WO2007082547A1 - Agent de traitement de la tuberculose oculaire et procédé de production et d'utilisation de celui-ci - Google Patents

Agent de traitement de la tuberculose oculaire et procédé de production et d'utilisation de celui-ci Download PDF

Info

Publication number
WO2007082547A1
WO2007082547A1 PCT/EA2006/000020 EA2006000020W WO2007082547A1 WO 2007082547 A1 WO2007082547 A1 WO 2007082547A1 EA 2006000020 W EA2006000020 W EA 2006000020W WO 2007082547 A1 WO2007082547 A1 WO 2007082547A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
bis
glutamyl
treatment
glycinate
eye
Prior art date
Application number
PCT/EA2006/000020
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Leonid Andreevich Kozhemyakin
Olga Sergeevna Ketlinskaya
Valentina Mikhailovna Khokkanen
Olga Gennadevna Ionova
Original Assignee
Leonid Andreevich Kozhemyakin
Olga Sergeevna Ketlinskaya
Khokkanen Valentina Mikhailovn
Olga Gennadevna Ionova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Leonid Andreevich Kozhemyakin, Olga Sergeevna Ketlinskaya, Khokkanen Valentina Mikhailovn, Olga Gennadevna Ionova filed Critical Leonid Andreevich Kozhemyakin
Publication of WO2007082547A1 publication Critical patent/WO2007082547A1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • An agent for treating eye tuberculosis a method for its preparation and use
  • the invention relates to medicine, namely to ophthalmology, and can be used in monotherapy and in the complex treatment of active tuberculous chorioretinitis, as well as other diseases of the posterior part of the eye, which are accompanied by changes in pigment epithelium.
  • a limited amount is used in ophthalmic practice.
  • the retina is an intensely aerated and blood-supplying tissue, which creates additional prerequisites for the activation of LP (A. Shvedova, 1986, F.
  • Oxidative stress is considered as a universal unit of cell death that occurs with necrosis, apoptosis, and toxic damage. cell expectations (M. Waips, J. P. Shaw, 2000). In this regard, the search for agents with antioxidant activity and cytoprotective action remains relevant.
  • chorioretinitis The most common causes of chorioretinitis are tuberculosis, syphilis, toxoplasmosis, common infectious diseases (flu, pneumonia, brucellosis, cerebrospinal meningitis), focal infections, eye injury, complicated myopia.
  • Topical treatment consists of subconjunctival, para- or retro-bulbar injections of corticosteroids and broad-spectrum antibiotics in the form of daily injections of dexazone or 0.5-1% emulsion of hydrocortisone with kanamycin (monomycin, lincomycin, gentamicin).
  • Physiotherapeutic treatment is used: electrophoresis with papain for resorption of opacities in the vitreous body, with a 2% solution of calcium chloride, with antibiotics, magnetotherapy to accelerate the resorption of products of inflammation.
  • General treatment includes anti-allergic, anti-inflammatory and specific therapy. If tuberculosis or other etiology of chorioretinitis is detected, specific therapy is added to the treatment.
  • antibiotics In case of acute purulent choroiditis, parenteral administration of broad-spectrum antibiotics is indicated. With insufficient effect, antibiotics can be prescribed orally. A combination of antibiotics with sulfonamides is advisable.
  • biogenic stimulants are used: liquid aloe extract, FiBS, vitreous in the form of subcutaneous injections.
  • liquid aloe extract a) Treatment of chorioretinitis of tuberculous etiology
  • FiBS a) Treatment of chorioretinitis of tuberculous etiology
  • etiotropic chemotherapy up to 9-12 months. Nevertheless, many relapses were noted.
  • phthisiology has scientifically substantiated the transition to a reduction in the duration of treatment with its intensification.
  • I - Isoniazid Teubazid
  • P - Rifampicin Rifadin
  • P - Pyrazinamide C - Streptomycin
  • M - Metazide The number before the designation of the drugs indicates the duration of this phase in months. The number below the letter indicates how many times a week should take the drug.
  • 2 treatment categories of patients are distinguished.
  • 4 chemotherapy drugs are prescribed to patients with severe eye tuberculosis, and 3 chemotherapy drugs to the remaining patients (with moderate forms of the disease).
  • 3 chemotherapy drugs to the remaining patients (with moderate forms of the disease).
  • patients of both categories gorium is recommended to prescribe 2 chemotherapy drugs daily or 3 times a week.
  • local etiotropic chemotherapy should be performed.
  • tuberculostatics that have a toxic effect on the structures of the eyeball, and also taking into account the toxicity of mycobacterium tuberculosis, the state of hypoxia of unaffected MBT cells (Aleksandrova AE, Antonenkova EB, 1998), can lead to complications such as the detachment of pigment and neuroepithelium and secondary retinal dystrophy.
  • Drug treatment of chorioretinal dystrophies and other complications of chorioretinitis of tuberculous etiology includes: antioxidants (emoxipin, tocopherol, histochrome, para-aminobenzoic acid, etc.); biostimulants (taufon, solcoseryl, anabolic steroids); angioprotectors and vasodilators (trental, prodectin, cavinton, dicinone, etc.); anti-sclerotic, nootropic drugs (miskleron, picamilon) [Ustinova E.I., 2002].
  • antioxidants emoxipin, tocopherol, histochrome, para-aminobenzoic acid, etc.
  • biostimulants taufon, solcoseryl, anabolic steroids
  • angioprotectors and vasodilators trental, prodectin, cavinton, dicinone, etc.
  • tuberculosis The significance of immunity in tuberculosis can be illustrated by the following facts. In case of local primary infection during the first week, 50% of macrophages contains tuberculosis mycobacteria, with repeated infection, most bacteria are destroyed rapidly, tuberculosis mycobacteria contains only 3% of macrophages. This pathogen is an optional intracellular parasite and in the body is mainly located in the macrophage phagosomes. This is also due to the fact that mycobacterium tuberculosis synthesize an enzyme that inhibits the fusion of the phagosome with lysosomes.
  • T-lymphocytes The dominant immunocompetent cells in tuberculosis are T-lymphocytes, and the most common mechanism for the manifestation of immunodeficiency is a violation of interclonal relationships due to disorders of T-regulatory influences and the capacity of the cytokine link. T cells proliferating in response to specific mycobacterium antigens secrete lymphokines that activate macrophages to fulfill protective functions.
  • One of the characteristic lesions of the pigment epithelium is dystrophy of the retina. b) Treatment of retinal dystrophy
  • Anticoagulants of direct and indirect action, fibrinolytic, vasodilating, antisclerotic agents, enzymes, co-enzymes, vitamins, angioprotectors, hormones, anabolic steroids, etc. have been widely used in treatment (K. Trutneva, 1976; L. Moshetova, 1977; G. Smolyakova, 1988). A number of authors note the positive effect of the use of anticoagulants, in particular heparin (L. Moshetova, 1977). However, treatment with anticoagulants in old age should be carried out with great care because of the danger of hemorrhagic complications. In the presence of peptic ulcer, hemorrhoids with bleeding, diseases of the liver, kidneys, hypertension, the use of anticoagulants is not recommended.
  • Sex hormones bound estrogens
  • Sex hormones for the elderly and old people should be used with great care, since the senile body may be hypersensitive to them.
  • tissue therapy is widely used - aloe, FIBS, vitreous humor, placental suspension, placental blood, embryonic tissue suspension.
  • FIBS vitreous humor
  • placental suspension placental blood
  • embryonic tissue suspension G. Smolyakova (1988)
  • drugs that affect these processes - phosphaden, etymizole, pyridoxine, as well as anti-kigosh preparations.
  • retinalamine - lyophilized powder for injection which is a complex of polypeptide fractions isolated from the retina of cattle and pigs.
  • Retinalamine affects the state of the blood coagulation system and has an immunomodulatory effect.
  • Antioxidants are widely used for the correction of lipid peroxidation processes.
  • the arsenal of drugs for the treatment of diseases of the posterior eyeball, accompanied by a violation of the pigment epithelium, is currently quite diverse.
