WO2001001948A2 - Composition cosmetique pour l'hydratation et la protection des fibres d'elastines - Google Patents

Composition cosmetique pour l'hydratation et la protection des fibres d'elastines Download PDF

Info

Publication number
WO2001001948A2
WO2001001948A2 PCT/FR2000/001925 FR0001925W WO0101948A2 WO 2001001948 A2 WO2001001948 A2 WO 2001001948A2 FR 0001925 W FR0001925 W FR 0001925W WO 0101948 A2 WO0101948 A2 WO 0101948A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
elastin
fibers
hydration
acid
resistance
Prior art date
Application number
PCT/FR2000/001925
Other languages
English (en)
Other versions
WO2001001948A3 (fr
Inventor
Ladislas Robert
Alexandre-Michel Robert
Original Assignee
Institut D'evaluation Dermatophysique
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institut D'evaluation Dermatophysique filed Critical Institut D'evaluation Dermatophysique
Priority to AU62932/00A priority Critical patent/AU6293200A/en
Publication of WO2001001948A2 publication Critical patent/WO2001001948A2/fr
Publication of WO2001001948A3 publication Critical patent/WO2001001948A3/fr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A61K8/671—Vitamin A; Derivatives thereof, e.g. ester of vitamin A acid, ester of retinol, retinol, retinal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A61K8/362—Polycarboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A61K8/365—Hydroxycarboxylic acids; Ketocarboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/37—Esters of carboxylic acids
    • A61K8/375—Esters of carboxylic acids the alcohol moiety containing more than one hydroxy group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
    • A61K8/44—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
    • A61K8/442—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof substituted by amido group(s)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/46—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing sulfur
    • A61K8/466—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing sulfur containing sulfonic acid derivatives; Salts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/55—Phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/55—Phosphorus compounds
    • A61K8/553—Phospholipids, e.g. lecithin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
    • A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists

Definitions

  • Connective tissue cells including fibroblasts, and smooth muscle cells are involved in the biosynthesis of the components of CEM. Biosynthesis is regulated at different levels (genetic and post-synthetic) from cell differentiation in the embryo and throughout the lifespan.
  • the composition of the ECM changes with age, which has the effect of modifying the structure and altering the function of the skin. These changes over time are partially intrinsic in nature, and partially extrinsic depending on various conditions such as nutrition, radiation, and exposure to various chemicals. Thus, genetic and environmental factors are directly responsible for the mechanisms involved in skin aging.
  • the elastic fibrous network includes the following three distinct areas:
  • Elastogenesis also largely depends on the action of several glycoproteins with tropoelastin. This interaction is critical with regard to the spatial arrangement of the elastic fibers and their subsequent crosslinking due to the action of lysyloxidase. These structural glycoproteins are rich in polar amino acids, therefore hydrophilic, which play an important role in attracting the water molecules necessary for the elasticity of elastin (19). However, it has been observed that the number of glycoprotein microfibrils which surround the elastic fibers decrease with age. As such, this drop could be partly responsible for the loss of water in aging elastic fibers.
  • Hydrophilic polysaccharides can also interact with elastin (20).
  • hyaluronan is of very special interest. Indeed, it is a high molecular weight polysaccharide which forms a network retaining more than ten times its weight in water. In addition, this molecule can regulate molecular traffic (21). It is quite surprising to note the presence of hydrophilic molecules interacting with a hydrophobic protein such as elastin. It has been determined that the tertiary structure of hyaluronan resembles a two-sided band, one side being predominantly hydrophobic, the other side being hydrophilic (22). This conformation explains the affinity of hyaluronan for elastin (23).
  • One aspect of the present invention relates to a method of screening for molecules capable of improving the elasticity of the skin, characterized in that it comprises the following steps: a) one or more molecules (s) are interacted on fibers d purified elastin, b) determining their effect on hydration and / or on the resistance of the fibers vis-à-vis the elastase, c) selecting one or more molecule (s) having a positive effect on the hydration and / or fiber resistance.
  • This selection can be made by calculating the capacity of each molecule to decrease the amount of peptide fragments obtained per unit of elastase in a given time interval.
  • Another aspect of the present invention relates to a molecule obtainable by the methods mentioned above, and to the use of a molecule or a combination of said molecules for hydrating aged elastin fibers and / or to protect said fibers against the action of elastase.
  • These molecules are useful for the preparation of a cosmetic composition intended for the treatment of the skin, in particular for improving the elasticity of the skin and / or combating its aging.
  • the molecule mentioned above is a molecule selected from trehalose, retinol and its derivatives, retinoic acid and derivatives, taurine, lactic acid, glycolic acid, phytic acid, malic acid, hyaluronan digested by hyaluronidase and lactose, to hydrate the elastin fibers and / or to protect said fibers against the action of elastase.
  • This compound is useful for the preparation of a cosmetic composition intended for improving the elasticity of the skin and / or combating its aging.
  • the composition according to the invention is particularly indicated for deep hydration of the skin.
  • trehalose a substance selected for its strong protective power against elastolysis in the previous series of experiments, it protects at 60%.
  • the second series of experiments focused on the one hand on derivatives of vitamin A: Retinol (all-trans) [vitamin A], retinoic acid (all-trans) [vitamin A acid] palmitate retinol (all-trans) and retinol acetate (all-trans); (see Table I) and on the other hand on different lipid and phospholipid derivatives (phosphatidylcholine type XE, phosphatidylcholine type IV-S, trioleine, 1,3-dilinoleine, trioleine and n-lauroylsarcosine).
  • Samples of 150 microliters are taken either for the determination of the production of peptide fragments by the Lowry procedure, or by reading the optical density at 280 nanometers in a UV spectrophotometer. Elastolysis is calculated from the quantity of peptide fragments obtained per unit of enzyme in a given time interval.
  • ROBERT L. JACOB M.P. and HORNEBECK W., Interactions between lipids, lipoproteins and extracellular matrix macromolecules with special reference to elastin, In: "Atherosclerosis VII", Fidge N.H. and Nestel P.J. Eds., 1986, pp. 439-442 (Elsevier Science Publ.).
  • BIZBIZ L. ALPEROVITCH A., ROBERT L.
  • EVA group Aging of the vascular wall: serum concentration of elastin peptides and elastase inhibitors in relation with cardiovascular risk factor.
  • the EVA study Atherosclerosis, 1997, 131: 73-78.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

La présente invention concerne une nouvelle approche cosmétique qui consiste en la formation d'un complexe entre les fibres d'elastine et des substances capables d'hydrater et/ou d'augmenter la résistance desdites fibres à la dégradation par l'élastase. L'objectif est de fournir une composition comprenant des composés, tels que le tréhalose, pour améliorer l'élasticité de la peau et/ou prévenir son vieillissement.

