution, are amplified by PCR.
  • the reaction mixture of 25 .mu.l is composed of 2.5 .mu.l 10X PCR buffer, 0.5 .mu.l of 20 mM dNTPs (5 mM of each dNTP), 1 .mu.l of each 10 .mu.M PCR primer and 1.25 Taq polymerase units ( Sigma).
  • the amplification conditions are as follows: n cycles of 1 min at 94 ° C, 45 sec at 58 ° C and 1 min at 72 ° C.
  • the optimal number n of amplification cycles for each sample is determined by analyzing 5 ⁇ l of the reaction mixture after 24, 26, 28 and 30 cycles by 2% agarose gel electrophoresis so that the amplification is in the exponential phase. . Quantification of the intensity of the bands is performed on the agarose gel photograph using the ImageJ software (http://rsb.info.nih.gov/ij/). The number of cycles n chosen is identical for all the samples and is in the exponential phase. Choice of optimal dilution
  • the strongest matrix is diluted so that all the amplification products have identical intensities.
  • 2 .mu.l of the diluted cDNA, 1 A (the lower die) to 1/160 (the highest matrix) are amplified by PCR cycle number n selected previously and under the same conditions.
  • An analysis of the agarose gels using the ImageJ software makes it possible to choose the dilution for which the amplification products are of the same intensity; this is the normalization step.

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

La présente invention concerne de nouvelles molécules pour la stimulation des défenses naturelles des plantes, et leurs formulations.

