UA53780C2 - Method for producing material containing prostate-gland cells, the material containing prostate-gland cells and transplantation-based techniques for treating uterus fibromatosis, chronic prostatitis and disorders in male sexual functions - Google Patents
Method for producing material containing prostate-gland cells, the material containing prostate-gland cells and transplantation-based techniques for treating uterus fibromatosis, chronic prostatitis and disorders in male sexual functions Download PDFInfo
- Publication number
- UA53780C2 UA53780C2 UA2000095262A UA00095262A UA53780C2 UA 53780 C2 UA53780 C2 UA 53780C2 UA 2000095262 A UA2000095262 A UA 2000095262A UA 00095262 A UA00095262 A UA 00095262A UA 53780 C2 UA53780 C2 UA 53780C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- material containing
- prostate gland
- prostate
- cells
- transplantation
- Prior art date
Links
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims abstract description 54
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 title claims abstract description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 47
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 206010016629 fibroma Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 206010049444 fibromatosis Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 title claims abstract description 11
- 208000013507 chronic prostatitis Diseases 0.000 title claims abstract description 10
- 201000007094 prostatitis Diseases 0.000 title claims abstract description 10
- 230000036299 sexual function Effects 0.000 title abstract description 7
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 title abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 11
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 6
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 6
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000001139 rectus abdominis Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 4
- 206010057672 Male sexual dysfunction Diseases 0.000 claims description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000002563 splenic artery Anatomy 0.000 claims 3
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 abstract description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 abstract description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 34
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- 206010046798 Uterine leiomyoma Diseases 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 210000002332 leydig cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 2
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 2
- 210000000569 greater omentum Anatomy 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000000754 myometrium Anatomy 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 2
- 210000000955 splenic vein Anatomy 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 239000007757 Media 199 Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000003263 anabolic agent Substances 0.000 description 1
- 229940070021 anabolic steroids Drugs 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 210000002570 interstitial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/55—Glands not provided for in groups A61K35/22 - A61K35/545, e.g. thyroids, parathyroids or pineal glands
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до способу отримання матеріалу, що містить клітини 2 передміхурової залози та призначеного для трансплантації хворим, самого матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, який отримано новим способом, і до трансплантологічним методам лікування фіброматоза матки, хронічного простатиту та порушень чоловічої статевої функції шляхом трансплантації отриманого матеріалу.The invention relates to the field of medicine, namely to the method of obtaining material containing cells of the prostate gland 2 and intended for transplantation to patients, the material itself containing cells of the prostate gland, which is obtained by a new method, and to transplantological methods of treating fibromatosis of the uterus, chronic prostatitis and disorders of male sexual function by transplantation of the obtained material.
Відомо спосіб отримання матеріалу з внутрішньоутробних плодів людини та ссавців (плодів свині, плодів 70 великої рогатої худоби), що містить зокрема, .острівкові клітини підшлункової залози. Спосіб полягає в тому, що підшлункову залозу внутрішньоутробних плодів людини, великої рогатої худоби або свині витягують в стерильних умовах, промивають в розчині Хенкса з антибіотиками, розрізують на фрагменти розміром 2-Змм, які знов промивають розчином Хенкса з антибіортиками. Потім тканину занурюють в 0,1-0,395 розчин коллалітину (препарат, що містить коллагеназу) або суміш рівних частин 0,195 розчину коллалітину та 0,195 розчину трипсіну 72 на 20-30 хвилин при температурі 20-22. Далі видаляють розчин ферментів, переносять матеріал в 0,395 розчин трипсіну, поміщують на магнітний розмішувач та піддають обробці протягом 15-20 хвилин. Роблять два-три злива розчина трипсіна із завислими у ньому поодинокими клітинами та невеличкими клітинні комплексами у центрифужні флакони, а потім центрифугують та залишок ресуспензують. Отримані неосаджені клітини та клітинні комплекси пофракційно відокремлюють та засівають ними культуральні матраци. Інкубацію проводять при темперературі 36-37 протягом 8-10 днів із заміною ростового середовища кожні 3-4 дні. При цьому була отримана культура, переважну частину якої складають Б-клітини (див. Експерементаьні основи клінічної трансплантації острівкових клітин/ Шумаков В.