WO2003101491A1 - Moyens preventifs et/ou therapeutiques destines a des sujets presentant l'expression ou l'activation de her2 et/ou egfr - Google Patents

Moyens preventifs et/ou therapeutiques destines a des sujets presentant l'expression ou l'activation de her2 et/ou egfr Download PDF

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her2
egfr
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cancer
methyl
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PCT/JP2003/006988
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Tsuyoshi Suzuki
Yasunori Kitano
Shinji Yano
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Mitsubishi Pharma Corporation
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    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Definitions

  • the present invention relates to a drug used for a series of treatment methods in which Her2 or / and EGFR expression or activation diagnosis is performed on a test subject, and the test subject whose expression has been confirmed is treated.
  • target molecules of anticancer drugs have been mainly molecules involved in DNA and RNA synthesis and molecules involved in cell division. These anticancer drugs are known to cause serious side effects such as bone marrow toxicity because the target molecule is not specific to cancer cells.
  • oncogenes include epidermal growth factor receptor (hereinafter abbreviated as EGFR) and its related human EGFR type2 (hereinafter abbreviated as Her2; also known as erbB-2). .
  • EGFR epidermal growth factor receptor
  • Her2 human EGFR type2
  • EGFR and Her2 are transmembrane glycoproteins with molecular weights of 170 kD and 185 kD, respectively.
  • the tyrosine kinase domain exists in the intracellular domain of EGFR and Her2, and transmits signals to the nucleus through phosphorylation.
  • the amino acid sequence of each kinase domain is about 80% homologous and structurally similar.
  • the homology of the C-terminal autophosphorylation domain is low at about 30%. It is inferred that there is a difference.
  • EGFR is expressed at an extremely high frequency of 89% in esophageal cancer [J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1993 119, 401-407] 0
  • EGFR accounts for 45% of non-small cell lung cancer Res. 1993 53, 2379-2385], and EGFR gene amplification in 50% of glioblasts [Cancer Res. 2000 60, 1383-1387].
  • EGFR and Her2 form a heterocomplex with each other and have a functional interaction [Clin. Oncol. 2001 19 (18s), 32s-40s]. It is known that co-expression of EGFR and Her2 further accelerates canceration by EGFR alone [Cell 1987 58, 287-292]. It has also been reported that the co-expression of EGFR and Her2 in breast cancer, oral cancer, lung cancer, etc., results in poor prognosis [Clin. Cancer Res. 1999 5, 4164-4174].
  • dual inhibitors drugs that inhibit both EGFR and Her2 (hereinafter simply referred to as dual inhibitors) not only have the advantage of spreading the indication disease than drugs that act on only one of them, but also have a synergistic effect of dual inhibition. It is also excellent in that effective action can be expected for co-expressed cancers.
  • EGFR and Her2 diagnostic techniques are already widely known. And early in an attempt to detect the pre-cancerous lesions of the oral cavity cancer by Konjugeito a fluorescent dye to an antibody that binds also been reported recently in the EGFR [Cancer Res. 2001 61, 4490-4496] 0 On the other hand, of breast cancer patients Her2 Some reports have suggested that the presence or absence of expression can predict the antitumor effect of an anthracycline anticancer drug [Clin. Cancer Res. 2001 7, 1577-1581]. Thus, the diagnosis of EGFR and Her2 may be of interest in early detection of the disease and in selecting effective and appropriate drugs for individual patients.
  • Her2 inhibitor is a neutralizing antibody Herceptin (trade name, Roche). It has already been marketed in various countries as a therapeutic agent for breast cancer metastases, but tyrosine kinase inhibitors are in clinical development of anticancer drugs. Similarly, dual inhibitors of EGFR and Her2 have been researched and developed, but have not yet been put to practical use.
  • Herceptin an anti-Her2 antibody
  • Herceptest trade name
  • the dual inhibitor of EGFR and Her2 can be used for a wide range of organ cancers because it can be applied to any cancer that expresses any target molecule.
  • TS Thymidylate synthase
  • the present inventors have conducted intensive studies to solve the above-mentioned problems, and as a result, performed diagnosis on the expression or activity of Her2 or HER and EGFR in a test subject, and It has been found that administration of Her2 or HNO and EGFR inhibitors to the identified test subjects can establish a series of treatments.
  • the present invention relates to Her2 or Z and And an EGFR inhibitor, a pharmaceutical composition comprising the inhibitor as an active ingredient, and a prophylactic and / or therapeutic method characterized by administering the inhibitor to a subject.
  • the present invention is a.
  • Her2 or / and EGFR expression or activity of the test subject is diagnosed by a test for detecting Her2 or Z and EGFR expression or activity, and as a result, Her2 or / and EGFR is overexpressed or activated.
  • Her2 or and an EGFR inhibitor for administration to a subject determined to have
  • Her2 or Z and EGFR activity of the test subject are diagnosed by a test for detecting Her2 or / and EGFR activity, and as a result, it is determined that Her2 or Z and EGFR are activated.
  • the inhibitor according to the above (1) which is administered to a test subject.
  • Her2 and EGFR activities are diagnosed by a test to detect the activity of Her2 and EGFR, and administered to the test subjects who are determined to have activated Her2 and EGFR as a result.
  • the test for detecting Her2 and EGFR expression or activity is an in vitro test (3)
  • the inhibitor according to (3) which is a combination drug comprising a Her2 inhibitor and an EGFR inhibitor.
  • the immunological method using antibodies is selected from the group consisting of enzyme-linked immunosorbent assay, enzyme-linked immunosorbent assay, radioimmunoassay, immunohistochemical method, and Western blot method.
  • the hybridization method using a nucleic acid and a nucleic acid derivative is a method selected from the group consisting of RT-PCR, ISH, FISH, Northern blot, and Southern blot. 12) The inhibitor according to 2),
  • R 1 is Ci—4 alkyl, —4 alkoxy, CH 3 SO 2 CH 2 CH 2 NHCH 2 — in a r _ (wherein, Ar is phenyl, furan, Chiofen, is selected from pyromellitic Ichiru and thiazole Ichiru, in each of the properly be 1 optionally two halogen, CI- 4 alkyl or C DOO 4 alkoxy Or one C ⁇ C—C (R 6 ) (R 7 ) (R 8 ) (where R 6 , R 7 , and R 8 are each It is independently a hydrogen atom, arsenic Dorokishi, halogen, Ci-4 alkyl or CI- 4 alkoxy, or, the ring is a hydrogen atom
  • R 2 represents hydrogen, halogen, hydroxy, or.
  • HCO-R 9 (wherein, R 9 Haji have alkyl, Ji 4 alkoxy, C 2 - 4 alkenyl le or C 2 _ 4 shows the alkynyl.) Is selected from the group consisting of; U is substituted by R 3 groups, Phenyl, pyridyl, 3H-imidazolyl, indolyl, isoindolyl, indolininole, isoindolininole, 1H-indazolinole, 2,3-dihi, optionally substituted with at least one independently selected R 4 group Draw 1 H-indazolinole, 1 H-benzimidazolinole, 2,3-dihydro-1H-benzimidazolyl or 1H-benzotriazolyl group; R 3 represents benzyl, halo, dihachino and trihalo If benzyl, benzoyl, pyridylmethyl, pyridylmethoxy, phen
  • Bok alkyl Amino, CI_ 4 alkylthio, - 4 alkylsulfinyl, C i-4 alkylsulfonyl, CI_ 4 alkyl carbonylation le, carboxy, force Rubamoiru, C i_ 4 alkoxycarbonyl, CI- 4 Arukanoi Ruamino, N- (Ji 4 Alkyl) carpamoyl, N, N-di (dialkyl) ylrubamoyl, cyano, nitro and trifluoromethyl.
  • Her2 or and diseases caused by overexpression or activation of EGFR are angiogenesis associated with the growth of cancer, cancer and sarcoma, angiogenesis associated with cancer metastasis, angiogenesis associated with diabetic retinopathy, artery
  • Her2 or EGFR expression or activity of the test subject is diagnosed by a test for detecting Her2 or EGFR expression or activity, and as a result, Her2 or Z and EGFR are overexpressed or activated.
  • a preventive or therapeutic agent for a disease caused by overexpression or activation of Her2 or // and EGFR for administration to a subject determined to be
  • Her2 or EGFR and EGFR are angiogenesis associated with the growth of cancer, cancer and sarcoma, angiogenesis associated with cancer metastasis, angiogenesis associated with diabetic retinopathy, arteriosclerosis Or the prophylactic or / and therapeutic agent according to the above (21), which is psoriasis,
  • Her2 or / and EGFR expression or activity is diagnosed by a test to detect Her2 or EGFR expression or activity, and as a result, Her2 or Z and EGFR are overexpressed or activated.
  • a method for preventing or treating a disease caused by overexpression or activation of Her2 or / and EGFR which comprises administering an effective amount of a Her2 or Z and EGFR inhibitor to a test subject determined to be ,
  • Her2 or EGFR and EGFR are angiogenesis associated with the growth of cancer, cancer and sarcoma, angiogenesis associated with cancer metastasis, angiogenesis associated with diabetic retinopathy
  • the prevention or Z and the treatment method according to the above (23), wherein the disease is atherosclerosis or psoriasis (25) The pharmaceutical composition according to any one of (18) Riki et al. (20), and a method for preventing or preventing a disease caused by overexpression or activation of Her2 or / and EGFR using the pharmaceutical composition. / And a commercial package containing documentation stating that it can or should be used for treatment;
  • test for detecting Her2 or / and EGFR expression examples include an immunological method using an antibody against Her2 or Z and EGFR, or a hybridization method using nucleic acids and nucleic acid derivatives.
  • analytical method examples include solid-phase enzyme immunoassay, enzyme-linked immunoassay, radioimmunoassay, immunohistochemical method, and Western blot method, and the like.
  • shion method examples include the RT-PCR method, the ISH method, the FISH method, the Northern blot method, and the Southern plot method.
  • the enzyme-linked immunosorbent assay is an enzyme-linked immunoassay (EIA) performed on a solid phase, in which an enzyme is labeled covalently with an antigen or antibody.
  • EIA enzyme-linked immunoassay
  • This is a method in which an enzyme-linked immunoassay method for detecting the presence of an antibody or an antigen using an enzyme activity is performed on a solid phase.
  • This method was developed by E. Engval et al. In 1971, replacing the radioisotope labeled on either the antigen or antibody of radioimmunoassay (radioimmunoassay: RIA) with a non-radioactive enzyme.
  • Zeputo mole it developed as (zeptomole 10- 21 moles) level can also be a method of measurement of antigen.
  • the ELISA method includes a direct antibody method, an indirect antibody method, a competitive method, and a two-antibody sandwich method, and a method suitable for a measurement purpose is selected.
  • Agarose, microtiter wells, latex particles, and the like are used for the solid phase, and horseradish-derived peroxidase is most often used for the labeling enzyme.
  • Other enzymes include alkaline phosphatase and galactosidase.
  • an immunohistochemical method is also applicable.
  • the “Western plot method” is a method of detecting proteins transferred to a membrane such as a PVDF membrane using an antibody. Since the specific binding between the antibody and the well is used, only a small amount of the sample is required, and the target protein can be detected specifically.
  • Hybridization refers to the interaction of complementary nucleic acid strands. Since DNA has a double-stranded structure due to complementary interactions (C is always linked to G and A is always linked to T), separating complementary strands favors each other, ie, "hybridizes". This occurs even between two DNA strands or between a DNA strand and an RNA strand whose base sequences are sufficiently complementary. Hybridization occurs in all physiological reactions of DNA, such as replication and transcription, and forms the basis of many molecular biological techniques such as Southern plotting, Northern plotting, and PCR.
  • PCR Polymerase chain reaction
  • the iSH (in situ hybridization) method is an effective means for detecting gene expression in tissue fragments.
  • the combination of this method and the fluorescence detection method is the FISH method
  • Northern plot method is a technique for analyzing mRNA. Electrophores the RNA, which tends to have a secondary structure, under denaturing conditions and transfers it to a membrane (nylon, nitrocellulose, etc.). Depending on the metamorphic method, there are: 1. a method using formamide and formaldehyde; 2. a method using glyoxal; or 3. a method using methylmercury hydroxide.
  • the "Southern blot method” is a transcription method described by Southern in 1975, which detects a transcribed DM region having a base sequence complementary to a labeled nucleic acid probe.
  • tissues from patients are subjected to the above-mentioned test methods to detect the expression or activity of Her2 or NO and EGFR
  • a disease caused by overexpression or activation of Her2 or Z and EGFR include brain tumor, pharyngeal cancer, laryngeal cancer, tongue cancer, esophageal cancer, gastric cancer, colon cancer, non-small cell lung cancer, knee cancer, Bile duct cancer, gallbladder cancer, liver cancer, kidney cancer, bladder cancer, prostate cancer, breast cancer, ovarian cancer, cervical cancer, endometrial cancer, skin cancer, pediatric solid cancer, bone tumor, hemangioma and other cancers, diabetic retinopathy Vascular neoplasia, arteriosclerosis, psoriasis, etc., brain cancer, pharyngeal cancer, laryngeal cancer, tongue cancer, esophagus cancer, stomach cancer, colorectal cancer, non-small cell lung cancer, knee cancer, bile duct cancer, gallbladder cancer, liver cancer, Kidney cancer, bladder cancer, prostate cancer, breast cancer, ovarian cancer, cervical cancer, endometrial cancer,
  • Her2 or / and EGFR overexpression or activation refers to expression or activity that is higher than the expression level or activity required for homeostasis of a living organism, and that is required for normal tissues of the same origin. Expression or activity over the amount or activity.
