UA16041U - A set of monoclonal antibodies of p2, p3, p4, p5, p6, specific to protein of p24 human immunodeficiency virus, suitable for use in immuno fermentative analysis - Google Patents
A set of monoclonal antibodies of p2, p3, p4, p5, p6, specific to protein of p24 human immunodeficiency virus, suitable for use in immuno fermentative analysis Download PDFInfo
- Publication number
- UA16041U UA16041U UAU200601618U UAU200601618U UA16041U UA 16041 U UA16041 U UA 16041U UA U200601618 U UAU200601618 U UA U200601618U UA U200601618 U UAU200601618 U UA U200601618U UA 16041 U UA16041 U UA 16041U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- monoclonal antibodies
- protein
- immunodeficiency virus
- human immunodeficiency
- specific
- Prior art date
Links
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 title claims abstract description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title abstract description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title abstract description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 101100187130 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) nim-1 gene Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011545 carbonate/bicarbonate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N pristane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Корисна модель стосується імунхімії та гібридомної технології і може бути використаний для одержання 2 моноклональних антитіл (МКАТ) до білку р24 вірусу імунодефіциту людини (ВІЛ) та їхніх імуноферментних кон'югатів. Метою корисної моделі є одержання нових моноклональних антитіл до р24 ВІЛ, придатних для використання у імуноферментному аналізі (ІФА).A useful model relates to immunochemistry and hybridoma technology and can be used to produce 2 monoclonal antibodies (mCAT) to the human immunodeficiency virus (HIV) p24 protein and their enzyme-linked immunosorbent assay conjugates. The purpose of the utility model is to produce novel HIV p24 monoclonal antibodies suitable for use in enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).
Відомі МКАТ до білку рг24 вірусу імунодефіциту людини |1). Проте згадані моноклональні антитіла непридатні для використання у імуноферментних тест-системах для серологічної діагностики. 70 Найбільш близьким до запропонованих є моноклональні антитіла, які взаємодіють із білком р24 вірусу імунодефіциту людини (2).Known MKATs to the rg24 protein of the human immunodeficiency virus |1). However, the mentioned monoclonal antibodies are unsuitable for use in immunoenzymatic test systems for serological diagnosis. 70 The closest to those proposed are monoclonal antibodies that interact with the p24 protein of the human immunodeficiency virus (2).
У порівнянні із вищезгаданими антитілами клони Р2, РЗ, Р4, РБ5, РбЄ характеризуються більшою специфічністю та активністю у імуноферментному аналізі.Compared with the above-mentioned antibodies, clones P2, RZ, P4, RB5, RbE are characterized by greater specificity and activity in immunoenzymatic analysis.
Моноклональні антитіла продукуються гібридними клітинами, що одержані при злитті мієломних мишачих 12 клітин Зр2/0 та спленоцитів мишей лінії ВаІр/с. Клони МКАТ Р2, РЗ, Р4, РБ5, РбЄ характеризуються наступними ознаками. 2 ве 1861016 з 10008601 -Monoclonal antibodies are produced by hybrid cells obtained by the fusion of myeloma mouse 12 Zr2/0 cells and splenocytes of BaIr/c mice. MKAT clones P2, RZ, P4, RB5, RbE are characterized by the following features. 2 ve 1861016 with 10008601 -
Приклад 1. Одержання та очистка МКАТ із асцитичної рідини. «-Example 1. Preparation and purification of MKAT from ascitic fluid. "-
Для нагромадження значної кількості МКАТ гібридоми-продуценти певних антитіл культивували у черевних порожнинах мишей. Для цього за 10-14 днів до ін'єкції клітин мишам вводили внутрішньочеревно по 0,5мл «І пристану. Мінеральне масло служило сильним стимулятором асцитоутворення. Потім вводили від 10 9 до 107 о гібридом-продуцентів МКАТ в їмл середовища. Через 5-8 днів у мишей починала накопичуватися рідина в черевній порожнині. Її відбирали шляхом проколювання черевної стінки товстою голкою. З однієї миші і за ре) кілька разів вдавалося отримати від 5 до 1О0мл асцитичної рідини. Після центрифугування при ЗООбоб/хв. на «- протязі 5 хвилин асцит зберігали в замороженому стані.To accumulate a significant amount of MKAT, hybridomas-producers of certain antibodies were cultivated in the abdominal cavities of mice. For this, 10-14 days before the injection of cells, mice were injected intraperitoneally with 0.5 ml of I pristan. Mineral oil served as a strong stimulator of ascites formation. Then, from 10 9 to 107 o of MKAT-producing hybridomas were introduced into 1 ml of the medium. After 5-8 days, mice began to accumulate fluid in the abdominal cavity. It was taken by piercing the abdominal wall with a thick needle. It was possible to obtain from 5 to 100 ml of ascitic fluid from one mouse several times. After centrifugation at ZOOb/min. for "- for 5 minutes, ascites was kept in a frozen state.
Антитіла, що знаходяться в асциті, осаджували сульфатом натрію (1895 та 1695), розчиняли у дистильованій воді, переосаджували сульфатом амонію (5095) та розчиняли у мінімальній кількості води.Antibodies in ascites were precipitated with sodium sulfate (1895 and 1695), dissolved in distilled water, reprecipitated with ammonium sulfate (5095), and dissolved in a minimal amount of water.
Приклад 2. Спосіб використання моноклональних антитіл у складі імуносорбенту тест-системи для « 0 визначення антигену р24 ВІЛ у сироватках чи плазмі крові людини. 2 с Сорбцію МКАТ до білку р24 ВІЛ у полістиролових планшетах проводили у 0,05М карбонат-бікарбонатном буфері (рН 9,6) протягом ночі при 4 9С в концентрації бмкг/мл. Для відмивання використовували ;з» фосфатно-сольовий буфер з додаванням 0,0595 твін-20 (ФОСБТ), рН 7,2-7,4. У лунки планшету вносили досліджувані зразки сироваток крові. Планшет інкубували 1 годину при 372 і потім відмивали. Для виявленняExample 2. The method of using monoclonal antibodies as part of the immunosorbent of the test system for the determination of p24 HIV antigen in human serum or blood plasma. 2 s Sorption of MKAT to protein p24 of HIV in polystyrene tablets was carried out in 0.05M carbonate-bicarbonate buffer (pH 9.6) overnight at 4 9С at a concentration of 1000 mg/ml. Phosphate-salt buffer with the addition of 0.0595 Tween-20 (FOSBT), pH 7.2-7.4 was used for washing. Blood serum samples were put into the wells of the tablet. The tablet was incubated for 1 hour at 372 and then washed. To detect
Зв'язаних антитіл використовували кон'югат поліклональних кролячих антитіл до р24 ВІЛ з пероксидазою хрону, - який інкубували 1 годину при кімнатній температурі. Планшет тричі відмивали ФСБТ і один раз водою. Як субстрат використовували 0,00395 розчин перекису водню в 0,15М цитратному буфері, рН 5,0, а як хромоген - б тетраметилбензидін. Реакцію зупиняли 2М сірчаною кислотою. Оптичну щільність при довжині хвиль 492нм і ав! бЗОнм вимірювали на спектрофотометрі.A conjugate of polyclonal rabbit antibodies to p24 HIV with horseradish peroxidase was used as bound antibodies, which was incubated for 1 hour at room temperature. The tablet was washed three times with FSBT and once with water. A 0.00395 solution of hydrogen peroxide in 0.15 M citrate buffer, pH 5.0 was used as a substrate, and tetramethylbenzidine was used as a chromogen. The reaction was stopped with 2M sulfuric acid. Optical density at a wavelength of 492 nm and av! bZOnm was measured on a spectrophotometer.
Перелік літературних джерел: т- 1. МУеШеа К., МівзеМм/йла К., Найзаоп (с. еї аЇ. Сопіоптайоп, рН-іпадисейд сопіогтайопа| спапдев, апа - М Шегтаї! опіоїдіпуд ої апіі-р24 (НІМ-1) топосіопа! апіроду СВ4-1 апа йв Рар апа Рс їпадтепів // Віоспітіса еїList of literary sources: t- 1. MueShea K., MivzeMm/yla K., Naizaop (p. ei aY. Sopioptaiop, рН-ipadiseid sopiogtaiopa| spapdev, apa - M Sheghtai! opioidipud oi apii-r24 (NIM-1) toposiopa ! apirodu SV4-1 apa yv Rar apa Rs ipadtepiv // Viospitis ei
Віорпузіса Асіа (ВВА) - Ргоївіп 5ігисішге апа МоіІесшаг Епгутоіоду. - 1999. - Мої. 1431, 1. - Р.120-131. 2. Зіемепз Р., Егапсів С., доПеу М. еї аЇ. Мопосіопа! апіїбодіев (о НІМ-1 р24 соге ргоїеіп іпсіцде раїг8Viorpuzisa Asia (BVA) - Rgoivip 5igisishge apa MoiIesshag Epgutoiodu. - 1999. - Mine. 1431, 1. - R.120-131. 2. Ziemepz R., Egapsiv S., doPeu M. ei aYi. Moposiope! apiibodiev (about NIM-1 p24 soge rgoieip ipsitsde raig8
МПісп ехпірії зупегдівіїс Біпаїпу // МоіІесціаг Іттипоіоду. - 1993. - Мої. ЗО, 3. - Р.243-254.MPisp ekpirii zupegdiviis Bipaipu // MoiIesciag Ittypoiodu. - 1993. - Mine. ZO, 3. - R. 243-254.
З. Тіїввеп Р. Ргерагайоп ої епгуте-апіроду ог епгуте-тасготоїЇесціе сопіда(ев // І арогаїогу іеспіднев с іп Біоспетівзігу апа тоїіесшіаг Біоіоду: ргасіїсе апа (Шеогу ої еплуте іттипоаззауз / Едйоге К.Н. Вигаоп, Р.Н. уап Кпіррепрего. - Атвіегдат: ЕІземіег, 1985. - Р.221-241. боZ. Tiivvep R. Rgeragayop oi epgute-apirodu og epgute-tasgotoiYescie sopida(ev // I arogaiogu iespidnev s ip Biospetivzigu apa toiiesshiag Bioiodu: rgasiise apa (Sheogu oi eplute ittypoazzauz / Edyoge K.N. Vygaop, R.N. uap Kpirreprego - Atviegdat: Eizemieg, 1985. - P.221-241. because
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200601618U UA16041U (en) | 2006-02-16 | 2006-02-16 | A set of monoclonal antibodies of p2, p3, p4, p5, p6, specific to protein of p24 human immunodeficiency virus, suitable for use in immuno fermentative analysis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200601618U UA16041U (en) | 2006-02-16 | 2006-02-16 | A set of monoclonal antibodies of p2, p3, p4, p5, p6, specific to protein of p24 human immunodeficiency virus, suitable for use in immuno fermentative analysis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA16041U true UA16041U (en) | 2006-07-17 |
Family
ID=37503624
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200601618U UA16041U (en) | 2006-02-16 | 2006-02-16 | A set of monoclonal antibodies of p2, p3, p4, p5, p6, specific to protein of p24 human immunodeficiency virus, suitable for use in immuno fermentative analysis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA16041U (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2521669C2 (en) * | 2008-10-31 | 2014-07-10 | Торэй Индастриз, Инк. | Method of human protein cxcl1 immunoassay |
-
2006
- 2006-02-16 UA UAU200601618U patent/UA16041U/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2521669C2 (en) * | 2008-10-31 | 2014-07-10 | Торэй Индастриз, Инк. | Method of human protein cxcl1 immunoassay |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102305859B (en) | Activated toxic antibody kit for detecting porcine reproductive and respiratory syndrome virus | |
| Tanaka et al. | Mucosal immunity and primary biliary cirrhosis: presence of antimitochondrial antibodies in urine | |
| CN105527444B (en) | The enzyme-linked immunologic detecting kit and inhibin B test methods of inhibin B | |
| RU2395577C1 (en) | STRAIN OF HYBRID ANIMAL CELLS Mus musculus L - PRODUCER OF MONOCLONAL ANTIBODIES FOR EXPOSING VP40 PROTEIN OF EBOLA VIRUS, ZAIRE SUBTYPE (Mainga STRAIN) (VERSIONS), MONOCLONAL ANTIBODY PRODUCED BY SAID STRAIN (VERSIONS) AND SET FOR "SANDWICH" FORMAT IMMUNOENZYMOMETRIC TEST SYSTEM FOR EXPOSING VP40 PROTEIN OF EBOLA VIRUS, ZAIRE SUBTYPE (Mainga STRAIN) | |
| UA16041U (en) | A set of monoclonal antibodies of p2, p3, p4, p5, p6, specific to protein of p24 human immunodeficiency virus, suitable for use in immuno fermentative analysis | |
| CN103645322B (en) | A kind of chemical luminescence ELISA detection kit of streptomysin | |
| CN110045130B (en) | Immunoassay detection kit for IgA nephropathy-related polypeptide | |
| CN102368068B (en) | Kit for detecting chlamydia pneumoniae IgM antibody | |
| ITMI992319A1 (en) | METHOD FOR THE QUALITATIVE AND QUANTITATIVE DETERMINATION OF HUMAN BODIES OF IGC CLASS | |
| KR20020076896A (en) | Method of measurement for ceruloplasmin concentration with enzyme-linked immunosorbent assay in filter paper, and Wilson's disease screening test kit and diagnosis reagent using thereof | |
| WO1997023509A1 (en) | ANTIFACTOR Xa-TISSUE FACTOR PATHWAY INHIBITOR COMPLEX MONOCLONAL ANTIBODY AND USE OF THE SAME | |
| CN111848792B (en) | Preparation method and detection method of antibody of bovine serum albumin and other impurities in vaccine | |
| Tadepalli et al. | Determination of zidovudine concentration in serum by enzyme-linked immunosorbent assay and by time-resolved fluoroimmunoassay | |
| KR100998419B1 (en) | hapten compound and antibody | |
| UA16035U (en) | A set of monoclonal antibodies k3, k7, specific to immunoglobulins of class of g of cattle, suitable for use in immuno fermentative analysis | |
| UA16039U (en) | A set of monoclonal antibodies of m3, m5, m6, m8, specific to human immunoglobulins of class of m, suitable for use in immuno fermentative analysis | |
| UA16040U (en) | A set of monoclonal antibodies of r2, r4, specific to horse-radish peroxidase enzyme, suitable for use in immuno fermentative analysis | |
| UA26768U (en) | MONOCLONAL ANTIBODIES TO IgG OF HUMAN SUITABLE FOR USE IN IMMUNO-ENZYME TEST-SYSTEMS | |
| UA16037U (en) | A set of monoclonal antibodies of b1, b4, b5, b6, b10, specific to surface antigen of hepatitis b virus, suitable for use in immuno fermentative analysis | |
| CN102721810B (en) | Liquid-phase blocking ELISA kit for discriminating classic PRRS and HPRRS | |
| JP2005035893A (en) | Alachlor hapten and antibody against alachlor and immunoassay using the same | |
| UA16036U (en) | Set of monoclonal antibodies of g3, g6, g7, specific to human immuniglobulins of class g, suitable for use in immuno fermentative analysis | |
| CN102707069B (en) | Immunohistochemical double-antibody kit | |
| UA10588U (en) | Monoclonal antibodies 156S10, specific to human immunoglobulins of the class G, suitable to immuno analysis | |
| RU2535159C1 (en) | Method and kit for enzyme immunoassay of functional activity of complement component c3 according to ability to bind to peptidoglycan |