WO1989005301A1 - Utilisation de composes de la serie de la retuline et de l'isoretuline a titre de composes a activite pharmaceutique, en particulier de medicaments analgesiques, antispasmodiques et antiinflammatoires - Google Patents

Utilisation de composes de la serie de la retuline et de l'isoretuline a titre de composes a activite pharmaceutique, en particulier de medicaments analgesiques, antispasmodiques et antiinflammatoires Download PDF

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WO1989005301A1
WO1989005301A1 PCT/BE1988/000032 BE8800032W WO8905301A1 WO 1989005301 A1 WO1989005301 A1 WO 1989005301A1 BE 8800032 W BE8800032 W BE 8800032W WO 8905301 A1 WO8905301 A1 WO 8905301A1
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compounds
isoretulin
retulin
residue
series
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Luc Angenot
Jacques Damas
Monique Tits
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Universite De Liege
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/20—Spiro-condensed systems

Definitions

  • the present invention relates to the pharmacological use of compounds of the retulin and isoretulin series by exploiting their antinociceptive and antispasmodic effects.
  • retulin and isoretulin constitute indolinic alkaloids, which can be extracted from different Loganiacees of the genus Strychnos, where they are present in place of other alkaloids such as strychnine, the toxicity of which is well known.
  • Isoretulin (16-epiretulin) is the form usually derived from strychnine in the hemisynthetic pathways and corresponds to the formula
  • the present invention is based on the observation that retulin and isoretulin as well as a large number of derivatives of these compounds have an anti-inflammatory effect, an analgesic effect and an antispasmodic effect.
  • R 1 or R 2 in which in position 16, either R 1 or R 2 must represent hydrogen while that of the substituents R 1 or R 2 which does not represent hydrogen represents -CH 2 OH- or -CH 2 OH acylated, preferably acetylated or an aldehyde function;
  • R 3 in position 1 represents an alkyl residue or a residue acyl, preferably an acetyl residue;
  • R 4 in position 18 represents an alkyl chain, preferably methyl, an acylated -CH 2 OH- or preferably CH 2 OH group;
  • R 5 represents hydrogen or a substituent on the benzene ring which can be hydroxyl or methoxy as well as the compounds substituted on the nitrogen in position 4 and the derivatives in which the C 19 -C 20 double bond is hydrogenated.
  • Many of these compounds are known as such and their synthesis has been described in the literature. The compounds can all be obtained easily by hemisisynthesis starting from strychnine or from derivatives or homologs of strychnine.
  • isoretulin for example has been described starting from strychnine whose natural sources are abundant (S.nux-vomica, S.ignatii, S.icaja). The final yield is approximately 15% isoretulin.
  • Two other alkaloids can also advantageously be used for this hemisynthesis, in the sense that the reduced number of steps makes it possible to obtain a better final yield (40 to 45% of isoretulin).
  • It is diaboline (initially encountered in S. diaboli from South America) and its deacetylated derivative, generally known as the aldehyde of WIELAND and GUMLICH rather than under the name of caracurine VII which had been given to it attributed after its extraction from several South American Strychnos, in particular S.toxifern, S.cordata.
  • diaboline and its derivative were later found in other American and African species, these substances are not currently available on the chemical market.
  • the retulin series is less easily accessible from strychnine which has a configuration reverse at the carbon level in position 16.
  • retulin is synthesized with a yield of 50% from the akuammicine (alkaloid of the seeds of Picralima nitida) available on the market but at significantly higher prices of the order of 200 times that of strychnine.
  • Retulin and isoretulin can also be obtained by transformation of strychnobilin-type dimer alkaloids, which are predominant in the root bark of S. variabilis (Kinshasa). Finally, remember that retulin is present in appreciable quantities in the stems of S. henningsii from Zaire.
  • the -CH 2 OH function at position 16 can be easily esterified or oxidized to aldehyde.
  • the -CH 2 OAC function can be preserved in position 18, hydrolyzed to -CH 2 OH function or else reduce it (as in isoretulin) to the methyl group.
  • Conventional reduction techniques make it possible to reduce the ethylidene function in position C 19 -C 20 .
  • the nitrogen atoms in position 4 and particularly in position 1 can be substituted using suitable reagents.
  • the ⁇ epimer of isoretulin can be produced, namely the retulin and make the substitutions or modifications described for isoretulin.
  • the compounds comprising the formaldehyde residue while etanr. pharmacologically active can have a toxicity in particular a cytotoxicity which can make their therapeutic use little indicated. In this case, they retain their interest at least as intermediate products in the synthesis.
  • isoretulin has a therapeutic index equal to 15.
  • the alkaloids of the retulin and isoretulin series are much less toxic than strychnine, the
  • LD50 is 0.5 mg / Kg and that the curary diquaternary alkaloids whose LD50 is close to 50 ⁇ g / Kg.
  • Isoretulin having an LD50 of 70 mg / kg is one hundred and forty times less toxic than strychnine.
  • the other alkaloids tested have a similar toxicity; only strychnobilin-type dimers and isoretulin are slightly more toxic (around 30 mg / kg), which still represents a toxicity sixty times less than that of strychnine. 2. Oral toxicity.
  • isoretulin In intragastric administration in mice, isoretulin has an LD50 of 300 mg / Kg. Animals that have received lower doses show no lesions, particularly in the gastrointestinal tract.
  • isoretulin and tulinal have significant analgesic activity with respect to the nociceptive action of phenylparabenzo ⁇ uinone.
  • isoretulinal reduces mitosis by a factor of eight at a concentration of 10 ⁇ g / ml, and by a factor of twenty at the concentration of 50 ⁇ g / ml. At this latter concentration, however, cell necrosis is evident.
  • isoretulinal could be due to the aldehyde function.
  • Isoretulin inhibits carrageenan edema in rats (ED50: 40 mg / Kg). It also reduces edema with zymosan in rats.
  • Retulin is also inhibitory in these two tests.
  • This anti-inflammatory effect does not depend on the inhibition of prostaglandin synthesis: retulin and isoretulin do not modify the hypotensive action of arachidonic acid in rats. As a result, the mechanism of action of the anti-inflammatory effect is completely original.
  • Isoretulin reduces the stimulation of the rat ileum by histamine and bradykinin.
  • the inhibitory concentrations are of the order of 10 -6 to 10 -4 M.
  • the residue was treated ⁇ 225 ml of water, 40 ml of acetic acid and 1.5 g of activated charcoal. It is filtered and again 1.5 g of activated carbon are added to the filtrate. After further filtration and addition of 18.5 ml of concentrated hydrochloric acid, the filtrate is kept at 0 ° C for 24 hours. The precipitate which forms therein is 23-isonoitrosostrychnine hydrochloride (formula II). The yield is 80%.
  • a solution composed of the alkaloid obtained in Example 3 (formula IV), 2 ml of acetic anhydride and 5 ml of pyridine is heated at reflux for 1.5 hours in a water bath. After this time, the solution is evaporated under reduced pressure and added with ether. The ethereal solution of the oily residue is filtered through a short column of Brockmann basic alumina. After evaporation of the ether, the crude triacetylated alkaloid in the appearance of a colorless gum is obtained re (formula V).
  • the acecylisoretulin is dissolved in 10 ml of ethanol and this solution is made alkaline with 10% sodium hydroxide in water. This solution is concentrated on a rotary evaporator until a precipitate begins to form and then the mixture is extracted with chloroform. The chloroform extracts, dehydrated over anhydrous sodium sulphate, are evaporated and the residue obtained is crystallized from ethyl acetate. It isoretulin (formula VII).
