TWI833696B - 含有咪唑之alk2激酶抑制劑 - Google Patents

含有咪唑之alk2激酶抑制劑 Download PDF

Info

Publication number
TWI833696B
TWI833696B TW107120504A TW107120504A TWI833696B TW I833696 B TWI833696 B TW I833696B TW 107120504 A TW107120504 A TW 107120504A TW 107120504 A TW107120504 A TW 107120504A TW I833696 B TWI833696 B TW I833696B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
compound
group
imidazol
mmol
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
TW107120504A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201904958A (zh
Inventor
普瑞凡 L 科頓
亞拉格達 S 巴布
Ｖ 沙提許 庫馬
張維河
鵬程 呂
克里斯南 瑞曼
Original Assignee
美商百歐克斯製藥公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商百歐克斯製藥公司 filed Critical 美商百歐克斯製藥公司
Publication of TW201904958A publication Critical patent/TW201904958A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI833696B publication Critical patent/TWI833696B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/88—Nitrogen atoms, e.g. allantoin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/16—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
    • C07D473/32—Nitrogen atom
    • C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/052—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being six-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

本文揭示式I、II、III及IV化合物及其醫藥學上可接受之鹽。所述化合物為ALK2激酶之抑制劑。亦提供包括式I、II、III或IV化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，及涉及使用所述化合物其醫藥學上可接受之鹽及組合物治療及預防各種疾病及病況，諸如進行性骨化性纖維發育不良的方法。

Description

含有咪唑之ALK2激酶抑制劑
四種人類骨形態生成蛋白(BMP)受體中之一者(ACVR1/ALK2)的激酶結構域內的單個突變(R206H)已與次級(異位)骨形成之嚴重病症相關聯。由於所述突變，所有呈現典型進行性骨化性纖維發育不良(FOP)特徵的兒童最終均出現次級異位骨骼，且他們的動作受次級異位骨骼阻擋。所述病症長期以來與軟組織(骨骼肌、肌腱、韌帶、筋膜)中之BMP信號傳導失調相關，所述軟組織經由軟骨內過程轉化為異位骨的帶狀、片狀及板狀。除了與典型形式之FOP相關的常見R206H突變之外，亦已在ACVR1/ALK2中鑑別出其他失調突變，導致非典型及變異形式之FOP。此外，已顯示基於抑制ALK2之能力有效調節BMP信號傳導的化合物亦抑制來自多個信號傳導途徑之激酶。
因此，仍需要抑制ALK2激酶之其他化合物，其將適用於各種重要的治療應用。
在某些態樣中，本發明提供一種式(I)或式(II)化合物： ； 或其醫藥學上可接受之鹽； 其中： A為視情況經取代之稠合芳環、雜芳環、部分不飽和環烷基環或部分不飽和雜環烷基環； W為C或N； Ra 表示H或烷基； R1 表示伸雜芳基； R1a 表示H或視情況經取代之-C(O)烷基、-C(O)O(烷基)、-C(O)(雜環基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(雜芳基)、-C(O)NRx Ry 、烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基； J表示H、鹵基、-OR2 、-NR2 R3 、-C(O)NR2 R3 、-C(O)O(烷基)、-C(O)OH、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2 表示視情況經取代之烷基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基； R3 表示H或烷基；或 R2 及R3 一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2a 在每次出現時獨立地表示鹵基、羥基、-C(O)H、側氧基、-NH2 、-C(O)NH2 、-C(O)OH、-C(O)R5 、-C(O)OR5 、-C(O)NH(R5 )，或視情況經取代之烷基、烷氧基、羥基烷基、雜芳基、芳基或-N(烷基)2 ； 或任何兩個偕位或鄰位出現之R2a 一起可形成螺環或稠合環烷基環； R5 在每次出現時獨立地表示視情況經取代之烷基、芳烷基、芳基、雜芳烷基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基或(雜環烷基)烷基；及 Rx 及Ry 各自獨立地表示H、烷基、芳烷基、雜芳烷基、芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基。
在其他態樣中，本發明提供一種式(III)或式(IV)化合物：或其醫藥學上可接受之鹽； 其中： A為視情況經取代之稠合芳環、雜芳環、部分不飽和環烷基環或部分不飽和雜環烷基環； W為C或N； B為CH或N； D為CH或N； 其限制條件為當B為CH時，則D為N；或當D為CH時，則B為N； Ra 表示H或烷基； R1 表示伸雜芳基； R1a 表示H或視情況經取代之-C(O)烷基、-C(O)芳基、-C(O)雜芳基、-C(O)O(烷基)、-C(O)(雜環基)、-C(O)NRx Ry 、烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基； J表示H、鹵基、-OR2 、-NR2 R3 、-C(O)NR2 R3 、-C(O)O(烷基)、-C(O)OH、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2 表示視情況經取代之烷基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基； R3 表示H或烷基；或 R2 及R3 一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2a 在每次出現時獨立地表示鹵基、羥基、-C(O)H、側氧基、-NH2 、-C(O)NH2 、-C(O)OH、-C(O)R5 、-C(O)OR5 、-C(O)NH(R5 )，或視情況經取代之烷基、烷氧基、羥基烷基、雜芳基、芳基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基或-N(烷基)2 ； 或任何兩個偕位或鄰位出現之R2a 一起可形成螺環或稠合環烷基環； R5 在每次出現時獨立地表示視情況經取代之烷基、芳烷基、芳基、雜芳烷基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基或(雜環烷基)烷基；及 Rx 及Ry 各自獨立地表示H、烷基、芳烷基、雜芳烷基、芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基。
在其他態樣中，本發明提供一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自由以下組成之群：。
在某些態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包括本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽；及醫藥學上可接受之賦形劑。
在某些態樣中，本發明提供抑制ALK2激酶之方法，其包括向有需要之個體投與有效量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明亦提供治療進行性骨化性纖維發育不良之方法，其包括向有需要之個體投與有效量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在其他態樣中，本發明提供治療癌症之方法，其包括向有需要之個體投與治療有效量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在某些實施例中，癌症為神經膠質瘤。
相關申請案 本申請案主張2017年6月15日提交之美國臨時專利申請案序號62/520,150的優先權。
本文提供式(I)、(II)、(III)及(IV)之化合物及其醫藥學上可接受之鹽，其可用於抑制ALK2激酶且可用於治療或預防將受益於抑制ALK2激酶之疾病或病況。舉例而言，所揭示之ALK2激酶抑制劑可用於適合用於治療癌症或進行性骨化性纖維發育不良之治療方法及組合物中。定義
冠詞「一(a及an)」在本文中用於指該冠詞之一個或多於一個(亦即至少一個)文法賓語。舉例而言，「一要素」意謂一個要素或多於一個要素。
術語「雜原子」為此項技術中公認的且係指除碳或氫以外之任何元素的原子。說明性雜原子包含硼、氮、氧、磷、硫及硒，或者氧、氮或硫。
如本文所用，術語「烷基」為技術術語且係指飽和脂族基團，包含直鏈烷基、分支鏈烷基、環烷基(脂環族)、經烷基取代之環烷基及經環烷基取代之烷基。在某些實施例中，直鏈或分支鏈烷基在其主鏈中具有約30個或更少碳原子(例如，對於直鏈C1 -C30 ，對於分支鏈C3 -C30 )，或者約20個或更少，或10個或更少。在某些實施例中，術語「烷基」係指C1 -C10 烷基。在某些實施例中，術語「烷基」係指C1 -C6 烷基，例如C1 -C6 直鏈烷基。在某些實施例中，術語「烷基」係指C3 -C12 分支鏈烷基。在某些實施例中，術語「烷基」係指C3 -C8 分支鏈烷基。烷基之代表性實例包含但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基及正己基。
術語「環烷基」意謂各自具有3至12個碳原子之單環或雙環或橋連飽和碳環。某些環烷基在其環結構中具有5-12個碳原子，且在環結構中可具有6-10個碳。較佳地，環烷基為(C3 -C7 )環烷基，其表示具有3至7個碳原子之單環飽和碳環。單環環烷基之實例包含環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環庚基及環辛基。雙環環烷基環系統包含橋連單環及稠合雙環。橋連單環含有單環環烷基環，其中單環之兩個非鄰接碳原子藉由具有一至三個額外碳原子之伸烷基橋鍵(亦即-(CH2 ) w -形式之橋聯基團，其中w 為1、2或3)連接。雙環系統之代表性實例包含但不限於雙環[3.1.1]庚烷、雙環[2.2.1]庚烷、雙環[2.2.2]辛烷、雙環[3.2.2]壬烷、雙環[3.3.1]壬烷及雙環[4.2.1]壬烷。稠合雙環環烷基環系統含有與苯基、單環環烷基、單環環烯基、單環雜環基或單環雜芳基稠合之單環環烷基環。橋連或稠合雙環環烷基經由單環環烷基環內所含之任何碳原子連接至母分子部分。環烷基視情況經取代。在某些實施例中，稠合雙環環烷基為與苯基環、5或6員單環環烷基、5或6員單環環烯基、5或6員單環雜環基或5或6員單環雜芳基稠合之5或6員單環環烷基環，其中稠合雙環環烷基視情況經取代。
如本文所用，術語「(環烷基)烷基」係指經一或多個環烷基取代之烷基。(環烷基)烷基之實例為環己基甲基。
如本文所用，術語「雜環烷基」係指非芳環系統之基團，包含但不限於單環、雙環及三環，其可完全飽和或其可含有一或多個不飽和單元，為避免疑問，不飽和度不會產生芳環系統，且具有3至12個原子，包含至少一個雜原子，諸如氮、氧或硫。出於例證說明之目的，其不應視為限制本發明之範疇，以下為雜環之實例：氮雜環丙烷基、氮雜環丙烯基、氧雜環丙烷基、硫雜環丙烷基、硫雜環丙烯基、二氧雜環丙烷基、二氮雜環丙烯基、二氮雜環庚烷基、1,3-二噁烷基、1,3-二氧雜環戊烷基、1,3-二硫雜環戊烷基、1,3-二噻烷基、咪唑啶基、異噻唑啉基、異噻唑啶基、異噁唑啉基、異噁唑啶基、氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、氧雜環丁稀基、硫雜環丁烷基、硫雜環丁烯基、二氮雜環丁烷基、二氧雜環丁烷基、二氧雜環丁烯基、二硫雜環丁烷基、二硫雜環丁烯基、二氧雜環戊烷基、噁唑基、噻唑基、三嗪基、異噻唑基、異噁唑基、氮呯、氮雜環丁烷基、嗎啉基、噁二唑啉基、噁二唑啶基、噁唑啉基、噁唑啶基、側氧基哌啶基、側氧基吡咯啶基、哌嗪基、哌啶基、哌喃基、吡唑啉基、吡唑啶基、吡咯啉基、吡咯啶基、奎寧環基、硫代嗎啉基、四氫哌喃基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、噻二唑啉基、噻二唑啶基、噻唑啉基、噻唑啶基、硫代嗎啉基、1,1-二氧離子基硫代嗎啉基(硫代嗎啉碸)、硫代哌喃基及三噻烷基。雜環烷基視情況經一或多個如下所述之取代基取代。
如本文所用，術語「(雜環烷基)烷基」係指經一或多個雜環烷基(亦即雜環基)取代之烷基。
如本文所用，術語「烯基」意謂含有2至10個碳且含有至少一個藉由移除兩個氫形成之碳碳雙鍵的直鏈或分支鏈烴基。烯基之代表性實例包含但不限於乙烯基、2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、3-丁烯基、4-戊烯基、5-己烯基、2-庚烯基、2-甲基-1-庚烯基及3-癸烯基。烯基之不飽和鍵可位於部分中之任何位置且可具有圍繞雙鍵之(Z)或(E)構型。
如本文所用，術語「炔基」意謂含有2至10個碳原子且含有至少一個碳碳參鍵的直鏈或分支鏈烴基。炔基之代表性實例包含但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、3-丁炔基、2-戊炔基及1-丁炔基。
術語「伸烷基」為此項技術中公認的且如本文所用，係關於藉由移除如上文所定義之烷基的兩個氫原子獲得的二基。在一個實施例中，伸烷基係指經二取代之烷烴，亦即在兩個位置經諸如以下之取代基取代之烷烴：鹵素、疊氮基、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環烷基、羥基、烷氧基、胺基、硝基、巰基、亞胺基、醯胺基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、矽烷基、醚基、烷硫基、磺醯基、磺醯胺基、酮基、醛基、酯基、雜環基、芳族或雜芳族部分、氟烷基(諸如三氟甲基)、氰基或其類似基團。亦即，在一個實施例中，「經取代之烷基」為「伸烷基」。
術語「胺基」為技術術語且如本文所用係指未經取代之及經取代之胺，例如可由以下通式表示之部分：， 其中Ra 、Rb 及Rc 各自獨立地表示氫、烷基、烯基、-(CH2 )x -Rd ，或Ra 及Rb 與其所連接之N原子一起完成在環結構中具有4至8個原子之雜環；Rd 表示芳基、環烷基、環烯基、雜環基或聚環基；且x為零或1至8範圍內之整數。在某些實施例中，Ra 或Rb 中僅一者可為羰基，例如Ra 、Rb 及氮一起不形成醯亞胺。在其他實施例中，Ra 及Rb (及視情況存在之Rc )各自獨立地表示氫、烷基、烯基或-(CH2 )x -Rd 。在某些實施例中，術語「胺基」係指-NH2 。
在某些實施例中，術語「烷基胺基」係指-NH(烷基)。
在某些實施例中，術語「二烷基胺基」係指-N(烷基)2 。
如本文所用，術語「醯胺基」意謂-NHC(=O)-，其中醯胺基經由氮鍵結至母分子部分。醯胺基之實例包含烷基醯胺基，諸如CH3 C(=O)N(H)-及CH3 CH2 C(=O)N(H)-。
術語「醯基」為技術術語且如本文所用係指RCO-形式之任何基團，其中R為任何有機基團，例如烷基、芳基、雜芳基、芳烷基及雜芳烷基。代表性醯基包含乙醯基、苯甲醯基及丙二醯基。
如本文所用，術語「胺基烷基」係指經一或多個胺基取代之烷基。在一個實施例中，術語「胺基烷基」係指胺基甲基。
術語「胺基醯基」為技術術語且如本文所用係指經一或多個胺基取代之醯基。
如本文所用，術語「胺基亞硫醯基」係指胺基醯基之類似物，其中RC(O)-之O已經硫置換，因此具有形式RC(S)-。
術語「磷醯基」為技術術語且如本文所用一般可由下式表示：其中Q50表示S或O，且R59表示氫、低碳烷基或芳基；例如-P(O)(OMe)-或-P(O)(OH)2 。當用於取代例如烷基時，磷醯基烷基之磷醯基可由以下通式表示：其中Q50及R59各自獨立地為上文所定義，且Q51表示O、S或N；例如-O-P(O)(OH)OMe或-NH-P(O)(OH)2 。當Q50為S時，磷醯基部分為「硫代磷酸酯基」。
如本文所用，術語「胺基磷醯基」係指經至少一個如本文所定義之胺基取代之磷醯基；例如-P(O)(OH)NMe2 。
如本文所用，術語「疊氮基(azide/azido)」意謂-N3 基團。
如本文所用，術語「羰基」係指-C(=O)-。
如本文所用，術語「硫羰基」係指-C(=S)-。
如本文所用，術語「烷基磷醯基」係指經至少一個如本文所定義之烷基取代之磷醯基；例如-P(O)(OH)Me。
如本文所用，術語「烷硫基」係指烷基-S-。術語「(烷硫基)烷基」係指經烷硫基取代之烷基。
如本文所用，術語「羧基」意謂-CO2 H基團。
術語「芳基」為技術術語且如本文所用係指包含單環、雙環及多環芳族烴基，例如苯、萘、蒽及芘。通常，芳基含有6-10個碳環原子(亦即(C6 -C10 )芳基)。芳環可在一或多個環位置處經一或多個諸如以下之取代基取代：鹵素、疊氮基、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環烷基、羥基、烷氧基、胺基、硝基、巰基、亞胺基、醯胺基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、矽烷基、醚基、烷硫基、磺醯基、磺醯胺基、酮基、醛基、酯基、雜環基、芳族或雜芳族部分、氟烷基(諸如三氟甲基)、氰基或其類似基團。術語「芳基」亦包含具有兩個或更多個環之多環系統，其中兩個或更多個碳為兩個鄰接環所共有(所述環為「稠合環」)，其中所述環中之至少一者為芳族烴，例如其他環可為環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜芳基及/或雜環基。在某些實施例中，術語「芳基」係指苯基。
術語「伸芳基」意謂藉由移除如上文所定義之芳基的兩個氫原子而獲得的二基。在某些實施例中，伸芳基係指經二取代之芳烴，亦即在兩個位置處經諸如以下之取代基取代的芳烴：鹵素、疊氮基、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環烷基、羥基、烷氧基、胺基、硝基、巰基、亞胺基、醯胺基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、矽烷基、醚基、烷硫基、磺醯基、磺醯胺基、酮基、醛基、酯基、雜環基、芳族或雜芳族部分、氟烷基(諸如三氟甲基)、氰基或其類似基團。亦即，在某些實施例中，「經取代之芳基」為「伸芳基」。
術語「雜芳基」為技術術語且如本文所用係指在環結構中總共具有3至12個原子的單環、雙環及多環芳族基團，其中包含一或多個諸如氮、氧或硫之雜原子。例示性雜芳基包含氮雜吲哚基、苯并(b)噻吩基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并噁二唑基、呋喃基、咪唑基、咪唑并吡啶基、吲哚基、吲哚啉基、吲唑基、異吲哚啉基、異噁唑基、異噻唑基、異喹啉基、噁二唑基、噁唑基、嘌呤基、哌喃基、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、吡唑并[3,4-d]嘧啶基、喹啉基、喹唑啉基、三唑基、噻唑基、噻吩基、四氫吲哚基、四唑基、噻二唑基、噻吩基、硫代嗎啉基、三唑基或莨菪烷基及其類似基團。「雜芳基」可在一或多個環位置處經一或多個諸如以下之取代基取代：鹵素、疊氮基、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環烷基、羥基、烷氧基、胺基、硝基、巰基、亞胺基、醯胺基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、矽烷基、醚基、烷硫基、磺醯基、磺醯胺基、酮基、醛基、酯基、雜環基、芳族或雜芳族部分、氟烷基(諸如三氟甲基)、氰基或其類似基團。術語「雜芳基」亦包含具有兩個或更多個環之多環系統，其中兩個或更多個碳為兩個鄰接環所共有(所述環為「稠合環」)，其中所述環中之至少一者為在環結構中具有一或多個雜原子之芳族基，例如其他環可為環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜芳基及/或雜環基。
術語「伸雜芳基」意謂藉由移除如上文所定義之雜芳基的兩個氫原子而獲得的二基。在某些實施例中，伸雜芳基係指經二取代之雜芳烴，亦即在兩個位置處經諸如以下之取代基取代之雜芳烴：鹵素、疊氮基、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環烷基、羥基、烷氧基、胺基、硝基、巰基、亞胺基、醯胺基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、矽烷基、醚基、烷硫基、磺醯基、磺醯胺基、酮基、醛基、酯基、雜環基、芳族或雜芳族部分、氟烷基(諸如三氟甲基)、氰基或其類似基團。亦即，在某些實施例中，「經取代之雜芳基」為「伸雜芳基」。
術語「芳烷基」或「芳基烷基」為技術術語且如本文所用係指經芳基取代之烷基，其中所述部分經由烷基附接於母分子。
術語「雜芳烷基」或「雜芳基烷基」為技術術語且如本文所用係指經雜芳基取代之烷基，其經由烷基附接於母分子部分。
如本文所用，術語「烷氧基」意謂經由氧原子附接於母分子部分的如本文所定義之烷基。烷氧基之代表性實例包含但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、第三丁氧基、戊氧基及己氧基。
術語「烷氧基烷基」係指經烷氧基取代之烷基。
術語「烷氧基羰基」意謂經由如本文所定義之由-C(=O)-表示之羰基附接於母分子部分的如本文所定義之烷氧基。烷氧基羰基之代表性實例包含但不限於甲氧基羰基、乙氧基羰基及第三丁氧基羰基。
如本文所用，術語「烷基羰基」意謂經由如本文所定義之羰基附接於母分子部分的如本文所定義之烷基。烷基羰基之代表性實例包含但不限於乙醯基、1-側氧基丙基、2,2-二甲基-1-側氧基丙基、1-側氧基丁基及1-側氧基戊基。
如本文所用，術語「芳基羰基」意謂經由如本文所定義之羰基附接於母分子部分的如本文所定義之芳基。芳基羰基之代表性實例包含但不限於苯甲醯基及(2-吡啶基)羰基。
如本文所用，術語「烷基羰氧基」及「芳基羰氧基」意謂經由氧原子附接於母分子部分的如本文所定義之烷基羰基或芳基羰基。烷基羰氧基之代表性實例包含但不限於乙醯氧基、乙基羰氧基及第三丁基羰氧基。芳基羰氧基之代表性實例包含但不限於苯基羰氧基。
術語「烯氧基(alkenoxy或alkenoxyl)」意謂經由氧原子附接於母分子部分的如本文所定義之烯基。烯氧基之代表性實例包含但不限於2-丙烯-1-氧基(亦即CH2 =CH-CH2 -O-)及乙烯基氧基(亦即CH2 =CH-O-)。
如本文所用，術語「芳氧基」意謂經由氧原子附接於母分子部分的如本文所定義之芳基。
如本文所用，術語「雜芳氧基」意謂經由氧原子附接於母分子部分的如本文所定義之雜芳基。
如本文所用，術語「碳環基」意謂含有3至12個碳原子之單環或多環(例如雙環、三環等)烴基，其完全飽和或具有一或多個不飽和鍵，且為避免疑問，不飽和度不會產生芳環系統(例如苯基)。碳環基之實例包含1-環丙基、1-環丁基、2-環戊基、1-環戊烯基、3-環己基、1-環己烯基及2-環戊烯基甲基。
術語「氰基」為技術術語且如本文所用係指-CN。
術語「鹵基」為技術術語且如本文所用係指-F、-Cl、-Br或-I。
如本文所用，術語「鹵烷基」係指一些或全部氫經鹵素原子置換的如本文所定義之烷基。
術語「羥基」為技術術語且如本文所用係指-OH。
如本文所用，術語「羥基烷基」意謂經由如本文所定義之烷基附接於母分子部分的至少一個如本文所定義之羥基。羥基烷基之代表性實例包含但不限於羥甲基、2-羥乙基、3-羥丙基、2,3-二羥戊基及2-乙基-4-羥庚基。
如本文所用，術語「矽烷基」包含矽烷基(H3 Si-)之烴基衍生物(亦即(烴基)3 Si-)，其中烴基為藉由自烴移除氫原子形成的單價基團，例如乙基、苯基。烴基可為不同基團之組合，其可變化以提供許多矽烷基，諸如三甲基矽烷基(TMS)、第三丁基二苯基矽烷基(TBDPS)、第三丁基二甲基矽烷基(TBS/TBDMS)、三異丙基矽烷基(TIPS)及[2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基(SEM)。
如本文所用，術語「矽烷氧基」意謂經由氧原子附接於母分子的如本文所定義之矽烷基。
本發明之組合物中所含之某些化合物可以特定幾何或立體異構形式存在。另外，本發明化合物亦可為光學活性的。本發明涵蓋屬於本發明範疇內之所有此類化合物，包含順式及反式異構體、(R )-及(S )-對映異構體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體、其外消旋混合物及其其他混合物。額外不對稱碳原子可存在於諸如烷基之取代基中。所有此類異構體以及其混合物意欲包含於本發明中。
舉例而言，若需要本發明化合物之特定對映異構體，則其可藉由不對稱合成或藉由用對掌性助劑衍生來製備，其中所得非對映異構性混合物經分離且輔助基團裂解以提供純的所需對映異構體。或者，在分子含有鹼性官能基(諸如胺基)或酸性官能基(諸如羧基)之情況下，用適當的光學活性酸或鹼形成非對映異構性鹽，接著藉由此項技術中熟知的分步結晶或層析手段解析由此形成的非對映異構體，且隨後回收純對映異構體。
應理解，「取代」或「經取代」包含隱含的限制條件，亦即此類取代與經取代之原子及取代基的允許價數相符，且取代產生穩定的化合物，例如其不會自發地經歷諸如藉由重排、斷裂、分解、環化、消除或其他反應之轉化。
亦預期術語「經取代」包含有機化合物之所有可容許的取代基。在一廣泛態樣中，可容許的取代基包含有機化合物的非環狀及環狀、分支鏈及未分支、碳環及雜環、芳族及非芳族取代基。說明性取代基包含例如上文所描述之彼等取代基。對於適當有機化合物，可容許的取代基可為一或多個且相同或不同。出於本發明之目的，諸如氮之雜原子可具有氫取代基及/或本文所述之滿足雜原子價數之有機化合物的任何可容許的取代基 本發明不意欲以任何方式受有機化合物之可容許的取代基限制。
在某些實施例中，視情況選用之取代基可包含例如鹵素、鹵烷基、羥基、羰基(諸如羧基、烷氧基羰基、甲醯基或醯基)、硫羰基(諸如硫酯基、硫乙酸酯基或硫甲酸酯基)、烷氧基、烯氧基、炔氧基、磷醯基、磷酸酯基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、胺基(包含烷基胺基及二烷基胺基)、醯胺基、脒基、亞胺基、氰基、硝基、疊氮基、巰基、烷硫基、硫酸酯基、磺酸酯基、胺磺醯基、磺醯胺基、磺醯基、矽烷基、矽烷氧基、雜環烷基、環烷基、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
如本文所用，片語「保護基」意謂保護潛在反應性官能基免受不希望的化學轉化的臨時取代基。此類保護基之實例包含羧酸之酯、醇之矽烷基醚以及醛及酮分別之縮醛及縮酮。已綜述保護基之化學領域(Greene, T.W.; Wuts, P.G.M. 《有機合成保護基(Protective Groups in Organic Synthesis )》, 第2版; Wiley: New York, 1991)。本發明化合物之受保護形式包含於本發明之範疇內。
出於本發明之目的，根據元素週期表，CAS版，《化學及物理手冊(Handbook of Chemistry and Physics)》，第67版，1986-87內封鑑別化學元素。
本文之其他化學術語係根據此項技術中之習知用法來使用，如《麥格勞-希爾化學術語詞典(The McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms)》 (Parker, S.編, 1985), McGraw-Hill, San Francisco, 以引用的方式併入本文中)所例示。除非另外規定，否則本文中所用之所有技術及科學術語具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所理解相同之含義。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」包含衍生自無機或有機酸之鹽，所述無機或有機酸包含例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、磷酸、甲酸、乙酸、乳酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、丁二酸、酒石酸、乙醇酸、柳酸、檸檬酸、甲磺酸、苯磺酸、苯甲酸、丙二酸、三氟乙酸、三氯乙酸、萘-2-磺酸及其他酸。醫藥學上可接受之鹽形式可包含構成鹽之分子比率不為1:1的形式。舉例而言，鹽可包括每分子鹼多於一個無機或有機酸分子，諸如每分子式I、II、III或IV化合物兩個鹽酸分子。作為另一個實例，鹽可包括每分子鹼少於一個無機或有機酸分子，諸如每分子酒石酸兩個式I、II、III或IV化合物分子。
如本文所用，術語「載劑」及「醫藥學上可接受之載劑」係指與化合物一起投與或調配用於投與之稀釋劑、佐劑、賦形劑或媒劑。此類醫藥學上可接受之載劑的非限制性實例包含液體，諸如水、鹽水及油；及固體，諸如阿拉伯膠(gum acacia)、明膠、澱粉糊、滑石、角蛋白、膠態二氧化矽、尿素及其類似物。另外，可使用助劑、穩定劑、增稠劑、潤滑劑、調味劑及著色劑。適合之醫藥載劑的其他實例描述於E.W. Martin的《雷明頓醫藥科學(Remington ' s Pharmaceutical Sciences )》中，其以全文引用之方式併入本文中。
如本文所用，術語「治療」意謂預防、中斷或減緩個體之疾病或病況進展，或消除所述疾病或病況。在一個實施例中，「治療」意謂中斷或減緩個體之疾病或病況進展或消除所述疾病或病況。在一個實施例中，「治療」意謂減輕個體中疾病或病況的至少一個客觀表現。
如本文所用，術語「有效量」係指足以產生期望的生物效應之量。
如本文所用，術語「治療有效量」係指足以產生期望的治療效果之量。
如本文所用，術語「抑制」意謂降低可客觀量測之量或程度。在各種實施例中，「抑制」意謂與相關對照相比降低至少5、10、20、30、40、50、60、70、80、90或95%。在一個實施例中，「抑制」意謂降低100%，亦即中斷或消除。
如本文所用，術語「個體」係指哺乳動物。在各種實施例中，個體為小鼠、大鼠、兔、貓、犬、豬、綿羊、馬、牛或非人類靈長類動物。在一個實施例中，個體為人類。化合物
本發明提供式(I)或(II)化合物：； 或其醫藥學上可接受之鹽； 其中： A為視情況經取代之稠合芳環、雜芳環、部分不飽和環烷基環或部分不飽和雜環烷基環； W為C或N； Ra 表示H或烷基； R1 表示伸雜芳基； R1a 表示H或視情況經取代之-C(O)烷基、-C(O)芳基、-C(O)雜芳基、-C(O)O(烷基)、-C(O)(雜環基)、-C(O)NRx Ry 、烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基； J表示H、鹵基、-OR2 、-NR2 R3 、-C(O)NR2 R3 、-C(O)O(烷基)、-C(O)OH、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2 表示視情況經取代之烷基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基； R3 表示H或烷基；或 R2 及R3 一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2a 在每次出現時獨立地表示鹵基、羥基、-C(O)H、側氧基、-NH2 、-C(O)NH2 、-C(O)OH、-C(O)R5 、-C(O)OR5 、-C(O)NH(R5 )，或視情況經取代之烷基、烷氧基、羥基烷基、雜芳基、芳基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基或-N(烷基)2 ； 或任何兩個偕位或鄰位出現之R2a 一起可形成螺環或稠合環烷基環； R5 在每次出現時獨立地表示視情況經取代之烷基、芳烷基、芳基、雜芳烷基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基或(雜環烷基)烷基；及 Rx 及Ry 各自獨立地表示H、烷基、芳烷基、雜芳烷基、芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Ia)或式(IIa)表示：； 其中： 在價數允許的情況下，Q、T、U及V各自獨立地表示CH、CH2 、N、NH、O或SO2 ，其中CH、CH2 或NH基團之任何氫視情況經出現之R4 置換； R4 在每次出現時獨立地表示鹵基、氰基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、-CH2 C(O)NH2 、-C(O)R5 、-C(O)OR5 或-S(O)2 R5 ； 如價數允許，m為0-4之整數。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Ib)或式(IIb)表示：； 其中Q表示CH或N；且V表示CH或N。在某些實施例中，Q為N且V為CH。在替代性實施例中，Q為CH且V為N。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Ic)或式(IIc)表示：。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Id)或式(IId)表示： ； 其中T表示CH2 、NH、O或SO2 ；且U表示CH2 、NH、O或SO2 。在某些實施例中，T為NH；且U為CH2 。在其他實施例中，T為CH2 且U為NH。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Ie)或式(IIe)表示：。 在式(Ia)、(IIa)、(Ib)、(IIb)、(Ic)、(IIc)、(Id)、(IId)、(Ie)及(IIe)中之任一者中，在某些實施例中，m為0或1。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Ij)或(IIj)表示：； 其中： W為C或N； 在價數允許的情況下，X、Y及Z各自獨立地表示CH、CH2 、CO、N、NH、O、S或SO2 ，其中CH、CH2 或NH基團之任何氫視情況經出現之R4 置換； R4 在每次出現時獨立地表示氰基、鹵基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、-CH2 C(O)NH2 、-C(O)R5 、-C(O)OR5 或-S(O)2 R5 ； 如價數允許，n為0-4之整數。
在某些實施例中，R4 在每次出現時獨立地表示鹵基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、-CH2 C(O)NH2 、-C(O)R5 、-C(O)OR5 或-S(O)2 R5 。
在某些實施例中，R4 在每次出現時獨立地表示鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基或雜芳基烷氧基。
在某些實施例中，X、Y或Z中之一者為NR4 。
在某些此類實施例中，R4 係選自由以下組成之群：。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Ik)或(IIk)表示：； 其中X、Y及Z各自獨立地表示CH、N、NH、O、S或SO2 。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Ik')或(IIk')表示：。
或者，在某些實施例中，本發明化合物由式(Ik'')或(IIk'')表示：； 其中X及Z中之至少一者係選自由O、N、NH及S組成之群。
在式(Ik'')及(IIk'')化合物之某些實施例中，X及Z中之一者係選自由O、NH及S組成之群；且X及Z中之另一者為CH。舉例而言，X可選自由O、NH及S組成之群。或者，Z可選自由O、NH及S組成之群。
在式(Ik'')及(IIk'')化合物之其他實施例中，X及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群。舉例而言，X及Z中之一者可為N且X及Z中之另一者可為NH。
在某些實施例中，本發明化合物由式(In)或(IIn)表示：其中Y及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群。
在某些此類實施例中，Y為N且Z為NH。
在某些實施例中，本發明化合物由式(Im)或(IIm)表示：； 其中X、Y及Z各自獨立地表示CH2 、CO、NH、O、S或SO2 。
在式(Im)或(IIm)化合物之某些實施例中，X、Y及Z中之每一者為CH2 。在替代性實施例中，X、Y及Z中之一者為N或O。
在式(Ij)、(IIj)、(Ik)、(IIk)、(Ik')、(IIk')、(Ik'')、(IIk'')、(Im)及(IIm)中之任一者中，在某些實施例中，n為0或1。
在以上實施例中之任一者中，R4 若存在，可選自由視情況經取代之烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基及(雜環烷基)烷基組成之群。
在以上實施例中之任一者中，Ra 可為H。
在某些實施例中，R1 為含氮伸雜芳基，諸如5員含氮伸雜芳基。在某些實施例中，R1 為伸咪唑。
在某些實施例中，-R1 -R1a 表示。
在某些實施例中，R1a 為H。
或者，R1a 可為視情況經取代之苯基。具體而言，R1a 可為苯基，其經一或多次出現的鹵基、羥基、氰基、-C(O)NH2 、羥基烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、環烷基、-C(O)烷基、-C(O)O-烷基、雜環烷基、-C(O)NH(烷基)、-C(O)N(烷基)2 、-C(O)雜環烷基、-C(O)(脯胺醇)、-C(O)NH((環烷基)烷基)或-C(O)NH(環烷基)取代。在某些實施例中，R1a 為苯基，其經兩次或更多次出現的烷氧基取代。較佳地，R1a 為3,4,5-三甲氧基苯基。
在某些實施例中，R1a 為經取代之苯基，其中苯基上之兩個相鄰取代基與插入原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基環。舉例而言，R1a 可為苯基，其中兩個相鄰取代基形成視情況經取代之稠合雜環，諸如1,4-二噁烷或1,3-二氧戊環。
在某些實施例中，R1a 為視情況經取代之雜芳基，諸如喹啉。
在某些實施例中，J為芳基，其視情況經一或多次出現的R2a 取代。
在替代性實施例中，J為-NR2 R3 。
在某些此類實施例中，R2 及R3 一起形成雜環烷基環，例如吡咯啶環，其視情況經一或多次出現的R2a 取代。
在某些此類實施例中，R2a 在每次出現時可獨立地表示-C(O)NH2 、-C(O)R5 、羥基烷基、雜芳基或芳基；較佳為-C(O)NH2 或羥基烷基。
在某些實施例中，A表示視情況經取代之稠合環烷基環，諸如視情況經取代之環己烷或環庚烷環。
在某些實施例中，A表示視情況經取代之稠合雜環烷基環，諸如視情況經取代之四氫呋喃或吡咯啶環。
在某些實施例中，本發明化合物係選自由下表中所描繪之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組成之群：
在其他態樣中，本發明提供由式(III)或式(IV)表示之化合物：或其醫藥學上可接受之鹽； 其中： A為視情況經取代之稠合芳環、雜芳環、部分不飽和環烷基環或部分不飽和雜環烷基環； W為C或N； B為CH或N； D為CH或N； 其限制條件為當B為CH時，則D為N；或當D為CH時，則B為N； Ra 表示H或烷基； R1 表示伸雜芳基； R1a 表示H或視情況經取代之-C(O)烷基、-C(O)芳基、-C(O)雜芳基、-C(O)O(烷基)、-C(O)(雜環基)、-C(O)NRx Ry 、烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基； J表示H、鹵基、-OR2 、-NR2 R3 、-C(O)NR2 R3 、-C(O)O(烷基)、-C(O)OH、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2 表示視情況經取代之烷基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基； R3 表示H或烷基；或 R2 及R3 一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a 取代； R2a 在每次出現時獨立地表示鹵基、羥基、-C(O)H、側氧基、-NH2 、-C(O)NH2 、-C(O)OH、-C(O)R5 、-C(O)OR5 、-C(O)NH(R5 )，或視情況經取代之烷基、烷氧基、羥基烷基、雜芳基、芳基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基或-N(烷基)2 ； 或任何兩個偕位或鄰位出現之R2a 一起可形成螺環或稠合環烷基環； R5 在每次出現時獨立地表示視情況經取代之烷基、芳烷基、芳基、雜芳烷基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基或(雜環烷基)烷基；及 Rx 及Ry 各自獨立地表示H、烷基、芳烷基、雜芳烷基、芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基。
在某些實施例中，化合物由式(IIIa)或式(IVa)表示：； 其中： 在價數允許的情況下，Q、T、U及V各自獨立地表示CH、CH2 、N、NH、O或SO2 ，其中CH、CH2 或NH基團之任何氫視情況經出現之R4 置換； R4 在每次出現時獨立地表示鹵基、氰基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、-CH2 C(O)NH2 、-C(O)R5 、-C(O)OR5 或-S(O)2 R5 ； 如價數允許，m為0-4之整數。
在某些實施例中，化合物由式(IIIb)或式(IVb)表示： ； 其中Q表示CH或N；且V表示CH或N。在某些實施例中，Q為N且V為CH。在替代性實施例中，Q為CH且V為N。
在某些實施例中，化合物由式(IIIc)或式(IVc)表示：。
在某些實施例中，化合物由式(IIId)或式(IVd)表示：； 其中T表示CH2 、NH、O或SO2 ；且U表示CH2 、NH、O或SO2 。在某些實施例中，T為NH；且U為CH2 。在其他實施例中，T為CH2 且U為NH。
在某些實施例中，化合物由式(IIIe)或式(IVe)表示：。
在式(IIIa)、(IVa)、(IIIb)、(IVb)、(IIIc)、(IVc)、(IIId)、(IVd)、(IIIe)及(IVe)中之任一者中，在某些實施例中，m為0或1。
在某些實施例中，化合物由式(IIIj)或式(IVj)表示：； 其中： W為C或N； 在價數允許的情況下，X、Y及Z各自獨立地表示CH、CH2 、CO、N、NH、O、S或SO2 ，其中CH、CH2 或NH基團之任何氫視情況經出現之R4 置換； R4 在每次出現時獨立地表示鹵基、氰基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、-CH2 C(O)NH2 、-C(O)R5 、-C(O)OR5 或-S(O)2 R5 ； 如價數允許，n為0-4之整數。
在某些實施例中，R4 在每次出現時獨立地表示鹵基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、-CH2 C(O)NH2 、-C(O)R5 、-C(O)OR5 或-S(O)2 R5 。
在某些實施例中，R4 在每次出現時獨立地表示鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基或雜芳基烷氧基。
在某些實施例中，X、Y或Z中之一者為NR4 。
在某些此類實施例中，R4 係選自由以下組成之群：。
在某些實施例中，化合物由式(IIIk)或(IVk)表示：； 其中X、Y及Z各自獨立地表示CH、N、NH、O、S或SO2 。
在其他實施例中，化合物由式(IIIk')或(IVk')表示：。
在某些實施例中，化合物由式(IIIk'')或(IVk'')表示：； 其中X及Z中之至少一者係選自由O、N、NH及S組成之群。
在式(IIIk'')及(IVk'')化合物之某些實施例中，X及Z中之一者係選自由O、NH及S組成之群；且X及Z中之另一者為CH。舉例而言，X可選自由O、NH及S組成之群。或者，Z可選自由O、NH及S組成之群。
在式(IIIk'')及(IVk'')化合物之其他實施例中，X及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群。舉例而言，X及Z中之一者為N且X及Z中之另一者為NH。
在某些實施例中，本發明化合物由表示，其中所述化合物由式(IIIn)或(IVn)表示：其中Y及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群。
在某些實施例中，Y為N且Z為NH。
在某些實施例中，本發明化合物由式(IIIm)或(IVm)表示： ； 其中X、Y及Z各自獨立地表示CH2 、CO、NH、O、S或SO2 。
在式(IIIm)或(IVm)化合物之某些實施例中，X、Y及Z中之每一者為CH2 。在替代性實施例中，X、Y及Z中之一者為N或O。
在式(IIIj)、(IVj)、(IIIk)、(IVk)、(IIIk')、(IVk')、(IIIk'')、(IVk'')、(IIIm)及(IVm)中之任一者中，在某些實施例中，n為0或1。
在以上實施例中之任一者中，R4 若存在，可選自由視情況經取代之烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基及(雜環烷基)烷基組成之群。
在以上實施例中之任一者中，Ra 可為H。
在某些實施例中，R1 為含氮伸雜芳基，諸如5員含氮伸雜芳基。在某些實施例中，R1 為伸咪唑。
在某些實施例中，-R1 -R1a 表示。
在某些實施例中，R1a 為H。
或者，R1a 可為視情況經取代之苯基。具體而言，R1a 可為苯基，其經一或多次出現的鹵基、羥基、氰基、-C(O)NH2 、羥基烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、環烷基、-C(O)烷基、-C(O)O-烷基、雜環烷基、-C(O)NH(烷基)、-C(O)N(烷基)2 、-C(O)雜環烷基、-C(O)(脯胺醇)、-C(O)NH((環烷基)烷基)或-C(O)NH(環烷基)取代。在某些實施例中，R1a 為苯基，其經兩次或更多次出現的烷氧基取代。較佳地，R1a 為3,4,5-三甲氧基苯基。
在某些實施例中，R1a 為經取代之苯基，其中苯基上之兩個相鄰取代基與插入原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基環。舉例而言，R1a 可為苯基，其中兩個相鄰取代基形成視情況經取代之稠合雜環，諸如1,4-二噁烷或1,3-二氧戊環。
在某些實施例中，R1a 為視情況經取代之雜芳基，諸如喹啉。
在某些實施例中，J為芳基，其視情況經一或多次出現的R2a 取代。
在替代性實施例中，J為-NR2 R3 。
在某些此類實施例中，R2 及R3 一起形成雜環烷基環，例如吡咯啶環，其視情況經一或多次出現的R2a 取代。
在某些此類實施例中，R2a 在每次出現時可獨立地表示-C(O)NH2 、-C(O)R5 、羥基烷基、雜芳基或芳基；較佳為-C(O)NH2 或羥基烷基。
在某些實施例中，本發明化合物係選自由下表中所描繪之化合物組成之群： 醫藥組合物
本發明提供醫藥組合物，其各自包括一或多種本發明化合物其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。在某些實施例中，醫藥組合物包括本發明化合物及醫藥學上可接受之載劑。在某些實施例中，醫藥組合物包括複數種本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。
在某些實施例中，本發明之醫藥組合物進一步包括至少一種除本發明化合物以外的額外醫藥活性劑。至少一種額外醫藥活性劑可為可用於治療將藉由抑制ALK2激酶而受益之疾病或病況的藥劑。
本發明之醫藥組合物可藉由將一或多種本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽與醫藥學上可接受之載劑及視情況選用之一或多種額外醫藥活性劑組合來製備。使用方法
本發明提供可用於治療或預防其治療將受益於ALK2激酶抑制之疾病或病況的化合物及其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，本發明提供抑制ALK2激酶之方法，其包括向有需要之個體投與有效量之本發明化合物(例如式(I)、(II)、(III)或(IV)化合物)或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，本發明提供用作藥劑之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在某些態樣中，本發明提供治療進行性骨化性纖維發育不良之方法，其包括向有需要之個體投與治療有效量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽的步驟。
本發明亦提供一種治療癌症之方法，其包括向有需要之個體投與治療有效量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽的步驟。
在某些實施例中，癌症包括中樞神經系統腫瘤、乳癌、前列腺癌、皮膚癌(包含基底細胞癌、鱗狀細胞癌及黑素瘤)、子宮頸癌、子宮癌、肺癌、卵巢癌、睪丸癌、甲狀腺癌、星形細胞瘤、神經膠質瘤、胰臟癌、胃癌、肝癌、結腸癌、腎癌、膀胱癌、食道癌、喉癌、腮腺癌、膽道癌、直腸癌、子宮內膜癌、腺癌、小細胞癌、神經母細胞瘤、間皮瘤、腎上腺皮質癌、上皮癌、硬纖維瘤、促結締組織增生性小圓細胞瘤、內分泌腫瘤、尤文氏肉瘤家族腫瘤、生殖細胞腫瘤、肝胚細胞瘤、肝細胞癌、非橫紋肌肉瘤、軟組織肉瘤、骨肉瘤、外周原始神經外胚層腫瘤、視網膜胚細胞瘤、橫紋肌肉瘤及威爾姆氏瘤。
在某些實施例中，癌症為神經膠質瘤，諸如彌漫型內因性腦橋神經膠質瘤。
本發明化合物可用於治療其治療將受益於ALK2激酶抑制之任何疾病或病況，其意味著在此類疾病或病況中降低ALK2激酶活性將為合乎需要的。舉例而言，可能需要在ALK2激酶不當活化或過度活化之情況下降低ALK2激酶活性。調配物、投藥途徑及給藥
本發明化合物及其醫藥學上可接受之鹽可調配為醫藥組合物且以適於所選投藥途徑，例如口服或非經腸，藉由靜脈內、腹膜內、肌內、局部或皮下途徑的各種形式投與哺乳動物宿主，諸如人類患者。本發明亦涵蓋額外投藥途徑。
因此，本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽可與醫藥學上可接受之媒劑(諸如惰性稀釋劑或可同化的食用載劑)組合全身投與，例如口服。其可封裝於硬或軟殼明膠膠囊中，可壓製成錠劑，或可直接併入患者飲食之食物中。對於口服治療性投藥，活性化合物(亦即本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽)可與一或多種賦形劑組合且以可攝取錠劑、口腔錠、糖衣錠、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、粉片及其類似物之形式使用。此類組合物及製劑應含有至少0.1%之活性化合物。當然，組合物及製劑之百分比可變化且宜在給定單位劑型重量的約2%至約60%之間。此類治療上有用之組合物中活性化合物之量為將獲得有效劑量水準之量。
錠劑、糖衣錠、丸劑、膠囊及其類似物亦可含有以下稀釋劑及載劑：可添加黏合劑，諸如黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米澱粉或明膠；賦形劑，諸如磷酸二鈣；崩解劑，諸如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、海藻酸及其類似物；潤滑劑，諸如硬脂酸鎂；及甜味劑，諸如蔗糖、果糖、乳糖或阿斯巴甜糖(aspartame)；或調味劑，諸如胡椒薄荷、冬青油或櫻桃調味劑。當單位劑型為膠囊時，除上述類型之材料之外，其可含有液體載劑，諸如植物油或聚乙二醇。各種其他材料可以包衣形式存在或以其他方式改變固體單位劑型之物理形式。舉例而言，錠劑、丸劑或膠囊可經明膠、蠟、蟲膠或糖及其類似物包覆。糖漿或酏劑可含有活性化合物、作為甜味劑之蔗糖或果糖、作為防腐劑之對羥基苯甲酸甲酯及對羥基苯甲酸丙酯、染料及調味劑，諸如櫻桃或橙味。當然，用於製備任何單位劑型之任何材料應為醫藥學上可接受的且在所用量下基本上無毒。另外，活性化合物可併入持續釋放製劑及裝置中。
活性化合物亦可藉由輸注或注射靜脈內或腹膜內投與。活性化合物之溶液可在水或生理學上可接受之水溶液中製備，視情況與無毒界面活性劑混合。分散液亦可在甘油、液體聚乙二醇、三醋精及其混合物中及在油中製備。在普通的儲存及使用條件下，此等製劑含有防腐劑以防止微生物生長。
適用於注射或輸注之醫藥劑型可包含包括活性化合物之無菌水溶液或分散液或無菌粉末，其適於臨時製備無菌可注射或可輸注溶液或分散液，視情況囊封於脂質體中。在所有情況下，最終劑型在製造及儲存條件下應為無菌、流體且穩定的。液體載劑或媒劑可為溶劑或液體分散介質，包括例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液體聚乙二醇及其類似物)、植物油、無毒甘油酯及其適合之混合物。適當流動性可例如藉由形成脂質體、藉由在分散液之情況下維持所需粒度或藉由使用界面活性劑來維持。防止微生物之作用可藉由各種抗細菌劑及抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞及其類似物來實現。在許多情況下，將較佳包含等張劑，例如糖、緩衝劑或氯化鈉。延長可注射組合物之吸收可藉由在組合物中使用延遲吸收劑(例如單硬脂酸鋁及明膠)來實現。
無菌可注射溶液係藉由將所需量之活性化合物視需要與上文列舉之各種其他成分一起併入適當溶劑中，隨後過濾滅菌來製備。在用於製備無菌可注射溶液之無菌粉末的情況下，製備方法可包含真空乾燥及冷凍乾燥技術，其產生先前無菌過濾之溶液中存在的活性化合物加上任何額外所需成分的粉末。
對於局部投藥，本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽可以純的形式施用，亦即當其為液體時。然而，通常希望將其以與皮膚病學上可接受之載劑(其可為固體或液體)組合之組合物或調配物形式投與皮膚。
有用的固體載劑包含細粉狀固體，諸如滑石、黏土、微晶纖維素、二氧化矽、氧化鋁及其類似物。有用的液體載劑包含水、醇或二醇或水-醇/二醇摻合物，其中本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽可視情況藉助於無毒界面活性劑以有效含量溶解或分散。可添加佐劑(諸如芳香劑及其他抗微生物劑)以使用於給定用途之特性最佳化。所得液體組合物可自吸收墊施用，用於浸漬繃帶及其他敷料，或使用泵型或氣溶膠噴霧器噴灑於患病區域上。
增稠劑，諸如合成聚合物、脂肪酸、脂肪酸鹽及酯、脂肪醇、改質纖維素或改質礦物材料，亦可與液體載劑一起使用以形成可塗抹的糊劑、凝膠、軟膏、皂及其類似物，以直接施用於使用者的皮膚。
可用於將本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽遞送至皮膚的有用的皮膚組合物之實例為此項技術中已知的；例如參見Jacquet等人(美國專利第4,608,392號；以引用的方式併入本文中)、Geria(美國專利第4,992,478號；以引用的方式併入本文中)、Smith等人(美國專利第4,559,157號；以引用的方式併入本文中)及Wortzman(美國專利第4,820,508號；以引用的方式併入本文中)。
本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽的有用劑量可至少最初藉由比較其活體外活性及在動物模型中之活體內活性來確定。用於將小鼠及其他動物中之有效劑量外推至人類的方法為此項技術中已知的；例如參見美國專利第4,938,949號(以引用的方式併入本文中)。
用於治療所需之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的量將不僅隨著所選特定化合物或鹽而變化，且亦隨著投藥途徑、所治療之病況的性質及患者之年齡及病況而變化，且最終由主治醫師或臨床醫師酌情處理。
然而，一般而言，適合之劑量將在每天每公斤接受者體重約0.5至約100 mg範圍內，例如每天每公斤體重約3至約90 mg，每天每公斤體重約6至約75 mg，每天每公斤約10至約60 mg或每天每公斤約15至約50 mg。
本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽可方便地調配成單位劑型；例如每單位劑型含有5至1000 mg、10至750 mg或50至500 mg活性化合物。在一個實施例中，本發明提供包括調配成此類單位劑型之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽的組合物。所需劑量宜以單次劑量或以在適當時間間隔下投與之分次劑量(例如每天兩次、三次、四次或更多次子劑量)提供。子劑量本身可進一步分成例如許多鬆散間隔的離散投藥。
本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽亦可與其他治療劑組合投與，例如可用於治療或預防其治療將受益於ALK2激酶抑制之疾病或病況的其他藥劑。
其他遞送系統可包含諸如此項技術中熟知的定時釋放、延遲釋放或持續釋放遞送系統。此類系統可避免重複投與活性化合物，從而增加個體及醫師之便利性。許多類型之釋放遞送系統為可用的且為一般熟習此項技術者已知的。長期持續釋放植入物之使用可為合乎需要的。如本文所用，長期釋放意謂遞送系統或植入物經構築及佈置以遞送治療水準之活性化合物至少30天且較佳60天。
在某些實施例中，本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽經調配以用於眼內投與，例如直接注射或插入眼內醫療裝置內或與眼內醫療裝置結合。
本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽可經調配以存放於醫療裝置中，所述醫療裝置可包含各種習知移植物、支架、包含支架移植物、導管、球囊、筐或可部署或永久植入體腔內之其他裝置中之任一者。作為特定的實例，希望具有可遞送本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽至已藉由介入技術治療之身體區域的裝置及方法。
在示例性實施例中，本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽可存放於醫療裝置(諸如支架)內，且遞送至治療部位以治療身體之一部分。
支架已用作治療劑(亦即藥物)之遞送載具。血管內支架一般永久地植入冠狀動脈或外周血管中。支架設計包含美國專利第4,733,655號(Palmaz)、美國專利第4,800,882號(Gianturco)或美國專利第4,886,062號(Wiktor)之彼等支架設計。此類設計包含金屬及聚合物支架，以及自擴張及可球囊擴張支架。支架亦可用於在與血管結構接觸之部位遞送藥物，例如美國專利第5,102,417號(Palmaz)、美國專利第5,419,760號(Narciso, Jr.)、美國專利第5,429,634號(Narciso, Jr.)及國際專利申請案第WO 91/12779號(Medtronic, Inc.)及WO 90/13332(Cedars-Sanai Medical Center)中所揭示。
術語「存放」意謂活性化合物藉由此項技術中已知之方法塗佈、吸附、置放或以其他方式併入裝置中。舉例而言，活性化合物可包埋在塗佈或跨越醫療裝置之聚合物材料內且自所述聚合物材料釋放(「基質型」)或由所述聚合物材料包圍且經由所述聚合物材料釋放(「儲集型」)。在後一實例中，活性化合物可使用此項技術中已知的一或多種用於產生聚合物材料之技術夾帶於此類材料內或偶合至此類材料。在其他調配物中，活性化合物可連接於醫療裝置的表面而無需塗層，例如藉助於可分離鍵，且隨時間釋放或可藉由現用機械或化學方法移除。在其他調配物中，活性化合物可為永久固定的形式，其在植入部位提供活性化合物。
在某些實施例中，活性化合物可在形成用於醫療裝置(諸如支架)之生物相容性塗層期間與聚合物組合物一起併入。由此等組分產生之塗層通常為均勻的且可用於塗佈許多經設計用於植入之裝置。
視期望的釋放速率或期望的聚合物穩定程度而定，聚合物可為生物穩定或生物可吸收聚合物，但生物可吸收聚合物通常適用於此實施例，因為與生物穩定聚合物不同，其通常不會在植入後長期存在以引起任何不良的慢性局部反應。可使用之生物可吸收聚合物包含但不限於聚(L-乳酸)、聚己內酯、聚乙交酯(PGA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLLA/PGA)、聚(羥基丁酸酯)、聚(羥基丁酸酯-共-戊酸酯)、聚二氧環己酮、聚原酸酯、聚酸酐、聚(乙醇酸)、聚(D-乳酸)、聚(L-乳酸)、聚(D,L-乳酸)、聚(D,L-丙交酯)(PLA)、聚(L-丙交酯)(PLLA)、聚(乙醇酸-共-碳酸三亞甲酯)(PGA/PTMC)、聚環氧乙烷(PEO)、聚二氧環己酮(PDS)、聚磷酸酯、聚磷酸酯胺基甲酸酯、聚(胺基酸)、氰基丙烯酸酯、聚(碳酸三亞甲酯)、聚(亞胺基碳酸酯)、共聚(醚-酯)(例如PEO/PLA)、聚乙二酸烷二酯、聚磷氮烯及生物分子，諸如纖維蛋白、纖維蛋白原、纖維素、澱粉、膠原蛋白及玻尿酸、聚ε己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯、水凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物及此項技術中已知的其他適合之生物可吸收聚合物。另外，可使用具有相對低慢性組織反應之生物穩定聚合物，諸如聚胺基甲酸酯、聚矽氧及聚酯，且亦可使用在醫療裝置上可溶解及固化或聚合的其他聚合物，諸如聚烯烴、聚異丁烯及乙烯-α-烯烴共聚物；丙烯酸系聚合物及共聚物、乙烯基鹵化物聚合物及共聚物，諸如聚氯乙烯；聚乙烯吡咯啶酮；聚乙烯醚，諸如聚乙烯甲基醚；聚偏二乙烯鹵化物，諸如聚偏二氟乙烯及聚偏二氯乙烯；聚丙烯腈、聚乙烯酮；聚乙烯芳族物，諸如聚苯乙烯；聚乙烯酯，諸如聚乙酸乙烯酯；乙烯基單體與彼此及烯烴之共聚物，諸如乙烯-甲基丙烯酸甲酯共聚物、丙烯腈-苯乙烯共聚物、ABS樹脂及乙烯-乙酸乙烯酯共聚物；哌喃共聚物；聚羥基-丙基-甲基丙烯醯胺-酚；聚羥乙基-天冬醯胺-酚；經棕櫚醯基殘基取代之聚氧化乙烯-聚離胺酸；聚醯胺，諸如耐綸66(Nylon 66)及聚己內醯胺；醇酸樹脂、聚碳酸酯；聚甲醛；聚醯亞胺；聚醚；環氧樹脂、聚胺基甲酸酯；嫘縈；嫘縈-三乙酸酯；纖維素、乙酸纖維素、丁酸纖維素；乙酸丁酸纖維素；塞璐芬(cellophane)；硝酸纖維素；丙酸纖維素；纖維素醚；以及羧甲基纖維素。
聚合物及半透性聚合物基質可形成成形物品，諸如瓣膜、支架、管道、假體及其類似物。
在本發明之某些實施例中，本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽與形成為支架或支架-移植裝置之聚合物或半透性聚合物基質偶合。
通常，聚合物藉由旋塗、浸漬或噴塗施用於可植入裝置的表面。出於此目的，亦可利用此項技術中已知的額外方法。噴塗方法包含傳統方法以及使用噴墨型施配器之微沈積技術。另外，聚合物可使用光圖案化沈積於可植入裝置上以將聚合物僅置放於裝置之特定部分上。裝置之此塗層在裝置周圍提供均勻的層，其允許改良多種分析物經由裝置塗層之擴散。
在本發明之某些實施例中，本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽經調配以自聚合物塗層釋放至置放醫療裝置的環境中。較佳地，使用涉及聚合物載體或層之數種熟知技術中之至少一者控制溶離，經延長的時間範圍(例如數月)以受控方式釋放活性化合物。此等技術中之一些描述於美國專利申請案2004/0243225A1中，其全部揭示內容以其整體併入本文中。
此外，如例如全部併入本文中之美國專利第6,770,729號中所述，聚合物組合物之試劑及反應條件可經操縱以使得可控制活性化合物自聚合物塗層的釋放。舉例而言，可調節一或多個聚合物塗層之擴散係數以控制活性化合物自聚合物塗層的釋放。在此主題之變化形式中，可控制一或多個聚合物塗層之擴散係數以調節置放醫療裝置之環境中存在之分析物(例如促進聚合物之一些部分分解或水解之分析物)接近聚合物組合物內之一或多種組分的能力(且例如由此調節活性化合物自聚合物塗層釋放)。本發明之另一實施例包含具有複數個聚合物塗層之裝置，所述塗層各自具有複數個擴散係數。在本發明之此類實施例中，活性化合物自聚合物塗層之釋放可藉由複數個聚合物塗層來調節。
在本發明之另一個實施例中，活性化合物自聚合物塗層之釋放係藉由調節聚合物組合物之一或多種特性，諸如存在一或多種內源性或外源性化合物，或者聚合物組合物之pH來控制。舉例而言，某些聚合物組合物可經設計以響應於聚合物組合物之pH降低而釋放活性化合物。套組
本發明亦提供一種套組，其包括本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽、至少一種其他治療劑、封裝材料及向哺乳動物投與本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽及其他治療劑以治療或預防將受益於ALK2抑制之疾病或病況的說明書。在一個實施例中，哺乳動物為人類。
相關技術之一般技術者應理解，鑒於一般熟習此項技術者已知的資訊，對本文所述之組合物及方法的其他適合之修飾及修改根據本文所含之本發明之描述顯而易見且可在不背離本發明或其任何實施例之範疇的情況下做出。 實例
現已詳細描述本發明，參考以下實例將更清楚地理解本發明，所述實例僅出於說明之目的包含在此且不意欲限制本發明。第1部分展示例示性本發明化合物之合成。第2部分展示各種例示性3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)試劑之製備。第3部分呈現例示性本發明化合物之生物分析資料。
出於本發明之目的，數個描述詞「吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪」及「吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪」及其類似物在為本文所揭示之化合物提供化學名稱之上下文中理解為同義的，因此能夠且有時可互換使用。作為非限制性實例，化學名稱「2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪」及「2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪」均理解為係指具有以下結構之化合物：
作為另一個非限制性實例，化學名稱「2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺」及「2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺」均理解為係指具有以下結構之化合物： 第 1 部分 ： 合成含有咪唑之 ALK2 激酶抑制劑 流程1
製備2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1b )
向2,4-二氯呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (0.71 g，3.74 mmol；CAS # 956034-07-4)於2-丙醇(20 mL)中之溶液中添加DIPEA (1.63 mL，9.36 mmol)、1-甲基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(0.5 g，3.74 mmol)且加熱回流24小時。將反應混合物真空濃縮至乾且用水濕磨所得殘餘物。所得固體藉由過濾收集且真空乾燥，得到呈棕色固體狀之2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1b ) ( 550 mg，59%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.89 (s, 1H, D2 O可交換), 8.35 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 250.3 (M+1), 272.3, 274.3 (M+Na), (ES-): 248.2 (M-1)。 流程2
製備(S)-(1-(4-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(2a )
2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1b ) (100 mg，0.40 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(122 mg，1.20 mmol)於N-甲基-2-吡咯啶酮(1 mL)中之攪拌懸浮液在150℃下進行微波輻照2小時。反應混合物用乙酸乙酯(50 mL)稀釋，用鹽水(2 × 20 mL)洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。藉由combiflash (矽膠，12 g，用氯仿/CMA-80溶離)純化粗殘餘物，得到呈淡黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(2a ) (43 mg，34%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.90 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.00 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.42 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 6.71 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 4.94 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 4.13 (s, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.62 - 3.49 (m, 1H), 3.48 - 3.23 (m, 2H), 2.07 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 315.4 (M+1), 337.5 (M+Na), (ES-): 313.4 (M-1)。HPLC純度：98.70%。 流程3
製備(R)-(1-(4-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(3a )
根據流程2中所報道之程序，使2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1b ) ( 100 mg，0.40 mmol)與(R)-吡咯啶-2-基甲醇(122 mg，1.20 mmol)在NMP (1 mL)中反應，在處理及純化之後得到呈淡黃色固體狀之(R)-(1-(4-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(3a ) (65 mg，52%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.91 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.00 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.42 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 6.71 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 4.93 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 4.13 (s, 1H), 3.82 - 3.69 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.61 - 3.48 (m, 1H), 3.48 - 3.23 (m, 2H), 2.06 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 315. 4 (M+1), 337.4 (M+Na), (ES-): 313.3 (M-1)。 流程4
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b )
化合物4b 係根據2008年1月10日由Mastalerz, Harold等人在PCT國際申請案WO 2008/005956中報道之程序(以引用的方式併入)由化合物4a 製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.15 (s, 1H), 7.75 - 7.67 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 4.5, 1.5 Hz, 1H), 6.68 (dd, J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+): 249.3 (M+1), 271.3 (M+Na); MS (ES-): 247.2(M-1)。
步驟2：製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4c )
化合物4c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (100 mg，0.40 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(179 mg，1.21 mmol)及DIPEA (0.21 mL，1.21 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至20%之CMA80/CHCl3 溶離] ]純化後得到呈黃色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4c ) (50 mg，35%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.24 (s, 1H), 8.67 - 8.56 (m, 1H), 7.67 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.44 - 7.32 (m, 2H), 7.28 - 7.15 (m, 2H), 7.06 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.86 - 6.67 (m, 1H), 6.36 (dd, J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.81 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.67 - 3.54 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.46 - 2.24 (m, 1H), 2.09 - 1.75 (m, 3H); MS (ES+): 361.5 (M+1); MS (ES-) 359.4 (M-1)。 流程5
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(5a )
化合物5a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1b ) (100 mg，0.40 mmol)、DIPEA (155 mg，1.20 mmol)及2-(吡咯啶-2-基)吡啶鹽酸鹽(148 mg，0.8 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(12 g)，用0至20%之CMA80/CHCl3 溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(5a ) (22 mg，15%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.83 (s, 1H, D2 O可交換), 8.61 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.66 (td, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.38 - 7.27 (m, 1H), 7.26 - 7.18 (m, 1H), 7.15 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.84 - 6.67 (m, 1H), 6.67 - 6.44 (m, 1H), 5.29 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.99 - 3.81 (m, 1H), 3.78 - 3.60 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 2.46 - 2.27 (m, 1H), 2.06 - 1.74 (m, 3H); MS (ES+): 362.4 (M+1), 384.5 (M+Na)。 流程6
製備(S )-(1-(4-(1-甲基-1H -咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(6a )
化合物6a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H -咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (50 mg，0.2 mmol)、(S )-吡咯啶-2-基甲醇(61 mg，0.6 mmol)及DIPEA (0.11 mL，0.6 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至40%之CMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到(S )-(1-(4-(1-甲基-1H -咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(6a ) (34 mg，54%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (s, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.35 (dd,J = 2.4, 1.7 Hz, 1H), 7.08 (d,J = 3.5 Hz, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.81 (t,J = 5.0 Hz, 1H), 4.16 - 4.07 (m, 1H), 3.82 - 3.70 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.54 - 3.42 (m, 1H), 3.36 - 3.25 (m, 2H), 2.12 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 314.4 (M+1); MS (ES-): 312.4 (M-1)。 流程7
製備(R )-(1-(4-(1-甲基-1H -咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(7a )
化合物7a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H -咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (50 mg，0.2 mmol)、(R )-吡咯啶-2-基甲醇(61 mg，0.6 mmol)及DIPEA (0.11 mL，0.6 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至40%之CMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到(R )-(1-(4-(1-甲基-1H -咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(7a ) (27 mg，43%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (s, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.35 (dd,J = 2.5, 1.7 Hz, 1H), 7.08 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.81 (t,J = 5.0 Hz, 1H), 4.20 - 4.04 (m, 1H), 3.82 - 3.69 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.54 - 3.42 (m, 1H), 3.35 - 3.24 (m, 2H), 2.11 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+): 314.5 (M+1), 336.5 (M+Na)。 流程8
製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(8c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(8b )
化合物8b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (240 mg，1.28 mmol；CAS # 918538-05-3)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (0.67 mL，3.83 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (250 mg，1.28 mmol；根據由Sakamoto, Toshihiro等人在《生物有機與藥物化學(Bioorganic & Medicinal Chemistry)》, 17(14), 5015-5026; 2009及由Francini, Cinzia Maria等人在《醫藥化學(Chem. Med. Chem)》, 10(12), 2027-2041中報道之程序製備)來製備。由此得到2-氯-N-(1-苯基-1H -咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(8b ) ( 302 mg，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.35 - 8.18 (m, 1H), 7.95 - 7.87 (m, 1H), 7.81 - 7.73 (m, 1H), 7.65 (d,J = 7.9 Hz, 2H), 7.56 (t,J = 7.7 Hz, 2H), 7.46 - 7.35 (m, 2H), 6.80 - 6.66 (m, 1H); MS (ES+): 311.3 (M+1); MS (ES-): 309.3 (M-1)。
步驟2：製備(S )-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(8c )
化合物8c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(8b ) (100 mg，0.32 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(98 mg，0.97 mmol)及DIPEA (0.17 mL，0.97 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至40%之CMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到呈淺灰白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(8c ) (29 mg，24%產率) TFA鹽(使用含0.1% TFA之乙腈/水作為流動相藉由逆相管柱純化最終化合物獲得)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.58 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.76 (d,J = 7.8 Hz, 2H), 7.51 (t,J = 7.7 Hz, 2H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.23 - 7.09 (m, 2H), 7.00 (s, 1H), 6.48 - 6.31 (m, 1H), 4.26 - 4.09 (m, 1H), 3.84 - 3.68 (m, 1H), 3.59 - 3.44 (m, 1H), 3.44 - 3.28 (m, 2H), 2.15 - 1.78 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 )) δ -74.29; MS (ES+): 376.5 (M+1); MS (ES-): 374.4 (M-1), 410.4 (M+Cl)。 流程9
製備N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(9a )
化合物9a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(8b ) (100 mg，0.32 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶鹽酸鹽(149 mg，0.81 mmol)及DIPEA (0.28 mL，1.61 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至40%之CMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到呈淺棕色固體狀之N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(9a ) (27 mg, 20%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.55 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.26 - 8.08 (m, 1H), 8.04 - 7.76 (m, 1H), 7.67 - 7.52 (m, 6H), 7.49 - 7.34 (m, 3H), 7.20 - 7.10 (m, 1H), 6.42 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.47 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 3.91 - 3.78 (m, 1H), 3.70 - 3.62 (m, 1H), 2.53 - 2.36 (m, 1H), 2.14 - 1.73 (m, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.26; MS (ES+): 423.5 (M+1), 445.5 (M+Na); MS (ES-): 421.4 (M-1)。 流程10
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(10a )
化合物10a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H -咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (80 mg，0.32 mmol)、2-苯基吡咯啶(142 mg，0.97 mmol)及DIPEA (0.17 mL，0.97 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至40%之CMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到呈淺灰白色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(10a ) (31 mg，27%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (s, 1H), 7.41 - 7.25 (m, 6H), 7.24 - 7.15 (m, 1H), 7.05 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.78 - 6.66 (m, 1H), 6.35 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.32 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 1H), 3.64 - 3.54 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 2.41 - 2.30 (m, 1H), 2.01 - 1.76 (m, 3H); MS (ES+): 360.5 (M+1), 382.5 (M+Na); MS (ES-): 358.4 (M-1), 394.5 (M+Cl)；HPLC純度：95.75%。 流程11
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-3-基)吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(11a )
化合物11a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1b ) (100 mg，0.4 mmol)、3-(吡咯啶-2-基)吡啶(119 mg，0.8 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水0-100%溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-3-基)吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(11a ) (23 mg，16%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.83 (s, 1H, D2 O可交換), 8.54 (s, 1H), 8.41 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 7.8, 4.7 Hz, 2H), 6.72 (s, 1H), 6.70 - 6.30 (m, 1H), 5.35 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.98 - 3.81 (m, 1H), 3.77 - 3.60 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.47 - 2.33 (m, 1H), 2.02 - 1.73 (m, 3H); MS (ES+): 362.5 (M+1), 384.5 (M+Na), 745.8 (2M+Na), (ES-): 360.4 (M-1)。 流程12
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12b )
化合物12b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (0.31 g，1.5 mmol；CAS # 16234-14-3)在2-丙醇(10 mL)中使用1-甲基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(0.2 g，1.5 mmol)及DIPEA (0.65 mL，3.74 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用CMA-80/氯仿溶離)純化後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12b ) (165 mg，42%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.82 (s, 1H), 8.21 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 266.3 (M+1), 288.3 (M+Na), (ES-): 264.2 (M-1)。
步驟2：製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12c )
化合物12c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12b ) (100 mg，0.38 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(167 mg，1.13 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，30 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12c ) (86 mg，61%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.81 (s, 1H, D2 O可交換), 8.62 (s, 1H), 8.02 - 7.80 (m, 1H), 7.66 (td, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.27 - 7.05 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 5.34 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.01 - 3.84 (m, 1H), 3.79 - 3.64 (m, 1H), 3.64 - 3.43 (m, 3H), 2.44 (s, 1H), 2.08 - 1.77 (m, 3H); MS (ES+): 378.5 (M+1), 400.5 (M+Na), (ES-): 376.4 (M-1)。 流程13
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(13a )
化合物13a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1b ) (100 mg，0.4 mmol)、2-苯基吡咯啶(147 mg，1.0 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈無色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(13a ) (8 mg，6%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.50 (s, 1H, D2 O可交換), 8.33 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.6 Hz, 4H), 7.32 - 7.20 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.47 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.74 - 3.63 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.49 - 2.34 (m, 1H), 2.08 (s, 1H), 2.01 - 1.83 (m, 2H); MS (ES+): 361.5 (M+1)。 流程14
製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(14b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(14a )
化合物14a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (400 mg，2.12 mmol)在2-丙醇(30 mL)中使用DIPEA (0.92 mL，5.29 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (414 mg，2.12 mmol)來製備。由此得到呈淺棕色固體狀之2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(14a )( 267 mg，41%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.01 (s, 1H), 8.38 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 2H), 7.63 - 7.50 (m, 2H), 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.06 (d, J = 2.2 Hz, 1H); MS (ES+): 312.3 (M+1), 334.3 (M+Na), 310.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(14b )
化合物14b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(14a ) (100 mg，0.32 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(81 mg，0.8 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(14b ) (65 mg，54%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13 (s, 1H, D2 O可交換), 8.18 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.80 - 7.64 (m, 2H), 7.51 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.00 (s, 1H, D2 O可交換), 4.20 (s, 1H), 3.85 - 3.69 (m, 1H), 3.66 - 3.54 (m, 1H), 3.55 - 3.41 (m, 2H), 2.09 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 377.5 (M+1), (ES-): 375.4 (M-1)。 流程15
製備(S)-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(15a )
化合物15a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H -咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (80 mg，0.32 mmol)、(S)-2-苯基吡咯啶(142 mg，0.97 mmol)、DIPEA (0.17 mL，0.97 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之(S)-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(15a ) (42 mg，36%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (s, 1H, D2 O可交換), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.34 - 7.26 (m, 4H), 7.25 - 7.15 (m, 1H), 7.05 (dd, J = 4.3, 1.7 Hz, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.36 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.33 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.86 - 3.70 (m, 1H), 3.66 - 3.50 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 2.42 - 2.28 (m, 1H), 2.02 - 1.71 (m, 3H); MS (ES+): 360.5 (M+1), (ES-): 358.5 (M-1)。 流程16
製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(16b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(16a )
化合物16a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (500 mg，2.44 mmol)在2-丙醇(30 mL)中使用DIPEA (1.07 mL，6.1 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (477 mg，2.45 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(16a )( 340 mg，43%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.97 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (s, 1H), 8.24 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.62 - 7.52 (m, 2H), 7.46 - 7.36 (m, 2H); MS (ES+): 328.3 (M+1) (ES-): 326.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(16b )
化合物16b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(16a ) (100 mg，0.31 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(77 mg，0.76 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(16b ) (95 mg，79%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.72 (s, 2H), 7.51 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.35 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H, D2 O可交換), 4.24 (s, 1H), 3.87 - 3.70 (m, 1H), 3.70 - 3.45 (m, 1H), 3.43 - 3.36 (m, 2H), 2.12 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+): 393.5 (M+1), 415.5 (M+Na), (ES-): 391.4 (M-1)。 流程17
製備(S)-N4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺(17a )
化合物17a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(16a ) (100 mg，0.31 mmol)、(S)-1-苯乙胺(111 mg，0.92 mmol)及DIPEA (0.2 mL，1.2 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之(S)-N4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺(17a ) (65 mg，52%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H, D2 O可交換), 8.33 - 8.16 (m, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.97 - 7.87 (m, 1H), 7.76 - 7.63 (m, 2H), 7.57 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.48 - 7.30 (m, 3H), 7.33 - 7.19 (m, 3H), 7.22 - 7.07 (m, 1H), 7.04 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 5.32 - 5.16 (m, 1H), 1.50 (d, J = 7.0 Hz, 3H); MS (ES+): 413.5 (M+1), (ES-): 411.5 (M-1); HPLC純度：91.57 %。 流程18
製備(S)-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(18a )
化合物18a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (100 mg，0.4 mmol)、(S)-2-(吡咯啶-2-基)吡啶二鹽酸鹽(98 mg，0.44 mmol)及DIPEA (0.17 mL，0.97 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之(S)-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(18a ) (11 mg，8%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H, D2 O可交換), 8.66 - 8.56 (m, 1H), 7.67 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.43 - 7.31 (m, 2H), 7.27 - 7.16 (m, 2H), 7.06 (dd, J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.75 (bs, 1H), 6.36 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.74 (m, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.44 - 2.31 (m, 1H), 2.05 - 1.79 (m, 3H); MS (ES+): 361.5 (M+1), 383.5 (M+Na)。 流程19
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-3-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(19a )
化合物19a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (100 mg，0.4 mmol)、3-(吡咯啶-2-基)吡啶(119 mg，0.804 mmol)及DIPEA (0.21 mL，1.21 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-3-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(19a ) (11 mg，8%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H, D2 O可交換), 8.66 - 8.56 (m, 1H), 7.67 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.43 - 7.31 (m, 2H), 7.27 - 7.16 (m, 2H), 7.06 (dd, J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.75 (bs, 1H), 6.36 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.74 (m, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.44 - 2.31 (m, 1H), 2.05 - 1.79 (m, 3H); MS (ES+): 361.5 (M+1), 383.5 (M+Na)。 流程20
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-4-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(20a )
化合物20a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (100 mg，0.4 mmol)、4-(吡咯啶-2-基)吡啶(119 mg，0.8 mmol)及DIPEA (0.21 mL，1.21 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-4-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(20a ) (23 mg，16%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.26 (s, 1H, D2 O可交換), 8.55 - 8.42 (m, 2H), 7.37 (s, 2H), 7.34 - 7.30 (m, 2H), 7.07 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.36 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.86 - 3.73 (m, 1H), 3.68 - 3.58 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 2.47 - 2.30 (m, 1H), 2.01 - 1.73 (m, 3H); MS (ES+): 361.5 (M+1), 383.5 (M+Na), (ES-): 359.4 (M-1)。 流程21
製備(S)-N4-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)喹唑啉-2,4-二胺(21c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(21b )
化合物21b 係根據由Su, Qibin等人在《醫藥化學雜誌(Journal of Medicinal Chemistry)》, 57(1), 144-158; 2014中報道之程序來製備。由此得到呈淺棕色固體狀之2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(21b )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.97 (s, 1H, D2 O可交換), 8.72 (dd, J = 8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.84 (ddd, J = 8.3, 6.9, 1.3 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.62 - 7.50 (m, 3H), 3.73 (s, 3H); MS (ES+): 260.3 (M+1), 282.3 (M+Na), (ES-): 258.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-N4-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)喹唑啉-2,4-二胺(21c )
