WO2005073184A1 - Composes derives de 1,3-diphenylprop-2-en-1-one, preparation et utilisations - Google Patents

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hydroxy
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Karine Caumont-Bertrand
Jean-François DELHOMEL
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Definitions

  • the present invention relates to substituted 1,3-diphenylprop-2-en-1- one derivatives, the pharmaceutical and / or cosmetic compositions comprising them, their therapeutic and / or cosmetic applications, in particular in the fields of human health. and animal.
  • the present invention also relates to a process for the preparation of these derivatives.
  • the compounds according to the invention represent an advantageous therapeutic tool for the improvement of pathologies linked to dysregulations of the lipid and / or carbohydrate metabolism (hyperlipidemia, diabetes, obesity etc.) and can be used in particular for preventing or treating cardiovascular diseases (in particular coronary heart disease, cerebral ischemia and peripheral arterial diseases), dyslipidemia, pathologies associated with syndrome X, diabetes, obesity, hypertension, inflammatory diseases, dermatological diseases (psoriasis, atopic dermatitis, acne, etc.), asthma, disorders linked to oxidative stress, the effects of aging in general, for example skin aging, in particular in the cosmetic field (the appearance of wrinkles, etc.).
  • cardiovascular diseases in particular coronary heart disease, cerebral ischemia and peripheral arterial diseases
  • dyslipidemia pathologies associated with syndrome X
  • diabetes obesity
  • hypertension inflammatory diseases
  • dermatological diseases psoriasis, atopic dermatitis, acne, etc.
  • asthma disorders linked to oxidative stress
  • the effects of aging in general for example
  • the compounds according to the invention are capable of exerting a prophylactic activity in terms of neuroprotection, and also of ensuring active neuroprotection in the acute phase of ischemic cerebral accidents, which constitute one of the major complications of cardiovascular affections.
  • the compounds according to the invention allow a reduction in the overall cardiovascular risk.
  • Coronary heart disease, cerebral ischemia and peripheral arterial diseases constitute the main cardiovascular diseases according to the International Atherosclerosis Society (Harmonized Clinical Guidelines on Prévention of Atherosclerotic Vascular Disease, 2003). Cardiovascular disease today represents one of the major causes of death in adults in most developed countries and in some developing countries. Among cardiovascular disease, cerebrovascular disease is the 3rd cause of death and the 1st cause of disability in adults. The need for effective treatment and / or prevention strategies against these pathologies has become a global emergency. Dyslipidemia (hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia), diabetes and hypertension are among the clearly identified cardiovascular risk factors (IAS, 2003). It also seems that insufficient protection of lipoproteins against oxidation is an identified risk factor.
  • the compounds according to the invention are activators PPAR (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor) and that they therefore represent an advantageous therapeutic tool.
  • PPARs are associated with the metabolism of lipids and glucose.
  • the activators of PPARs for example fibrates, make it possible to regulate plasma cholesterol as well as the concentration of triglycerides via the activation of PPAR ⁇ (Hourton, Delerive et al. 2001). Treatment with fibrates leads to increased fatty acid oxidation in the liver. They also reduce the synthesis and expression of triglycerides (Staels and Auwerx 1998).
  • PPAR ⁇ activators are also able to correct hyperglycemia as well as the concentration of insulin. Fibrates also decrease the mass of adipose tissue thanks to a mechanism independent of food intake and expression of the gene encoding leptin (Guerre-Millo, Gervois et al. 2000). The therapeutic value of PPAR ⁇ agonists has been widely studied in the treatment of type II diabetes (Spiegelman 1998). PPAR ⁇ agonists have been shown to restore the insulin sensitivity of target tissues as well as reduce plasma glucose, lipid and insulin levels in both animal models of type II diabetes and in humans (Ram 2003).
  • PPARs by ligands also intervenes in the regulation of the expression of genes participating in processes such as inflammation, angiogenesis, cell proliferation and differentiation, apoptosis and the activities of iNOS, MMPase and TIMPs.
  • the activation of PPAR ⁇ in keratinocytes leads to a arrest of their proliferation and of the expression of genes involved in cell differentiation ( Komuves, Hanley et al. 2000).
  • the activation of PPARs has also been shown to interfere with the differentiation, maturation, migration and immunogenicity of dendritic cells, which are the most powerful antigen presenting cells (Gosset et al. 2001; Nencioni et al 2002; Angeli et al. 2003).
  • PPARs have anti-inflammatory properties because they negatively interfere with transcription mechanisms involving other transcription factors such as NF-kB or transcription activators (STAT) and AP-1 (Desvergne and Wahli 1999). These anti-inflammatory and anti-proliferative properties make PPARs therapeutic targets of interest for the treatment of diseases such as vascular occlusive diseases (atherosclerosis, etc.), cerebral ischemia, hypertension, diseases linked to neo -vascularisation (diabetic retinopathies, etc.), inflammatory diseases (Bowel's disease, psoriasis, etc.), asthma and neoplastic diseases (carcinogenesis, etc.). In addition, the compounds according to the invention have the advantage of being antioxidants.
  • diseases such as vascular occlusive diseases (atherosclerosis, etc.), cerebral ischemia, hypertension, diseases linked to neo -vascularisation (diabetic retinopathies, etc.), inflammatory diseases (Bowel's disease, psoria
  • ROS reactive oxygen species
  • ROS is done via an antioxidant system comprising an enzymatic component (superoxide dismutase, catalase and gluthation peroxidase) and a non-enzymatic component essentially carotenoids, vitamin C and vitamin E (Gilgun-Sherki, Melamed et al. 2001).
  • Inflammatory cytokines in atheromatous plaque including interleukin I, tumor necrosis factor (TNF- ⁇ and the surface counterpart of TNF ⁇ called CD-40 ligand), lead to production by macrophages and smooth muscle cells enzymes that can weaken the extracellular matrix. Cracking of the shell can result in occlusive thrombosis.
  • the compounds according to the invention are also advantageous therapeutic tools for the treatment and / or prevention of cerebral ischemia due to their pharmacological and in particular anti-inflammatory properties.
  • the first event of cerebral ischemia occurs within the first few hours, and consists of a massive release of glutamate which results in neuronal depolarization as well as cellular edema.
  • the entry of calcium into the cell induces mitochondrial damage promoting the release of free radicals as well as the induction of enzymes which cause the membrane degradation of neurons.
  • the entry of calcium and the production of free radicals in turn activate certain transcription factors, such as NF- ⁇ B.
  • This activation induces inflammatory processes such as the induction of adhesion proteins at the endothelial level, the infiltration of the ischemic focus by neutrophils, microglial activation, the induction of enzymes such as nitric oxide (NO) synthase type II or type II cyclooxygenase.
  • NO nitric oxide
  • the compounds of the present invention interfere with the differentiation and maturation of these dendritic cells and inhibit the migration of these cells to secondary lymphoid organs.
  • the compounds according to the invention have a reduced capacity to induce the proliferation of naive CD4 + T cells. The compounds according to the invention therefore interfere with the initiation of the immune response and therefore represent an advantageous therapeutic tool for the treatment of asthma.
  • the present invention relates to new substituted 1,3-diphenylprop-2-en-1-one derivatives, pharmaceutical and / or cosmetic compositions comprising them, their applications in therapy and / or in cosmetics, in particular in the fields of health. human and animal.
  • the present invention also relates to a process for the preparation of these derivatives.
  • the inventors have surprisingly demonstrated that the compounds according to the invention have an agonist PPAR activity and antioxidant properties.
  • the compounds according to the invention are therefore capable of interfering with at least two signaling pathways which are activated in particular during inflammation: the production of cytokines as well as the production of free radicals.
  • the compounds according to the invention represent an advantageous therapeutic and / or cosmetic means for the treatment of cardiovascular diseases, pathologies associated with syndrome X, dyslipidemias, diabetes, obesity, hypertension, inflammatory diseases, dermatological diseases (psoriasis, atopic dermatitis, acne, etc.), asthma, disorders linked to oxidative stress, aging in general, for example skin aging, in particular in the cosmetic field ( appearance of wrinkles, etc.).
  • the compounds according to the invention are capable of exerting a prophylactic activity in terms of neuroprotection, and also of ensuring active neuroprotection in the acute phase of ischemic strokes.
  • the compounds according to the invention represent an advantageous therapeutic tool for preventing and / or treating several cardiovascular risk factors linked to dysregulations of the lipid and / or carbohydrate metabolism (hyperlipidemia, diabetes, obesity, etc.). They reduce the overall risk.
  • the present invention therefore aims to provide new derivatives of 1, 3-diphenylprop-2-en-1-one having an improved formula and satisfactory therapeutic efficacy.
  • the compounds of formula (I) are as defined above and exclude the compounds of formula (I) for which simultaneously: "the groups Xi, X2 and X simultaneously represent a hydrogen atom," and one of the groups X 3 or X 5 represents a hydrogen atom or a halogen or an alkyl radical or an alkyloxy radical or an alkylthio radical or a hydroxyl group or a thiol group or a thionitroso group.
  • a particular object of the invention relates to the compounds of general formula (la) which correspond to the compounds of general formula (I) in which Xi and X 5 are hydrogen atoms.
  • the present invention relates to compounds of general formula (Ib) which correspond to the compounds of general formula (I) in which X 2 and X 4 are alkyl radicals and more advantageously in which Xi and X 5 are atoms 'hydrogen.
  • a particular subject of the invention relates to the compounds of general formula (Ic) which are compounds of general formula (I) in which Xi, X 3 and X 4 are alkyl radicals.
  • Another particular subject of the invention relates to the compounds of general formula (Id) which are compounds of general formula (I) in which Xi, X 2 ,
  • X 4 and X 5 are hydrogen atoms.
  • Another subject of the invention relates to the compounds of general formula (II) which are compounds of general formula (I) in which X 6 and X 8 are alkyl radicals. Even more preferably, the compounds of general formula (II) are those in which X 1 and X 5 are hydrogen atoms and advantageously in which X 2 and X 4 are alkyl radicals.
  • Another particular subject of the invention relates to the compounds of general formula (II) in which Xi, X 3 , X 4 , X 6 and X 8 are alkyl radicals.
  • Another particular subject of the invention relates to the compounds of general formula (II) in which e and Xs are alkyl radicals and Xi, X 2 , X 4 and X 5 are hydrogen atoms.
  • the compounds of formula (I) are as defined above with X 3 which represents a halogen atom or a thionitroso group or corresponds to the formula (Gj-Rj) n -G 'j-R'i as defined previously, in which G'i represents an oxygen atom or a sulfur atom.
  • the present invention also includes optical and geometric isomers, racemates, tautomers, salts, hydrates and mixtures of the compounds according to the invention.
  • the present invention also preferably includes the prodrugs of the compounds according to the invention, which, after administration in a subject, transform into compounds according to the invention and / or the metabolites of the compounds according to the invention which exhibit therapeutic activities comparable to compounds according to the invention.
  • At least one of the groups Gi or G'i represents a sulfur atom with i being able to take one of the values 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8.
  • alkyl designates a saturated, linear, branched or cyclic hydrocarbon radical, halogenated or not, more particularly having from 1 to 24, preferably 1 to 10, carbon atoms such as methyl, ethyl, propyl , isopropyl, n-butyl, isobutyl, tertiobutyl, pentyl, neopentyl, n-hexyl or cyclohexyl. Groups having one or two carbon atoms or having two to seven carbon atoms are particularly preferred. Methyl and ethyl groups are very particularly preferred.
  • alkenyl denotes an unsaturated, linear, branched or cyclic hydrocarbon radical, halogenated or not, more particularly having from 1 to 24, preferably 1 to 10, carbon atoms.
  • aryl denotes an aromatic hydrocarbon radical substituted or not, in particular substituted by at least one halogen atom, an alkyl, hydroxyl, thiol, alkyloxy, alkylthio, oxime or thionitroso radical. Phenyl groups are very particularly preferred.
  • heterocycle designates a saturated or unsaturated or aromatic cyclic radical comprising one or more heteroatoms, such as nitrogen, sulfur and oxygen.
  • heterocycles such as dithiolanes, pyridine, furan, thiophene or morpholine are particularly preferred.
  • the piperidine and piperazine heterocycles are advantageously substituted by at least one alkyl group as defined above.
  • thionitroso refers to a nitroso group linked to the aromatic cycle via a sulfur atom.
  • alkyloxy refers to an alkyl chain linked to the ring through an oxygen atom. The alkyl chain meets the definition previously stated.
  • alkylthio refers to an alkyl chain linked to the aromatic ring via a sulfur atom (thioether bond).
  • the alkyl chain meets the definition previously stated.
  • the halogen atom represents a chlorine, bromine, iodine or fluorine atom.
  • the present invention also relates to a process for the preparation of the compounds of formula (I).
  • the process of the present invention comprises bringing into contact in basic medium or in acid medium at least one compound of formula (A) with at least one compound of formula (B), the formulas (A) and (B) being :
  • X 7 can also represent a hydroxyl or thiol group.
  • the conditions for carrying out this reaction in an acid medium or basic are within the reach of those skilled in the art and can vary to a large extent.
  • the contacting of these two compounds is advantageously carried out in a stoichiometric manner. It is preferably carried out at room temperature (between about 18 ° C and 25 ° C) and at atmospheric pressure.
  • the reaction is preferably carried out in the presence of a base, such as an alkali metal hydroxide, such as sodium hydroxide or an alkali metal alcoholate such as sodium ethylate.
  • a base such as an alkali metal hydroxide, such as sodium hydroxide or an alkali metal alcoholate such as sodium ethylate.
  • reaction is preferably carried out in the presence of a strong acid, such as hydrochloric acid.
  • reaction scheme can be represented as follows
  • the synthesis in basic medium can be carried out as follows: The ketone (compound (A)) at 1 molar equivalent and the aldehyde (compound (B)) at 1 molar equivalent are dissolved in an hydroalcoholic hydroxide solution sodium at 20 molar equivalents. The whole is stirred for about 18 hours at room temperature (between 18 and 25 ° C). The medium is then acidified (in particular to reach a pH of around 2), in particular with hydrochloric acid.
  • the expected substituted 1,3-diphenylprop-2-en-1-one can be obtained by precipitation or solid / liquid extraction after evaporation of the reaction medium. It can then be purified by chromatography on silica gel or by recrystallization.
  • the synthesis in an acid medium can be carried out as follows: The ketone (compound (A)) at 1 molar equivalent and the aldehyde (compound (B)) at 1 molar equivalent are dissolved in a saturated ethanol solution gaseous hydrochloric acid. The whole is stirred at room temperature for about 6 hours, the solvent is removed, in particular by evaporation under reduced pressure. The substituted 1,3-diphenylprop-2-en-1-one is purified, in particular by chromatography on silica gel.
  • the process for preparing the compounds of formula (I) makes it possible to prepare compounds called below intermediate compounds.
  • the present invention also relates to certain raw materials and intermediate compounds obtained in the context of the present invention.
  • the present invention also relates to the compounds of general formula (I) as described above, as medicaments.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical and / or cosmetic composition
  • a pharmaceutical and / or cosmetic composition comprising, in a pharmaceutically and / or cosmetically acceptable carrier, at least one compound of general formula (I) as described above, optionally in combination with another therapeutic and / or cosmetic active ingredient. It is advantageously a pharmaceutical and / or cosmetic composition for the treatment of cardiovascular diseases, dyslipidemias, pathologies associated with syndrome X, diabetes, obesity, hypertension, inflammatory diseases, diseases dermatological
  • the pharmaceutical and / or cosmetic compositions according to the invention are capable of exerting a prophylactic activity in terms of neuroprotection, and also make it possible to ensure active neuroprotection in the acute phase of ischemic strokes.
  • a pharmaceutical and / or cosmetic composition for preventing and / or treating the appearance of several cardiovascular risk factors linked to dysregulations of the lipid and / or carbohydrate metabolism (hyperlipidemia, diabetes, obesity etc.) by reducing the overall risk.
  • the invention also relates to the use of at least one compound of formula
  • compositions according to the invention advantageously comprise one or more excipients or vehicles, acceptable from the pharmaceutical point of view. Mention may be made, for example, of saline, physiological, isotonic, buffered solutions, etc., compatible with pharmaceutical use and known to those skilled in the art.
  • compositions may contain one or more agents or vehicles chosen from dispersants, solubilizers, stabilizers, preservatives, etc.
  • Agents or vehicles usable in formulations are in particular methylcellulose, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, polysorbate 80, mannitol, gelatin, lactose, vegetable oils, acacia, etc.
  • the compositions can be formulated as injectable suspensions, gels, oils, tablets, suppositories, powders, capsules, capsules, etc., optionally by means of dosage forms or devices ensuring prolonged and / or delayed release.
  • an agent such as cellulose, carbonates or aids is advantageously used.
  • the compounds or compositions according to the invention can be administered in different ways and in different forms.
  • they can be injected orally or systemically, such as for example intravenously, intramuscularly, subcutaneously, trans-dermal, intra-arterial, etc.
  • the compounds are generally packaged in the form of liquid suspensions, which can be injected using syringes or infusions, for example.
  • the flow rate and / or the dose injected can be adapted by a person skilled in the art depending on the patient, the pathology, the mode of administration, etc.
  • the compounds are administered at doses which can vary between 1 ⁇ g and 2 g / administration, preferably from 0.1 mg to 1 g / administration.
  • the administrations can be daily or repeated several times a day, if necessary.
  • the compositions according to the invention can also comprise other agents or active principles.
  • FIG. 1a represents the antioxidant nature of compound 2 (Cpd 2) according to the invention tested at the concentration of 10 ⁇ M.
  • FIG. 1a represents the kinetics of formation of conjugated dienes over time.
  • the Lag-Phase is 120 minutes when the LDL are incubated with copper alone. This period is 314 minutes when the medium also contains compound 2.
  • FIG. 1b illustrates the speed of formation of the dienes. This is 1.8 nmol / min / mg LDL in the presence of copper alone, it is no more than 0.1 nmol / min / mg LDL when compound 2 is present in the medium.
  • FIG. 1c represents the maximum quantity of dienes formed during the experiment. Copper alone induces the formation of 372 nmol / mg of conjugated dienes, this amount is 35 nmol / mg when the medium also contains compound 2, which represents a 90% decrease in the amount of dienes formed.
  • Figures 2a, 2b. 2c illustrate the antioxidant nature of compound 4 (Cpd 4), compound 6 (Cpd 6) and compound 8 (Cpd 8) according to the invention tested at the concentration of lO ⁇ M.
  • FIG. 2a represents the kinetics of formation of conjugated dienes.
  • the Lag-Phase is 132 minutes when the LDL are incubated with copper alone.
  • the value of the lag phase is respectively 401, 205 and 169 minutes in the presence of compounds 4, 6 and 8.
  • FIG. 2b represents the calculation of the speed of formation of the dienes.
  • the rate of formation of copper-conjugated dienes is 2.2 nmol / min / mg LDL.
  • the presence of compounds 4, 6 and 8 causes a decrease in the speed of the oxidation reaction of the dienes. It is 0.2 nmol / min / mg in the presence of compound 4 and 1.7 nmol / min / mg in the presence of compound 6 or of compound 8.
  • the total amount of dienes formed (FIG.
  • the Fi g ure 3a illustrates the antioxidant character of compound 11 (Cpd 11) according to the invention.
  • the antioxidant nature of compound 11 has been demonstrated for different concentrations between 10 "6 M and 3.5.10 " 5 M.
  • the lag-phase is 87.2 minutes. From the concentration of 10 "6 M, there is an increase in the lag phase compared to the control: The lag phase is 101.5 minutes in the presence of compound 11 at the concentration of 10 " 6 M. It increases with the concentration compound in the medium to reach the maximum value observed: 210 minutes at a concentration of 3.3.10 "5 M.
  • FIG. 4a represents the antioxidant nature of compound 19 (Cpd 19) and compound 23 (Cpd 23) according to the invention tested at the concentration of lO ⁇ M.
  • FIG. 4a represents the kinetics of formation of conjugated dienes.
  • the Lag-Phase is 61 minutes in the presence of copper alone. In the presence of the compound
  • the antioxidant nature of compounds 19 and 23 also results in a reduction in the speed of formation of dienes and in a reduction in the total amount of dienes formed.
  • the rate of formation of the dienes is 1.9 nmol / min / mg of LDL (FIG. 4b). It is respectively 1, 6 and 1.3 nmol / min / mg of LDL in the presence of compounds 19 and 23.
  • the total amount of dienes formed is 370.9 nmol / mg of LDL ( figure 4c). It is respectively 346.6 and 340.3 nmol / mg of LDL in the presence of compounds 19 and 23.
  • Figures 5a. 5b. 5c illustrate the antioxidant nature of compound 25 (Cpd 25), compound 27 (Cpd 27), compound 29 (Cpd 29) and compound 31 (Cpd 31) according to the invention tested at the concentration of 10 ⁇ M.
  • Figure 5a shows the kinetics of LDL oxidation in the presence of different compounds: it increases in the presence of different antioxidant compounds. It is 54.9 minutes in the presence of compound 29. It increases to 87.6 minutes in the presence of compound 25, 124.5 minutes in the presence of compound 31 and reaches 170.8 minutes in the presence of compound 27.
  • the LDL oxidation rate is 2 nmol / min / mg LDL in the absence of compounds ( Figure 5b).
  • the presence of the compounds induces a reduction in the oxidation rate.
  • the speed is 1.6 nmol / min / mg in the presence of compound 25 and 1.4 nmol / min / mg in the presence of compound 31. This speed is minimal in the presence of compound 27 and reaches 0.8 nmol / min / mg.
  • the total amount of dienes formed is 386 nmol / mg of LDL in the absence of compounds (FIG. 5c). It is 374 nmol / mg in the presence of compound 27, it is 365 nmol / mg in the presence of compound 25 and 352 nmol / mg in the presence of compound 31.
  • Figures ⁇ a. 6b. 6c illustrate the antioxidant nature of compound 37 (Cpd 37) according to the invention tested at the concentration of lO ⁇ M.
  • Figure 6a shows the oxidation kinetics of LDL.
  • the presence of the compound in the medium results in an increase in the lag-phase. It reaches 106 minutes in the presence of compound 37 while it is only 56 minutes in the absence of compound.
  • the decrease in the rate of LDL oxidation and the decrease in the amount of dienes formed also testify to the antioxidant nature of the compound tested.
  • the oxidation rate is 2 nmol / min / mg of LDL
  • the total amount of dienes formed is 360.0 nmol / mg of LDL.
  • the presence of compound 37 it is no more than 326.9 nmol / mg of LDL (FIG. 6c).
  • FIGS 7a. 7b. 7c illustrate the antioxidant nature of compound 13 (Cpd
  • Figure 7a shows the oxidation kinetics of LDL.
  • the lag-phase is 67.3 minutes. It increases in the presence of the various compounds. This value is 100 minutes in the presence of compound 41, 126.5 minutes in the presence of compound 47, 148 minutes in the presence of compound 33 and 219 minutes in the presence of compound 13.
  • the presence of the compounds in the medium also has an influence on the oxidation rate of LDL and the total amount of dienes formed.
  • Compounds 13 and 33 cause a significant decrease in the oxidation rate of the dienes (Figure 7b).
  • the oxidation rate of the dienes is 2.5 nmol / min / mg of LDL in the absence of compounds. It is 1, 5 and
  • FIGS 8a. 8b. 8c illustrate the antioxidant nature of compound 17 (Cpd 17), compound 21 (Cpd 21), compound 39 (Cpd 39) and compound 43 (Cpd 43) according to the invention tested at the concentration of 10 "4 M.
  • the kinetics of LDL oxidation is shown in Figure 8a.
  • the lag phase In the absence of compound, the lag phase is 67.3 minutes. It increases in the presence of compounds 17, 39 and 43. In the presence of compound 43, the lag phase is 97 minutes. In the presence of compound 17, it is 148 minutes and in the presence of compound 39, it is 133 minutes.
  • Figure 8b shows the LDL oxidation rate. In the absence of compound it is 2.5 nmol / min / mg. In the presence of compound 17, it is 1.8 nmol / min / mg In the presence of compound 39, it is 1.2 nmol / min / mg and in the presence of compound 43, it is 2.2 nmol / min / mg.
  • FIG. 8c represents the total quantity of dienes formed during the oxidation.
  • Figures 9a and 9b illustrate the evaluation of the agonist properties PPAR ⁇ and PPAR ⁇ of the compounds according to the invention with the transactivation system PPAR ⁇ / Gal4 and PPAR ⁇ / Gal4 in RK13 cells.
  • the RK13 cells are incubated with compound 2 at concentrations of between 0.01 and 10 ⁇ M for 24 hours.
  • the results are represented by the induction factor (ratio between the luminescent signal obtained with the compound and the luminescent signal obtained without the compound) according to the different treatments. The higher the induction factor, the better the agonist property for PPAR ⁇ or PPAR ⁇ .
  • the results presented in FIG. 9a show the induction factors of compound 2 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the induction factor measured with compound 2 is maximum for the dose of 10 ⁇ M and reaches the value of 18.49.
  • the induction factor varies from 1.31 to 31.00, it increases with the concentration of compound 2 in the medium.
  • 15b. 15c. 16a. 17a. 18a. 18b illustrate the evaluation of the agonist properties PPAR ⁇ , PPAR ⁇ and PPAR ⁇ of the compounds according to the invention with the transactivation system PPAR ⁇ / Gal4, PPAR ⁇ / Gal4 and PPAR ⁇ / Gal4 in COS-7 cells.
  • COS-7 cells are incubated with the compounds according to the invention at different concentrations for 24 hours. The results are represented by the induction factor (ratio between the luminescent signal obtained with the compound and the luminescent signal obtained without the compound) according to the different treatments.
  • FIG. 10a illustrates the induction factors of compound 4 (Cpd4), compound 6 (Cpd6) and compound 8 (Cpd8) according to the invention.
  • the results presented in FIG. 10a show the induction factors of compound 4 (Cpd4), compound 6 (Cpd6) and compound 8 (Cpd ⁇ ) with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system.
  • the values of these induction factors are noted in the following table:
  • the maximum induction factor measured for compound 4 is 9.92 to 10 ⁇ M.
  • Compound 4 has a maximum induction factor of 5.82, it is observed for a concentration of 10 ⁇ M.
  • the maximum value of the induction factor observed with compound 6 is 6.83 (10 ⁇ M) with compound 6 and 2.74 with compound 8 (10 ⁇ M).
  • FIGS 11a. 11b and 11c illustrate the induction factors of compound 13 according to the invention (Cpd 13).
  • Figure 11a illustrates the induction factors of compound 13 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • Figure 11b illustrates the induction factors of compound 13 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • Figure 11c illustrates the induction factors of compound 13 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • FIGS 12a and 12b illustrate the induction factors of compound 23 according to the invention (Cpd23).
  • Figure 12a illustrates the induction factors of compound 23 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the maximum value is 8.35, it is observed from the concentration of 1 ⁇ M.
  • Figure 12b illustrates the induction factors of compound 23 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the maximum value is 7.24, it is observed from the concentration of 1 ⁇ M.
  • FIGS 13a and 13b illustrate the induction factors of compound 29 according to the invention (Cpd29).
  • Figure 13a illustrates the induction factors of compound 29 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • Figure 13b illustrates the induction factors of compound 29 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the maximum value is 87.56, it is observed at a concentration of 10 ⁇ M.