  • retulin or isoretulin
  • 50 mg of retulin (or isoretulin) are dissolved in 50 ml of hydrochloric acid N and heated for 4 hours under reflux under a nitrogen atmosphere. The solution is then made alkaline with IN sodium hydroxide until pH 11 and then extracted with chloroform. Chloroform extracts dried over anhydrous sodium sulfate, are distilled under reduced pressure to dryness.
  • deacetylretulin or deacetylisoretulin is formed.
  • Example 4 The procedure was as in Example 4. 25 mg of deacetylretulin (or deacetylisoretulin) are dissolved in 5 ml of pyridine; 2 ml of acetic anhydride are added thereto. The solution is heated at reflux for 1.5 h in a water bath. It is then evaporated on a rotary evaporator under reduced pressure and the oily residue is frequently taken up in a few ml of methanol to facilitate the removal of the pyridine.
  • deacetylretulin or deacetylisoretulin
  • the alkaloid formed is not revealed by ceric sulphate and becomes orange with ferric chloride after heating for 5 minutes at 100 ° C.
  • acetylretulin (or acetylisoretulin) is formed.
  • EXAMPLE 10 ACETYLATION OF RETULIN (OR ISORETULIN): ACETYLRETULIN (OR ACETYLISORETULIN)
  • N-acylindolinic chromophore On its UV spectrum, we find the N-acylindolinic chromophore and on its IR spectrum, an N-acyl band at 1665 cm -1 . Its mass spectrum indicates a molecular ion at m / z 324 and other fragments characteristic of N-formyl, in particular m / z 172.
  • the alkaloid obtained is Na-formyl-deacetylretulin.
  • deacetylretulin or deacetylisoretulin
  • acetic acid 0.1 ml
  • formalin is added.
  • the solution is kept at laboratory temperature for 48 hours. At the end of this time, it is basified with ammonia and then extracted with chloroform (3 ⁇ 10 ml).
  • the chloroform solution dried over anhydrous sodium sulfate is distilled under reduced pressure until dry.
  • the chromatography residue shows a majority stain coloring - intense pink with ferric chloride and red turning yellow then green with ceric sulfate, when the starting alkaloid is deacetylisoretu line
  • rosibiline or isorosibiline
  • a methanol mixture hydrochloric acid 2 N / l: l.
  • the solution is kept for a few hours at laboratory temperature and is then basified to pH 11 with 10% sodium hydroxide. It is then extracted with chloroform (3 ⁇ 10 ml) which is evaporated to dryness after passage over anhydrous sodium sulphate ”
  • the hydrolysis products obtained are deacetylretulin (or deacetylisoretulin).
  • the oxazine cycle opens very easily in a hydrochloric medium.
  • these alkaloids were left for 3 hours at 37 ° C. in 0.1 N HCl medium and found that after this period of time, the asymmetric bisindolic alkaloids were completely hydrolyzed.
  • Table II annexed shows the hemisynthesis of retulin from strychnine. The first steps are identical to those of the "isoretulin" series (see examples 1 and 2).
  • Example 15 TRANSFORMATION OF WIELANDGUMLICH'S ALDEHYDE INTO HEXACYCLIC LACTAM (FORMULA IX)
  • Example 17 To 1 g of the alkaloid obtained in Example 17 (fig. XI), 15 ml of 10% HAc, 975 mg of KI0 4 and 250 ml of H 2 O are added. 3 g of NaBH 4 are added and the whole is left for 14 h at 4 ° C. Finally, this aqueous solution is extracted with chloroform. After evaporation of the solvent, the N-formyl-deacetylretulin is recovered.
  • the oxidation reaction of the alcoholic function of isoretulin has a double primary interest during hemisyntheses, because it makes it possible to obtain diastereoisomers in equilibrium, isoretulinal and retulinal, which authorize not only the hemisynthesis of many symmetrical dimeric alkaloids or no, but also, by reduction, to move from the isoretulin series to the retulin series, which is less easily accessible.
  • isoretulin or retulin
  • isoretulin 50 mg
  • isoretulin or retulin
  • 400 mg of pyridinium chlorochromate (PCC) and 500 mg of anhydrous sodium acetate are suspended in 4 ml of dichloromethane.
  • the isoretulin solution is added with stirring and left in contact, still with stirring, for three hours.
  • a dilute ammonia solution is added to the suspension and the aldehyde formed is extracted with five times 25 ml of chloroform.
  • the yield is quantitative.
  • the pharmacological properties of isoretulin and retulin were discussed below.
  • test substances are administered intraperitoneally half an hour before the injection of lambda carrageenan into the sole of the plantar.
  • the volume of the paw is measured by plethysmometry, before, then one, two, three and four hours after the injection of carrageenan (1 mg / paw).
  • the first orientation tests focused on the isoretulin used at doses of 8, 16, 32 and 64 mg / Kg. The results show the increase in the volume of the paw, expressed as a percentage of the normal volume.
  • Isoretulin is clearly inhibiting from 32 mg / kg, it is not active at 8 mg / kg and the effect is less after 4 hours for the dose, from 16 mg / kg.
  • Retulin is active for 45 mg / Kg. Its activity is close to that of oretulin (after two hours res).
  • the results show the increase in the volume of the paw expressed as a percentage of the increase measured in the control animals after 4 hours.
  • Carrageenan edema depends on the intervention of kinins and leukocytes with their pro-inflammatory factors including prostaglandins (PG). This edema is inhibited by aspirin and indomethacin.
  • PG prostaglandins
  • the hypotensive action of arachidonic acid depends on its conversion to PG type substances, mainly PGI 2 . It is therefore a witness to the synthesis of PG occurring in the rat cardiovascular system and is suppressed by all inhibitors of PG formation, including aspirin and indomethacin. Retulin has been used in doses ranging from 40 to 49 mg / Kg. It does not modify the action of arachidonic acid in the 6 animals tested. It cannot therefore be classified as inhibitors of PG synthesis.
  • Flaps of guinea pig ileum are superfused in series with Tyrode liquid with or without isoretulin added. This, from 10 -6 M (0.4 ⁇ g / ml) reduces the myostimulatory action of histamine on the ileum.
  • This antagonism is of a non-competitive type: the dose-response curve for histamine is shifted to the right but no longer reaches the maximum response, the antispasmodic effect increases with increases in the concentration of isoretulin (10 -6 at 10 -4 M or from 0.4 to 35 ⁇ g / ml). For the highest concentration, the response to histamine is reduced by 20 times and the maximum response only reaches 50% of the initial maximum response.
  • This antagonism is non-specific since it is also exerted vis-à-vis the myostimulating effect of bradykinin. O-acetylisoretulin (10 -6 and 10 -5 M) is inactive in this test.
  • the following therapeutic indications can be particularly retained.
  • the doses useful to be administered to humans by the oral route are of the order of 25 to 50 mg per dose, preferably at a rate of 1 to 3 doses per day.

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Abstract

Composés à effet pharmaceutique répondant à la formule générale (I) dans laquelle en position 16, soit R1, soit R2 doit représenter l'hydrogène tandis que celui des substituants R1 ou R2 qui ne représente pas l'hydrogène représente -CH2OH- ou -CH2OH acylé, de préférence acétylé ou une fonction aldéhyde; R3 en position 1 représente un reste alkyle ou un reste acyle, de préférence un reste acétyle; R4 en position 18 représente une chaîne alkyle, de préférence méthyle, un groupe -CH2OH- ou -CH2OH acylé de préférence acétylé; R5 représente l'hydrogène ou un substituant sur l'anneau benzénique qui peut être hydroxyle ou méthoxy ainsi que les composés substitués sur l'azote en position 4 et les dérivés dans lesquels la double liaison C19-C20 est hydrogénée. Les composés ont un effet antiinflammatoire, un effet analgésique et un effet antispasmodique.

