WO2006046583A1 - 視細胞またはその機能を再生させるための材料 - Google Patents

視細胞またはその機能を再生させるための材料 Download PDF

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WO2006046583A1
WO2006046583A1 PCT/JP2005/019653 JP2005019653W WO2006046583A1 WO 2006046583 A1 WO2006046583 A1 WO 2006046583A1 JP 2005019653 W JP2005019653 W JP 2005019653W WO 2006046583 A1 WO2006046583 A1 WO 2006046583A1
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stromal cells
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Inventor
Noriyuki Kuno
Fumihiko Takamatsu
Original Assignee
Santen Pharmaceutical Co., Ltd.
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    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/35—Fat tissue; Adipocytes; Stromal cells; Connective tissues
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
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    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Definitions

  • the present invention is a therapeutic agent for a disease that causes photoreceptor cell damage, containing fat-derived stromal cells as an active ingredient.
  • the present invention also relates to a photoreceptor cell containing fat-derived stromal cells as an active ingredient or a material for regenerating the function thereof.
  • a photoreceptor cell is a cell that converts a light stimulus to the retina into an electrical signal, and controls an important function related to optical sensation and vision.
  • diseases that cause photoreceptor cell damage include retinal pigment degeneration, cone dystrophy, age-related macular degeneration, age-related macular disease, macular edema, retinal detachment, cancer-related retinopathy, retinal vein occlusion, retinal pigment epithelial detachment, etc. Is mentioned.
  • These diseases are refractory and are not easily cured even by administration of existing drugs, and it is impossible to restore the function of photoreceptors that have once degenerated or fallen.
  • it is desired to regenerate the function of photoreceptor cells As a new treatment method, regenerative medicine is attempted in which cells of tissues of self and other families are transplanted, and cells, tissues and organs that have malfunctioned are replaced and regenerated.
  • Non-Patent Document 1 is a paper on the differentiation of adipose-derived stromal cells, in which fat tissue-adherent cells are separated and their properties are examined.
  • adipose-derived stromal cells from adipose tissue, for example, it is pointed out that collection of adipocytes is easy and patient suffering is relatively small.
  • bone marrow stromal cells isolated from bone marrow are effective in treating central nervous system diseases, and also in treating diseases derived from retinal vascular lesions such as retinitis pigmentosa and macular degeneration. Suggests it is valid
  • Patent Document 1 Japanese Translation of Special Publication 2002-504503
  • Non-Patent Document l Mol Biol Cell 13; 4279_4295,2002
  • the present inventors conducted extensive research on photoreceptors or materials for regenerating their functions, and found that they were derived from rat fat in a pharmacological test using spontaneous rat retinal degeneration model rats (RCS rats). When stromal cells are injected under the retina, photoreceptor cells or their functions are regenerated, and it has been found that the inhibitory effect on photoreceptor cell degeneration is significantly superior to the case where rat bone marrow stromal cells are injected. It was.
  • the present invention provides:
  • a therapeutic agent for diseases that cause photoreceptor damage comprising fat-derived stromal cells as an active ingredient
  • retinal degenerative disease is retinal pigment degeneration, cone dystrophy, age-related macular degeneration, macular edema, retinal detachment, cancer-related retinopathy, retinal vein occlusion, or retinal pigment epithelial detachment Agents, and
  • photocytopathy refers to those in which the photocell is damaged by various factors
  • examples of the “disease causing photocytopathy” include, for example, the retina.
  • Examples include retinal degenerative diseases such as pigment degeneration, cone dystrophy, age-related macular degeneration, age-related macular disease, macular edema, retinal detachment, cancer-related retinopathies, retinal vein occlusion, and retinal pigment epithelial detachment.
  • the adipose-derived stromal cells used in the present invention are not particularly limited and have impaired visual cells.
  • the patient's own tissue strength may be collected, or a tissue force other than the patient may be collected.
