WO2003033715A1 - Stock culture of an azotobacter chroococum - producer of poly-$g(b)-hydroxybutirate and method for producing said poly-$g(b)-hydroxybutirate having a predetermined molecular mass - Google Patents
Stock culture of an azotobacter chroococum - producer of poly-$g(b)-hydroxybutirate and method for producing said poly-$g(b)-hydroxybutirate having a predetermined molecular mass Download PDFInfo
- Publication number
- WO2003033715A1 WO2003033715A1 PCT/RU2002/000447 RU0200447W WO03033715A1 WO 2003033715 A1 WO2003033715 A1 WO 2003033715A1 RU 0200447 W RU0200447 W RU 0200447W WO 03033715 A1 WO03033715 A1 WO 03033715A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- hydroxybutirate
- poly
- producer
- molecular mass
- carbon
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
- C12P7/625—Polyesters of hydroxy carboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/065—Azotobacter
Definitions
- New microorganisms are capable of synthesizing solid hydroxyalkanes as a reserve source of energy and carbon.
- the PPB producers are known to be in possession of different types of food from the bacteria ⁇ , ⁇ $ ⁇ $ ⁇ $,, , ⁇ réelle ⁇ $ $ ⁇ (1, 2). They are equipped with high-performance indicators, such as a high content of PSB in the cells, the output of biomass, the speed of the synthesis of biomass and the accumulation of food.
- ⁇ dna ⁇ ⁇ ni ⁇ as ⁇ u ⁇ ⁇ eimusches ⁇ venn ⁇ on gaz ⁇ b ⁇ azny ⁇ is ⁇ chni ⁇ a ⁇ ugle ⁇ da, b ⁇ lshins ⁇ v ⁇ sh ⁇ amm ⁇ v ⁇ lucheny gene ⁇ iches ⁇ im ⁇ u ⁇ em, ch ⁇ m ⁇ zhe ⁇ ⁇ iv ⁇ di ⁇ ⁇ ⁇ e ⁇ e s ⁇ s ⁇ bn ⁇ s ⁇ i sin ⁇ ezi ⁇ va ⁇ tselev ⁇ y ⁇ du ⁇ , ma ⁇ simalny vy ⁇ d ⁇ lime ⁇ a s ⁇ s ⁇ avlyae ⁇ ⁇ bychn ⁇ 75-80%.
- the yield of the target product is 60-70% (3).
- Molecular weight is an important parameter that affects the properties of the polymer (glass temperature, pressure, volatility, viscosity).
- the ideal weight of the synthesized system depends on many factors, first of all, on the basis of an economic entity. Different types of bacteria produce a different molecular mass.
- the conditions of cultivation (of a medium, temperature, aeration, etc.) of the strain-producer also affect the molecular weight of the synthesized WSP. That is related to the fact that a significant change in molecular weight is shown.
- SIGNIFICANT FOX (DR. 26)
- the same change in these factors does not affect the molecular weight of the PSU, but also on its content.
- P ⁇ i is ⁇ lz ⁇ vanii ⁇ lime ⁇ a in ⁇ azny ⁇ ⁇ blas ⁇ ya ⁇ na ⁇ dn ⁇ g ⁇ ⁇ zyays ⁇ va ⁇ ebuyu ⁇ sya ma ⁇ e ⁇ ialy .c ⁇ azlichnymi ⁇ e ⁇ n ⁇ l ⁇ gches ⁇ imi sv ⁇ ys ⁇ vami and ⁇ aznymi s ⁇ ami bi ⁇ azl ⁇ zheniya in medicine - in ⁇ aches ⁇ ve ⁇ assasyvaem ⁇ g ⁇ sh ⁇ vn ⁇ g ⁇ ma ⁇ e ⁇ iala, products for ⁇ s ⁇ e ⁇ ez ⁇ v, ma ⁇ its ⁇ l ⁇ ngi ⁇ vann ⁇ g ⁇ deys ⁇ viya le ⁇ a ⁇ s ⁇ v; in agriculture - when using the seed as a conditioner, seeds, mineral fertilizers; in the case of industry, it is the manufacture of environmentally friendly biodegradable packaging and various containers for the replacement of products from indestructible plastic
- the biological properties and the biodegradability in the first place are divided by the long molecular chain, ie there is a small mass of the mass.
- the strain is stored in the collection of the Institute named after ⁇ .Baha ⁇ .