化合物21c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(21b ) (100 mg，0.39 mmol)、(S)-1-苯乙胺(140 mg，1.16 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之(S)-N4-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)喹唑啉-2,4-二胺(21c ) (24 mg，18%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.96 (s, 1H, D2 O可交換), 8.36 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.55 - 7.39 (m, 4H), 7.37 - 7. 3 (m, 5H), 7.08 - 6.93 (m, 1H), 5.29 (s, 1H), 3.69 (s, 3H), 1.50 (d, J = 7.0 Hz, 3H); MS (ES+): 345.5 (M+1), 367.5 (M+Na), (ES-): 343.4 (M-1), 379.5 (M+Cl)。 流程22
製備(S)-(1-(6-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(22c )
步驟1：製備2-氯-6-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(22b )
化合物22b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-6-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶(22a ) (500 mg，2.28 mmol，CAS # 76872-23-6)在2-丙醇(30 mL)中使用DIPEA (1.0 mL，5.71 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (363 mg，2.28 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-6-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(22b ) (340 mg，44%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.88 (s, 1H, D2 O可交換), 8.25 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 2H), 7.57 (dd, J = 8.7, 7.1 Hz, 2H), 7.46 - 7.36 (m, 1H), 2.56 (d, J = 1.2 Hz, 3H); MS (ES+): 364.3 (M+ Na), (ES-): 340.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(22c )
化合物22c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(22b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(89 mg，0.88 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之(S)-(1-(6-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(22c ) (65 mg，55%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.98 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (s, 1H), 7.96 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.84 - 7.60 (m, 2H), 7.57 - 7.42 (m, 3H), 7.40 - 7.29 (m, 1H), 4.94 (s, 1H, D2 O可交換), 4.42 - 4.02 (m, 1H), 3.87 - 3.39 (m, 2H), 2.63 - 2.51 (m, 1H), 2.49 - 2.35 (m, 4H), 2.13 - 1.76 (m, 4H); MS (ES+): 407.5 (M+1), 429.5 (M+Na), (ES-): 405.4。 流程23
製備(S)-(1-(6-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(23c )
步驟1：製備2-氯-6-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(23b )
化合物23b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶(23a ) (500 mg，2.28 mmol，CAS # 35265-82-8)在2-丙醇(30 mL)中使用DIPEA (1.00 mL，5.71 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (363 mg，2.28 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-6-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(23b ) (340 mg，44%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.75 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 7.9, 1.6 Hz, 2H), 7.57 (dd, J = 8.6, 7.1 Hz, 2H), 7.45 - 7.36 (m, 1H), 7.17 - 7.08 (m, 1H), 2.60 (s, 3H); MS (ES+): 342.3 (M+1), 364.3 (M+Na), (ES-): 340.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(23c )
化合物23c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(23b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(89 mg，0.88 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(6-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(23c ) (65 mg，55%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.19 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.72 (s, 2H), 7.51 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.37 - 4.71 (m, 1H, D2 O可交換), 4.36 - 4.05 (m, 1H), 3.85 - 3.69 (m, 1H), 3.70 - 3.38 (m, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.10 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 407.5 (M+1), 429.5 (M+Na), (ES-): 405.5 (M-1)。 流程24
製備(S)-N4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)喹唑啉-2,4-二胺(24b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(24a )
化合物24a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯喹唑啉(21a ) (180 mg，0.9 mmol；CAS # 607-68-1)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (0.51 mL，2.92 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (177 mg，0.9 mmol)來製備。由此得到呈灰白色固體狀之2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(24a ) (125 mg，43%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.18 (s, 1H, D2 O可交換), 8.77 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.87 (ddd, J = 8.3, 7.0, 1.3 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.70 - 7.65 (m, 2H), 7.60 (tdd, J = 8.5, 6.9, 1.5 Hz, 3H), 7.46 - 7.37 (m, 1H); MS (ES+): 322.4 (M+1), 344.4 (M+Na), (ES-): 320.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-N4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)喹唑啉-2,4-二胺(24b )
化合物24b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(24a ) (100 mg，0.31 mmol)、(S)-1-苯乙胺(113 mg，0.93 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之(S)-N4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-N2-(1-苯基乙基)喹唑啉-2,4-二胺(24b ) (86 mg，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.47 - 10.14 (m, 1H, D2 O可交換), 8.66 - 8.36 (m, 2H), 8.22 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.82 - 7.63 (m, 1H), 7.59 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.51 - 7.28 (m, 9H), 7.26 - 7.15 (m, 2H), 5.35 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H); MS (ES+): 407.5 (M+1), (ES-): 405.6 (M-1)。 流程25
製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(25c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(25b )
化合物25b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (323 mg，1.72 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.9 mL，5.15 mmol)及1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(25a ) (440 mg，2.06 mmol；根據由Sakamoto, Toshihiro等人在《生物有機與藥物化學》, 17(14), 5015-5026; 2009及由Francini, Cinzia Maria等人在《醫藥化學》, 10(12), 2027-2041中報道之程序製備)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(25b ) (381 mg，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.35 (s, 1H, D2 O可交換), 8.21 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.74 - 7.65 (m, 2H), 7.49 - 7.35 (m, 3H), 6.72 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO) δ -114.97; MS (ES+): 329.3 (M+1); MS (ES-): 327.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(25c )
化合物25c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(25b ) (100 mg，0.32 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(154 mg，1.52 mmol)及DIPEA (0.16 mL，0.91 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至40%之CMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(25c ) (40mg，33%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.53 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 - 7.74 (m, 2H), 7.39 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 2H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.91 (t,J = 5.0 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.26 - 4.12 (m, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 1H), 3.55 - 3.44 (m, 1H), 3.39 - 3.25 (m, 2H), 2.12 - 1.81 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -115.67; MS (ES+): 394.5 (M+1), 416.5 (M+Na); MS (ES-): 392.5 (M-1)。 流程26
製備(S)-(1-(4-((1-環丙基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(26c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(26b )
化合物26b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (268 mg，1.43 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (1.25 mL，7.14 mmol)及1-環丙基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(26a ) (1.4 g，7.14 mmol)來製備。由此得到呈微棕色固體狀之2-氯-N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(26b ) (225 mg，57%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.19 (s, 1H, D2 O可交換), 7.73 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.35 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.68 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.62 - 3.46 (m, 1H), 1.14 - 0.89 (m, 4H); MS (ES-): 273.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-環丙基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(26c )
化合物26c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(26b ) (70 mg，0.26 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(129 mg，1.27 mmol)及DIPEA (0.13 mL，0.76 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(24 g)，用0至40%之CMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-環丙基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(26c ) (22 mg，25%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (s, 1H, D2 O可交換), 7.60 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 7.49 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.35 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.09 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.77 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.21 - 4.01 (m, 1H), 3.80 - 3.64 (m, 1H), 3.59 - 3.38 (m, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.13 - 1.77 (m, 4H), 1.07 - 0.83 (m, 4H); MS (ES+): 340.5 (M+1), 362.5 (M+Na)。 流程27
製備N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(27a )
化合物27a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(26b ) (70 mg，0.26 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(113 mg，0.76 mmol)及DIPEA (0.13 mL，0.76 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(27a ) (48 mg，51%產率)；1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H, D2 O可交換), 8.59 (s, 1H), 7.78 - 7.60 (m, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 1H), 7.41 - 7.32 (m, 1H), 7.29 - 7.11 (m, 2H), 7.09 - 6.99 (m, 1H), 6.93 - 6.70 (m, 1H), 6.46 - 6.26 (m, 1H), 5.43 - 5.21 (m, 1H), 3.89 - 3.70 (m, 1H), 3.42 (s, 1H), 3.37 - 3.21 (m, 1H), 2.47 - 2.29 (m, 1H), 2.12 - 1.68 (m, 3H), 1.09 - 0.87 (m, 3H), 0.88 - 0.71 (m, 1H); MS (ES+): 387.5 (M+1), 409.5 (M+Na)。 流程28
製備(S)-(1-(4-((1-環己基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(28c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(28b )
化合物28b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (376 mg，2.0 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.05 mL，6.0 mmol)及1-環己基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(28a ) (572 mg，2.4 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(28b ) (381 mg，60%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.68 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.86 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.78 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.79 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.28 (ddd,J = 11.7, 7.9, 3.8 Hz, 1H), 2.10 (d,J = 11.9 Hz, 2H), 1.85 (d,J = 13.3 Hz, 2H), 1.72 (dt,J = 14.9, 11.6 Hz, 3H), 1.40 (q,J = 12.7 Hz, 2H), 1.24 (t,J = 12.5 Hz, 1H); MS (ES+): 317.3 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-環己基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(28c )
化合物28c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(28b ) (100 mg，0.32 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(160 mg，1.56 mmol)及DIPEA (0.17 mL，0.95 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺灰白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-環己基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(28c ) (25 mg，21%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (s, 1H, D2 O可交換), 7.66 - 7.51 (m, 2H), 7.43 - 7.28 (m, 1H), 7.18 - 7.01 (m, 1H), 6.45 - 6.22 (m, 1H), 4.93 - 4.76 (m, 1H, D2 O可交換), 4.20 - 4.07 (m, 1H), 4.07 - 3.92 (m, 1H), 3.83 - 3.65 (m, 1H), 3.54 - 3.20 (m, 3H), 2.13 - 1.84 (m, 6H), 1.89 - 1.70 (m, 4H), 1.72 - 1.54 (m, 1H), 1.47 - 1.12 (m, 3H); MS (ES+): 382.5 (M+1), 404.5 (M+Na); MS (ES-): 380.4 (M-1)。 流程29
製備N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(29a )
化合物29a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(28b ) (100 mg，0.32 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(140 mg，0.95 mmol)及DIPEA (0.17 mL，0.95 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(29a ) (47 mg，35%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 (s, 1H, D2 O可交換), 8.64 - 8.52 (m, 1H), 7.67 (td,J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.49 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.26 - 7.21 (m, 1H), 7.19 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.08 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.91 - 6.83 (m, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.33 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 3.87 - 3.70 (m, 2H), 3.66 - 3.50 (m, 1H), 2.42 - 2.28 (m, 1H), 2.15 - 2.03 (m, 1H), 2.03 - 1.78 (m, 6H), 1.81 - 1.64 (m, 2H), 1.67 - 1.51 (m, 1H), 1.51 - 1.37 (m, 2H), 1.37 - 1.15 (m, 1H). MS (ES+): 429.6 (M+1), 451.6 (M+Na)。 流程30
製備N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(30a )
化合物30a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(26b ) (100 mg，0.36 mmol)、2-苯基吡咯啶(161 mg，1.09 mmol)及DIPEA (0.19 mL，1.09 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺灰白色固體狀之N-(1-環丙基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(30a ) (74 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.36 (s, 1H, D2 O可交換), 7.89 (s, 1H), 7.50 - 7.39 (m, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 2H), 7.26 (d,J = 7.5 Hz, 2H), 7.23 - 7.16 (m, 1H), 7.08 - 6.90 (m, 2H), 6.40 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.33 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 4.00 - 3.29 (m, 3H), 2.41 - 2.21 (m, 1H), 2.05 - 1.73 (m, 3H), 1.11 - 0.76 (m, 4H). MS (ES+): 386.5 (M+1), 408.5 (M+Na)。 流程31
製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(31c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(31b )
化合物31b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (500 mg，2.44 mmol；CAS # 18740-39-1)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.70 mL，9.75 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (716 mg，3.66 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(31b ) (640 mg，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.06 (s, 1H, D2 O可交換), 8.26 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.69 - 7.63 (m, 2H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.46 - 7.36 (m, 1H); MS (ES+): 328.2 (M+1), 350.2 (M+Na), (ES-): 326.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(31c )
化合物31c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(31b ) (100 mg，0.31 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(93 mg，0.92 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(31c ) (95 mg，79%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.16 (s, 1H, D2 O可交換), 8.22 (s, 1H), 7.99 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.89 - 7.59 (m, 2H), 7.60 - 7.42 (m, 3H), 7.35 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H, D2 O可交換), 4.46 - 4.00 (m, 1H), 3.95 - 3.36 (m, 4H), 2.17 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 393.5 (M+1), 415.5 (M+Na), (ES-): 391.4 (M-1)。 流程32
製備(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(32a )
化合物32a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(24a ) (100 mg，0.31 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(94 mg，0.93 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之(S)-(1-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(32a ) (75 mg，62%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.49 - 10.15 (m, 1H, D2 O可交換), 8.48 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.93 - 7.63 (m, 3H), 7.61 - 7.43 (m, 2H), 7.43 - 7.24 (m, 2H), 7.09 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.16 - 4.88 (m, 1H, D2 O可交換), 4.49 - 4.14 (m, 1H), 3.93 - 3.56 (m, 3H), 3.54 - 3.36 (m, 1H), 2.19 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 387.4 (M+1), (ES-): 385.3 (M-1)。 流程33
製備N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(33a )
化合物33a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(14a ) (100 mg，0.32 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶鹽酸鹽(148 mg，0.8 mmol)及DIPEA (0.22 mL，1.28 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(33a ) (61 mg，45%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.03 (s, 1H, D2 O可交換), 8.26 (s, 1H), 8.17 - 7.90 (m, 2H), 7.80 - 7.45 (m, 5H), 7.39 (p, J = 8.5, 4.2 Hz, 1H), 7.35 - 7.18 (m, 1H), 7.11 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 6.77 (s, 1H), 5.39 (s, 1H), 4.01 - 3.82 (m, 1H), 3.79 - 3.54 (m, 1H), 2.45 - 2.28 (m, 1H), 2.11 - 1.88 (m, 2H), 1.88 - 1.71 (m, 1H); MS (ES+): 424.5 (M+1), 446.5 (M+Na)。 流程34
製備N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(34a )
化合物34a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (100 mg，0.4 mmol)、1-甲基哌嗪(0.13 mL，1.21 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(34a ) (37 mg，30%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (s, 1H, D2 O可交換), 7.49 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 7.37 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.41 (dd,J = 4.5, 2.5 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.55 (t,J = 4.9 Hz, 4H), 2.41 (q,J = 5.0 Hz, 4H), 2.22 (s, 3H); MS (ES+): 313.4 (M+1), 325.4 (M+Na)。 流程35
製備2-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(35a )
化合物35a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(8b ) (100 mg，0.32 mmol)、1-甲基哌嗪(0.11 mL，0.97 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之2-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(35a ) (16 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.59 (s, 1H, D2 O可交換), 8.23 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.83 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.63 (dd,J = 8.5, 1.5 Hz, 2H), 7.56 (dd, J = 8.7, 7.1 Hz, 2H), 7.45 - 7.39 (m, 1H), 7.39 - 7.34 (m, 1H), 7.16 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.45 (dd, J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 3.66 - 3.52 (m, 4H), 2.50 - 2.36 (m, 4H), 2.23 (s, 3H); MS (ES+): 375.5 (M+1)。 流程36
製備(S)-(1-(4-((1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(36c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(36b )
化合物36b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (260 mg，1.38 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.73 mL，4.15 mmol)及1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(36a ) (450 mg，1.8 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(36b ) (125 mg，28%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.40 (s, 1H, D2 O可交換), 8.08 (t,J = 1.5 Hz, 1H), 7.83 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.77 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 2H), 7.73 (td,J = 7.9, 1.6 Hz, 1H), 7.59 - 7.46 (m, 2H), 7.40 (ddd,J = 9.1, 6.0, 2.0 Hz, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -125.09; MS (ES+): 329.3 (M+1); MS (ES-): 363.4 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(36c )
化合物36c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(36b ) (70 mg，0.21 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(108 mg，1.07 mmol)及DIPEA (0.11 mL，0.64 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(36c ) (45 mg，54%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.56 (s, 1H, D2 O可交換), 8.02 (t,J = 1.8 Hz, 1H), 7.87 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 7.76 (td,J = 7.9, 1.7 Hz, 1H), 7.55 - 7.41 (m, 2H), 7.40 - 7.31 (m, 2H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.74 (t,J = 5.2 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.20 - 4.04 (m, 1H), 3.72 - 3.62 (m, 1H), 3.54 - 3.44 (m, 1H), 3.46 - 3.26 (m, 2H), 2.08 - 1.79 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -125.10; MS (ES+): 394.5 (M+1); 416.5 (M+Na); MS (ES-): 392.5 (M-1), 428.5 (M+Cl)。 流程37
製備N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37b )
化合物37b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (350 mg，1.86 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.58 mmol)及1-環丁基-1H -咪唑-4-胺鹽酸鹽(37a ) (420 mg，2.42 mmol)來製備。由此得到呈微黃色固體狀之2-氯-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37b ) (348 mg，65%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.16 (s, 1H, D2 O可交換), 7.83 - 7.62 (m, 2H), 7.53 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.35 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.68 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 4.88 - 4.61 (m, 1H), 2.55 - 2.19 (m, 4H), 1.96 - 1.64 (m, 2H); MS (ES+): 289.3 (M+1), 311.3 (M+Na); MS (ES-): 287.3 (M-1)。
步驟2：製備N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37c )
化合物37c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37b ) (70 mg，0.24 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(108 mg，0.73 mmol)及DIPEA (0.13 mL, 0.73 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37c ) (65 mg，67%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H, D2 O可交換), 8.59 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.67 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.29 - 7.12 (m, 2H), 7.08 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 7.05 - 6.93 (m, 1H), 6.42 - 6.30 (m, 1H), 5.35 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 4.55 (q,J = 8.6 Hz, 1H), 3.90 - 3.75 (m, 1H), 3.71 - 3.54 (m, 1H), 2.45 - 2.26 (m, 4H), 2.26 - 2.09 (m, 1H), 2.12 - 1.99 (m, 1H), 2.02 - 1.88 (m, 1H), 1.89 - 1.69 (m, 3H). MS (ES+): 401.5 (M+1); 423.5 (M+Na)。 流程38
製備(S)-(1-(4-((1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(38c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(38b )
化合物38b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (384 mg，2.04 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.07 mL, 6.12 mmol)及11-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(38a ) (730 mg，2.96 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(38b ) (264 mg，36%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.41 (s, 1H), 9.30 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.68 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.16 - 8.06 (m, 3H), 7.88 - 7.76 (m, 2H), 7.71 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 6.74 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 /D2 O) δ 9.24 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.16 - 8.00 (m, 3H), 7.80 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.69 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.72 (dd, J = 4.4, 2.5 Hz, 1H); MS (ES+): 362.3 (M+1), 384.3 (M+Na); MS (ES-): 360.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(38c )
化合物38c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(38b ) (100 mg，0.28 mmol)、(S )-吡咯啶-2-基甲醇(140 mg，1.38 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.83 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(38c ) (66 mg，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.63 (s, 1H, D2 O可交換), 9.42 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 8.81 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 8.53 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.15 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.12 - 8.00 (m, 2H), 7.79 (ddd,J = 8.4, 6.9, 1.6 Hz, 1H), 7.69 (td,J = 7.5, 6.9, 1.3 Hz, 1H), 7.41 (dd,J = 2.4, 1.7 Hz, 1H), 7.18 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.41 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 5.28 - 5.16 (m, 1H, D2 O可交換), 4.37 - 4.18 (m, 1H), 3.93 - 3.79 (m, 1H), 3.56 - 3.40 (m, 1H), 3.45 - 3.20 (m, 2H), 2.21 - 1.72 (m, 4H). MS (ES+): 427.5 (M+1); 449.5 (M+Na)。 流程39
製備(S)-(1-(4-((1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(39c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(39b )
化合物39b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (500 mg，2.66 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.39 mL，7.98 mmol)及1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-胺(39a ) (511 mg，3.19 mmol)來製備。由此得到呈微棕色固體狀之2-氯-N-(1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(39b ) (728 mg，88%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.38 (s, 1H, D2 O可交換), 8.96 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 8.61 (dd,J = 4.7, 1.4 Hz, 1H), 8.35 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.13 (ddd,J = 8.3, 2.8, 1.4 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.61 (dd,J = 8.3, 4.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.35 (m, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 312.3 (M+1); MS (ES-): 310.4 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(39c )
化合物39c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(39b ) (100 mg，0.32 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(162 mg，1.60 mmol)及DIPEA (0.17 mL，0.96 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈微棕色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(39c ) (60 mg，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.59 (s, 1H, D2 O可交換), 9.04 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 8.55 (dd,J = 4.7, 1.3 Hz, 1H), 8.35 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.25 - 8.14 (m, 1H), 8.01 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.54 (dd,J = 8.3, 4.7 Hz, 1H), 7.40 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.16 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.40 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.13 - 4.74 (m, 1H, D2 O可交換), 4.28 - 4.13 (m, 1H), 3.77 (dd,J = 10.1, 3.4 Hz, 1H), 3.55 - 3.44 (m, 1H), 3.46 - 3.25 (m, 2H), 2.18 - 1.77 (m, 4H). MS (ES+): 377.5 (M+1); 399.5 (M+Na)。 流程40
製備N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40a )
化合物40a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(14a ) (100 mg，0.32 mmol)、2-苯基吡咯啶(118 mg，0.8 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40a ) (18 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.04 (s, 1H, D2 O可交換), 8.19 - 7.83 (m, 2H), 7.66 - 7.50 (m, 2H), 7.54 - 7.25 (m, 2H), 7.26 - 7.14 (m, 3H), 7.16 - 7.00 (m, 4H), 6.74 (s, 1H), 5.41 (s, 1H), 3.99 - 3.57 (m, 2H), 2.40 - 2.24 (m, 1H), 1.98 - 1.63 (m, 3H); MS (ES+) 423.5 (M+1), 445.5 (M+Na)。 流程41
製備(S)-(1-(7-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(41c )
步驟1：製備2-氯-7-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(41b )
化合物41b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶(41a ) (500 mg，2.28 mmol；CAS # 35265-83-9)及DIPEA (1.59 mL，9.13 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (558 mg，2.85 mmol)來製備。由此得到呈灰白色固體狀之2-氯-7-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(41b ) (350 mg，45%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.72 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.72 - 7.63 (m, 2H), 7.57 (dd,J = 8.6, 7.1 Hz, 2H), 7.46 - 7.36 (m, 1H), 2.31 (d,J = 1.2 Hz, 3H); MS (ES+): 342.3 (M+1), 364.3 (M+Na), (ES-): 340.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(41c )
化合物41c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲基-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(41b ) (100 mg，0.29 mmol)及(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(89 mg，0.88 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(7-甲基-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(41c ) (82 mg，69%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.71 (s, 2H), 7.57 (d,J = 1.3 Hz, 1H), 7.51 (t,J = 7.7 Hz, 2H), 7.35 (t,J = 7.4 Hz, 1H), 5.65 - 4.81 (m, 1H, D2 O可交換), 4.26 (s, 1H), 3.86 - 3.52 (m, 2H), 3.51 - 3.24 (m, 2H), 2.22 (d,J = 1.2 Hz, 3H), 2.11 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 407.5 (M+1), 429.5 (M+Na), (ES-): 405.5 (M-1)。 流程42
製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(42b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(42a )
化合物42a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶(23a ) (302 mg，1.38 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.96 mL，5.51 mmol)、1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(25a ) (368 mg，1.72 mmol)來製備。由此得到呈深棕色固體狀之2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(42a ) (100 mg，21%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.74 (s, 1H, D2 O可交換), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 2H), 7.48 - 7.37 (m, 2H), 7.13 (d,J = 1.3 Hz, 1H), 2.60 (s, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -115.30; MS (ES+): 382.4 (M+Na), (ES-): 358.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(42b )
化合物42b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(42a ) (90 mg，0.25 mmol)及(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(89 mg，0.88 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(42b ) (27 mg，25%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.14 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.86 - 7.62 (m, 2H), 7.35 (t,J = 8.6 Hz, 2H), 6.83 (d,J = 1.3 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H, D2 O可交換), 4.37 - 4.01 (m, 1H), 3.89 - 3.68 (m, 1H), 3.68 - 3.44 (m, 3H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.16 - 1.72 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -73.43; MS (ES+): 425.4 (M+1), 447.4 (M+Na), (ES-): 423.4 (M-1)。 流程43
製備(S)-(1-(4-((1-環丁基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(43a )
化合物43a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37b ) (100 mg，0.35 mmol)及(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(175 mg，1.73 mmol)及DIPEA (0.18 mL，1.04 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠24 g，用0-40% CMA-80/氯仿溶離)純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-環丁基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(43a ) (67 mg，55%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.33 (s, 1H, D2 O可交換), 7.67 - 7.56 (m, 2H), 7.42 - 7.29 (m, 1H), 7.09 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.97 - 4.76 (m, 1H, D2 O可交換), 4.69 (p,J = 8.5 Hz, 1H), 4.29 - 4.05 (m, 1H), 3.84 - 3.67 (m, 1H), 3.55 - 3.42 (m, 1H), 3.41 - 3.19 (m, 2H), 2.52 - 2.28 (m, 4H), 2.12 - 1.83 (m, 4H), 1.83 - 1.62 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO) δ -73.48; MS (ES+): 354.5 (M+1); 376.5 (M+Na); MS (ES-): 352.4 (M-1)。 流程44
製備(S)-(1-(4-((1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(44c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(44b )
化合物44b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (254 mg，1.35 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.71 mL，4.06 mmol)及1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(44a ) (440 mg，1.76 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(44b ) (343 mg，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.35 (s, 1H, D2 O可交換), 8.33 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.67 (dt, J = 10.1, 2.1 Hz, 1H), 7.63 - 7.57 (m, 1H), 7.55 - 7.49 (m, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 1H), 7.30 - 7.20 (m, 1H), 6.73 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 329.3 (M+1), 351.3 (M+Na); MS (ES-): 327.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(44c )
化合物44c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(44b ) (100 mg，0.3 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(154 mg，1.52 mmol)及DIPEA (0.16 mL，0.91 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(44c ) (30 mg，25%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.54 (s, 1H, D2 O可交換), 8.33 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.81 - 7.70 (m, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 1H), 7.58 - 7.46 (m, 1H), 7.40 (dd,J = 2.4, 1.7 Hz, 1H), 7.23 - 7.13 (m, 2H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.07 - 4.90 (m, 1H, D2 O可交換), 4.26 - 4.12 (m, 1H), 3.85 - 3.67 (m, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.44 - 3.22 (m, 2H), 2.22 - 1.75 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO) δ -110.92; MS (ES+): 394.5 (M+1); 416.5 (M+Na); MS (ES-): 392.4 (M-1)。 流程45
製備2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(45d )
步驟1：製備4-(2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)乙醯基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(45b )
向哌嗪-1-甲酸第三丁酯(1 g，5.37 mmol)、2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)乙酸(45a ) (1.09 g，5.37 mmol；CAS # 886498-98-2)、EDC (1.24 g，6.44 mmol)於乙腈(15 mL)及DMF (1 mL)中之攪拌懸浮液中添加TEA (2.25 mL，16.11 mmol)及DMAP (33 mg，0.27 mmol)且在室溫下攪拌16小時。將反應物濃縮以移除乙腈且用乙酸乙酯(100 mL)稀釋，用1N KHSO4 (2 × 20 mL)、飽和碳酸氫鈉(2 × 20 mL)、水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，乾燥且濃縮，得到呈無色固體狀之4-(2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)乙醯基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(45b ) (1.00 g，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 6.72 (s, 1H), 6.69 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.66 (s, 2H), 3.57 (t,J = 5.3 Hz, 2H), 3.49 - 3.24 (m, 6H), 1.41 (s, 9H); MS (ES+): 393.5 (+Na) (ES-): 369.3 (M-1)。
步驟2：製備2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸鹽(45c )
在室溫下，向4-(2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)乙醯基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(45b ) (0.95 g，2.56 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1.98 mL，25.6 mmol)且在室溫下攪拌隔夜。真空濃縮反應物，得到呈油狀之2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸鹽(45c ) (800 mg，81%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.94 (s, 2H), 6.88 - 6.43 (m, 2H), 3.77 (s, 5H), 3.72 (s, 2H), 3.63 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.14 (d, J = 27.6 Hz, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.66, -112.12 - -120.42 (m); MS (ES+) 271.3 (M+1), 293.3 (M+Na), 541.6 (2M+1), 563.5 (2M+Na)。
步驟3：製備2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(45d )
化合物45d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(31b ) (100 mg，0.31 mmol)、2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸鹽(45c ) (371 mg，0.97 mmol)及DIPEA (0.28 mL，1.61 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(45d ) (43 mg，24%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.30 (s, 1H, D2 O可交換), 8.29 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.70 - 7.64 (m, 2H), 7.57 (t,J = 7.9 Hz, 2H), 7.43 - 7.34 (m, 1H), 7.15 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.71 (d,J = 9.5 Hz, 2H), 3.93 - 3.85 (m, 2H), 3.85 - 3.78 (m, 4H), 3.77 (s, 3H), 3.76 - 3.70 (m, 2H), 3.65 - 3.56 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -113.98; MS (ES+): 562.6 (M+1), 584.6 (M+Na)。 流程46
製備(S)-N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(46a )
化合物46a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(28b ) (72 mg，0.23 mmol)、(S )-2-苯基吡咯啶鹽酸鹽(50 mg，0.27 mmol)及DIPEA (0.12 mL，0.68 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺灰白色固體狀之(S)-N-(1-環己基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(46a ) (13 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.42 (s, 1H, D2 O可交換), 8.06 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.38 - 7.13 (m, 6H), 6.98 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.42 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.34 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 3.99 - 3.81 (m, 1H), 3.80 - 3.68 (m, 1H), 3.66 - 3.49 (m, 1H), 2.42 - 2.22 (m, 1H), 2.05 - 1.64 (m, 9H), 1.62 - 1.32 (m, 3H), 1.32 - 1.14 (m, 1H); MS (ES+): 428.6 (M+1)。 流程47
製備(S)-1-(3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47c )
步驟1：製備1-(3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47b )
化合物47b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (185 mg，1.0 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.52 mL，2.96 mmol)及1-(3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47a ) (238 mg，1.18 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之1-(3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47b ) (282 mg，81%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.37 (s, 1H, D2 O可交換), 8.38 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.14 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 8.01 - 7.97 (m, 1H), 7.97 - 7.89 (m, 2H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.72 (t,J = 7.9 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 2.68 (s, 3H); MS (ES+): 353.3 (M+1); MS (ES-): 351.4 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47c )
化合物47c 係根據流程2中所報道之程序，由1-(3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47b ) (100 mg，0.28 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(143 mg，1.42 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.85 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47c ) (39 mg，33%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.58 (s, 1H, D2 O可交換), 8.38 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.24 - 8.16 (m, 1H), 8.07 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.06 - 7.98 (m, 1H), 7.98 - 7.84 (m, 1H), 7.65 (t,J = 7.9 Hz, 1H), 7.40 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.40 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 4.87 (t,J = 5.0 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.29 - 4.03 (m, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 1H), 3.63 - 3.46 (m, 1H), 3.47 - 3.22 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.10 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 418.5 (M+1)。 流程48
製備(S)-4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯酚(48c )
步驟1：製備4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯酚(48b )
化合物48b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (410 mg，2.18 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.14 mL，6.54 mmol)及4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯酚(458 mg，2.61 mmol) (48a ) (238 mg，1.18 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯酚(48b ) (264 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.34 (s, 1H), 9.78 (s, 1H), 8.04 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 - 7.74 (m, 1H), 7.47 - 7.35 (m, 3H), 6.94 - 6.86 (m, 2H), 6.71 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 327.3 (M+1); MS (ES-): 325.2 (M-1), 361.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯酚(48c )
化合物48c 係根據流程2中所報道之程序，由4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯酚(48b ) (100 mg，0.31 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(155 mg，1.53 mmol)及DIPEA (0.16 mL，0.92 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯酚(48c ) (60 mg，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.46 (s, 1H, D2 O可交換), 9.69 (s, 1H, D2 O可交換), 8.02 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.84 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d,J = 8.8 Hz, 2H), 7.38 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.14 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.85 (d,J = 8.8 Hz, 2H), 6.38 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.85 (t,J = 5.0 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.26 - 4.06 (m, 1H), 3.81 - 3.65 (m, 1H), 3.55 - 3.42 (m, 1H), 3.45 - 3.23 (m, 2H), 2.11 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 392.5 (M+1); 414.5 (M+Na); C20 H21 N7 O2 之分析計算值: C, 61.37; H, 5.41; N, 25.05; 實驗值: C, 60.88; H, 5.54; N, 24.96。 流程49
製備(S)-(1-(4-((1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(49c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(49b )
化合物49b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (375 mg，2.0 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.05 mL，5.99 mmol)及1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-胺(49a ) (464 mg，2.396 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(49b ) (264 mg，38%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.36 (s, 1H), 8.29 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.74 - 7.68 (m, 2H), 7.66 - 7.60 (m, 2H), 7.40 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.72 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6 /D2 O) δ 8.19 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.70 - 7.64 (m, 2H), 7.62 - 7.56 (m, 2H), 7.32 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 6.71 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 345.3, 347.3 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(49c )
化合物49c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(49b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(147 mg，1.45 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.87 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(49c ) (55 mg，46%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.55 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.96 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 - 7.77 (m, 2H), 7.63 - 7.50 (m, 2H), 7.39 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.03 - 4.80 (m, 1H, D2 O可交換), 4.31 - 4.07 (m, 1H), 3.87 - 3.67 (m, 1H), 3.53 - 3.35 (m, 1H), 3.42 - 3.23 (m, 2H), 2.11 - 1.83 (m, 4H)。MS (ES+): 410.4 (M+1)。 流程50
製備(S)-(1-(4-((1-環戊基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(50c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-環戊基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(50b )
化合物50b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (392 mg，2.08 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.09 mL, 6.25 mmol)及1-環戊基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(50a ) (469 mg，2.499 mmol)來製備。由此得到呈淺黃色固體狀之2-氯-N-(1-環戊基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(50b ) (397 mg，63%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.17 (s, 1H, D2 O可交換), 7.72 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.68 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.35 (dd,J = 4.5, 1.5 Hz, 1H), 6.68 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.69 - 4.50 (m, 1H), 2.24 - 2.05 (m, 2H), 1.92 - 1.57 (m, 6H). MS (ES+): 303.3 (M+1), 325.3 (M+Na); MS (ES-): 301.3 (M-1)
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-環戊基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(50c )
化合物50c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環戊基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(50b ) (100 mg，0.33 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(33 mg，0.33 mmol)及DIPEA (0.17 mL，0.99 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到(S)-(1-(4-((1-環戊基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(50c ) (80 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (s, 1H, D2 O可交換), 7.59 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.54 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.35 (dd,J = 2.4, 1.7 Hz, 1H), 7.09 (dd,J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 6.35 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.78 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.52 (p,J = 7.3 Hz, 1H), 4.20 - 4.04 (m, 1H), 3.77 - 3.64 (m, 1H), 3.55 - 3.44 (m, 1H), 3.44 - 3.28 (m, 2H), 2.22 - 1.97 (m, 2H), 1.99 - 1.70 (m, 9H), 1.73 - 1.52 (m, 1H). MS (ES+): 368.5 (M+1); 370.5 (M+Na)。 流程51
製備2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-(4-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(51a)
化合物51a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (100 mg，0.4 mmol)、2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸鹽(45c ) (170 mg，0.44 mmol)及DIPEA (0.21 mL，1.21 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-(4-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(51a ) (25 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.54 (s, 1H, D2 O可交換), 8.10 (s, 1H), 7.54 - 7.40 (m, 2H), 7.11 - 6.97 (m, 1H), 6.72 (d, J = 9.4 Hz, 2H), 6.49 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.77 (s, 4H), 3.71 (s, 3H), 3.64 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 3.57 (s, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -114.02; MS (ES+): 483.5 (M+1), 505.5 (M+Na)。 流程52
製備2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(52a )
化合物52a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(8b ) (100 mg，0.32 mmol)、2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸鹽(45c ) (247 mg，0.64 mmol)及DIPEA (0.22 mL，1.28 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(52a ) (25 mg，14%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.63 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.72 - 7.64 (m, 2H), 7.57 (dd, J = 8.6, 7.2 Hz, 2H), 7.47 (dd, J = 2.5, 1.7 Hz, 1H), 7.43 - 7.34 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.72 (d, J = 9.5 Hz, 2H), 6.47 (dd, J = 4.5, 2.5 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.76 - 3.65 (m, 6H), 3.64 - 3.58 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -114.00 (d, J = 9.4 Hz); MS (ES+): 545.6 (M+1), 567.6 (M+Na), (ES-): 543.5 (M-1)。 流程53
製備1-(4-(4-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌嗪-1-基)-2-苯基乙酮(53b )
化合物53b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4b ) (100 mg，0.4 mmol)、2-苯基-1-(哌嗪-1-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸鹽(53a ) (256 mg，0.80 mmol；根據2003年3月20日由Levy, Daniel E.等人在PCT國際申請案2003022214中所報道之程序製備)及DIPEA (0.28 mL，1.61 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之1-(4-(4-(1-甲基-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌嗪-1-基)-2-苯基乙酮(11 mg，7%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.38 (s, 1H, D2 O可交換), 7.50 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.45 - 7.36 (m, 2H), 7.36 - 7.29 (m, 2H), 7.29 - 7.19 (m, 3H), 7.18 - 7.09 (m, 1H), 6.42 (dd, J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.59 (m, 4H), 3.60 - 3.43 (m, 4H); MS (ES+): 417.6 (M+1), 439.5 (M+Na), (ES-): 415.5 (M-1)。 流程54
製備4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(54a )
化合物54a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(16a ) (100 mg，0.31 mmol)、哌嗪-1-甲酸第三丁酯(170 mg，0.92 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之4-(4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(54a ) (92 mg，63%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), D2 O可交換, 8.22 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 (dd,J = 1.9, 0.9 Hz, 1H), 7.55 (dd,J = 8.7, 7.1 Hz, 2H), 7.43 - 7.35 (m, 1H), 7.12 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 3.85 - 3.71 (m, 4H), 3.50 - 3.38 (m, 4H), 1.43 (s, 9H); MS (ES+): 478.6 (M+1), 500.5 (M+Na)。 流程55
製備(S)-(1-(4-((1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(55c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(55b )
化合物55b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (423 mg，2.25 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.18 mL，6.75 mmol)及1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(55a ) (511 mg，2.70 mmol)來製備。由此得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(55b ) (635 mg，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.11 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.63 - 7.49 (m, 2H), 7.40 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.19 - 7.06 (m, 2H), 6.71 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 -D2 O) δ 8.02 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 1.6, 0.8 Hz, 1H), 7.74 - 7.67 (m, 1H), 7.56 - 7.47 (m, 2H), 7.30 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.12 - 7.00 (m, 2H), 6.70 (dd, J = 4.6, 2.7 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H). MS (ES+): 341.3 (M+1), 363.4 (M+Na); MS (ES-): 339.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(55c )
化合物55c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(55b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(148 mg，1.47 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.87 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(55c ) (83 mg，70%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.49 (s, 1H, D2 O可交換), 8.11 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 9.0 Hz, 2H), 7.38 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 9.0 Hz, 2H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 4.94 - 4.81 (m, 1H, D2 O可交換), 4.27 - 4.08 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.80 - 3.70 (m, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.44 - 3.30 (m, 2H), 2.13 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 406.5 (M+1)。 流程56
製備(S)-(1-(4-((1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(56c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(56b )
化合物56b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (373 mg，1.99 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.04 mL，5.96 mmol)及1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(56a ) (451 mg，2.38 mmol)來製備。由此得到呈淺黃色固體狀之2-氯-N-(1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(56b ) (556 mg，82%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.34 (s, 1H), 8.29 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 7.23 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 7.03 - 6.93 (m, 1H), 6.72 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 -D2 O) δ 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.53 - 7.41 (m, 1H), 7.34 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.21 - 7.14 (m, 2H), 7.03 - 6.93 (m, 1H), 6.71 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H); MS (ES+): 341.4 (M+1); MS (ES-): 339.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(56c )
化合物56c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(56b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(148 mg，1.47 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.87 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(56c ) (58 mg，49%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.53 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.45 - 7.34 (m, 2H), 7.35 - 7.23 (m, 2H), 7.15 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.97 - 6.86 (m, 1H), 6.39 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 5.02 - 4.68 (m, 1H, D2 O可交換), 4.30 - 4.11 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.74 (dd,J = 9.9, 3.5 Hz, 1H), 3.61 - 3.46 (m, 1H), 3.47 - 3.26 (m, 2H), 2.17 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 406.5 (M+1)。 流程57
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(57c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b )
化合物57b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (226 mg，1.2 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.63 mL，3.61 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (300 mg，1.02 mmol)來製備。由此得到呈白色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (410 mg，85%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.31 (s, 1H), 8.21 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.72 (dd, J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 -D2 O) δ 8.14 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 6.88 (s, 2H), 6.71 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.67 (s, 3H); MS (ES+): 401.4 (M+1); MS (ES-): 399.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(57c )
化合物57c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (100 mg，0.25 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(126 mg，1.25 mmol)及DIPEA (0.13 mL，0.74 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(57c ) (18 mg，16%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.54 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.14 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.84 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.29 - 4.15 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.79 - 3.68 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.61 - 3.47 (m, 1H), 3.49 - 3.24 (m, 2H), 2.12 - 1.75 (m, 4H); MS (ES+): 466.5 (M+1), 488.5 (M+Na)；化合物57c 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化來自上文步驟2之粗反應混合物，隨後凍乾而獲得；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.78 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.12 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.02 (s, 2H), 6.43 (dd, J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 4.26 - 4.13 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.78 - 3.21 (m, 7H), 2.08 - 1.80 (m, 4H). MS (ES+): 466.3 (M+1). MS (ES-): 500.2 (M+Cl)。 流程58
製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(58b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(58a )
化合物58a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (261 mg，1.27 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.44 mL，2.54 mmol)及1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(25a ) (225 mg，1.27 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(58a ) (268 mg，61%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.96 (s, 1H, D2 O可交換), 8.29 - 8.18 (m, 2H), 7.91 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 - 7.65 (m, 2H), 7.48 - 7.35 (m, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -115.27; MS (ES+): 346.3 (M+1), 368.3 (M+Na); (ES-): 344.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(58b ).