Description

Nouvelles molécules pour la stimulation des défenses naturelles des plantes, et leurs formulations
La présente invention concerne de nouvelles molécules pour la stimulation des défenses naturelles des plantes, et leurs formulations.
Dès son origine, l'agriculture a généré des conditions favorables au développement des maladies des plantes cultivées en concentrant des populations de végétaux sur certaines surfaces et en effectuant des cultures successives de la même plante sur la même parcelle. IJ a alors fallu trouver des solutions afin de minimiser au maximum les pertes en rendements agricoles. En matière de protection des cultures, il est possible de distinguer deux grands types d'approches complémentaires, en excluant la transgenèse. L'une est préventive et consiste à mettre en œuvre des moyens qui limitent l'impact des maladies. Il s'agit aujourd'hui du choix des variétés pour leurs qualités de tolérance aux maladies, et de la pratique de techniques culturales. L'autre est curative et permet de s'attaquer directement aux maladies en les éradiquant au travers de l'utilisation de produits phytosanitaires.
Cependant, les consommateurs expriment deux attentes fortes : la prise en compte de l'environnement dans les modes de production agricole et la garantie de la qualité sanitaire des produits qu'ils consomment L'utilisation de produits phytosanitaires, très largement répandue, est amenée à être réduite dans les années à venir. En effet, l'induction de plus en plus fréquente de résistance chez les pathogènes par l'utilisation de pesticides, le retrait de molécules pesticides toxiques pour certaines espèces et la pression du public poussent la communauté agricole et scientifique à chercher une alternative à la lutte chimique, c'est-à-dire de nouvelles méthodes plus respectueuses de l'environnement.
Dans ce cadre, la stimulation du système de défense des végétaux constitue une alternative à la lutte chimique en terme de protection des cultures. Il s'agit d'utiliser les mécanismes naturels d'élicitation des défenses des plantes permettant ainsi l'acquisition d'une meilleure résistance des végétaux aux pathogènes.
Les plantes ont toujours été confrontées à une grande diversité d'agresseurs (bactéries, champignons, nématodes, insectes) et ont donc développé des systèmes de défense pour leur résister. Les plantes n'ont pas de cellules de défense mobiles ni de système immunitaire adaptatif. Leur défense repose sur T immunité innée de chaque cellule et sur des signaux systémiques qui émanent des sites d'infection (Jones JDG, Dangl JL, 2006. The plant immune system. Nature, 444 : 323- 329).
Une fois le pathogène reconnu, une réponse rapide de mort cellulaire, appelée réaction hypersensible, se met en place afin de limiter la propagation du pathogène (Lamb C, Dixoή RA, 1997. The Oxidative Burst in Plant Disease Résistance. Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol 48: 251-275). Il s'agit d'une réponse locale : au site de pénétration de l'agresseur, les cellules infectées s'autodétruisent. Cette réaction hypersensible concorde avec des réactions biochimiques qui participent à la protection de la plante. On distingue différents types de réactions :
- le renforcement de la paroi par la production de molécules destinées à accroître leur résistance (Benhamou N, 1996. Elicitor-induced plant defence pathways Trends in Plant Science 1: 233-240) ;
- la production d'antibiotiques végétaux, les phytoalexines qui inhibent le développement du pathogène (Albersheim P, Valent BS, 1978. Host-pathogen interactions in plants. Plants, when exposed to oligosaccharides of fungal origin, défend themselves by accumulating antibiotics. J CeIl Biol., 78 (3) : 627-643) ;
~ la production massive d'espèces actives de l'oxygène (ROS Reactive Oxygen Species) : il s'agit du peroxyde d'oxygène (H2O2), du radical superoxide (0O2 ") et du radical hydroxyle (0OH) (Lamb C, Dixon RA, 1997. The Oxidative Burst in Plant Disease Résistance. Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol 48: 251-275) ;
- la production de protéines de défense qui représentent une activité antimicrobienne intense ; ces protéines sont connues sous le nom de protéines PR (Pathogenesis Related proteins) et elles sont synthétisées dans la cellule seulement en cas d'attaque par un pathogène (van Loon LC, 1997. Induced résistance in plant and the rôle of pathogenesis-related proteins. European Journal of Plant Pathology 103: 753- 765).
Parallèlement et coordonnée avec cette réponse locale, les éliciteurs activent une réponse, non plus confinée au site d'infection, mais généralisée à l'ensemble de la plante, dite réponse systémique acquise (Ross AF, 1961. Systemic acquired résistance induced by localized virus infections in plants. Virology, 14 : 340-358; Ryals J, Uknes S, Ward E, 1994. Systemic Acquired Résistance. Plant Physiol., 104 (4) : 1109-1112) ou induite (Pieterse CM, van Wees SC, van PeIt JA, Knoester M, Laan R, Gerrits H, Weisbeek PJ, van Loon LC, 1998. A novel signaling pathway controlling induced systemic résistance in Arabidopsis. Plant CeIl 10: 1571-158), (SAR "Systemic Acquired Response" ou ISR "induced systemic response"), (J.L.M. Soosaar et al., 2005. Mechanisms of plant résistance to viruses. Nature Reviews Microbiology, 3: 789-798). Cette réaction permet à la plante de se préparer à lutter contre toute attaque éventuelle et peut perdurer plusieurs jours ou plusieurs semaines.
La propagation de cette réaction de défense aux tissus sains passe par la transmission de signaux, en particulier de type phytohormones (acide salicylique, acide jasmonique, éthylène). Elle aboutit entre autres à la production de protéines et peptides reliés à la pathogenèse (protéines PR ou défensines) (Heil M, Bostock RM, 2002. Induced systemic résistance (ISR) against pathogens in the context of induced plant defences. Ann Bot, 89 (5) : 503-512.).
La réponse systémique permet de protéger la plante lors d'attaque ultérieure par un pathogène. Deux types de réponse systémique, la réponse acquise (SAR) qui est souvent obtenue dans le cas d'attaques par des microorganismes pathogènes et dépend surtout de signaux basés sur l'acide salicylique, et la réponse systémique induite (ISR) qui est globalement obtenue en réponse aux microorganismes non pathogènes ou aux herbivores et utilise la voie de l'acide jasmonique et de T éthylène.
Cette "protection" systémique présente donc un intérêt agronomique tout particulier puisque son induction artificielle permet à la plante d'être dans un état défensif latent et de réagir plus rapidement aux attaques de pathogènes. Elles sont effectives dans des conditions de culture au champ et offrent un mécanisme naturel de contrôle biologique des pathologies des plantes, donnant un moyen de limiter les apports de pesticides dans les champs (Heil M, Bostock RM, 2002. Induced systemic résistance (ISR) against pathogens in the context of induced plant defences. Ann Bot, 89 (5) : 503- 512.).
Les polysaccharides sont des polymères constitués de monosaccharides appelés également glucides ou sucres. On distingue les homopolysaccharides qui contiennent un seul type de monosaccharide et les hétéropolysaccharides qui sont formés de motifs sucre différents. Ces distinctions de structures peuvent s'accompagner de différences dans les propriétés et fonctions de ces composés dans le monde du vivant.
De nombreux homopolysaccharides, comme le glycogène ou l'amidon, constituent des sources d'énergie et appartiennent aux polysaccharides de réserves. D'autres homopolysaccharides, de type cellulose ou chitine, sont des polysaccharides de structure et participent à la composition des parois des cellules des plantes ou au cytosquelette des animaux.
Les hétéropolysaccharides sont pour la plupart impliqués comme support extracellulaire et comme matrice. Ainsi, l'enveloppe cellulaire qui assure la rigidité des cellules bactériennes est formée d'une couche de peptidoglycane, un hétéropolymère, constitué de chaînes glucidiques reliées par des liaisons peptidiques. Au sein des tissus animaux, l'espace extracellulaire est occupé par des hétéropolysaccharides, comme l'acide hyaluronique dans les articulations, qui forment une matrice maintenant la cohésion entre les cellules et qui assurent une protection, une forme et un support aux cellules, tissus et organes. D'autres hétéropolysaccharides interagissent avec les protéines pour former des sécrétions visqueuses et lubrifiantes (protéoglycanes).
Dans le domaine des éliciteurs, les homopolysaccharides sont en général libérés lors de l'attaque de la cellule par le pathogène et de l'hydrolyse de la paroi cellulaire végétale (composés glycuroniques). Ces composés vont amplifier la réponse de défense mise en œuvre par la plante lors de la perception du pathogène par les récepteurs.
Ainsi, il existe de nombreuses demandes de brevets décrivant l'utilisation d' homopolysaccharides en tant qu' éliciteurs (notamment les demandes internationales WO 98/47375, WO 99/03346 et WO 00/17215).
Il n'existe à ce jour aucun brevet décrivant l'utilisation d'hétéropolysaccharides en tant qu' éliciteurs.
La présente invention a pour but de fournir de nouveaux éliciteurs de types hétéropolysaccharides.
La présente invention a également pour but de fournir un nouveau procédé de stimulation des défenses naturelles des plantes par l'utilisation d'un hétéropolysaccharide, éventuellement en association avec un agent tensioactif, de préférence de la famille des polyglycosides d'alkyles.
La présente invention concerne l'utilisation d'un composé d'unité répétitive de formule (I) suivante :
(A)i-B-C (I) dans laquelle :
- i représente 0 ou 1 ;
- A représente un sucre uronique, notamment un acide glucuronique ou mannuronique, - B représente 1, 2 oυ 3 motifs glucose, l'un au moins des motifs glucose étant éventuellement substitué, notamment par au moins un motif galactose, le cas échéant par au moins un motif galactose comprenant le cas échéant un groupe pyruvate,
- C représente un motif galactose ou un 6-déoxy-2-épimère du galactose, tel que le 6-déoxy-L-talose, le cas échéant substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2- ulosonique et/ou par au moins un groupement acétate, la liaison entre le groupe A et le groupe B étant de type 1 — > 4 la liaison entre le groupe B et le groupe C étant de type 1 — » 1 ou 1 -> 4, lesdits motifs A, B et C susmentionnés pouvant le cas échéant être substitués par au moins un groupement acétate, en tant qu'éliciteur des défenses naturelles des plantes contre les pathogènes fongiques et/ou viraux et/ou bactériens.
Les composés de formule (I) sont des hétéropolysaccharides.
Les hétéropolysaccharides sont notamment des composés sécrétés par des organismes et qui vont potentiellement être perçus comme des éliciteurs par la cellule végétale.
Les composés de formule (I) sont des hétéropolysaccharides de poids moléculaire compris d'environ 360 Da à environ 1 000 kDa, de préférence d'environ 360 Da à environ 500 kDa. Les composés de formule (I) peuvent également être présents soit sous une forme désacétylée avec un poids moléculaire compris d'environ 360 Da à environ 500 kDa, soit sous une forme hydrolysée avec un poids moléculaire compris d'environ 360 Da à environ 70 kDa, soit sous une forme hydrolysée et désacétylée avec un poids moléculaire compris d'environ 360 Da à environ 70 kDa .
Le terme "éliciteur" désigne une substance capable, dans certaines conditions, de stimuler des mécanismes de défenses naturelles des plantes.
Le terme éliciteur est défini par Darvil et Albersheim (Phytoalexins and their elicitors - A Défense Against Microbial Infection in Plants. Ann. Rev. Plant Physiol. 1984, 35, 243-275) comme une molécule signal chez les plantes qui induit les voies de biosynthèse de phytoalexines. Le terme éliciteur est désormais généralisé aux substances qui, introduites à de faibles concentrations chez des être vivants, initient ou augmentent la biosynthèse de composés spécifiques (Radman R. et al., Elicitation of plants and microbial cell Systems, Biotechnology and Applied Biochemistry, 37 (1). pp. 91-102). Selon la présente invention, un éliciteur est une substance qui, introduite à de faibles concentrations chez la plante, induit les voies de biosynthèse de composés de défense, permettant à la plante de lutter contre une attaque ultérieure d'un pathogène, sans altérer sa croissance. En particulier selon l'invention, un composé éliciteur permet de préserver les plantes des pathogènes sans entrainer d'impact néfaste sur le développement desdites plantes, et donc sur le rendement de production de biomasse.
Le terme "plantes" désigne la plante considérée dans son ensemble incluant son appareil racinaire, son appareil végétatif, les graines, semences et fruits. Parmi les variétés de plantes, on peut notamment citer :
- les plantes de grandes cultures telles que les céréales (blé, maïs...) ;
- les protéagineux (pois) ;
- les oléagineux (soja, tournesol, colza) ;
- les plantes prairiales utiles pour l'alimentation animale ;
- les cultures spécialisées telles qu'en particulier le maraîchage, la vigne, P arboriculture, ou l'horticulture.
- Les algues
Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (I) dans laquelle i est égal à 1.
Ainsi, la présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci- dessus de composés de formule suivante (1-1) : A— B-C
A, B et C étant tels que définis ci-dessus.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (1-1), caractérisée en ce que C représente un motif galactose, ledit motif galactose étant (pouvant être) le cas échéant substitué par au moins un groupement acétate.
Ainsi, la présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci- dessus de composés de formule suivante (I- 1) : A-B-C dans laquelle A représente un sucre uronique, B est tel que défini ci-dessus et C représente un galactose.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (I- 1), caractérisée en ce que B représente : - un motif glucose non substitué par un motif galactose, ledit motif glucose étant le cas échéant substitué par au moins un groupement acétate, ou
- trois motifs glucose, l'un au moins de ces trois motifs étant éventuellement substitué par au moins un motif galactose.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (I- 1), caractérisée en ce que B représente un motif glucose non substitué par un motif galactose, ledit motif glucose étant le cas échéant substitué par au moins un groupement acétate.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que l'unité répétitive du composé est la suivante :
Figure imgf000008_0001
dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent, indépendamment les uns des autres, H ou un groupe acyle comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, notamment un groupe acétyle.
Le motif polysaccharidique de formule (II) susmentionné est constitué de motifs comprenant 3 sucres dont 2 sucres neutres et 1 sucre acide, à savoir l'acide mannuronique, le glucose et le galactose.
Selon un mode de réalisation avantageux, sur les 8 groupements hydroxyles (OR1 à ORs) de l'unité répétitive de formule (II), entre 3,5 et 4,5 groupements acétyles sont présents.
La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé tel que défini ci-dessus, dans lequel au moins 12,5% de la totalité des groupes R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représente un groupe acétyle, et notamment dans lequel au moins 12,5% de la totalité des groupes R1, R2, R3, R4, R5, Rk 6, R7 et R8 représente un groupe acétyle.
La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé tel que défini ci-dessus, dans lequel au moins d'environ 43% à environ 56%, et de préférence d'environ 43,75% à environ 56,25% de la totalité des groupes R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et Rs représente un groupe acétyle.
Selon un mode de réalisation particulier, les composés tels que définis ci-dessus peuvent se présenter sous la forme d'une double hélice. La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé tel que défini ci-dessus, dans lequel au moins 10%, et de préférence au moins 12,5% de la totalité des groupes R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représente un atome d'hydrogène.
La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé tel que défini ci-dessus, dans lequel au moins 60% de la totalité des groupes R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représente un atome d'hydrogène. Ce composé correspond à la forme désacétylée du composé de l'invention.
La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que l'unité répétitive du composé est la suivante :
Figure imgf000009_0001
Cette unité répétitive correspond à un composé de formule (I) dans laquelle A représente l'acide mannuronique, B représente le glucose et C représente le galactose.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (I- 1), caractérisée en ce que B représente trois motifs glucose, l'un au moins de ces trois motifs étant éventuellement substitué par au moins un motif galactose.
Selon un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (1-1), caractérisée en ce que B représente trois motifs glucose, au moins de ces trois motifs étant éventuellement substitué par au moins un motif galactose et caractérisée en ce que les motifs glucose sont reliés entre eux par des liaisons de type 1 -» 4 et/ou 1 -» 6.
De façon avantageuse, un seul motif glucose est substitué par au moins un motif galactose.
Selon un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (1-1), caractérisée en ce que B représente le motif suivant :
Figure imgf000009_0002
dans lequel l'un au moins des groupes OH est substitué par au moins un motif galactose.
Selon un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (I- 1), caractérisée en ce que B représente le motif suivant :
Figure imgf000010_0001
Selon un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que l'unité répétitive du composé est la suivante :
Figure imgf000010_0002
Ce composé est notamment décrit dans les demandes de brevets suivantes : WO 98/35993, WO 03/038069, FR 2 856 076 et FR 2 863 270. Il est par la suite désigné par le terme Soligel® (commercialisé par la Société Demanderesse ARD). Le Soligel® peut être hydrolyse avec ou sans groupements acétate. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (I) dans laquelle i est égal à 0.
Ainsi, la présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci- dessus de composés de formule suivante (1-2) : B-C
B et C étant tels que définis ci-dessus.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (1-2), caractérisée en ce que B représente deux motifs glucose.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (1-2). caractérisée en ce que B représente deux motifs glucose, et en ce que les motifs glucose sont reliés entre eux par une liaison de type 1 — » 4.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus de composés de formule (1-2), caractérisée en ce que C représente le 6-déoxy-L-talose, substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et par au moins un groupement acétate.
Ainsi, la présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci- dessus d'un composé avec un motif de répétition de formule suivante : β-Kàop 2 i . 3 ^
-→3)-β-r>-Gîςp-(l→4)-β-ï>-G^j?-(l→4)-α-L*6dTa^-(i~»
2
I
OAc
dans laquelle α-L-6dTalp représente le 6-désoxy-L-talose et βKdop représente l'acide 3-désoxy-D-manno-oct-2-ulosonique.