  • Her2 or EGFR "Patients in which Her2 or EGFR is overexpressed or activated” are patients in which at least one of Her2 or EGFR is overexpressed or activated, preferably patients in which both are overexpressed or activated.
  • the Her2 or / and EGFR inhibitor of the present invention is characterized by being administered for the treatment of a patient in which Her2 or / and EGFR is overexpressed or activated as described above.
  • the “Her2 or Z and EGFR inhibitor” of the present invention is preferably a Her2 and EGFR inhibitor administered to a patient in which Her2 and EGFR are overexpressed or activated, and a Her2 inhibitor and an EGFR inhibitor
  • the Her2 inhibitor and the EGFR inhibitor can be used simultaneously, separately or at intervals over time. That is, the Her2 inhibitor and the EGFR inhibitor may be administered simultaneously by different routes, separately or at different times, for example on the same day, or over a period of days to weeks or months. It is also possible to administer at intervals.
  • Her2 inhibitors used in the present invention include anti-Her2 antibody Herceptin (Roche) , TAK-165 (Takeda), ETH-102 (ExonHit Ther.) And the like.
  • Examples of the EGFR inhibitor used in the present invention include Iressa (A. Zeneca), OSI-774 (Roche), ⁇ -166 (Novartis), ⁇ -569 (Wyeth) and the like.
  • TAK-165 WO02 / 06249, JP-A-2001-348385, JP-A-2002-69070, JP-A-9-136877, JP-A-11-60571, etc.
  • Iressa refer to WO 96/33980
  • Patent No. 3040486, for 0SI-774 refer to WO 96/30347
  • PKI-166 refer to WO 97/02266, and for EKB-569, refer to US Pat. It is described in Patent No. 6,002,008.
  • one or a plurality of them can be selected from the respective inhibitors, and the mixture can be produced and used by a known method as appropriate.
  • FIG. 1 is a diagram of the chemiluminescence of Example 4 taken with a lumino CCD camera.
  • a dual inhibitor is preferable, and specific examples thereof include an inhibitor that acts based on the inhibition of the protein kinase activity of the enzyme, the Her2 or the inhibitor, and the intracellular protein content of EGFR. Or an inhibitor of physical binding between the Her2 or / and the EGFR and a signal transduction molecule.
  • Examples of more specific compounds of the “dual inhibitor” include the following compounds disclosed in WO99 / 31516 (Japanese Patent Application Laid-Open No. 2000-52025).
  • General formula (I) Japanese Patent Application Laid-Open No. 2000-52025.
  • R 1 is CH 3 S0 2 CH 2 CH 2 NHCH 2 — Ar— group (where Ar is selected from phenyl, furan, thiophene, pyrrole and thiazole, each of which optionally contains one or two halogens, Ci-4 R 2 may be hydrogen, halogen, hydroxy, or Bok alkyl, - 4 alkoxy, is selected from the group consisting of CI_ 4 alkylamino ⁇ Pi di [Ci alkyl] Amino; U is at least one of R 4 which is substituted by R 3 groups, and is further selected as desired by the independent Phenyl, pyridyl, 3H-imidazolyl, indolyl, isoindolyl, indolino
  • R 3 trihalomethyl benzyl or trihalomethyl benzyl O or represents alkoxy
  • halogen in or R 3 represents a group of formula (a) (wherein, R 5 are each independently, C - 4 is selected from alkyl ⁇ Piji Bok 4 alkoxy; and, n represents 0 to 3); hydroxy R 4 are each independently halogen, C ⁇ one 4 alkyl, C 2 _ 4 alkenyl, C 2 _ 4 alkynyl, Ji 4 alkoxy, Amino, Ji decoction Arukiruamino, di comp alkyl] Amino, Ji 4 alkylthio, C - 4 alkylsulfide El, C Bok 4 alkylsulfonyl, C - 4 alkylcarbonyl, carboxy, force Rubamoiru, C Bok 4 alkoxycarbonyl, — 4 alkanoylamino, N— (C— 4 alkyl) carpamoyl
  • the compound of the general formula (I) may be in the form of any of a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate, an isomer, an optical isomer or a racemate, and a mixture of diastereomers.
  • Pharmaceutically acceptable salts include inorganic acid salts such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, phosphoric acid, metaphosphoric acid, nitric acid and sulfuric acid, formic acid, acetic acid, tartaric acid, trifrenole acetic acid, citric acid, malic acid, Organic acid salts such as lactic acid, fumaric acid, maleic acid, benzoic acid, phthalic acid, glyconoleic acid, gnorenuronic acid, gnoreconic acid, succinic acid, methanesnolefonic acid, p-toluenesulfonic acid, isethionic acid, sodium, potassium, magnesium, Organic base salts such as alkali metals such as calcium, alkaline earth metal salts, ammoni
  • the dual inhibitor according to the present invention includes, in addition to all the above-mentioned compounds, other compounds having a dual inhibitory action (for example, the compounds described in WO02 / 06651). included.
  • the inhibitor of the present invention may be a pharmaceutically acceptable carrier (excipient, binder, disintegrant, flavoring agent, flavoring agent, emulsifier, diluent, solubilizing agent, etc. ) And pharmaceutical compositions or preparations (tablets, pills, capsules, granules)
  • parenteral includes subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection or infusion.
  • the active ingredient compound may contain at least one pharmaceutically acceptable excipient (an inert diluent, a lubricant, a preservative, an antioxidant, a disintegrant, a binder, a thickener, a buffer). , A sweetener, a flavoring agent, a perfume agent, etc.).
  • Liquid preparations for oral administration include pharmaceutically acceptable emulsions, syrups, elixirs, suspensions, solutions and the like, including inert diluents commonly used in the art. Is also good.
  • Formulations for injection can be prepared using a suitable dispersing agent or wetting agent and a suspending agent by a method known in the art. it can.
  • the sterile injectable preparation may also be a sterile injectable solution or suspension using a diluent or solvent.
  • sterile, fixed oils can also be used as a normal solvent or suspending solvent. For this purpose any boiler oil or fatty acid can be used.
  • Suppositories for rectal administration are mixed with the drug and suitable nonirritating excipients, such as those that are solid at room temperature but liquid at the intestinal tract, that melt in the rectum and release the drug. Can be manufactured.
  • Dosage should be adjusted according to the patient's age, weight, general health, gender, diet, time of administration, mode of administration, rate of excretion, combination of drugs, and the severity of the condition being treated by the patient. Alternatively, it is determined in consideration of other factors. For example, when the compound represented by the above general formula (I) is used, the daily dose varies depending on the condition and weight of the patient, the type of the compound, the administration route, etc. ⁇ 100 O in g Z kg weight Z day
  • 0.05 to 50 mg / kg body weight / day is administered once or several times a day.
  • about 0.01 to 50 times subcutaneously, intravenously, intramuscularly, or rectally.
  • mg / kg body weight day preferably 0.01 to 201118: 8 body weight Z days.
  • the prophylactic or therapeutic agent used for the Her2 or EGFR expression or activated patient of the present invention is tested for Her2 or EGFR expression or activity, and Her2 or EGFR is overexpressed or activated. If it is determined that the patient has a disease caused by the expression or activation of Her2 or EGFR, a document stating that it can or should be used for the patient By being packaged together, it can be suitably provided as a pharmaceutical.
  • PD 0183805 inhibits EGFR tyrosine kinase and has an in vivo anti-cancer effect against EGFR overexpressing cancer A431.
  • Also, the dihydrochloride CI-1033 of PD 0183805 is It has been reported that MDA-MB-453 cells inhibit tyrosine phosphorylation of Her2, erbB3 and erbB4 when stimulated with harregulin2 ) .
  • PD 0183805 is abbreviated as PD
  • dihydrochloride CI-1033 of PD 0183805 is abbreviated as PD ⁇ 2HC1.
  • the chemical name and chemical structure of PD are as follows.
  • Human epidermoid carcinoma cells A431 provided by Medical Cell Resource Center, Tohoku University Institute of Aging Medicine; catalog number TKG-0182, or purchased from ATCC; ATCC number CRL-1555
  • the purified EGFR was used to improve the method for measuring the osteosynthesis kinase activity of Linda J. Pike et al. (Proceedings of the National Academy of Science of the USA, 1982, 79, 1433). The detailed method is as follows.
  • A431 cells in DMEM medium supplemented with 10% FBS After culturing the cells in 5% CO2, the cells are homogenized in a solution containing 10 mM HEPES buffer (pH 7.4), 0.25 M saccharose, and 0.1 mM EDTA, and then centrifuged at 3,000 XG for 5 minutes. Further, the supernatant was centrifuged at 100,000 ⁇ G for 30 minutes to obtain an A431 cell membrane fraction, which was subjected to measurement as a partially purified EGFR as an enzyme source.
  • A431 cell membrane fraction (1 0 ⁇ 1 5 ⁇ g), 30 mM HEPES buffer (pH 7.4), the reaction mixture of 2 mM MnCl 2, 100 ⁇ Na 3 V0 4N ⁇ Pi dimethylsulfoxide drug dissolved in de (DMS0)
  • DMS0 de
  • the reaction was started by adding a final concentration of 1 OM. The volume at this time is 60 ⁇ L.
  • the reaction was performed on ice for 30 minutes. The reaction was stopped by adding 10 L of 10 mg / mL bovine serum albumin and 25 ⁇ L of 20% trichloroacetic acid, and the mixture was left on ice for 30 minutes. Centrifuge for 40 min, sample 40 ⁇ L of supernatant, and Adsorbed on phosphocellulose paper. The operation of immersing this in 0.75% phosphoric acid water for 5 minutes and washing was repeated four times, and then the paper was taken out. The count of 32 P was measured with a liquid scintillation counter, and this value was designated as A.
  • Inhibition rate (%) 100- ⁇ (A-C) I (B-C) ⁇ X 100
  • the IC 50 value (50% inhibitory concentration) was calculated from the inhibition rate obtained by changing the concentration of the drug added. The results are shown in the table below.
  • Cells donor than constitutively NIH3T3 mouse fibers were transformed with activated mutant C-er BB2 blast cell line (Tohoku University Aging Medical Laboratory Cell Resource Center for Biomedical by replacing 659 of heparin to glutamate; Cat No. TKG-0298) (hereinafter referred to as A4 cells).
  • This cell line was cultured and maintained in a plastic culture dish at 37 ° C. under 5% carbon dioxide gas in a DMEM / F12 mixed medium (hereinafter, referred to as Atsushi medium) containing 10% FBS.
  • A4 cells suspended in Atsey's medium were seeded at 3 ⁇ 10 5 / well in a 12-well plate, and the confluent cells were cultured with the drug for 2 hours at 37 ° C. After washing the cells once with PBS, resuspend in cell lysis buffer (60 mM Tris (pH 6.8), 2% SDS, 10% glycerol, 5% beta-mercaptoethanol, 0.001% bromophenol blue) The sonicated product was used as a whole cell lysate for Western blotting.
  • cell lysis buffer 60 mM Tris (pH 6.8), 2% SDS, 10% glycerol, 5% beta-mercaptoethanol, 0.001% bromophenol blue
  • the resulting phosphorylation signal was quantified, the signal when no compound was added was set to 100% control, the background signal was set to 0%, and the inhibition of phosphorylation by the drug was evaluated by a% control. The results are shown in the table below.
  • Human knee cancer HPAC (ATCC number CRL-2119), human colon cancer LS174T (ATCC number CL-188) and human lung cancer NCI-H520 (ATCC number HTB-182) were purchased from ATCC.
  • Human cervical cancer E180 was provided by Tohoku University Institute of Aging and Medical Cell Resource Center (catalog number TKG-0437, ATCC number HTB-33 if purchased from ATCC).
  • Balb N female nude mice N Balb AJcl- nu mice, CLEA Japan, during the 5-week-old stock cultured human cancer cells suspended in PBS 5 ⁇ 10 6/100 / ⁇ 1 were implanted subcutaneously into the back of, After about 7 days, when the average volume of the transplanted tumor became almost 100 * 3 , groups were divided into four groups so that the average tumor volume of each group was constant.
  • the drug was administered by oral gavage once a day for 14 consecutive days from the day of grouping, and the mice in the control group did not receive the drug.
  • the relative tumor growth rate was calculated for the control group and the drug-treated group, taking the tumor volume value on the day of administration as 1.
  • the anticancer effect was shown by% control. The% control was calculated by the following equation.
  • Her2 or EGFR inhibitor inhibits the growth of (EGFR, Her2 both positive), (EGFR positive, Her2 negative) or (EGFR negative, Her2 positive) cancer cells Effect, i.e., Her2 or / and EGFR inhibitor overexpresses Her2 or / and EGFR
  • Human knee cancer HPAC (ATCC number CRL-2119), PANC1 (ATCC number CRL-1469), human transformant Daudi (ATCC number CCL-213), human colorectal cancer LS174T (ATCC number CL-188) were purchased from ATCC. .
  • Human vulvar cancer A431 (catalog number TKG-0182), human cervical cancer ME180 (catalog number TKG-0437), human tongue cancer HSC-3 (catalog number TKG-0484), (-4 (catalog number) No. TKG-0489) was provided by Tohoku University Institute for Aging and Medical Cell Resource Center.
