WO2006090902A1

WO2006090902A1 - 有害生物防除組成物

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Publication number: WO2006090902A1
Application number: PCT/JP2006/303929
Authority: WO
Inventors: Shinji Isayama
Original assignee: Sumitomo Chemical Co Ltd
Current assignee: Sumitomo Chemical Co Ltd
Priority date: 2005-02-24
Filing date: 2006-02-23
Publication date: 2006-08-31
Anticipated expiration: 2007-08-24

Abstract

本発明は、バチルス・チューリンジエンシスが産生し得る殺虫性タンパク質と分子量が２,０００～８００，０００の範囲であるポリエチレングリコールとを含有することを特徴とする有害生物防除組成物等に関する。

Description

明細書

有害生物防除組成物技術分野

本発明は、有害生物防除組成物、より具体的には、バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性タンパク質とポリエチレングリコ一ルとを含有する有害生物防除組成物等に関する。背景技術

バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) の殺虫性タンパク質が殺虫活性を有することが知られている（例えば、昆虫病理学福原敏彦著（学会出版センター） 01641-1104参照) 。

バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) の殺虫性タンパク質を利用しながら、例えば、農園芸における有害生物に対して、より低薬量にて優れた防除効果を有する有害生物防除剤の開発が望まれている。発明の開示

本発明は、単に混合した時に得られると予想される相加効果以上の相乗効果を得ることが出来、使用する薬量の低減を可能とする有害生物防除組成物における組み合わせに関する。

即ち、本発明は、

1. バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性タンパク質（以下、本タンパク質と記すこともある。）と分子量が 2, 000〜8 00, 000の範囲であるポリエチレングリコールとを含有することを特徴とする有害生物防除組成物（以下、本発明組成物と記すこともある。）；

2. 相乗効果量の

バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性夕ンパク質と分子量が 2， 000〜 800， 000の範囲であるポリエチレングリコールとを含有することを特徴とする有害生物防除組成物；

3. バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus t uringiesis) が産生し得る殺虫性タンパク質とポリエチレングリコールとが重量比で 1： 1000〜10： 1の割合で含有されてなることを特徴とする前項 1または 2記載の有害生物防除組成物； 4. 殺虫性タンパク質が、バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringies is)の生菌体もしくは芽胞、それらが熱若しくは化学的手段により死菌化処理された菌体、又はそれら菌体の破碎物に含まれた状態にある殺虫性夕ンパク質であることを特徴とする前項 1又は 2記載の有害生物防除組成物；

5. バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性タンパク質とポリエチレングリコールとの両者の有効量を、混用又は同時に若しくは非同時に併用して、保護すべき植物、有害生物又は有害生物の生息場所に施用することを特徴とする有害生物防除方法；

6. 相乗効果量の

バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性夕ンパク質とポリエチレングリコールとの両者の有効量を、混用又は同時に若しくは非同時に併用して、保護すべき植物、有害生物又は有害生物の生息場所に施用することを特徴とする有害生物防除方法；

7.有害生物が鱗翅目害虫の幼虫であることを特徴とする前項 5または 6記載の有害生物防除方法；

8.有害生物がハスモンョトウであることを特徴とする前項 5または 6記載の有害生物防除方法；

9. 有害生物防除のための、バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringi esis)が産生し得る殺虫性タンパク質とポリエチレングリコールとの組み合わせ使用 10. 有害生物防除のための、相乗効果量の

バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性夕ンパク質とポリエチレングリコールとの組み合わせ使用；

等を提供するものである。発明を実施するための最良の形態

本発明組成物において一つの有効成分として用いられる本タンパク質は、バチルス •チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) に由来する殺虫性タンパク質であれば特に制限はない。本タンパク質として、具体的には例えば、 C r ylA (a) 、 C rylA (b) 、 C r ylA (c) 、 CryIB、 C ryIC、 C ryID、 C r yl F、 C ryIIA、 C r yIIB、 C ryV、 C r y V I等をあげることができる。これら本タンパク質は、天然では、バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) に属する細菌により産生される。その中でも例えば、クルスタキ（k urstaki)、アイザワイ（aizawai)等の亜種に属する前記細菌により産生される殺虫性タンパク質を本発明組成物に好ましく用いることができる。