La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que l'éliciteur est utilisé en association avec un agent tensioactif.
La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que l'éliciteur est utilisé en association avec au moins un agent tensioactif, et avec au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance. Un fongicide (Un fongicide est un produit phytosanitaire conçu exclusivement pour tuer ou limiter le développement des champignons parasites des végétaux. 2 grandes familles de fongicides existent les fongicides de contact qui agissent sur des mécanismes enzymatiques impliqués dans la production d'énergie du végétal et les fongicides systémiques qui agissent sur des phénomènes de biosynthèse et sont de ce fait davantage spécifiques).
Un insecticide est une substance active ou une préparation ayant la propriété de tuer les insectes.Les principales familles chimiques des insecticides sont les organophosphorés, les carbamates, les pyréthrinoïdes de synthèse, les organochlorés et les benzoyl urées.
Les modes d'action des insecticides peuvent être fondés sur la perturbation du système nerveux, de la respiration cellulaire, de la mise en place de la cuticule, ou de la perturbation de la mue.
Le terme insecticide recouvre les pesticides toxiques pour les insectes et les arthropodes proches (acariens). Il regroupe les produits détruisant les formes adultes ou larvaires ou bien les oeufs.
On distingue des produits agissant par contact et des produits systémiques, plus des produits à mode intermédiaire, dit translaminaires.)
Un herbicide ou Phytocide est une substance active ou une préparation ayant la propriété de tuer les végétaux.
Le terme « désherbant » est un synonyme d'herbicide. En protection des cultures, les herbicides sont employés pour lutter contre les adventices, ou mauvaises herbes, destinées à détruire ou à limiter la croissance des végétaux, qu'ils soient herbacés ou ligneux. Ils peuvent être utilisés, selon leur mode d'action, en pré ou post-levée.
Un régulateur ou stimulateur de croissance est une substance active ou une préparation qui, appliquée sur tout ou une partie d'un végétal, agit sur les mécanismes physiologiques, notamment la différenciation ou l'élongation cellulaires, sans nuire à la plante d'un point de vue agronomique.
Les régulateurs de croissances sont constitués d'hormones de croissances telles que l'auxine et la gibbérelline contenus dans des substances de croissances qui agissent principalement sur la division cellulaire. Ils sont utilisés en agriculture pour lutter contre les phénomènes d'élongation et de verse, afin de renforcer les tiges des cultures (céréales, crucifères, vignes...) ce qui permet à la récolte de mieux résister aux dégâts provoqués par les intempéries. Comme par exemples :Arvest ou Bref C de Phyteurop, Moddus de Syngenta...
La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et le composé de formule (I) varie d'environ 1 à 10 000, notamment 1 à 600.
La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que l'agent tensioactif est choisi parmi :
- les tensioactifs mouillants, ioniques ou non, notamment ceux de la famille des organosiliconés (comme Sylgard® de Dow Corning, Zipper® et Breakthru® S240 de Goldschmitt Chemical), ceux de la famille des organofluorés (comme les Zonyl de Dupont), les polyglycosides d'alkyle ou APG (comme l'Agnique® PG 8105 ou PG 8107-U de Cognis), les alcools éthoxylés en C8 à Cl 8, les alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6 (comme le Triton® Xl 14 de ICI), les aminés grasses éthoxylées (comme l'Agnique® TAM 15 de Cognis), les tristyryl phénol éthoxylés, les sucroesters, les sulfates d'alcools en C8 à Cl 8, les alkyl benzène, toluène ou xylène sulfonates, les sulfates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et les phosphonates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et
- les tensioactifs émulsionnants, tels que les APG contenant 14 à 22 atomes de carbone sur la chaîne alkyle (comme Xyliance® de Soliance), les alcools gras éthoxylés et les acides gras éthoxylés (tels que Alkamuls A de Rhodia), les huiles de ricin éthoxylés (tel que Alkamul 14R de Rhodia), les esters de sorbitan éthoxylés ou non éthoxylés (tels que ceux proposés par Oléon), les alkylaryles éthoxylés et propoxylés, les copolymères éthoxy-propoxylés, les esters phosphatés d'alkylaryle polyoxyéthylène glycol, les alkylaryles sulfonates et les lignines sulfatés.
La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que l'éliciteur est utilisé en association avec un composé supplémentaire ou un mélange de composés supplémentaires, ledit composé supplémentaire étant choisi parmi :
- un solvant organique ou une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou l'oléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou - un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyJ-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl-éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25 (de WACKER).
La présente invention concerne également l'utilisation d'une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, et
- au moins un agent tensioactif, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et F éliciteur varie d'environ 1 à 10 000, notamment environ 1 à 600.
La présente invention concerne également l'utilisation d'une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus,
- au moins un agent tensioactif, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance. ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 10 000, notamment d'environ 1 à 600.
L'éliciteur de l'invention peut être appliqué seul ou en association avec une molécule phytosanitaire, tel qu'un fongicide pour compléter son action.
Les molécules phytosanitaires sont notamment décrites dans The pesticide manual, I4'ème édition, Clive Tomlin, publié par The British Crop protection Council.
Les molécules phytosanitaires sont utilisées de préférence à des doses variant d'environ 1 g à environ 5 kg par hectare de matières actives (éliciteur s : 0,2 g à 5Kg/ha). Selon un mode de réalisation préféré, la présente invention concerne l'utilisation d'une composition telle que définie ci-dessus caractérisée en ce que l'agent tensioactif est choisi parmi :
- les tensioactifs mouillants, ioniques ou non, notamment ceux de la famille des organosiliconés (comme Sylgard® de Dow Corning, Zipper® et Breakthru® S240 de Goldschmitt Chemical), ceux de la famille des organofluorés (comme les Zonyl® de Dupont), les polyglycosides d'alkyle ou APG (comme l'Agnique® PG 8105 ou PG 8107-U de Cognis), les alcools éthoxylés en C8 à Cl 8, les alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C16 (comme le Triton® Xl 14 de ICI), les aminés grasses éthoxylées (comme l'Agnique® TAM 15 de Cognis), les tristyryl phénol éthoxylés, les sucroesters, les sulfates d'alcools en C8 à C 18, les alkyl benzène, toluène ou xylène sulfonates, les sulfates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C16, et les phosphonates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et
- les tensioactifs émulsionnants, tels que les APG contenant 14 à 22 atomes de carbone sur la chaîne alkyle (comme Xyliance® de Soliance), les alcools gras éthoxylés et les acides gras éthoxylés (tels que Alkamuls A de Rhodia), les huiles de ricin éthoxylés (tel que Alkamul 14R de Rhodia), les esters de sorbitan éthoxylés ou non éthoxylés (tels que ceux proposés par Oléon), les alkylaryles éthoxylés et propoxylés, les copolymères éthoxy-propoxylés, les esters phosphatés d'alkylaryle polyoxyéthylène glycol, les alkylaryles sulfonates et les lignines sulfatés.
Par agent tensioactif mouillant, on désigne un composé tensioactif permettant de faciliter le mouillage d'un solide par un liquide, c'est-à-dire étalement du liquide sur le solide. En diminuant la tension superficielle, les agents tensioactifs mouillants permettent un plus grand étalement du liquide.
Par agent tensioactif émulsionnant, on désigne un composé tensioactif permettant de faciliter le mélange de deux liquides non miscibles. Un des liquides est dispersé dans le second liquide sous forme de petites gouttelettes
Par agent tensioactif moussant, on désigne un composé tensioactif permettant de faciliter la formation de mousse, c'est-à-dire la dispersion d'un volume important de gaz dans un faible volume de liquide. Ce type d'agent tensioactif s'adsorbe à l'interface eau-air.
De préférence les compositions contenant l'éliciteur de l'invention contiendront un agent mouillant (ou agent tensioactif) choisi parmi les polyglycosides d'alkyles (ou APG). Les APG seront préférés car ils augmentent considérablement le pouvoir mouillant des préparations, c'est à dire qu'ils augmentent la rétention des bouillies phytosanitaires sur les feuilles des plantes traitées et augmentent par ce fait la surface d'échange entre la goutte pulvérisée et la zone cuticulaire et ainsi favorisent la pénétration des actifs vers les cellules de la plante. Le caractère mouillant des APG est référencé par exemple par les brevets US 4 888 325, US 5 385 750 . De plus les APG sont issus de substances renouvelables et sont totalement biodégradables et formeront avec l'éliciteur objet de la présente demande des préparations environnementalement attractives.
Les APG ont pour formule générale R(OG)n dans laquelle R est un radical aliphatique linéaire ou ramifié, avec ou sans insaturation(s), contenant de 2 à 30 atomes de carbone, de préférence de 4 à 18 atomes de carbone et de préférence encore de 5 à 14 atomes de carbone. G représente des restes identiques ou différents d'osés choisis de préférence parmi les hexoses et les pentoses, tels que le glucose, le fructose, le mannose, le galactose, le sorbose, ainsi que le ribose, le xylose, Farabinose, le xylulose. Dans la formule précédente O représente un atome d'oxygène et n représente le degré de polymérisation ou Dp donnant le nombre moyen d'unités saccharidiques liées à la partie R (n est généralement compris entre 1 et 18, de préférence entre 1 et 5 et de préférence encore entre 1 et 3).
Les APG peuvent être préparés selon le brevet US 3 219 656 et de préférence selon les brevets FR 2 723 858 et FR 2 744 648 au nom de la demanderesse. Les émulsionnants utiles aux préparations de l'invention seront par exemples ceux préparés selon les brevets FR 2 789 330, FR 2 767 069 et FR 2 869 242 de la demanderesse.
Une utilisation avantageuse selon la présente invention est l'utilisation d'une composition telle que définie ci-dessus comprenant au moins un éliciteur et en outre :
— au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou Poléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
— au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF)5 les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
— au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25 (de WACKER).
Formule 1 : Soligel hydrolyse désacétylé (Elacaps) 7g/L+ agrisurfactant S810 (ARD)128 g/L+ Bronopol (Proctetol BN, BASF) 0,14 g/L
Formule 2 : Soligel hydrolyse désacétylé (Elacaps) 60g/L+ agrisurfactant S810 (ARD) 25,6 g/L+ Bronopol (Proctetol BN, BASF) 0,14 g/L
La présente invention comprend notamment l'utilisation d'une composition comprenant une combinaison de 2, 3, 4, 5 ou 6 polysaccharides sélectionnés parmi :
* le Soligel, le Soligel désacétylé, le Soligel hydrolyse, le Soligel hydrolyse et désacétylé (ce composé est également nommé Elacaps),
* les composés de formule (1-2) telle que définie ci-dessus, et notamment le composé de formule (1-2) caractérisé en ce que C représente le 6-déoxy-L-talose, substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et par au moins un groupement acétate, ce composé est également nommé MWA,
* le composé de formule (I) dans laquelle A représente l'acide mannuronique, B représente le glucose et C représente le galactose, ce composé est également nommé ALV104.
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, on utilise : une composition comprenant une combinaison de Soligel et de Soligel désacétylé, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel et de Soligel hydrolyse, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé et de
Soligel hydrolyse, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé et d'Elacaps, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé et d'ALV104 ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison d'Elacaps et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison d'Elacaps et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et de Soligel hydrolyse, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et d'Elacaps, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et d' ALV104 ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'Elacaps et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'Elacaps et d'ALV104, lg
ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'ALV104 et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps et de MWA5 ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et de MWA5 ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d' ALVl 04, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, et d'ALV104, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, et de MWA, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, on utilise une composition comprenant le Soligel et d'Elacaps.
La présente invention comprend notamment l'utilisation d'une composition comprenant :
- une combinaison de 2, 3, 4, 5 ou 6 polysaccharides sélectionnés parmi :
* le. Soligel, le Soligel désacétylé, le Soligel hydrolyse, le Soligel hydrolyse et désacétylé (ce composé est également nommé Elacaps),
* les composés de formule (1-2) telle que définie ci-dessus, et notamment le composé de formule (1-2) caractérisé en ce que C représente le 6-déoxy-L- talose, substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et par au moins un groupement acétate, ce composé est également nommé MWA,
* le composé de formule (I) dans laquelle A représente l'acide mannuronique, B représente le glucose et C représente le galactose, ce composé est également nommé ALV 104.
- un agent tensioactif tel que défini ci-dessus, tel qu'un agent tensioactif mouillant, émulsifiant ou moussant.
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention on utilise : une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, n
ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'ALV104, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, d' ALVl 04 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une composition comprenant une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif.
Selon un- mode de réalisation avantageux de l'invention, on utilise une composition comprenant le Soligel, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, Selon un mode de réalisation préféré, la présente invention concerne l'utilisation d'une composition telle que définie ci-dessus, comprenant :
— un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, et
— au moins un agent tensioactif mouillant, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 10 000, notamment environ 1 à 600.
Selon un mode de réalisation préféré, la présente invention concerne l'utilisation d'une composition telle que définie ci-dessus, comprenant :
— un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, et
- au moins un agent tensioactif émulsionnant, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 10 000, notamment environ 1 à 600.
Selon un mode de réalisation préféré, la présente invention concerne l'utilisation d'une composition telle que définie ci-dessus, comprenant :
— un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, et
— au moins un tensioactif émulsionnant, choisi parmi les mono ou oligoglycéride d'acide caprique éthoxylé ou caprilique éthoxylé, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 10 000, notamment environ 1 à 600.
La présente invention concerne une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, et
- au moins un agent tensioactif mouillant, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif mouillant et l' éliciteur varie d'environ 1 à 600.
La présente invention concerne une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, et
- au moins un agent tensioactif émulsionnant, sous réserve que ledit agent tensioactif émulsionnant soit différent du mono ou d'oligoglycéride d'acide caprique éthoxylé ou caprilique éthoxylé, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif émulsionnant et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
La présente invention concerne une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus,
- au moins un agent tensioactif mouillant, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif mouillant et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
La présente invention concerne une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus,
- au moins un agent tensioactif émulsionnant, sous réserve que ledit agent tensioactif émulsionnant soit différent du mono ou d'oligoglycéride d'acide caprique éthoxylé ou caprilique éthoxylé, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif émulsionnant et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
La présente invention concerne une composition comprenant un éliciteur d'unité répétitive de formule (I), un agent tensioactif et une molécule phytosanitaire telle que définie ci-dessus, comprenant en outre :
- au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou l'oléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF5 la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25.
La présente invention concerne une composition comprenant un éliciteur d'unité répétitive de formule (I), un agent tensioactif et une molécule phytosanitaire telle que définie ci-dessus, comprenant en outre :
- au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou l'oléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de p'olydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25.
La présente invention concerne une composition comprenant une combinaison de 2, 3, 4, 5 ou 6 polysaccharides sélectionnés parmi le Soligel, le Soligel désacétylé, le Soligel hydrolyse, le Soligel hydrolyse et désacétylé (ce composé est également nommé Elacaps), les composés de formule (1-2) telle que définie ci-dessus, et notamment le composé de formule (1-2) caractérisé en ce que C représente le 6-déoxy-L-talose, substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et par au moins un groupement acétate, ce composé est également nommé MWA, le composé de formule (I) dans laquelle A représente l'acide mannuronique, B représente le glucose et C représente le galactose, ce composé est également nommé ALV 104.
Les compostions avantageuses de l'invention comprennent : une combinaison de Soligel et de Soligel désacétylé, ou une combinaison de Soligel et de Soligel hydrolyse, ou une combinaison de Soligel désacétylé et de Soligel hydrolyse, ou une combinaison de Soligel désacétylé et d'Elacaps, ou une combinaison de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, ou une combinaison de Soligel et de MWA, ou une combinaison de Soligel et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel désacétylé et de MWA, ou une combinaison de Soligel désacétylé et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel hydrolyse et de MWA, ou une combinaison de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une combinaison d'Elacaps et de MWA, ou une combinaison d'Elacaps et d'ALV104, ou une combinaison de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et de Soligel hydrolyse, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et d'Elacaps, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et de MWA, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et de MWA, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, d'Elacaps et de MWA, ou une combinaison de Soligel, d'Elacaps et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, d'ALV104 et de MWA, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, Zo
ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et de MWA, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps et de MWA, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et de MWA, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d' ALVl 04, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison d'Elacaps, de MWA et d' ALVl 04, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'Elacaps, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et de
MWA, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps et de MWA, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et de MWA, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse,- d'Elacaps et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et de
MWA, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de
MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ^
ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, et d'ALV104, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, et de MWA, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'ALV104,
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, on utilise le Soligel et d'Elacaps.
La présente invention comprend notamment une composition comprenant :
- une combinaison de 2, 3, 4, 5 ou 6 polysaccharides sélectionnés parmi
* le Soligel, le Soligel désacétylé, le Soligel hydrolyse, le Soligel hydrolyse et désacétylé (ce composé est également nommé Elacaps),
* les composés de formule (1-2) telle que définie ci-dessus, et notamment le composé de formule (1-2) caractérisé en ce que C représente le 6-déoxy-L- talose, substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et par au moins un groupement acétate, ce composé est également nommé MWA,
* le composé de formule (I) dans laquelle A représente l'acide mannuronique, B représente le glucose et C représente le galactose, ce composé est également nommé ALV 104.
- un agent tensioactif tel que défini ci-dessus, tel qu'un agent tensioactif mouillant, émulsifiant ou moussant.
Les compositions avantageuses de l'invention comprennent : une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, d'ALV104, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d' ALV 104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de MWA, d' ALV 104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d' ALVl 04 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d' ALVl 04 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, d'ALV104 et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA et d'un agent tensioactif, ou une combinaison de Soligel, de Soligel désacétylé, de Soligel hydrolyse, d'Elacaps, de MWA, d'ALV104 et d'un agent tensioactif,
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, on utilise le Soligel, d'Elacaps et d'un agent tensioactif,
La présente invention concerne une composition comprenant:
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, sous réserve que :
* soit i représente 0,
* soit B représente 1 ou 2 motifs glucose, l'un au moins des motifs glucose étant éventuellement substitué, notamment par au moins un motif galactose, le cas échéant par au moins un motif galactose comprenant le cas échéant un groupe pyruvate,
* soit C représente un motif 6-déoxy-2-épimère du galactose, tel que le 6- déoxy-L-talose, le cas échéant substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et/ou par au moins un groupement acétate,
* soit la liaison entre le groupe B et le groupe C étant de type 1 — » 1 ou 1 → 4,
- au moins un agent tensioactif, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et Péliciteur varie d'environ 1 à 600.
La présente invention concerne une composition telle que définie ci-dessus, comprenant : •
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, sous réserve que :
* soit i représente 0,
* soit B représente 1 ou 2 motifs glucose, l'un au moins des motifs glucose étant éventuellement substitué, notamment par au moins un motif galactose, le cas échéant par au moins un motif galactose comprenant le cas échéant un groupe pyruvate,
* soit C représente un motif 6-déoxy-2-épimère du galactose, tel que le 6- déoxy-L-talose, le cas échéant substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et/ou par au moins un groupement acétate,
* soit la liaison entre le groupe B et le groupe C étant de type 1 — > 1 ou 1 → 4,
- au moins un agent tensioactif, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
Selon un mode de réalisation avantageux, l'agent tensioactif est choisi parmi : J4
- les tensioactifs mouillants, ioniques ou non, notamment ceux de la famille des organosiliconés, ceux de la famille des organofluorés, les polyglycosides d'alkyle ou APG5 les alcools éthoxylés en C8 à Cl 8, les alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C 16, les aminés grasses éthoxylées, les tristyryl phénol éthoxylés, les sucroesters, les sulfates d'alcools en C 8 à Cl 8, les alkyl benzène, toluène ou xylène sulfonates, les sulfates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et les phosphonates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C16, et
- les tensioactifs émulsionnants, tels que les APG contenant 14 à 22 atomes de carbone sur la chaîne alkyle, les alcools gras éthoxylés et les acides gras éthoxylés, les huiles de ricin éthoxylés, les esters de sorbitan éthoxylés ou non éthoxylés, les alkylaryles éthoxylés et propoxylés, les copolymères ethoxy-propoxylés, les esters phosphatés d'alkylaryle polyoxyéthylène glycol, les alkylaryles sulfonates et les lignines sulfatés.
La présente invention concerne une composition telle que définie ci-dessus, comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus, sous réserve que :
* soit i représente 0,
* soit B représente 1 ou 2 motifs glucose, l'un au moins des motifs glucose étant éventuellement substitué, notamment par au moins un motif galactose, le cas échéant par au moins un motif galactose comprenant le cas échéant un groupe pyruvate,
* soit C représente un motif 6-déoxy-2-épimère du galactose, tel que le 6- déoxy-L-talose, le cas échéant substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et/ou par au moins un groupement acétate,
* soit la liaison entre le groupe B et le groupe C étant de type 1 -> 1 ou 1 → 4,
- au moins un agent tensioactif, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600,
- au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou Poléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
— au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25
La présente invention concerne également un procédé de traitement des plantes, en particulier des vignes, et des céréales, notamment du blé, ou du colza, pour la potentialisation et la stimulation de leurs défenses naturelles, c'est-à-dire propre à assurer une protection préventive vis-à-vis des agents pathogènes (fongiques et/ou viraux et/ou bactériens), ledit procédé comprenant l'application, notamment sur les feuilles ou sur les semences, d'une composition contenant un éliciteur tel que défini ci- dessus et d'unité répétitive de formule (I).
La présente invention concerne également un procédé de traitement des plantes, en particulier des vignes, des céréales, notamment du blé, ou du colza, pour la potentialisation et la stimulation de leurs défenses naturelles, c'est-à-dire propre à assurer une protection préventive vis-à-vis des agents pathogènes (fongiques et/ou viraux et/ou bactériens), ledit procédé comprenant l'application, notamment sur les feuilles ou sur les semences, d'une composition telle que définie ci-dessus comprenant un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie ci-dessus et au moins un agent tensioactif LÉGENDE DES FIGURES
La Figure 1 concerne l'observation de la croissance des plantes, après application de différents traitements. La quantité de matière sèche (en g) est mesurée au cours du temps, à savoir 19 jours (colonnes blanches) ou 33 jours (colonnes noires) après application desdits traitements. La colonne "A" correspond au traitement avec de l'eau ; la colonne "B" correspond au traitement avec de l'acide salicylique à une concentration de 5 mM ; la colonne "C" correspond au traitement avec du Soligel® à une concentration de 37 g/ha ; la colonne "D" correspond au traitement avec du Soligel® à une concentration de 3,7 g/ha ; la colonne "E" correspond au traitement avec du Iodus® à une concentration de 37 g/ha et la colonne "F" correspond au traitement avec du Iodus® à une concentration de 3,7 g/ha.
Les Figures 2A et 2B représentent l'indice d'infection (rapport du nombre de feuilles présentant un symptôme de la maladie sur le nombre total de feuilles) avec un intervalle de confiance à 95% en fonction de la nature et de la concentration de l'éliciteur, ledit indice étant mesuré 4 jours (colonnes blanches) ou 7 jours (colonnes noires) après l'infection. Les colonnes "A" correspondent à un traitement avec de l'eau ; la colonne "B" correspond à un traitement avec du Soligel® à une concentration de 12 mg/L ; la colonne "C" correspond à un traitement avec du Soligel® à une concentration de 1,2 mg/L et la colonne "D" correspond à un traitement avec du Soligel® à une concentration de 0,12 mg/L. La Figure 2A concerne l'infection par Pseudomonas syringae DC3000 8 jours après dépôt des éliciteurs candidats, la Figure 2B concerne l'infection par Botrytis cinerea 7 jours après dépôt des éliciteurs candidats.
Les Figures 3A et 3B représentent l'expression de gènes de défense dans les feuilles â'A. thaliana en réponse au dépôt de différentes molécules candidates, expression analysée par extraction des ARNm et RT-PCR semi-quantitative . UBQ5 et EFl a des gènes constitutifs ont été utilisés comme contrôle pour normaliser la quantité de matrice ADNc.
La Figure 4 représente l'indice de "nécrose" (feuilles nécrosées) chez le blé après différents traitements (avec un indice de confiance à 95%), suivis d'une infection par Mycosphaereîla graminicola. Cet indice est mesuré 15 jours après infection (colonnes blanches) et 21 jours après infection (colonnes noires). La colonne "A" correspond au témoin eau ; la colonne "B" correspond au témoin Iodus40® (Goëmar®) à une concentration de 37 g/ha ; la colonne "C" correspond au témoin Iodus40® à une concentration de 3,7 g/ha ; la colonne "D" correspond au Soligel® (ARD) à une concentration de 37 g/ha et la colonne "E" correspond au Soligel® à une concentration de 3,7 g/ha.
La Figure 5 représente l'indice de "nécrose" (feuilles nécrosées) chez le blé après différents traitements (avec un indice de confiance à 95%), suivis d'une infection par Mycosphaerella graminicola. Cet indice est mesuré 15 jours après infection (colonnes blanches) et 21 jours après infection (colonnes noires). La colonne "A" correspond au témoin eau ; la colonne "B" correspond au témoin Iodus40® (Goëmar®) à une concentration de 0,37 g/ha ; la colonne "C" correspond au Soligel® (ARD) à une concentration de 0,37 g/ha ; la colonne "D" correspond au moût YAS34 (moût de fermentation du Soligel®) à une concentration en polysaccharide de 1,86 g/ha ; la colonne "E" correspond au moût YAS34 à une concentration en polysaccharide de 0,37 g/ha et la colonne "F" correspond au moût YAS34 à une concentration en polysaccharide de 0,037 g/ha.
La Figure 6 représente la rétention foliaire (en mg/g) du Soligel® à différentes concentrations (symbole blanc 1,5 g.l"1, symbole gris 0,4g.!"1 et symbole noir 0,0015g.l" !) en fonction de la concentration en adjuvant sur des feuilles de blé. Quatre tensio actifs ont été testés : AlkylPolyGlycoside C8/C10 symbolisé par un triangle (Agrisurfactant S810 ARD) ; AlkylPolyPentoside C10/C12 symbolisé par un rond (Agrisurfactant FxI 0/12 plus) ; APP C810 symbolisé par un losange (Alkyl polypentosides C8/C10) ; Agrimul PG2069 symbolisé par un carré (Cognis). Les résultats sont traités par analyse de la variance (ANOVA).
La Figure 7 représente l'indice de "non rigidité" (colonnes blanches) et de "pycnide" (colonnes noires) chez le blé après différents traitements (avec un indice de confiance à 95%). Cet indice est mesuré 21 jours après infection. La colonne "A" correspond au témoin eau ; la colonne "B" correspond au Soligel® seul à une concentration de 37 g/ha ; la colonne "C" correspond au tensioactif seul S 8/ 10® (ARD) à 0,06% p/v ; la colonne "D" correspond au Soligel® à une concentration de 37 g/ha en combinaison avec le tensioactif S8/10® à 0,06% ; la colonne "E" correspond au tensioactif seul APP C8/C10® (ARD) à 0,06% et la colonne "F" correspond au Soligel® à une concentration de 37 g/ha en combinaison avec le tensioactif APP C8/C10® à 0,06%. Les Figures 8A, 8B, 8C, 8D et 8E représentent respectivement l'indice de "non rigidité" (8A), l'indice de "chlorose" (8B), l'indice de "nécrose" (8C), l'indice de "pycnide" (8D) et le nombre moyen de feuilles (8E) chez le blé après différents traitements (avec un indice de confiance à 95%). Ces mesures sont effectuées 15 jours (colonnes blanches), 21 jours (colonnes noires) et 28 jours après infection (colonnes grises) par Mycosphaerella graminocola. Les colonnes "A" correspondent au témoin SESP {sans éliciteur sans pathogène) ; les colonnes "B" correspondent au témoin EUP (eau ultra pure) ; les colonnes "C" correspondent au Soligel® seul à une concentration de 3,7 g/ha ; les colonnes "D" correspondent au Soligel désacétylé seul à une concentration de 3,7 g/ha ; les colonnes "E" correspondent à la molécule HT14 (Soligel® hydrolyse) seul à une concentration de 3,7 g/ha ; les colonnes "F" correspondent à la molécule HDBlO (Soligel® hydrolyse et désacétylé) seul à une concentration de 3,7 g/ha.
Les Figures 9A, 9B, 9C, 9D et 9E représentent respectivement l'indice de "non rigidité" (9A), l'indice de "chlorose" (9B)5 l'indice de "nécrose" (9C), l'indice de "pycnide" (9D) et le nombre moyen de feuilles (9E) chez le blé après différents traitements (avec un indice de confiance à 95%). Ces mesures sont effectuées 15 jours (colonnes blanches), 21 jours (colonnes noires), 28 jours après infection (colonnes grises) et 35 jours (colonnes hachurées) par Mycosphaerella graminicola. Les colonnes "A" correspondent au témoin SESP ; les colonnes "B" correspondent au témoin EUP (eau ultra pure) ; les colonnes "C" correspondent à l'agrisurfactant S8/10® seul à 0,06% ; les colonnes "D" correspondent au Soligel® à une concentration de 3,7 g/ha en combinaison avec l'agrisurfactant S8/10® à 0,06% ; les colonnes "E" correspondent au Soligel® désacétylé à une concentration de 3,7 g/ha en combinaison avec l'agrisurfactant S8/10® à 0,06% ; les colonnes "F" correspondent au fongicide Opus® (BASF Agro) seul à 0,5 L/ha ; les colonnes "G" correspondent au Soligel® à une concentration de 3,7 g/ha en combinaison avec le fongicide Opus® à 0,5 L/ha et les colonnes "H" correspondent au Soligel® désacétylé à une concentration de 3,7 g/ha en combinaison avec le fongicide Opus® à 0,5 L/ha.
Les figures 10A et 10B représentent l'intensité de la septoriose sur les blés (variété Caphorn) traités en parcelles d'expérimentation . Sur la base d'une stratégie à 2 interventions fongicides (avec l'Opus de BASF agro apporté à 0.5L/ha) nous avons voulu vérifier si il était possible de substituer une intervention fongicide classique par un traitement éliciteur. Nous avons testé 2 doses de Soligel à différent stade de culture du blé comme le montre le protocole d'essai ci contre :
Figure imgf000040_0001
1 PARTIE EXPÉRIMENTAT.E
1.1 I Propriétés sur la plante modèle Arabidopsis thaliana a. Effet des éliciteur s candidats sur la croissance de la plante
La pesée de la matière sèche des rosettes 3 à 4 semaines après Pélicitation a permis de contrôler que l'application de molécules candidates tels que le Soligel® et le Iodus® à des doses de 3,7 g/ha et 37 g/ha appliquées à 16 jours post-germination n'affectait pas la croissance des plantes (Figure 1). L'analyse statistique de la variance montre qu'il n'y a pas d'effet significatif à 95% sur la croissance des plantes en terreau en fonction des éliciteurs appliqués, excepté pour le traitement acide salicylique (5 mM) par rapport au contrôle eau. Par contre lors de cette expérience, l'application d'une dose d'acide salicylique à 5 mM, sur des plantes âgées de 15 jours, s'est révélée être fatale pour la croissance des plantes (Figure 1).
Ainsi l'utilisation du Soligel® comme candidat éliciteur ne se traduit pas par une modification significative de la masse sèche de feuille, montrant que l'utilisation du Soligel® n'a pas été accompagnée par une perte de croissance. b. Protection
La somme des connaissances acquises sur A. thaliana au cours de ces dernières années en fait un organisme modèle d'étude pour les interactions plantes/pathogènes. Sur ce modèle, il a été choisi d'utiliser 2 pathogènes pour tester l'efficacité de protection par le Soligel® chez A. thaliana :
— Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000, pour l'activation de la voie de l'acide salicylique, avec comme gène induit le gène PR-I ;
- Botrytis cinerea agrr. , La résistance d'A thaliana à B. cinerea repose sur la voie de signalisation de l'acide jasmonique et de Pethylène (gène rapporteur PDFl.2) et la production de la camalexine (gène rapporteur PAD3). II a été procédé à des tests d'infection sur plante entière sur A. thaliana afin de vérifier si le Soligel® élicitait une réponse de défense susceptible de protéger la plante contre l'infection par différents pathogènes. Pour cela, différents challenges ont été effectués (Figures 2A et 2B) sur des plantes élicitées à différentes concentrations de Soligel®, et, à titre comparatif, les mêmes expériences ont été menées avec de l'eau.
Auparavant, il a été vérifié l'absence d'inhibition de la croissance des pathogènes Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 et Botrytis cinerea, par le Soligel® aux concentrations testées lors des essais suivants.
Huit jours après dépôt sur deux feuilles de la rosette des éliciteurs potentiels, Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 est déposé sur toutes les feuilles de la rosette. Le rapport du nombre de feuilles portant des symptômes de chlorose ou de nécrose par rapport au nombre de feuilles total de chaque plante permet d'estimer un indice d'infection (Figure 2À).
Les facteurs pris en compte pour l'analyse de la variance de l'indice d'infection sont :
- la nature et la concentration de l'éliciteur (eau, 12,20 - 1,22 - 0,12 mg/L)
- le temps entre l'infection par Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 et l'indexation de l'infection chez les plantes (4 et 7 jours).
La Figure 2A représente l'indice d'infection en fonction de la nature et la concentration de l'éliciteur. Nous n'observons pas de différence significative à 95% entre les plantes élicitées par de l'eau et le Soligel® à 12,20 et 0,12 mg.l'1. Seul le Soligel®' à 1,22 mg.l"1 permet de réduire significativement l'indice d'infection d'un facteur 2 par rapport à l'eau, quatre jours post-infection.