  • the cells were cultured in a 100-well culture dish until they were almost confluent. After removing the medium from the 100 dish culture dish and washing once with PBS, about 0.6 mL of RIPA buffer (50 mM Tris (pH 7.4), 150 mM sodium chloride, 1% NP-40, 0.25% deoxycholic acid, lmM EDTA and protease inhibitor cocktail) were added, and the mixture was allowed to stand on ice for 10 minutes. The cell lysate was collected in a 1.5 mL centrifuge tube, and refrigerated at 10, OOOrpm for 10 minutes. The supernatant was transferred to another tube and the cell lysate was used for Western blotting.
  • RIPA buffer 50 mM Tris (pH 7.4), 150 mM sodium chloride, 1% NP-40, 0.25% deoxycholic acid, lmM EDTA and protease inhibitor cocktail
  • a cell lysate for a protein amount of 25 g was subjected to 7.5% SDS-polyacrylamide electrophoresis, and then transferred to a PVDF membrane. After blocking the membrane, a specific antibody to EGFR (Santa Cruz Biotechnology, Cat. No. sc-03) or a specific antibody to Her2 (Upstate biotechnology Cat. No. 06-) in 0.1% Tween 20 supplemented Tris buffer 562) and then treated with HRP-labeled anti-Egret secondary antibody (ICN Pharmaceuticals Cat # 55689). The membrane was treated with a chemiluminescent reagent, ECL western blotting detection reagents (Amersham pharmacia biotech, Kataguchi No. 2209), and the luminescence was photographed with a lumino CCD camera.
  • Figure 1 shows the image.
  • Table 7 shows the description of each lane in Fig. 1.
  • RNA was extracted from the cancer cells using the SNAPAP TM total RNA isolation kit (invitrogen, catalog number 45-0472). A reverse transcription reaction was performed using 1 g of the obtained total RNA. The reverse transcription reaction was performed using the 1st Strand cDNA Synthesis Kit for RT-PCR (Roche, catalog number 1483188).
  • a random primer p (dN) 6 was used as a primer.
  • PCR was performed using 1 ⁇ L of the obtained cDNA.
  • the primer attached to Human Epidermal growth factor receptor and GAPDH genes Dual-PCR kit (Maxim Biotech, catalog number DP-10065-G) as the primer, and use TaKaRa Ex Taq TM (Takara Shuzo, catalog number) for the enzyme.
  • RR001A was used. Reaction conditions were 96 ° C for 1 minute, 1 cycle of% ° C for 1 minute, 58 ° C for 1 minute and 30 seconds, and 30 cycles of 72 ° C for 10 minutes.
  • the primer used was RT-PCR primer set HUMAN erb-B2 (CLP, catalog number 5254 ⁇ H).
  • the enzyme used was TaKaRa Ex Taq TM (Takara Shuzo, catalog number RR001A). The reaction was performed at 94 ° C for 5 minutes, 60 ° C for 5 minutes, 1 cycle, 72 ° C for 2 minutes, 94 ° C for 1 minute, 60 ° C for 1 minute, 40 cycles, and 72 ° C for 10 minutes. Agarose electrophoresis was performed on the obtained PCR product to confirm the presence or absence of expression. From the results of Examples 4 and 5, Her2 or
  • Examples 2 and 4 show that Her2 or EGFR activation can be tested.
  • the expression or activity of Her2 or EGFR in the patient is examined. If it is determined that Her2 or EGFR is overexpressed or activated, Her2 or EGFR is overexpressed or activated. It is determined that the patient has a disease caused by the expression or activation of EGFR, and the medicament of the present invention is administered.
  • the inhibitor of the present invention is not only an effective treatment for cancer patients as described above, but also a prophylactic or Z treatment for preventing the transition from hormone-sensitive cancer to resistant cancer in prostate cancer and breast cancer. It can be expected as a medicine. Furthermore, it can also be expected as a prophylactic or therapeutic agent for angiogenesis associated with the growth of solid cancer and sarcoma, angiogenesis associated with cancer metastasis, angiogenesis associated with diabetic retinopathy, arteriosclerosis, psoriasis, and the like.
  • This application is based on a patent application No. 2002-16162130 filed in Japan, the contents of which are incorporated in full herein.

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Description

明 細 書
Her2又は/及び EGFR発現又は活性化対象に用いる予防又は/及び治療剤
技術分野
本発明は、 被検対象に対して Her2又は/及び EGFRの発現又は活性化診断を行い、 それらの発現が確認された被検対象を治療の対象とする一連の治療方法に使用する 薬剤に関する。
背景技術
従来、 抗癌剤の標的分子は DNAや RNAの合成に関与する分子そして細胞分裂に関与 する分子が主であった。 これらの抗癌剤は、 標的分子が癌細胞特異的ではないため 、 骨髄毒性などの重篤な副作用を引き起こすことが知られている。
近年、 分子腫瘍学の発展により癌の発生は癌遺伝子、 癌抑制遺伝子の異常によつ て引き起こされることが明らかになった。 最もよく知られた癌遺伝子として上皮増 殖因子受容体 (epidermal growth factor receptor、 以下 EGFRと略す。) とその類縁 の human EGFR type2 (以下 Her2と略す。 別名 erbB- 2とも呼ぶ。) が挙げられる。
EGFRと Her2はそれぞれ分子量 170kD、 185kDの膜貫通型糖蛋白質である。 EGFRと Her2 の細胞内ドメインにはチロシンキナーゼドメインが存在し、 リン酸化反応を通して 信号を核へ伝えている。互いのキナーゼドメインのァミノ酸配列は約 80%の相同性を 持ち構造的によく似ている力 C末端にある自己リン酸化ドメインの相同性は約 30% と低く両レセプターの信号伝達機構に質的違いがあることが推察される。
EGFRは食道癌に 89%と極めて高い頻度で発現している [J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1993 119, 401-407] 0 一方、 その他の癌種では非小細胞肺癌の 45%に EGFRの 過剰発現 [Cancer Res. 1993 53, 2379-2385]、 グリオブラスト一マの 50%に EGFRの遺 伝子増幅 [Cancer Res. 2000 60, 1383-1387]などの報告がある。
Her2に関しては乳癌の 39%に遺伝子増幅 [J. Clin. Oncol. 1993 11, 1936-1942] 、 卵巣癌の 32%に過剰発現 [Cancer Res. 1990 50, 4087-4091]、 ホルモン抵抗性前立 腺癌の 67%に過剰発現 [Clinical Cancer Res. 2001 7, 2643- 2647]などの報告がある EGFRや Her2は様々な臓器癌に過剰発現しているが、 これらによる癌化の分子機構 の実態はリン酸化反応を介した信号伝達であり、 EGFRや Her2の発現量の程度と独立 にこの信号伝達機能が過剰に活性化することによっても臨床的に癌の進行を悪化さ せることがある。 したがって、 標的の発現が癌種によって異なる以上、 これらを標 的とする治療は当然ながら個別の治療を必要とする。 そして癌の性質を診断し標的 分子の発現や活性化の有無に合わせて薬剤を選択すべきである。 これにより効果的 かつ合理的な治療が達成できる。
EGFRと Her2は互いにへテロ複合体を形成し機能的な相互作用が見られる [ Clin. Oncol. 2001 19 (18s) , 32s- 40s]。 そして、 EGFRと Her2の共発現により EGFR 単独による癌化がさらに加速されることが知られている [Cell 1987 58, 287-292] 。 また、 乳癌、 口腔癌、 肺癌等において EGFRと Her2の共発現があると予後不良にな るとの報告もある [Clin. Cancer Res. 1999 5, 4164-4174]。
したがって、 EGFRと Her2両方を阻害する薬剤 (以下、 単にデュアル阻害剤とも称 す。)はどちらか一方にしか作用しない薬剤に比べて適応疾患が広がる有利性がある のみならず、 デュアル阻害の相乗作用によって共発現癌に対して効果的な治療を期 待できる点でも優れている。
EGFRと Her2の診断技術は既に広く知られている。 そして EGFRに結合する抗体に蛍 光色素をコンジュゲイトさせて口腔癌の前癌病変を早期に検出する試みも最近報告 された [Cancer Res. 2001 61, 4490-4496] 0 一方、 乳癌患者の Her2発現の有無によ りアントラサイクリン系抗癌剤の抗腫瘍効果が予測できることを示唆する報告も出 てきた [Clin. Cancer Res. 2001 7, 1577-1581]。 したがって、 EGFRや Her2の診断は 病気を早期発見する役割と個々の患者に有効で適切な薬剤を選択するために有益と なる可能性がある。
EGFR阻害剤としては中和抗体とチロシンキナーゼ阻害剤が抗癌剤の臨床開発段階 にある。 Her2阻害剤では中和抗体ハーセプチン (Herceptin:商品名、 Roche社) 力 S 転移性乳癌に対する治療剤として既に各国で上市されているが、 チロシンキナーゼ 阻害剤は抗癌剤の臨床開発段階にある。 同様に EGFRと Her2のデュアル阻害剤も研究開発されているがまだ実用化には至つ ていない。
抗 Her2抗体ハーセプチンは Her2の発現診断ハーセプテスト (Herceptest:商品名 ) で治療対象患者の選別を既に行っているが、 適応癌種は乳癌に限定されている。
EGFRキナーゼ阻害剤ィレッサ (Iressa :商品名、 A. Zeneca社) には従来の抗癌剤 が持つ骨髄毒性などの重篤な副作用がないこと、 そして、 非小細胞肺癌に有効であ ることが臨床試験で示されてきた [Clin. Cancer Res. 2001 7, 3780s]。 し力 し、 ィ レッサの臨床試験では治験対象患者の選択のために EGFR発現を事前に確認する作業 は行われていない。
EGFRと Her2のデュアル阻害剤は、 いずれかの標的分子が発現している癌であれば 適応範囲とする事ができるため、 幅広い臓器癌を対象とする。 し力 し、 既に記述し たように、 より正確には標的蛋白の発現又は活性化を診断することにより治療対象 患者を適切に選別した上での処方が望ましく、 デュアル阻害剤によるこの一連の治 療法は医療現場において未だ確立されたものではない。
癌組織中の標的分子の発現と抗癌剤の感受性に関する別の例としては、 乳癌組織 中のチミジル酸合成酵素 (Thymidylate synthase: TS) 発現量及びジヒドロピリミ ジン脱水素酵素 (Dihydropyrimidine dehydrogenase) 活性値と 5FU感受性は関連が あるとの報告がある [日本癌治療学会誌 2000 35, 340] o しかし、 実際に治療法とし て 5FU処方前に TS発現診断を行うには至っていない。
上記のように、 抗癌剤の処方にあたり、 薬剤の標的分子を診断して効果的な治療 法を予測することが切望されている。
発明の開示
本発明者らは、 前述の事情に鑑み上記課題を解決すべく鋭意研究を進めた結果、 被検対象に対して Her2又はノ及び EGFRの発現又は活性診断を行い、 それらの発現又 は活性が確認された被検対象に対して Her2又はノ及び EGFR阻害剤を投与することに より、 一連の治療法を確立し得ることを見出すに至った。