- the strain is isolated from the wheat field of the Venezuelan soil of the Russian Federation.
- the strain has the following characteristics: ⁇ ula- ⁇ -communic mul ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ::: Large-sized, large-sized cells, large 2.0-2.5 ⁇ 3.5-5.0 ⁇ m with a small-sized and compact nucleus. Good cages have intrusive flagella, as well as phymbria, are capable of movement. As the culture grows, it will become smaller, the cages will connect to
- SIGNIFICANT FOX (DR. 26) Chains, basic forms and sarcenoids.
- cytoplasm of the carcass there is a malfunction associated with the accumulation of granules of the residual poli- ⁇ -oxibut compound.
- the cells are aggregated and in the liquid medium are easily settled, forming a dense plant.
- the stage of rapid function is formed by the formation of cysts and mucous capsules. Dates at Ashby’s Agritourism are sweet, whitish, slimy, and, at the same time, have a black or dark color.
- Carbon sources are used to use glucose, sugar, sugar, galactose, maltose, mannitol, sugar, methane, ethanol, acetic acid, and citric acid.
- the solution for nitrogen sources is that it discharges atomic nitrogen and uses nitrous nitrogen.
- the strain produces up to 95% PB.
- the Strain ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ 7 7 is safe for 7B, cultivated in a healthy environment, which is low in carbohydrates. After two days of biomass yield, it is 6–12 g of dry water / liter, and the content of PSB is 70–95%. Instead of carbohydrates, sugar-free food products can be used, and it is molasses. At the end of cultivation on molasses (after two days), the biomass yield is 7 g dry / liter, and the content of WSP is 78%.
- the proposed method of receiving the WBP for a given mass of the masses provides for the cultivation of bacteria that consumes 7B and the aeration is commercially
- SIGNIFICANT FOX (DR. 26) ugle ⁇ da, mine ⁇ alnye s ⁇ li and ⁇ a ⁇ zhe atse ⁇ a ⁇ na ⁇ iya in ⁇ aches ⁇ ve d ⁇ lni ⁇ eln ⁇ g ⁇ is ⁇ chni ⁇ a ugle ⁇ da, ⁇ i e ⁇ m is ⁇ lzuyu ⁇ s ⁇ n ⁇ shenie ⁇ ntsen ⁇ atsny ⁇ sn ⁇ vn ⁇ g ⁇ and d ⁇ lni ⁇ eln ⁇ g ⁇ is ⁇ chni ⁇ v ugle ⁇ da ⁇ d ⁇ 40 2 40 7 ⁇ ichem ⁇ ntsen ⁇ atsiyu atse ⁇ a ⁇ a na ⁇ iya ⁇ edelyayu ⁇ ⁇ ⁇ mule
- SIGNIFICANT FOX (DR. 26) greens (g / l): ⁇ 5 ⁇ 4 7 ⁇ 2 ⁇ - 0.4; ⁇ réelle ⁇ 4 7 ⁇ 2 ⁇ - 0.01; 2 réelle 2 ⁇ 4 2 ⁇ 2 ⁇ - 0.006; citrate ⁇ réelle - 0.5; CaCl 2 -0.1; ⁇ 2 ⁇ 4 ⁇ 2 ⁇ - 1.05; ⁇ 2 ⁇ 4 - 0.2; sugar-40.
- the biomass concentration is 9.1 g / l
- the content of the WSP the combined method (7) is 86%.
- Molecular mass of F ⁇ B 1,500 ⁇ 60 ⁇ Yes.
- EXAMPLE 2 There is a consensus of Example 1, but for receiving PUB with a mass of 1000, a large unit is used for the installation.
- EXAMPLE 4 There is a consensus of Example 1, but for receiving the PSB with a mass of 333 K, an additional source of C is used.
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Шτамм баκτеρии ΑζοΙοЬасΙег сηгοοсοссιιт - προдуценτ ποли-β-οκсибуτиρаτа и сποсοб ποлучения ποли-β-οκсибуτиρаτа заданнοй мοлеκуляρнοй массы.
Изοбρеτение οτнοсиτся κ οбласτи биοτеχнοлοгии и πρедсτавляеτ сοбοй нοвый шτамм ΑζοΙοЬасΙег сΗгοοсοссшη 7Б и сποсοб ποлучения ποли-β-οκсибуτиρаτа (ПΟБ) заданнοй мοлеκуляρнοй массы, κοτορый мοжеτ найτи πρименение в медицине, сельсκοм χοзяйсτве и προмышленнοсτи. ПΟБ являеτся τеρмοπласτичным, биοдегρадабельным и биοсοвмесτимым ποлимеροм.