  • Figures 14a, 14b and 14c illustrate the induction factors of compound 31 according to the invention (Cpd31).
  • Figure 14a illustrates the induction factors of compound 31 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • Figure 14b illustrates the induction factors of compound 31 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • Figure 14c illustrates the induction factors of compound 31 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the maximum value is 11.70, it is observed for the concentration of 10 ⁇ M.
  • FIGS 15a. 15b and 15c illustrate the induction factors of compound 33 according to the invention (Cpd33).
  • Figure 15a illustrates the induction factors of compound 33 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • Figure 15b illustrates the induction factors of compound 33 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • FIG. 15c illustrates the induction factors of compound 33 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the maximum value is 90.84, it is observed from the concentration of 3 ⁇ M.
  • Figure 16a illustrates the induction factors of compound 35 according to the invention
  • Figure 16a illustrates the induction factors of compound 35 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the maximum value is 24.33, it is observed from the concentration of 1 ⁇ M.
  • Figure 17a illustrates the induction factors of compound 37 according to the invention (Cpd37) with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system.
  • the maximum value is 19.77, it is observed from the concentration of 1 ⁇ M.
  • FIGS 18a and 18b illustrate the induction factors of compound 39 according to the invention (Cpd39).
  • Figure 18a illustrates the induction factors of compound 39 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • Figure 18b illustrates the induction factors of compound 39 with the PPAR ⁇ / Gal4 transactivation system. The values of these induction factors are noted in the following table.
  • the maximum value is 4.86, it is observed from the concentration of 0.3 ⁇ M.
  • FIGs 19a. 19b. 19c. 19d. 20a. 20b. 20c and 20d are shown the effects of treatment with compound 2 (Cpd2), compound 13 (Cpd13), compound 33 (Cpd33) and compound 39 (Cpd39) on the metabolism of triglycerides and cholesterol in Apo E2 / E2 transgenic mice.
  • the animals were treated by gavage with 50 mg of compound per kg and per day, for 7 days.
  • Figures 19a and 19b show the decrease in plasma triglyceride and cholesterol levels induced by compound 2.
  • Figures 20a and 20b show the decrease in plasma triglyceride and cholesterol levels induced by compounds 13, 33 and 39.
  • Figures 19c and 19d show the distribution of triglycerides and cholesterol in lipoparticles evaluated by exclusion chromatography induced by treatment with compound 2.
  • FIGS. 20c and 20d show the distributions of triglycerides and cholesterol in the lipoparticles evaluated by exclusion chromatography induced by the treatment with compounds 13, 33 and 39.
  • a typical distribution of triglycerides and cholesterol is observed, mainly located in the lipoparticles. large size.
  • Figure 21 illustrates the interference of the compounds according to the invention with the differentiation of dendritic cells.
  • CD86 coupled to PE PhysicalErythrine
  • Figure 22 illustrates the interference of the compounds according to the invention with the maturation of the dendritic cells induced by LPS (LipoPolySaccharide).
  • LPS LipoPolySaccharide
  • FIG. 23 illustrates a Mixed Lymphocyte Reaction (MLR) carried out in the presence of increasing quantities of dendritic cells treated or not treated with compound 31 and incubated with naive CD4 + T cells for 7 days.
  • MLR Mixed Lymphocyte Reaction
  • the compounds of the invention are prepared according to the general methods described below.
  • ketone (1 eq) and the aldehyde (1 eq) are dissolved in a hydroalcoholic solution of sodium hydroxide (20 eq). The whole is stirred for 18 hours at room temperature.
  • 1,3-diphenylprop-2-en-1-one is obtained by precipitation or liquid solid extraction after evaporation of the reaction medium. It is purified by chromatography on silica gel or by recrystallization.
  • the sodium (1 eq) is dissolved in absolute ethanol.
  • the ketone (1 eq) and the aldehyde (1 eq) are added.
  • the whole is kept under stirring at temperature ambient for 12 hours then a 2N sodium hydroxide solution (5 eq) is added.
  • the whole is maintained at 100 ° C for 12 hours.
  • the reaction medium is acidified by addition of an aqueous solution of 6N hydrochloric acid.
  • the solvent is removed by evaporation under reduced pressure.
  • the residue is purified by chromatography on silica gel or by recrystallization.
  • Phenol (1 eq) or thiophenol (1 eq) is dissolved in acetonitrile, the halogen derivative (1 to 10 eq) and potassium carbonate (5 eq) are added.
  • the reaction medium is maintained for approximately 10 hours with vigorous stirring at reflux.
  • the salts are removed by filtration, the solvent and the excess reagent are removed by evaporation under reduced pressure, the expected product is purified by chromatography on silica gel.
  • the tert-butyl ester (1 eq) is dissolved in dichloromethane and then trifluoroacetic acid (10 eq) is added. The whole is kept for 12 hours with stirring at room temperature. The product formed is purified by chromatography on silica gel or by recrystallization.
  • Raw material 1 4 '- (Bromoéthyloxy) acetophenone
  • Raw material 2 4 '- (Pentylthioethyloxy) acetophenone
  • the raw material 1 (1 eq) and the penthanethiol (1 eq) are dissolved in methanol in the presence of triethylamine (2 eq).
  • the reaction medium is maintained at reflux for 18 hours, the solvent is removed by evaporation under reduced pressure.
  • the oil is taken up in ethyl acetate, washed with an aqueous solution of 2N hydrochloric acid.
  • the 4 '- (pentylthioethyloxy) acetophenone is obtained after purification on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 9-1).
  • This compound is synthesized from 4-hydroxy-3,5-dimethylbenzaldehyde and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 8-2). 1 H NMR CDCI3 ⁇ ppm: 1.43 (s, 6H), 1.49 (s, 9H), 2.28 (s, 6H), 7.53 (s, 2H), 9.88 (s, 1 H )
  • 2,6-Dimethylphenol (1éq) is dissolved in methylene chloride, the solution is cooled to 0 ° C and then aluminum chloride (3éq) and acetyl bromide (2éq) are added. The whole is stirred for 3 hours at room temperature, then poured onto ice. The aqueous phase is extracted with dichloromethane, the organic phase is washed with water until neutral, dried over magnesium sulfate and then the solvent is removed by evaporation under reduced pressure. The intermediate ester obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent: cyclohexane-ethyl acetate: 9-1) and then taken up in a 2N aqueous sodium hydroxide solution (2.5 eq).
  • This compound is synthesized from 4-hydroxy-3,5-dimethylbenzaldehyde and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 8-2). 1 H NMR CDCI 3 ⁇ ppm: 1.43 (s, 6H), 1.49 (s, 9H), 2.28 (s, 6H), 7.53 (s, 2H), 9.88 (s, 1H )
  • 2,6-Dimethylphenol (1éq) is dissolved in methylene chloride, the solution is cooled to 0 ° C and then aluminum chloride (3éq) and acetyl bromide (2éq) are added. The whole is stirred for 3 hours at room temperature, then poured onto ice. The aqueous phase is extracted with dichloromethane, the organic phase is washed with water until neutral, dried over magnesium sulfate and then the solvent is removed by evaporation under reduced pressure. The intermediate ester obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent: cyclohexane-ethyl acetate: 9-1) and then taken up in a 2N aqueous sodium hydroxide solution (2.5 eq).
  • This compound is synthesized from 4'-hydroxyacetophenone and (R, S) -5- [1, 2] dithiolan-3-ylpentanol according to the general method 5 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 95-5).
  • This compound is synthesized from 4-hydroxy-3,5-dimethylbenzaldehyde and
  • Raw material 7 4 '- (Cyclohexylethyl) acetophenone
  • This compound is synthesized from 4'-hydroxyacetophenone and 2-cyclohexylethanol according to the general method 5 previously described.
  • Raw material 8 2,6-Dimethylthioanisole
  • This compound is synthesized from 2,6-dimethylthiophenol and methyl iodide according to the general method 4 previously described.
  • Raw material 9 3 ', 5'-Dimethyl-4'-methylthioacetophenone
  • the raw material 8 (1 eq) is dissolved in methylene chloride, the solution is cooled to 0 ° C. and then aluminum chloride (2.5 eq) and acetyl bromide (2 eq) are added. The whole is stirred for 72 hours at room temperature, then poured onto ice. The aqueous phase is extracted with dichloromethane, the organic phase is washed with water until neutral, dried over magnesium sulfate and then the solvent is removed by evaporation under reduced pressure.
  • This compound is synthesized from the raw material 4 and methyl iodide according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from the raw material 4 and 2-cyclohexylethanol according to the general method 5 previously described.
  • Raw material 12 4 '- (Bromoethyloxy) -3', 5'-dimethylacetophenone
  • This compound is synthesized from the raw material 4 and dibromoethane according to the general method 4 previously described.
  • Raw material 13 4 '- (Cyclohexylthioethyloxy) acetophenone
  • This compound is synthesized from the raw material 1 and from cyclohexane thiol according to the general method 4 previously described.
  • Raw material 14 4 '- (Cyclohexylthioethyloxy) -3', 5'-dimethylacetophenone
  • This compound is synthesized from the raw material 12 and from cyclohexane thiol according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from 4'-hydroxy-3-methylacetophenone and methyl iodide according to the general method 4 previously described.
  • the crude product obtained after elimination of the potassium carbonate by filtration and elimination of the solvents by evaporation under reduced pressure is used for the synthesis of the corresponding intermediate compound.
  • Raw material 16 1, 3-Dimethyl-2-hexylthiobenzene
  • Raw material 17 3 ', 5'-Dimethyl-4'-hexylthioacetophenone
  • the raw material 16 (1 eq) is dissolved in methylene chloride, the solution is cooled to 0 ° C. and then aluminum chloride (1 eq) and acetyl bromide (1 eq) are added. The whole is stirred for 2 hours at room temperature, then poured onto ice. The aqueous phase is extracted with dichloromethane, the organic phase is washed with water until neutral, dried over magnesium sulfate and then the solvent is removed by evaporation under reduced pressure. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane).
  • Raw material 18 3 ', 5'-Dimethyl-4' - (Morpholin-4-ylethyloxy) acetophenone
  • reaction medium is extracted with dichloromethane.
  • organic phases are combined, dried over magnesium sulfate.
  • the solvent is removed by evaporation under reduced pressure.
  • Raw material 20 4'-Methoxy-3'-trifluoromethylacetophenone
  • reaction medium is left at 4:00 pm with stirring at room temperature and then one hour at reflux after addition of a supplement of methyl magnesium chloride (1 eq).
  • the reaction medium is poured onto an aqueous solution of 1N hydrochloric acid, and extracted with dichloromethane.
  • the organic phase is neutralized with an aqueous solution of potassium bicarbonate and then washed with water.
  • the organic phase is dried over magnesium sulfate and then the solvent is removed by evaporation under reduced pressure.
  • This compound is synthesized from the raw material 2 and 4-hydroxy-3,5-dimethylbenzaldehyde according to the general method 1 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 85-15).
  • This compound is synthesized from the raw material 5 and from 4-hydroxy-3,5-dimethylbenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • This compound is synthesized from 4'-methylthioacetophenone and 3,5-dibromo-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • This compound is synthesized from the raw material 7 and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • the product crystallizes in the reaction medium, it is drained, washed with ethanol previously cooled to 0 ° C and dried under vacuum.
  • This compound is synthesized from the raw material 9 and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 8-2).
  • This compound is synthesized from the raw material 10 and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • the product crystallizes in the reaction medium, it is drained, washed with ethanol previously cooled to 0 ° C and dried under vacuum.
  • This compound is synthesized from the raw material 11 and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 8-2).
  • This compound is synthesized from the raw material 13 and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • the product crystallizes in the reaction medium, it is drained, washed with ethanol previously cooled to 0 ° C.
  • This compound is synthesized from 2 ', 4', 5'-trimethylacetophenone and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • This compound is synthesized from the raw material 14 and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 7-3).
  • This compound is synthesized from pentamethylacetophenone and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • the product crystallizes in the reaction medium, it is drained and purified by recrystallization from ethanol.
  • This compound is synthesized from 4'-phenoxyacetophenone and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • This compound is synthesized from 4'-methoxy-3'-fluoroacetophenone and
  • the product crystallizes in the reaction medium, it is drained and then washed with heptane.
  • This compound is synthesized from the raw material and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • the product crystallizes in the reaction medium, it is drained and washed with heptane.
  • This compound is synthesized from the raw material 17 and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 8-2).
  • This compound is synthesized from 2 ', 5'-dimethoxyacetophenone and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • This compound is synthesized from 4'-bromoacetophenone and from the raw material 19 according to the general method 1 previously described.
  • the ethanol is removed by evaporation under reduced pressure, the solid is washed with absolute ethanol.
  • This compound is synthesized from the raw material and 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzaldehyde according to the general method 1 previously described.
  • the ethanol is removed by evaporation under reduced pressure, the solid is washed with absolute ethanol.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 1 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 1 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from the raw material 3 and the raw material 4 according to the general method 1 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: dichloromethane-methanol: 95-5).
  • This compound is synthesized from compound 3 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 2 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 85-15).
  • This compound is synthesized from compound 5 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 3 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 7 according to the general method 6 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: dichloromethane-methanol: 98-2).
  • This compound is synthesized from intermediate compound 4 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: dichloromethane-cyclohexane: 7-3).
  • This compound is synthesized from compound 10 according to the general method 6 previously described. Purification by precipitation in the dichloromethane-heptane mixture.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 5 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 12 according to the general method 6 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: dichloromethane-methanol: 98-2).
  • This compound is synthesized from compound 14 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 6 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 16 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 3 and hexyl bromide according to the general method 4 previously described.
  • the crude product obtained after elimination of the potassium carbonate and elimination of the solvents by evaporation under reduced pressure was used for the synthesis of compound 19.
  • This compound is synthesized from compound 18 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 7 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 20 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 8 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 22 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 9 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 24 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 10 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 95-5).
  • This compound is synthesized from compound 26 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 11 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 28 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 12 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 30 according to the general method 6 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: dichloromethane-methanol: 98-2).
  • This compound is synthesized from intermediate compound 13 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 32 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 14 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 34 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 15 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 36 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 16 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 38 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 17 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • This compound is synthesized from compound 40 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from raw materials 18 and 3 according to the general method 1 previously described. After elimination of the ethanol by evaporation under reduced pressure. Compound 42 is obtained after trituration of the residual oil in diethyl ether.
  • Compound 42 is dissolved in ethanol and then a 2M sodium hydroxide solution is added. The whole is maintained at 4:00 p.m. with stirring at room temperature. The reaction medium is poured into water, the aqueous phase is washed with ethyl acetate, neutralized by addition of acetic acid. The aqueous phase is extracted with diethyl ether. The precipitate which forms in the ethereal phase is drained and recrystallized from absolute ethanol.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 18 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described. Purification by chromatography on silica gel (elution: cyclohexane-ethyl acetate: 95-5).
  • This compound is synthesized from compound 44 according to the general method 6 previously described.
  • This compound is synthesized from intermediate compound 19 and tert-butyl bromoisobutyrate according to the general method 4 previously described.
  • the compounds tested are the compounds according to the invention, the preparation of which is described in the examples described above.
  • the LDLs are prepared according to the method described by Lebeau et al. (Lebeau, Furman et al. 2000).
  • EDTA is removed from the LDL preparation by dialysis.
  • the oxidation then takes place at 30 ° C by adding 10O ⁇ l of a solution with 16.6 ⁇ M of CuSO 4 to 160 ⁇ L of LDL (125 ⁇ g of proteins / ml) and 20 ⁇ l of a solution of the test compound .
  • the formation of dienes, the species to be observed, is measured by optical density at 232 nm in the samples treated with the compounds with or without copper.
  • the optical density at 232 nm is measured every 10 minutes for 8 hours using a thermostated spectrophotometer (tecan Ultra 380). The analyzes are carried out in triplicate.
  • the compounds have an antioxidant activity when they induce a lag phase lag and decrease the oxidation rate and the amount of dienes formed compared to the control sample.
  • the inventors demonstrate that the compounds according to the invention have at least one of the antioxidant properties mentioned above, this indicating that the compounds according to the invention have an intrinsic antioxidant character.
  • the cell lines used for this type of experiment are of the neuronal, neuroblastoma (human) and PC12 (rat) cells type.
  • PC12 cells were prepared from a rat pheochromocytoma and are characterized by the method of Greene and Tischler (Greene and Tischler, 1976). These cells are commonly used for studies of neuronal differentiation, signal transduction and neuronal death.
  • the PC12 cells are cultured as previously described (Farinelli, Park et al. 1996), in complete RPMI medium (Invitrogen) supplemented with 10% horse serum and 5% fetal calf serum. (Primary) cultures of endothelial cells and smooth muscles are also used.
  • the cells are ordered from Promocell (Promocell GmBH, Heidelberg) and are cultured according to the supplier's instructions. The cells are treated with different doses of compounds from 5 to 300 ⁇ M for 24 hours, the cells are then recovered and the increase in the expression of the target genes is evaluated by quantitative PCR.
  • the mRNAs are extracted from cells in culture treated or not with the compounds according to the invention.
  • the extraction is carried out using reagents from the Absolutely RNA RT-PCR miniprep Kit (Stratagene, France) according to the supplier's instructions.
  • the mRNAs are then assayed by spectrometry and quantified by quantitative RT-PCR using the Light Cycler Fast start DNA Master Sybr Green I kit (Roche) on a Light Cycler System device (Roche, France).
  • Primer pairs specific for Super Oxide Dismutase (SOD), Catalase and Glutathione Peroxidase (GPx) genes, antioxidant enzymes are used as probes. Pairs of primers specific for the ⁇ -actin and cyclophilin genes are used as control probes.
  • SOD Super Oxide Dismutase
  • GPx Glutathione Peroxidase
  • the increase in the expression of mRNAs, measured by quantitative RT-PCR, of the genes of the antioxidant enzymes is demonstrated in
  • the antioxidant properties of the compounds are also evaluated using a fluorescent indicator, the oxidation of which is followed by the appearance of a fluorescent signal.
  • the decrease in intensity of the fluorescent signal emitted is measured in the cells treated with the compounds in the following manner: the PC12 cells cultured as previously described (black plates 96 wells transparent backgrounds, Falcon) are incubated with increasing doses of H 2 O 2 (0.25 mM - 1 mM) in serum-free medium for 2 to 24 hours. After the incubation, the medium is removed and the cells are incubated with a solution of dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA, Molecular Probes, Eu subconscious, USA) 10 ⁇ M in PBS for 30 min at 37 ° C.
  • DCFDA dichlorodihydrofluorescein diacetate
  • the cells are then rinsed with PBS.
  • the detection of the fluorescence emitted by the oxidation indicator is measured using a fluorimeter (Tecan Ultra 384) at an excitation wavelength of 495 nm and an emission wavelength 535 nm. The results are expressed as a percentage of protection relative to the oxidized control.
  • the fluorescence intensity is lower in the cells incubated with the compounds according to the invention than in the untreated cells.
  • the protective effect of the compounds on lipid peroxidation on cell cultures is determined as follows: the different cell lines as well as the cells in culture primary are treated as above, the cell supernatant is recovered after treatment and the cells are lysed and recovered for the determination of the protein concentration.
  • the detection of lipid peroxidation is determined as follows: Lipid peroxidation is measured using thiobarbituric acid (TBA) which reacts with lipoperoxidation of aldehydes such as malondialdehyde (MDA). After the treatments, the cell supernatant is collected (900 ⁇ l) and 90 ⁇ l of butylated hydroxytoluene are added thereto (Morliere, Moysan et al. 1991).
  • the reduction in lipid peroxidation observed in cells treated with the compounds according to the invention confirms the results obtained previously.
  • the compounds according to the invention advantageously have intrinsic antioxidant properties which make it possible to slow down and / or inhibit the effects of oxidative stress.
  • the inventors also show that the compounds according to the invention are capable of inducing the expression of the genes of antioxidant enzymes. These particular characteristics of the compounds according to the invention allow the cells to fight more effectively against oxidative stress and therefore to be protected from damage caused by free radicals.
  • Example 4 Evaluation of the activation of PPARs in vitro by the compounds according to the invention
  • the compounds according to the invention tested are the compounds having a carboxylic acid function and the preparation of which is described in the examples described above.
  • the nuclear receptors belonging to the PPAR subfamily which are activated by two major classes of pharmaceutical compounds, fibrates and glitazones, which are widely used in human clinics for the treatment of dyslipidemia and diabetes, play an important role in homeostasis lipid and carbohydrate.
  • the following experimental data show that the compounds according to the invention activate PPAR ⁇ .PPAR ⁇ and PPARD in vitro.
  • the activation of PPARs is evaluated in vitro in RK13 or COS-7 epitheloid cell lines by measuring the transcriptional activity of chimeras made up of the DNA binding domain of the transcription factor.
  • RK13 cells come from ECACC (Porton Do n, UK), COS-7 cells come from ATCC (American Type Culture Collection) and are cultured in DMEM medium supplemented with 10% vol / vol of calf serum fetal, 100 U / ml penicillin (Gibco, Paisley, UK) and 2 mM L-Glutamine (Gibco, Paisley, UK).
  • the culture medium is changed every two days.
  • the cells are stored at 37 ° C. in a humid atmosphere containing 5% of CO 2 and 95% of air.
  • the plasmids used in transfection The plasmids pG5TkpGL3, pRL-CMV, pGal4-hPPARcc, pGal4-hPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ and pGal4- ⁇ have been described by Raspe, Madsen et al. (1999).
  • the constructions pGal4-mPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ and pGal4-hPPAR ⁇ were obtained by cloning into the vector pGal4- ⁇ DNA fragments amplified by PCR corresponding to the DEF domains of the human receptors PPAR ⁇ , PPAR ⁇ and PPAR ⁇ .
  • RK13 cells are seeded in 24-well culture dishes at a rate of 5 ⁇ 10 4 cells / well, COS-7 cells in 96-well plates at a rate of 5 ⁇ 10 4 cells / well and are transfected for 2 hours with the plasmid reporter pG5TkpGL3 (50 ng / well), expression vectors pGal4- ⁇ , pGal4-mPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ (100 ng / well) and the transfection efficiency control vector pRL-CMV (1 ng / well) according to the protocol described above (Raspe, Madsen et al.
  • the cells are lysed (Gibco, Paisley, UK) and the luciferase activities are determined using the Dual-Luciferase TM Reporter Assay System assay kit (Promega, Madison, Wl, USA) for RK13 and Steady Glow Luciferase (Promega) cells for COS-7 cells according to the supplier's instructions as described above.
  • the protein content of the cell extracts is then evaluated using the Bio-Rad Protein Assay assay kit (Bio-Rad, M ⁇ nchen, Germany) according to the supplier's instructions.
  • the inventors demonstrate an increase in luciferase activity in cells treated with the compounds according to the invention and transfected with the plasmid pGal4-hPPAR ⁇ . This induction of luciferase activity indicates that the compounds according to the invention are activators of PPAR ⁇ . Examples of results are given in FIGS. 9a, 10a, 11a, 12a, 13a, 14a, 15a, 16a, 17a and 18a where the activating properties PPAR ⁇ of the compounds according to the invention are illustrated. The inventors demonstrate an increase in luciferase activity in cells treated with the compounds according to the invention and transfected with the plasmid pGal4-hPPAR ⁇ .
  • the inventors demonstrate an increase in luciferase activity in cells treated with the compounds according to the invention and transfected with the plasmid pGal4-hPPAR ⁇ . This induction of luciferase activity indicates that the compounds according to the invention are activators of PPAR ⁇ . Examples of results are shown in FIG. 11c, 13b, 14c and 15c where the PPAR ⁇ activating properties of the compounds are illustrated.
  • the inflammatory response appears in many neurological disorders, such as multiple sclerosis, Alzheimer's and Parkinson's disease, cerebral ischemia and traumatic brain injury.
  • inflammation is one of the important factors of neurodegeneration.
  • One of the first reactions of glia cells to stroke is to release cytokines and free radicals. The consequence of this release of cytokines and free radicals is an inflammatory response in the brain that can lead to the death of neurons (Rothwell, 1997).
  • LPS LipoPolySaccharide
  • bacterial endotoxin Esscherichia coli 011 1: B4
  • an LPS concentration 1 ⁇ g / ml for 24 hours.
  • the cell culture medium is completely changed.
  • TNF- ⁇ is an important factor in the inflammatory response to stress (oxidant for example).
  • the culture medium for the stimulated cells is removed and the amount of TNF- ⁇ is evaluated with an ELISA-TNF- ⁇ kit (Immunotech, France ).
  • the samples are diluted 50 times in order to be in line with the standard range (Chang, Hudson et al. 2000).
  • the anti-inflammatory property of the compounds is characterized in the following way: the culture medium of the cells is completely changed and the cells are incubated with the compounds to be tested for 2 hours. After this incubation, LPS is added to the culture medium at a final concentration of 1 mcg / ml.
  • the cell supernatant is recovered and stored at -80 ° C when it is not treated directly.
  • the cells are lysed and the amount of protein is quantified, using the Bio-Rad Protein Assay assay kit (Bio-Rad, M ⁇ nchen, Germany) according to the supplier's instructions.
  • the measurement of the decrease in TNF- ⁇ secretion favored by the treatment with the test compounds is expressed in pg / ml / ⁇ g of protein and reported as a percentage relative to the control.
  • the compounds according to the invention tested are the compounds whose preparation is described in the examples described above.
  • Fibrates abundantly used in human clinics for the treatment of dyslipidemias involved in the development of atherosclerosis, one of the main causes of mortality and morbidity in Western societies, are powerful activators of the nuclear receptor PPAR ⁇ . This regulates the expression of genes involved in transport (apolipoproteins such as Apo Al, Apo AM and Apo Clll, membrane transporters such as FAT) or the catabolism of lipids (ACO, CPT-I or CPT-II). Treatment with PPAR ⁇ activators therefore results, in humans and rodents, in a reduction in circulating cholesterol and triglyceride levels.
  • mice are maintained under a light / dark cycle of 12/12 hours at a constant temperature of 20 + 3 ° C. After a week's acclimatization, the mice are weighed and collected in groups of 6 animals selected so that the distribution of their body weight is uniform. The test compounds are suspended in the carboxymethylcellulose and administered by intragastric gavage, once a day for 7 days, at the doses indicated. Animals have free access to water and food. At the end of the experiment, the animals are weighed and sacrificed under anesthesia. Blood is collected on EDTA. The plasma is prepared by centrifugation at 3000 rpm for 20 minutes. Liver samples are taken and stored frozen in liquid nitrogen for further analysis.
  • Serum lipid concentrations total cholesterol and free cholesterol, triglycerides and phospholipids are measured by colorimetric determination (Boehringer, Mannheim, Germany) according to the supplier's instructions.
  • the serum concentrations of the apolipoproteins Al, Ail and Clll are measured according to the methods described above (Rasscher et al. 1999, Asset G et al., Lipids, 1999).
  • FIGS. 19a, 19b, 19c and 19d An example of results is given in FIGS. 19a, 19b, 19c and 19d where the activity of compound 2 on the metabolism of triglycerides and cholesterol is illustrated.
  • FIGS. 20a, 20b, 20c and 20d An example of results is given in FIGS. 20a, 20b, 20c and 20d where the activity of compounds 13, 33 and 39 on the metabolism of triglycerides and cholesterol is illustrated.