Description

COMPOSITION COSMETIQUE POUR L'HYDRATATION ET LA PROTECTION DES FIBRES D'ELASTINE
La présente invention concerne une nouvelle approche cosmétique qui consiste en la formation d'un complexe entre les fibres d'élastine et des substances capables d'hydrater et/ou d'augmenter la résistance desdites fibres à la dégradation par l'élastase. L'objectif est de fournir une composition comprenant des composés, tels que le trehalose, pour améliorer l'élasticité de la peau et/ou prévenir son vieillissement.
L'élastine est le composé fibreux essentiel qui confère l'élasticité aux tissus. Les tissus conjonctifs, tels que la peau, la paroi des vaisseaux, le cartilage élastique et les ligaments sont des matériaux composites. Ils sont constitués de diverses macromolécules qui interagissent spécifiquement entre elles et qui forment la matrice extracellulaire (MEC).
Selon leur fonction, les macromolécules de la MEC font parties des deux classes suivantes :
Les collagènes et l'élastine qui représentent les éléments fibreux, les protéoglycannes, les glycosaminoglycannes, et les glycoprotéines de structure qui constituent un matériel de remplissage interagissant avec les fibres de la MEC et les cellules.
Les cellules de tissus conjonctifs, notamment les fibroblastes, et les cellules musculaires lisses sont impliquées dans la biosynthèse des composants de la MEC. La biosynthèse est régulée à différents niveaux (génétique et post-synthétique) dès la différenciation cellulaire dans l'embryon et pendant toute la durée de la vie. La composition de la MEC change avec l'âge, ce qui a pour conséquence de modifier la structure et d'altérer la fonction de la peau. Ces changements dans le temps sont partiellement intrinsèques par nature, et partiellement extrinsèques en fonction de diverses conditions telles que la nutrition, les radiations, et l'exposition à diverses substances chimiques. Ainsi, les facteurs génétiques et environnementaux sont directement responsables des mécanismes impliqués dans le vieillissement de la peau Dans la peau jeune, le réseau fibreux élastique comprend les trois zones distinctes suivantes :
- Le derme superficiel qui contient des fines fibrilles formant des faisceaux verticaux, - la couche intermédiaire,
- et le derme profond dans lequel on trouve des fibres matures moins orientées.
Ces variations de structure, d'orientation, et de forme illustrent les différences de composition chimique des fibres élastiques. Les changements liés au vieillissement des fibres élastiques sont caractérisés par leur fragmentation, suivie par un réarrangement horizontal. Cette fragmentation démontre qu'il existe une corrélation entre le vieillissement, la qualité et la quantité, et la nature des fibres élastiques dans la peau. On note également des modifications d'orientation des fibres élastiques qui sont accompagnées par une augmentation relative de leur densité de surface (7-11). Ces changements morphologiques et quantitatifs sont confirmés par la biologie moléculaire. En effet, des expériences d'amplification RT-PCR ont permis de mettre en évidence que les ARNm de la tropoélastine (précurseur monomérique des fibres élastiques) augmentent avec l'âge des donneurs de fibroblastes de la peau (12). Il apparaît donc que les modifications des fibres élastiques causées par le vieillissement proviennent de la régulation des mécanismes de biosynthèse de l'élastine. Toutefois, les modifications post-synthétiques, telles que la modification de l'activité de l'élastase, les dommages créés par les radicaux libres produits par radiation UV, et l'interaction avec des composés lipidiques et le calcium sont également importants, et peuvent être considérés comme une cible d'action privilégiée pour améliorer l'élasticité de la peau (13-15).
Des expériences physico-chimiques ont démontré que l'élasticité des fibres d'élastine est dépendante de l'entropie du système. En effet, il est généralement admis que l'entropie baisse avec l'étirement des fibres. Ceci est dû principalement à deux facteurs :
- L'interaction entre les fibres d'élastine et l'eau,
- le degré de liberté des chaînes peptidiques. Ces paramètres sont influencés par les macromolécules environnantes avec lesquelles les peptides d'élastine sont en interaction (16, 17). Une perte d'élasticité des fibres d'élastine a été constatée lorsqu'elles sont séchées (17, 18). Généralement, les fibres conservent leur élasticité lorsque leur poids est dû pour au moins 40% à la présence de molécules d'eau. La composition en acides aminés de l'élastine montre clairement une prédominance d'acides aminés aliphatiques et hydrophobes. Ainsi, lorsque les fibres élastiques sont étirées, la surface de contact entre les molécules d'eau et le squelette peptidique hydrophobe augmente. Ceci induit une augmentation de l'ordre des molécules d'eau qui ont tendance à réduire au minimum leur contact avec la surface hydrophobe de l'élastine. Cette augmentation d'ordre, provenant de l'augmentation du nombre de liaisons hydrogènes entre les molécules d'eau, a pour conséquence une baisse sensible de l'entropie du système élastine-eau. Les fibres élastiques ont donc tendance à se contracter spontanément sous l'action des forces entropiques du système.
Une autre conséquence de l'étirement des fibres réside en la baisse du degré de liberté des chaînes peptidiques, ce qui représente aussi une baisse de l'entropie (augmentation de l'ordre du système) (16). Le relâchement des fibres s'accompagne donc d'une augmentation du désordre du système peptidique qui s'additionne avec l'entropie du système eau-élastine. Ainsi, l'environnement des fibres élastiques joue un rôle prépondérant dans le processus de l'élasticité de la peau et de son vieillissement.
L'élastogénèse dépend également pour une grande part de l'action de plusieurs glycoprotéines avec la tropoélastine. Cette interaction est critique en ce qui concerne l'arrangement spatial des fibres élastiques et leur subséquente réticulation due à l'action de la lysyloxydase. Ces glycoprotéines de structure sont riches en acides aminés polaires donc hydrophiles qui jouent un rôle important pour attirer les molécules d'eau nécessaires à l'élasticité de l'élastine (19). Or, il a été observé que le nombre de microfibrilles de glycoprotéines qui entourent les fibres élastiques baissent avec l'âge. En tant que telle, cette baisse pourrait être en partie responsable de la perte d'eau au sein de fibres élastiques vieillissantes.
Des polysaccharides hydrophiles peuvent également interagir avec l'élastine (20). Le cas de l'hyaluronane est d'un intérêt tout à fait spécial. En effet, il s'agit d'un polysaccharide de haut poids moléculaire qui forme un réseau retenant plus de dix fois son poids en eau. De plus, cette molécule peut réguler les trafics moléculaires (21). Il est tout à fait surprenant de constater la présence de molécules hydrophiles interagissant avec une protéine hydrophobe telle que l'élastine. Il a été déterminé que la structure tertiaire du hyaluronane ressemble à une bande à deux faces, une face étant majoritairement hydrophobe, l'autre face étant hydrophile (22). Cette conformation explique l'affinité du hyaluronane pour l'élastine (23).
En outre, il a été montré que l'activité des élastases augmente avec l'âge (24 et 25). Ces élastases dégradent l'élastine et produisent des peptides-qui sont détectés et quantifiés dans le sang (26 et 27). Ces peptides sont alors capables de stimuler le récepteur de l'élastine qui se situent à la surface des fibroblastes. Certaines cellules, telles que les monocytes attirées par l'inflammation due aux radiations UV, augmentent la sécrétion de l'élastase et la production de radicaux libres. Les produits de dégradation de l'élastine augmentent donc l'altération des composants de la peau au cours du vieillissement.
