RU2142163C1

RU2142163C1 - Method for modelling inflammatory diseases in female genital organs

Info

Publication number: RU2142163C1
Application number: RU96114522A
Authority: RU
Inventors: Е.В. Старкова; Т.И. Дергачева; В.В. Асташов
Original assignee: Институт клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН
Priority date: 1996-07-17
Filing date: 1996-07-17
Publication date: 1999-11-27

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves using white not pedigree rats. Staphylococcus aureus is injected at a dose of 3•10⁶ microbe bodies. Injection is carried out into posteroanterior wall of the middle part of the vagina by means of tuberculin syringe as submucous application. EFFECT: enhanced accuracy of pathologic process approximation. 8 dwg

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть применено при моделировании воспалительных заболеваний женских половых органов. The invention relates to medicine, namely to gynecology, and can be used to model inflammatory diseases of the female genital organs.

Интерес к проблеме воспалительных заболеваний женских половых органов связан с их частотой, возможностью передачи инфекции плоду, а также их "омоложением". Несвоевременное или неадекватное лечение воспалительных заболеваний женских половых органов приводит к хронизации процесса, часто является причиной бесплодия, внематочных беременностей, инвалидизации (Сметник В. П. , 1995). Несмотря на применение новых медикаментозных препаратов, методов физиотерапии, санаторно-курортного лечения, частота воспалительных заболеваний женских половых органов не имеет тенденции к снижению (Савельева Г. М. , Антонова Л.В., 1987). Поэтому является актуальным изучение этиопатогенетических факторов возникновения и развития воспалительного процесса в половых органах. Для фундаментальных исследований создаются модели воспалительных заболеваний половых органов на лабораторных животных. В литературе описано достаточно много способов моделирования воспалительных процессов половых органов. Их можно условно разделить на 3 группы. Interest in the problem of inflammatory diseases of the female genital organs is associated with their frequency, the possibility of transmission of the infection to the fetus, as well as their “rejuvenation”. Untimely or inadequate treatment of inflammatory diseases of the female genital organs leads to a chronic process, often causing infertility, ectopic pregnancies, and disability (Smetnik V.P., 1995). Despite the use of new drugs, methods of physiotherapy, spa treatment, the frequency of inflammatory diseases of the female genital organs does not tend to decrease (Savelyeva G.M., Antonova L.V., 1987). Therefore, it is relevant to study the etiopathogenetic factors of the onset and development of the inflammatory process in the genitals. For basic research, models of inflammatory diseases of the genital organs in laboratory animals are created. The literature describes a lot of methods for modeling inflammatory processes of the genital organs. They can be divided into 3 groups.

В исследованиях Скакуна Н. П. , Дроговоз С.М. (1968), Старковой Н.И. (1984) лабораторным животным внутривенно вводилась культура микроорганизмов или их токсинов в определенной заданной дозе. Метод позволяет получить генерализованную инфекцию, в том числе и половых органов. Однако в клинических условиях подобное поражение встречается только при сепсисе, что является крайней тяжелым проявлением генерализованной инфекции. In the studies of Skakuna N.P., Drogovoz S.M. (1968), Starkova N.I. (1984) a laboratory animal was injected intravenously with a culture of microorganisms or their toxins in a specific predetermined dose. The method allows you to get a generalized infection, including genital organs. However, in clinical conditions, such a lesion occurs only in sepsis, which is an extreme severe manifestation of a generalized infection.

В исследованиях Magnusson, Sveinsson (1988), Moller, Mardh (1970) заражали самцов различными микроорганизмами и подсаживали самцов к самкам. Подобным образом исследуется исключительно и единственно половой путь передачи инфекции, то есть исследуется, какие микроорганизмы способны вызывать сочетанное поражение партнеров, в какой минимальной патогенной дозе, при каком инкубационном периоде. In studies, Magnusson, Sveinsson (1988), Moller, Mardh (1970) infected males with various microorganisms and planted males on females. In a similar way, the sole and only sexual route of transmission of the infection is examined, that is, it is investigated which microorganisms are capable of causing combined affection of partners, at what minimum pathogenic dose, at what incubation period.

