RU2135195C1 - Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method - Google Patents

Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method Download PDF

Info

Publication number
RU2135195C1
RU2135195C1 RU98122714/14A RU98122714A RU2135195C1 RU 2135195 C1 RU2135195 C1 RU 2135195C1 RU 98122714/14 A RU98122714/14 A RU 98122714/14A RU 98122714 A RU98122714 A RU 98122714A RU 2135195 C1 RU2135195 C1 RU 2135195C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
material containing
transplanted
cells
prostate
prostate cells
Prior art date
Application number
RU98122714/14A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
В.Г. Овсюк
Н.Н. Скалецкий
Original Assignee
Овсюк Валерий Григорьевич
Скалецкий Николай Николаевич
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Овсюк Валерий Григорьевич, Скалецкий Николай Николаевич filed Critical Овсюк Валерий Григорьевич
Priority to RU98122714/14A priority Critical patent/RU2135195C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2135195C1 publication Critical patent/RU2135195C1/en
Priority to UA2000095262A priority patent/UA53780C2/en
Priority to PCT/RU1999/000489 priority patent/WO2000035463A1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/55Glands not provided for in groups A61K35/22 - A61K35/545, e.g. thyroids, parathyroids or pineal glands
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves using mammalian prostate. The prostate is washed, cut into fragments and the so obtained material is inoculated in culturing mattresses adding culturing (growth) medium and mammalian serum. Then optimum incubation conditions are maintained. The material containing prostate cells is transplantable into various organs and tissues. EFFECT: enhanced effectiveness of treatment. 37 cl

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения материала, содержащего клетки предстательной железы и предназначенного для трансплантации больным, собственно материалу, содержащему клетки предстательной железы, полученной новым способом, и к трансплантологическим методам лечения фиброматоза матки, хронического простатита и нарушений мужской половой функции путем трансплантации полученного материала. The invention relates to medicine, namely to a method for producing material containing prostate cells and intended for transplantation to patients, in fact, material containing prostate cells obtained in a new way, and to transplantological methods of treating uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual dysfunction by transplantation of the resulting material.

Известен способ получения материала из внутриутробных плодов человека и животных (плодов свиньи, плодов крупного рогатого скота), содержащего, в частности, островковые клетки поджелудочной железы. Способ заключается в том, что поджелудочную железу внутриутробных плодов человека, крупного рогатого скота или свиньи извлекают в стерильных условиях, промывают в растворе Хенкса с антибиотиками, разрезают на фрагменты размером 2-3 мм, которые вновь промывают раствором Хенкса с антибиотиками. Затем ткань погружают в 0,1-0,3%-ный раствор коллалитина (препарат, содержащий коллагеназу) или смесь равных частей 0,1%-ного раствора коллалитина и 0,1%-ного раствора трипсина на 20-30 мин при температуре 20-22. Далее удаляют раствор ферментов, переносят материал в 0,3%-ный раствор трипсина, помещают на магнитный размешиватель и подвергают обработке в течение 15-20 мин. Делают два - три слива раствора трипсина со взвешенными в нем одиночными клетками и небольшими клеточными комплексами в центрифужные флаконы, а затем центрифугируют и осадок ресуспендируют. Полученные не осевшие клетки и клеточные комплексы пофракционно отделяют и засевают ими культуральные матрасы. Инкубацию проводят при температуре 36-37oC в течение 8-10 дней с заменой ростовой среды каждые 3-4 дня. При этом была получена культура, подавляющую часть которой составляют бета-клетки (см. Экспериментальные основы клинической трансплантации островковых клеток. /Шумаков В.И., Блюмкин В.Н., Скалецкий Н.Н., Шальнев Б.И. в сборнике "Трансплантация островковых клеток поджелудочной железы (очерки)", М., "Канон", 1995, с. 38-42).A known method of obtaining material from intrauterine fruits of humans and animals (fetuses of pigs, fetuses of cattle), containing, in particular, islet cells of the pancreas. The method consists in the fact that the pancreas of the fetuses of a person, cattle or pig is removed under sterile conditions, washed in a Hanks solution with antibiotics, cut into fragments 2-3 mm in size, which are again washed with a Hanks solution with antibiotics. Then the tissue is immersed in a 0.1-0.3% solution of collalitin (a preparation containing collagenase) or a mixture of equal parts of a 0.1% solution of collalitin and a 0.1% trypsin solution for 20-30 minutes at a temperature 20-22. Next, the enzyme solution is removed, the material is transferred to a 0.3% trypsin solution, placed on a magnetic stirrer and subjected to processing for 15-20 minutes. Two to three drains of a trypsin solution with single cells and small cell complexes suspended in it are made into centrifuge bottles, and then centrifuged and the sediment resuspended. Received not settled cells and cell complexes are fractionally separated and seeded with culture mattresses. Incubation is carried out at a temperature of 36-37 o C for 8-10 days with the replacement of the growth medium every 3-4 days. At the same time, a culture was obtained, the vast majority of which are beta cells (see Experimental fundamentals of the clinical transplantation of islet cells. / Shumakov V.I., Blumkin V.N., Skaletsky N.N., Shalnev B.I. in the collection " Transplantation of islet cells of the pancreas (essays) ", M.," Canon ", 1995, S. 38-42).