Description

UTILISATION DE COMPOSES DE LA SERIE DE LA RETULINE ET DE L'ISORETULINE Â TITRE DE COMPOSÉS À ACTIVITÉ PHARMACEUTIQUE, EN PARTICULIER DE MEDICAMENTS ANALGESIQUES, ANTISPASMODIQUES ET ANTIINFLAMMATOIRES
Objet de l'invention
La présente invention porte sur l'utilisation pharmacologique de composés de la série de la rétuline et de l'isorétuline en exploitant leurs effets antinociceptifs et antispasmodiques.
Résumé de l'art antérieur
On sait que la rétuline et l'isorétuline constituent des alcaloïdes indoliniques, qui peuvent être extraits de différentes Loganiacees du genre Strychnos, où ils sont présents à la place d'autres alcaloïdes tels que la strychnine, dont la toxicité est bien connue.
L'isorétuline (16-épirétuline) est la forme déri¬vant habituellement de la strychnine dans les voies d'hémisynthèse et répond à la formule
Figure imgf000003_0001
tandis que la rétuline correspond à la formule
Figure imgf000004_0001
La littérature mentionne plusieurs voies d'hémisynthèse de ces composés qui ont été mises au point essentiellement pour élucider la structure de ces composés et de leurs dérivés.
On peut citer notamment : E. WENKERT et K. SKLAR, Synthesis of Rétuline, J.Org. chem. (1966), 31, pp. 2689-2691, (qui concerne aussi l'isorétuline);
J.R. HYMON et al., Die Chemie des WIELAND-GUMLICH Aldehyds und seine Derivaten, Helv.chim.Acta (1969), 52, pp. 1564-1602; J.R. HYMON et al., Synthèse des Retulins, Helv.chim.Acta. (1966), 49, pp. 2067-2071.
D'autres composés analogues de la série de la rétuline et de l'isorétuline ont été également décrits par M. TITS, L. ANGENOT et D. TAVERNIER dans les publications suivantes : Phytochemistry, 1979, Vol. 18, pp. 515-516 Phytochemistry, 1980, Vol. 19, pp. 1531-1534 Tetrahedron Letters, 1980, Vol. 21, pp. 2439-2442 Planta Medica, 1981, Vol. 41, pp. 240-243 Journal of Natural Products, 1983, Vol. 46, No. 5, pp. 630-645
J.Pharm.Belg., 1983, Vol. 38, No. 5, pp. 241-245 Phytochemistry, 1985, Vol. 24, No. 1, pp. 205-207 Principe de l'invention
La présente invention est basée sur l'observation que la rétuline et l'isorétuline ainsi qu'un grand nombre de dérivés de ces composés présentent un effet antiinflammatoire, un effet analgésique et un effet antispasmodique.
On sait qu'il n'existe en fait que peu de types différents de composés anti-inflammatoires non stéroïdiens et que ceux-ci sont parmi les médicaments les plus prescrits. Les composés les plus couramment utilisés comportent tous une fonction acide ou pseudo-acide et une relation de causalité a été établi entre l'usage de ces composés et notamment le risque d'ulcère gastro-intestinal hémorragique.
Des composés à effet antiinflammatoire exerçant peu d'effet secondaires indésirables présentent donc un intérêt considérable.
Selon la présente invention, il est proposé à titre de médicaments des composés selon la formule générale
Figure imgf000005_0001
dans laquelle en position 16, soit R1, soit R2 doit représenter l'hydrogène tandis que celui des substituants R1 ou R2 qui ne représente pas l'hydrogène représente -CH2OH- ou -CH2OH acylé, de préférence acétylé ou une fonction aldéhyde; R3 en position 1 représente un reste alkyle ou un reste acyle, de préférence un reste acétyle;
R4 en position 18 représente une chaîne alkyle, de préférence méthyle, un groupe -CH2OH- ou -CH2OH acylé de préférence acétylé; R5 représente l'hydrogène ou un substituant sur l'anneau benzénique qui peut être hydroxyle ou méthoxy ainsi que les composés substitués sur l'azote en position 4 et les dérivés dans lesquels la double liaison C19-C20 est hydrogénée. Un grand nombre de ces composés sont connus en tant que tel et leur synthèse a été décrite dans la littérature. Les composés peuvent tous être obtenus facilement par voie d 'hêmisynthèse au départ de la strychnine ou de dérivés ou d'homologues de la strychnine.
L'hémisynthèse de l'isorétuline par exemple a été décrite à partir de la strychnine dont les sources naturelles sont abondantes (S.nux-vomica, S.ignatii, S.icaja). Le rendement final est d'environ 15% d'isorêtuline.
Deux autres alcaloïdes peuvent aussi servir avantageusement à cette hémisynthèse, en ce sens que le nombre réduit d'étapes, permet d'obtenir un meilleur rendement final (40 à 45% d'isorétuline). Il s'agit de la diaboline (rencontrée initialement dans la S.diaboli d'Amérique du Sud) et son dérivé dêsacétylé, généralement connu sous le nom d'aldéhyde de WIELAND et GUMLICH plutôt que sous la dénomination de caracurine VII qui lui avait été attribué après son extraction à partir de plusieurs Strychnos sud-américains, notamment S.toxifern, S.cordata. Quoique la diaboline et son dérivé aient ensuite été retrouvées dans d'autres espèces américaines et africaines, ces substances ne sont pas disponibles actuellement sur le marché des produits chimiques.
La série rétuline est moins facilement accessible à partir de la strychnine qui possède une configuration inverse au niveau du carbone en position 16.
Par contre, la rétuline est synthétisée avec un rendement de 50% à partir de l'akuammicine (alcaloïde des graines de Picralima nitida) disponible sur le marché mais à des prix sensiblement plus élevés de l'ordre de 200 fois celui de la strychnine.
On peut également obtenir la rétuline et l'isorétuline par transformation des alcaloïdes dimères du type strychnobiline, majoritaires dans les écorces de racines du S.variabilis (Kinshasa). Enfin rappelons que la rétuline est présente en quantité appréciable dans les tiges du S. henningsii du Zaïre.
A titre d'illustration des voies de synthèse possibles on peut se référer aux Tableau I et II annexés qui indiquent de manière schématique la préparation de l'isorétuline et de la rétuline au départ de la strychnine. Des illustrations spécifiques d'exécution des différentes étapes opératoires seront décrites dans les exemples qui suivent. On notera que la fonction amido en position 1 de l'isorétuline peut subir une hydrolyse permettant d'obtenir des produits indiqués pour le substituant R3 ci-dessus.
De même, la fonction -CH2OH en position 16 peut être facilement esterifiée ou oxydée en aldéhyde.
Partant du composé V on peut préserver la fonction -CH2OAC en position 18, l'hydrolyser en fonction -CH2OH ou encore la réduire (comme dans l'isorétuline) en groupe méthyle. Les techniques classiques de réduction permettent de réduire la fonction éthylidène en position C19-C20.
De même les atomes d'azote en position 4 et particulièrement en position 1 peuvent être substitués à l'aide de réactifs appropriés. Au départ de l'aldéhyde de Wieland-Gumlich représenté par la formule III dans le Tableau I, on peut réaliser l'épimère β de l'isorétuline à savoir la rétuline et réaliser les substitutions ou modifications décrites pour l'isorétuline.