І, Блюмкін В.Н., Скалецький Н.Н., Шальнев Б.І. в збірці "Трансплантація підшлункової залози (нариси)", м, "Канон" 1995. -С.38-42).There is a known method of obtaining material from human and mammalian fetuses (pig fetuses, cattle fetuses), which contains, in particular, islet cells of the pancreas. The method consists in the fact that the pancreas of fetuses of humans, cattle or pigs is extracted under sterile conditions, washed in Hanks' solution with antibiotics, cut into fragments of 2 mm in size, which are washed again with Hanks' solution with antibiotics. Then the fabric is immersed in a 0.1-0.395 solution of kollalitin (a preparation containing collagenase) or a mixture of equal parts of 0.195 solution of kollalitin and 0.195 solution of trypsin 72 for 20-30 minutes at a temperature of 20-22. Next, the enzyme solution is removed, the material is transferred to a 0.395 trypsin solution, placed on a magnetic stirrer and processed for 15-20 minutes. Two or three pours of the trypsin solution with single cells and small cell complexes suspended in it are made into centrifuge vials, and then centrifuged and the remainder resuspended. The obtained unsettled cells and cell complexes are fractionally separated and seeded with them in culture mattresses. Incubation is carried out at a temperature of 36-37 for 8-10 days with replacement of the growth medium every 3-4 days. At the same time, a culture was obtained, the majority of which consists of B cells (see Experimental basis of clinical transplantation of islet cells / Shumakov V.I., Blyumkin V.N., Skaletskyi N.N., Shalnev B.I. in the collection "Pancreas Transplantation glands (essays)", m., "Kanon" 1995. - P.38-42).
До недоліків відомого способу відноситься значна втрата клітин в процесі багатоетапної обробки матеріалу, с зокрема, під час знаходження на магнітному розмішувачі та при центрифугуванні, а також при фракційному (3 осадженні клітинних комплексів та поодиноких клітин.The disadvantages of the known method include a significant loss of cells in the process of multi-stage processing of the material, in particular, during being on a magnetic stirrer and during centrifugation, as well as during fractional (3) sedimentation of cell complexes and single cells.
Відомо матеріал, що містить бета-клітини, який отримано зазначеним вище способом, (див. там же ж).A material containing beta cells is known, which was obtained by the above-mentioned method (see ibid.).
До недоліків відомого матеріалу, отриманого даним способом, відноситься його знижена біологічна активність, спричинена недоліками способу його отримання, в процесі якого частина клітин знищується, а о цастина травмується при знаходженні на магнітному розмішувачі та при центрифугуванні. сThe disadvantages of the known material obtained by this method include its reduced biological activity, caused by the disadvantages of the method of its production, in the process of which some cells are destroyed, and the castine is injured when it is on a magnetic stirrer and during centrifugation. with
Відомо спосіб отримання суспензії життєздатних клітин Лейдига ссавців - інтерстаціальних клітин текстикул ембріона людини, корови, свині, а також новонароджених поросят та телят, до того ж новонароджені особини - мають бути максимально раннього віку для того, аби не встигла сформуватися стабільна антигенна видова со специфічність. Для приготування суспензії використовуються розчини, які містять поживний субстрат для клітин, зокрема склади стандартних середовищ для клітин тваринної тканини - середовищами Ігла, розчинами Хенкса, о середовищем 199 та подібними. При цьому усі операції проводяться в асептичних умовах. Отримана суспензія має бути стерильною (см. патент Російської Федерації Мо2078590, А.61 М.37/00, А 61 К 35/48, публ. 10.05.97).There is a known method of obtaining a suspension of viable Leydig cells of mammals - interstitial cells of the tissues of human embryos, cows, pigs, as well as newborn piglets and calves, moreover, newborn individuals must be as young as possible so that stable antigenic species specificity does not have time to form. To prepare the suspension, solutions are used that contain a nutrient substrate for cells, in particular, compositions of standard media for cells of animal tissue - Eagle's media, Hanks' solutions, media 199 and the like. At the same time, all operations are carried out in aseptic conditions. The resulting suspension must be sterile (see patent of the Russian Federation Mo2078590, A.61 M.37/00, A 61 K 35/48, publ. 10.05.97).