  • fat-derived stromal cells can be cultured and grown by the following method.
  • adipose tissue mass collected from human subcutaneous fat is minced with scissors, and the resulting strips are shaken with a collagenase solution, filtered through a filter, and a cell group is collected by centrifugation. To do.
  • a cell group is collected by centrifugation.
  • adherent cells are collected from the collected cell group, and cultured in an incubator to proliferate, thereby obtaining adipose-derived stromal cells.
  • the adipose-derived stromal cells include those into which a photoreceptor cell-specific homeobox gene and a gene encoding a factor exhibiting a neuroprotective action or a degeneration inhibitory action are introduced.
  • the photoreceptor-specific homeobox gene is a gene or differentiation trait that has a region-specific expression pattern in the photoreceptor cell and controls the region-specific morphogenesis.
  • Examples of such genes include Crx, Otx2, Nrl, Chx 10, and the like.
  • BDNF brain-derived neurotrophic factor
  • PEDF retinal pigment epithelium-derived neurotrophic factor
  • HGF cell growth factor
  • the method for introducing a photoreceptor-specific homeobox gene into a fat-derived stromal cell or a gene encoding a factor that exhibits a neuroprotective action or a degeneration-suppressing action is not particularly limited.
  • the lipofusion method elect In addition to physicochemical introduction methods such as the mouth position method, calcium phosphate method, and gene gun method, adenovirus vectors, adeno-associated wi-less vectors, retro winores betaters, sendai winores betaters, sendai virus envelope vectors, etc. The method using is mentioned.
  • the therapeutic agent for diseases causing visual cell damage of the present invention includes, for example, brain-derived neurotrophic factor (BDNF), retinal pigment epithelium-derived neurotrophic When combined with factors (PEDF), hepatocyte growth factor (HGF), etc. (transplant / carrier), the therapeutic effect is enhanced.
  • BDNF brain-derived neurotrophic factor
  • PEDF retinal pigment epithelium-derived neurotrophic
  • HGF hepatocyte growth factor
  • these factors and cross-linking When gelatin hydrogenol (hydrogel obtained by cross-linking gelatin) is administered in combination, the factor is sustained-released, resulting in a long-term therapeutic effect.
  • the therapeutic agent for diseases causing photoreceptor cell damage of the present invention or a material for regenerating photoreceptor cells or a function thereof, if necessary, a pharmaceutically acceptable stabilizer, preservative, solubilizing agent.
  • a pharmaceutically acceptable stabilizer such as agents, pH adjusters, thickeners, suspending agents, buffering agents, isotonic agents, preservatives, soothing agents, anti-oxidants, A well-known thing can be used.
  • the present invention also provides a method for treating a disease causing a photoreceptor damage, comprising administering an effective amount of an adipose-derived stromal cell to a patient, and an effective amount of an adipose-derived stromal cell. It also relates to a method for regenerating a photoreceptor cell or a function thereof.
  • the dose (injection amount) of the therapeutic agent for diseases causing visual cell damage of the present invention can be appropriately adjusted in consideration of the disease site, the degree of the disease, the age and weight of the patient, and the like.
  • the range of 1 10 3 to 1 10 12 cells (per time) is preferred.
  • the mode of administration is not particularly limited, but can be injected, for example, as an injection into the site of photoreceptor damage or its surrounding tissues (subretinal, intraretinal, intravitreal, etc.).
  • examples of the material for regenerating the photoreceptor cell or the function thereof of the present invention include a material in which a fat-derived stromal cell is seeded on a sheet-like scaffold. It can be transplanted or implanted in the surrounding tissues (subretinal, intraretinal, intravitreous, etc.) or can be injected by injection.
  • the fat-derived stromal cells of the present invention are retinal pigment degeneration, cone dystrophy, age-related macular degeneration, age-related macular disease, macular edema, retinal detachment, cancer-related retinopathy, retinal vein occlusion, retina It is useful as a therapeutic agent for diseases that cause photoreceptor cell damage such as pigment epithelial detachment, and is an excellent material for regenerating photoreceptor cells or their functions.