すなわち、 本発明は、 このような一連の治療法において投与される Her2又は Z及 び EGFR阻害剤、 該阻害剤を有効成分とする医薬組成物、 該阻害剤を被検対象に投与 することを特徴とする予防又は/及び治療方法関し、 さらに詳細には以下のとおり である。
本発明は、
(1) Her2又は Z及び EGFR発現又は活性を検出するための検査により被検対象の Her2又は/及び EGFR発現又は活性を診断し、 その結果、 Her 2又は/及び EGFRが過剰 発現又は活性化していると判断された被検対象に対して投与するための Her2又は 及び EGFR阻害剤、
(2) Her2又は/及び EGFRの活性を検出するための検查により被検対象の Her2又は Z及び EGFRの活性を診断し、 その結果、 Her2又は Z及び EGFRが活性化していると判 断された被検対象に対して投与するための前記 (1) に記載の阻害剤。
(3) Her2及び EGFR発現又は活性を検出するための検査により被検対象の Her2及び EGFR発現又は活性を診断し、 その結果、 Her2及び EGFRが過剰発現又は活性化してい ると判断された被検対象に対して投与される Her2及び EGFR阻害剤である前記 ( 1 ) に記載の阻害剤、
(4) Her2及び EGFRの活性を検出するための検査により被検対象の Her2及び EGFRの 活性を診断し、 その結果、 Her2及び EGFRが活性化していると判断された被検対象に 対して投与するための前記 (3) に記載の阻害剤。
(5) 被検対象が、 Her2又は 及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患を患 つていると予想されるものである前記 (1) に記載の阻害剤、
(6) 被検対象が、 Her2及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患を患ってい ると予想されるものである前記 (3) に記載の阻害剤、
(7) 被検対象がヒ トである、 前記 (1) から (6) のいずれか 1に記載の阻害剤 (8) Her2又は/及ぴ EGFR発現又は活性を検出するための検査が体外検査である前 記 (1) に記載の阻害剤、
(9) Her2及び EGFR発現又は活性を検出するための検査が体外検査である前記 (3 ) に記載の阻害剤、
(10) Her2阻害剤及び EGFR阻害剤からなる合剤である前記 (3) に記載の阻害剤
(1 1) Her2阻害剤及び EGFR阻害剤を同時に、 別々に、 又は経時的に間隔を置いて 投与するための前記 (3) に記載の阻害剤、
(12) 体外検査が、 抗体を用いた免疫学的方法又は核酸及び核酸誘導体を用いた ハイブリダィゼーシヨン法である前記 (8) 又は (9) に記載の阻害剤、
(13) 抗体を用いた免疫学的方法が、 固相酵素免疫検定法、 酵素一結合免疫アツ セィ法、 ラジオィムノアッセィ法、 免疫組織化学的方法、 及ぴウェスタンプロット 法からなる群より選ばれる方法である前記 (1 2) に記載の阻害剤、
(14) 核酸及び核酸誘導体を用いたハイブリダィゼーシヨン法が、 RT— PCR 法、 I SH法、 F I SH法、 ノーザンブロット法、 及びサザンブロット法からなる 群より選ばれる方法である前記 (1 2) に記載の阻害剤、
(15) 下記一般式 (I)
Figure imgf000007_0001
{式中、 Xは N又は CHであり ; Yが CR1であって、 Vが Nであるか;又は Yが Nであって、 Vが CR1であるか;又は Yが CR1であって、 Vが CR2であるか; 又は Yが CR2であって、 Vが CR1であり ; R1は Ci— 4アルキル、 — 4アルコキ シ、 CH3 S O2CH2CH2NHCH2— A r _ (ここで、 Arはフエニル、 フラン 、 チォフェン、 ピロ一ル及びチアゾ一ルから選択され、 その各々は所望により 1も しくは 2個のハロゲン、 Ci— 4アルキル又は Cト 4アルコキシで置換されていても よレ、。) 又は一 C≡C— C (R6) (R7) (R8) (ここで、 R6、 R7、 R8はそれぞ れ独立して、 水素原子、 ヒ ドロキシ、 ハロゲン、 Ci-4アルキル又は Ci— 4アルコ キシ、 又は、 環が水素原子又は C — 4アルキルで置換されていてもよく、 環内に O
、 S又は Nから選ばれる 1から 2個のへテロ原子を含んでいてもよい C3_6のシク 口アルキルを表す。) を表し ; R2は水素、 ハロゲン、 ヒ ドロキシ、 。 アルキル 、 アルコキシ、 。 アルキルァミノ、 ジ [Ci アルキル] アミノ及ぴ一N
HCO-R9 (ここで、 R9はじ い アルキル、 じ 4アルコキシ、 C24アルケニ ル又は C2_4アルキニルを示す。) からなる群から選択され; Uは R3基で置換され 、 かっさらに所望により独立に選択される少なくとも 1個の R4基で置換されてい てもよいフエニル、 ピリジル、 3H—イミダゾリル、 インドリル、 イソインドリル 、 インドリニノレ、 イソインドリニノレ、 1H—インダゾリノレ、 2, 3—ジヒ ドロー 1 H—インダゾリノレ、 1 H—べンズイミダゾリノレ、 2, 3—ジヒ ドロ一 1 H—ベンズ イミダゾリル又は 1H—ベンゾトリアゾリル基を表し; R 3はベンジル、 ハロー、 ジハ口一及びトリハロベンジル、 ベンゾィル、 ピリジルメチル、 ピリジルメ トキシ 、 フエノキシ、 ベンジルォキシ、 ハロー、 ジハロー及ぴトリハロベンジルォキシな らびにベンゼンスルホニルからなる群から選択されるか;又は R3はトリハロメチ ルベンジル又はトリハロメチルベンジルォキシを表すか;又は R 3は上記式 (a) の基を表し (式中、 R5は各々独立にハロゲン、 C — 4アルキル及ぴ Ci_4アルコキ シから選択され;かつ、 nは 0〜3である) ; R4は各々独立にヒ ドロキシ、 ハロゲ ン、 — 4アルキル、 C 24アルケニル、 C2_4アルキニル、 — 4アルコキシ、 ァ ミノ、 Ci アルキルァミノ、 ジ [。卜 アルキル] ァミノ、 Ci_4アルキルチオ、 — 4アルキルスルフィニル、 C i— 4アルキルスルホニル、 Ci_4アルキルカルボ二 ル、 カルボキシ、 力ルバモイル、 C i_4アルコキシカルボニル、 Ci— 4アルカノィ ルァミノ、 N— (じ 4アルキル) カルパモイル、 N, N—ジ (じ アルキル) 力ルバモイル、 シァノ、 ニトロ及びトリフルォロメチルである。 } で示される置換へ テロ芳香族化合物、 もしくはその薬学的に許容される塩、 それらの水和物もしくは 溶媒和物、 それらの光学活性体もしくはラセミ体、 又は、 それらのジァステレオマ 一混合物である前記 (1) 又はから (14) のいずれか 1に記載の阻害剤、 (1 6) (4— (3 _フルォロベンジルォキシ) 一フヱニル) 一 (6— (5 - ((2 一メタンスルホ二ル一ェチルァミノ) メチル) 一フラン一2—ィル) 一ピリ ド [3 , 4 - d] ピリ ミジン _ 4一ィル) 一ァミン;
(4—ベンジルォキシフエニル) - (6— (5— ((2—メタンスルホニル一ェチル ァミノ) ーメチル) 一フラン一 2—ィル) 一キナゾリン一 4一ィル) 一ァミン; N— { 4 - [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フ: 二ル} - 6 - [5 - ({[2— ( メチルスルホ -ル) ェチル] アミノ } メチル) 一 2—フリル] —4ーキナゾリンァ ミン;
N— [4一 (ベンジルォキシ) フエニル] — 7—メ トキシ _6— [5— ({[2 - ( メチルスルホ -ル) ェチル] アミノ} メチル) _ 2—フリル] —4—キナゾリンァ ミン;
N- ( 1—ベンジル— 1 H—インダゾ一ル一 5—ィル) 一7—メ トキシ一 6— [5 ― ({[2— (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一 2—フリル] ー4一 キナゾリンァミン;
N- { 3—フルォロ一 4一 [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエ二ル} -6- [
5 - ({[2- (メチルスルホニル) ェチル] アミノ } メチル) _ 2—フリル] 一 4 ーキナゾリンァミン;
N- [1— (3—フルォロベンジル) 一 1 H—インダゾール一 5—ィル] - 6 - [ 2— ({[2— (メチルスルホ -ル) ェチル] アミノ} メチル) 一 1, 3—チアゾ一 ル一4一ィル] —4—キナゾリンァミン;
6 - [5— ({[2 - (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一2—フリル
1 - N- [4— (フエニルスルホニル) フエニル] —4ーキナゾリンァミン; N- { 3—フルォロ一 4— [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエ二ル} — 6— [
2— ({[2— (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一 1, 3—チアゾー ルー 4ーィル ] —4—キナゾリンァミン;
N- (1—ベンジル— 1H—インダゾール一 5—ィル) 一6— [2— ({[2— (メ チノレスルホニル) ェチル] アミノ } メチル) - 1 , 3 _チアゾ一ルー 4—ィル] ― 4ーキナゾリンァミン;
N— (3 _フルオロー 4 _ベンジルォキシフエニル) 一 6— [5— ({[2— (メチ ルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一 4一フリル] 一 4—キナゾリンァミン N— (3—クロ口一 4—ベンジルォキシフエニル) 一6— [2— ({[2 - (メチノレ スルホニル) ェチル] ァミノ) メチル) 一4—フリル] 一 4—キナゾリンァミン; N- {3—クロロー 4一 [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエ二ル} —6— [5 一 ({[2 - (メチルスルホニル) ェチル] アミノ } メチル) 一 2—フリル] — 4一 キナゾリンァミン;
N— ( 1 _ベンジルー 1 H—インダゾ一ル一 5 fル) 一7—フルォロ一 6— [5 ― ({[2 - (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一2—フリル] —4一 キナゾリンァミン;
N— (3 _トリフノレオロメチノレ一 4—ペンジノレオキシフエ二ノレ) - 6 - [5— ({[ 2— (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一 4—フリル] —4—キナゾ リンァミン;
N— [4— (3—クロ口一 4—フルオロフェニル) ァミノ一 7— [3— (4—モル ホリニル) プロボキシ] キナゾリン一 6—ィル] アクリルアミ ド;
N— { 4 - [(3—クロ口一 4—フルオロフェニル) ァミノ] _7_ [3—メチノレー 3— (4 _メチル一 1—ピぺラジュル) 一 1—プチニル] —6—キナゾリエル) ァ タリルァミ ド;又は
N— {3—クロ口一 4— [(3—フノレオ口べンジノレ) ォキシ] フエ二ノレ }— 6_ [5— ({ [2- (メタンスルホニル) ェチル] ァミノ)メチル) 一 2—フリル] —4ーキ ナゾリンァミンもしくはその薬学的に許容される塩、 それらの水和物もしくは溶媒 和物、 それらの光学活性体もしくはラセミ体、 又は、 それらのジァステレオマー混 合物である前記 (1) から (15) のいずれか 1に記載の阻害剤、
(1 7) N- [4— (3—クロ口一 4—フルオロフェニル) ァミノ] —7— [3—
(4一モルホリニル) プロポキシ] キナゾリン一 6—ィル] アクリルアミ ド、 又は N— {3—クロ口一 4— [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエニル }ー6— [5— ({ [2- (メタンスルホニル) ェチル] アミノ}メチル) 一2—フリル] —4ーキ ナゾリンアミンもしくはその薬学的に許容される塩、 それらの水和物もしくは溶媒 和物、 それらの光学活性体もしくはラセミ体又はそれらのジァステレオマー混合物 である前記 (1) から (16) のいずれか 1に記載の阻害剤、
(18) 前記 (1) から (1 7) のいずれか 1に記載の阻害剤を有効成分として含 有し、 かつ製薬上許容され得る担体を含有する医薬組成物、
(1 9) Her2又はノ及ぴ EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患の予防又はノ及 ぴ治療薬である前記 (1 8) に記載の医薬組成物、
(20) Her2又は 及ぴ EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、 癌及ぴ肉 腫の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生 、 動脈硬化、 又は乾癬である前記 (19) に記載の医薬組成物、
(21) Her2又はノ及ぴ EGFR発現又は活性を検出するための検査により被検対象の Her2又は 及び EGFR発現又は活性を診断し、 その結果、 Her2又は Z及び EGFRが過剰 発現又は活性化していると判断された被検対象に対して投与するための、 Her2又は //及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患の予防又はノ及び治療薬、
(22) Her2又はノ及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、 癌及び肉 腫の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生 、 動脈硬化、 又は乾癬である前記 (21) に記載の予防又は/及び治療薬、
(23) Her2又はノ及び EGFR発現又は活性を検出するための検査により被検対象の Her2又は/及び EGFR発現又は活性を診断し、 その結果、 Her2又は Z及び EGFRが過剰 発現又は活性化していると判断された被検対象に対して有効量の Her2又は Z及び EGFR阻害剤を投与することを特徴とする、 Her2又は/及び EGFRの過剰発現又は活性 化に起因する疾患の予防又は 及び治療方法、
(24) Her2又はノ及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、 癌及び肉 腫の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生
、 動脈硬化、 又は乾癬である前記 (23) に記載の予防又は Z及び治療方法、 ( 2 5 ) 前記 (1 8 ) 力 ら (2 0 ) のいずれか 1に記載の医薬組成物、 及び該医薬 組成物を Her2又は/及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患の予防又は/及び 治療に使用し得るか又は使用すべきであることを記載した書類とを含む商業的パッ ケージ、
( 2 6 ) Her2又は/及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、癌及ぴ肉腫 の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生、 動脈硬化、 又は乾癬である前記 (2 5 ) に記載の商業的パッケージ、 に関する。 本発明における各定義は次の通りである。