A partir de ces résultats, on peut dresser le modèle suivant pour expliquer la perte d'élasticité des fibres élastiques lors du vieillissement :
Pendant l'élastogénèse, les fibres élastiques se développent dans un environnement riche en composés hydrophiles (glycoprotéines et protéoglycannes).
Avec le temps, ces composés hydrophiles se raréfient car leur synthèse diminue, et leur dégradation augmente. - La diminution de la teneur en eau des fibres élastiques, qui es corrélee avec leur baisse d'élasticité, est expliquée par la perte d'élasticité entropique du système. Au même moment, des lipides et du calcium s'accumulent à l'intérieur des fibres élastiques, ce qui favorise encore plus la perte d'élasticité, et expose les fibres à l'action de l'élastase.
L'utilisation du trehalose, un composé préféré de la présente invention, a été décrite en cosmétique notamment dans les documents suivants : EP 180 559, JP 97 77650, JP 96 92035, JP 94 40845, et US 4,839,164. Toutefois, aucun de ces documents ne décrit, ni ne suggère l'invention telle que définie ci-après.
DESCRIPTION
Ainsi, la présente invention concerne une nouvelle approche cosmétique pour traiter et/ou prévenir le vieillissement de la peau, qui consiste en la formation d'un complexe entre les fibres élastiques et des substances de faible poids moléculaire capables d'interagir avec l'élastine, et d'induire une haute capacité de liaison avec les molécules d'eau.
De telles substances, interagissant avec les fibres élastiques, remplacent les glycoprotéines et les glycosaminoglycannes naturellement présentes dans la peau jeune, qui disparaissent avec l'âge. De manière avantageuse, un objectif est de fournir des composés qui permettent également d'augmenter la résistance des fibres à la dégradation par l'élastase.
Un aspect de la présente invention concerne un procédé de criblage de molécules susceptibles d'améliorer l'élasticité de la peau caractérisée en ce qu'il comporte les étapes suivantes : a) On fait interagir une ou plusieurs molécule(s) sur des fibres d'élastine purifiées, b) on détermine leur effet sur l'hydratation et/ou sur la résistance des fibres vis-à-vis de l'élastase, c) on sélectionne une ou plusieurs molécule(s) présentant un effet positif sur l'hydratation et/ou sur la résistance des fibres.
L'effet desdites molécules sur les fibres d'élastine purifiées peut être déterminé par mesure du diamètre des fibres traitées comparé à celui des fibres non traités. Essentiellement l'étape a) consiste à : - Peser le poids exact des tubes.
Mettre l'élastine fibreuse/ tube + du sérum physiologique ou autre tampon ou solution équivalente. Ajouter la substance à tester. Incuber les échantillons. Centrifuger.
Ensuite, l'étape b) consiste en une mesure de la largeur des fibres d'élastine ( = largeur des fibres traitées et non traitées ; avant l'hydrolyse par l'élastase, et des fibres hydrolysées. A cet effet, on peut observer les fibres d'élastine sous microscope avec un agrandissement de 400 X.. Pour chaque champ, la largeur précise de chaque fibre est mesurée. Les mesures peuvent être réalisées par analyse d'image semi-automatique à l'aide d'une cellule de Malassez.
L'étape b) peut également consister en un pesage du complexe fibre-molécule-eau retenu et du complexe témoin fibre-eau, et aussi en la détermination de la quantité de produits de dégradation par l'action de l'élastase des fibres présents dans le surnageant par mesure colorimétrique (dosage des peptides selon Lowry et al. à 280 nm) et/ou par lecture de la densité optique.
En ce qui concerne l'étape c), il s'agit de sélectionner des molécules augmentant le diamètres et/ou le poids des fibres, et/ou des molécules pour lesquelles il y a une diminution de la quantité de produit de dégradation dû à l'action de l'élastase.
Ce procédé peut être adapté à l'identification de molécules capables d'hydrater les fibres d'élastine. A cet effet, le procédé comprend les étapes suivantes : a) Purification, séchage des fibres d'élastine à haute température, et refroidissement en dessiccateur, b) addition aux fibres obtenues à l'étape a) d'une ou plusieurs molécule(s) dans une solution aqueuse, d) élimination de la solution en excès par centrifugation, et pesage du complexe fibre- molécule-eau retenu, e) sélection d'une ou plusieurs molécule(s) qui favorisent la rétention d'eau par les fibres. De préférence, les molécules à tester sont polaires et de faible poids moléculaire. La sélection à l'étape d) peut être entreprise en calculant la différence en poids des fibres conduisant à des ratios [élastine - substances / élastine] et [élastine - substances (hydratées) / élastine - substances (séchées)] qui varient pour chaque molécule testée.
Ce procédé peut également être adapté à l'identification de molécules capables de protéger les fibres d'élastine contre l'action de l'élastase. Dans cette alternative, le procédé comprend les étapes suivantes : a) Mise en contact des fibres d'élastine purifiées avec une ou plusieurs molécule(s) de faible poids moléculaire dans une solution aqueuse contenant de l'élastase, b) centrifugation et détermination de la quantité de produits de dégradation des fibres présents dans le surnageant par mesure colorimétrique et/ou par lecture de la densité optique, c) sélection d'une ou plusieurs molécule(s) qui protègent les fibres contre la dégradation par l'élastase.
Cette sélection peut être réalisée en calculant la capacité de chaque molécule à diminuer la quantité de fragments peptidiques obtenus par unité d'élastase dans un intervalle de temps donné.
De plus, le procédé selon l'invention peut être mise en œuvre pour le criblage de molécules capables à la fois d'hydrater les fibres d'élastine et de protéger lesdites fibres contre l'action de l'élastase. En ce sens, on peut mettre en oeuvre en parallèle ou en série les procédés tels que décrits ci-dessus.
Un autre aspect de la présente invention porte sur une molécule susceptible d'être obtenue par les procédés mentionnés ci-dessus, et sur l'utilisation d'une molécule ou d'une combinaison desdites molécules pour hydrater les fibres d'élastine âgées et/ou de protéger lesdites fibres contre l'action de l'élastase. Ces molécules sont utiles pour la préparation d'une composition cosmétique destinée au traitement de la peau, en particulier pour améliorer l'élasticité de la peau et/ou lutter contre son vieillissement. Dans un mode préféré de réalisation de l'invention, la molécule évoquée précédemment est une molécule sélectionnée parmi le trehalose, le rétinol et ses dérivés, l'acide rétinoïque et des dérivés, la taurine, l'acide lactique, l'acide glycolique, l'acide phytique, l'acide malique, le hyaluronane digéré par la hyaluronidase et le lactose, pour hydrater les fibres d'élastine et/ou pour protéger lesdites fibres contre l'action de l'élastase.
Ce composé est utile pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à l'amélioration de l'élasticité de la peau et/ou lutter contre son vieillissement. La composition selon l'invention est particulièrement indiquée pour l'hydratation en profondeur de la peau.
Un aspect complémentaire de l'invention réside en une composition cosmétique qui comprend une quantité efficace d'une molécule selon l'invention pour améliorer l'élasticité de la peau et/ou lutter contre son vieillissement. Une telle composition peut comprendre une quantité efficace d'une molécule sélectionnée parmi le trehalose, le rétinol, l'acide rétinoïque, et le lactose, ou une association desdites molécules pour améliorer l'élasticité de la peau et/ou lutter contre son vieillissement et au moins une molécule selon l'invention.