化合物58b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(58a ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(88 mg，0.86 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(4-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(58b ) (69 mg，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H, D2 O可交換), 8.15 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.01 - 7.88 (m, 2H), 7.77 (s, 2H), 7.36 (t,J = 8.4 Hz, 2H), 7.10 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 5.35 - 4.91 (m, 1H, D2 O可交換), 4.23 (s, 1H), 3.92 - 3.69 (m, 1H), 3.69 - 3.18 (m, 3H), 2.15 - 1.73 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -116.11; MS (ES+): 411.4 (M+1), 433.4 (M+Na); (ES-): 409.4 (M-1)。 流程59
製備3-(4-((2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59c )
步驟1：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59b )
化合物59b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (145 mg，0.77 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.4 mL，2.31 mmol)及3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59a ) (125 mg，0.77 mmol)來製備。由此得到呈黃色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59b ) (168 mg，70%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.17 (s, 1H), 7.86 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.73 (dt, J = 2.9, 1.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.77 - 6.60 (m, 1H), 4.77 (p, J = 8.6 Hz, 1H), 3.31 - 3.12 (m, 1H), 2.96 - 2.81 (m, 2H), 2.79 - 2.63 (m, 2H); MS (ES+): 314.3 (M+1); MS (ES-): 312.3 (M-1); HPLC純度：98.51%。
步驟2：製備3-(4-((2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59c )
化合物59c 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59b ) (60 mg，0.19 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(85 mg，0.57 mmol)及DIPEA (0.1 mL，0.57 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之3-(4-((2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59c ) (41 mg，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (s, 1H, D2 O可交換), 8.62 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.71 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.66 (td,J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 1H), 7.17 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.16 - 6.97 (m, 2H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.32 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 4.68 - 4.40 (m, 1H), 3.96 - 3.76 (m, 1H), 3.76 - 3.50 (m, 1H), 3.33 - 3.21 (m, 1H), 3.02 - 2.61 (m, 4H), 2.44 - 2.26 (m, 1H), 2.16 - 1.71 (m, 3H); MS (ES+): 426.5 (M+1), 448.5 (M+Na)。 流程60
製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(60b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(60a )
化合物60a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (261 mg，1.27 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.44 mL，2.54 mmol)及1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(25a ) (225 mg，1.27 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(60a ) (270 mg，61%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H, D2 O可交換), 8.21 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.04 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 3H), 7.48 - 7.37 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -115.31; MS (ES+): 346.3 (M+1), 368.3 (M+Na); (ES-): 344.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(60b )
化合物60b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(60a ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(88 mg，0.86 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(4-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(60b ) (25 mg，22%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.17 (s, 1H, D2 O可交換), 8.17 (s, 1H), 7.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.91 - 7.61 (m, 2H), 7.47 - 7.21 (m, 3H), 7.03 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.17 - 4.77 (m, 1H, D2 O可交換), 4.39 - 3.99 (m, 1H), 3.89 - 3.19 (m, 4H), 2.13 - 1.81 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -73.43; MS (ES+) 411.4 (M+1), 433.4 (M+Na)。 流程61
製備3,3-二甲基-1-(4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丁-1-酮(61b )
化合物61b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(31b ) (100 mg，0.31 mmol)、第三-3,3-二甲基-1-(哌嗪-1-基)丁-1-酮2,2,2-三氟乙酸鹽 (61a ) (182 mg，0.61 mmol；根據由Bisacchi, Gregory S.等人在美國專利6,335,324中描述之程序製備)及DIPEA (0.21 mL，1.22 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之3,3-二甲基-1-(4-(4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丁-1-酮(61b ) (95 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.26 (s, 1H, D2 O可交換), 8.25 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 2H), 7.61 - 7.52 (m, 2H), 7.45 - 7.34 (m, 1H), 7.13 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.87 - 3.74 (m, 4H), 3.71 - 3.54 (m, 4H), 2.30 (s, 2H), 1.01 (s, 9H); MS (ES+): 476.6 (M+1), 498.5 (M+Na), (ES-): 474.6 (M-1)。 流程62
製備2-(乙基(4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)乙醇(62b )
化合物62b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(31b ) (100 mg，0.31 mmol)、2-(乙胺基)乙醇(62a ) (82 mg，0.92 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺棕色固體狀之2-(乙基(4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)乙醇(62b ) (43 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H, D2 O可交換), 8.23 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.80 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.75 - 7.59 (m, 2H), 7.53 (t,J = 7.7 Hz, 2H), 7.42 - 7.27 (m, 1H), 7.02 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H, D2 O可交換), 3.82 - 3.54 (m, 6H), 1.31 - 1.06 (m, 3H); MS (ES+): 381.4 (M+1), 403.4 (M+Na), (ES-): 379.4 (M-1)。 流程63
製備(S)-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(63a )
化合物63a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37b ) (70 mg，0.24 mmol)、(S)-2-苯基吡咯啶(54 mg，0.36 mmol)及DIPEA (0.13 mL，0.73 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-苯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(63a ) (65 mg，67%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (s, 1H, D2 O可交換), 7.88 - 7.79 (m, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 1H), 7.36 - 7.23 (m, 4H), 7.23 - 7.15 (m, 1H), 7.09 - 6.97 (m, 2H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.41 - 5.30 (m, 1H), 4.66 - 4.43 (m, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 1H), 3.67 - 3.51 (m, 1H), 2.41 - 2.08 (m, 6H), 2.02 - 1.69 (m, 4H); MS (ES+): 400.6 (M+1), 422.5 (M+Na); HPLC純度：98.69%。 流程64
製備(S)-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(64a )
化合物64a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(37b ) (60 mg，0.21 mmol)、(S )-2-(吡咯啶-2-基)吡啶二鹽酸鹽(55 mg，0.25 mmol)及DIPEA (0.11 mL，0.62 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之(S)-N-(1-環丁基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(64a ) (10 mg，12%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.26 (s, 1H, D2 O可交換), 8.67 - 8.48 (m, 1H), 7.67 (td,J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.56 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.30 - 7.13 (m, 2H), 7.08 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 7.05 - 6.89 (m, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.35 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 4.65 - 4.36 (m, 1H), 3.90 - 3.72 (m, 1H), 3.68 - 3.49 (m, 1H), 2.47 - 2.25 (m, 4H), 2.26 - 2.11 (m, 1H), 2.12 - 1.99 (m, 1H), 2.01 - 1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.65 (m, 3H). MS (ES+): 401.5 (M+1), 423.5 (M+Na); HPLC純度：96.63%。 流程65
製備(S)-(1-(4-((1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(65c )
步驟1：製備N-(1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(65b )
化合物65b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (199 mg，1.06 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.55 mL，3.18 mmol)及1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-胺(65a ) (231 mg，1.17 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之N-(1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(65b ) (271 mg，73%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.36 (s, 2H), 8.18 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.46 (dd, J = 3.1, 2.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 6.72 (dd, J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 6.52 (ddd, J = 3.0, 2.0, 0.9 Hz, 1H); MS (ES+): 350.4 (M+1); MS (ES-): 348.3 (M-1), 384.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(65c )
化合物65c 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(65b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(145 mg，1.43 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(65c ) (81 mg，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.26 (s, 1H, D2 O可交換), 10.50 (s, 1H, D2 O可交換), 8.14 (s, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.70 - 7.60 (m, 2H), 7.46 - 7.41 (m, 1H), 7.41 - 7.37 (m, 1H), 7.33 (dd,J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 7.20 - 7.11 (m, 1H), 6.53 - 6.46 (m, 1H), 6.40 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.06 - 4.37 (m, 1H), 4.30 - 4.09 (m, 1H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.58 - 3.48 (m, 1H), 3.48 - 3.23 (m, 2H), 2.15 - 1.71 (m, 4H); MS (ES+): 415.5 (M+1); HPLC純度： 99.33%。 流程66
製備(S)-(1-(4-((1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(66c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(66b )
化合物66b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (112 mg，0.59 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.31 mL，1.78 mmol)及1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-胺(66a ) (95mg，0.59 mmol；2011年7月28日由Bleicher, Konrad等人在PCT國際申請案2011089132中所報道之程序製備)來製備。由此在藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至40% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈固體狀之2-氯-N-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(66b ) (27 mg，15%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.37 (s, 1H), 8.64 - 8.49 (m, 2H), 8.25 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.11 - 7.97 (m, 1H), 7.86 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.80 - 7.75 (m, 1H), 7.48 - 7.33 (m, 2H), 6.72 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 312.3 (M+1); MS (ES-): 310.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(66c )
化合物66c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(66b ) (27 mg, 0.09 mmol)、(S )-吡咯啶-2-基甲醇(44 mg，0.43 mmol)及DIPEA (0.05 mL，0.26 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(66c ) (9 mg，28%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.58 (s, 1H, D2 O可交換), 8.51 (s, 1H), 8.48 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.98 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.47 - 7.31 (m, 2H), 7.22 - 7.09 (m, 1H), 6.46 - 6.37 (m, 1H), 5.02 - 4.81 (m, 1H, D2 O可交換), 4.26 - 4.11 (m, 1H), 3.90 - 3.73 (m, 1H), 3.63 - 3.46 (m, 1H), 3.47 - 3.15 (m, 2H), 2.19 - 1.69 (m, 4H); MS (ES+): 377.4 (M+1), 399.4 (M+Na); HPLC純度：97.04%。 流程67
製備(S)-(1-(4-((1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(67c )
步驟1：製備N-(1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(67b )
化合物67b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (215 mg，1.14 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.6 mL，3.43 mmol)及1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-胺(67a ) (249 mg，1.26 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之N-(1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(67b ) (314 mg，79%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.36 (s, 1H), 11.33 (s, 1H), 8.16 - 8.05 (m, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.80 - 7.71 (m, 2H), 7.61 - 7.52 (m, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 1H), 7.37 - 7.25 (m, 1H), 6.72 (p, J = 3.4, 2.9 Hz, 1H), 6.58 - 6.46 (m, 1H); MS (ES+): 350.4 (M+1), 372.4 (M+Na); MS (ES-): 348.3 (M-1), 384.3 (M+Cl); HPLC純度：98.41%。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(67c )
化合物67c 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(67b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(145 mg，1.43 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(67c ) (80 mg，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.30 (s, 1H, D2 O可交換), 10.48 (s, 1H, D2 O可交換), 8.09 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.55 - 7.43 (m, 2H), 7.44 - 7.32 (m, 2H), 7.19 - 7.11 (m, 1H), 6.53 - 6.47 (m, 1H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.87 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.28 - 4.06 (m, 1H), 3.86 - 3.67 (m, 1H), 3.57 - 3.45 (m, 1H), 3.47 - 3.25 (m, 2H), 2.11 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 415.5 (M+1); MS (ES-): 413.5 (M-1), 449.4 (M+Cl); HPLC純度：99.37 %。 流程68
製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(68a )
化合物68a 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59b ) (50 mg，0.16 mmol)、( S )-吡咯啶-2-基甲醇(81 mg，0.8 mmol)及DIPEA (0.08 mL，0.48 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁腈(68a ) (36 mg，60%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.38 (s, 1H, D2 O可交換), 7.72 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.36 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.09 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.80 (t,J = 5.2 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.77 - 4.63 (m, 1H), 4.23 - 4.04 (m, 1H), 3.81 - 3.67 (m, 1H), 3.57 - 3.45 (m, 1H), 3.45 - 3.33 (m, 2H), 3.27 - 3.12 (m, 1H), 2.98 - 2.62 (m, 4H), 2.16 - 1.75 (m, 4H); MS (ES+): 379.5 (M+1); 401.5 (M+Na)。 流程69
製備N-(1-環戊基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(69a )
化合物69a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-環戊基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(50b ) (50 mg，0.17 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(73 mg，0.5 mmol)及DIPEA (0.09 mL，0.5 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淡黃色固體狀之N-(1-環戊基-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(69a ) (48 mg，70%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.26 (s, 1H, D2 O可交換), 8.61 - 8.50 (m, 1H), 7.67 (td,J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.51 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.26 - 7.13 (m, 2H), 7.13 - 7.05 (m, 1H), 7.04 - 6.89 (m, 1H), 6.36 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.31 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 4.43 - 4.23 (m, 1H), 3.79 (t,J = 9.3 Hz, 1H), 3.68 - 3.50 (m, 1H), 2.41 - 2.29 (m, 1H), 2.18 - 1.87 (m, 5H), 1.89 - 1.53 (m, 6H); MS (ES+): 415.5 (M+1), 437.5 (M+Na); HPLC純度：98.48 %。 流程70
製備(S)-(1-(6-(羥甲基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(70f )
步驟1：製備2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(70a )
在0℃下，向2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (4 g，19.51 mmol)於THF (100 mL)中之溶液中添加硫代甲醇鈉(1.418 g，19.51 mmol)且使其達到室溫。反應混合物藉由添加1 N HCl淬滅且倒入水(200 mL)中。經分離之固體藉由過濾收集，真空乾燥，得到呈棕色固體狀之2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(70a ) (3.76 g，89%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.96 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 2.68 (s, 3H)。
步驟2：製備2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲醛(70b )
在-78℃下在氮氣下，向2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(70a ) (3.68 g，17.0 mmol)於無水THF (100 mL)中之溶液中逐滴添加正丁基鋰(於己烷中之1.6 M溶液，21.25 mL，34.0 mmol)。反應物在-78℃下攪拌1.5小時且藉由逐滴添加N,N-二甲基甲醯胺(2.63 mL，34.0 mmol)緩慢淬滅。在-78℃下攪拌反應物2小時且使其升溫至室溫隔夜。將反應混合物冷卻至0℃，用1 N HCl淬滅且用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取。分離有機層，用水(2 × 20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-100%乙酸乙酯/己烷溶離]純化，得到呈棕色固體狀之2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲醛(70b ) (2.48 g，60%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 2.73 (s, 3H); MS (ES+): 277.2 (M+Na)。
步驟3：製備2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲醛(70c )
在0℃下，經30分鐘之時段向2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲醛(70b ) (2 g，8.17 mmol)於乙腈(50 mL)及二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加含硫醯氯(3.32 mL，40.9 mmol)之二氯甲烷(20 mL)。反應混合物在0℃下攪拌10分鐘且用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅。將反應混合物真空濃縮以移除有機溶劑且用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取水性殘餘物。合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈深棕色固體狀之2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲醛(70c ) (1.9 g，100%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 8.62 (s, 1H)。
步驟4：製備(2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(70d )
在室溫下，向2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲醛(70c ) (1 g，4.29 mmol)於THF (30 mL)及水(1 mL)中之溶液中添加硼氫化鈉(162 mg，4.29 mmol)且攪拌20分鐘。反應混合物用乙酸乙酯(100 mL)稀釋，用1 N HCl淬滅。分離有機層，用鹽水洗滌，乾燥且濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用0-100%乙酸乙酯/己烷溶離]純化，得到呈白色固體狀之(2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(70d ) (450 mg，45%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.43 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 6.07 (t, J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.83 (dd, J = 5.8, 1.3 Hz, 2H)。
步驟5：製備(2-氯-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(70e )
化合物70e 係根據流程1中所報道之程序，由(2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(70d ) (40 mg，0.17 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.12 mL，0.68 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(8a ) (50 mg，0.26 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之(2-氯-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(70e ) (25 mg，41%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.25 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.66 (dd,J = 8.4, 1.4 Hz, 2H), 7.57 (t,J = 7.9 Hz, 2H), 7.46 - 7.35 (m, 1H), 5.83 (t,J = 5.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.72 (d,J = 5.6 Hz, 2H); MS (ES+): 380.3(M+Na), (ES-): 356.2 (M-1)。
步驟6：製備(S)-(1-(6-(羥甲基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(70f )
化合物70f 係根據流程2中所報道之程序，由(2-氯-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(70e ) (24 mg，0.07 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(20 mg，0.2 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(6-(羥甲基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(70f ) (10 mg，35%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.07 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (s, 1H), 7.97 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.85 - 7.67 (m, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.58 - 7.42 (m, 2H), 7.39 - 7.28 (m, 1H), 5.50 (t,J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 5.05 - 4.82 (m, 1H, D2 O可交換), 4.57 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.42 - 3.99 (m, 1H), 3.97 - 3.34 (m, 4H), 2.16 - 1.76 (m, 4H); MS (ES+): 423.4 (M+1), (ES-): 421.3 (M-1), 457.4 (M+Cl)。 流程71
製備(S)-(1-(4-((1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(71c )
步驟1：製備N-(1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(71b )
化合物71b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (357 mg，1.9 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.0 mL，5.7 mmol)及1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-胺(71a ) (340 mg，2.28 mmol)來製備。由此得到呈黃色固體狀之N-(1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(71b ) (496 mg，87%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.92 (s, 1H), 11.34 (s, 1H), 8.35 - 8.13 (m, 1H), 8.02 - 7.93 (m, 1H), 7.93 - 7.81 (m, 1H), 7.81 - 7.66 (m, 1H), 7.52 - 7.26 (m, 1H), 6.83 - 6.68 (m, 1H), 6.67 - 6.53 (m, 1H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 /D2 O) δ 8.14 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.33 - 7.26 (m, 1H), 6.71 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 2.5 Hz, 1H); MS (ES+): 301.3(M+1); MS (ES-): 299.3(M-1); HPLC純度：98.56%。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(71c )
化合物71c 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(71b ) (90 mg，0.3 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(151 mg，1.5 mmol)及DIPEA (0.16 mL，0.9 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(71c ) (86 mg，79%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.94 (s, 1H, D2 O可交換), 10.54 (s, 1H, D2 O可交換), 8.15 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.86 (dd,J = 2.4, 1.1 Hz, 1H), 7.39 (dd,J = 2.4, 1.7 Hz, 1H), 7.13 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.86 (t,J = 5.6 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.25 - 4.04 (m, 1H), 3.88 - 3.71 (m, 1H), 3.58 - 3.45 (m, 1H), 3.45 - 3.24 (m, 2H), 2.17 - 1.70 (m, 4H); MS (ES+): 366.5(M+1), 388.5 (M+Na); HPLC純度：99.33%。 流程72
製備(S)-(1-(4-((1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(72c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(72b )
化合物72b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (313 mg，1.67 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.87 mL，5.0 mmol)及1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(72a ) (365 mg，1.67 mmol)來製備。由此得到呈固體狀之2-氯-N-(1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(72b ) (492 mg，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.32 (s, 1H, D2 O可交換), 8.29 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 6.72 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 6.54 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 3.83 (s, 6H); MS (ES+): 371.4 (M+1); MS (ES-): 369.3 (M-1); HPLC純度：98.98%。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(72c )
化合物72c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(72b ) (100 mg，0.27 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(136 mg，1.35 mmol)及DIPEA (0.14 mL，0.81 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(72c ) (73 mg，62%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.53 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (dd,J = 2.4, 1.7 Hz, 1H), 7.14 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.86 (d,J = 2.2 Hz, 2H), 6.47 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.82 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.27 - 4.13 (m, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.78 - 3.65 (m, 1H), 3.62 - 3.48 (m, 1H), 3.49 - 3.24 (m, 2H), 2.10 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 436.5 (M+1), 458.4 (M+Na); MS (ES-): 434.4 (M-1); HPLC純度：98.94%。 流程73
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(73c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(73b )
化合物73b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (313 mg，1.67 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.87 mL，5.0 mmol)及1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(73a ) (365 mg，1.67 mmol)來製備。由此得到呈固體狀之2-氯-N-(1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(73b ) (513 mg，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.32 (s, 1H, D2 O可交換), 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.49 - 7.34 (m, 1H), 7.25 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.16 - 7.06 (m, 2H), 6.72 (dd, J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.80 (s, 3H); MS (ES+): 371.5 (M+1); MS (ES-): 369.3 (M-1); HPLC純度：99.51%。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(73c )
化合物73c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(73b ) (100 mg，0.27 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(136 mg，1.35 mmol)及DIPEA (0.14 mL，0.81 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺灰白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(73c ) (38 mg，32%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.51 (s, 1H, D2 O可交換), 8.16 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.42 - 7.35 (m, 1H), 7.23 (d,J = 8.3 Hz, 2H), 7.14 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 6.39 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.85 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換 ), 4.19 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.80 - 3.67 (m, 1H), 3.60 - 3.47 (m, 1H), 3.47 - 3.25 (m, 2H), 2.09 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 436.5 (M+1); MS (ES-): 434.4 (M-1)。 流程74
製備N-(1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(74a )
化合物74a 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(71b ) (90 mg，0.3 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(133 mg，0.9 mmol)及DIPEA (0.16 mL，0.9 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈微黃色固體狀之N-(1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(74a ) (53 mg，43%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.93 (s, 1H, D2 O可交換), 10.43 (s, 1H, D2 O可交換), 8.40 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.93 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.73 - 7.46 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.20 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.17 - 7.03 (m, 2H), 6.69 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 6.38 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.34 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 3.98 - 3.78 (m, 1H), 3.78 - 3.50 (m, 1H), 2.44 - 2.27 (m, 1H), 2.11 - 1.71 (m, 3H); MS (ES+): 413.5 (M+1), 435.5 (M+Na); HPLC純度：98.54%。 流程75
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(75b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75a )
化合物75a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (304 mg，1.48 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.52 mL，2.97 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (370 mg，1.48 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75a ) (403 mg，65%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.86 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d,J = 6.0 Hz, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.39 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 440.3 (M+Na), (ES-): 416.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(75b )
化合物75b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75a ) (100 mg，0.24 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(73 mg，0.72 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(75b ) (93 mg，81%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H, D2 O可交換), 8.22 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.09 - 7.98 (m, 1H), 7.93 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.10 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 5.29 - 4.79 (m, 1H, D2 O可交換), 4.53 - 4.04 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.81 - 3.55 (m, 5H), 3.46 - 3.24 (m, 2H), 2.10 - 1.69 (m, 4H); MS (ES+): 483.5 (M+1), 505.5 (M+Na), 965.8 (2M+1), 987.8 (2M+Na), (ES-): 481.5 (M-1)。 流程76
製備(S)-(1-(4-((1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(76c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(76b )
化合物76b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (0.5 g，2.65 mmol)在DCM (20 mL)中使用DIPEA (1.03 g，7.97 mmol)及1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-胺(76a ) (0.67 g，3.19 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-80%乙酸乙酯/己烷溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(76b ) (300 mg，31%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.45 (s, 1H), 9.04-9.03 (s, 1H), 8.23-8.20 (d, 1H), 8.11-7.96 (d, 2H), 7.93-7.91 (t, 1H), 7.84-7.82 (m, 3H), 7.77-7.76 (m, 1H), 7.45-7.44 (s, 1H), 6.75-6.74 (s, 1H); MS (ES+): 362.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(76c )
2-氯-N-(1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(76b ) (300 mg，0.83 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(838 mg，8.29 mmol)於NMP (10 mL)中之攪拌溶液在150℃下加熱16小時。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取反應混合物。合併之有機層用鹽水溶液(100 mL)洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮。所獲得之粗產物藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-10%乙酸乙酯/甲醇溶離)純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(76c ) (110 mg，31%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.63 (s, 1H, D2 O可交換), 9.03 (dd,J = 4.1, 1.6 Hz, 1H), 8.30 - 8.10 (m, 2H), 8.02 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 7.96 - 7.86 (m, 2H), 7.80 (dd,J = 7.4, 1.2 Hz, 1H), 7.66 (dd,J = 8.6, 4.2 Hz, 1H), 7.40 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.18 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.41 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.51 (t,J = 5.3 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.10 - 3.96 (m, 1H), 3.63 - 3.49 (m, 1H), 3.47 - 3.20 (m, 3H), 1.98 - 1.68 (m, 4H); MS (ES+) 449.5 (M+Na); HPLC純度：94.15%。 流程77
製備(S)-(1-(7-(4-甲氧基苯基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(77d )
步驟1：製備7-溴-2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(77b )
化合物77b 係根據流程1中所報道之程序，由7-溴-2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(77a ) (50 mg，0.19 mmol；CAS# 1008112-03-5)在2-丙醇(6 mL)中使用DIPEA (0.67 mL，3.83 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (250 mg，1.28 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，40 g，用乙酸乙酯及甲醇/己烷(0至100%)之9:1混合物溶離]純化後得到呈白色固體狀之7-溴-2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(77b ) (22 mg，30%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.50 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.71 - 7.63 (m,2H), 7.57 (dd,J = 8.8, 7.1 Hz, 2H), 7.52 (d,J = 4.7 Hz,1H), 7.46 - 7.37 (m, 1H), 6.91 (d,J = 4.7 Hz, 1H).MS (ES+): 389.2, 391.3 (M+2); MS (ES-): 387.2, 389.1 (M+2)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-溴-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(77c )
化合物77c 係根據流程2中所報道之程序，由7-溴-2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(77b ) (50 mg，0.13 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.04 mL，0.39 mmol)及DIPEA (0.07 mL，0.39 mmol)在NMP (0.5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(4g)，用0至20% DMA-80/CHCl3 溶離]純化後得到(S)-(1-(7-溴-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(77c )，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟中。
步驟3：製備(S)-(1-(7-(4-甲氧基苯基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(77d )
在密封反應器中，在正壓氮氣流下，(S)-(1-(7-溴-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(77c ) (20 mg，0.04 mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(33 mg，0.22 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (7 mg，8.80 µmol)、碳酸鈉(12 mg，0.11 mmol)於二噁烷(3 mL)及水(1 mL)中之漿液在90℃下攪拌2小時。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc (50 mL)稀釋且經由矽藻土墊過濾。反應混合物藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化。合併含有產物之適當溶離份且濃縮以移除乙腈。用飽和碳酸氫鈉鹼化水溶液且藉由過濾收集所獲得之固體，真空乾燥，得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(4-甲氧基苯基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(77d ) (6 mg，28%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.53 (s, 1H, D2 O可交換), 8.29 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.22 - 8.13 (m, 2H), 8.01 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.76 (d,J = 7.9Hz, 2H), 7.51 (t,J = 7.8 Hz, 2H), 7.36 (t,J = 7.3 Hz, 1H), 7.29 (d,J = 4.6 Hz,1H), 7.04 - 6.96 (m, 2H), 6.81 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.82 (s, 1H),3.79 (s, 3H), 3.64 - 3.52 (m, 1H), 3.44 (q,J = 10.0, 9.2 Hz, 2H), 2.16 - 1.82(m, 4H); MS (ES+): 482.6 (M+1)。 流程78
製備(S)-(1-(6-(羥甲基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(78f )
步驟1：製備2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[3,2-d]嘧啶(78a )
化合物78a 係根據流程70之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (2 g，9.75 mmol)及硫代甲醇鈉(0.75 g，10.24 mmol)製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[3,2-d]嘧啶(78a ) (1.85 g，88%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.47 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.60 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 2.75 (s, 3H)。
步驟2：製備2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(78b )
化合物78b 係根據流程70之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[3,2-d]嘧啶(78a ) (1 g，4.61 mmol)製備。由此在處理後得到呈紅色固體狀之2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(78b ) (1.05 g，93%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 2.77 (s, 3H)。
步驟3：製備2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(78c )
化合物78c 係根據流程70之步驟3中所報道之程序，由2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(78b ) (200 mg，0.82 mmol)製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(78c ) (75 mg，39%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.29 (s, 1H), 8.63 (s, 1H)。
步驟4：製備(2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(78d )
化合物78d 係根據流程70之步驟4中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(78c ) (70 mg，0.3 mmol)製備。由此在處理後得到呈淺橙色固體狀之(2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(78d ) (95 mg)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.43 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 6.07 (t, J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.83 (dd, J = 5.8, 1.3 Hz, 2H)。
步驟5：製備(2-氯-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(78e )
化合物78e 係根據流程1中所報道之程序，由(2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(78d ) (90 mg，0.38 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.1 mL，0.57 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(8a ) (91 mg，0.57 mmol)來製備。由此得到呈深棕色固體狀之(2-氯-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(78e ) (45 mg，33%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.99 - 10.67 (m, 1H, D2 O可交換), 8.27 (s, 1H), 7.94 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.68 (d,J = 7.9 Hz, 2H), 7.57 (t,J = 7.8 Hz, 2H), 7.41 (t,J = 7.3 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.92 (s, 1H, D2 O可交換), 4.78 (d,J = 5.4 Hz, 2H); MS (ES+): 358.3 (M+1), (ES-): 356.3 (M-1)。
步驟6：製備(S)-(1-(6-(羥甲基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(78f )
化合物78f 係根據流程2中所報道之程序，由(2-氯-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(78e ) (39 mg，0.11 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(33 mg，0.33 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(6-(羥甲基)-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(78f ) (12 mg，26%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.81 - 7.59 (m, 2H), 7.51 (t,J = 7.7 Hz, 2H), 7.34 (t,J = 7.4 Hz, 1H), 6.93 (d,J = 1.1 Hz, 1H), 5.72 (t,J = 5.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 5.04 (s, 1H, D2 O可交換), 4.70 (dd,J = 5.8, 1.2 Hz, 2H), 4.22 (s, 1H), 3.88 - 3.69 (m, 1H), 3.69 - 3.49 (m, 2H), 3.44 - 3.24 (m, 1H), 2.12 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 423.4 (M+1); (ES-): 421 (M-1); HPLC純度：95.50%。 流程79
製備(S)-(1-(7-(戊-1-烯-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(79d )
步驟1：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b )
化合物79b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79a ) (400 mg，1.85 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.97 mL，5.55 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (635 mg，2.22 mmol)來製備。由此得到呈黃色固體狀之2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (564 mg，71%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.81 (s, 1H), 10.21 (s, 1H), 9.46 (s, 0H), 8.25 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 4.9 Hz, 1H), 7.35 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 3H). MS (ES+): 429.5 (M+1); MS (ES-): 427.3 (M-1)。
步驟2：製備1-(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)戊-1-醇(79c )
在-78℃下，向2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (100 mg，0.23 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中添加n-BuLi (1.6 M，0.32 mL，0.51 mmol)且在-78℃下攪拌4小時。反應混合物用飽和NH4 Cl淬滅且用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥，過濾，真空濃縮且藉由急驟管柱層析(矽膠12g，用0至20% MeOH/DCM溶離)純化，得到呈黃色固體狀之1-(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)戊-1-醇(79c ) (65 mg，57%產率)；1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d ) δ 10.51 (s, 1H), 7.94 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.84 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.65 (s, 2H), 6.58 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 5.16 (dd,J = 7.5, 6.1 Hz, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.88 (s, 3H), 2.14 - 1.79 (m, 2H), 1.65 - 1.21 (m, 4H), 0.91 (t,J = 7.0 Hz, 3H); MS (ES+): 487.5 (M+1); MS (ES-): 485.5 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(1-(7-(戊-1-烯-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(79d )
化合物79d 係根據流程2中所報道之程序，由1-(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)戊-1-醇(79c ) (65 mg，0.13 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(68 mg，0.67 mmol)、DIPEA (0.07 mL，0.4 mmol)在NMP (2.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-(戊-1-烯-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(79d ) (11 mg，15%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.14 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.70 (d,J = 16.1 Hz, 1H), 6.55 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.52 - 6.40 (m, 1H), 4.84 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.30 - 4.17 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.81 - 3.68 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.53 (m, 1H), 3.54 - 3.35 (m, 2H), 2.19 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 2.10 - 1.81 (m, 4H), 1.56 - 1.39 (m, 2H), 0.93 (t,J = 7.2 Hz, 3H); MS (ES+): 534.6 (M+1); MS (ES-): 532.7 (M-1), 568.6 (M+Cl); HPLC純度：94.02%。 流程80
製備(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(80a)
化合物80a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(77c ) (30 mg，0.07 mmol)、1-(第三丁氧基羰基)-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基硼酸(30.0 mg，0.13 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (9.69 mg，0.01 mmol)、碳酸鈉(17.50 mg，0.17 mmol)在二噁烷(3 mL)及水(1 mL)中製備。由此在藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化後得到呈棕色固體狀之(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯( 80a ) (7 mg，19%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.52 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.75 (d,J = 7.9 Hz, 2H), 7.51 (t,J = 7.8 Hz, 2H), 7.35 (t,J = 7.3 Hz, 1H), 7.21 (d,J = 4.9 Hz, 1H), 6.50 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 4.19 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 3.78 (d,J = 9.8 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.38 (s, 1H), 2.59 - 2.53 (m, 1H), 2.10 - 1.91 (m, 4H), 1.43 (s, 9H).19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -73.99; MS (ES+): 557.6 (M+1); 579.6 (M+Na)。 流程81
製備N-(1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(81c )
步驟1：製備2-氯-N-(1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(81b )
化合物81b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (187 mg，0.99 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.52 mL，2.98 mmol)及1'-甲基-1'H-1,4'-二咪唑-4-胺(81a ) (162 mg，0.99 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-N-(1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(81b ) (205 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.31 (s, 1H, D2 O可交換), 8.03 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.71 (dd, J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 315.3(M+1), 337.3 (M+Na); MS (ES-): 313.3(M-1); HPLC純度：99.21%。
步驟2：製備N-(1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(81c )
化合物81c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(81b ) (70 mg，0.22 mmol)、2-(吡咯啶-2-基)吡啶(99 mg，0.67 mmol)及DIPEA (0.12 mL，0.67 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之N-(1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)-2-(2-(吡啶-2-基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(81c ) (55 mg，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.40 (s, 1H, D2 O可交換), 8.44 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.64 - 7.55 (m, 1H), 7.44 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.33 (m, 2H), 7.20 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.21 - 7.10 (m, 1H), 7.12 - 7.08 (m, 1H), 6.38 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.92 - 3.80 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.74 - 3.57 (m, 1H), 2.53 - 2.25 (m, 1H), 2.11 - 1.74 (m, 3H); MS (ES+): 427.5 (M+1), 449.5 (M+Na); HPLC純度：98.90%。 流程82
製備(S)-(1-(4-((1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(82a )
化合物82a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(81b ) (70 mg，0.22 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(112 mg，1.11 mmol)及DIPEA (0.12 mL，0.67 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(4-((1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(82a ) (65 mg，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.52 (s, 1H), 8.01 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.71 - 7.58 (m, 1H), 7.54 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.39 (dd, J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 5.26 - 4.98 (m, 1H), 4.31 - 4.00 (m, 1H), 3.95 - 3.76 (m, 1H), 3.73 - 3.65 (m, 3H), 3.53 - 3.25 (m, 3H), 2.16 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 380.4 (M+1), 402.4 (M+Na); HPLC純度：99.92%。 流程83
製備((S)-1-(4-((1-(3-氟-5-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(83c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(83b )
化合物83b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (365 mg，1.94 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.02 mL，5.83 mmol)及1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(83a ) (379 mg，1.94 mmol)來製備。由此得到呈固體狀之2-氯-N-(1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(83b ) (521 mg，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.33 (s, 1H, D2 O可交換), 8.38 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.65 - 7.53 (m, 2H), 7.45 - 7.36 (m, 1H), 7.31 (tt, J = 9.3, 2.2 Hz, 1H), 6.73 (dd, J = 4.5, 2.6 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -107.50; MS (ES+): 347.3 (M+1); MS (ES-): 345.2 (M-1); HPLC純度：98.86%。
步驟2：製備((S)-1-(4-((1-(3-氟-5-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(83c )
化合物83c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(83b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(146 mg，1.44 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.87 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之((S)-1-(4-((1-(3-氟-5-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(83c ) (66 mg，47%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.55 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (dd,J = 2.5, 1.7 Hz, 1H), 7.14 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.90 - 6.77 (m, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.46 - 6.33 (m, 2H), 4.83 (t,J = 6.1 Hz, 2H, D2 O可交換), 4.27 - 4.08 (m, 1H), 3.83 - 3.75 (m, 1H), 3.74 - 3.64 (m, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.53 - 3.29 (m, 4H), 3.27 - 3.21 (m, 1H), 3.18 - 3.05 (m, 1H), 2.22 - 1.72 (m, 8H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -110.98 - 111.15 (m);19 FCPD NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -111.06; MS (ES+): 493.5 (M+1); MS (ES-): 491.4 (M-1), 527.6 (M+Cl); HPLC純度：96.03%。 流程84
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(84b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a )
化合物84a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (0.4 g，1.95 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.36 mL，7.8 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (669 mg，2.34 mmol)來製備。由此得到呈淡黃色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (275 mg，34%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.01 (s, 1H, D2 O可交換), 8.21 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.91 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.71 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 440.3 (M+Na), (ES-): 416.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(84b )
化合物84b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (100 mg，0.24 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(73 mg，0.72 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(84b ) (65 mg，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.17 (s, 1H, D2 O可交換), 8.23 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.08 - 7.94 (m, 1H), 7.79 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.02 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 4.90 (s, 1H, D2 O可交換), 4.47 - 4.24 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.82 - 3.51 (m, 5H), 3.46 - 3.23 (m, 2H), 2.13 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 483.4 (M+1), 505.4 (M+Na), (ES-): 481.4 (M-1)；化合物84b 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)用乙腈及含0.1% HCl之水溶離純化來自上文步驟2之粗反應混合物來製備；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.36 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.20 - 7.84 (m, 2H), 7.37 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 6.99 (s, 2H), 4.68 - 4.19 (m, 1H), 4.14 - 3.07 (m, 13H), 2.20 - 1.76 (m, 4H). MS (ES+): 483.2 (M+1), 505.3 (M+Na); MS (ES-): 517.2 (M+Cl); HPLC純度：95.11%。 流程85
製備(S)-(1-(7-溴-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(85b )
步驟1：製備7-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(85a )
化合物85a 係根據流程1中所報道之程序，由7-溴-2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(77a ) (500 mg，1.87 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.62 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.71 g，2.47 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，40 g，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之7-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(85a ) (480 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.46 (s, 1H, D2 O可交換), 8.22 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.90 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H). MS (ES+): 481.3 (M+2); MS (ES-): 479.2, 481.2 (M+2)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-溴-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(85b )
化合物85b 係根據流程2中所報道之程序，由7-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(85a ) (50 mg，0.1 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.03 mL，0.31 mmol)及DIPEA (0.06 mL，0.31 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-溴-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(85b ) (16 mg，28%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.68 (s, 1H, D2 O可交換), 8.26 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.28 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.55 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.40 - 3.34 (m, 2H), 2.07 - 1.83 (m, 4H).19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.03; MS (ES+): 544.4, 546.4 (M+2); MS (ES-): 542.4, 544.3 (M+2)。 流程86
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(86b )
步驟1：製備 2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(86a )
化合物86a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯喹唑啉(21a ) (0.4 g，2.01 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.4 mL，8.04 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.69 g，2.41 mmol)來製備。由此得到呈淺粉色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(86a ) (1.26 mmol，63%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.12 (s, 1H, D2 O可交換), 8.75 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.01 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.87 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 7.72 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.61 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+): 412.4 (M+1), 434.3 (M+Na), (ES-): 410.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(86b )
化合物86b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(86a ) (100 mg，0.24 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(74 mg，0.73 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈奶油色固體狀之(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(86b ) (55 mg，48%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.59 - 10.09 (m, 1H, D2 O可交換), 8.47 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.20 - 7.94 (m, 1H), 7.54 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 7.31 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.08 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 6.98 (s, 2H), 5.09 - 4.67 (m, 1H, D2 O可交換), 4.56 - 4.14 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.69 (s, 5H), 3.57 - 3.17 (m, 1H), 2.18 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 477.5 (M+1), (ES-): 475.5 (M-1)。 流程87
製備(S)-(1-(7-溴-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(87c )
步驟1：製備7-溴-2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(87b )
化合物87b 係根據流程1中所報道之程序，由7-溴-2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(87a ) (0.2 g，0.70 mmol；CAS # 41102-25-4)在2-丙醇(6 mL)中使用DIPEA (0.67 mL，3.83 mmol)及1-苯基-1H-咪唑-4-胺, HCl (8a ) (182 mg，0.93 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠12 g，用乙酸乙酯及甲醇/己烷(0至100%)之9:1混合物溶離]純化後得到呈棕色固體狀之7-溴-2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(87b ) (122 mg，43%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.34 (s, 1H, D2 O可交換), 8.44 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.73 - 7.64 (m, 2H), 7.62 - 7.52 (m, 2H), 7.46 - 7.36 (m, 1H). MS (ES-): 404.1, 406.1 (M-2)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-溴-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(87c )
化合物87c 係根據流程2中所報道之程序，由7-溴-2-氯-N-(1-苯基-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(87b ) (50 mg，0.12 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.04 mL，0.39 mmol)及DIPEA (0.06 mL，0.37 mmol)在NMP (0.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈淡黃色固體狀之(S)-(1-(7-溴-4-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(87c ) (22 mg，38%產率)；1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.78 - 8.54 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.21 - 8.01 (m, 1H), 7.74 - 7.54 (m, 4H), 7.54 - 7.43 (m, 1H), 4.38 - 4.15 (m, 1H), 4.14 - 3.93 (m, 2H), 3.93 - 3.65 (m, 2H), 2.44 - 2.21 (m, 1H), 2.21 - 1.99 (m, 2H), 1.99 - 1.79 (m, 1H);19 F NMR (282 MHz, 甲醇-d 4 ) δ -77.25; MS (ES+): 471.3, 473.3 (M+2)。HPLC純度：97.84%。 流程88
製備2-(4-甲氧基苯基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(88a )
化合物88a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (200 mg，0.5 mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(114 mg，0.75 mmol)、PdCl2 (dppf) (73 mg，0.100 mmol)在無水1,4-二噁烷(15 mL)及水(1 mL)中使用碳酸鉀(207 mg，1.5 mmol)來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之2-(4-甲氧基苯基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(88a ) (52 mg，22%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.89 (s, 1H, D2 O可交換), 8.33 - 8.29 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.20 - 8.15 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.08 - 6.97 (m, 4H), 6.73 - 6.67 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.82 (s, 3H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 473.5 (M+1), 495.4 (M+Na), MS (ES-): 471.4 (M-1), 507.4 (M+Cl)。 流程89
製備(S)-(1-(7-(4-甲氧基苯基)-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(89a)
化合物89a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 87c ) (50 mg，0.11 mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(81 mg，0.53 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (4 mg，5.30 µmol)在無水1,4-二噁烷(3 mL)及水(1 mL)中使用碳酸鈉(28 mg，0.27 mmol)來製備。由此在處理、藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化及凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(4-甲氧基苯基)-4-(1-苯基-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 89a ) (20 mg，38%產率)；1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ): δ 8.20 (s, 1H), 8.03 (d,J = 12.4 Hz, 2H), 7.61 (dd,J = 11.6, 7.7 Hz, 4H), 7.53 - 7.42 (m, 3H), 7.13 - 7.03 (m, 2H), 4.18 (s, 1H), 4.12 - 3.96 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.78 (dd,J = 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.73 - 3.63 (m, 1H), 3.60 (s, 1H), 2.34 - 2.17 (m, 1H), 2.05 (s, 2H), 1.87 (s, 1H)。19 F NMR (282 MHz, 甲醇-d 4 ) δ -77.28; MS (ES+): 499.5 (M+1), 521.5 (M+Na); MS (ES-): 497.5 (M-1)。 流程90
製備(S)-(1-(7-(4-甲氧基苯基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(90a)
化合物90a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(85b ) (70 mg，0.13 mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(98 mg，0.64 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (5 mg，6.43 µmol)在無水1,4-二噁烷(3 mL)及水(1 mL)中使用碳酸鈉(34 mg，0.32 mmol)來製備。由此在處理、藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化及凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(4-甲氧基苯基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(90a) (31 mg，42%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.57 (s, 1H, D2 O可交換), 8.33 (s, 1H), 8.17 (d,J = 8.7 Hz, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.06 - 6.92 (m, 4H), 6.81 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.36 - 4.16 (m, 1H), 4.04 (s, 1H), 3.92 - 3.87 (m, 6H), 3.83 - 3.75 (m, 3H), 3.73 - 3.64 (m, 3H), 3.57 -3.31 (m, 2H), 2.12 - 1.85 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.45; MS (ES+): 572.6, 594.6 (M+Na), 610.4 (M+K)。 流程91
製備(S)-1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(91a)
化合物91a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (0.2 g，0.5 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.17 g，1.5 mmol)及DIPEA (0.26 mL，1.5 mmol)於NMP (2 mL)中之攪拌懸浮液製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(91a) (50 mg，19%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.50 (s, 1H, D2 O可交換), 8.22 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.42 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H, D2 O可交換), 7.17 (s, 1H), 7.12 - 7.05 (m, 2H), 7.02 (s, 1H, D2 O可交換), 6.41 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 4.41 (s, 1H), 3.93 (t,J = 4.2 Hz, 6H), 3.68 (t,J = 4.2 Hz, 3H), 3.35 (s, 1H), 2.19 (s, 1H), 1.95 (d,J = 13.6 Hz, 4H); MS (ES+): 479.5 (M+1)。 流程92
製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92d )
步驟1：製備2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92a )
化合物92a 係根據流程70之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(70a ) (0.5 g，2.31 mmol)在THF (20 mL)中使用正丁基鋰(於己烷中之1.6 M溶液，3.03 mL，4.85 mmol)且用氯甲酸異丁酯(0.6 mL，4.61 mmol)淬滅來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用0-100%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈棕色固體狀之2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92a ) (403 mg，55%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.09 (s, 1H), 4.14 (d,J = 6.6 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.04 (hept,J = 6.6 Hz, 1H), 0.97 (d,J = 6.7 Hz, 6H); MS (ES+): 339.2 (M+Na)。
步驟2：製備2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92b ).
化合物92b 係根據流程70之步驟3中所報道之程序，由2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92a ) (375 mg，1.18 mmol)在乙腈(30 mL)及DCM (5 mL)中使用硫醯氯(0.48 mL，5.92 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈糖漿狀之2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92b ) (174 mg，48%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.21 (s, 1H), 4.17 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.06 (dt, J = 13.4, 6.7 Hz, 1H), 0.99 (d, J = 6.8 Hz, 6H)。
步驟3：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92c )
化合物92c 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92b ) (160 mg，0.52 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (0.27 mL，1.57 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.22 g，0.78 mmol)來製備。由此得到呈棕色固體狀之2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92c ) (160 mg，59%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.43 (s, 1H, D2 O可交換), 8.87 (s, 1H), 8.22 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.91 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 4.12 (d,J = 6.5 Hz, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 2.09 - 1.96 (m, 1H), 1.01 (d,J = 6.7 Hz, 6H); MS (ES+): 540.5 (M+Na), (ES-): 516.5 (M-1)。
步驟4：製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92d )
化合物92d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸酯(92c ) (80 mg，0.15 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(46.9 mg，0.46 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在藉由將反應混合物倒入水中且藉由過濾收集分離出之固體，隨後真空乾燥處理後得到呈棕色固體狀之(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸異丁酯(92d ) (65 mg，72%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (s, 1H, D2 O可交換), 8.63 (s, 1H), 8.12 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.08 - 3.99 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.84 - 3.58 (m, 5H), 3.52 - 3.36 (m, 2H), 2.13 - 1.76 (m, 5H), 1.00 (dd,J = 6.6, 1.6 Hz, 6H); MS (ES+): 583.6 (M+1)。 流程93
製備(S)-4-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(93c)
步驟1：製備4-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(93b)
化合物93b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (180 mg，0.97 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.51 mL，2.92 mmol)及4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺鹽酸鹽(93a ) (0.26 g，1.29 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之4-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺( 93b ) (0.26 g，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.37 (s, 1H, D2 O可交換), 8.38 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H, D2 O可交換), 8.08 - 8.01 (m, 2H), 7.98 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.78 (d,J = 2.3 Hz, 2H), 7.75 (s, 1H), 7.50 (s, 1H, D2 O可交換), 7.40 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H). MS (ES+): 354.4; MS (ES-): 352.3。
步驟2：製備(S)-4-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(93c)
化合物93c 係根據流程2中所報道之程序，由4-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺( 93b ) (160 mg，0.45 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.13 mL，1.34 mmol)及DIPEA (0.23 mL，1.34 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-4-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(93c) (102 mg，55%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.57 (s, 1H, D2 O可交換), 8.37 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H, D2 O可交換), 8.05 - 8.01 (m, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.86 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H, D2 O可交換), 7.40 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.16 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.40 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H, D2 O可交換), 4.21 (s, 2H), 3.89 - 3.70 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 2.17 - 1.75 (m, 4H); MS (ES+): 419.4 (M+1); MS (ES-): 453.4 (M+Cl)。 流程94
製備(S)-3-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(94c)
步驟1：製備3-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(94b)
化合物94b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (240 mg，1.29 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA ((0.68 mL，3.87 mmol)及3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺鹽酸鹽(94a ) (0.4 g，1.68 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之3-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(94b) (0.27 g，60%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.36 (s, 1H, D2 O可交換), 8.31 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.11 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.96 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (dt,J = 7.6, 1.3 Hz, 1H), 7.86 - 7.80 (m, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.65 (t,J = 7.9 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.41 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H). MS (ES+): 354.3 (M+1); MS (ES-): 352.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-3-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(94c)
化合物94c 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺( 94b ) (150 mg，0.42 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.13 mL，1.34 mmol)及DIPEA (0.22 mL，1.27 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-3-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(94c) (0.12 g，69%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.57 (s, 1H, D2 O可交換), 8.30 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.15 - 8.08 (m, 2H), 8.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (dd,J = 8.0, 2.1 Hz, 1H), 7.83 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.69 - 7.53 (m, 2H), 7.39 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.14 (dd,J = 4.4, 1.6 Hz, 1H), 6.40 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.97 (s, 1H, D2 O可交換), 4.21 (s, 1H), 3.78 (dd,J = 10.0, 3.5 Hz, 1H), 3.51 (d,J = 18.1 Hz, 2H), 3.35 (s, 1H), 2.11 - 1.82 (m, 4H).19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -73.49; MS (ES+): 419.5 (M+1); MS (ES-): 453.4 (M+Cl)。流程95
製備(S)-1-(4-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(95c)
步驟1：製備1-(4-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(95b)
化合物95b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (240 mg，1.3 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.51 mL，2.92 mmol)及1-(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮鹽酸鹽(95a ) (0.4 g，1.68 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之1-(4-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(95b) (0.26 g，57%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.40 (s, 1H, D2 O可交換), 8.45 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.18 - 8.09 (m, 2H), 8.01 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 - 7.80 (m, 2H), 7.79 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.41 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 2.62 (s, 3H). MS (ES-): 351.3, 353.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(4-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(95c)
化合物95c 係根據流程2中所報道之程序，由1-(4-(4-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮( 95b ) (150 mg，0.43 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.13 mL，1.34 mmol)及DIPEA (0.22 mL，1.28 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈棕色固體狀之(S)-1-(4-(4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(95c) (30 mg，14%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.79 (s, 1H, D2 O可交換), 8.64 (s, 1H), 8.13 - 8.05 (m, 3H), 7.95 (d,J = 8.5 Hz, 2H), 7.44 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.16 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.43 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.76 (dd,J = 10.0, 3.6 Hz, 1H), 3.58 - 3.42 (m, 1H), 3.36 (dd,J = 11.7, 7.1 Hz, 2H), 2.62 (s, 3H), 2.11 - 1.83 (m, 4H)。MS (ES+): 418.5 (M+1); MS (ES-): 452.5 (M+Cl)。流程96
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(96b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(96a)
向2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (0.5 g，2.7 mmol)於2-丙醇(6 mL)中之溶液中添加(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.39 mL，4.0 mmol)、DIPEA (1.39 mL，8.0 mmol)且在90℃下加熱1小時。將反應物冷卻至室溫且藉由過濾收集所獲得之固體，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (0.49 g，73%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.70 (dd,J = 2.6, 1.4 Hz, 1H), 6.97 (dd,J = 4.7, 1.6 Hz, 1H), 6.80 - 6.57 (m, 1H), 5.15 (t,J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.87 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.44 (d,J = 17.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.82 (m, 1H), 3.72 - 3.39 (m, 2H), 2.22 - 1.84 (m, 4H). MS (ES+): 253.3, 255.3 (M+2); MS (ES-): 287.2, 289.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(96b)
(S)-(1-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (0.1 g，0.4 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.11 g，0.4 mmol)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(30 mg，0.04 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(80 mg，0.79 mmol)、Pd2 (dba)3 (40 mg，0.04 mmol)於無水二噁烷(4 mL)中之漿液在密封反應器中在正壓氮氣流下在90℃下加熱18小時。用EtOAc (100 mL)稀釋反應混合物且分離有機層。有機層用水(3×)、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮至乾。殘餘物藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化且凍乾，得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96b ) (21 mg，11%產率)鹽酸鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 9.72 (s, 1H, D2 O可交換), 9.63 (s, 1H, D2 O可交換), 9.38 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 6.90 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.54 (s, 1H), 4.07 - 3.93 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.77 (s, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.68 - 3.62 (m, 1H), 3.60 - 3.47 (m, 1H), 2.23 - 1.88 (m, 4H). MS (ES+): 466.5 (M+1), 688.5 (M+Na); MS (ES-): 464.6 (M-1)。流程97
製備(S)-(1-(6-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(97d )
步驟1：製備(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(97a )
化合物97a 係根據流程1中所報道之程序，由(2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(70d ) (1.2 g，5.1 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (2.67 mL，15.31 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (1.89 g，6.64 mmol)來製備。由此得到呈淺棕色固體狀之(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(97a ) (1.48 g，65%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.90 (s, 1H, D2 O可交換), 8.19 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 6.93 (s, 2H), 5.82 (t,J = 5.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.72 (dd,J = 5.8, 1.2 Hz, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 448.3 (M+1), 470.3 (M+Na), (ES-): 446.3 (M-1)。
步驟2：製備2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b )
在0℃下，向(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(97a ) (0.5 g，1.12 mmol)於DCM (50 mL)中之攪拌懸浮液中添加N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)及亞硫醯氯(0.2 mL，2.79 mmol)。使反應混合物升溫至室溫隔夜，真空濃縮至乾，用己烷濕磨且過濾，得到呈固體狀之2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b ) (520 mg，100%產率)，其原樣用於下一步驟；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 /D2 O) δ 11.26 (s, 1H, D2 O可交換), 8.07 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.01 (s, 2H), 5.17 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+): 466.4, 468.4 (M+1), (ES-): 464.3, 466.4 (M-1)。
步驟3：製備2-氯-6-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97c)
向2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b ) (100 mg，0.21 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中添加嗎啉(0.04 mL，0.43 mmol)、DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)且在50℃下加熱隔夜。真空濃縮反應混合物且藉由急驟管柱層析純化，得到2-氯-6-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺( 97c ) ；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.89 (s, 1H), 8.19 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.75 (s, 2H), 3.60 (m, 6H), 2.47 (m, 6H); MS (ES+): 539.4 (M+Na), (ES-): 515.4 (M-1)。
步驟4：製備(S)-(1-(6-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(97d )
化合物97d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺( 97c ) (50 mg，0.09 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.03 mL，0.26 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(6-(嗎啉基甲基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 97d ) (21 mg，42%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.70 (s, 1H, D2 O可交換), 11.49 (s, 1H, D2 O可交換), 8.52 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.02 (s, 1H, D2 O可交換), 7.01 (s, 2H), 4.60 (s, 2H), 4.50 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.81 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.60 - 3.41 (m, 4H), 3.40 - 3.07 (m, 4H), 2.15 - 1.86 (m, 4H). MS (ES+): 582.6 (M+1); MS (ES-): 616.6 (M+Cl)。 流程98
製備(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(98a)
化合物98a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(85b ) (150 mg，0.28 mmol)、1-(第三丁氧基羰基)-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基硼酸(188 mg，0.83 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (10 mg，0.01 mmol)、碳酸鈉(73 mg，0.69 mmol)在二噁烷(3 mL)及水(1 mL)製備。由此在藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯( 98a ) (70 mg，38%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.53 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.20 (d,J = 4.6 Hz, 2H), 6.96 (s, 2H), 6.50 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H, D2 O可交換), 4.21 (s, 2H), 4.06 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.54 (s, 2H), 3.42 (d,J = 6.9 Hz, 1H), 3.28 (s, 1H), 2.54 (s, 2H), 2.09 - 1.86 (m, 4H), 1.43 (s, 9H). MS (ES+): 669.7 (M+Na)。 流程99
製備1-(2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙醇(99b )
步驟1：製備1-(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙醇(99a )
化合物99a 係根據流程79之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (200 mg，0.47 mmol)在THF (10 mL)中使用MeLi (3 M於THF中，0.33 mL，1.03 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0至10% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈淡黃色固體狀之1-(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙醇(99a ) (103 mg，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.21 (s, 1H), 8.20 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.36 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.68 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 5.31 (d,J = 5.0 Hz, 1H), 5.16 (p,J = 6.4 Hz, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 1.45 (d,J = 6.5 Hz, 3H);MS (ES+): 445.5 (M+1), 467.4 (M+Na)。
步驟2：製備1-(2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙醇(99b )
化合物99b 係根據流程2中所報道之程序，由1-(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙醇(99a ) (35 mg，0.08 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(80 mg，0.79 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之1-(2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙醇(99b ) (25 mg，51%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.79 (s, 1H, D2 O可交換), 9.32 (s, 1H, D2 O可交換), 9.20 (s, 1H, D2 O可交換), 8.37 - 8.15 (m, 1H), 8.07 - 7.90 (m, 1H), 7.25 (dd, J = 10.5, 4.6 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.77 (dd, J = 16.6, 4.6 Hz, 1H), 5.45 - 5.21 (m, 1H), 4.37 - 4.14 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.67 - 3.49 (m, 2H), 3.47 - 3.18 (m, 3H), 2.17 - 1.76 (m, 4H), 1.76 - 1.65 (m, 3H); MS (ES+): 492.5 (M-OH);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.28；HPLC純度：92.61%；元素分析：C25 H31 N7 O5 ∙2CF3 COOH∙3H2 O之計算值：C, 42.29; H, 4.77; N, 11.90；實驗值：C, 42.02; H, 4.79; N, 12.08。 流程100
製備(S)-(1-(6-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(100e )
步驟1：製備2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-醇(100a )
化合物100a 係使用由Deng, Jifeng等人在《歐洲醫藥化學雜誌(European Journal of Medicinal Chemistry)》, 46(1), 71-76; 2010中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (4 g，19.51 mmol)製備。由此得到呈白色固體狀之2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-醇(100a ) (2.45 g，13.13 mmol，67.3%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.54 (s, 1H, D2 O可交換), 7.61 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.39 (d,J = 5.8 Hz, 1H); MS (ES-): 185.1(M-1)。
步驟2：製備6-溴-2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-醇(100b ).