Відомо спосіб лікування фіброматозу матки із застосуванням андрогенів та анаболічних стероїдів (див. «There is a known method of treating fibromatosis of the uterus with the use of androgens and anabolic steroids (see "
Травянко Т.Д., Сольський Я.П. "Довідник з акушерсько-гінекологічної ендокринології" Київ. "Здоров'я" 1989, б. З 196-197). с Відомо спосіб лікування фіброматозу матки із застосуванням агоніста гонадотропін-рилізінг гормону (див.Travyanko T.D., Solskyi J.P. "Handbook of obstetrics and gynecology endocrinology" Kyiv. "Health" 1989, p. From 196-197). c There is a known method of treating uterine fibromatosis with the use of a gonadotropin-releasing hormone agonist (see
Із» Лейн Дж. Та ін. Застосування агоніста гонадотропін-рилізінг гормону для лікування гінекологічних захворювань. "Акушерство та гінекологія", Мо2,1991, - 17 с.).From" Lane J. And others. Use of gonadotropin-releasing hormone agonist for the treatment of gynecological diseases. "Obstetrics and Gynecology", Mo2, 1991, - 17 p.).
Однак ці способи лікування не ефективні в ряді випадків. До того ж у (певного процента хворих після закінчення лікування, внаслідок якого сталося зменшення розміру пухлини, згодом пухлина знов збільшувалася. і-й Відомо спосіб лікування хронічного простатиту, який полягає в тому, що пацієнту під капсулу обох долей оз передміхурової залози уводять суспензію життєздатних клітин Лейдига (клітин ембріональної текстикулярної тканини) ссавців ембріонального походження та новонароджених у долі не менш 2 млн. клітин в 1мл (див. патент це. Російської Федерації Мо2078590, А.61 М.37/00, А 61 К 35/48, публ. 10.05.97). о 20 Відомо спосіб лікування хворих з порушеннями чоловічої статевої функції, який полягає в тому, що пацієнту під білкову оболонку яєчка уводять суспензію клітин Лейдига (клітин ембріональної текстикулярної тканини) в мк кількості не менш 2 млн. клітин в 1мл (див. патент Російської Федерації Мо2026643, МКВ А.61 В. 17/00, А 61 К 35/48, публ.20.01.95).However, these methods of treatment are not effective in some cases. In addition, in (a certain percentage of patients, after the end of the treatment, which resulted in a decrease in the size of the tumor, the tumor grew again later. 1-th There is a known method of treating chronic prostatitis, which consists in injecting the patient with a suspension of viable cells under the capsule of both lobes of the prostate gland Leydig cells (cells of embryonic texticular tissue) of mammals of embryonic origin and newborns in the amount of at least 2 million cells in 1 ml (see the patent of the Russian Federation Mo2078590, A.61 M.37/00, A 61 K 35/48, publ. . 10.05.97). o 20 There is a known method of treating patients with disorders of male sexual function, which consists in injecting a suspension of Leydig cells (cells of embryonic texticular tissue) in the amount of at least 2 million cells in 1 ml under the protein shell of the testicle. (see patent of the Russian Federation Mo2026643, MKV A.61 V. 17/00, A 61 K 35/48, publ. 20.01.95).