「Her2又は/及び EGFR発現を検出するための検査」としては、 Her2又は Z及び EGFR に対する抗体を用いた免疫学的方法、 又は、 核酸及び核酸誘導体を用いたハイプリ ダイゼーシヨン法が挙げられ、 免疫学的方法のより好ましい具体例としては、 固相 酵素免疫検定法、 酵素一結合免疫アツセィ法、 ラジオィムノアッセィ法、 免疫組織 化学的方法、 又はウェスタンプロット法等が挙げられ、 ハイブリダィゼーシヨン法 のより好ましい具体例としては、 RT- PCR法、 ISH法、 FISH法、 ノーザンブロット法、 又はサザンプロット法等が挙げられる。
「固相酵素免疫検定法 (ELISA = enzyme-1 inked immuno solvent assay)」 とは、 固相で行う酵素一結合免疫アツセィ法(EIA) であり、抗原または抗体に共有結合で 酵素を標識し、 抗体または抗原の存在を、 酵素活性を利用して検出する酵素一結合 免疫ァッセィ法を固相で行なう方法である。この方法は 1971年 E. Engvalらによって 開発されたラジオィムノアッセィ (放射性免疫測定法: RIA) の抗原、抗体のいずれ かに標識する放射性同位体を非放射性の酵素に置き換えたもので、 1990年にゼプト モル (zeptomole : 10— 21モル) レベルの抗原の測定も可能な方法として開発された。
ELISA法には直接抗体法、 間接抗体法、競合法、二抗体サンドィツチ法などがあり 、 測定目的にあった方法が選択される。 固相にはァガロース、 マイクロタイターゥ エル、 ラテックス粒子などが利用され、 標識酵素には、 西洋ヮサビ由来のペルォキ シダーゼが最もよく利用される。 その他の酵素としては、 アルカリホスファターゼ 、 ガラクトシダ一ゼ等も使われる。 なお、 本発明においては、 免疫組織化学的方法も適用可能である。
「ウェスタンプロット法」 とは、 PVDF膜などのメンブランに転写された蛋白質を 抗体をつかって検出する方法である。 抗体と坑原の特異的結合を利用するためサン プルは微量で済み、 特異的にタ一ゲットとする蛋白質を検出できる。
「ハイプリダイゼーシヨン」 とは、相補核酸鎖の相互作用を意味する。 DNAは相補 的相互作用 (Cは G、 Aは Tと常に結合) による二本鎖構造をとつているため、 相補鎖 を分離するとお互いに好んでリア-—ル、 すなわち "ハイブリダィズ" する。 これ は 2本の DNA鎖や、 塩基配列が充分に相補的な DNA鎖と RNA鎖の間でも生じる。 ハイブ リダイゼーションは、複製や転写など全ての DNAの生理的反応において生じ、サザン プロッティングゃノーザンプロッティング、 PCR等多くの分子生物学的手法の基礎を なす。
「PCR (Polymerase Chain Reaction)」 とは、 DNA Polymeraseの反応を連続的、 連 鎖的に実行することにより、 1セットの primerの間にはさまれる DNA断片を特異的に 増幅する反応である。 中でも、 逆転写反応と PCRを組み合わせた 「RT-PCR (reverse transcription— polymerase chain reactionノ法」 はもつとも感度; 0 i¾い。
iSH (in situハイブリダイゼーション)法」 は組織断片での遺伝子発現の検出法 として有効な手段である。 本法と蛍光検出法とを組み合わせたものが FISH法である
「ノーザンプロット法」 とは、 mRNAの解析を目的とした技術である。 2次構造を とりやすい RNAを変成条件下で電気泳動し、メンブレン(ナイロンやニトロセルロー ス等) にトランスファ一する。 変成方法によって 1.ホルムアミドとホルムアルデヒ ドを用いる方法、 2.グリオキサールを用いる方法、 又は 3.水酸化メチル水銀を用い る方法等がある。
「サザンブロット法」 とは、 1975年に Southernによって記載された転写の手法で あり、標識された核酸プローブと相補的な塩基配列を持つ、転写された DMの領域を 検出するものである。
Her2又は/及び EGFRの発現又は活性を検出するには、 患者から採取した組織 (癌 組織、 血管壁組織、 皮膚、 口腔粘膜等) あるいは体液 (血液、 リンパ液) などを上 記で挙げたような検査方法に付して Her2又はノ及び EGFRの発現又は活性を検出する
「Her2又は Z及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患」 の具体例としては 、 脳腫瘍、 咽頭癌、 喉頭癌、 舌癌、 食道癌、 胃癌、 大腸癌、 非小細胞肺癌、 膝癌、 胆管癌、 胆嚢癌、 肝癌、 腎癌、 膀胱癌、 前立腺癌、 乳癌、 卵巣癌、 子宮頸癌、 子宮 体癌、 皮膚癌、 小児固形癌、 骨腫瘍、 血管腫等の癌、 糖尿病性網膜症に伴う血管新 生、 動脈硬化、 乾癬等が挙げられ、 脳腫瘍、 咽頭癌、 喉頭癌、 舌癌、 食道癌、 胃癌 、 大腸癌、 非小細胞肺癌、 膝癌、 胆管癌、 胆嚢癌、 肝癌、 腎癌、 膀胱癌、 前立腺癌 、 乳癌、 卵巣癌、 子宮頸癌、 子宮体癌、 皮膚癌等が好ましく、 脳腫瘍、 胃癌、 大腸 癌、 非小細胞肺癌、 脬癌、 腎癌、 前立腺癌、 乳癌、 卵巣癌等がより好ましい。
「Her2又は/及び EGFRの過剰発現又は活性化」 とは、 生体の恒常性 (ホメォスタ シス) にとつて必要な発現量又は活性以上の発現又は活性であり、 同一起源の正常 組織にとって必要な発現量又は活性以上の発現又は活性である。
「Her2又は 及び EGFRが過剰発現又は活性化している患者」 とは、 Her2又は EGFR の少なくとも一方が過剰発現又は活性化している患者、 好ましくは両方が過剰発現 又は活性化している患者である。 本発明の Her2又は/及ぴ EGFR阻害剤は、 上記のよ うな Her2又は /及び EGFRが過剰発現又は活性化している患者の治療のために投与す ることを特徴とする。
本発明の 「Her2又は Z及び EGFR阻害剤」 としては、 Her2及び EGFRが過剰発現又は 活性化している患者に対して投与する Her2及び EGFR阻害剤であることが好ましく、 Her2阻害剤及び EGFR阻害剤からなる合剤であつても良く、 Her2阻害剤及び EGFR阻害 剤を同時に、 別々に、 又は、 経時的に間隔を置いて使用することも可能である。 即 ち、 Her2阻害剤と EGFR阻害剤とを種々異なるルートにより同時に、 別々に、 あるい は、 例えば同じ日に時間をずらして投与したり、 数日から数週間又は数ケ月にわた り、 所定間隔で投与することも可能である。
本発明において使用する Her2阻害剤としては、 抗 Her2抗体ハーセプチン (Roche) 、 TAK-165 (武田)、 ETH-102 (ExonHit Ther. ) 等が挙げられ、 また、 本発明におい て使用する EGFR阻害剤としては、 ィレッサ(A. Zeneca)、 OSI- 774 (Roche) , ΡΚΙ-166 (Novartis)、 ΕΚΒ-569 (Wyeth)等が挙げられる。これらの製造等に関しては、 TAK- 165 については WO02/06249号公報、 特開 2001- 348385号公報、 特開 2002-69070号公報、 特開平 9-136877号公報、 特開平 11- 60571号公報等に、 ィレッサについては W O 96/33980号公報、 特許第 3040486号公報に、 0SI- 774については WO96/30347号公報 に、 PKI- 166については W O 97/02266号公報に、 EKB-569については米国特許第 6, 002, 008号に記載されている。
これらを Her2阻害剤及び EGFR阻害剤からなる合剤とする場合、 それぞれの阻害剤 から、 1つ又は複数ずつを選択し適宜公知の方法により合剤を製造して使用するこ とが出来る。
図面の簡単な説明
図 1は、 実施例 4の化学発光をルミノ C C Dカメラで撮影した図である。
発明を実施するための最良の形態
本発明の阻害剤としては、 デュアル阻害剤が好ましく、 具体例としては、 当該酵 素の蛋白質キナーゼ活性の阻害に基づき作用する阻害剤、 当該 Her2又はノ及び EGFR の細胞内蛋白質含量を減少させることにより作用する阻害剤、 又は当該 Her2又は/ 及び EGFRと信号伝達分子との物理的結合の阻害剤等が挙げられる。
「デュアル阻害剤」 のより具体的な化合物の例としては、 WO 9 9 / 3 5 1 4 6 号公報 (特表 2 0 0 2 _ 5 0 0 2 2 5号公報) に開示されている下記一般式 (I )
(Rs) n (a)
Figure imgf000015_0001
{式中、 Xは N又は C Hであり ; Yが C R 1であって、 Vが Nであるか;又は Yが Nであって、 Vが CR1であるか;又は Yが CR1であって、 Vが CR2であるか; 又は Yが CR2であって、 Vが CR1であり ; R1は CH3S02CH2CH2NHCH 2— Ar—基 (ここで、 A rはフエニル、 フラン、 チォフェン、 ピロール及びチア ゾールから選択され、 その各々は所望により 1もしくは 2個のハロゲン、 Ci-4ァ ルキル又は アルコキシ基で置換されていてもよい) を表し; R2は水素、ハロ ゲン、 ヒドロキシ、 。卜 アルキル、 — 4アルコキシ、 Ci_4アルキルアミノ及ぴ ジ [Ci アルキル] ァミノからなる群から選択され; Uは R 3基で置換され、 かつ さらに所望により独立に選択される少なくとも 1個の R4基で置換されていてもよ いフエニル、 ピリジル、 3 H—イミダゾリル、 インドリル、 イソインドリル、 イン ドリ二ノレ、 イソインドリニル、 1H—インダゾリル、 2, 3—ジヒ ドロー 1H—ィ ンダゾリル、 1 H—ベンズイミダゾリル、 2, 3—ジヒ ドロー 1 H—ベンズイミダ ゾリル又は 1 H—ベンゾトリアゾリル基を表し; R3はベンジル、 ハロー、 ジハロ 一及びトリハロベンジル、 ベンゾィル、 ピリジルメチル、 ピリジルメ トキシ、 フエ ノキシ、 ベンジルォキシ、 ハロー、 ジハ口一及ぴトリハ口べンジルォキシならびに ベンゼンスルホニルからなる群から選択されるか;又は R3はトリハロメチルベン ジル又はトリハロメチルベンジルォキシを表すか;又は R 3は上記式 (a) の基を 表し (式中、 R 5は各々独立にハロゲン、 C — 4アルキル及ぴじ卜 4アルコキシから 選択され;かつ、 nは 0〜3である) ; R4は各々独立にヒドロキシ、 ハロゲン、 C 丄一 4アルキル、 C2_4アルケニル、 C2_4アルキニル、 じ 4アルコキシ、 ァミノ、 じ い アルキルァミノ、 ジ [じ アルキル] ァミノ、 じ 4アルキルチオ、 C — 4 アルキルスルフィエル、 C卜 4アルキルスルホニル、 C — 4アルキルカルボニル、 カルボキシ、 力ルバモイル、 C卜4アルコキシカルボニル、 — 4アルカノィルァ ミノ、 N— (C — 4アルキル) カルパモイル、 N, N—ジ (じ 4アルキル) カル バモイ Λ シァノ、 ニトロ及びトリフルォロメチルである。} で示される置換へテロ 芳香族化合物、 特に好ましくは、 Ν— {3—クロロー 4一 [(3—フルォ口べンジル
) ォキシ] フエ二ル}— 6— [5 - ({ [2— (メタンスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) —2—フリル] —4ーキナゾリンァミン等が、 又は WO00/3 1048 号公報に開示されている N— [ 4— (3—クロロー 4—フルオロフェニル) ァミノ ] - 7 - [ 3— (4—モルホリエル) プロボキシ] キナゾリン一 6—ィル] アタリ ルアミ ド等が挙げられる。
一般式 (I ) の化合物は、 薬学的に許容される塩、 水和物もしくは溶媒和物、 幾 何異性体、 光学異性体もしくはラセミ体、 又はジァステレオマー混合物のいずれの 形態であってもよい。 薬学的に許容される塩としては、 塩酸、 臭化水素酸、 リン酸 、 メタリン酸、 硝酸おょぴ硫酸などの無機酸塩、 ギ酸、 酢酸、 酒石酸、 トリフノレオ 口酢酸、 クェン酸、 リンゴ酸、 乳酸、 フマル酸、 マレイン酸、 安息香酸、 フタル酸 、 グリコーノレ酸、 グノレクロン酸、 グノレコン酸、 コハク酸、 メタンスノレホン酸、 p - トルエンスルホン酸、 イセチオン酸などの有機酸塩、 ナトリウム、 カリウム、 マグ ネシゥム、 カルシウムなどのアルカリ金属 'アルカリ土類金属塩、 アンモニゥム、 テトラメチノレアミン、 トリェチルァミン、 ベンジルァミン、 フエネチルァミン、 モ ノエタノ一レアミン、 ジェタノ一ルァミン、 トリス (ヒ ドロキシェチルァミン) な どの有機塩基塩、 リジン、 アルギニン、 ァスパラギン酸、 グルタミン酸などのアミ ノ酸塩が挙げられる。
一般式(I) の化合物の製造方法及ぴデュアル阻害作用については WO 9 9 / 3 5 1 4 6号公報に、 N— [ 4 - ( 3—クロ口一 4 _フルオロフェニル) ァミノ一 7— [ 3— (4一モルホリニル) プロボキシ] キナゾリン一 6 _ィル] アクリルアミ ド の製造方法及びデュアル阻害作用については WO O 0 / 3 1 0 4 8号公報に記載さ れている。
本発明に係るデュアル阻害薬には上記した全ての化合物の他に、 デュアル阻害作 用を有するその他の化合物 (例えば、 WO 0 2 / 0 6 6 4 5 1に記載されている化 合物) が含まれる。
本発明の阻害剤を医薬として用いる場合、 本発明の阻害剤を製薬上許容しうる担 体 (賦形剤、 結合剤、 崩壊剤、 矯味剤、 矯臭剤、 乳化剤、 希釈剤、 溶解補助剤等) と混合して得られる医薬組成物あるいは製剤 (錠剤、 ピル剤、 カプセル剤、 顆粒剤
、 散剤、 シロップ剤、 ェマルジヨン剤、 エリキシル剤、 懸濁剤、 溶液剤、 注射剤、 点滴剤あるいは坐剤等) の形態で経口的又は非経口的に投与することができる。 本発明において、 非経口とは、 皮下注射、 静脈内注射、 筋肉内注射、 腹腔内注射 あるいは点滴法等を含むものである。
経口投与用の固形投与剤型としては、 散剤、 顆粒剤、 錠剤、 ピル剤、 カプセル剤 等の上記したものがあげられる。 そのような剤型において、 活性成分化合物は薬学 上許容され得る少なくとも一つの添加物 (不活性希釈剤、 滑沢剤、 保存剤、 抗酸化 剤、 崩壊剤、 結合剤、 増粘剤、 緩衝剤、 甘味付与剤、 フレーバー付与剤、 パーフユ ーム剤等) を含むことができる。
経口投与用の液剤は、 医薬として許容されるェマルジヨン剤、 シロップ剤、 エリ キシル剤、 懸濁剤、 溶液剤等が挙げられ、 それらは当該分野で普通に用いられる不 活性希釈剤を含んでいてもよい。
注射用調剤 (無菌注射用水性懸濁物あるいは油性懸濁物等) は、 適当な分散化剤 又は湿化剤及び懸濁化剤等を用いて当該分野で知られた方法で調製することができ る。 その無菌注射用調剤は、 また、 希釈剤あるいは溶剤を用いた無菌の注射のでき る溶液または懸濁液であってもよい。 さらに、 通常溶剤又は懸濁化溶媒として無菌 の不揮発性油も用いることができる。 このためには、 いかなる不揮発性油も脂肪酸 も使用できる。
直腸投与用の坐剤は、 その薬物と適当な非刺激性の補形剤、 例えば常温では固体 であるが、 腸管の温度では液体で、 直腸内で融解し、 薬物を放出するもの等と混合 して製造することができる。
投与量は、 年齢、 体重、 一般的健康状態、 性別、 食事、 投与時間、 投与方法、 排 泄速度、 薬物の組合せ、 治療を行っている患者のそのときの病状の程度に応じ、 そ れらあるいはその他の要因を考慮して決められる。例えば上記一般式(I) で表され る化合物を使用する場合、 その 1日の投与量は、 患者の状態や体重、 化合物の種類 、投与経路等によって異なるが、経口的には 0. 0 1〜1 0 0 O in g Z k g体重 Z日
、好ましくは 0. 0 5〜5 0 O m g / k g体重/日を、一日 1〜数回に分けて投与す る。 また、 非経口的には、 皮下、 静脈内、 筋肉内又は直腸内に、 約 0 . 0 1〜5 0 m g/k g体重 日、 好ましくは 0. 01〜201118ノ¾: 8体重 Z日投与するのが 好ましい。
本発明の Her2又は 及び EGFRの発現又は活性化した患者に用いる予防又はノ及び 治療剤は、 Her2又は 及び EGFRの発現又は活性を検査し、 Her2又はノ及ぴ EGFRが過 剰発現又は活性化していると判断された場合には、 Her2又は 及ぴ EGFRの発現又は 活性化に起因する疾患を患っていると判定し、 当該患者に使用し得るか若しくは使 用すべきであることを記載した書類とともにパッケージすることによって、 好適に 医薬品として提供される。