  • the objective of this invention is to provide a means for etiopathogenetic therapy of diseases of the posterior part of the eyeball of various etiologies, which has antibacterial and antiviral activity based on immunocorrecting mechanisms, including due to the synthesis of endogenous (intrinsic) interferons; simultaneously having a pronounced cytoprotective effect, due to the activation of cell metabolism, including immunocompetent ones; development of a method for treating the treatment of diseases of the posterior part of the eye, which are accompanied by a violation of pigment ethelium, including active tuberculous chorioretinotes.
  • the technical result of the claimed invention is an energized stable form of bis- ( ⁇ -L-glutamyl) -L-cystinyl-bis-glycinate sodium with retained disulfide bond and a method for its preparation, as well as the development of a new method for the treatment of diseases of the posterior eyeball various etiologies.
  • the integrative result of the biological and pharmacological effects of the claimed invention as a drug for the treatment of diseases the posterior part of the eyeball, accompanied by a violation of the pigment epithelium, is its ability to regulate the ratio of humoral and cellular immunity, as well as the metabolic processes underlying cell proliferation, differentiation and apoptosis. 5
  • a group of inventions is proposed, united by a single inventive concept, namely:
  • Metabolism is the totality of all biochemical reactions that occur in the cells of living organisms.
  • Apoptosis implies a morphologically recognizable form of genetically programmed cell death. By the mechanism of apoptosis, aging cells are removed from the body, cell death is induced during embryogenesis, as well as “repaired” activated immune cells. In the classical definition, apoptosis is thus defined as the physiological suicide of cells.
  • Cytokines are protein regulatory substances produced by immunocompetent cells. The dynamics and content of cytokines determine the nature and characteristics of the course of various, including infectious and allergic, eye diseases.
  • Chorioretinitis is an inflammatory disease of the choroid of the 20 eyes and retina.
  • Retinal (from lat. Retipa - the retina) - related to the inner shell of the eye.
  • the macula is the central area of the retina.
  • NADP-H-dependent reductase system is an enzymatic system that provides the conversion of disulfide glutathione to reduced glutathione due to disruption of the disulfide bond.
  • Catalase is an enzyme that breaks down hydrogen peroxide to release molecular oxygen.
  • Zo EFI - electrophysiological study ERG - electroretinography (from electro-, Latin. Retipa - the retina of the eye and -graphy), a method for studying the function of the organ of vision by registering the bioelectric potentials of the retina resulting from exposure to light on the eye.
  • the graphic record of 5 bioelectric potentials is called an electroretinogram (ERG).
  • the agent indicated in the patent was not optimal from the point of view of preserving the disulfide bond and, therefore, the chemical stability of the drug obtained on the basis of sodium bis- ( ⁇ -L-glutamyl) -L-cystinyl-bis-glycinate glycinate (disulfide glutathione).
  • an agent is proposed - an energized stable form of bis- ( ⁇ -L-glutamyl) -L-cystinyl-bis-glycinate sodium with retained disulfide connection that
  • a method for the production of an energized form of sodium bis- ( ⁇ -L-glutamyl) -L-cystinyl-bis-glycinate which ensures the stability of the formula of disulfide glutathione and its new biological and pharmacological effects. You are based on high biochemical reactivity and tropism for pigment epithelial cells.
  • the authors first demonstrated and substantiated in clinical practice that the use of an energized analogue of disulfide-5 glutathione in the treatment of patients with diseases of the posterior part of the eye with pigmented epithelium in mono mode and in combination with traditional therapy allows to achieve a high therapeutic effect.
  • a method of obtaining an energized form of bis- ( ⁇ -L-glutamyl) -L-cystinyl-bis-glycinate sodium includes: ü - oxidation of the starting compound - reduced glutathione ( ⁇ -L-glutamyl-L-cysteinyl glycine) - sodium carbonate peroxide the presence of a catalase enzyme by stirring an aqueous solution of the starting material and these reagents for 30 minutes at a temperature of 20 ⁇ 30 0 C and pH 8 ⁇ 9;
  • Example 1 The method is illustrated by the following example.
  • Example 1 The method is illustrated by the following example.
  • Reduced glutathione (GSH) in an amount of 1.22 g (8 mmol) was suspended in 5 ml of distilled water and added with stirring 1 ml (8 mmol) of 4N NaOH solution.
  • the resulting clear solution is cooled to a temperature of 18 ⁇ 19 0 C and then 2.8 ml of a 3% solution of sodium carbonate peroxide (additive compound of hydrogen peroxide and Na 2 CO 3 ) are added to the reaction mixture.
  • sodium carbonate peroxide is added small
  • UV ultraviolet irradiation
  • freeze drying of an aqueous solution of the drug is carried out according to the instructions for using the unit for freeze drying.
  • Catalase is a unique enzyme that breaks down hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) with the release of molecular oxygen, which oxidizes reduced glutathione due to sodium carbonate in an alkaline environment.
  • H 2 O 2 hydrogen peroxide
  • Subsequent irradiation of the solution of oxidized glutathione with ultraviolet ensures the formation of new hydrogen bonds between the hydrogen atom of the NH 2 molecule and the oxygen atoms in the molecule of oxidized glutathione (disulfide glutathione).
  • the Ural Federal District provides
  • the claimed drug has unique biological and pharmacological effects, providing immunoregulatory effect, including activation of anti-infectious immunity, normalization of metabolic processes
  • the mentioned biological and pharmacological effects are mainly due to the mechanisms of biochemical and immunological activity of the energetic form of disulfide glutathione due to its positive effect on metabolism and, hence, on the bioenergetics of retinal and vascular membranes of the eye and resident macrophages of eye tissues.
  • Main property The claimed agent is its ability to have a differential effect on normal (stimulation of metabolism, proliferation and differentiation) and mycobacterium tuberculosis (induction of apoptosis) cells.
  • These biological and pharmacological effects led to the high therapeutic efficacy of the drug based on the energetic form of disulfide glutathione as a treatment for diseases of the posterior part of the eye, accompanied by a violation of pigment epithelium, which was demonstrated in the course of clinical studies.
  • the clinical effectiveness of the claimed agent and the method of its use as a pharmaceutical preparation for the treatment of diseases of the posterior part of the eye with pigment epithelium disorders, including active tuberculous chorioretinitis is ensured by the following types of activity of the proposed agent: ⁇ * immunocorrective activity due to the regulation of local immunity, first of all, by activating the function of resident macrophages;
  • the proposed agent is used in the form of parabulbar, subcutaneous and intramuscular injections 1-2 times a day, 0.5 ml of a 1-3% solution; the course of treatment is continued until the disappearance of the symptoms of the disease, but at least 14 days.
  • Intramuscular injection substance reduction (series of 2 experiments) was less effective: despite the fact that the phenomena of exudation and prominence somewhat decreased (l, 8 ⁇ 0.40 / l, 6 ⁇ 0.34 points and 2.0 ⁇ 0.44 / 1, 8 ⁇ 1.6 diopters), the size of the focus remained unchanged (2.2 ⁇ 0.34 DD).
  • Intramuscular injection of a 3% solution of the substance (series of 3 experiments) was less effective than parabulbar administration, but more effective than intramuscular injection of a 1% solution of the substance.
  • the substance in the form of a 1% solution was used in the form of 0.5 ml parabulbar injections daily with a course of 15 procedures against a background of general and local specific ABT (intramuscularly 10% isoniazid solution 6.0 ml, inside pyrazinamide 30 mg / kg body weight, endonasal electrophoresis with 3% isoniazid solution).
  • Patient B. 76 years old, medical history N ° 5896, was in the department from November 4, 2004 to December 5, 2004 with a diagnosis of “High complicated myopia of le- of the eye, myopia of a weak degree of the right eye, secondary chorioretinal dystrophy of both eyes. ”