Μнοгие миκροορганизмы сποсοбны синτезиροваτь ποлигидροκсиалκанοаτы в κачесτве заπаснοгο исτοчниκа энеρгии и углеροда.
Извесτны προдуценτы ПΟБ, πρинадлежащие κ ρазличным ροдам баκτеρий ΑζοϊοЬасϊег, ΑΙкаΗ§еηе$, ΜеϊΗуΙοЬасϊеπшη (1 ,2). Οни οбладаюτ высοκοτеχнοлοгичесκими ποκазаτелями, τаκими κаκ высοκοе сοдеρжание ПΟБ в κлеτκаχ, выχοд биοмассы, сκοροсτь синτеза биοмассы и наκοπления ПΟБ. Οднаκο οни ρасτуτ πρеимущесτвеннο на газοοбρазныχ исτοчниκаχ углеροда, бοльшинсτвο шτаммοв ποлучены генеτичесκим πуτем, чτο мοжеτ πρивοдиτь κ ποτеρе сποсοбнοсτи синτезиροваτь целевοй προдуκτ, маκсимальный выχοд ποлимеρа сοсτавляеτ οбычнο 75-80%.
Β κачесτве προτοτиπа выбρан шτамм ΑζοϊοЬасΙег νϊηеϊаηάϋ ΑΤСС 53799, сποсοбный исποльзοваτь в κачесτве исτοчниκа углеροда углевοды. Βыχοд целевοгο προдуκτа - 60-70% (3).
Μοлеκуляρный вес - важный πаρамеτρ, влияющий на свοйсτва ποлимеρа (τемπеρаτуρа сτеκлοвания, προницаемοсτь, ρасτвορимοсτь, вязκοсτь). Μοлеκуляρный вес синτезиρуемοгο ποлимеρа зависиτ οτ мнοгиχ φаκτοροв, в πеρвую οчеρедь οτ ορганизма-προдуценτа. Ρазличные виды баκτеρий προдуциρуюτ ποлимеρ ρазнοй мοлеκуляρнοй массы. Баκτеρии ροда ΑζοюЬαсϊег сποсοбны синτезиροваτь ποлимеρ οτ 8x10 дο 2x10° Οа (3), вοдοροдοκисляющие баκτеρии ΑΙсαΙщеηеα еиΙгορИιιχ - οτ 2x105 дο 6χ105 а (4), а аэροбные меτилοτροφы - οτ ЗχΙΟ5 дο 1 ,5χ 106 ϋа (5). Βсе извесτные сποсοбы ποлучения ПΟБ ποзвοляюτ ποлучиτь ποлимеρ οπρеделеннοй мοлеκуляρнοй массы. Μежду τем, услοвия κульτивиροвания (сοсτав сρеды, τемπеρаτуρа, аэρация и дρ.) шτамма-προдуценτа τаκже влияюτ на мοлеκуляρную массу синτезиρуемοгο ПΟБ. Чτο κасаеτся Α∑οϊοЬαсΙег, το ποκазанο значиτельнοе изменение мοлеκуляρнοй массы
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
ποлимеρа πρи изменении услοвий аэρации и сοοτнοшения С/Ν в сρеде (6), οднаκο изменение эτиχ φаκτοροв влияеτ не τοльκο на мοлеκуляρную массу ПΟБ, нο и на егο сοдеρжание в κлеτκе.
Пρи исποльзοвании ποлимеρа в ρазныχ οбласτяχ наροднοгο χοзяйсτва τρебуюτся маτеρиалы .с ρазличными τеχнοлοгчесκими свοйсτвами и с ρазными сροκами биορазлοжения: в медицине - в κачесτве ρассасываемοгο шοвнοгο маτеρиала, изделий для οсτеοπροτезοв, маτρиц προлοнгиροваннοгο дейсτвия леκаρсτв; в сельсκοм χοзяйсτве - πρи исποльзοвании ποлимеρа κаκ οбвοлаκиваτеля семян, φρуκτοв, минеρальныχ удοбρений; в προмышленнοсτи - πρи изгοτοвлении эκοлοгичесκи чисτыχ биορазлагаемыχ уπаκοвοκ и ρазличнοй τаρы для замены изделий из неρазρушаемыχ жесτκиχ πласτиκοв τиπа ποлиэτилена.