(実施例)
以下、 本発明について実施例を挙げて詳細に説明するが、 その要旨を超えない限 り、 本発明は以下に限定されるものではない。
実施例 1
EGFRチロシンキナーゼ阻害作用
(方法)
試験に用いた薬剤 PD 0183805は、 EGFRチロシンキナーゼを阻害し EGFR過剰発現癌 A431に対して in vivo制癌効果を示すことが知られている "。 また、 PD 0183805の 2 塩酸塩 CI-1033は MDA- MB- 453細胞をハーレギュリン刺激した時の Her2、 erbB3そして erbB4のチロシンリン酸化を阻害することが報告されている 2)
以下の記載において PD 0183805を PD、 PD 0183805の 2塩酸塩 CI- 1033を PD · 2HC1 と略す。 PDの化学名及び化学構造は下記のとおりである。
N- [4 - (3—クロロー 4—フノレオロフェニノレ) アミノー 7_ [3— (4—モノレ ホリニル) プロポキシ] キナゾリン一 6—ィル] アクリルアミ ド
Figure imgf000019_0001
7 また、 PD及ぴ PD · 2HC1の合成は、 WO 00/3 1 048号公報に記載された方法 に準じて行なった。
1) Vincent, P. W., Patmore, S. J. , Bridges, A. J., Kirkish, し S. , Dudeck, R. C. , Leopold, W. R. , Zhou, H. , Elliott, W. L. Proc. Am. Assoc. Cancer Res. , 40: 117, 1999.
2) Slichenmyer, . J. , Elliott, . L. and Fry, D. W. Semin. Oncol. , 28: 80, 2001.
ヒト類表皮癌細胞 A431 (東北大学加齢医学研究所 医用細胞資源センタ一より供 与;カタ口グ番号 TKG-0182、 または ATCCより購入の場合; ATCC番号 CRL- 1555) より 得られた部分的に精製された EGFRを用い、 Linda J. Pikeらのチ口シンキナーゼ活 性測定方法 (Proceedings of the National Academy of Science of the U. S. A., 1982, 79, 1433)を改良して行った。 詳しい方法は以下の通りである。
A431細胞を 10%FBS添加 DMEM培地中で 3 Ί。じ、 5%炭酸ガス下で培養し、 この細胞 を 10 mM HEPES緩衝液(pH7.4)、 0.25 Mサッカロース、 0.1 mM EDTAを含む溶液中で ホモジネート後、 3, 000 XGで 5分間遠心分離し、 更にその上清を 100,000XGで 3 0分間遠心分離を行い A431細胞膜画分を得、 これを酵素源である部分精製 EGFRとし て測定に供した。
A431細胞膜画分 (1 0〜1 5 β g), 30 mM HEPES緩衝液 (pH7.4)、 2 mM MnCl2 、 100 μΜ Na3V04N 及ぴジメチルスルホキシド (DMS0)に溶解した薬剤の反応混液 ( 終濃度 1% DMS0) に、 1 00 n gの EG Fを加えた後、 合成基質アンジォテンシ ン I I (Asp- Arg- Val- Tyr - lie- His - Pro- Phe) 50 μ g、 アデノシン三リン酸 (γ - 3 2 Ρ -標識体 3 7KBqを含む) 最終濃度 1 O Mを加えて反応を開始した。 この時 の容量は 60 μ Lである。
反応は氷中にて 30分間行い、 1 0 mg/mL牛血清アルブミンを 6 Lと 20 %トリクロ口酢酸 25 μ L加えて反応を停止し、 そのまま氷中に 3 0分間放置した その後 5000Gで 2分間遠心した後、 上清を 40 μ Lサンプリングして Ρ 8 1 ホスホセルロースペーパーに吸着させた。 これを 0. 75%リン酸水に 5分間浸し て洗浄する操作を 4回繰り返した後ぺ一パ一を取り出し、 液体シンチレーションカ ゥンターで32 Pのカウントを測定し、 この値を Aとした。
同時に薬剤を添加しない反応、 薬剤および E G F共に添カ卩しない反応の力ゥント も測定し、 それぞれ B、 Cとした。
これらの値から、 チロシンキナーゼ阻害率は、 下記の式により求められる。 阻害率(%)= 100- {(A-C) I (B-C)} X 100
薬剤の添加濃度を変化させて得られた阻害率より I C50値 (50%阻害濃度) を 算出した。 結果を下記表に示す。
(表 1)
Figure imgf000021_0001
実施例 2
細胞 He r 2チロシンキナーゼ阻害作用
(方法)
細胞は 659番目のパリンをグルタミン酸に置換することにより恒常的に活性化 した変異 C- erbB2で形質転換した NIH3T3マウス繊維芽細胞株 (東北大学加齢医学研究 所 医用細胞資源センターより供与;カタログ番号 TKG-0298) を用いた (以下 A4細 胞と記す。)。 この細胞株は 10%FBS添加 DMEM/F12混合培地(以下アツセィ培地と記す 。) により 37°C、 5%炭酸ガス下でプラスチック培養皿中で培養維持した。
アツセィ培地に懸濁した A4細胞を 1 2ゥエルプレートに 3X105/well蒔き込み、 コンフレントになった細胞を薬剤とともに 2時間 37°Cで培養した。細胞を PBSで 1回 洗浄した後、 細胞溶解バッファ (60 mM トリス (pH6.8)、 2% SDS、 10% グリセロー ル、 5%ベータメルカプトエタノール、 0.001%ブロモフエノールブルー)に再懸濁し 、 超音波処理したものを全細胞溶解液としてウェスタンプロット法に用いた。
蛋白量 25 g分の全細胞溶解液を 7.5% SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動にかけ た後、 PVDF膜に転写した。 膜をブロッキングした後、 0. 1%ツイーン 20添カ卩トリス緩 衝液中で抗ホスホチロシン マウスモノクローナル抗体 PY20 (Transduction Laboratories, カタ口グ番号 P11120)とィンキュベーシヨンし、 次に HRP標識抗マゥ ス 2次抗体(DAK0、 カタ口グ番号 P0447)で処理した。 膜を化学発光試薬 ECL western blotting detection reagents (Amersham pharmacia biotech、 ス-タロク番号 RPN2209) で処理し化学発光をルミノ C C Dカメラで撮影した。 化学発光の撮影と画像解析は Macintosh版デンシトグラフ(ATT0、 製品型式 AE- 6930)を用いて行った。
得られたリン酸化シグナルを定量化し、 化合物非添加時のシグナルを 1 0 0 %コ ントロールとし、 パックグラウンドシグナルを 0 %とし、 薬剤によるリン酸化阻害 を%コントロールで評価した。 結果を下記表に示す。
(表 2 )
Figure imgf000022_0001
実施例 1、 2の結果より、 PDは Her2又は EGFRのいずれに対しても阻害作用を示す こと、 即ち、 PDが Her2又は Z及び EGFR阻害剤として作用することが理解できる。 実施例 3
in vivo制癌効果
(方法)
ヒト膝癌 HPAC (ATCC番号 CRL-2119)、 ヒト大腸癌 LS174T (ATCC番号 CL- 188) そして ヒ ト肺癌 NCI- H520 (ATCC番号 HTB - 182) は ATCCより購入した。 ヒ ト子宮頸癌 E180は 東北大学加齢医学研究所 ·医用細胞資源センターより供与いただいた (カタログ番 号 TKG- 0437、 ATCCより購入の場合は ATCC番号 HTB- 33)。 Balbん雌ヌードマウス ( Balbん AJcl- nuマウス、 日本クレア社、入荷時 5週令) の背部皮下に P B Sに懸濁し た培養ヒ ト癌細胞を 5 Χ 106/100 /ί 1移植し、 7日前後経過して移植腫瘍の平均体積 がほぼ 100 賺 3となった時点で各群の平均腫瘍体積値が一定になるように 1群 4匹 ずつ群分けを行った。
腫瘍体積値はノギスで長径と短径を測定し、 [ (短径) 2 Χ (長径ノ2 ) ] =腫瘍 体積 [讓 3]とした。 群分けを行った日から 14日間連日薬剤を 1日 1回強制経口投 与し、 対照群のマウスには薬剤を与えなかった。 投与開始日の腫瘍体積値を 1とし た相対腫瘍増殖率を対照群と薬剤処理群で算出した。 制癌効果を%コントロールで 示した。 %コントロールは下記式により算出した。
%コントロール = [(薬剤処理群の最終日の平均相対腫瘍増殖率一 1) / (対照群の 最終 3の平均相対腫瘍増殖率一 1)] X I 00
結果を下記表に示す。
(表 3)
Figure imgf000023_0001
(表 4)
Figure imgf000023_0002
(表 5)
Figure imgf000023_0003
(表 6)
Figure imgf000023_0004
上記各表に示した結果から、 Her2又はノ及び EGFR阻害剤は、 (EGFR、. Her2両陽性) 、 (EGFR陽性、 Her2陰性) 又は (EGFR陰性、 Her2陽性) の癌細胞に対して増殖抑制効 果を示すこと、 即ち、 Her2又は/及び EGFR阻害剤は Her2又は 及び EGFRの過剰発現
2 又は活性化による疾患の予防 ·治療に有効であることが理解できる。
実施例 4
ウェスタンブロット法による EGFR又は Her2の発現確認
(方法)
ヒト膝癌 HPAC (ATCC番号 CRL- 2119)、 PANC1 (ATCC番号 CRL- 1469)、 ヒ トリンフォー マ Daudi (ATCC番号 CCL- 213)、 ヒト大腸癌 LS174T (ATCC番号 CL- 188) は ATCCより購入 した。 ヒ ト外陰癌 A431 (カタログ番号 TKG- 0182)、 ヒト子宮頸癌 ME180 (カタログ番 号 TKG-0437)、ヒト舌癌 HSC- 3 (カタ口グ番号 TKG-0484)、 ( -4(カタ口グ番号 TKG- 0489 ) は東北大学加齢医学研究所 ·医用細胞資源センターより供与いただいた。
100應培養皿でほぼコンフレントになるまで細胞培養した。 100匪培養皿の培地を 除去し PBSで 1回洗浄した後に約 0. 6mLの RIPAバッファ (50mM トリス(pH7. 4)、 150mM 塩化ナトリゥム、 1% NP- 40、 0. 25%デォキシコール酸、 lmM EDTA、 プロテアーゼィ ンヒビターカクテル) を添加し、氷上で 1 0分間静置した。細胞溶解液を 1. 5mL遠心 チューブに回収して 10, OOOrpmで 10分間冷却遠心した。上清を別なチユーブに移して この細胞溶解液をウェスタンブロット法に用いた。
蛋白量 25 g分の細胞溶解液を 7. 5% SDS-ポリアクリルアミド電気泳動にかけた後 PVDF膜に転写した。 膜をプロッキングした後、 0. 1%ツイ一ン 20添カ卩トリス緩衝液中 で EGFRに対する特異抗体(Santa Cruz Biotechnology, カタログ番号 sc- 03)または Her2に対する特異抗体(Upstate biotechnology カタログ番号 06- 562)とインキュべ ーシヨンし、 次に HRP標識抗ゥサギ 2次抗体(ICN Pharmaceuticals カタログ番号 55689)で処理した。 膜を化学発光試薬 ECL western blotting detection reagents (Amersham pharmacia biotech、 カタ口グ番号固 2209)で処理しィ匕学発光を ルミノ C C Dカメラで撮影した。
図 1に画像を示した。 また、 下記表に図 1中の各レーンの説明を示した。 (表 7 )
レーン 細胞株 上段図 下段図
EGra発現 Her2発現
1 HPAC 陽性 陽性
2 PANC1 陽性 陽性
3 ME180 陽性 陰性
4 Daudi 陰性 陰性
5 A431 陽性
6 LS174T 陰性 陽性
7 HSC3 陽性
8 HSC4 陽性 陽性
実施例 5
RT - PCR法による EGFR又は Her2の発現確認
(方法)
Molecular Cloning, A Laboratory Manual Vol. 1, Second Editionに従レヽ実験 行なった。 以下に詳細に記述する。
癌細胞から S. N. A. P. ™ total RNA isolation kit (invitrogen, カタログ番号 45-0472) により total RNAを抽出した。 得られた total RNAのうち 1 gを用い逆転写 反応を行なった。 逆転写反応は 1st Strand cDNA Synthesis Kit for RT- PCR (Roche 、 カタログ番号 1 483 188) を用いて行なった。
このときのプライマーとしてはランダムプライマー p (dN) 6を用いた。 得られた cDNAの 1 μ Lを用いて PCRを行った。 EGFR mRNAの検出時はプライマーは Human Epidermal growth factor receptor and GAPDH genes Dual - PCR kit (Maxim Biotech 、 カタログ番号 DP- 10065- G) 添付のプライマーを用い、 酵素は TaKaRa Ex Taq™ (宝 酒造、カタログ番号 RR001A)を用いた。反応条件は 96°C 1分 1サイクル、%°C 1分 58 °C 1分 30秒 30サイクル、 72°C 10分 1サイクルで行なった。 Her2 mRNAの検出時は プライマーは RT- PCR primer set HUMAN erb - B2 (CLP, カタログ番号 5254· H) 添付の プライマーを用い、 酵素は TaKaRa Ex Taq™ (宝酒造、 カタログ番号 RR001A) を用い た。反応条件は 94°C 5分 60°C 5分 1サイクル、 72°C 2分 94°C 1分 60°C 1分 40サイ クル、 72°C10分 1サイクルで行なった。得られた PCR産物についてァガロース電気泳 動を行い、 発現の有無の確認を行なった。 上記実施例 4、 5の結果から、 ウェスタンプロット法や RT-PCR法により Her2又は
EGFRの発現確認が可能であることがわかる。
また、 上記実施例 2、 4の結果から、 Her2又は EGFR活性化の検査が可能である ことが分かる。 このような検査法を用いて患者における Her2又は 及び EGFRの発 現又は活性を検査し、 Her2又はノ及ぴ EGFRが過剰発現又は活性化していると判断 された場合には、 Her2又はノ及ぴ EGFRの発現又は活性化に起因する疾患を患って いると判定し、 本発明の医薬品を投与する。
産業上の利用可能性
本発明の阻害剤は、 上記のように癌患者に対する有効な治療法であることに加え 、 前立腺癌や乳癌でのホルモン感受性癌から抵抗性癌への移行を防ぐための予防又 は Z及び治療薬としても期待できる。 更に、 固形癌及び肉腫の成長に伴う血管新生 、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生、 動脈硬化、 乾癬等の予 防又は 及び治療薬としても期待できる。 本出願は、 日本で出願された特願 2 0 0 2 - 1 6 2 1 3 0を基礎としており、 そ れらの内容は、 本明細書に全て包含される。

Claims

請求の範囲
1 . Her2又は Z及ぴ EGFRの発現又は活性を検出するための検査により被検対象の Her2又は Z及ぴ EGFRの発現又は活性を診断し、 その結果、 Her2又は/及び EGFRが過 剰発現又は活性化していると判断された被検対象に対して投与するための Her2又は /及び EGFR阻害剤。
2 . Her2又は Z及び EGFRの活性を検出するための検查により被検対象の Her2又は /及び EGFRの活性を診断し、 その結果、 Her2又は Z及ぴ EGFRが活性化していると判 断された被検対象に対して投与するための請求の範囲 1に記載の阻害剤。