向2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-醇(100a ) (2.43 g，13.02 mmol)於乙酸(30 mL)中之溶液中添加溴(2.01 mL，39.1 mmol)且在室溫下攪拌10小時。所得固體藉由過濾收集，用水洗滌且真空乾燥，得到呈茶色固體狀之6-溴-2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-醇(100b ) (2.85 g，82%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.94 (s, 1H)。
步驟3：製備6-溴-2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(100c )
6-溴-2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-醇(100b ) (2.84 g，10.70 mmol)及氧氯化磷(9.97 mL，107 mmol)之混合物加熱回流30小時。濃縮混合物以移除過量氧氯化磷，用冰冷的水稀釋且用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取。合併之有機層用水(20 mL)、鹽水(30 mL)洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈白色固體狀之6-溴-2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(100c ) (1.4 g，46%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.94 (s, 1H)。
步驟4：製備6-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(100d )
化合物100d 係根據流程1中所報道之程序，由6-溴-2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(100c ) (0.5 g，1.76 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.92 mL，5.28 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (654 mg，2.29 mmol)來製備。由此得到呈淺紫色固體狀之6-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(100d ) (718 mg，82%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.04 (s, 1H, D2 O可交換), 8.21 (d,J = 1.6 Hz, 2H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES-): 494.2, 496.3 (M-1)。
步驟5：製備(S)-(1-(6-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(100e )
化合物100e 係根據流程2中所報道之程序，由6-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(100d ) (300 mg，0.6 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(18 mg，1.81 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在藉由倒入水中且收集藉由過濾分離之固體，隨後真空乾燥處理後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(6-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(100e ) (35 mg，10%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): 11.08 (s, 1H, D2 O可交換), 8.57 (s, 1H), 8.04 (d, J = 15.7 Hz, 2H), 7.01 (s, 2H), 4.42 (s, 1H), 4.20 (s, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.81 (s, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.44 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 2.12 - 1.85 (m, 4H)。MS (ES+): 561.3, 564.3 (M+1), (ES-) 595.3 597.4(M+Cl)。 流程101
製備(S)-(1-(7-(羥甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(101c )
步驟1：製備(2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(101a )
化合物101a 係根據流程70之步驟4中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79a ) (100 mg，0.46 mmol)製備。由此在處理後得到呈油狀之(2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(101a ) (100 mg，99%產率)，其未經進一步純化即用於下一反應。MS (ES+): 218.1 (M+1)。
步驟2：製備(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(101b )
化合物101b 係根據流程1中所報道之程序，由(2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(101a ) (100 mg，0.46 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.24 mL，1.38 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (157 mg，0.55 mmol)來製備。由此得到呈淺灰白色固體狀之(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(101b ) (85 mg，43%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.24 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.37 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.69 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 5.24 (t,J = 5.6 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.70 (d,J = 5.5 Hz, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 431.4 (M+1), 453.4 (M+Na); MS (ES-): 429.3 (M-1); HPLC: 98.24%。
步驟3：製備(S)-(1-(7-(羥甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(101c )
使(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(101b ) (97 mg，0.23 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(171 mg，1.69 mmol)、二第三丁基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(di-t-Bu-XPhos，14 mg，0.034 mmol)、Pd2 (dba)3 (14 mg，0.016 mmol)、第三丁醇鈉(162 mg，1.69 mmol)於PhMe (5 mL)中之漿液脫氣且置於密封反應器中。反應物在100℃下加熱48小時，冷卻至室溫，用飽和NH4 Cl水溶液淬滅且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。合併有機層，用水、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮至乾。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0至40% MeOH/DCM溶離)純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-(羥甲基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(101c ) (12 mg，11%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.10 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.37 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.32 - 4.09 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.79 - 3.70 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.67 - 3.52 (m, 1H), 3.53 - 3.20 (m, 2H), 2.14 - 1.75 (m, 4H);MS (ES+): 496.5 (M+1), 518.5 (M+Na); MS (ES-): 494.4 (M-1)。 流程102
製備(S)-1-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(102b )
步驟1：製備1-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(102a )
化合物102a 係根據流程97之步驟3中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b ) (100 mg，0.21 mmol)、DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)及哌啶-4-醇(43 mg，0.43 mmol)在THF (3 mL)中製備。由此得到1-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(102a ) (32 mg 28%產率)；MS (ES+): 531.5, 533.5 (M+1), (ES-): 529.4, 531.4 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(102b )
化合物102b 係根據流程2中所報道之程序，由1-((2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇( 102a ) (0.03 g，0.06 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.02 mL，0.18 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈固體狀之(S)-1-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(102b ) (13 mg，36%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.40 (s, 1H), 10.97 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.19 - 7.88 (m, 2H), 7.00 (s, 2H), 4.65 - 4.41 (m, 2H), 4.40 - 3.91 (m, 6H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 2.87 (m, 4H), 2.15 - 1.86 (m, 7H), 1.85 - 1.60 (m, 1H). MS (ES+): 596.6 (M+1); MS (ES-): 630.6 (M+Cl)。 流程103
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(103b )
步驟1：製備(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a )
化合物103a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (1.0 g，5.29 mmol)在IPA (30 mL)中使用DIPEA (2.06 mL，15.87 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺鹽酸鹽(57a ) (1.81g，6.34 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (1.0 g，47 %)；MS (ES+): 402.0 (M+1); MS (ES-): 400.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(103b )
化合物103b 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (300 mg，0.75 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.76 g，7.5 mmol)在NMP (20 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-10%甲醇/乙酸乙酯溶離)純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(103b ) (100 mg，29%)游離鹼。游離鹼藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18管柱，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水(0-50%)溶離]再純化，隨後凍乾，得到呈淡黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(103b ) (25 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 13.40 (s, 1H), 11.91 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.01 (d,J = 10.6 Hz, 3H), 4.44 (s, 1H), 3.87 (d,J = 3.8 Hz, 6H), 3.75 (s, 1H), 3.68 (d,J = 3.7 Hz, 3H), 3.58 - 3.34 (m, 3H), 2.02 (s, 4H). MS (ES+): 467.5 (M+1), 489.5 (M+Na); MS (ES-): 501.5 (M+Cl); HPLC純度：98.60%。 流程104
製備(S)-(1-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(104b )
步驟1：製備2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(104a )
化合物104a 係根據流程97之步驟3中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b ) (100 mg，0.21 mmol)、DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)及1-甲基哌嗪(0.048 mL，0.43 mmol)在THF (3 mL)中製備。由此得到2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(104a ) (32 mg，28%產率)；MS (ES+): 530.5, 532.5 (M+1), (ES-): 528.4 (M-1), 564.4, 566.4 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(104b )
化合物104b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(104a )(0.05 g，0.09 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.03 mL，0.26 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈茶色固體狀之(S)-(1-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(104b ) (10 mg，24%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.14 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.07 - 7.85 (m, 2H), 6.98 (d,J = 4.6 Hz, 2H), 4.48 (s, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.94 (s, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.86 (s, 2H), 3.81 (s, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.61 - 3.40 (m, 4H), 3.40 - 3.12 (m, 4H), 2.79 (s, 3H), 2.11 - 1.85 (m, 4H)。MS (ES+): 595.6 (M+1)。 流程105
製備(S)-(1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(105b )
步驟1：製備2-氯-7-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(105a )
向2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (100 mg，0.23 mmol)於二氯乙烷(5 mL)中之溶液中添加哌啶(0.025 mL，0.26 mmol)及乙酸(0.03 mL)。向此懸浮液中添加NaBH(OAc)3 (64 mg，0.3 mmol)且攪拌反應物8小時。添加額外量之NaBH(OAc)3 (64 mg，0.3)且使反應物攪拌8小時。用1 N NaOH (2 mL)淬滅反應物，分離有機層且用CH2 Cl2 (3 × 10 mL)萃取水層。將合併之有機層乾燥，過濾且真空濃縮。粗產物藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0%至10% MeOH/DCM溶離)純化，得到呈淺灰白色固體狀之2-氯-7-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(105a ) (43 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d ) δ 10.56 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.07 - 6.81 (m, 1H), 6.84 - 6.40 (m, 3H), 4.10 - 3.73 (m, 11H), 2.61 - 2.41 (m, 4H), 1.67 - 1.49 (m, 4H), 1.48 - 1.33 (m, 2H); MS (ES+): 498.5 (M+1); MS (ES-): 496.5 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(105b )
化合物105b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(105a ) (43 mg，0.09 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(87 mg，0.86 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠4 g，用0%至10% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈白色固體狀之(S )-(1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(105b ) (6 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.88 - 6.83 (m, 3H), 6.45 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 4.33 - 4.16 (m, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.87 (s, 2H), 3.88 - 3.78 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.75 - 3.50 (m, 2H), 3.40 - 3.25 (m, 1H), 2.64 - 2.45 (m, 4H), 2.14 - 1.86 (m, 4H), 1.72 - 1.53 (m, 4H), 1.49 - 1.36 (m, 2H); MS (ES+): 563.6 (M+1), 585.6 (M+Na)。化合物105b 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化來自上文步驟2之粗反應混合物，隨後凍乾呈黃色固體狀而獲得。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.90 (s, 1H), 10.36 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.23 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 6.99 (s, 2H), 6.72 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.29 - 4.14 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.84 - 3.26 (m, 9H), 2.86 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 2.13 - 1.16 (m, 10H). MS (ES+): 563.3 (M+1); MS (ES-): 597.4 (M+Cl)。HPLC純度：95.10%。 流程106
製備(S)-(1-(7-((4-環丙基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(106b )
步驟1：製備2-氯-7-((4-環丙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(106a )
化合物106a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (100 mg，0.23 mmol)在二氯乙烷(3 mL)中使用1-環丙基哌嗪(44 mg，0.35 mmol)、乙酸(0.03 mL)及NaBH(OAc)3 (74 mg，0.35 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0%至10% DMA-80/DCM溶離)純化後得到呈固體狀之2-氯-7-((4-環丙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(106a ) (46 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.64 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.91 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 6.61 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.18 - 3.61 (m, 11H), 3.36 - 2.11 (m, 8H), 1.68 - 1.47 (m, 1H), 0.62 - 0.15 (m, 4H); MS (ES+): 539.5 (M+1), 561.5 (M+Na); MS (ES-): 537.5 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-((4-環丙基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(106b )
化合物106b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-((4-環丙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(106a ) (46 mg，0.09 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(86 mg，0.85 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈固體狀之(S)-(1-(7-((4-環丙基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(106b ) (14 mg，27%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.47 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.33 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.89 - 4.79 (m, 1H, D2 O可交換), 4.26 - 4.08 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.85 - 3.66 (m, 3H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.54 (m, 1H), 3.52 - 3.38 (m, 2H), 2.67 - 2.25 (m, 8H), 2.11 - 1.81 (m, 4H), 1.65 - 1.49 (m, 1H), 0.37 (s, 2H), 0.28 - 0.18 (m, 2H); MS (ES+): 604.7 (M+1), 626.6 (M+Na); 化合物106b 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化來自上文步驟2之粗反應混合物，隨後凍乾呈黃色固體狀而獲得。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.49 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.13 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.34 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.79 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.58 (s, 1H), 3.52 - 3.42 (m, 2H), 3.42 - 3.20 (m, 9H), 2.11 - 1.71 (m, 4H), 1.67 - 1.40 (m, 1H), 0.44 - 0.13 (m, 4H). MS (ES-): 602.6 (M-1)。HPLC純度：93.61%。 流程107
製備(S)-(1-(7-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(107a)
向(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯( 98a ) (0.06 g，0.05 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(0.04 mL，0.54 mmol)且在室溫下攪拌隔夜。反應混合物用EtOAc (50 mL)稀釋，用水(3×)、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化且凍乾，得到呈HCl鹽形式之(S)-(1-(7-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 107a ) (8 mg，27%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.68 (s, 1H), 9.16 (s, 2H), 8.37 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.22 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.58 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.00 - 3.25 (m, 17H), 2.83 - 2.68 (m, 2H), 2.11 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 547.6。HPLC純度：96.94 %。 流程108
製備(S)-(1-(6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(108b )
步驟1：製備2-氯-6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(108a )
化合物108a 係根據流程97之步驟3中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b ) (100 mg，0.21 mmol)、DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)及1-(吡啶-2-基)哌嗪(0.065 mL，0.43 mmol)在THF (3 mL)中製備。由此得到呈固體狀之2-氯-6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(108a ) (60 mg，47%)。MS (ES+): 593.5 (M+1), (ES-): 591.4 (M-1), 627.5, 629.5 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(108b )
化合物108b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(108a ) (0.06 g，0.1 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.03 mL，0.3 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(108b ) (10 mg，15%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.16 (s, 1H), 11.60 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.19 - 7.93 (m, 5H), 7.37 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 7.00 (d,J = 8.5 Hz, 2H), 4.74 - 4.30 (m, 4H), 3.88 (s, 6H), 3.81 - 3.19 (m, 13H), 2.16 - 1.89 (m, 4H); . MS (ES+): 658.5; MS (ES-): 692.5 (M+Cl)。HPLC純度：97.78%。 流程109
製備3-(6-(羥甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯甲醛(109a )
化合物109a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(97a ) (0.2 g，0.44 mmol)使用3-甲醯基苯基硼酸(0.1 g，0.67 mmol)、PdCl2 (dppf) (65 mg，0.09 mmol)、碳酸鉀(185 mg，1.34 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)及水(1 mL)中製備。由此在處理、藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之3-(6-(羥甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯甲醛(109a ) (134 mg，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.63 (s, 1H, D2 O可交換), 10.14 (s, 1H), 8.95 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 8.76 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 8.28 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.18 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.03 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.73 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 7.03 (s, 2H), 5.84 (s, 1H, D2 O可交換), 4.76 (s, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 518.5 (M+1), 540.3 (M+Na), (ES-): 516.5 (M-1)。 流程110
製備3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醛(110a )
化合物110a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (0.2 g，0.5 mmol)使用3-甲醯基苯基硼酸(112 mg，0.75 mmol)、PdCl2 (dppf) (73 mg，0.1 mmol)、碳酸鉀(207 mg，1.5 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)及水(1 mL)中製備。由此在處理、藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醛(110a ) (45 mg，19%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.02 (s, 1H, D2 O可交換), 10.13 (s, 1H), 8.82 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 8.64 (dt,J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 8.30 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.18 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.04 (dt,J = 7.7, 1.4 Hz, 1H), 7.88 (dd,J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.73 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 7.51 - 7.25 (m, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.77 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 471.4 (M+1), (ES-): 469.4 (M-1)。 流程111
製備(S)-(1-(7-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(111b )
步驟1：製備2-氯-7-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(111a )
化合物111a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (200 mg，0.47 mmol)在二氯乙烷(3 mL)中使用1-嗎啉(0.045 mL，0.51 mmol)、乙酸(0.05 mL)及NaBH(OAc)3 (129 mg，0.61 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0%至10% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈淡粉色固體狀之2-氯-7-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(111a ) (131 mg，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.24 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.67 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.78 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.56 (t,J = 4.6 Hz, 4H), 2.47 - 2.37 (m, 4H); MS (ES+): 500.4 (M+1), 522.4 (M+Na); HPLC純度：95.21%。
步驟2：製備(S)-(1-(7-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(111b )
化合物111b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-7-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(111a ) (106 mg，0.21 mmol)、(S )-吡咯啶-2-基甲醇(161 mg，1.59 mmol)、二第三丁基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(di-t-Bu-XPhos) (14 mg，0.032 mmol)、Pd2 (dba)3 (14 mg，0.015 mmol)及第三丁醇鈉(153 mg，1.59 mmol)在甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠24 g，用0%至10% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈固體狀之(S)-(1-(7-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(111b ) (75 mg，63%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.48 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.14 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.35 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 4.83 (t,J = 5.2 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.31 - 4.07 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.85 - 3.63 (m, 5H), 3.65 - 3.43 (m, 4H), 3.42 - 3.23 (m, 4H), 2.46 - 2.29 (m, 4H), 2.13 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+): 565.6 (M+1), 587.4 (M+Na); MS (ES-): 563.6 (M-1); HPLC純度：84.98%。化合物111b 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化來自上文步驟2之粗反應混合物，隨後凍乾而獲得；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.51 (s, 1H), 11.15 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.25 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.04 (s, 2H), 6.78 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.20 (s, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.85 - 3.71 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.47 (s, 1H), 3.37 - 3.21 (m, 4H), 3.19 - 2.96 (m, 4H), 2.09 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES+): 565.4 (M+1), 587.3 (M+Na). MS (ES-): 599.5 (M+Cl)。HPLC純度：94.30%。 流程112
製備(S)-(1-(7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(112b )
步驟1：製備2-氯-7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(112a )
化合物112a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (200 mg，0.47 mmol)在二氯乙烷(10 mL)中使用1-甲基哌嗪(0.078 mL，0.7 mmol)、乙酸(0.05 mL)及NaBH(OAc)3 (148 mg，0.7 mmol)來製備。
將合併之有機層乾燥，過濾且真空濃縮。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0%至50% DMA-80/DCM溶離)純化後得到呈固體狀之2-氯-7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(112a ) (122 mg，51.0%產率)；1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.13 (s, 1H), 7.94 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 6.63 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.25 - 3.56 (m, 11H), 2.86 - 2.37 (m, 8H), 2.29 (s, 3H); MS (ES+): 513.5 (M+1); MS (ES-): 511.5 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(112b )
化合物112b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(112a ) (106 mg，0.21 mmol)、(S )-吡咯啶-2-基甲醇(157 mg，1.55 mmol)、(di-t-Bu-XPhos) (13 mg，0.031 mmol)、Pd2 (dba)3 (13 mg，0.015 mmol)及第三丁醇鈉(149 mg，1.55 mmol)在甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠12 g，用0至40% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(112b ) (31 mg，26.0%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.33 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.83 (t, J = 5.2 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.28 - 4.06 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.82 - 3.69 (m, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.65 - 3.54 (m, 1H), 3.54 - 3.37 (m, 2H), 2.55 - 2.18 (m, 8H), 2.15 (s, 3H), 2.11 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 578.6 (M+1), 600.6 (M+Na); HPLC純度：88.41%。 流程113
製備(S)-(1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(113b )
步驟1：製備2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(113a )
化合物113a 係根據流程97之步驟3中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b ) (150 mg，0.32 mmol)、DIPEA (0.23 mL，1.29 mmol)及哌啶(0.04 mL，0.64 mmol)在THF (3 mL)中製備。由此得到呈固體狀之2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(113a ) (100 mg，60%)，其未經進一步純化即用於下一步驟；MS (ES-): 514.4 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(113b )
化合物113b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(113a ) (0.1 g，0.19 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.1 mL，0.97 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(4 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 113b ) (15 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d ) δ 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.62 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.67 (s, 2H), 4.42 (s, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.89 (s, 3H), 3.83 - 3.69 (m, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.55 - 2.37 (m, 4H), 2.22 - 1.51 (m, 9H), 1.52 - 1.35 (m, 3H).MS (ES+): 580.6 (M+1); MS (ES-): 578.6 (M-1)；化合物113b 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化來自上文步驟2之粗反應混合物，隨後凍乾而獲得；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.36 (s, 1H), 10.85 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.07 (s, 2H), 7.00 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.39 - 4.06 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.79 - 3.62 (m, 4H), 3.58 - 3.28 (m, 3H), 3.06 - 2.78 (m, 4H), 2.19 - 1.88 (m, 4H), 1.88 - 1.56 (m, 4H), 1.51 - 1.19 (m, 2H); MS (ES+): 580.4; MS (ES-): 614.5 (M+Cl)。HPLC純度：98.49%。 流程114
製備(S)-(1-(7-((4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(114b )
步驟1：製備2-氯-7-((4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(114a )
化合物114a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (200 mg，0.47 mmol)在二氯乙烷(8 mL)中使用1-(2-甲氧基乙基)哌嗪(101 mg，0.7 mmol)、乙酸(0.05 mL)及NaBH(OAc)3 (148 mg，0.7 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0至50% DMA-80/DCM溶離)純化後得到呈黃色固體狀之2-氯-7-((4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(114a ) (72 mg，28%產率)；MS (ES+): 557.5, 579.5 (M+1); MS (ES-): 555.5 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-((4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(114b )
化合物114b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-7-((4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(114a ) (72 mg，0.13 mmol)、(S )-吡咯啶-2-基甲醇(98 mg，0.97 mmol)、(di-t-Bu-XPhos) (8 mg，0.019 mmol)、Pd2 (dba)3 (8 mg，0.009 mmol)及第三丁醇鈉(93 mg，0.97 mmol)在PhMe (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠12 g，用0至50% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈固體狀之(S)-(1-(7-((4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(114b ) (16 mg，20%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.50 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.14 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.35 (s, 1H), 4.96 - 4.75 (m, 1H, D2 O可交換), 4.30 - 4.06 (m, 1H), 3.54 - 3.25 (m, 4H), 3.87 (s, 6H), 3.84 - 3.68 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.67 - 3.52 (m, 1H), 3.31 - 3.14 (m, 3H), 2.76 - 2.24 (m, 10H), 2.10 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 622.7 (M+1); MS (ES-): 656.7 (M+Cl)。 流程115
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(115b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(115a)
向2,4-二氯喹唑啉(21a ) (2.0 g，10.04 mmol)於DCM (30 mL)中之溶液中添加(S)-吡咯啶-2-基甲醇(2.0 mL，19.77 mmol)、DIPEA (3.5 mL，27.15 mmol)且在室溫下攪拌1小時。反應物用水(50 mL)稀釋，用DCM (2 × 100 mL)萃取。合併有機層，乾燥，過濾且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-40%乙酸乙酯/己烷溶離)純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 115a ) (1.4 g，54%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.33 - 8.22 (m, 1H), 7.78 (ddd, J = 8.2, 6.9, 1.2 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.47 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.4 Hz, 1H), 4.85 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.57 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.11 - 3.87 (m, 2H), 3.64 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.16 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES-): 264.3 (M+1), 286.3 (M+Na); MS (ES-): 262.3 (M-1), 298.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(115b)
化合物115b 係根據流程96之步驟2中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 115a ) (250 mg，0.95 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.41 g，1.42 mmol)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，0.07 g，0.11 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.09 g，0.1 mmol)及第三丁醇鈉(0.18 g，1.9 mmol)在PhMe (4 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(4 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 115b ) (169 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.01 (s, 1H), 8.08 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.56 (td,J = 7.4, 6.8, 1.2 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.10 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 4.87 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.10 - 3.97 (m, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.85 - 3.73 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.63 - 3.50 (m, 1H), 2.12 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES+): 477.5 (M+1); MS (ES-): 511.5 (M+Cl)。 流程116
製備(S)-4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(116c)
步驟1：製備4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(116b)
化合物116b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (340 mg，1.81 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.95 mL，5.44 mmol)及4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈鹽酸鹽( 116a ) (0.4 g，1.81 mmol；根據2016年3月31日Jones, Alison等人在PCT國際申請案2016046530中所報道之程序製備)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至50%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈( 116b ) (0.55 g，91%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.39 (s, 1H), 8.47 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.09 - 8.02 (m, 2H), 8.01 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.94 - 7.87 (m, 2H), 7.79 (dd,J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H)。MS (ES-): 334.3, 336.3 (M+2)。
步驟2：製備(S)-4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(116c)
化合物116c 係根據流程2中所報道之程序，由4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈( 116b ) (100 mg，0.3 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.09 mL，0.9 mmol)及DIPEA (0.16 mL，0.9 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈( 116c ) (20 mg，18%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.67 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.15 - 7.92 (m, 5H), 7.42 (s, 1H), 7.15 (d,J = 4.2 Hz, 1H), 6.41 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.42 - 3.27 (m, 2H), 2.13 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 401.5。IR (膜): 2230 cm−1 。HPLC純度：94.20%。流程117
製備(S)-1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(117a )
化合物117a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(105a ) (52 mg，0.104 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(119 mg，1.04 mmol)在NMP (1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用NaHCO3 轉化成游離鹼後得到呈淺灰白色固體狀之(S)-1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(117a ) (7 mg，12%產率)；1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d ) δ 8.04 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.69 - 7.58 (m, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.63 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.51 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 5.54 - 5.32 (m, 1H), 4.66 - 4.54 (m, 1H), 4.28 - 3.67 (m, 12H), 3.70 - 3.57 (m, 1H), 2.77 - 2.43 (m, 4H), 2.40 - 2.14 (m, 2H), 2.16 - 1.93 (m, 2H), 1.81 - 1.50 (m, 4H), 1.52 - 1.35 (m, 2H); MS (ES+): 576.6 (M+1)。 流程118
製備(S)-1-((2-((S)-2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(118b )
步驟1：製備2-氯-7-(((環丙基甲基)胺基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(118a )
化合物118a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (400 mg，0.93 mmol)在二氯乙烷(10 mL)中使用1-環丙基甲胺(0.24 mL，2.8 mmol)、乙酸(0.11 mL)及NaBH(OAc)3 (297 mg，1.4 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0%至40% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈固體狀之2-氯-7-(((環丙基甲基)胺基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(118a ) (218 mg，48%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.20 (s, 1H), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.65 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.39 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 0.99 - 0.78 (m, 1H), 0.46 - 0.31 (m, 2H), 0.14 - 0.02 (m, 2H); MS (ES+): 484.4 (M+1), 506.4 (M+Na); MS (ES-):482.4 (M-1), 518.4 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-((2-((S)-2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(118b )
化合物118b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-(((環丙基甲基)胺基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(118a ) (98 mg，0.2 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.462 g，4.1 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(12 g)，用0%至40% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-((2-((S)-2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)吡咯啶-2-甲醯胺(118b ) (10 mg，8%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.43 (s, 1H, D2 O可交換), 8.21 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.63 - 7.43 (m, 1H, D2 O可交換), 7.37 - 7.15 (m, 2H, D2 O可交換), 7.16 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 7.08 (s, 2H), 7.04 (s, 1H, D2 O可交換), 6.39 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 4.49 - 4.35 (m, 1H), 4.23 - 4.06 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.52 (m, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 1H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.32 - 1.98 (m, 2H), 2.00 - 1.85 (m, 4H), 1.81 - 1.48 (m, 4H); MS (ES+): 605.6 (M+1), 627.6 (M+Na); HPLC純度：95.61%。 流程119
製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(119c)
步驟1：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(119b)
化合物119b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (852 mg，4.53 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (2.38 mL，13.6 mmol)及3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈鹽酸鹽( 119a ) (1 g，4.53 mmol；可根據2016年3月31日由Jones, Alison等人在PCT國際申請案2016046530中所報道之程序製備)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(119b) (0.9 g，59%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.37 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.29 (t,J = 1.8 Hz, 1H), 8.02 (ddd,J = 8.1, 2.4, 1.1 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (dt,J = 7.7, 1.3 Hz, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.40 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES-): 335.3, 337.3 (M+2)。
步驟2：製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(119c)
化合物119c 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈( 119b ) (300 mg，0.89 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.27 mL，2.68 mmol)及DIPEA (0.47 mL，2.68 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈( 119c ) (22 mg，6%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.28 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.25 - 8.06 (m, 2H), 7.90 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 7.83 - 7.68 (m, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.77 - 3.63 (m, 1H), 3.55 - 3.19 (m, 3H), 2.10 - 1.73 (m, 4H); MS (ES+): 401.5; MS (ES-): 399.5 (M-1), 435.5 (M+Cl)。HPLC純度：96.43 %。流程120
製備(S)-(1-(7-(((環丙基甲基)胺基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(120a )
化合物120a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-(((環丙基甲基)胺基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(118a ) (103 mg，0.21 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(431 mg，4.26 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(((環丙基甲基)胺基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(120a ) (10 mg，7%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.76 (s, 1H, D2 O可交換), 8.79 (s, 2H, D2 O可交換), 8.28 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.60 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.81 - 3.70 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.67 - 3.56 (m, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.35 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 2.88 (q, J = 6.1 Hz, 2H), 2.20 - 1.75 (m, 4H), 1.21 - 1.01 (m, 1H), 0.69 - 0.52 (m, 2H), 0.48 - 0.30 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -74.16; MS (ES+): 549.5 (M+1), 571.6 (M+Na); HPLC純度：94.26 %。 流程121
製備(S)-4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(121b )
步驟1：製備4-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(121a )
化合物121a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (400 mg，0.93 mmol)在二氯乙烷(10 mL)中使用哌嗪-1-甲酸第三丁酯(521 mg，2.8 mmol)、乙酸(0.064 mL)及NaBH(OAc)3 (297 mg，1.4 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0%至40% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈固體狀之4-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(121a ) (218 mg，39%產率)；1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 7.90 (s, 1H), 7.64 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.74 - 6.58 (m, 3H), 4.09 - 3.79 (m, 11H), 3.53 - 3.34 (m, 4H), 2.65 - 2.39 (m, 4H), 1.44 (s, 9H); MS (ES+): 599.6 (M+1), 621.6 (M+Na); MS (ES-): 597.5 (M-1)。
步驟2：製備(S)-4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(121b )
化合物121b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由4-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(121a ) (148 mg，0.25 mmol)、(S )-吡咯啶-2-基甲醇(187 mg，1.85 mmol)、(di-t-Bu-XPhos) (16 mg，0.087 mmol)、Pd2 (dba)3 (16 mg，0.087 mmol)及第三丁醇鈉(178 mg，1.85 mmol)在PhMe (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠24 g，用0至50% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈黃色固體狀之(S)-4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(121b ) (86 mg，52%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.49 (s, 1H, D2 O可交換), 8.24 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.34 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.84 (t, J = 5.2 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.26 - 4.12 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.87 - 3.71 (m, 2H), 3.80 - 3.67 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.53 (m, 1H), 3.51 - 3.22 (m, 6H), 2.38 (s, 4H), 2.12 - 1.69 (m, 4H), 1.36 (s, 9H); MS (ES+): 664.7 (M+1), 686.7 (M+Na); MS (ES-): 662.7 (M+1), 698.8 (M+Cl); HPLC純度：88.43%。 流程122
製備(S)-(1-(7-(哌嗪-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(122a )
向(S)-4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(121b ) (66 mg，0.1 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加TFA (0.15 mL，1.99 mmol)且在室溫下攪拌3小時。真空濃縮反應混合物且將殘餘物溶解於DCM中，用飽和NaHCO3 水溶液、鹽水洗滌，乾燥且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0-50% DMA80/DCM溶離)純化，得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(哌嗪-1-基甲基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(122a ) (22 mg，39%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.45 (s, 1H, D2 O可交換), 8.23 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 4.5, 2.1 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.32 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.93 - 4.72 (m, 1H, D2 O可交換), 4.32 - 4.13 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.80 - 3.70 (m, 3H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.52 (m, 1H), 3.54 - 3.24 (m, 2H), 2.71 - 2.59 (m, 4H), 2.41 - 2.27 (m, 4H), 2.10 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 564.7 (M+1); MS (ES-): 598.9 (M+Cl); HPLC純度：98.11%。 流程123
製備(S)-1-(2-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(123c)
步驟1：製備1-(5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯基)乙酮(123b)
化合物123b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (240 mg，1.30 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.68 mL，3.89 mmol)及1-(5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯基)乙酮鹽酸鹽( 123a ) (0.3 g，1.3 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至50%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之1-(5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯基)乙酮( 123b ) (0.35 g，71%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.41 - 11.28 (m, 1H), 8.19 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.91 - 7.79 (m, 2H), 7.76 (dt,J = 5.9, 2.4 Hz, 2H), 7.45 - 7.31 (m, 2H), 6.72 (q,J = 2.6 Hz, 1H), 3.96 (d,J = 2.5 Hz, 3H), 2.59 (d,J = 2.6 Hz, 3H)。MS (ES+): 405.4 (M+Na); MS (ES-): 381.4, 383.4 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(2-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(123c)
化合物123c 係根據流程2中所報道之程序，由1-(5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯基)乙酮( 123b ) (100 mg，0.26 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.08 mL，0.78 mmol)及DIPEA (0.14 mL，0.78 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮( 123c ) (10 mg，10%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.92 (s, 1H), 10.63 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.09 (d,J = 2.8 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.92 (dd,J = 8.9, 2.7 Hz, 1H), 7.41 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.17 - 7.07 (m, 2H), 6.41 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.27 - 4.12 (m, 2H), 3.73 (dd,J = 10.0, 3.5 Hz, 1H), 3.50 (s, 1H), 3.45 - 3.26 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.10 - 1.81 (m, 4H). MS (ES+): 434.5 (M+1); MS (ES-): 432.5 (M-1), 468.6 (M+Cl)。HPLC純度：88.85%。流程124
製備(3-(6-(羥甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯基)甲醇(124a )
化合物124a 係根據流程70之步驟4中所報道之程序，在MeOH (10 mL)中使用NaBH4 (4 mg，0.1 mmol)由3-(6-(羥甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯甲醛(109a ) (50 mg，0.1 mmol)製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之(3-(6-(羥甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯基)甲醇(124a ) (0.03 g，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.54 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.26 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.44 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 7.01 (s, 2H), 5.79 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 501.6 (M-18)；HPLC純度：93.11%。 流程125
製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺(125c)
步驟1：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺(125b)
化合物125b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (350 mg，1.86 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.58 mmol)及3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺( 125a ) (0.4 g，1.86 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至50%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺( 125b ) (0.52 g，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.34 (s, 1H), 8.38 - 8.28 (m, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.95 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.69 (t,J = 1.6 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.45 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 7.40 (t,J = 2.3 Hz, 2H), 6.73 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H)。MS (ES+): 384.2, 386.5 (M+1), 406.3 (M+Na); MS (ES-): 382.4, 384.4 (M-1)。
步驟2：製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺(125c)
化合物125c 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺( 125b ) (100 mg，0.26 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.08 mL，0.78 mmol)及DIPEA (0.14 mL，0.78 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(4 g)，用0至100%含乙酸乙酯/甲醇(9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺( 125c ) (14 mg，12%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.56 (s, 1H), 8.32 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 8.10 - 8.00 (m, 2H), 7.70 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.47 - 7.33 (m, 3H), 7.14 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.40 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 4.89 (t,J = 5.0 Hz, 1H), 4.28 - 4.15 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.82 - 3.69 (m, 1H), 3.61 - 3.47 (m, 1H), 3.48 - 3.34 (m, 2H), 2.11 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 449.5 (M+1); MS (ES-): 447.5 (M-1)。HPLC純度：87.51%。 流程126
製備(S)-1-(7-(哌啶-1-羰基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(126c )
步驟1：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(126a )
向2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (1 g，2.33 mmol)於乙腈(4 ml)、t-BuOH (28 mL)、水(4 mL)中之溶液中添加二氫磷酸鈉(0.56 g，4.66 mmol)及2-甲基丁-2-烯(2.63 mL，23.32 mmol)。反應混合物用冰-水浴冷卻且添加亞氯酸鈉(1.055 g，11.66 mmol)於水(4 mL)中之溶液。使反應混合物升溫至室溫隔夜且用水稀釋。藉由過濾收集所獲得之固體，在空氣中乾燥，得到呈白色固體狀之2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(126a ) (1.037 g，100%產率，基於NMR資料混雜有30%起始物質79b )，其未經進一步純化即直接用於下一步驟；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.77, 11.55 (2s, 1H), 8.25 (dd,J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 7.93 (dd,J = 5.2, 1.6 Hz, 1H), 7.49 (dd,J = 14.2, 4.8 Hz, 1H), 7.32 (dd,J = 20.8, 4.8 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H)。
步驟2：製備(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(126b )
向2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(126a ) (0.75 g，1.69 mmol)及哌啶(0.2 mL，2.02 mmol)於DMF (50 mL)中之溶液中添加HATU (769 mg，2.02 mmol)及DIPEA (0.883 mL，5.06 mmol)，在室溫下攪拌隔夜且用EtOAc (200 mL)稀釋。用水、鹽水洗滌有機層，乾燥，過濾且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(40g)，用0至30% DMA80/DCM溶離]，隨後[矽膠(40g)，用0至100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化兩次，得到呈黃色固體狀之(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(126b ) (219 mg，25%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.46 (s, 1H), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.85 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.69-3.58 (m, 2H), 3.26 - 3.04 (m, 2H), 1.77 - 1.39 (m, 6H); MS (ES+): 512.5 (M+1), 534.5 (M+1); MS (ES-): 510.5(M-1)。
步驟3：製備(S)-1-(7-(哌啶-1-羰基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(126c )
化合物126c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(126b ) (253 mg，0.49 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(169 mg，1.48 mmol)、(di-t-Bu-XPhos) (32 mg，0.074 mmol)、Pd2 (dba)3 (32 mg，0.035 mmol)及Cs2 CO3 (483 mg，1.48 mmol)在PhMe (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠24 g，用0至10% MeOH/DCM溶離)純化，隨後藉由逆相層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(7-(哌啶-1-羰基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(126c ) (6 mg，2%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.65 (s, 1H, D2 O可交換), 8.26 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.24 (s, 2H, 1H D2 O可交換), 7.15 - 6.95 (m, 3H, 1H D2 O可交換), 6.55 (s, 1H), 4.52 - 4.27 (m, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.86 - 3.70 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.36 (m, 2H), 3.34 - 3.01 (m, 2H), 2.31 - 1.79 (m, 4H), 1.72 - 1.29 (m, 6H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.12; MS (ES+): 590.6 (M+1), 612.6 (M+Na); MS (ES-): 624.0 (M+Cl); HPLC純度：83.3 %；化合物126c 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化來自上文步驟2之粗反應混合物，隨後凍乾而獲得；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.10 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.22 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.17 (s, 2H), 7.03 (s, 1H), 6.60 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.06 - 2.97 (m, 15H), 2.28 - 1.79 (m, 4H), 1.69 - 1.32 (m, 6H)。MS (ES-): 588.3 (M-1)。HPLC純度：94.09%。 流程127
製備(S)-3-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(127b)
步驟1：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲腈(127a)
向3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺( 125b ) (0.06 g，0.14 mmol)於THF (5 mL)中之溶液中添加吡啶(0.02 mL，0.29 mmol)、2,2,2-三氟乙酸酐(0.02 mL，0.17 mmol)且在室溫下攪拌1小時。混合物用水(1 mL)淬滅且真空濃縮至乾。向殘餘物中添加飽和NaHCO3 水溶液(20 mL)且用氯仿(2 × 30 mL)萃取。合併有機層，用鹽水(30 mL)洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用己烷/乙酸乙酯(1:0至2:1)溶離]純化，得到呈白色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲腈( 127a ) (31 mg，59%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.32 (s, 1H), 8.38 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 - 7.73 (m, 2H), 7.59 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.49 (t,J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.73 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H)。MS (ES+): 366.4; MS (ES-): 364.4。
步驟2：製備(S)-3-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(127b)
化合物127b 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲腈( 127a ) (100 mg，0.27 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(0.08 mL，0.78 mmol)及DIPEA (0.14 mL，0.78 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(4 g)，用0至100%含乙酸乙酯/甲醇(9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-3-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯甲腈( 127b ) (10 mg，9%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.76 - 10.58 (m, 1H), 10.54 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 2H), 7.19 - 7.07 (m, 2H), 6.44 - 6.34 (m, 1H), 4.96 - 4.81 (m, 1H), 4.25 - 4.08 (m, 1H), 3.81 - 3.68 (m, 1H), 3.58 - 3.42 (m, 1H), 3.44 - 3.33 (m, 1H), 2.23 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 417.5 (M+1), 439.5 (M+Na); MS (ES-): 415.5 (M-1)。 流程128
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(128c)
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(128b)
化合物128b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (366 mg，1.95 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.02 mL，5.84 mmol)及1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(128a ) (0.38 g，1.95 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺( 128b ) (566 mg，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.34 (s, 1H, D2 O可交換), 8.26 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (ddd, J = 11.9, 7.0, 2.8 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.65 (dt, J = 10.4, 8.8 Hz, 1H), 7.58 - 7.48 (m, 1H), 7.40 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.72 (dd, J = 4.4, 2.6 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -135.50, -135.68 (m), -139.73, -141.11 (m);19 F CPD NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -135.59 (d, J = 22.9 Hz), -140.48 (d, J = 22.9 Hz); MS (ES+): 347.3 (M+1); MS (ES-): 345.3 (M-1); HPLC純度：99.39 %。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(128c)
化合物128c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺( 128b ) (100 mg，0.29 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(146 mg，1.44 mmol)及DIPEA (0.15 mL，0.87 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用含0.1% TFA之乙腈及含0.1% TFA之水溶離]純化，隨後使用飽和碳酸氫鈉轉化成游離鹼後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 128c ) ( 24 mg，20%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.55 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.07 - 7.96 (m, 1H), 7.93 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.65 (dt, J = 5.7, 2.9 Hz, 1H), 7.63 - 7.47 (m, 1H), 7.40 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.15 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.39 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 5.01 (t, J = 4.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.30 - 4.08 (m, 1H), 3.88 - 3.69 (m, 1H), 3.58 - 3.43 (m, 1H), 3.45 - 3.20 (m, 2H), 2.17 - 1.77 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -133.86 - -137.91 (m), -139.79 - -143.07 (m);19 FCPD NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -135.89 (d, J = 22.6 Hz), -141.35 (d, J = 22.6 Hz); MS (ES+): 412.4 (M+1); MS (ES-): 410.4 (M-1), 446.3 (M+Cl); HPLC純度：97.91%。 流程129
製備(S)-(1-(7-((異丙胺基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(129b )
步驟1：製備2-氯-7-((異丙胺基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(129a )
化合物129a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (400 mg，0.93 mmol)在二氯乙烷(10 mL)中使用1-異丙胺(0.24 mL，2.8 mmol)、乙酸(0.064 mL)及NaBH(OAc)3 (297 mg，1.4 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0%至50% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈固體狀之2-氯-7-((異丙胺基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(129a ) (217 mg，49%產率)；1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 8.98 (br, s, 1H), 7.91 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.72 - 7.57 (m, 1H), 6.80 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 0.9 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.94 (s, 6H), 3.89 (s, 3H), 2.95 - 2.74 (m, 1H), 1.79 (br, s, 1H), 1.13 (d, J = 6.2 Hz, 6H); MS (ES+): 472.5 (M+1), 494.5 (M+Na); MS (ES-): 470.5 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-((異丙胺基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(129b )
化合物129b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-((異丙胺基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(129a ) (103 mg，0.22 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(221 mg，2.18 mmol)在NMP (1.5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(4 g)，用0至50% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-((異丙胺基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(129b )(8 mg，7%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) (兩種旋轉異構體之混合物) δ 11.21及11.18 (2s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.85及8.82 (2s, 1H), 8.12 - 8.05 (m, 1H), 7.24及7.20 (2d,J = 4.5 Hz, 1H), 7.10 - 7.01 (m, 2H), 6.77及6.73 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 4.66 - 4.52 (m, 1H), 4.45 - 4.29 (m, 2H), 4.22 (s, 1H), 3.98 - 3.12 (m, 13H), 2.13 - 1.68 (m, 4H), 1.35 - 1.28 (m, 6H); MS (ES+): 559.5 (M+Na); MS (ES-): 571.6 (M+Cl)。HPLC純度：96.89%。 流程130
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(130a )
化合物130a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(86a ) (100 mg，0.24 mmol)、DIPEA (0.11 mL，0.85 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.15 g，1.31 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-80%乙酸乙酯/己烷溶離)純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(130a ) (50 mg，43%)游離鹼。其藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18管柱24 g)，用乙腈及0.1% HCl水(0-50%)溶離]再純化，隨後凍乾，得到呈淡黃色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(130a ) (20 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.29 (s, 1H), 11.65 (s, 1H), 8.77 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.13 - 7.99 (m, 1H), 7.99 - 7.81 (m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.57 - 7.40 (m, 2H), 7.37 - 7.24 (m, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.75 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 4.10 - 4.01 (m, 2H), 3.94 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.40 - 1.95 (m, 4H); MS (ES+): 490.5 (M+1), 512.5 (M+Na); MS (ES-): 524.5 (M+Cl)。HPLC純度：98.13%。 流程131
製備(S)-1-(4-((1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(131a )
化合物131a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(72b ) (150 mg，0.41 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.14 g，1.21 mmol)及DIPEA (0.21 mL，1.21 mmol)在NMP (2 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(131a ) (50 mg，25%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.53 (s, 1H), 8.35 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.48 - 7.37 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.16 (dd, J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 7.00 (s, 3H), 6.47 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.86 (s, 6H), 3.78 (m, 1H), 3.48 (m, 1H), 2.31 - 1.82 (m, 4H). MS (ES+): 449.4; MS (ES-): 483.3 (M+Cl)。HPLC純度：94.06%。 流程132
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(132b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(132a)
化合物132a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (2 g，9.75 mmol)在2-丙醇(20 mL)中添加(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(1.11 g，9.75 mmol)、DIPEA (5.11 mL，29.3 mmol)來製備。由此得到呈黃色固體狀之(S)-1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 132a ) (1.28 g，46%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.71 - 7.66 (m, 1H), 7.58 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.07 - 6.97 (m, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.19 - 3.77 (m, 2H), 2.25 - 1.86 (m, 4H)。MS (ES-): 281.3, 317.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(132b)
化合物132b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 132a ) (0.3 g，1.06 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.3 g，1.06 mmol)、二第三丁基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(50 mg，0.13 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(610 mg，6.4 mmol)、Pd2 (dba)3 (60 mg，0.06 mmol)在無水二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 132b ) (0.03 g，6%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.18 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.31 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.28 (s, 2H), 7.08 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), ), 4.25 (m, 1H), 4.03 - 3.84 (m, 7H), 3.71 (s, 3H), 2.34 - 1.86 (m, 4H)。MS (ES+): 496.3; MS (ES-): 530.3 (M+Cl)。流程133
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(133b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(133a)
化合物133a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (2 g，9.75 mmol)之2-丙醇(20 mL)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.96 mL，9.75 mmol)、DIPEA (5.11 mL，29.3 mmol)製備。由此得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 133a ) (1.52 g，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.61 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 4.96 - 4.73 (m, 1H), 4.48 - 4.34 (m, 1H), 4.05 - 3.67 (m, 2H), 3.66 - 3.38 (m, 2H), 2.22 - 1.81 (m, 4H)。MS (ES+): 292.2 (M+Na)。MS (ES-): 268.3 (M-1), 304.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(133b)
化合物133b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 133a ) (0.5 g，1.85 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.53 g，1.85 mmol)、二第三丁基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(0.094 g，0.22 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(1.07 g，11.12 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.1 g，0.11 mmol)在無水二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 133b ) (100 mg，12%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.26 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.57 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.12 (s, 2H), 4.68 - 4.50 (m, 1H), 4.07 - 3.93 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.85 - 3.76 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.66 - 3.58 (m, 1H), 3.47 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 2.20 - 1.83 (m, 4H)。MS (ES+): 483.4 (M+1); MS (ES-): 517.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.94%。流程134
製備(3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯基)甲醇(134a )
化合物134a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (0.3 g，0.75 mmol)使用3-(羥甲基)苯基硼酸(171 mg，1.10 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (86 mg，0.075 mmol)、碳酸鉀(207 mg，1.5 mmol)在1,4-二噁烷(8 mL)及水(2 mL)中製備。由此在處理、藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]隨後[(矽膠，12 g)，用0-15% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯基)甲醇(134a ) (54 mg，15%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.93 (s, 1H, D2 O可交換), 8.28 (s, 2H), 8.24 - 8.15 (m, 2H), 7.83 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.43 (d,J = 4.7 Hz, 2H), 7.41 - 7.34 (m, 1H), 7.01 (s, 2H), 6.76 - 6.68 (m, 1H), 5.30 (t,J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.58 (d,J = 5.8 Hz, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 495.3 (M+1); (ES-): 471.4 (M-1)。 流程135
製備2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(135a )
化合物135a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (0.3 g，0.75 mmol)使用2-胺甲醯基苯基硼酸(185 mg，1.12 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (86 mg，0.075 mmol)、碳酸鉀(207 mg，1.5 mmol)在1,4-二噁烷(8 mL)及水(2 mL)中製備。由此在處理、藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(135a ) (26 mg，7%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.77 (s, 1H, D2 O可交換), 8.25 - 8.16 (m, 2H, D2 O可交換), 7.83 - 7.74 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.56 - 7.46 (m, 3H), 7.41 - 7.30 (m, 2H), 7.15 (s, 2H), 6.79 - 6.70 (m, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.67 (s, 3H); MS (ES+): 486.3 (M+1); 508.3 (M+Na); HPLC純度：95.32% 流程136
製備3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(136a )
化合物136a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (0.3 g，0.75 mmol)使用3-胺甲醯基苯基硼酸(185 mg，1.12 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (86 mg，0.075 mmol)、碳酸鉀(207 mg，1.5 mmol)在1,4-二噁烷(8 mL)及水(2 mL)中製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(136a ) (250 mg，69%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.97 (s, 1H, D2 O可交換), 8.81 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 8.45 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 8.33 - 8.27 (m, 1H), 8.23 - 8.09 (m, 2H, D2 O可交換), 7.98 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 - 7.82 (m, 1H), 7.56 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.49 - 7.34 (m, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.81 - 6.69 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 508.3 (M+Na); (ES-): 484.4 (M-1); HPLC純度：98.25%。 流程137
製備(2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯基)甲醇(137a )
化合物137a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (0.3 g，0.75 mmol)使用2-(羥甲基)苯基硼酸(171 mg，1.10 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (86 mg，0.075 mmol)、碳酸鉀(207 mg，1.5 mmol)在1,4-二噁烷(8 mL)及水(2 mL)中製備。由此在處理、藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)苯基)甲醇(137a ) (65 mg，18%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.93 (s, 1H, D2 O可交換), 8.27 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.93 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.67 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.47 (t,J = 7.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.30 (m, 2H), 6.91 (s, 2H), 6.75 (t,J = 3.5 Hz, 1H), 5.19 (t,J = 5.6 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.86 (d,J = 5.5 Hz, 2H), 3.85 (s, 6H), 3.68 (s, 3H); MS (ES+): 495.3 (M+1); (ES-): 471.4 (M-1); HPLC純度：97.31%。 流程138
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(138b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(138a)
化合物138a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (2 g，9.75 mmol)之2-丙醇(20 mL)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.96 mL，9.75 mmol)、DIPEA (5.11 mL，29.3 mmol)來製備。由此得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 138a ) (1.17 g，45%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.27 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.40 (s, 1H), 3.92 (s, 2H), 3.68 - 3.56 (m, 1H), 3.56 - 3.42 (m, 1H), 2.20 - 1.85 (m, 4H)。MS (ES+): 270.2 (M+1); MS (ES-): 268.2, 304.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(138b)
化合物138b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 138a ) (500 mg，1.85 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (508 mg，2.32 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，398 mg，0.834 mmol)、碳酸銫(1.81 g，5.56 mmol)、Pd2 (dba)3 (260 mg，0.28 mmol)在無水二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 138b ) (410 mg，46%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.82 - 10.49 (m, 1H, D2 O可交換), 8.43 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.45 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 6.98 (s, 2H), 4.77 - 4.54 (m, 1H), 4.17 - 3.93 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.65 - 3.50 (m, 2H), 2.31 - 1.96 (m, 4H); MS (ES+) 483.3 (M+1), 505.3 (M+Na), (ES-) 517.3 (M+Cl); HPLC純度，96.8 %。 流程139
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(139b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(139a)
化合物139a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (2 g，9.75 mmol)在2-丙醇(20 mL)中添加(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(1.11 g，9.75 mmol)、DIPEA (5.11 mL，29.3 mmol)來製備。由此得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 139a ) (2.2 g，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.29 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.58 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.25 - 3.87 (m, 2H), 2.35 - 1.67 (m, 4H)。MS (ES-): 317.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(139b)
化合物139b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 139a ) (0.5 g，1.85mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.53 g，1.85 mmol)、二第三丁基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(0.094 g，0.22 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(1.07 g，11.12 mmol)、Pd2 (dba)3 (102 mg，0.111 mmol)在無水二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色HCl鹽形式之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 139b ) (38 mg，4%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.54 (s, 1H), 8.45 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.44 (d,J = 5.4 Hz, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (s, 2H), 4.88 - 4.76 (m, 1H), 4.45 - 4.30 (m, 1H), 4.11 - 3.96 (m, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 2.21 - 1.99 (m, 4H); MS (ES+): 496.4 (M+1); MS (ES-): 494.3 (M-1)。 流程140
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(140c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(140b )
化合物140b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(140a ) (0.5 g，2.5 mmol，CAS # 39551-54-7)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.31 mL，7.50 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.79 g，2.75 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至30% DCM/MeOH溶離]純化後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(140b ) (0.58 g，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.36 (s, 1H), 8.93 (dd, J = 4.3, 1.5 Hz, 1H), 8.30 - 8.13 (m, 2H), 8.02 - 7.87 (m, 2H), 6.96 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H)。MS (ES+): 435.3 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(140c )
化合物140c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(140b ) (0.15 g，0.36 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.04 mL，0.36 mmol)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，0.03 g，0.04 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(0.11 g，1.09 mmol)、Pd2 (dba)3 (30 mg，0.04 mmol)在脫氣甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(140c ) (50 mg，29%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ (旋轉異構體之混合物) δ 9.44及9.29 (2s, 1H), 8.45 - 8.42及8.42 - 8.41 (2m, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.05及7.97 (2s, 1H), 7.75及7.73 (2s, 1H), 7.62及7.59 (2d,J = 4.2 Hz, 1H), 6.97及6.95 (2s, 2H), 5.15及4.99 (2s, 1H), 4.40及4.24 (2s, 1H), 3.96 - 3.34 (m, 13H), 2.14 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 478.3 (M+1); MS (ES-): 476.3 (M-1); 512.5 (M+Cl)。 流程141
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(141d )
步驟1：製備2-氯-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(141b )
化合物141b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(141a ) (100 mg，0.29 mmol，根據由Su, Qibin等人; 《醫藥化學雜誌》, 57(1), 144-158; 2014所報道之程序製備)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (0.15 mL，0.88 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (93 mg，0.29 mmol)來製備。由此在過濾後得到呈白色固體狀之2-氯-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(141b ) (122 mg，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.92 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.01 - 7.92 (m, 2H), 7.81 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.66 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 7.47 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.23 (s, 1H), 6.90 (s, 2H), 3.86 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.37 (s, 3H); MS (ES+) 556.1 (M+1); 577.2 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(141c )
化合物141c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(141b ) (150 mg，0.27 mmol)、DIPEA (0.14 mL，0.81 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(82 mg，0.81 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(141c ) (130 mg，78%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 - 10.07 (m, 1H, D2 O可交換), 8.18 (s, 1H), 8.02 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 8.00 - 7.80 (m, 1H), 7.44 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.20 (d,J = 3.9 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 4.98 - 4.76 (m, 1H, D2 O可交換), 4.34 - 4.04 (m, 1H), 3.86 (s, 6H), 3.80 - 3.71 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.64 - 3.55 (m, 1H), 3.47 - 3.37 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.10 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+ ) 642.3 (M+Na); (ES-): 618.4 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(141d )
向(S)-(1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(141c ) (650 mg，1.05 mmol)於MeOH/THF (50 mL)中之溶液中添加Cs2 CO3 (1025 mg，3.15 mmol)。所得混合物在50℃下加熱隔夜。將反應混合物冷卻至室溫，真空濃縮，且將所得殘餘物溶解於乙酸乙酯中，用水、鹽水洗滌，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由層析[矽膠(24 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18 50 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]進一步純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(141d ) (320 mg，66%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.42 (s, 2H, D2 O可交換), 8.45 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.06 - 6.89 (m, 4H), 4.46 - 4.24 (m, 4H, 1H為D2 O可交換的), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.48 (m, 2H), 2.16 - 1.92 (m, 4H); MS (ES+ ) 466.3 (M+1); (ES-) 464.6 (M-1); 500.3 (M+Cl); HPLC純度，97.94%。 流程142
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(142b )
步驟1：製備(S)-1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(142a )
化合物142a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(141b ) (150 mg，0.27 mmol)、DIPEA (0.14 mL，0.81 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(93 mg，0.81 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(142a ) (80 mg，47%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 - 9.92 (m, 1H, D2 O可交換), 8.24 - 8.10 (m, 1H), 8.03 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.90 - 7.72 (m, 1H), 7.45 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.26 - 7.15 (m, 1H), 7.15 - 6.83 (m, 4H), 4.57 - 4.33 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.59 - 3.46 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.05 - 1.90 (m, 3H), 2.27 - 2.11 (m, 1H), 1.26 - 1.11 (m, 2H); MS (ES+): 633.3 (M+1); 656.3 (M+Na); (ES-): 631.4 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(142b )
化合物142b 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(142a ) (50 mg，0.79 mmol)在MeOH/THF (3 mL)中使用Cs2 CO3 (77 mg，0.24 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(142b ) (28 mg，74%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.03 (s, 1H, D2 O可交換), 9.68 (s, 1H, D2 O可交換), 8.14 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.14 - 6.97 (m, 3H), 6.91 (s, 1H), 6.81 - 6.68 (m, 2H), 4.47 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 3.92 (s, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.64 - 3.50 (m, 1H), 2.29 - 2.09 (m, 1H), 2.04 - 1.81 (m, 3H); MS (ES+): 479.3 (M+1); (ES-): 477.4 (M-1); HPLC純度，97.22%。 流程143
製備(S)-1-(8-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(143h )
步驟1：製備3-異丙氧基-2-硝基苯甲酸異丙酯(143b )
在室溫下，向3-羥基-2-硝基-苯甲酸(143a ) (10.0 g，54.6 mmol)於DMF (40.0 mL)中之攪拌溶液中添加碳酸鉀(30.14 g，218 mmol)及異丙基碘(13.09 mL，77.04 mmol)。反應混合物在回流下攪拌4小時且在劇烈攪拌下倒入冰水中。用EtOAc (3 × 200 mL)萃取水層。合併之有機層用鹽水(50.0 mL)洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈棕色液體狀之3-異丙氧基-2-硝基苯甲酸異丙酯(143b )(8 g，55 %)，其未經進一步純化即原樣使用；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.90 - 7.59 (m, 2H), 7.53 (dd,J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 5.09 (m, 1H), 4.95 - 4.57 (m, 1H), 1.26 (dd,J = 6.1, 4.0 Hz, 12H); MS (ES+): 268 (M+1)。
步驟2：製備3-異丙氧基-2-硝基苯甲酸(143c )
向3-異丙氧基-2-硝基苯甲酸異丙酯(143b ) (8.0 g，29.9 mmol)於甲醇(32 mL)中之攪拌溶液中添加氫氧化鈉(5.9 g，22.07 mmol)於水(32.0 mL)中之溶液且在室溫下攪拌5小時。反應混合物在0℃下用1 N HCl酸化且藉由過濾收集所獲得之固體，在真空烘箱中在40℃下乾燥，得到呈灰白色固體狀之3-異丙氧基-2-硝基苯甲酸(143c ) (5.5 g，81 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.76 - 7.40 (m, 3H), 4.82 (m, 1H), 1.24 (d,J = 6.0 Hz, 6H); MS (ES-): 224.0 (M-1)。
步驟3：製備2-胺基-3-異丙氧基苯甲酸(143d )
向3-異丙氧基-2-硝基苯甲酸(143c ) (5.5 g，22.22 mmol)於乙醇(60 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (1.0 g，0.94 mmol)且在室溫下使用氫氣球氫化12小時。反應混合物經由矽藻土床過濾以移除Pd/C。將濾液濃縮至乾，得到呈微黃色固體狀之2-胺基-3-異丙氧基苯甲酸(143d ) (3.5 g，74 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.32 (dd,J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 6.97 (dd,J = 8.0, 1.4 Hz, 1H), 6.48 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 4.55 (m, 1H), 1.28 (d,J = 6.0 Hz, 6H); MS (ES-): 194.0 (M-1)。
步驟4：製備8-異丙氧基喹唑啉-2,4-二醇(143e )
向2-胺基-3-異丙氧基苯甲酸(143d ) (3.5 g，17.92 mmol)於乙酸(96.25 mL)中之攪拌溶液中添加脲(14.99 g，248.08 mmol)且在110℃下加熱5小時。將反應混合物冷卻至室溫且真空濃縮至乾。殘餘物用水(250 mL)稀釋且所獲得之固體藉由過濾收集，真空乾燥，得到呈棕色固體狀之8-異丙氧基喹唑啉-2,4-二醇(143e ) (1.8 g，42 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.29 (s, 1H), 10.38 (s, 1H), 7.44 (dd,J = 7.9, 1.2 Hz, 1H), 7.36 - 7.26 (m, 1H), 7.11 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 4.72 (dt,J = 12.0, 6.0 Hz, 1H), 1.31 (dd,J = 6.1, 1.0 Hz, 6H); MS (ES-): 219.0 (M-1)。
步驟5：製備2,4-二氯-8-異丙氧基喹唑啉(143f )
在室溫下，向8-異丙氧基喹唑啉-2,4-二醇(143e ) (1.5 g，6.81 mmol)於甲苯(9 mL)中之攪拌溶液中添加DIPEA (3.5 mL，27.08 mmol)、POCl3 (9 mL)且在90℃下加熱12小時。反應混合物在劇烈攪拌下倒入冰水中且用EtOAc (2 × 100 mL)萃取水層。合併之有機萃取物用飽和碳酸氫鈉溶液(50.0 mL)洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用乙酸乙酯/正己烷(0-5 %)溶離]純化，得到呈微黃色固體狀之2,4-二氯-8-異丙氧基喹唑啉(143f ) (0.8 g，46 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.84 - 7.74 (m, 2H), 7.67 (q,J = 4.7 Hz, 1H), 4.91 (m, 1H), 1.39 (d,J = 6.0 Hz, 6H)。
步驟6：製備2-氯-8-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(143g )
