UA134968U - Спосіб визначення концентрації гемоглобіну - Google Patents
Спосіб визначення концентрації гемоглобіну Download PDFInfo
- Publication number
- UA134968U UA134968U UAU201900215U UAU201900215U UA134968U UA 134968 U UA134968 U UA 134968U UA U201900215 U UAU201900215 U UA U201900215U UA U201900215 U UAU201900215 U UA U201900215U UA 134968 U UA134968 U UA 134968U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- hemoglobin
- concentration
- hydrochloric acid
- distilled water
- blood
- Prior art date
Links
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 title claims abstract description 35
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 title claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 4
- BMUDPLZKKRQECS-UHFFFAOYSA-K 3-[18-(2-carboxyethyl)-8,13-bis(ethenyl)-3,7,12,17-tetramethylporphyrin-21,24-diid-2-yl]propanoic acid iron(3+) hydroxide Chemical compound [OH-].[Fe+3].[N-]1C2=C(C)C(CCC(O)=O)=C1C=C([N-]1)C(CCC(O)=O)=C(C)C1=CC(C(C)=C1C=C)=NC1=CC(C(C)=C1C=C)=NC1=C2 BMUDPLZKKRQECS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 229940109738 hematin Drugs 0.000 description 3
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N chlorpromazine Chemical compound C1=C(Cl)C=C2N(CCCN(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001076 chlorpromazine Drugs 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 2-(furan-2-yl)-7-methyl-1h-1,8-naphthyridin-4-one Chemical compound N=1C2=NC(C)=CC=C2C(O)=CC=1C1=CC=CO1 INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSFOVUSSGSKXFI-GAQDCDSVSA-N CC1=C/2NC(\C=C3/N=C(/C=C4\N\C(=C/C5=N/C(=C\2)/C(C=C)=C5C)C(C=C)=C4C)C(C)=C3CCC(O)=O)=C1CCC(O)=O Chemical compound CC1=C/2NC(\C=C3/N=C(/C=C4\N\C(=C/C5=N/C(=C\2)/C(C=C)=C5C)C(C=C)=C4C)C(C)=C3CCC(O)=O)=C1CCC(O)=O KSFOVUSSGSKXFI-GAQDCDSVSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical class O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- KXZJHVJKXJLBKO-UHFFFAOYSA-N chembl1408157 Chemical compound N=1C2=CC=CC=C2C(C(=O)O)=CC=1C1=CC=C(O)C=C1 KXZJHVJKXJLBKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 230000005499 meniscus Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229950003776 protoporphyrin Drugs 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Спосіб вимірювання концентрації гемоглобіну включає використання 0,1 N хлорводневої кислоти та дистильованої води. Оптичну щільність зразків визначають у 96-лунковому біохімічному планшеті, де змішують 20 мкл крові та 50 мкл води дистильованої, очікують 10 хвилин, додають 20 мкл хлорводневої кислоти, вимірювання проводять на імуноферментному або біохімічному аналізаторі при довжині хвилі 520-560 нм з подальшим розрахунком концентрації гемоглобіну.
Description
Корисна модель належить до медицини, а саме до клінічної медицини, і може бути використана для визначення концентрації гемоглобіну.
Гемоглобін - основний дихальний пігмент еритроцитів, який відноситься до хромопротеїдів.
Складається з білка глобіну та гему - сполуки протопорфірину із залізом. Основна функція гемоглобіну -забезпечити тканини киснем.
Гем надає гемоглобіну характерне забарвлення, яке може змінюватися при приєднанні до гема різних хімічних груп. На цьому засновані практично всі сучасні методи визначення концентрації гемоглобіну.
Відомий цианметгемоглобіновий фотометричний спосіб визначення вмісту гемоглобіну, який передбачає застосування ФЕК із зеленими світлофільтрами або спектрофотометру. Мірною піпеткою у пробірку наливають 5 мл трансформуючого розчину Драбкіна, який складається з красної кров'яної солі, ціаністого калію або натрію та дистильованої води В пробірку додають 20 мкл крові. Вміст пробірки перемішують та залишають у холодильнику на 20 хвилин. Після цього робочий та трансформуючий розчини наливають у кювети товщиною 1 см та проводять вимірювання на ФЕК з використанням зеленого світлофільтру. Розрахунок концентрації гемоглобіну проводять за формулою |Знциклопедия клинических лабораторньїх тестов /под ред. В.В. Меньшикова. - М.: Лабинформ, 1997.- 960 с.