К недостаткам известного способа относится значительная потеря клеток в процессе многоэтапной обработки материала, в частности при нахождении на магнитном размешивателе и при центрифугировании, а также при фракционном осаждении клеточных комплексов и одиночных клеток. The disadvantages of this method include a significant loss of cells during the multi-stage processing of the material, in particular when being on a magnetic stirrer and during centrifugation, as well as in fractional precipitation of cell complexes and single cells.

Известен материал, содержащий бета-клетки, полученный указанным выше способом (см. там же). Known material containing beta cells obtained by the above method (see ibid.).

К недостаткам известного материала, полученного данным способом, относится его сниженная биологическая активность из-за недостатков способа его получения, в процессе которого часть клеток уничтожается, а часть травмируется при нахождении на магнитном размешивателе и при центрифугировании. The disadvantages of the known material obtained by this method include its reduced biological activity due to the disadvantages of the method for its preparation, during which some of the cells are destroyed and some are injured when located on a magnetic stirrer and during centrifugation.

Известен способ получения суспензии жизнеспособных клеток Лейдига млекопитающих - интерстициальных клеток тестикул эмбриона человека, коровы, свиньи, а также новорожденных поросят и телят, причем новорожденные особи должны быть максимально раннего возраста для того, чтобы не успела оформиться стабильная антигенная видовая специфичность. Для приготовления суспензии используются растворы, содержащие питательный субстрат для клеток, в частности пользуются составами стандартных сред для клеток животной ткани - средами Игла, растворами Хенкса, средой 199 и подобными. При этом все операции проводятся в асептических условиях. Полученная суспензия должна быть стерильна (см. патент Российской Федерации N 2078590, A 61 M 37/00, A 61 K 35/48, 10.05.97). There is a method of obtaining a suspension of viable mammalian Leydig cells — interstitial cells of testicles of human, cow, pig embryos, as well as newborn piglets and calves, and newborn individuals must be as young as possible so that stable antigenic species specificity does not have time to take shape. To prepare the suspension, solutions are used that contain a nutrient substrate for the cells, in particular, they use compositions of standard media for animal tissue cells — Eagle’s media, Hanks’s solutions, 199 medium and the like. Moreover, all operations are performed under aseptic conditions. The resulting suspension must be sterile (see patent of the Russian Federation N 2078590, A 61 M 37/00, A 61 K 35/48, 05/10/97).

Известен способ лечения фиброматоза матки с применением андрогенов и анаболических стероидов (см. Травянко Т.Д., Сольский Я.П. "Справочник по акушерско-гинекологической эндокринологии". Киев, Здоровья, 1989, с. 196-197). A known method of treating uterine fibromatosis with the use of androgens and anabolic steroids (see Travyanko TD, Solsky YP "Handbook of obstetric and gynecological endocrinology. Kiev, Health, 1989, S. 196-197).

Известен способ лечения фиброматоза матки с применением агониста гонадотропин-рилизинг гормона (см. Лейн Дж. и др. Применение агониста гонадотропин-рилизинг гормона для лечения гинекологических заболеваний. "Акушерство и гинекология", N 2, 1991, с. 17). A known method of treating uterine fibromatosis with the use of a gonadotropin releasing hormone agonist (see Lane J. et al. Use of a gonadotropin releasing hormone agonist for the treatment of gynecological diseases. "Obstetrics and gynecology", N 2, 1991, p. 17).

Однако эти способы лечения не эффективны в ряде случаев. К тому же у определенного процента больных после окончания лечения, в результате которого произошло уменьшение размера опухоли, впоследствии опухоль вновь увеличивалась. However, these treatments are not effective in some cases. In addition, in a certain percentage of patients after treatment, which resulted in a decrease in the size of the tumor, the tumor subsequently increased again.