化合物143g 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-8-異丙氧基喹唑啉(143f ) (1.0 g，3.88 mmol)在IPA (15 mL)中使用DIPEA (2.03 mL，15.71 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基胺(57a ) (0.96 g，3.88 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之2-氯-8-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(143g ) (600 mg，33 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.78 (dd,J = 8.1, 1.6 Hz, 1H), 7.47 - 7.13 (m, 2H), 4.80 (dt,J = 19.9, 5.9 Hz, 2H), 4.56 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 4.09 - 3.82 (m, 2H), 3.63 (dd,J = 5.7, 4.0 Hz, 2H), 2.24- 1.93 (m, 3H), 1.82 (td,J = 8.8, 8.2, 3.9 Hz, 1H), 1.33 (dd,J = 6.0, 2.4 Hz, 6H); MS (ES+): 470.0 (M+1)；HPLC純度：98.63%。
步驟7：製備(S)-1-(8-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(143h )
化合物143h 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-8-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(143g ) (350 mg，0.74 mmol)及L-脯胺醯胺(0.42 g，3.71 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-40%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之化合物(143h ) (0.06 g，15%)。白色固體藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水(0-50%)溶離]再純化，得到呈黃色HCl鹽形式之(S)-1-(8-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(143h ) (60 mg)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.34 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.12 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.11 (d, J = 8.9 Hz, 3H), 6.99 (q, J = 8.6 Hz, 3H), 4.95 - 4.76 (m, 1H), 4.58 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.01 - 3.85 (m, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.35 - 3.29 (m, 1H), 2.37 - 1.76 (m, 4H), 1.38 - 1.17 (m, 6H)。MS (ES+): 570.3 (M+Na)。 流程144
製備(S)-(1-(8-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(144a )
化合物144a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-8-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(143g ) (300 mg，0.63 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.64 g，6.38 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-40%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之化合物(144a ) (70 mg，20 %)。固體藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水(0-50%)溶離]再純化，得到呈黃色HCl鹽形式之(S)-(1-(8-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(144a ) (80 mg)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) (旋轉異構體之混合物) δ 10.35及10.11 (2s, 1H), 8.26及8.13 (s, 2H), 8.09及8.06 (2s, 1H), 7.12及7.10 (2s, 1H), 7.06 - 6.89 (m, 4H), 4.87 - 4.61 (m, 1H), 4.23 - 3.46 (m, 14H), 2.29 - 1.60 (m, 4H), 1.31及1.27 (d,J = 6.0 Hz, 6H); MS (ES+): 535.3 (M+1); MS (ES-): 533.4 (M-1)。HPLC純度：96.15%。 流程145
製備(S)-(1-(7-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(145h )
步驟1：製備4-異丙氧基-2-硝基苯甲酸異丙酯(145b )
化合物145b 係根據流程143之步驟1中所報道之程序，由4-羥基-2-硝基苯甲酸(145a ) (10.0 g，54.60 mmol)在DMF (40 mL)中使用碳酸鉀(30.14 g，218 mmol)及異丙基碘(13.09 mL，77.04 mmol)來製備。由此在處理後得到呈棕色液體狀之4-異丙氧基-2-硝基苯甲酸異丙酯(145b )(8 g，55 %)，其未經進一步純化即原樣使用；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.83-7.80 (d, 1H), 7.50-7.49 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 5.06 (m, 1H), 4.81 (m, 1H), 1.30-1.14 (d, 12H); MS ES (+): 268 (M+1)。
步驟2：製備4-異丙氧基-2-硝基苯甲酸(145c )
化合物145c 係根據流程143之步驟2中所報道之程序，由4-異丙氧基-2-硝基苯甲酸異丙酯(145b ) (8.0 g，29.9 mmol)在甲醇(32 mL)及水(32 mL)中使用氫氧化鈉(5.9 g，22.07 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之4-異丙氧基-2-硝基苯甲酸(145c ) (5.5 g，81 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.88-7.83 (d, 1H). 7.49-7.43 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 4.84-4.76 (m, 1H), 1.30-1.24 (d, 6H); MS (ES-): 224.0 (M-1)。
步驟3：製備2-胺基-4-異丙氧基苯甲酸(145d )
化合物145d 係根據流程143之步驟3中所報道之程序，由4-異丙氧基-2-硝基苯甲酸(145c )製備。由此在處理後得到呈黃色固體狀之2-胺基-4-異丙氧基苯甲酸(145d ) (3.5 g，73 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.55-8.10 (d, 2H), 7.33-7.30 (d, 1H), 6.99-6.66 (d, 1H), 6.50-6.45 (m, 1H), 4.59-4.51 (m, 1H), 1.29-1.27 (d, 6H); MS ES (-): 194.0 (M-1)。
步驟4：製備7-異丙氧基喹唑啉-2,4-二醇(145e )
化合物145e 係根據流程143之步驟4中所報道之程序，由2-胺基-4-異丙氧基苯甲酸(145d ) (3.5 g，17.92 mmol)在乙酸(96.25 mL)中使用脲(14.99 g，248.08 mmol)來製備。由此得到呈棕色固體狀之7-異丙氧基喹唑啉-2,4-二醇(145e ) (1.8 g，46 %)；MS (ES-): 219.2 (M-1)。
步驟5：製備2,4-二氯-7-異丙氧基喹唑啉(145f )
化合物145f 係根據流程143之步驟5中所報道之程序，由7-異丙氧基喹唑啉-2,4-二醇(145e ) (1.5 g，6.81 mmol)在甲苯(9 mL)中使用DIPEA (3.5 mL，27.08 mmol)及POCl3 (9 mL)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用乙酸乙酯/正己烷(0-5 %)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之2,4-二氯-7-異丙氧基喹唑啉(145f ) (0.8 g，46 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.17-8.14 (d, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 4.98-4.94 (m, 1H), 1.41-1.36 (d, 6H); MS (ES+): 258.0 (M+1)。
步驟6：製備2-氯-7-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(145g )
化合物145g 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-異丙氧基喹唑啉(145f ) (1.0 g，3.88 mmol)在IPA (15 mL)中使用DIPEA (2.03 mL，15.71 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基胺(57a ) (0.96 g，3.88 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之2-氯-7-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(145g ) (0.6 g，33 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.88 (s, 1H), 8.64-8.61 (d, 1H). 8.21-8.20 (d, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.17-7.13 (m, 2H), 6.93 (s, 2H),4.87-4.83 (m, 1H), 3.88 (s, 6H). 3.70 (s, 3H), 1.35-1.33 (d, 6H); MS (ES-): 468.0 (M-1)。
步驟7：製備(S)-(1-(7-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(145h )
化合物145h 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(145g ) (180 mg，0.38 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.38 g，3.75 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-40%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之化合物(145h ) (0.11 g，54%)。白色固體藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水(0-50%)溶離]再純化，得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(145h ) (90 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.29 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.84 - 6.61 (m, 2H), 4.73 (p, J = 5.9 Hz, 1H), 4.55 - 4.14 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.57 - 3.18 (m, 3H), 2.06 - 1.94 (m, 4H), 1.32 (d, J = 5.9 Hz, 6H)。MS (ES+): 535.4 (M+1); MS (ES-): 533.4 (M-1)。 流程146
製備3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯甲醯胺(146a )
化合物146a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (150 mg，0.36 mmol)使用3-胺甲醯基苯基硼酸(89 mg，0.54 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (83 mg，0.072 mmol)及碳酸鉀(99 mg，0.72 mmol)在1,4-二噁烷及水(10 mL，4:1)中製備。由此在處理及過濾，隨後對固體進行乾燥後得到呈黃色固體狀之3-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯甲醯胺(146a ) (85 mg，47%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.65 (s, 1H, D2O可交換), 8.95 (s, 1H), 8.60 (d,J =7.9 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.16 - 8.08 (m, 2H), 8.00 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.71 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.58 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.00 (s, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.72 (s, 3H); MS (ES+): 525.3 (M+Na); (ES-): 501.2 (M-1)。 流程147
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(147b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(147a)
化合物147a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (2 g，9.75 mmol)在2-丙醇(20 mL)中添加(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(1.21 g，10.64 mmol)、DIPEA (5.57 mL，31.9 mmol)來製備。由此得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 147a ) (2.2 g，78%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.85 - 7.65 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.09 - 6.97 (m, 1H), 6.79 - 6.64 (m, 1H), 4.65 (dd, J = 8.3, 2.9 Hz, 1H), 4.17 - 3.58 (m, 2H), 2.44 - 1.75 (m, 4H); MS (ES-): 300.3, 302.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(147b)
化合物147b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 147a ) (0.3 g，1.13 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.5 g，1.3 mmol)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，0.08 g，0.14 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(0.33 g，3.39 mmol)、Pd2 (dba)3 (100 mg，0.11 mmol)在無水甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 147b ) (0.04 g，6%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.88 (s, 1H), 7.84 - 7.47 (m, 2H), 7.47 - 6.78 (m, 5H), 6.69 (s, 1H), 6.65 - 6.59 (m, 1H), 4.91 - 4.78 (m, 1H), 4.47 - 4.02 (m, 1H), 3.74 (s, 9H), 3.26 - 2.88 (m, 1H), 2.36 - 1.56 (m, 4H)。MS (ES+): 479.3 (M+1), 501.3 (M+Na); MS (ES-): 513.3 (M+Cl)。流程148
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(148b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(148a)
化合物148a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (3 g，15.87 mmol)在2-丙醇(30 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(1.57 mL，15.87 mmol)、DIPEA (8.32 mL，47.6 mmol)來製備。由此得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 148a ) (3.07 g，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.22 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.90 (d, 1H), 4.58 - 4.19 (m, 1H), 4.03 - 3.74 (m, 1H), 3.58 (d,J = 27.4 Hz, 3H), 1.98 (d,J = 27.9 Hz, 4H)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(148b)
化合物148b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 148a ) (0.3 g，1.18 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.34 g，1.18 mmol)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，0.09 g，0.14 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(0.34 g，3.6 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.10 g，0.11 mmol)在無水甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(148b) (80 mg，14 %產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.85 (s, 1H), 8.81 - 8.66 (m, 1H), 8.37 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.96 - 7.82 (m, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.03 (s, 2H), 4.62 (m, 1H), 4.20 - 3.42 (m, 13H), 2.26 - 1.86 (m, 4H); MS (ES+): 467.3 (M+1), 489.3 (M+Na); MS (ES-): 501.3 (M+Cl)。流程149
製備(S)-(1-(6-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(149c )
步驟1：製備6-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(149b )
化合物149b 係根據流程1中所報道之程序，由6-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(149a ) (1 g，3.4 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (2.38 mL，13.6 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (1.17 g，4.08 mmol)來製備。由此得到呈淡黃色固體狀之6-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(149b ) (320 mg，19%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.57 (s, 1H), 8.14 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.77 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.37 (d,J = 8.2 Hz, 4H), 7.29 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 6.94 - 6.83 (m, 2H), 3.86 (d,J = 1.2 Hz, 6H), 3.73 (s, 2H), 3.68 (d,J = 1.1 Hz, 3H), 3.51 (s, 2H), 2.72 (s, 4H); MS (ES+): 507.3 (M+1), (ES-): 541.4 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(149c )
化合物149c 係根據流程2中所報道之程序，由6-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(149b ) (120 mg，0.24 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(72 mg，0.71 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/二氯甲烷(0至40%)溶離]純化後得到呈淺棕色固體狀之(S)-(1-(6-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(149c ) (131 mg，97%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.67 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.15 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.51 - 7.09 (m, 5H), 6.90 (s, 2H), 5.31 - 4.80 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 4.13 (d,J = 19.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 7H), 3.79 - 3.51 (m, 8H), 3.45 (s, 2H), 2.64 (d,J = 5.3 Hz, 2H), 2.61 - 2.50 (m, 2H), 2.03 - 1.75 (m, 4H); MS (ES+): 572.4 (M+1), 594.4 (M+Na), (ES-): 570.5 (M-1)。 流程150
製備(S)-(1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(150c)
步驟1：製備(S)-(1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(150b)
化合物150b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由5,7-二氯噻唑并[5,4-d]嘧啶(150a ) (500 mg，15.87 mmol；CAS # 13479-88-4)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.24 mL，2.43 mmol)、DIPEA (1.27 mL，7.28 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% MeOH/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 150b ) (0.33 g，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.17 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.04 (q, J = 5.5, 5.0 Hz, 1H), 4.85 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.40 (dt, J = 10.4, 4.6 Hz, 1H), 4.23 - 3.96 (m, 1H), 3.75 - 3.49 (m, 2H), 2.20 - 1.83 (m, 4H)。MS (ES+): 293.2 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-(1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(150c)
化合物150c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 150b ) (0.15 g，0.55 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.19 g，0.67 mmol)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，0.04 g，0.07 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(0.16 g，1.66 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.05 g，0.06 mmol)在無水甲苯(7 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 150c ) (0.03 g，10%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.12 (s, 2H), 5.19 - 4.98 (m, 1H), 4.70 - 4.47 (m, 1H), 4.31 - 4.14 (m, 1H), 4.13 - 3.96 (m, 1H), 3.94 - 3.55 (m, 11H), 2.15 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 484.3 (M+1); MS (ES-): 518.3 (M+Cl)。HPLC純度：95.61%。 流程151
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(151b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(151a)
化合物151a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (800 mg，4.23 mmol)在2-丙醇(16 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(482 mg，4.23 mmol)、DIPEA (2.21 mL，12.69 mmol)來製備。由此得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 151a ) (600 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) (旋轉異構體之混合物) δ 8.33, 8.25 (2s, 1H), 7.58, 7.53 (2s, 1H), 7.13, 7.05 (2s, 1H), 6.96 (2s, 1H), 4.87, 4.52 (2d,J = 8.4 Hz, 1H), 4.18 - 3.86 (m, 1H), 3.81 - 3.52 (m, 1H), 2.38 - 1.70 (m, 4H); MS (ES+): 267.3 (M+1), (ES-): 301.2, 303.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(151b)
化合物151b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 151a ) (0.3 g，1.13 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (0.32 g，1.13 mmol)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，100 mg，0.11 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(0.32 g，3.37 mmol)、Pd2 (dba)3 (100 mg，0.11 mmol)在無水甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(151b) (60 mg，10%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) (兩種旋轉異構體之混合物) δ 10.94及10.78 (2s, 1H), 8.79及8.68 (2s, 1H), 8.43及8.33 (2d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.94及7.79 (2s, 1H), 7.60及7.26 (2s, 1H), 7.21及7.14 (2s, 2H), 7.10及7.09 (2s, 1H), 7.07 - 7.02 (m, 1H), 5.09 - 5.01及4.80 - 4.68 (2m, 1H), 4.40 - 4.26 (m, 1H), 4.12 - 3.99 (m, 1H), 3.92及3.88 (2s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.43 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 480.3 (M+1); MS (ES-): 478.4 (M-1)。 流程152
製備(S)-1-(6-苯甲基-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(152a )
化合物152a 係根據流程2中所報道之程序，由6-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(149b ) (120 mg，0.24 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(81 mg，0.71 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/二氯甲烷(0至40%)溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-1-(6-苯甲基-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(152a ) (90 mg，65%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.46 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.12 (s, 1H), 7.97 - 7.72 (m, 1H), 7.49 - 7.24 (m, 5H), 7.20 - 6.98 (m, 2H), 6.95 - 6.80 (m, 2H), 4.39 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 3.99 - 3.84 (m, 7H), 3.83 - 3.76 (m, 1H), 3.78 - 3.63 (m, 3H), 3.55 - 3.41 (m, 3H), 3.42 - 3.32 (m, 1H), 2.78 - 2.56 (m, 4H), 2.30 - 2.02 (m, 1H), 2.02 - 1.76 (m, 3H); MS (ES+): 585.4 (M+1), (ES-): 583.4 (M-1)。 流程153
製備(S)-(1-(7-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(153c )
步驟1：製備7-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(153b )
化合物153b 係根據流程1中所報道之程序，由7-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(153a ) (1 g，3.4 mmol；CAS # 1059735-34-0)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (2.38 mL，13.6 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (1.17 g，4.08 mmol)來製備。由此得到呈淡黃色固體狀之7-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(153b ) (350 mg，20%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.56 (s, 1H), 8.15 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.45 - 7.23 (m, 5H), 6.90 (s, 2H), 3.86 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.78 - 2.68 (m, 2H), 2.68 - 2.58 (m, 2H); MS (ES+): 507.3 (M+1), 529.3 (M+Na), (ES-): 541.4 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(153c )
化合物153c 係根據流程2中所報道之程序，由7-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(153b ) (150 mg，0.296 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(90 mg，0.89 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用DMA 80/二氯甲烷(0至40%)溶離]純化後得到呈橙色固體狀之(S)-(1-(7-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(153c ) (110 mg，65%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.65 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.17 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.45 - 7.14 (m, 5H), 6.91 (s, 2H), 5.01 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 4.33 - 3.97 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.63 (s, 2H), 3.32 (d,J = 1.7 Hz, 4H), 3.22 (s, 2H), 2.69 (q,J = 5.6 Hz, 2H), 2.56 (d,J = 5.5 Hz, 2H), 2.02 - 1.72 (m, 4H); MS (ES+) 572.4 (M+1), 594.5 (M+Na), (ES-): 570.4 (M-1), 606.6 (M+Cl)。 流程154
製備(S)-1-(7-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(154a )
化合物154a 係根據流程2中所報道之程序，由7-苯甲基-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(153b ) (150 mg，0.3 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(101 mg，0.89 mmol)在2-丙醇(4 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/二氯甲烷(0至40%)溶離]純化後得到呈橙色固體狀之(S)-1-(7-苯甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(154a ) (100 mg，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.44 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.14 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.42 - 7.23 (m, 5H), 7.08 (s, 2H), 6.90 (s, 2H), 4.36 (s, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.83 - 3.74 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 3.55 - 3.35 (m, 1H), 3.23 (s, 2H), 2.69 (d,J = 6.3 Hz, 2H), 2.57 (d,J = 5.4 Hz, 2H), 2.15 (s, 1H), 1.91 (d,J = 14.8 Hz, 3H); MS (ES+): 585.4 (M+1), 607.4 (M+Na), (ES-): 583.4 (M-1)。 流程155
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(155a )
化合物155a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (800 mg，1.91 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(2.18 g，19.1 mmol)及DIPEA (0.627 mL，3.59 mmol)在NMP (40 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-10%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之化合物(155a ) (0.43 g，44 %)。固體藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水(0-50%)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(155a ) (232 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.29 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.99 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.62 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.51 (m, 1H), 2.38 - 1.86 (m, 4H)。MS (ES+): 496.3 (M+1); MS (ES-): 494.4 (M-1), 530.3 (M+Cl)。 流程156
製備2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(156a )
化合物156a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (150 mg，0.37 mmol)、吡咯啶(0.09 mL，1.12 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/二氯甲烷(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(156a ) (0.03 g，19%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.56 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.39 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.39 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.55 (d, J = 6.2 Hz, 4H), 1.91 (q, J = 3.5 Hz, 4H)。MS (ES+): 436.4 (M+1)。 流程157
製備2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯甲醯胺(157a )
化合物157a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (150 mg，0.36 mmol)使用2-胺甲醯基苯基硼酸(89 mg，0.54 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (83 mg，0.072 mmol)及碳酸鉀(99 mg，0.72 mmol)在1,4-二噁烷及水(10 mL，4:1)中製備。由此在處理及過濾，隨後對固體進行乾燥後得到呈灰白色固體狀之2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)苯甲醯胺(157a ) (23 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.48 (s, 1H), 8.22 (d,J = 1.5 Hz, 2H, D2 O可交換), 8.10 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.95 - 7.87 (m, 1H), 7.71 - 7.64 (m, 1H), 7.57 - 7.40 (m, 4H), 7.33 - 7.18 (m, 1H), 7.16 (s, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.68 (s, 3H); MS (ES+): 503.3 (M+1); 525.2 (M+Na); (ES-) 501.3 (M-1)。 流程158
製備(S)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(158b )
步驟1：製備5-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(158a )
化合物158a 係根據流程1中所報道之程序，由5,7-二氯噻唑并[5,4-d]嘧啶(150a ) (0.3 g，1.46 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.76 mL，4.37 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.46 g，1.6 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用甲醇/DCM (0至30%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之5-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(158a ) (0.41 g，67%產率)；MS (ES+): 441.2及443.2 (M+Na); MS (ES-): 417.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(158b )
化合物158b 係根據流程2中所報道之程序，由5-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(158a ) (0.07 g，0.16 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.05 g，0.47 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用DMA 80/二氯甲烷(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(158b ) (0.04 g，52%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (兩種旋轉異構體之混合物) δ 9.79及9.26 (2s, 1H), 8.85及8.52 (2s, 1H), 8.18及8.09 (2s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.46 - 6.79 (m, 4H), 4.56 - 4.37及4.36 - 4.29 (2m, 1H), 3.91 (s, 7H), 3.72及3.69 (2s, 3H), 3.62 - 3.48 (m, 1H), 2.37 - 1.83 (m, 4H)。MS (ES+): 497.3 (M+1); MS (ES-): 531.3 (M+Cl)。 流程159
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(159c)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(159a)
化合物159a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(141a ) (1 g，2.92 mmol)之2-丙醇(10 mL)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.3 gm，2.92 mmol)、DIPEA (0.77 mL，4.38 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 159a ) (865 mg，73%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.96 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 6.88 (s, 1H), 5.10 - 4.66 (m, 1H, D2 O可交換), 4.28 (s, 1H), 3.90 - 3.35 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.12 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+ ) 407.3 (M+1); (ES-) 441.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(159b)
化合物159b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 159a ) (620 mg，1.52 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (1085 mg，3.05，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，327 mg，0.69 mmol)、碳酸銫(1241 mg，3.81 mmol)、Pd2 (dba)3 (209 mg，0.23mmol)在甲苯及t -BuOH (20 mL，5:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]、[矽膠(24 g)，用0-10% MeOH/DCM溶離]純化兩次後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 159b ) (198 mg，21%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.33 (s, 1H, D2 O可交換), 8.68 - 8.24 (m, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.04 (s, 2H), 7.36 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.25 (d,J = 3.8 Hz, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.72 (d,J = 4.1 Hz, 1H), 5.04 - 4.55 (m, 1H, D2 O可交換), 4.56 - 4.15 (m, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.78 - 3.71 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.64 - 3.47 (m, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.13 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 620.8 (M+1); 642.4 (M+Na); (ES-): 618.4 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(159c)
化合物159c 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 159b ) (150 mg，0.24 mmol)及Cs2 CO3 (237 mg，0.73 mmol)在MeOH/THF (5 mL，3:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]，隨後製備型HPLC [(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 159c ) (26 mg，23%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.00 (s, 1H, D2 O可交換), 10.40 (s, 1H, D2 O可交換), 8.37 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.16 - 7.03 (m, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.72 - 6.62 (m, 1H), 4.73 - 4.38 (m, 2H, D2 O可交換), 4.06 - 3.93 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.61 - 3.53 (m, 2H), 2.22 - 1.92 (m, 4H); MS (ES+): 466.3 (M+1), 488.4 (M+Na); (ES-): 464.4 (M-1), 500.3 (M+Cl)。 流程160
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(160d )
步驟1：製備2-氯-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(160b )
化合物160b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(160a ) (3 g，8.77 mmol，根據由Su, Qibin等人; 《醫藥化學雜誌》, 57(1), 144-158; 2014所報道之程序製備)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (4.59 mL，26.3 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(57a ) (4.17 g，13.15 mmol)來製備。由此在過濾後得到呈白色固體狀之2-氯-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(160b ) (1.03 g，21%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.90 (s, 1H), 8.26 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 8.21 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 - 7.74 (m, 3H), 7.46 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 6.98 - 6.90 (m, 3H), 3.89 (s, 6H), 3.72 (s, 3H), 2.34 (s, 3H); MS (ES+): 555.2 (M+1); 577.2 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-(1-(5-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(160c )
化合物160c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(160b ) (400 mg，0.72 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(219 mg，2.16 mmol)及DIPEA (0.378 mL，2.162 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(5-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(160c ) (166 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.57 (s, 1H, D2 O可交換), 8.22 (s, 1H), 7.88 (d,J = 3.7 Hz, 2H), 7.68 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.41 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.64 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 4.93 - 4.80 (m, 1H, D2 O可交換), 4.25 (s, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 5H), 3.34 - 3.21 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 2.05 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 620.4 (M+1); 642.3 (M+Na); (ES-): 618.3 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(160d )
化合物160d 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(5-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(160c )(120 mg，0.19 mmol)及Cs2 CO3 (189 mg，0.58 mmol)在MeOH/THF (5 mL, 3:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(160d ) (38 mg，42%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.62 (s, 1H, D2 O可交換), 9.69 (s, 1H, D2 O可交換), 8.18 (s, 1H), 7.97 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.34 (t,J = 2.9 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.10 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 4.27 - 4.15 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.78 - 3.62 (m, 5H), 3.62 - 3.51 (m, 1H), 3.40 - 3.32 (m, 2H), 1.95 - 1.89 (m, 4H); MS (ES+): 466.4 (M+1); (ES-): 464.4 (M-1)。 流程161
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(161a )
化合物161a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(140b ) (0.06 g，0.15 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.05 g，0.47 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(161a ) (26 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (兩種旋轉異構體之混合物) δ 9.43及9.26 (2s, 1H), 8.47及8.46 (2s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.11及7.98 (2s, 1H), 7.83及7.80 (s, 1H), 7.71 - 7.59 (m, 1H), 7.37及7.28 (2s, 1H), 7.18 - 6.84 (m, 3H), 4.52及4.33 (2d,J = 8.8 Hz, 1H), 3.94及3.89 (2s, 6H), 3.83 - 3.57 (m, 5H), 2.38 - 2.19及2.08 - 1.87 (2m, 4H); MS (ES+): 491.3 (M+1), MS (ES-): 525.3 (M+Cl)。 流程162
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(162b )
步驟1：製備(S)-1-(5-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(162a )
化合物162a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(160b ) (327 mg，0.59 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(269 mg，2.36 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]；[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化兩次後得到呈白色固體狀之(S)-1-(5-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(162a ) (162 mg，44%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.60 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (s, 1H), 8.00 - 7.77 (m, 2H), 7.68 (d,J = 8.5 Hz, 2H), 7.41 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.30 - 6.80 (m, 4H; 2H, D2 O可交換), 6.68 (s, 1H), 4.51 - 4.30 (m, 1H), 4.04 - 3.74 (m, 8H), 3.69 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.24 - 2.06 (m, 1H), 2.01 - 1.79 (m, 3H); MS (ES+): 633.2 (M+1); 655.2 (M+Na); (ES-): 631.5 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(162b )
化合物162b 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(5-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(162a ) (130 mg，0.21 mmol)及Cs2 CO3 (201 mg，0.62 mmol)在MeOH/THF (5 mL，3:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]、[矽膠(12 g)，用0-60% DMA-80/DCM溶離]純化兩次，隨後使用含1 N HCl (2 mL)之CH3 CN將游離鹼轉化成HCl鹽後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(162b ) (30 mg，31%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.52 (s, 1H, D2 O可交換), 12.02 (s, 1H, D2 O可交換), 11.14 (s, 1H, D2 O可交換), 8.29 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.67 - 7.59 (m, 1H), 7.56 (s, 1H, D2 O可交換), 7.26 - 7.16 (m, 1H, D2 O可交換), 7.12 (s, 2H), 6.41 (s, 1H), 4.61 (d,J = 8.9 Hz, 2H), 4.52 (brs, 2H, D2 O可交換), 3.93 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.62 - 3.49 (m, 1H), 2.36 - 2.24 (m, 1H), 2.13 - 1.97 (m, 3H); MS (ES+): 479.4 (M+1), 501.3 (M+Na); (ES-): 513.3 (M+Cl)。 流程163
製備2-(吡咯啶-1-基)-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(163a )
化合物163a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(141b ) (80 mg，0.14 mmol)、吡咯啶(62 mg，0.87 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-(吡咯啶-1-基)-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(163a ) (65 mg，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.15 (s, 1H, D2 O可交換), 8.18 (s, 1H), 8.05 - 7.96 (m, 3H), 7.43 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.18 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 7.02 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 6.89 (s, 2H), 3.85 (s, 6H), 3.75 - 3.50 (m, 7H), 2.36 (s, 3H), 2.02 - 1.87 (m, 4H); MS (ES+): 590.3 (M+1); 612.3 (M+Na); (ES-): 588.5 (M-1)。 流程164
製備(S)-(1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-基)甲醇(164a )
化合物164a 係根據流程2中所報道之程序，由5-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(158a ) (120 mg，0.29 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.09 mL，0.86 mmol)、DIPEA (0.15 mL，0.86 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-基)甲醇(164a ) (31 mg，23%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.84 - 9.29 (m, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.10 - 7.78 (m, 1H), 6.96 (s, 2H), 5.08 - 4.61 (m, 1H), 4.46 - 4.05 (m, 1H), 4.01 - 3.22 (m, 13H), 2.11 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+): 484.3 (M+1); MS (ES-): 482.3 (M-1); 518.2 (M+Cl)。HPLC純度：94.37%。 流程165
製備(S)-(1-(7-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(165b)
步驟1：製備(S)-(1-(7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(165a)
化合物165a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含7-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(153a ) (1 g，3.4 mmol)之2-丙醇(5 mL)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(344 mg，3.4 mmol)、DIPEA (0.89 mL，5.1 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 165a ) (1.13 g，93%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.45 - 7.17 (m, 5H), 4.71 (t,J = 5.9 Hz, 1H,D2 O 可交換 ), 4.40 - 4.23 (m, 1H), 3.76 - 3.56 (m, 4H), 3.56 - 3.42 (m, 2H), 3.43 - 3.26 (m, 1H), 3.21 (d,J = 17.3 Hz, 1H), 3.03 - 2.78 (m, 2H), 2.76 - 2.57 (m, 1H), 2.41 - 2.24 (m, 1H), 1.99 - 1.83 (m, 3H), 1.81 - 1.69 (m, 1H)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(165b)
化合物165b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 165a ) (300 mg，0.84 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (313 mg，1.25 mmol，游離鹼)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，104 mg，0.167 mmol)、碳酸銫(817 mg，2.51 mmol)及Pd2 (dba)3 (115 mg，0.125 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 165b ) (235 mg，49%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.74 - 11.60 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.20 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.71 (s, 1H), 7.88 - 7.59 (m, 3H), 7.59 - 7.36 (m, 3H), 7.02 (s, 2H), 4.58 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.33 - 4.03 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.67 - 3.53 (m, 2H), 3.53 - 3.39 (m, 2H), 3.39 - 3.22 (m, 2H), 3.26 - 2.92 (m, 1H), 2.11 - 1.76 (m, 4H); MS (ES+): 572.4 (M+1), 594.3 (M+Na)。 流程166
製備(S)-1-(7-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(166b)
步驟1：製備(S)-1-(7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(166a)
化合物166a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含7-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(153a ) (1 g，3.4 mmol)之2-丙醇(5 mL)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(388 mg，3.4 mmol)、DIPEA (0.89 mL，5.1 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 166a ) (1.1 g，87%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.43 - 7.24 (m, 6H), 6.94 (s, 1H), 4.60 - 4.46 (m, 1H), 3.97 - 3.70 (m, 2H), 3.63 (s, 2H), 3.49 - 3.23 (m, 2H), 2.98 - 2.84 (m, 3H), 2.78 - 2.60 (m, 1H), 2.21 - 2.04 (m, 1H), 1.96 - 1.72 (m, 3H)。
步驟2：製備(S)-1-(7-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(166b)
化合物166b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 166a ) (400 mg，1.07 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (402 mg，1.61，游離鹼)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，134 mg，0.21 mmol)、碳酸銫(1.05 g，3.23 mmol)及Pd2 (dba)3 (148 mg，0.161 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到(S)-1-(7-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 166b ) (105 mg，17%產率)淡黃色固體；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.25 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 10.11 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.91 (s, 1H), 7.89 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.74 (dd,J = 6.5, 2.9 Hz, 2H), 7.63 - 7.44 (m, 5H), 7.24 (s, 2H), 7.11 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 4.74 - 4.59 (m, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.36 - 3.97 (m, 4H), 3.91 (s, 6H), 3.82 - 3.47 (m, 5H), 3.47 - 3.00 (m, 4H), 2.38 - 2.11 (m, 1H), 2.08 - 1.69 (m, 3H)；游離鹼1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.59 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.39 - 7.24 (m, 5H), 7.21 (s, 1H), 7.10 (s, 2H), 6.92 (s, 1H), 4.72 - 4.58 (m, 1H), 4.07 - 3.89 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.67 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 3.42 (d,J = 16.5 Hz, 1H), 3.16 (d,J = 16.6 Hz, 1H), 2.87 (d,J = 10.1 Hz, 2H), 2.46 - 2.34 (m, 1H), 2.29 - 2.07 (m, 1H), 1.99 - 1.72 (m, 4H); MS (ES+): 585.4 (M+1), (ES-): 619.5 (M+Cl)。 流程167
製備(S)-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈(167f )
步驟1：製備5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈(167e )
化合物167e 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (670 mg，2.38 mmol)在DCM (20 mL)中使用DIPEA (1.38 g，10.72 mmol)及5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈鹽酸鹽(167d ) (1.0 g，5.31 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈(167e ) (1.03 g，21%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.66 (s, 1H), 9.22 (m, 1H), 7.92 (s, 2H), 7.83 (s, 2H), 7.35-7.34 (s, 1H), 6.79 (s, 1H) 3.92 (s, 3H), 3.90 (s, 3H)。
步驟2：製備(S)-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈(167f )
化合物167f 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈(167e ) (300 mg，0.76 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(770 mg，7.58 mmol)在NMP (12 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-10%甲醇/乙酸乙酯溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈(167f ) (50 mg，14%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.66 (s, 1H), 7.92 (s, 2H), 7.45 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 6.97 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.48 (dd,J = 4.5, 2.5 Hz, 1H), 4.64 (t,J = 4.8 Hz, 1H), 4.12 - 4.01 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.66 - 3.56 (m, 1H), 3.55 - 3.38 (m, 3H), 2.08 - 1.74 (m, 4H)。 流程168
製備4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-胺(168b)
步驟1：製備2-氯-4-(吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(168a)
化合物168a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1.02 g，5.44 mmol)之2-丙醇(30 mL)、吡咯啶(0.49 mL，5.98 mmol)、TEA (1.52 mL，10.87 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-氯-4-(吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪( 168a ) (550 mg，45%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.69 (dd,J = 2.7, 1.5 Hz, 1H), 6.96 (dd,J = 4.6, 1.6 Hz, 1H), 6.66 (dd,J = 4.6, 2.7 Hz, 1H), 3.93 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 3.64 (t,J = 6.8 Hz, 2H), 2.05 (p, J = 6.8 Hz, 2H), 1.90 (p, J = 6.8 Hz, 2H)。
步驟2：製備4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-胺(168b)
化合物168b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-4-(吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪( 168a ) (0.5 g，2.25 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (840 mg，3.37，游離鹼)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，280 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(2195 mg，6.74 mmol)及Pd2 (dba)3 (308 mg，0.34 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]、[矽膠(25 g)，用0至100%含(9:1)乙酸乙酯/甲醇之己烷溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化兩次後得到呈白色固體狀之4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-胺( 168b ) (21 mg，2%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.53 (s, 1H), 8.02 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.68 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.55 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 6.89 (s, 2H), 6.75 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.46 (dd,J = 4.5, 2.5 Hz, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.83 - 3.71 (m, 4H), 3.68 (s, 3H), 2.15 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 436.3 (M+1), 458.3 (M+Na)。 流程169
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(169c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺(169b )
化合物169b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[2,3-d]嘧啶(169a ) (0.5 g，2.5 mmol；CAS # 126728-20-9)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.31 mL，7.5 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.86 g，3.0 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用甲醇/DCM (0至30%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺(169b ) (0.7 g，68%產率)；MS (ES+): 435.7 (M+Na); MS (ES-): 411.3及413.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(169c )
化合物169c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺(169b ) (0.15 g，0.36 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.11 mL，1.09 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用DMA-80/二氯甲烷(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(169c ) (06 mg，35%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (呈兩種旋轉異構體之混合物)1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.70及10.49 (s, 1H), 8.88及8.86 (2d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.71 - 8.63 (m, 1H), 8.32 - 8.23 (m, 1H), 8.13及8.04 (2s, 1H), 7.16 - 7.02 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.72 - 5.59及5.01 - 4.88 (2m, 1H), 4.54 - 4.40及4.33 - 4.17 (2m, 1H), 3.99 - 3.35 (m, 13H), 2.14 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 478.3 (M+1); MS (ES-): 512.3 (M+Cl)。 流程170
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(170a )
化合物170a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺(169b ) (0.15 g，0.36 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(124 mg，1.09 mmol)、DIPEA (0.19 mL，1.09 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA-80/二氯甲烷(0至30%)溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠，C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(170a ) (31 mg，17%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.93 (s, 1H), 9.60 - 9.20 (m, 1H), 9.01 - 7.93 (m, 2H), 7.63 - 7.45 (m, 2H), 7.30 - 7.11 (m, 3H), 7.00 (s, 1H), 4.82 - 4.68 (m, 1H), 4.12 - 3.81 (m, 7H), 3.79 - 3.64 (m, 4H), 2.40 - 1.88 (m, 4H); MS (ES+): 491.3 (M+1), 513.3 (M+Na); MS (ES-): 489.4 (M-1), 525.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.96%。 流程171
製備(S)-1-(7-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(171a )
化合物171a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(145g ) (300 mg，0.63 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.65 g，5.75 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-4%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之化合物(171a ) (0.28 g，77%)。固體藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水(0-50%)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-1-(7-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(171a ) (34 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.31 (s, 1H), 11.37 (s, 1H), 8.66 (d,J = 9.2 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.89 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.13 (s, 2H), 7.08 - 6.94 (m, 1H), 4.80 - 4.68 (m, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 1H), 3.94 (s, 7H), 3.69 (s, 4H), 2.38 - 1.94 (m, 4H), 1.37 (d,J = 5.9 Hz, 6H); MS (ES+): 548.4 (M+1); MS (ES-): 582.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.90%。 流程172
製備(S)-(1-(2-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(172a)
化合物172a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (0.91 g，3.6 mmol)、1-苯基-1H-咪唑-4-胺(8a ) (860 mg，5.40，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.77 g，1.62 mmol)、碳酸銫(3.52 g，10.8 mmol)及Pd2 (dba)3 (490 mg，0.54 mmol)在1,4-二噁烷(30 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-苯基-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 172a ) (370 mg，27%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.12 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.68 - 7.49 (m, 5H), 6.85 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.59 - 4.33 (m, 1H), 4.09 - 3.34 (m, 4H), 2.26 - 1.65 (m, 4H); MS (ES+): 376.3 (M+1), 398.3 (M+Na)。 流程173
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(173c)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(173a)
化合物173a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(141a ) (1.54 g，4.5 mmol)之2-丙醇(10 mL)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.51 g，4.50 mmol)、DIPEA (1.18 mL，6.75 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 173a ) (600 mg，32%產率)；MS (ES-): 418.4 (M-1), 454.2, 456.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(173b)
化合物173b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 173a ) (500 mg，1.19 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (848 mg，2.38，游離鹼)、Pd2 (dba)3 (109 mg，0.12 mmol)、BrettPhos (63.9 mg，0.12 mmol)、BrettPhos鈀環(64.8 mg，0.071 mmol)及Cs2 CO3 (776 mg，2.38 mmol)在t-BuOH (15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]；[矽膠(24 g)，用0-100%含EtOAc/MeOH(9:1)之己烷溶離]純化兩次後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 173b ) (420 mg，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.52 (s, 1H, D2 O可交換), 8.65 - 8.34 (m, 1H), 8.34 - 8.17 (m, 1H), 8.14 - 7.88 (m, 2H), 7.36 (d,J = 8.1 Hz, 3H, 1H為D2 O可交換的), 7.26 (d,J = 3.9 Hz, 1H), 7.15 - 6.91 (m, 3H, 1H為D2 O可交換的), 6.84 - 6.68 (m, 1H), 4.72 - 4.51 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.70 - 3.62 (m, 5H), 2.30 (s, 3H), 2.12 - 1.87 (m, 4H); MS (ES+): 633.3 (M+1), 655.3 (M+Na)。
步驟3：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(173c)
化合物173c 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 173b ) (220 mg，0.35 mmol)在MeOH/THF (5 mL，1:1)中使用Cs2 CO3 (340 mg，1.04 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]、[矽膠(12 g)，用0-60% DMA-80/DCM溶離]純化兩次後得到化合物173c 之游離鹼。游離鹼在CH3 CN中在HCl (1 N，2 mL)存在下攪拌30分鐘，在凍乾後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 173c ) (39 mg，23%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.24 (s, 1H, D2 O可交換), 10.75及10.33 (2s, 1H, D2 O可交換), 8.57 (s, 1H), 7.89 - 7.73 (m, 1H, D2 O可交換), 7.48及7.34 (2 bs, 1H, D2 O可交換), 7.21 - 6.94 (m, 4H, 部分D2 O可交換), 6.70及6.49 (2 bs, 1H), 4.92 - 4.72 (m, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 2H), 3.91 (s, 7H), 3.70 (s, 3H), 2.37 - 2.18 (m, 1H), 2.14 - 1.92 (m, 3H); MS (ES+): 479.4 (M+1), 501.3 (M+Na); (ES-): 513.4 (M+Cl)。 流程174
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(174b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(174a)
化合物174a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[2,3-d]嘧啶(169a ) (0.5 g，2.5 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.25 mL，2.5 mmol)及DIPEA (1.31 mL，7.5 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用MeOH/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 174a ) (0.46 g，70%產率)；MS (ES+): 265.3 (M+1), 287.2 (M+Na); MS (ES-): 263.2 (M-1), 299.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(174b)
化合物174b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 174a ) (0.25 g，0.94 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (280 mg，1.13，游離鹼)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，0.071 g，0.113 mmol)、第三丁醇鈉(0.27 g，2.83 mmol)及Pd2 (dba)3 (90 mg，0.09 mmol)在甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 174b ) (31 mg，7%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.29 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.56 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.24 (dd,J = 8.1, 4.5 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 5.17 - 4.88 (m, 1H), 4.88 - 4.66 (m, 1H), 4.17 - 3.55 (m, 13H), 2.21 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 478.3 (M+1), 500.3 (M+Na)。HPLC純度：96.94%。 流程175
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(175b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(175a)
化合物175a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(140a ) (0.3 g，1.50 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.15 mL，1.50 mmol)及DIPEA (0.79 mL，4.50 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-30% MeOH/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 175a ) (0.21 g，53%產率)；MS (ES+): 265.3 (M+1), 287.2 (M+Na); MS (ES-): 263.3及265.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(175b)
化合物175b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 175a ) (0.2 g，0.76 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (280 mg，1.13，游離鹼)、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(BiNAP，0.06 g，0.09 mmol)、第三丁醇鈉(0.22 g，2.27 mmol)及Pd2 (dba)3 (70 mg，0.08 mmol)在甲苯(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 175b ) (33 mg，9%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.82 (s, 1H), 8.77 - 8.68 (m, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.89 - 7.79 (m, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.63 - 4.46 (m, 1H), 4.46 - 4.31 (m, 1H), 4.18 - 3.99 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.87 - 3.75 (m, 1H), 3.75 - 3.59 (m, 4H), 2.34 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 478.3 (M+1), 500.3 (M+Na); MS (ES-): 512.3 (M+Cl)。HPLC純度：97.16%。 流程176
製備(R)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(176b)
步驟1：製備(R)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(176a)
化合物176a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (3 g，15.96 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(2.0 g，17.55 mmol)及TEA (4.45 mL，31.9 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用乙酸乙酯及甲醇/己烷之9:1混合物溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 176a ) (3.85 g，91%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.83 - 7.62 (m, 1H), 7.41 (d,J = 70.7 Hz, 1H), 7.01 (dd,J = 4.6, 1.6 Hz, 1H), 6.74 (dd,J = 19.1, 3.6 Hz, 1H), 6.70 - 6.57 (m, 1H), 5.01 - 4.51 (m, 1H), 4.22 - 3.56 (m, 2H), 2.43 - 1.72 (m, 4H)。
步驟2：製備(R)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(176b)
化合物176b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 176a ) (0.5 g，1.88 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (700 mg，2.82 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.40 g，0.84 mmol)、碳酸銫(1.83 g，5.65 mmol)及Pd2 (dba)3 (250 mg，0.28 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C18，150 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 176b ) (394 mg，43.8%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.66 - 9.46, 9.46 - 9.27 (2m, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.90, 7.85 (2s, 1H), 7.78 - 7.67, 7.67 - 7.57 (2m, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.30 - 7.08 (m, 2H), 7.08 - 6.85 (m, 1H), 6.75 - 6.46 (m, 1H), 4.95 - 4.82, 4.75 - 4.59 (2m, 1H), 4.33 - 4.05 (m, 1H), 4.01 - 3.75 (m, 7H), 3.72 (s, 3H), 2.30 - 1.81 (m, 4H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 -D2 O) δ 9.11 (s, 1H), 7.72 - 7.55, 7.87 - 7.72 (2m, 1H), 7.18 - 7.05 (m, 2H), 6.91 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.73 - 6.50 (m, 2H), 4.74 - 4.61, 4.94 - 4.88 (2m, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.73 (s, 3H), 2.32 - 1.91 (m, 4H); MS (ES+): 479.4 (M+1), 501.4 (M+Na), (ES-): 513.4 (M+Cl)。 流程177
製備(S)-(1-(6-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(177b)
步驟1：製備(S)-(1-(6-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(177a)
化合物177a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由6-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(149a ) (0.5 g，1.7 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(172 mg，1.7 mmol)及DIPEA (0.45 mL，2.55 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/氯仿(0至50%)溶離純化後得到呈油狀之(S)-(1-(6-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 177a ) (511 mg，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.40 - 7.18 (m, 5H), 4.79 - 4.63 (m, 1H, D2 O可交換), 4.37 - 4.18 (m, 1H), 3.78 - 3.64 (m, 2H), 3.65 - 3.49 (m, 4H), 3.52 - 3.34 (m, 2H), 2.89 - 2.72 (m, 1H), 2.72 - 2.54 (m, 2H), 2.47 - 2.32 (m, 1H), 1.97 - 1.79 (m, 3H), 1.78 - 1.63 (m, 1H)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(177b)
化合物177b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(6-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 177a ) (0.33 g，0.91 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (340 mg, 1.36 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，195 mg，0.41 mmol)、碳酸銫(890 mg，2.73 mmol)及Pd2 (dba)3 (125 mg，0.14 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(6-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 177b ) (140 mg，27%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.50 - 11.73 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.61 - 10.07 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.58 - 8.26 (m, 1H), 7.79 - 7.65 (m, 3H), 7.55 - 7.42 (m, 3H), 6.98 (s, 2H), 4.67 - 4.30 (m, 7H), 3.87 (s, 6H), 3.83 - 3.72 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.38 (m, 2H), 3.37 - 2.95 (m, 2H), 2.10 - 1.75 (m, 4H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6-D2O ) δ 8.45 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 2H), 7.57 - 7.47 (m, 3H), 6.96 (s, 2H), 4.65 - 4.36 (m, 7H), 3.87 (s, 6H), 3.70 - 3.68 (m, 4H), 3.67 - 3.56 (m, 1H), 3.57 - 3.40 (m, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.14 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 572.4(M+1), 595.5(M+Na), (ES-): 606.4 (M+Cl); HPLC純度：98.17 %。 流程178
製備N-(萘-2-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(178b)
向2-溴萘(178a ) (100 mg，0.48 mmol，在40 mL小瓶中)於二噁烷(5 mL)中之溶液中添加1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (181 mg，0.72 mmol，游離鹼)、BrettPhos鈀環(22 mg，0.024 mmol)、BrettPhos (23 mg，0.048 mmol)及Cs2 CO3 (393 mg，1.21 mmol)。反應混合物用氬氣充分脫氣且在95℃下加熱12小時。反應混合物用EtOAc (120 mL)稀釋，過濾以移除無機固體。濾液用水、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]純化兩次，得到呈游離鹼形式之化合物178b 。游離鹼在CH3 CN中在HCl (1N，2 mL)存在下攪拌30分鐘，在凍乾後得到呈灰白色固體狀之N-(萘-2-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺( 178b ) (26 mg，14%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.23 (s, 1H), 8.99 (brs, 1H, D2 O可交換), 8.02 (s, 1H, D2 O可交換), 7.87 - 7.70 (m, 3H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 7.40 - 7.33 (m, 2H), 7.33 - 7.22 (m, 2H), 7.16 (s, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.72 (s, 3H); MS (ES+ ) 376.3 (M+1); (ES-) 410.3 (M+Cl)。流程179
製備N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹啉-2-胺(179b)
化合物179b 係根據流程178中所報道之程序，由含2-氯喹啉(179a ) (75 mg，0.46 mmol)之二噁烷(5 mL)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (171 mg，0.69 mmol)、BrettPhos鈀環(21 mg，0.023 mmol)、BrettPhos (25 mg，0.046 mmol)及Cs2 CO3 (299 mg，0.92 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹啉-2-胺( 179b ) (138 mg，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.86 (s, 1H, D2 O可交換), 8.21 - 8.15 (m, 1H), 8.13 - 8.06 (m, 1H), 7.98 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 7.82 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 (dd,J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.62 - 7.51 (m, 1H), 7.29 - 7.18 (m, 1H), 7.14 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+): 377.3 (M+1); 399.3 (M+Na); (ES-): 375.3 (M-1)。流程180
製備(S)-(1-(5-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(180b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(180a)
化合物180a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(160a ) (1.23 g, 3.59 mmol)之IPA (15 mL)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.36 g，3.59 mmol)、DIPEA (0.94 mL，5.39 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 180a ) (1.21 g，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.88 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.36 (m, 2H), 7.33 - 7.23 (m, 2H), 6.67 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 4.80 (t, 1H, D2 O可交換), 4.61 - 4.45 (m, 1H), 4.07 - 3.93 (m, 1H), 3.65 - 3.48 (m, 2H), 3.44 - 3.34 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.11 - 1.84 (m, 3H), 1.82 - 1.66 (m, 1H)。
步驟2：製備(S)-(1-(5-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(180b)
化合物180b 係根據流程178中所報道之程序，由含(S)-(1-(2-氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 180a ) (350 mg，0.86 mmol)之二噁烷(15 mL)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (322 mg，1.29 mmol)、BrettPhos鈀環(39 mg，0.043 mmol)、BrettPhos (46 mg，0.086 mmol)及Cs2 CO3 (561 mg，1.72 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-60% DMA-80/DCM溶離]、[矽膠(24 g)，用0-100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化兩次後得到呈游離鹼形式之化合物180b 。使用含1 N HCl (2 mL)之乙腈將游離鹼轉化成HCl鹽，得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(5-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 180b ) (75 mg，14%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.32 - 12.00 (m, 1H, D2 O可交換), 10.83 - 10.49 (m, 1H, D2 O可交換), 8.52 (s, 1H), 8.05 - 7.88 (m, 2H), 7.77 (s, 1H), 7.48 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.09 - 6.96 (m, 3H), 4.84 - 4.57 (m, 1H), 4.28 - 4.08 (m, 1H), 3.98 - 3.83 (m, 8H), 3.72 - 3.62 (m, 5H), 2.39 (s, 3H), 2.13 - 1.91 (m, 4H); MS (ES+): 620.3 (M+1); (ES-): 618.4 (M-1)。流程181
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(181d)
步驟1：製備(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯(181b)
化合物181b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯(181a ) (2.0 g，6.58 mmol，CAS # 635698-56-5)在2-丙醇(20 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.67 g，6.58 mmol)及DIPEA (1.72 mL，9.86 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/氯仿(0至50%)溶離]純化後得到呈油狀之2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 181b ) (511 mg，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.79 - 4.71 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 4.56 (m, 2H), 4.31 (dd,J = 6.3, 3.9 Hz, 1H), 3.83 - 3.55 (m, 2H), 3.57 - 3.28 (m, 4H), 2.67 (t,J = 6.1 Hz, 2H), 2.04 - 1.85 (m, 3H), 1.85 - 1.69 (m, 1H), 1.41 (s, 9H)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯(181c)
化合物181c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 181b ) (0.5 g，1.36 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (422 mg，1.69 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.29 g，0.61 mmol)、碳酸銫(1.33 g，4.07 mmol)及Pd2 (dba)3 (186 mg，0.2 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 181c ) (350 mg，44%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 -D2 O) δ 8.33 (d,J = 17.4 Hz, 1H), 7.74 - 7.56 (m, 1H), 6.94 (d,J = 3.4 Hz, 2H), 4.80 - 4.44 (m, 3H), 3.93 - 3.84 (m, 8H), 3.84 - 3.71 (m,2H), 3.69 (s, 3H), 3.65 - 3.22 (m, 2H), 2.89 - 2.71 (m, 2H), 2.21 - 1.79 (m, 4H), 1.43 (s, 9H); MS (ES+) 582.4 (M+1), 604.3 (M+Na), (ES-) 616.5 (M+Cl); HPLC純度：90.07 %。
步驟3：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(181d)
化合物181d 係藉由在DCM中使用三氟乙酸(0.69 mL，8.94 mmol)水解(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 181c ) (260 mg，0.45 mmol)之Boc來製備。由此在藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并 [4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 181d ) (95 mg，44%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.48 - 9.44 (m, 3H,D2 O 可交換 ), 8.41 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 6.97 (d,J = 2.6 Hz, 2H), 4.74 - 4.47 (m, 2H), 4.47 - 4.22 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.69 - 3.54 (m, 4H), 3.55 - 3.36 (m, 2H), 3.36 - 3.16 (m, 1H), 3.12 - 2.95 (m, 2H), 2.14 - 1.71 (m, 4H); MS (ES+): 482.4 (M+1), 504.3 (M+Na), (ES-): 516.3 (M+Cl)。流程182
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d)
步驟1：製備(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(182b)
化合物182b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(182a ) (2.0 g，6.58 mmol，CAS # 916420-27-4)在2-丙醇(20 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.67 g，6.58 mmol)及DIPEA (1.72 mL，9.86 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/氯仿(0至50%)溶離]純化後得到呈油狀之(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 182b ) (1.85 g，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.77 - 4.62 (m, 1H), 4.47 (d,J = 18.7 Hz, 1H), 4.39 - 4.26 (m, 1H), 4.23 - 4.01 (m, 1H), 4.00 - 3.84 (m, 2H), 3.76 - 3.55 (m, 2H), 3.54 - 3.34 (m, 1H), 3.12 - 2.79 (m, 2H), 2.76 - 2.62 (m, 1H), 2.03 - 1.83 (m, 3H), 1.81 - 1.63 (m, 1H), 1.43 (s, 9H)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(182c)
化合物182c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 182b ) (0.5 g，1.36 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (422 mg，1.69 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，290 mg，0.61 mmol)、碳酸銫(1.33 g，4.07 mmol)及Pd2 (dba)3 (186 mg，0.2 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 182c ) (320 mg，41%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 -D2 O) δ 8.43 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.64 - 4.52 (m, 2H), 4.28 - 4.17 (m, 1H), 4.01 - 3.67 (m, 12H), 3.67 - 3.53 (m, 1H), 3.53 - 3.42 (m, 2H), 3.32 - 3.04 (m, 2H), 2.07 - 1.91 (m, 4H), 1.45 (s, 9H); MS (ES+): 582.4 (M+1), (ES-): 616.4 (M+Cl); HPLC純度：90.76 %。
步驟3：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d)
化合物182d 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM中使用三氟乙酸(0.68 mL，8.77 mmol)水解(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 182c ) (255 mg，0.44 mmol)之Boc來製備。由此在藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 182d ) (155 mg，73%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (s, 1H), 10.03 - 9.76 (m, 2H), 8.59 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.00 (s, 2H), 4.61 (s, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.82 - 3.73 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.56 (m, 1H), 3.52 - 3.35 (m, 2H), 3.22 - 3.05 (m, 2H), 3.01 - 2.85 (m, 1H), 2.09 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 482.4 (M+1), 504.4 (M+Na), (ES-): 516.4 (M+Cl); C24 H31 N7 O4 (HCl)3 (H2 O)4 之分析計算值：C, 43.48; H, 6.39; Cl, 16.04; N, 14.79；實驗值：C, 43.49; H, 6.22; Cl, 15.85; N, 14.56。 流程183
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(183c )
步驟1：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183a )
化合物183a 係由2,4-二氯-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(182a ) (1.0 g，3.29 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (2.3 mL，13.15 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.98 g，3.95 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA-80/DCM (0至80%)溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183a ) (0.87 g，51%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.65 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.16 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.78 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.90 (s, 2H), 4.35 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.61 (t,J = 5.8 Hz, 2H), 2.69 - 2.60 (m, 2H), 1.43 (s, 9H)。
步驟2：製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183b )
化合物183b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183a ) (0.4 g，0.77 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(235 mg，2.32 mmol)在2-丙醇(7 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183b ) (0.41 g，91%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.79 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.18 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 6.92 (s, 2H), 5.26 - 4.70 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 4.39 - 3.97 (m, 3H), 3.87 (s, 6H), 3.77 - 3.56 (m, 4H), 3.66 - 3.40 (m, 4H), 3.39 - 3.23 (m, 1H), 2.58 - 2.53 (m, 2H), 2.06 - 1.79 (m, 4H), 1.44 (s, 9H); MS (ES+): 582.4 (M+1), 604.3 (M+Na), (ES-): 580.4 (M-1); HPLC純度：95.74 %。
步驟3：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(183c )
化合物183c 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (10 mL)中使用三氟乙酸(0.96 mL，12.48 mmol)水解(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183b )(363 mg，0.624 mmol)之Boc來製備。由此在藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(183c ) (210 mg，70%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6- D2 O) δ 8.27 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 6.89 (s, 2H), 4.47 - 4.31 (m, 1H), 4.21 - 4.10 (m, 2H), 3.86 - 3.80 (m, 6H), 3.66 (s, 3H), 3.65 - 3.45 (m, 2H), 3.45 - 3.31 (m, 4H), 2.82 - 2.69 (m, 2H), 2.09 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 482.3 (M+1), 504.4 (M+Na), (ES-): 516.4 (M+Cl); HPLC: 99.46 %; C24 H31 N7 O4 (HCl)2.75 (H2 O)3 之分析計算值：C, 45.33; H, 6.30; Cl, 15.33; N, 15.42；實驗值：C, 45.13; H, 6.18; Cl, 15.74; N, 15.22。 流程184
製備2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(184b )
步驟1：製備2-(吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(184a )
化合物184a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183a ) (0.2 g，0.39 mmol)、吡咯啶(83 mg，1.16 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-(吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(184a ) (0.18 g，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.84 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.18 (s, 1H), 8.01 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 6.89 (s, 2H), 4.20 (s, 2H), 3.86 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.56 (s, 6H), 2.61 - 2.40 (m, 2H), 1.98 - 1.81 (m, 4H), 1.43 (s, 9H); MS (ES+): 552.4 (M+1), 574.4 (M+Na); HPLC純度：96.29 %。
步驟2：製備2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(184b )
化合物184b 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (10 mL)中使用三氟乙酸(0.42 mL，5.44 mmol)水解2-(吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(184a )(150 mg，0.27 mmol)之Boc來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(184b ) (91 mg，74%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6- D2 O) δ 10.61 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 9.92 (s, 2H,D2 O 可交換 ), 8.39 (s, 1H), 8.02 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.70 - 3.52 (m, 2H), 3.47 - 3.31 (m, 4H), 2.91 - 2.78 (m, 2H), 1.99 (m, 4H); MS (ES+): 452.4 (M+1), (ES-): 486.4 (M+Cl); HPLC純度：98.30 %; C23 H29 N7 O3 (HCl)2.5 (H2 O)3 之分析計算值：C, 46.29; H, 6.33; Cl, 14.85; N, 16.43；實驗值：C, 46.70; H, 6.22; Cl, 14.74; N, 16.51。 流程185
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(185b )
步驟1：製備(S)- 2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(185a )
化合物185a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(183a ) (293 mg，0.57 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(194 mg，1.7 mmol)在2-丙醇(7 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之( S )- 2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(185a ) (0.29 g，86%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.09 - 8.44 (m, 1H,D2O 可交換 ), 8.15 (s, 1H), 7.99 - 7.71 (m, 1H), 7.29 - 6.75 (m, 4H), 4.45 - 4.34 (m, 1H), 4.33 - 4.10 (m, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.57 (s, 2H), 3.41 - 3.27 (m, 2H), 2.62 - 2.44 (m, 2H), 2.30 - 2.07 (m, 1H), 2.02 - 1.76 (m, 3H), 1.43 (s, 9H); MS (ES+): 595.4 (M+1), 617.3 (M+Na); HPLC純度：94.40 %。
步驟2：製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(185b )
化合物185b 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (10 mL)中使用三氟乙酸(0.674 mL，8.74 mmol)水解( S )- 2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(185a )(260 mg，0.44 mmol)之Boc來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(185b ) (133 mg，62%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6- D2 O) δ 10.49 - 10.12 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.12 - 9.72 (m, 2H,D2 O 可交換 ), 8.44 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.26 - 6.90 (m, 3H), 4.82 - 4.43 (m, 1H), 4.43 - 4.04 (m, 2H), 3.92 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.64 - 3.51 (m, 1H), 3.48 - 3.31 (m, 3H), 2.94 - 2.78 (m, 2H), 2.41 - 2.13 (m, 1H), 2.09 - 1.89 (m, 3H); MS (ES+): 495.3 (M+1), (ES-): 529.4 (M+Cl); HPLC: 96.21%; C24 H30 N8 O4 (HCl)2.5 (H2 O)4.5 之分析計算值：C, 43.23; H, 6.27; Cl, 13.29; N, 16.81；實驗值：C, 43.29; H, 6.11; Cl, 13.44; N, 16.37。 流程186
製備2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺(186a )
化合物186a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺(169b ) (0.15 g，0.36 mmol)、吡咯啶(0.09 mL，1.09 mmol)、DIPEA (0.19 mL，1.09 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/二氯甲烷(0至30%)溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離純化後得到呈黃色固體狀之2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺(186a ) (43 mg，26%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.88 (s, 1H), 9.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.78 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.51 (dd, J = 8.0, 5.0 Hz, 1H), 6.97 (s, 2H), 3.96 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.77 - 3.62 (m, 5H), 2.15 - 1.88 (m, 4H). MS (ES+): 448.3 (M+1); MS (ES-): 446.4 (M-1)。HPLC純度：98.41%。 流程187
製備N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(187b )
化合物187b 係由4-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(187a ) (0.1 g，0.65 mmol；CAS # 888720-29-4)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.34 mL，1.95 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (243 mg，0.98 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(4 g)，用MeOH/DCM (0至30%)溶離]；隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離純化後得到呈淡黃色固體狀之N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(187b ) (36 mg，15%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.61 (s, 1H), 8.10 (s, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.81 (s, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.70 (s, 3H)。MS (ES+): 367.3 (M+1); MS (ES-): 401.3 (M+Cl)。HPLC純度：99.62%。 流程188
製備2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(188a )
化合物188a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(140b ) (80 mg，0.19 mmol)、吡咯啶(0.05 mL，0.58 mmol)、DIPEA (0.1 mL，0.58 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之2-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(188a ) (46 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.34 (s, 1H), 8.40 (dd, J = 4.2, 1.5 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.72 (dd, J = 8.6, 1.5 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.5, 4.2 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.83 - 3.75 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.65 - 3.45 (m, 2H), 2.03 - 1.83 (m, 4H)。MS (ES+): 448.3 (M+1)。HPLC純度：97.56%。 流程189
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(189a )
化合物189a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75a ) (500 mg，1.19 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(273 mg，2.39 mmol)在NMP (20 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-10%甲醇/乙酸乙酯溶離)純化後得到呈固體狀之化合物(189a ) (0.16 g，27%)。固體藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水(0-50%)溶離]再純化，得到呈黃色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(189a ) (69 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 13.41 (s, 1H), 11.83 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.31 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.70 - 7.55 (m, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.13 (s, 2H), 4.67 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.13 - 3.82 (m, 7H), 3.77 - 3.57 (m, 4H), 2.40 - 1.90 (m, 4H); MS (ES+): 496.3 (M+1); MS (ES-): 530.3 (M+Cl)。 流程190
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(190a )
化合物190a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (300 mg，0.75 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.85 g，7.46 mmol)在NMP (20 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0-10%甲醇/乙酸乙酯溶離)純化後得到呈固體狀之化合物190a (90 mg，24%)游離鹼。其藉由逆相急驟管柱層析[矽膠C-18管柱(24 g)，用乙腈及0.1% HCl水(0-50%)溶離再純化，隨後凍乾，得到呈黃色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(190a ) (40 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.84 (s, 1H), 8.53 - 8.34 (m, 2H), 7.90 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.16 - 7.03 (m, 3H), 4.61 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.08 - 3.83 (m, 7H), 3.74 - 3.54 (m, 4H), 2.40 - 1.87 (m, 4H); MS (ES+): 480.3 (M+1); MS (ES-): 514.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.13%。 流程191
製備(S)-1-(5-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(191b )及(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(191c)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(191a)
化合物191a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(160a ) (1.91 g，5.58 mmol)之IPA (15 mL)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.64 g，5.58 mmol)、DIPEA (1.46 mL，8.38 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 191a ) (1.6 g，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.89 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 7.52 - 7.40 (m, 2H), 7.34 - 7.20 (m, 3H), 7.08 (s, 1H), 6.69 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.11 - 3.94 (m, 1H), 3.79 - 3.65 (m, 1H), 2.41 - 2.33 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.01 - 1.76 (m, 3H)。
步驟2：製備(S)-1-(5-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(191b )及(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(191c)