Ceci semble indiquer que le Soligel® a induit chez A. thaliana une résistance à l'infection par le pathogène P. syringae. Cependant cette protection ne se prolonge pas, puisque l'indice d'infection rejoint la valeur du traitement eau 7 jours post-infection.
Botrytis cinerea est déposé sur des piqûres réalisées toutes les feuilles, à l'aide d'un aiguille stérile. Les feuilles sont considérées comme infectées dès que la nécrose s'est étendue autour de la piqûre sur laquelle le pathogène a été déposé. L'indice d'infection est calculé par rapport du nombre de feuilles infectées sur le nombre total de feuilles.
La Figure 2B présente les indices d'infection par Botrytis cinerea 7 jours après infection pour des plantules à' A. thaliana traitées par différents éliciteurs potentiels ou de l'eau. Le Soligel® à 12,2 et 1,22 mg.l"1 permet de contrôler le développement de B. cinerea avec 95 à 100% de feuilles ne présentant pas d'extension de la lésion. Ces résultats suggèrent que le Soligel® aux deux concentrations, 12,2 et 1,22 mg.l"1, induit au niveau de la plante un mécanisme de résistance contre ce pathogène.
Les résultats obtenus montrent que le Soligel® réduit l'infection d' A. thaliana par P. syringae pv tomato DC3000 et B. cinerea.
c. Caractérisation moléculaire de la réponse induite par les éliciteurs candidats
L'analyse moléculaire de la réponse d'Arabidopsis thaliana aux éliciteurs candidats a été réalisée en analysant l'expression différentielle d'un ou plusieurs gènes marqueurs par RT-PCR semi-quantitative. Une étude comparative de l'expression de 3 gènes de défense a été réalisée à partir d'ARNm extrait des feuilles témoins ou "élicitées" avec les candidats éliciteurs. En effet parmi l'ensemble des gènes induits dans la réaction d'élicitation chez A. thaliana, dans un premier, deux puis trois gènes caractéristiques des voies de défense ont été sélectionnés :
Différents gènes de défense sont fréquemment utilisés comme marqueurs des voies de défense. Ainsi :
- le gène PR-I, comme représentant de l'activation de la voie de l'acide salicylique,
- le gène PDFl.2, comme représentant de l'activation concomitante des voies de l'acide jasmonique et de l'éthylène, le gène PAD3, comme représentant de la synthèse de la camalexine, une phytoalexine propre h A. thaliana.
Afin de caractériser le potentiel éliciteur du Soligel®, nous avons analysé par RT- PCR semi-quantitative l'expression différentielle des trois gènes caractéristiques des voies de défense chez A. thaliana (Figure 3). Une étude comparative de l'expression des gènes de défense a été réalisée à partir d'ARNms extraits de feuilles traitées avec les candidats éliciteurs, le Soligel® à différentes concentrations : 3700 mg.l'1, 370 mg.l"1, 12,2 mg.1"1, 1,22 mg.lSt 0,122 mg.l"1.
Nous avons utilisé des traitements contrôles négatif, l'eau, et positifs pour l'induction de l'expression des gènes observés : SA 5 mM (gène PR-I), Methyl- jasmonate (MeJA) 50 μM (gène PDF 1.2) etAlternaria brassicicola (gène PAD3). Pour chaque condition, nous avons vérifié l'absence d'ADNg dans les ADNcs en procédant à deux contrôles. Le premier consiste à réaliser une PCR avec les amorces des gènes de références EFl -a ou UBQ5 sur les ARNms extraits des feuilles et à vérifier l'absence de produits d'amplification avant de réaliser la RT. Le deuxième contrôle consiste à utiliser, lors des PCRs sur les ADNc, des amorces « discriminantes » de sorte qu'une différence de taille de l'amplifiât est obtenue selon que l'ADNc ou PADNg est amplifié, car dans le cas de l'ADNg les introns sont amplifiés. Pour le contrôle de la réaction d'amplification, nous avons utilisé un contrôle positif, de l'ADNg et négatif, de l'eau.
Le potentiel éliciteur du Soligel® a été étudié à différentes concentrations : 3700 mg/L, 370 mg/L, 12,2 mg/L, 1,22 mg/L et 0,122 mg/L.
Nous avons également cherché à identifier si une modification de la structure du Soligel® entraînait une modification de la réponse observée en diminuant la masse molaire (HT 14), en enlevant les groupements acétates (Soligel® désacétylé), ou en diminuant la masse molaire et en enlevant les groupements acétates (HDBlO).
La figure 3 A regroupe l'expression des gènes PR-I, PDFl.2 et PAD3 dans les feuilles, 24h après dépôt des différents traitements étudiés. Nous observons que le Soligel® à 12,2 et 1,22 mg.l"1 induit fortement l'expression de PR-I (Figure 3A), tout comme le contrôle positif SA 5mM. Par ailleurs, nous observons une très faible expression de P DF 1.2 et de PAD3.1. Concernant, les concentrations de Soligel® les plus fortes, nous observons une modification de la réponse, orientée vers la seule expression de PDF 1.2 forte à 370 mg.l"1 et très faible à 3700 mg.l'1.
L'induction de gènes marqueurs, et plus particulièrement du gène PR-I, est concentration dépendante en Soligel®.
Concernant l'impact de la masse molaire et de groupements acétate sur l'expression des gènes de défense, l'induction des gènes PR-I et PDFl.2 est plus importante quand la masse molaire est diminuée.
Par ailleurs, on observe l'induction de ces mêmes gènes pour des doses plus faibles lorsque les molécules comportent des groupements acétates par rapport aux formes désacétylées du polymère.
L'étude du gène P ADS semble montrer une très légère expression de ce gène en réponse au Soligel® désacétylé à la plus forte concentration testée. De plus, l'observation du profil d'expression induit par HDB10 est plus proche du profil observé pour le Soligel® désacétylé que celui observé pour HT14. Ces résultats montrent que des modifications de structure (désacétylation et masse molaire) entraînent une modification de la réponse de la plante aux éliciteurs candidats.
Nous avons également testé un autre hétéropolysaccharide appelé MWA qui provient de Burkholderia caribensis souche MWAP71 isolé de micro-aggrégats de la rhizosphère de la Martinique (Vanhaverbeke C, Heyraud A, Achouak W, Heulin T, 2001. Structural analysis of the exopolysaccharide from Burkholderia caribensis strain MWAP71. Carbohydr Res. 334:127-33.). Une légère induction de l'expression de P DF 1.2 est observée à la plus faible concentration (Figure 3B)5 soulignant ici encore que la diminution de la quantité en polysaccharide semble nécessaire pour permettre une élicitation plus efficace.
Ces résultats mettent en évidence l'induction par le Soligel® et ses dérivés des gènes PR-I, PDFl.2 et PAD3 et par MWA du gène PDF1.2 de façon dose dépendante.
II - Propriétés sur Triticum aestivum a. Choix du pathogène.
On regroupe sous le nom de septoriose du blé deux maladies causées par deux champignons cryptogamiques : Stagonospora nodorum et Septoria tritici. Nous avons opté pour l'agent pathogène de la septoriose des feuilles, S. tritici I Mycosphaerella graminicola pathologie principale sévissant dans le nord-est de la France.
En milieu naturel, la principale source primaire de contamination en automne, donc sur des plants de blé au stade 2-3 feuilles, est constituée d'ascopores de la forme sexuée M. graminicola formés sur les chaumes de l'année précédente (Doyle A, 2004. Know your ennemy, the biology of Septoria tritici (www.farmersjournal.ie/cp2004/sept01.pdf). Irish Farmer journal: 5-10). Mais la propagation de la maladie s'effectue par la dispersion de pycnidiospores formés par la forme asexuée S. tritici.
L' élicitation des défenses naturelles des plantes étant une démarche préventive de protection contre les pathogènes, nous avons choisi de sélectionner la phase du pathogène de la septoriose majoritairement à l'origine du démarrage de la maladie c'est-à-dire la forme téléomorphe. Le développement plus rapide de M. graminicola était d'autre part adapté à nos conditions de culture et d'infection. Ainsi la forme sexuée M. graminicola souche CBS 100332 a été choisie. b. Les symptômes de la septoriose.
Lors des premiers essais d'infection des plants par M. graminicola CBS 100332, nous avons observé la présence de différents symptômes décrits dans la littérature (Eyal Z, Scharen AL, HuffmanMDand Prescott JM, 1985. Global insights into virulence frequencies of Mycosphaerella graminicola. Phytopathology, 75 : 1456— 1462 ; Robert C, Bancal MO, Lannou C, Ney B5 2006. Quantification of the effects of Septoria tritici blotch on wheat leaf gas exchange with respect to lésion âge, leaf number, and leaf nitrogen status. J Exp Bot, 57 : 225-234) : la « chlorose » qui se traduit par un palissement du limbe de la feuille sous la forme d'une tache ou plus étendu à toute la feuille, la « nécrose » qui se manifeste par une tache jaune-brun-marron (selon l'âge de la nécrose) qui est le plus souvent peu étendue et délimitée, la présence des « pycnides caractérisée par la présence de petits points noirs en relief et qui sont observés tardivement.
Cependant lors des essais d'infection de M. graminicola, nous avons observé de façon systématique un symptôme non décrit dans la littérature qui se traduit par l'effondrement des feuilles et que nous avons nommé symptôme de « non rigidité ».
Les indices d'infection pour un symptôme sont calculés en effectuant pour chaque plant (9 à 12 plants indexés par traitement) le rapport entre le nombre de feuilles présentant ce symptôme et le nombre total de feuilles. Pour chaque condition, au moins deux expériences indépendantes ont été réalisées.
Lors des essais, nous avons mis en place une condition « témoin » où l'élicitation a été simulée par vaporisation d'eau sur les feuilles de blé avant d'infecter les plants par le pathogène et une condition dite de « référence » pour laquelle des plants de blé qui n'ont subi ni élicitation ni infection par M. graminicola (SESP, sans éliciteur et sans pathogène) sont cultivés dans des boîtes dans les mêmes conditions que les plants infectés. Ce traitement nous a permis d'évaluer l'impact des conditions de culture et du stress abiotique (conditions fortement humides) sur le développement des plants de blé.
c. Effets des éliciteur s candidats sur la protection du blé contre Mycosphaerella graminicola 1) Effet du Soligel® et du moût de fermentation du Soligel® sur la protection du blé contre M. graminicola
Le Soligel® et le moût ont été testés à différentes doses comme éliciteurs potentiels et pour leur capacité à induire chez le blé une protection contre M. graminicola. L'effet éliciteur des traitements candidats à été comparé à des traitements par de l'eau ou de PIodus40 (Goëmar®) un éliciteur commercial à base de laminarine, préconisé chez le blé.
Les plants de blé au stade deux feuilles ont été traités avec le Soligel® (37 g.ha"1 ; 3,7 g.ha"1,), du Iodus40 (37 g.ha'1 ; 3,7 g.ha"1), du môut de fermentation du Soligel® (à une concentration équivalente en EPS de 1,86 g.ha"1 ; 0, 37 g.ha"1 ; 0,037 g.ha"1) ou de l'eau puis sept jours post-traitement ils ont été infectés avec la souche M. graminicola CBS 100332.
Les indices d'annotation du symptôme de nécrose pour les différents traitements en fonction du temps sont représentés en Figure 4 et 5. Nous observons que quinze jours après le challenge, les plants traités par le Soligel® aux trois concentrations testées (37 g-ha"1 ; 3,7 g.ha"1 ; 0,37 g.ha"1) montrent 40 à 78% de feuilles nécrosées en moins que les plants traités par de l'eau. Vingt-un jours après infection, seul Soligel à 37 g.ha"1 permet de réduire de 20% l'indice de feuilles nécrosées par rapport au traitement eau. L'application du Iodus40® à 37 g.ha"1 entraîne de façon transitoire 25% de feuilles nécrosées en moins que le traitement eau quinze jours après le challenge.
Le moût de fermentation du Soligel à 1,86 et 0, 37 g-ha"1 de polysaccharide n'entraîne pas de protection contre le pathogène 15 jours après challenge mais il permet 21 jours après le challenge de maîtriser la propagation de la maladie de façon à observer 30% de feuilles nécrosées en moins que le témoin eau (Figure 5).
De façon similaire à l'étude sur Arabidopsis thaliana, le Soligel montre une capacité élicitrice en protégeant le blé contre M. graminicola. Cependant cette protection est transitoire.
2) Formulation des éliciteurs candidats
La feuille de blé est constituée d'une couche de cire qui la rend très hydrophobe et entraîne le roulement des gouttes de solutions aqueuses vaporisées à sa surface. Le Soligel® est un polysaccharide présentant des propriétés de viscosité et d'adhésion. Afin de mettre en évidence l'impact de la concentration en polysaccharide sur l'adhésion des solutions de Soligel® aux feuilles de blé, nous avons comparé la rétention foliaire d'une solution de Soligel® à 0,4 g.l Λ et à 1,5 g.l "ι à celle de l'eau.
L'analyse de la variance montre que la rétention foliaire de l'eau (0,40 mg.g"1) et celle du Soligel® à 0,4 g.l ~ι (0,46 mg.g"1) ne sont pas significativement différentes (p > 0,05) mais présentent un écart significatif avec la rétention foliaire du Soligel® à 1,5 g.l"1 (0,70 mg.g"1) (p < 0,05). Ces résultats montrent que le Soligel® ne présente pas de propriétés d'adhésion à des concentrations de polysaccharide inférieures ou égales à 0,4 g.l"1.
Dans les expériences d'élicitation des plants de blé, la plus forte dose testée, 37 g.ha"1, est obtenue par vaporisation d'une solution de Soligel® à 12 mg.l"1. À cette concentration, le Soligel® devrait présenter la même rétention que l'eau. Afin d'augmenter l'adhésion du Soligel® à la surface de la feuille, augmenter le temps de contact et potentialiser l'effet de la molécule, nous avons cherché à le formuler avec différents adjuvants.
Nous avons donc réalisé des essais de formulations sur une gamme de concentrations allant de 1,5 mg.l Λ (0,28 g.ha"1) à 1,5 g.l"1 (283,5 g.ha'1).
Différents tensioactifs de la famille des polyglycosides d'alkyle (APG) ont été choisis: S L'agrisurfactant S810®, produit par ARD, qui est un polyglycoside d'alkyle synthétisé à partir de son de blé (70% de glucose et 30% de pentose) et d'alcools capriques et capryliques d'origine végétale avec 8 à 10 carbones dans la chaîne carbonée, S L'agrisurfactant FxlO12® plus, fabriqué également par ARD, qui un polypentoside d'alkyle C 10/Cl 2 comportant 10 à 12 carbones dans la chaîne carbonée, S Agrimul PG2067® (Cognis) qui est un polyglycoside d'alkyle à base glucose, avec 8 à 10 carbones dans la chaîne carbonée, et commercialisé comme adjuvant de produit phytosanitaire, S L' APP C8/C10®, produit par ARD au laboratoire à partir de l'hydrolyse de la paille, qui est composé exclusivement de xylose avec 10 carbones dans la chaîne carbonée, Pour ces essais de rétention foliaire, les concentrations en Soligel® sont 1,5 mg.l"1, 0,4 g.l'1 , 1,5 g.l"1 et les concentrations en adjuvants de 0 à 1 g.l"1.
La figure 6 représente les valeurs de rétention foliaire sur feuilles de blé du Soligel® à différentes concentrations en fonction de la nature et de la concentration en adjuvant.
Tous les tensioactifs testés permettent à 0,6 g.l"1 d'améliorer significativement la rétention foliaire du Soligel® à 0,4 et 0,00015 g.l"1. L'agrisurfactant S810® permet d'augmenter significativement la rétention foliaire du Soligel® même à la concentration la plus élevée (1,5 g.l"1). À la plus faible concentration en Soligel® (1,5 mg.l"1), l'addition de tensio actifs tels que ragrisurfactant C810®, l'APP C8/C10® et Agrimul PG2067® accroît la rétention foliaire pour atteindre une valeur limite d'environ 1 mg.g'1.
Ces expériences nous ont permis de sélectionner quatre tensioactifs : l'agrisurfactant C810®, l'APP C8/C10®, l'agrisurfactant 10-12® plus et Agrimul PG2067®.
2) Protection du blé contre Mycosphaerella graminicola par les éliciteurs candidats formulés
Notre hypothèse de départ postulait que l'augmentation de l'adhésion du Soligel® pourrait accroître le temps de contact entre l'éliciteur et la surface de la feuille, potentialiser la réponse de la plante et donc améliorer la protection. Afin de vérifier cette hypothèse, nous avons traité des plants de blé au stade deux feuilles avec une solution de Soligel® à 12 mg.l" (37 g.ha"1) seul ou formulé avec les tensioactifs l'agrisurfactant S810® et l'APP C8/C10® à une concentration de 0,6 g.l"1.
Sept jours post-traitement, les plants ont été infectés avec le pathogène M. graminicola. La figure 7 présente les indices de non rigidité, de formation des pycnides pour les différents traitements 21 jours après challenge.
Dans le cas des tensioactifs, l'agrisurfactant S810® et l'APP C8/C10®, ces tensioactifs utilisés seuls ne diminuent pas l'indice de non rigidité des feuilles et augmentent significativement la formation de pycnides par rapport aux plants témoins, comme si l'ajout de ces tensioactifs favorisait la pénétration et/ou le développement du pathogène. Le Soligel® ne permet pas 21 jours post-challenge de réduire de façon reproductible l'affaissement des feuilles et le développement des pycnides par rapport au traitement eau {cf. figure 4 et 5). 4o
Les formulations Soligel® - l'agrisurfactant S810® ou l'APP C8/C10® permettent de réduire très significativement l'indice de formation de pycnides et le symptôme d'affaissement des feuilles par rapport aux composés pris séparément ou par rapport au traitement témoin. Les tensioactifs S810®, l'APP C8/C10® présentent donc une action synergique avec le Soligel®..
Nos résultats montrent que l'application des tensioactifs S810® et l'APP C8/10® seuls favorise la formation de pycnides, alors qu'en association avec le Soligel® les adjuvants l'agrisurfactant S810® et l'APP C8/C10® présentent une forte synergie qui conduit à une réduction drastique des symptômes de la maladie. Ces adjuvants ont été sélectionnés pour la suite de nos études.
Les premiers essais (Figure 4 et 7) ont montré que 15 jours post-challenge, le Soligel® à 3,7 g.ha"1 ou 37 g.ha"1 diminuent de façon significative et identique le symptôme de « nécrose » par rapport au traitement eau. Par souci de coût, la dose de 3,7 g.ha"1 de Soligel® a été sélectionnée pour la suite de l'étude.
4) Impact de la structure chimique et de la formulation des molécules sur la croissance et la protection du blé contre Mycosphaerella graminicola Les données de la littérature montrent que les propriétés élicitrices sont très dépendantes de la structure chimique dans le cas des composés de type polysaccharides.
Nous avons donc cherché à déterminer l'effet de variations structurales sur la capacité à induire chez le blé une réponse de défense contre M. graminicola, telles que la désacétylation (Soligel® désacétylé), la diminution de la masse molaire par diminution du nombre d'unités répétitives (HT14), ou les deux (HDBlO).
Notons que ces modifications chimiques ont un impact sur les propriétés physicochimiques des composés. La désacétylation diminue les interactions chaînes- chaînes, ce qui se traduit par une diminution de la viscosité des solutions et de la capacité à former des gels (Villain-Simmonet A (1999) Nouveaux polysaccharides bactériens. Structures et propriétés. Doctorat, Université Joseph Fourier, Grenoble) a réduction de masse molaire peut conduire à des composés présentant un comportement rhéologique de gel faible (Dargelas F (2002) Structures et propriétés d'un nouveau polysaccharide bactérien. Nouvelles applications. Doctorat « chimie physique moléculaire et structurale », Université Joseph Fourier). ^