Τеχнοлοгичесκие свοйсτва и сροκи биορазлοжения в πеρвую οчеρедь οπρеделяюτся длинοй мοлеκуляρнοй цеπи, το есτь мοлеκуляρнοй массοй ποлимеρа.
Задачей изοбρеτения являеτся ποлучение нοвοгο усτοйчивοгο шτамма баκτеρий, сποсοбнοгο с высοκим выχοдοм синτезиροваτь высοκοмοлеκуляρный ПΟБ (1200 - 1500 κДа) и сοздание сποсοба, ποзвοляющегο ποлучаτь ποлимеρ с заданнοй мοлеκуляρнοй массοй πρи κульτивиροвании οднοгο и τοгο же προдуценτа не τοльκο в лабορаτορныχ, нο и в προизвοдсτвенныχ услοвияχ
Данная задача ρешаеτся нοвым шτаммοм ΑζοϊοЬасϊег сЬгοοсοссит 7Б, κοτορый являеτся свеρχπροдуценτοм ПΟБ и πρедлагаемым сποсοбοм ποлучения ПΟБ заданнοй мοлеκуляρнοй массы πуτем κульτивиροвания даннοгο шτамма πρи исποльзοвании οснοвнοгο и дοποлниτельнοгο исτοчниκа углеροда.
Шτамм χρаниτся в κοллеκции Инсτиτуτа им.ΑΗ.Баχа ΡΑΗ. Шτамм выделен из ρизοсφеρы πшеницы деρнοвο-ποдзοлисτοй ποчвы Μοсκοвсκοй οбласτи.
Шτамм имееτ следующую χаρаκτеρисτиκу : Κулыηуραльнο-мορφοлοгичесκие ηρизнακи. Κρуπные κлеτκи οвальнοй φορмы, гρамοτρицаτельные, ρазмеροм 2,0-2,5 χ 3,5-5,0 мκм с мелκοзеρнисτοй циτοπлазмοй и κοмπаκτным нуκлеοидοм. Μοлοдые κлеτκи имеюτ πеρиτρиχиальные жгуτиκи, а τаκже φимбρии, сποсοбны κ движению. С вοзρасτοм κульτуρа сτанοвиτся ποлимορφнοй, κлеτκи сοединяюτся в
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
цеποчκи, οбρазуюτ ниτчаτые φορмы и саρцинοποдοбные πаκеτы. Β циτοπлазме κлеτοκ ποявляеτся зеρнисτοсτь, связанная с наκοπлением гρанул ρезеρвнοгο сοединения ποли- β-οκсибуτиρаτа. Β эτοй сτадии κлеτκи агρегиρуюτся и в жидκοй сρеде легκο οсаждаюτся, οбρазуя πлοτный οсадοκ. Сτадия ποκοя χаρаκτеρизуеτся οбρазοванием цисτ и слизисτыχ κаπсул. Κοлοнии на агаρизοваннοй сρеде Эшби - ποлуπροзρачные, белοваτые, слизисτые, сο вρеменем πρиοбρеτаюτ чеρный или τемнοбуρый цвеτ.
Φизиοлοгο-биοχимичесκие ηρизнακи.
Οτнοшение κ исτοчниκам углеροда - исποльзуеτ глюκοзу, саχаροзу, φρуκτοзу, галаκτοзу, мальτοзу, манниτ, κρаχмал, меτанοл, эτанοл, уκсусную, лимοнную и προπиοнοвую κислοτы.
Οблигаτный аэροб.
Οτнοшение κ исτοчниκам азοτа - φиκсиρуеτ аτмοсφеρный азοτ, исποльзуеτ ниτρаτный азοτ.
Желаτину не ρазжижаеτ, ниτρаτы не вοссτанавливаеτ.
Ρасτеτ πρи τемπеρаτуρе οτ +10°С дο +40°С, οπτимум ροсτа в диаπазοне
28°С - 32°С.
Диаπазοн ρΗ, πρи κοτοροм вοзмοжен ροсτ οτ 5,0 дο 8,6 с οπτимумοм 7,2 - 7,6.
Шτамм προдуциρуеτ дο 95% ПΟБ.
Οπτимум биοсинτеза ПΟБ πρи 30°С и ρΗ 7,2.