3 . Her2及び EGFRの発現又は活性を検出するための検查により被検対象の Her2及 ぴ EGFRの発現又は活性を診断し、 その結果、 Her2及び EGFRが過剰発現又は活性化し ていると判断された被検対象に対して投与するための請求の範囲 1に記載の阻害剤
4 . Her2及ぴ EGFRの活性を検出するための検査により被検対象の Her2及ぴ EGFR の活性を診断し、 その結果、 Her2及び EGFRが活性化していると判断された被検対象 に対して投与するための請求の範囲 3に記載の阻害剤。
5 . 被検対象が、 Her2又は/及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患を患 つていると予想される患者である、 請求の範囲 1から 4のいずれか 1項に記載の阻 害剤。
6 . 被検対象が、 Her2及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患を患ってい ると予想される患者である、 請求の範囲 1カゝら 4のいずれか 1項に記載の阻害剤。
7 . 被検対象がヒトである、 請求の範囲 1から 6のいずれか 1項に記載の阻害剤
8 . Her2又は Z及ぴ EGFRの発現又は活性を検出するための検査が体外検査である 請求の範囲 1から 4のいずれか 1項に記載の阻害剤。
9 . Her2及ぴ EGFRの発現又は活性を検出するための検査が体外検査である請求の 範囲 1から 4のいずれか 1項に記載の阻害剤。
1 0 . Her2阻害剤及び EGFR阻害剤からなる合剤である請求の範囲 3に記載の阻害 剤。
1 1. Her2阻害剤及び EGFR阻害剤を同時に、 別々に、 又は経時的に間隔を置いて 投与するための請求の範囲 1力 ら 9のいずれか 1項に記載の阻害剤。
1 2. 体外検査が、 抗体を用いた免疫学的方法又は核酸及び核酸誘導体を用いた ハイブリダイゼーション法である請求の範囲 8又は 9に記載の阻害剤。
1 3. 抗体を用いた免疫学的方法が、 固相酵素免疫検定法、 酵素一結合免疫アツ セィ法、 ラジオィムノアッセィ法、 免疫組織化学的方法、 及びウェスタンプロット 法からなる群より選ばれる方法である請求の範囲 12に記載の阻害剤。
14. 核酸及ぴ核酸誘導体を用いたハイブリダィゼーシヨン法が、 RT— PCR 法、 I SH法、 F I SH法、 ノーザンプロット法、 及びサザンブロット法からなる 群より選ばれる方法である請求の範囲 1 2に記載の阻害剤。
1 5. 下記一般式 (I)
(R"n (a)
Figure imgf000028_0001
{式中、 Xは N又は CHであり ; Yが CR1であって、 Vが Nであるか;又は Yが Nであって、 Vが CR1であるか;又は Yが CR1であって、 Vが CR2であるか; 又は Yが CR2であって、 Vが CR1であり ; R1は アルキル、 Ci_4アルコキ シ、 CH3S02CH2CH2NHCH2— A r _ (ここで、 Arはフエニル、 フラン 、 チォフェン、 ピロール及びチアゾールから選択され、 その各々は所望により 1も しくは 2個のハロゲン、 C 4アルキル又は Ci_4アルコキシで置換されていても ょレ、。) 又は一 C≡C— C (R6) (R7) (R8) (ここで、 R6、 R7、 R8はそれぞ れ独立して、 水素原子、 ヒドロキシ、 ハロゲン、 C _4アルキル又は アルコ キシ、 又は、 環が水素原子又は アルキルで置換されていてもよく、 環内に O 、 S又は Nから選ばれる 1から 2個のへテロ原子を含んでいてもよい C36のシク 口アルキルを表す。) を表し; R2は水素、 ハロゲン、 ヒ ドロキシ、 アルキル 、 じい アルコキシ、 じ アルキルァミ ノ、 ジ [。 アルキル] アミノ及ぴ一N HCO-R9 (ここで、 R9は Ci— 4アルキル、 アルコキシ、 C24ァルケ二 ル又は C2_4アルキニルを示す。) からなる群から選択され; Uは R3基で置換され 、 かつさらに所望により独立に選択される少なくとも 1個の R4基で置換されてい てもよいフエニル、 ピリジル、 3H—イミダゾリル、 インドリル、 イソインドリル 、 インドリニノレ、 イソインドリ-ル、 1H—インダゾリル、 2, 3—ジヒ ドロ一 1 H—インダゾリル、 1 H—ベンズイミダゾリル、 2, 3—ジヒ ドロ _ 1 H—ベンズ イミダゾリル又は 1 H—ベンゾトリアゾリル基を表し; R3はベンジル、 ハロー、 ジハ口一及ぴトリハロベンジル、 ベンゾィル、 ピリジルメチル、 ピリジルメ トキシ 、 フエノキシ、 ベンジルォキシ、 ハロー、 ジハロー及びトリハロベンジルォキシな らびにベンゼンスルホ-ルからなる群から選択されるか;又は R3はトリハロメチ ルベンジル又はトリハロメチルベンジルォキシを表すか;又は R 3は上記式 (a) の基を表し (式中、 R5は各々独立にハロゲン、 Ci_4アルキル及び Ci_4アルコキ シから選択され;かつ、 nは 0〜3である) ; R4は各々独立にヒ ドロキシ、 ハロゲ ン、 4アルキル、 C2_4アルケニル、 C2_4アルキニル、 アルコキシ、 ァ ミノ、 じ卜 アルキルァミノ、 ジ [じ アルキル] ァミノ、 4アルキルチオ、 。丄— 4アルキルスルフィニル、 C卜4アルキルスルホニル、 Ci— 4アルキルカルボ- ル、 カルボキシ、 力ルバモイル、 C卜 4アルコキシカルボニル、 4アルカノィ ルァミノ、 N— ( い アルキル) カルパモイル、 N, N—ジ (Ci アルキル) カルパモイル、 シァノ、 ニトロ及びトリフルォロメチルである。 } で示される置換へ テロ芳香族化合物、 もしくはその薬学的に許容される塩、 それらの水和物もしくは 溶媒和物、 それらの光学活性体もしくはラセミ体、 又は、 それらのジァステレオマ —混合物である請求の範囲 1から 14のいずれ力 1項に記載の阻害剤。
16. (4— (3—フルォロベンジルォキシ) 一フエニル) 一 (6— (5— ((
2—メタンス ホニルーェチルァミノ) メチル) 一フラン一 2—ィル) 一ピリ ド [ 3, 4 - d] ピリミジン一 4—ィル) 一ァミン;
(4—ベンジルォキシフエ-ル) 一 (6— (5— ((2—メタンスノレホニルーェチル ァミノ) 一メチル) 一フラン一 2-ィル) 一キナゾリン一 4—ィル) 一ァミン; N- {4一 [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエ二ル} —6— [5 - ({[2 - ( メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一2—フリル] —4—キナゾリンァ ミン;
N- [4— (ベンジルォキシ) フエニル] _ 7—メ トキシー 6— [5 - ({[2 - ( メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) _2—フリル] —4—キナゾリンァ ミン;
N— ( 1 _ベンジル一 1 H—インダゾール一 5—ィノレ) 一7—メ トキシ一 6— [5 - ({[2- (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一2—フリル] —4一 キナゾリンァミン;
N- {3—フルオロー 4一 [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエ二ル} -6- [
5 - ({[2 - (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一2—フリル] _4 —キナゾリンァミン;
N— [ 1 - (3—フルォロベンジル) 一 1 H—インダゾール— 5—ィル] ー6— [ 2- ({[2 - (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一 1, 3 _チアゾー ル一4一ィル] —4—キナゾリンァミン;
6 - [5 - ({[2_ (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一2—フリル ] 一 N— [4 - (フエニノレスノレホニノレ) フエ二ノレ] 一 4ーキナゾリンァミン;
N— {3—フルオロー 4一 [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエ二ル} —6— [ 2- ({[2- (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) ー 1, 3—チアゾ一 ルー 4—ィル] 一 4—キナゾリンァミン;
N- ( 1—ベンジル _ 1 H—インダゾールー 5—ィル) 一6— [2— ({[2— (メ チルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一 1, 3—チアゾ一ノレ _ 4—ィル] - 4ーキナゾリンァミン;
N— (3—フルォロ 4一べンジルォキシフエニル) 一6— [5— ({[2— (メチ ルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一4一フリル] —4—キナゾリンァミン
N- (3—クロ口 _ 4一べンジルォキシフエニル) 一6— [2- ({[2— (メチル スルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一4—フリル] —4—キナゾリンァミン; N— {3—クロ口一4— [(3—フルォロベンジル) ォキシ] フエ二ル} —6— [5 一 ({[2- (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) _2—フリル] 一 4— キナゾリンァミン ;
N— ( 1—ベンジ/レ一 1 H—インダゾール一 5—ィノレ) 一7—フノレオロー 6— [5 一 ({[2 - (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一2—フリル] _4一 キナゾリンァミン ;
N- (3—トリフノレオロメチルー 4—ペンジノレオキシフエニル) 一 6— [5 - ({[ 2 - (メチルスルホニル) ェチル] アミノ} メチル) 一4一フリル] —4—キナゾ リンァミン;
N- [4— (3—クロ口一 4—フノレオロフェニノレ) ァミノ一 7— [3— (4—モノレ ホリニル) プロボキシ] キナゾリン一 6—ィル] アクリルアミ ド;
N- {4- [(3—クロ口一 4—フルオロフェニノレ) ァミノ] —7— [3—メチノレ一 3— (4—メチルー 1—ピぺラジュル) _ 1—ブチュル] 一 6—キナゾリ二ル} ァ クリルアミ ド;又は
N— {3—クロ口一 4— [(3—フルォロベンジノレ) ォキシ] フエ二ル}— 6— [5— ({ [2- (メタンスルホニル) ェチル] アミノ}メチル) 一 2—フリル] —4ーキ ナゾリンァミンもしくはその薬学的に許容される塩、 それらの水和物もしくは溶媒 和物、 それらの光学活性体もしくはラセミ体、 又は、 それらのジァステレオマー混 合物である請求の範囲 1から 15のいずれか 1項に記載の阻害剤。
1 7. N- [4— (3—クロ口一 4一フルオロフヱニル) ァミノ] —7— [3— (4—モルホリニル) プロボキシ] キナゾリン一 6—ィル] アクリルアミ ド、 又は
N— {3—クロロー 4— [(3—フルォロベンジノレ) ォキシ] フエニル }— 6— [5—
({ [2- (メタンスルホニル) ェチル] アミノ}メチル) _2—フリル] —4ーキ ナゾリンァミンもしくはその薬学的に許容される塩、 それらの水和物もしくは溶媒 和物、 それらの光学活性体もしくはラセミ体又はそれらのジァステレオマ一混合物 である請求の範囲 1から 1 6のいずれか 1項に記載の阻害剤。
1 8 . 請求の範囲 1から 1 7のいずれか 1項に記載の阻害剤を有効成分として含 有し、 かつ製薬上許容され得る担体を含有する医薬組成物。
1 9 . Her2又は Z及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患の予防又は/及 ぴ治療薬である請求の範囲 1 8に記載の医薬組成物。
2 0 . Her2又は Z及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、 癌及び肉 腫の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生 、 動脈硬化、 又は乾癬である請求の範囲 1 9に記載の医薬組成物。
2 1 . Her2又は 及び EGFRの発現又は活性を検出するための検査により被検対象 の Her2又は Z及び EGFRの発現又は活性を診断し、 その結果、 Her2又は Z及ぴ EGFRが 過剰発現又は活性化していると判断された被検対象に対して投与するための、 Her2 又は/及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患の予防又は 及ぴ治療薬。
2 2 . Her2又はノ及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、 癌及ぴ肉 腫の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生 、 動脈硬化、 又は乾癬である請求の範囲 2 1に記載の予防又は/及び治療薬。
2 3 . Her2又は/ /及び EGFRの発現又は活性を検出するための検査により被検対象 の Her2又は//及ぴ EGFRの発現又は活性を診断し、 その結果、 Her2又は/及び EGI¾が 過剰発現又は活性化していると判断された被検対象に対して有効量の Her2又は/及 ぴ EGFR阻害剤を投与することを特徴とする、 Her2又は 及ぴ EGFRの過剰発現又は活 性化に起因する疾患の予防又は/及び治療方法。
2 4 . Her2又は 及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、 癌及び肉 腫の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生 、 動脈硬化、 又は乾癬である請求の範囲 2 3に記載の予防又は/及ぴ治療方法。
2 5 . 請求の範囲 1 8から 2 0のいずれか 1項に記載の医薬組成物、 及ぴ該医薬 組成物を Her2又は/及ぴ EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患の予防又は/及び 治療に使用し得るか又は使用すべきであることを記載した書類とを含む商業的パッ ケージ。
2 6 . Her2又は/及び EGFRの過剰発現又は活性化に起因する疾患が癌、癌及ぴ肉腫 の成長に伴う血管新生、 癌転移に伴う血管新生、 糖尿病性網膜症に伴う血管新生、 動脈硬化、 又は乾癬である請求の範囲 2 5に記載の商業的パッケージ。
3
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005117553A2 (en) 2004-05-27 2005-12-15 The Regents Of The University Of Colorado Methods for prediction of clinical outcome to epidermal growth factor receptor inhibitors by cancer patients
JP2008533490A (ja) * 2005-03-16 2008-08-21 オーエスアイ・ファーマスーティカルズ・インコーポレーテッド 上皮成長因子受容体キナーゼ阻害剤に対する抗癌応答を予測する生物学的マーカー
US8017321B2 (en) 2004-01-23 2011-09-13 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Gefitinib sensitivity-related gene expression and products and methods related thereto