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Средство для лечения туберкулеза глаз, способ его получения и применения
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и мо- 5 жет быть использовано в монотерапии и в комплексном лечении активных туберкулезных хориоретинитов, а также других заболеваний заднего отдела глаза, которые сопровождаются изменениями пигментного эпителия.
В последние годы отмечается увеличение числа больных с хориорети- нитами различной этиологии, при этом отмечается значительный рост вирус- ιо ных и цитомегаловирусных хориоретинитов, в меньшей степени - бактериальных, токсоплазменных, бруцеллезных, при системных заболеваниях, а также при ВИЧ-инфекции, сифилисе, туберкулезе, различных микст-форм (хориоретиниты смешанной этиологии, например туберкулезный с вирусом простого герпеса и пр.).
15 Довольно часто клиническое течение хориоретинитов различной этиологии отличается длительным и тяжелым воспалительным процессом, сопровождается такими серьезными осложнениями как помутнения и кровоизлияния в стекловидное тело, преретинальные кровоизлияния и геморрагии сетчатки, формирование субретинальных неоваскулярных мембран, витреоре-
20 тинальных шварт. Эти осложнения приводят к снижению зрения, вплоть до слабовидения и слепоты, и стойкой утрате трудоспособности.
Сложность патогенеза специфического процесса хориоретинитов туберкулезной этиологии, недостаточная эффективность этиотропной терапии, рост лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза (МБТ) к основ-
25 ным противотуберкулезным препаратам, стремление максимально сократить сроки лечения, а также избежать осложнений и улучшить качество жизни больных туберкулезом диктует необходимость дальнейшего совершенствования патогенетического направления как во фтизиатрии, так и фтизиооф- тальмологии [Беллендир Э.H., 1986, 2000]. зо В последние годы параспецифический компонент воспаления зачастую преобладает в картине заболевания. При этом клетки, находящиеся в непо- средственной близости к гранулеме, не пораженные МВТ, гибнут вследствие гипоксии, а также токсического влияния противотуберкулезных препаратов.
Проблема эффективного лечения острых хориоретинитов различной
5 этиологии и их осложнений не раз поднималась в отечественной и зарубежной литературе [Александров Е.И. и др., 1995, Полунин Г.C., 2002, Тарасова Л.H., 2001, Устинова E.И., 2002, Хокканен В.М. и др., 1998,1999,2002, E. Ваkkаli M., 2001, Ishihаrа M., 1998, Wаhееb S., 2001], где обсуждается эффективность различных методов лечения, однако, все они, в основном, сводятся ю к своевременному применению антибактериальных средств и кортикосте- роидов для подавления острого воспалительного процесса, а также лечения всевозможных последствий в неактивной стадии. Однако, даже при своевременно начатом лечении площадь поражения остается значительной (в основном за счет зоны перифокальной дистрофии и отслоения пигментного и ней-
15 роэпителия сетчатки).
Воспалительные изменения в хориоидее и сетчатке, ишемия сетчатки вследствие сосудистого стаза при хроническом воспалении приводят к нарушению нормального соединения пигментного эпителия с мембраной Бруха. При этом стимулируется выброс вазопролиферативного фактора, что приво-
20 дит к прорастанию новообразованных сосудов через дефекты мембраны Бруха под пигментный эпителий. В результате хориоидальной экссудации формируется отслойка пигментного эпителия. Нарушение барьерной функции пигментного эпителия ведет к возникновению отслоения нейроэпителия сетчатки [Кацнельсон Л. Ф., 1990]. Развитие субретинальной неоваскулярной
25 мембраны сопровождается ретинальными геморрагиями. Длительно существующее отслоение пигментного эпителия заканчивается формированием фиброваскулярного рубца, что значительно утяжеляет течение заболевания и приводит к значительному снижению зрения [Хокканен B.M., 1998, 2002.]. Ситуация усугубляется токсичностью корд-фактора микобактерий ту- зо беркулеза, который ингибирует дыхание в митохондриях и разобщает окис- лительное фосфорилирование [Александрова A.E.,1998]. Имеются данные о неблагоприятном влиянии на биоэнергетический обмен таких противотуберкулезных препаратов как изониазид, рифампицин, пиразинамид, стрептомицин. Нарушение микроциркуляции введет к тому, что страдает свертываю- 5 щая система крови. В литературе имеются данные о развитии при туберкулезе гиперкоагуляции и усилении фибринолиза. В результате рыхлые сгустки крови, агрегаты фибрина и тромбоцитов закупоривают мелкие сосуды, что ведет к усугублению гипоксии и ацидозу в тканях [Приймак А. А., 1995].
Не последняя роль в этом процессе принадлежит индукции апоптоза, а ю точнее преобладанию клеточной гибели над митозом клеток. При этом клетки сетчатой оболочки, не пораженные микобактериями туберкулеза, начинают гибнуть вследствие гипоксии, токсичности химиопрепаратов, а также токсинов, вырабатываемых МБТ.
В офтальмологической практике используется ограниченное количество
15 средств, способных защитить ткани сетчатой оболочки от воздействия экзогенных и эндогенных факторов. Для местного использования разрешены к применению такие препараты как тауфона 4% раствор и эмоксипина 1% раствор. Однако, учитывая их узкую направленность (препараты применяются при хориоретинальных дистрофиях различного генеза), существует необхо-
20 димость поиска эффективных средств защиты клеток (тканей) от экзогенных и эндогенных факторов, т.е. препаратов сопровождения антибактериальной и противотуберкулезной терапии.
Сетчатка - интенсивно аэрируемая и кровоснабжаемая ткань, что создает дополнительные предпосылки активации ПОЛ (А.Шведова, 1986, F.
25 Воsсh-Моrеll еt аl., 1996). Нарушение баланса между окислительными и ан- тиоксидантными системами приводит к окислительному повреждению белков, нуклеиновых кислот, но прежде всего липидов биологических мембран, которые чрезвычайно легко вовлекаются в цепные свободнорадикальные реакции. Окислительный стресс рассматривается как универсальное звено ги- зо бели клеток, которое имеет место при некрозе, апоптозе, токсических повре- ждениях клетки (М.Ваiпs, J.Р. Shаw, 2000). В связи с этим актуальным остается поиск средств, обладающих антиоксидантной активностью и цитопро- текторным действием.
Чаще всего причинами хориоретинитов являются туберкулез, сифилис, токсоплазмоз, общие инфекционные заболевания (грипп, пневмония, бруцеллез, цереброспинальный менингит), фокальные инфекции, травма глаза, осложненная близорукость.
Местное лечение заключается в подконъюнктивальных, пара- или рет- робульбарных инъекциях кортикостероидов и антибиотиков широкого спек- тра действия в виде ежедневных инъекций дексазона или 0,5-1% эмульсии гидрокортизона с канамицином (мономицином, линкомицином, гентамици- ном). Применяют физиотерапевтическое лечение: электрофорез с папаином для рассасывания помутнений в стекловидном теле, с 2% раствором кальция хлорида, с антибиотиками, магнитотерапию для ускорения рассасывания продуктов воспаления.
Общее лечение включает противоаллергическую, противовоспалительную и специфическую терапию. При выявлении туберкулезной или прочей этиологии хориоретинита к лечению добавляют специфическую терапию.
В случае острого гнойного хориоидита показано парентеральное при- менение антибиотиков широкого спектра действия. При недостаточном эффекте антибиотики можно назначить внутрь. Целесообразно сочетание антибиотиков с сульфаниламидами.
Для лечения последствий хориоидитов применяют биогенные стимуляторы: экстракт алоэ жидкий, ФиБС, стекловидное тело в виде подкожных инъекций. а) Лечение хориоретинитов туберкулезной этиологии До последнего времени пациентам с впервые выявленным туберкулезом глаз традиционно назначался длительный основной курс этиотропной химиотерапии (до 9-12 месяцев). Тем не менее отмечалось немало рецидивов. В последние годы во фтизиатрии научно обоснован переход к сокращению сроков лечения при его интенсификации. Проведенный нами ретроспективный анализ эффективности специфического лечения больных туберкулезом глаз подтвердил возможность клинического излечения за более короткие сроки, хотя, судя по результатам туберкулиновых проб, далеко не у всех больных. По всей вероятности, одновременно необходима интенсификация лечения в связи с появлением резистентных форм микобактерий.