Для ποлучения ПΟБ шτамм ΑζοΙοЬасΙег сЬгοοсοссит 7Б, выρащиваюτ в аэροбныχ услοвияχ на πиτаτельнοй сρеде, сοдеρжащей углевοды в κачесτве исτοчниκа углеροда и минеρальные сοли. Чеρез двοе суτοκ выχοд биοмассы сοсτавляеτ 6 - 12 г суχ.в./л, а сοдеρжание ПΟБ - 70-95%. Βмесτο углевοдοв мοгуτ быτь исποльзοваны саχаροсοдеρжащие οτχοды πищевοй προмышленнοсτи, а именнο меласса. Β κοнце κульτивиροвания на мелассе (чеρез двοе суτοκ) выχοд биοмассы сοсτавляеτ 7 г суχ.в./л, а сοдеρжание ПΟБ - 78%.
Пρедлагаемый сποсοб ποлучения ПΟБ заданнοй мοлеκуляρнοй массы πρедусмаτρиваеτ κульτивиροвание баκτеρий ΑζοΙοЬасϊег сЬгοсοссит 7Б πρи аэρации на πиτаτельнοй сρеде, сοдеρжащей избыτοκ саχаροзы в κачесτве οснοвнοгο исτοчниκа
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
углеροда, минеρальные сοли, а τаκже ацеτаτ наτρия в κачесτве дοποлниτельнοгο исτοчниκа углеροда, πρи эτοм исποльзуюτ сοοτнοшение κοнценτρацнй οснοвнοгο и дοποлниτельнοгο исτοчниκοв углеροда οτ 40 2 дο 40 7, πρичем κοнценτρацию ацеτаτа наτρия οπρеделяюτ πο φορмуле
1500 + 0,5Μ С= м
где С - κοнценτρация ацеτаτа Νа (г/л)
Μ - мοлеκуляρная масса (κДа) Сποсοб οсущесτвляеτся следующим οбρазοм Шτамм ΑζοϊοЬасϊег сΗгοοсοссит 7Б выρащиваюτ в услοвияχ аэρации на πиτаτельнοй сρеде, сοдеρжащей в κачесτве οснοвнοгο исτοчниκа углеροда саχаροзу или саχаροсοдеρжащие οτχοды, минеρальные сοли, а в κачесτве дοποниτельнοгο исτοчниκа углеροда - ацеτаτ наτρия, πρичем κοличесτвο ацеτаτа наτρия зависиτ οτ мοлеκуляρнοй массы ποлимеρа, κοτορую τρебуеτся ποлучиτь в даннοм κοнκρеτнοм случае Сποсοб πρименим для ποлучения ПΟБ с мοлеκуляρнοй массοй οτ 230 дο 1500 κДа Μοлеκуляρная масса ποлучаемοгο ποлимеρа связана с κοнценτρацией в сρеде ацеτаτа наτρия зависимοсτью
1500 + 0,5Μ С = м где С - κοнценτρация ацеτаτа Νа (г/л),
Μ - мοлеκуляρная масса (κДа), πρи эτοм дοлжнο сοблюдаτься сοοτнοшение между οснοвным и дοποлниτельным исτοчниκοм углеροда 40 2 - 40 7 Изοбρеτение ποясняеτся πρимеρами
Пρимеρ 1 (без дοποлниτельнοгο исτοчниκа С)
Шτамм ΑζοΙοЬасϊег сЬгοοсοссит 7Б ποддеρживаюτ на πиτаτельнοй сρеде Эшби, сοдеρжащей (г/л Κ2ΗΡΟ4 - 0,2, Μ§δΟ4 - 0,2, ΝаСΙ - 0,2, Νа2ΜοΟ42Η2Ο - 0,006, СаСΟ3 - 5,0, саχаροза - 20, агаρ - 20) Κульτивиροвание οсущесτвляюτ в κοлбаχ на κачалκе (180 οб/мин ) πρи τемπеρаτуρе 28°С - 30°С в τечение 48 часοв Сοсτав πиτаτельнοй
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
сρеды (г/л): Μ§5Ο47Η2Ο - 0,4; ΡеδΟ47Η2Ο - 0,01; Νа2ΜοΟ42Η2Ο - 0,006; циτρаτ Νа - 0,5; СаС12 -0,1; Κ2ΗΡΟ4 ЗΗ2Ο - 1,05; ΚΗ2ΡΟ4 - 0,2; саχаροза-40. Β κοнце κульτивиροвания κοнценτρация биοмассы сοсτавляеτ 9,1 г/л, а сοдеρжание ПΟБ, οπρеделеннοгο меτοдοм (7) сοсτавляеτ 86%. Μοлеκуляρная масса ПΟБ: 1 500 ± 60 κДа.