До недоліків цих способів можна віднести деяку їх складність та небезпеку травмування відповідних органів 25 з можливим розвитком в майбутньому запального процесу (у тому числі автоїмунного характеру), тому що дляThe disadvantages of these methods include some of their complexity and the danger of injuring the relevant organs 25 with the possible development of an inflammatory process in the future (including of an autoimmune nature), because for
ГФ) досягнення позитивного результату лікування необхідно вводити суспензію клітин під капсулу долей передміхурової залози або під білкову оболонку яєчка. о Задачею винаходу, який відноситься до способу отримання матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, є його спрощення, збільшення гарантовано високого відсотку (до 9095) витягу непошкоджених клітин з 60 вихідного матеріалу та здешевлення за рахунок відмови від застосування ферменту, що містить коллагеназу.HF) to achieve a positive treatment result, it is necessary to inject a suspension of cells under the capsule of the lobes of the prostate gland or under the protein shell of the testicle. o The task of the invention, which refers to the method of obtaining material containing cells of the prostate gland, is to simplify it, to increase the guaranteed high percentage (up to 9095) of extracting intact cells from 60 starting material and to make it cheaper by refusing to use an enzyme containing collagenase.
Задачею винаходу, який відноситься до матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, є отримання матеріалу з високою біологічною активністю.The task of the invention, which relates to the material containing cells of the prostate gland, is to obtain a material with high biological activity.
Задачею винаходу, який відноситься до способів лікування фіброматоза матки, хронічного простатиту та порушення чоловічої статевої функції, є підвищення ефективності лікування за рахунок використання матеріалу бо з високою біологічною активністю.The task of the invention, which relates to the methods of treating fibromatosis of the uterus, chronic prostatitis and male sexual dysfunction, is to increase the effectiveness of the treatment due to the use of material with high biological activity.
Поставлена задача вирішується тим, що при отриманні матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, використовують передміхурову залозу дорослого молодого або новонародженого кролика (можливе використання передміхурової залози іншого ссавця), при цьому витягнуту передміхурову залозу промивають в розчині Хенкса з доданням антибіотиків, розрізують її на фрагменти і засівають отриманим матеріалом культуральні матраци, додаючи культуральне (ростове) середовище та сироватку ссавців, потім забезпечують необхідний (оптимальний) режим для культивуемих мікрофрагментів передміхурової залози, для чого здійснюють інкубацію при температурі 35-40 протягом від двох діб до шести тижнів з однократним або багатократним зниженням температури до 4-25 2С та витримкою при зниженій температурі, а також із 70 тимчасовим однократним або періодичним зниженням концентрації сироватки.The task is solved by the fact that when obtaining material containing cells of the prostate gland, the prostate gland of an adult young or newborn rabbit is used (the prostate gland of another mammal can be used), while the extracted prostate gland is washed in Hanks' solution with the addition of antibiotics, cut into fragments and inoculate culture mattresses with the obtained material, adding culture (growth) medium and mammalian serum, then provide the necessary (optimal) mode for cultured microfragments of the prostate gland, for which incubation is carried out at a temperature of 35-40 for two days to six weeks with single or multiple lowering the temperature to 4-25 2C and holding at a lower temperature, as well as with a temporary one-time or periodic decrease in serum concentration.
Поставлена задача для матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, вирішується шляхом використання зазначеного вище способу його отримання.The task for the material containing cells of the prostate gland is solved by using the above-mentioned method of obtaining it.
Поставлена задача для способу лікування фіброматозу матки вирішується при його здійсненні, в процесі якого проводять трансплантацію матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, при цьому зазначений 75 матеріал може бути трансплантованим в різні органи та тканини: підшкірно, внутрім'язно, зокрема, в прямий м'яз живота, в печінку (безпосередньо в паренхіму або через портальну вену або й гілки), в пульпу селезінки, в селезінкову вену, в порожнину очеревини, в спеціально створену м'язову кишеню, в паренхіму печінки або у великий сальник.The task set for the method of treating fibromatosis of the uterus is solved during its implementation, in the process of which a transplant of material containing cells of the prostate gland is carried out, while the specified 75 material can be transplanted into various organs and tissues: subcutaneously, intramuscularly, in particular, into the direct muscle stomach ulcer, into the liver (directly into the parenchyma or through the portal vein or branches), into the pulp of the spleen, into the splenic vein, into the peritoneal cavity, into a specially created muscle pocket, into the parenchyma of the liver, or into the great omentum.