Недоліком способу є використання надзвичайно токсичних речовин.
Відомий також спосіб визначення вмісту гемоглобіну у біологічних рідинах, який полягає в тому, що в контрольну та дослідну фотометричні кювети, товщиною 2,5 мм вносять по 0,8 мл суміші концентрованих оцтової та азотної кислот. У дослідну кювету додають розчин яєчного альбуміну у дистильованій воді об'ємом 10 мкл та 5 мкл розведеної у 2000 разів цільної крові.
Туди також додають 0,25 мл розчину хлорпромазину з концентрацією 0,0025 95. Його також вводять у такому ж об'ємі у контрольну кювету. Після цього для запуску реакції хлорпромазину з гемвмісними сполуками у дослідну кювету додають 0,5 мл З 95 пероксиду водню та через 2-3 хвилини на ФЕК реєструють приріст оптичної щільності при довжині хвилі 530-550 нм проти контрольної проби. Між концентрацією гемоглобіну та приростом оптичної щільності в розчині існує лінійна залежність, яка дозволяє визначити концентрацію гемоглобіну за калібрувальним графіком (Патент Российской Федерации Мо 2300771, (0501 М 33/72 /Кемеровський
Зо государственньй університет, Драпезо Р.Г., Голенда И.Л. Заявл. 11.04.2005, Опубл. 20.10.2006.
Способ определения гемоглобина в биологических жидкостяхі|.
Цей спосіб є складним, потребує спеціальних реагентів та особливого досвіду персоналу, тому він не застосовується у клінічних дослідженнях.
Також відомий спосіб визначення вмісту гемоглобіну, який засновано на обробці проби крові реагентом-комплексоутворювачем на основі додецилсульфату натрію та визначення концентрації гемоглобіну за результатами вимірювання оптичної щільності отриманого продукту. До проби крові додають реактив-комплексоутворювач та через 30 с вимірюють оптичну щільність при довжині хвилі 413 нм. Концентрацію гемоглобіну НЬ визначають за відношенням: НЬБ - Е х К - М, де К - коефіцієнт розведення крові, Е - значення визначеної оптичної щільності, М - калібрувальний коефіцієнт (Патент Российской Федерации Мо 2054173, сої М33/48. /"Акционерное общество закрьтого типа НПП "Техномедика", Антонов В.С.,
Власенко В.И., Ованесов Е.Н., Прищепа М.И., Сецко И.В., Шибанов А.Н. Заявл. 10.04.1992,
Опубл. 10.02.1996. Способ определения концентрации сгемоглобина в крови, реактивкомплексообразователь и раствор-калибратор для его осуществления).
Недоліком способу є велика кількість реагентів, складність їх приготування та вимога високої кваліфікації персоналу, тому даний спосіб не знайшов використання у клінічних лабораторіях.
Відомий спосіб визначення гемоглобіну, де в якості приладу вимірювання застосовують імуноферментний аналізатор. Спочатку готують З розчини гемоглобіну з відомою концентрацією на трансформуючому розчині Драбкіна. Вимірювання проводять на аналізаторі Мультискан ЕХ у 9б-луночному планшеті, використовуючи одну лунку для бланка, яким є чистий розчин
Драбкіна. Після цього будують калібрувальний графік (Пат. Мо 2196328, КИ, МПК 501 М33/49, 501 М33/52, (0301 М33/72. /Корякин СП. - 3. Мо 2001112444/14, заявл. 04.05.2001, опубл. 10.01.2003. Применение планшетного иммуноферментного анализатора в качестве гемоглобинометра)|.
Недоліком способу є застосування токсичного розчину Драбкіна, що робить проведення таких досліджень потенційно небезпечними.