また、本タンパク質は、天然に存在するバチルス ·チューリンジェンシス（Bacil lus thuringiesis)に属する細菌により産生される殺虫性タンパク質であっても、通常の遺伝子工学的な手法を用いて作製された形質転換体（例えば、大腸菌、枯草菌、植物等）により産生される殺虫性タンパク質であってもよい。尚、このような形質転換体を作製する際に用いられる、本タンパク質のアミノ酸配列をコードする塩基配列を有する遺伝子（以下、本遺伝子と記すこともある。）は、（1) 天然に存在する遺伝子の中からクロ一エングされた遺伝子であってもよいし、（2)天然に存在する遺伝子の中からクローニングされた遺伝子の塩基配列において、その一部の塩基の欠失、置換又は付加が人為的に導入されてなる遺伝子（即ち、天然に存在する遺伝子に変異処理（部分変異導入処理、突然変異処理等）を行った遺伝子）であってもよいし、 (3) 人為的に合成された遺伝子であってもよい。上記のような微生物は、天然から分離してもよいし、菌株保存機関等から購入してもよい。また、このような微生物から、通常の微生物学的手法や遺伝子工学的手法等に準じて人為的に作製してもよい。

天然から分離する場合には、例えば、まず、土壌を野外から採取する。採取された土壌を滅菌水で懸濁させた後、得られた懸濁液を、例えば、枯草菌等の微生物の分離に用いられる固体培地上に塗布し、これを 25 °Cで培養する。数日後に生えてきた菌の独立したコロニーを切り取り、例えば、枯草菌等の微生物の分離に用いられる新しい固体培地に移植し、これをさらに 25 °Cで培養する。生育してきた菌について、 S NEATH, (P.H.A.), MAIR, (N.S.) SHARPE, (M. E. ) and HOLT, (J. G. ) :Bergey' s manu al of Systematic Bacteriorogy. Vol.2. 1984, Williams and Wilkins, Baltimore .等に記載される方法等に従って、バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thu ringiesis) に属する細菌であるかを同定することにより、バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) に属する細菌を選抜すればよい。

つぎに、選抜されたバチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) に属する細菌について、当該細菌中の殺虫性タンパク質の有無を、例えば、生物活性評価法や顕微鏡観察法等に従つて確認することにより、バチルス 'チューリンジェンシス (Bacillus thuringiesis) に属する細菌を確認すればよい。本発明組成物で用いられる本タンパク質は、単離されたタンパク質でもよいが、例えば、バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) の生菌体若しくは芽胞、それらが熱若しくは化学的手段により死菌化処理された菌体、又はそれら菌体の破碎物に含まれた状態にある殺虫性タンパク質であってもよい。

尚、殺虫性タンパク質を産生するバチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus th uringiesis) に属する細菌を培養する培地としては、一般的細菌用培地、普通ブイョン液体培地等があげられるが、当該細菌が増殖する培地であれば何でもよい。前述の如く、上記の培地を用いて培養されたバチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis)に属する細菌及びその産生物を培地ごと遠心分離及び Z又は乾燥して本発明組成物の一つの有効成分である本タンパク質として用いることができる。或いは公知の方法に従って前記培地から分離された殺虫性タンパク質自体をそのまま本タンパク質として用いてもよい。因みに、本タンパク質自体の分子量は、数万〜十数万ダルトンである。本タンパク質は、所定回数の分裂を繰り返したバチルス 'チューリンジェンシス (Bacillus thuringiesis) に属する細菌が崩壊する際に、結晶性物質の形で芽胞とともに放出される。また、本発明組成物で用いられる本タンパク質としては、市販の BT製剤品を用いてもよく、好ましくは、ダイポール（商標登録）（住友化学（株））、エスマルク（商標登録）（住友化学（株））、フローバック（商標登録）（住友化学（株））、ゼン夕ーリ（商標登録）（住化武田農薬（株））等をあげることができる。本発明組成物において他の一つの有効成分として用いられる「分子量が 2， 000 〜800， 000の範囲であるポリエチレングリコール」（以下、本化合物と記すこともある。）は、 [_CH₂ CH₂ 〇— ] _nで表されるエチレンォキシドの重合体で、エチレンォキシド、ポリオキシエチレンとも呼ばれ、その分子量は 2， 000〜8 00, 000の範囲である。好ましい分子量としては 4， 000〜500， 000の範囲をあげることができる。