  • Green fluorescent protein transgenic rats (3 weeks old) were euthanized by over anesthesia with jetyl ether, and subcutaneous fat was collected.
  • the collected subcutaneous fat was shredded with scissors in phosphate buffered saline (5 ml), 5 ml collagenase solution (2 mg / ml) was added, and the mixture was shaken at 37 ° C for 15 to 20 minutes.
  • the filtrate was centrifuged (2000 rpm, 5 minutes), the supernatant was removed, the residue was suspended in Medium 99 (10 ml) containing 10% ushi fetal serum, and this suspension was centrifuged again (1000 rpm, 10 minutes). After removing the supernatant, the residue was suspended in 5 ml of Medium 99 containing 10% ushi fetal serum, seeded in a culture flask, and cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 conditions. 12-24 hours after seeding, cultivated to remove non-adherent cells
  • Green fluorescent protein transgenic rats (3 weeks old) were euthanized by anesthesia with jetyl ether, and femur and tibia were collected.
  • Cells were extruded from the bone marrow of the femur and tibia with phosphate buffered saline (1 ml) using a 1 ml syringe and 24G needle.
  • the extruded cells were suspended in 15% ushi fetal serum-containing MEM (4 ml, manufactured by Invitrogen), seeded in a culture flask, and cultured under conditions of 37 ° C and 5% CO. After sowing,
  • Adipose-derived stromal cells were dispersed in phosphate buffered saline at 4 ⁇ 10 4 cells / ⁇ .
  • a suspension 5 ⁇ 1 (adipose-derived stromal cells; 2 ⁇ 10 5 cells) / eye) in which fat-derived stromal cells are dispersed is injected under the retina of both eyes of a 3-week-old RCS rat. did.
  • phosphate buffered saline was used as phosphate buffered saline.
  • Bone marrow stromal cells were dispersed in phosphate buffered saline at 4 ⁇ 10 4 cells / ⁇ 1. Next, a suspension 5 ⁇ 1 (bone marrow stromal cells; 2 ⁇ 10 5 cells) / eye) in which bone marrow stromal cells were dispersed was injected under the retina of both eyes of a 3-week-old RCS rat. As a control, phosphate buffered saline was used.