Il convient de noter que les composés comportant le reste formaldêhyde tout en étanr. pharmacologiquement actifs peuvent présenter une toxicité en particulier une cytotoxicité qui peut rendre leur utilisation thérapeutique peu indiquée. Ils conservent dans ce cas leur intérêt au moins comme produits intermédiaires dans la synthèse.
Propriétés phaxmacologiques
Les observations les plus intéressantes sont les suivantes : Certains des composés réduisent des oedèmes expérimentaux chez le rat. Ils ne semblent pas inhiber la synthèse des prostaglandines. Les mêmes composés inhibent la stimulation de muscles lisses. Ils s'avèrent de plus inhibiteurs de la stimulation nociceptive chez la souris. Chez cette espèce, l' isorétuline possède un index thérapeutique égal à 15.
Activité spécifique et toxicité
a) 1. Toxicité aiguë par voie intra-veineuse chez la souris.
Les alcaloïdes des séries rétuline et isorétuline sont beaucoup moins toxiques que le strychnine dont la
LD50 est de 0,5 mg/Kg et que les alcaloïdes diquaternai- res curarisants dont la LD50 est voisine de 50μg/Kg.
L'isorétuline ayant une LD50 de 70 mg/Kg, est cent quarante fois moins toxique que la strychnine. Les autres alcaloïdes testés ont une toxicité voisine; seuls les dimères du type strychnobiline et l'isorêtulinal sont un peu plus toxiques (environ 30 mg/Kg), ce qui représente encore une toxicité soixante fois moindre que celle de la strychnine. 2. Toxicité par voie orale.
En administration intragastrique chez la souris, l'isorétuline possède une LD50 de 300 mg/Kg. Les animaux ayant reçu des doses inférieures ne présentent aucune lésion, en particulier au niveau gastro-intestinal.
b) Effets généraux sur le système nerveux. Action analgésique.
Les expériences réalisés sur la souris par voie intragastrique à la dose unique de 20 mg/kg montrent que les molécules n'exercent pas, à cette dose, d'effets significatifs sur le temps de sommeil, la curiosité, la motilité et les facultés d'agrippement.
Cependant, l'isorétuline et l' tulinal possèdent une activité analgésique non négligeable vis à vis de l'action nociceptive de la phénylparabenzoσuinone.
Dans ce test classique de l'activité analgésique, la ED50de l'isorétuline est de 20 mg/kg). L'isorétuline est donc nettement plus active que l'aspirine (182 mg/kg).
c) Effets sur le système cardiovasculaire.
La rétuline et l'isorétuline en injection intraveineuse chez le rat aux doses de 7 à 49 mg/Kg ne modifient pas la pression artérielle générale.
d) Effets anti-mitotiques (cytotoxicité) .
Les activités cytotoxiques potentielles de la rétuline et de ses analogues ont été testées sur différentes souches de milieux de cultures de cellules normales (souche 2002) ou cancéreuses (mélanôme B16, ascite L1210, carcinome HeLa).
Aux doses de 1 et 10 μg d'alcaloïde par ml de culture, aucun effet ne fut décelé pour les alcaloïdes, à l'exception de l'isorétulinal qui exerçait un effet anti-mitotique faible mais intéressant. C'est ainsi qu'à 1' encontre du mélanôme B16, l'isorétulinal réduit les mitoses d'un facteur huit à la concentration de 10 μg/ml, et d'un facteur vingt à la concentration de 50μg/ml. A cette dernière concentration, une nécrose des cellules est cependant manifeste. Nous supposons que l'activité de l'isorétulinal pourrait être due à la fonction aldéhyde.
e) Action antiinflammatoire.
L'isorétuline inhibe l'oedème à la carragénine chez le rat (ED50 : 40 mg/Kg). Elle réduit également l'oedème au zymosan chez le rat.
La rétuline est également inhibitrice dans ces deux tests.
Par contre7 brucine, holstiine, o-acétylisorétuline sont inactives dans les tests précités.
Cet effet antiinflammatoire ne dépend pas de l'inhibition de la synthèse des prostaglandines : la rétuline et l'isorétuline ne modifient pas l'action hypotensive de l'acide arachidonique chez le rat. Il en résulte que le mécanisme d'action de l'effet antiinflammatoire est tout à fait original.
f) Effet antispasmodique.
L'isorétuline réduit la stimulation de l'iléon de rat par l'histamine et la bradykinine. Les concentrations inhibitrices sont de l'ordre de 10-6 à 10-4 M.
L'invention sera décrite plus en détail à l'aide d'exemples illustratifs des voies d'hémisynthèse étudiées et d'études des propriétés pharmacologiques.
Les voies de synthèse explorées sont celles schématisées au Tableau I annexé, décrivant l'hémisynthèse de l'isorétuline à partir de la strychnine. Cette hémisynthèse se déroule en six étapes, les deux premières aboutissant à l'aldéhyde de WIELAND-GUM-LICH. Exemple 1 : PREPARATION DE LA 23-ISONITROSOSTRYCHNINE
(formule II) À PARTIR DE LA STRYCHNINE
(formule I)
25 g de strychnine (formule I) sont solubilisées dans 150 ml d'éthanol absolu et placés dans un ballon à trois tubulures équipé d'un entonnoir, d'un condensateur à reflux et d'un agitateur. On ajoute, sous agitation, 45 ml de nitrite d'isoamyle puis goutte à goutte pendant une heure une solution préparée à l'aide de 6,75 g de sodium dans 188 ml d'alcool absolu. La température du mélange augmente graduellement de 60°C à 90°C et est maintenue à 90ºC pendant 4 heures. Le mélange est évaporé sous pression réduite à siccité, pour éliminer l'excès de nitrite d'isoamyle. Au résidu, on ajoute 37 ml d'eau que l'on évapore à sec et on recommence une fois cette opération. Finalement, on ajoute au résidu^ 225 ml d'eau, 40 ml d'acide acétique et 1,5 g de charbon actif. On filtre et on ajoute à nouveau 1,5 g de charbon actif au filtrat. Après une nouvelle filtration et addition de 18,5 ml d'acide chlorhydrique concentré, on maintient le filtrat à 0°C pendant 24 heures. Le précipité qui s'y forme est le chlorhydrate de 23-isonoitrosostrychnine (formule II). Le rendement est de 80%.
Exemple 2 : TRANSFORMATION DE LA 23-ISONITROSOSTRYCHNINE (formule II) EN ALDEHYDE DE WIELAND-GUMLICH (formule III)
À 5 g de chlorhydrate de 23-isonitrosostrychnine, on ajoute par petites portions, sous agitation pendant 5 minutes, 75 ml de chlorure de thionyle à la température de 0ºC. La température est ensuite augmentée jusqu'à 20ºC et après 5 heures, le mélange est évaporé à sec. On ajoute 50 ml d'éther, on agite le mélange et la solution est à nouveau évaporée à sec. Cette opération est répé têe 3 fois. Finalement, le résidu est solubilisé dans
125 ml d'acide chlorhydrique IN et chau.ffé à 100°C pendant 3 heures. Après refroidissement, la solution est alcalinisêe par l'ammoniaque et extraite 5 fois avec un égal volume d'éther puis épuisée par le chloroforme à l'aide d'un extracteur liquide/liquide. Les extraits sont rassemblés, évaporés à sec et le résidu est cristallisé dans le benzène : il s'agit de l'aldéhyde de WIELAND-GUMLICH (formule III).