化合物191b 及191c 係根據流程178中所報道之程序，由含(S)-1-(2-氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 191a ) (400 mg，0.95 mmol)之t -BuOH (15 mL)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (261 mg，1.05 mmol)、BrettPhos鈀環(43 mg，0.048 mmol)、BrettPhos (77 mg，0.14 mmol)、Pd2 (dba)3 (174 mg，0.19 mmol)及Cs2 CO3 (621 mg，1.91 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18管柱，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水(0-50%)溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-1-(5-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(191b ) (16 mg，3%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (brs, 1H, D2 O可交換), 10.46 (s, 1H, 1H, D2 O可交換), 8.26 (s, 1H), 8.00 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.57 - 7.41 (m, 3H, 1H為D2 O可交換的), 7.26 - 6.96 (m, 5H, 1H為D2 O可交換的), 4.83 - 4.73 (m, 1H), 4.43 - 4.30 (m, 1H), 4.08 - 3.97 (m, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.30 - 2.23 (m, 1H), 2.14 - 1.98 (m, 3H); MS (ES+): 633.3 (M+1); 655.3 (M+Na); (ES-): 631.4 (M-1); 667.3 (M+Cl)，及呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(191c) (15 mg，3%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.58 (s, 1H, D2 O可交換), 11.97 (s, 1H, D2 O可交換), 10.21 (s, 1H, D2 O可交換), 8.29 - 8.20 (m, 1H), 7.71 - 7.66 (m, 1H), 7.63 (t,J = 3.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.56 (s, 1H), 7.23 - 7.16 (m, 1H, D2 O可交換), 7.10 (s, 2H), 6.51 - 6.40 (m, 1H), 4.85 - 4.72 (m, 1H), 4.40 - 4.30 (m, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.76 - 3.73 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.31 - 2.23 (m, 1H), 2.15 - 2.02 (m, 3H); MS (ES+): 479.3 (M+1); 493.5 (M+Na); (ES-): 513.3 (M+Cl)。 流程192
製備4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺(192b)
步驟1：製備2-氯-4-(吡咯啶-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶(192a)
化合物192a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[2,3-d]嘧啶(169a ) (0.5 g，2.50 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用吡咯啶(0.21 mL，2.5 mmol)及DIPEA (1.31 mL，7.5 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% MeOH/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-氯-4-(吡咯啶-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶( 192a ) (0.41 g，70%產率)；MS (ES+): 235.2及237.1 (M+1)。
步驟2：製備4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺(192b)
化合物192b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2-氯-4-(吡咯啶-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶( 192a ) (0.15 g，0.64 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (160 mg，0.64 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，180 mg，0.38 mmol)、Pd2 (dba)3 (180 mg，0.19 mmol)及碳酸銫(630 mg，1.92 mmol)在二噁烷(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-胺( 192b ) (50 mg，16%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.86 (s, 1H), 9.06 - 8.64 (m, 2H), 8.59 - 8.13 (m, 1H), 7.98 - 7.66 (m, 1H), 7.64 - 7.31 (m, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.47 - 3.25 (m, 13H), 2.26 - 1.81 (m, 4H)。MS (ES+): 448.3 (M+1); MS (ES-): 446.0 (M-1)。 流程193
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(193c)
步驟1：製備(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-氯-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯(193a)
化合物193a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯(181a ) (2.0 g，6.58 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.75 g，6.58 mmol)及DIPEA (1.72 mL，9.86 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/氯仿(0至50%)溶離]純化後得到呈油狀之(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-氯-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 193a ) (1.8 g，72%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.43 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.75 (d,J = 16.1 Hz, 1H), 4.61 (d,J = 16.1 Hz, 1H), 4.50 (m, 1H), 3.92 - 3.70 (m, 2H), 3.69 - 3.41 (m, 2H), 2.67 (t,J = 6.1 Hz, 2H), 2.13 (m, 1H), 1.88 (m, 3H), 1.42 (s, 9H)。
步驟2：製備(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯(193b)
化合物193b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-氯-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 193a ) (0.52 g，1.35 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (422 mg，1.69 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.29 g，0.61 mmol)、碳酸銫(1.33 g，4.07 mmol)及Pd2 (dba)3 (186 mg，0.2 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(C18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 193b ) (340 mg，42%產率) HCl鹽；MS (ES+): 595.4 (M+1), (ES-): 593.5 (M-1)。
步驟3：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(193c)
化合物193c 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (5 mL)中使用三氟乙酸(0.65 mL，8.41 mmol)水解(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸第三丁酯( 193b ) (250 mg，0.42 mmol)之Boc來製備。由此在藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 193c ) (42 mg，20%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.30 (s, 2H,D2 O 可交換 ), 9.72 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.49 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.20 (s, 2H), 4.72 - 4.57 (m, 2H), 4.44 - 4.27 (m, 1H), 4.19 - 4.02 (m, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.85 - 3.69 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.52 - 3.37 (m, 1H), 3.36 - 3.19 (m, 1H), 3.11 - 2.95 (m, 2H), 2.34 - 2.21 (m, 1H), 2.11 - 1.78 (m, 3H); MS (ES+): 495.4 (M+1), (ES-): 529.4 (M+Cl)。流程194
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(194c)
步驟1：製備(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-氯-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(194a)
化合物194a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(182a ) (2.0 g，6.58 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.75 g，6.58 mmol)及DIPEA (1.72 mL，9.86 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/氯仿(0至50%)溶離]純化後得到呈油狀之(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-氯-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 194a ) (0.51 g，21%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.37 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.38 (d,J = 18.6 Hz, 1H), 4.22 (d,J = 18.9 Hz, 1H), 3.97 - 3.75 (m, 2H), 3.66 (m, 1H), 3.35 - 3.21 (m, 1H), 2.99 - 2.75 (m, 2H), 2.20 - 2.05 (m, 1H), 1.99 - 1.73 (m, 3H), 1.43 (s, 9H)。
步驟2：製備(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯(194b)
化合物194b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-氯-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 194a ) (0.52 g，1.35 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (422 mg，1.69 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，29 mg，0.61 mmol)、碳酸銫(1.33 g，4.07 mmol)及Pd2 (dba)3 (186 mg，0.203 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 194b ) (320 mg，40%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13, 9.94 (2s, 1H, 旋轉異構體), 8.77, 8.42 (2s, 1H, 旋轉異構體), 7.86, 7.79 (2s, 1H, 旋轉異構體), 7.52 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.18 - 7.03 (m, 2H), 4.68 (m, 1H), 4.57 (d,J = 18.7 Hz, 1H), 4.36 (d,J = 18.5 Hz, 1H), 4.09 (d,J = 49.7 Hz, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.85 - 3.69 (m, 1H), 3.69 (m, 3H), 3.56 - 3.17 (m, 2H), 3.17 - 2.93 (m, 1H), 2.93 - 2.69 (m, 1H), 2.35 - 2.16 (m, 1H), 2.06 - 1.74 (m, 3H), 1.60 (s, 3H), 1.45 (s, 6H); MS (ES-): 593.5 (M-1), 629.4 (M+Cl)。
步驟3：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(194c)
化合物194c 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (5 mL)中使用三氟乙酸(0.65 mL，8.44 mmol)水解(S)-4-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酸第三丁酯( 194b ) (251 mg，0.42 mmol)之Boc來製備。由此在藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 194c ) (60 mg，29%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.95 (s, 3H), 8.77 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.22 (s, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.73 - 4.58 (m, 1H), 4.25 - 4.04 (m, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.85 - 3.74 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.55 - 3.37 (m, 1H), 3.15 (d,J = 27.5 Hz, 4H), 2.33 - 2.14 (m, 1H), 2.09 - 1.76 (m, 3H); MS (ES+): 495.4 (M+1), (ES-): 529.4。 流程195
製備N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)異喹啉-3-胺(195b)
化合物195b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由3-氯異喹啉( 195a ) (0.125 g，0.76 mmol；CAS # 19493-45-9)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (190 mg，0.76 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，150 mg，0.31 mmol)、Pd2 (dba)3 (140 mg，0.195 mmol)及碳酸銫(0.5 g，1.53 mmol)在t-BuOH/甲苯(12 mL，1:3比率)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)異喹啉-3-胺( 195b ) (22 mg，8%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.73 (s, 1H, D2 O可交換), 9.11 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.04 - 7.93 (m, 2H), 7.78 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.69 - 7.59 (m, 1H), 7.43 - 7.35 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.12 (s, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.72 (s, 3H); MS (ES+): 377.3 (M+1); 399.3 (M+Na); (ES-): 411.3 (M+Cl)。 流程196
製備(S)-1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-甲醯胺(196b)
步驟1：製備(S)-1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-甲醯胺(196a)
化合物196a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由5,7-二氯噻唑并[5,4-d]嘧啶(150a ) (0.2 g，0.97 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.11 g，0.97 mmol)及DIPEA (0.51 mL，2.91 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM/甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 196a ) (0.17 g，61%產率)；MS (ES+): 306.1 (M+Na); MS (ES-): 282.3 (M-1), 318.1及320.1 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-甲醯胺(196b)
化合物196b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 196a ) (0.17 g，0.6 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (150 mg，0.6 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.17 g，0.36 mmol)、碳酸銫(0.58 g，1.79 mmol)及Pd2 (dba)3 (160 mg，0.18 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)及甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 196b ) (10 mg，4%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.01 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.04 - 8.67 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.53 - 6.81 (m, 4H), 4.77 - 4.03 (m, 3H), 4.02 - 3.50 (m, 9H), 2.32 - 1.83 (m, 4H)。MS (ES+): 497.3 (M+1); MS (ES-): 495.3 (M-1)。 流程197
製備5-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(197a )
化合物197a 係根據流程2中所報道之程序，由5-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(158a ) (0.15 g，0.36 mmol)、吡咯啶(0.09 mL，1.07 mmol)、DIPEA (0.19 mL，1.07 mmol)在2-丙醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈棕色固體狀之5-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(197a ) (0.11 g，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.60 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.81 - 3.43 (m, 7H), 2.02 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 454.3 (M+1); MS (ES-): 452.4 (M-1)。 流程198
製備N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-2-胺(198b)
化合物198b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2-氯喹唑啉( 198a ) (0.1 g，0.61 mmol；CAS # 6141-13-5)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (151 mg，0.61 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，116 mg，0.24 mmol)、Pd2 (dba)3 (111 mg，0.12 mmol)及碳酸銫(396 mg，1.53 mmol)在t -BuOH/甲苯(12 mL，1:3比率)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-2-胺( 198b ) (13 mg，6%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.29 (s, 1H, D2 O可交換), 9.33 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.95 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.87 - 7.78 (m, 2H), 7.47 - 7.34 (m, 1H), 7.02 (s, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 378.3 (M+1); 400.3 (M+Na); (ES-): 376.3 (M-1)。 流程199
製備4-(吡咯啶-1-基)-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-胺(199b)
步驟1：製備2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(199a)
化合物199a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(160a ) (1.4 g，4.09 mmol)之IPA (10 mL)、吡咯啶(290 mg，4.09 mmol)、DIPEA (1.07 mL，6.14 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶( 199a ) (1.3 g，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.95 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 7.56 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 7.45 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 6.87 (d,J = 4.1 Hz, 1H), 3.78 - 3.63 (m, 2H), 3.60 - 3.45 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.07 - 1.92 (m, 2H), 1.92 - 1.78 (m, 2H)。
步驟2：製備4-(吡咯啶-1-基)-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-胺(199b)
化合物199b 係根據流程178中所報道之程序，由含2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5-甲苯磺醯基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶( 199a ) (350 mg，0.93 mmol)之DMA (15 mL)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (231 mg，0.93 mmol)、Pd2 (dba)3 (170 mg，0.19 mmol)、X-Phos (177 mg，0.37 mmol)及Cs2 CO3 (756 mg，2.32 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-60% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之4-(吡咯啶-1-基)-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-胺( 199b ) (95 mg，17%產率)游離鹼。將游離鹼(28 mg)取出且與1% HCl混合1小時，隨後移除過量HCl，將殘餘物用水/CH3 CN溶解且凍乾，得到呈灰白色固體狀之4-(吡咯啶-1-基)-5-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2-胺( 199b ) (29 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H, D2 O可交換), 9.06 (s, 1H), 8.38 (s, 1H, D2 O可交換), 7.96 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.44 - 7.30 (m, 3H), 7.11 (s, 2H), 6.83 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.75 - 3.62 (m, 7H), 2.31 (s, 3H), 2.02 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 590.3 (M+1); 612.3 (M+Na); (ES-): 588.3 (M-1)。流程200
製備(S)-(1-(8-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(200b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-8-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(200a) 化合物200a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-8-異丙氧基喹唑啉(143f ) (0.5 g，1.95 mmol)在2-DCM (10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.98 g，9.76 mmol)及DIPEA (0.756 g，5.85 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用DCM/甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-8-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 200a ) (0.6 g，96%產率)；MS (ES+): 322.3 (M+1), 344.3 (M+Na); MS (ES-): 320.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(8-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(200b)
化合物200b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-8-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 200a ) (0.25 g，0.78 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (190 mg，0.78 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，220 mg，0.47 mmol)、碳酸銫(0.76 g，2.33 mmol)及Pd2 (dba)3 (210 mg，0.23 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)及甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(8-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 200b ) (50 mg，11%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.78 - 13.65及11.98 (2m, 1H), 11.65及11.32 (2s, 1H), 8.51 - 8.32 (m, 1H), 7.85 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.49 - 7.29 (m, 2H), 7.00 (s, 2H), 4.90 (s, 1H), 4.29 - 4.04 (m, 1H), 3.99 - 3.49 (m, 13H), 2.27 - 1.86 (m, 4H), 1.56 - 1.29 (m, 6H); MS (ES+): 535.3 (M+1); MS (ES-): 569.4 (M+Cl)。HPLC純度：98.33%。 流程201
製備6-苯甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-胺(201b)
化合物201b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由6-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶( 201a ) (0.26 g，1.0 mmol，根據由Sun, Hao-Peng等人在《歐洲醫藥化學雜誌》, 79, 399-412; 2014中所報道之程序製備)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (312 mg，1.25，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)及碳酸銫(978 mg，3.0 mmol)在二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之6-苯甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-胺( 201b ) (124 mg，26%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.79 - 11.52 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.22 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.83 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.75 - 7.60 (m, 2H), 7.58 - 7.43 (m, 3H), 7.03 (s, 2H), 4.58 - 4.33 (m, 2H), 4.23 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.54 - 3.19 (m, 3H), 3.19 - 2.95 (m, 1H); MS (ES+) 473.3 (M+1), (ES-) 507.2 (M+Cl); HPLC純度98.29 %。 流程202
製備7-苯甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(202b)
步驟1：製備7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(202a )
向7-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(153a ) (2 g，6.80 mmol)於乙醇(35 mL)中之溶液中添加鋅(3.56 g，54.4 mmol)及氫氧化銨(4.73 mL，34.0 mmol)且在90℃下加熱15小時。將反應物冷卻，經由矽藻土過濾且用乙酸乙酯洗滌。濃縮濾液且藉由急驟管柱層析(矽膠，25 g，用0至100%乙酸乙酯/己烷溶離)純化，得到呈濃稠糖漿狀之7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(202a ) (800 mg，45%產率)；1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d ) δ 8.35 (d,J = 3.1 Hz, 1H), 7.40 - 7.25 (m, 5H), 3.73 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 2.86 (d,J = 5.4 Hz, 2H), 2.80 (t,J = 5.5 Hz, 2H)。
步驟2：製備7-苯甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(202b)
化合物202b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由7-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(202a )(0.26 g，1.0 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (312 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)及碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之7-苯甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺( 202b ) (145 mg，31%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.76 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 10.18 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.74 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.70 (t,J = 4.6 Hz, 2H), 7.55 - 7.41 (m, 3H), 7.00 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 4.34 - 4.11 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.45 - 3.06 (m, 3H), 3.02 - 2.86 (m, 1H); MS (ES+): 473.3 (M+1), (ES-): 507.3 (M+Cl); HPLC: 98.06 %。 流程203
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(203b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(203a)
化合物203a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[2,3-d]嘧啶(169a ) (0.5 g，2.50 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.29 g，2.5 mmol)及DIPEA (1.31 mL，7.5 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% MeOH/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 203a ) (0.51 g，73%產率)；MS (ES+): 278.2及280.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(203b)
化合物203b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 203a ) (0.25 g，0.9 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (220 mg，0.9 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，280 mg，0.54 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.25 g，0.27 mmol)及碳酸銫(0.88 g，2.7 mmol)在二噁烷(5 mL)及甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA-0/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 203b ) (30 mg，6%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.73 (s, 1H), 8.81 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.71 - 7.41 (m, 2H), 7.35 - 6.84 (m, 3H), 5.00 - 4.77 (m, 1H), 4.52 - 4.06 (m, 2H), 3.92 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.42 - 1.94 (m, 4H). MS (ES+): 591.3 (M+1), 513.3 (M+Na); MS (ES-): 525.3 (M+Cl)。 流程204
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(204b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(204a)
化合物204a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯喹唑啉(21a ) (0.5 g，2.51 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.29 g，2.5 mmol)及DIPEA (1.31 mL，7.5 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% MeOH/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 204a ) (0.27 g，39%產率)；MS (ES-): 311.2及313.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(204b)
化合物204b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 204a ) (0.25 g，0.9 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (230 mg，0.9 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.26 g，0.54 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.25 g，0.27 mmol)及碳酸銫(0.88 g，2.7 mmol)在二噁烷(5 mL)及甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 204b ) (0.03 g，7%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.68 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.39 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.89 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 7.71 - 7.54 (m, 2H), 7.49 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.36 - 7.10 (m, 3H), 4.93 - 4.83 (m, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 1H), 4.31 - 4.14 (m, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 2.42 - 1.86 (m, 4H); MS (ES+): 490.3 (M+1), 512.2 (M+Na); MS (ES-): 524.3 (M+Cl)。HPLC純度：95.00%。流程205
製備(S)-1-(8-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(205b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯-8-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(205a)
化合物205a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-8-異丙氧基喹唑啉(143f ) (0.50 g，1.94 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(1.1 g，9.72 mmol)及DIPEA (0.75 g，5.83 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(25 g)，用乙酸乙酯/己烷(10至80%)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(2-氯-8-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 205a ) ( 0.615 g，95%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.82 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.46 - 7.21 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 4.78 (dt,J = 15.0, 7.5 Hz, 2H), 4.07 (d,J = 20.4 Hz, 2H), 2.10 - 1.72 (m, 4H), 1.33 (d,J = 6.0 Hz, 6H); MS (ES+) 335.0 (M+1); HPLC純度：99.1%。
步驟2：製備(S)-1-(8-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(205b)
化合物205b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯-8-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 205a ) (0.25 g，0.78 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (190 mg，0.78 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，210 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(0.73 g，2.24 mmol)及Pd2 (dba)3 (210 mg，0.23 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)及甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(8-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 205b ) (20 mg，5%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.51 (s, 1H), 8.50 - 8.25 (m, 1H), 7.99 - 7.79 (m, 2H), 7.68 - 7.54 (m, 2H), 7.42 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.12 (m, 2H), 6.99 (s, 1H), 5.00 - 4.79 (m, 2H), 4.57 - 4.09 (m, 2H), 3.91 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 2.43 - 1.90 (m, 4H), 1.56 - 1.35 (m, 6H)。MS (ES+): 548.3 (M+1), 570.4 (M+Na); MS (ES-): 582.3 (M+Cl); HPLC純度：95.12%。 流程206
製備(S)-4-(2-(三氟甲基)吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-胺(206b)
步驟1：製備(S)-2-氯-4-(2-(三氟甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(206a)
化合物206a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (400 mg，2.13 mmol)之IPA (40 mL)、(S)-2-(三氟甲基)吡咯啶(296 mg，2.13 mmol)、DIPEA (0.74 mL，4.25 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-2-氯-4-(2-(三氟甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪( 206a ) (590 mg，95%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.88 - 7.80 (m, 1H), 7.14 - 7.05 (m, 1H), 6.82 - 6.74 (m, 1H), 5.48 - 5.33 (m, 1H), 4.16 - 4.08 (m, 1H), 4.09 - 3.95 (m, 1H), 2.23 - 2.09 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO) δ -71.87。
步驟2：製備(S)-4-(2-(三氟甲基)吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-胺(206b)
化合物206b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-2-氯-4-(2-(三氟甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪( 206a ) (300 mg，1.03 mmol)在甲苯/t -BuOH (25 mL，比率：5:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (309 mg，1.24 mmol)、Pd2 (dba)3 (309 mg，1.24 mmol)、X-Phos (197 mg，0.41 mmol)及Cs2 CO3 (1177 mg，3.61 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後[矽膠(12 g)，用0-100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化兩次後得到化合物206b 之游離鹼。使用5% HCl將游離鹼轉化成HCl鹽，隨後凍乾，得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(三氟甲基)吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-胺( 206b ) (276 mg，50%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.49 (s, 1H, D2 O可交換), 9.14 (s, 1H), 7.90 (s, 1H, D2 O可交換), 7.73 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.11 (s, 2H), 6.99 - 6.91 (m, 1H), 6.66 - 6.56 (m, 1H), 5.58 - 5.44 (m, 1H), 4.20 - 4.06 (m, 1H), 4.06 - 3.94 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.72 (s, 3H), 2.23 - 2.09 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO) δ -71.95; MS (ES+): 504.3 (M+1), 526.3 (M+Na); (ES-): 538.3 (M+Cl)。 流程207
製備4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(207b)
步驟1：製備2-氯-4-(吡咯啶-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶(207a)
化合物207a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (1 g，4.88 mmol)之IPA (10 mL)、吡咯啶(0.4 mL，4.88 mmol)、DIPEA (2.56 mL，14.63 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-氯-4-(吡咯啶-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶( 207a ) (0.97 g，83%產率)；MS (ES+): 240.1及242.1 (M+1), 262.1及264.1 (M+Na)。
步驟2：製備4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(207b)
化合物207b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-4-(吡咯啶-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶( 207a ) (400 mg，1.67 mmol)在甲苯/1,4-二噁烷(10 mL，比率：1:1)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (420 g，1.67 mmol)、Pd2 (dba)3 (460 mg，0.50 mmol)、X-Phos (480 mg，1.0 mmol)及Cs2 CO3 (1630 mg，5.01 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺( 207b ) (40 mg，5%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.69 (s, 1H), 8.41 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.10 - 3.91 (m, 4H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.30 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES+): 453.3 (M+1), 475.3 (M+Na); MS (ES-): 487.4 (M+Cl)。 流程208
製備N2 ,N7 -雙(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)萘-2,7-二胺(208b)
化合物208b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2,7-二溴萘( 208a ) (400 mg，1.4 mmol，CAS # 58556-75-5)在甲苯/1,4-二噁烷(25 mL，比率：1:5)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (523 mg，2.1 mmol)、Pd2 (dba)3 (128 mg，0.14 mmol)、X-Phos (200 mg，0.42 mmol)及Cs2 CO3 (912 mg，2.8 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之N2 , N7 -雙(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)萘-2,7-二胺( 208b ) (35 mg，4%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.97 (s, 2H), 8.76 (s, 2H, D2 O可交換), 7.89 (s, 2H, D2 O可交換), 7.68 - 7.58 (m, 2H), 7.25 - 7.20 (m, 2H), 7.14 - 7.01 (m, 6H), 3.87 (s, 12H), 3.71 (s, 6H); MS (ES+): 623.4 (M+1); 645.3 (M+Na); (ES-): 657.4 (M+Cl)。流程209
製備(R)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(209b)
步驟1：製備(R)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(209a)
化合物209a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (520 mg，2.77 mmol)之IPA (40 mL)、(R)-吡咯啶-3-醇(241 mg，2.77 mmol)、DIPEA (0.97 mL，5.53 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇( 209a ) (601 mg，91%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.70 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.03 - 6.90 (m, 1H), 6.70 - 6.64 (m, 1H), 5.21 - 4.98 (m, 1H, D2 O可交換), 4.53 - 4.29 (m, 1H), 4.10 - 3.92 (m, 2H), 3.86 - 3.75 (m, 1H), 3.70 - 3.62 (m, 1H), 2.16 - 1.88 (m, 2H); MS (ES+): 239.3 (M+1); (ES-): 237.3 (M-1)。
步驟2：製備(R)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(209b)
化合物209b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇( 209a ) (300 mg，1.26 mmol)在甲苯/t -BuOH (25 mL，比率：5:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (376 mg，1.51 mmol)、Pd2 (dba)3 (173 mg，0.19 mmol)、X-Phos (240 mg，0.50 mmol)及Cs2 CO3 (1433 mg，4.40 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後[矽膠(12 g)，用0-100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化兩次後得到110 mg化合物209b 之游離鹼。使用含1 N HCl (1.0 mL)之CH3 CN (0.5 mL)將游離鹼轉化成HCl鹽，隨後凍乾，得到呈灰白色固體狀之(R)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇( 209b ) (40 mg，7%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.65 (s, 1H, D2 O可交換), 9.30 (s, 1H), 7.91 (s, 1H, D2 O可交換), 7.66 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.97 - 6.82 (m, 1H), 6.61 - 6.49 (m, 1H), 4.54 - 4.36 (m, 1H), 4.14 - 3.95 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.85 - 3.74 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.20 - 1.84 (m, 2H); MS (ES+): 452.9 (M+1); 475.4 (M+Na); (ES-): 486.3 (M+Cl)。流程210
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(210a )
化合物210a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (400 mg，0.1 mmol)、(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(456 mg，3.99 mmol)及DIPEA (0.52 mL，2.99 mmol)在NMP (15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠(24 g)，用0-60% DMA-80/DCM溶離)，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(210a ) (196 mg，41%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.73 (s, 1H, D2 O可交換), 8.57 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.47 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H, D2 O可交換), 7.18 - 7.09 (m, 3H), 7.02 (s, 1H, D2 O可交換), 6.49 - 6.39 (m, 1H), 4.40 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.83 - 3.73 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.53 - 3.39 (m, 1H), 2.27 - 2.12 (m, 1H), 2.01 - 1.85 (m, 3H); MS (ES+): 479.3 (M+1); (ES-): 477.3 (M-1); 513.3 (M+Cl)。 流程211
製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(211b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(211a)
化合物211a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (520 mg，2.77 mmol)之IPA (40 mL)、(S)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(342 mg，2.77 mmol)、DIPEA (1.45 mL，8.3 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇( 211a ) (620 mg，94%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.74 - 7.64 (m, 1H), 7.02 - 6.89 (m, 1H), 6.71 - 6.61 (m, 1H), 5.20 - 5.02 (m, 1H), 4.55 - 4.32 (m, 1H), 4.10 - 3.92 (m, 2H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 3.72 - 3.62 (m, 1H), 2.17 - 1.81 (m, 2H)。
步驟2：製備(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(211b)
化合物211b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇( 211a ) (300 mg，1.26 mmol)在甲苯/t -BuOH (25 mL，比率：5:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (376 mg，1.51 mmol)、Pd2 (dba)3 (173 mg，0.19 mmol)、X-Phos (240 mg，0.50 mmol)及Cs2 CO3 (1433 mg，4.40 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/含有0.1% HCl)之水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇( 211b ) (135 mg，24%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.68 (s, 1H, D2 O可交換), 9.31 (s, 1H), 7.93 (s, 1H, D2 O可交換), 7.66 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.89 (dd,J = 21.4, 4.6 Hz, 1H), 6.61 - 6.50 (m, 1H), 5.04 (bs, 1H, D2 O可交換), 4.55 - 4.35 (m, 1H), 4.10 - 3.96 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.84 - 3.73 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.19 - 1.83 (m, 2H); MS (ES+): 452.3 (M+1); (ES-): 486.3 (M+Cl)。 流程212
製備(S)-1-(4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212g )
步驟1：製備1-(4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212f )
化合物212f 係由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1.8 g，9.57 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (5.01 mL，38.81 mmol)及1-(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212e ) (1.29 g，7.69 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用乙酸乙酯/正己烷(0-70%)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之1-(4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212f ) (0.27 g，7 %)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.27 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.7, 1.5 Hz, 1H), 7.54 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.29 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 4.10 - 3.93 (m, 3H), 3.87 (d,J = 0.8 Hz, 3H), 2.61 (d,J = 0.8 Hz, 3H); MS (ES+): 413.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-1-(4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212g )
化合物212g 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由1-(4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212f ) (0.4 g，0.96 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.60 g，5.93 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-100%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之化合物212g (0.05 g，11%)游離鹼；游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(4-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212g ) (30 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.59 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.52 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.45 - 7.33 (m, 2H), 7.13 (dd, J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.27 - 4.13 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.78 - 3.66 (m, 1H), 3.62 - 3.27 (m, 3H), 2.59 (s, 3H), 2.15 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES+): 478.3 (M+1); MS (ES-): 512.3 (M+Cl)。 流程213
製備(S)-1-(6-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(213b)
步驟1：製備(S)-1-(6-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(213a)
化合物213a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由6-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(149a ) (0.5 g，1.7 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(194 mg，1.7 mmol)及DIPEA (0.445 mL，2.55 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/氯仿(0至50%)溶離純化後得到呈棕色固體狀之(S)-1-(6-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 213a ) (496 mg，78%產率)；1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.46 - 7.25 (m, 6H), 6.91 (s, 1H), 5.75 (s, 2H), 4.56 - 4.35 (m, 1H), 3.93 - 3.57 (m, 4H), 2.82 - 2.60 (m, 4H), 2.20 - 2.03 (m, 1H), 1.95 - 1.70 (m, 3H)。
步驟2：製備(S)-1-(6-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(213b)
化合物213b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(6-苯甲基-2-氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 213a ) (320 mg，0.86 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (268 mg，1.08 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，185 mg，0.387 mmol)、碳酸銫(841 mg，2.58 mmol)及Pd2 (dba)3 (118 mg，0.129 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(6-苯甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 213b ) (125 mg，25%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 + D2 O) δ 8.50 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.60 (d,J = 3.7 Hz, 2H), 7.56 - 7.41 (m, 3H), 7.12 (s, 2H), 4.76 - 4.51 (m, 3H), 4.49 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.81 - 3.63 (m, 5H), 3.43 (s, 2H), 3.11 - 2.98 (m, 2H), 2.35 - 2.14 (m, 1H), 2.08 - 1.75 (m, 3H); MS (ES+): 585.4 (M+1), (ES-): 619.4 (M+Cl); HPLC純度：96.6 %。 流程214
製備(3R,5S)-5-(羥甲基)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(214b)
步驟1：製備(3R,5S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-(羥甲基)吡咯啶-3-醇(214a)
化合物214a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (400 mg，2.13 mmol)之IPA (40 mL)、(3R,5S)-5-(羥甲基)吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(327 mg，2.13 mmol)、DIPEA (1.115 mL，6.38 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(3R,5S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-(羥甲基)吡咯啶-3-醇( 214a ) (425 mg，74%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.75 - 7.67 (m, 1H), 6.97 - 6.86 (m, 1H), 6.73 - 6.61 (m, 1H), 5.14 - 5.00 (m, 1H, D2 O可交換), 4.82 (t,J = 5.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.56 - 4.40 (m, 2H), 4.08 - 3.95 (m, 1H), 3.91 - 3.75 (m, 2H), 3.66 - 3.46 (m, 1H), 2.35 - 2.12 (m, 1H), 2.09 - 1.88 (m, 1H)。
步驟2：製備(3R,5S)-5-(羥甲基)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇(214b)
化合物214b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(3R,5S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-(羥甲基)吡咯啶-3-醇( 214a ) (300 mg，1.12 mmol)在甲苯/t -BuOH (42 mL，比率：5:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (334 mg，1.34 mmol)、Pd2 (dba)3 (153 mg，0.17 mmol)、X-Phos (213 mg，0.45 mmol)及Cs2 CO3 (1273 mg，3.91 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18 50 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(3R,5S)-5-(羥甲基)-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-醇( 214b ) (395 mg，74%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.59 (s, 1H, D2 O可交換), 9.37 (s, 1H), 7.92 (bs, 1H, D2 O可交換), 7.65 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 6.87 - 6.75 (m, 1H), 6.60 - 6.50 (m, 1H), 5.42 (brs, 2H, D2 O可交換), 4.67 - 4.56 (m, 1H), 4.56 - 4.45 (m, 1H), 4.08 - 3.97 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.86 - 3.75 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.65 - 3.52 (m, 1H), 2.23 - 2.11 (m, 1H), 2.02 - 1.86 (m, 1H); MS (ES+): 482.3 (M+1); (ES-): 470.4 (M-1)。 流程215
製備(S)-(1-(7-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(215a )
向(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d ) (119 mg，0.2 mmol，2,2,2-三氟乙酸鹽)、1-(溴甲基)-4-(三氟甲基)苯(96 mg，0.4 mmol)於DCM (2.5 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.14 mL，0.8 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA-80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離)純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(215a ) (47 mg，37%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.67 (s, 1H), 7.96 (d,J = 8.3 Hz, 2H), 7.88 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 7.74 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.68 - 4.46 (m, 5H), 4.31 - 4.01 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.67 - 3.55 (m, 2H), 3.53 - 3.36 (m, 2H), 3.37 - 3.16 (m, 2H), 3.13 - 2.90 (m, 1H), 2.10 - 1.78 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -61.19; MS (ES+): 640.4 (M+1), (ES-): 674.4 (M+Cl); HPLC純度：96.4 %。 流程216
製備(S)-(1-(7-(吡啶-3-基甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(216a )
向(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d ) (119 mg，0.2 mmol，2,2,2-三氟乙酸鹽)、3-(溴甲基)吡啶氫溴酸鹽(101 mg，0.4 mmol)於DCM (2.5 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.14 mL，0.8 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g，用0.1% HCl及乙腈溶離)]純化，得到呈淡黃色固體狀之(S)-(1-(7-(吡啶-3-基甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(216a ) (19 mg，17%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 9.16 (s, 1H), 9.01 - 8.86 (m, 1H), 8.75 (d,J = 7.9 Hz, 2H), 8.03 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.03 (s, 2H), 5.21 - 4.60 (m, 3H), 4.29 - 4.21 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.53 - 3.36 (m, 2H), 3.37 - 3.16 (m, 2H), 3.15 - 2.90 (m, 1H), 2.15 - 1.73 (m, 4H); MS (ES+): 573.4 (M+1), 595.4 (M+Na), (ES-): 607.4 (M+Cl); HPLC純度：99.09 %。 流程217
製備(S)-(1-(7-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(217a )
向(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d ) (119 mg，0.2 mmol，2,2,2-三氟乙酸鹽)、1-(溴甲基)-3-(三氟甲氧基)苯(102 mg，0.40 mmol)於DCM (2.5 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.14 mL，0.8 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(217a ) (55 mg，42%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.17 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.68 (s, 1H), 7.77 (d,J = 16.6 Hz, 3H), 7.64 (t,J = 7.9 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.67 - 4.47 (m, 2H), 4.48 - 4.00 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.67 - 3.54 (m, 1H), 3.52 - 3.36 (m, 1H), 3.37 - 3.08 (m, 1H), 3.11 - 2.78 (m, 1H), 1.94 (d,J = 17.5 Hz, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.66 ; MS (ES+): 656.4 (M+1), 678.3 (M+Na), 690.3 (M+Cl); HPLC純度97.5 %。 流程218
製備(S)-2-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)乙醯胺(218a )
向(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d ) (119 mg，0.2 mmol，2,2,2-三氟乙酸鹽)、2-溴乙醯胺(55 mg，0.4 mmol)於DCM (2.5 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.14 mL，0.8 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-2-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)乙醯胺(218a ) (32 mg，30%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.68 (s, 1H), 8.10 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.77 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.74 (s, 1H), 7.02 (s, 2H), 4.68 - 4.45 (m, 1H), 4.39 (s, 2H), 4.29 - 3.99 (m, 3H), 3.88 (s, 6H), 3.87 - 3.71 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.67 - 3.49 (m, 2H), 3.49 - 3.27 (m, 2H), 3.27 - 3.10 (m, 1H), 3.09 - 2.91 (m, 1H), 2.07 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 539.3 (M+1), 561.3 (M+Na), (ES-): 573.4 (M+Cl); HPLC純度：98.3 %。 流程219
製備(S)-4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲基)苯甲腈(219a )
向(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d ) (119 mg，0.2 mmol，2,2,2-三氟乙酸鹽)、4-(溴甲基)苯甲腈(78 mg，0.4 mmol)於DCM (2.5 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.14 mL，0.8 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA-80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲基)苯甲腈(219a ) (52 mg，44%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6- D2 O) δ 8.78 (s, 1H), 8.01 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.92 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.77 (s, 1H), 7.03 (s, 2H), 4.70 - 4.49 (m, 3H), 4.33 - 4.09 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.87 - 3.70 (m, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 2H), 3.55 - 3.37 (m, 2H), 3.37 - 3.23 (m, 2H), 3.19 - 2.98 (m, 1H), 1.94 (tt,J = 18.8, 8.8 Hz, 4H); MS (ES+): 597.4 (M+1), (ES-): 631.4 (M+Cl); HPLC純度：97.2 %。 流程220
製備(S)-3-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲基)苯甲腈(220a )
向(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(182d ) (119 mg，0.2 mmol，2,2,2-三氟乙酸鹽)、3-(溴甲基)苯甲腈(78 mg，0.4 mmol)於DCM (2.5 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.14 mL，0.8 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g)，用0.1% HCl及乙腈溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲基)苯甲腈(220a ) (56 mg，47%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.71 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.07 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.72 (dd,J = 14.3, 6.1 Hz, 2H), 7.02 (s, 2H), 4.59 - 4.51 (m, 1H), 4.33 - 4.01 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.51 (m, 1H), 3.51 - 3.37 (m, 2H), 3.38 - 3.20 (m, 2H), 3.20 - 2.91 (m, 1H), 2.10 - 1.75 (m, 4H); MS (ES+) 597.5 (M+1); HPLC純度：91.15 %。 流程221
製備(S)-(1-(6,7-二甲氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(221c)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(221b)
化合物221b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹唑啉(221a ) (1.0 g，3.86 mmol；CAS # 27631-29-4)之IPA (40 mL)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(390 mg，3.86 mmol)、DIPEA (1.35 mL，7.72 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 221b ) (1 g，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.51 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.86 (t,J = 5.5 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.62 - 4.50 (m, 1H), 4.16 - 4.00 (m, 1H), 4.00 - 3.92 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.74 - 3.51 (m, 2H), 2.13 - 1.93 (m, 3H), 1.93 - 1.75 (m, 1H)。
步驟2：製備(S)-(1-(6,7-二甲氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(221c)
化合物221c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 221b ) (350 mg，1.08 mmol)在甲苯/t -BuOH (40 mL，比率：5:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (323 mg，1.30 mmol)、Pd2 (dba)3 (148 mg，0.16 mmol)、X-Phos (206 mg，0.43 mmol)及Cs2 CO3 (881 mg，2.7 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18 50 g)，用0-100% CH3CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(6,7-二甲氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 221c ) (286 mg，49%產率)；1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.81 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.31 - 4.16 (m, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.94 (d,J = 2.9 Hz, 9H), 3.86 - 3.79 (m, 5H), 2.29 - 1.96 (m, 4H); MS (ES+): 537.4 (M+1); (ES-): 535.4 (M-1); HPLC純度：97.62%。 流程222
製備(S)-2-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)丙-2-醇(222b)
步驟1：製備(S)-2-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)丙-2-醇(222a )
化合物222a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (300 mg，1.6 mmol)之IPA (10 mL)、(S)-2-(吡咯啶-2-基)丙-2-醇(206 mg，1.6 mmol)、DIPEA (0.56 mL，3.19 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-2-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)丙-2-醇(222a )(260 mg，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.73 (s, 1H), 7.02 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.74 - 6.61 (m, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.75 - 4.61 (m, 1H), 4.15 - 3.91 (m, 2H), 2.30 - 2.13 (m, 1H), 2.13 - 2.01 (m, 1H), 1.96 - 1.74 (m, 2H), 1.14 (s, 3H), 1.10 (s, 3H)。
步驟2：製備(S)-2-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)丙-2-醇(222b)
化合物222b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-2-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)丙-2-醇(222a )(250 mg，0.89 mmol)在甲苯/t -BuOH (40 mL，比率：5:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (266 mg，1.07 mmol)、Pd2 (dba)3 (122 mg，0.13 mmol)、X-Phos (170 mg，0.36 mmol)及Cs2 CO3 (725 mg，2.23 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18 50 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-2-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)丙-2-醇( 222b ) (138 mg，31%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.73 (s, 1H, D2 O可交換), 9.29 (s, 1H), 7.98 - 7.88 (m, 1H, D2 O可交換), 7.70 (s, 1H), 7.13 (s, 2H), 7.02 - 6.91 (m, 1H), 6.64 - 6.51 (m, 1H), 4.79 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 4.16 - 3.95 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 2.29 - 2.11 (m, 1H), 2.07 - 1.79 (m, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); MS (ES+): 494.4 (M+1); 516.4 (M+Na); (ES-): 528.4 (M+Cl)。 流程223
製備(S)-(4,4-二氟-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(223b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-4,4-二氟吡咯啶-2-基)甲醇(223a)
化合物223a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1.30 g，6.91 mmol)之IPA (10 mL)、(S)-(4,4-二氟吡咯啶-2-基)甲醇鹽酸鹽(1.2 g，6.91 mmol)、DIPEA (3.62 mL，20.74 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-4,4-二氟吡咯啶-2-基)甲醇( 223a ) (1.5 g，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.81 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.37 - 5.00 (m, 1H, D2 O可交換), 4.89 - 4.61 (m, 1H), 4.52 - 4.21 (m, 2H), 3.79 - 3.53 (m, 2H), 2.81 - 2.57 (m, 2H)。
步驟2：製備(S)-(4,4-二氟-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(223b)
化合物223b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-4,4-二氟吡咯啶-2-基)甲醇( 223a ) (250 mg，0.87 mmol)在甲苯/t -BuOH (20 mL，比率：5:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (259 mg，0.87 mmol)、Pd2 (dba)3 (119 mg，0.13 mmol)、X-Phos (165 mg，0.35 mmol)及Cs2 CO3 (705 mg，2.17 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18 50 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(4,4-二氟-1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 223b ) (233 mg，54%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.57 (s, 1H, D2 O可交換), 9.25 (s, 1H), 7.92 (s, 1H, D2 O可交換), 7.69 (s, 1H), 7.13 (s, 2H), 6.94 - 6.85 (m, 1H), 6.63 - 6.53 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.52 - 4.20 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.77 - 3.64 (m, 5H), 2.78 - 2.54 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO) δ -95.62; MS (ES+): 502.3 (M+1); 524.3 (M+Na), (ES-): 536.3 (M+Cl); HPLC純度：99.45%。流程224
製備6-苯甲基-4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-胺(224b)
步驟1：製備6-苯甲基-2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(224a)
化合物224a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由6-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(149a ) (0.5 g，1.7 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用吡咯啶(0.121 g，1.700 mmol)及DIPEA (0.89 mL，5.1 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用含(9:1)乙酸乙酯/甲醇之己烷溶離)純化後得到呈固體狀之6-苯甲基-2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶( 224a ) (430 mg，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.42 - 7.19 (m, 5H), 3.70 - 3.60 (m, 4H), 3.58 - 3.44 (m, 4H), 2.65 (s, 4H), 1.89 - 1.72 (m, 4H)。
步驟2：製備6-苯甲基-4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-胺(224b)
化合物224b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由6-苯甲基-2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶( 224a ) (0.33 g，1 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (287 mg，1.15 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之6-苯甲基-4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-胺( 224b ) (72 mg，13%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.09 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 10.44 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.39 (s, 1H), 7.78 - 7.71 (m, 1H), 7.71 - 7.64 (m, 2H), 7.55 - 7.43 (m, 3H), 6.95 (s, 2H), 4.65 - 4.00 (m, 4H), 3.86 (s, 6H), 3.85 - 3.69 (m, 4H), 3.68 (s, 3H), 3.37 - 3.01 (m, 4H), 2.06 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+): 542.4 (M+1), (ES-): 576.3 (M+Cl)。HPLC純度：95.59 %。 流程225
製備7-苯甲基-4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(225b)
步驟1：製備7-苯甲基-2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(225a)
化合物225a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由7-苯甲基-2,4-二氯-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶(153a ) (0.5 g，1.7 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用吡咯啶(121 mg，1.7 mmol)及DIPEA (0.89 mL，5.1 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之7-苯甲基-2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶( 225a ) (350 mg，63%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.41 - 7.20 (m, 5H), 3.69 - 3.56 (m, 6H), 3.34 (m, 2H), 2.89 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.58 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.88 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+) 329.3 (M+1)，
步驟2：製備7-苯甲基-4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(225b)
化合物225b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由7-苯甲基-2-氯-4-(吡咯啶-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶( 225a ) (0.33 g，1 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (287 mg，1.15 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之7-苯甲基-4-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺( 225b ) (115 mg，21%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6- D2 O) δ 8.45 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.64 - 7.55 (m, 2H), 7.54 - 7.45 (m, 3H), 6.92 (s, 2H), 4.50 - 4.30 (m, 2H), 4.15 - 3.97 (m, 2H), 3.85 (s, 6H), 3.83 - 3.74 (m, 4H), 3.67 (s, 3H), 3.58 - 3.41 (m, 2H), 3.20 - 3.08 (m, 2H), 1.95 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 542.4 (M+1); HPLC純度：96.69 %。 流程226
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(226c)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(226b)
化合物226b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉(226a ) (0.5 g，2.46 mmol，CAS# 1127-85-1)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.25 g，2.46 mmol)及DIPEA (1.29 mL，7.39 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/氯仿(0至50%)溶離純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 226b ) (350 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 4.67 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.41 - 4.23 (m, 1H), 3.76 - 3.65 (m, 1H), 3.65 - 3.53 (m, 1H), 3.48 (m, 1H), 3.41 - 3.32 (m, 1H), 2.79 - 2.53 (m, 4H), 1.89 (m, 6H), 1.77 - 1.29 (m, 2H)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(226c)
化合物226c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 226b ) (1.0 g，3.73 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (1.07 g，4.29 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，801 mg，1.68 mmol)、碳酸銫(3.65 g，11.2 mmol)及Pd2 (dba)3 (513 mg，0.56 mmol)在1,4-二噁烷(35 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 226c ) (665 mg，37%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.93 (s, 1H,D2O 可交換 ), 10.14 (s, 1H), 8.33 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.64 (s, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.01 - 3.90 (m, 2H), 3.90 - 3.78 (m, 6H), 3.67 (d,J = 1.4 Hz, 3H), 3.57 - 3.38 (m, 2H), 2.84 - 2.57 (m, 4H), 2.07 - 1.74 (m, 6H), 1.72 - 1.39 (m, 2H); MS (ES+): 481.3 (M+1), (ES-): 515.3 (M+Cl); HPLC純度：99.05 %。 流程227
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(227b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(227a)
向2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (0.5 g，2.7 mmol)於2-丙醇(5 mL)中之溶液中添加(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.27 g，2.66 mmol)、DIPEA (1.39 mL，8.00 mmol)且在室溫下攪拌5小時。藉由過濾收集所獲得之固體，真空乾燥，得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 227a ) (0.43 g，64%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 7.70 (dd,J = 2.6, 1.4 Hz, 1H), 6.97 (dd,J = 4.7, 1.6 Hz, 1H), 6.80 - 6.57 (m, 1H), 5.15 (t,J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.87 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.44 (d,J = 17.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.82 (m, 1H), 3.72 - 3.39 (m, 2H), 2.22 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 253.3, (M+1); MS (ES-): 287.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(227b)
化合物227b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 227a ) (253 mg，1 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (287 mg，1.15 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 227b ) (178 mg，38%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.35 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 9.00 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.08 (s, 2H), 6.85 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.67 - 4.36 (m, 1H), 4.11 - 3.93 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 3.71 - 3.60 (m, 2H), 3.61 - 3.31 (m, 2H), 2.21 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 466.3 (M+1), 488.3 (M+Na), (ES-): 500.3 (M+Cl); HPLC純度：98.29 %。流程228
製備(S)-(1-(2-((1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(228d)
化合物228d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1 mmol)、1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-胺(228c ) (238 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 228d ) (160 mg，39%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.46 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 9.02 (s, 1H), 8.68 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.43 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.97 - 7.86 (m, 2H), 7.68 (s, 1H), 6.88 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.53 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.95 - 3.78 (m, 2H), 3.74 - 3.36 (m, 2H), 2.23 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 407.3 (M+1), 429.3 (M+Na), (ES-): 405.1 (M-1); HPLC純度：99.51 %。 流程229
製備(S)-(1-(2-((1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(229d)
化合物229d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1 mmol)、1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(229c ) (322 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 229d ) (225 mg，48%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.38 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.04 (s, 2H), 7.81 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.49 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.85 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.96 - 3.71 (m, 2H), 3.67 (d,J = 10.2 Hz, 1H), 3.58 (s, 1H), 2.23 - 1.82 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -61.08; MS (ES+): 474.3 (M+1), 496.2 (M+Na), (ES-): 508.3 (M+Cl); HPLC純度：99.86 %。 流程230
製備(S)-1-(2-((1-(3-胺甲醯基-4,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(230f)
化合物230f 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 147a ) (400 mg，1.5 mmol)、5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(230e ) (550 mg，2.10 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，287 mg，0.6 mmol)、碳酸銫(1470 mg，4.51 mmol)及Pd2 (dba)3 (206 mg，0.225 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(20 g)，用甲醇/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(3-胺甲醯基-4,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 230f ) (80 mg，12%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.58 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.66 (s, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.49 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.43 - 7.31 (m, 1H), 7.30 - 7.00 (m, 1H), 6.90 - 6.73 (m, 1H), 6.71 - 6.42 (m, 1H), 4.85 - 4.66 (m, 1H), 4.18 - 4.09 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.87 - 3.72 (m, 4H), 2.20 - 1.93 (m, 4H)。MS (ES+): 492.3 (M+1), 514.3 (M+Na); MS (ES-): 490.3 (M-1), 526.4 (M+Cl)。流程231
製備(S)-5-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(231a)
化合物231a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (400 mg，1.5 mmol)、5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(230e ) (0.52 g，2.21 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.30 g，0.63 mmol)、碳酸銫(1.54 g，4.74 mmol)及Pd2 (dba)3 (0.22 g，0.24 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(20 g)，用0-10%甲醇/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-5-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺( 231a ) (80 mg，11%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.63 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.65 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 7.59 - 7.53 (m, 1H), 7.39 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.33 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 6.76 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.47 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.80 (m, 7H), 2.21 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 501.3 (M+Na); MS (ES-): 477.4 (M-1)。流程232
製備(S)-1-(6,7-二甲氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(232b)
步驟1：製備(S)-1-(2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(232a)
化合物232a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹唑啉(221a ) (1.0 g，3.86 mmol)之IPA (40 mL)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(441 mg，3.86 mmol)、DIPEA (1.35 mL，7.72 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 232a ) (1.1 g，85%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.59 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.11 (s, 2H), 4.83 - 4.67 (m, 1H), 4.20 - 4.09 (m, 1H), 4.09 - 3.98 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.31 - 2.15 (m, 1H), 2.06 - 1.80 (m, 3H)。
步驟2：製備(S)-1-(6,7-二甲氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺(232b)
化合物232b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-1-(2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 232a ) (350 mg，1.04 mmol)在甲苯/t -BuOH (40 mL，比率：3:2)中使用1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (311 mg，1.25 mmol，游離鹼)、Pd2 (dba)3 (143 mg，0.16 mmol)、X-Phos (198 mg，0.42 mmol)及Cs2 CO3 (847 mg，2.6 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(6,7-二甲氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-甲醯胺( 232b ) (23 mg，4%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.71 (s, 1H, D2 O可交換), 10.44 (s, 1H, D2 O可交換), 8.28 (s, 1H), 7.89 - 7.52 (m, 3H), 7.32 - 7.02 (m, 4H, 1H is D2 O可交換), 4.96 - 4.81 (m, 1H), 4.58 - 4.38 (m, 1H), 4.31 - 4.14 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (s, 9H), 3.69 (s, 3H), 2.44 - 2.31 (m, 1H), 2.16 - 1.95 (m, 3H); MS(ES-): 548.8 (M-1): 584.4 (M+Cl)。 流程233
製備7-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-胺(233b)
步驟1：製備5-氯-7-(吡咯啶-1-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶(233a)
化合物233a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由5,7-二氯噻唑并[5,4-d]嘧啶(150a ) (0.5 g，2.43 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用吡咯啶(0.2 mL，2.43 mmol)及DIPEA (1.27 mL，7.28 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM/甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之5-氯-7-(吡咯啶-1-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶( 233a ) (0.45 g，77%產率)；MS (ES+): 241.3 (M+1)。
步驟2：製備7-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-胺(233b)
化合物233b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由5-氯-7-(吡咯啶-1-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶( 233a ) (0.3 g，1.25 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (310 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.36 g，0.75 mmol)、碳酸銫(1.22 g，3.74 mmol)及Pd2 (dba)3 (0.34 g，0.37 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)及甲苯(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之7-(吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-胺( 233b ) (20 mg，3%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.28 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 7.70 - 6.90 (m, 4H), 4.35 - 4.02 (m, 4H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 2.17 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES+): 454.3 (M+1)。 流程234
製備(S)-1-(5-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(234e)
化合物234e 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (300 mg，1.18 mmol)、1-(5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(234d ) (0.37 g，1.42 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.230 g，0.47 mmol)、碳酸銫(1.16 g，3.56 mmol)及Pd2 (dba)3 (0.16 g，0.18 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(20 g)，用0-10%甲醇/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之化合物( 234e ) (70 mg，12%產率)游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈黃色固體狀之(S)-1-(5-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮( 234e ) (15 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.60 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.03 - 6.79 (m, 1H), 6.65 - 6.48 (m, 1H), 4.73 - 4.29 (m, 1H), 4.17 - 3.28 (m, 10H), 2.61 (s, 3H), 2.23 - 1.81 (m, 4H). MS (ES+): 478.3 (M+1); MS (ES-): 512.3 (M+Cl)。流程235
製備2-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(235a )
化合物235a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (300 mg，0.75 mmol)及1-甲基哌嗪(299 mg，2.99 mmol)在NMP (6 mL)中使用DIPEA (0.39 mL，2.24 mmol)作為鹼來製備。由此在處理後得到呈固體狀之化合物235a ，其與含HCl (1%)之乙腈混合且凍乾，得到呈灰白色固體狀之2-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(235a ) (183 mg，53%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.70 (s, 2H, D2 O可交換), 8.88 (s, 1H), 8.40 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.17 - 7.99 (m, 1H, D2 O可交換), 7.20 - 6.93 (m, 3H), 4.76 (d,J = 14.0 Hz, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.74 - 3.58 (m, 5H), 3.56 - 3.40 (m, 2H), 3.28 - 3.08 (m, 2H), 2.78 (d,J = 4.1 Hz, 3H); MS(ES+ ) 466.3 (M+1);(ES-) 500.3 (M+Cl); HPLC純度，95.54%。 流程236
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-3-醇(236a )
化合物236a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (300 mg，0.75 mmol)及(R)-吡咯啶-3-醇(260 mg，2.99 mmol)在NMP (6 mL)中使用DIPEA (0.78 mL，4.48 mmol)作為鹼來製備。由此在處理，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-3-醇(236a ) (59 mg，18%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.33 (s, 1H, D2 O可交換), 11.96 (s, 1H, D2 O可交換), 8.45 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.08 - 7.95 (m, 1H), 7.05 - 6.99 (m, 1H), 6.99 - 6.91 (m, 2H), 4.51 - 4.45 (m, 4H), 3.88 (s, 6H), 3.78 - 3.63 (m, 5H), 2.20 - 1.81 (m, 2H); MS(ES+): 453.3 (M+1);(ES-): 451.6 (M-1); HPLC純度，96.88%。 流程237
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-3-醇(237a )
化合物237a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (300 mg，0.75 mmol)及(S)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(369 mg，2.99 mmol)在NMP (6 mL)中使用DIPEA (0.78 mL，4.48 mmol)作為鹼來製備。由此在處理，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-3-醇(237a ) (43 mg，13%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.31 (s, 1H, D2 O可交換), 11.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.13 - 7.89 (m, 1H), 7.07 - 6.89 (m, 3H), 4.57 - 4.26 (m, 4H), 3.88 (s, 6H), 3.76 - 3.62 (m, 5H), 2.19 - 1.79 (m, 2H); MS(ES+): 453.3 (M+1);(ES-): 487.3 (M+Cl); HPLC純度，96.60%。 流程238
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(238a )
化合物238a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (2 g，4.99 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(1.97 mL，19.96 mmol)在NMP (10 mL)中使用DIPEA (5.23 mL，29.9 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0至30% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(238a ) (1.35 g，58%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.71 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.02 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 4.4, 1.6 Hz, 1H), 7.00 (t, J = 1.2 Hz, 2H), 6.42 (ddd, J = 4.5, 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.26 - 4.13 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.76 - 3.66 (m, 4H), 3.60 - 3.25 (m, 3H), 2.15 - 1.68 (m, 4H)。MS (ES+): 466.3 (M+1), 488.3 (M+Na); MS (ES-): 464.2 (M-1), 500.3 (M+Cl)。HPLC純度：96.69%。 流程239
製備(S)-環丙基(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)甲酮(239a)
向(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 181d ) (179 mg，0.3 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加環丙烷甲酸(0.036 mL，0.450 mmol)、EDCI (86 mg，0.450 mmol)及DIPEA (0.210 mL，1.200 mmol)。在室溫下攪拌溶液，用二氯甲烷(50 mL)稀釋，用鹽水(2 × 20 mL)洗滌，乾燥，過濾，真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析(矽膠25 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[((矽膠C-18，100 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，得到呈淡黃色固體狀之(S)-環丙基(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)甲酮( 239a ) (95 mg，58%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.23 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 10.27 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.43 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 5.15 - 4.78 (m, 2H), 4.78 - 4.39 (m, 2H), 4.27 - 4.07 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.84 - 3.55 (m, 5H), 3.55 - 3.39 (m, 2H), 2.97 - 2.65 (m, 2H), 2.22 - 2.01 (m, 1H), 2.01 - 1.80 (m, 4H), 0.85 - 0.63 (m, 4H); MS (ES+): 550.4 (M+1), (ES-): 584.3 (M+Cl); HPLC純度：97.49。流程240
製備(S)-5-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-羰基)吡咯啶-2-酮(240a)
向(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 181d ) (179 mg，0.3 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加(S)-5-側氧基吡咯啶-2-甲酸(58.1 mg，0.45 mmol)、EDCI (86 mg，0.45 mmol)及DIPEA (0.21 mL，1.2 mmol)。在室溫下攪拌溶液，用二氯甲烷(50 mL)稀釋，用鹽水(2 × 20 mL)洗滌，乾燥，過濾，真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析(矽膠25 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-5-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-羰基)吡咯啶-2-酮( 240a ) (41 mg，23%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.33 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.51 (s, 1H), 7.80 (d,J = 32.8 Hz, 1H,D2 O 可交換 ), 7.73 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 4.94 (d,J = 15.7 Hz, 1H), 4.84 - 4.56 (m, 3H), 4.48 (d,J = 15.6 Hz, 1H), 3.92 - 3.78 (m, 8H), 3.75 - 3.44 (m, 6H), 3.06 - 2.68 (m, 2H), 2.18 - 2.05 (m, 2H), 2.03 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 593.4 (M+1), (ES-): 627.4 (M+Cl); HPLC純度：94.07 %。流程241
製備(S)-4-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-羰基)苯甲腈(241a)
向(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 181d ) (179 mg，0.3 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加4-氰基苯甲酸(66 mg，0.45 mmol)、EDCI (86 mg，0.45 mmol)及DIPEA (0.21 mL，1.2 mmol)。在室溫下攪拌溶液，用二氯甲烷(50 mL)稀釋，用鹽水(2 × 20 mL)洗滌，乾燥，過濾，真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析(矽膠25 g，用DMA-80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-4-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-羰基)苯甲腈( 241a ) (61 mg，33%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 - 9.94 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.31 (s, 1H), 7.98 (d,J = 7.9 Hz, 2H), 7.78 - 7.56 (m, 3H), 6.96 (s, 2H), 5.23 - 4.87 (m, 1H), 4.87 - 4.57 (m, 2H), 4.01 - 3.73 (m, 7H), 3.75 - 3.66 (m, 3H), 2.12 - 1.64 (m, 4H), 3.87 (m, 7H), 3.69 - 3.21 (m, 4H), 3.05 - 2.61 (m, 2H); MS (ES+): 611.3 (M+1), 633.3 (M+Na), (ES-): 645.4 (M+Cl); HPLC純度：90.45 %。 流程242
製備(S)-(1-(2-((1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(242a)
化合物242a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(72a ) (274 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-100%乙酸乙酯及甲醇於己烷中之(9:1)混合物溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 242a ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 242a ) (230 mg，53%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.37 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 9.03 (d,J = 18.3 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.00 - 6.93 (m, 2H), 6.85 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.63 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.58 - 4.40 (m, 1H), 3.85 (s, 6H), 3.68 - 3.32 (m, 4H), 2.09 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 436.3 (M+1), 458.3 (M+Na); HPLC純度：99.16 %。 流程243
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(243a)
化合物243a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(73a ) (274 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 243a ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色HCl鹽形式之(S)-(1-(2-((1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 243a ) (160 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.55 - 9.44 (m, 1H), 9.15 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 2H), 7.15 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 6.86 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.54 - 4.48 (m, 1H), 4.05 - 3.93 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.74 - 3.60 (m, 2H), 3.63 - 3.39 (m, 1H), 2.14 - 1.99 (m, 4H); MS (ES+): 436.3 (M+1), 458.3 (M+Na), (ES-): 470.3 (M+Cl); HPLC: 95.57%。 流程244
製備(S)-(1-(7-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(244b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(244a )
化合物244a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-異丙氧基喹唑啉(145f ) (200 mg，0.77 mmol)在DCM (10 mL)中使用DIPEA (0.4 mL，3.09 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.39 gm，3.85 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-60%乙酸乙酯/正己烷溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(244a ) (0.15 g，60 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.15 (d,J = 9.1 Hz, 1H), 7.15 - 6.87 (m, 2H), 4.82 (dt,J = 8.0, 5.5 Hz, 2H), 4.55 (t,J = 5.5 Hz, 1H), 4.11 - 3.74 (m, 1H), 3.61 (q,J = 5.4, 4.4 Hz, 2H), 2.20 - 1.62 (m, 4H), 1.32 (dd,J = 6.0, 2.2 Hz, 6H); MS (ES-): 320.0 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(244b)
化合物244b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(244a ) (500 mg，1.55 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (580 mg，2.33 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，290 mg，0.6 mmol)、碳酸銫(2020 mg，6.2 mmol)及Pd2 (dba)3 (210 mg，0.23 mmol)在甲苯及t-BuOH (50 mL，比率5:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用0-5%甲醇/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(244b ) (250 mg，30%產率)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.09 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 9.3 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.83 - 6.65 (m, 2H), 4.88 (s, 1H), 4.76 (dt,J = 12.9, 6.5 Hz, 1H), 4.01 (s, 1H), 3.93 - 3.73 (m, 9H), 3.67 (d,J = 9.8 Hz, 5H), 2.03 (s, 4H), 1.43 - 1.23 (m, 6H); MS (ES+): 535.4 (M+1), 557.7 (M+Na)。HPLC純度：87.35%。 流程245
製備(S)-1-(7-(哌嗪-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(245c )
步驟1：製備4-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(245a )
化合物245a 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79b ) (2000 mg，4.67 mmol)在二氯乙烷(200 mL)中使用哌嗪-1-甲酸第三丁酯(1.3 mL，5.13 mmol)、乙酸(0.54 mL)及NaBH(OAc)3 (2.56 g，12.1 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0%至15%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈棕色固體狀之4-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(245a ) (1.2 g，43%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.22 (s, 1H), 8.20 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.66 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 3.88 (s, 9H), 3.81 (m, 2H), 3.70 (m, 4H), 2.38 (t,J = 4.9 Hz, 4H), 1.38 (s, 9H); MS (ES+): 599.0 (M+1), MS (ES-): 597.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-4-((2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(245b )