Исходя из этих представлений и учитывая опыт отечественных фтизиатров и рекомендации ВОЗ, предлагаются альтернативные схемы системного и местного этиотропного лечения для впервые выявленных больных туберкулезом глаз (Устинова E.И., 2001).
Figure imgf000007_0001
Примечание. В аббревиатурах: И - Изониазид (Тубазид), P - Рифампи- цин (Рифадин), П - Пиразинамид, С - Стрептомицин, M - Метазид. Цифра перед обозначениями препаратов указывает на продолжительность этой фазы в месяцах. Цифра внизу после буквы указывает, сколько раз в течение недели следует принимать препарат.
В соответствии с тяжестью клинических проявлений выделяют 2 ле- чебные категории больных. В начальной фазе лечения (2 месяца) больным с тяжелыми формами туберкулеза глаз назначается по 4 химиопрепарата, остальным больным (со средними по тяжести формами заболевания) - по 3 химиопрепарата. В фазе продолжения лечения (4 месяца) больным обеих кате- горий рекомендуется назначать по 2 химиопрепарата ежедневно или 3 раза в неделю. Параллельно с системным лечением должна проводиться местная этиотропная химиотерапия.
Однако, использование только туберкулостатиков, обладающих токси- ческим действием на структуры глазного яблока, а также учитывая токсичность микобактерий туберкулеза, состояние гипоксии не пораженных МБТ клеток (Александрова A.E., Антоненкова E.B.,1998), может привести к таким осложнениям, как отслоение пигментного и нейроэпителия и вторичная дистрофия сетчатки. Медикаментозное лечение хориоретинальных дистрофий и других осложнений хориоретинитов туберкулезной этиологии включает в себя: анти- оксиданты (эмоксипин, токоферол, гистохром, парааминобензойная кислота и др.); биостимуляторы (тауфон, солкосерил, анаболические стероиды); ан- гиопротекторы и сосудорасширяющие средства (трентал, продектин, кавин- тон, дицинон и др.); противосклеротические, ноотропные препараты (миск- лерон, пикамилон) [Устинова E.И., 2002]. Однако, вышеизложенные препараты применяются в стадии затихания или в неактивной фазе заболевания как симптоматические средства при уже сформировавшихся осложнениях.
Значимость иммунитета при туберкулезе может быть проиллюстриро- вана следующими фактами. При локальном первичном инфицировании в течение первой недели 50% макрофагов содержит микобактерий туберкулеза, при повторном инфицировании большинство бактерий быстро разрушается, микобактерий туберкулеза содержит только 3% макрофагов. Этот возбудитель - факультативный внутриклеточный паразит и в организме преимуще- ственно находится в фагосомах макрофагов. Это обусловлено еще и тем, что микобактерий туберкулеза синтезируют фермент, ингибирующий слияние фагосомы с лизосомами. Доминирующие иммунокомпетентные клетки при туберкулезе - T- лимфоциты, а наиболее распространенный механизм проявления иммунодефицита - нарушение межклональных взаимосвязей за счет расстройств Т-регуляторных влияний и дееспособности цитокинового звена. Т-клетки, пролиферирующие в ответ на специфические антигены микобакте- рии, секретируют лимфокины, активирующие макрофаги к выполнению защитных функций.
Одним из характерных поражений пигментного эпителия являются дистрофии сетчатки. б) Лечение дистрофий сетчатки
Современные подходы к медикаментозному лечению дистрофий сетчатки направлены на улучшение микроциркуляции и обменных процессов в сетчатке и хориоидее.
Широкое применение в лечении нашли антикоагулянты прямого и непрямого действия, фибринолитические, сосудорасширяющие, антисклеротические средства, ферменты, ко-ферменты, витамины, ангиопротекторы, гормоны, анаболические стероиды и др. (К.Трутнева, 1976; Л.Мошетова, 1977; Г.Смолякова, 1988). Ряд авторов отмечает положительный эффект от применения антикоагулянтов, в частности гепарина (Л.Мошетова, 1977). Однако лечение антикоагулянтами в пожилом возрасте следует проводить с большой осторожностью из-за опасности геморрагических осложнений. При наличии язвенной болезни, геморроя с кровотечением, заболеваний печени, почек, ги- пертонической болезни применение антикоагулянтов не рекомендуется.
При назначении спазмолитических, сосудорасширяющих, гипотензивных средств следует соблюдать осторожность и учитывать уровень не только артериального давления, но и мочевины в крови, так как при нефросклерозе, сморщенной почке средства, понижающие артериальное давление, могут способствовать гиперазотемии. При этом в связи с ухудшением функции почек усиливается также кумулирование различных медикаментозных средств, даже таких, которым это не свойственно. В пожилом и старческом возрасте значительное понижение артериального давления может вызвать тромбоз вен сетчатки. В силу указанных причин при назначении гипотензивных средств лицам пожилого и старческого возраста необходим строго индивидуальный подход.
Предложено также применять половые гормоны (связанные эстрогены), которые предупреждают возможность возникновения кровоизлияний при заболеваниях, сопровождающихся повышенной проницаемостью сосудов. Половые гормоны пожилым и старым людям следует применять с большой осторожностью, так как у старческого организма возможна повышенная чувствительность к ним.
В лечении дистрофических заболеваний сетчатки широко применяется тканевая терапия - алоэ, ФИБС, стекловидное тело, взвесь плаценты, плацентарная кровь, взвесь эмбриональной ткани. Г.Смолякова (1988), учитывая, что одним из этиологических моментов в развитии ЦИХРД может быть нарушение нейрогуморальных процессов, считает целесообразным применение препаратов, влияющих на эти процессы, - фосфадена, этимизола, пиридок- сина, а также антикигошовых препаратов.
А. Днепровская и С.Харинцева (1988) опубликовали первую работу о возможностях применения ретиналамина - лиофилизированного порошка для инъекций, представляющего собой комплекс полипептидных фракций, выделенных из сетчатки глаза крупного рогатого скота и свиней. Ретинала- мин влияет на состояние системы гемокоагуляции и обладает иммуномоду- лирующим действием.
Существует еще множество препаратов, которые применяются для лечения и профилактики дистрофических заболеваний сетчатки, однако стойкого улучшения зрения, как правило, получить не удается. Большинство ав- торов признают, что консервативная терапия эффективна лишь на ранних стадиях процесса и результаты ее нестабильны.
Широкое применение для коррекции процессов перекисного окисления липидов получили антиоксиданты (токоферол). Таким образом, арсенал препаратов для лечения заболеваний заднего отдела глазного яблока, сопровождающихся нарушением пигментного эпителия, в настоящее время достаточно разнообразен.
Тем не менее следует подчеркнуть, что практически отсутствуют сред- ства, позволяющие:
• восстанавливать базисные нарушения в системе взаимоотношений иммунологических и нейротрофических процессов,
• улучшать метаболизм клеток,
• оказывать цитопротекторный эффект,
• корригировать систему местного иммунитета.
Задачей данного изобретения является получение средства для этиопато- генетической терапии заболеваний заднего отдела глазного яблока различной этиологии, обладающего антибактериальной и противовирусной активностью на основе иммунокорригирующих механизмов, в том числе вследствие синтеза эндогенных (собственных) интерферонов; одновременно обладающего выраженным цитопротекторным действием, за счет активации метаболизма клеток, в том числе иммунокомпетентных; разработка способа лечения лечения заболеваний заднего отдела глаза, которые сопровождаются нарушением пигментного этителия, в том числе активных туберкулезных хорио- ретинотов.