Avantageusement, cette composition peut comprendre du trehalose à une concentration qui se situe entre 1 et 20%, de préférence entre 5 et 15%. La molécule supplémentaire peut notamment être sélectionnée parmi la taurine, l'acide phytique, l'acide succinique, et l'acide citrique. L'objectif d'associer deux molécules selon l'invention est de fournir une composition contenant une molécule permettant d'hydrater les fibres d'élastine et une deuxième molécule qui protège lesdites fibres contre les attaques de l'élastase. L'efficacité de la composition est alors renforcée, et la peau retrouve son élasticité et une apparence plus jeune.
La composition peut comporter en outre au moins une substance active en cosmétique choisie notamment parmi les anti-radicalaires dont la vitamine E, les sels minéraux, les polymères négativement chargés dont l'ADN, les hydratants dont l'acide hyaluronique, le glycolate de guanidine et les céramides, les vitamines dont les vitamines C et E, les liposomes, les anti-inflammatoires, dont l'acide glycyrrhétinique, les acides gras essentiels (AGE) ou les huiles riches en AGE, les amincissants, les cicatrisants, et les protecteurs solaires.
De préférence, la composition cosmétique selon l'invention est un produit, tel qu'une crème, une lotion, un gel, destiné à être appliqué sur la peau.
Ainsi, l'invention se rapporte à l'utilisation d'une combinaison de molécules sélectionnées parmi le trehalose, le rétinol et ses dérivés, l'acide rétinoïque et ses dérivés, la taurine, l'acide lactique, l'acide glycolique, l'acide phytique, l'acide malique et le hyaluronane digéré par la hyaluronidase, pour l'hydratation des fibres élastiques âgées et pour leur protection contre l'attaque des élastases.
Avantageusement, l'invention vise l'utilisation d'une composition cosmétique comprenant : du Rétinol (all-trans) palmitate à une concentration comprise entre 10 mg/ml et 100 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, du trehalose à une concentration comprise entre 5 mg/ml et 100 mg/ml, de préférence à 50 mg/ml, de la taurine, à une concentration comprise entre 5 et 100 mg/ml, de préférence à
50 mg/ml, de l'acide phytique, à une concentration entre 10 mg/ml et 200mg/ml, de préférence à 100 mg/ml, - de l'acide malique, à une concentration comprise entre 1 et 200 mg/ml, de préférence à 100 mg/ml, et du hyaluronane digéré par la hyaluronidase à une concentration comprise entre 10 mg/ml et 500 mg/ml, de préférence à 200 mg/ml, ou de l'acide succinique entre 10 et 200 mg/ml, de préférence à 50 mg/ml, du trehalose, à une concentration comprise entre 0,1 et 200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, et de l'acide phytique entre 1 et 200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, du rétinol acétate (ail trans.), à une concentration comprise entre 0,1 et 10 mg/ml, de préférence à 1 mg/ml, et du trehalose entre 0,1 et 200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, ou de l'acide rétinoique (ail trans.), à une concentration comprise entre 1 et 1200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, et de la trioléine entre 1 et 500 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
La composition explicitée ci-dessus peut comporter en outre de l'acide glycolique à des concentrations comprises entre 1 et 20 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, ou de l'acide lactique, entre 0,1 et 20 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml. Cette composition se trouve avantageusement sous la forme d'une crème.
Pour la suite de la description, on se référera aux légendes des figures présentées ci- après.
Légendes
Figures 1 A - 1D : Hydratation de l'élastine complexée avec les substances testées. Cette figure montre la variabilité de l'effet des différentes substances testées sur la rétention de l'eau par les complexes élastine-substance. Le trehalose a un effet très positif sur l'hydratation des fibres alors que le α-carragénane et l'acide mannuronique ont un effet négatif (données non présentées). La haute variabilité de ces effets sur l'hydratation de l'élastine indique clairement que l'augmentation de l'hydratation est la conséquence d'interaction spécifique entre les substances testées et l'élastine. De manière tout à fait surprenante, la capacité hydratante du trehalose est du même ordre de grandeur que celle du hyaluronane hydrolisé ( 7,5 mg d'eau retenue par mg de trehalose et 8,8 mg d'eau retenue par mg de hyaluronane hydrolisé fixé sur l'élastine.
Figures 2A et 2B : Inhibition de l'élastolyse (contrôle et taurine).
2A - Le décalage de la courbe vers la gauche montre clairement que les fibres ont été sensiblement dégradées par l'élastase. 2B - Le décalage est moins important lorsque l'on rajoute de la taurine dans la solution contenant l'élastase. Ce composé protège les fibres.
Figures 3 A et 3B : Inhibition de l'élastolyse par les substances les plus efficaces Cette figure montre l'augmentation de la résistance à l'élastolyse par mg de substances fixées sur l'élastine. Très peu de substances parmi celles testées ont montré une capacité à augmenter la résistance de l'élastine aux attaques de l'élastase.
Le trehalose a été le plus efficace, suivi par la taurine. Ces deux substances permettent d'augmenter d'environ 25 à 35% la résistance de l'élastine à l'élastolyse. La plupart des autres substances augmentent la susceptibilité de l'élastine à être dégradée par l'élastase (données non fournies).
Il ressort clairement de ces figures que le trehalose a une activité maximale pour des concentrations comprises entre 5 et 15%. On note que l'acide phytique et l'acide pyruvique donnent également de bons résultats.
Figure 4 : Résistance des fibres aux attaques par l'élastase en fonction du temps.
Cette figure illustre la propriété du trehalose et de diverses substances à protéger durablement les fibres.
Figures 5 et 6 : Photographie des fibres d'élastine séchées et hydratées.
La différence de morphologie des fibres est illustrée dans ces photographies.
5- Fibres séchées.
6- Fibres hydratées.
Figures 7-12 : Résultats des tests sur le diamètre des fibres et sur la diminution de l'élastolyse.
La figure 7 donne les pourcentages de réhydratation de l'élastine obtenus avec les α- hydroxy-acides, l'acide glycolique et l'acide lactique en comparaison avec des résultats de quelques substances précédemment testées: le trehalose, l'acide phytique et la taurine. La figure 8 montre la résistance à l'élastolyse obtenue notamment avec les α-hydroxy-acides, l'acide glycolique et l'acide lactique. La figure 9 montre la réhydratation de l'élastine obtenue avec le rétinol (all-trans) [vitamine A], l'acide rétinoïque (all-trans) [vitamine A acide], le palmitate de rétinol (all-trans) et l'acétate de rétinol (all-trans). La figure 10 montre l'effet de ces substances sur la résistance de l'élastine à l'élastolyse. La figure 11 montre que le lactose augmente l'efficacité du rétinol (all-trans) ainsi que celle de l'acétate de rétinol (all-trans).
La figure 12 montre le même phénomène de potentialisation par le lactose de l'effet du rétinol, et de l'acétate de rétinol sur la protection de l'élastine contre l'élastolyse.
Exemple 1 : Procédé de criblage de molécules permettant d'hydrater les fibres d'élastine et d'augmenter la résistance des fibres d'élastine vis-à-vis de l'élastase. (test par analyse d'image).
Matériels et méthodes Le but du test par analyse d'image a été double : d'une part, suivre l'hydratation de l'élastine fibreuse en complexe avec des substances à tester par rapport à l'hydratation de l'élastine seule; d'autre part, suivre l'élastolyse par l'élastase pancréatique des mélanges élastine fibreuse - substance X par rapport à l'élastolyse de l'élastine seule. L'hydratation et l'élastolyse de l'élastine fibreuse ont été suivis à 37 °C, sous agitation et en présence de solution physiologique et de substances testées à la concentration indiquée. Certaines des substances testées sont listées au tableau I ci-dessous.