  • the messenger RNAs were quantified by quantitative RT-PCR using the Light Cycler Fast Start DNA Master Sybr Green I kit (Hoffman-La Roche, Basel, Switzerland) on a Light Cycler System device.
  • Example 7 Evaluation of the neuroprotective effects of the compounds according to the invention in a model of cerebral ischemia-reperfusion
  • the animals are kept under a light / dark cycle of 12/12 hours at a temperature of 20 +/- 3 ° C. Animals have free access to water and food. Food gain and weight gain are recorded. The animals are treated by gavage with the compounds according to the invention or the vehicle (0.5% carboxycellulose), for 14 days before the induction of ischemia of the cerebral middle artery.
  • mice The brains of the mice are frozen, crushed and reduced to powders then resuspended in a saline solution.
  • the different enzymatic activities are then measured as described by the following authors: superoxide dismutase (Flohe and Otting 1984); glutathione peroxidase (Paglia and Valentine 1967); glutathione reductase (Spooner, Delides et al. 1981); glutathione S-transferase
  • the animals are anesthetized using an intraperitoneal injection of 300 mg / kg of chloral hydrate.
  • a rectal probe is placed and the body temperature is maintained at 37 +/- 0.5 ° C. Blood pressure is measured during the whole experiment.
  • the right carotid is updated using a medial cervical incision.
  • the pterygopalatine artery was ligated at its origin and an arteriomy is performed in the external carotid artery in order to slip a nylon monofilament into it.
  • This filament is then gently advanced into the common carotid artery and then into the internal carotid artery in order to close off the origin of the middle cerebral artery. After 1 hour, the filament is removed to allow reperfusion.
  • Treatment of the animals The animals having undergone a prior ischemia-reperfusion are treated with the compounds according to the invention for 24 or 72 hours orally (gavage), twice a day.
  • the animals treated with the compounds according to the invention have damage to the brain level reduced compared to the untreated animals.
  • the volume of the infarction is reduced when the compounds according to the invention are administered one or more times after ischemia-reperfusion.
  • Example 8 Evaluation of the protective effects of the compounds according to the invention in an animal model of atherosclerosis
  • the compounds according to the invention by virtue of their activating and antioxidant PPAR properties, have a beneficial action on the progression of atheromatous plaque.
  • mice of approximately 2 months of age are maintained under a light / dark cycle of 12/12 hours at a constant temperature of 20 ⁇ 3 ° C during the acclimatization period and throughout the duration of the experimentation. After the acclimatization period of one week, the mice are weighed and grouped into groups of 8 animals selected so that the distribution of their body weight is uniform.
  • the animals have free access to water and food, they are subjected to a western type diet containing 21% fat and 0.15% cholesterol for a period of two weeks before treatment.
  • the compounds to be tested are introduced into the food at the doses indicated.
  • the treatment lasts 6 weeks.
  • the animals are weighed and sacrificed under anesthesia, by cervical dislocation. "The heart is perfused in situ and then prepared for histological analysis, a needle is introduced into the right ventricle and the aorta is sectioned in its abdominal part • Blood samples are taken before the start of the experiment, each week and then at the end of the experiment, the blood is collected on EDTA and the plasma is prepared by centrifugation at 3000 revolutions / minute for 20 minutes (measurements of plasma cholesterol and triglyceride levels).
  • a Krebs Ringer solution is introduced for 10 minutes.
  • the tissues are fixed with 4% PAF in a 10 mM PBS solution at -4 ° C overnight.
  • the samples are then washed with a 100 mM PBS solution.
  • the hearts are placed in a 30% sucrose-Tris solution for one day then immersed in OCT (tissue teck) under vacuum for 30 minutes then in a mold containing OCT, immersed in isopentane and cooled with liquid nitrogen.
  • the samples are stored at -80 ° C.
  • Cryosections of 10 ⁇ m thickness are made from the aortic arch until the valves disappear. They are collected on slides covered with gelatin.
  • the slides are stained with a solution of red oil and Phematoxylin so as to differentiate the middle part of the intima.
  • the different morphogenic parameters are determined using an Olympus microscope and a color camera coupled to the Analysis image analysis system.
  • the quantification of the injured surfaces is carried out manually using a graphic tablet coupled to the same computer system.
  • the global surface of atheromatous lesions is expressed in ⁇ M 2 , it is compared to the control group.
  • the compounds according to the invention tested allow a significant reduction in the surface of the lesions reflecting a reduction in the progression of the lesions.
  • Compound 39 is tested on the differentiation of dendritic cells derived from monocytes (by monitoring the acquisition of the phenotype of dendritic cells).
  • the blood samples come from voluntary donors (French Blood Establishment) and the monocytes are isolated using a standard protocol using magnetic beads conjugated to anti-CD14 (Miltenyi Biotec).
  • the differentiation of the monocytes thus isolated is then induced by incubating them 6 days in a culture medium containing a mixture of GM-CSF and IL-4 cytokines (20 ng / ml for each of the cytokines).
  • the acquisition of the phenotype of dendritic cells is then studied through the expression of the CD1a marker on the cell surface.
  • the inventors have thus shown that compound 39 interferes with importantly with the differentiation of dendritic cells by almost completely suppressing the expression of CD1a on the surface of the cells ( Figure 21).
  • the expression of the costimulation molecule CD80 is also reduced, to a lesser level, while the expression of CD86 is slightly increased (data not shown). Similar results are obtained by testing the compounds 13 and 31 of the invention. These results suggest that the compounds according to the invention interfere with the differentiation of dendritic cells and stimulate the dendritic cells towards the acquisition of an atypical phenotype.
  • BAL bronchoalveolar washing liquid
  • the compounds of the present invention interfere with the differentiation and maturation of dendritic cells and inhibit the migration of these cells to the secondary lymphoid organs.
  • the compounds have a reduced ability to induce the proliferation of naive CD4 + T cells.
  • the compounds according to the invention therefore interfere with the initiation of the immune response and therefore represent an advantageous therapeutic tool for the treatment of asthma.

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Abstract

La présente invention concerne de composés dérivés de 1,3-diphénylprop-2-èn-1-one substituées, des compositions pharmaceutiques et/ou cosmétiques les comprenant, leurs applications en thérapeutique et cosmétique. Elle a également trait à un procédé de préparation de ces dérivés.

Description

COMPOSES DERIVES DE 1,3-DIPHENYLPROP-2-EN-1-ONE, PREPARATION ET UTILISATIONS
La présente invention concerne des dérivés de 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1- one substitués, les compositions pharmaceutiques et/ou cosmétiques les comprenant, leurs applications en thérapeutique et/ou en cosmétique, notamment dans les domaines de la santé humaine et animale. La présente invention a également trait à un procédé de préparation de ces dérivés. Les composés selon l'invention représentent un outil thérapeutique avantageux pour l'amélioration des pathologies liées aux dérèglements du métabolisme lipidique et/ou glucidique (hyperlipidémie, diabète, obésité etc.) et sont utilisables notamment pour prévenir ou traiter les maladies cardiovasculaires (notamment les maladies coronariennes, l'ischémie cérébrale et les maladies artérielles périphériques), les dyslipidémies, les pathologies associées au syndrome X, le diabète, l'obésité, l'hypertension, les maladies inflammatoires, les maladies dermatologiques (psoriasis, dermatites atopiques, acné, etc.), l'asthme, les désordres liés au stress oxydatif, les effets du vieillissement en général, par exemple le vieillissement cutané, notamment dans le domaine cosmétique (l'apparition de rides, etc.). Les composés selon l'invention sont capables d'exercer une activité prophylactique en terme de neuroprotection, et également d'assurer une neuroprotection active dans la phase aiguë des accidents ischémiques cérébraux, qui constituent une des complications majeures des affections cardiovasculaires. Par leur action simultanée sur plusieurs facteurs de risque des maladies cardiovasculaires, les composés selon l'invention permettent une diminution du risque cardiovasculaire global.
Les maladies coronariennes, l'ischémie cérébrale et les maladies artérielles périphériques constituent les principales maladies cardiovasculaires selon l'International Atherosclerosis Society (Harmonized Clinical Guidelines on Prévention of Atherosclerotic Vascular Disease, 2003). Les maladies cardiovasculaires représentent aujourd'hui une des causes majeures de mortalité chez l'adulte dans la plupart des pays développés et dans certains pays en voie de développement. Parmi les maladies cardiovasculaires, la pathologie vasculaire cérébrale représente la 3ème cause de mortalité et la 1ère cause de handicap chez l'adulte. Le besoin de stratégies de traitement et/ou de prévention efficaces contre ces pathologies est devenu une urgence mondiale. Les dyslipidémies (l'hypercholestérolémie, l'hypertriglycéridémie), le diabète et l'hypertension font partie des facteurs de risque cardiovasculaire clairement identifiés (IAS, 2003). Il semble également qu'une protection insuffisante des lipoprotéines contre l'oxydation soit un facteur de risque identifié. Les études épidémiologiques ont montré qu'il existe un effet synergique entre ces différents facteurs. La présence concomitante de plusieurs d'entre eux conduit à une aggravation dramatique du risque cardiovasculaire. Il convient alors de parler de risque global (global risk) pour les maladies cardiovasculaires. II existe donc un réel besoin de produits capables d'agir de façon concomitante sur ces différents facteurs de risque et donc de diminuer le risque des maladies cardiovasculaires mais également de traiter chaque dérèglement et ses conséquences pris indépendamment (dyslipidémies, diabète, hypertension, ischémie cérébrale, pathologies associées au syndrome X, obésité, etc.).
Les inventeurs ont montré, de manière surprenante, que les composés selon l'invention sont des activateurs PPAR (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor) et qu'ils représentent donc un outil thérapeutique avantageux. Il est bien connu en effet que les PPARs sont associés au métabolisme des lipides et du glucose. Les activateurs de PPARs, les fibrates par exemple, permettent de réguler le cholestérol plasmatique ainsi que la concentration de triglycérides via l'activation de PPARα (Hourton, Delerive et al. 2001). Le traitement avec des fibrates entraîne une augmentation de l'oxydation des acides gras au niveau hépatique. Ils réduisent également la synthèse et l'expression des triglycérides (Staels and Auwerx 1998). Les activateurs de PPARα sont également capables de corriger une hyperglycémie ainsi que la concentration d'insuline. Les fibrates diminuent par ailleurs la masse du tissu adipeux grâce à un mécanisme indépendant de la prise alimentaire et de l'expression du gène codant pour la leptine (Guerre-Millo, Gervois et al. 2000). L'intérêt thérapeutique des agonistes PPARγ a été largement étudié dans le traitement du diabète de type II (Spiegelman 1998). Il a été montré que les agonistes PPARγ permettent la restauration de la sensibilité à l'insuline des tissus cibles ainsi que la réduction des taux plasmatiques de glucose, de lipides et d'insuline aussi bien dans des modèles animaux de diabète de type II que chez l'homme (Ram 2003). L'activation des PPARs par les ligands intervient également dans la régulation de l'expression de gènes participant à des processus comme l'inflammation, l'angiogenèse, la prolifération et la différenciation cellulaires, l'apoptose et les activités de iNOS, de la MMPase et des TIMPs. L'activation de PPARα dans des kératinocytes entraîne un arrêt de leur prolifération et de l'expression de gènes impliqués dans la différenciation cellulaire (Komuves, Hanley et al. 2000). Il a été aussi démontré que l'activation des PPARs interfère avec la différenciation, la maturation, la migration et l'immunogénécité des cellules dendritiques, qui sont les cellules présentatrices d'antigène les plus puissantes (Gosset et al. 2001 ; Nencioni et al. 2002 ; Angeli et al. 2003). Les PPARs ont des propriétés anti-inflammatoires car ils interfèrent négativement dans des mécanismes de transcription impliquant d'autres facteurs de transcription tels que NF-kB ou les activateurs de la transcription (STAT) et AP- 1 (Desvergne and Wahli 1999). Ces propriétés anti-inflammatoires et anti- prolifératives font des PPARs des cibles thérapeutiques d'intérêt pour le traitement de maladies comme les maladies occlusives vasculaires (athérosclérose, etc.), l'ischémie cérébrale, l'hypertension, les maladies liées à une néo-vascularisation (rétinopathies diabétiques, etc.), les maladies inflammatoires (maladie de Bowel, psoriasis, etc.), l'asthme et les maladies néoplasiques (carcinogenèse, etc.). De plus, les composés selon l'invention présentent l'avantage d'être des antioxydants. Les radicaux libres interviennent en effet dans un spectre très large de pathologies comme les pathologies cardiovasculaires (athérosclérose, etc.), l'ischémie cérébrale, les désordres génétiques et métaboliques (diabètes, etc.) mais également les maladies infectieuses et dégénératives (Alzheimer, Parkinson, Prion, etc.), les problèmes ophtalmiques, le vieillissement, les allergies, l'initiation et la promotion cancéreuse (Mates, Perez-Gomez et al. 1999). Les espèces réactives oxygénées (ROS) sont produites pendant le fonctionnement normal de la cellule. Les ROS sont constituées de radicaux hydroxyle ( OH), de l'anion superoxyde (O2 "). du peroxyde d'hydrogène (H2O2) et de l'oxyde nitrique (NO ). Ces espèces sont très labiles et du fait de leur grande réactivité chimique, elles peuvent également constituer un danger pour les fonctions biologiques des cellules en provoquant des réactions de peroxydation lipidique, l'oxydation de certaines enzymes et des oxydations très importantes de protéines qui mènent à leur dégradation. La prise en charge des ROS se fait via un système antioxydant comprenant une composante enzymatique (superoxyde dismutase, catalase et gluthation peroxydase) et une composante non enzymatique essentiellement les caroténoïdes, la vitamine C et la vitamine E (Gilgun-Sherki, Melamed et al. 2001).
De plus, les résultats de nombreuses études in vitro et in vivo ont montré la participation potentielle des LDL (Low Density Lipoproteins) oxydées à l'athérosclérose. La plaque d'athérosclérose à développement lent comporte un noyau riche en cholestérol entouré d'une coque de tissus fibreux. La fissuration de la plaque est de plus en plus considérée comme le résultat de modifications inflammatoires chroniques dans la région de la coque fibreuse. Les médiateurs de l'inflammation tels que les cytokines influencent plusieurs processus biologiques dans la coque fibreuse de la plaque, diminuant sa résistance à la rupture. Les cytokines inflammatoires dans la plaque athéromateuse, dont l'interleukine I, le facteur de nécrose tumorale (TNF-α et l'homologue de surface de TNFα appelé CD-40 ligand), conduisent à la production par les macrophages et les cellules musculaires lisses d'enzymes qui peuvent affaiblir la matrice extracellulaire. De la fissuration de la coque peuvent résulter des thromboses occlusives. Les composés selon l'invention sont aussi des outils thérapeutiques avantageux pour le traitement et/ou la prévention de l'ischémie cérébrale de par leurs propriétés pharmacologiques et notamment anti-inflammatoires. Le premier événement de l'ischémie cérébrale survient dans les premières heures, et consiste en une libération massive de glutamate qui aboutit à une dépolarisation neuronale ainsi qu'à un œdème cellulaire. L'entrée de calcium dans la cellule induit des dégâts mitochondriaux favorisant la libération de radicaux libres ainsi que l'induction d'enzymes qui provoquent la dégradation membranaire des neurones. L'entrée de calcium et la production de radicaux libres activent à leur tour certains facteurs de transcription, comme NF-κB. Cette activation induit des processus inflammatoires comme l'induction de protéines d'adhésion au niveau endothélial, l'infiltration du foyer ischémique par les polynucléaires neutrophiles, l'activation microgliale, l'induction d'enzymes comme l'oxyde nitrique (NO) synthase de type II ou la cyclooxygenase de type II. Ces processus inflammatoires conduisent à la libération de NO ou de prostanoïdes qui sont toxiques pour la cellule. L'ensemble de ces processus aboutit à un phénomène d'apoptose provoquant des lésions irréversibles (Dirnagl, ladecola et al. 1999). Le concept de neuroprotection prophylactique s'appuie sur des bases expérimentales mettant en évidence une résistance vis-à-vis de l'ischémie dans des modèles animaux. Différents mécanismes de résistance à l'ischémie cérébrale été mis en évidence : cytokines, voies de l'inflammation, radicaux libres, NO, canaux potassique ATP dépendant, adénosine. Les composés selon l'invention présentent ainsi l'avantage de jouer le rôle de neuroprotecteur. Enfin, les composés selon l'invention présentent un intérêt particulier dans le traitement des pathologies inflammatoires, notamment dans le traitement de l'asthme. En effet, la prévalence des maladies allergiques, notamment de l'asthme, s'accroît régulièrement dans l'ensemble des pays industrialisés, représentant un problème majeur de santé publique. Quel que soit le mécanisme en cause, les affections d'origine allergiques ont en commun une réaction inflammatoire initiée par les cellules dendritiques présentant l'antigène. Les inventeurs ont montré que les composés de la présente invention interfèrent avec la différenciation et la maturation des ces cellules dendritiques et inhibent la migration de ces cellules vers les organes lymphoïdes secondaires. De plus, il a été montré que les composés selon l'invention présentent une capacité réduite à induire la prolifération des cellules T CD4+ naïves. Les composés selon l'invention interfèrent donc avec l'initiation de la réponse immunitaire et représentent donc un outil thérapeutique avantageux pour le traitement de l'asthme.
La présente invention concerne de nouveaux dérivés de 1 ,3-diphénylprop- 2-èn-1-one substitués, des compositions pharmaceutiques et/ou cosmétiques les comprenant, leurs applications en thérapeutique et/ou en cosmétique, notamment dans les domaines de la santé humaine et animale. La présente invention a également trait à un procédé de préparation de ces dérivés. Les inventeurs ont mis en évidence, de manière surprenante, que les composés selon l'invention possèdent une activité PPAR agoniste et des propriétés antioxydantes. Les composés selon l'invention sont donc capables d'interférer avec au moins deux voies de signalisation qui sont activées en particulier pendant l'inflammation : la production de cytokines ainsi que la production de radicaux libres. En agissant de manière synergique les composés selon l'invention représentent un moyen thérapeutique et/ou cosmétique avantageux pour le traitement des maladies cardiovasculaires, des pathologies associées au syndrome X, des dyslipidémies, du diabète, de l'obésité, de l'hypertension, des maladies inflammatoires, des maladies dermatologiques (psoriasis, dermatites atopiques, acné, etc.), de l'asthme, des désordres liés au stress oxydatif, du vieillissement en général, par exemple du vieillissement cutané, notamment dans le domaine cosmétique (l'apparition de rides, etc.). D'autre part, les composés selon l'invention sont capables d'exercer une activité prophylactique en terme de neuroprotection, et également d'assurer une neuroprotection active dans la phase aiguë des accidents ischémiques cérébraux. Enfin, les composés selon l'invention représentent un outil thérapeutique avantageux pour prévenir et/ou traiter plusieurs facteurs de risque cardiovasculaires liés aux dérèglements du métabolisme lipidique et/ou glucidique (hyperlipidémie, diabète, obésité etc.). Ils permettent la diminution du risque global. La présente invention a donc pour but de proposer de nouveaux dérivés de 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-one substitués présentant une formule améliorée et une efficacité thérapeutique satisfaisante.
Ces buts et d'autres sont atteints par la présente invention qui a notamment pour objet des dérivés de 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-one substitués de formule générale (I) suivante :
Figure imgf000008_0001
(I) dans laquelle :
X représente un groupement répondant à la formule suivante : G7-R7 dans laquelle G7 est un atome d'oxygène ou de soufre et R est une chaîne alkyle telle que définie ci-après, substituée par un groupement du groupe 1 ou un groupement du groupe 2, R7 peut éventuellement être également substitué par un groupement aryle, les substituants du groupe 1 sont choisis parmi les groupements carboxy de formule : -COORa, les groupements carbamoyies de formule : -CONRbRc ou le groupement tetrazolyle, les substituants du groupe 2 sont choisis parmi l'acide sulfonique (-SO3H) et les groupements sulfonamide de formule : -Sθ2NRbRc, avec Ra, Rb et Rc, identiques ou différents, représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle substitué ou non, les groupements Xi avec i = 1, 2, 3, 4 ou 5, identiques ou différents, représentent un atome d'halogène ou un groupement thionitroso ou répondent respectivement à la formule (Gj-Ri)n-G'i-R'j dans laquelle : " n peut prendre les valeurs 0 ou 1 , " Gi et G'j, identiques ou différents, représentent une simple liaison, un atome d'oxygène ou un atome de soufre, » Rj et R'j, identiques ou différents, représentent un radical alkyle, alkényle, aryle ou un hétérocycle, " R'j peut également représenter un atome d'hydrogène, les groupements Xi avec i = 6 ou i = 8, identiques ou différents, représentent un atome d'halogène ou répondent à la formule G'i-R'j , G'j et R'j étant tels que définis précédemment, XQ et Xs ne représentant pas simultanément un atome d'hydrogène,
Xi avec i = 1 , 2, 3, 4, 5, 6 ou 8 ne pouvant représenter un hétérocycle directement lié au cycle aromatique de la 1 ,3-diphényl prop-2-én-1-one,
à l'exclusion des composés de formule (I) pour lesquels simultanément : " un des groupements Xi, X2, X3, X4 ou X5 est un groupement hydroxyle, " G7 est un atome d'oxygène, » et un des groupements X& ou Xs est un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un hydroxyle ou un groupement alkyloxy,
à l'exclusion des composés de formule (I) pour lesquels simultanément : " les groupements Xi, X2 et * représentent simultanément un atome d'hydrogène, " les groupements X6 et Xs représentent G'jR'j, " le groupement X5 représente un groupement thionitroso ou un groupement m le groupement X3 représente un halogène ou un groupement G'jR'j, dans lesquels G'j représente un atome d'oxygène, un atome de soufre ou une simple liaison et R'j représente un groupement alkyle saturé, linéaire, ramifié ou cyclique, halogène ou non, ou un atome d'hydrogène. Selon un mode particulier, les composés de formule (I) sont tels que définis ci- dessus et excluent les composés de formule (I) pour lesquels simultanément : » les groupements Xi, X2 et X représentent simultanément un atome d'hydrogène, " et un des groupements X3 ou X5 représente un atome d'hydrogène ou un halogène ou un radical alkyle ou un radical alkyloxy ou un radical alkylthio ou un groupement hydroxyle ou un groupement thiol ou un groupement thionitroso.
De manière préférentielle, un objet particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (la) qui correspondent aux composés de formule générale (I) dans laquelle Xi et X5 sont des atomes d'hydrogène. De manière préférentielle, la présente invention concerne des composés de formule générale (Ib) qui correspondent aux composés de formule générale (I) dans laquelle X2 et X4 sont des radicaux alkyle et plus avantageusement dans laquelle Xi et X5 sont des atomes d'hydrogène. Un objet particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (le) qui sont des composés de formule générale (I) dans laquelle Xi, X3 et X4 sont des radicaux alkyle.
Un autre objet particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (Id) qui sont des composés de formule générale (I) dans laquelle Xi, X2,
X4 et X5 sont des atomes d'hydrogène.
Un autre objet de l'invention concerne les composés de formule générale (II) qui sont des composés de formule générale (I) dans laquelle X6 et X8 sont des radicaux alkyle. De manière encore plus préférentielle, les composés de formule générale (II) sont ceux dans laquelle Xi et X5 sont des atomes d'hydrogène et avantageusement dans laquelle X2 et X4 sont des radicaux alkyle. Un autre objet particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (II) dans laquelle Xi, X3, X4, X6 et X8 sont des radicaux alkyle.
Un autre objet particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (II) dans laquelle e et Xs sont des radicaux alkyles et Xi, X2, X4 et X5 sont des atomes d'hydrogène.
Selon un aspect particulier de l'invention, les composés de formule (I) sont tels que définis ci-avant avec X3 qui représente un atome d'halogène ou un groupement thionitroso ou répond à la formule (Gj-Rj)n-G'j-R'i telle que définie antérieurement, dans laquelle G'i représente un atome d'oxygène ou un atome de soufre.
La présente invention inclut également les isomères optiques et géométriques, les racémates, les tautomères, les sels, les hydrates et les mélanges des composés selon l'invention.
La présente invention inclut également de préférence les prodrogues des composés selon l'invention, qui, après administration chez un sujet, se transforment en composés selon l'invention et/ou les metabolites des composés selon l'invention qui présentent des activités thérapeutiques comparables aux composés selon l'invention.
De manière préférentielle, au moins un des groupements Gi ou G'i représente un atome de soufre avec i pouvant prendre une des valeurs 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8.
Dans le cadre de la présente invention, les dérivés selon l'invention tels que décrits ci-dessus peuvent adopter la conformation cis ou trans. Selon la présente invention, le terme « alkyle » désigne un radical hydrocarboné saturé, linéaire, ramifié ou cyclique, halogène ou non, ayant plus particulièrement de 1 à 24, de préférence 1 à 10, atomes de carbone tels que méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, tertiobutyle, pentyle, néopentyle, n-hexyle ou cyclohexyle. Les groupes comportant un ou deux atomes de carbone ou comportant de deux à sept atomes de carbone sont particulièrement préférés. Les groupes méthyle et éthyle sont tout particulièrement préférés.
Selon la présente invention, le terme « alkényle » désigne un radical hydrocarboné insaturé, linéaire, ramifié ou cyclique, halogène ou non, ayant plus particulièrement de 1 à 24, de préférence 1 à 10, atomes de carbone. Selon la présente invention, le terme « aryle » désigne un radical hydrocarboné aromatique substitué ou non, en particulier substitué par au moins un atome d'halogène, un radical alkyle, hydroxyle, thiol, alkyloxy, alkylthio, oxime ou thionitroso. Les groupes phényles sont tout particulièrement préférés. Selon la présente invention, le terme « hétérocycle » désigne un radical cyclique saturé ou insaturé ou aromatique comprenant un ou plusieurs hétéroatomes, tels que azote, soufre et oxygène. Ils peuvent être substitués, avantageusement par au moins un groupement alkyle tel que défini précédemment. Les hétérocycles tels que dithiolanes, pyridine, furanne, thiophène ou morpholine sont particulièrement préférés. Dans le cadre de la présente invention, les hétérocycles pipéridine et pipérazine sont avantageusement substitués par au moins un groupement alkyle tel que défini précédemment.
Le terme thionitroso fait référence à un groupement nitroso lié au cycle aromatique par l'intermédiaire d'un atome de soufre. Le terme alkyloxy fait référence à une chaîne alkyle liée au cycle par l'intermédiaire d'un atome d'oxygène. La chaîne alkyle répond à la définition précédemment énoncée.
Le terme alkylthio fait référence à une chaîne alkyle liée au cycle aromatique par l'intermédiaire d'un atome de soufre (liaison thioéther). La chaîne alkyle répond à la définition précédemment énoncée.
L'atome d'halogène représente un atome de chlore, brome, iode ou fluor.