La figure 9 présente l'évolution sur 2 à 4 semaines post-infection, des indices de non-rigidité (9A), chlorose (9B), nécrose (9C) et formation de pycnides (9D) ainsi que le nombre moyen de feuilles par plant pour des plantules élicitées au stade deux- trois feuilles et infectées par M. graminicola 7 jours après.
Par rapport au traitement eau, le Soligel® (3,7 g/ha) améliore significativement les indices de non-rigidité et diminue de façon transitoire la formation de pycnides. Les indices de chlorose et nécrose ne sont pas significativement modifiés.
La désacétylation du polysaccharide multiplie par 2 la proportion de feuilles affaissées, même si l'indice reste très inférieur à celui des plantes traitées par de l'eau, prolonge la durée de protection contre la formation de pycnides mais ne modifie pas les indices de chlorose et nécrose.
La diminution de la masse molaire diminue les indices de chlorose et pycnides, mais n'affecte pas la nécrose.
L'hydrolyse/désacétylation du polysaccharide permet elle d'améliorer les quatre indices de façon significative.
Concernant l'impact sur le développement des plantes, le Soligel® et le Soligel® désacétylé ne présentent pas d'effet sur la croissance tandis que le Soligel® hydrolyse et le Soligel® hydrolysé/désacétylé permettent un accroissement significatif du nombre moyen de feuilles par plant. Notons que le développement de M. graminicola ne modifie pas non plus la croissance des plantes infectées par rapport aux plantes de référence (SESP).
L'ensemble de ces résultats semble montrer que la structure chimique du polysaccharide a un impact sur l'efficacité des molécules à induire chez la plante une capacité à se défendre contre l'infection, et sur la croissance des plantes.
5) Formulation de Féliciteur avec un fongicide
Nous avons étudié des formulations Soligel®/antifongique. Nous avons testé l'Opus (BASF agro) qui est un composé antifongique systémique de la famille des triazoles qui inhibe la synthèse des stérols. L'antifongique a été vaporisé sur les feuilles à la moitié de la dose préconisée par le fournisseur, seul ou en association avec le Soligel® et le Soligel® désacétylé à 3,7 g.ha"1 (Figure 9). ^
L'application du fongicide seul ne modifie pas ou améliore significativement les indices d'infection de « non rigidité », de « chlorose » et de « nécrose » par rapport à l'eau et le Soligel®. Par contre, l'indice d'infection « pycnide » est augmenté lors de l'ajout de l'Opus®.
L'observation des traitements Soligel® + Agrisurfactant S810® et Soligel® désacétylé + l' agrisurfactant S810® montre qu'environ 20% des feuilles présentent le symptôme de « chlorose » alors que l'application de l'Opus® (BASF agro) entraîne l'extension du symptôme de « chlorose » à 45% des feuilles, ceci est également observé dans le cas du Soligel® désacétylé + Opus® .
Dans nos conditions de culture, le fongicide seul, l'Opus® (BASF agro), à demi dose semble être moins efficace que le Soligel® pour les symptômes de « non rigidité » et de « pycnide ».
En revanche l'effet protecteur de la formule fongicide + Soligel® (forme acétylée et désacétylée) paraît plus efficace que le fongicide seul puisque pour l'ensemble des symptômes cette formule présente des indices équivalents à ceux du Soligel®, forme acétylée et désacétylée, additionnée d' agrisurfactant S810®. Ainsi sans être synergiques, les deux produits formulés ne semblent pas antagonistes.
6) Essais en champs
Des essais en champs ont été entrepris lors de la campagne 2007, ils avaient pour objectif de vérifier l'effet protecteur du produit Soligel désacétylé et hydrolyse à 70 et 300 g/ha formulé avec le tensio actif agrisurfactant S810® à 0.06%. L'indexation faite sur F2 et F3 du blé sur la maladie dominante la septoriose montrent :
> l'effet protection pour les deux doses d'éliciteur avec l'augmentation de la pression de la maladie : effets très significatifs des traitements éliciteurs à 70 g/ha (et 300 g/ha sur F3)
> sur F2 : efficacité de l'éliciteur : 43% de réduction de l'infection contre 60% pour l'Opus par rapport au témoin
> Sur F3 : efficacité de l'éliciteur : 29% de réduction de l'infection contre 60% pour l'Opus par rapport au témoin ^ l'effet des différents traitements se retrouvent sur les rendements parcelles qui sont significativement supérieurs pour les parcelles traitées exclusivement à l'Opus et celles traitées avec le Soligel à 70g/ha.
MATERIELS ET METHODES
1) Matériel végétal a) Arabidopsis thaliana
La culture in vitro d'A. thaliana est réalisée en conditions stériles dans des boîtes de culture carrées et translucides (12,5 cm , Gremer®). Les graines sont stérilisées par trempage dans une solution d'hypochlorite de calcium à 2% (p/v), d'éthanol à 95% (v/v) et de Tween20 à 1% (p/v) pendant 5 min avec agitation par retournement à plusieurs reprises. Les graines sont ensuite rincées trois fois avec de l'éthanol à 95% (v/v), séchées à température ambiante sous une hotte à flux laminaire jusqu'à évaporation complète de l'éthanol, puis conservées stérilement à 4°C avant d'être semées. Les graines sont ensuite déposées sur un milieu gélifié et nutritif stérile qui est le milieu Hoagland/2 (Arnon DI, Hoagland DR (1940) Crop production in artificial culture solutions and in soils with spécial référence to factors influencing yields and absorption of organic nutrients. Soil ScL, 50 : 463-483- Tableau I) additionné de Phytagel® à 0,7 g/L. Les boîtes sont fermées par du Micropore® et placées verticalement dans une chambre de culture.
Les plantes sont cultivées sur terreau stérilisé par irradiation en pots de 5,75 cm x 5,75 cm. Une couche de sable grossier est déposée à la surface du terreau pour éviter la formation d'algues. L'arrosage se fait quotidiennement par immersion, avec une alternance de 3 jours d'eau de ville et 1 jour de solution nutritive Coïc-Lesaint (Tableau 1) . L'apport en CO2 est celui des conditions atmosphériques.
Les conditions de cultures en phytotron sont de 14h de jour à 21 °C, sous une intensité lumineuse de 150 μmol de photons.mΛs'1 pour les cultures en boîtes. Pour les cultures en pots, les conditions de cultures en phytotron sont 1Oh de nuit à 18°C, 14h de jour à 210C5 220 μmol de photons.m^.s"1 et 50 à 60 % d'humidité relative. TABLEAU I
- MILIEUX & SOLUTION -
LB (Luria-Bertani) :
Tryptone 10 g.1"1
Yeast extract 5 g.1"1
Agar 15 g.1"1
Eau distillée 1 1
PDB (Potato Dextrose Broth) :
Potato Dextrose Broth 24 ^r1
Eau distillée 1 1
PDB/2 (Potato Dextrose Broth) :
Potato Dextrose Broth 12 g.!"1
Eau distillée 1 1
PAF (Pseudomonas Agar F) :
PAF 38 gX1
Eau distillée 1 1
PDA (Potato Dextrose - Agar) :
Potato Dextrose Broth 24 ^r1
Agar 15 gX1
Eau distillée 1 1
DYAA (Dextrose 1% Yeast extract Asparagine Agar) :
Dextrose 10 g.P
Yeast extract î g-r1
L-asparagine 1,78 g.!-1
K2HPO4 0,38 g.1"1
MgSO4 ,7H2O 0,25 g.1"1
FeCl3 (solution 10%) 0,05 %
Agar 20 g.1-1
Eau distillée 1 1
Hoagland/2 + phytagel 0,7 % (w/v) :
Solutions mères :
Macroéléments
Figure imgf000053_0001
Microéléments 6- H3BO3 572 mg.1'1
MnCl2, 4H2O 362 mg.r1
ZnSO4, 7K2O 50 mg.r1
CuSO4, ^H2O 16 mg.l"1
Na2MoO4, 2 H2O 50 mg.l"1
Solution finale : 1, 2, 3, 4, 5, 6 0,25 %
Eau 1 1 (qsp)
Figure imgf000054_0001
b) Triticum aestivum L. cv. Caphorn
Les plants de Triticum aestivum sont cultivés sur terreau stérilisé par irradiation en pots de 5,75 cm x 5,75 cm. Les graines sont déposées à la surface du terreau préalablement tassé, à raison d'une graine par pot, puis elles sont recouvertes d'une fine couche de terreau et d'une couche de sable grossier afin d'éviter la formation d'algues.
Le schéma de culture que nous avons mis au point est constitué de deux phases distinctes : a. Phase I : les blés sont cultivés et élicités dans une chambre de culture régulée, b. Phase II : les plants sont répartis dans des boîtes étanches et translucides et infectés avec le pathogène de la septoriose.
Lors de la Phase I, l'arrosage se fait quotidiennement par immersion (1 fois par jour ), d'une solution nutritive Coïc-Lesaint (Tableau I). Les conditions en chambre de culture sont de 8h de jour à 190C, sous une intensité 220 μmol de photons.m -'2. „s-"1 , 14h de nuit à 12°C, et 50 à 60 % d'humidité relative. L'apport en CO2 est celui des conditions atmosphériques.
Lors de la Phase II de l'expérimentation, les boîtes sont placées dans les chambres de cultures et sont ventilées par un flux d'air stérile (entrant et sortant) afin d'éviter l'accumulation de COa et de diminuer l'effet de serre. Les blés ont été cultivés avec une photopériode de 8h de jour et 16h de nuit, sous des conditions de lumière de 250 μmol.m^.s"1, dans une atmosphère contenant 360 ppm de CO2 ce qui est équivalent à la quantité de CO2 atmosphérique. La présence d'eau au fond des boîtes permet l'alimentation hydrique des plantes et le maintien d'une forte humidité afin de favoriser le développement de l'infection.
2) Matériel pathogène a) Botrytis cinerea, Pstudomonas syringae, Alternaria brassicicola i. Culture
Botrytis cinerea agrr. est cultivé en boîtes de Pétri sur milieu DYAA, à une température moyenne de 22°C et à la lumière ambiante.
Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 est cultivée en milieu solide PAF puis en milieu liquide LB. il Challenge
Une suspension de spores des champignons A. brassicicola, B. cinerea est préparée en grattant la surface du mycélium d'une culture du champignon sur milieu DYAA en présence d'eau de ville filtrée sur 0,2 μm. Une culture de P. syringae en phase exponentielle de croissance est centrifugée à 1500 g pendant 10 min, lavée par du MgCl2 1 mM et reprise dans 15 ml de MgCl2 1 mM. L'inoculation des différents pathogènes d'_4. thaliana est réalisée 4 à 8 jours après dépôt des éliciteurs candidats, par dépôt de gouttes de 10 μl d'une suspension de 5.105 spores. mi"1 ou 107 bactéries-ml"1 sur le maximum de feuilles. Dans le cas de B. cinerea, l'inoculation a été faite par 1 goutte de 10 μl disposée de part et d'autre de la nervure centrale de la feuille, sur le maximum de feuilles, au niveau de piqûres réalisées à l'aide de la pointe d'un cure dent ou d'une aiguille stériles.
b) Mycosphaerella graminicola Hi. Culture
Mycosphaerella graminicola est cultivé en boîte de Pétri sur milieu DYAA, à une température de 22°C et à la lumière ambiante. Des morceaux de Mycosphaerella graminicola prélevés du tube de la mycothèque sont déposés sur des filtres (Cyclopore® polycarbonate, Whatman®) préalablement stérilisés et posés sur le milieu de culture solide (Figure 54 et 55). Ainsi, 3 semaines après la mise en culture, le filtre portant la culture de Mycosphaerella graminicola est transféré dans du PDB (Difco®, Tableau I). La culture est placée sous agitation par retournement (30 rpm/min) à une température de 220C et à la lumière ambiante pendant une dizaine de jours.
zV. Challenge
L'inoculation est faite avec la culture liquide de M. graminicola. Avant le challenge, la culture est observée au microscope afin d'en vérifier le stade et d'évaluer la quantité de spores libres qui varie LlO4 spores.ml"1 à 1.106 spores.ml"1. Les plants de Triticum aestivum L. sont répartis dans des boîtes translucides (3 à 10 plants par boîtes selon les expériences) avec 1 cm d'eau et infectés par vaporisation d'1 ml de la culture de M. graminicola sur le plant entier afin d'inoculer l'ensemble des feuilles.
Ensuite les boîtes sont fermées et placées dans des cellules de culture sous une intensité lumineuse de 220 μmol de photons.m" .s"1, 8h de jour à 19°C et 14h de nuit à 12°C à l'intérieur les boîtes. Le renouvellement de l'air dans les boîtes est assuré par des pompes à membrane qui s'approvisionnent en air dans les cellules de culture. Des filtres stériles en polycarbonate sont placés sur chaque boîte en entrée et sortie du circuit de ventilation pour éviter les contaminations dans l'enceinte. L'apport en CO2 est celui des conditions atmosphériques.
3) Préparation et application des éliciteurs
Sur Arabidopsis thaliana, les éliciteurs testés sont le Soligel® et ses dérivés, développés par ARD. Les solutions d' éliciteurs sont préparées avec de l'eau de ville (sans chauffage de la solution), stérilisée par filtration sur membrane stérile 0,2 μm, à 3700 mg.l"1, 370 mg.l"1, 12,2 mg.l"1, 1,22 mg.l"1 et 0,12 mg.l"1. Les solutions de contrôles positifs sont l'acide salicylique 5mM (SigmaUltra, > 99%) et le MeJa 50μM (Sigma) préparés avec de l'eau de ville et stérilisée par filtration sur 0,2 μm. L'élicitation des plantes est réalisée 15 jours après semis des graines, par dépôt d'une goutte de 10 μl d'éliciteur candidat sur 2 feuilles opposées de la rosette.
Sur Triticum aestivum L., les éliciteurs testés sont le Soligel® et ses dérivés, formulés ou non formulés, développés par ARD et le Iodus 40 commercial développé par PhytoGoëmar. Les solutions d' éliciteurs sont préparées avec de l'eau de ville stérilisée par fîltration sur 0,2 μm, à 12,2 mg.i"1, 1,22 mg.l"1 et 0,12 mg.l"1. Si l'on rapporte la masse d'éliciteur déposé à un traitement d' 1 l.ha"1, sachant que la surface d'un pot est de 33 cm2 et que l'on applique 1 ml/pot, les concentrations effectives sont de 37 g.ha"1, 3,7 g.ha"1 et 0,37 g.ha"1. Quand l'éliciteur candidat est formulé, un tensioactif (Agrisurfactant S810® ou APP C8/C10, ARD) est additionné à 0,06% p/v.
L'élicitation des plants est réalisée 15 jours après semis des graines, stade 2-3 feuilles (20 sur l'échelle de Zadok), par vaporisation sur le plant entier d'1 ml de la solution d'éliciteur candidat.
Les plantes témoins ont été traitées selon le même protocole avec de l'eau distillée ou de l'eau de ville stérilisées par filtration sur 0,2 μm.
4) Méthodologie pour la rétention foliaire.
Les solutions testées sont additionnées d'un colorant bleu : le Chicago Sky Blue 6B (Acros Organics®) à 0,4 %. Deux heures après la pulvérisation (à l'aide d'un pulvérisateur mécanique muni d'une buse de pulvérisation agricole permettant de délivrer 189 l.ha"1), les parties aériennes des plantes sont coupées et «lavées» par agitation à la main (retournement/agitation dans la solution 30 fois pendant 30 secondes) dans 50 ml de Triton X100 (Acros Organics®) à 0,25%. La solution de lavage est récupérée et la lecture de la Densité Optique est effectuée à 618 nm afin de doser la concentration de colorant dans les solutions de lavage. Les parties aériennes coupées sont ensuite placées à 104°C, les matières sèches sont obtenues après 48 h.
Les résultats sont exprimés en mg de colorant retenu par gramme de masse sèche. L'efficacité est calculée en considérant la masse de colorant retenu par gramme de biomasse telle que défini précédemment sur la masse de colorant pulvérisée par gramme de biomasse.
Un traitement statistique est réalisé sur les moyennes des trois répétitions à l'aide de l'analyse de variance (ANOVA) avec un niveau de significativité de 0,05 à l'aide du logiciel libre KyPlot. 5?
5) Test d'inhibition de la croissance des pathogènes par les éliciteurs
Nous avons testé le pouvoir potentiel d'inhibition de croissance des éliciteurs sur les pathogènes utilisés chez A. thaliana, P. syringae, B. cinerea et A. brassicicola.
L'effet des éliciteurs sur la croissance de P. syringae , B. cinerea et A. brassicicola a été observé sur milieux géloses PAF pour Pseudomonas syringae et DYAA pour les deux autres pathogènes (Tableau I). Des spots de lOOμl des molécules testés, Soligel® et/ou le moût bactérien de Rhizobium sp. YAS34 à différentes concentrations ou eau stérile, ont été déposés sur les milieux. Après séchage, soit lOOμl d'une solution de P. syringae est déposée sur les spots des molécules testées, soit lOOμl d'une solution de champignons, B. cinerea ou A. brassicicola, est déposée au centre de la boîte. Les boîtes sont incubées à 300C pour P. syringae et en alternance jour-nuit à 20-23 °C pour B. cinerea et A. brassicicola. Le développement de P. s syringae sur un spot d'éliciteur ou sur de l'eau est évalué 72h après le dépôt, alors que l'observation de la croissance de B. cinerea et A. brassicicola est faite après une semaine de croissance.
6) Indexation de la protection des plantes contre les pathogènes a) A. thaliana
L'indice de protection des plantes par les différents éliciteurs est déterminé au niveau macroscopique 3 et 8j post-challenge. Les feuilles présentant des symptômes d'infection (chlorose, nécrose) ou les feuilles saines sont dénombrées par rapport au nombre de feuilles total. L'indice de protection est calculé en faisant le rapport des feuilles saines sur le nombre total de feuilles.
L'analyse statistique de la variance de l'indice d'infection est réalisée par le logiciel STATGRAPHICS Plus (Stat Point, Inc., USA).
b) Triticum aestivum L. cv. Caphorn Expériences en conditions de laboratoire.
Chaque plant de blé est indexé selon la formule suivante sur le nombre total de feuilles du plant, le nombre de feuilles présentant un symptôme « non rigidité », le nombre de feuille présentant un symptôme « chlorose », le nombre de feuilles présentant un symptôme « nécrose », le nombre de feuilles présentant un symptôme 3o
« pycnide ». Puis des indices pour chaque symptôme sont calculés selon la formule suivante :
Nombre de feuille avec symptôme « x » Indice symptôme « x » -
Nombre total de feuille
Par ailleurs, nous exploitons le nombre total de feuilles par plant et nous l'analysons en effectuant une moyenne par traitement. Ainsi nous obtenons un nombre moyen de feuilles par plant qui nous permet de caractériser le développement du blé.
L'analyse statistique de la variance pour chaque indice d'infection et pour l'estimation du nombre moyen de feuilles par plant est réalisée par le logiciel STATGRAPHICS Plus (Stat Point, Inc., USA).
Expériences en champ.
L'indexation de la maladie consiste à attribuer, pour chaque feuille, un pourcentage représentant l'étendue de la maladie sur la feuille en pourcentage d'aire.
La note maximale indiquant une contamination complète déclenchant le dessèchement et par la suite la mort de la feuille est de 100%. L'indexation est faite par au moins deux personnes.
7) Analyse de la réponse i) Extraction d'ARN totaux
Pour chaque concentration d'éliciteurs candidats et chaque temps de prélèvement (24h, 48h et I)), les parties aériennes de 5 à 10 plantules à" A. thaliana sont récoltées, immédiatement immergées dans de l'azote liquide et réduites en poudre dans un mortier en présence d'azote liquide. Les ARNs sont extraits à partir de 100 à 300 mg de tissus foliaires par la technique au Trizol® (Invitrogen, Life Technologies). Le Trizol® est une solution contenant du phénol et de l'isothiocyanate de guanidine permettant l'extraction en une seule étape des ARNs totaux à partir de cellules ou de tissus. L'addition de chloroforme suivie d'une centrifugation sépare la solution en une phase aqueuse, contenant les ARNs, et une phase organique. Les ARNs sont précipités par de l'isopropanol. Le culot d'ARNs est ensuite lavé à Péthanol 75% (v/v) à -20°C puis, après centrifugation, repris dans 25 μl d'eau DEPC (Diethyl pyroçarbonate, Sigma®). Les ARMs ainsi obtenus sont ensuite soumis à un traitement à la DNase I (kit DNA-free™, Ambion) pour éliminer une contamination par de l'ADN. Afin d'éliminer les traces de polysaccharide, de phénol, d'isothiocyanate de guanidine, et d'isopropanol les ARNs sont purifiés et concentrés par dépôt sur une colonne (Kit RNeasy MinElute Cleanup, Qiagen®) et sont élues dans 14 μl d'eau RNase Free.