Відомий також спосіб визначення вмісту гемоглобіну колориметричним методом за допомогою гемометра Салі. Для виконання цього способу в середню пробірку гемометра до бо нижньої риски 10 наливають 0,1 М хлорводневої кислоти. Потім туди ж поміщають 20 мкл крові,
взятої з пальця. Через 5-10 хвилин утворюється солянокислий гематин, який забарвлює розчин у коричневий колір. До цього розчину додають по краплям дистильовану воду, доки колір отриманого розчину не буде однаковим з кольором стандартного розчину гематину, який знаходиться у додаткових запаяних пробірках, що розташовані по краях гемометру. Цифри на рівні нижнього меніску отриманого розчину вказують абсолютний, в грамах, або відносний вміст гемоглобіну у крові /Любина А.Я. Клинические лабораторнье исследования /А.Я. Любина, Л.П.
Ильичева, Т.В. Катасонова и др. - М.: Медицина, 1984. - 288 с.|.
Цей спосіб визначення концентрації гемоглобіну є найбільш близьким до того, що заявляється, за технічною суттю та результатом, який може бути досягнутим, тому його обрано за найближчий аналог.
Недоліком способу аналогу є недостатня точність результатів.
В основу корисної моделі поставлено задачу вдосконалення існуючих способів визначення концентрації гемоглобіну з метою уникнення застосування шкідливих та небезпечних реагентів в ході проведення аналізу і підвищення точності результатів.
Задачу, яку поставлено в основу корисної моделі, вирішують тим, що у відомому способі вимірювання концентрації гемоглобіну, який включає використання 0,1 М хлорводневої кислоти та дистильованої води, згідно з корисною моделлю, оптичну щільність зразків визначають у 96- луночному біохімічному планшеті, де змішують 20 мкл крові та 50 мкл води дистильованої, очікують 10 хвилин, додають 20 мкл хлорводневої кислоти, вимірювання проводять на імуноферментному або біохімічному аналізаторі при довжині хвилі 520-560 нм з подальшим розрахунком концентрації гемоглобіну.
Технічний результат корисної моделі, а саме, вдосконалення існуючих способів визначення концентрації гемоглобіну для уникнення застосування шкідливих та небезпечних реагентів і підвищення точності результатів, обумовлений синергізмом заходів та засобів, які заявляються.
Спосіб виконують наступним чином: У лунку 96-луночного біохімічного планшету поміщають 20 мкл свіжої цільної крові, взятої з пальця. Туди ж додають 50 мкл дистильованої води.
Інкубують 2-3 хв. із застосуванням шейкеру при 500-600 об/хв. або 10 хв. у стані спокою. За цей час проходить гемоліз еритроцитів. Після цього додають 20 мкл 0,1 М хлороводневої кислоти, яка забарвлює розчин у коричневий колір через утворення солянокислого гематину. Таким
Зо самим чином, в іншій лунці проводять підготовку стандартного зразка крові з відомим вмістом гемоглобіну. Ще одну лунку-бланк заповнюють сумішшю, яка складається з 50 мкл дистильованої води і 20 мкл 0,1 М хлороводневої кислоти.
Вимірюють оптичну щільність на біохімічному або імуноферментному аналізаторі при довжині хвилі 520-560 нм. При видачі результатів вимірювання оптична щільність лунки-бланка автоматично віднімається від оптичної щільності інших лунок. Концентрацію гемоглобіну у досліджуваниюзразкежеграховують за формулою: до опи о У ПИ ст. ; де: Снів). концентрація гемоглобіну у досліджуваних зразках; Сньст) . концентрація . . Одзр, 2, й оба гемоглобіну у стандартному зразку; - оптична щільність досліджуваного зразка; ст. - оптична щільність стандартного зразка.
Одиниці вимірювання концентрації гемоглобіну залежать від того, в яких одиницях наведено концентрацію стандартного зразка. Ефективність способу ілюструє наступний приклад:
Приклад. Точність методу, що заявляється, визначали шляхом здійснення 80 паралельних аналізів зразків крові пацієнтів, які страждають на туберкульоз, в порівнянні з контрольною групою, яка складалась із 10 здорових осіб. Дослідження проводили двома методами: із застосуванням гемометру Салі та планшетного аналізатора ГІ аріїпе-80. Усереднені результати вимірювань наведені у табл.
