WO2001075154A3 - Procede de sequençage parallele d'un melange d'acides nucleiques sur une surface - Google Patents

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Abstract

L'invention concerne un procédé de séquençage parallèle d'au moins deux acides nucléiques différents contenus dans un mélange d'acides nucléiques, comprenant les opérations suivantes: préparer une surface comportant des îlots d'acides nucléiques, dans chaque cas de même sorte, des acides nucléiques tertiaires; traiter les acides nucléiques tertiaires de telle sorte que les produits sont en liaison avec la surface seulement par l'extrémité 5' d'un double brin ; couper les acides nucléiques tertiaires avec des endonucléases de restriction de type IIS de sorte à donner naissance à des extrémités 3' ou 5' en saillie ; déterminer une ou plusieurs bases des acides nucléiques tertiaires; relier par ligature des molécules de liaison avec les extrémités libres des molécules d'acide nucléique tertiaire, ces molécules de liaison présentant une ou plusieurs marques témoignant des endonucléases de restriction de type IIS; couper à nouveau les acides nucléiques tertiaires avec une ou plusieurs endonucléases de restriction de type IIS, qui reconnaissent les parties de séquences introduites à l'étape (e) par les molécules de liaison dans les acides nucléiques tertiaires ; réitérer les étapes (d), (e) et (f) jusqu'à ce que l'information de séquence voulue soit obtenue.
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