Selon un mode particulier de l'invention, les composés préférés sont indiqués ci- dessous avec les formules qui leur sont associées :
La 1 -(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)-3,5-diméthylphényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000013_0001
La 1-(4-Mercapto-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthyl phényl)-prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000013_0002
La 1-(4-Cyclohexyléthylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000013_0003
La 1-(2,5-Dihydroxy-3,4,6-triméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000014_0001
La 1-(2,5-Diméthoxy-3,4,6-triméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthoxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000014_0002
La 1-(2,5-Dihydroxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)- prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000014_0003
La 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)- prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000014_0004
La 1-(4-Phényléthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000014_0005
La 1-(4-(Morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000015_0001
La 1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000015_0002
La 1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000015_0003
La 1 -(4-Hydroxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-ène-1-one :
Figure imgf000015_0004
La 1-(4-Hydroxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-ène-1 -one :
Figure imgf000015_0005
La 1 -(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyl diméthyl méthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000016_0001
La 1 -(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000016_0002
La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- dibromophényl)-prop-2-ène-1 -one :
Figure imgf000016_0003
La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-dibromophényl)- prop-2-ène-1-one :
Figure imgf000016_0004
La 1-(4-Cyclohexyléthyloxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000016_0005
La 1-(4-Cyclohexyléthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000017_0001
La 1 -(4-Méthylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000017_0002
La 1-(4-Méthylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000017_0003
La 1 -(4-Propyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000017_0004
La 1 -(4-Propyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000017_0005
La 1 -(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000018_0001
La 1-(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
La 1-(4-Hexyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthyl méthyloxy -3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000018_0003
La 1-(4-Hexyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthyl phényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000018_0004
La 1-(4-Cyclohexyléthyloxy-3, 5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthyl méthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000018_0005
La 1 -(4-Cyclohexylét yloxy-3, 5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000019_0001
La 1 -(4-Cyclohexylthioéthyloxyphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000019_0002
La 1-(4-Cyclohexylthioéthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000019_0003
La 1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000019_0004
La 1 -(2 ,4 , 5-Triméthylp hény l)-3-(4-carboxyd iméthylméthyloxy-3, 5-d iméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000019_0005
La 1 -(4-CyclohexyIthioéthyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000020_0001
La 1 -(4-Cyclohexylthioéthyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000020_0002
La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3- fluorophényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000020_0003
La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3-fluorophényl)prop-2- èn-1-one :
Figure imgf000020_0004
La 1-(2,3,4,5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000020_0005
La 1-(2,3,4,5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000021_0001
La 1-(4-Phényloxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000021_0002
La 1 -(4-Phényloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000021_0003
La 1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000021_0004
La 1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000021_0005
La 1-(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000022_0001
La 1-(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000022_0002
La 1 -(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000022_0003
La 1 -(4-Hexylthio-3 , 5-d iméthy lphényl)-3-(4-carboxyd iméthylméthyloxy-3 , 5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000022_0004
La 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000022_0005
La 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000023_0001
Le chlorhydrate de 1-(3,5-Diméthyl-4-(morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4- ethyloxycarbonyl diméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000023_0002
La 1 -(3,5-Diméthyl-4-(morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000023_0003
La 1-(4-Bromophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- difluorophényl)-prop-2-èn-1 -one :
Figure imgf000023_0004
La 1-(4-Bromophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-difluorophényl)-prop-2- èn-1-one :
Figure imgf000023_0005
La 1 -(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényI)-prop-2-èn-1-one :
Figure imgf000024_0001
La 1-(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2~èn-1 -one :
Figure imgf000024_0002
La présente invention a également pour objet un procédé de préparation des composés de formule (I).
Ce procédé de préparation présente de nombreux avantages. Il est simple à mettre en œuvre industriellement et permet d'obtenir un rendement élevé en composés de formule (I). Le procédé de la présente invention comprend une mise en contact en milieu basique ou en milieu acide d'au moins un composé de formule (A) avec au moins un composé de formule (B), les formules (A) et (B) étant :
Figure imgf000024_0003
Figure imgf000024_0004
formules dans lesquelles Xi, X2, X3, X4, X5, Xβ, X7 et X8 ont les définitions données précédemment, X7 pouvant également représenter un groupement hydroxyle ou thiol. Les conditions de mise en œuvre de cette réaction en milieu acide ou basique sont à la portée de l'homme du métier et peuvent varier dans une large mesure.
La mise en contact de ces deux composés est avantageusement réalisée de manière stœchiométrique. Elle est réalisée de préférence à une température ambiante (entre environ 18°C et 25°C) et à pression atmosphérique.
En milieu basique, la réaction est de préférence réalisée en présence d'une base, tel qu'un hydroxyde de métal alcalin, comme l'hydroxyde de sodium ou un alcoolate de métal alcalin comme l'éthylate de sodium.
En milieu acide, la réaction est de préférence réalisée en présence d'un acide fort, tel que l'acide chlorhydrique.
Le schéma réactionnel peut être représenté comme suit
Figure imgf000025_0001
La synthèse en milieu basique peut être réalisée de la façon suivante : La cétone (composé (A)) à 1 équivalent-molaire et l'aldéhyde (composé (B)) à 1 équivalent-molaire sont solubilisés dans une solution hydroalcoolique d'hydroxyde de sodium à 20 équivalents-molaire. L'ensemble est agité pendant environ 18 heures à température ambiante (entre 18 et 25°C). Le milieu est ensuite acidifié (pour atteindre en particulier un pH d'environ 2), notamment avec de l'acide chlorhydrique. La 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-one substituée attendue peut être obtenue par précipitation ou extraction solide/liquide après évaporation du milieu réactionnel. Elle peut être ensuite purifiée par chromatographie sur gel de silice ou par recristallisation. La synthèse en milieu acide peut être réalisée de la façon suivante : La cétone (composé (A)) à 1 équivalent-molaire et l'aldéhyde (composé (B)) à 1 équivalent-molaire sont solubilisés dans une solution d'ethanol saturée d'acide chlorhydrique gazeux. L'ensemble est agité à température ambiante pendant environ 6 heures, le solvant est éliminé, notamment par évaporation sous pression réduite. La 1,3-diphénylprop-2-èn-1-one substituée est purifiée, notamment par chromatographie sur gel de silice.
Le procédé de préparation des composés de formule (I) permet de préparer des composés appelés ci-dessous composés intermédiaires. La présente invention a également pour objet certaines matières premières et composés intermédiaires obtenus dans le cadre de la présente invention.
Ces composés intermédiaires sont plus particulièrement choisis parmi :
La 1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop- 2-èn-1-one ; La 1 -(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl) -prop-2-èn-1-one ; La 1 -(4-Méthylthiophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-d ibromophényl)prop-2-èn-1 - one ; La 1-(4-(Cyclohexyléthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop- 2-èn-1-one ; La 1 -(4-Méthylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényI)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-(Cyclohexyléthyloxy)-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-(Cyclohexylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1- one La 1-(4-(Cyclohexylthioéthyloxy)-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1 -(4-Méthylthiophényl)-3-(4-hydroxy-3-fluorophényl)prop-2-èn-1 -one ; La 1-(2,3,4,5,6-PentaméthyIphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop- 2-èn-1-one ; La 1 -(4-Phénoxyphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one ; La 1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2- èn-1-one ; La 1-(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2- èn-1-one ; La 1 -(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1 -(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 - one ; La 1 -(4-Bromophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-difluorophényl)-prop-2-èn-1 -one ; La 1-(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)- prop-2-èn-1-one.
La présente invention a aussi pour objet les composés de formule générale (I) tels que décrits ci-dessus, à titre de médicaments.
La présente invention a également pour objet une composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant, dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique et/ou cosmétique, au moins un composé de formule générale (I) tel que décrit ci-dessus, éventuellement en association avec un autre actif thérapeutique et/ou cosmétique. Il s'agit avantageusement d'une composition pharmaceutique et/ou cosmétique pour le traitement des maladies cardiovasculaires, des dyslipidémies, des pathologies associées au syndrome X, du diabète, de l'obésité, de l'hypertension, des maladies inflammatoires, des maladies dermatologiques
(psoriasis, dermatites atopiques, acné, etc.), de l'asthme, des désordres liés au stress oxydatif, du vieillissement en général et par exemple du vieillissement cutané notamment dans le domaine cosmétique (l'apparition de rides, etc.). D'autre part, les compositions pharmaceutiques et/ou cosmétiques selon l'invention sont capables d'exercer une activité prophylactique en terme de neuroprotection, et également permettent d'assurer une neuroprotection active dans la phase aiguë des accidents ischémiques cérébraux. Enfin, il s'agit avantageusement d'une composition pharmaceutique et/ou cosmétique pour prévenir et/ou traiter l'apparition de plusieurs facteurs de risque cardiovasculaire liés aux dérèglements du métabolisme lipidique et/ou glucidique (hyperlipidémie, diabète, obésité etc.) en permettant la diminution du risque global. L'invention concerne aussi l'utilisation d'au moins un composé de formule
(I) pour la préparation d'une composition pharmaceutique et/ou cosmétique destinée à la mise en œuvre d'une méthode de traitement ou de prophylaxie du corps humain ou animal. L'invention concerne également une méthode de traitement des pathologies liées au métabolisme des lipides et/ou des glucides comprenant l'administration à un sujet, notamment humain, d'une dose efficace d'un composé ou d'une composition pharmaceutique tels que définis ci-avant. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention comprennent avantageusement un ou plusieurs excipients ou véhicules, acceptables sur le plan pharmaceutique. On peut citer par exemple des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier. Les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, stabilisants, conservateurs, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations (liquides et/ou injectables et/ou solides) sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, l'acacia, etc. Les compositions peuvent être formulées sous forme de suspensions injectables, gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, etc., éventuellement au moyen de formes galéniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des a idons.
Les composés ou compositions selon l'invention peuvent être administrés de différentes manières et sous différentes formes. Ainsi, ils peuvent être injectés par voie orale ou systémique, comme par exemple par voie intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée, trans-dermique, intra-artérielle, etc. Pour les injections, les composés sont généralement conditionnés sous forme de suspensions liquides, qui peuvent être injectées au moyen de seringues ou de perfusions, par exemple. Il est entendu que le débit et/ou la dose injectée peuvent être adaptés par l'homme du métier en fonction du patient, de la pathologie, d u mode d'administration, etc. Typiquement, les composés sont administrés à des doses pouvant varier entre 1 μg et 2g /administration, préférentiellement de 0,1 rng à 1 g /administration. Les administrations peuvent être quotidiennes ou répétées plusieurs fois par jour, le cas échéant. D'autre part, les compositions selon l'invention peuvent comprendre, en outre, d'autres agents ou principes actifs.
LEGENDE DES FIGURES :
Les Figures 1a. 1b. 1c illustrent le caractère antioxydant du composé 2 (Cpd 2) selon l'invention testé à la concentration de lO^M. La figure 1a représente la cinétique de formation de diènes conjugués au cours du temps. La Lag-Phase est de 120 minutes lorsque les LDL sont incubées avec le cuivre seul. Ce délai est de 314 minutes lorsque le milieu contient également le composé 2.
La figure 1b illustre la vitesse de formation des diènes. Celle-ci est de 1 ,8 nmol/min/mg de LDL en présence de cuivre seul, elle n'est plus que de 0,1 nmol/min/mg de LDL lorsque le composé 2 est présent dans le milieu.
La figure 1c représente la quantité maximale de diènes formés au cours de l'expérience. Le cuivre seul induit la formation de 372 nmol/mg de diènes conjugués, cette quantité est de 35 nmol/mg quand le milieu contient également le composé 2, ce qui représente une diminution de 90% de la quantité de diènes formés.
Les Figures 2a, 2b. 2c illustrent le caractère antioxydant des composé 4 (Cpd 4), composé 6 (Cpd 6) et composé 8 (Cpd 8) selon l'invention testés à la concentration de lO^M.
La figure 2a représente la cinétique de formation de diènes conjugués. La Lag-Phase est de 132 minutes lorsque les LDL sont incubées avec le cuivre seul. La valeur de la lag phase est respectivement de 401, 205 et 169 minutes en présence des composés 4, 6 et 8. La figure 2b représente le calcul de la vitesse de formation des diènes. La vitesse de formation des diènes conjugués par le cuivre est de 2,2 nmol/min/mg de LDL. La présence des composés 4, 6 et 8 provoque une diminution de la vitesse de la réaction d'oxydation des diènes. Elle est de 0,2 nmol/min/mg en présence du composé 4 et de 1,7 nmol/min/mg en présence du composé 6 ou du composé 8. La quantité totale de diènes formés (figure 2c) est de 511 nmol/mg de LDL en présence de cuivre seul. En présence des composés 4, 6 et 8, cette quantité passe à 138, 443 et 474 nmol/mg respectivement. La Figure 3a illustre le caractère antioxydant du composé 11 (Cpd 11) selon l'invention.
Le caractère antioxydant du composé 11 a été mis en évidence pour différentes concentrations comprises entre 10"6 M et 3,5.10"5 M. En l'absence du composé 11, la lag-phase est de 87,2 minutes. Dés la concentration de 10"6 M, on note une augmentation de la lag phase par rapport au contrôle : La lag phase est de 101 ,5 minutes en présence du composé 11 à la concentration de 10"6 M. Elle augmente avec la concentration en composé dans le milieu pour atteindre la valeur maximale observée : 210 minutes à la concentration de 3,3.10"5M.
Les Figures 4a. 4b. 4c illustrent le caractère antioxydant des composé 19 (Cpd 19) et composé 23 (Cpd 23) selon l'invention testés à la concentration de lO^M. La figure 4a représente la cinétique de formation de diènes conjugués. La Lag- Phase est de 61 minutes en présence de cuivre seul. En présence du composé
19, la lag phase est de 92,5 minutes. Elle est de 96,4 minutes en présence du composé 23.
Le caractère antioxydant des composés 19 et 23 se traduit également par une diminution de la vitesse de formation des diènes et par une diminution de la quantité totale des diènes formés.
En l'absence de composé, la vitesse de formation des diènes est de 1,9 nmol/min/mg de LDL (figure 4b). Elle est respectivement de 1 ,6 et 1,3 nmol/min/mg de LDL en présence des composés 19 et 23. En l'absence de composé, la quantité totale de diènes formés est de 370,9 nmol/mg de LDL (figure 4ç). Elle est respectivement de 346,6 et 340,3 nmol/ mg de LDL en présence des composés 19 et 23.
Les Figures 5a. 5b. 5c illustrent le caractère antioxydant des composé 25 (Cpd 25), composé 27 (Cpd 27), composé 29 (Cpd 29) et composé 31 (Cpd 31) selon l'invention testés à la concentration de lO^M.
La Figure 5a montre la cinétique d'oxydation des LDL en présence des différents composés : elle augmente en présence des différents composés antioxydants. Elle est de 54,9 minutes en présence du composé 29. Elle passe à 87,6 minutes en présence du composé 25, 124,5 minutes en présence du composé 31 et atteint 170,8 minutes en présence du composé 27.
Le caractère antioxydant de ces composés est également illustré par la vitesse d'oxydation des LDL (figure 5b) et par la mesure de la quantité totale de diènes formés (figure 5c).
La vitesse d'oxydation des LDL est de 2 nmol/min/mg de LDL en l'absence de composés (figure 5b). La présence des composés induit une diminution de la vitesse d'oxydation. La vitesse est de 1 ,6 nmol/min/mg en présence du composé 25 et de 1 ,4 nmol/min/mg en présence du composé 31. Cette vitesse est minimale en présence du composé 27 et atteint 0,8 nmol/min/mg. La quantité totale de diènes formés est de 386 nmol/mg de LDL en l'absence de composés (figure 5c). Elle est de 374 nmol/mg en présence du composé 27, elle est de 365 nmol/mg en présence du composé 25 et de 352 nmol/mg en présence du composé 31.
Les Figures βa. 6b. 6c illustrent le caractère antioxydant du composé 37 (Cpd 37) selon l'invention testé à la concentration de lO^M.
La Figure 6a montre la cinétique d'oxydation des LDL. La présence du composé dans le milieu se traduit par une augmentation de la lag-phase. Elle atteint 106 minutes en présence du composé 37 alors qu'elle n'est que de 56 minutes en l'absence de composé.
La diminution de la vitesse d'oxydation des LDL et la diminution de la quantité de diènes formés témoignent également du caractère antioxydant du composé testé. En l'absence de composé, la vitesse d'oxydation est de 2 nmol/min/mg de LDL, en présence du composé, elle est de 1,8 nmol/min/mg de LDL (figure 6b). En l'absence de composé, la quantité totale de diènes formés est de 360,0 nmol/mg de LDL. En présence du composé 37, elle n'est plus que de 326,9 nmol/mg de LDL (figure 6c).
Les Figures 7a. 7b. 7c illustrent le caractère antioxydant des composé 13 (Cpd
13), composé 33 (Cpd 33), composé 41 (Cpd 41), composé 47 (Cpd 47), selon l'invention testés à la concentration de lO^M. La figure 7a représente la cinétique d'oxydation des LDL. En l'absence de composés antioxydants, la lag-phase est de 67,3 minutes. Elle augmente en présence des différents composés. Cette valeur est de 100 minutes en présence du composé 41, 126,5 minutes en présence du composé 47, 148 minutes en présence du composé 33 et 219 minutes en présence du composé 13. La présence des composés dans le milieu a également une influence sur la vitesse d'oxydation des LDL et la quantité totale des diènes formés. Les composés 13 et 33 provoquent une diminution importante de la vitesse d'oxydation des diènes (figure 7b). La vitesse d'oxydation des diènes est de 2,5 nmol/min/mg de LDL en l'absence de composés. Elle est respectivement de 1 ,5 et
1 ,4 nmol/min/mg de LDL en présence des composés 13 et 33. Seuls les composés 33 et 41 provoquent une diminution de la quantité totale de diènes formées (figure 7c). La quantité totale de diènes formés est de 432,5 nmol/mg de LDL en l'absence de composé. Elle est de 399 nmol/mg de LDL en présence du composé 33 et de 403 nmol/mg de LDL en présence du composé 41.
Les Figures 8a. 8b. 8c illustrent le caractère antioxydant des composé 17 (Cpd 17), composé 21 (Cpd 21), composé 39 (Cpd 39) et composé 43 (Cpd 43) selon l'invention testés à la concentration de 10"4M. La cinétique d'oxydation des LDL est représentée par la figure 8a.
En l'absence de composé, la lag phase est de 67,3 minutes. Elle augmente en présence des composés 17, 39 et 43. En présence du composé 43, la lag phase est de 97 minutes. En présence du composé 17, elle est de 148 minutes et en présence du composé 39, elle est de 133 minutes. La figure 8b représente la vitesse d'oxydation des LDL. En l'absence de composé elle est de 2,5 nmol/min/mg. En présence du composé 17, elle est de 1 ,8 nmol/min/mg En présence du composé 39, elle est de 1 ,2 nmol/min/mg et en présence du composé 43, elle est de 2,2 nmol/min/mg. La figure 8c représente la quantité totale de diènes formés au cours de l'oxydation. Seul le composé 39 induit une diminution significative de la quantité totale des diènes formés. Cette quantité est de 432,3 nmol/mg en l'absence de composé et elle est de 371,2 nmol/mg en présence du composé 39. Le retard de formation de diènes conjugués, la diminution de la vitesse de formation des diènes et la diminution de la quantité totale de diènes formés sont trois paramètres qui attestent du caractère antioxydant des composés selon l'invention.
Les Figures 9a et 9b illustrent l'évaluation des propriétés d'agoniste PPARα et PPARγ des composés selon l'invention avec le système de transactivation PPARα/Gal4 et PPARγ/Gal4 dans les cellules RK13. Les cellules RK13 sont incubées avec du composé 2 à des concentrations comprises entre 0,01 et 10 μM pendant 24h. Les résultats sont représentés par le facteur d'induction (Rapport entre le signal luminescent obtenu avec le composé et le signal luminescent obtenu sans composé) en fonction des différents traitements. Plus le facteur d'induction est élevé, meilleure est la propriété d'agoniste pour PPARα ou PPARγ. Les résultats présentés par la figure 9a montrent les facteurs d'induction du composé 2 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant .
Figure imgf000034_0001
Le facteur d'induction mesuré avec le composé 2 est maximal pour la dose de 10μM et atteint la valeur de 18,49.
Les résultats présentés par la figure 9b montrent les facteurs d'induction du composé 2 avec le système de transactivation PPARγ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant :
Figure imgf000034_0002
Figure imgf000035_0001
Pour ce qui concerne le système PPARγ/Gal4, le facteur d'induction varie de 1 ,31 à 31 ,00, il augmente avec la concentration en composé 2 dans le milieu.
Les Figures 10a 10b. 11a. 11b. 11c. 12a. 12b. 13a. 13b. 14a. 14b. 14c. 15a.
15b. 15c. 16a. 17a. 18a. 18b illustrent l'évaluation des propriétés d'agoniste PPARα, PPARγ et PPARδ des composés selon l'invention avec le système de transactivation PPARα/Gal4, PPARγ/Gal4 et PPARδ/Gal4 dans les cellules COS- 7. Les cellules COS-7 sont incubées avec les composés selon l'invention à différentes concentrations pendant 24h. Les résultats sont représentés par le facteur d'induction (Rapport entre le signal luminescent obtenu avec le composé et le signal luminescent obtenu sans composé) en fonction des différents traitements.
Les figures 10a et 10b illustrent les facteurs d'induction des composé 4 (Cpd4), composé 6 (Cpd6) et composé 8 (Cpd8) selon l'invention. Les résultats présentés par la figure 10a montrent les facteurs d'induction des composé 4 (Cpd4), composé 6 (Cpd6) et composé 8 (Cpdδ) avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant :
Figure imgf000035_0002
Figure imgf000036_0001
Le facteur d'induction maximal mesuré pour le composé 4 est de 9,92 à 10μM.
Cette valeur est de 7,01 pour le composé 6 (10μM) et de 15,67 avec le composé 8
(1μM).
Les résultats présentés par la figure 10b montrent les facteurs d'induction des composé 4, composé 6 et composé 8 avec le système de transactivation
PPARγ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant :
Figure imgf000036_0002
Le composé 4 a un facteur d'induction maximal de 5,82, il est observé pour une concentration de 10μM.
La valeur maximale du facteur d'induction observée avec le composé 6 est de 6,83 (10μM) avec le composé 6 et 2,74 avec le composé 8 (10μM).
Les figures 11a. 11 b et 11c illustrent les facteurs d'induction du composé 13 selon l'invention (Cpd 13).
La figure 11a illustre les facteurs d'induction du composé 13 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000037_0001
La valeur maximale est 17,05, elle est observée à la concentration de 1μM. La figure 11b illustre les facteurs d'induction du composé 13 avec le système de transactivation PPARγ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000037_0002
La valeur maximale est de 4,03, elle est observée pour la concentration de 1 μM. La figure 11c illustre les facteurs d'induction du composé 13 avec le système de transactivation PPARδ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000038_0001
La valeur maximale est observée pour la concentration de 1μM, elle est de 28,75.
Les Figures 12a et 12b illustrent les facteurs d'induction du composé 23 selon l'invention (Cpd23).
La figure 12a illustre les facteurs d'induction du composé 23 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000038_0002
La valeur maximale est 8,35, elle est observée dès la concentration de 1 μM.
La figure 12b illustre les facteurs d'induction du composé 23 avec le système de transactivation PPARγ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000039_0001
La valeur maximale est 7,24, elle est observée dès la concentration de 1μM.
Les Figures 13a et 13b illustrent les facteurs d'induction du composé 29 selon l'invention (Cpd29).
La figure 13a illustre les facteurs d'induction du composé 29 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000039_0002
La valeur maximale est 15,75, elle est observée à la concentration de 3μM. La figure 13b illustre les facteurs d'induction du composé 29 avec le système de transactivation PPARδ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000040_0001
La valeur maximale est 87,56, elle est observée à la concentration de 10μM.
Les Figures 14a, 14b et 14c illustrent les facteurs d'induction du composé 31 selon l'invention (Cpd31). La figure 14a illustre les facteurs d'induction du composé 31 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000040_0002
Figure imgf000041_0001
La valeur maximale est 6,03, elle est observée pour la concentration de 10μM. La figure 14b illustre les facteurs d'induction du composé 31 avec le système de transactivation PPARγ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000041_0002
La valeur maximale est 7,79, elle est observée pour la concentration de 3μM. La figure 14c illustre les facteurs d'induction du composé 31 avec le système de transactivation PPARδ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000041_0003
Figure imgf000042_0001
La valeur maximale est 11,70, elle est observée pour la concentration de 10μM.
Les Figures 15a. 15b et 15c illustrent les facteurs d'induction du composé 33 selon l'invention (Cpd33).
La figure 15a illustre les facteurs d'induction du composé 33 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000042_0002
La valeur maximale est 20,82, elle est observée dès la concentration de 0,3μM. La figure 15b illustre les facteurs d'induction du composé 33 avec le système de transactivation PPARγ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000042_0003
Figure imgf000043_0001
La valeur maximale est 7,99, elle est observée dès la concentration de 3μM. La figure 15c illustre les facteurs d'induction du composé 33 avec le système de transactivation PPARδ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000043_0002
La valeur maximale est 90,84, elle est observée dès la concentration de 3μM.
La Figure 16a illustre les facteurs d'induction du composé 35 selon l'invention
(Cpd35).
La figure 16a illustre les facteurs d'induction du composé 35 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000043_0003
Figure imgf000044_0001
La valeur maximale est 24,33, elle est observée dès la concentration de 1 μM.
La Figure 17a illustre les facteurs d'induction du composé 37 selon l'invention (Cpd37) avec le système de transactivation PPARα/Gal4.
Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000044_0002
La valeur maximale est 19,77, elle est observée dès la concentration de 1 μM.
Les Figures 18a et 18b illustrent les facteurs d'induction du composé 39 selon l'invention (Cpd39).
La figure 18a illustre les facteurs d'induction du composé 39 avec le système de transactivation PPARα/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000044_0003
Cpd 39 0,001 μM 1,08 0,003μM 1,17 0,01μM 3,19 0,03μM 7,69 0,1μM 9,68 0,3μM 10,16 1μM 10,42 3μM 9,96
La valeur maximale est 10,42, elle est observée dès la concentration de 1μM. La figure 18b illustre les facteurs d'induction du composé 39 avec le système de transactivation PPARγ/Gal4. Les valeurs de ces facteurs d'induction sont notées dans le tableau suivant.
Figure imgf000045_0001
La valeur maximale est 4,86, elle est observée dès la concentration de 0,3μM.
Les résultats illustrés par les figures montrent que les composés selon l'invention testés possèdent la propriété de ligand vis-à-vis de PPARα, PPARγ et/ou PPARδ.
Ils permettent aussi l'activation au niveau transcriptionnel de ces récepteurs nucléaires.
Sur les figures 19a. 19b. 19c. 19d. 20a. 20b. 20c et 20d sont représentés les effets du traitement avec les composé 2 (Cpd2), composé 13 (Cpd13), composé 33 (Cpd33) et composé 39 (Cpd39) sur le métabolisme des triglycérides et du cholestérol chez les souris transgéniques Apo E2/E2. Les animaux ont été traités par gavage avec 50mg de composé par kg et par jour, pendant 7 jours. Les figures 19a et 19b montrent la diminution des taux plasmatiques de triglycérides et de cholestérol induite par le composé 2.
Les figures 20a et 20b montrent la diminution des taux plasmatiques de triglycérides et de cholestérol induite par les composés 13, 33 et 39. Les figures 19c et 19d montrent la distribution des triglycérides et du cholestérol dans les lipoparticules évaluée par chromatographie d'exclusion induite par le traitement avec le composé 2.