化合物245b 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由4-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(245a ) (500 mg，0.84 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(950 mg，8.36 mmol)在DMA (30 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0%至5%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈棕色固體狀之(S)-4-((2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(245b ) (0.22 g，39%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (s, 1H), 8.22 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.17 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 7.02 (d,J = 15.2 Hz, 3H), 6.39 (s, 1H), 4.38 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 3.86 (d,J = 35.0 Hz, 9H), 3.69 (s, 3H), 2.42 (s, 4H), 2.20 (s, 2H), 1.95 (s, 5H), 1.42 (d,J = 8.9 Hz, 2H), 1.37 (s, 9H); MS: ES (+): 677.3 (M+1)。
步驟3：製備(S)-1-(7-(哌嗪-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(245c )
向(S)-4-((2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(245b )(200 mg，0.3 mmol)於乙醇(2.0 mL)中之攪拌溶液中添加4 N乙醇HCl (2.0 mL，8.0 mmol)且在室溫下攪拌2小時。減壓濃縮反應混合物，且將所獲得之固體用乙醚濕磨，藉由過濾收集，真空乾燥，得到呈棕色固體狀之(S)-1-(7-(哌嗪-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(245c ) (150 mg，88%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.46 (s, 1H), 11.21 (s, 1H), 10.39 - 9.72 (m, 2H), 8.80 (s, 1H), 7.32 - 7.03 (m, 4H), 6.77 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.69 - 4.47 (m, 2H), 4.46 - 4.20 (m, 1H), 4.01 - 3.08 (m, 19H), 2.36 - 1.74 (m, 4H)。MS (ES+): 577.3 (M+1); MS (ES-): 611.2 (M+Cl)。 流程246
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)甲醇(246a )
化合物246a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (350 mg，0.87 mmol)及(R)-吡咯啶-3-基甲醇(352 mg，3.48 mmol)在NMP (4 mL)中使用DIPEA (0.46 mL，2.61 mmol)作為鹼來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之化合物246a 游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (s, 1H, D2 O可交換), 8.20 (s, 1H), 8.07 - 8.00 (m, 2H), 6.91 (s, 2H), 6.73 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 4.71 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 7H), 3.45 - 3.38 (m, 2H), 2.41 - 2.34 (m, 1H), 2.04 - 1.93 (m, 1H), 1.80 - 1.67 (m, 1H); MS (ES+): 489.3 (M+Na); (ES-): 465.3 (M-1); HPLC純度，97.16%。藉由使用逆相管柱層析[(矽膠C-18 50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]將游離鹼轉化成HCl鹽，得到呈白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)甲醇(246a ) (160 mg，37%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.18 (s, 1H, D2 O可交換), 11.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.44 (s, 1H), 8.38 - 8.30 (m, 1H), 8.07 - 7.94 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.95 (s, 2H), 5.15 (s, 1H, D2 O可交換), 4.04 - 3.77 (m, 8H), 3.75 - 3.60 (m, 5H), 3.55 - 3.31 (m, 3H), 2.22 - 1.69 (m, 2H); MS (ES+): 467.3 (M+1); (ES-): 501.2 (M+Cl); HPLC純度，96.98%。 流程247
製備(S)-N-環丙基-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(247b )
步驟1：製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲酸(247a )
向L-脯胺酸(2.71 g，23.52 mmol)及NaOH (0.94 g，23.52 mmol)於二噁烷/水(10 mL)中之溶液中添加(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (1.89 g，4.7 mmol)、DIPEA (1.23 mL，7.06 mmol)且加熱回流隔夜。再將含NaOH (0.75 g，18.82 mmol)之水(5 mL)添加至反應物中且再加熱回流8小時。藉由過濾移除固體(起始物質)且用HOAc (20 mL)處理濾液。反應混合物在室溫下攪拌1小時且真空濃縮，得到(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲酸(247a ) (1.68 g，74.3%產率)，其未經進一步純化即用於下一步驟中；MS (ES+): 481.2 (M+1); (ES-): 479.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-N-環丙基-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(247b )
向(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲酸(247a ) (250 mg，0.52 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加環丙胺(36 mg，0.62 mmol)、DIPEA (0.18 mL，1.04 mmol)、HATU (237 mg，0.62 mmol)且在室溫下攪拌4小時。反應混合物用EtOAc稀釋，用水(3 ×)、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]進一步純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-N-環丙基-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(247b ) (79 mg，29%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.68 (bs, 1H, D2 O可交換), 11.88 (bs, 1H, D2 O可交換), 8.57 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.21 - 8.07 (m, 1H, D2 O可交換), 7.81 (s, 1H), 7.23 - 7.06 (m, 3H), 4.59 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.09 - 3.80 (m, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.52 (m, 1H), 2.47 - 2.38 (m, 1H), 2.36 - 2.12 (m, 1H), 2.13 - 1.76 (m, 3H), 0.62 - 0.36 (m, 2H), 0.36 - 0.08 (m, 2H); MS (ES+): 520.3 (M+1); 542.3 (M+Na); (ES-): 518.4 (M-1); 554.3 (M+Cl); HPLC純度97.27%。 流程248
製備(S)-N-(環丙基甲基)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(248a )
化合物248a 係根據流程247中所報道之程序，由(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲酸(247a ) (160 mg，0.33 mmol)在DMF (10 mL)中使用環丙基甲胺(28.4 mg，0.4 mmol)、DIPEA (0.12 mL，0.67 mmol)、HATU (152 mg，0.4 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]純化後，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]進一步純化，得到呈白色固體狀之(S)-N-(環丙基甲基)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(248a ) (45 mg，25%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.15 (s, 1H, D2 O可交換), 11.80 (s, 1H, D2 O可交換), 8.39 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.17 - 8.07 (m, 1H, D2 O可交換), 7.79 (s, 1H), 7.15 - 7.02 (m, 3H), 4.69 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 3.98 - 3.89 (m, 8H), 3.69 (s, 3H), 3.63 - 3.53 (m, 1H), 3.04 - 2.91 (m, 1H), 2.82 - 2.69 (m, 1H), 2.36 - 2.22 (m, 1H), 2.16 - 1.91 (m, 3H), 0.78 - 0.64 (m, 1H), 0.17 - 0.04 (m, 2H), -0.03 - -0.11 (m, 2H); MS(ES+): 534.3 (M+1);(ES-): 532.3 (M-1); 568.2 (M+Cl); HPLC純度98.3%。 流程249
製備(S)-(1-(2-((1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(249d)
化合物249d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(249c ) (280 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 249d ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 249d ) (30 mg，7%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.63 - 9.20 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.99 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.66 - 4.38 (m, 1H), 4.08 - 3.91 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.75 - 3.61 (m, 2H), 3.64 - 3.37 (m, 1H), 2.23 - 1.86 (m, 4H), MS (ES+): 440.2 (M+1), 462.2 (M+Na), (ES-): 474.2 (M+Cl); HPLC純度：98.71 %。流程250
製備(S)-(1-(2-((1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(250d)
化合物250d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(250c ) (280 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 250d ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 250d ) (43 mg，10%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.39 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 9.02 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.74 - 7.59 (m, 2H), 7.55 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.44 - 7.32 (m, 1H), 6.86 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.64 - 4.39 (m, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.87 (s, 1H), 3.75 - 3.62 (m, 2H), 3.61 - 3.33 (m, 1H), 2.19 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 440.3 (M+1), 462.2 (M+Na) (ES-): 474.2 (M+Cl); HPLC純度：97.33 %。流程251
製備(R)-2-(3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(251a )
化合物251a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (422 mg，1.05 mmol)及(R)-N,N-二甲基吡咯啶-3-胺(600 mg，5.25 mmol)在NMP (4 mL)中使用DIPEA (0.55 mL，3.15 mmol)作為鹼來製備。由此在藉由用MeOH (10 mL)濕磨粗殘餘物進行處理，隨後過濾及真空乾燥後得到呈灰白色固體狀之化合物251a (160 mg，32%產率)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H, D2 O可交換), 8.16 (s, 1H), 8.08 - 7.98 (m, 2H), 6.92 (s, 2H), 6.78 - 6.70 (m, 1H), 3.92 - 3.78 (m, 8H), 3.68 (s, 3H), 3.61 - 3.46 (m, 1H), 3.31 - 3.16 (m, 1H), 2.83 - 2.66 (m, 1H), 2.17 (s, 6H), 2.13 - 2.03 (m, 1H), 1.86 - 1.72 (m, 1H); MS (ES+): 480.3 (M+1); (ES-): 514.3 (M+Cl)；藉由使用逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]將游離鹼轉化成HCl鹽，得到呈白色固體狀之(R)-2-(3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(251a ) (108 mg，20%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.23 - 11.64 (m, 2H, D2 O可交換), 8.57 (s, 1H), 8.40 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.11 - 6.96 (m, 3H), 4.16 - 3.99 (m, 4H), 3.89 (s, 6H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.81 (s, 6H), 2.49 - 2.34 (m, 2H); MS (ES+ ) 480.3 (M+1); (ES-): 514.3 (M+Cl); MS (ES+): 480.3 (M+1); (ES-): 514.2 (M+Cl); HPLC純度：96.58%。 流程252
製備(S)-N-甲基-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(252a )
化合物252a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (350 mg，0.87 mmol)及(S)-N-甲基吡咯啶-2-甲醯胺鹽酸鹽(574 mg，3.48 mmol)在NMP (4 mL)中使用DIPEA (0.91 mL，5.23 mmol)作為鹼來製備。由此在藉由用MeOH (10 mL)濕磨粗殘餘物進行處理，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-N-甲基-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(252a ) (245 mg，57%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.36 (s, 1H, D2 O可交換), 11.84 (s, 1H, D2 O可交換), 8.46 - 8.28 (m, 2H), 8.17 - 7.99 (m, 1H, D2 O可交換), 7.73 (s, 1H), 7.19 - 7.01 (m, 3H), 4.66 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 4.00 - 3.88 (m, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.64 - 3.51 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.35 - 2.17 (m, 1H), 2.15 - 1.86 (m, 3H); MS (ES+): 494.2 (M+Na); 516.2 (M+Na); (ES-): 528.2 (M+Cl); HPLC純度：94.53%。 流程253
製備(S)-1-(1-甲基-7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(253c )
步驟1：製備5-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(253b )
化合物253b 係根據流程1中所報道之程序，由5,7-二氯-1-甲基-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶(253a ) (300 mg，1.48 mmol)在2-丙醇(50 mL)中使用DIPEA (0.77 mL，4.43 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (387 mg，1.55 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之5-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(253b ) (320 mg，52%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.87 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 6.95 (s, 2H), 4.38 (s, 3H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 438.1 (M+Na); (ES-): 414.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(1-甲基-7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(253c )
化合物253c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(253b ) (300 mg，0.72 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(412 mg，3.61 mmol)在NMP (10 mL)中使用DIPEA (0.38 mL，2.16 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(1-甲基-7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(253c ) (152 mg，43%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.75 (s, 1H, D2 O可交換), 9.09 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.59 (s, 1H, D2 O可交換), 7.23 (s, 2H), 7.17 (s, 1H, D2 O可交換), 4.58 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 4.38 (s, 3H), 4.00 - 3.83 (m, 8H), 3.70 (s, 3H), 3.60 - 3.47 (m, 1H), 2.34 - 2.17 (m, 1H), 2.06 - 1.90 (m, 3H); MS(ES+): 494.3 (M+Na);516.3 (M+Na);(ES-): 492.3 (M-1); 528.3 (M+Cl)。HPLC純度，98.77% 流程254
製備(S)-3-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)丙醯胺(254a )
向(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(183c ) (417 mg，0.7 mmol)、3-溴丙醯胺(213 mg，1.4 mmol)於DCM (15 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.489 mL，2.80 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g)，用0.1% HCl水溶液及乙腈溶離)純化，得到呈白色固體狀之(S)-3-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)丙醯胺(254a ) (95 mg，25%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.95 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 10.59 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.52 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.71 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.14 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 6.99 (s, 2H), 4.72 - 4.04 (m, 3H), 3.87 (s, 6H), 3.82 - 3.57 (m, 5H), 3.60 - 3.45 (m, 4H), 3.45 - 3.15 (m, 1H), 2.96 (s, 2H), 2.76 (s, 2H), 2.01 (s, 4H); MS (ES+): 553.4 (M+1), (ES-): 587.4 (M+Cl); HPLC純度：93.71%。 流程255
製備(S)-1-(7-(3-胺基-3-側氧基丙基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(255a )
向(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(185b ) (426 mg，0.7 mmol)、3-溴丙醯胺(213 mg，1.4 mmol)於DCM (15 mL)中之攪拌懸浮液中添加DIPEA (0.489 mL，2.8 mmol)且在室溫下攪拌12小時。將反應混合物真空濃縮，藉由急驟管柱層析(矽膠，24 g，用DMA 80/二氯甲烷溶離)純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，25 g)，用0.1% HCl水溶液及乙腈溶離)純化，得到呈白色固體狀之(S)-1-(7-(3-胺基-3-側氧基丙基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(255a ) (77 mg，20%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.32 - 11.60 (m, 1H, D2 O可交換), 10.43 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.59 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.72 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.54 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.27 - 6.96 (m, 4H, 2 HD2 O 可交換 ), 4.60 - 4.47 (m, 1H), 4.46 - 4.21 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.88 - 3.68 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.63 - 3.20 (m, 4H), 2.98 (s, 2H), 2.77 (s, 2H), 2.35 - 2.15 (m, 1H), 2.09 - 1.83 (m, 3H); MS (ES+): 566.4 (M+1), 588.3 (M+Na), (ES-): 600.3 (M+Cl); HPLC純度：96.19 %。 流程256
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(256d)
化合物256d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(256c ) (309 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 256d ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 256d ) (205 mg，44%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.45 (s, 1H), 9.11 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.79 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.37 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.29 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.13 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.92 - 6.75 (m, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.12 (dq,J = 14.2, 7.0 Hz, 4H), 4.03 - 3.73 (m, 2H), 3.72 - 3.35 (m, 2H), 2.23 - 1.80 (m, 4H), 1.37 (q,J = 6.6 Hz, 6H); MS (ES+): 464.3 (M+1), 486.3 (M+Na), (ES-): 498.3 (M+Cl); HPLC純度：98.19 %。 流程257
製備(S)-(1-(2-((1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(257d)
化合物257d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-咪唑-4-胺(257c ) (254 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 257d ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 257d ) (200 mg，48%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.43 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 9.09 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.21 (d,J = 9.4 Hz, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.86 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.08 - 3.83 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.75 - 3.38 (m, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.26 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 420.3 (M+1), 442.3 (M+Na), (ES-): 454.3 (M+Cl); HPLC純度：97.77 %。 流程258
製備(S)-4-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲腈(258d)
化合物258d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲腈(258c ) (268 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 258d ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-4-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲腈( 258d ) (71 mg，17%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.35 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.89 (s, 1H), 8.06 - 7.79 (m, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.52 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.64 - 4.45 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 4.05 - 3.31 (m, 4H), 2.24 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 431.3 (M+1), 453.3 (M+Na), (ES-): 465.3 (M+Cl); HPLC純度：98.56 %。流程259
製備(S)-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(259d)
步驟1：製備(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(259a)
向2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(79a ) (0.4 g，1.85 mmol)於2-丙醇(10 mL)中之溶液中添加(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.18 mL，1.85 mmol)及DIPEA (0.97 mL，5.55 mmol)。混合物在室溫下攪拌2小時且藉由過濾收集所獲得之固體，藉由急驟管柱層析(矽膠12 g，用0至30% DCM及甲醇溶離)純化，得到呈黃色固體狀之(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛(259a )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.09 (s, 1H), 7.47 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 6.86 (d,J = 5.1 Hz, 1H), 5.44 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 4.50 - 4.40 (m, 1H), 4.10 - 3.86 (m, 2H), 3.78 - 3.68 (m, 1H), 3.59 - 3.45 (m, 1H), 2.27 - 2.02 (m, 3H), 1.93 - 1.78 (m, 1H)。
步驟2：製備(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(259b )
在室溫下，向(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲醛( 259a ) (2.0 g，9.3 mmol)於THF/水(66 mL，8:2)中之攪拌溶液中添加2-甲基-2-丁烯(5.4 g，76.98 mmol)及磷酸二氫鈉(9.2 g，76.79 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌20分鐘，冷卻至0℃且添加NaClO2 (3.3 g，36.48 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌4小時且在減壓下濃縮。所獲得之殘餘物用1 N HCl酸化且藉由過濾收集所獲得之固體，用水洗滌，真空乾燥，得到呈灰白色固體狀之(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(259b ) (2.0 g，73%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.8 (S, 1H), 7.2 (m, 1H), 7.0 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.51-4.42 (m, 2H), 3.9 (m,1H), 3.67-3.60 (m, 2H), 2.25-1.95 (m, 4H); MS: (ES+): 296.9 (M+1), (ES-): 295.1 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(259c )
在室溫下，向(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(259b ) (1.0 g，3.37 mmol)於乙腈(30 mL)中之攪拌溶液中依序添加TBTU (1.62 g，5.05 mmol)、DIPEA (1.0 g，8.42 mmol)及哌啶(0.29 g，3.37 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌5小時，用水稀釋且用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取。合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮。所獲得之粗殘餘物藉由急驟管柱層析(矽膠，用0至5%甲醇/DCM溶離)純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(259c ) (1.0 g，82 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.04-7.02 (d, 1H), 6.77-6.76 (d, 1H), 4.8 (s, 1H), 4.5 (m, 1H), 4.01-3.9 (m, 2H), 3.6-3.5 (m, 4H), 3.1 (m, 2H), 2.05-1.94 (m, 4H), 1.58-1.39 (m, 6H); MS (ES+): 363.1 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(259d)
化合物259d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(259c )(400 mg，1.10 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (411 mg，1.65 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，209 mg，0.44 mmol)、碳酸銫(1000 mg，3.08 mmol)及Pd2 (dba)3 (151 mg，0.17 mmol)在甲苯/t-BuOH (56 mL，比率：5:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-10%甲醇/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈棕色固體狀之(S)-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮( 259d ) (80 mg，11%) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.80 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.92 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 6.75 - 6.60 (m, 1H), 4.68 - 4.28 (m, 1H), 4.10 - 2.91 (m, 18H), 2.30 - 1.72 (m, 4H), 1.65 - 1.17 (m, 6H). MS (ES+): 577.4 (M+1), 599.3 (M+Na); MS (ES-): 611.4 (M+Cl); HPLC純度：95.17% 流程260
製備2-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(260a )
化合物260a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (350 mg，0.87 mmol)及3,3-二氟吡咯啶鹽酸鹽(500 mg，3.48 mmol)在NMP (4 mL)中使用DIPEA (0.91 mL，5.23 mmol)作為鹼來製備。由此在藉由用MeOH (10 mL)濕磨粗殘餘物進行處理，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化兩次後得到呈白色固體狀之2-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(260a ) (42 mg，10%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.79 (s, 1H, D2 O可交換), 8.43 - 8.31 (m, 2H), 8.01 (s, 1H, D2 O可交換), 7.08 - 6.91 (m, 3H), 4.34 - 4.17 (m, 2H), 4.02 - 3.93 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.72 - 2.55 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO) δ -100.01; MS (ES+): 473.2 (M+1); HPLC純度：94.94%。 流程261
製備(S)-2-(3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(261a )
化合物261a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (350 mg，0.87 mmol)及(S)-N,N-二甲基吡咯啶-3-胺(398 mg，3.48 mmol)在NMP (4 mL)中使用DIPEA (0.46 mL，2.61 mmol)作為鹼來製備。由此在藉由用MeOH (10 mL)濕磨粗殘餘物進行處理，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化兩次後得到呈白色固體狀之(S)-2-(3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(261a ) (33 mg，8%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.92 (s, 1H, D2 O可交換), 11.61 (s, 1H, D2 O可交換), 8.37 (d,J = 8.7 Hz, 2H, 1H為D2 O可交換的), 8.00 (s, 1H), 7.09 - 6.93 (m, 3H), 4.10 - 3.96 (m, 4H), 3.83 - 3.75 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.87 - 2.73 (m, 6H), 2.48 - 2.43 (m, 2H); MS(ES+): 480.2 (M+1);(ES-): 514.2 (M+Cl); HPLC純度：95.36%。 流程262
製備(S)-(1-(2-((1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(262d)
化合物262d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(262c ) (304 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 262d ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 262d ) (214 mg，47%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.84 - 9.52 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 9.12 (s, 1H), 8.04 - 7.84 (m, 3H), 7.74 (dd,J = 14.6, 6.1 Hz, 2H), 7.52 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 6.92 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.09 - 3.75 (m, 1H), 3.75 - 3.51 (m, 2H), 3.51 - 3.29 (m, 1H), 2.25 - 1.86 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.78; MS (ES+): 460.2 (M+1), 482.2 (M+Na), (ES-) 494.2 (M+Cl); HPLC純度：95.39 %。 流程263
製備(S)-(1-(2-((1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(263d)
化合物263d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (253 mg，1.0 mmol)、1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(263c ) (322 mg，1.25 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15 mmol)在1,4-二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA 80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 263d ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 263d ) (205 mg，43%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.87 - 9.37 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 9.06 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.81 - 7.64 (m, 3H), 7.36 (s, 1H), 6.91 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.08 - 3.76 (m, 1H), 3.75 - 3.51 (m, 2H), 3.51 - 3.33 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.27 - 1.86 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.66; MS (ES+): 474.2 (M+1), 496.2 (M+Na), (ES-): 508.2 (M+Cl); HPLC純度：95.69 %。流程264
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(264b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(264a)
化合物264a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉(226a ) (0.5 g，2.46 mmol，CAS # 1127-85-1)在2-丙醇(5 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.25 g，2.46 mmol)及DIPEA (1.29 mL，7.39 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/氯仿(0至50%)溶離純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 264a ) (550 mg，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 4.70 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.40 - 4.22 (m, 1H), 3.74 - 3.54 (m, 2H), 3.47 (m, 1H), 3.36 (m, 2H), 2.78 - 2.54 (m, 4H), 1.99 - 1.51 (m, 6H), 1.47 - 1.30 (m, 1H)。
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(264b)
化合物264b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 264a ) (1.46 g，5.45 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (1.56 g，6.27 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，1.17 g，2.45 mmol)、碳酸銫(5.33 g，16.36 mmol)及Pd2 (dba)3 (749 mg，0.82 mmol)在1,4-二噁烷(40 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 264b ) (799 mg，32%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.35 (s, 1H, D2 O可交換), 10.01 (s, 1H, D2 O可交換), 8.25 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.94 (d,J = 1.1 Hz, 2H), 4.77 - 4.44 (m, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 2H), 3.87 (d,J = 1.0 Hz, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.63 - 3.32 (m, 2H), 2.79 - 2.60 (m, 4H), 2.08 - 1.75 (m, 6H), 1.70 - 1.41 (m, 2H); MS (ES+): 481.4 (M+1), (ES-): 515.4 (M+Cl); HPLC純度：96.8 %。 流程265
製備N2-甲基-N2-(1-甲基哌啶-4-基)-N4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺(265a )
化合物265a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (350 mg，0.87 mmol)及N,1-二甲基哌啶-4-胺(893 mg，6.97 mmol)在NMP (6 mL)中使用DIPEA (0.46 mL，2.61 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之N2-甲基-N2-(1-甲基哌啶-4-基)-N4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2,4-二胺(265a ) (103 mg，24%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.87 (s, 1H, D2 O可交換), 11.21 (s, 1H, D2 O可交換), 8.59 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.15 - 6.99 (m, 3H), 4.85 - 4.66 (m, 1H), 3.94 - 3.77 (m, 7H), 3.76 - 3.60 (m, 4H), 3.55 - 3.39 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.69 - 2.58 (m, 2H), 2.37 - 2.18 (m, 2H), 2.01 - 1.87 (m, 2H); MS(ES+): 494.3 (M+1);(ES-): 528.3 (M+Cl); HPLC純度：91.01%。 流程266
製備(S)-1-(7-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(266c )
步驟1：製備2-氯-7-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(266b )
化合物266b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-氟喹唑啉(266a ) (500 mg，2.3 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.21 mL，6.91 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (690 mg，2.76 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之2-氯-7-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(266b ) (0.91 g，92%產率)；MS (ES+): 430.3 (M+1), 452.1及454.1 (M+Na); MS (ES-): 428.3及430.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(7-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(266c )
化合物266c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(266b ) (300 mg，0.7 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(320 mg，2.79 mmol)在NMP (10 mL)中使用DIPEA (0.73 mL，4.19 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(7-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(266c ) (220 mg，62%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.98 (s, 1H), 11.77 (s, 1H), 8.87 (dd,J = 9.3, 5.7 Hz, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.17 (d,J = 10.0 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.37 (dt,J = 8.9, 5.1 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.71 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.21 - 4.06 (m, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.85 - 3.58 (m, 4H), 2.42 - 2.20 (m, 1H), 2.19 - 1.93 (m, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -101.24; MS (ES+): 508.2 (M+1); MS (ES-): 506.3 (M-1)。HPLC純度：95.29%。 流程267
製備(S)-N-(環丙基甲基)-3-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲醯胺(267i )
步驟1：製備5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-(環丙基甲基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(267h )
化合物267h 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (400 mg，2.12 mmol)在2-丙醇(60 mL)中使用DIPEA (0.82 mL，6.38 mmol)及5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-N-(環丙基甲基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(267g ) (807 mg，2.55 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-(環丙基甲基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(267h ) (0.35 g，59 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.32 (s, 1H) 8.44 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.89 -7.88 (s ,1H) 7.78 (s, 1H), 7.46-7.40 (d, 2H), 7.19 (s, 1H), 6.73 (s, 1H) 3.95 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.20-3.16 (m, 2H), 1.05-1.02 (m, 1H), 0.47-0.45 (m, 2H), 0.024-0.019 (m, 2H); MS (ES+): 468.0 (M+1), (ES-): 466.0 (M-1)。
步驟2：製備(S)-N-(環丙基甲基)-3-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲醯胺(267i )
化合物267i 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-(環丙基甲基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(267h ) (300 mg，0.64 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(650 mg，6.14 mmol)在NMP (15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用甲醇/乙酸乙酯(0-10%)溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-N-(環丙基甲基)-3-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲醯胺(267i ) (20 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.10 (s, 1H), 10.80 (s, 1H), 9.12 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.83 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.45 (s, 2H), 7.12 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 4.3, 2.4 Hz, 1H), 4.30 - 4.12 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.82 - 3.27 (m, 4H), 3.21 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.09 - 1.77 (m, 4H), 1.17 - 0.95 (m, 1H), 0.54 - 0.37 (m, 2H), 0.33 - 0.19 (m, 2H)。MS (ES+): 519.3 (M+1), 541.2 (M+Na); MS (ES-): 517.3 (M-1); 553.3 (M+Cl)。 流程268
製備(S)-2-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-3-甲氧基苯甲醯胺(268b )
步驟1：製備5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(268a )
化合物268a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1000 mg，5.31 mmol)在2-丙醇(60 mL)中使用DIPEA (2.06，15.95 mmol)及5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(230e ) (1.67 g，6.38 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(268a ) (0.5 g，32 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.31 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.67-7.54 (m, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.45- 7.40 (m, 3H), 6.72 (s, 1H), 3.95 (s, 3H) ,3.86 (s, 3H); MS (ES+): 414.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-2-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-3-甲氧基苯甲醯胺(268b )
化合物268b 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(268a ) (500 mg，1.2 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(1120 mg，12.08 mmol)在NMP (15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用甲醇/乙酸乙酯(0-10%)溶離]純化後得到呈固體狀之化合物268b 游離鹼(40 mg，7 %)。固體藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-2-羥基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-3-甲氧基苯甲醯胺(268b ) (20 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.78 (s, 1H), 8.50 (d,J = 6.9 Hz, 2H), 8.17 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.44 (d,J = 2.4 Hz, 2H), 7.12 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.48 - 6.38 (m, 1H), 4.27 - 4.13 (m, 1H), 3.89 (m, 3H), 3.76 - 3.25 (m, 1H), 3.58 - 3.46 (m, 1H), 3.44 - 3.25 (m, 2H), 2.06 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 465.3 (M+1), 487.2 (M+Na); MS (ES-): 463.3 (M-1); 499.3 (M+Cl)。HPLC純度：81.95%。 流程269
製備(S)-(1-(7-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(269a )及((2S,2'S)-1,1'-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2,7-二基)雙(吡咯啶-2,1-二基))二甲醇(269b )
化合物269a 及269b 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(266b ) (300 mg, 0.7 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.28 mL，2.79 mmol)在NMP (15 mL)中使用DIPEA (0.73 mL，4.19 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化兩次，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之化合物(269a ) (0.09 g，26 %) HCl鹽及呈白色固體狀之化合物(269b ) (0.02 g，4%產率) HCl鹽。
(S)-(1-(7-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(269a )之分析資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.81 (s, 1H), 8.80 (td, J = 9.6, 5.6 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.21 - 7.97 (m, 2H), 7.41 - 7.25 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.80 - 4.40 (m, 1H), 4.09 - 3.30 (m, 13H), 2.24 - 1.83 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -101.53; MS (ES+): 495.2 (M+1); MS (ES-): 493.3 (M-1); HPLC純度：99.43%。
((2S,2'S)-1,1'-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2,7-二基)雙(吡咯啶-2,1-二基))二甲醇(269b )之分析資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.31 (s, 1H), 8.67 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.05 (q, J = 17.0, 15.2 Hz, 3H), 6.79 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.64 - 4.39 (m, 1H), 4.00 - 3.72 (m, 8H), 3.72 - 3.03 (m, 10H), 2.20 - 1.76 (m, 8H)。MS (ES+): 576.4 (M+1); MS (ES-): 610.4 (M+Cl)。HPLC純度：86.39%。 流程270
製備(S)-5-(羥甲基)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-酮(270a)
化合物270a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺( 103a ) (500 mg，1.24 mmol)、(S)-5-(羥甲基)吡咯啶-2-酮(215 mg，1.87 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，289 mg，0.5 mmol)、碳酸銫(811 mg，2.49 mmol)及Pd2 (dba)3 (228 mg，0.25 mmol)在1,4-二噁烷(20 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA 80/DCM溶離]純化後得到呈固體狀之化合物( 270a ) 游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]再純化，得到呈白色固體狀之(S)-5-(羥甲基)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-酮( 270a ) (142 mg，24%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.87 (s, 1H, D2 O可交換), 9.23 (s, 1H), 8.91 - 8.57 (m, 1H, D2 O可交換), 8.55 - 8.30 (m, 1H), 7.45 - 6.96 (m, 3H), 5.85 (s, 1H), 4.85 - 4.58 (m, 1H), 4.05 - 3.43 (m, 13H), 2.97 - 2.73 (m, 1H), 2.29 - 1.99 (m, 2H); MS (ES+): 481.3 (M+1); 503.2 (M+Na); (ES-): 479.2 (M-1), 515.3 (M+Cl); HPLC純度：94.57%。 流程271
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(271c)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(271b)
化合物271b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶(271a ) (0.25 g，1.32 mmol，CAS# 5466-43-3)在2-丙醇(50 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.13 g，1.32 mmol)及DIPEA (0.46 mL，2.64 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 271b ) (286 mg，85%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.91 - 4.73 (m, 1H, D2 O可交換), 4.28 - 4.14 (m, 1H), 3.81 - 3.40 (m, 3H), 3.32 - 3.27 (m, 1H), 3.17 - 2.95 (m, 2H), 2.75 - 2.60 (m, 2H), 2.02 - 1.73 (m, 6H); MS (ES+): 276.2 (M+Na); (ES-): 252.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(271c)
化合物271c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 271b ) (200 mg，0.79 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (196 mg，0.79 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，150 mg，0.32 mmol)、碳酸銫(514 mg，1.58 mmol)及Pd2 (dba)3 (144 mg，0.16 mmol)在甲苯/t-BuOH (25 mL，比率：5:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 271c ) (130 mg，35%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.44 (s, 1H, D2 O可交換), 10.44 (d,J = 24.5 Hz, 1H, D2 O可交換), 8.50 (s, 1H), 7.85 - 7.67 (m, 1H), 7.08 - 6.85 (m, 2H), 4.64 - 4.32 (m, 1H), 4.04 - 3.92 (m, 1H), 3.92 - 3.74 (m, 6H), 3.74 - 3.58 (m, 3H), 3.49 - 3.30 (m, 1H), 3.19 - 2.96 (m, 2H), 2.92 - 2.72 (m, 2H), 2.10 - 1.87 (m, 6H); MS (ES+): 467.3 (M+1); 489.3 (M+Na); (ES-): 501.3 (M+Cl); HPLC純度：98.23%。 流程272
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(272b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(272a)
化合物272a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶(271a ) (0.25 g，1.32 mmol)在2-丙醇(50 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.13 g，1.32 mmol)及DIPEA (0.46 mL，2.64 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 272a ) (221 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.92 - 4.75 (m, 1H, D2 O可交換), 4.29 - 4.15 (m, 1H), 3.78 - 3.42 (m, 3H), 3.32 - 3.22 (m, 1H), 3.14 - 2.97 (m, 2H), 2.75 - 2.58 (m, 2H), 2.01 - 1.79 (m, 6H); MS (ES+): 254.2 (M+1); (ES-): 252.3 (M-1)。
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(272b)
化合物272b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 272a ) (200 mg，0.79 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (196 mg，0.79 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，150 mg，0.32 mmol)、碳酸銫(514 mg，1.58 mmol)及Pd2 (dba)3 (144 mg，0.16 mmol)在甲苯/t-BuOH (25 mL，比率：5:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 272b ) (137 mg，37%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.46 (s, 1H, D2 O可交換), 10.68 - 10.17 (m, 1H, D2 O可交換), 8.50 (s, 1H), 7.85 - 7.66 (m, 1H), 7.07 - 6.91 (m, 2H), 4.64 - 4.35 (m, 1H), 4.03 - 3.91 (m, 1H), 3.90 - 3.78 (m, 7H), 3.73 - 3.61 (m, 4H), 3.48 - 3.33 (m, 1H), 3.17 - 2.97 (m, 2H), 2.93 - 2.80 (m, 2H), 2.11 - 1.85 (m, 6H); MS (ES+): 467.3 (M+1); 489.3 (M+Na); (ES-): 501.3 (M+Cl); HPLC純度：96.28%。 流程273
製備(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-硫哌喃并[4,3-d]嘧啶6,6-二氧化物(273c)
步驟1：製備(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-7,8-二氫-5H-硫哌喃并[4,3-d]嘧啶6,6-二氧化物(273b)
化合物273b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7,8-二氫-5H-硫哌喃并[4,3-d]嘧啶6,6-二氧化物(273a ) (0.2 g，0.79 mmol，CAS# 1187830-50-7)在2-丙醇(50 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(80 mg，0.79 mmol)及DIPEA (0.28 mL，1.58 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-7,8-二氫-5H-硫哌喃并[4,3-d]嘧啶6,6-二氧化物( 273b ) (234 mg，93%產率)；MS (ES+): 318.3 (M+1); 340.1 (M+Na); (ES-): 316.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-硫哌喃并[4,3-d]嘧啶6,6-二氧化物(273c)
化合物273c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-7,8-二氫-5H-硫哌喃并[4,3-d]嘧啶 6,6-二氧化物( 273b ) (200 mg，0.63 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (157 mg，0.63 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，120 mg，0.25 mmol)、碳酸銫(410 mg，1.26 mmol)及Pd2 (dba)3 (115 mg，0.13 mmol)在甲苯/t-BuOH (25 mL，比率：5:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-硫哌喃并[4,3-d]嘧啶6,6-二氧化物( 273c ) (110 mg，33%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (s, 1H, D2 O可交換), 8.47 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 4.73 - 4.57 (m, 2H), 4.47 - 4.34 (m, 1H), 3.93 - 3.72 (m, 9H), 3.71 - 3.59 (m, 5H), 3.57 - 3.46 (m, 3H), 3.36 - 3.13 (m, 2H), 2.05 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+): 531.2 (M+1); (ES-): 565.2 (M+Cl); HPLC純度：97.84%。 流程274
製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274c )
步驟1：製備2-氯-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274b )
化合物274b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-6-異丙基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274a ) (200 mg，0.813 mmol，CAS# 1079649-94-7)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.43 mL，2.45 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (203 mg，0.81 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之2-氯-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274b ) (0.21 g，56 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.97 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 6.92 (s, 2H), 4.50 - 4.29 (m, 3H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 1.23 (d,J = 6.7 Hz, 6H)。
步驟2：製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274c )
化合物274c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274b ) (100 mg，0.218 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(55 mg，0.55 mmol)在2-丙醇(1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274c ) (106 mg，93%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.39 (d,J = 22.6 Hz, 1H,D2 O 可交換 ), 8.39 (s, 1H), 7.99 (d,J = 15.6 Hz, 1H), 6.97 (s, 2H), 4.40 (d,J = 12.6 Hz, 5H, 1 HD2 O 可交換 ), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 4H), 3.66 - 3.51 (m, 2H), 3.55 - 3.36 (m, 1H), 2.00 (s, 4H), 1.25 (d,J = 6.6 Hz, 6H); MS (ES+): 524.3 (M+1), 546.3 (M+Na), (ES-): 522.2 (M-1); HPLC純度：96.16 %。 流程275
製備(R)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(275a )
化合物275a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(274b ) (86 mg，0.187 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(47 mg，0.469 mmol)在2-丙醇(1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(R)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-6-異丙基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-酮(275a ) (86 mg，88%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.55 - 11.18 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.39 (s, 1H), 7.99 (d,J = 15.9 Hz, 1H), 6.98 (s, 2H), 5.19 - 4.15 (m, 5H, 1 HD2 O 可交換 ), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 4H), 3.66 - 3.51 (m, 2H), 3.51 - 3.37 (m, 1H), 2.12 - 1.70 (m, 4H), 1.25 (d,J = 6.7 Hz, 6H); MS (ES+): 524.3 (M+1), 546.4 (M+Na), (ES-): 522.3 (M-1); HPLC純度：94.71 %。 流程276
製備(S)-(1-(7-氟-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(276b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-氟喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(276a)
化合物276a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-氟喹唑啉(266a ) (0.4 g，1.84 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.18 mL，1.84 mmol)及DIPEA (0.97 mL，5.53 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7-氟喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 276a ) (0.467 g，90%產率)；MS (ES+): 282.2 (M+1); (ES-): 316.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-氟-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(276b)
化合物276b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-氟喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 276a ) (0.3 g, 1.07 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.26 g，1.07 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.31 g，0.64 mmol)、碳酸銫(1.041 g，3.19 mmol)及Pd2 (dba)3 (0.293 g，0.319 mmol)在甲苯/t-BuOH (40 mL，比率：3:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-氟-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 276b ) (0.04 g，8%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 13.02 (s, 1H), 8.49 - 8.22 (m, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.56 - 7.19 (m, 2H), 6.98 (s, 2H), 4.94 - 4.73 (m, 1H), 4.33 - 4.00 (m, 2H), 3.96 - 3.35 (m, 11H), 2.27 - 1.78 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -101.99; MS (ES+): 495.3 (M+1); MS (ES-): 529.3 (M+Cl)。HPLC純度：96.22%。 流程277
製備(R)-1-(7-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(277a )
化合物277a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-異丙氧基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(145g ) (300 mg，0.63 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.65 g，5.7 mmol)在NMP (10 mL)中使用DIPEA (0.24 g，1.91 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用DMA80 MeOH/DCM (0-4%)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之化合物277a (0.28 g，81 %)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.48 (s, 1H), 11.46 (s, 1H), 8.66 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 7.07 - 6.96 (m, 1H), 4.88 - 4.60 (m, 2H), 4.16 - 4.02 (m, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.83 - 3.55 (m, 4H), 2.40 - 1.74 (m, 4H), 1.37 (d,J = 5.9 Hz, 6H); MS (ES+): 548.4 (M+1)。使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]將游離鹼轉化成HCl鹽，得到呈黃色固體狀之(R)-1-(7-異丙氧基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(277a ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.66 (s, 1H), 11.59 (s, 1H), 8.67 (d,J = 9.0 Hz, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 7.07 - 6.98 (m, 1H), 4.86 - 4.60 (m, 2H), 3.93 (s, 6H), 3.92 - 3.83 (m, 1H), 3.80 - 3.71 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.42 - 1.87 (m, 4H), 1.37 (dd,J = 6.1, 2.1 Hz, 6H); MS (ES+): 548.4 (M+1); MS (ES-): 582.4 (M+Cl)。HPLC純度：93.76 %。 流程278
製備(R)-(1-(7-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(278b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯-7-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(278a )
化合物278a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-異丙氧基喹唑啉(145f ) (200 mg，0.77 mmol)在DCM (10 mL)中使用DIPEA (0.4 mL，3.09 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.39 gm，3.85 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-60%乙酸乙酯/正己烷溶離)純化後得到呈灰白色固體狀之(R)-(1-(2-氯-7-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(278a ) (0.15 g，60 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.22-8.19 (d, 1H), 7.10-7.04 (m, 2H), 4.91-4.84 (m, 2H), 4.62-4.58 (m, 4H), 3.69-3.64 (m, 2H), 2.12-2.05 (m, 4H), 1.91-1.39 (d, 6H); MS (ES- ): 320.0 (M-1)。
步驟2：製備(R)-(1-(7-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(278b)
化合物278b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯-7-異丙氧基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(278a ) (500 mg，1.55 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (580 mg，2.33 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，290 mg，0.6 mmol)、碳酸銫(2020 mg，6.2 mmol)及Pd2 (dba)3 (210 mg，0.23 mmol)在甲苯及t-BuOH (50 mL，比率5:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用甲醇/二氯甲烷0-5%溶離]純化後得到呈白色固體狀之化合物(278b ) (300 mg，36%產率)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ- 9.45 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.94-6.91 (m, 3H), 6.79-6.75 (m, 1H), 4.80-4.78 (s,1H), 4.76-4.74 (m,2H), 3.89-3.85 (s,6H),3.79-3.75 (m, 3H), 3.68 (m, 4H), 2.07-2.04 (d, 4H), 1.54-1.50 (d, 6H); MS (ES+ ) 535.0 (M+1); HPLC純度：90.4%；游離鹼藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]再純化，得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(7-異丙氧基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(278b ) (110 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.41 (s, 1H), 10.63 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.97 (dd, J = 9.3, 2.4 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 4.75 (dd, J = 12.6, 6.5 Hz, 2H), 4.23 - 3.99 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.78 - 3.46 (m, 5H), 2.30 - 1.79 (m, 4H), 1.33 (dd, J = 6.0, 1.6 Hz, 6H)。MS (ES-): 569.3 (M+Cl)。HPLC純度：96.79 %。 流程279
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(279c)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(279b)
化合物279b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶(279a ) (0.3 g，1.57 mmol；CAS# 848398-41-4)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.16 gm，1.57 mmol)及DIPEA (0.823 mL，4.71 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 279b ) (374 mg，93%產率)；MS (ES+): 278.1 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(279c)
化合物279c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 279b ) (256 mg，1.0 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (287 mg，1.150 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈淺棕色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 279c ) (140 mg，30%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.66 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 5.42 - 5.12 (m, 2H), 5.06 - 4.81 (m, 2H), 4.70 - 4.28 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.86 - 3.70 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.64 (d,J = 10.2 Hz, 1H), 3.55 - 3.28 (m, 2H), 2.13 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 469.3 (M+1), (ES-): 503.3 (M+Cl); HPLC純度：99.4 %。 流程280
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(280b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(280a)
化合物280a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶(279a ) (0.3 g，1.57 mmol；CAS# 848398-41-4)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.16 gm，1.57 mmol)及DIPEA (0.823 mL，4.71 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 280a ) (368 mg，92%產率)；MS (ES+): 278.2 (M+Na), (ES-): 254.3。
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(280b)
化合物280b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 280a ) (256 mg，1.0 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (287 mg，1.15 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(977 mg，3.0 mmol)及Pd2 (dba)3 (137 mg，0.15mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈淺棕色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 280b ) (135 mg，29%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.65 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 5.41 - 5.07 (m, 2H), 5.03 - 4.74 (m, 2H), 4.64 - 4.37 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.86 - 3.68 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.69 - 3.57 (m, 1H), 3.56 - 3.29 (m, 2H), 2.09 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 469.3 (M+1), (ES-): 503.3 (M+Cl); HPLC純度：99.1 %。 流程281
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(281b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-胺(281a )
化合物281a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶(279a ) (400 mg，2.09 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.1 mL，6.28 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (522 mg，2.09 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-胺(281a ) (545 mg，64%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.16 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 5.76 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 404.1 (M+1); 426.3 (M+Na), (ES-): 402.3 (M-1)
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(281b )
化合物281b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-胺(281a ) (200 mg，0.5 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(125 mg，1.24 mmol)在2-丙醇(1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(281b ) (178 mg，77%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.15 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 6.95 (s, 2H), 4.96 (s, 4H), 4.56 - 4.39 (m, 1H), 4.37 - 3.89 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.57 - 3.38 (m, 2H), 2.16 - 1.89 (m, 4H); MS (ES+): 469.3 (M+1), (ES-): 503.3 (M+Cl); HPLC純度：98.31 %。 流程282
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(282a )
化合物282a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-胺(281a ) (200 mg，0.5 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(125 mg，1.24 mmol)在2-丙醇(1 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(282a ) (125 mg，54%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.13 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 6.95 (s, 2H), 4.95 (s, 4H), 4.58 - 4.41 (m, 1H), 4.40 - 3.96 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.58 - 3.40 (m, 4H), 2.13 - 1.92 (m, 4H); MS (ES+): 469.3 (M+1), (ES-): 503.3 (M+Cl); HPLC: 98.2 %。 流程283
製備(R)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇(283b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇(283a)
化合物283a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (350 mg，1.86 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(R)-吡咯啶-3-基甲醇(188 mg，1.86 mmol)及DIPEA (0.98 mL，5.58 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，0-50% EtOAc/己烷]純化後得到呈黃色半固體狀之(R)-(1-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇( 283a ) (446 mg，95%產率)；MS (ES+): 253.2 (M+1); (ES-): 287.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(R)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇(283b)
化合物283b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇( 283a ) (430 mg，1.7 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (424 mg，1.7 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，324 mg，0.68 mmol)、碳酸銫(1109 mg，3.4 mmol)及Pd2 (dba)3 (311 mg，0.34 mmol)在甲苯/t -BuOH (25 mL，比率：5:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇( 283b ) (195 mg，25%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.62 (s, 1H, D2 O可交換), 9.25 (s, 1H), 7.90 (s, 1H, D2 O可交換), 7.65 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 2H), 6.94 - 6.82 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.25 (s, 1H, D2 O可交換), 4.07 - 3.81 (m, 9H), 3.75 - 3.65 (m, 4H), 3.60 - 3.36 (m, 3H), 2.20 - 1.67 (m, 2H); MS (ES+): 466.3 (M+1); (ES-): 500.2 (M+Cl); HPLC純度：98.98%。流程284
製備(S)-(1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(284c )
步驟1：製備2-氯-7-(三氟甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(284b )
化合物284b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-(三氟甲基)喹唑啉(284a ) (500 mg，1.872 mmol，CAS# 396-02-1)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.62 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (513 mg，2.06 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之2-氯-7-(三氟甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(284b ) (741 mg，82%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.45 (s, 1H), 8.99 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.03 (d,J = 7.6 Hz, 2H), 7.90 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+) 480.2 (M+1), 502.2 (M+Na); (ES-): 478.3 (M-1); 957.3 (2M-1)
步驟2：製備(S)-(1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(284c )
化合物284c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-(三氟甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(284b ) (300 mg，0.63 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.25 mL，2.5 mmol)、DIPEA (0.66 mL，3.75 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(284c ) (31 mg，9%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.86 (s, 1H), 8.95 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 8.75 - 8.60 (m, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.10 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 4.84 - 4.50 (m, 1H), 4.13 - 3.43 (m, 13H), 2.22 - 1.94 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -62.17; MS (ES+): 545.3 (M+1); MS (ES-): 543.4 (M-1), 579.4 (M+Cl)。HPLC純度：91.18 %。 流程285
製備(S)-1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(285a )
化合物285a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-(三氟甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(284b ) (300 mg，0.63 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(285 mg，2.5 mmol)、DIPEA (0.66 mL，3.75 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(285a ) (46 mg，13%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.06 (s, 1H), 9.00 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.95 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.14 (d,J = 1.5 Hz, 2H), 4.75 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.22 - 4.07 (m, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.86 - 3.73 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.44 - 1.87 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -62.16; MS (ES+): 558.3 (M+1), 580.3 (M+Na); MS (ES-): 556.3 (M-1), 592.4 (M+Cl)。HPLC純度：91.99 %。 流程286
製備(S)-(1-(7-(三氟甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(286b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(286a)
化合物286a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-(三氟甲基)喹唑啉(284a ) (400 mg，1.5 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用(S)-吡咯啶-3-基甲醇(0.15 mL，1.5 mmol)及DIPEA (0.79 mL，4.49 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，DCM及甲醇(0至30%)]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 286a ) (0.41 g，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.48 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 7.94 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 7.70 (dd,J = 8.9, 2.0 Hz, 1H), 4.84 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 4.65 - 4.53 (m, 1H), 4.11 - 3.91 (m, 2H), 3.76 - 3.56 (m, 2H), 2.18 - 1.82 (m, 4H); MS (ES-): 330.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-(三氟甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(286b)
化合物286b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 286a ) (300 mg，0.9 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (225 mg，0.9 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，259 mg，0.54 mmol)、碳酸銫(884 mg，2.7 mmol)及Pd2 (dba)3 (248 mg，0.27 mmol)在甲苯/t-BuOH (40 mL，比率：3:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(三氟甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 286b ) (178 mg，36%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.79 (s, 1H), 8.50 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.81 (s, 2H), 7.69 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.01 (s, 2H), 5.01 - 4.72 (m, 1H), 4.34 - 4.02 (m, 2H), 3.93 - 3.47 (m, 11H), 2.28 - 1.80 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -62.07; MS (ES+): 545.3 (M+1); MS (ES-): 543.4 (M-1), 579.4 (M+Cl)。HPLC純度：88.78%。 流程287
製備(R)-1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(287a )
化合物287a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-(三氟甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(284b ) (100 mg，0.208 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(95 mg，0.83 mmol)、DIPEA (0.22 mL，1.25 mmol)在NMP (4 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(287a ) (46 mg，40%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.88 (s, 1H), 8.99 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.20 - 4.09 (m, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.83 - 3.73 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.39 - 1.95 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -62.17; MS (ES+): 558.3 (M+1); MS (ES-): 556.4 (M-1), 592.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.63%。 流程288
製備(R)-1-(7-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(288a )
化合物288a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(266b ) (1500 mg，3.49 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(1593 mg，13.96 mmol)在NMP (10 mL)中使用DIPEA (3.66 mL，20.94 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(R)-1-(7-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(288a ) (192 mg，11%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 13.05 (s, 1H), 8.87 (dd, J = 9.3, 5.7 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.19 (dt, J = 10.1, 2.4 Hz, 1H), 7.98 - 7.87 (m, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.37 (td, J = 8.7, 2.6 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.15 (t, J = 1.4 Hz, 2H), 4.75 - 4.70 (m, 1H), 4.21 - 4.06 (m, 1H), 3.93 (d, J = 1.4 Hz, 6H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.69 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 2.42 - 1.80 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -101.18; MS (ES+): 508.3 (M+1); MS (ES-): 506.3 (M-1), 542.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.90%。 流程289
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(289b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-胺(289a )
化合物289a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶(271a ) (1.7 g，8.99 mmol)在2-丙醇(50 mL)中使用DIPEA (4.71 mL，27.0 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (2.35 g，9.44 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-胺(289a ) (1 g，28%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.87 (s, 1H, D2 O可交換), 8.16 - 8.09 (m, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 1H), 6.90 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.85 - 2.72 (m, 4H), 2.10 - 1.93 (m, 2H); MS (ES+): 402.1 (M+1), 424.1 (M+Na); (ES-): 400.2 (M-1), 436.1 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(289b )
化合物289b 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-胺(289a ) (200 mg，0.5 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(151 mg，1.49 mmol)、DIPEA (0.26 mL，1.49 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(289b ) (122 mg，53%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.78 (s, 1H, D2 O可交換), 10.83 (s, 1H, D2 O可交換), 8.47 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 6.97 (s, 2H), 4.51 - 4.34 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.73 - 3.59 (m, 5H), 3.54 - 3.41 (m, 2H), 2.96 (t,J = 7.8 Hz, 2H), 2.86 - 2.75 (m, 2H), 2.15 - 1.94 (m, 6H); MS (ES+): 467.3 (M+1); (ES-): 501.2 (M+Cl); HPLC純度，98.77% 流程290
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(290a )
化合物290a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-胺(289a ) (200 mg，0.5 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(151 mg，1.49 mmol)、DIPEA (0.26 mL，1.49 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d] 嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(290a ) (103 mg，44%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.11 (s, 1H, D2 O可交換), 10.99 (s, 1H, D2 O可交換), 8.79 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.32 - 6.50 (m, 2H, D2 O可交換, 1H), 4.41 (s, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.82 - 3.71 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.53 - 3.36 (m, 2H), 3.09 - 2.89 (m, 2H), 2.85 - 2.63 (m, 2H), 2.22 - 1.84 (m, 6H); MS (ES+): 467.3 (M+1); (ES-): 501.2 (M+Cl); HPLC純度，98.47%。 流程291
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(291a )
化合物291a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-胺(289a ) (200 mg，0.5 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(227 mg，1.99 mmol)、DIPEA (0.26 mL，1.49 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(291a ) (130 mg，55%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.30 (s, 1H, D2 O可交換), 10.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.77 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H, D2 O可交換), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H, D2 O可交換), 7.22 - 7.11 (m, 3H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.00 -3.85 (m, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.53 (m, 1H), 3.06 - 2.96 (m, 2H), 2.87 - 2.76 (m, 2H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 2.17 - 1.91 (m, 5H); MS (ES+): 480.3 (M+1); (ES-): 514.2 (M+Cl); HPLC純度，94.64%流程292
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(292a )
化合物292a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-胺(289a ) (200 mg，0.5 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(227 mg，1.99 mmol)、DIPEA (0.26 mL，1.49 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(292a ) (157 mg，66%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.35 (s, 1H, D2 O可交換), 11.01 (s, 1H, D2 O可交換), 8.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.22 - 8.04 (m, 1H, D2 O可交換), 7.90 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H, D2 O可交換), 7.18 (s, 3H), 4.60 - 4.52 (m, 1H), 4.02 - 3.95 (m, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.54 (m, 1H), 3.08 - 2.96 (m, 2H), 2.88 - 2.75 (m, 2H), 2.32 - 2.20 (m, 1H), 2.17 - 1.89 (m, 5H); MS (ES+): 480.2 (M+1); (ES-): 514.2 (M+Cl); HPLC純度，90.63% 流程293
製備(R)-(1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(293a )
化合物293a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-(三氟甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(284b ) (100 mg，0.21 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.082 mL，0.83 mmol)、DIPEA (0.22 mL，1.25 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色HCl鹽形式之(R)-(1-(7-(三氟甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(293a ) (0.021 g，19%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) (兩種旋轉異構體之混合物) δ 12.69 (s, 1H), 12.06及11.92 (2s, 1H), 9.03 - 8.89 (m, 1H), 8.63及8.55 (2d,J = 4.7 Hz, 1H), 8.48 - 8.39 (m, 1H), 8.10及8.09 (2s, 1H), 7.84 - 7.74 (m, 1H), 7.01及6.97 (2d,J = 4.5 Hz, 2H), 4.83 - 4.53 (m, 1H), 4.16 - 3.44 (m, 13H), 2.24 - 1.79 (m, 4H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -62.16; MS (ES+): 545.3 (M+1); MS (ES-): 543.8 (M-1)。HPLC純度：98.81%。 流程294
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(294a )
化合物294a 係根據流程2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (500 mg，1.24 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(315 mg，3.11 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18管柱，100 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(294a ) (358 mg，62 %) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.18 - 12.46 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 12.08 - 11.66 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.36 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.99 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.97 (s, 2H), 4.56 - 4.41 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.60 - 3.40 (m, 4H), 2.17 - 1.87 (m, 4H); MS (ES+): 467.3 (M+1), (ES-): 501.2 (M+Cl); HPLC純度：95.46 %。 流程295
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(295b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-胺(295a )
化合物295a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-5,6,7,8-四氫喹唑啉(226a ) (2 g，9.85 mmol，CAS # 1127-85-1)在2-丙醇(50 mL)中使用DIPEA (5.16 mL，29.5 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (2.58 g，10.34 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-胺(295a ) (1.64 g，40%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.33 (s, 1H), 8.16 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.90 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.67 - 2.53 (m, 4H), 1.84 - 1.66 (m, 4H)。
步驟2：製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(295b )
化合物295b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-胺(295a ) (300 mg，0.721 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(182 mg，1.8 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(295b ) (250 mg，72%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.88 - 11.24 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.34 - 9.99 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.35 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.52 - 4.39 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.67 (s, 3H), 3.69 - 3.38 (m, 4H), 2.78 - 2.64 (m, 2H), 2.59 - 2.37 (m, 2H), 2.07 - 1.91 (m, 4H), 1.81 - 1.67 (m, 4H); MS (ES+): 481.3 (M+1), (ES-): 515.3 (M+Cl); HPLC純度：95.66 %。 流程296
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(296a )
化合物296a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-胺(295a ) (300 mg，0.72 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(182 mg，1.8 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(296a ) (245 mg，71%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.82 - 11.49 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.31 - 10.01 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.39 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.49 - 4.41 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.65 - 3.34 (m, 4H), 2.78 - 2.65 (m, 2H), 2.58 - 2.35 (m, 2H), 2.06 - 1.90 (m, 4H), 1.81 - 1.63 (m, 4H); MS (ES+) 481.3 (M+1), (ES-) 515.3 (M+Cl); HPLC純度：98.7 %。 流程297
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(297a )
化合物297a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (500 mg，1.2 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.47 mL，4.79 mmol)、DIPEA (1.25 mL，7.18 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(297a ) (295 mg，51%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.57 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.98 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.65 - 4.28 (m, 1H), 4.14 - 3.26 (m, 13H), 2.30 - 1.70 (m, 4H); MS (ES+): 483.2 (M+1); MS (ES-): 481.2 (M-1), 517.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.27%。 流程298
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(298a )
化合物298a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (500 mg，1.2 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(546 mg，4.79 mmol)、DIPEA (1.25 mL，7.18 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(298a ) (330 mg，56%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.42 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.00 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.81 - 4.48 (m, 1H), 4.13 - 3.78 (m, 7H), 3.79 - 3.43 (m, 4H), 2.39 - 1.80 (m, 4H)。MS (ES+): 496.2 (M+1); MS (ES-): 494.3 (M-1), 530.3 (M+Cl)。HPLC純度：97.58%。 流程299
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(299a )
化合物299a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75a ) (500 mg，1.2 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(546 mg，4.79 mmol)、DIPEA (1.25 mL，7.18 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈桃色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(299a ) (535 mg，90%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 13.75 (s, 1H), 12.04 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.34 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.71 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 4.79 - 4.51 (m, 1H), 4.11 - 3.83 (m, 7H), 3.74 - 3.56 (m, 4H), 2.42 - 1.82 (m, 4H)。MS (ES+): 496.2 (M+1); MS (ES-): 530.3 (M+Cl)。HPLC純度：95.76%。 流程300
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(300a )
化合物300a 係根據流程2中所報道之程序，由(2-氯-呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)-[1-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-胺(103a ) (500 mg，1.24 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(355 mg，3.11 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(300a ) (165 mg，28%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.68 - 12.81 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 11.88 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.40 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.62 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.25 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.13 (s, 2H), 7.09 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 4.62 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.65 - 3.50 (m, 2H), 2.37 - 2.22 (m, 1H), 2.17 - 1.95 (m, 3H); MS (ES+): 480.3 (M+1), 502.3 (M+Na), (ES-): 514.3 (M+Cl); HPLC純度：94.9 %。 流程301
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(301b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(301a)
化合物301a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (500 mg，2.65 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-基甲醇(281 mg，2.78 mmol)、DIPEA (1.39 mL，7.94 mmol)來製備。由此得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 301a ) (360 mg，54%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.29 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 6.95 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 5.05 - 4.78 (m, 1H), 4.60 - 4.20 (m, 1H), 4.05 - 3.75 (m, 1H), 3.72 - 3.39 (m, 3H), 2.16 - 1.82 (m, 4H)。
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(301b)
化合物301b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 301a ) (0.35 g，1.38 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (395 mg，1.59 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，296 mg，0.62 mmol)、Pd2 (dba)3 (190 mg，0.21 mmol)及碳酸銫(1349 mg，4.14 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 301b ) (125 mg，19%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.92 - 10.79 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.82 - 10.67 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.49 (s, 1H), 8.43 - 8.30 (m, 1H), 7.79 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.07 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.99 (d,J = 3.5 Hz, 2H), 4.62 (s, 1H), 4.15 - 3.88 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.65 - 3.46 (m, 2H), 2.22 - 1.89 (m, 4H); MS (ES+): 467.3 (M+1), 489.3 (M+Na), (ES-): 501.3 (M+Cl); HPLC純度：97.5 %。 流程302
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(302a )
化合物302a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-胺(295a ) (300 mg，0.72 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(206 mg，1.8 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(302a ) (152 mg，43%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.95 - 11.68 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 10.22 - 9.90 (m, 1H,D2 O 可交換 ), 8.54 - 8.15 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.53 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.24 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.12 (s, 2H), 4.68 - 4.55 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.65 - 3.47 (m, 2H), 2.86 - 2.66 (m, 2H), 2.60 - 2.41 (m, 2H), 2.36 - 2.17 (m, 1H), 2.14 - 1.89 (m, 3H), 1.86 - 1.62 (m, 4H); MS (ES+): 494.3 (M+1), 516.3 (M+Na), (ES-): 528.4 (M+Cl); HPLC純度：99.22 %。 流程303
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(303a )
化合物303a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75a ) (500 mg，1.2 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.47 mL，4.79 mmol)、DIPEA (1.25 mL，7.18 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(303a ) (0.335 g，58.0%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 13.60 (s, 1H), 12.07 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.29 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.65 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.14 - 6.94 (m, 2H), 4.65 - 4.32 (m, 1H), 4.12 - 3.33 (m, 13H), 2.25 - 1.69 (m, 4H)。MS (ES+): 483.3 (M+1); MS (ES-): 517.3 (M+Cl)。HPLC純度：97.38%。 流程304
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(304a )
化合物304a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(86a ) (370 mg，0.9 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.36 mL，3.59 mmol)、DIPEA (0.94 mL，5.39 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟層析[(矽膠C18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈棕色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(304a ) (195 mg，46%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.59 (s, 1H), 11.92 (s, 1H), 9.00 - 8.58 (m, 1H), 8.37 - 7.98 (m, 2H), 7.83 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.58 - 7.29 (m, 1H), 7.06 (s, 2H), 7.00 (s, 1H), 4.81 - 4.41 (m, 1H), 4.12 - 3.35 (m, 13H), 2.30 - 1.65 (m, 4H); MS (ES+): 477.4 (M+1); MS (ES-): 511.4 (M+Cl)。HPLC純度：92.69%。 流程305