Известен способ лечения хронического простатита, заключающийся в том, что пациенту под капсулу обеих долей предстательной железы вводят суспензию жизнеспособных клеток Лейдига (клеток эмбриональной тестикулярной ткани) млекопитающих эмбрионального происхождения и новорожденных в доле не менее 2 млн. клеток в 1 мл (см. патент Российской Федерации N 2078590, A 61 М 37/00, A 61 К 35/48, 10.05.97). A known method of treating chronic prostatitis is that a suspension of viable Leydig cells (cells of embryonic testicular tissue) of mammalian origin and newborns in a fraction of at least 2 million cells in 1 ml is administered to a patient under a capsule of both prostate glands (see Russian patent Federation N 2078590, A 61 M 37/00, A 61 K 35/48, 05/10/97).

Известен способ лечения больных с нарушением мужской половой функции, заключающийся в том, что пациенту под белковую оболочку яичка вводят суспензию клеток Лейдига (клеток эмбриональной тестикулярной ткани) в количестве не менее 2 млн. клеток в 1 мл (см. патент Российской Федерации N 2026643, A 61 В 17/00, A 61 К 35/48, 20.01.95). A known method of treating patients with impaired male sexual function, which consists in the fact that the patient under the protein membrane of the testicle is injected with a suspension of Leydig cells (cells of embryonic testicular tissue) in an amount of at least 2 million cells in 1 ml (see patent of the Russian Federation N 2026643, A 61 V 17/00, A 61 K 35/48, 01.20.95).

К недостаткам этих способов можно отнести некоторую их сложность и опасность травматизации соответствующих органов с возможным развитием в последующем воспалительного процесса (в том числе аутоиммунного характера), так как для достижения положительного результата лечения необходимо вводить суспензию клеток под капсулу долей предстательной железы или под белочную оболочку яичка. The disadvantages of these methods include some of their complexity and the risk of trauma to the corresponding organs with the possible development of an inflammatory process (including an autoimmune character), since in order to achieve a positive treatment result, it is necessary to introduce a suspension of cells under the capsule of the prostate gland or under the testicle .

Задачей изобретения, относящегося к способу получения материала, содержащего клетки предстательной железы, является его упрощение, увеличение гарантированно высокого процента (до 90%) извлечения неповрежденных клеток из исходного материала и удешевление за счет отказа от применения фермента, содержащего коллагеназу. The objective of the invention relating to a method for producing material containing prostate cells is to simplify it, increase a guaranteed high percentage (up to 90%) of removing intact cells from the source material and reduce the cost of not using an enzyme containing collagenase.

Задачей изобретения, относящегося к материалу, содержащему клетки предстательной железы, является получение материала с высокой биологической активностью. The objective of the invention, relating to a material containing prostate cells, is to obtain material with high biological activity.

Задачей изобретения, относящегося к способам лечения фиброматоза матки, хронического простатита и нарушений мужской половой функции, является повышение эффективности лечения за счет использования материала с высокой биологической активностью. The objective of the invention relating to methods for the treatment of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and disorders of male sexual function, is to increase the effectiveness of treatment through the use of material with high biological activity.

Поставленная задача решается тем, что при получении материала, содержащего клетки предстательной железы, используют предстательную железу взрослого молодого или новорожденного кролика (возможно использование предстательной железы другого млекопитающего), при этом извлеченную предстательную железу промывают в растворе Хенкса с добавлением антибиотиков, разрезают ее на фрагменты и засевают полученным материалом культуральные матрасы, добавляя культуральную (ростовую) среду и сыворотку млекопитающих, затем обеспечивают необходимый (оптимальный) режим, для культивируемых микрофрагментов предстательной железы, для чего осуществляют инкубацию при температуре 35 - 40oC в продолжение от двух суток до шести недель с однократным или многократным снижением температуры до 4 - 25oC и выдержкой при пониженной температуре, а также с временным однократным или периодическим снижением концентрации сыворотки.The problem is solved in that when receiving material containing prostate cells, use the prostate gland of an adult young or newborn rabbit (it is possible to use the prostate gland of another mammal), while the extracted prostate gland is washed in Hanks solution with the addition of antibiotics, cut into fragments and culture mattresses are inoculated with the obtained material, adding culture (growth) medium and mammalian serum, then provide the necessary ( optimal) regimen for cultured microfragments of the prostate gland, for which they are incubated at a temperature of 35 - 40 o C for two days to six weeks with a single or multiple decrease in temperature to 4 - 25 o C and exposure at low temperature, as well as temporary single or periodic decrease in serum concentration.

Поставленная задача для материала, содержащего клетки предстательной железы, решается за счет использования указанного выше способа его получения. The problem for the material containing prostate cells is solved by using the above method for its preparation.