Afin de s'assurer de l'absence d'ADN dans nos échantillons, 1 μl de chaque solution d' ARN est utilisé pour réaliser une PCR avec les amorces du gène EFl -a ou UBQ5 avec les conditions d'amplification mentionnées dans le tableau IL Les amplifiats (5 μl) sont déposés sur un gel d'agarose 2,0% dans un tampon TBE IX. La migration s'effectue sous 100V. Après confirmation de l'absence de produit d'amplification, la qualité et la quantité des ARNs extraits sont caractérisées par spectrophotométrie (biophotomètre Eppendorf®). L'intégrité et la quantité des ARN sont vérifiées en condition dénaturante par électrophorèse sur gel d'agarose 1% en milieu TBE IX.
TABLEAU II
gène N° amorces PCR taille produit taille produit T° hybridation d'accession PCR (pb) PCR (pb) (0C) si ADNc si ADNg
PR-I At2gl4610 5'-GTAGGTGCTCTTGTTCTTCCC-S' 420 pb 420 pb 58 5'-CACATAATTCCCACGAGGATC-3'
PDFl.2a At5g44420 5'-CTAAGTTTGCTTCCATCATC-3' 210 pb 304 pb 55 5'-GTGCTGGGA Λ GACATAGTTG-3 '
PADS At3g26830 5'-GACAATCTCCGGTGAATCTTG-31 472 pb 570 pb 58 5'-CTGATCAGCTCGGTCATTCCC-3'
EF-Ja At5g60390 5'-GTGAGCACGCTCTTCTTGCT-31 458 pb 558 pb 58 5'-GAGACTCGTGGTGCATCTCA-3'
UBQS At3g62250 5'-GTGGTGCTAAGAAGAGGAAG-31 253 pb 253 pb 55 5'-GATCAÀGCTTCAACTCCTTCT-3'
ii) L'ADNc étudié
L'expression de gènes, décrits comme impliqués dans les réactions de défense à l'attaque d'un pathogène ainsi que de gènes témoins d'expression, a été analysée à l'aide de la Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). La synthèse du premier brin d'ADNc est réalisée dans un volume final de 20 μl à partir d'1 à 1,5 μg d'ARN en utilisant le Kit Omniscript (Qiagen®). L'eau RNase-free est supplémentée par 2 μl de tampon de réaction, 2 μl d'un mélange de dNTP (à une concentration finale de 20 mM de dATP, dGTP, dTTP et dCTP), 2 μl d'une solution d'oligodT18 à 10 μM, 4 U de transcriptase inverse Omniscript et 10 U d'inhibiteur de RNase (RNase Inhibitor, Promega®). L'ADNc simple brin est synthétisé à 37°C pendant 60 min.
iii) PCR semi-quantitative
Les ADNcs simple brin synthétisés sont utilisés comme matrice pour amplifier des gènes connus, grâce à des amorces spécifiques. Au préalable, une normalisation de ces matrices avec un gène présentant une expression constitutive (EFi -a et UBQ5) est nécessaire. Choix du nombre optimal de cycle
Deux μl d'ADNc, à la dilution 1/8, sont amplifiés par PCR. Le mélange réactionnel de 25 μl est composé de 2,5 μl tampon PCR 1OX, 0,5 μl de dNTP 20 mM (5 mM de chaque dNTP), Iμl de chaque amorce PCR à 10 μM et 1,25 unités de Taq polymérase (Sigma). Les conditions d'amplifications sont les suivantes : n cycles de 1min à 94°C, 45 sec à 58°C et 1 min à 72°C. Le nombre optimal n de cycles d'amplification pour chaque échantillon est déterminé en analysant 5 μl du mélange réactionnel après 24, 26, 28 et 30 cycles par électrophorèse sur gel d'agarose 2% de sorte que l'amplification soit dans la phase exponentielle. La quantification de l'intensité des bandes est réalisée sur la photographie du gel d'agarose à l'aide du logiciel ImageJ (http://rsb.info.nih.gov/ij/). Le nombre de cycle n choisi est identique pour tous les échantillons et se situe dans la phase exponentielle. Choix de la dilution optimale
Au nombre de cycle n choisi, lorsque les produits présentent des niveaux d'amplifications différents, la matrice la plus forte est diluée afin que tous les produits d'amplifications présentent des intensités identiques. Ainsi 2 μl des ADNc dilués, de 1A (matrice la plus faible) à 1/160 (matrice la plus forte) sont amplifiés par PCR au nombre n de cycle choisi précédemment et dans les mêmes conditions. Une analyse des gels d'agarose à l'aide du logiciel ImageJ permet de choisir la dilution pour laquelle les produits d'amplification sont de même intensité ; c'est l'étape de normalisation.
Une fois les matrices normalisées, différentes amplifications sont réalisées par PCR en utilisant les amorces spécifiques de chaque gène étudié pour un nombre optimal de cycles et aux dilutions optimales choisies pour chaque matrice.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'un composé d'unité répétitive de formule (I) suivante :
(A)1-B-C (I) dans laquelle :
- i représente 0 ou 1 ;
- A représente un sucre uronique, notamment un acide glucuronique ou mannuronique,
- B représente 1, 2 ou 3 motifs glucose, l'un au moins des motifs glucose étant éventuellement substitué, notamment par au moins un motif galactose, le cas échéant par au moins un motif galactose comprenant le cas échéant un groupe pyruvate,
- C représente un motif galactose ou un 6-déoxy-2-épimère du galactose, tel que le 6-déoxy-L-talose, le cas échéant substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2~ ulosonique et/ou par au moins un groupement acétate, la liaison entre le groupe A et le groupe B étant de type 1 -» 4 la liaison entre le groupe B et le groupe C étant de type 1 — > 1 ou 1 -» 4, lesdits motifs A, B et C susmentionnés pouvant le cas échéant être substitués par au moins un groupement acétate, en tant qu'éliciteur des défenses naturelles des plantes contre les pathogènes fongiques et/ou viraux et/ou bactériens.
2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que i est égal à 1.
3. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que C représente un motif galactose, ledit motif galactose étant le cas échéant substitué par au moins un groupement acétate.
4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que B représente :
- un motif glucose non substitué par un motif galactose, ledit motif glucose étant le cas échéant substitué par au moins un groupement acétate, ou
- trois motifs glucose, l'un au moins de ces trois motifs étant éventuellement substitué par au moins un motif galactose.
5. Utilisation selon la revendication 4, caractérisée en ce que B représente un motif glucose non substitué par un motif galactose, ledit motif glucose étant le cas échéant substitué par au moins un groupement acétate.
6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l'unité répétitive du composé est la suivante :
Figure imgf000063_0001
dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent, indépendamment les uns des autres, H ou un groupe acyle comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, notamment un groupe acétyle.
7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l'unité répétitive du composé est la suivante :
Figure imgf000063_0002
8. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que B représente trois motifs glucose, l'un au moins de ces trois motifs étant éventuellement substitué par au moins un motif galactose.
9. Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que les motifs glucose sont reliés entre eux par des liaisons de type 1 -> 4 et/ou 1 -» 6.
10. Utilisation selon la revendication 8 ou 9, caractérisée en ce qu'un seul motif glucose est substitué par au moins un motif galactose.
11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, caractérisée en ce que B représente le motif suivant :
dans le
Figure imgf000064_0001
moins un motif galactose.
12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, caractérisée en ce que B représente le motif suivant :
Figure imgf000064_0002
13. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 et 8 à 12, caractérisée en ce que l'unité répétitive du composé est la suivante :
Figure imgf000064_0003
14. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que i est égal à 0.
15. Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que B représente deux motifs glucose.
16. Utilisation selon la revendication 15, caractérisée en ce que les motifs glucose sont reliés entre eux par une liaison de type 1 —» 4.
17. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 14 à 16, caractérisée en ce que C représente le 6-déoxy-L-talose, substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct- 2-ulosonique et par au moins un groupement acétate.
18. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 17, caractérisée en ce que l'éliciteur est utilisé en association avec au moins un agent tensioactif.
19. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 17, caractérisée en ce que l'éliciteur est utilisé en association avec au moins un agent tensioactif, et avec au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance.
20. Utilisation selon la revendication 18 ou 19, caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et le composé de formule (I) varie d'environ 1 à 10 000.
21. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 18 à 20, caractérisée en ce que l'agent tensioactif est choisi parmi :
- les tensioactifs mouillants, ioniques ou non, notamment ceux de la famille des organosiliconés, ceux de la famille des organofluorés, les polyglycosides d'alkyle ou APG, les alcools éthoxylés en C8 à C18, les alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C16, les aminés grasses éthoxylées, les tristyryl phénol éthoxylés, les sucroesters, les sulfates d'alcools en C8 à Cl 8, les alkyl benzène, toluène ou xylène sulfonates, les sulfates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et les phosphonates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et fi5
- les tensioactifs émulsionnants, tels que les APG contenant 14 à 22 atomes de carbone sur la chaîne alkyle, les alcools gras éthoxylés et les acides gras éthoxylés, les huiles de ricin éthoxylés, les esters de sorbitan éthoxylés ou non éthoxylés, les alkylaryles éthoxylés et propoxylés, les copolymères ethoxy-propoxylés, les esters phosphatés d'alkylaryle polyoxyéthylène glycol, les alkylaryles sulfonates et les lignines sulfatés.
22. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 18 à 21, caractérisée en ce que réliciteur est utilisé en association avec un composé supplémentaire ou un mélange de composés supplémentaires, ledit composé supplémentaire étant choisi parmi :
- un solvant organique ou une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou l'oléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl-éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25.
23. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 22 d'une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17, et
- au moins un agent tensioactif, ,,
66
ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
24. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 23 d'une composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17,
- au moins un agent tensioactif, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
25. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 24 d'une composition caractérisée en ce que l'agent tensioactif est choisi parmi :
- les tensioactifs mouillants, ioniques ou non, notamment ceux de la famille des organosiliconés, ceux de la famille des organofluorés, les polyglycosides d'alkyle ou APG, les alcools éthoxylés en C8 à Cl 8, les alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C 16, les aminés grasses éthoxylées, les tristyryl phénol éthoxylés, les sucroesters, les sulfates d'alcools en C8 à C18, les alkyl benzène, toluène ou xylène sulfonates, les sulfates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C16, et les phosphonates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et
- les tensioactifs émulsionnants, tels que les APG contenant 14 à 22 atomes de carbone sur la chaîne alkyle, les alcools gras éthoxylés et les acides gras éthoxylés, les huiles de ricin éthoxylés, les esters de sorbitan éthoxylés ou non éthoxylés, les alkylaryles éthoxylés et propoxylés, les copolymères ethoxy-propoxylés, les esters phosphatés d'alkylaryle polyoxyéthylène glycol, les alkylaryles sulfonates et les lignines sulfatés.
26. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 25 d'une composition comprenant en outre :
- au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou ,_
67
l'oléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropfopane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25.
27. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 23 à 26, dans laquelle l'agent tensioactif est un agent tensioactif mouillant.
28. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 23 à 26, dans laquelle l'agent tensioactif est un agent tensioactif émulsionnant.
29. Composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17, et
- au moins un agent tensioactif mouillant, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif mouillant et l' éliciteur varie d'environ 1 à 600.
30. Composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17, et
- au moins un agent tensioactif émulsionnant, sous réserve que ledit agent tensioactif émulsionnant soit différent du mono ou d'oligoglycéride d'acide caprique éthoxylé ou caprilique éthoxylé, β8
ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif émulsionnant et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
31. Composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17,
- au moins un agent tensioactif mouillant, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif mouillant et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
32. Composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17,
- au moins un agent tensioactif émulsionnant, sous réserve que ledit agent tensioactif émulsionnant soit différent du mono ou d'oligoglycéride d'acide caprique éthoxylé ou caprilique éthoxylé, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif émulsionnant et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
33. Composition selon l'une des revendications 29 ou 31, comprenant en outre :
- au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou Poléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- ^
éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25.
34. Composition selon l'une des revendications 30 ou 32, comprenant en outre :
- au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou Poléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-siloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
- au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25.
35. Composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17, sous réserve que :
* soit i représente 0,
* soit B représente 1 ou 2 motifs glucose, l'un au moins des motifs glucose étant éventuellement substitué, notamment par au moins un motif galactose, le cas échéant par au moins un motif galactose comprenant le cas échéant un groupe pyruvate,
* soit C représente un motif 6-déoxy-2-épimère du galactose, tel que le 6- déoxy-L-talose, le cas échéant substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et/ou par au moins un groupement acétate,
* soit la liaison entre le groupe B et le groupe C étant de type 1 -» 1 ou 1 → 4,
- au moins un agent tensioactif, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
36. Composition comprenant :
- un éliciteur d'unité répétitive de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 17, sous réserve que :
* soit i représente 0,
* soit B représente 1 ou 2 motifs glucose, l'un au moins des motifs glucose étant éventuellement substitué, notamment par au moins un motif galactose, le cas échéant par au moins un motif galactose comprenant le cas échéant un groupe pyruvate,
* soit C représente un motif 6-déoxy-2-épimère du galactose, tel que le 6- déoxy-L-talose, le cas échéant substitué par l'acide 3-déoxy-D-manno-oct-2-ulosonique et/ou par au moins un groupement acétate,
* soit la liaison entre le groupe B et le groupe C étant de type 1 -» 1 ou 1 → 4,
- au moins un agent tensioactif, et
- au moins une molécule phytosanitaire notamment choisie parmi les composés suivants : un fongicide, un insecticide, un herbicide et un régulateur ou stimulateur de croissance, ladite composition étant caractérisée en ce que le rapport massique entre l'agent tensioactif et l'éliciteur varie d'environ 1 à 600.
37. Composition selon la revendication 35 ou 36, caractérisée en ce que l'agent tensioactif est choisi parmi : - les tensioactifs mouillants, ioniques ou non, notamment ceux de la famille des organosiliconés, ceux de la famille des organofluorés, les polyglycosides d'alkyle ou APG, les alcools éthoxylés en C8 à Cl 8, les alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, les aminés grasses éthoxylées, les tristyryl phénol éthoxylés, les sucroesters, les sulfates d'alcools en C8 à C 18, les alkyl benzène, toluène ou xylène sulfonates, les sulfates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à C16, et les phosphonates d' alkyl-phénol éthoxylés en C8 à Cl 6, et
— les tensioactifs émulsionnants, tels que les APG contenant 14 à 22 atomes de carbone sur la chaîne alkyle, les alcools gras éthoxylés et les acides gras éthoxylés, les huiles de ricin éthoxylés, les esters de sorbitan éthoxylés ou non éthoxylés, les alkylaryles éthoxylés et propoxylés, les copolymères ethoxy-propoxylés, les esters phosphatés d'alkylaryle polyoxyéthylène glycol, les alkylaryles sulfonates et les lignines sulfatés.
38. Composition selon l'une quelconque des revendications 35 à 37, comprenant en outre :
— au moins un solvant organique ou au moins une huile choisi parmi : les huiles végétales, les esters d'acides gras végétaux comme l'ester méthylique de colza ou l'oléate de méthyle, les huiles minérales comme les huiles paraffines ou le white spirit, les huiles aromatiques d'origine pétrolière, le xylène, les alcools, les cétones, le DMF, la N-méthyl pyrrolidone, la N-octyl pyrrolidone et les dérivés chlorés tels que le monochlorobenzène, et/ou
- au moins un polymère ou mélange de polymères choisi parmi : les copolymères oxydes de polydiméthyl-îiloxane-alkylés, les polymères blocks de phényl- éthoxylé/propoxylé alkylés, les polyvinyl-pyrrolidones alkylés, les gommes de xanthane, les carboxyméthylcelluloses et les alginates, et/ou
— au moins un agent conservateur choisi parmi : les esters méthylique, éthylique, propylique et butylique de l'acide p-hydroxybenzoïque, le benzoate de sodium, le 2- bromo-2-nitropropane-l,3-diol (tel que le Bronopol® de BASF), les isothiazolones (tel que le KATHON® CG de Rohm et Haas) ou tout agent chimique évitant la prolifération bactérienne ou des moisissures, et/ou
- au moins un antimousse choisi parmi les polysiloxanes SE2, SE9 ou SE25. ?2
39. Procédé de traitement des plantes, en particulier des vignes et des céréales, notamment du blé ou du colza, pour la potentialisation et la stimulation de leurs défenses naturelles, ledit procédé comprenant l'application, notamment sur les feuilles, d'une composition contenant un éliciteur tel que défini dans la revendication 1.
40. Procédé de traitement des plantes, en particulier des vignes et des céréales, notamment du blé, pour la potentialisation et la stimulation de leurs défenses naturelles, ledit procédé comprenant l'application, notamment sur les feuilles, d'une composition telle que définie dans l'une quelconque des revendications 29 à 38.
PCT/FR2008/001491 2007-10-23 2008-10-23 Nouvelles molecules pour la stimulation des defenses naturelles des plantes, et leurs formulations WO2009090346A2 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0707423A FR2922412B1 (fr) 2007-10-23 2007-10-23 Nouvelles molecules pour la stimulation des defenses naturelles des plantes et leurs formulations
FR0707423 2007-10-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2009090346A2 true WO2009090346A2 (fr) 2009-07-23
WO2009090346A3 WO2009090346A3 (fr) 2010-06-17