Protocole de l'examen de la largeur des fibres par analyse d'image : Peser le poids exact des tubes (PYREX). - Mettre 50 mg élastine fibreuse/ tube + 2 ml de sérum physiologique. Ajouter 100 μl de substance X par tube (en concentration indiquée). Incubation des échantillons pendant 5 jours à 37 °C, sous agitation. - Centrifugation à température ambiante, 2500 rpm, (r =18 cm; 800 g), 10 minutes. On garde des culots (mixture élastine-X) Analyse d'images : mesure de la largeur des fibres d'élastine ( = largeur des fibres hydratées ; avant l'hydrolyse par l'élastase ; analyse en moyenne de 300 fibres).
A la fin de cette série de mesure, on ajoute 2 ml de tampon d'élastase par tube (composition : Tris-HCl 100 mM, 0,01 % d'azide de sodium, pH 8,0).
On ajoute également 100 μl d'une solution d'élastase pancréatique de 10 U/ml/tube (=1 U/tube).
Incubation 1 heure à 37 C° sous agitation. - Centrifugation à 4 °C, 2500 rpm, (r =18 cm ; 800 g), 10 minutes. - Mesure de la largeur des fibres hydrolysées.
On a analysé en moyenne 300 fibres par traitement. On met une goutte de l'échantillon entre une cellule Malassez et une lamelle et on observe les fibres d'élastine avec un agrandissement de 400 X. Pour chaque champ, la largeur précise de chaque fibre est mesurée. Les mesures sont réalisées réalisées par analyse d'image semi-automatique après étalonnage à l'aide d'une cellule de Malassez.
Résultats de la mesure du diamètre des fibres :
L'acide lactique utilisé à 5 à 10%, considéré comme un excellent produit hydratant de l'épiderme, est relativement peu efficace pour la réhydratation des fibres d'élastine. La réhydratation des fibres d'élastine reste en dessous de 20% par rapport au contrôle (fibres réhydratées dans une solution physiologique). L'acide glycolique à 5% est plus efficace avec environ 22% d'augmentation de réhydratation par rapport au témoin, un peu supérieur à ce que nous avons obtenu dans cette expérience avec le trehalose (figure 7). Par contre, nous avons constaté relativement peu d'effet des α-hydroxy- acides sur la protection contre l'élastolyse des fibres (figure 8). Par exemple, l'acide glycolique à 5% ne protège les fibres d'élastine contre l'élastolyse qu'à 25% par rapport au témoin. Quant au trehalose, substance retenue pour son fort pouvoir de protection contre l'élastolyse dans les séries d'expérience précédentes, il protège à 60%. La deuxième série d'expériences a porté d'une part sur des dérivés de la vitamine A : le rétinol (all-trans) [vitamine A], l'acide rétinoïque (all-trans) [vitamine A acide], le palmitate de rétinol (all-trans) et l'acétate de rétinol (all-trans) ; (voir tableau I) et d'autre part sur différents dérivés lipidiques et phospholipidiques (phosphatidylcholine type X-E, phosphatidylcholine type IV-S, trioleine, 1,3-dilinoleine, trioleine et n- lauroylsarcosine). La figure 9 montre la réhydratation de l'élastine obtenue avec ces substances. Les lipides se sont montrés peu efficaces, comme on s'y attendait. Par contre, le rétinol et l'acide rétinoïque (la vitamine A et la vitamine A acide) ont augmenté de 12 à 15% l'hydratation des fibres par rapport au témoin. La figure 10 montre l'effet de ces substances sur la résistance de l'élastine à l'élastolyse. La trioleine (huile d'olive) et l'all-trans rétinol ont conféré une plus grande résistance à l'élastolyse. Les autres substances testées ont été moins efficaces. Enfin, dans la dernière série d'expérience, nous avons testé l'effet conjoint des dérivés de la vitamine A avec le lactose. Le lactose est un antagoniste du récepteur de l'élastine-laminine, testé dans nos expériences précédentes avec le mélibiose en tant que modulateurs des effets médiés par ce récepteur. La réaction du lactose avec le récepteur de l'élastine- laminine (ou elastin binding protein, EBP) a été décrite dans la littérature avant la mise en évidence par nos méthodes de l'efficacité du mélibiose. Le lactose augmente l'efficacité du rétinol (all-trans) ainsi que celle de l'acétate de rétinol (all-trans). Le lactose seul est peu efficace (figure 11). Le même phénomène de potentialisation par le lactose de l'effet du rétinol, et de l'acétate de rétinol sur la protection de l'élastine contre l'élastolyse a été observé (figure 12).
Plusieurs des substances testées dans ces dernières séries d'expériences ont présenté des propriétés intéressantes. Certains acides organiques, comme l'acide glycolique, le trioleine et des dérivés de la vitamine A possèdent des propriétés intéressantes : l'augmentation de la réhydratation de l'élastine et de la résistance contre l'élastolyse. La synergie trouvée entre le lactose et les différents dérivés du rétinol est particulièrement intéressante. Elle montre que la combinaison de ces substances possède une efficacité remarquable pour hydrater les fibres d'élastine et pour augmenter leur résistance à l'élastolyse. Il convient d'insister sur le fait qu'il s'agit ici d'effets de nature purement physico-chimiques et non pas physiologiques puisqu'il n'y a pas de cellule vivante dans le protocole expérimental utilisé. Ces effets sont totalement indépendants et distincts des effets décrits pour le rétinol et ses dérivés qui nécessitent la présence de cellules vivantes possédant dans leur noyau le récepteur de l'acide rétinoïque. Il faut remarquer que cette démonstration de la présence et de l'efficacité de l'acide rétinoïque n'a pas été confirmée au cours du vieillissement dans le derme et de l'épiderme. Les effets que nous observons sont totalement indépendants, car basés sur les interactions moléculaires directes entre les substances testées et les fibres d'élastine sans faire appel au récepteur de l'élastine.
Tableau I : Substances testées pour l'hydratation de l'élastine et pour la résistance à l'élastolyse.
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000017_0001
Exemple 2 : Procédé de criblage de molécules permettant d'hydrater les fibres d'élastine (test d'hydratation)
Protocole : 100 mg de fibres d'élastine sont ajoutés dans plusieurs tubes (préalablement pesés). Des tubes sont placés dans un four à 100°C toute la nuit. Le poids des échantillons d'élastine ainsi séché est calculé. Les échantillons contenant l'élastine sont ensuite mélangés avec 20 mg de la substance testée dans 2 ml de solution saline physiologique (0,9 % NaCl), et le mélange est incubé pendant trois à cinq jours à 37°C avec une agitation constante. Les échantillons sont centrifugés à température ambiante à 500g pendant dix minutes. Les sédiments, après complète décantation, sont à nouveau pesés afin d'obtenir le poids de la réhydratation des complexes élastine-subtances testées. Ces échantillons sont à nouveau séchés à 100° toute la nuit et sont à nouveau pesés. La différence en poids conduit à des ratio [élastine - substances / élastine] et [élastine - substances (hydratées) / élastine - substances (séchées)].
La quantité d'eau retenue par les fibres d'élastine pures séchées (contrôle) et par le complexe élastine-substance a été calculée. Les résultats en ce qui concerne le trehalose, l'acide phytique, la taurine et les autres substances sont présentés aux figures lA à 2B.
Parmi les substances plus efficaces on peut notamment citer le trehalose. Les figures 4 à 6 illustrent la capacité d'hydratation des substances testées en fonction du temps, ainsi que le changement de morphologie des fibres dû à l'hydratation. Exemple 3 : Procédé de criblage de molécules permettant d'augmenter la résistance des fibres d'élastine vis-à-vis de l'élastase.