Exemple 3 : REDUCTION DE L'ALDÉHYDE DE WIELAND-GUMLICH
500 mg du résidu obtenu au stade précédent sont solubilisés dans 25 ml du mélange méthanol : eau/8:2. On y ajoute un excès de borohydrure de sodium et on laisse en contact pendant 1,5 heure sous agitation à température ordinaire. Ensuite, on dilue par 10 ml d'eau et on évapore le méthanol sous pression réduite à l'évaporateur rotatif. Le mélange alcalin est extrait per le chloroforme à l'aide d'un extracteur liquide/liquide pendant 5 heures. La solution chloroformique, sêchée sur sulfate de sodium anhydre, est évaporée à sec. Le résidu sec constitue l'aldéhyde de WIELAND-GUMLICH réduit (formule IV).
Exemple 4 : ACÉTYLATION DE L'ALCALOÏDE RÉDUIT OBTENU À L'EXEMPLE PRÉCÉDENT
On chauffe à reflux pendant 1, 5 heure au bain-marie, une solution composée de l'alcaloïde obtenu à l'exemple 3 (formule IV), de 2 ml d'anhydride acétique et de 5 ml de pyridine. Après ce laps de temps, la solution est évaporée sous pression réduite et additionnée d' éther. La solution éthérée du résidu huileux est filtrèe sur une courte colonne d'alumine basique Brockmann. On obtient après évaporation de l'éther, l'alcaloïde triacétylé brut sous l'aspect d'une gomme incolo re ( formule V) .
Exemple 5 Î HYDROGÉNATION DE L'ALCALOÏDE TRIACÉTYLÉ (formule V) : ACÉTYLISORÉTULINE (formule VI)
À environ 300 mg de l'alcaloïde triacétylé obtenu à l'exemple 4, on additionne 50 ml d'eau, 30 ml d'acide acétique glacial, 0,5 ml d'acide chlorhydrique concentré et 135 mg de charbon palladie à 10%. On procède ensuite à l'hydrogénation sous pression normale et à température ordinaire jusqu'à ce que la quantité d'hydrogène nécessaire à la formation de la chaîne éthylidénique soit adsorbée. Le catalyseur est filtré et la solution aqueuse acide est alcalinisee par l'ammoniaque. La solution alcaline est extraite par le chloroforme (4 × 50 ml). Après évaporation du chloroforme desséché sur sulfate de sodium anhydre, on _abtient un résidu d'acétylisbrêtuline. ( formule VI).
Exemple 6 : SAPONIFICATION DE L'ACÉTYLISORÉTULINE (formule VI) : ISORÉTULINE (formule VII)
L'acécylisorétuline est solubilisée dans 10 ml d'ethanol et cette solution est alcalinisee par de l'hydroxyde de sodium à 10% dans l'eau. On concentre cette solution à l'évaporateur rotatif, jusqu'à ce qu'un précipité commence à se former puis on extrait le mélange par le chloroforme. Les extrais chloroformiques, déshydratês sur sulfate de sodium anhydre, sont évaporés et le résidu obtenu est critallisé dans l'acétate d ' éthy- le. Il s'agit de l'isorétuline (formule VII).
Les spectres UV et IR des alcaloïdes obtenus lors de ces diverses réactions sont conformes aux données de la littérature. Pour l'alcaloïde obtenu au dernier stade, l'isorétuline, le spectre de masse indique que l'ion moléculaire et la fragmentation sont également confor mes .
Des essais complémentaires portant qur la formation de dérivés de la rétuline et de l'isorétuline ont également été effectués.
Exemple 7 : RÉDUCTION DES ALDÉHÏDES "RÉTULINAL ⇋ ISORÉTULINAL" : RETULINE ET ISORETULINE
Pour cette réduction, on a opéré de la même façon que l'exemple 3.
50 mg de la paire aldéhydique sont dissous dans 10 ml du mélange méthanol/8: 2. A cette solution, on ajoute un excès de borohydrure de sodium. On laisse en contact pendant 1,5 heure à température ordinaire et sous agitation. Après ce laps de temps, le mélange est dilué par de l'eau et le méthanol est évaporé sous pression réduite. La solution alcaline est extraite au chloroforme et les solutions chlrόfcrmiques séchées sur le sulfate de sodium anhydre sont distillées sous pression réduite jusqu'à siccité.
Après chromatographie couche mince sur silicagel on observe bien 2 spots correspondants d'une part à la rétuline, d'autre part à l'isorètuline. Sur le spectre IR, on note la disparition de la bande aldéhydique à 1735 cm-1.
Le même mode opératoire permet de réduire le 16 α-hydroxyisorêtulinal en 16 α-hydroxyisorétuline.
Exemple 8 : DESACÉTYLATION DE LA RETULINE (OU DE L'ISORÉTULINE) : DÉSACÉTYLRÉTULINE (OU DÉSACÊ-
TYLISORÉTULINE)
50 mg de rétuline (ou d' isorétuline) sont dissous dans 50 ml d'acide chlorhydrique N et chauffés pendant 4 heures à reflux sous atmosphère d'azote. La solution est alors alcalinisee par la soude IN jusque pH 11 puis extraite par le chloroforme. Les extraits chloroformiques séchés sur sulfate de sodium anhydre, sont distillés sous pression réduite jusqu'à siccité.
Le résidu chromatographié sur couche mince de silicagel montre la présence d'un seu] produit se colorant directement en orangé avec le sulfate cérique et le chlorure ferrique.
Le spectre UV/I max (log ε ) : 212 (4.52), 248
(4.2) et 300 (3.8) nra et le spectre IR où l'on observe la disparition de la bande à 1660 cm-1, indiquent la présence d'un chromophore N-H indolinique.
Suivant le produit de départ, on forme la désacétylrétuline ou la désacétylisorétuline.
Exemple 9 : ACÉTYLATION DE LA DÉSACÉTYLRÉTULINE (OU DE
LA DÉSACÉTYLISORÉTULINE) : ACÉTYLRÉTULINE (OU ACÊTYLISORÉTULINE)
On a procédé comme à l'e'emple 4. 25 mg de désacétylrêtuline (ou désacétylisorétuline) sont dissous dans 5 ml de pyridine; on y ajoute 2 ml d'anhydride acétique. La solution est chauffée à reflux pendant 1,5 h au bain-marie. On l'évaporé ensuite à l'évaporateur rotatif sous pression réduite et on reprend fréquemment le résidu huileux par quelques ml de méthanol pour faciliter l'élimination de la pyridine.
Sur le spectre UV du résidu, on retrouve le chromopore N-acylindolinique et sur le spectre IR les deux bandes caractérisant la fonction ester à
Figure imgf000015_0002
1240 et 1740 cm-1 et la bande amide à
Figure imgf000015_0001
1655 cm-1.
Dans chaque cas, l'alcaloïde formé n'est pas révélé par le sulfate cérique et devient orangé avec le chlorure ferrique après chauffage de 5 minutes à 100'C.