Bacillus thuringensisの殺虫活性成分と本化合物との混用については、その最適な製剤処方として混用することが知られている（例えば、米国特許 US5， 501, 852等参照）。本発明組成物は、例えば、広範囲な農園芸における鱗翅目害虫の防除に好適に利用できる。その代表例として、下記のものが挙げられる。二カメィガ (Chilo suppressalis) 、コブノメイガ (Cnap alocrocis medinalis) 3 一口ピアンコーンホ一ラー (Ostrinia nubilalis) 、シノッ卜ガ (Parapediasia te terrella) 等のメイガ類、ハスモンョトウ（Spodoptera litura) 、シロイチモジョトウ (Spodoptera exigu ) 、ァヮョトヮ (Pseudaletia separata; 、ョトゥ力 (Ma mestra brasicae) 、タマナヤガ（AgroUs ipsilon) 、イラクサギンゥヮバ (Trich oplusia ni) 、夕マナギンゥヮパ（Autographa nigrisigna) 、へリオティス属（He liothis spp.) 、へリコべルパ属（Helicovei^pa spp.) 、エアリアス属（Earias sp p.) 等のャガ類、モンシロチョウ（Pieris rapae crucivora) 等のシロチョウ類、チャノコカクモンハマキ（Adoxophyes honmai) 、リンゴコカクモンハマキ（Adoxophy es orana fasciata) 、ナシヒメシンクイ (Grapholita molesta) 、コドリングモス (Cydia pomonell ) 等のハマキガ類、モモシンクィガ（Carposina niponensis) 等のシンクィガ類、モモハモグリガ（Lyonetia clerkella);等のチビガ類、キンモンホソガ (Phyllonorycter ringoniella) 等のホソガ類、ミカンハモグリガ (Phyllocni stis citrella) 等のコハモグリガ類、コナガ (Plutella xylostella) などのスガ類、ドクガ (Euproctis taiwana) 、ママイ刀 (Lymantria dispar) 、モンシロドクガ (Euproctis similis) なのドクガ類、ヒメクロラガ (Scopelodes contracus ) などのイラガ類、マッカレハ（Dendrolimus spectabilis) などのカレハガ類、ピンクポールワーム（Pectinophora gossypiella) 等のキバガ類、ヒトリガ類、ヒロズコガ類等。本発明組成物において、本タンパク質と本化合物との混合比としては、有害生物防除活性について相乗効果を生ずる混合比であればよく、例えば、重量比で 1 : 100 0〜10 ： 1の割合、好ましくは 1 ： 500〜5 ： 1の割合、より好ましくは 1 ： 5 〜 2 ： 1の割合等をあげることができる。

本発明組成物を用いる場合には、他の何らの成分も加えず、そのまま本化合物と本タンパク質とを混合して用いてもよいが、通常は当該混合物にさらに固体坦体、液体坦体またはガス状担体等、必要により界面活性剤、その他の製剤用補助剤を加えることにより、油剤、乳剤、水和剤、顆粒水和剤、水中懸濁剤や水中乳濁剤等のフロアブル剤、粉剤、粒剤、エアゾール、マイクロカプセル剤、加熱燻蒸剤、または毒餌剤等の各種製剤として用いることが好ましい。これらの製剤には、有効成分として本発明組成物を、通常、重量比で約 0. 01〜95%含有させることがよい。製剤化の際に用いられる固体坦体としては、例えば、粘土類（カオリンクレー、珪藻土、ベントナイト、フバサミクレー、酸性白土等）、合成含水酸化珪素、タルク類、セラミック類、その他の無機鉱物（セリサイト、石英、硫黄、活性炭、炭酸カルシゥム、水和シリカ等）、化学肥料（硫安、燐安、硝安、尿素、塩安等）等の微粉末や粒状物があげられる。