Поставленная задача для способа лечения фиброматоза матки решается при его осуществлении, в процессе которого производят трансплантацию материала, содержащего клетки предстательной железы, при этом упомянутый материал может быть трансплантирован в различные органы и ткани: подкожно, внутримышечно, в частности в прямую мышцу живота, в печень (непосредственно в паренхиму или через воротную вену или ее ветви), в пульпу селезенки, в селезеночную вену, в полость брюшины, в специально создаваемый мышечный карман, в паренхиму печени или в большой сальник. The problem for the method of treating uterine fibromatosis is solved in its implementation, during which transplantation of material containing prostate cells is performed, while the said material can be transplanted into various organs and tissues: subcutaneously, intramuscularly, in particular into the rectus abdominis muscle, into the liver (directly into the parenchyma or through the portal vein or its branches), into the pulp of the spleen, into the splenic vein, into the peritoneal cavity, into the specially created muscle pocket, into the liver parenchyma or into the large oh oil seal.

Принципиальным отличием способа получения материала, содержащего клетки предстательной железы, в соответствии с данным изобретением является его простота и относительно низкая себестоимость за счет того, что в качестве исходного материала используются предстательная железа новорожденных, молодых или взрослых кроликов, а не эмбрионов, как в ближайшем аналоге. Для предложенного способа возможно и использование эмбрионов млекопитающих, но это нецелесообразно, так как железистые структуры в эмбриональной предстательной железе еще не сформированы. The fundamental difference between the method of obtaining material containing prostate cells in accordance with this invention is its simplicity and relatively low cost due to the fact that the prostate gland of newborns, young or adult rabbits, and not embryos, is used as starting material, as in the closest analogue . For the proposed method, the use of mammalian embryos is also possible, but this is impractical, since the glandular structures in the embryonic prostate have not yet been formed.

При осуществлении способа в соответствии с настоящим изобретением исключаются операции, травмирующие клетки предстательной железы, а именно центрифугирование, обработка на магнитном размешивателе, и операция обработки ферментом для растворения коллагеновых волокон. В соответствии с настоящим изобретением удается обеспечить высвобождение более 90% клеток предстательной железы, содержащихся в исходной предстательной железе. When implementing the method in accordance with the present invention, operations that injure the cells of the prostate gland, namely centrifugation, treatment with a magnetic stirrer, and an operation with an enzyme to dissolve collagen fibers, are excluded. In accordance with the present invention, it is possible to ensure the release of more than 90% of prostate cells contained in the original prostate gland.

Для получения материала, содержащего клетки предстательной железы, может быть использована предстательная железа млекопитающих, в частности новорожденных млекопитающих или их плодов. Имеющийся опыт показывает, что возможно использование предстательной железы крупного рогатого скота и их плодов, а также лошадей и свиней, плода человека, но наиболее доступным и дешевым материалом является предстательная железа новорожденных, молодых или взрослых кроликов. To obtain material containing cells of the prostate gland, the prostate gland of mammals, in particular newborn mammals or their fetuses, can be used. Existing experience shows that it is possible to use the prostate gland of cattle and their fruits, as well as horses and pigs, the human fetus, but the prostate gland of newborns, young or adult rabbits is the most affordable and cheapest material.

Для получения материала, содержащего клетки предстательной железы, извлекают предстательную железу, например молодого или взрослого кролика, и помещают ее в холодный раствор Хенкса с добавлением антибиотиков. Вынув предстательную железу из раствора, удаляют ее капсулу и прослойки соединительной ткани с кровеносными сосудами. Декапсулированную предстательную железу измельчают до микрофрагментов размером до 1 мм и вновь промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотиков. Полученным материалом засевают культуральные матрасы, куда добавляется культуральная (ростовая) среда и сыворотка млекопитающих. В качестве сыворотки может быть использована сыворотка крупного рогатого скота. Затем засеянные культуральные матрасы помещают в термостат, где обеспечивают оптимальный режим для клеток предстательной железы, для чего осуществляют инкубацию при постоянной температуре, находящейся в диапазоне 35 - 40oC, в течение от двух суток до шести недель, при этом однократно снижают температуру в зависимости от необходимости (за культурой ведется микроскопический контроль) до 4 - 25oC и выдерживают определенное время при пониженной температуре. Длительность выдержки определяется экспериментально для конкретного вида культуры клеток. Для получения высококачественного материала, содержащего клетки предстательной железы, производят временное однократное или периодически повторяющееся снижение концентрации сыворотки. Время выдержки при пониженной концентрации сыворотки также определяется экспериментально для конкретного вида культуры клеток предстательной железы.To obtain material containing prostate cells, a prostate, such as a young or adult rabbit, is removed and placed in a cold Hanks solution with antibiotics added. Having taken out the prostate gland from the solution, its capsule and layers of connective tissue with blood vessels are removed. The decapsulated prostate is crushed to microfragments up to 1 mm in size and again washed with Hanks solution with the addition of antibiotics. Cultured mattresses are seeded with the resulting material, to which culture (growth) medium and mammalian serum are added. As serum, cattle serum can be used. Then, the seeded culture mattresses are placed in a thermostat, where they provide an optimal regime for prostate cells, for which they are incubated at a constant temperature in the range of 35 - 40 o C for two days to six weeks, while the temperature is reduced once, depending from necessity (the culture is under microscopic control) to 4 - 25 o C and withstand a certain time at a low temperature. The exposure time is determined experimentally for a particular type of cell culture. To obtain high-quality material containing prostate cells, a temporary single or periodically repeated decrease in serum concentration is performed. The exposure time at low serum concentrations is also determined experimentally for a particular type of prostate cell culture.