Suivant l'alcaloïde de départ, il se forme l'acétylrétuline (ou l'acétylisorétuline). Exemple 10 : ACÉTYLATION DE LA RETULINE (OU DE L'ISORETULINE) : ACÉTYLRÉTULINE (OU ACÉTYLISORÉTULINE)
10 mg de rétuline (ou d' isorétuline) sont dissous dans 1 ml de pyridine auquel on ajoute 4 ml d'anhydride acétique. Le contact est maintenu pendant 24 heures à la température du labratoire. Ensuite, on évapore la solution à l'êvaporateur rotatif jusqu'à siccité en reprenant fréquemment le résidu par quelques ml de méthanol, comme dans le cas précédent, jusqu'à élimination complète de la pyridine. Enfin, on solubilise le résidu dans quelques ml de chloroforme et on lave cette solution par quelques ml d'ammoniaque à 2,5 % puis par l'eau. On évapore le chloroforme après l'avoir déshydraté sur le sulfate de sodium anhydre. Le résidu obtenu en partant de la rétuline migre au même Rf que celui de l'alcaloïde formé à l'exemple 9 à partir de la désacétylrêtuline (ceci est aussi applicable à la série "iso"). Dans les deux cas, l'alcaloïde formé ne se colore pas avec le sulfate cérique et devient orangé avec le chlorure ferrique à 100°C. Les spectres UV et IR sont similaires à ceux des alcaloïdes obtenus à l'exemple 9 . Il s'agit donc de l'acêtylrétuline (ou de l'acétylisorétuline).
Exemple 11 Ï FORMYLATION DE LA DÉSACÉTYLRÊTULINE ET SAPONIFICATION DU PRODUIT OBTENU Ï Na-FORMYL-DÉSACÉTYLRÉTULINE
0,11 moles d'anhydride acétique et 0,11 moles d'acide formique sont chauffés pendant deux heures sous agitation à 50°C.
10 mg de désacétylrêtuline sont dissous dans 1 ml de pyridine et 3 ml de la solution préparée ci-dessus. On abandonne cette solution au moins 48 heures à la température du laboratoire puis on évapore le mélange à sec comme décrit aux exemples 9 et 10. Le résidu est dissous dans 2 ml d'ethanol auquel on additionne 2 ml d'hydroxyde de sodium à 10% dans l'eau. On concentre la solution sous pression réduite à l'évaporateur rotatif jusqu'au moment où un précipité commence à se former puis on extrait l'alcaloïde par le chloroforme qui, après déshydratation sur sulfate de sodium anhydre, est évaporé à sec.
Le produit formé ne se colore que très faiblement à froid avec le sulfate cérique et devient rouge-orangé après chauffage de 5 minutes à 100°C avec le chlorure ferrique.
Sur son spectre UV, on retrouve le chromophore N-acylindolinique et sur son spectre IR, une bande N-acyle à 1665 cm-1. Son spectre de masse indique un ion moléculaire à m/z 324 et d'autres fragments caractéristiques du N-formyle, notamment m/z 172.
L'alcaloïde obtenu est la Na-formyl-désacétylrétuline.
Exemple 12 : CONDENSATION DE LA DÉSACÉTYLRÉTULINE (OU DE LA DÉSACÉTYLISORÉTULINE) AVEC LE FORMALDEHYDE : ROSIBILINE (OU ISOROSIBILINE)
11 mg de désacêtylrétuline (ou de désacétylisorétuline) sont dissous dans 1,5 ml d'acide acétique à 10%. On ajoute 0,1 ml de formol. La solution est maintenue à la température du laboratoire pendant 48 heures. Au bout de ce temps, elle est alcalinisee par l ammoniaque puis extraite par le chloroforme (3 × 10 ml). La solution chloroformique séchée sur sulfate de sodium anhydre est distillée sous pression réduite jusqu'à siccité. Le résidu chromatographie montre une tache majoritaire se colorant - en rose intense avec le chlorure ferrique et en rouge virant au jaune puis au vert avec le sulfate cérique, lorsque l'alcaloïde de départ est la désacétylisorétu line
- en rose avec le chlorure ferrique et en rouge virant à l'orange avec le sulfate cérique lorsque l'alcaloïde de départ est la désacétylisorêtuline. Leur spectre UV indique un chromophore N-H indolinique et leur spectre de masse un ion moléculaire à m/z 308.
La rosibiline (ou l'isorosibiline) ont donc bien été formée.
Exemple 13 : HYDROLYSE ACIDE DE LA ROSIBILINE (OU DE
L* ISOROSIBILINE) : DÉSACÉTYLPETULINE (OU
DÉSACÉTYLISORÊTULINE)
15 mg de rosibiline (ou d' isorosibiline) sont dissous dans 4 ml d'un mélange méthanol : acide chlorhydrique 2 N/l:l. La solution est maintenue quelques heures à la température de laboratoire puis est alcalinisee jusque pH 11 par l'hydroxyde de sodium à 10%. Elle est ensuite extraite par le chloroforme (3 × 10 ml ) qui est évaporé à sec après passage sur sulfate de sodium anhydre»
Les produits d'hydrolyse obtenus sont la désacétylrêtuline (ou la désacétylisorêtuline).
Exemple 14 : HYDROLYSE ACIDE DES ALCALOÏDES BISINDOLI- QUES TYPE "STRYCHNOBILINE" : DÉSACÉTYLRÉ- TULINE ET "RÉTULINAL ⇋ ISORÉTULINAL
50 mg d'alcaloïde bisindolique ( strychnobiline, isostrychnobiline ou 12' hydroxyisostrychnobiline) sont dissous dans 2 ml d'acide chlorhydrique 2 N. On laisse en contact pendant 15 minutes à la température du laboratoire puis on ajoute 4 ml d'eau. Après 1,5 heure, on alcalinise par hydroxyde de sodium 2 N jusqu'à pH 11 et on extrait les alcaloïdes par le chloroforme. Les solutions chloroformiques séchées sur sulfate de sodium an hydre sont évaporées à sec.
Le résidu est chromatographié sur silicagel dans différentes phases.
Lorsqu'on hydrolyse les alcaloïdes bisindoliques de PM 614 tels la strychnobiline et 1'isostrychnobiline, on observe sur les chromatogrammes plusieurs spots dont un se colore en rouge-orangé avec le sulfate cérique et le chlorure ferrique et correspond à la désacêtylrétuline et deux autres ne se colorent pas avec le sulfate cérique mais deviennent orangés avec le chlorure ferrique après chauffage de 5 minutes à 100"C; ces spots (dont un est plus intense que l'autre) sont identiques à ceux de "l'isorétulinal, rétulinal.". Lorsqu'on hydrolyse les alcaloïdes bisindoliques de PM 630 tels la 12'-hydroxyisostrychnobiline, on observe sur les chromatogrammes, plusieurs spots dont un se colore également en rouge-orangé avec le sulfate cérique et le chlorure ferrique et correspond aussi à la désacêtylrétuline, tandis que les deux autres qui ne sont pas révélés par le sulfate cérique deviennent brun-violet avec le chlorure ferrique, après chauffage de 5 minutes à 100ºC; ces spots correspondent aux alcaloïdes 12-hydroxyisorétulinal et 12-hydroxyrêtulinal en équilibre.
Le cycle oxazinique s'ouvre très facilement en milieu chrlohydrique. Pour imiter le milieu physiologique, on a laissé ces alcaloïdes pendant 3 heures à 37 °C en milieu HCl 0,1 N et constaté qu'après ce laps de temps, les alcaloïdes bisindoliques asymétriques étaient complètement hydrolyses.