液体坦体としては、例えば、水、アルコール類（メタノール、エタノール等）、ケトン類（アセトン、メチルェチルケトン等）、芳香族炭化水素類（トルエン、キシレン、ェチルベンゼン、メチルナフタレン等）、非芳香族炭化水素類（へキサン、シク口へキサン、灯油、軽油等）、エステル類（酢酸ェチル、酢酸ブチル等）、二トリル類（ァセトニトリル、イソプチロニトリル等）、エーテル類（ジイソプロピルエーテル、ジォキサン等）、酸アミド類（N, N—ジメチルホルムアミド、 N， N—ジメチルァセトアミド類）、ハロゲン化炭化水素類（ジクロロメタン、トリクロロェタン、四塩化炭素等）、ジメチルスルホキシド、植物油（大豆油、綿実油等）等があげられる。

また、ガス状担体、即ち、噴射剤としては、例えばフロンガス、ブタンガス、液化石油ガス、ジメチルエーテル、炭酸ガス等があげられる。界面活性剤としては、例えば、アルキル硫酸エステル塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルァリ一ルスルホン酸塩、アルキルァリ一ルェ一テル類、多価アルコールエステル類、糖アルコール誘導体等があげられる。その他の製剤用補助剤としては、例えば、カゼイン、ゼラチン、糖類（澱粉、ァラビアガム、セルロース誘導体、アルギン酸等）、リグニン誘導体、ベントナイト、合成水溶性高分子（ポリビニルアルコール、ポリビエルピロリドン、ポリアクリル酸類等）、 P A P (酸性リン酸イソプロピル）、 B HT ( 2 , 6—ジ— tert—プチル— 4 —メチルフエノール）、 B HA ( 2— tert—ブチル—4ーメトキシフエノールおよび 3—ter t—プチルー 4—メトキシフエノール）、植物油、鉱物油、界面活性剤、脂肪酸、脂肪酸エステル等が挙げられる。毒餌剤の基材としては、例えば、穀物粉、植物油、糖、結晶セルロース等の餌成分、ジブチルヒドロキシトルエン、ノルジヒドログアイァレチン酸等の酸化防止剤、デヒドロ酢酸等の保存料、トウガラシ末等の誤食防止剤、チーズ香料、タマネギ香料等の誘引性香料等が挙げられる。水中懸濁剤や水中乳濁剤等のフロアブル剤は、通常、約 1〜7 5重量％の有効成分化合物を、約 0 . 5〜1 5重量％の懸濁補助剤（例えば保護コロイドゃチクソトロピ一性を付与しうる物質）、約 0〜1 0重量％の補助剤（例えば消泡剤、防鲭剤、安定剤、展着剤、浸透助剤、凍結防止剤、防腐剤、防黴剤等）を含む水中で、微少に分散させることにより得ることができる。本発明組成物は、各々の有効成分を上記の製剤手法により製剤した後、これら製剤を混合することにより調製することもできる。即ち、本発明組成物は、その製剤形態によっては、本化合物を予め製剤化したものと、本タンパク質を予め製剤化したものとを混合することにより調製してもよい。また、両者を施用時に混用又は同時若しくは非同時に併用することもできる。

このようにして製剤化された本発明組成物は、そのままで、あるいは水等に希釈して用いる。また、さらに他の殺虫剤、殺ダニ剤、殺線虫剤、殺菌剤、除草剤、植物成長調節剤、共力剤、肥料、土壌改良剤、動物用飼料等を混用又は同時若しくは非同時に併用することもできる。本発明組成物は、その有効量を、有害生物、有害生物の生息場所、有害生物ら保護すべき植物等に処理される。その際、本発明組成物が乳剤、水和剤、顆粒水和剤、フロアブル剤等に製剤化されたものである場合には、通常、水等で希釈して処理される。

本発明組成物を、例えば、農園芸における有害生物に対して処理する場合には、本発明組成物の有効量又は施用量は、通常、 1 0 0 0 m² 当たりの施用量で約 0 . 1〜 1 0 0 0 gである。尚、有害生物防除のための有効成分を粒剤、粉剤、油剤等のまま施用する場合には、通常、上記の有効量又は施用量となるように何ら希釈することなくそのまま施用すればよい。また、有害生物防除のための有効成分を、乳剤、水和剤、顆粒水和剤、フロアブル剤等を水に希釈して施用する場合でも、上記の有効量又は施用量となるように水で希釈して施用すればよい。具体的には例えば、乳剤、水和剤、顆粒水和剤、フロアブル剤等を水で希釈して用いる場合には、本発明組成物の施用濃度としては、通常、約 1〜10000 p pmをあげることができる。上記の有効量又は施用量は、いずれも製剤の種類、施用時期、施用場所、施用方法、害虫の種類、被害程度等の状況によって異なり、上記の範囲に闋わることなく増減して適宜選択することができる。実施例