Техническим результатом заявленного изобретения является энергизо- ванная стабильная форма биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил-биc-глицинaтa натрия с сохраняемой дисульфидной связью и способ ее получения, а также разработка нового способа лечения заболеваний заднего отдела глазного яб- лока различной этиологии.
Интегративным результатом биолого-фармакологических эффектов заявляемого в изобретении средства как препарата для лечения заболеваний заднего отдела глазного яблока, сопровождающихся нарушением пигментного эпителия, является его способность регулировать соотношение гуморального и клеточного иммунитета, а также метаболические процессы, лежащие в основе пролиферации, дифференцировки и апоптоза клеток. 5 Для решения этой задачи предложена группа изобретений, объединенных единым изобретательским замыслом, а именно:
- энергизованная стабильная форма биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил- бис-глицината натрия с сохраняемой дисульфидной связью в качестве средства для лечения заболеваний заднего отдела глаза, которые сопровожда- ю ются нарушением пигментного эпителия, в том числе формированием активных туберкулезных хориоретинитов;
- способ получения энергизованной формы биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циc- тинил-бис-глицината натрия, включающий окисление исходного соединения - восстановленного глутатиона (γ-L-глутамил-L-цистеинил-глицина) перок-
15 сид карбонатом натрия в присутствии фермента каталазы путем перемешивания водного раствора исходного вещества и указанных реагентов в течение 30 минут при температуре 20÷30 0C и рН 8÷9; выделение свободного гекса- пептида биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил-биc-глицинa; перевод окисленной формы гексапептида (дисульфидглутатиона) в натриевую соль посредством
20 обработки его водного раствора 4N раствором NaOH; фильтрацию полученного раствора; стабилизацию дисульфидной связи гексапептида путем облучения раствора ультрафиолетовыми лучами; выделение конечного продукта методом лиофильной сушки;
- способ лечения заболеваний заднего отдела глаза, которые сопровож- 25 даются нарушением пигментного эпителия, в том числе развитием активных туберкулезных хориоретинитов, характеризующийся тем, что биc-(γ-L- глyтaмил)-L-циcтинил-биc-глицинaт натрия применяют в монорежиме и/или в составе базовой специфической антибактериальной и противотуберкулезной химиотерапии в виде парабульбарных и/или подкожных, и/или внутри- зо мышечных инъекций ежедневно 1-2 раза в день по 0,5 мл 1-3% раствора до
ю получения терапевтического эффекта, но не менее, чем в количестве 15 процедур, курс лечения продолжают до исчезновения симптомов заболевания, но не менее 14 дней.
5 В настоящем изобретении используется следующая, принятая в этой области, терминология.
Метаболизм - совокупность всех биохимических реакций, происходящих в клетках живых организмов.
Апоптоз — подразумевает морфологически распознаваемую форму ге- ιо нетически программированной клеточной гибели. Механизмом апоптоза стареющие клетки удаляются из организма, индуцируется гибель клеток во время эмбриогенеза, а также «oтρaбoтaвшиx» активированных иммунных клеток. В классическом определении, таким образом, апоптоз определяется как физиологическое самоубийство клеток.
15 Цитокины - регуляторные вещества белковой природы, продуцируемые иммунокомпетентными клетками. Динамика и содержание цитокинов определяют характер и особенности течения различных, в том числе и инфекционных и аллергических, заболеваний глаза.
Хориоретиниты - воспалительные заболевания сосудистой оболочки 20 глаза и сетчатки.
Геморрагии - кровоизлияния.
Ретинальные (от лат. rеtiпа - сетчатка) - относящиеся к внутренней оболочке глаза.
Макула - центральная зона сетчатки.
25 НАДФ-Н-зависимая редуктазная система - ферментативная система, которая обеспечивает превращение дисульфидглутатиона в восстановленный глутатион вследствие разрыва дисульфидной связи.
Каталаза — фермент, который расщепляет перекись водорода с выделением молекулярного кислорода. зо ЭФИ - электрофизиологическое исследование ЭРГ - электроретинография (от электро-, лат. rеtiпа — сетчатая оболочка глаза и -графия), метод исследования функции органа зрения посредством регистрации биоэлектрических потенциалов сетчатки, образующихся в результате воздействия света на глаз. Графическая запись биоэлектрических 5 потенциалов называется электроретинограммой (ЭРГ).
А-волна и В-волна - показатели ЭРГ
CT - стекловидное тепло
Опацитаты - воспалительные клеточные элементы
ю Известны средство дисульфидглутатион [Краткая химическая энциклопедия, Москва, «Coвeтcкaя энциклопедия)), т. 1, 1961, с. 979-980] и способ лечения различных форм туберкулеза легких [патент RU JNb 2197984, А 6 IK 38/08, А 6 IP 31/06], в котором раскрыта концептуальная модель использования препаратов на основе дисульфидглутатиона для лечения лекарственно-
15 резистентного туберкулеза. Однако средство, указанное в патенте оказалось не оптимальным с точки зрения сохранности дисульфидной связи и, следовательно, химической стабильности лекарственного препарата, полученного на основе биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил-биc-глицинaтa натрия (дисульфидглутатиона).
20 В качестве предпочтительного воплощения заявляемого изобретения, обеспечивающего новый уровень терапии заболеваний заднего отдела глазного яблока, сопровождающихся нарушением пигментного эпителия, предлагается средство — энергизованная стабильная форма биc-(γ-L-глyтaмил)-L- цистинил-бис-глицината натрия с сохраняемой дисульфидной связью, что
25 обеспечивает биофизическую и биохимическую стабильность данного вещества и, следовательно, его фармацевтическую активность в биологических средах.
Разработан способ получения энергизованной формы биc-(γ-L-глyтa- мил)-L-циcтинил-биc-глицинaтa натрия, обеспечивающий стабильность фор- зо мулы дисульфидглутатиона и его новые биолого-фармакологические эффек- ты на основе высокой биохимической реакционной способности и тропности к клеткам пигментного эпителия.
Согласно изобретению, авторы впервые показали и обосновали в клинической практике, что применение энергизированного аналога дисульфид- 5 глутатиона в терапии больных заболеваниями заднего отдела глаза с поражением пигментного эпителия в монорежиме и сочетании с традиционной терапией позволяет достичь высокого терапевтического эффекта.
Способ получения энергизованной формы биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циc- тинил-бис-глицината натрия включает: ю - окисление исходного соединения - восстановленного глутатиона (γ-L- глутамил-L-цистеинилглицина) - пероксид карбонатом натрия в присутствии фермента каталазы путем перемешивания водного раствора исходного вещества и указанных реагентов в течение 30 минут при температуре 20÷30 0C и pH 8÷9;
15 - выделение свободного гексапептида биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил- бис-глицина
Н-γ-L-Glu-L-Суs-Glу-ОН Н-γ-L-Glu-L-Суs-Glу-ОН
- перевод окисленной формы гексапептида (дисульфидглутатиона) в 20 натриевую соль посредством обработки его водного раствора 4N раствором
NaOH;
- фильтрацию полученного после окисления раствора;
- стабилизацию дисульфидной связи гексапептида путем облучения реакционного раствора с помощью аппарата для ультрафиолетового облучения;
25 - выделение конечного продукта методом лиофильной сушки.
Способ иллюстрируется следующим примером. Пример 1
Восстановленный глутатион (GSH) в количестве 1,22 г (8 ммоль) сус- зо пендируют в 5 мл дистиллированной воды и при перемешивании добавляют 1 мл (8 ммоль) 4N раствора NaOH. Полученный прозрачный раствор охлаждают до температуры 18÷19 0C и далее в реакционную смесь прибавляют 2,8 мл 3% раствора пероксид карбоната натрия (аддитивное соединение перекиси водорода и Na2CO3). Пероксид карбоната натрия добавляют небольшими