Protocole : Environ 100 mg d'élastine ou du complexe élastine-substances sont ajoutés dans des tubes contenant 3ml de tampon Tris pH 8,6, et les échantillons sont incubés 24 heures à 37°C avec une agitation constante. 30 unités d'élastase pancréatique sont ajoutées dans chaque tube et le contenu est vigoureusement agité. Les tubes sont ensuite incubés à 37°C pour permettre à l'enzyme d'agir. La réaction est stoppée en refroidissant les tubes dans un bain de glace après 0 minute, une heure et 24 heures. Les tubes sont ensuite centrifugés à 1200g pendant 20 minutes à 4°C. Des échantillons de 150 microlitres sont pris soit pour la détermination de la production de fragments peptidiques par la procédure de Lowry, soit par la lecture de la densité optique à 280 nanomètres dans un spectrophotomètre à UV. L'élastolyse est calculée à partir de la quantité de fragments peptidiques obtenus par unité d'enzyme dans un intervalle de temps donné.
Des échantillons d'élastine ont été purifiés comme indiqué précédemment, traités ou non traités, et ont été suspendus dans un tampon Tris HC1 à pH 8,6. L'élastase a ensuite été rajoutée, et l'élastolyse a été suivie en déterminant les produits de dégradation de l'élastine dans le surnageant soit par la procédure de Lowry, soit par lecture de la densité optique desdits surnageants à 280 nm. La liste des substances qui ont été testées est présentée aux figures 3A et 3B. Certains composés de haut poids moléculaire ont subi un traitement par méthanolyse afin de faciliter leur pénétration dans la peau. La plupart des substances testées sont des carbohydrates et d'autres, telles que la mélatonine ou la taurine, sont des substances biologiquement actives. Quelques alcools aliphatiques ont également été testés car ils sont connus pour leur interaction avec l'élastine (17, 27, 28). Les chaînes aliphatiques de ces alcools peuvent interagir avec les régions hydrophobes de l'élastine, et le groupe hydroxile peut former des liaisons hydrogènes avec l'eau. Les autres substances testées ont été choisies en fonction de leur capacité à interagir avec l'eau (présence de groupes polaires). Le hyaluronane, le trehalose, et la mélatonine font partie des composés qui possèdent le plus d'affinité pour l'élastine. Le trehalose s'avère être un bon candidat pour améliorer l'élasticité de la peau car il possède à la fois la propriété d'hydratation et de protection des fibres. Exemple 4 : Compositions envisageables selon l'invention.
- Trehalose (5 à 15 %)
- Taurine (5 à 10 %)
- Acide Phytique (1 %) Acide Succinique (5%)
REFERENCES
1) COMPER W.D., Extracellular matrix, 1996, 1-2: (Harwood Académie Publishers, Australia)
2) ROBERT L. and LABAT-ROBERT J., Morphogenesis, aging and repair of connective tissues., Facial Plastic Sur gery, 1989, 6: 1-7.
3) L. ROBERT, B. ROBERT., Aging of connective tissues, skin, Eds Frontiers of Matrix Biology, 1973, 1 : (Karger, Basel).
4) ROBERT L. and HORNEBECK W., Elastin and élastases, CRC Press, 1989, I et II: (CRC Press Inc. Boca Raton, Fia.).
5) ROBERT L., CHADWICK D , The molecular biology and pathology of elastic tissues, eds., 1995 (John Wiley & Sons, Chichester).
6) ROBERT B., SZIGETI M., DEROUETTE J.C., ROBERT L., BOUISSOU H. and FABRE M.T., Studies on the nature of the "microfibrillar" component of elastic fibers, Eur. J. Biochem., 1971, 21 : 507-516.
7) GODEAU G., GONNORD G., JOLIVET 0., SCHOEVAERT D., POMPIDOU A., LAGRUE G. and ROBERT A.M., A sélective histochemical method for the quantitative estimation of elastic fibers by computerized morphometric analysis. Effect of Colchicin treatment, Anal. Quant. Cytol. Hislol, 1986, 8: 321-325.
8) GODEAU G. and ROBERT A.M., Use of pycnogenols in the histological staining of elastic fibers and their quantification in several tissues by automated image analysis. In . - "Elastin and élastases" L. Robert and W. Hornebeck Eds., 1989, I: pp. 7-19 (CRC Press, Boca Raton). 9) VOROS E., ROBERT C, GODEAU G. and ROBERT A.M., Morphometric study of the évolution of the skin surface relief with âge, Acta. Stereoi, 1989, 8: 379-380.
10) ROBERT C, LESTY C. and ROBERT A.M., Aging of the skin: study of elastic fiber network, modifications by computerized image analysis, Gerontol., 1988, 34:
291-296.
11) FRANCES C, BRANCHET M.C., BOISNIC S., LESTY C. and ROBERT L. , Elastic fibers in normal human skin. Variations with âge: a morphometric analysis. Arch. Gerontol. Geriatr., 1990, 10: 57-67.
12) HOLZENBERGER M., LEVIINZI S.A., HERZOG C.P., DEAK S.B., ROBERT L. and BOYD CD., Quantitation of tropoelastin messenger RNA and assessment of alternative splicing in human skin fibroblasts by reverse transcriptase polymerase chain reaction, PCR- Methods and Applications, 1993, 3: 2, 107-114.
13) ROBERT L., CHAUDIERE J. and JACOTOT B., Interaction between lipids and the intercellular matrix of the arterial wall: its rôle in the évolution of atherosclerotic lésions, In: «Régression of atherosclerosis lésions. Expérimental studies and observations in humans » Malinow M.R., V.H. Blaton Eds., 1984, 79: pp. 145-173 (NATO SI séries, Life Sciences, Plénum Press, London).
14) ROBERT L., JACOB M.P. and HORNEBECK W., Interactions between lipids, lipoproteins and extracellular matrix macromolecules with spécial référence to elastin, In: «Atherosclerosis VII», Fidge N.H. and Nestel P.J. Eds., 1986, pp. 439-442 (Elsevier Science Publ.).
15) ROBERT L. and JACOB M.P., Interactions between lipids and elastin, In: "Elastin and Elastases" Robert L. and Hornebeck W., Eds., 1989, 1: pp. 257-286 (CRC Press, Boca Raton). 16) URRY D.W., LU AN C.C., PENG S.Q., Molecular biophysics of elastin structure, function and pathology, In: «The molecular biology and pathology of elastic tissues » L. Robert, D. Chadwick Eds., 1995 (4-22 aohn Wiley & Sons).
17) ROBERT A.M;, ROBERT L., Biology and pathology of elastic tissues,. Eds., Frontiers of matrix Biology, 1980, 8: (Karger, Basel).
18) PARTRIDGE S. M., Elastin, in: « Advances in protein chemistry » Anfinsen C.B., Bailey K., Anson M.L., Edsall J.T., Eds., 1962, 17: 227-302 (Académie Press, New York).
19) ROBERT L., Structural glycopro teins: Historical remarks, In: "Frontiers of Matrix Biology", J. Labat-Robert, R. Timpl and L. Robert Eds., 1986, 11 : 1-16 (Karger, Basel).
20) MOCZAR M. and ROBERT L., Interaction of proteodermatan sulphate with elastin, Biochem. Soc. Trans., 1987, 15: 1078-1079.
21) LAURENT T.C., Structure of hyaluronic acid, in: «Chemistry and molecular biology of the intercellular matrix » Balazs E.A., Ed., 1970, 2: 703-732 (Académie
Press, London).
22) MOULABBI M., BROCH H., ROBERT L. and VASILESCU D., Quantum molecular modeling of hyaluronan, Journal of Molecular Structure, (Theochem) 395-396, 1997, 477 -508.
23) SCOTT J.E., Secondary structures in hyaluronan solutions: chemical and biological implications, In: «The biology of hyaluronan » Laurent T.C., Chadwick D. Eds., 1989, 6-20 John Wiley & Sons, Chichester). 24) LABAT-ROBERT J., KERN P. and ROBERT L., Biomarkers of connective tissue aging: biosynthesis of fibronectin, collagen type III and elastase, Ann. New York. Acad. ScL, 1992, 673: 16-22.
25) HOMSY R., PELLETIER-LEBON P., TIXIER J.M., GODEAU G., ROBERT L. and HORNEBECK W., Characterization of human skin fibroblasts elastase activity, , J. Invest. Dermatol, 1988, 91: 472-477.
26) FULOP T., WEI S.M., ROBERT L. and JACOB M.P., Détermination of elastin peptides in normal and arteriosclerotic human sera by ELIS A, Clin. Physiol. Biochem.,
1990, 8: 273-282.
27) BIZBIZ L., ALPEROVITCH A., ROBERT L. and the EVA group, Aging of the vascular wall: sérum concentration of elastin peptides and elastase inhibitors in relation with cardiovascular risk factor. The EVA study, Atherosclerosis, 1997, 131: 73-78.