Таблиця
Дані, які отримані за допомогою планшетного аналізатора мають значно меншу стандартну помилку, порівняно з даними, які визначались за методом Салі.
Таким чином, спосіб, що заявляється, здатний забезпечити достатню точність визначення вмісту гемоглобіну наряду з простотою виконання аналізу та повною відсутністю небезпечних реагентів.
Claims (1)
- ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб вимірювання концентрації гемоглобіну, який включає використання 0,1 М хлорводневої кислоти та дистильованої води, який відрізняється тим, що оптичну щільність зразків визначають у 96-лунковому біохімічному планшеті, де змішують 20 мкл крові та 50 мкл води дистильованої, очікують 10 хвилин, додають 20 мкл хлорводневої кислоти, вимірювання проводять на імуноферментному або біохімічному аналізаторі при довжині хвилі 520-560 нм з подальшим розрахунком концентрації гемоглобіну.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU201900215U UA134968U (uk) | 2019-01-08 | 2019-01-08 | Спосіб визначення концентрації гемоглобіну |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU201900215U UA134968U (uk) | 2019-01-08 | 2019-01-08 | Спосіб визначення концентрації гемоглобіну |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA134968U true UA134968U (uk) | 2019-06-10 |
Family
ID=74307134
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU201900215U UA134968U (uk) | 2019-01-08 | 2019-01-08 | Спосіб визначення концентрації гемоглобіну |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA134968U (uk) |
-
2019
- 2019-01-08 UA UAU201900215U patent/UA134968U/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rodkey et al. | Spectrophotometric measurement of carboxyhemoglobin and methemoglobin in blood. | |
| Trinder | A rapid method for the determination of sodium in serum | |
| Robertson et al. | Calcium measurements in serum and plasma—total and ionized | |
| JP3523878B2 (ja) | ヘモグロビンの定量用無シアン化物試薬及び方法 | |
| Hill | Automated fluorometric method for determination of serum calcium | |
| Mahoney et al. | Changes in oxygen measurements when whole blood is stored in iced plastic or glass syringes | |
| Kumar et al. | Basic concepts in clinical biochemistry: a practical guide | |
| KR20180016512A (ko) | 혈액 검사 키트 및 혈액 분석 방법 | |
| CN108700565A (zh) | 血液制备和图谱分析 | |
| CN106546729B (zh) | 一种去除干式免疫荧光定量法检测中血清基质效应的新工艺方法 | |
| WO2016081453A1 (en) | Lateral flow assay ratio test | |
| UA134968U (uk) | Спосіб визначення концентрації гемоглобіну | |
| Brundha et al. | Comparison of haemoglobin estimation by Sahli’s two-time average, Sahli’s threetime average methods and automated analyzer method: A different approach in clinical pathology | |
| Serdar et al. | Comparison of relationships between FT4 and log TSH in Access DXI 800 Unicel, Modular E170 and ADVIA Centaur XP Analyzer | |
| RU2300771C2 (ru) | Способ определения гемоглобина в биологических жидкостях | |
| JPS6118982B2 (uk) | ||
| JP2022540701A (ja) | 接線流溶血検出血液検査装置 | |
| CN116930105A (zh) | 样本分析仪和样本分析方法 | |
| RU2163019C2 (ru) | Способ качественно-количественного определения содержания белка в биологических растворах | |
| DIANA et al. | EVALUATION OF THE COLORIMETRIC CYANMETHEMOGLOBIN METHOD AND THE AUTOMATICAL HEMATOLOGY ANALYZER FOR HEMOGLOBIN ESTIMATION | |
| Kenny et al. | Rapid, Automated, Simultaneous Determination of Serum CO2 and Chloride with the" AutoAnalyzer I" | |
| RU2159442C1 (ru) | Набор реагентов для определения концентрации гемоглобина в крови | |
| RU2097762C1 (ru) | Набор реактивов для определения первичных ароматических аминов в растворах и биологических жидкостях | |
| Weissman et al. | Evaluation of the Corning 940 calcium titrator for use with serum and urine | |
| EYUBE | MOUNT GILEAD HOSPITAL BENIN CITY, EDO STATE |