5 порциями в течение 3 минут с такой скоростью, чтобы температура реакционной смеси не превышала 23 0C. Через 3-5 минут после внесения пероксида карбоната натрия в реакционную смесь добавляют 100 мкг фермента катала- зы. Через 30 минут после добавления всех реагентов в реакционный раствор помещают электрод потенциометра и определяют рН раствора. Если рН ме- ю нее 8,5, по каплям добавляют 4N раствор NaOH до рН 8÷9.
Контроль полноты прохождения реакции окисления осуществляют методом ВЭЖХ. Если по данным ВЭЖХ после стандартного интегрирования хроматограммы содержание окисленной формы глутатиона составляет менее 97%, перемешивание продолжают еще 30 минут и контроль методом ВЭЖХ
15 повторяют. Если результат равен или превышает 97%, реакцию считают законченной и фильтруют полученный раствор под вакуумом.
После фильтрации раствор подвергают ультрафиолетовому облучению (УФО) на аппарате типа «Изoльдa» при следующем режиме: мощность источника излучения — 8 Вт; длина волны — 254 нм; скорость прокачки реакци-
20 онного раствора, мл/мин — 10/20.
Далее проводится лиофильная сушка водного раствора препарата согласно инструкции по использованию установки для лиофильной сушки.
Преимущество разработанного оригинального способа получения окисленного глутатиона с сохраняемой энергизованной дисульфидной связью за-
25 ключается в использовании катализатора фермента каталазы и пероксида натрия. Каталаза - уникальный фермент, расщепляющий перекись водорода (H2O2) с выделением молекулярного кислорода, окисляющего восстановленный глутатион благодаря карбонату натрия в щелочной среде. Проведенные исследования показали, что образование окисленного глутатиона (GSSG) не- зо обходимо проводить при рН 8÷9; в нейтральной и кислой областях выход GSSG резко снижается. Последующее облучение раствора окисленного глу- татиона ультрафиолетом обеспечивает образование новых водородных связей между атомом водорода молекулы NH2 и атомами кислорода в молекуле окисленного глутатиона (дисульфидглутатиона). Наряду с этим УФО обеспе-
5 чивает новую биофизику молекулы дисульфидглутатиона в связи с появлением источников лабильных π-электронов и формированием донорно-ак- цепторных свойств в рамках одной молекулы.
Данные биофизические эффекты обусловливают новую биохимию дисульфидглутатиона, а именно устойчивость молекул дисульфидглутатиона к ю воздействию фермента, присутствующего в крови и клетках животных организмов, НАДФ -Независимой глутатион-редуктазе, восстанавливающий окисленный глутатион до восстановленного (GSH).
Таким образом, предложен новый способ получения фармацевтически активного вещества — энергизованной формы биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcти-
15 нил-бис-глицината натрия, отличающийся от уже известных способов более высоким выходом целевого продукта, степенью чистоты, стабильностью получаемой формы и удобством применения в процессе масштабирования. На основе этой стабильной базовой субстанции может быть получен ряд стабильных готовых лекарственных форм с длительными сроками хране-
20 ния - не менее 3 лет.
На основании доклинических исследований установлено, что заявляемое средство обладает уникальными биолого-фармакологическими эффектами, обеспечивая иммунорегулирующее действие, в том числе активацию противоинфекционного иммунитета, нормализацию метаболических процес-
25 сов в клетках глаза наряду с наработкой противовоспалительных цитокинов. Названные биолого-фармакологические эффекты в основном обусловлены механизмами биохимической и иммунологической активности энергизованной формы дисульфидглутатиона вследствие ее позитивного влияния на метаболизм и, отсюда, на биоэнергетику клеток сетчатки и сосудистой обо- зо лочки глаза и резидентных макрофагов тканей глаза. Основным свойством заявляемого средства является его способность оказывать дифференцированное воздействие на нормальные (стимуляция метаболизма, пролиферации и дифференцировки) и инфицированные микобактериями туберкулеза (индукция апоптоза) клекти. Цитопротекторные эффекты энергизованной формы дисульфидглутатиона, лежащие в основе его позитивных нейротрофических эффектов, связаны с регуляцией тиол-дисульфидного обмена и новым уровнем регулируемого соотношения ключевых факторов биологического окисления HAД+/HAД-E+ и HAДФ+/HAДФ-H+, что имеет принципиальное значение для нормализации метаболизма пигментного эпителия. Указанные биолого-фармакологические эффекты обусловили высокую терапевтическую эффективность препарата на основе энергизованной формы дисульфидглутатиона в качестве средства лечения заболеваний заднего отдела глаза, сопровождающихся нарушением пигментного эпителия, которая была продемонстрирована в процессе клинических исследований. Согласно изобретению, клиническая результативность заявляемого средства и способа его применения в качестве фармацевтического препарата для лечения заболеваний заднего отдела глаза с нарушением пигментного эпителия, в том числе активных туберкулезных хориоретинитов, обеспечивается следующими видами активности предлагаемого средства: <* иммунокорригирующей активностью вследствие регуляции местного иммунитета, в первую очередь посредством активации функции резидентных макрофагов;
*> цитопротекторной активностью вследствие активации метаболизма и биоэнергетики клеток глаза; 4> антибактериальной и противовирусной активностью вследствие повышения уровня содержания эндогенных интерферонов;
*> противовоспалительным действием и репаративной активностью вследствие регуляции уровня содержания провоспалительных цитокинов и стимуляцией тиол-дисульфидного обмена; *> индукцией апоптоза инфицированных клеток, что обеспечивает сохранение чувствительности к действию традиционной антибактериальной и противовирусной химиотерапии.
Согласно изобретению способ лечения заболеваний заднего отдела гла-
5 за, сопровождающихся нарушением пигментного эпителия, в том числе, вследствие активных туберкулезных хориоретинитов, заключается в назначении пациенту, нуждающемуся в этом, предлагаемого средства, причем применение препарата осуществляется, по крайней мере, один раз в день в течение периода времени, необходимого для достижения терапевтического ιо эффекта.
Согласно изобретению предлагаемое средство применяется в виде па- рабульбарных, подкожных и внутримышечных инъекций 1-2 раза в день по 0,5 мл 1-3% раствора; курс лечения продолжают до исчезновения симптомов заболевания, но не менее 14 дней.
15 Ниже приведены примеры клинической реализации и результаты лечения больных хориоретинитами и дистрофиями сетчатки.
Примеры реализации. Пример реализации 2
20 Обоснованием для заявляемого способа лечения являются данные, полученные в эксперименте на 28 кроликах породы шиншилла (52 глаза): в серии 1- парабульбарное введение 1% раствора вещества на фоне антибактериальной терапии (АБТ), в серии 2 - внутримышечное введение 1% раствора вещества на фоне АБТ, в серии 3 - внутримышечное введение 3% раствора
25 вещества на фоне АБТ, в серии 4 - контроль (только АБТ).
При изучении эффективности лечения было отмечено, что самые лучшие результаты наблюдались в серии 1 опытов (табл.l). При местном применении вещества было зафиксировано уменьшение размеров очага (2,46± 0,47/2,2±0,54 DD), экссудации (l,68±0,36/l,2±0,44 балла), проминенции (2,2± зо 0,24/1, 6±0,32 дптр) после проведения курса лечения. Внутримышечное вве- дение вещества (серия 2 опытов) оказалось менее эффективным: несмотря на то, что явления экссудации и проминенция несколько уменьшились (l,8±0,40 /l,6±0,34 балла и 2,0±0,44/1,8±1,6 дптр), размеры очага остались неизменными (2,2±0,34 DD). Внутримышечное введение 3% раствора вещества (серия 3 опытов) оказалось менее эффективным, чем парабульбарное введение, однако эффективнее, чем внутримышечное введение 1% раствора вещества. В контрольной серии 4, где применялась только химиотерапия, офтальмологические параметры поражения глаз даже несколько увеличились: размер очага 2,24±0,42/2,4± 0,40 DD, проминенция l,8±0,30/l,85±0,36 диоптрий и лишь экссудация уменьшилась (l,8±0,34/l,7±0,36 балла).