Family

ID=39431061

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2008/001491 WO2009090346A2 (fr) 2007-10-23 2008-10-23 Nouvelles molecules pour la stimulation des defenses naturelles des plantes, et leurs formulations

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR2922412B1 (fr)
WO (1) WO2009090346A2 (fr)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019110538A1 (fr) 2017-12-04 2019-06-13 Institut National De La Recherche Agronomique Nouveaux composés et compositions phytopharmaceutiques, leur préparation et leurs utilisations

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2988604B1 (fr) * 2012-03-29 2015-12-18 Soliance Compositions d'oligosaccharides, leur procede de preparation et leurs utilisations
CN115151134A (zh) * 2019-12-02 2022-10-04 米塔玛有限公司 椰枣糖的单独使用或与多酚的混合使用以保护植物免受病原体侵害

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1987006796A1 (fr) * 1986-05-13 1987-11-19 The Australian National University Modification de la reaction de plantes a des micro-organismes
WO1998035993A1 (fr) * 1997-02-12 1998-08-20 Agro Industrie Recherches Et Developpement (A.R.D.) Societe Anonyme Polysaccharide, micro-organisme et procede pour son obtention, composition le contenant et application
WO1998047375A1 (fr) * 1997-04-18 1998-10-29 Laboratoires Goëmar S.A. Procede pour la potentialisation et la stimulation des defences naturelles des plantes
FR2863270A1 (fr) * 2003-12-09 2005-06-10 Ard Sa Polysaccharides, leur procede de preparation et leur utilisation
WO2007042557A2 (fr) * 2005-10-13 2007-04-19 Universite Victor Segalen - Bordeaux 2 Composition pour application phytopharmaceutique pour stimuler les defenses naturelles des plantes

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020177526A1 (en) * 1996-06-13 2002-11-28 Yuguang Chen Insecticidal seed coating

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1987006796A1 (fr) * 1986-05-13 1987-11-19 The Australian National University Modification de la reaction de plantes a des micro-organismes
WO1998035993A1 (fr) * 1997-02-12 1998-08-20 Agro Industrie Recherches Et Developpement (A.R.D.) Societe Anonyme Polysaccharide, micro-organisme et procede pour son obtention, composition le contenant et application
WO1998047375A1 (fr) * 1997-04-18 1998-10-29 Laboratoires Goëmar S.A. Procede pour la potentialisation et la stimulation des defences naturelles des plantes
FR2863270A1 (fr) * 2003-12-09 2005-06-10 Ard Sa Polysaccharides, leur procede de preparation et leur utilisation
WO2007042557A2 (fr) * 2005-10-13 2007-04-19 Universite Victor Segalen - Bordeaux 2 Composition pour application phytopharmaceutique pour stimuler les defenses naturelles des plantes

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019110538A1 (fr) 2017-12-04 2019-06-13 Institut National De La Recherche Agronomique Nouveaux composés et compositions phytopharmaceutiques, leur préparation et leurs utilisations

Also Published As

Publication number Publication date
WO2009090346A3 (fr) 2010-06-17
FR2922412A1 (fr) 2009-04-24
FR2922412B1 (fr) 2011-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1729582B1 (fr) Utilisation des ulvanes comme activateurs des reactions de defense des plantes et de resistance contre des contraintes biotiques ou abiotiques
Hellio et al. Natural marine products with antifouling activities
WO2018234690A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de partie de plante de roquette pour stimuler les défenses de plantes et d&#39;arbres et composition et procédé associés
EP3886585A1 (fr) Nouvelle composition pour la défense des plantes contre des agents pathogènes
Wersal et al. Aquatic plants their uses and risks
WO2009090346A2 (fr) Nouvelles molecules pour la stimulation des defenses naturelles des plantes, et leurs formulations
JP6647042B2 (ja) 寄生性、病原性又は雑草生物系の核酸を含む、前記系の増殖を阻害及び／又は制御するための組成物
WO2007042557A2 (fr) Composition pour application phytopharmaceutique pour stimuler les defenses naturelles des plantes
EP3525593A1 (fr) Procédé d&#39;élicitation d&#39;une plante au moyen d&#39;extraits de champignons macroscopiques comestibles
Muthu-Pandian et al. Marine weeds against fungal phytopathogens-Current agronomical implications and intriguing perspectives for a sustainable future
Semmouri et al. Allelopathy in macroalgae: Ecological principles, research opportunities and pitfalls reviewed
EP3566580B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait ou d&#39;une fraction d&#39;extrait d&#39;algue rouge agarophyte comme éliciteur/stimulateur de défense végétal et application dudit extrait ou de ladite fraction d&#39;extrait
EP3678487B1 (fr) Composition phytopharmaceutique à base d&#39;alkyl pentoside et d&#39;acide nonanoïque et son utilisation en tant qu&#39;herbicide
RU2821581C1 (ru) Комплексное средство для биологической защиты сельскохозяйственных растений
CA2450878A1 (fr) Eliciteur provenant d&#39;extraits de graines de trigonella foenum graecum et son utilisation dans un procede de lutte contre les agents pathogenes de plantes
Saraswati et al. Efficacy of red betel leaf’s (Piper crocatum) chloroform extract as repellent against rice bugs Leptocorisa acuta Thunberg, 1783 (Hemiptera: Alydidae)
Rejiniemon et al. Disease suppression efficacy of Dysoxylum terpenoids against the bacterial sheath light pathogen, Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) on susceptible rice (Oryza sativa L) through induced resistance through biocatalysis
WO2021110648A1 (fr) Utilisation de saccharides de dattes seuls ou en melange avec des polyphenols pour proteger les plantes contre des pathogenes
Waisen The effect of spirotetramat applied against reniform nematode, Rotylenchulus reniformis, on pineapple, Ananas comosus, and tomato, Solanum lycopersicum
이주욱 Toxicity assessment of eight antifouling booster biocides on spore and female gametophyte of brown alga Undaria pinnatifida
de Freitas Proença et al. Curcumin and carvacrol co-loaded zein nanoparticles: Comprehensive preparation and assessment of biological activities in pest control
Hamed et al. Assessment of nematicidal efficacy of some biomaterials against Meloidogyne incognita on eggplant (Solanum melongena L.)
EP4117439A1 (fr) Composition phytosanitaire comprenant des ulvanes et du silicium
WO2024033576A1 (fr) Produit de biocontrole a partir de coproduit de poireau
FR2721174A1 (fr) Extrait de rehmannia glutinosa, composition protectrice contre le paraquat et procédé de traitement.

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 08870998

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 08870998

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2