Claims

REVENDICATIONS
1. Procédé de criblage de molécules susceptibles d'améliorer l'élasticité de la peau caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : a) On fait interagir une ou plusieurs molécule(s) sur des fibres d'élastine purifiées, b) on détermine leur effet sur l'hydratation et/ou sur la résistance des fibres vis-à-vis de l'élastase, c) on sélectionne une ou plusieurs molécule(s) présentant un effet positif sur l'hydratation et/ou sur la résistance des fibres.
2. Procédé selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'étape b) consiste en un pesage du complexe fibre-molécule-eau retenu et du complexe témoin fibre-eau, en la détermination de la quantité de produits de dégradation par l'action de l'élastase des fibres présents dans le surnageant, et/ou en une mesure du diamètre des fibres traitées comparé à celui des fibres non traitées.
3. Procédé selon la revendication 1 permettant l'identification de molécules capables d'hydrater les fibres d'élastine caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) Purification, séchage des fibres d'élastine à haute température, et refroidissement en dessiccateur, b) addition aux fibres obtenues à l'étape a) d'une ou plusieurs molécule(s) dans une solution aqueuse, c) élimination de la solution en excès par centrifugation, et pesage du complexe fibre - molécule-eau retenue, d) sélection d'une ou plusieurs molécule(s) qui favorisent la rétention d'eau par les fibres.
4. Procédé selon la revendication 3 caractérisé en ce que les molécules sont polaire(s) et de faible poids moléculaire.
5. Procédé selon la revendication 1 permettant l'identification de molécules capables de protéger les fibres d'élastine contre l'action de l'élastase caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) Mise en contact des fibres d'élastine purifiées avec une ou plusieurs molécule(s) de faible poids moléculaire dans une solution aqueuse contenant de l'élastase, b) centrifugation et détermination de la quantité de produits de dégradation des fibres présents dans le surnageant par mesure colorimétrique et/ou par lecture de la densité optique, c) sélection d'une ou plusieurs molécule(s) qui protègent les fibres contre la dégradation par l'élastase.
6. Procédé de criblage de molécules capables à la fois d'hydrater les fibres d'élastine et de protéger lesdites fibres contre l'action de l'élastase caractérisé en ce qu'on met en œuvre en parallèle ou en série les procédés selon les revendications 3 et 5.
7. Utilisation d'une molécule ou d'une combinaison de molécules sélectionnées parmi le trehalose, le rétinol et ses dérivés, l'acide rétinoïque et des dérivés, la taurine, l'acide lactique, l'acide glycolique, l'acide phytique, l'acide malique et le hyaluronane digéré par la hyaluronidase, pour hydrater les fibres d'élastine et/ou pour protéger lesdites fibres contre l'action de l'élastase.
8. Utilisation d'une combinaison de molécules sélectionnées parmi le trehalose, le rétinol et ses dérivés, l'acide rétinoïque et ses dérivés, la taurine, l'acide lactique, l'acide glycolique, l'acide phytique, l'acide malique et le hyaluronane digéré par la hyaluronidase, pour l'hydratation des fibres élastiques âgées et pour leur protection contre l'attaque des élastases.
9. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant du Rétinol (all-trans) palmitate à une concentration comprise entre 10 mg/ml et 100 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
10. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant du trehalose à une concentration comprise entre 5 mg/ml et 100 mg/ml, de préférence à 50 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
1 1. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant de la taurine, à une concentration comprise entre 5 et 100 mg/ml, de préférence à 50 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
12. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant de l'acide phytique, à une concentration entre 10 mg/ml et 200mg/ml, de préférence à 100 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
13. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant l'acide malique, à une concentration comprise entre 1 et 200 mg/ml, de préférence à 100 mg/ml, et du hyaluronane digéré par la hyaluronidase à une concentration comprise entre 10 mg/ml et 500 mg/ml, de préférence à 200 mg/ml, ou de l'acide succinique entre 10 et 200 mg/ml, de préférence à 50 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
14. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant du trehalose, à une concentration comprise entre 0,1 et 200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, et de l'acide phytique entre 1 et 200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
15. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant du rétinol acétate (ail trans.), à une concentration comprise entre 0,1 et 10 mg/ml, de préférence à 1 mg/ml, et du trehalose entre 0,1 et 200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
16. Utilisation d'une composition cosmétique comprenant de l'acide rétinoique (ail trans.), à une concentration comprise entre 1 et 1200 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, et de la trioleine entre 1 et 500 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, pour augmenter l'hydratation de l'élastine ainsi que sa résistance à l'élastolyse.
17. Utilisation selon l'une des revendications 9 à 16 caractérisée en ce que la composition comporte en outre de l'acide glycolique à des concentrations comprises entre 1 et 20 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml, ou de l'acide lactique, entre 0,1 et 20 mg/ml, de préférence à 10 mg/ml.
18. Utilisation selon l'une des revendications 9 à 17 caractérisée en ce que la composition se trouve sous la forme d'une crème.
PCT/FR2000/001925 1999-07-06 2000-07-05 Composition cosmetique pour l'hydratation et la protection des fibres d'elastines WO2001001948A2 (fr)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AU62932/00A AU6293200A (en) 1999-07-06 2000-07-05 Cosmetic composition for moisturizing and protecting elastine fibers

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR99/08700 1999-07-06
FR9908700A FR2795956B1 (fr) 1999-07-06 1999-07-06 Composition cosmetique pour ameliorer l'elasticite de la peau et lutter contre son vieillissement

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2001001948A2 true WO2001001948A2 (fr) 2001-01-11
WO2001001948A3 WO2001001948A3 (fr) 2001-11-08

Family

ID=9547752

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2000/001925 WO2001001948A2 (fr) 1999-07-06 2000-07-05 Composition cosmetique pour l'hydratation et la protection des fibres d'elastines

Country Status (3)

Country Link
AU (1) AU6293200A (fr)
FR (1) FR2795956B1 (fr)
WO (1) WO2001001948A2 (fr)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1170002A1 (fr) * 2000-06-29 2002-01-09 JOHNSON & JOHNSON CONSUMER COMPANIES, INC. Procédé pour diminuer la perte d'élasticité et de fermeté de la peau
WO2004054526A1 (fr) * 2002-12-13 2004-07-01 Unilever Plc Compositions capillaires traitantes

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2940059B1 (fr) * 2008-12-24 2011-04-29 Lvmh Rech Compostion cosmetique contenant au moins deux osmolytes a effet hydratant ou anti-age
FR2984735B1 (fr) * 2011-12-23 2014-01-24 Oreal Composition hydratante