以下、本発明を製剤例及び試験例によりさらに詳しく説明するが本発明はこれらの例に限定されるものではない。

尚、後述された「BT菌培養物」とは、バチルス 'チューリンジェンシス（Bacil lus thuringiesis)に属する細菌由来の生芽胞を 1 m 1当たり 1 X 10³個含む胞子懸濁液 100 1を、 500mlフラスコに入れて滅菌された L一 b r o t h液体培地（100ml) に接種し、 25 の条件下で、 2〜 5日間程度振とう培養（ 150 r pm) を行い、その後、得られた培養液からバチルス ·チュ一リンジェンシス（B acillus thuringiesis)に属する細菌由来の芽胞と殺虫性タンパク質との両者を遠心分離により回収し、乾燥することにより得られた培養物（即ち、本タンパク質の一つの形態）を意味する。製剤例 1 乳剤

本化合物（分子量 4, 000、 20, 000及び 500， 000) 1部と、 B T菌培養物 10部とを、キシレン 36. 5部及びジメチルホルムアミド 36. 5部に溶解し、これにポリオキシエチレンスチリルフエニルエーテル 10部及びドデシルペンゼンスルホン酸カルシウム 6部を加え、よく攪拌混合して乳剤を得る。製剤例 2 水和剤

本化合物（分子量 4， 000、 20， 000及び 500， 000) 5部と、 BT菌培養物 45部とを、ラウリル硫酸ナトリウム 4部リグニンスルホン酸カルシウム 2部、合成含水酸化珪素微粉末 22部及び珪藻土 22部を混合した中に加え、よく攪拌混合して水和剤を得る。製剤例 3 粒剤

本化合物（分子量 4， 000、 20， 000及び 500， 000) 1部に、 BT菌培養物 5部、合成含水酸化珪素微粉末 5部、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム 5部、ベントナイト 30部及びクレー 54部を加え、よく攪拌混合し、次いでこれらの混合物に適当量の水を加え、さらに攪拌し、増粒機で製粒し、通風乾燥して粒剤を得る。製剤例 4 粉剤

本化合物（分子量 4， 000、 20， 000及び 500, 000) 0. 5部と、 B T菌培養物 4部、合成含水酸化珪素微粉末 1部、凝集剤としてドリレス B (三共社製 ) 1部及びクレー 7部とを乳鉢でよく混合した後にジュースミキサ一で攪拌混合する。得られた混合物にカツトクレ一 86. 5部を加えて、充分攪拌混合して粉剤を得る

製剤例 5 フロアブル剤

本化合物（分子量 4， 000、 20， 000及び 500， 000) 1部と、 BT菌培養物 10部及びソルビタントリオェレート 1. 5部とを、ポリビニルアルコール 2 部を含む水溶液 26部中に加え、よく攪拌混合し、次いでこれらの混合物をサンドグライダーで微粉碎（粒径 3 m以下）した後、この中に、キサンタンガム 0. 05部及びアルミニウムマグネシウムシリゲート 0. 1部を含む水溶液 48部を加え、さらにプロピレングリコール 15部を加えて攪拌混合してフロアブル剤を得る。製剤例 6 油剤

本化合物（分子量 4， 000、 20， 000及び 500, 000) 0. 1部と、 B T菌培養物 0. 8部とを、キシレン 5部及びトリクロロェタン 5部に溶解し、これを脱臭灯油 89. 1部に混合して油剤を得る。製剤例 7 マイクロ力プセル剤