Принципова відміна способу отримання матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, згідно з даним 2о винаходом, полягає в його простоті та відносно низькій собівартості за рахунок того, що в якості вихідного матеріалу використовується передміхурова залоза новонароджених, молодих або дорослих кроликів, а не ембріонів, як у найближчому аналозі. Для запропонованого способу можливо і використання ембріонів ссавців, але це не є доцільним, тому що залозисті структури в ембріональній передміхуровій залозі ще не сформовані.The fundamental difference of the method of obtaining material containing cells of the prostate gland, according to this 2nd invention, is its simplicity and relatively low cost due to the fact that the prostate gland of newborn, young or adult rabbits is used as the starting material, and not embryos, as in the closest analogy. For the proposed method, it is also possible to use mammalian embryos, but this is not advisable, because the glandular structures in the embryonic prostate gland are not yet formed.
При здійсненні способу згідно з даним винаходом виключаються операції, які травмують клітини Га передміхурової залози, а саме центрифугування, обробка на магнітному розмішувачі, та операція обробки ферментом для розчинення колагенових волокон. Згідно з даним винаходом вдається забезпечити вивільнення о більш як 9095 клітин передміхурової залози, що містяться у вихідній передміхурової залозі.When implementing the method according to the present invention, operations that injure the cells of the prostate gland, namely centrifugation, processing on a magnetic stirrer, and the operation of processing with an enzyme to dissolve collagen fibers, are excluded. According to the present invention, it is possible to release more than 9095 prostate cells contained in the original prostate gland.
Для отримання матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, може бути використана передміхурова залоза ссавців, зокрема, новонароджених ссавців або їх плодів. Досвід доводить, що можливе використання о передміхурової залози великої рогатої худоби та їх плодів, а також коней та свиней, плода людини, але найбільш доступним та дешевим матеріалом є передміхурова залоза новонароджених, молодих або дорослих со кроликів. ч-To obtain material containing cells of the prostate gland, the prostate gland of mammals, in particular, newborn mammals or their fetuses, can be used. Experience proves that it is possible to use the prostate gland of cattle and their fetuses, as well as horses and pigs, human fetuses, but the most accessible and cheap material is the prostate gland of newborns, young or adult rabbits. h-
Для отримання матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, витягують передміхурову залозу, наприклад, молодого або дорослого кролика, і занурюють її в холодний розчин Хенкса з доданням антибіотиків. о Вийнявши передміхурову залозу із розчину, видаляють її капсулу та прошарки сполучної тканини з юю кровоносними судинами. Декапсуловану передміхурову залозу подрібнюють до мікрофрагментів розміром до 1мм і знов промивають розчином Хенкса з доданням антибіотиків.To obtain material containing cells of the prostate gland, the prostate gland is removed, for example, from a young or adult rabbit, and immersed in cold Hanks' solution with the addition of antibiotics. After removing the prostate gland from the solution, its capsule and layers of connective tissue with its blood vessels are removed. The decapsulated prostate gland is crushed into microfragments up to 1 mm in size and washed again with Hanks' solution with the addition of antibiotics.
Отриманим матеріалом засівають культуральні матраци, куди додано культуральне (ростове) середовище та « сироватку великої рогатої худоби. Потім засіяні культуральні матраци розташовують в термостаті, де забезпечують оптимальний режим для клітин передміхурової залози, для чого здійснюють інкубацію при - с постійній температурі, що знаходиться в діапазоні 35-402С, протягом від двох діб до шести тижнів, при цьому а однократно знижують температуру в залежності від необхідності (за культурою ведеться мікроскопічний "» контроль) до 4-252С, та витримують сталий час при зниженій температурі. Тривалість витримки визначається експериментально для конкретного вида культури клітин. Для отримання високоякісного матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, проводять тимчасове однократне або періодично повторюване зниження 1 концентрації сироватки. Час витримки при зниженій концентрації сироватки також визначається сю експериментально для конкретного виду культури клітин передміхурової залози.The resulting material is sown in cultural mattresses, where a cultural (growth) medium and "cattle serum" are added. Then the seeded culture mats are placed in a thermostat, where they provide an optimal regime for the cells of the prostate gland, for which incubation is carried out at a constant temperature in the range of 35-402C for two days to six weeks, while the temperature is lowered once in depending on the need (microscopic control of the culture is carried out) to 4-252C, and withstand a constant time at a reduced temperature. The duration of exposure is determined experimentally for a specific type of cell culture. To obtain high-quality material containing prostate cells, a temporary one-time or periodically repeated reduction of serum concentration 1. The exposure time at reduced serum concentration is also determined experimentally for a specific type of prostate cell culture.
Отриманий матеріал може бути використаним для трансплантації безпосередньо після збору або -і збереженим достатньо тривалий час до операції при зниженій температурі або за допомогою заморожування. со 50 Спосіб лікування фіброматоза матки здійснюють із застосуванням матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, які отримано із використанням запропонованого способу. 62 Вибір способу введення матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, може бути різним, тобто матеріал може бути трансплантовано в різні органи та тканини: внутрім'язно, зокрема, в прямий м'яз живота, в печінку (в паренхіму або через портальну вену або її гілки) в пульпу селезінки, в селезінкову вену, в порожнину очеревини, в спеціально створену м'язову кишеню, в паренхіму печінки або у великий сальник або о підшкірно.The resulting material can be used for transplantation immediately after collection or stored for a long enough time before surgery at a low temperature or by freezing. со 50 The method of treating fibromatosis of the uterus is carried out with the use of material containing cells of the prostate gland, which were obtained using the proposed method. 62 The choice of the method of introduction of material containing cells of the prostate gland can be different, that is, the material can be transplanted into different organs and tissues: intramuscularly, in particular, into the rectus abdominis muscle, into the liver (into the parenchyma or through the portal vein or its branches) in the pulp of the spleen, in the splenic vein, in the peritoneal cavity, in a specially created muscle pocket, in the parenchyma of the liver or in the great omentum or subcutaneously.
Найбільш просте по техніці виконання, ефективне та найменш травматичне для хворого є введення їмо) матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, за допомогою шприца в прямий м'яз живота.The most technically simple, effective and least traumatic for the patient is the injection of material containing prostate cells using a syringe into the rectus abdominis muscle.
Аналогічним образом здійснюють способи лікування хронічного простатиту та порушення чоловічої статевої 60 функції.Methods of treatment of chronic prostatitis and disorders of male sexual function are carried out in a similar manner.
Використання матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, який отримано запропонованим способом, для трансплантації дозволить суттєво підвищити ефективність операції, спростити отримання та знизити собівартість отриманого матеріалу, що в свою чергу є передумовою для широкого впровадження зазначених вище способів лікування. 65 Нижче наведені приклади ілюструють ефективність трансплантації матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, у випадках фіброматозу матки, хронічнім простатиті та порушенні чоловічої статевої функції.The use of material containing cells of the prostate gland obtained by the proposed method for transplantation will significantly increase the efficiency of the operation, simplify the acquisition and reduce the cost of the obtained material, which in turn is a prerequisite for the wide implementation of the above methods of treatment. 65 The following examples illustrate the effectiveness of transplantation of material containing cells of the prostate gland in cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis, and male sexual dysfunction.
Приклад 1. Хвора С.Є., 52 роки, надійшла в гінекологічне відділення з діагнозом: фіброматоз матки. ПриExample 1. Patient SE, 52 years old, was admitted to the gynecology department with a diagnosis of uterine fibromatosis. At
УЗД на лівій стінці матки виявляється ділянка фіброматоза без чітких контурів із середнім діаметром 23мм.Ultrasound on the left wall of the uterus revealed a fibromatosis area without clear contours with an average diameter of 23 mm.