Les figures 20c et 20d montrent les distributions des triglycérides et du cholestérol dans les lipoparticules évaluées par chromatographie d'exclusion induite par le traitement avec les composés 13, 33 et 39. On observe une distribution typique des triglycérides et du cholestérol principalement localisée dans les lipoparticules de grande taille. On observe également une diminution des triglycérides et du cholestérol dans cette classe de lipoparticules induite par le traitement avec les différents composés testés.
La Figure 21 illustre l'interférence des composés selon l'invention avec la différenciation des cellules dendritiques.
Le composé 39 (10"6 M) est ajouté à j = 0 de la différenciation des monocytes en cellules dendritiques. Après 6 jours de différenciation (en présence des cytokines GM-CSF et IL-4), les cellules dendritiques sont analysées par cytométrie de flux. (---): Ac de l'isotype contrôle couplé au fluorochrome (en noir): Ac anti-CD1a couplé au FITC (Fluorescein IsoThioCyanate) ou Ac anti-
CD86 couplé au PE (PhycoErythrine).
La Figure 22 illustre l'interférence des composés selon l'invention avec la maturation des cellules dendritiques induites par le LPS (LipoPolySaccharide). Les cellules dendritiques sont incubées pendant 4 heures avec les composés 31 ,
13 ou 39, puis sont stimulées avec le LPS pendant 16 heures. Les transcrits CCR7 et ELC sont analysés par RT-PCR quantitative tandis que la cytokine TNFalpha est analysée par la technique ELISA. La Figure 23 illustre une Réaction Mixte Lymphocytaire (MLR) effectuée en présence de quantités croissantes de cellules dendritiques traitées ou non avec le composé 31 et incubées avec des cellules T CD4+ naïves pendant 7 jours. La prolifération des cellules T est mesurée par mesure de l'incorporation de BrdU
(BromodeoxyUridine).
D'autres aspects et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.
EXEMPLES
Exemple 1 : Synthèse des composés selon l'invention
Les composés de l'invention sont préparés selon les méthodes générales décrites ci-dessous.
Description des méthodes générales de synthèse selon l'invention :
Synthèse de 1.3-diphénylprop-2-èn-1-ones :
Méthode générale 1 :
Synthèse de 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-ones en milieu acide : La cétone (1 éq) et l'aldéhyde (1 éq) sont solubilisés dans une solution d'ethanol saturée d'acide chlorhydrique gazeux. L'ensemble est agité à température ambiante pendant 6 heures puis le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. La 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-one est purifiée par chromatographie sur gel de silice ou par recristallisation.
Méthode générale 2 : Synthèse de 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-ones en présence d'hydroxyde de sodium :
La cétone (1 éq) et l'aldéhyde (1 éq) sont solubilisés dans une solution hydroalcoolique d'hydroxyde de sodium (20 éq). L'ensemble est agité 18 heures à température ambiante. Le milieu est acidifié (pH = 2) avec de l'acide chlorhydrique. La 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-one est obtenue par précipitation ou extraction solide liquide après évaporation du milieu réactionnel. Elle est purifiée par chromatographie sur gel de silice ou par recristallisation.
Méthode générale 3 : Synthèse de 1 ,3-diphénylprop-2-en-1-ones substituées en présence d'éthylate de sodium :
Le sodium (1 éq) est dissout dans l'éthanol absolu. La cétone (1 éq) et l'aldéhyde (1 éq) sont ajoutés. L'ensemble est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 12 heures puis une solution de soude 2N (5 éq) est ajoutée. L'ensemble est maintenu à 100°C pendant 12 heures. Le milieu réactionnel est acidifié par addition d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 6N. Le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice ou par recristallisation.
O-Alkylation de phénols ou du thiophénols :
Méthode générale 4 :
Le phénol (1 éq) ou le thiophénol (1éq) est solubilisé dans l'acétonitrile, le dérivé halogène (1 à 10 éq) et le carbonate de potassium (5 éq) sont ajoutés. Le milieu réactionnel est maintenu environ 10 heures sous vive agitation à reflux. Les sels sont éliminés par filtration, le solvant et l'excès de réactif sont éliminés par évaporation sous pression réduite, le produit attendu est purifié par chromatographie sur gel de silice.
Méthode générale 5 :
L'alcool (1éq), le phénol (1éq) et la triphénylphosphine sont solubilisés dans du dichlorométhane. Le diisopropylazodicarboxylate (1éq) est ajouté, l'ensemble est laissé 12 heures, sous agitation à température ambiante. Le milieu réactionnel est lavé avec de l'eau, séché sur sulfate de magnésium et évaporé sous pression réduite. Le résidu d'évaporation est purifié par chromatographie sur gel de silice
Acidolvse d'esters tertiobutyliques : Méthode générale 6 :
L'ester tertiobutylique (1 éq) est solubilisé dans du dichlorométhane puis l'acide trifluoroacétique (10 éq) est additionné. L'ensemble est maintenu 12 heures sous agitation à température ambiante. Le produit formé est purifié par chromatographie sur gel de silice ou par recristallisation.
Synthèse des matières premières servant à la synthèse des composés selon l'invention :
Matière première 1 : 4'-(Bromoéthyloxy)acétophénone
Figure imgf000050_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-hydroxyacétophénone et de dibromoéthane selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1). RMN 1H CDCI3 δppm : 2,55(s, 3H), 3,66(t, 2H, J = 6,50Hz), 4,35(t, 2H, J = 6,50Hz), 6,94(d, 2H, J = 7,23Hz), 7,94(d, 2H, J = 7,23Hz)
Matière première 2 : 4'-(Pentylthioéthyloxy)acétophénone
Figure imgf000050_0002
La matière première 1 (1éq) et le penthanethiol (1éq) sont solubilisés dans du méthanol en présence de triéthylamine (2 éq). Le milieu réactionnel est maintenu 18 heures à reflux, le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. L'huile est reprise par de l'acétate d'éthyle, lavée par une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2N. La 4'-(pentylthioéthyloxy)acétophénone est obtenue après purification sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1).
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,85(m, 3H), 1 ,24-1 ,39(m, 4H), 1 ,52-1 ,62(m, 2H), 2,50(s, 3H), 2,64(t, 2H, J = 7,2Hz) , 2,94(t, 2H, J = 6,8Hz), 4,14(t, 2H, J = 6,8Hz), 6,88(d, 2H, J = 8,7 Hz), 7,89(d, 2H, J = 8,7Hz)
Matière première 3 :
3,5-Diméthyl-4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxybenzaldéhyde
Figure imgf000051_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4-hydroxy-3,5-diméthylbenzaldéhyde et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2). RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,43(s, 6H), 1 ,49(s, 9H), 2,28(s, 6H), 7,53(s, 2H), 9,88(s, 1 H)
Matière première 4: 4'-Hydroxy-3',5'-acetophénone
Figure imgf000051_0002
Le 2,6-diméthylphénol (1éq) est solubilisé dans du chlorure de méthylène, la solution est refroidie à 0°C puis sont ajoutés le chlorure d'aluminium (3éq) et le bromure d'acétyle (2éq). L'ensemble est agité 3 heures à température ambiante, puis versé sur de la glace. La phase aqueuse est extraite par du dichlorométhane, la phase organique est lavée à l'eau jusqu'à neutralité, séchée sur sulfate de magnésium puis le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. L'ester intermédiaire obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1) puis repris par une solution aqueuse de soude 2N (2.5éq). L'ensemble est agité 48 heures à température ambiante puis acidifié par une solution d'acide chlorhydrique diluée. Le précipité est lavé avec de l'eau jusqu'à neutralité des eaux de lavage. RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,30(s, 6H), 2,54(s, 3H), 7,65(s, 2H)
Matière première 5 :
4'-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)acétophénone
Figure imgf000052_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4-hydroxy-3,5-diméthylbenzaldéhyde et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2). RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,43(s, 6H), 1 ,49(s, 9H), 2,28(s, 6H), 7,53(s, 2H), 9,88(s, 1H)
Matière première 4: 4'-Hydroxy-3',5'-acetophénone
Figure imgf000052_0002
Le 2,6-diméthylphénol (1éq) est solubilisé dans du chlorure de méthylène, la solution est refroidie à 0°C puis sont ajoutés le chlorure d'aluminium (3éq) et le bromure d'acétyle (2éq). L'ensemble est agité 3 heures à température ambiante, puis versé sur de la glace. La phase aqueuse est extraite par du dichlorométhane, la phase organique est lavée à l'eau jusqu'à neutralité, séchée sur sulfate de magnésium puis le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. L'ester intermédiaire obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1) puis repris par une solution aqueuse de soude 2N (2.5éq). L'ensemble est agité 48 heures à température ambiante puis acidifié par une solution d'acide chlorhydrique diluée. Le précipité est lavé avec de l'eau jusqu'à neutralité des eaux de lavage. RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,30(s, 6H), 2,54(s, 3H), 7,65(s, 2H)
Matière première 5 :
4'-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)acétophénone
Figure imgf000053_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-hydroxyacétophénone et de (R,S)-5-[1 ,2] dithiolan-3-ylpentanol selon la méthode générale 5 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 95-5). RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,42-1 ,62(m, 4H), 1 ,62-1 ,75(m, 2H), 1 ,75-1 ,89(m, 2H), 1 ,89-1 ,98(m, 1 H), 2,42-2,51 (m, 1H), 2,56(s, 3H), 3,08-3,21 (m, 2H), 3,55-3,61 (m, 1 H), 4,06(t, 2H, J = 6,2Hz), 6,92(d, 2H, J = 8,7Hz), 7,93(d, 2H, J = 8,7Hz)
Matière première 6 :
(R,S)-2-phényl-2-(4-formyl-1 ,6-diméthylphényloxy) acétate d'éthyle
Figure imgf000053_0002
Ce composé est synthétisé à partir de 4-hydroxy-3,5-diméthylbenzaldéhyde et de
2-hydroxy-2-phényl acétate d'éthyle selon la méthode générale 5 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1 ). RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,22(t, 3H, J = 7,35Hz), 2,20(s, 6H), 4,16-4,28(m, 2H),
5,3(s, 1H), 7,38-7,51 (m, 7H), 9,87(s, 1 H)
Matière première 7 : 4'-(Cyclohexyléthyl)acétophénone
Figure imgf000053_0003
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-hydroxyacétophénone et de 2- cyclohexyléthanol selon la méthode générale 5 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane-acétate d'éthyle :
9-1).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 0,90-1 ,80(m, 13H), 2,56 (s, 3H), 4,07(t, 2H, J = 6,45Hz),
6,92(d, 2H, J = 8,80Hz), 7,93(d, 2H, J = 8,80Hz)
Matière première 8 : 2,6-Diméthylthioanisole
Figure imgf000054_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 2,6-diméthylthiophénol et d'iodure de méthyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1). RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,28(s, 3H), 2,62(s, 6H), 7,16(m, 3H)
Matière première 9 : 3',5'-Diméthyl-4'-méthylthioacétophénone
Figure imgf000054_0002
La matière première 8 (1éq) est solubilisée dans du chlorure de méthylène, la solution est refroidie à 0°C puis sont ajoutés le chlorure d'aluminium (2,5éq) et le bromure d'acétyle (2éq). L'ensemble est agité 72 heures à température ambiante, puis versé sur de la glace. La phase aqueuse est extraite par du dichlorométhane, la phase organique est lavée à l'eau jusqu'à neutralité, séchée sur sulfate de magnésium puis le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,23(s, 3H), 2,54(s, 3H), 2,56(s, 6H), 7,63(s, 2H) Matière première 10: 4'-Méthoxy-3',5'-diméthylacétophénone
Figure imgf000055_0001
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 4 et d'iodure de méthyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Le produit brut obtenu après élimination du carbonate de potassium par filtration et élimination des solvants par évaporation sous pression réduite est utilisé pour la synthèse du composé intermédiaire correspondant.
RMN 1H CDCI3 δppm : 2 ,31 (s, 6H), 2,54(s, 3H), 3,74(s, 3H), 7,63(s, 2H)
Matière première 11 : 4'-Cyclohexyléthyl-3',5'-diméthylacétophénone
Figure imgf000055_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 4 et de 2- cyclohexyléthanol selon la méthode générale 5 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 85-15).
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,92-1 ,80(m, 13H), 2,31 (s, 6H), 2,55(s, 3H), 3,86(t, 2H, J = 7,05Hz), 7,63(s, 2H)
Matière première 12 : 4'-(Bromoéthyloxy)-3',5'-diméthylacétophénone
Figure imgf000055_0003
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 4 et de dibromoéthane selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 85-15).
RMN 1H CDCI3 δppm : 2,36(s, 6H), 2,56(s, 3H), 3,68(t, 2H, J = 6,21 Hz), 4,14(t,
2H, J = 6,21 Hz), 7,65 (s, 2H)
Matière première 13 : 4'-(Cyclohexylthioéthyloxy)acétophénone
Figure imgf000056_0001
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 1 et de cyclohexane thiol selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1,08(m, 5H), 1 ,40(m, 1H), 1 ,56(m, 2H),1 ,80(m, 2H), 2,30(s,
3H), 2,53(m, 1H), 2,69(t, 2H, J = 6,96Hz), 3,95(t, 2H, J = 6,96Hz), 6,68(d, 2H, J = 8,88Hz), 7,69(d, 2H, J = 8,88Hz)
Matière première 14 : 4'-(Cyclohexylthioéthyloxy)-3',5'-diméthylacétophénone
Figure imgf000056_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 12 et de cyclohexane thiol selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1). RMN 1H CDCI3 δppm : 1,26-1,42(m, 5H), 1 ,59-1 ,65(m, 1H), 1 ,80(m, 2H), 2,00(m,
2H), 2,35(s, 6H), 2,56(s, 3H), 2,75(m, 1H), 2,95(t, 2H, J ≈ 6,81 Hz), 3,96(t, 2H, J =
6,81 Hz Hz), 7,64 (s, 2H) Matière première 15 : 4'-Méthoxy-3'-méthylacétophénone
Figure imgf000057_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-hydroxy-3-méthylacétophénone et d'iodure de méthyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Le produit brut obtenu après élimination du carbonate de potassium par filtration et élimination des solvants par évaporation sous pression réduite est utilisé pour la synthèse du composé intermédiaire correspondant.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,53(s, 3H), 2,56(s, 3H), 3,90(s, 3H), 6,85(d, 1 H, J = 8,46Hz), 7,78(s, 1H), 7,82(d, 1 H, J = 8,46Hz)
Matière première 16 : 1 ,3-Diméthyl-2-hexylthiobenzène
Figure imgf000057_0002
Ce composé est synthétisé à partir de 2,6-diméthylthiophénol et de bromure d'hexyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane). RMN 1H CDCI3 δppm : 0,90(t, 3H, J = 6,57Hz), 1 ,27-1 ,58(m, 8H), 2,57(s, 6H),
2,66(t, 2H, J = 7,11 Hz), 7,12 (m, 3H)
Matière première 17 : 3',5'-Diméthyl-4'-hexylthioacétophénone
Figure imgf000057_0003
La matière première 16 (1éq) est solubilisée dans du chlorure de méthylène, la solution est refroidie à 0°C puis sont ajoutés le chlorure d'aluminium (1 éq) et le bromure d'acétyle (1éq). L'ensemble est agité 2 heures à température ambiante, puis versé sur de la glace. La phase aqueuse est extraite par du dichlorométhane, la phase organique est lavée à l'eau jusqu'à neutralité, séchée sur sulfate de magnésium puis le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane). RMN 1H CDCI3 δppm : 0,87(t, 3H, J = 6,72Hz), 1 ,22-1 ,53(m, 8H), 2,58(s, 3H), 2,59 (s, 6H), 2,68(t, 2H, J = 7,23Hz), 7,66(s, 2H)
Matière première 18 : 3',5'-Diméthyl-4'-(Morpholin-4-yléthyloxy)acétophénone
Figure imgf000058_0001
La matière première 12 (1éq) et la morpholine (0,7éq) sont solubilisées dans l'acétone. Du carbonate de potassium (1éq) est ajouté, l'ensemble est maintenu
72h00 à reflux. Le carbonate est éliminé par filtration, le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. L'huile résiduelle est reprise par une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 1N et lavée avec de l'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est rendue basique (pH = 9) par addition de carbonate de potassium puis extraite par de l'acétate d'éthyle. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium puis le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite. RMN 1H CDCI3 δppm : 2,33(s, 6H), 2,54(s, 3H), 2,60(t, 4H, J = 4,70Hz), 2,81 (t, 2H, J = 5,76Hz), 3,76(t, 4H, J = 4,70Hz) 3,93(t, 2H, J = 5,76Hz), 7,62(s, 2H)
Matière première 19 :
3,5-Difluoro-4-hydroxybenzaldéhyde
Figure imgf000058_0002
Le 2,6-difluorophénol (1éq) et l'hexaméthylènetétramine (2éq) sont solubilisés dans un mélange eau/acide acétique (10-90). L'ensemble est maintenu 18h00 à reflux puis refroidi à température ambiante.
Le milieu réactionnel est extrait par du dichlorométhane. Les phases organiques sont rassemblées, séchées sur sulfate de magnésium. Le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite.
RMN 1H CDCI3 δppm : 7,35(dd, 2H, J = 6,57Hz, J = 2,82Hz), 9,67(s, 1 H)
Matière première 20 : 4'-Méthoxy-3'-trifluorométhylacétophénone
Figure imgf000059_0001
Le 4-méthoxy-3-trifluorométhylbenzonitrile (1éq) est dissout dans du THF anhydre.
Du chlorure de méthyl magnésium en solution dans le THF (1éq) est additionné.
Le milieu réactionnel est laissé 16h00 sous agitation à température ambiante puis une heure à reflux après addition d'un complément de chlorure de méthyl magnésium (1éq).
Le milieu réactionnel est versé sur une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 1N, et extrait par du dichlorométhane. La phase organique est neutralisée avec une solution aqueuse de bicarbonate de potassium puis lavée avec de l'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium puis le solvant est éliminé par évaporation sous pression réduite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,60(s, 3H), 3,99(s, 3H), 7,07(d, 1 H, J = 8,79 Hz), 8,14(d, 1 H, J = 8,79Hz, J = 1 ,77Hz), 8,19(s, 1 H)
Synthèse de composés intermédiaires servant à la synthèse des composés selon l'invention :
Composé intermédiaire 1 : 1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1- one
Figure imgf000060_0001
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 2 et de 4-hydroxy-3,5- diméthylbenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 85-15).
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,91 (m, 3H), 1 ,33-1 ,42(m, 4H), 1 ,59-1 ,67(m, 2H), 2,29(s, 6H), 2,64(t, 2H, J = 7,60Hz) , 2,96(t, 2H, J = 6,80Hz), 4,24(t, 2H, J = 6,80Hz), 6,97(d, 2H, J = 8,70Hz), 7,31 (s, 2H), 7,37 (d, 1H, J = 15,54Hz), 7,72(d, 1 H, J = 15,54Hz), 8,03(d, 2H, J = 8,70Hz)
Composé intermédiaire 2 : 1-(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)
-prop-2-èn-1-one
Figure imgf000060_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 5 et de 4-hydroxy-3,5- diméthylbenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2). RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,45-1 ,65(m, 4H), 1 ,65-1 ,77(m, 2H), 1 ,77-1 ,87(m, 2H),
1 ,87-2,0(m, 1 H), 2,30(s, 6H), 2,43-2,51 (m, 1 H), 3,09-3,22(m, 2H), 3,56-3,62(m, 1H), 4,04(t, 2H, J = 6,40Hz), 6,96(d, 2H, J = 8,50Hz), 7,31 (s, 2H), 7,41 (d, 1H, J =
15,40Hz), 7,73(d, 1H, J = 15,40Hz), 8,04(d, 2H, J = 8,50Hz) Composé intermédiaire 3 : 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-dibromophényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000061_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-méthylthioacétophénone et de 3,5- dibromo-4-hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 2,55(s, 3H), 6,19(s, 1H), 7,32(d, 2H, J = 8,70Hz), 7,41(1H,
J = 15,40Hz), 7,63(d, 1H, J = 15,40), 7,75(s, 2H), 7,96(d, 2H, J = 8,70Hz)
Composé intermédiaire 4:
1-(4-(Cyclohexyléthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1- one
Figure imgf000061_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 7 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Le produit cristallise dans le milieu réactionnel, il est essoré, lavé avec de l'éthanol préalablement refroidi à 0°C et séché sous vide.
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,90-1 ,80(m, 13H), 2,30(s, 6H), 4,08(t, 2H, J = 6,54Hz),
6,97(d, 2H, J = 9,00Hz), 7,30(s, 2H), 7,42(d, 1H, J = 15,50Hz), 7,73(d, 1 H, J =
15,50Hz), 8,03(d, 2H, J = 9,00Hz)
Composé intermédiaire 5 1-(4-Méthylthio-3 ,5-diméthyl-phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn- 1-one
Figure imgf000062_0001
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 9 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 2,28 (s, 3H), 2,30(s, 6H), 2,64(s, 6H), 7,32(s, 2H), 7,36(d, 1H, J ≈ 15,76Hz), 7,72(s, 2H), 7,73(d, 1H, J = 15,76Hz)
Composé intermédiaire 6 :
1-(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1- one
Figure imgf000062_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 10 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Le produit cristallise dans le milieu réactionnel, il est essoré, lavé avec de l'éthanol préalablement refroidi à 0°C et séché sous vide.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,28(s, 6H), 2,35(s, 6H), 3,77(s, 3H), 7,30(s, 2H), 7,35(d,
1 H, J = 15,63Hz), 7,70(d, 1H, J = 15,63Hz), 7,72(s, 2H)
Composé intermédiaire 7 :
1-(4-(Cyclohexyléthyloxy)-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000063_0001
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 11 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 0,94-1 ,05(m, 2H), 1 ,16-1 ,31 (m, 4H), 1 ,57-1 ,82(m, 7H), 2,30(s, 6H), 2,35(s, 6H), 3,86(t, 2H, J = 7,08 Hz), 7,32(s, 2H), 7,38(d, 1 H, J = 15,81 Hz), 7,71 (s, 2H), 7,72(d, 1H, J = 15,81 Hz)
Composé intermédiaire 8 :
1-(4-(Cyclohexylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-
1-one
Figure imgf000063_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 13 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Le produit cristallise dans le milieu réactionnel, il est essoré, lavé avec de l'éthanol préalablement refroidi à 0°C.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,23-1 ,42(m, 5H), 1 ,63-1 ,65(m, 1H), 1 ,79-1 ,81 (m, 2H), 2,01-2,08(m, 2H), 2,29(s, 6H), 2,73-2,81 (m, 1 H), 2,96(t, 2H, J = 7,08Hz), 4,20(t, 2H, J = 7,08Hz), 6,97(d, 2H, J = 8,73Hz), 7,30(s, 2H), 7,41 (d, 1 H, J = 15,53Hz), 7,73(d, 1H, 15,53Hz), 8,04(d, 2H, J = 8,73Hz)
Composé intermédiaire 9 :
1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000064_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 2',4',5'-triméthylacétophénone et de 3,5- diméthyl-4-hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 7-3).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,27(s, 9H), 2,29(s, 3H), 2,38(s, 3H), 7,00(d, 1H,
J=15,90Hz), 7,04 (s, 1 H), 7,23(s, 2H), 7,27(s, 1H, ), 7,39(d, 1H, J=15,90Hz)
Composé intermédiaire 10 :
1-(4-(Cyclohexylthioéthyloxy)-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000064_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 14 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 7-3).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,32(m, 5H), 1 ,63(m, 1H), 1 ,79(m, 2H), 2,03(m, 2H), 2,29(s, 6H), 2,37(8, 6H), 2,75(m, 1H), 2,97(t, 2H, J = 7,05Hz), 3,97(t, 2H, J = 7,05Hz), 7,30(s, 2H) 7,37(d, 1 H, J = 15,70Hz), 7,70(d, 1H, J = 15,70Hz), 7,71 (s, 2H)
Composé intermédiaire 11 : 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-hydroxy-3-fluorophényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000065_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-méthylthioacétophénone et de 3-fluoro-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Le produit cristallise dans le milieu réactionnel, il est essoré et séché sous vide. RMN 1H CDCI3 δppm : 2,55(s, 3H), 7,04(t, 1H, J = 8,37Hz), 7,30-7,42(m, 5H), 7,73(d, 1H, J = 15,54Hz), 7,95(d, 2H, J = 8,40Hz)
Composé intermédiaire 12:
1 -(2,3,4, 5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1- one
Figure imgf000065_0002
Ce composé est synthétisé à partir de pentaméthylacétophénone et de 3,5- diméthyl-4-hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Le produit cristallise dans le milieu réactionnel, il est essoré et purifié par recristallisation dans l'éthanol.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,09(s, 6H), 2,20(s, 6H), 2,22(s, 6H), 2,26(s, 3H), 6,83(d,
1 H, J = 16, 11 Hz), 7,05(d, 1H, J = 16, 11 Hz), 7,16(s, 2H)
Composé intermédiaire 13 : 1-(4-Phénoxyphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000065_0003
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-phénoxyacétophénone et de 3,5- diméthyl-4-hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 7-3).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,30(s, 6H), 7,05(d, 2H, J = 8,67Hz), 7,1(d, 2H, J =
8,47Hz), 7,21 (t, 1H, J = 7,30Hz), 7,31 (s, 2H), 7,43-7,38(m, 3H), 7,75 (d, 1 H, J =
15,36Hz), 8,05 (d, 2H, J = 8,47Hz)
Composé intermédiaire 14 : 1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000066_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-méthoxy-3'-fluoroacétophénone et de
3,5-diméthyl-4-hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Le produit cristallise dans le milieu réactionnel, il est essoré puis lavé avec de l'heptane.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,30(s, 6H), 3,98(s, 3H), 7,04(t, 1H, J = 8,30Hz), 7,31 (s,
2H), 7,35(d, 1H, J = 15,69Hz), 7,74(d, 1 H, J = 15,69Hz), 7,79-7,87(m, 2H)
Composé intermédiaire 15 : 1-(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 15 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Figure imgf000066_0002
Le produit cristallise dans le milieu réactionnel, il est essoré et lavé avec de l'heptane.
RMN 1H CDCI3 δppm : 2,30(s, 9H), 3,92(s, 3H), 6,90(d, 1H, J = 8,45Hz), 7,31 (s,
2H), 7,43(d, 1H, J = 15,52Hz), 7,73(d, 1 H, J = 15,52Hz) , 7,88(s, 1H), 7,93(d, 1 H,
J = 8,45Hz)
Composé intermédiaire 16 : 1-(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 one
Figure imgf000067_0001
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 17 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,88(t, 3H, J = 6,90Hz), 1,20-1,50(m, 8H), 2,30(s, 6H), 2,63(s, 6H), 2,70(t, 2H, J = 6,9Hz), 7,32(s, 2H), 7,36(d, 1H, J = 15,51 Hz), 7,72 (s, 2H), 7,73 (d, 1H, J = 15,51 Hz)
Composé intermédiaire 17 : 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000067_0002
Ce composé est synthétisé à partir de 2',5'-diméthoxyacétophénone et de 3,5- diméthyl-4-hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 7-3). RMN 1 H CDCI3 δppm : 2,27(s, 6H), 3,74(s, 3H), 3,82(s, 3H), 6,93(d, 1H, J = 8,73Hz), 7,02(dd, 1H, J = 8,73Hz, J = 3,27Hz), 7,14(d, 1H, J = 3,27Hz), 7,22(d, 1 H, J = 15,81 Hz), 7,25(s, 2H), 7,53(d, 1H, J = 15,81 Hz)
Composé intermédiaire 18 : 1-(4-Bromophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-difluorophényl)-prop-2-èn-1-one
Figure imgf000068_0001
Ce composé est synthétisé à partir de 4'-bromoacétophénone et de la matière première 19 selon la méthode générale 1 précédemment décrite. L'éthanol est éliminé par évaporation sous pression réduite, le solide est lavé avec de l'éthanol absolu.