  • FIG. 1 is a graph showing the residual rate (average value) of b-wave amplitude at 4 weeks after injection of fat-derived stromal cells and bone marrow stromal cells under the retina.

Abstract

本発明は、網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、黄斑浮腫、網膜剥離などの視細胞障害を惹起する難治性疾患に対して有効な治療剤を探索すること、および視細胞若しくはその機能を再生させるために有用な材料を提供する。脂肪由来間質細胞を視細胞障害部位またはその周辺組織に注入すると、視細胞またはその機能が再生し、優れた網膜変性抑制効果を示す。したがって、脂肪由来間質細胞は、網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、黄斑浮腫、網膜剥離、癌関連網膜症、網膜静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離などの視細胞障害を惹起する疾患の治療剤として有用であり、また、視細胞またはその機能を再生させるための優れた材料となる。

Description

明 細 書
視細胞またはその機能を再生させるための材料
技術分野
[0001] 本発明は、脂肪由来間質細胞を有効成分として含有する視細胞障害を惹起する疾 患の治療剤である。また、本発明は、脂肪由来間質細胞を有効成分として含有する 視細胞またはその機能を再生させるための材料に関する。
背景技術
[0002] 視細胞は、網膜への光刺激を電気信号に変換する細胞であり、光覚、視覚に関わ る重要な機能を司るので、視細胞に障害が生ずれば、視力や視野などに対して深刻 な影響を及ぼす。視細胞障害を惹起する疾患としては、例えば網膜色素変性、錐体 ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、黄斑浮腫、網膜剥離、癌関連網膜症、 網膜静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離などが挙げられる。これらの疾患は、難治性で 既存の薬物を投与しても容易には治癒されず、一旦変性'脱落した視細胞の機能を 取り戻すことはできないので、視細胞の変性を抑制 ·遅延させること、さらには視細胞 の機能を再生させることが望まれている。新しい治療方法として、 自家及び他家の細 胞ゃ組織を移植し、機能不全に陥った細胞、組織や臓器を置換、再生させる再生医 療が試みられている。
[0003] ところで、非特許文献 1は、脂肪由来間質細胞の分化に関する論文であり、脂肪組 織力 付着細胞を分離して、その性質を検討している。そして、脂肪組織から脂肪由 来間質細胞を得ることの利点として、例えば脂肪細胞の採取は容易であり、また患者 の苦痛も比較的少ないことを指摘している。他方、特許文献 1は、骨髄から単離した 骨髄間質細胞が中枢神経系疾患の治療に有効であり、網膜色素変性症、黄斑変性 症などの網膜血管の病変に由来する疾患の治療にも有効であることを示唆している
[0004] しかし、脂肪由来間質細胞に関して、視細胞障害に対する薬理作用を検討する報 告はない。
特許文献 1 :特表 2002— 504503号公報 非特許文献 l : Mol Biol Cell 13;4279_4295,2002
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0005] 網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、黄斑浮腫、網膜 剥離などの視細胞障害を惹起する難治性疾患に関して、視細胞またはその機能を 再生させるために有用な材料を提供できれば、視細胞障害を惹起する難治性網膜 疾患の根本的な治療に貢献できる。
課題を解決するための手段
[0006] 本発明者等は、視細胞またはその機能を再生させるための材料について鋭意研究 を行ったところ、 自然発症網膜変性モデルラット (RCSラット）を用いた薬理試験にお いて、ラット脂肪由来間質細胞を網膜下に注入すると、視細胞またはその機能が再 生し、ラット骨髄間質細胞を注入した場合よりも視細胞変性抑制効果が顕著に優れ ていることを見出し、本発明に至った。