Полученный материал может быть использован для трансплантации непосредственно после сбора или сохранен достаточно длительное время до операции при пониженной температуре или с помощью замораживания. The resulting material can be used for transplantation immediately after collection or stored for a sufficiently long time before surgery at low temperature or by freezing.

Способ лечения фиброматоза матки осуществляют с использованием материала, содержащего клетки предстательной железы, полученных с использованием предложенного способа. A method of treating uterine fibromatosis is carried out using a material containing prostate cells obtained using the proposed method.

Выбор способа введения материала, содержащего клетки предстательной железы, может быть различным, то есть материал может быть трансплантирован в различные органы и ткани: внутримышечно, в частности в прямую мышцу живота, в печень (в паренхиму или через воротную вену или ее ветви), в пульпу селезенки, в селезеночную артерию, в полость брюшины, в специально создаваемый мышечный карман, в большой сальник или подкожно. The choice of the method of introducing material containing prostate cells can be different, that is, the material can be transplanted into various organs and tissues: intramuscularly, in particular into the rectus abdominis muscle, into the liver (into the parenchyma or through the portal vein or its branches), spleen pulp, into the splenic artery, into the peritoneal cavity, into a specially created muscle pocket, into a large omentum or subcutaneously.

Самым простым по технике исполнения, эффективным и наименее травматическим для больного является введение материала, содержащего клетки предстательной железы, посредством шприца в прямую мышцу живота. The simplest technique, effective and least traumatic for the patient is the introduction of material containing prostate cells through a syringe into the rectus abdominis muscle.

Аналогичным образом осуществляют способы лечения хронического простатита и нарушения мужской половой функции. Similarly carry out methods of treating chronic prostatitis and disorders of male sexual function.

Использование материала, содержащего клетки предстательной железы, полученного предложенным способом, для трансплантации позволит существенно повысить эффективность операции, упростить получение и снизить себестоимость полученного материала, что в свою очередь является предпосылкой для широкого внедрения указанных выше способов лечения. The use of material containing prostate cells obtained by the proposed method for transplantation will significantly increase the efficiency of the operation, simplify the production and reduce the cost of the material obtained, which in turn is a prerequisite for the widespread introduction of the above treatment methods.

Ниже описываемые примеры иллюстрируют эффективность трансплантации материала, содержащего клетки предстательной железы, при фиброматозе матки, хроническом простатите и нарушениях мужской половой функции. The following examples illustrate the effectiveness of transplantation of material containing prostate cells in uterine fibromatosis, chronic prostatitis, and male sexual dysfunction.

Пример 1. Больная С.Е., 52 лет, поступила в гинекологическое отделение с диагнозом: фиброматоз матки. При УЗИ на левой боковой стенке матки определяется участок фиброматоза без четких контуров средним диаметром 23 мм. Миометрий несколько неоднородной эхоструктуры. Заключение: фиброматоз тела матки. Спустя 4 суток после поступления больной была выполнена внутримышечная трансплантация материала, содержащего клетки предстательной железы, полученные от молодых кроликов. Еще через 2 дня больная была выписана из стационара под амбулаторное наблюдение. При контрольном УЗИ, проведенном через 6 недель после трансплантации, были получены следующие данные: при исследовании матки участков фиброматоза не обнаружено. Миометрий обычной структуры. Заключение: патологических изменений не выявлено. Example 1. Patient S.E., 52 years old, was admitted to the gynecological department with a diagnosis of uterine fibromatosis. Ultrasound on the left side wall of the uterus determines the site of fibromatosis without clear contours with an average diameter of 23 mm. Myometrium is somewhat heterogeneous echostructure. Conclusion: fibromatosis of the uterus. 4 days after admission, the patient was performed intramuscular transplantation of material containing prostate cells obtained from young rabbits. After another 2 days, the patient was discharged from the hospital under outpatient supervision. When the control ultrasound was performed 6 weeks after transplantation, the following data were obtained: when examining the uterus, no sites of fibromatosis were found. Myometrium of the usual structure. Conclusion: no pathological changes were detected.