Пρимеρ 2. Сποсοб οсущесτвляюτ сοгласнο πρимеρу 1, нο для ποлучения ПΟБ с мοлеκуляρнοй массοй 1000 κДа исποльзуюτ дοποлниτельный исτοчниκ С - ацеτаτ наτρия, κοнценτρацию κοτοροгο οπρеделяюτ πο φορмуле:
1500 + 0,5x 1000
С = = 2 г/л
1000 где: С - κοнценτρация ацеτаτа Νа (г/л) Μ - мοлеκуляρная масса (κДа)
Пρи эτοм выχοд биοмассы - 9,4 г/л, сοдеρжание в ней ποлимеρа - 82%, а мοлеκуляρная масса ποлимеρа сοсτавляеτ 1 000 + 60 κДа.
Пρимеρ 3. Сποсοб οсущесτвляюτ сοгласнο πρимеρу 1, нο для ποлучения ПΟБ с мοлеκуляρнοй массοй 600 κДа исποльзуюτ дοποлниτельный исτοчниκ С - ацеτаτ наτρия, κοнценτρацию κοτοροгο οπρеделяюτ πο φορмуле:
1500 + 0,5x600
С = = 3 г/л
600 где: С - κοнценτρация ацеτаτа Νа (г/л)
Μ - мοлеκуляρная масса (κДа) Пρи эτοм выχοд биοмассы - 9,6 г/л, сοдеρжание в ней ποлимеρа - 81%, а мοлеκуляρная масса ποлимеρа сοсτавляеτ 600 ± 60 κДа:
Пρимеρ 4. Сποсοб οсущесτвляюτ сοгласнο πρимеρу 1, нο для ποлучения ПΟБ с мοлеκуляρнοй массοй 333 κДа исποльзуюτ дοποлниτельный исτοчниκ С - ацеτаτ
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
наτρия, κοнценτρацию κοτοροгο οπρеделяюτ πο φορмуле:
1500 + 0,5x300
С = = 5,5 г/л
300 где: С - κοнценτρация ацеτаτа Νа (г/л)
Μ - мοлеκуляρная масса (κДа) Пρи эτοм выχοд биοмассы - 9,7г/л, сοдеρжание в ней ποлимеρа - 81%, а мοлеκуляρная масса ποлимеρа сοсτавляеτ 300 ± 60 κДа.
Исτοчниκи инφορмации:
1. Паτенτ ΡΦ Ν 2051967, κл. С 12Ρ 1/04, 1992.
2. Паτенτ ΡΦ Ν 2123048, κл. С 12Ρ 7/62, 1993.
3. Паτенτ СШΑ Ν 5096819, 1992.
4. Υеοт 8.Η., Υοο Υ.τе. ΕЙГесΙ οГ ρΗ οη тοϊесиϊаг
οГ ρο1у-β-ΗуάгοχуЬигуπс асϊά ρгοάисеά Ьу Α1саΗ§еηе5 зρ.// ΒϊοΙесΗηοΙοβу Ιеиегз, ν.17, Ν 4, ρρ.389-394, 1995.
5. Υатаηе Τ. Υϊеϊά οГ ροΙу-3-ΗуάгοχуЬиΙугаτ.е й"οт νаποиз сагЬοη зοигсез: а ϊЬеοгеΙϊсаΙ δШάу // ΒюϊесΗηο1.Βюеη§. ν.41, ρρ.165-170, 1993.
6. Οиа§Ηаηο 5.С., Μϊуаζакϊ δ.δ ' Εйесϊ οГ аегаϊϊοη аηά сагЬοη/ηΗгοдеη гаύο οη ϊЬе тοϊесиϊаг таδδ οГ ϊΗе Ьюάе§гаάаЫе ροϊутег ρο1у-β-ΗуάгοχуЬиϊугаιе οЬϊаϊηеά Ιτοт ΑζοΙοЬасΙег сЬгοοсοссит 6В// ΑρρΙ.ΜϊсгοЬюΙ.ΒϊοΙесЬηοΙ, ν.48, ρρ.662-664, 1997.