Міометрій трохи неоднорідної ехо-структури. Висновок. Фіброматоз тіла матки. Через 4 доби після надходження хворої було виконано внутрім'язну трансплантацію матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, отримані від молодих кроликів. Ще через 2 дні хвору було виписано із стаціонару під амбулаторний нагляд.The myometrium has a somewhat heterogeneous echo structure. Conclusion. Fibromatosis of the uterine body. 4 days after the patient's admission, an intramuscular transplantation of material containing prostate cells obtained from young rabbits was performed. After another 2 days, the patient was discharged from the hospital under outpatient supervision.
При контрольному УЗД, яке було проведено через б-тижнів після трансплантації, були отримані такі дані: при дослідженні матки ділянок фіброматозу не виявлено. Міометрій звичайної структури. 70 Висновок: патологічних змін не виявлено.During the control ultrasound, which was performed two weeks after transplantation, the following data were obtained: during the examination of the uterus, no areas of fibromatosis were detected. Myometrium of a normal structure. 70 Conclusion: no pathological changes were detected.
Наступний 16-місячний нагляд ознаки рецидів фіброматузу матки не виявив.The next 16-month follow-up did not reveal signs of recurrence of uterine fibromatosis.
Приклад 2. Хворий Б.В., 39 років. Страждає на хронічний простатит на протязі 8 років. Неодноразові курси традиційного лікування у уролога та сексопатолога не дали позитивного ефекту. Хворому було виконано внутрім'язну трансплантацію матеріалу, що містить клітини передміхурової залози, отримані від дорослих /5 Кроликів. Вже через 2 тижні після пересадки хворий почав відмічати значне поліпшення стану здоров'я, підвищення працездатності. На протязі наступних 2 місяців у хворого підвищилася сексуальна активність: частота повноцінних сексуальних контактів збільшилася від 2,1 на місяць до 2,5 на тиждень. Таке значне покращання статевої функції відзначалося не менш як на протязі 8 місяців після трансплантації.Example 2. Patient B.V., 39 years old. He has been suffering from chronic prostatitis for 8 years. Repeated courses of traditional treatment with a urologist and a sexologist did not have a positive effect. The patient underwent intramuscular transplantation of material containing cells of the prostate gland obtained from adults/5 rabbits. Already 2 weeks after the transplant, the patient began to notice a significant improvement in his state of health, increased work capacity. Over the next 2 months, the patient's sexual activity increased: the frequency of full sexual contacts increased from 2.1 per month to 2.5 per week. Such a significant improvement in sexual function was noted at least 8 months after transplantation.
Claims (1)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98122714/14A RU2135195C1 (en) | 1998-12-17 | 1998-12-17 | Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method |
| PCT/RU1999/000489 WO2000035463A1 (en) | 1998-12-17 | 1999-12-16 | Method for producing a material containing cells from the prostate gland, material containing cells from the prostate gland and methods for treating uterus fibromatosis, chronic prostatitis and disorders of the male sexual function according to a transplantation technique |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA53780C2 true UA53780C2 (en) | 2003-02-17 |
Family
ID=20213481
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2000095262A UA53780C2 (en) | 1998-12-17 | 1999-12-16 | Method for producing material containing prostate-gland cells, the material containing prostate-gland cells and transplantation-based techniques for treating uterus fibromatosis, chronic prostatitis and disorders in male sexual functions |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2135195C1 (en) |
| UA (1) | UA53780C2 (en) |
| WO (1) | WO2000035463A1 (en) |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3888981A (en) * | 1974-02-13 | 1975-06-10 | American Home Prod | Treatment of benign prostatic hypertrophy |
| GB8528809D0 (en) * | 1985-11-22 | 1985-12-24 | Fink Gmbh | Treatment & composition |
| EP0459666B1 (en) * | 1990-05-31 | 1994-11-09 | Pfizer Inc. | Medicaments against impotence |