Последующее 16-месячное наблюдение признаков рецидива фиброматоза матки не выявило. The subsequent 16-month observation of signs of recurrence of uterine fibromatosis did not reveal.

Пример 2. Больной Б.В., 39 лет. Страдает хроническим простатитом в течение 8 лет. За последние 4 года стал отмечать значительное ослабление половой функции. Неоднократные курсы традиционного лечения у уролога и сексопатолога не дали положительного эффекта. Больному была выполнена внутримышечная трансплантация материала, содержащего клетки предстательной железы, полученные от взрослых кроликов. Уже через 2 недели после пересадки больной стал отмечать значительное улучшение общего состояния, повышение работоспособности. В течение последующих 2 месяцев у больного повысилась сексуальная активность: частота полноценных сексуальных контактов увеличилась с 2,1 в месяц до 2,5 в неделю. Столь значительное улучшение половой функции отмечалось по меньшей мере в течение 8 мес. после трансплантации. Example 2. Patient B.V., 39 years old. Suffers from chronic prostatitis for 8 years. Over the past 4 years, began to notice a significant weakening of sexual function. Repeated courses of traditional treatment by a urologist and sex therapist did not give a positive effect. The patient was performed intramuscular transplantation of material containing prostate cells obtained from adult rabbits. After 2 weeks after transplantation, the patient began to notice a significant improvement in general condition, increased efficiency. Over the next 2 months, the patient increased sexual activity: the frequency of full sexual contacts increased from 2.1 per month to 2.5 per week. Such a significant improvement in sexual function was noted for at least 8 months. after transplantation.

Claims (37)