При изучении гистологических срезов удалось установить, что только в серии 1 опытов отмечалась сохранность клеток пигментного эпителия (ПЭ) вне зоны специфического и параспецифического воспаления (pиc.2). В непо- средственной близости к туберкулезной гранулеме большая часть клеток ПЭ была разрушена с выходом пигмента в окружающие ткани. В сериях 2 и 3 опытов деструкция ПЭ с разрывами клеточной оболочки, разрежением пигмента или его элиминация наблюдалась во всех препаратах и на площади, превышающей размеры специфического и параспецифического воспаления (рис.l). В некоторых препаратах такие изменения прослеживались вплоть до зубчатой линии. Следует отметить, что состояние слоев сетчатки вне зоны очага в серии 1 опытов было удовлетворительным, тогда как в сериях 2-4 определялись явления деструкции и отека ее слоев.
Пример реализации 3
Клинические исследования были проведены на 12 больных с активным туберкулезным хориоретинитом. Лечение 1% раствором вещества осуществлялось на фоне стандартной противотуберкулезной терапии. По способу введения препарата были выделены две группы: группа 1 - 1% раствор вещества парабульбарно на фоне АБТ, группа 2 - только традиционное противотуберкулезное лечение.
При сравнении результатов лечения у больных признаки воспалительной реакции были купированы в более короткие сроки в группе 1, чем в
5 группе 2 (5-6 недель в основной и 8-9 недель в контрольной группах). Офтальмоскопически это характеризовалось уменьшением размеров очага, степени экссудации, уровня проминенции. По данным ЭФИ было зафиксировано повышение амплитуды А-волны (на 6-8 мкВ и 4-5 мС в основной группе против 3-4 мкВ и 1-2 мС в контрольной группе) и В-волны (8-10 мкВ и 5-7 ю мС в основной группе против 4-5 мкВ и 2-3 мС в контрольной группе) по сравнению с исходным уровнем, что говорит о нейроцитопротекторном свойстве препарата. По данным компьютерной периметрии было зафиксировано уменьшение размера скотомы в обеих группах исследования, однако в основной группе эта разница также была больше (на 7% против 4%). и Полученные данные позволяют говорить об эффективности данного способа лечения и целесообразности включения 1% раствора вещества в комплексную противотуберкулезную терапию активных туберкулезных хо- риоретинитов и других заболеваний заднего отдела глаза, сопровождающихся изменениями пигментного эпителия, гипоксией тканей и интоксикацией.
20
Пример реализации 4 заявленного способа лечения туберкулезных поражений глаза
Больная 3., история болезни Na 1054, поступила в отделение туберкулеза глаз СПбНИИФ 01.10.2004 г. по поводу периферического очагового хо-
25 риоретинита правого глаза туберкулезной этиологии в активной стадии. Туберкулезная этиология установлена в 1987г. Первое обострение произошло спустя 5 лет, затем через каждые 2 года. Однако с декабря 2003 г. по сентябрь 2004 г. обострений было 4, несмотря на проводимое лечение в противотуберкулезных учреждениях и специализированных санаториях. Офталь- зо москопический статус перед началом лечения - острота зрения правого глаза 0,9; в CT воспалительные клеточные элементы (опацитаты) и плавающие помутнения в задних слоях. Глазное дно: диск зрительного нерва (ДЗН) бледно- розовый, границы в нижней части размыты. По ходу нижнего сосудистого пучка на средней периферии расположен хориоретинальный очаг размером
5 1,0 DD, желтоватого цвета, проминирующий (0,5 диоптрий), с нечеткими краями, экссудатом в верхней части и отеком в перифокальной области и несколькими мелкими ретинальными очажками отсева. Периферическая ЭРГ: А-волна 25 мкВ и 20 мС; В-волна 180 мкВ и 50 мС. Компьютерная периметрия: абсолютная скотома 14,8%. Учитывая частые обострения и опасность ю развития осложнений, больной был назначен курс вещества. Вещество в виде 1% раствора применяли в виде парабульбарных инъекций по 0,5 мл ежедневно курсом 15 процедур на фоне общей и местной специфической АБТ (внутримышечно 10% раствор изониазида по 6,0 мл, внутрь пиразинамид 30 мг/кг массы тела, эндоназальный электрофорез с 3% раствором изониазида). Пере-
15 носимость препарата была удовлетворительной. В месте введения препарата не отмечалось гиперемии, отека параорбитальной клетчатки, имела место небольшая болезненность в течение 10-15 минут после инъекции. Проявлений местной и общей аллергических реакций не отмечено. Через 1 месяц от начала проведения курса лечения опацитаты практически отсутствуют, ДЗН стал
20 иметь четкие границы, очаг уменьшился в размере до 0,8 DD, стал более четким, появилась начальная пигментация. По данным ЭФИ: А-волна 32 мкВ и 25 мС; волна В 200 мкВ и 55 мС. По данным компьютерной периметрии абсолютная скотома уменьшилась до 12,4%. Острота зрения правого глаза повысилась до 1,0.
25
Пример реализации 5 заявленного способа лечения хориореτинальных дистрофий
Больная Б., 76 лет, история болезни N° 5896, находилась в отделении с 04.11.2004 г. по 05.12.2004 г. с диагнозом «Bыcoкaя осложненная миопия ле- вого глаза, миопия слабой степени правого глаза, вторичная хориоретиналь- ная дистрофия обоих глaз».
При поступлении: острота зрения правого глаза с коррекцией sрh - 1,0 Д = 0,2-0,3, левого глаза с коррекцией sрh - 14,0 Д = ОД. Поля зрения: на ле- вом глазу выявлены абсолютные и относительные скотомы =44%, на правом глазу парацентральная абсолютная скотома =8%, центральная относительная скотома -3%. На глазном дне определялись изменения, характерные для осложненной миопии: обширные стафиломы (OS>OD), атрофические хориоре- тинальные очаги (на OS без транссудации, на OD в парамакулярной области с отеком макулы), сетчатка перерастянута, на периферии сетчатки отмечается диспигментация.
Больной была проведена традиционная дедистрофическая терапия с использованием витаминов внутримышечно и 1% раствора эмоксипина местно. Однако видимых результатов это не дало. После проведения курса лечения 1% раствором вещества из 15 пара- бульбарных инъекций в оба глаза по 0,5 мл на фоне продолжения дедистро- фической общей терапии на 20 день от начала лечения повысилась острота зрения правого глаза с коррекцией sрh -1,0 Д = 0,5, левого глаза с коррекцией sph-14,0 Д = 0,3. Относительная скотома на правом глазу исчезла.
m/E.Ш06/Q00U2U Таблица 1
Степень изменения основных офтальмоскопических показателей у кроликов на фоне применения вещества
Figure imgf000024_0001
Источники информации
1. Александрова A.E., Антоненкова Е.В. Разработка нового направления патогенетической терапии туберкулеза на основе использования средств антигипоксического действия (Сб. науч. трудов и материа-
5 лов XV Всероссийской конференции, т.l, СПб., 1998, ее.168- 173.
2. Патент РФ JNs 2197984 «Cпocoб лечения различных форм туберкулеза легких, в том числе резистентных к противотуберкулезной хи- миoтepaпии», Кожемякин Л.A., Перельман M.И., Соколова Г.Б. и др., 2003. ю 3. Беллендир Э.H., Песчанская И.H., Наконечный Г.Д. Состояние мик- роциркуляторного русла при туберкулезе сосудистого тракта глаза в эксперименте // Проблемы туберкулеза, 1977, Ns 3, ее. 64-67.
4. Беллендир Э.H., Ягафарова P.K., Хокканен B.M., Вишневский Б.И. Экспериментальные данные о влиянии нативного и иммобилизо-
15 ванного террилитина на проницаемость Изониазида в ткани глаза //
Депонирована во ВНИИМИ Ns 466-B от 17.12.91.
5. Васильева CH. Экспериментальное обоснование использования Глутоксима в качестве средства сопровождения этиотропной терапии генерализованного туберкулеза. Автореф. дис. канд.мед.наук,
20 СПб., 2004, 24 с.
6. Соколова Г.Б., Синицин M.B., Кожемякин Л.A., Перельман М.И. Глутоксим в комплексной терапии туберкулеза// ГЛУТОКСИМ. Новая идеология сопровождения антибактериальной, противовирусной и противоопухолевой терапии (в помощь практическому врачу), M.,
25 2003, 131 с.
7. Устинова Е.И. Основные принципы диагностики, дифференциальной диагностики и лечения туберкулеза глаз //Вестник офтальмологии, Ne 3, 200I5 ее. 38 - 40.
8. Устинова Е.И. Туберкулез глаз и сходные с ним заболевания. СПб., зо 2002. Краткая химическая энциклопедия, Москва, «Coвeтcкaя энциклопе- дия», т. 1, 1961, cc. 979-980.