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2269327A1 (fr) * 1974-05-04 1975-11-28 Henkel & Cie Gmbh
EP0180559A2 (fr) * 1982-08-16 1986-05-07 Norman Orentreich Composition hydratante dermatologique et méthode
US4839164A (en) * 1987-02-24 1989-06-13 Estee Lauder, Inc. Trehalose containing cosmetic composition and method of using it
WO1995005155A1 (fr) * 1993-08-17 1995-02-23 Roc S.A. Utilisation d'oligosaccharides dans la prevention et le traitement du vieillissement des tissus
WO1996019099A2 (fr) * 1995-08-25 1996-06-27 Lvmh Recherche Utilisation de la vitamine c ou de ses derives ou analogues pour stimuler la synthese de l'elastine cutanee
FR2760365A1 (fr) * 1997-03-07 1998-09-11 Roc Sa Composition pharmaceutique ou cosmetologique contenant au moins un retinoide, et methode de traitement cosmetique des modifications liees au vieillissement de la peau et/ou des phaneres
FR2762783A1 (fr) * 1997-05-02 1998-11-06 Roc Sa Utilisation d'oligosaccharides pour le traitement du tissu conjonctif et methode de traitement cosmetique mettant en oeuvre ces oligosaccharides

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0977650A (ja) * 1995-09-14 1997-03-25 Ajinomoto Co Inc 化粧料
JPH09124453A (ja) * 1995-11-02 1997-05-13 Japan Happy:Kk 皮膚外用剤

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2269327A1 (fr) * 1974-05-04 1975-11-28 Henkel & Cie Gmbh
EP0180559A2 (fr) * 1982-08-16 1986-05-07 Norman Orentreich Composition hydratante dermatologique et méthode
US4839164A (en) * 1987-02-24 1989-06-13 Estee Lauder, Inc. Trehalose containing cosmetic composition and method of using it
WO1995005155A1 (fr) * 1993-08-17 1995-02-23 Roc S.A. Utilisation d'oligosaccharides dans la prevention et le traitement du vieillissement des tissus
WO1996019099A2 (fr) * 1995-08-25 1996-06-27 Lvmh Recherche Utilisation de la vitamine c ou de ses derives ou analogues pour stimuler la synthese de l'elastine cutanee
FR2760365A1 (fr) * 1997-03-07 1998-09-11 Roc Sa Composition pharmaceutique ou cosmetologique contenant au moins un retinoide, et methode de traitement cosmetique des modifications liees au vieillissement de la peau et/ou des phaneres
FR2762783A1 (fr) * 1997-05-02 1998-11-06 Roc Sa Utilisation d'oligosaccharides pour le traitement du tissu conjonctif et methode de traitement cosmetique mettant en oeuvre ces oligosaccharides

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE WPI Week 9729 Derwent Publications Ltd., London, GB; AN 1997-316455 XP002134813 & JP 09 124453 A (JAPAN HAPPY KK) *
PATENT ABSTRACTS OF JAPAN vol. 1997, no. 07 (C & JP 09 077650 A (AJINOMOTO CO) cité dans la demande *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1170002A1 (fr) * 2000-06-29 2002-01-09 JOHNSON & JOHNSON CONSUMER COMPANIES, INC. Procédé pour diminuer la perte d'élasticité et de fermeté de la peau
WO2004054526A1 (fr) * 2002-12-13 2004-07-01 Unilever Plc Compositions capillaires traitantes

Also Published As

Publication number Publication date
FR2795956B1 (fr) 2006-07-14
FR2795956A1 (fr) 2001-01-12
AU6293200A (en) 2001-01-22
WO2001001948A3 (fr) 2001-11-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1068864B1 (fr) Utilisation d'au moins un hydroxystilbène comme agent anti-glycation.
JP2002524487A (ja) 自然老化または老化亢進性（日光皮膚炎、汚染）の際の、瘢痕化、保湿化および皮膚外観改良用のペプチドの化粧品としてのまたは皮膚薬品としての使用
EP2753300B1 (fr) Association de carraghénane et de c-glycoside et leurs utilisations
EP1559417A1 (fr) Principe actif obtenu a partir de poudre de semences de Medicago sativa
FR2792202A1 (fr) Extrait peptidique de lupin et composition pharmaceutique ou cosmetique ou nutraceutique comprenant un tel extrait
EP1021161A1 (fr) Utilisation de l'acide ellagique et de ses derives en cosmetique et en dermatologie
WO2008047061A2 (fr) Utilisation cosmetique par voie orale et/ou parenterale de la glucosamine eventuellement associee a au moins un compose polyphenol et composition correspondante
EP2242500B1 (fr) Utilisation d'un actif issu de cyperus esculentus pour son action cutanee anti-age
WO2019129770A1 (fr) Oligosaccharides sulfatés et leurs utilisations cosmétiques
WO2006134583A1 (fr) Compositions cosmetiques contenant des extraits d'airelle vigne d'ida (vaccinium vitis idea)
FR2977494A1 (fr) Compositions cosmetiques ou pharmaceutiques contenant des acides hyaluroniques de masses moleculaires differentes
Morganti Chitin Nanofibrils in skin treatment
WO2001001948A2 (fr) Composition cosmetique pour l'hydratation et la protection des fibres d'elastines
WO2004096168A1 (fr) Procede d'obtention d'un principe actif a partir du soja, ayant des proprietes anti-vieillissement, compositions et utilisations de ces compositions a visee cosmetique
FR2757766A1 (fr) Utilisation des sophorolipides en tant qu'agent stimulateur du metabolisme des fibroblastes dermiques
CN1875913A (zh) 含茶氨酸的化妆或治疗组合制剂
FR3055550B1 (fr) Nouvel actif immunomodulateur et composition le comprenant
FR2973381A1 (fr) Nouveaux composes oligosaccharides et leur utilisation cosmetique
EP3449901A1 (fr) Composition cosmétique ou dermocosmétique, son procédé de préparation et son utilisation
FR3018448A1 (fr) Principe actif obtenu a partir de l'algue hypnea musciformis et utilisations cosmetiques
FR3092249A1 (fr) Principe actif cosmetique issu de tourteau de graines de simmondsia chinensis et utilisations cosmetiques
FR2834462A1 (fr) Procede de preparation d'un principe actif vegetal, en particulier hydratant et a effet anti-rides, principe actif obtenu, composition et application en cosmetique
EP0967968A1 (fr) Composition pharmaceutique ou cosmetique contenant au moins un retinoide
WO1999063964A1 (fr) Procede de preparation de fibrilline a partir de cnidaires, et compositions obtenues utilisables en cosmetiques
WO2022243268A1 (fr) Extrait de vaccinium macrocarpon et ses effets cosmétiques anti-âge

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BY BZ CA CH CN CR CU CZ DE DK DM DZ EE ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NO NZ PL PT RO RU SD SE SG SI SK SL TJ TM TR TT TZ UA UG US UZ VN YU ZA ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE BF BJ CF CG CI CM GA GN GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
AK Designated states

Kind code of ref document: A3

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BY BZ CA CH CN CR CU CZ DE DK DM DZ EE ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NO NZ PL PT RO RU SD SE SG SI SK SL TJ TM TR TT TZ UA UG US UZ VN YU ZA ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A3

Designated state(s): GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE BF BJ CF CG CI CM GA GN GW ML MR NE SN TD TG

REG Reference to national code

Ref country code: DE

Ref legal event code: 8642

122 Ep: pct application non-entry in european phase
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP