UA152369U

UA152369U - Спосіб кріоконсервування еритроцитів

Info

Publication number: UA152369U
Application number: UAU202106223U
Authority: UA
Inventors: Єлизавета Леонідівна Воловельська; Віктор Володимирович Рамазанов
Original assignee: Інститут Проблем Кріобіології І Кріомедицини Національної Академії Наук України
Priority date: 2021-11-05
Filing date: 2021-11-05
Publication date: 2023-01-18

Abstract

Спосіб кріоконсервування еритроцитів, при якому виконують відмивання еритромаси розчином, що містить 0,9 % NaCl, додавання до еритроцитів у співвідношенні 1:1 кріоконсерванту, що містить 38 % гліцерину, 2,9 % сорбітолу, 0,63 % NaCl і воду дистильовану, інкубацію протягом 20 хв. при 25-26 °C, заморожування до -196 °C, відігрівання на водяній бані при 41-45 °C і відмивання клітин від кріоконсерванту гіпертонічним та фізіологічним розчинами NaCl. В розчин для відмивання еритромаси додатково вводять N-ацетилцистеїн в концентрації 0,3 %.

Description

Корисна модель належить до кріобіології і кріомедицини і може бути використана для довгострокового зберігання еритроцитів з метою подальшого їх використання для трансфузії.

Відомий спосіб кріоконсервування еритроцитів, який включає відмивання еритромаси розчином, що містить 0,995 Масі, заморожування клітин до -1967С у кріоконсерванті, що містить 28 95 гліцерину, 6,8 95 сорбітолу, 0,25 95 Масі та дистильовану воду, відігрівання на водяній бані при 41-457С і 4-кратне відмивання з використанням гіпертонічного та фізіологічного розчинів|11.

Недоліком цього способу є використання високої концентрації сорбітолу, довготривала інкубація та 4-кратне відмивання еритроцитів від кріопротектора, що призводить до зниження збереженості еритроцитів (гемоліз до 11 95).

Найбільш близьким до заявленого є спосіб кріоконсервування еритроцитів, який включає відмивання еритромаси 0,9 95 розчином Масі, змішування еритроцитів з кріоконсервантом, що містить 38 95 гліцерину, 2,9 95 сорбітолу, 0,63 95 Масі і воду дистильовану, інкубування 20 хв. при 25-26 "С, заморожування до -196 "С, відігрівання на водяній бані при 41-45 "С і відмивання від кріоконсерванта гіпертонічним (6 95) і фізіолоічним розчинами Масі (21.

Недоліком способу є те, що він не забезпечує високої збереженості еритроцитів (гемоліз 16 Об).

В основу корисної моделі поставлена задача удосконалити відомий спосіб кріоконсервування еритроцитів шляхом зміни складу розчину для відмивання еритромаси, що дозволить знизити гемоліз і підвищити збереженість еритроцитів після розморожування і подальшого відмивання від кріоконсерванта.

Поставлена задача вирішується тим, що в відомому способі кріоконсервування еритроцитів, який включає відмивання еритромаси розчином, що містить 0,995 МасСі, додавання до еритроцитів у співвідношенні 1:1 кріоконсерванта, що містить 38 95 гліцерину, 2,9 95 сорбітолу, 0,63 95 Масі і воду дистильовану, інкубацію протягом 20 хв. при 25-26 "С, заморожування до - 196 "С, відігрівання на водяній бані при 41-45 "С і відмивання від кріоконсерванта гіпертонічним та фізіологічним розчинами МасСі, згідно з корисною моделлю, в розчин для відмивання еритромаси додатково вводять М-ацетилцистеїн в концентрації 0,3 95.

Введення М-ацетилцистеїну в розчин для відмивання еритромаси забезпечує зменшення

Зо ступеня окислення гемоглобіну і втрати білків в процесі відмивання еритромаси|3,4|, що дає можливість знизити гемоліз кріоконсервованих еритроцитів у порівнянні з прототипом на 7 95.

Суть корисної моделі пояснюється прикладом

Приклад

Кров центрифугували при 1500 об/хв. протягом 10 хв. і видаляли надосад. Отриману еритромасу З3-разово відмивали розчином, що містить 0,9 95 Масі ї 0,3 95 М-ацетилцистеїну. До еритроцитів (70-74 95 гематокрит) у співвідношенні 1:11 додавали кріоконсервант, що містить 38 95 гліцерину, 2,9 95 сорбітолу, 0,63 95 Масі і воду дистильовану. Перемішували і інкубували 20 хв. при 25-26 "С. Еритроцити розливали в контейнери і занурювали у рідкий азот (-196 7С). де зберігали протягом 24 годин. Відігрівання еритроцитів здійснювали на водяній бані при 41- "С, відмивали при кімнатній температурі з використанням гіпертонічного (6 90) ії фізіологічного (0,9 95) розчинів Масі. Далі еритроцити переносили в розчин 88, що містить 0,3 95 Мабсі, 7 90 сахарози, 0,2 96 МагНРОз--12Н2О і 0,1 95 МанНгРО4-2НеО, для гіпотермічного зберігання (4 С).

Через 24 години визначали збереженість еритроцитів по гемолізу і загальним втратам клітин.

Результати наведені в Таблиці. 45 Дані Таблиці свідчать, що загальні втрати і гемоліз еритроцитів, консервованих заявленим способом, після гіпотермічного зберігання нижче, ніж еритроцитів, консервованих способом за прототипом.

Таблиця

Збереженість еритроцитів після кріоконсервування та гіпотермічного зберігання п-б

Джерела інформації:

1. Воловельська Є Л., Рамазанов В В., Шпакова Н М. Спосіб кріоконсервування еритроцитів.

Пат. України Ме145192, МПК АОТМ 1/02. Публ. 25.11.2020, Бюл. Мо 22. 2.ГеіКепе С С, Мооптап РЕ, Копіпд У Сї, Тиціепве-де Гапде В, еїеККіпдег Р 5, ВакККег У С,

Іадегбега У М, Вгапа А Метоємеп А у еїарійу айег ШТам/іпд ої ВВС5 їтог2еп м/п пе підп-апа Іом/- діусетої теїтоай /Лтапвтивіоп 2003.Рер;-Моі!.43(2).-Р. 157-164.

З. Оитазулаіа 0)., 7пцо Г., Манадап 5., еї аІ. Сішайіопе ргоїесі5 спетоКіпе-5самепадіпу апа апідохідайме детепзе їшпсійоп5 іп питап ВВС // Ат ./ РНпузіо! Сеї! Рпузіо!. - 2001. - Мої. 280, Мо 4. -

Р. 867-873. 4. Стеепмжаїйїї Т). Весепі аємеіортепів іп Ше Іопд-їєепт ргезегмайоп ої гей Біоса сеїЇв // Ст

Оріп Нетай)!). - 1997. Мої. 4, Мо 6. - Р. 431-435.

Claims

ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб кріоконсервування еритроцитів, при якому виконують відмивання еритромаси розчином, що містить 0,9 95 Масі, додавання до еритроцитів у співвідношенні 1:11 кріоконсерванту, що містить 38 95 гліцерину, 2,9 95 сорбітолу, 0,63 95 Масі і воду дистильовану, інкубацію протягом хв. при 25-26 "С, заморожування до -196 "С, відігрівання на водяній бані при 41-45 С і відмивання клітин від кріоконсерванту гіпертонічним та фізіологічним розчинами Масі, який відрізняється тим, що в розчин для відмивання еритромаси додатково вводять М- 20 ацетилцистеїн в концентрації 0,3 Фо.