Le tableau II ci-annexé reprend l'hémisynthèse de la rétuline à partir de la strychnine. Les premières étapes sont identiques à celles de la série "isorétuline" (voir exemples 1 et 2). Exemple 15 : TRANSFORMATION DE L'ALDÉHYDE DE WIELANDGUMLICH EN LACTAME HEXACYCLlQUE (FORMULE IX)
3.1 g de W.G.A. et 1.95 g de KCN sont solubilisés dans 100 ml d'H2O et 1.2 g d'HAc. La solution est agitée pendant 6 h à 78ºC. Après refroidissement, le mélange rêactionnel est extrait plusieurs heures par du chloroforme au moyen d'un extracteur liquide/liquide. Les solutions chloroformiques sont maintenues une nuit à 4°C, la lactame hexacyclique y précipite.
Exemple 16 : HYDROGÉNATION DE LA LACTAME HEXACYCLIQUE
On solubilise 1.2 g de lactame hexacyclique dans 50 ml d'H2θ, 30 ml d'HAc et 0.5 ml d'HCl conc. On y ajoute 300 mg de charbon palladie à 10% et on procède à l'hydrogénation sous pression normale et à température ordinaire. Le catalyseur est filtré et la solution aqueuse acide est alcalinisee par l'ammoniaque avant d'être extraite par le chloroforme. Après évaporation du solvant desséché sur Na2SO4 anhydre, on obtient le produit hydrogêné (formule X).
Exemple 17 î REDUCTION DE LA FONCTION LACTAME
On solubilise 1 g d'alcaloïde obtenu à l'exemple 16 (formule X) dans 45 ml de tétrahydrofurane. On y additionne 640 mg de LiAlH4 on laisse en contact 10 minutes à température ordinaire puis on chauffe à reflux le mélange pendant 30 minutes. Ensuite, on ajoute sous refroidissement 15 ml d'acétate d'éthyle et on concentre cette solution à l'évaporâteur rotatif. Enfin, on additionne 30 ml d'une solution saturée de tartrate sodicopotassique et on extrait cette solution aqueuse par du chloroforme. Après évaporation du solvant, on obtient le produit réduit (formule XI) qui donne une coloration rouge cerise avec Ce(SO4)2/H2SO4.
Exemple 18 : FORMATION DE N-FORMYL-DÉSACÉTYLRÉTULINE (FORMULE XII)
A 1 g d'alcaloïde obtenu à l'exemple 17 (fig. XI), on ajoute 15 ml d'HAc à 10%, 975 mg de KI04 et 250 ml d'H2O. On laisse en contact 12 minutes puis on additionne 3 g de NaBH4 et on abandonne le tout 14 h à 4°C. Enfin, cette solution aqueuse est extraite par le chloroforme. Après évaporation du solvant, on récupère la N-formyl-désacétylrétuline.
De la N-formyl-désacêtylrétuline, on passe facilement à la désacêtylrétuline par hydrolyse acide (cf. exemple 8) puis à la rétuline (cf. exemple 9).
Exemple 19 : OXYDATION DE L'ISORETULINE (OU RÉTULINE) EN ISORÉTULINAL ⇋ RÉTULINAL)
La réaction d'oxydation de la fonction alcoolique de l'isorétuline présente un double intérêt primordial lors des hémisynthèses, car elle permet d'obtenir des diastéréoisomères en équilibre, isorétulinal et rétulinal, qui authorisent non seulement l'hémisynthèse de nombreux alcaloïdes dimères symétriques ou non, mais également, par réduction, de passer de la série isorétuline à la série rétuline, moins facilement accessible.
50 mg d'isorétuline (ou de rétuline) sont solubilisés dans 2 ml de dichlorométhane. On met en suspension 400 mg de pyridinium chlorochromate (PCC) et 500 mg d'acétate sodique anhydre dans 4 ml de dichlorométhane. On ajoute sous agitation, la solution d'isorétuline et on laisse en contact, toujours sous agitation, pendant trois heures. À la fin de la réaction, on ajoute à la suspension une solution ammoniacale diluée et on extrait l'aldéhyde formé par cinq fois 25 ml de chloroforme. Le rendement est Quantitatif. Les propriétés pharmacologiques de l'isorétuline et de la rétuline ont fait objet des observations suivantes.
Exemple 20 : OEDÈME À LA CARRAGÉNINE LAMBDA
Les substances à tester sont administrées par voie intrapéritonéale une demi-heure avant l'injection de carragénine lambda dans la sole plantaire. Le volume de la patte est mesuré par plethysmometrie, avant, puis une, deux, trois et quatre heures après l'injection de carragénine (1 mg/patte).
- Les premiers essais d'orientation ont porté sur l'isorétuline utilisée aux doses de 8, 16, 32 et 64 mg/Kg. Les résultats reprennent l'augmentation du volume de la patte, exprimée en pourcentage du volume normal.
1 heure 2 heures 4 heures Témoin 24.8 ± 2.7 52.3 ± 5 78.1 + 5.9 (8)
8 mg/Kg 20.2 ± 6.5 56.6 ± 7.3 82.4 + 8.3 (5)
16 mg/Kg 16 ± 2.3 36 ± 6.2 68 + 7.9 (5)
32 mg/Kg 19.7 ± 4.1 35.2 ± 6.1 57.7 ± 5.7 (8)
64 mg/Kg 12.4 ± 1.4 33 ± 3.4 69.6 ± 6.9 (6)
L'isorétuline est nettement inhibitrice à partir de 32 mg/Kg, elle n'est pas active à 8 mg/Kg et l'effet est moindre après 4 heures pour la dose, de 16 mg/Kg.
- Essais avec la rétuline.
1 heure 2 heures 4 heures Témoin 24.2 = 3 68.8 + 7 93.2 + 4.9 (5) 45 mg/Kg 30.4 + 11.6 51.2 + 11.5 63.2 + 6.1 (5)
La rétuline est active pour 45 mg/Kg. Son activité est proche de celle de l'i'orétuline (après deux heu res).
Deux essais supplémentaires ont été effectués en injectant la rétuline et d' isorétuline aux doses de 50
/fcg et 250£--g dans la patte, en même temps que la carra- génine. A ces doses, ces deux substances ne modifient pas l'oedème et elles n'agissent donc pas par un effet contre-irritant.
- Essais avec d'autres substances proches.
Les résultats reprennent l'augmentation du volume de la patte exprimée en pourcentage de l'accroissement mesuré chez les animaux témoins après 4 heures.
Isorétuline 32 mg/Kg 74 + 7.3%; p< 0.05
40 mg/Kg 65 + 8.4%; p< 0.05 Rétuline 45 mg/Kg 68 + 6.5%; p <0.01
O-ac étylisorétuline 25 mg/Kg 114 + 4.5%
50 mg/Kg 90.3 + 16.4% Holstiine 25 mg/Kg 90 + 4.6%
50 mg/Kg 105 + 9.2% Brucine 50 mg/Kg 98.7 + 7%
100 mg/Kg 60% des animaux meurent en convulsions
Seuls de la série citée, le rétuline et l'isorétuline présentent une activité anti-inflammatoire.
L'oedème à la carragénine dépend de l'intervention des kinines et des leucocytes avec leurs facteurs pro-inflammatoires dont les prostaglandines (PG). Cet oedème est inhibé par l'aspirine et l'indométhacine.
Exemple 21 : OEDÈME AU ZYMOSAN
On a étudié ensuite l'effet de l'isorétuline sur l'oedème au zymosan. Celui-ci se développe très rapidement grâce à la libération immédiate des aminés mastocytai res. Pour minimiser cette influence, tous les rats sont traités par mépyramine et méthysergide une demi-heure avant l'injection de zymosan (1 mg/patte). L'isorétuline a été administrée par voie intrapéritonéale (40 mg/Kg) en même temps que les anti-amines.