US9714294B2 (en) 2010-05-27 2017-07-25 Genmab A/S Monoclonal antibodies against HER2 epitope
US9862769B2 (en) 2010-05-27 2018-01-09 Genmab A/S Monoclonal antibodies against HER2
US11578141B2 (en) 2011-04-20 2023-02-14 Genmab A/S Bispecific antibodies against HER2 and CD3

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7060808B1 (en) * 1995-06-07 2006-06-13 Imclone Systems Incorporated Humanized anti-EGF receptor monoclonal antibody
US20030224001A1 (en) * 1998-03-19 2003-12-04 Goldstein Neil I. Antibody and antibody fragments for inhibiting the growth of tumors
ZA200007412B (en) * 1998-05-15 2002-03-12 Imclone Systems Inc Treatment of human tumors with radiation and inhibitors of growth factor receptor tyrosine kinases.
PL365999A1 (en) * 1999-05-14 2005-01-24 Imclone Systems Incorporated Treatment of refractory human tumors with epidermal growth factor receptor antagonists
ES2331646T3 (es) 2000-05-19 2010-01-12 Genentech, Inc. Ensayo para la deteccion de genes para mejorar la probabilidad de una respuesta eficaz a una terapia contra el cancer basada en antagonistas de erbb.
WO2002011677A2 (en) * 2000-08-09 2002-02-14 Imclone Systems Incorporated Treatment of hyperproliferative diseases with epidermal growth factor receptor antagonists
US20080008704A1 (en) * 2001-03-16 2008-01-10 Mark Rubin Methods of treating colorectal cancer with anti-epidermal growth factor antibodies
DK2163256T3 (en) 2001-05-11 2015-12-07 Ludwig Inst For Cancer Res Ltd Specific binding proteins and use thereof
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
TW200813014A (en) * 2002-03-28 2008-03-16 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
EP1622941A2 (en) * 2003-03-20 2006-02-08 ImClone Systems Incorporated Method of producing an antibody to epidermal growth factor receptor
CA2538884C (en) * 2003-09-16 2010-09-21 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives as tyrosine kinase inhibitors
EP1667992B1 (en) * 2003-09-19 2007-01-24 Astrazeneca AB Quinazoline derivatives
ES2387809T3 (es) * 2004-03-19 2012-10-02 Imclone Llc Anticuerpo frente al receptor del factor de crecimiento epidérmico humano
KR100832594B1 (ko) * 2005-11-08 2008-05-27 한미약품 주식회사 다중저해제로서의 퀴나졸린 유도체 및 이의 제조방법
WO2009030224A2 (de) * 2007-09-07 2009-03-12 Schebo Biotech Ag Neue chinazolin- verbindungen und ihre verwendung zur therapie von krebserkrankungen
CA2723989C (en) * 2008-05-13 2017-04-25 Astrazeneca Ab Fumarate salt of 4-(3-chloro-2-fluoroanilino)-7-methoxy-6-{[1-(n-methylcarbamoylmethyl)piperidin-4-yl]oxy}quinazoline
WO2011153050A1 (en) 2010-06-02 2011-12-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and use of compounds that bind to her2/neu receptor complex
WO2011153049A1 (en) 2010-06-02 2011-12-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and use of compounds that bind to her2/neu receptor complex
AU2014216178B2 (en) 2013-02-15 2018-06-28 KALA BIO, Inc. Therapeutic compounds and uses thereof
CN105189462B (zh) 2013-02-20 2017-11-10 卡拉制药公司 治疗性化合物和其用途
US9688688B2 (en) 2013-02-20 2017-06-27 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of 4-((4-((4-fluoro-2-methyl-1H-indol-5-yl)oxy)-6-methoxyquinazolin-7-yl)oxy)-1-(2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)butan-1-one and uses thereof
US9468681B2 (en) 2013-03-01 2016-10-18 California Institute Of Technology Targeted nanoparticles
US9890173B2 (en) 2013-11-01 2018-02-13 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
CN106061261B (zh) 2013-11-01 2018-04-24 卡拉制药公司 治疗化合物的结晶形式及其用途
CN103554091B (zh) * 2013-11-05 2016-05-18 沈阳工业大学 喹唑啉衍生物及其制备方法和用途
WO2017003668A1 (en) 2015-07-01 2017-01-05 California Institute Of Technology Cationic mucic acid polymer-based delivery systems
CA3036340A1 (en) 2016-09-08 2018-03-15 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
CA3036336A1 (en) 2016-09-08 2018-03-15 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
MX2019002629A (es) 2016-09-08 2019-10-07 Kala Pharmaceuticals Inc Formas cristalinas de compuestos terapéuticos y usos de los mismos.

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999035146A1 (en) * 1998-01-12 1999-07-15 Glaxo Group Limited Bicyclic heteroaromatic compounds as protein tyrosine kinase inhibitors
WO2000031048A1 (en) * 1998-11-19 2000-06-02 Warner-Lambert Company N-[4-(3-chloro-4-fluoro-phenylamino)-7-(3-morpholin-4-yl-propoxy)-quinazolin-6-yl]-acrylamide, an irreversible inhibitor of tyrosine kinases

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999035146A1 (en) * 1998-01-12 1999-07-15 Glaxo Group Limited Bicyclic heteroaromatic compounds as protein tyrosine kinase inhibitors
WO2000031048A1 (en) * 1998-11-19 2000-06-02 Warner-Lambert Company N-[4-(3-chloro-4-fluoro-phenylamino)-7-(3-morpholin-4-yl-propoxy)-quinazolin-6-yl]-acrylamide, an irreversible inhibitor of tyrosine kinases

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP1510221A4 *

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8017321B2 (en) 2004-01-23 2011-09-13 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Gefitinib sensitivity-related gene expression and products and methods related thereto
EP2949764A1 (en) * 2004-05-27 2015-12-02 The Regents of The University of Colorado Methods for prediction of clinical outcome to epidermal growth factor receptor inhibitors by cancer patients
US9434994B2 (en) 2004-05-27 2016-09-06 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Methods for prediction of clinical outcome to epidermal growth factor receptor inhibitors by non-small cell lung cancer patients
JP2013005800A (ja) * 2004-05-27 2013-01-10 Regents Of The Univ Of Colorado A Body Corporate 癌患者による上皮成長因子受容体阻害薬に対する臨床転帰の予測方法
EP1751309A4 (en) * 2004-05-27 2009-08-05 Univ Colorado ROUTES WITH LOCAL PREFERRED DIRECTION AND LAYOUT GENERATION
EP1751309A2 (en) * 2004-05-27 2007-02-14 The Regents of the University of Colorado Methods for prediction of clinical outcome to epidermal growth factor receptor inhibitors by cancer patients
EP2527460A1 (en) * 2004-05-27 2012-11-28 The Regents of The University of Colorado Methods for prediction of clinical outcome to epidermal growth factor receptor inhibitors by cancer patients
JP2008502328A (ja) * 2004-05-27 2008-01-31 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ コロラド 癌患者による上皮成長因子受容体阻害薬に対する臨床転帰の予測方法
WO2005117553A2 (en) 2004-05-27 2005-12-15 The Regents Of The University Of Colorado Methods for prediction of clinical outcome to epidermal growth factor receptor inhibitors by cancer patients
JP2008533490A (ja) * 2005-03-16 2008-08-21 オーエスアイ・ファーマスーティカルズ・インコーポレーテッド 上皮成長因子受容体キナーゼ阻害剤に対する抗癌応答を予測する生物学的マーカー
US9714294B2 (en) 2010-05-27 2017-07-25 Genmab A/S Monoclonal antibodies against HER2 epitope
US9862769B2 (en) 2010-05-27 2018-01-09 Genmab A/S Monoclonal antibodies against HER2
US10793640B2 (en) 2010-05-27 2020-10-06 Genmab A/S Monoclonal antibodies against HER2 epitope
US11046771B2 (en) 2010-05-27 2021-06-29 Genmab A/S Monoclonal antibodies against HER2
US11091553B2 (en) 2010-05-27 2021-08-17 Genmab A/S Monoclonal antibodies against HER2
US11578141B2 (en) 2011-04-20 2023-02-14 Genmab A/S Bispecific antibodies against HER2 and CD3

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