UA29973U - Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду listeria - Google Patents

Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду listeria Download PDF

Info

Publication number
UA29973U
UA29973U UAU200706530U UAU200706530U UA29973U UA 29973 U UA29973 U UA 29973U UA U200706530 U UAU200706530 U UA U200706530U UA U200706530 U UAU200706530 U UA U200706530U UA 29973 U UA29973 U UA 29973U
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
medium
hydrolyzate
pancreatic
accumulation
bacteria
Prior art date
Application number
UAU200706530U
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Inventor
Михаил Валериевич Бабкин
Елена Валентиновна Прохорятова
Наталия Васильевна Калашник
Лилия Николаевна Выговская
Марина Евгениевна Романько
Original Assignee
Национальный Научный Центр "Институт Экспериментальной И Клинической Ветеринарной Медицины"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Национальный Научный Центр "Институт Экспериментальной И Клинической Ветеринарной Медицины" filed Critical Национальный Научный Центр "Институт Экспериментальной И Клинической Ветеринарной Медицины"
Priority to UAU200706530U priority Critical patent/UA29973U/uk
Publication of UA29973U publication Critical patent/UA29973U/uk

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду Listeria до складу якого входить панкреатичний гідролізат казеїну (ПГК), екстракт пекарських дріжджів (ЕПД), літію хлорид, натрію хлорид, цитрат амонійного заліза, вода дистильована, як джерело азоту – панкреатичний гідролізат кільки з утриманням амінного азоту 0,15-0,20г/% за рН середовища 7,2-7,4.

Description

Опис винаходу
Корисна модель відноситься до гуманної і ветеринарної мікробіології, біотехнології та може бути 2 використана для бактеріологічної діагностики лістеріозу, для підтримки і зберігання музейних штамів культур та накопичення бактеріальної маси у виробничих умовах.
Лістеріоз - загальна проблема для медичних та ветеринарних фахівців, тому що інфікування відбувається аліментарним шляхом при застосуванні харчових продуктів та кормів тваринного і рослинного походження.
Низька концентрація лістерій у патологічному матеріалі в порівнянні з кількістю супутньої мікрофлори 70 перешкоджає ідентифікації збудника методом прямого висіву на диференційно-діагностичне середовище. Для збільшення кількості лістеріозного мікробу в досліджуваних зразках використовують засіб накопичення культури збудника на середовищах збагачення.
Існує засіб накопичення лістерій за температури (4-6)2С протягом 14 діб на середовище збагачення - фосфатно-сольовому буфері (Веленева И.А., Автореферат дис. канд. биол. наук.-- Владивосток, 1996. - 19бс.).
Середовище виготовляють на основі дистильованій води з додаванням Ман РО), зневоджений - 2,Зг/л та
Маг» НРО, зневоджений - 12,5г/л, рН 7 4.
Для виділення лістерій з морепродуктів та морської води використовують середовище збагачення, яке містить розчинник та поживну основу (Патент КО 2268307 кл. С1201/04 Способ накопления листериозного микроба (І івіегіа топосзіодепев) от 07.04.2004). У якості розчинника використовують стерильну морську воду, в якості поживної основи мінеральні солі у 5 маточних розчинах.
Вищеназвані середовища неможливо використовувати для накопичення бактерійної біомаси у біотехнологічному виробництві.
Також для вирощування та діагностики бактерій роду І івіегіа часто використовують щільні поживні середовища, наприклад, поживне середовище на основі ферментативного гідролізату крові (патент КО 2118363 29 кл, С12М1/20, С12012/04 от 19.06.97 Микробиологическая середа для вьуращивания и диагностики бактерий шщ рода І ізіегіа), яке також неможливо використовувати у біотехнологічному виробництві, тому, що використання щільних середовищ ускладнює технологічний процес накопичення бактеріальної маси.
Найбільш близьким мікробіологічним середовищем є диференційне середовище для бактеріологічної діагностики лістеріозу (патент 48) 2223313 Кл. С12М1/20,01251/04 от 07/04/2004 со
Дифференциально-диагностическая среда для вьіделения листерий ), яке складається з наступних компонентів: че
Панкреатичний гідролізат рибної муки 12,0-18,0; б»
Панкреатичний гідролізат казеїну 8,0-12,0; Тех!
Екстракт пекарських дріжджів 1,5-2,0;
Зо Літій хлориду 14,0-16,0; с
Натрій хлориду 3,0-4,0;
Ескулін 0,7-0,9;
Цитрат амонійного заліза 0,45-0,55; «
Поліміксін В сульфату 0,005-0,015; 70 Налідіксова кислота 0,015-0,025; о, с Акріфлавіна 0,005-0,015; ; » Агар-агар 12,0-14,0;
Дистильована вода решта.
Недоліком цього середовища є те, що це багатокомпонентне середовище є диференційним щільним, має де високу вартість та не придатне для накопичення бактеріальної маси лістерій. «се В основу корисної моделі поставлено задачу - розробити мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду І ізіегіа до складу якого входить панкреатичний гідролізат казеїну (ПГК), екстракт пекарських ікс) дріжджів (ЕПД), літію хлорид, натрію хлорид, цитрат амонійного заліза, вода дистильована, шляхом додавання -І 20 як джерела азоту-панкреатичного гідролізату кільки з утриманням амінного азоту 0,15-0,20г/90 за рН середовища 7,2-1 А при наступному співвідношенні компонентів, г/л:
Се
ЕПД 1,8-2,3; пк 9,5-10,5;
Літію хлорид 14,0-15,5; с Натрію хлорид 2,5-3,5;
Цитрат амонійного заліза 0,4-0,6;
Панкреатичного гідролізату кільки 14,0-16,0;
Дистильована вода решта. 60 щоб забезпечити ефективність мікробіологічного середовища.
Панкреатичний гідролізат кільки, який пропонується в якості живильної основи, є продуктом глибокого розщеплення білків з вмістом широкого спектру амінокислот. Крім того, вміст амінного азоту в даному поживному середовищі доповнює панкреатичний гідролізат казеїну та м'ясо-пептонний бульйон. Внесення гідролізату бо дріжджів сприяє інтенсивному росту лістерій, тому, що він є джерелом вітамінів групи В. Порівняльний аналіз технічного рішення з прототипом дозволяє зробити висновок, що мікробіологічне середовище відрізняється від -Д-
існуючого спрощенням складу,не містить дорогих компонентів, має більш виражені ростові властивості, що відповідає критерію "новизна"
Приклад 1.
Середовище готують таким чином: беруть наступні наважки компонентів, г/л.
ЕПД 1,8 пк 9,5
Літію хлориду 14,0; 70 Натрію хлориду 2,5;
Цитрату амонійного заліза О,4;
Панкреатичного гідролізу кільки 14,5
Готують панкреатичний гідролізат кільки за Хотінгером, відповідно до методики (Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, Биргер О.М. /М.: 1967. - С.53-54). т5 До одного літру гідролізату кільки, який містить 14,5г сухого панкреатичного гідролізату додають наважки, кип'ятять до розчинення компонентів. Після охолодження доводять рН до 7,2-7,4, фільтрують та стерилізують за
О,5атм. протягом 30 хвилин.
Бактеріальний контроль середовища проводили відповідно з прикладом З (таблиця).
Приклад 2. 720 Готують середовище за прописом прикладу 1 при наступному співвідношенні компонентів, г/л:
ЕПД 21 пк 10,5
Літію хлориду 15,5;
Натрію хлориду 3,5; шщ
Цитрату амонійного заліза 0,6;
Панкреатичного гідролізу кільки 16,0
До одного літру гідролізату кільки, який містить 16,0г сухого панкреатичного гідролізату додають наважки, Ме, кип'ятять до розчинення компонентів. Після охолодження доводять рН до 7,2-7,4, фільтрують та стерилізують за м.
О,5атм. протягом 30 хвилин.
Бактеріальний контроль середовища проводили відповідно з прикладом З (таблиця). Ме,
Приклад 3. Фо
Ефективність середовища перевіряли з використанням тест штамів: І ів(егіа топосуїодепез Мо924002, І ів(егіа 32 мапмії Ме924004, І івіегіа іпосиа Мо924005. с
Для порівняння ростових властивостей різних середовищ використовували МПБ, бульйон Хотінгера, середовище Мартену, МПБ з додаванням 1595 гідролізату казеїну та 0,290 ПГК.
Для визначення ростових властивостей, спочатку робили посів кожного тест-штаму на скошений МПА. «
Готували у стерильному 0,995 розчині хлориду натрію мікробну завись, яка за стандартом каламутності 70 відповідала 50Омлн. м.к./см3. в) с Далі робили засів кожної культури по 0,1см3 на бсм3 кожного рідкого середовища: МПБ, МПБ з додаванням :з» 195 гідролізату казеїну і 0,295 гідролізату дріжджів, середовища Мартена та бульйону Хотінгера (3 пробірки).
Інкубували 24 години за температури (35--0,5)2С. Далі готували з кожної пробірки кожного рідкого середовища десятикратні розведення на стерильному фізіологічному розчині до розведення 10 8, ко З розведення 1072-1078 засівали по 0,1см мікробної зависі на чашку Петрі з МПА, (п-3).
Посіви інкубували протягом 48 годин за температури (35--0,5)20. шо Колонії І івіегіа топосуїодепев, І івіегіа імапмії, Іівіега іпосцпа на МПА були круглими прозорими з
Ге сирувато-білим відтінком, розміром 0,2-1,0мм.
Облік результатів проводили за допомогою пристрою для підрахунку колоній (таблиця). - Інтенсивність росту бактеріальної біомаси оцінювали у динаміці часу, перші дві години кожні 30 хвилин, се» потім через 3, 4, 5, 6, 8, 12, та 24 години за оптичною густиною суспензії мікробних клітин, яку реєстрували у відповідній термін, фотометрично при довжині хвилі 59Онм.
З таблиці видно, що передбачуване середовище має високі ростові властивості. Так фаза адаптації (лаг-фаза) її у порівнянні з бульйоном Мартена займала менше часу в 4,8 раз та в 4,1 рази з бульйоном
Хотінгера, а фаза активного росту більше в 2,7 та в 1,3 рази, відповідно. с Таким чином, запропоноване рідке поживне середовище для накопичення біомаси лістерій, має наступні переваги: - не містить дорогих компонентів; 60 - компоненти середовища виробляються на промисловому рівні, тому вони стандартизовані; - склад середовища спрощується, при цьому ростові властивості перевищують такі відомих бактеріальних середовищ; - на основі запропонованого середовища можна виготовити диференційне рідке і щільне поживне бактеріальне середовище. б5
Таблиця
Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду І івієегіа
Вид поживного середовища Показники процесу культивування лістерій
Концентрація мікроорганізмів через 24г. КУСІсм З, 19
МПБЕ 1,096ПГКя 0,2 95 ЕПД 1,3-40,08 5,340,3 5,76-40,23
Бульйон Мартена 1,4-0,15 6,1-0,45 7,67-0,18
Бульйон Хотінгера 1,201 12,1--0,7 8,55-0,34
Технічне рішення, 0,29-0,03 16,3-0,6 10,24-0,57 приклад 1
Технічне рішення, 0,31-0,04 16,0-0,5 10,32-0,43 приклад 2