RMN 1H CDCI3 δppm : 5,97(s, 1H), 7,18(d, 2H, J = 8,30Hz), 7,35(d, 1 H, J = 15,36Hz), 7,65(m, 3H), 7,89(d, 2H, J=8,30Hz)
Composé intermédiaire 19 :
1-(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2- èn-1-one
Figure imgf000068_0002
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 20 et de 3,5-diméthyl-4- hydroxybenzaldéhyde selon la méthode générale 1 précédemment décrite. L'éthanol est éliminé par évaporation sous pression réduite, le solide est lavé avec de l'éthanol absolu.
RMN 1H DMSOd6 δppm : 2,22(s, 6H), 4,01 (s, 3H), 7,41 (d, 1H, J = 9,00 Hz), 7,52(s, 2H), 7,64(d, 1H, J = 15,40Hz), 8,96(s, 1 H), 7,76(d, 1H, J = 15,40Hz) , 8,29 (d, 1H, J = 1 ,60Hz), 8,49(dd, 1H, J = 9,00Hz, J = 1 ,60Hz)
Synthèse des composés selon l'invention : Composé 1 selon l'invention :
1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000069_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 1 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1). RMN 1H CDCI3 δppm : 0,91 (t, 3H, J = 7,10Hz), 1,37-1,69(m, 21H) 2,27(s, 6H),
2,63(t, 2H, J = 7,10Hz), 2,93(t, 2H, J = 7,10Hz), 4,21(t, 2H, J = 7,10Hz), 6,97(d,
2H, J = 8,70Hz), 7,28(s, 2H), 7,44(d, 1H, J = 15,81 Hz), 7,70(d, 1H, J = 15,81 Hz),
8,03(d, 2H, J = 8,70Hz)
Composé 2 selon l'invention :
1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000069_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 1 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,84-0,89(m, 3H), 1,39-1,24(m, 4H), 1,39(s, 6H), 1,50-1,57
(m, 2H), 2,22(s, 6H), 2,61 (t, 2H, J = 7,40Hz), 2,90(t, 2H, J = 6,20Hz), 4,26(t, 2H, J = 6,20Hz), 7,09(d, 2H, J = 8,50Hz), 7,57(s, 2H), 7,59(d, 1H, J = 15,40Hz), 7,83(d,
1H, J = 15,40Hz), 8,15(d, 2H, J = 8,50Hz), 12,90(s, 1H) SM(ES-MS): 483,2(m-1) F°C = 85,2-89,8
Composé 3 selon l'invention :
1-(4-Hydroxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)-prop-2-ène-1-one
Figure imgf000070_0001
Ce composé est synthétisé à partir de la matière première 3 et de la matière première 4 selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 95-5).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,46(s, 6H), 1 ,53(s, 9H), 2,27(s, 6H), 2,33(s, 6H), 7,28(s, 2H), 7,43(d, 1 H, J = 15,81 Hz), 7,69(d, 1H, J = 15,81 Hz), 7,74(s, 2H)
Composé 4 selon l'invention :
1-(4-Hydroxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-ène-1-one
Figure imgf000070_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 3 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1,39(s, 6H), 2,22(s, 6H), 2,25(s, 6H), 7,33(s, 2H), 7,45(d,
1 H, J = 15,5Hz), 7,69(d, 1 H, J = 15,5Hz), 7,75(s, 2H)
SM(ES-MS) : 381 ,3(m-1) F°C = 199,3-199,8
Composé 5 selon l'invention :
1-(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyl diméthyl méthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000071_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 2 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 85-15).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,43(s, 6H), 1 ,53(m, 13H), 1 ,65-1 ,75(m, 2H), 1 ,75-1 ,85(m, 2H), 1 ,85-1 ,97(m, 1H), 2,28(s, 6H), 1 ,46-1 ,52(m, 1 H), 3,12-3,21(m, 2H), 3,58- 3,63(m, 1H),4,05(t, 2H, J = 6,21 Hz), 6,97(d, 2H, J = 8,30Hz), 7,29(s, 2H), 7,45(d, 1 H, J = 15,50Hz), 7,70(d, 1 H, J = 15,50Hz), 8,03(d, 2H, J = 8,30Hz)
Composé 6 selon l'invention :
1-(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one
Figure imgf000071_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 5 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2 ).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,56(m, 10H), 1 ,67-1 ,77(m, 2H), 1 ,77-1,90(m, 2H), 1 ,90-
1 ,97(m, 1 H), 2,30(s, 6H), 2,43-2,52(m, 1H), 3,11-3,22(m, 2H), 3,58-3,63(m, 1 H), 4,05(t, 2H, J = 6,20Hz), 6,98(d, 2H, J = 8,80Hz), 7,31(s,2H), 7,46(d,1 H, J 15,80Hz), 7,71 (d, 1H, J = 15,80Hz), 8,03(d, 2H, J = 8,80Hz) SM(ES-MS) : 529,1(M+1) F°C= 182,7-186,6°C
Composé 7 selon l'invention :
1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- dibromophényl)-prop-2-ène-1 -one
Figure imgf000072_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 3 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1). RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,54(s, 9H), 1 ,63(s, 6H), 2,56(s, 3H), 7,33(d, 2H, J =
8,50Hz), 7,44(d, 1H, J = 15,70Hz), 7,62(d, 1H, J = 15,70Hz), 7,78(s, 2H), 7,96(d,
2H, J = 8,50Hz)
Composé 8 selon l'invention : 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-dibromophényl)-prop-
2-ène-1-one
Figure imgf000072_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 7 selon la méthode générale 6 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1,54(s, 6H), 2,51 (s, 3H), 7,41 (d, 2H, J = 8,5Hz), 7,64(d, 1 H, J = 15,4Hz), 8,04(d, 1H, J = 15,4Hz), 8,15(d, 2H, J = 8,5Hz), 8,29(s, 2H), 12,93(s, 1 H)
SM(ES-MS): 513,2(m-1)
Composé 10 selon l'invention : 1-(4-Cyclohexyléthyloxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000073_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 4 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- cyclohexane : 7-3 ).
RMN 1H CDCI3 δppm : 0 ,90-1 ,30(m, 5H), 1 ,50(m, 16H), 1 ,73(m, 7H), 2,28(s, 6H), 4,08(t, 2H, J = 6,54Hz), 6,97(d, 2H, J = 8,70 Hz), 7,29(s, 2H), 7,45(d, 1 H, J = 15,75Hz ), 7,70(d, 1 H, J = 15,75Hz), 8,03(d, 2H, J = 8,70Hz)
Composé 11 selon l'invention :
1-(4-Cyclohexyléthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000073_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 10 selon la méthode générale 6 précédemment décrite. Purification par précipitation dans le mélange dichlorométhane-heptane.
RMN 1H CDC δppm : 0,90-1 ,30(m, 5H), 1 ,56(m, 7H), 1,70(m, 7H), 2,30(s, 6H),
4,09(t, 2H, J = 6,57Hz), 6,98(d, 2H, J = 9,09Hz), 7,32(s, 2H), 7,4(d, 1 H, J =
15,60Hz), 7,71 (d, 1 H, J = 15,60Hz), 8,04 (d, 2H, J = 9,09Hz)
SM(ES-MS): 465,3(m+1)
F°C = 134,8-135,3
Composé 12 selon l'invention :
1 -(4-Méthylth io-3 , 5-d iméthylphényl)-3-(4-tertiobuty loxycarbony Id iméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000074_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 5 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2 ).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,50(s, 6H), 1 ,51 (s, 3H), 1 ,53 (s, 9H), 2,28(s, 6H), 2,63(s,
6H), 7,30(s, 2H), 7,39(d, 1H, J = 15,69Hz), 7,69(d, 1H, J = 15,69Hz), 7,72(s, 2H)
Composé 13 selon l'invention :
1-(4-Méthylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000074_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 12 selon la méthode générale 6 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1 H DMSOd6 δppm : 1 ,39(s, 6H), 2,22(s, 6H), 2,28(s, 3H), 2,59(s, 6H),
7,56(s, 2H), 7,62(d, 1H, J = 15,37Hz), 7,79(d, 1H, J = 15,37Hz), 7,89(s, 2H), 12,95
(s, 1H)
SM(ES-MS): 412,9(m+1)
F°C = 177,0-179,0
Composé 14 selon l'invention :
1-(4-Propyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000075_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 3 et de bromure de propyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite, Le produit brut obtenu après élimination du carbonate de potassium et élimination des solvants par évaporation sous pression réduite a été utilisé pour la synthèse du composé 15. RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,09(t, 3H, J = 7,41 Hz), 1 ,46(s, 6H), 1 ,58(s, 9H), 1 ,83(m, 2H), 2,27(s, 6H), 2,35(s, 6H), 3,78 (t, 2H, J = 6,09Hz), 7,29(s, 2H), 7,41 (d, 1 H, J = 15,32Hz), 7,68(d, 1H, J = 15,32Hz), 7,70(s, 2H)
Composé 15 selon l'invention :
1-(4-Propyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000075_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 14 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 95-5).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,05(t, 3H, J = 7,29Hz), 1,39(s, 6H), 1 ,78(m, 2H), 2,23(s,
6H), 2,32(s, 6H), 3,78(m, 2H), 7,56(s, 2H), 7,58(d, 1 H, J = 16,26Hz ), 7,80(d, 1 H,
J = 16,26Hz), 7,86(s, 2H)
SM(ES-MS): 424,9(m+1)
F°C = 188,5-189,7
Composé 16 selon l'invention :
1-(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000076_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 6 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 95-5 ). RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,47(s, 9H), 1 ,53(s, 6H), 2,29(s, 6H), 2,31 (s, 6H), 3,79(s,
3H), 7,30(s, 2H), 7,40 (d, 1H, J = 15,50Hz), 7,70(d, 1H, J = 15,50Hz), 7,71 (s, 2H)
Composé 17 selon l'invention :
1-(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000077_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 16 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1,57(s ,6H), 2,31 (s, 6H), 2,38( s, 6H), 3,79(s, 3H), 7,33(s,
2H), 7,43(d, 1H, J = 15,81 Hz), 7,71 (d, 1H, J = 15,81 Hz), 7,72(s, 2H)
SM(ES-MS) : 396,9 (m+1)
F°C = 166,6-168,8
Composé 18 selon l'invention :
1 -(4-Hexyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthyl méthyloxy -
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000077_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 3 et de bromure d'hexyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Le produit brut obtenu après élimination du carbonate de potassium et élimination des solvants par évaporation sous pression réduite a été utilisé pour la synthèse du composé 19.
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,93(t, 3H, J = 8,58Hz), 1,37(m, 4H), 1,47(s, 6H), 1,53(m,
11 H), 1,83(m, 2H), 2,28(s, 6H), 2,36(s, 6H), 3,82(t, 2H, J = 6,54Hz), 7,29(s, 2H),
7,40(d, 1H, J = 15,57Hz), 7,70(d, 1H, J = 15,57Hz), 7,71 (s, 2H)
Composé 19 selon l'invention :
1 -(4-Hexyloxy-3 , 5-d iméthylphényl)-3-(4-carboxyd iméthylméthy loxy-3 , 5-d iméthyl phényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000078_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 18 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 95-5). RMN 1 H CDCI3 δppm : 0,93(t, 3H, J = 7,02Hz), 1 ,37(m, 4H), 1 ,50(m, 2H), 1 ,56(s, 6H), 1 ,83(m, 2H), 2,30(s, 6H), 2,34(s, 6H), 3,82(t, 2H, J = 6,57Hz), 7,32(s, 2H), 7,42(d, 1 H, J = 15,48Hz), 7,69(d,1 H, J = 15,48Hz), 7,71 (s, 2H) SM(ES-MS) : 466,9(m+1) F°C = 171 ,0-172,0
Composé 20 selon l'invention :
1-(4-Cyclohexyléthyloxy-3, 5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthyl méthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000078_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 7 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 85-15). RMN 1H CDCI3 δppm : 0,94-1 ,53(m, 28H), 2,28(s, 6H), 2,35(s, 6H), 3,86(t, 2H, J=6,75Hz), 7,29(s, 2H), 7,41(d, 1H, J=15,76Hz), 7,70 (d, 1H, J=15,76Hz), 7,71 (s, 2H)
Composé 21 selon l'invention : 1-(4-Cyclohexyléthyloxy-3, 5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000079_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 20 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 0,97-1,04(m, 2H), 1,16-1,34(m, 4H), 1 ,56(s, 6H), 1 ,63-
1 ,82(m, 7H), 2,30(s, 6H), 2,35(s, 6H), 3,86(t, 2H, J = 6,60Hz), 7,32(s, 2H), 7,43 (d,
1 H, J = 15,81 Hz), 7,70(d, 1 H, 15,81 Hz), 7,71(s, 2H)
SM(ES-MS) : 492,9(m+1)
F°C = 166,4-167,7
Composé 22 selon l'invention :
1-(4-Cyclohexylthioéthyloxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000079_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 8 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 7-3).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,29(m, 5H), 1 ,46 (s, 6H), 1 ,53(s, 9H), 1 ,62(m, 1 H),
1 ,80(m, 2H), 2,03(m, 2H), 2,27(s, 6H), 2,75(m, 1H), 2,95(t, 2H, 6,81 Hz), 4,20(t,
2H, J = 6.81Hz), 6,97(d, 2H, J = 9,24Hz), 7,28(s, 2H), 7,43,(d, 1H, J = 15,78Hz),
7,70(d, 1 H, J = 15,78Hz), 8,03(d, 2H, J = 9,24Hz) Composé 23 selon l'invention :
1-(4-Cyclohexylthioéthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000080_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 22 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2). RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,27-1 ,38(m, 4H), 1 ,56(s, 6H), 1 ,63-1 ,66(m, 2H), 1 ,79-
1 ,81 (m, 2H), 2,01-2,04(m, 2H), 2,30(s, 6H), 2,76-2,77(m, 1 H), 2,96(t, 2H, J = 7,08
Hz), 4,21 (t, 2H, J = 7,08Hz), 6,97(d, 2H, J = 8,61 Hz), 7,31 (s, 2H), 7,41 (d, 1 H, J =
15,60Hz), 7,73(d, 1H, J = 15,60Hz), 8,04(d, 2H, J = 8,61 Hz)
SM(Maldi-tof): 496,67(m+1) F°C = 112,3-114
Composé 24 selon l'invention :
1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000080_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 9 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2). RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,40-1 ,65(m, 15H), 2,22(s, 6H), 2,25(s, 3H), 2,28(s, 3H), 2,35(s, 3H), 7,00(8, 1H), 7,01 (d, 1H, J = 15,70Hz), 7,18 (s, 2H), 7,24(s, 1H), 7,35(d, 1 H, 15,70Hz)
Composé 25 selon l'invention :
1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000081_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 24 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlrorométhane- méthanol: 98-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,55(s, 6H), 2,27,(s, 6H), 2,27-2,30 (m, 6H), 2,39 (s, 3H),
7,05 (s, 1 H), 7,07 (d, 1 H, J = 15,24Hz), 7,24(s, 2H); 7,28 (s, 1 H), 7,4 (d, 1 H, J = 15,78Hz)
SM(ES-MS) : 381 ,2(m+1)
F°C = 168,7-173,3
Composé 26 selon l'invention : 1-(4-Cyclohexylthioéthyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000081_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 10 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 95-5).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,27-2,04 (m, 10H), 1,47(s, 6H), 1 ,53(s, 9H), 2,29(s, 6H), 2,38(s, 6H), 2,75(m, 1 H), 2,98(t, 2H, J=6,84Hz), 3,98(t, 2H, J=6,84Hz), 7,29(s, 2H), 7,40(d, 1 H, J=15,63Hz), 7,70(d, 1 H, J=15,63Hz), 7,71 (s, 2H )
Composé 27 selon l'invention :
1-(4-Cyclohexylthioéthyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000082_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 26 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,26-1,42(m, 5H), 1 ,56(s, 6H), 1 ,62-1 ,64(m, 1 H), 1 ,79-1 ,81 (m, 2H), 2,03-2,00(m, 2H), 2,3(s, 6H), 2,38(s, 6H), 2,71-2,78(m, 1H), 2,97(t, 2H, J = 7,00Hz), 3,98(t, 2H, J = 7,00Hz), 7,32(s, 2H), 7,43(d, 1H, J = 15,78Hz), 7,7(d, 1 H, J = 15,24Hz), 7,71 (s, 2H) SM(MALDI-TOF) : 524,78(m+1) F°C = 156,0-158,0
Composé 28 selon l'invention :
1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3- fluorophényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000082_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 11 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,43(s, 9H), 1 ,62(s, 6H), 2,53(s, 3H), 6,95(t, 1H, J = 8,07
Hz), 7,32(d, 2H, J = 8,64Hz), 7,39(m, 3H), 7,72(d, 1H, J = 15,50Hz), 7,95(d, 2H, J
= 8,64Hz)
Composé 29 selon l'invention :
1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3-fluorophényl)prop-2-èn-
1-one
Figure imgf000083_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 28 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Il est purifié par précipitation dans un mélange dichlorométhane-heptane : 70-30.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,67(s, 6H), 2,56(s, 3H), 7,09(t, 1 H, J = 8,19Hz), 7,32(m,
3H), 7,43 (m, 2H), 7,73(d, 1 H, J = 15,24Hz), 8,73(d, 2H, J = 8,73Hz)
SM(ES-MS) : 375,1(m+1)
F°C = 142,2-144,6
Composé 30 selon l'invention :
1-(2,3,4,5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000083_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 12 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 95-5 ).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,44(s, 6H), 1 ,53(s, 9H), 2,11 (s, 6H), 2,22(s, 6H), 2,23(s, 6H), 2,28(s, 3H), 6,84(d, 1H, J = 16,26Hz), 7,06(d, 1 H, J = 16,26Hz), 7,16(s, 2H)
Composé 31 selon l'invention : 1-(2,3,4,5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000084_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé 30 selon la méthode générale 6 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,53(s, 6H), 2,11 (s, 6H), 2,22(s, 6H), 2,24(s, 6H), 2,28(s,
3H), 6,87(d, 1 H, J = 16,20Hz), 7,08(d, 1 H, J = 16,20Hz), 7,19(s, 2H)
SM(ES-MS) : 409,1(m+1) F°C = 192,8-194,2
Composé 32 selon l'invention :
1-(4-Phényloxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000085_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 13 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 7-3).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,47(s, 6H), 1 ,53(s, 9H), 2,28(s, 6H), 7,02(d, 2H, J =
8,70Hz), 7,1(d, 2H, J = 7,92Hz), 7,21 (t, 1H, J = 7,35Hz), 7,29(s, 2H), 7,39-7,46(m,
3H), 7,73(d, 1H, J = 16,20Hz), 8,04(d, 2H, J = 8,70Hz)
Composé 33 selon l'invention :
1-(4-Phényloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-2- èn-1-one
Figure imgf000085_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 32 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1H DMSOd6 δppm : 1 ,39(s, 6H), 2,22(s, 6H), 7,08(d, 2H, J = 8,55Hz),
7,15(d, 2H, J = 8,01Hz), 7,25(t, 1 H, J = 7,41 Hz), 7,47(t, 2H, J = 7,44Hz), 7,55(s,
2H), 7,62 (d, 1H, J = 15,70Hz), 7,82(d, 1H, J = 15,70Hz), 8,19(d, 2H, J = 8,55Hz)
SM(ES-MS): 430,9(m+1)
F°C = 154,0-156,0
Composé 34 selon l'invention : 1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000086_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 14 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 8-2).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,50(s, 6H), 1 ,53(s, 9H), 2,28(s, 6H), 3,98(s, 3H), 7,04(t,
1H, J = 8,07Hz), 7,29(s, 2H), 7,39(d, 1H, J = 15,70Hz), 7,73(d, 1H, J = 15,70Hz),
7,78-7,86 (m, 2H)
Composé 35 selon l'invention :
1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000086_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 34 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1 H DMSOd6 δppm : 1 ,39(s, 6H), 2,22(s, 6H), 3,95(s, 3H), 7,31 (t, 1 H, J = 7,35Hz), 7,57(s, 2H), 7,60(d, 1 H, J = 15,78Hz), 7,83 (d, 1 H, J = 15,78Hz), 7,99- 8,06 (m, 2H) SM(ES-l\/IS): 387,1(m+1) F°C = 167,0-169,0 Composé 36 selon l'invention :
1-(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one
Figure imgf000087_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 15 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,46(s, 6H), 1 ,52(s, 9H), 2,27(s, 9H), 3,90(s, 3H), 6,88
(d, 1H, J=8,73Hz), 7,28(s, 2H), 7,45(d, 1 H, J=16,11 Hz), 7,70(d, 1H, J=16,11Hz),
7,87(s, 1 H ), 7,92(dd, 1 H, J=8,73Hz, J = 1 ,65Hz)
Composé 37 selon l'invention :
1-(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000087_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 36 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol: 98-2) puis par recristallisation dans l'acétonitrile.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,39(s, 6H), 2,22(s, 6H), 2,24(s, 3H), 3,90(s, 3H), 7,08 (d,
1 H, J = 8,55Hz), 7,56 (s, 2H), 7,58 (d, 1H, J = 16,71Hz), 7,82(d, 1H, J = 15,51Hz),
7,99 (s, 1 H), 8,06 (d, 1H, 8,55), 12,95(s, 1H)
SM(ES-MS): 383,2 (m+1)
F°C = 157,0-159,0
Composé 38 selon l'invention : 1-(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy- 3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 16 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1).
RMN 1H CDCI3 δppm : 0,88(t, 3H, J = 6,84Hz), 1 ,25-1 ,62(m, 8H), 1 ,47(s, 6H),
1 ,53(s, 9H), 2,29(s, 6H), 2,62(s, 6H), 2,70(t, 2H, J = 6,96Hz), 7,30(s, 2H), 7,39(d,
1 H, J = 15,90Hz), 7,70(d, 1 H, J = 15,51 Hz), 7,71 (s, 2H)
Composé 39 selon l'invention :
1-(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one
Figure imgf000088_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 38 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1 H DMSOd6 δppm : 0,84(m, 3H), 1 ,22-1 ,40(m, 8H), 2,08(s, 6H), 2,22(s, 6H), 2,58(s, 6H), 2,73(t, 2H, J = 6,90Hz), 7,57(s, 2H), 7,63(d, 1H, J = 15,35Hz), 7,8(d, 1 H, J = 15,35Hz), 7,89(s, 2H) SM(ES-MS): 483,2(m+1) F°C = 130,0-132,0
Composé 40 selon l'invention 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000089_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 17 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 7-3 ).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,45(s, 6H), 1 ,52(s, 9H), 2,25(s, 6H), 3,81 (s, 3H), 3,86(s,
3H), 6,93(d, 1 H, J = 9,24Hz), 7,01 (dd, 1H, J = 8,82Hz, J = 2,7Hz), 7,14(d, 1 H, J =
2,8Hz), 7,22 (s, 2H), 7,26 (d, 1 H, 15,60Hz), 7,52 (d, 1H, J = 15,60Hz)
Composé 41 selon l'invention :
1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-
2-èn-1-one
Figure imgf000089_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 40 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : dichlorométhane- méthanol : 98-2).
RMN 1H DMSOd6 δppm : 1 ,38 (s, 6H), 2,19 (s, 6H), 3,75 (s, 3H), 3,8 (s, 3H), 7,00
(d, 1H, J = 2,16 Hz), 7,12 (m, 2H), 7,26 (d, 1H, J = 16,2 Hz), 7,37 (d, 1 H, J =
13,5Hz), 7,4 (s, 2H)
SM(ES-MS): 398,3(m-1)
F°C = produit huileux Composé 42 selon l'invention :
Chlorhydrate de 1 -(3,5-Diméthyl-4-(morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4- éthyloxycarbonyl diméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one
Figure imgf000090_0001
Ce composé est synthétisé à partir des matières premières 18 et 3 selon la méthode générale 1 précédemment décrite. Après élimination de l'éthanol par évaporation sous pression réduite. Le composé 42 est obtenu après trituration de l'huile résiduelle dans l'éther diéthylique.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,36(t, 3H, J = 6,84Hz), 1 ,49(s, 6H), 2,24(s, 6H), 2,38(s, 6H), 3,20(s, 2H), 3,50(s, 2H), 3,73(d, 2H, J = 11 ,04Hz), 4,03(d, 2H, J = 11 ,04Hz), 4,30-4,45(m, 6H), 7,36(d, 1H, J = 15,75Hz), 7,28(s, 2H), 7,66(m, 3H), 13,39(s, 1H, N.HCI, éch/D2O)
Composé 43 selon l'invention :
1-(3,5-Diméthyl-4-(morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one
Figure imgf000090_0002
Le composé 42 est solubilisé dans de l'éthanol puis une solution de soude 2M est ajoutée. L'ensemble est maintenu 16h00 sous agitation à température ambiante . Le milieu réactionnel est versé dans de l'eau, la phase aqueuse est lavée par de l'acétate d'éthyle, neutralisée par addition d'acide acétique. La phase aqueuse est extraite par de l'éther diéthylique, Le précipité qui se forme dans la phase éthérée est essoré et recristallisé dans l'éthanol absolu.
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,50(s, 6H), 2,28(s, 6H), 2,36(s, 6H), 2,89(m, 4H), 3,06(t, 2H, J=5,46Hz), 3,87(m, 4H), 4,06(t, 2H, J=5,46Hz), 6,50(s, 1 H), 7,40(d, 1H, J=15,78Hz), 7,27(s, 2H), 7,68 (m, 3H). SM(MALDI-TOF): 496(m+1) F°C = 167-169
Composé 44 selon l'invention :
1-(4-Bromophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- difluorophényl)-prop-2-èn-1 -one
Figure imgf000091_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 18 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite. Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 95-5).
RMN 1H CDCI3 δppm : 1 ,50(s, 9H), 1 ,57(s, 6H), 7,38(d, 2H, J=8,50Hz), 7,65(d, 1 H, J=15,78Hz), 7,66(m, 3H), 7,89(d, 2H, J=8,50Hz)
Composé 45 selon l'invention :
1-(4-Bromophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-difluorophényl)-prop-2-èn-
1-one
Figure imgf000091_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 44 selon la méthode générale 6 précédemment décrite.
Purification par recristallisation dans l'éther diisopropylique.