1. Способ получения материала, содержащего клетки предстательной железы, заключающийся в использовании в качестве исходного материала предстательной железы млекопитающего, при этом извлеченную предстательную железу промывают, разрезают на микрофрагменты и засевают полученным материалом культуральные матрасы, добавляя культуральную (ростовую) среду и сыворотку млекопитающих, после чего осуществляют инкубацию в термостате при постоянной температуре с последующей выдержкой при более низкой температуре, отличающийся тем, что для извлечения клеток предстательной железы из фрагментов предстательной железы обеспечивают режим инкубации при постоянной температуре, находящейся в диапазоне 35 - 40oC в течение от двух суток до шести недель с однократным снижением температуры до 4 - 25oC и выдержкой при этой температуре, а также с однократным или периодическим снижением концентрации сыворотки млекопитающих, после чего собирают клетки предстательной железы с культурального матраса и получают материал для трансплантации.1. The method of obtaining material containing cells of the prostate gland, which consists in using mammalian prostate gland as a starting material, wherein the extracted prostate gland is washed, cut into microfragments and culture mattresses are inoculated with the resulting material, adding culture (growth) medium and mammalian serum, after which is carried out by incubation in a thermostat at a constant temperature, followed by exposure at a lower temperature, characterized in that for extraction of prostate cells from fragments of the prostate gland provide incubation at a constant temperature in the range of 35 - 40 o C for two days to six weeks with a single drop in temperature to 4 - 25 o C and exposure at this temperature, as well as a single or periodic decrease in the concentration of mammalian serum, after which the cells of the prostate are collected from the culture mattress and material is obtained for transplantation. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для промывания предстательной железы используют холодный раствор Хенкса с добавлением антибиотиков. 2. The method according to claim 1, characterized in that for washing the prostate gland use a cold Hanks solution with the addition of antibiotics. 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что перед измельчением предстательной железы удаляют капсулу железы и прослойки соединительной ткани с кровеносными сосудами. 3. The method according to p. 1, characterized in that before grinding the prostate gland removes the capsule of the gland and the layer of connective tissue with blood vessels. 4. Материал, содержащий клетки предстательной железы, полученные из предстательной железы млекопитающего, отличающийся тем, что он получен способом по п.1. 4. Material containing prostate cells obtained from the prostate gland of a mammal, characterized in that it is obtained by the method according to claim 1. 5. Способ лечения фиброматоза матки, включающий введение биологически активных элементов, отличающийся тем, что в качестве биологически активного элемента используют материал, содержащий клетки предстательной железы, по п. 4 и осуществляют его трансплантацию. 5. A method for the treatment of uterine fibromatosis, including the introduction of biologically active elements, characterized in that as a biologically active element using material containing prostate cells, according to claim 4 and carry out its transplantation. 6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют внутримышечно. 6. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted intramuscularly. 7. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в прямую мышцу живота. 7. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into the rectus abdominis muscle. 8. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в паренхиму печени. 8. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into the liver parenchyma. 9. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют через воротную вену или ее ветви. 9. The method according to p. 5, characterized in that the material containing cells of the prostate gland is transplanted through the portal vein or its branches. 10. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в пульпу селезенки. 10. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into the spleen pulp. 11. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в полость брюшины. 11. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into the peritoneal cavity. 12. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в большой сальник. 12. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into a large omentum. 13. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в селезеночную артерию. 13. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into the splenic artery. 14. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в специально созданный мышечный карман. 14. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into a specially created muscle pocket. 15. Способ по п. 5, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют подкожно. 15. The method according to p. 5, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted subcutaneously. 16. Способ лечения хронического простатита, включающий введение в организм биологически активных элементов, отличающийся тем, что в качестве биологически активного элемента используют материал, содержащий клетки предстательной железы, по п.4 и осуществляют его трансплантацию. 16. A method of treating chronic prostatitis, including the introduction into the body of biologically active elements, characterized in that as a biologically active element using material containing prostate cells, according to claim 4 and carry out its transplantation. 17. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют внутримышечно. 17. The method according to clause 16, wherein the material containing prostate cells is transplanted intramuscularly. 18. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в прямую мышцу живота. 18. The method according to clause 16, wherein the material containing prostate cells is transplanted into the rectus abdominis muscle. 19. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в паренхиму печени. 19. The method according to clause 16, wherein the material containing prostate cells is transplanted into the liver parenchyma. 20. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют через воротную вену или ее ветви. 20. The method according to clause 16, wherein the material containing cells of the prostate gland is transplanted through the portal vein or its branches. 21. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в пульпу селезенки. 21. The method according to clause 16, wherein the material containing cells of the prostate gland, transplanted into the pulp of the spleen. 22. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в полость брюшины. 22. The method according to clause 16, wherein the material containing cells of the prostate gland is transplanted into the peritoneal cavity. 23. Способ по. 16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в большой сальник. 23. The method according to. 16, characterized in that the material containing prostate cells is transplanted into a large omentum. 24. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в селезеночную артерию. 24. The method according to clause 16, wherein the material containing prostate cells is transplanted into the splenic artery. 25. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в специально созданный мышечный карман. 25. The method according to clause 16, wherein the material containing cells of the prostate gland is transplanted into a specially created muscle pocket. 26. Способ по п.16, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательный железы, трансплантируют подкожно. 26. The method according to clause 16, wherein the material containing prostate cells is transplanted subcutaneously. 27. Способ лечения нарушений мужской половой функции, включающей введение биологически активных элементов, отличающийся тем, что в качестве биологически активного элемента используют материал, содержащий клетки предстательной железы, по п.4 и осуществляют его трансплантацию. 27. A method of treating disorders of male sexual function, including the introduction of biologically active elements, characterized in that as a biologically active element using material containing prostate cells, according to claim 4 and carry out its transplantation. 28. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют внутримышечно. 28. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted intramuscularly. 29. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в прямую мышцу живота. 29. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted into the rectus abdominis muscle. 30. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в паренхиму печени. 30. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted into the liver parenchyma. 31. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют через воротную вену или ее ветви. 31. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted through the portal vein or its branches. 32. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в пульпу селезенки. 32. The method according to item 27, wherein the material containing cells of the prostate gland, transplanted into the pulp of the spleen. 33. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в полость брюшины. 33. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted into the peritoneal cavity. 34. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в большой сальник. 34. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted into a large omentum. 35. Способ по п. 27, отличающийся тем, что материал содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в селезеночную артерию. 35. The method according to p. 27, characterized in that the material containing cells of the prostate gland is transplanted into the splenic artery. 36. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют в специально созданный мышечный карман. 36. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted into a specially created muscle pocket. 37. Способ по п.27, отличающийся тем, что материал, содержащий клетки предстательной железы, трансплантируют подкожно. 37. The method according to item 27, wherein the material containing prostate cells is transplanted subcutaneously.
RU98122714/14A 1998-12-17 1998-12-17 Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method RU2135195C1 (en)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98122714/14A RU2135195C1 (en) 1998-12-17 1998-12-17 Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method
UA2000095262A UA53780C2 (en) 1998-12-17 1999-12-16 Method for producing material containing prostate-gland cells, the material containing prostate-gland cells and transplantation-based techniques for treating uterus fibromatosis, chronic prostatitis and disorders in male sexual functions
PCT/RU1999/000489 WO2000035463A1 (en) 1998-12-17 1999-12-16 Method for producing a material containing cells from the prostate gland, material containing cells from the prostate gland and methods for treating uterus fibromatosis, chronic prostatitis and disorders of the male sexual function according to a transplantation technique