[0007] すなわち、本発明は、
(1)脂肪由来間質細胞を有効成分として含有する視細胞障害を惹起する疾患の治 療剤、
(2)視細胞障害を惹起する疾患が網膜変性疾患である前（1)記載の治療剤、
(3)網膜変性疾患が、網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、黄斑浮腫 、網膜剥離、癌関連網膜症、網膜静脈閉塞症または網膜色素上皮剥離である前（2) 記載の治療剤、および
(4)脂肪由来間質細胞を有効成分として含有する視細胞またはその機能を再生させ るための材料、
に関する。
[0008] 本発明において、「視細胞障害」とは、種々の要因により視細胞が損傷を受けた状 態にあるものをレ、い、「視細胞障害を惹起する疾患」としては、例えば網膜色素変性 、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、黄斑浮腫、網膜剥離、癌関連網 膜症、網膜静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離などの網膜変性疾患が挙げられる。
[0009] 本発明で使用される脂肪由来間質細胞は、特に限定されず、視細胞に障害をもつ 患者自身の組織力 採取してもよぐまた、患者以外の組織力 採取したものを用い てもよレ、。例えば、以下の方法によって脂肪由来間質細胞を培養 ·増殖することがで きる。
[0010] まず、ヒトの皮下脂肪から採取した脂肪組織塊をハサミで細かくし、得られた細片を コラゲナーゼ溶液で振とう処理した後、フィルターで濾別し、遠心分離で細胞群を回 収する。つぎに、回収した細胞群から付着性細胞だけを回収し、インキュベーターで 培養して増殖させることにより、脂肪由来間質細胞が得られる。
[0011] 本発明において、脂肪由来間質細胞には、視細胞特異的ホメォボックス遺伝子や 神経保護作用あるいは変性抑制作用を示す因子をコードする遺伝子を導入したもの も含まれる。
[0012] 視細胞特異的ホメォボックス遺伝子としては、視細胞の発生過程にぉレ、て、視細胞 の領域特異的な発現様式を有し、かつ領域特異的な形態形成を制御する遺伝子や 分化形質の発現に関与する遺伝子などがあり、具体的には、 Crx、 Otx2、 Nrl、 Chx 10等が挙げられる。
[0013] また、神経保護作用あるいは変性抑制効果を示す因子をコードする遺伝子としては 、具体的には、脳由来神経栄養因子 (BDNF)、網膜色素上皮由来の神経栄養因子 (PEDF)、肝実質細胞増殖因子 (HGF)等の因子をコードする遺伝子が挙げられる
[0014] 脂肪由来間質細胞への視細胞特異的ホメォボックス遺伝子や神経保護作用あるい は変性抑制作用を示す因子をコードする遺伝子の導入方法は、特に制限されず、例 えば、リポフエクシヨン法、エレクト口ポレーシヨン法、リン酸カルシウム法、遺伝子銃を 用いる方法などの物理化学的な導入法をはじめ、アデノウイルスベクター、アデノ随 伴ゥイノレスベクター、レトロウイノレスベタター、センダイウイノレスベタター、センダイウイ ルスエンベロープベクターなどを用いる方法が挙げられる。
[0015] 本発明の視細胞障害を惹起する疾患の治療剤、または視細胞若しくはその機能を 再生させるための材料は、これに例えば脳由来神経栄養因子（BDNF)、網膜色素 上皮由来の神経栄養因子 (PEDF)、肝実質細胞増殖因子 (HGF)などの因子を併 用して投与 (移植 ·坦植)すると、治療効果が増強する。さらに、これらの因子と架橋 ゼラチンヒドロゲノレ (ゼラチンを架橋化して得られるヒドロゲル）を組み合わせて投与 すると、因子が徐放化される結果、長期に渡って治療効果が持続する。
[0016] 本発明の視細胞障害を惹起する疾患の治療剤、または視細胞若しくはその機能を 再生させるための材料は、必要に応じて製剤上許容される安定化剤、保存剤、可溶 化剤、 pH調整剤、増粘剤、懸濁化剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、無痛化剤、抗酸 化剤などの添加剤を含有してもよぐこれらの添加剤は公知のものを使用できる。
[0017] 本発明は、また、脂肪由来間質細胞の有効量を患者に投与することからなる視細胞 障害を惹起する疾患の治療方法、および、脂肪由来間質細胞の有効量を患者に投 与することからなる視細胞またはその機能を再生させる方法にも関する。