Claims

Формула изобретения
1. Энергизованная стабильная форма биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил- бис-глицината натрия с сохраняемой дисульфидной связью, обеспечивающей биофизическую и биохимическую стабильность данного вещества и, следо-
5 вательно, его фармацевтическую активность в биологических средах, используемая в качестве средства для лечения заболеваний заднего отдела глаза, которые сопровождаются нарушением пигментного эпителия, в том числе активных туберкулезных хориоретинитов.
2. Способ получения энергизованной формы биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циc- ιо тинил-бис-глицината натрия, включающий окисление исходного соединения
- восстановленного глутатиона (γ-L-глутамил-L-цистеинил-глицина) перок- сид карбонатом натрия в присутствии фермента каталазы путем перемешивания водного раствора исходного вещества и указанных реагентов в течение 30 минут при температуре 25° С и рН = 8-9; выделение свободного гексапеп-
15 тида биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил-биc-глицинa; перевод окисленной формы гексапептида (дисульфид глутатиона) в натриевую соль посредством обработки его водного раствора раствором 4N NaOH; фильтрации полученного после окисления раствора; стабилизации дисульфидной связи гексапептида, вследствие ее энергизации; выделение конечного продукта методом лио-
20 фильной сушки.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что стабилизацию дисульфидной связи биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил-биc-глицинaтa натрия осуществляют путем ультрафиолетового облучения (УФО) реакционного раствора с помощью аппарата для УФО.
25 4. Способ лечения заболеваний заднего отдела глаза, которые сопровождаются нарушением пигментного эпителия, в том числе активных туберкулезных хориоретинитов, характеризующийся тем, что энергизованную форму биc-(γ-L-глyтaмил)-L-циcтинил-биc-глицинaтa натрия применяют в монорежиме и/или в составе базовой специфической антибактериальной и противо- зо туберкулезной химиотерапии в виде парабульбарных и/или подкожных, и/или внутримышечных инъекций ежедневно 1-2 раза в день по 0,5 мл 1-3% раствора, до получения терапевтического эффекта, но не менее, чем в количестве 15 процедур, курс лечения продолжают до исчезновения симптомов заболевания, но не менее 14 дней.
PCT/EA2006/000020 2006-01-20 2006-12-27 Agent de traitement de la tuberculose oculaire et procédé de production et d'utilisation de celui-ci WO2007082547A1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA200600714 2006-01-20
EA200600714A EA010926B1 (ru) 2006-01-20 2006-01-20 Средство для лечения туберкулеза глаз, способ его получения и применения

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2007082547A1 true WO2007082547A1 (fr) 2007-07-26

Family

ID=38287284

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EA2006/000020 WO2007082547A1 (fr) 2006-01-20 2006-12-27 Agent de traitement de la tuberculose oculaire et procédé de production et d'utilisation de celui-ci

Country Status (2)

Country Link
EA (1) EA010926B1 (ru)
WO (1) WO2007082547A1 (ru)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6312734B1 (en) * 1998-11-23 2001-11-06 Novelos Therapeutics, Inc. Methods for production of the oxidized glutathione composite with cis-diamminedichloroplatinum and pharmaceutical compositions based thereof regulating metabolism, proliferation, differentiation and apoptotic mechanisms for normal and transformed cells
RU2177801C1 (ru) * 2001-01-25 2002-01-10 Санкт-Петербургская Общественная Организация "Санкт-Петербургский Институт Биорегуляции И Геронтологии Сзо Рамн" Средство, ингибирующее ангиогенез при заболеваниях органа зрения
RU2197984C1 (ru) * 2001-11-14 2003-02-10 Закрытое акционерное общество "ВАМ-исследовательские лаборатории" Способ лечения различных форм туберкулеза легких, в том числе резистентных к противотуберкулезной химиотерапии

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2089179C1 (ru) * 1995-12-14 1997-09-10 Закрытое акционерное общество "ВАМ" Стимулятор эндогенной продукции цитокинов и гепопоэтических факторов и способ его использования
US6350467B1 (en) * 1996-12-31 2002-02-26 Antioxidant Pharmaceuticals Corp. Pharmaceutical preparations of glutathione and methods of administration thereof
RU2144374C1 (ru) * 1998-11-23 2000-01-20 Закрытое акционерное общество "ВАМ" Способ получения композита окисленного глутатиона с cis-диаминодихлорплатиной и фармацевтических композиций на его основе, регулирующих метаболизм, пролиферацию, дифференцировку и механизмы апоптоза нормальных и трансформированных клеток
RU2161982C1 (ru) * 2000-01-20 2001-01-20 Общество с ограниченной ответственностью "Клиника Института биорегуляции и геронтологии" Тетрапептид, стимулирующий функцию сетчатой оболочки глаза, фармакологическое средство на его основе и способ его применения

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6312734B1 (en) * 1998-11-23 2001-11-06 Novelos Therapeutics, Inc. Methods for production of the oxidized glutathione composite with cis-diamminedichloroplatinum and pharmaceutical compositions based thereof regulating metabolism, proliferation, differentiation and apoptotic mechanisms for normal and transformed cells
RU2177801C1 (ru) * 2001-01-25 2002-01-10 Санкт-Петербургская Общественная Организация "Санкт-Петербургский Институт Биорегуляции И Геронтологии Сзо Рамн" Средство, ингибирующее ангиогенез при заболеваниях органа зрения
RU2197984C1 (ru) * 2001-11-14 2003-02-10 Закрытое акционерное общество "ВАМ-исследовательские лаборатории" Способ лечения различных форм туберкулеза легких, в том числе резистентных к противотуберкулезной химиотерапии

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Entsiklopedichesky slovar meditsinskikh terminov", 2001, MEDITSINA, MOSCOW, pages: 816 *
"Kratkaya meditsinskay entsiklopediya", TUBERKULEZ VNELEGOCHNY, MOSCOW, vol. SECOND EDITION, 1989, XP003015961, Retrieved from the Internet <URL:http://www.golkom.ru/kme/19/3-255-2.l.html> *

Also Published As

Publication number Publication date
EA010926B1 (ru) 2008-12-30
EA200600714A1 (ru) 2007-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0348353A2 (en) The use of physiologically active substances for the manufacture of drugs for cerebral and neuronal diseases
US3943251A (en) Ophthamological use of hydrastis compounds
US5145680A (en) Eye drop formulation useful for treating lesions of corneal epithelium
WO2006079243A1 (fr) Emploi du flavonol et des glycosides de type flavonol dans la stimulation de la croissance des cellules épithéliales rénales tubulaires pour sécréter le facteur de croissance osseuse
DE68916777T2 (de) Verwendung von TNF zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Psoriasis.
WO2007082547A1 (fr) Agent de traitement de la tuberculose oculaire et procédé de production et d&#39;utilisation de celui-ci
EP1616004A1 (en) Process for isolating and purifing ovine hyaluronidase
RU2714193C1 (ru) Способ лечения воспалительных или дистрофических заболеваний глаз
EP0878200B1 (en) Therapeutic agent for ophthalmic diseases
Bietti Use of paraaminosalicylic acid alone or in association with streptomycin in ocular tuberculosis: Experimental and clinical investigations
AU749673B2 (en) Use of glycosaminoglycans for producing pharmaceutical preparations for treating diabetes-associated diseases of the eye
WO1997038691A1 (fr) Medicament pour neuropathie retinienne
RU2362554C2 (ru) Регенерирующее противовоспалительное средство и способы лечения с помощью этого средства
RU2038088C1 (ru) Способ лечения ожогов глаз
RU2095067C1 (ru) Способ стимуляции репаративных и трофических процессов в тканях организма
RU2188021C2 (ru) Способ лечения увеитов
JPS6238329B1 (ru)
RU2195297C2 (ru) Способ лечения дистрофических заболеваний глаз
RU2157154C1 (ru) Способ лечения диабетической ретинопатии
US3903282A (en) Ophthamological use of hydrastis compounds
JPH0881389A (ja) 網膜色素上皮細胞増殖剤
RU2239436C1 (ru) Средство для лечения синдрома сухого глаза как осложнения перенесенных офтальмоинфекций
CN114732805A (zh) 厚朴酚的新用途
RU2192898C1 (ru) Способ лечения герпетического кератита с изъязвлением
RU2120294C1 (ru) Лекарственное средство

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
DPE1 Request for preliminary examination filed after expiration of 19th month from priority date (pct application filed from 20040101)
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

32PN Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established

Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC, EPO FORM 1205A OF 27.01.2009

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 06828780

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1