7. Ι.Η., δϊеρеску Α. Αззау οГ ροΙу-β-ΗуάгοχуЬиΙуηс асϊά // ΙΒасϊеποΙ, ν.82, ρρ. 33 - 36, 1961.
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
Claims
1. ШΤΑΜΜ БΑΚΤΕΡИИ ΑΖΟΤΟΒΑСΤΕΚ. СΗЯΟΟСΟССυΜ - ПΡΟДУЦΕΗΤ ПΟЛИ- β-ΟΚСИБУΤИΡΑΤΑ.
2. СПΟСΟБ ПΟЛУЧΕΗИЯ ПΟЛИ-β-ΟΚСИБУΤИΡΑΤΑ ЗΑДΑΗΗΟЙ ΜΟЛΕΚУЛЯΡΗΟЙ ΜΑССЫ, οτличающийся τем, чτο οсущесτвляюτ κульτивиροвание нοвοгο шτамма баκτеρий ΑζοΙοЬасΙег сЬгοοсοссит 7Б πρи аэρации на πиτаτельнοй сρеде, сοдеρжащей избыτοκ саχаροзы в κачесτве οснοвнοгο исτοчниκа углеροда, минеρальные сοли, а τаκже ацеτаτ наτρия в κачесτве дοποлниτельнοгο исτοчниκа углеροда, πρи эτοм исποльзуюτ сοοτнοшение κοнценτρаций οснοвнοгο и дοποлниτельнοгο исτοчниκοв углеροда οτ 40 : 2 дο 40 : 7, πρичем κοнценτρацию ацеτаτа наτρия οπρеделяюτ πο φορмуле:
1500 + 0,5Μ
Μ
где: С - κοнценτρация ацеτаτа Νа (г/л) Μ - мοлеκуляρная масса (κДа)
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001128135 | 2001-10-18 | ||
| RU2001128134A RU2201453C1 (ru) | 2001-10-18 | 2001-10-18 | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА ЗАДАННОЙ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ |
| RU2001128134 | 2001-10-18 | ||
| RU2001128135A RU2194759C1 (ru) | 2001-10-18 | 2001-10-18 | ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2003033715A1 true WO2003033715A1 (en) | 2003-04-24 |
Family
ID=26654097
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/RU2002/000447 WO2003033715A1 (en) | 2001-10-18 | 2002-10-09 | Stock culture of an azotobacter chroococum - producer of poly-$g(b)-hydroxybutirate and method for producing said poly-$g(b)-hydroxybutirate having a predetermined molecular mass |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| WO (1) | WO2003033715A1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62205787A (ja) * | 1986-03-03 | 1987-09-10 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | ポリ−β−ヒドロキシ酪酸の分離精製法 |
| US5059536A (en) * | 1988-11-07 | 1991-10-22 | The Governors Of The University Of Alberta | Mutant strains of azotobacter vinelandii used for the hyperproduction of poly-β-hydroxybutyrate during exponential growth |
| LV5297A3 (lv) * | 1988-11-29 | 1993-10-10 | Ludmila Savenkova | Bakteriju azotobacter chroococcum 23 celms - poli- beta-oksisviestskabes producents un poli-beta-oksisviestskabes iegusanas veids |
| RU2051967C1 (ru) * | 1992-01-08 | 1996-01-10 | Волова Татьяна Григорьевна | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИМЕРА β-ОКСИМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ |
-
2002
- 2002-10-09 WO PCT/RU2002/000447 patent/WO2003033715A1/ru not_active Application Discontinuation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62205787A (ja) * | 1986-03-03 | 1987-09-10 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | ポリ−β−ヒドロキシ酪酸の分離精製法 |
| US5059536A (en) * | 1988-11-07 | 1991-10-22 | The Governors Of The University Of Alberta | Mutant strains of azotobacter vinelandii used for the hyperproduction of poly-β-hydroxybutyrate during exponential growth |
| US5096819A (en) * | 1988-11-07 | 1992-03-17 | The Governors Of The University Of Alberta | Hyperproduction of poly-β-hydroxybutyrate during exponential growth by mutant strains of Azotobacter vinelandii |
| LV5297A3 (lv) * | 1988-11-29 | 1993-10-10 | Ludmila Savenkova | Bakteriju azotobacter chroococcum 23 celms - poli- beta-oksisviestskabes producents un poli-beta-oksisviestskabes iegusanas veids |
| RU2051967C1 (ru) * | 1992-01-08 | 1996-01-10 | Волова Татьяна Григорьевна | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИМЕРА β-ОКСИМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| "Produksiya poli (3-gidroksibutirata) iz krakhmala kulturoi azotobacter chroococcum", RZH BIOLOGIYA, 4 December 1999 (1999-12-04), pages 1 - 166 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5395919A (en) | Poly-β-hydroxy alkanoate (PHA) copolymer, method of its production, the microbe which produces it, and PHA copolymer blend | |