[0018] 本発明の視細胞障害を惹起する疾患の治療剤の投与量 (注入量）は、疾患部位や 疾患の程度、患者の年齢や体重などを考慮して適宜調整でき、脂肪由来間質細胞 数1 103〜1 1012個の範囲（1回当り）が好ましぃ。投与形態は、特に制限されな いが、例えば注射剤として視細胞障害部位またはその周辺組織 (網膜下、網膜内、 硝子体内など）に注入することができる。
[0019] また、本発明の視細胞またはその機能を再生させるための材料としては、例えば脂 肪由来間質細胞をシート状足場に播種したものが挙げられ、これらの材料は視細胞 障害部位またはその周辺組織 (網膜下、網膜内、硝子体内など）に移植 ·埋植しても よぐまた、注射などにより注入することもできる。
発明の効果
[0020] 後述するラットの脂肪由来間質細胞および骨髄間質細胞を用いた網膜変性抑制 試験の結果力も明らかなように、骨髄間質細胞を注入しても視細胞機能はほとんど 改善されないのに対し、脂肪由来間質細胞を注入すると、視細胞またはその機能が 再生し、優れた網膜変性抑制効果を発揮する。
[0021] したがって、本発明の脂肪由来間質細胞は、網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加 齢黄斑変性、加齢黄斑症、黄斑浮腫、網膜剥離、癌関連網膜症、網膜静脈閉塞症 、網膜色素上皮剥離などの視細胞障害を惹起する疾患の治療剤として有用であり、 また、視細胞またはその機能を再生させるための優れた材料となる。
発明を実施するための最良の形態 [0022] 以下に、薬理試験の結果および製剤例を示すが、これらの例は本発明をよりよく理 解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
[0023] 1.薬理試験
(1)ラット脂肪由来間質細胞の単離 '培養
緑色蛍光タンパクトランスジヱニックラット（3週齢）をジェチルエーテルの過麻酔に より安楽死させ、皮下脂肪を採取した。採取した皮下脂肪をリン酸緩衝生理食塩水（ 5ml)中でハサミを用いて細断し、 5mlのコラゲナーゼ溶液（2mg/ml)を加え、 37°C で 15〜20分間振とうした。振とう後、 10mlの 10%ゥシ胎仔血清含有 Mediuml99 (10 ml、 Invitrogen社製）を加え、懸濁液とした。この懸濁液を滅菌した 200 μ mフィルタ 一でろ過して細胞塊を除去した。ろ液を遠心分離（2000rpm、 5分間）し、上清を除 去した後、残渣を 10%ゥシ胎仔血清含有 Mediuml99 (10ml)に懸濁させ、この懸濁 液を再度遠心分離（1000rpm、 10分間）した。上清を除去した後、残渣を 5mlの 10 %ゥシ胎仔血清含有 Mediuml99に懸濁させ、培養用フラスコに播種し、 37°C、 5%C O条件下で培養した。播種後、 12〜24時間で、非付着性細胞を除去するために培
2
地交換 (ゥシ胎仔血清（10%)および塩基性線維芽細胞増殖因子（100ng/ml)含 有 Mediuml99)をし、付着性細胞を 37°C、 5% CO条件下でコンフルェントになるま
2
で培養して、実験用脂肪由来間質細胞を得た。
[0024] (2)ラット骨髄間質細胞の単離'培養
緑色蛍光タンパクトランスジエニックラット（3週齢）をジェチルエーテルの過麻酔に より安楽死させ、大腿骨および脛骨を採取した。 1mlのシリンジおよび 24Gの注射針 を用いてリン酸緩衝生理食塩水（1ml)で大腿骨および脛骨の骨髄中から細胞を押 出した。押出された細胞を 15%ゥシ胎仔血清含有ひ — MEM (4ml、 Invitrogen社製 )に懸濁させ、培養用フラスコに播種し、 37°C、 5%CO条件下で培養した。播種後、
2
4日目に非付着性細胞を除去するために培地交換（15%ゥシ胎仔血清および塩基 性線維芽細胞増殖因子（100 ng/ml)含有ひ— MEM)をし、 37°C、 5% CO条件
2 下でコンフルェントになるまで培養して、実験用骨髄間質細胞を得た。
[0025] (3)網膜変性抑制試験
Jiang LQらの方法（Invest. Ophthalmol. Vis. Sci 35(13):4300- 4309 (1994))に準じて 、網膜変性抑制試験を実施した。網膜変性抑制試験では、 自然発症網膜変性モデ ルラットとして、 RCSラット（Royal College of Surgeons Rat)を用レ、、網膜電図におけ る b波振幅 (注入前および注入 4週間後）を測定して、網膜変性抑制作用を評価した