Claims (1)

  1. Формула винаходу Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду І ізіегіа, до складу якого входить панкреатичний гідролізат казеїну (ПГК), екстракт пекарських дріжджів (ЕПД), літію хлорид, натрію хлорид, цитрат амонійного заліза, вода дистильована, який відрізняється тим, що додатково містить як джерело азоту - панкреатичний гідролізат кільки з утриманням амінного азоту 0,15-0,20г/95 за рН середовища 7,2-7,4 при наступному співвідношенні компонентів, г/л: ЕПД 1,8-2,3 в пк 9,5-10,5 літію хлорид 14,0-15,5 шщ натрію хлорид 2,5-3,5 цитрат амонійного заліза 0,4-0,6 панкреатичний гідролізат кільки 14,0-16,0 с дистильована вода решта. че Офіційний бюлетень "Промислова власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних б» мікросхем", 2008, М 3, 11.02.2008. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і ду науки України. Зо с
    - . и? ко (Се) (Се) - Се 60 б5
UAU200706530U 2007-06-11 2007-06-11 Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду listeria UA29973U (uk)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU200706530U UA29973U (uk) 2007-06-11 2007-06-11 Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду listeria

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU200706530U UA29973U (uk) 2007-06-11 2007-06-11 Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду listeria

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA29973U true UA29973U (uk) 2008-02-11

Family

ID=39817563

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAU200706530U UA29973U (uk) 2007-06-11 2007-06-11 Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду listeria

Country Status (1)

Country Link
UA (1) UA29973U (uk)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11732237B2 (en) Microbiological growth media and methods of using the same
CN110129406A (zh) 一种铜绿假单胞菌显色培养基及利用其快速检测的方法
CN101485300A (zh) 一种拟丽突线虫的培养方法
CN102706821A (zh) 一种食源菌生物被膜形成抑制剂的快速鉴定方法
UA29973U (uk) Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду listeria
CN102093472A (zh) 海胆共附生菌株抑菌活性蛋白的制备方法
CN107287275A (zh) 培养基、包含其的试剂盒、及其应用
Indhu et al. STUDIES ON MICROFLORA AND THEIR ROLE ON EGG SHELL CONTAMINATION AND INFECTION.
CN104651258A (zh) 一种乙基紫叠氮钠肉汤及其应用
RU2444567C1 (ru) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛЕЦИТИНАЗНОЙ АКТИВНОСТИ У БАКТЕРИЙ РОДА Listeria
CN104651254A (zh) 一种粪肠球菌琼脂培养基及其应用
CN102994633B (zh) 一种用于检测溶血性链球菌的核酸适体、互补序列及非诊断检测方法
RU2541454C1 (ru) Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie
RU2328526C1 (ru) Способ выявления микобактерий туберкулеза крупного рогатого скота
RU2410424C1 (ru) Питательная среда для культивирования микроорганизмов
CN104651256A (zh) 一种甘露醇卵黄培养基及其应用
CN104263807A (zh) 一种胆汁液态培养基及其应用
JP4210674B2 (ja) マイコプラズマ・ガリセプティカム培養用培地
CN106939329B (zh) 一种用于检测霉菌性阴道炎的培养液、试剂盒及检测方法
JP2011004712A (ja) セレウス菌グループ検出用培地
Pelletier et al. Identification of the microbial population found in water sources in and around San Salvador Island, Bahamas
CN104651477A (zh) 一种甲苯胺蓝-dna酶琼脂培养基及其应用
CN104651255A (zh) 一种豆粉琼脂培养基及其应用
RU2336305C1 (ru) Элективная питательная среда для выделения возбудителя псевдотуберкулеза
CN104651250A (zh) 一种ps琼脂培养基及其应用