В исследованиях Гармашевой Н.Л. (1947), Самородиновой Л.А. (1965), Тихоновской О.А. (1986), Маринкина И.О. (1996) с целью создания воспаления половых органов животным под наркозом производилась лапаротомия и в изолированный маточный рог после предварительной его перевязки вводился флогогенный агент. Подобный метод позволяет моделировать воспаление половых органов, но животное повергается операционной травме, что искажает естественное течение воспалительного процесса, этот метод вызывает изолированное поражение одного маточного рога и далек от естественного протекания воспалительного процесса в клинических условиях. In the studies of Garmasheva N.L. (1947), L. Samorodinova (1965), Tikhonovskaya O.A. (1986), Marinkina I.O. (1996) in order to create inflammation of the genital organs of animals under anesthesia, a laparotomy was performed and a phlogogenic agent was introduced into the isolated uterine horn after preliminary ligation. A similar method allows you to simulate genital inflammation, but the animal is subjected to surgical trauma, which distorts the natural course of the inflammatory process, this method causes an isolated lesion of one uterine horn and is far from the natural course of the inflammatory process in clinical conditions.

За прототип нами была избрана модель воспаления наружных половых органов, предложенная Шуриной А.М. (1977). Модель основана на возникновении и развитии асептического воспаления в месте инъекции раствора скипидара в область половой губы собаки. Однако и в этой модели есть существенные недостатки: во-первых, создается изолировано воспаление наружных гениталий, во-вторых, асептическое воспаление в клинических условиях встречается намного реже, чем септическое. For the prototype, we have chosen a model of inflammation of the external genital organs, proposed by A. Shurina. (1977). The model is based on the occurrence and development of aseptic inflammation at the injection site of turpentine solution in the labia of the dog. However, this model also has significant drawbacks: firstly, inflammation of the external genitalia is created isolated, and secondly, aseptic inflammation in clinical conditions is much less common than septic.

Таким образом, вышеописанные способы моделирования воспалительных заболеваний половых органов не отражают реального развития воспалительного процесса в половых органах и затрудняют экстраполяцию полученных данных на человека. Thus, the above-described methods for modeling inflammatory diseases of the genital organs do not reflect the real development of the inflammatory process in the genital organs and make it difficult to extrapolate the obtained data to humans.

Целью нашего исследования являлось создание модели воспалительных заболеваний половых органов, наиболее приближенной к клиническому течению патологического процесса у женщин. The aim of our study was to create a model of inflammatory diseases of the genital organs, which is closest to the clinical course of the pathological process in women.

Предлагаемый нами способ моделирования воспалительных заболеваний половых органов заключается в следующем. Белым беспородным крысам-самкам в заднебоковую стенку средней трети влагалища с помощью туберкулинового шприца под слизистую вводился Staphylococcus aureus, штамм 25923, в дозе 3•10⁶ микробных тел.Our proposed method for modeling inflammatory diseases of the genital organs is as follows. Staphylococcus aureus, strain 25923, at a dose of 3 • 10 ⁶ microbial bodies was introduced into the posterior lateral wall of the middle third of the vagina using a tuberculin syringe under the mucosa of white outbred female rats.

За сутки до операции суточную культуру St. aureus суспендировали в 5 мл физиологического раствора, инкубировали при температуре 37^oC в течение 3-х часов. После инкубации центрифугировали, надосадочную жидкость сливали, осадок ресуспендировали в 5 мл стерильного физиологического раствора, вновь центрифугировали для получения необходимой концентрации. Степень мутности определяли по стандарту мутности (3•10⁶ микробных тел).The day before the operation, the daily culture of St. aureus was suspended in 5 ml of physiological saline, incubated at a temperature of 37 ^o C for 3 hours. After incubation, they were centrifuged, the supernatant was drained, the precipitate was resuspended in 5 ml of sterile physiological saline, and centrifuged again to obtain the required concentration. The degree of turbidity was determined by the standard turbidity (3 • 10 ⁶ microbial bodies).

Наблюдение за развитием инфекционного процесса длилось в течение 14 суток. Исследованию на 4, 6, 14 сутки воспаления подвергались: стенки влагалища, маточного рога, регионарные лимфатические узлы. Использовались общепринятые гистологические методики, окрашивание срезов гематоксилином и эозином. Monitoring the development of the infectious process lasted for 14 days. On the 4th, 6th, and 14th days of the study, the following infections were examined: walls of the vagina, uterine horn, and regional lymph nodes. Conventional histological techniques were used, stained sections with hematoxylin and eosin.