[0026] i)脂肪由来間質細胞の網膜下注入による網膜変性抑制試験
(実験方法）
脂肪由来間質細胞を 4 X 104個/ μ ΐになるようにリン酸緩衝生理食塩水に分散させ た。つぎに、この脂肪由来間質細胞を分散させた懸濁液 5 μ 1 (脂肪由来間質細胞； 2 X 105個）/眼）を 3週齢の RCSラットの両眼の網膜下に注入した。コントロールとして リン酸緩衝生理食塩水を用レ、た。
[0027] 網膜下注入後 4週目に網膜電図をとり、 b波の振幅を測定した。網膜下注入後 4週 目の b波の残存率を、注入前における b波振幅を基準（100%)にして算出した。試験 結果を図 1に示す (網膜変性抑制効果は、 b波振幅残存率が高いほど大きい。）。な お、例数は各 8眼であり、残存率はその平均値である。
[0028] ii)骨髄間質細胞の網膜下注入による網膜変性抑制試験
(実験方法）
骨髄間質細胞を 4 X 104個/ μ 1になるようにリン酸緩衝生理食塩水に分散させた。 つぎに、この骨髄間質細胞を分散させた懸濁液 5 μ 1 (骨髄間質細胞； 2 X 105個) / 眼）を 3週齢の RCSラットの両眼の網膜下に注入した。コントロールとしてリン酸緩衝 生理食塩水を用いた。
[0029] 網膜下注入後 4週目に網膜電図をとり、 b波の振幅を測定した。網膜下注入後 4週 目の b波の残存率を、注入前における b波振幅を基準（100%)にして算出した。試験 結果を図 1に示す。なお、例数は各 8眼であり、残存率はその平均値である。
[0030] (結果）
図 1から明らかなように、脂肪由来間質細胞を網膜下に注入すると、視細胞または その機能が再生し、優れた網膜変性抑制効果を発揮した。これに対し、骨髄間質細 胞を網膜下に注入しても、ほとんど網膜変性抑制効果を示さなかった。
[0031] 2.製剤例 本発明の代表的な製剤例を以下に示す。
[0032] 注射剤 1 ( lml)
脂肪由来間質細胞 4 X 107個
濃グリセリン 26mg
滅菌精製水 適量
図面の簡単な説明
[0033] [図 1]図 1は、脂肪由来間質細胞および骨髄間質細胞を網膜下に注入した後 4週目 の b波振幅残存率（平均値）を示すグラフである。

Claims

請求の範囲
[I] 脂肪由来間質細胞を有効成分として含有する視細胞障害を惹起する疾患の治療剤
[2] 視細胞障害を惹起する疾患が網膜変性疾患である請求項 1記載の治療剤。
[3] 網膜変性疾患が、網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、 黄斑浮腫、網膜剥離、癌関連網膜症、網膜静脈閉塞症または網膜色素上皮剥離で ある請求項 2記載の治療剤。
[4] 脂肪由来間質細胞を有効成分として含有する視細胞またはその機能を再生させるた めの材料。
[5] 脂肪由来間質細胞の有効量を患者に投与することからなる視細胞障害を惹起する 疾患の治療方法。
[6] 視細胞障害を惹起する疾患が網膜変性疾患である請求項 5記載の治療方法。
[7] 網膜変性疾患が、網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、 黄斑浮腫、網膜剥離、癌関連網膜症、網膜静脈閉塞症または網膜色素上皮剥離で ある請求項 6記載の治療方法。
[8] 脂肪由来間質細胞の有効量を患者に投与することからなる視細胞またはその機能を 再生させる方法。
[9] 視細胞障害を惹起する疾患の治療剤を製造するための、脂肪由来間質細胞の使用
[10] 視細胞障害を惹起する疾患が網膜変性疾患である請求項 9記載の使用。
[II] 網膜変性疾患が、網膜色素変性、錐体ジストロフィー、加齢黄斑変性、加齢黄斑症、 黄斑浮腫、網膜剥離、癌関連網膜症、網膜静脈閉塞症または網膜色素上皮剥離で ある請求項 10記載の使用。
[12] 視細胞またはその機能を再生させるための材料を製造するための、脂肪由来間質細 胞の使用。
PCT/JP2005/019653 2004-10-26 2005-10-26 視細胞またはその機能を再生させるための材料 WO2006046583A1 (ja)

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JP2004-310442 2004-10-26
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