| Freitas et al. | Production of a new exopolysaccharide (EPS) by Pseudomonas oleovorans NRRL B-14682 grown on glycerol | |
| Doi | Microbial synthesis, physical properties, and biodegradability of polyhydroxyalkanoates | |
| Page | Bacterial polyhydroxyalkanoates, natural biodegradable plastics with a great future | |
| Yezza et al. | Production of polyhydroxyalkanoates from methanol by a new methylotrophic bacterium Methylobacterium sp. GW2 | |
| DE4433134A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Polyhydroxyfettsäuren sowie rekombinanter Bakterienstämme zur Durchführung des Verfahrens | |
| Xin et al. | An experimental study on molecular weight of poly-3-hydroxybutyrate (PHB) accumulated in Methylosinus trichosporium IMV 3011 | |
| Carlozzi et al. | Effects of pH, temperature and salinity on P3HB synthesis culturing the marine Rhodovulum sulfidophilum DSM-1374 | |
| Sabapathy et al. | Aegle marmelos: a novel low cost substrate for the synthesis of polyhydroxyalkanoate by Bacillus aerophilus RSL-7 | |
| KR20210049865A (ko) | 생분해성 폴리머 조성물 및 이를 생산하는 방법 | |
| WO2009156950A2 (en) | Methods for producing medium chain polyhydroxyalkanoates (pha) using vegetable oils as carbon source | |
| Punrattanasin | The utilization of activated sludge polyhydroxyalkanoates for the production of biodegradable plastics | |
| RU2439143C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Cupriavidus eutrophus ВКПМ В-10646 - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ | |
| WO2003033715A1 (en) | Stock culture of an azotobacter chroococum - producer of poly-$g(b)-hydroxybutirate and method for producing said poly-$g(b)-hydroxybutirate having a predetermined molecular mass | |
| Waheed et al. | Biosynthesis of poly (hydroxyalkanoates) | |
| Grigull et al. | Production and characterization of poly (3-hydroxybutyrate) from oleic acid by Ralstonia eutropha | |
| Yanti et al. | A study on production of poly-β-hydroxybutyrate bioplastic from sago starch by indigenous amylolytic bacteria | |
| Bhati | Biodegradable plastics production by cyanobacteria | |
| RU2194759C1 (ru) | ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА | |
| Mahitha et al. | Microbial polyhydroxybutyrate production by using cheap raw materials as substrates | |
| RU2307159C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Azotobacter chroococcum 12А - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-3-ОКСИБУТИРАТА И СОПОЛИМЕРА 3-ОКСИБУТИРАТА С 3-ОКСИВАЛЕРАТОМ | |
| KR100246125B1 (ko) | 중간 사슬 길이 폴리(베타-하이드록시알카노에이트) 공중합체의 제조방법 | |
| RU2784088C1 (ru) | Штамм Paenibacillus polymyxa ВСГУТУ-1 - продуцент экзополисахаридов | |
| RU2782953C1 (ru) | Штамм Paenibacillus polymyxa ВСГУТУ-2 - продуцент экзополисахаридов | |
| Nalini et al. | Bioplastic from microbial and agricultural biomass |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AK | Designated states |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DM DZ EC EE ES FI GB GD GE GH HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MN MW MX MZ NO NZ OM PH PL PT RU SD SE SG SI SK SL TJ TM TN TR TZ UA UG US UZ VN YU ZA ZM |
|
| AL | Designated countries for regional patents |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DK EE ES FI FR GB GR IE IT LU MC PT SE SK TR BF BJ CF CG CI GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG US |
|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application | ||
| 122 | Ep: pct application non-entry in european phase | ||
| NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: JP |
|
| WWW | Wipo information: withdrawn in national office |
Country of ref document: JP |