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1 ,65(s, 6H), 7,24(d, 2H, J= 8,50Hz), 7,41 (d, 1 H, J=15,84
Hz), 7,66(m, 3H), 7,89(d, 2H, J=8,50Hz)
SM(ES-MS): 425(m+1)
F°C = 142 Composé 46 selon l'invention :
1-(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one
Figure imgf000092_0001
Ce composé est synthétisé à partir du composé intermédiaire 19 et de bromoisobutyrate de tertiobutyle selon la méthode générale 4 précédemment décrite.
Purification par chromatographie sur gel de silice (élution : cyclohexane-acétate d'éthyle : 9-1).
RMN 1 H CDCI3 δppm : 1,47(s, 6H), 1 ,53(s, 9H), 2,29(s, 6H), 4,00(s, 3H), 7,10(d,
1 H, J = 8,65 Hz), 7,30(s, 2H), 7,40(d, 1H, J = 15,27Hz), 7,75(d, 1H), 8,25(d, 1 H, J
= 8,65Hz), 8,28(s, 1 H)
Composé 47 selon l'invention :
1-(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one
Figure imgf000092_0002
Ce composé est synthétisé à partir du composé 46 selon la méthode générale 6 précédemment décrite. Le composé 47 pur a été obtenu après élimination des solvants par évaporation sous pression réduite.
RMN 1 H DMSOd6 δppm : 1 ,40(s, 6H), 2,23(s, 6H), 4,03(s, 3H), 7,43(d, 1 H, J=
8,7Hz), 7,60(8, 2H), 7,65(d, 1 H, J=15,40Hz), 7,88(d, 1 H, J=15,40Hz), 8,31 (s,
1H), 8,51(d, 1H, J= 8,70Hz), 12,80(s, 1H).
SM(ES-MS): 437,3(m+1)
F°C = 182,5 Exemple 2 : Evaluation des propriétés antioxydantes des composés selon l'invention
Protection de l'oxydation des LDL induite par le cuiyre: Les composés testés sont les composés selon l'invention dont la préparation est décrite dans les exemples décrits ci-dessus.
L'oxydation des LDL est une modification importante et joue un rôle prépondérant dans la mise en place et le développement de l'athérosclérose (Jurgens, Hoff et al. 1987). Le protocole suivant permet la mise en évidence des propriétés antioxydantes des composés. Sauf mention différente, les réactifs proviennent de chez Sigma (St Quentin, France).
Les LDL sont préparés suivant la méthode décrite par Lebeau et al. (Lebeau, Furman et al. 2000). Les solutions de composés à tester sont préparées à 10"2 M dans un tampon bicarbonate (pH = 9) et diluées dans du PBS pour avoir des concentrations finales allant de 0,1 à 100 μM.
Avant l'oxydation, l'EDTA est retiré de la préparation de LDL par dialyse. L'oxydation a ensuite lieu à 30°C en ajoutant 10O μl d'une solution à 16,6 μM de CuSO4 à 160 μL de LDL (125 μg de protéines/ml) et 20 μl d'une solution du composé à tester. La formation de diènes, l'espèce à observer, se mesure par densité optique à 232 nm dans les échantillons traités avec les composés avec ou sans cuivre. La mesure de la densité optique à 232 nm est réalisée toutes les 10 minutes pendant 8 heures à l'aide d'un spectrophotomètre thermostaté (tecan Ultra 380). Les analyses sont réalisées en triplicata. Nous considérons que les composés ont une activité antioxydante lorsqu'ils induisent un retardement de la lag phase et diminuent la vitesse d'oxydation et la quantité de diènes formés par rapport à l'échantillon témoin. Les inventeurs mettent en évidence que les composés selon l'invention présentent au moins une des propriétés antioxydantes citées ci dessus, ceci indiquant que les composés selon l'invention possèdent un caractère antioxydant intrinsèque.
Des exemples de résultats sont donnés sur les figures 1a, 1b, 1c, 2a, 2b, 2c, 3a, 4a, 4b, 4c, 5a, 5b, 5c, 6a, 6b, 6c, 7a, 7b, 7c, 8a, 8b, 8c où les propriétés antioxydantes des composés selon l'invention sont illustrées. Exemple 3 : mesure des propriétés antioxydantes des composés selon l'invention sur des cultures de cellules
Protocole de culture :
Les lignées cellulaires utilisées pour ce type d'expériences sont de type neuronales, neuroblastomes (humains) et cellules PC12 (rat). Les cellules PC12 ont été préparées à partir d'un phéochromocytome de rat et sont caractérisées par la méthode de Greene et Tischler (Greene and Tischler, 1976). Ces cellules sont couramment utilisées pour des études de différenciation neuronale, transduction du signal et mort neuronale. Les cellules PC12 sont cultivées comme précédemment décrit (Farinelli, Park et al. 1996), dans du milieu complet RPMI (Invitrogen) complémenté avec 10% de sérum de cheval et 5% de sérum de veau fœtal. Des cultures (primaires) de cellules endothéliales et de muscles lisses sont également utilisées. Les cellules sont commandées chez Promocell (Promocell GmBH, Heidelberg) et sont cultivées selon les indications du fournisseur. Les cellules sont traitées avec différentes doses de composés de 5 à 300 μM pendant 24 heures, les cellules sont alors récupérées et l'augmentation de l'expression des gènes cibles est évaluée par PCR quantitative.
Mesure des ARNm :
Les ARNm sont extraits des cellules en culture traitées ou non avec les composés selon l'invention. L'extraction est réalisée à l'aide des réactifs du kit Absolutely RNA RT-PCR miniprep Kit (Stratagene, France) selon les indications du fournisseur. Les ARNm sont ensuite dosés par spectrométrie et quantifiés par RT- PCR quantitative à l'aide du kit Light Cycler Fast start DNA Master Sybr Green I kit (Roche) sur un appareil Light Cycler System (Roche, France). Des paires d'amorces spécifiques des gènes de la Super Oxyde Dismutase (SOD), de la Catalase et de la Glutathion Peroxydase (GPx), enzymes anti-oxydantes, sont utilisées comme sondes. Des paires d'amorces spécifiques des gènes β-actine et cyclophiline sont utilisées comme sondes témoin. L'augmentation de l'expression des ARNm, mesurée par RT-PCR quantitative, des gènes des enzymes antioxydantes est mise en évidence dans les différents types cellulaires utilisés, lorsque les cellules sont traitées avec les composés selon l'invention.
Contrôle du stress Oxydatif :
Mesure des espèces oxydantes dans les cellules en culture :
Les propriétés antioxydantes des composés sont également évaluées à l'aide d'un indicateur fluorescent dont l'oxydation est suivie par l'apparition d'un signal fluorescent. La diminution d'intensité du signal fluorescent émis est mesurée dans les cellules traitées avec les composés de la manière suivante : les cellules PC12 cultivées comme précédemment décrit (plaques noires 96 puits fonds transparents, Falcon) sont incubées avec des doses croissantes de H2O2 (0,25 mM - 1 mM) dans du milieu sans sérum pendant 2 à 24 heures. Après l'incubation, le milieu est enlevé et les cellules sont incubées avec une solution de dichlorodihydrofluorescéine diacetate (DCFDA, Molecular Probes, Eugène, USA) 10 μM dans du PBS pendant 30 min à 37°C et dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Les cellules sont ensuite rincées avec du PBS. La détection de la fluorescence émise par l'indicateur de l'oxydation est mesurée à l'aide d'un fluorimètre (Tecan Ultra 384) à une longueur d'onde d'excitation de 495 nm et une longueur d'onde d'émission de 535 nm. Les résultats sont exprimés en pourcentage de protection par rapport au témoin oxydé.
L'intensité de fluorescence est plus faible dans les cellules incubées avec les composés selon l'invention que dans les cellules non traitées. Ces résultats indiquent que les composés selon l'invention favorisent l'inhibition de la production d'espèces oxydantes dans des cellules soumises à un stress oxydatif. Les propriétés antioxydantes décrites précédemment sont également efficaces pour induire une protection antiradicalaire dans des cellules en culture.
Mesure de la peroxydation lipidigue :
L'effet protecteur des composés sur la peroxydation lipidique sur des cultures de cellules (modèles cellulaires cités précédemment) est déterminé de la façon suivante : les différentes lignées cellulaires ainsi que les cellules en culture primaire sont traitées comme précédemment, le surnageant des cellules est récupéré après le traitement et les cellules sont lysées et récupérées pour la détermination de la concentration protéique. La détection de la peroxydation lipidique est déterminée de la manière suivante : La peroxydation lipidique est mesurée à l'aide d'acide thiobarbiturique (TBA) qui réagit avec la lipoperoxydation des aldéhydes tel que le malondialdéhyde (MDA). Après les traitements, le surnageant des cellules est collecté (900 μl) et 90 μl d'hydroxytoluène butylé y sont ajoutés (Morliere, Moysan et al. 1991). 1 ml d'une solution de TBA à 0,375% dans 0.25M HCL contenant 15% d'acide trichloroacetique est également ajouté aux milieux reactionnels. Le mélange est chauffé à 80°C pendant 15 min, refroidi sur glace et la phase organique est extraite avec du butanol. L'analyse de la phase organique se fait par spectrofluorométrie (λeχC=515 nm et λem =550 nm) à l'aide du spectrofluorimètre Shimazu 1501 (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japon). Les TBARS sont exprimés en équivalents MDA en utilisant un standard le tetra-ethoxypropane. Les résultats sont normalisés par rapport au contenu en protéines.
La diminution de la peroxydation lipidique observée dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention confirme les résultats obtenus précédemment. Les composés selon l'invention présentent avantageusement des propriétés antioxydantes intrinsèques qui permettent de ralentir et/ou d'inhiber les effets d'un stress oxydatif. Les inventeurs montrent également que les composés selon l'invention sont capables d'induire l'expression des gènes d'enzymes antioxydants. Ces caractéristiques particulières des composés selon l'invention permettent aux cellules de lutter plus efficacement contre le stress oxydatif et donc d'être protégées vis à vis des dommages induits par les radicaux libres.
Exemple 4 : Evaluation de l'activation des PPARs in vitro par les composés selon l'invention
Les composés selon l'invention testés sont les composés possédant une fonction acide carboxylique et dont la préparation est décrite dans les exemples décrits ci- dessus. Les récepteurs nucléaires membres de la sous-famille des PPARs qui sont activés par deux classes majeures de composés pharmaceutiques, les fibrates et les glitazones, abondamment utilisées en clinique humaine pour le traitement des dyslipidémies et du diabète, jouent un rôle important dans l'homéostasie lipidique et glucidique. Les données expérimentales suivantes montrent que les composés selon l'invention activent PPARα.PPARγ et PPARD in vitro.
L'activation des PPARs est évaluée in vitro dans des lignées cellulaires de type epithéloïde RK13 ou COS-7 par la mesure de l'activité transcriptionnelle de chimères constituées du domaine de liaison à l'ADN du facteur de transcription
Gal4 de levure et du domaine de liaison du ligand des différents PPARs. Ces derniers résultats sont ensuite confirmés dans des lignées cellulaires selon les protocoles suivants : L'exemple est donné pour les cellules RK13 et les cellules COS-7.
Protocoles de culture
Les cellules RK13 proviennent de I' ECACC (Porton Do n, UK), les cellules COS- 7 proviennent de l'ATCC (American Type Culture Collection) et sont cultivées dans du milieu DMEM supplémenté de 10% vol/vol de sérum de veau fœtal, 100 U/ml pénicilline (Gibco, Paisley, UK) et de 2 mM L-Glutamine (Gibco, Paisley, UK).
Le milieu de culture est changé tous les deux jours. Les cellules sont conservées à 37°C dans une atmosphère humide contenant 5% de C02 et 95% d'air.
Description des plasmides utilisés en transfection Les plasmides pG5TkpGL3, pRL-CMV, pGal4-hPPARcc, pGal4-hPPARγ, pGal4- hPPARδ et pGal4-φ ont été décrits par Raspe, Madsen et al. (1999). Les constructions pGal4-mPPARα, pGal4-hPPARγ et pGal4-hPPARδ ont été obtenues par clonage dans le vecteur pGal4-φ de fragments d'ADN amplifiés par PCR correspondants aux domaines DEF des récepteurs nucléaires PPARα, PPARγ et PPARδ humains. Transfection
Les cellules RK13 sont ensemencées dans des boîtes de culture de 24 puits à raison de 5x104 cellules/puits, les cellules COS-7 dans des plaques de 96 puits à raison de 5x104 cellules/puits et sont transfectées pendant 2 heures avec le plasmide rapporteur pG5TkpGL3 (50 ng/puits), les vecteurs d'expression pGal4-φ, pGal4-mPPARα, pGal4-hPPARα, pGal4-hPPARγ, pGal4-hPPARδ (100 ng/puits) et le vecteur de contrôle de l'efficacité de transfection pRL-CMV (1 ng/puits) suivant le protocole décrit précédemment (Raspe, Madsen et al. 1999) puis incubées pendant 36 heures avec les composés testés. A l'issue de l'expérience, les cellules sont lysées (Gibco, Paisley, UK) et les activités luciférase sont déterminées à l'aide du kit de dosage Dual-Luciferase™ Reporter Assay System (Promega, Madison, Wl, USA) pour les cellules RK13 et Steady Glow Luciférase (Promega) pour les cellules COS-7 selon la notice du fournisseur comme décrit précédemment. Le contenu en protéines des extraits cellulaires est ensuite évalué à l'aide du kit de dosage Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, Mϋnchen, Allemagne) selon la notice du fournisseur.
Les inventeurs mettent en évidence une augmentation de l'activité luciférase dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention et transfectées avec le plasmide pGal4-hPPARα. Cette induction de l'activité luciférase indique que les composés selon l'invention, sont des activateurs de PPARα. Des exemples de résultats sont donnés sur les figures 9a, 10a, 11a, 12a, 13a, 14a, 15a, 16a, 17a et 18a où les propriétés activatrices PPARα des composés selon l'invention sont illustrées. Les inventeurs mettent en évidence une augmentation de l'activité luciférase dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention et transfectées avec le plasmide pGal4-hPPARγ. Cette induction de l'activité luciférase indique que les composés selon l'invention sont des activateurs de PPARγ. Des exemples de résultats sont représentés par la figure 9b, 10b, 11b, 12b, 14b, 15b et 18b où les propriétés activatrices PPARγ des composés sont illustrées.
Les inventeurs mettent en évidence une augmentation de l'activité luciférase dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention et transfectées avec le plasmide pGal4-hPPARδ. Cette induction de l'activité luciférase indique que les composés selon l'invention sont des activateurs de PPARδ. Des exemples de résultats sont représentés par la figure 11c, 13b, 14c et 15c où les propriétés activatrices PPARδ des composés sont illustrées.
Exemple 5 : évaluation des propriétés anti-inflammatoires des composés selon l'invention
La réponse inflammatoire apparaît dans de nombreux désordres neurologiques, comme les scléroses multiples, les maladie d'Alzheimer et de Parkinson, les ischémies cérébrales et les accidents traumatiques du cerveau. De plus, l'inflammation est l'un des facteurs importants de la neurodégénérescence. Lors d'accidents cérébraux, une des premières réactions des cellules de la glie est de libérer des cytokines et des radicaux libres. La conséquence de cette libération de cytokines et de radicaux libres est une réponse inflammatoire au niveau cérébral qui peut mener à la mort des neurones (Rothwell, 1997).
Les lignées cellulaires et les cellules primaires sont cultivées comme décrit précédemment. Le LPS (LipoPolySaccharide), endotoxine bactérienne (Escherichia coli 011 1 :B4) (Sigma, France), est reconstitué dans de l'eau distillée et conservée à 4°C. les cellules sont traitées avec une concentration de LPS de 1 μg/ml pendant 24 heures. Pour éviter toutes interférences avec d'autres facteurs le milieu de culture des cellules est totalement changé.
Le TNF-α est un facteur important de la réponse inflammatoire à un stress (oxydant par exemple). Pour évaluer la sécrétion de TNF-α en réponse à une stimulation par des doses croissantes de LPS, le milieu de culture des cellules stimulées est prélevé et la quantité de TNF-α est évaluée avec un kit ELISA-TNF- α (Immunotech, France). Les échantillons sont dilués 50 fois afin d'être en adéquation avec la gamme étalon (Chang, Hudson et al. 2000). La propriété anti-inflammatoire des composés est caractérisée de la manière suivante : le milieu de culture des cellules est totalement changé et les cellules sont incubées avec les composés à tester pendant 2 heures. Après cette incubation, du LPS est rajouté au milieu de culture à une concentration finale de 1 μg/ml. Après 24 heures d'incubation, le surnageant de cellules est récupéré et stocké à -80°C lorsqu'il n'est pas traité directement. Les cellules sont lysées et la quantité de protéines est quantifiée, à l'aide du kit de dosage Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, Mϋnchen, Allemagne) selon la notice du fournisseur. La mesure de la diminution de sécrétion de TNF-α favorisée par le traitement avec les composés testés est exprimée en pg/ml/μg de protéine et rapportée en pourcentage par rapport au témoin. Ces résultats montrent que les composés selon l'invention possèdent des propriétés anti-inflammatoires.
Exemple 6 : Evaluation des effets sur le métabolisme lipidique in vivo
Les composés selon l'invention testés sont les composés dont la préparation est décrite dans les exemples décrits ci-dessus.
Les fibrates, abondamment utilisés en clinique humaine pour le traitement des dyslipidémies impliquées dans le développement de l'athérosclérose, une des principales causes de mortalité et de morbidité dans les sociétés occidentales, sont de puissants activateurs du récepteur nucléaire PPARα. Celui-ci régule l'expression de gènes impliqués dans le transport (apolipoprotéines telles que Apo Al, Apo AM et Apo Clll, transporteurs membranaires tel que FAT) ou le catabolisme des lipides (ACO, CPT-I ou CPT-II). Un traitement par les activateurs de PPARα se traduit donc, chez l'homme et le rongeur, par une diminution des taux circulants de cholestérol et de triglycérides.
Les protocoles suivants permettent de mettre en évidence une baisse du taux de triglycérides et du taux de cholestérol circulant, ainsi que l'intérêt des composés selon l'invention dans le cadre de la prévention et/ou du traitement des maladies cardio-vasculaires.
Traitement des animaux Des souris transgéniques Apo E2/E2 sont maintenues sous un cycle lumière/obscurité de 12/12 heures à une température constante de 20 + 3°C. Après une acclimatation d'une semaine, les souris sont pesées et rassemblées par groupes de 6 animaux sélectionnés de telle sorte que la distribution de leur poids corporel soit uniforme. Les composés testés sont suspendus dans la carboxyméthylcellulose et administrés par gavage intra-gastrique, à raison d'une fois par jour pendant 7 jours, aux doses indiquées. Les animaux ont un accès libre à l'eau et à la nourriture. A l'issue de l'expérience les animaux sont pesés et sacrifiés sous anesthésie. Le sang est collecté sur EDTA. Le plasma est préparé par centrifugation à 3000 tours/minutes pendant 20 minutes. Des échantillons de foie sont prélevés et conservés congelés dans de l'azote liquide pour analyse ultérieure.
Mesure des lipides et apolipoprotéines sérigues
Les concentrations sériques des lipides (cholestérol total et cholestérol libre, triglycérides et phospholipides) sont mesurées par dosage colorimétrique (Boehringer, Mannheim, Allemagne) selon les indications du fournisseur. Les concentrations sériques des apolipoprotéines Al, Ail et Clll sont mesurées selon les méthodes décrites précédemment (Raspé et al. 1999, Asset G et al., Lipids, 1999).
Un exemple de résultats est donné sur les figures 19a, 19b, 19c et 19d où l'activité du composé 2 sur le métabolisme des triglycérides et du cholestérol est illustrée.
Un exemple de résultats est donné sur les figures 20a, 20b, 20c et 20d où l'activité des composés 13, 33 et 39 sur le métabolisme des triglycérides et du cholestérol est illustrée.
Analyse des ARNs
L'ARN total a été isolé des fragments de foie par extraction à l'aide du mélange thiocyanate de guanidine/phénol acide/chloroforme suivant le protocole décrit précédemment (Raspé et al. 1999). Les ARN messagers ont été quantifiés par RT-PCR quantitative à l'aide du kit Light Cycler Fast Start DNA Master Sybr Green I kit (Hoffman-La Roche, Basel, Suisse) sur un appareil Light Cycler System
(Hoffman-La Roche, Basel, Suisse). Des paires d'amorces spécifiques des gènes ACO, Apo Clll et Apo AM ont été utilisées comme sondes. Des paires d'amorces spécifiques des gènes 36B4, β-actine et cyclophiline ont été utilisées comme sondes témoin. Alternativement, l'ARN total a été analysé par Northern Blot ou Dot Blot suivant le protocole décrit précédemment (Raspé et al., 1999).
Exemple 7 : Evaluation des effets neuro-protecteurs des composés selon l'invention dans un modèle d'ischémie-reperfusion cérébral
Modèle Prophylactique 1/ Traitements des animaux
1.1 Animaux et administration des composés Des souris C57 black/6 (sauvages) sont utilisées pour cette expérience.
Les animaux sont maintenus sous un cycle lumière/obscurité de 12/12 heures à une température de 20 +/- 3°C. Les animaux ont un accès libre à l'eau et à la nourriture. La prise de nourriture et la prise de poids sont enregistrées. Les animaux sont traités par gavage avec les composés selon l'invention ou le véhicule (carboxycellulose 0,5% ), pendant 14 jours avant l'induction de l'ischémie de l'artère moyenne cérébrale.
1.2 Induction d'une ischémie-reperfusion par occlusion intraluminale de l'artère moyenne cérébrale : Les animaux sont anesthésiés à l'aide d'une injection intra-péritonéale de 300 mg/kg d'hydrate de chloral. Une sonde rectale est mise en place et la température du corps est maintenue à 37 +/- 0,5°C. La pression artérielle est mesurée au cours de toute l'expérience. Sous un microscope chirurgical, la carotide droite est mise à jour à l'aide d'une incision cervicale médiale. L'artère ptérygopalatine a été ligaturée à son origine et une artèriotomie est réalisée dans l'artère carotide externe afin d'y glisser un mono-filament de nylon. Ce filament est alors doucement avancé dans l'artère carotide commune puis dans l'artère carotide interne afin d'obturer l'origine de l'artère cérébrale moyenne. Après 1 heure, le filament est retiré pour permettre la reperfusion.
21 Mesure du volume de l'infarctus cérébral : 24 heures après la reperfusion, les animaux préalablement traités ou non traités avec les composés sont tués par une overdose de pentobarbital. Les cerveaux sont rapidement congelés et sectionnés. Les sections sont colorées au violet Cresyl. Les zones non colorées des sections cérébrales ont été considérées comme lésées par l'infarctus. Les aires ont été mesurées et les volumes de l'infarctus et des deux hémisphères ont été calculés par la formule suivante (Volume de l'infarctus corrigé = Volume de l'infarctus - (volume de l'hémisphère droit - volume de l'hémisphère gauche)) pour compenser l'œdème cérébral. L'analyse des coupes de cerveaux d'animaux traités révèle une nette diminution du volume de l'infarctus par rapport aux animaux non traités. Lorsque les composés selon l'invention sont administrés aux animaux avant l'ischémie (effet prophylactique), ils sont capables d'induire une neuroprotection.
3/ Mesure de l'activité des enzymes anti-oxydantes :
Les cerveaux des souris sont congelés, écrasés et réduits en poudres puis resuspendus dans une solution saline. Les différentes activités enzymatiques sont ensuite mesurées comme décrits par les auteurs suivants : superoxide dismutase (Flohe and Otting 1984); glutathion peroxidase (Paglia and Valentine 1967); glutathion reductase (Spooner, Delides et al. 1981); glutathion-S-transferase
(Habig and Jakoby 1981); catalase (Aebi 1984).
Les différentes activités enzymatiques mentionnées ci-dessus sont augmentées dans les préparations de cerveaux des animaux traités avec les composés selon l'invention.
Modèle curatif ou traitement de la phase aiguë
1/ Induction d'une ischémie-reperfusion par occlusion intraluminale de l'artère moyenne cérébrale.
Des animaux tels que décrits précédemment sont utilisés pour cette expérience. Les animaux sont anesthésiés à l'aide d'une injection intra-péritonéale de 300 mg/kg d'hydrate de chloral. Une sonde rectale est mise en place et la température du corps est maintenue à 37 +/- 0,5°C. La pression artérielle est mesurée au cours de toute l'expérience. Sous un microscope chirurgical, la carotide droite est mise à jour à l'aide d'une incision cervicale médiale. L'artère ptérygopalatine a été ligaturée à son origine et une artèriotomie est réalisée dans l'artère carotide externe afin d'y glisser un mono-filament de nylon. Ce filament est ensuite doucement avancé dans l'artère carotide commune puis dans l'artère carotide interne afin d'obturer l'origine de l'artère cérébrale moyenne. Après 1 heure, le filament est retiré pour permettre la reperfusion.
2/ Traitement des animaux : Les animaux ayant subi une ischémie-reperfusion préalable sont traités par les composés selon l'invention pendant 24 ou 72 heures par voie orale (gavage), 2 fois par jour.
3/ Mesure du volume de l'infarctus cérébral : 24 ou 72 heures après la reperfusion, les animaux préalablement traités ou non traités avec les composés sont tués par une overdose de pentobarbital. Les cerveaux sont rapidement congelés et sectionnés. Les sections sont colorées au violet Cresyl. Les zones non colorées des sections cérébrales ont été considérées comme lésées par l'infarctus. Les aires ont été mesurées et le volume de l'infarctus et des deux hémisphères ont été calculés par la formule suivante (Volume de l'infarctus corrigé = Volume de l'infarctus - (volume de l'hémisphère droit - volume de l'hémisphère gauche)) pour compenser l'œdème cérébral. Dans les cas d'un traitement curatif (traitement de la phase aiguë), les animaux traités avec les composés selon l'invention ont des dommages au niveau cérébral réduit par rapport aux animaux non traités. En effet, le volume de l'infarctus est diminué lorsque les composés selon l'invention sont administrés une ou plusieurs fois après l'ischémie-reperfusion.
Exemple 8 : Evaluation des effets protecteurs des composés selon l'invention dans un modèle animal d'athérosclérose Les composés selon l'invention, de part leurs propriétés PPAR activatrices et antioxydantes, ont une action bénéfique sur la progression de la plaque athéromateuse.
1 /Traitement des animaux
Les souris transgéniques Apo E2/E2 femelles âgées d'environ 2 mois sont maintenues sous un cycle lumière/obscurité de 12/12 heures à une température constante de 20 ± 3°C pendant la période d'acclimatation et toute la durée de l'expérimentation. Après la période d'acclimatation d'une semaine, les souris sont pesées et rassemblées par groupes de 8 animaux sélectionnés de sorte que la distribution de leur poids corporel soit uniforme.
Les animaux ont un accès libre à l'eau et à la nourriture, ils sont soumis à un régime alimentaire de type western contenant 21% de graisse et 0,15% de cholestérol pendant une période de deux semaines avant traitement.
A l'issue de cette période, les composés à tester sont introduits dans la nourriture aux doses indiquées. Le traitement dure 6 semaines.
Les animaux sont pesés et sacrifiés sous anesthésie, par dislocation cervicale. " Le cœur est perfusé in situ puis préparé en vue de l'analyse histologique, une aiguille est introduite dans le ventricule droit et l'aorte est sectionnée dans sa partie abdominale • Des échantillons de sang sont prélevés avant le début de l'expérience, chaque semaine puis à l'issue de l'expérience. Le sang est collecté sur EDTA. Le plasma est préparé par centrifugation à 3000 tours/minutes pendant 20 minutes (mesures des taux plasmatiques de cholestérol et de triglycérides).