| EP0651637B1 (en) * | 1992-07-20 | 2006-10-04 | Massachusetts Institute Of Technology | Control of wound scar production with calmodulin inhibitors or protein kinase c inhibitors |
| RU2089204C1 (en) * | 1994-11-24 | 1997-09-10 | Научно-производственное объединение "Иммунопрепарат" | Method of preparing peptides recovering the prostate gland function |
| RU2087152C1 (en) * | 1995-07-26 | 1997-08-20 | Российская медицинская академия последипломного образования | Method for treating inflammatory infection diseases of male reproductive system organs |
| EA199800678A1 (en) * | 1996-01-29 | 1999-02-25 | Эли Лилли Энд Компани | METHOD OF INHIBITING MUSCULAR-APONURROTIC FIBROMATOSIS (DEMOID TUMORS) |
| RU2112504C1 (en) * | 1996-12-24 | 1998-06-10 | Открытое акционерное общество "Нижегородский химико-фармацевтический завод" | Agent "vitaprost" for prostate gland disease treatment |
-
1998
- 1998-12-17 RU RU98122714/14A patent/RU2135195C1/en not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-12-16 UA UA2000095262A patent/UA53780C2/en unknown
- 1999-12-16 WO PCT/RU1999/000489 patent/WO2000035463A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2000035463A1 (en) | 2000-06-22 |
| RU2135195C1 (en) | 1999-08-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1250715C (en) | Unactivated oocytes as cytoplast recipients for nuclear transfer | |
| Carlson | The secretion of gastric juice in health and disease | |
| CN109689072A (en) | Sperm activating agent and application thereof | |
| JP5542928B2 (en) | Method for producing transformed earthworm using worm's gonad regeneration ability, transformed earthworm produced thereby, and method for producing recombinant protein from body fluid of transformed earthworm | |
| KR860000898B1 (en) | Producing method of human chorionic gonadotpopin | |
| Ram | Hormonal control of reproduction in Busycon: Laying of egg capsules caused by nervous system extracts | |
| TW200423951A (en) | Method of preparing anti-angiogenic drug from cartilage and chondrocytes and methods of use | |
| CN102181462A (en) | New method for improving transgenic efficiency of animals | |
| JPH11505122A (en) | Isolation of cells from organ tissue using sonication | |
| CN100523174C (en) | Monkey-origin embryonic stem cells | |
| Johnson | Some proliferative and metaplastic changes in transitional epithelium | |
| UA53780C2 (en) | Method for producing material containing prostate-gland cells, the material containing prostate-gland cells and transplantation-based techniques for treating uterus fibromatosis, chronic prostatitis and disorders in male sexual functions | |
| Beebe et al. | A study of the so-called infectious lymphosarcoma of dogs | |
| Pescovitz et al. | Serum degradation of myelin basic protein with loss of encephalitogenic activity: evidence for an enzymatic process | |
| Nicholas | Experimental approaches to problems of early development in the rat | |
| Howell | Excystment and in vitro cultivation of Echinoparyphium serratum | |
| KR860001576B1 (en) | Process for the production of human multiplication-stimulating activity | |
| RU2135193C1 (en) | Method of preparing material containing pancreatic beta-cells for transplantation in diabetic patients utilizing cell migration phenomenon, material containing pancreatic beta-cells for transplantation in diabetic patients, and method of treating diabetes mellitus by transplantation method | |
| CN110373381A (en) | A kind of preparation method by the efficient placenta mesenchyma stem cell of homogenizer | |
| RU2142163C1 (en) | Method for modelling inflammatory diseases in female genital organs | |
| Aksenova et al. | Influence of sexual season on implantation of microinjected embryos and birth rate of new born-transplant in experiments on creating transgenic goats carrying human lactoferrin gene | |
| Onorato et al. | The effect of certain environmental factors on the development and hatching of the eggs of blood flukes | |
| NL2031814B1 (en) | Methods for isolating cells from a tissue sample. | |
| SU1377291A1 (en) | Method of producing cells of adrenal gland cortex of human being and animals | |
| Gray et al. | Insulin and glucagon responses of transplanted intrasplenic pancreatic islets |