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98122714/14A RU2135195C1 (en) 1998-12-17 1998-12-17 Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2135195C1 true RU2135195C1 (en) 1999-08-27

Family

ID=20213481

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98122714/14A RU2135195C1 (en) 1998-12-17 1998-12-17 Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method

Country Status (3)

Country Link
RU (1) RU2135195C1 (en)
UA (1) UA53780C2 (en)
WO (1) WO2000035463A1 (en)

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3888981A (en) * 1974-02-13 1975-06-10 American Home Prod Treatment of benign prostatic hypertrophy
GB8528809D0 (en) * 1985-11-22 1985-12-24 Fink Gmbh Treatment & composition
ATE113839T1 (en) * 1990-05-31 1994-11-15 Pfizer MEDICATIONS AGAINST IMPOTENCE.
DE69334068D1 (en) * 1992-07-20 2006-11-16 Massachusetts Inst Technology CONTROL OF WOUND TREATMENT WITH CALMODULIN INHIBITORS OR PROTEIN KINASE C INHIBITORS
RU2089204C1 (en) * 1994-11-24 1997-09-10 Научно-производственное объединение "Иммунопрепарат" Method of preparing peptides recovering the prostate gland function
RU2087152C1 (en) * 1995-07-26 1997-08-20 Российская медицинская академия последипломного образования Method for treating inflammatory infection diseases of male reproductive system organs
AU707675B2 (en) * 1996-01-29 1999-07-15 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting musculoaponeurotic fibromatoses (desmoid tumors)
RU2112504C1 (en) * 1996-12-24 1998-06-10 Открытое акционерное общество "Нижегородский химико-фармацевтический завод" Agent "vitaprost" for prostate gland disease treatment

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Травянко Т.Д., Сольский Я.П. Справочник по акушерско-гинекологической эндокринологии. - Киев: Здоровья, 1989, с.196, 197. *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2000035463A1 (en) 2000-06-22
UA53780C2 (en) 2003-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69535328T2 (en) IN-VITRO GROWTH OF LANGERHANS'SCHEN ISLANDS AND ITS USES
CN1250715C (en) Unactivated oocytes as cytoplast recipients for nuclear transfer
Woglom The study of experimental cancer. A review
Lane-Claypon et al. An experimental enquiry into the factors which determine the growth and activity of the mammary glands
Gaillard Growth and differentiation of explanted tissues
Bugbee et al. Anterior pituitary hormones
CN106581067A (en) Pharmaceutical compositions and topical use thereof
TW200423951A (en) Method of preparing anti-angiogenic drug from cartilage and chondrocytes and methods of use
CN102181462A (en) New method for improving transgenic efficiency of animals
Sangild et al. Adrenocortical stimulation of stomach development in the prenatal pig
JPH11505122A (en) Isolation of cells from organ tissue using sonication
Kon et al. An immunohistochemical study on the embryonic development of renin‐containing cells in the mouse and pig
RU2135195C1 (en) Method for producing material containing prostate cells and treating the cases of uterine fibromatosis, chronic prostatitis and male sexual function disorders by applying transplantation method
Beebe et al. A study of the so-called infectious lymphosarcoma of dogs
Bhosrekar Semen production and artificial insemination
Nicholas Experimental approaches to problems of early development in the rat
RU2135193C1 (en) Method of preparing material containing pancreatic beta-cells for transplantation in diabetic patients utilizing cell migration phenomenon, material containing pancreatic beta-cells for transplantation in diabetic patients, and method of treating diabetes mellitus by transplantation method
KR100570501B1 (en) A pregnancy predicting Kit and Method thereof
CN111298114A (en) Application of microbubble combined ultrasonic intervention in improving thin endometrial receptivity
Bandivdekar et al. Antibodies to human seminal plasma inhibin cause sperm agglutination and impairment of cervical mucus penetration and sperm-egg attachment
RU2142163C1 (en) Method for modelling inflammatory diseases in female genital organs
Allen Ovarian follicular hormone, theelin; Animal reactions.
CN110373381A (en) A kind of preparation method by the efficient placenta mesenchyma stem cell of homogenizer
Marshall The internal secretions of the reproductive organs
Onorato et al. The effect of certain environmental factors on the development and hatching of the eggs of blood flukes

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20051218