2/Préparation des coupes en vue de l'analyse histologique
Une solution Krebs Ringer est introduite pendant 10 minutes. Les tissus sont fixés avec du PAF 4% dans une solution 10mM de PBS à -4°C pendant une nuit. Les échantillons sont ensuite lavés avec une solution 100mM de PBS. Les cœurs sont placés dans une solution 30% de sucrose-Tris pendant une journée puis immergés dans de l'OCT (tissue Teck) sous vide pendant 30 minutes puis dans un moule contenant de l'OCT, immergés dans de l'isopentane et refroidi avec de l'azote liquide. Les échantillons sont conservés à -80°C.
Des cryosections de 10μm d'épaisseur sont réalisées à partir de l'arc aortique jusqu'à disparition des valves. Elles sont collectées sur des lames recouvertes de gélatine.
3/Analvse histologique
Les lames sont colorées avec une solution d'huile rouge et de Phématoxyline de façon à différencier la partie médiane de l'intima. Les différents paramètres morphogéniques sont déterminés à l'aide d'un microscope Olympus et d'une caméra couleur couplée au système d'analyse d'images Analysis. La quantification des surfaces lésées est réalisée de façon manuelle à l'aide d'une tablette graphique couplée au même système informatique.
La surface globale des lésions athéromateuses est exprimée en μM2, elle est comparée au groupe témoin. Les composés selon l'invention testés permettent une diminution significative de la surface des lésions traduisant une réduction de la progression des lésions.
Exemple 9 : effets in vitro des composés selon l'invention sur la différenciation et la maturation des cellules dendritiques
Le composé 39 est testé sur la différenciation des cellules dendritiques issues de monocytes (par suivi de l'acquisition du phénotype des cellules dendritiques). Pour ces expériences, les échantillons de sang proviennent de donneurs volontaires (Etablissement Français du Sang) et les monocytes sont isolés à l'aide d'un protocole standard utilisant des billes magnétiques conjuguées aux anti- CD14 (Miltenyi Biotec). On induit ensuite la différenciation des monocytes ainsi isolés en les incubant 6 jours dans un milieu de culture contenant un mélange de cytokines GM-CSF et IL-4 (20 ng/ml pour chacune des cytokines).
Le composé 39 est ajouté à t=0. L'acquisition du phénotype des cellules dendritiques est ensuite étudiée au travers de l'expression du marqueur CD1a à la surface cellulaire. Les inventeurs ont ainsi montré que le composé 39 interfère de manière importante avec la différenciation des cellules dendritiques en supprimant presque totalement l'expression de CD1a à la surface des cellules (Figure 21). L'expression de la molécule de costimulation CD80 est aussi réduite, à un moindre niveau, tandis que l'expression de CD86 est légèrement augmentée (données non présentées). Des résultats similaires sont obtenus en testant les composés 13 et 31 de l'invention. Ces résultats suggèrent que les composés selon l'invention interfèrent avec la différenciation des cellules dendritiques et stimulent les cellules dendritiques vers l'acquisition d'un phénotype atypique.
Les effets de ces composés sont ensuite étudiés sur la maturation des cellules dendritiques induites par le LPS (LipoPolySaccharide). Pour ces expériences, les cellules dendritiques dérivées des monocytes, obtenues à j=6 de la différentiation, sont pré-traitées avec les composés selon l'invention pendant 4 heures puis stimulées avec le LPS pendant 16 heures. Il a été ainsi montré que les composés interfèrent de manière importante avec la transcription induite par le LPS du récepteur CCR7 et de son ligand ELC (Figure 22). La figure 22 montre, de plus, que la sécrétion induite par le LPS de la cytokine de l'inflammation TNFalpha est aussi réduite de manière importante. La réduction de l'expression de ELC et de CCR7, gènes clés de la motilité des cellules dendritiques, suggèrent que les composés selon l'invention inhibent la migration des cellules dendritiques jusqu'aux organes lymphoïdes secondaires et ainsi interfèrent avec l'initiation de la réponse immunitaire déclenchée par ces cellules. Les inventeurs ont ainsi montré que les cellules dendritiques dérivées des monocytes traitées avec le composé 31 présentent une capacité réduite à induire la prolifération des cellules T CD4+ naïves, par une Réaction Mixte Lymphocytaire (MLR) (Figure 23). Pour cette expérience, des quantités croissantes de cellules dendritiques matures (traitées ou non avec le composé) sont incubées avec une quantité fixe de cellules T CD4+ naïves dérivées d'un autre donneur. Après une incubation de 5 jours, la BrdU (BromodeoxyUridine) est ajoutée pour 24 heures et son incorporation dans les cellules T est mesurée par ELISA avec des anticorps anti-BrdU couplés à des molécules chemiluminescentes. Exemple 10 : effets in vivo des composés selon l'invention dans un modèle d'asthme allergique induite par l'ovalbumine (OVA) chez la souris
Les effets des composés selon l'invention sont ensuite étudiés dans le cadre d'analyses in vivo utilisant un modèle d'asthme allergique induite par l'ovalbumine
(OVA) chez la souris.
Pour ces expériences, les souris sont sensibilisées par des injections intra- péritonéales d'ovalbumine en présence d'hydroxydes d'aluminium, à j = 0 et j = 10 de l'expérience. De J = 18 à j = 22, les souris reçoivent quotidiennement 50 mg/kg à 200 mg/kg des composés selon l'invention par gavage. 3 administrations consécutives d'ovalbumine en aérosols sont effectuées à j = 20, 21 et 22. Le composé est administré environ 1 heure avant chaque pulvérisation. Les souris sont ensuite sacrifiées à j = 24 et le liquide de lavage broncho-alvéolaire (BAL) est collecté pour la détermination de la cellularité (macrophages, éosinophiles, lymphocytes, neutrophiles) et pour la mesure des cytokines IL-5, IL-13, IL-4.
Les résultats obtenus montrent que les composés de la présente invention interfèrent avec la différenciation et la maturation des cellules dendritiques et inhibent la migration de ces cellules vers les organes lymphoïdes secondaires. De plus, les composés présentent une capacité réduite à induire la prolifération des cellules T CD4+ naïves. Les composés selon l'invention interfèrent donc avec l'initiation de la réponse immunitaire et représentent donc un outil thérapeutique avantageux pour le traitement de l'asthme.
BIBLIOGRAPHIE
Aebi, H. (1984). "Catalase in vitro." Methods Enzvmol 105: 121-6.
Angeli V, Hammad H, Staels B, Capron M, Lambrecht BN, Trottein F (2003)
"Peroxisome proliferator-activated receptor gamma inhibits the migration of dendritic cells: conséquences for the immune response" J Immunol. 170(10):5295- 301.
Asset G, Staels B, Wolff RL, Bauge E, Madj Z, Fruchart JC, Dallongeville J.
(1999). "Effects of Pinus pinaster and Pinus koraiensis seed oil supplementation on lipoprotein metabolism in the rat." Lipids 34(1): 39-44
Chang, R. C, P. Hudson, et al. (2000). "Influence of neurons on lipopolysaccharide-stimulated production of nitric oxide and tumor necrosis factor- alpha by cultured glia." Brain Res 853(2): 236-44.
Desvergne, B. and W. Wahli (1999). "Peroxisome proliferator-activated receptors: nuclear control of metabolism." Endocr Rev 20(5): 649-88.
Dirnagl, U., C. ladecola, et al. (1999). "Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view." Trends Neurosci 22(9): 391-7.
Farinelli, S. E., D. S. Park, et al. (1996). "Nitric oxide delays the death of trophic factor-deprived PC12 cells and sympathetic neurons by a cGMP-mediated mechanism." J Neurosci 16(7): 2325-34.
Flohe, L. and F. Otting (1984). "Superoxide dismutase assays." Methods Enzvmol 105: 93-104.
Gilgun-Sherki, Y., E. Melamed, ef al. (2001). "Oxidative stress induced- neurodegenerative diseases: the need for antioxidants that penetrate the blood brain barrier." Neuropharmacology 40(8): 959-75. Gosset, P., Charbonnier A.S., Delerive P., Fontaine J., Staels B., Pestel J., Tonnel A.B., Trottein F. (2001). "Peroxisome proliferator-activated receptor gamma activators affect the maturation of human monocyte-derived dendritic cells" Eur J Immunol. 10: 2857-65.
Greene, L. A. and A. S. Tischler (1976). "Establishment of a noradrenergic clonal line of rat adrenal pheochromocytoma cells which respond to nerve growth factor." Proc Natl Acad Sci U S A 73(7): 2424-8.
Guerre-Millo, M., P. Gervois, et al. (2000). "Peroxisome proliferator-activated receptor alpha activators improve insulin sensitivity and reduce adiposity." J Biol Chem 275(22): 16638-42.
Habig, W. H. and W. B. Jakoby (1981). "Assays for differentiation of glutathione S- transferases." Methods Enzvmol 77: 398-405.
Hourton, D., P. Delerive, et al. (2001). "Oxidized low-density lipoprotein and peroxisome-proliferator-activated receptor alpha down-regulate platelet-activating- factor receptor expression in human macrophages." Biochem J 354(Pt 1): 225-32.
International Atherosclerosis Society "Harmonized Clinical Guidelines on Prévention of Atherosclerotic Vascular Disease" 2003.
Jurgens, G., H. F. Hoff, et al. (1987). "Modification of human sérum low density lipoprotein by oxidation- characterization and pathophysiological implications." Chem Phvs Lipids 45(2-4): 315-36.
Komuves, L. G., K. Hanley, et al. (2000). "Stimulation of PPARalpha promotes epidermal keratinocyte differentiation in vivo." J Invest Dermatol 115(3): 353-60.
Lebeau, J., C. Furman, et al. (2000). "Antioxidant properties of di-tert- butylhydroxylated flavonoids." Free Radie Biol Med 29(9): 900-12. Mates, J. M., C. Perez-Gomez, et al. (1999). "Antioxidant enzymes and human diseases." Clin Biochem 32(8): 595-603.
Morliere, P., A. Moysan, et al. (1991). "UVA-induced lipid peroxidation in cultured human fibroblasts." Biochim Biophvs Acta 1084(3): 261-8.
Nencioni A, Grunebach F, Zobywlaski A, Denzlinger C, Brugger W, Brossait P., (2002) "Dendritic cell immunogenicity is regulated by peroxisome proliferator- activated receptor gamma" J Immunol. 169(3): 1228-35.
Paglia, D. E. and W. N. Valentine (1967). "Studies on the quantitative and qualitative characterization of erythrocyte glutathione peroxidase." J Lab Clin Med 70(1): 158-69.
Ram VJ (2003). "Therapeutic rôle of peroxisome proliferator-activated receptors in obesity, diabètes and inflammation.
Prog Drug Res. 60: 93-132.
Raspe, E., L. Madsen, et al. (1999). "Modulation of rat liver apolipoprotein gène expression and sérum lipid levels by tetradecylthioacetic acid (TTA) via PPARalpha activation." J Lipid Res 40(11): 2099-110.
Rothwell, N. J. (1997). "Cytokines and acute neurodegeneration." Mol Psvchiatrv 2(2): 120-1.
Spiegelman B. M. (1998)"PPARgamma in monocytes: less pain, any gain?" Cell., 93(2): 153-5
Spiegelmam B. M. (1998) "PPAR-gamma: adipogenic regulator and thiazolidinedione receptor. Diabètes. 47(4):507-14. Review. Spooner, R. J., A. Delides, et al. (1981). "Heat stability and kinetic properties of human sérum glutathione reductase activity in various disease states." Biochem Med 26(2): 239-48.
Staels, B. and J. Auwerx (1998). "Régulation of apo A-l gène expression by fibrates." Atherosclerosis 137 Suppl: S19-23.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composés dérivés de 1 ,3-diphénylprop-2-èn-1-one substitués de formule générale (I) suivante :
Figure imgf000113_0001
(I) dans laquelle
X représente un groupement répondant à la formule suivante : G -R7 dans laquelle G7 est un atome d'oxygène ou de soufre et R7 est une chaîne alkyle substituée par un groupement du groupe 1 ou un groupement du groupe 2, R7 peut éventuellement être également substitué par un groupement aryle, les substituants du groupe 1 sont choisis parmi les groupements carboxy de formule : -COORa, les groupements carbamoyies de formule : -CONRbRc ou le groupement tetrazolyle, les substituants du groupe 2 sont choisis parmi l'acide sulfonique (-SO3H) et les groupements sulfonamide de formule : -Sθ2NRbRc, avec Ra, Rb et Rc, identiques ou différents, représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle substitué ou non,
les groupements Xj avec i = 1 , 2, 3, 4 ou 5, identiques ou différents, représentent un atome d'halogène ou un groupement thionitroso ou répondent respectivement à la formule (Gi-Rj)n-G'i-R'j dans laquelle : " n peut prendre les valeurs 0 ou 1 " Gj et G'j, identiques ou différents, représentent une simple liaison, un atome d'oxygène ou un atome de soufre, " Ri et R'i, identiques ou différents, représentent un radical alkyle, alkényle, aryle ou un hétérocycle, » R'i peut également représenter un atome d'hydrogène, les groupements Xj avec i = 6 ou i = 8, identiques ou différents, représentent un atome d'halogène ou répondent à la formule G'j-R'j , G'i et R'i étant tels que définis précédemment, X6 et X8 ne représentant pas simultanément un atome d'hydrogène,
Xi avec i = 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 8 ne pouvant représenter un hétérocycle directement lié au cycle aromatique de la 1 ,3-diphényl prop-2-én-1-one,
à l'exclusion des composés de formule (I) pour lesquels simultanément : • un des groupements Xi, X2, X3, X4 ou X5 est un groupement hydroxyle, • G est un atome d'oxygène, " et un des groupements XQ ou X8 est un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un hydroxyle ou un groupement alkyloxy,
à l'exclusion des composés de formule (I) pour lesquels simultanément : " les groupements Xi, X2 et X représentent simultanément un atome d'hydrogène, " les groupements XQ et Xs représentent G'iR'i, » le groupement X5 représente un groupement thionitroso ou un groupement G'jR'j, " le groupement X3 représente un halogène ou un groupement G'jR'j, dans lesquels G'j représente un atome d'oxygène, un atome de soufre ou une simple liaison et R'j représente un groupement alkyle saturé, linéaire, ramifié ou cyclique, halogène ou non, ou un atome d'hydrogène.
2. Composés selon la revendication 1 , caractérisés en ce que Xi et X5 sont des atomes d'hydrogène.
3. Composés selon la revendication 1 ou 2, caractérisés en ce que X2 et X4 sont des radicaux alkyle.
4. Composés selon la revendication 1 , caractérisés en ce que X^ X3 et X sont des radicaux alkyle.
5. Composés selon la revendication 1 , caractérisés en ce que Xi, X2, X* et X5 sont des atomes d'hydrogène.
6. Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce que XQ et Xβ sont des radicaux alkyle.
7. Composés selon la revendication précédente, caractérisés en ce que Xi et X5 sont des atomes d'hydrogène.
8. Composés selon la revendication précédente, caractérisés en ce que X2 et X sont des radicaux alkyle.
9. Composés selon la revendication 1 , caractérisés en ce que Xi, X3, X , X et Xs sont des radicaux alkyle.
10. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que Xe et Xβ sont des radicaux alkyles et Xi, X2, X4 et X5 sont des atomes d'hydrogène.
11. Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce que X3 représente un atome d'halogène ou un groupement thionitroso ou répond à la formule (Gi-Rj)n-G'i-R'j telle que définie dans la revendication 1 , dans laquelle G'j représente un atome d'oxygène ou un atome de soufre.
12. Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce qu'au moins un des groupements Gi ou G'i représente un atome de soufre avec i pouvant prendre une des valeurs 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8.
13. Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi :
La 1 -(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)-3,5-diméthylphényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Mercapto-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthyl phényl)-prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Cyclohexyléthylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one ; La 1 -(2,5-Dihydroxy-3,4,6-triméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(2,5-Diméthoxy-3,4,6-triméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthoxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(2,5-Dihydroxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)- prop-2-èn-1-one ;
La 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)- prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Phényléthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one ; La 1-(4-(Morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Hydroxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-ène-1-one ;
La 1-(4-Hydroxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-ène-1-one ; La 1-(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyl diméthyl méthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one ; La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- dibromophényl)-prop-2-ène-1 -one ;
La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-dibromophényl)- prop-2-ène-1-one ; La 1 -(4-Cyclohexyléthyloxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(4-Cyclohexyléthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Méthylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Méthylth io-3, 5-d iméthylphény l)-3-(4-carboxyd iméthylméthyloxy-3 , 5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Propyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-Propyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Méthoxy-3, 5-d iméthylphény l)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Hexyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthyl méthyloxy -3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Hexyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthyl phényl)prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-Cyclohexyléthyloxy-3, 5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthyl méthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Cyclohexyléthyloxy-3, 5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Cyclohexylthioéthyloxyphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Cyclohexylthioéthyloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ; La 1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-Cyclohexylthioéthyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1 -one ;
La 1 -(4-Cyclohexylthioéthyloxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3- fluorophényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3-fluorophényl)prop-2- èn-1-one ;
La 1-(2,3,4,5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one ; La 1-(2,3,4,5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Phényloxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Phényloxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ; La 1 -(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-
3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl) prop-2-èn-1-one ; La 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; Le chlorhydrate de 1-(3,5-Diméthyl-4-(morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4- ethyloxycarbonyl diméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one ;
La 1 -(3,5-Diméthyl-4-(morpholin-4-yléthyloxy)phényl)-3-(4- carboxydiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1 -one ;
La 1-(4-Bromophényl)-3-(4-tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5- difluorophényl)-prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Bromophényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5-difluorophényl)-prop-2- èn-1-one ;
La 1 -(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4- tertiobutyloxycarbonyldiméthylméthyloxy-3,5-diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4-carboxydiméthylméthyloxy-3,5- diméthylphényl)-prop-2-èn-1-one.
14. Procédé de préparation de composés de formule (I) telle que définie dans l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comprend une mise en contact en milieu basique ou en milieu acide d'au moins un composé de formule (A) avec au moins un composé de formule (B), les formules (A) et (B) étant :
Figure imgf000119_0001
formules dans lesquelles X ( X2, X3, X4, X5, X6, X7 et X8 ont les définitions données dans l'une des revendications précédentes, X pouvant également représenter un groupement hydroxyle ou thiol.
15. Composés intermédiaires, caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi La 1 -(4-(Pentylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 - one ;
La 1 -(4-((R,S)-5-[1 ,2]dithiolan-3-ylpentyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl) -prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-Méthylthiophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-dibromophényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-(Cyclohexyléthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 - one ;
La 1 -(4-Méthy lthio-3 , 5-d iméthylphénylphényl)-3-(4-hyd roxy-3 , 5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1 -(4-Méthoxy-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-
1-one ;
La 1-(4-(Cyclohexyléthyloxy)-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-(Cyclohexylthioéthyloxy)phényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2- èn-1-one ;
La 1-(2,4,5-Triméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-(Cyclohexylth ioéthyloxy)-3 , 5-d iméthy lphényl)-3-(4-hyd roxy-3 , 5- diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ;
La 1 -(4-Méthylthiophényl)-3-(4-hydroxy-3-fluorophényl)prop-2-èn-1 -one ; La 1 -(2,3,4,5,6-Pentaméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 - one ;
La 1 -(4-Phénoxyphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 -one ;
La 1 -(4-Méthoxy-3-fluorophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 - one ; La 1 -(4-Méthoxy-3-méthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1 - one ;
La 1-(4-Hexylthio-3,5-diméthylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-
1-one ;
La 1-(2,5-Diméthoxyphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)prop-2-èn-1-one ; La 1-(4-Bromophényl)-3-(4-hydroxy-3,5-difluorophényl)-prop-2-èn-1-one ;
La 1-(4-Méthoxy-3-trifluorométhylphényl)-3-(4-hydroxy-3,5-diméthylphényl)-prop-
2-èn-1-one.
16. Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes 1 à 13, à titre de médicaments.
17. Composition pharmaceutique ou cosmétique comprenant, dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique ou cosmétique, au moins un composé de formule générale (I) tel que défini dans l'une des revendications 1 à 13, éventuellement en association avec un autre actif thérapeutique et/ou cosmétique.
18. Composition pharmaceutique ou cosmétique, selon la revendication 17, destinée au traitement des maladies cardiovasculaires, des dyslipidémies, des pathologies associées au syndrome X, du diabète, de l'obésité, de l'hypertension, des maladies inflammatoires, des maladies dermatologiques (psoriasis, dermatites atopiques, acné..), de l'asthme, des désordres liés au stress oxydatif ou au traitement du vieillissement en général, en particulier du vieillissement cutané.
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AU2005209446A AU2005209446A1 (en) 2004-01-08 2005-01-07 1,3-diphenylprop-2-en-1-one derivative compounds, preparation method thereof and uses of same
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2910892A1 (fr) * 2006-12-29 2008-07-04 Genfit Sa Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations.
JP2010514745A (ja) * 2006-12-29 2010-05-06 ジェンフィット 置換３−フェニル−１−（フェニルチエニル）プロパン−１−オンおよび３−フェニル−１−（フェニルフラニル）プロパン−１−オンの誘導体、その調製および使用
WO2011064350A1 (fr) 2009-11-26 2011-06-03 Genfit Utilisation de dérivés de 1,3-diphénylprop-2-èn-1-one pour le traitement de troubles hépatiques
WO2011080276A1 (fr) 2009-12-29 2011-07-07 Genfit Combinaisons pharmaceutiques comprenant un inhibiteur de dpp-4 et un dérivé de 1,3-diphénylprop-2-en-1-one
WO2011144579A1 (fr) 2010-05-17 2011-11-24 Genfit Procédé amélioré de préparation de dérivés de chalcone

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2841900B1 (fr) * 2002-07-08 2007-03-02 Genfit S A Nouveaux derives de 1,3-diphenylprop-2-en-1-one substitues, preparation et utilisations
US7816385B2 (en) * 2002-12-20 2010-10-19 High Point Pharmaceuticals, Llc Dimeric dicarboxylic acid derivatives, their preparation and use
CN102016007B (zh) 2008-03-27 2019-04-19 阿斯特利亚斯生物治疗股份公司 使灵长类多能干细胞分化成为造血谱系细胞
DE102011114780A1 (de) * 2011-10-01 2013-04-04 Merck Patent Gmbh Verwendung von Propanol- und Propenolderivaten als Antioxidantien
BR112014016129B1 (pt) * 2011-12-28 2022-04-05 Genfit Composto, derivado de 1,3-difenilpropano e composição farmacêutica
KR101601685B1 (ko) * 2015-08-24 2016-03-09 여명바이오켐 주식회사 항산화 효과가 우수한 택시폴린 유도체 및 이를 함유하는 화장료 조성물
US11478440B2 (en) * 2017-04-18 2022-10-25 Genfit Combination of Elafibranor or derivatives thereof with an anti-NASH, anti-fibrotic or anti-cholestatic agent
CN108658908B (zh) 2017-07-31 2019-05-10 广州必贝特医药技术有限公司 1，3-二取代烯酮类化合物及其应用
CN111148742B (zh) * 2017-11-30 2021-11-16 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 芳香族化合物及其药物组合物和用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4327365A1 (de) 1993-08-14 1995-02-16 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Phenolen und Phenolderivaten als Arzneimittel mit fibrinogensenkender Wirkung
EP0659743A1 (fr) * 1993-12-27 1995-06-28 Hoechst Aktiengesellschaft Dérivés de pipéridine comme inhibiteurs d'aggrégation de plaquettes et leur préparation
US5523302A (en) 1993-11-24 1996-06-04 The Du Pont Merck Pharmaceutical Company Aromatic compounds containing basic and acidic termini useful as fibrinogen receptor antagonists
EP1440688A1 (fr) 2001-10-11 2004-07-28 Kaneka Corporation Ligands de recepteurs actives par le proliferateur de peroxisome et procede de fabrication correspondant

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3994955A (en) * 1975-01-20 1976-11-30 G. D. Searle & Co. Substituted phenoxydialkylacetic acids and esters
US4190671A (en) * 1977-03-17 1980-02-26 Biorex Laboratories Limited Chalcone derivatives
GB8426424D0 (en) * 1984-10-19 1984-11-28 Biorex Laboratories Ltd Chalcone derivatives
BR0111889A (pt) * 2000-06-20 2003-06-24 Atherogenics Inc 1,3-bis-(fenil-substituìdo)-2-propen-1-onas e seu uso para tratar distúrbios mediados por vcam-1
FR2841900B1 (fr) * 2002-07-08 2007-03-02 Genfit S A Nouveaux derives de 1,3-diphenylprop-2-en-1-one substitues, preparation et utilisations
FR2841784B1 (fr) * 2002-07-08 2007-03-02 Composition a base de derives de 1,3-diphenylprop-2en-1-one substitues, preparation et utilisations

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4327365A1 (de) 1993-08-14 1995-02-16 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Phenolen und Phenolderivaten als Arzneimittel mit fibrinogensenkender Wirkung
US5523302A (en) 1993-11-24 1996-06-04 The Du Pont Merck Pharmaceutical Company Aromatic compounds containing basic and acidic termini useful as fibrinogen receptor antagonists
EP0659743A1 (fr) * 1993-12-27 1995-06-28 Hoechst Aktiengesellschaft Dérivés de pipéridine comme inhibiteurs d'aggrégation de plaquettes et leur préparation
EP1440688A1 (fr) 2001-10-11 2004-07-28 Kaneka Corporation Ligands de recepteurs actives par le proliferateur de peroxisome et procede de fabrication correspondant

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Harmonized Clinical Guidelines on Prevention of Atherosclerotic Vascular Disease", 2003, L'INTERNATIONAL ATHEROSCLEROSIS SOCIETY

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2910892A1 (fr) * 2006-12-29 2008-07-04 Genfit Sa Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations.
WO2008087365A2 (fr) * 2006-12-29 2008-07-24 Genfit Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations
WO2008087365A3 (fr) * 2006-12-29 2008-11-27 Genfit Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations
JP2010514745A (ja) * 2006-12-29 2010-05-06 ジェンフィット 置換３−フェニル−１−（フェニルチエニル）プロパン−１−オンおよび３−フェニル−１−（フェニルフラニル）プロパン−１−オンの誘導体、その調製および使用
WO2011064350A1 (fr) 2009-11-26 2011-06-03 Genfit Utilisation de dérivés de 1,3-diphénylprop-2-èn-1-one pour le traitement de troubles hépatiques
EP2641596A1 (fr) 2009-11-26 2013-09-25 Genfit Utilisation de dérivés 1,3-diphenylprop-2-en-1-one pour le traitement de troubles hépatiques
WO2011080276A1 (fr) 2009-12-29 2011-07-07 Genfit Combinaisons pharmaceutiques comprenant un inhibiteur de dpp-4 et un dérivé de 1,3-diphénylprop-2-en-1-one
WO2011144579A1 (fr) 2010-05-17 2011-11-24 Genfit Procédé amélioré de préparation de dérivés de chalcone

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