本化合物（分子量 4， 000、 20， 000及び 500, 000) 2部と、 ΒΤ菌培養物 8部、フエ二ルキシリルェ夕ン 10部及びスミジュール L— 75 (住友バイエルゥレ夕ン株式会社社製トリレンジィソシァネ一ト) 0. 5部とを混合した後、ァラビアガムの 10%水溶液 20部中に加え、ホモミキサーで攪拌して平均粒径 20 urn のエマルションを得る。次に、これにエチレングリコール 2部を加え、さらに 60 の温浴中で 24時間反応させてマイクロカプセルスラリーを得る。一方、ザンサンガム 0. 2部及びビーガム R (三洋化成株式会社製アルミニウムマグネシウムシリケ一ト） 1. 0部をイオン交換水 56. 3部に分散させて増粘剤溶液を得る。上記マイク口カプセルスラリー 42. 5部及び増粘剤溶液 57. 5部を混合してマイクロカプセル剤を得る。次に本発明組成物が優れた有害生物防除効果を示すことを試験例により示す。尚、 2種類の有効成分を混合して処理した際に予想される殺虫率の理論値は、例えば、 C o 1 byの計算式で代表される計算式（即ち、 E = X + Y— (X + Y/100) ) により求められる。当該式において、

X：有効成分 Aを Mp pmで処理した際の殺虫率（％)

Y：有効成分 Bを Nppmで処理した際の殺虫率（％)

E：有効成分 Aを M p p m、有効成分 Bを N p p mで処理した際に予想される殺虫率の理論値（％) 試験例 1 (Spodoptera litura に対する食葉浸漬試験、最適分子量の検討）

BT菌製剤品：フローバック (商標登録) (Bacillus thuringiensis var. aizaw ai ) ドライフロアブル製剤品、住友化学株式会社製）とポリエチレングリコール（以下、 PEGと称す。和光純薬工業株式会社製）の水希釈液とを混合して各々の所定濃度になるように加えた希釈液に、展着剤（特製リノ一：日本農薬株式会社製）を該希釈液の 1Z5000量加え、試験用薬液を調製した。尚、 PEGとしては、分子量 4 00、 1, 000、 4， 000、 20, 000、 500, 000及び 1 , 000, 0 00の PEGを各々用いた。ポット植えの 5〜 8葉期のキャベツの葉を切り取り、これを前記試験用薬液に 60秒間浸漬した。プラスチックカップ（500 c c) 内に、直径 9 Ommの濾紙を敷き、この上に浸漬後風乾したキャベツの葉を置いた。この上に、 Spodoptera litura の 3齢幼虫を 10頭放飼した（3反復）。処理 6日後に供試虫の生死を観察し、下記の式によって補正することにより殺虫率（5) を算出した。その結果を表 1および表 2に示す。尚、表 1及び表 2の中の「本タンパク質」における「施用濃度（ppm) 」は、 BT菌製剤品に含まれている BT培養物の量を本タンパク質の量として用いて算出した値である。殺虫率 ( ) = 100 X (M t -Mc) / (100 -Mc)

Mt ：供試化合物処理区における死虫率（％)

Mc ：供試化合物無処理区における死虫率（％)

表 1

供試薬剤施用濃度殺虫率の殺虫率の相乗効果有理論値 (%) 実測値 (%) 無判定結果本タンパク質 100 20. 0 一

PEG分子量 400 1000 0 ― 本発明組成物 100 (本タンハ。ク質) + 19. 8 30. 0 無し

1000 (PEG分子量 400)

本タンパク質 100 20. 0 ―

PEG分子量 1000 1000 0 ― 本発明組成物 100 (本タンハ。ク質） + 19. 8 23. 3 ノ、ゝ、

1000 (PEG分子量 1000)

本タンパク質 100 20. 0 ―

PEG分子量 4000 1000 0 ― 本発明組成物 100 (本タンハ。ク質） + 19. 8 60. 0 有り

1000 (PEG分子量 4000)

本タンパク質 100 20. 0 ―

PEG分子量 20000 1000 0 ― 本発明組成物 100 (本タンハ。ク質） + 19. 8 60. 0 有り

1000 (PEG分子量 20000)