На гистологических препаратах влагалища на 4-е сутки воспаления отмечается слущивание поверхностных слоев многослойного плоского эпителия, участки его десквамации, обильные инфильтрации сегментоядерными лейкоцитами (фиг. 1). В подслизистой и мышечных слоях также выраженная воспалительная инфильтрация, представленная макрофагами, лимфоцитами, плазмоцитами. Подслизистый и мышечный слои отечны, венозные сосуды неравномерно расширены, полнокровны, с периваскулярной воспалительной инфильтрацией, отдельные из мелких артерий спазмированы (фиг. 2). К 14-м суткам отмечаются признаки обратного развития воспалительного процесса: отек и гиперэмия тканей значительно уменьшены (фиг. 3). На препаратах маточного рога на 4-е сутки признаки воспаления определяются преимущественно в соединительной и мышечной тканях, которые также инфильтрированы в первые сутки воспаления полиморфноядерными лейкоцитами, макрофагами, а затем лимфо- и плазмоцитами, преимущественно перигландулярно. Определяется отек соединительной ткани, выраженное расширение и полнокровие венозных сосудов, лимфостаз (фиг. 4). К 14-м суткам признаки воспалительной реакции постепенно исчезают, наблюдается лимфоплазмоцитарная инфильтрация, также преимущественно перигландулярно и в миометрии (фиг. 5). Подобная гистологическая картина описана при воспалительных заболеваниях влагалища, тела матки и маточных труб в клинических условиях у женщин (Хмельницкий О.П., 1994). В регионарных лимфатических узлах (подвздошных и паховых) на 4-е сутки воспаления определяется нарастание площади мозгового вещества, в корковом веществе наблюдается увеличение площади вторичных лимфоидных узелков, паракортикальной зоны. Резко расширены краевой и мозговой синусы (фиг. 6). В "мазке-отпечатке" подвздошного лимфатического узла на 4-е сутки воспаления определяется кокковая флора вне- и внутриклеточно, количество лимфоцитов увеличено за счет бластных форм (фиг. 7). К 14-м суткам воспаления структура лимфатических узлов практически восстанавливается, кокковая микрофлора не определяется (фиг. 8). On histological preparations of the vagina on the 4th day of inflammation, desquamation of the surface layers of the stratified squamous epithelium, areas of its desquamation, abundant infiltration by segmented leukocytes is noted (Fig. 1). In the submucosal and muscle layers there is also a pronounced inflammatory infiltration, represented by macrophages, lymphocytes, plasmocytes. The submucosal and muscle layers are swollen, venous vessels are unevenly dilated, full-blooded, with perivascular inflammatory infiltration, some of the small arteries are spasmodic (Fig. 2). By the 14th day there are signs of a reverse development of the inflammatory process: edema and hyperemia of the tissues are significantly reduced (Fig. 3). On the preparations of the uterine horn on the 4th day, signs of inflammation are determined mainly in the connective and muscle tissues, which are also infiltrated on the first day of inflammation with polymorphonuclear leukocytes, macrophages, and then lymph and plasmocytes, mainly periglandularly. Edema of the connective tissue, pronounced expansion and plethora of venous vessels, lymphostasis are determined (Fig. 4). By the 14th day, the signs of the inflammatory reaction gradually disappear, lymphoplasmacytic infiltration is observed, also mainly periglandularly and in the myometrium (Fig. 5). A similar histological picture is described in inflammatory diseases of the vagina, uterus and fallopian tubes under clinical conditions in women (Khmelnitsky O.P., 1994). In the regional lymph nodes (iliac and inguinal) on the 4th day of inflammation, an increase in the area of the brain substance is determined, in the cortical substance there is an increase in the area of secondary lymphoid nodules, the paracortical zone. The marginal and cerebral sinuses are sharply expanded (Fig. 6). In the "smear-imprint" of the iliac lymph node on the 4th day of inflammation, coccal flora is determined extra- and intracellularly, the number of lymphocytes is increased due to blast forms (Fig. 7). By the 14th day of inflammation, the structure of the lymph nodes is practically restored, coccal microflora is not determined (Fig. 8).

Таким образом, предлагаемая модель воспалительного процесса женских половых органов наиболее полно отражает клиническое течение воспалительных заболеваний в клинической практике. Thus, the proposed model of the inflammatory process of the female genital organs most fully reflects the clinical course of inflammatory diseases in clinical practice.

Список используемой литературы. Bibliography.

1. Гармашева Н.Д. Экспериментальный инфекционный эндометрит. - Л.: Медицина, 1947, с. 168. 1. Garmasheva N. D. Experimental infectious endometritis. - L .: Medicine, 1947, p. 168.

2. Дроговоз С.М. Желчеобразовательная функция печени при стафилококковой инфекции и интоксикации. Автореф... канд. мед. наук. Черновцы, 1968, с. 19. 2. Drogovoz S.M. Bile-forming liver function with staphylococcal infection and intoxication. Abstract ... Cand. honey. sciences. Chernivtsi, 1968, p. 19.

3. Здродовский П. Ф. Проблемы инфекции, иммунитета и аллергии. - М., 1963, с. 268-268. 3. Zdrodovsky P. F. Problems of infection, immunity and allergies. - M., 1963, p. 268-268.