1 heure 3 heures 5 heures Témoins 28.3 + 2.9 44.8 + 5.7 47.8 + 6.9
40 mg/Kg 12.5 + 2.8 29.3 + 3.8 34.4 + 4.6
L'isorétuline par voie intrapéritonéale exerce un effet inhibiteur statistiquement significatif sur l'oedème au zymosan dans sa phase précoce. Cet oedème dépend de l'intervention du complément avec mise en jeu des aminés mastocytaires (cette participation est réduite dans nos conditions expérimentales) et de la stimulation des polynucléaires. Cet oedème est inhibé par l'aspirine et l'indométhacine surtout lorsque les effets des aminés mastocytaires a été supprimé. Ces résultats indiquent que dans ces deux modèles de réaction inflammatoire la rétuline et l'i'orétuline possèdent un pouvoir anti-inflammatoire.
Exemple 22 s ACTION HYPOTENSIVE DE L'ACIDE ARACHIDONIQUE
L'action hypotensive de l'acide arachidonique dépend de sa conversion en substances de type PG, la PGI2 principalement. Elle est donc un témoin d'une synthèse de PG se réalisant dans le système cardiovasculaire de rat et est supprimée par tous les inhibiteurs de la formation des PG, dont l'aspirine et l'indométhacine. La rétuline a été utilisée à des doses allant de 40 à 49 mg/Kg. Elle ne modifie pas l'action de l'acide arachidonique chez les 6 animaux testés. Elle ne peut donc pas se ranger dans les inhibiteurs de la synthèse des PG.
De plus, les résultats montrent que cette sub stance n ' a par elle-même aucun effet vasomoteur . Son action anti-inflammatoire ne peut donc s ' expliquer par un collapsus cardiovasσulaire qui compromettrait les échanges au niveau capillaire .
Exemple 23 : EFFET ANTISPASMODIQUE : INHIBITION DE L 'ACTION MYOSTIMU LANIE DE L ' HISTAMINE ET DE LA BRADYKININE SUR L ' ILÉON DE COBAYE
Des lambeaux d ' iléon de Cobaye sont superfusês en série par du liquide de Tyrode additionné ou non d ' isorétuline . Celle-ci , à partir de 10-6 M ( 0.4 μ g/ml ) réduit l'action myostimulante de l'histamine sur l'iléon. Cet antagonisme est de type non compétitif : la courbe dose-réponse à l'histamine est déplacée vers la droite mais n'atteint plus la réponse maximale, l'effet antispasmodique s'accroit avec les augmentations de la concentration en isorétuline (10-6 à 10-4 M soit de 0.4 à 35 μg/ml). Pour la concentration, la plus élevée, la réponse à l 'histamine est réduite de 20 fois et la réponse maximale n'atteint plus que 50% de la réponse maximale initiale. Cet antagonisme est non spécifique puisqu'il s'exerce également vis-à-vis de l'effet myostimulant de la bradykinine . La O-acétylisorétuline (10-6 et 10-5 M) est dans ce test inactive.
Cet effet antispasmodique de l'isorétuline rapproche cette substance de la papavérine. Néanmoins l'isorétuline est dépourvue de l'effet vasodilatateur de la papavérine.
Indications thérapeutiques
On peut conclure des exemples qui précèdent que le produit possède des propriétés remarquables lui confêrant un large spectre d'applications.
Les indications thérapeutiques suivantes peuvent tout particulièrement être retenues. - Douleurs aiguës et chroniques de toute origine, en particulier a) douleurs d'origine spastique au niveau du tractus gastro-intestinal, des voies biliaires, et du système uro-génital, dysménorrhées d'origine spasmodique, crampes utérines, coliques néphrétiques, coliques biliaires et colites spasmodiques b) rhumatismes inflammatoires et affections péri-articulaires, bursites, synovites, tendinites, ténosynovites, goutte, affections musculo-squelettiques, arthrose
- Traitement des oedèmes inflammatoires de toute origine, atteignant les tissus mous.
Les résultats obtenus chez l'animal suggèrent que les doses utiles à administrer chez l'homme par voie orale sont de l'ordre de 25 à 50 mg par prise, de préférence à raison de 1 à 3 prises par jour.
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Claims

R E VE N D I CAT I O N S
1. A titre de composes a effet pharmaceutique les composés selon la formule générale
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dans laquelle en position 16, soit R1, soit R2 doit représenter l'hydrogène tandis que celui des substituants R1 ou R2 qui ne représente pas l'hydrogène représente -CH2OH- ou -CH2OH acylé, de préférence acétylé ou une fonction aldéhyde;
R3 en position 1 représente un reste alkyle ou un reste acyle, de préférence un reste acétyle;
R4 en position 18 représente une chaîne alkyle, de préférence méthyle, un groupe -CH2OH- ou -CH2OH acylé de préférence acétylé;
R5 représente l'hydrogène ou un substituant sur l'anneau benzenique qui peut être hydroxyle ou méthoxy ainsi que les composés substitués sur l'azote en position 4 et les dérivés dans lesquels la double liaison C19-C20 est hydrogénée.
2. Procédé pour l'obtention des composés selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'ils sont extraits de Loganiacees du genre Strychnos et soumis, le cas échéant à différents modifications ou substitutions ou sont obtenus par voie d'hémisynthèse au départ de la strychnine ou de dérivés ou d'homologues de la strychnine.
3. Procédé selon la revendication 2 caractérisé en ce qu'il comporte une réaction d'oxydation de la fonction alcoolique de l'isorétuline ou de la rétuline en formant des diastéréoisomères en équilibre, isorétulinal et rétulinal, en vue de l'hémisynthèse d'alcaloïdes dimères symétriques ou non, ou en vue, par réduction, de passer de la série isorétuline à la série rétuline ou inversement.
4. Compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles contiennent une dose active d'un composé selon la revendication 1 ou obtenu par le procédé de la revendication 2 ou 3.
5. Compositions pharmaceutiques selon la revendication 4 pour les indications suivantes :
- douleurs aiguës et chroniques de toute origine , en particulier a) douleurs d'origine spastique au niveau du tractus gastro-intestinal, des voies biliaires, et du système uro-gênital, dysménorrhées d'origine spasmodique, crampes utérines, coliques néphrétiques, coliques biliaires et colites spasmodiques b) rhumatismes inflammatoires et affections pêri-articulaires, bursites, synovites, tendinites, ténosynovites, goutte, affections musculo-squelettiques, arthrose; et
- traitement des oedèmes inflammatoires de toute origine, atteignant les tissus mous.
6. Compositions pharmaceutiques selon la revendication 4 ou 5 caractérisées en ce qu'elles sont prépa rées de manière à administrer chez l'homme par voie orale des doses de l'ordre de 25 à 50 mg par prise, de préférence à raison de 1 à 3 prises par jour.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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FR2825936A1 (fr) * 2001-06-18 2002-12-20 Malemba Jean Claude Mapangou Procede d'obtention d'un extrait sec riche en composes tensioactifs

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chemical Abstracts, volume 76, 1972, (Columbus, Ohio, US), M.B. Sultanov: "Results and aspects of a pharmacological study of indole alkaloids from plants of the genus Vinca", voir page 11 *
Chemical Abstracts, volume 78, 1973 (Columbus, Ohio, US), A.G. Kurmukov et al.: "Effect of vincanidine on the central nervous system", voir page 20 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2825936A1 (fr) * 2001-06-18 2002-12-20 Malemba Jean Claude Mapangou Procede d'obtention d'un extrait sec riche en composes tensioactifs

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