表 2

試験例 2 (Spodoptera litura に対する食葉浸漬試験、最適混合量の検討）

BT菌製剤品：フローバック（登録商標）（Bacillus thuringiensis var. aizaw ai ) ドライフロアブル製剤品、住友化学株式会社製）とポリエチレングリコール（以下、本化合物、和光純薬工業株式会社製）の水希釈液とを混合して各々の所定濃度になるように加えた希釈液に、展着剤（特製リノ一：日本農薬株式会社製）を当該希釈液の 1/5000量加え、試験用薬液を調製した。尚、供試した本化合物としては、分子量 20, 000を用いた。ポット植えの 5〜 8葉期のキャベツの葉を切り取り、これを前記試験用薬液に 60秒間浸潰した。プラスチックカップ（500 c c) 内に、直径 9 Ommの濾紙を敷き、この上に浸漬後風乾したキャベツの葉を置いた。この上に、 Spodoptera litura の 3齢幼虫を 10頭放飼した（3反復）。処理 6日後に供試虫の生死を観察し、下記の式によって補正することにより殺虫率（5) を算出した。その結果を表 3及び表 4に示す。尚、表 3及び表 4の中の「本タンパク質」における「施用濃度（ppm) 」は、 BT菌製剤品に含まれている BT培養物の量を本タンパク質の量として用いて算出した値である。殺虫率 (%) = 100 X (M t -Mc) / (100 -Mc)

Mt ：供試化合物処理区における死虫率（％)

Mc ：供試化合物無処理区における死虫率（％) 表 3

供試薬剤施用濃度殺虫率の殺虫率の相乗効果有

(ppm) 理論値）実測値 «) 無判定結果本タンパク質 100 60. 0 ―

PEG分子量 20000 500 0 ― 本発明組成物 100 (本タンハ°ク質） + 59. 4 80. 0 有り

500 (PEG分子量 20000)

本タンパク質 100 60. 0

PEG分子量 20000 250 0 ■■— 本発明組成物 100 (本タンハ°ク質） + 59. 4 96. 7 有り

250 (PEG分子量 20000)

本タンパク質 100 60. 0 ―

PEG分子量 20000 125 0 一

本発明組成物 100 (本タンハ。ク質) + 59. 4 80. 0 有り

125 (PEG分子量 20000) 表 4

産業上の利用の可能性

本発明は、単に混合した時に得られると予想される相加効果以上の相乗効果を得ることが出来、使用する薬量の低減を可能とする有害生物防除組成物等を提供可能とする。

Claims

請求の範囲

1. バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性タンパク質と分子量が 2， 000〜800, 000の範囲であるポリエチレングリコールとを含有することを特徴とする有害生物防除組成物。

2. 相乗効果量の

バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性夕ンパク質と分子量が 2， 000〜 800, 000の範囲であるポリエチレングリコ一ルとを含有することを特徴とする有害生物防除組成物。

3. バチルス ·チューリンジェンシス (Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性タンパク質とポリエチレングリコールとが重量比で 1： 1000〜10： 1の割合で含有されてなることを特徴とする請求項 1または 2記載の有害生物防除組成物。

4. 殺虫性タンパク質が、バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringi esis)の生菌体もしくは芽胞、それらが熱若しくは化学的手段により死菌化処理された菌体、又はそれら菌体の破碎物に含まれた状態にある殺虫性タンパク質であることを特徴とする請求項 1又は 2記載の有害生物防除組成物。

5. バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性タンパク質とポリエチレングリコールとの両者の有効量を、混用又は同時に若しくは非同時に併用して、保護すべき植物、有害生物又は有害生物の生息場所に施用することを特徴とする有害生物防除方法。

6. 相乗効果量の

, バチルス 'チューリンジェンシス（Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性夕ンパク質とポリエチレングリコールとの両者の有効量を、混用又は同時に若しくは非同時に併用して、保護すべき植物、有害生物又は有害生物の生息場所に施用することを特徴とする有害生物防除方法。

7. 有害生物が鱗翅目害虫の幼虫であることを特徴とする請求項 5または 6記載の有害生物防除方法。

8. 有害生物がハスモンョトウであることを特徴とする請求項 5または 6記載の有害生物防除方法。

9. 有害生物防除のための、バチルス ·チューリンジェンシス（Bacillus thurin giesis)が産生し得る殺虫性タンパク質とポリエチレングリコールとの組み合わせ使用。

10. 有害生物防除のための、相乗効果量の

バチルス 'チューリンジェンシス (Bacillus thuringiesis) が産生し得る殺虫性夕ンパク質とポリエチレングリコールとの組み合わせ使用。