4. Кейт Л., Бергер Г. Причины инфекционных заболеваний малого таза. кн. Репродуктивное здоровье. Под ред. Кейта Л. и др.: Пер. с англ. - М.: Медицина, 1988, т. 1, гл. 1, с. 123-132. 4. Kate L., Berger G. Causes of infectious diseases of the pelvis. Prince Reproductive health. Ed. Keita L. et al.: Per. from English - M .: Medicine, 1988, t. 1, ch. 1, p. 123-132.

5. Маринкин И.О. Структурная организация лимфоидных органов при остром воспалительном процессе матки и в условиях его коррекции. Автореф. ...док. мед. наук. Новосибирск, 1996, с. 39. 5. Marinkin I.O. The structural organization of lymphoid organs in acute inflammatory process of the uterus and in the conditions of its correction. Abstract. ... doc. honey. sciences. Novosibirsk, 1996, p. 39.

6. Русньяк И., Фельди М., Сабо Д. Физиология и патология лимфообращения. Из-во Акад. Наук Венгрии, 1957, с. 125-126. 6. Rusnyak I., Feldi M., Szabo D. Physiology and pathology of lymph circulation. From Acad. Science of Hungary, 1957, p. 125-126.

7. Савельева Г.М., Антонова Л.В. Острые воспалительные заболевания внутренних половых органов женщины. - М.: Медицина, 1987, с. 56. 7. Savelyeva G.M., Antonova L.V. Acute inflammatory diseases of a woman’s internal genital organs. - M.: Medicine, 1987, p. 56.

8. Самородинова Л. А. Использование стероидных гормонов коры надпочечников при воспалительных заболеваниях женских половых органов. Автореф ... канд. мед. наук. Ленинград, 1965, 21 с. 8. Samorodinova L. A. Use of steroid hormones of the adrenal cortex in inflammatory diseases of the female genital organs. Abstract ... Cand. honey. sciences. Leningrad, 1965, 21 p.

9. Сметник В.П., Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология - С.-П.: Сотис, 1995, с. 12-26. 9. Smetnik V.P., Tumilovich L.G. Non-operative gynecology - S.-P.: Sotis, 1995, p. 12-26.

10. Старкова Н.И. Морфогенетическое изменение периферических лимфоидных органов беременных крыс после введения токсина стафилококка. "Морфогенез лимфатического и кровеносного русла и их тканей в норме, при патологии и в эксперименте". - Пермь, 1984, с. 45-47. 10. Starkova N.I. Morphogenetic change in the peripheral lymphoid organs of pregnant rats after administration of staphylococcus toxin. "Morphogenesis of the lymphatic and bloodstream and their tissues is normal, with pathology and experiment." - Perm, 1984, p. 45-47.

11. Тихоновская О. А. Моделирование острого и хронического воспаления придатков матки. В сб. : Молодежь и научно-технический прогресс., Томск, Из-во Томского ун-та, 1986, с. 76. 11. Tikhonovskaya O. A. Modeling of acute and chronic inflammation of the uterus. On Sat : Youth and scientific and technological progress., Tomsk, Iz-in Tomsk University, 1986, p. 76.

12. Хмельницкий О. П. Патоморфологическая диагностика гинекологических заболеваний. - С.-П.: Сотис, 1994, с. 37-299. 12. Khmelnitsky O. P. Pathomorphological diagnosis of gynecological diseases. - S.-P.: Sotis, 1994, p. 37-299.

13. Шурина А.М. Морфофункциональное исследование лимфатических узлов при асептическом воспалении. Дисс. ...канд. мед. наук. Новосибирск, 1977. 13. Shurina A.M. Morphofunctional examination of lymph nodes with aseptic inflammation. Diss. ... cand. honey. sciences. Novosibirsk, 1977.

14. Moller B.R., Mardh P.A. Experimental salpingitis in grivet monkeys by chlamydia thrachomatis. Acta path. microbiol. scand. Sect. B 1970, v. 88, n. 1, p. 107-114. 14. Moller B.R., Mardh P.A. Experimental salpingitis in grivet monkeys by chlamydia thrachomatis. Acta path. microbiol. scand. Sect. B 1970, v. 88, n. 1, p. 107-114.

Claims

A method for modeling inflammatory diseases of the female genital organs, which consists of introducing phlogogenic agents into the female genital organs, characterized in that they inject a Staphylococcus aureus mucosa with a dose of 3 × 10 ⁶ microbial bodies into the posterolateral wall of the middle third of the vagina using white tuberculin syringe under the mucous membrane.