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(305a )
化合物305a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(86a ) (370 mg，0.9 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(410 mg，3.59 mmol)、DIPEA (0.94 mL，5.39 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C18管柱，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(305a ) (255 mg，58.0%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.69 (s, 1H), 11.78 (s, 1H), 8.78 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.22 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.87 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.48 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.16 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 4.73 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.18 - 4.03 (m, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.82 - 3.72 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.40 - 1.72 (m, 4H)。MS (ES+): 490.4 (M+1); MS (ES-): 524.4 (M+Cl)。HPLC純度：93.74%。 流程306
製備((2R,2'R)-1,1'-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2,7-二基)雙(吡咯啶-2,1-二基))二甲醇(306a )
化合物306a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(266b ) (300 mg，0.47 mmol)及(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.18 mL，1.86 mmol)在NMP (4 mL)中使用DIPEA (0.49 mL，2.79 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((2R,2'R)-1,1'-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2,7-二基)雙(吡咯啶-2,1-二基))二甲醇(306a ) (62 mg，23%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.85 (2s, 1H), 11.42 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.48 (m, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.27 - 6.95 (m, 3H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.65 - 4.32 (m, 1H), 4.09 - 2.95 (m, 18H), 2.27 - 1.57 (m, 8H)。MS (ES+): 576.5 (M+1)。HPLC純度：93.12%。 流程307
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(307c)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(307a)
化合物307a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(141a ) (1 g，2.92 mmol)之2-丙醇(10 mL)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.3 gm，2.92 mmol)、DIPEA (0.77 mL，4.38 mmol)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 307a ) (562 mg，47%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , 旋轉異構體之混合物) δ 8.06 - 7.89 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.62 (2s, 1H), 7.46 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 6.90 (2s, 1H), 4.94 (2s, 1H), 4.27 (m, 1H), 3.91 - 3.58 (m, 2H), 3.59 - 3.38 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.20 - 1.77 (m, 4H)。
步驟2：製備(R)-(1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(307b)
化合物307b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 307a ) (562 mg，1.38 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (396 mg，1.59 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，296 mg，0.62 mmol)、碳酸銫(1349 mg，4.14 mmol)、Pd2 (dba)3 (190 mg，0.21 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用0-60% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 307b ) (215 mg，25%產率)；MS (ES+): 642.3 (M+Na), (ES-): 618.4 (M-1), 655.3 (M+Cl)。
步驟3：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(307c)
化合物307c 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(7-甲苯磺醯基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 307b ) (200 mg，0.32\ mmol)及Cs2 CO3 (315 mg，0.97 mmol)在MeOH/THF (10 mL，3:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]，隨後逆相製備型HPLC [(矽膠C-18，100 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 307c ) (45 mg，30%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.12 (s, 1H, D2 O可交換), 10.73 - 10.32 (2s, 1H, D2 O可交換), 8.43 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.21 - 7.06 (m, 1H), 6.99 (s, 2H), 6.69 (s, 1H), 4.68 - 4.38 (m, 1H), 4.08 - 3.92 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.89 - 3.75 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.67 - 3.38 (m, 2H), 2.23 - 1.89 (m, 4H); MS (ES+): 466.4 (M+1), 488.3 (M+Na), (ES-): 500.3 (M+Cl); HPLC純度：98.79 %。 流程308
製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(308b )
步驟1：製備(R)-(1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(308a )
化合物308a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(141b ) (500 mg，0.9 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(273 mg，2.7 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈棕色固體狀之(R)-(1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(308a ) (460 mg，82%產率)MS (ES+): 620.2 (M+1), (ES-): 654.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(308b )
化合物308b 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(308a )(450 mg，0.73 mmol)及Cs2 CO3 (710 mg，2.18 mmol)在MeOH/THF (20 mL，3:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]，隨後逆相製備型HPLC [(矽膠C-18，100 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(308b ) (149 mg，44%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.69 - 11.08 (bs, 2H, D2 O可交換), 8.40 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 - 6.92 (m, 2H), 4.55 - 4.28 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.84 - 3.46 (m, 4H), 2.07 - 1.99 (m, 4H); (ES+): 466.3 (M+1), (ES-): 500.3 (M+Cl); HPLC純度：96.37 %。 流程309
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(309b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(309a)
化合物309a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (1 g，4.88 mmol)之2-丙醇(10 mL)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.48 mL，4.88 mmol)、DIPEA (2.56 mL，14.63 mmol)製備。由此得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 309a ) (0.22 g，17%產率)；MS (ES-): 304.1 (M+Cl)。
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(309b)
化合物309b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 309a ) (0.2 g，0.74 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (185 mg，0.741 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，212 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(725 mg，2.22 mmol)、Pd2 (dba)3 (204 mg，0.22 mmol)在甲苯/正丁醇(30 mL，比率：2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 309b ) (52 mg，15%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.37 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.58 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 2H), 4.71 - 4.43 (m, 1H), 4.10 - 3.31 (m, 13H), 2.24 - 1.71 (m, 4H)。MS (ES+): 483.3 (M+1); MS (ES-): 517.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.16%。 流程310
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(310b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(310a)
化合物310a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由含2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(12a ) (1 g，4.88 mmol)之2-丙醇(10 mL)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.48 mL，4.88 mmol)、DIPEA (2.56 mL，14.63 mmol)製備。由此得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 310a ) (780 mg，59%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.26 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.33 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.50 - 4.30 (m, 1H), 4.09 - 3.73 (m, 2H), 3.61 (ddd,J = 10.7, 5.7, 3.5 Hz, 1H), 3.49 (dt,J = 11.2, 6.5 Hz, 1H), 2.16 - 2.03 (m, 2H), 1.97 (s, 2H); MS (ES-): 268 (M-1), 304.1 (M+Cl)。
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(310b)
化合物310b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 310a ) (300 mg，1.11 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (277 mg，1.11 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，318 mg，0.67 mmol)、碳酸銫(1087 mg，3.34 mmol)、Pd2 (dba)3 (306 mg，0.33 mmol)在甲苯/第三丁醇(40 mL，比率：3:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 310b ) (108 mg，20%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.71 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.43 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.43 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.02 (s, 2H), 4.79 - 4.48 (m, 1H), 4.15 - 3.92 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.55 (m, 1H), 2.36 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 483.3 (M+1); MS (ES-): 517.3 (M+Cl)。HPLC純度：97.03%。 流程311
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(311a )
化合物311a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-胺(281a ) (400 mg，0.99 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(339 mg，2.97 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(311a ) (315 mg，66%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.29 (s, 1H, D2 O可交換), 8.47 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.83 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H, D2 O可交換), 7.24 (s, 1H, D2 O可交換), 7.13 (s, 2H), 5.07 - 4.91 (m, 4H), 4.57 (dd,J = 9.0, 2.2 Hz, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.93 - 3.82 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.63 - 3.49 (m, 1H), 2.39 - 2.16 (m, 1H), 2.14 - 1.88 (m, 3H); (ES+): 482.3 (M+1), (ES-): 516.3 (M+Cl), 997.5 (2M+Cl); HPLC純度：98.35 %。 流程312
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(312a )
化合物312a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-4-胺(281a ) (400 mg，0.99 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(339 mg，2.97 mmol)在2-丙醇(3.5 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,7-二氫呋喃并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(312a ) (106 mg，22%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.23 (s, 1H, D2 O可交換), 8.38 (s, 1H), 7.82 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H, D2O可交換), 7.24 (s, 1H, D2O可交換), 7.11 (s, 2H), 5.07 - 4.91 (m, 4H), 4.67 - 4.46 (m, 1H), 3.92 (s, 6H), 3.90 - 3.83 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.63 - 3.50 (m, 1H), 2.37 - 2.18 (m, 1H), 2.11 - 1.94 (m, 3H); (ES+): 482.3 (M+1), (ES-): 516.3 (M+Cl), 997.5 (2M+Cl); HPLC純度：93.15 %。 流程313
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(313a )
化合物313a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-胺(295a ) (400 mg，0.96 mmol)及(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(329 mg，2.89 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18 (100 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(313a ) (286 mg，60%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.99 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 10.12 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.48 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.54 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.22 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.13 (s, 2H), 4.64 - 4.50 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.50 (m, 2H), 2.90 - 2.63 (m, 2H), 2.62 - 2.39 (m, 2H), 2.36 - 2.16 (m, 1H), 2.13 - 1.86 (m, 3H), 1.86 - 1.62 (m, 4H); MS (ES+): 494.3 (M+1), 516.3 (M+Na), (ES-): 528.3 (M+Cl); HPLC純度：99.397 %。 流程314
製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(314b )
步驟1：製備(R)-1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(314a )
化合物314a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲苯磺醯基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(141b ) (500 mg，0.9 mmol)、(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(308 mg，2.7 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用DMA-80/二氯甲烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(314a ) (430 mg，75%產率)；MS (ES+): 633.4 (M+1); (ES-): 631.4 (M-1)
步驟2：製備(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(314b )
化合物314b 係根據流程141之步驟3中所報道之程序，由(R)-1-(7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(314a ) (421 mg，0.67 mmol)及Cs2 CO3 (650 mg，2.0 mmol)在MeOH/THF (14 mL，3:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]，隨後逆相製備型HPLC [(矽膠C-18，100 g)，用0-100% CH3 CN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(314b ) (88 mg，28%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.33 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 11.17 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.34 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.54 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.23 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.12 (s, 2H), 7.00 (d,J = 12.3 Hz, 2H), 4.66 - 4.56 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.69 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 3.66 - 3.48 (m, 2H), 2.37 - 2.23 (m, 1H), 2.16 - 1.92 (m, 3H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 /D2 O) δ 11.39 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.83 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.11 (s, 2H), 7.01 (s, 2H), 4.61 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.69 (d,J = 1.8 Hz, 3H), 3.62 - 3.37 (m, 2H), 2.31 (d,J = 12.1 Hz, 1H), 2.05 (s, 3H); MS (ES+): 479.2(M+1), (ES-): 513.3 (M+Cl), 991.5 (2M+Cl); HPLC純度：98.43 %。 流程315
製備(S)-1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(315f )
步驟1：製備2-氯-4-(甲硫基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315a )
化合物315a 係根據流程70之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (1 g，5.29 mmol)及硫代甲醇鈉(385 mg，5.29 mmol)在THF (20 mL)及DMF (2 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用乙酸乙酯/己烷(0至20)溶離]純化後得到2-氯-4-(甲硫基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315a ) (0.6 g，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.54 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.22 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 2.69 (s, 3H)。
步驟2：製備2-氯-4-(甲硫基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(315b )
化合物315b 係根據流程70之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-(甲硫基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315a ) (583 mg，2.91)製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，40 g)，用乙酸乙酯及己烷溶離]純化後得到呈淺紅色固體狀之2-氯-4-(甲硫基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(315b ) (403 mg，61%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.98 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 2.73 (s, 3H)。
步驟3：製備2-氯-4-(甲硫基)-6-(哌啶-1-基甲基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315c )
化合物315c 係根據流程105之步驟1中針對還原胺化所報道之程序，由2-氯-4-(甲硫基) 呋喃并[3, 2-d] 嘧啶-6-甲醛(315b ) (400 mg，1.75 mmol)在二氯甲烷(10 mL)中使用哌啶(0.2 mL，2.0 mmol)及NaBH(OAc)3 (556 mg，2.62 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，40 g)，用甲醇/乙酸乙酯於己烷中之(9:1)混合物溶離)純化後得到呈紅色黏性物質狀之2-氯-4-(甲硫基)-6-(哌啶-1-基甲基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315c ) (400 mg，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.01 (s, 1H), 3.72 (s, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.44 - 2.40 (m, 4H), 1.56 - 1.43 (m, 4H), 1.43 - 1.28 (m, 2H)。
步驟4：製備2,4-二氯-6-(哌啶-1-基甲基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315d )
化合物315d 係根據流程70之步驟3中所報道之程序，由2-氯-4-(甲硫基)-6-(哌啶-1-基甲基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315c ) (390 mg，1.31 mmol)製備。由此在處理後得到2,4-二氯-6-(哌啶-1-基甲基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315d ) (0.32 g，85%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.17 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 2.45 (t,J = 5.1 Hz, 4H), 1.59 - 1.44 (m, 4H), 1.43 - 1.30 (m, 2H)。
步驟5：製備2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(315e )
化合物315e 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯-6-(哌啶-1-基甲基)呋喃并[3,2-d]嘧啶(315d ) (320 mg，1.12 mmol)在2-丙醇(7 mL)中使用DIPEA (0.59 mL，3.35 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (279 mg，1.12 mmol)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(315e ) (132 mg，24%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.80 (s, 1H), 8.16 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.83 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.83 (s, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.66 (s, 2H), 2.47 - 2.36 (m, 4H), 1.54 - 1.42 (m, 4H), 1.42 - 1.29 (m, 2H)。
步驟6：製備(S)-1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(315f )
化合物315f 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(315e ) (120 mg，0.24 mmol)及(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(82 mg，0.72 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(315f ) (50 mg，36%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.40 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 11.97 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 11.57 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.35 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.63 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.40 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 7.28 (s, 1H), 7.13 (s, 2H), 4.62 (m, 1H), 4.57 (m, 2H), 3.94 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.45 (m, 4H), 3.20 - 2.92 (m, 2H), 2.40 - 2.19 (m, 1H), 2.19 - 1.98 (m, 3H), 1.84 (m, 4H), 1.77 - 1.63 (m, 1H), 1.48 - 1.27 (m, 1H); MS (ES+): 577.4 (M+1), (ES-): 611.3 (M+Cl); HPLC純度：95.99 %。 流程316
製備(S)-(1-(1-甲基-7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-基)甲醇(316a )
化合物316a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(253b ) (200 mg，0.48 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.19 mL，1.92 mmol)在NMP (3 mL)中使用DIPEA (0.5 mL，2.89 mmol)作為鹼來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(1-甲基-7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-基)甲醇(316a ) (92 mg，40%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.79 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.06 (s, 2H), 4.56 - 4.39 (m, 1H), 4.37 (s, 3H), 4.05 - 3.90 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.89 - 3.69 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.41 (m, 2H), 2.23 - 1.72 (m, 4H); MS (ES+): 481.4 (M+1); MS (ES-): 479.4 (M-1), 515.3 (M+Cl)。HPLC純度：97.07%。 流程317
製備(R)-(1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-基)甲醇(317a )
化合物317a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(158a ) (400 mg，0.96 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.38 mL，3.82 mmol)、DIPEA (1.0 mL，5.73 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈棕色固體狀之(R)-(1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-基)甲醇(317a ) (0.065 g，14%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 9.22 - 9.08 (m, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.21 - 8.07 (m, 1H), 7.11 (s, 2H), 4.50 - 4.12 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.84 - 3.71 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.68 - 3.47 (m, 3H), 3.42 (dd,J = 10.5, 7.7 Hz, 1H), 2.22 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+): 484.3 (M+1), 506.3 (M+Na); MS (ES-): 518.3 (M+Cl)。HPLC純度：91.19 %。 流程318
製備(R)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(318a )
化合物318a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-胺(158a ) (400 mg，0.96 mmol)、(R)-吡咯啶-2-甲醯胺(436 mg，3.82 mmol)、DIPEA (1.0 mL，5.73 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-5-基)吡咯啶-2-甲醯胺(318a ) (58 mg，12%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (兩種旋轉異構體之混合物)10.90 (2s, 1H), 9.31 (2s, 1H), 8.99 (2s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.26 (s, 2H), 7.12 (m, 1H), 4.50 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.90 - 3.82 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.67 - 3.49 (m, 1H), 2.38 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 497.3 (M+1); MS (ES-): 495.3 (M-1), 531.3 (M+Cl)。HPLC純度：93.36%。 流程319
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(319b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(319a )
化合物319a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (350 mg，1.86 mmol)在2-丙醇(7 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.58 mmol)及1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(256c ) (460 mg，1.86 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(319a ) (320 mg，43%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.32 (s, 1H), 8.15 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.83 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.35 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.09 (d,J = 1.7 Hz, 2H), 6.72 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.15 (t,J = 7.0 Hz, 2H), 4.07 (q,J = 6.6 Hz, 2H), 1.41 - 1.36 (m, 3H), 1.36 - 1.30 (m, 3H)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(319b )
化合物319b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(319a ) (250 mg，0.63 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.19 mL，1.88 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，25 g)，用DMA-80/氯仿溶離]純化後得到呈游離鹼形式之化合物319b 。將游離鹼再溶解於乙腈(5 mL)、HCl (1 N，5 mL)中且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(319b ) (131 mg，45%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.65 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.43 (s, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.43 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.29 - 7.19 (m, 2H), 7.11 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 7.05 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 6.42 (dd,J = 4.4, 2.5 Hz, 1H), 4.24 - 4.11 (m, 3H), 4.07 (m, 2H), 3.70 (dd,J = 10.0, 3.6 Hz, 1H), 3.59 - 3.46 (m, 1H), 3.48 - 3.27 (m, 2H), 2.08 - 1.79 (m, 4H), 1.36 (q,J = 6.9 Hz, 6H); MS (ES+): 464.4 (M+1), 486.4 (M+Na); HPLC純度：98.47 %。 流程320
製備(S)-(1-(4-((1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(320b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(320a )
化合物320a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (250 mg，1.33 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (0.7 mL，3.99 mmol)及1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(229c ) (342 mg，1.33 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(320a ) (290 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.23 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.96 - 7.90 (m, 1H), 7.88 (s, 2H), 7.77 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.46 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 4.2 Hz, 1H), 6.72 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(320b )
化合物320b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(320a ) (200 mg，0.49 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.14 mL，1.47 mmol)在2-丙醇(2 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，25 g)，用DMA-80/氯仿溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，100 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(320b ) (70 mg，30%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.66 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.44 (s, 1H), 8.06 - 7.99 (m, 1H), 7.97 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.94 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.45 - 7.36 (m, 2H), 7.13 (dd,J = 4.4, 1.5 Hz, 1H), 6.42 (dd,J = 4.8, 2.2 Hz, 1H), 4.21 - 4.10 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.71 (dd,J = 10.0, 3.5 Hz, 1H), 3.55 - 3.43 (m, 1H), 3.45 - 3.27 (m, 2H), 2.08 - 1.82 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -61.02; MS (ES+ ), 474.3 (M+1), (ES- ), 508.3.3 (M+Cl); HPLC純度：98.68 %。 流程321
製備(S)-(1-(4-((1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(321b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(321a )
化合物321a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (420 mg，2.23 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.17 mL，6.7 mmol)及1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-胺(228c ) (425 mg，2.23 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(321a ) (290 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.37 (s, 1H), 8.53 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.37 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.35 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.79 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.76 (t,J = 2.4 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(321b )
化合物321b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(321a ) (300 mg，0.88 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.35 mL，3.51 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，25 g)，用DMA 80/氯仿溶離]純化後得到呈游離鹼形式之化合物321b 。將游離鹼再溶解於乙腈(5 mL)、HCl (1 N，5 mL)中且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(321b ) (180 mg，51%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.70 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.75 - 8.62 (m, 1H), 8.57 - 8.44 (m, 1H), 8.41 - 8.29 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.95 - 7.78 (m, 1H), 7.49 - 7.37 (m, 1H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.42 (dt,J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 4.27 - 4.12 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.75 (dd,J = 10.1, 3.5 Hz, 1H), 3.57 - 3.44 (m, 1H), 3.41 - 3.25 (m, 2H), 2.08 - 1.81 (m, 4H).; MS (ES+): 407.3 (M+1), 429.3 (M+Na), 441.3 (M+Cl); HPLC純度：98.89 %。 流程322
製備(S)-(1-(4-((1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(322b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(322a )
化合物322a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (350 mg，1.86 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.58 mmol)及1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(249c ) (416 mg，1.86 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(322a )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.34 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.78 (q,J = 1.5, 1.1 Hz, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.23 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.09 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.3, 2.8 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(322b )
化合物322b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(322a ) (250 mg，0.67 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.26 mL，2.67 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，25 g)，用DMA 80/氯仿溶離]純化後得到呈游離鹼形式之化合物322b 。將游離鹼再溶解於乙腈(5 mL)、HCl (1 N，5 mL)中且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(322b ) (96 mg，33%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.72 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.55 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.01 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.52 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.43 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.31 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.14 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 7.05 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 6.43 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.26 - 4.11 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.72 (dd,J = 10.2, 3.6 Hz, 1H), 3.57 - 3.45 (m, 1H), 3.44 - 3.28 (m, 2H), 2.07 - 1.84 (m, 4H); (ES+): 440.3 (M+1), 462.3 (M+Na), 474.3 (M+Cl); HPLC純度：99.39 %。 流程323
製備(R)-(1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(323b)
步驟1：製備(R)-(1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(323a)
化合物323a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由5,7-二氯噻唑并[5,4-d]嘧啶(150a ) (500 mg，15.87 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.24 mL，2.43 mmol)、DIPEA (1.27 mL，7.28 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至30% MeOH/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 323a ) (0.301 g，46%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.18 (s, 1H), 5.16 - 4.96 (m, 1H), 4.94 - 4.63 (m, 1H), 4.52 - 3.87 (m, 2H), 3.79 - 3.20 (m, 2H), 2.53 - 1.69 (m, 6H); MS (ES-): 269.1 (M-1), 305.1 (M+Cl)。
步驟2：製備(R)-(1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(323b)
化合物323b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(5-氯噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 323a ) (0.3 g，1.11 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (276 mg，1.11 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，317 mg，0.67 mmol)、碳酸銫(1083 mg，3.32 mmol)、Pd2 (dba)3 (304 mg，0.33 mmol)在甲苯(20 mL)及第三丁醇(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻唑并[5,4-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 323b ) (128 mg，24%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (bs, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.93 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 5.27 - 4.99 (m, 1H), 4.72 - 4.41 (m, 1H), 4.31 - 4.10 (m, 1H), 4.10 - 3.93 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.69 - 3.55 (m, 1H), 3.54 - 3.36 (m, 1H), 2.32 - 1.82 (m, 4H); MS (ES-): 518.3 (M+Cl)。HPLC純度：97.15%。 流程324
製備((1S,2R,5R)-3-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇(324b)
步驟1：製備((1S,2R,5R)-3-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇(324a)
化合物324a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (113 mg，0.6 mmol)在2-丙醇(4 mL)中使用(1S,2R,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基甲醇鹽酸鹽(105 mg，0.4 mmol)、DIPEA (0.32 mL，1.81 mmol)來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之((1S,2R,5R)-3-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇( 324a ) ( 105 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.72 (dd,J = 2.7, 1.4 Hz, 1H), 6.96 (dd,J = 4.7, 1.5 Hz, 1H), 6.68 (dd,J = 4.6, 2.7 Hz, 1H), 4.99 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.51 - 4.39 (m, 1H), 4.18 - 4.06 (m, 2H), 4.05 - 3.91 (m, 1H), 3.38 - 3.25 (m, 1H), 2.04 - 1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.76 (m, 1H), 0.85 - 0.70 (m, 1H), 0.62 (q,J = 4.5 Hz, 1H); MS (ES-): 263.2 (M-1); 299.2 (M+Cl)。
步驟2：製備((1S,2R,5R)-3-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇(324b)
化合物324b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((1S,2R,5R)-3-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇( 324a ) (0.1 g，0.38 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (94 mg，0.38 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，108 mg，0.23 mmol)、碳酸銫(369 mg，1.13 mmol)、Pd2 (dba)3 (104 mg，0.11 mmol)在甲苯(10 mL)及第三丁醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之((1S,2R,5R)-3-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇( 324b ) (55 mg，31%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.65 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.04 - 7.88 (m, 1H), 7.64 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.18 (s, 2H), 6.93 - 6.78 (m, 1H), 6.54 (dd,J = 4.6, 2.5 Hz, 1H), 4.67 - 4.42 (m, 1H), 4.23 - 3.94 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.53 (m, 1H), 3.30 (t,J = 9.1 Hz, 1H), 2.07 - 1.73 (m, 2H), 0.90 - 0.47 (m, 2H); MS (ES+): 478.4 (M+1), 500.3 (M+Na); MS (ES-): 512.4 (M+Cl)。HPLC純度：98.28%。流程325
製備((1R,3S,5R)-2-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(325e)
步驟1：製備(1R,3S,5R)-3-(羥甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(325b)
在−5℃下，向(1R,3S,5R)-2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(325a ) (100 mg，0.44 mmol；CAS # 197142-34-0)及N-甲基嗎啉(0.05 mL，0.44 mmol)於THF (5 mL)中之攪拌溶液中添加氯甲酸異丁酯(0.06 mL，0.44 mmol)。在10分鐘後，混合物經矽藻土過濾且用THF (3 × 20 mL)洗滌沈澱物。將濾液冷卻至0℃且小心地添加NaBH4 (25 mg，0.66 mmol)於水(0.8 mL)中之溶液(快速釋放氣體)。在用水(10 mL)稀釋後，用EtOAc (3 ×)洗滌溶液。收集有機層，乾燥，過濾，減壓蒸發，得到呈透明油狀之(1R,3S,5R)-3-(羥甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(325b ) (100 mg)；MS (ES+): 236.2 (M+Na)。
步驟2：製備(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基甲醇(325c )
向(1R,3S,5R)-3-(羥甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(325b ) (100 mg，0.47 mmol)於DCM (6 mL)中之溶液中添加TFA (0.17 mL，2.2 mmol)且在室溫下攪拌2小時。隨後真空移除溶劑，得到呈透明油狀之(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基甲醇(325c ) (100 mg，100%產率) TFA鹽，其未經進一步純化即用於下一步驟中。
步驟3：製備((1R,3S,5R)-2-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(325d )
向2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (83 mg，0.44 mmol)於IPA (5 mL)中之溶液中添加(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基甲醇TFA鹽(325c ) (100 mg，0.44 mmol)及DIPEA (0.23 mL，1.32 mmol)。所得混合物在60℃下攪拌3小時，冷卻至室溫且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100%含0-60% EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化，得到呈半固體狀之((1R,3S,5R)-2-(2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(325d ) (75 mg，64%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.73 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.24 - 7.16 (m, 1H), 6.72 - 6.64 (m, 1H), 4.96 (t,J = 5.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.55 - 4.44 (m, 1H), 3.77 - 3.68 (m, 1H), 3.66 - 3.50 (m, 2H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 1.98 - 1.80 (m, 2H), 1.28 - 1.16 (m, 1H), 0.68 - 0.57 (m, 1H); MS (ES+): 265.2 (M+1); (ES-): 299.2, 301.2 (M+Cl)。
步驟4：製備((1R,3S,5R)-2-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(325e)
化合物325e 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((1R,3S,5R)-2-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(325d ) (75 mg，0.28 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (78 mg，0.31 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，54 mg，0.11 mmol)、碳酸銫(185 mg，0.57 mmol)、Pd2 (dba)3 (52 mg，0.06 mmol)在t-BuOH/甲苯(10 mL，3:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至100% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之((1R,3S,5R)-2-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇( 325e ) (15 mg，11%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.63 (s, 1H, D2 O可交換), 9.37 (s, 1H), 7.91 (d,J = 1.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.69 - 7.62 (m, 1H), 7.18 - 7.06 (m, 3H), 6.60 - 6.51 (m, 1H), 4.65 - 4.60 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 3.67 - 3.56 (m, 3H), 2.31 - 2.18 (m, 1H), 1.96 - 1.78 (m, 2H), 1.27 - 1.13 (m, 1H), 0.58 (s, 1H); MS (ES+): 478.3 (M+1); (ES-): 512.4 (M+Cl); HPLC純度，96.96%。 流程326
製備((2S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(326c )
步驟1：製備6-氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(326b )
化合物326b 係根據流程1中所報道之程序，由4,6-二氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(326a ) (500 mg，1.83 mmol；根據由Su, Qibin等人在《醫藥化學雜誌》, 57(1), 144-158; 2014中所報道之程序製備)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (0.96 mL，5.49 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (479 mg，1.92 mmol，游離鹼)來製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之6-氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(326b ) (660 mg，74%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.46 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.93 (s, 2H), 5.79 (d,J = 10.0 Hz, 1H), 4.03 - 3.92 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 2.47 - 2.23 (m, 1H), 1.86 (m, 3H), 1.65 - 1.38 (m, 2H); MS (ES+): 486.3 (M+1), (ES-): 484.3 (M-1)。
步驟2：製備((2S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(326c )
化合物326c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由6-氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(326b ) (200 mg，0.41 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.16 mL，1.65 mmol)及DIPEA (0.43 mL，2.47 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/氯仿溶離]純化後得到呈白色固體狀之((2S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(326c ) (128 mg，57%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , 旋轉異構體之混合物) δ 10.57 (2s, 1H), 8.22 (s, 2H), 8.13 - 7.81 (2s, 1H), 6.95 (s, 2H), 5.84 - 5.52 (m, 1H), 4.98 (2s, 1H), 4.52 - 4.07 (2s, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.85 - 3.71 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.38 (m, 4H), 2.46 - 2.32 (m, 1H), 1.88 (m, 6H), 1.54 (m, 2H); MS (ES+): 551.4 (M+1), 573.3 (M+Na); MS (ES-): 549.4 (M-1)。HPLC純度：96.22%。 流程327
製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(327b)
步驟1：製備(R)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(327a)
化合物327a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯喹唑啉(21a ) (1 g，5.02 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.5 mL，5.02 mmol)、DIPEA (2.63 mL，15.07 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(327a ) (230 mg，17%產率)；MS (ES+): 264.3 (M+1); (ES-) 298.2 (M+Cl)
步驟2：製備(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(327b)
化合物327b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 327a ) (140 mg，0.53 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (132 mg，0.53 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，152 mg，0.32 mmol)、碳酸銫(519 mg，1.59 mmol)、Pd2 (dba)3 (146 mg，0.16 mmol)在甲苯(15 mL)及第三丁醇(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至100% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 327b ) (35 mg，14%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.40 (s, 1H), 10.61 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.30 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.86 (d,J = 7.4 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.67 - 7.50 (m, 1H), 7.49 - 7.38 (m, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.98 - 4.72 (m, 1H), 4.29 - 4.04 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.81 - 3.72 (m, 3H), 3.68 (s, 3H), 2.22 - 1.88 (m, 4H); MS (ES+): 477.4 (M+1), 499.3 (M+Na); MS (ES-): 511.4 (M+Cl)。HPLC純度：94.57%。 流程328
製備(S)-(1-(1-甲基-5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(328c)
步驟1：製備(S)-(1-(5-氯-1-甲基-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(328b)
化合物328b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由5,7-二氯-1-甲基-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶(328a ) (0.2 g，0.99 mmol；CAS # 939979-32-5)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.1 mL，0.99 mmol)、DIPEA (0.52 mL，2.96 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(5-氯-1-甲基-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 328b ) (252 mg，96%產率)；MS (ES+): 268.2 (M+1); (ES-) 266.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(1-甲基-5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇(328c)
化合物328c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(5-氯-1-甲基-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 328b ) (250 mg，0.934 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (233 mg，0.93 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，267 mg，0.56 mmol)、碳酸銫(913 mg，2.8 mmol)、Pd2 (dba)3 (257 mg，0.28 mmol)在甲苯(20 mL)及第三丁醇(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-甲基-5-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 328c ) (48 mg，11%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.78 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 6.97 (d,J = 2.4 Hz, 2H), 4.90 - 4.60 (m, 1H), 4.21 (s, 3H), 4.12 - 4.00 (m, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 1H), 3.88 (d,J = 2.3 Hz, 6H), 3.85 - 3.69 (m, 1H), 3.68 (d,J = 2.3 Hz, 3H), 3.67 - 3.37 (m, 1H), 2.18 - 1.91 (m, 4H), 1.87 - 1.69 (m, 1H); MS (ES+): 481.3 (M+1), 503.3 (M+Na); MS (ES-): 515.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.00%。 流程329
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(329a )
向((2S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(326c ) (50 mg，0.09 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加鹽酸(3 M於MeOH中) (3.31 mg，0.09 mmol)且在90℃下加熱2小時。真空濃縮反應混合物，藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]及逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(329a ) (34 mg，80%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ; 混合物或旋轉異構體) δ 12.63 (2s, 2H), 12.07 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.98 (2s, 1H), 6.98 (s, 2H), 4.69 - 4.27 (2m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.81 - 3.71 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.62 - 3.40 (m, 2H), 2.23 - 1.76 (m, 4H); MS (ES+): 467.3 (M+1); MS (ES-): 501.3 (M+Cl)。HPLC純度：92.77%。 流程330
製備(S)-(1-(4-((1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(330b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(330a )
化合物330a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (350 mg，1.86 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.58 mmol)及1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(262c ) (453 mg，1.86 mmol)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(330a ) (0.29 g，39%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.37 (s, 1H), 8.37 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.79 (dd,J = 2.7, 1.6 Hz, 2H), 7.77 - 7.66 (m, 2H), 7.42 (dt,J = 6.6, 2.4 Hz, 2H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.76。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(330b )
化合物330b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(330a ) (250 mg，0.63 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.25 mL，2.53 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，25 g)，用DMA-80/氯仿溶離]純化後得到呈游離鹼形式之化合物330b 。將游離鹼再溶解於乙腈(10 mL)、HCl (1 N，10 mL)中且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(330b ) (43 mg，15%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.59 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.38 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.84 (d,J = 6.0 Hz, 2H), 7.63 (t,J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.36 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.15 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.40 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.25 - 4.12 (m, 1H), 3.80 - 3.66 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 1H), 3.36 - 3.21 (m, 2H), 2.12 - 1.77 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.77; MS (ES+): 460.3 (M+1), 482.2 (M+Na), (ES-): 458.4 (M-1); HPLC純度：99.17 %。 流程331
製備(S)-(1-(4-((1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(331b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(331a )
化合物331a 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (285 mg，1.52 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.79 mL，4.55 mmol)及1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(263c ) (0.93 g，1.52 mmol)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(331a ) (312 mg，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.34 (s, 1H), 8.32 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.40 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 7.25 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 6.72 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.65。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(331b )
化合物331b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(331a ) (250 mg，0.61 mmol)及(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.24 mL，2.45 mmol)在2-丙醇(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，25 g)，用DMA 80/氯仿溶離]純化後得到呈游離鹼形式之化合物331b 。將游離鹼再溶解於乙腈(10 mL)、HCl (1 N，10 mL)中且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(331b ) (125 mg, 43%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.64 (s, 1H,D2 O 可交換 ), 8.44 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.01 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.45 - 7.37 (m, 1H), 7.24 - 7.19 (m, 1H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.41 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.26 - 4.12 (m, 1H), 3.76 (dd,J = 10.1, 3.6 Hz, 1H), 3.48 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 3.43 - 3.27 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.13 - 1.80 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.67; MS (ES+): 474.3 (M+1), 496.3 (M+Na), (ES-): 508.3 (M+Cl); HPLC純度：98.18 %。 流程332
製備((1S,2S,5R)-3-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇(332b)
步驟1：製備((1S,2S,5R)-3-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇(332a)
化合物324a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (113 mg，0.6 mmol)在2-丙醇(4 mL)中使用(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基甲醇鹽酸鹽(90 mg，0.6 mmol，CAS# 1818847-65-2)、DIPEA (0.32 mL，1.81 mmol)來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之((1S,2S,5R)-3-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇( 332a ) ( 117 mg，74%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.74 - 7.68 (m, 1H), 6.98 - 6.90 (m, 1H), 6.67 (dd,J = 4.6, 2.6 Hz, 1H), 4.93 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 4.50 (dd,J = 5.6, 3.1 Hz, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 2H), 3.76 - 3.48 (m, 2H), 1.84 - 1.58 (m, 2H), 0.78 - 0.66 (m, 1H), 0.20 - 0.05 (m, 1H)。
步驟2：製備((1S,2S,5R)-3-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇(332b)
化合物332b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((1S,2S,5R)-3-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇( 332a ) (110 mg，0.42 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (129 mg，0.52 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，89 mg，0.19 mmol)、碳酸銫(406 mg，1.25 mmol)、Pd2 (dba)3 (57 mg，0.06 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化，隨後凍乾後得到呈白色固體狀之((1S,2S,5R)-3-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基)甲醇( 332b ) (45 mg，23%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.47 (d,J = 17.2 Hz, 1H,D2 O 可交換 ), 9.14 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.11 (s, 2H), 6.83 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.54 - 4.16 (m, 1H), 4.09 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 3.69 - 3.35 (m, 2H), 1.96 - 1.55 (m, 2H), 0.83 - 0.67 (m, 1H), 0.21 - 0.05 (m, 1H); MS (ES+): 478.3 (M+1), 500.3 (M+Na), (ES-): 512.3 (M+Cl)。HPLC純度：99.35%。 流程333
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇(333b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇(333a)
化合物333a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪(4a ) (500 mg，2.66 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-3-基甲醇(269 mg，2.66 mmol)及DIPEA (1.39 mL，7.98 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，0-50% EtOAc/己烷]純化後得到呈白色半固體狀之(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇( 333a ) (577 mg，86%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.70 (s, 1H), 7.02 - 6.79 (m, 1H), 6.73 - 6.55 (m, 1H), 4.90 - 4.63 (m, 1H, D2 O可交換), 4.15 - 3.86 (m, 2H), 3.81 - 3.58 (m, 2H), 3.50 - 3.40 (m, 2H), 2.44 - 2.24 (m, 1H), 2.21 - 1.59 (m, 2H); MS (ES-): 251.1 (M-1), 287.1 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇(333b)
化合物333b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇( 333a ) (550 mg，2.18 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (651 mg，2.61，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，415 mg，0.87 mmol)、碳酸銫(709 mg，2.18 mmol)及Pd2 (dba)3 (299 mg，0.33 mmol)在甲苯/t-BuOH (40 mL，比率：3:2)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-100% DM80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-3-基)甲醇( 333b ) (325 mg，32%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.65 (s, 1H, D2 O可交換), 9.27 (s, 1H), 7.91 (d,J = 1.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.66 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.89 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 6.56 (d,J = 3.8 Hz, 1H), 4.04 (s, 9H), 3.76 - 3.63 (m, 4H), 3.59 - 3.39 (m, 2H), 2.48 - 2.31 (m, 1H), 2.22 - 1.67 (m, 2H); MS (ES+): 466.3 (M+1), (ES-): 500.3 (M+Cl); HPLC純度：98.71%。 流程334
製備2-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(334a )
化合物334a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(57b ) (200 mg，0.5 mmol)、1-甲基哌嗪(0.22 mL，2.0 mmol)及DIPEA (0.52 mL，2.99 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離)，隨後逆轉管柱層析[(矽膠C18，20 g)，用0-100%乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之2-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(334a ) (152 mg，66%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.35 (s, 1H), 11.13 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.06 (t, J = 1.7 Hz, 1H), 7.55 (dt, J = 2.5, 1.6 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 6.55 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 14.0 Hz, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.38 (m, 4H), 3.19 - 2.97 (m, 2H), 2.75 (d, J = 4.4 Hz, 3H)。MS (ES+): 465.4 (M+1), 487.4 (M+Na); MS (ES-): 463.1 (M-1), 499.4 (M+Cl)。HPLC純度：98.64%。 流程335
製備(S)-(1-(8-(哌啶-1-基甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335d )
步驟1：製備(S)-(1-(8-(溴甲基)-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335b )
化合物335b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由8-(溴甲基)-2,4-二氯喹唑啉(335a ) (3.0 g，10.27 mmol；CAS#: 192218-38-5；根據由Holmes, Jane L.等人在《合成(Synthesis)》, 48(8), 1226-1234; 2016中所報道之程序製備)在DCM (30 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.5 g，4.95 mmol)及DIPEA (3.9 g，30.17 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-100% EtOAc/正己烷溶離)純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(8-(溴甲基)-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335b ) (1.4 g 38%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.22 (d,J = 8.7, 1H), 7.92 (d,J = 7.0, 1H), 7.43-7.41 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.03 (s, 2H), 4.56 (m, 1H), 4.15 - 3.82 (m, 2H), 3.76 - 3.56 (m, 2H), 2.03 (m, 3H), 1.85 (m, 1H)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-氯-8-(哌啶-1-基甲基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335c )
在室溫下，向(S)-(1-(8-(溴甲基)-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335b ) (1.4 g，3.92 mmol)於DMF (30 mL)中之攪拌溶液中添加哌啶(0.4 g，4.69 mmol)及K2 CO3 (1.6 g，11.55 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌1小時，用水(300 mL)淬滅且用EtOAc (3 × 100 mL)萃取。濃縮合併之有機萃取物且經由矽膠管柱用10% MeOH/DCM溶離純化，得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-氯-8-(哌啶-1-基甲基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335c ) (220 mg，16%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.18 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.47 (m, 1H), 4.86 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 4.65 - 4.47 (m, 1H), 3.99 (m, 4H), 3.63 (m, 2H), 2.56 (m, 3H), 2.03 (d, m, 3H), 1.82 (m, 1H), 1.57 (m, 4H), 1.46 - 1.36 (m, 2H), 1.23 (m, 1H); MS (ES+): 361.3 (M+1), MS (ES-): 359.2 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(1-(8-(哌啶-1-基甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335d )
化合物335d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-8-(哌啶-1-基甲基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335c )(150 mg，0.416 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (104 mg，0.42，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，119 mg，0.25 mmol)、碳酸銫(406 mg，1.25 mmol)及Pd2 (dba)3 (114 mg，0.13 mmol)在甲苯/t-BuOH (15 mL，比率：2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(8-(哌啶-1-基甲基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(335d )(12 mg，5%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.94 (s, 1H), 10.72 (s, 1H), 8.44 - 8.31 (m, 2H), 8.22 (d,J = 7.4 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.49 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 6.99 (s, 2H), 5.09 - 4.41 (m, 5H), 4.32 - 4.03 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.53 - 3.10 (m, 4H), 2.22 - 1.86 (m, 4H), 1.85 - 1.62 (m, 6H); MS (ES+): 574.4 (M+1), 596.4 (M+Na); MS (ES-): 608.5 (M+Cl)。HPLC純度：92.95%.; MS (ES+): 574.4 (M+1), 596.4 (M+Na); MS (ES-): 608.5 (M+Cl)。HPLC純度：92.95%。 流程336
製備(S)-(1-(1-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(336c )
步驟1：製備6-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(336b )
化合物336b 係根據流程1中所報道之程序，由4,6-二氯-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(336a ) (0.5 g，2.463 mmol；CAS#98141-42-5)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.29 mL，7.39 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (645 mg，2.59 mmol)來製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之6-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(336b ) (827 mg，81%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.40 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 438.2 (M+Na); (ES-): 414.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(1-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(336c )
化合物336c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由6-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(336b ) (200 mg，0.48 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.19 mL，1.92 mmol)及DIPEA (0.5 mL，2.89 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(1-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(336c ) (117 mg，51%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.90 (2s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.05 (s, 2H), 4.36 (m, 2H), 4.06 - 3.89 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.85 (s, 3H), 3.81 - 3.71 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.32 (m, 1H), 2.20 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 481.3 (M+1), 503.2 (M+Na); MS (ES-): 479.3 (M-1), 515.2 (M+Cl)。HPLC純度：99.23%。 流程337
製備(S)-1-(1-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(337a )
化合物337a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由6-氯-1-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(336b ) (200 mg，0.48 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(220 mg，1.92 mmol)及DIPEA (0.5 mL，2.89 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((S)-1-(1-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(337a ) (106 mg，48%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , 旋轉異構體之混合物) δ 11.73 (2s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.05 (2s, 1H), 7.41 (2s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.06 (d,J = 10.2 Hz, 2H), 4.52 (dd,J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.90 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.75 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.40 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 494.3 (M+1), 516.2 (M+Na); MS (ES-): 492.7 (M-1)。HPLC純度：97.68%。 流程338
製備(S)-(1-(1-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(338b)
步驟1：製備(S)-(1-(6-氯-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(338a)
化合物338a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(336a ) (400 mg，1.97 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-3-基甲醇(0.19 mL，1.97 mmol)及DIPEA (1.0 mL，5.91 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(6-氯-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 338a ) (278 mg，53%產率)；MS (ES+): 268.2 (M+1); (ES-): 266.2 (M-1) 302.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(1-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(338b)
化合物338b 係根據流程 101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(6-氯-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 338a ) (200 mg，0.75 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (186 mg，0.745 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，214 mg，0.448 mmol)、碳酸銫(730 mg，2.24 mmol)及Pd2 (dba)3 (205 mg，0.22 mmol)在甲苯/t-BuOH (30 mL，比率：2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(1-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 338b ) (76 mg，21%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.34 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.12 (dm, 1H), 7.95 (m, 1H), 7.09 (s, 2H), 4.74 - 4.26 (m, 2H), 4.07 - 3.91 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.86 (s, 3H), 3.83 - 3.72 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.68 - 3.38 (m, 1H), 2.37 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 481.4 (M+1); MS (ES-): 515.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.33%。流程339
(S)-(1-(4-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(339e )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(339d )
化合物339d 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯呋喃并[3,2-d]嘧啶(1a ) (324 mg，1.71 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.9 mL，5.14 mmol)及1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(339c )(410 mg，1.71 mmol)來製備。由此在處理後得到呈茶色固體狀之2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(339d ) (268 mg，40%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.98 (s, 1H), 8.37 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.17 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.84 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.60 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.49 (dd,J = 8.7, 2.2 Hz, 1H), 7.05 (d,J = 2.1 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -48.75。
步驟 2：製備(S)-(1-(4-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(339e )
化合物 339e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-胺(339d ) (250 mg，0.64 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.25 mL，2.55 mmol)在IPA (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，25 g)，用DMA 80/氯仿溶離]純化後得到呈游離鹼形式之化合物339e 。將游離鹼溶解於乙腈(10 mL)、HCl (1 N，10 mL)中且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(339e ) (0.25 g，86%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.83 (s, 1H, D2 O可交換), 11.88 (s, 1H, D2 O可交換), 8.37 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.66 - 7.49 (m, 2H), 7.00 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 4.40 (s, 1H), 3.78 - 3.58 (m, 2H), 3.58 - 3.29 (m, 2H), 2.04 (d,J = 28.2 Hz, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -48.71; MS (ES+): 457.2 (M+1); (ES-) 491.3 (M+Cl); 947.5 (2M+Cl)。 流程340
製備(S)-1-(5-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(340c )
步驟1：製備2-氯-5-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基 )-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(340b )
化合物340b 係根據流程1中所報道之程序 ，由2,4-二氯-5-氟喹唑啉(340a ) (500 mg，2.3 mmol；CAS# 87611-00-5)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.21 mL，6.91 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (603 mg，2.42 mmol)來製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之2-氯-5-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(340b ) (734 mg，74%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.42 (d,J = 13.5 Hz, 1H), 8.24 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (td,J = 8.2, 6.1 Hz, 1H), 7.60 (dd,J = 8.4, 1.0 Hz, 1H), 7.50 (ddd,J = 12.2, 8.1, 1.0 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+): 430.2 (M+1), 452.2 & 454.1 (M+Na) ; MS (ES-): 428.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(5-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(340c )
化合物340c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-5-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(340b ) (200 mg，0.47 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.212 g，1.861 mmol)及DIPEA (0.488 mL，2.79 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(5-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(340c ) (145 mg，61%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.09 (s, 1H), 9.95 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.18 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.94 - 7.80 (m, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.39 (dd,J = 12.4, 8.2 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 4.70 (dd,J = 8.9, 2.2 Hz, 1H), 4.20 - 4.03 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.88 - 3.73 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.41 - 1.88 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -109.40; MS (ES+): 508.3 (M+1); MS (ES-): 542.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.48%。 流程341
製備(S)-( 1-(5-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(341a )
化合物 341a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-5-氟-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(340b ) (200 mg，0.47 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.18 mL，1.86 mmol)及DIPEA (0.49 mL，2.79 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(5-氟-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(341a ) (110 mg，48%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.85 (s, 1H), 9.93 (brs, 1H), 8.61 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 8.18 - 8.02 (m, 2H), 7.93 - 7.78 (m, 1H), 7.42 - 7.26 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.86 - 4.47 (m, 1H), 4.12 - 3.90 (m, 1H), 3.88 (d,J = 2.5 Hz, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.67 - 3.60 (m, 1H),, 2.13 - 1.98 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ): δ -109.73; MS (ES+): 495.3 (M+1), 517.3 (M+Na); MS (ES-): 529.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.70%。 流程342
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(342c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-胺(342b )
化合物342b 係根據流程 1中所報道之程序，由2,4-二氯-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶(342a ) (120 mg，0.585 mmol；CAS# 944902-88-9)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.31 mL，1.76 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (153 mg，0.62 mmol)來製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-胺(342b ) (62 mg，25%產率)；MS (ES+): 418.2 (M+1); 440.2 (M+Na); (ES-): 416.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(342c )
化合物342c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-胺(342b ) (55 mg，0.13 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.052 mL，0.53 mmol)及DIPEA (0.14 mL，0.79 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠，C18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(342c ) (35 mg，55%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.38 (s, 1H), 10.57 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 4.53 - 4.37 (m, 1H), 3.98 - 3.88 (m, 3H), 3.87 (s, 6H), 3.84 - 3.70 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.39 (m, 2H), 3.01 - 2.72 (m, 2H), 2.21 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+): 483.3 (M+1); MS (ES-): 517.3 (M+Cl)。HPLC純度：93.78%。 流程343
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(343b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(343a)
化合物343a 係根據流程 96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶(342a ) (120 mg，0.59 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-3-基甲醇(0.058 mL，0.59 mmol)及DIPEA (0.31 mL，1.76 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 343a ) (0.151 g，96%產率)；MS (ES+): 270.2 (M+1); (ES-): 268.2 (M-1); 304.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(343b)
化合物343b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 343a ) (150 mg，0.56 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (139 mg，0.56，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，159 mg，0.33 mmol)、碳酸銫(544 mg，1.67 mmol)及Pd2 (dba)3 (153 mg，0.17 mmol)在甲苯/t -BuOH (30 mL，比率：2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7,8-二氫-5H-哌喃并[4,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 343b ) (0.119 g，0.247 mmol，44.3%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.37 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 4.88 - 4.71 (m, 3H), 4.56 (s, 1H), 4.02 - 3.90 (m, 1H), 3.86 (s, 6H), 3.83 - 3.72 (m, 3H), 3.67 (s, 3H), 3.63 - 3.35 (m, 2H), 2.72 (m, 3H), 1.90 (m, 2H); MS (ES+): 483.4 (M+1), 505.3 (M+Na); MS (ES-): 517.3 (M+Cl)。HPLC純度：94.19%。流程344
製備(S)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(344c )
步驟1：製備7-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(344b )
化合物344b 係根據流程1中所報道之程序 ，由7-溴-2,4-二氯喹唑啉(344a ) (660 mg，2.38 mmol；CAS# 959237-68-4)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.24 mL，7.12 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (651 mg，2.61 mmol)來製備。由此在處理後得到呈棕色固體狀之7-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(344b ) (890 mg，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.26 (s, 1H), 8.69 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 8.23 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.76 (dd,J = 8.9, 2.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 3H)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(344c )
化合物 344c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由7-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(344b ) (0.3 g，0.61 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.24 mL，2.45 mmol)及DIPEA (0.64 mL，3.67 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(344c ) (0.265 g，78%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (s, 1H), 8.42 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.07 (d,J = 28.7 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.19 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 6.96 (d,J = 15.7 Hz, 2H), 5.26 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.52 - 4.14 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.85 - 3.67 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.65 - 3.25 (m, 1H), 2.11 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 556.8 (M+1); MS (ES-): 553.4及555.3 (M-1)。HPLC純度：89.30%。 流程345
製備(S)-1-(7-氰基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(345c )
步驟1：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基 )-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(345b )
化合物345b 係根據流程1中所報道之程序 ，由2,4-二氯喹唑啉-7-甲腈(345a ) (500 mg，2.23 mmol；CAS# 864292-40-0)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (1.17 mL，6.7 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (556 mg，2.23 mmol)來製備。由此在處理後得到呈黃色固體狀之2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(345b ) (818 mg，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.48 (s, 1H), 8.90 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 8.01 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 8.5, 1.7 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H). MS (ES+): 459.2 (M+Na); MS (ES-): 435.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(7-氰基 -4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(345c )
化合物345c 係根據流程 76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(345b ) (200 mg，0.46 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(209 mg，1.83 mmol)及DIPEA (0.48 mL，2.75 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(7-氰基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(345c ) (140 mg，59%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.23 (s, 1H), 11.88 (s, 1H), 8.91 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.63 - 8.48 (m, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.86 (dd,J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.73 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.23 - 3.99 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.88 - 3.72 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.41 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 515.3 (M+1); MS (ES-): 513.4 (M-1), 549.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.60 %。 流程346
製備(S)-(1-(3-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇(346c)
步驟1：製備(S)-(1-(3-氯異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇(346b)
化合物346b 係根據流程 2中所報道之程序，由1,3-二氯異喹啉(346a ) (1000 mg，5.05 mmol；CAS#: 7742-73-6)在2-丙醇(4 mL)中使用(S)-吡咯啶-3-基甲醇(560 mg，5.55 mmol)及DIPEA (0.31 mL，1.76 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈黃色油狀之(S)-(1-(3-氯異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 346b ) (1.15 g，87%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.19 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.75 - 7.68 (m, 1H), 7.68 - 7.58 (m, 1H), 7.50 - 7.40 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.71 (t,J = 5.6 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.58 - 4.45 (m, 1H), 4.08 - 3.93 (m, 1H), 3.77 - 3.59 (m, 2H), 3.56 - 3.47 (m, 1H), 2.13 - 1.87 (m, 3H), 1.80 - 1.63 (m, 1H); MS (ES+): 285.2 (M+Na); (ES-): 261.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(3-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基 )-1H-咪唑-4-基)胺基)異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇(346c)
化合物346c 係根據流程101 之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(3-氯異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 346b ) (700 mg，2.66 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (731 mg，2.93 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，508 mg，1.07 mmol)、碳酸銫(1736 mg，5.33 mmol)及Pd2 (dba)3 (487 mg，0.53 mmol)在甲苯/t-BuOH (10 mL，比率：2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(3-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 346c ) (166 mg，13%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H, D2 O可交換), 9.18 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.15 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 1.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.67 - 7.49 (m, 2H), 7.28 - 7.18 (m, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.58 (s, 1H, D2 O可交換), 4.80 - 4.65 (m, 1H), 4.17 - 4.03 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.76 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.69 - 3.64 (m, 1H), 3.63 - 3.53 (m, 1H), 2.21 - 2.10 (m, 1H), 2.06 - 1.90 (m, 2H), 1.87 - 1.73 (m, 1H); MS (ES+): 476.3 (M+1), 485.3 (M+Na); (ES-): 474.4 (M-1); HPLC純度，92.19%。 流程347
製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(347a )
化合物 347a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(345b ) (200 mg，0.46 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.18 mL，1.83 mmol)及DIPEA (0.48 mL，2.75 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(347a ) (81 mg，35%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.85 (s, 1H), 11.94 (s, 1H), 8.86 (t,J = 8.1 Hz, 1H), 8.64 (d,J = 12.5 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.90 - 7.79 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.86 - 4.43 (m, 1H), 4.12 - 3.92 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.47 (m, 2H), 2.32 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 502.4 (M+1); MS (ES-): 500.4 (M-1), 536.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.21 %。 流程348
製備(R)-(1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(348a )
化合物348a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(105a ) (500 mg，1.01 mmol)、(R ) -吡咯啶-2-基甲醇(1001 mg，10 mmol)在NMP (20 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠40 g，用0%至10% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈棕色固體狀之(R)-(1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(348a ) (200 mg，35%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.66 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.49 - 6.88 (m, 3H), 6.58 (s, 1H), 5.05 - 4.67 (m, 1H), 4.50 - 4.07 (m, 2H), 4.04 - 2.61 (m, 18H), 2.15 - 0.69 (m, 10H); MS (ES+): 498.2 (M+1); MS (ES-): 496.1 (M-1)。HPLC: 85.92%；化合物348a 之鹽酸鹽係藉由利用逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化來自上述步驟之粗反應混合物，隨後凍乾而獲得，得到呈黃色固體狀之化合物348a HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.57 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.17 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 4.96 - 4.72 (m, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.10 - 3.93 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.81 - 3.70 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.54 (m, 1H), 3.54 - 3.38 (m, 2H), 2.84 - 2.51 (m, 4H), 2.12 - 1.79 (m, 2H), 1.56 (s, 5H), 1.47 - 1.25 (m, 3H); MS (ES+): 563.5 (M+1); MS (ES-): 597.5 (M+Cl)。HPLC純度：93.73 %。 流程349
製備 (R)-1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(349a )
化合物 349a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-7-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(105a ) (400 mg，0.8 mmol)、(R )-吡咯啶-2-甲醯胺(917 mg，8.0 mmol)在NMP (20 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析(矽膠，用0%至10% MeOH/DCM溶離)純化後得到呈棕色固體狀之(R)-1-(7-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(349a ) (90 mg，19.44 %) 游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.04 (s, 1H), 10.75 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.47 - 6.91 (m, 5H), 6.77 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 4.51 - 4.31 (m, 3H), 4.01 - 3.55 (m, 11H), 3.32 (dd,J = 32.2, 11.7 Hz, 2H), 2.94 - 2.69 (m, 2H), 2.33 - 1.18 (m, 10H); MS (ES+): 576.2 (M+1); HPLC純度；83.51%。游離鹼藉由逆相急驟層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]再純化，隨後凍乾，得到呈棕色固體狀之化合物349a HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.04 (s, 1H), 10.75 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.47 - 6.91 (m, 5H), 6.77 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 4.51 - 4.31 (m, 3H), 3.91 (s, 6H), 3.79 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.49 (m, 1H), 3.32 (m, 2H), 2.94 - 2.69 (m, 2H), 2.33 - 1.18 (m, 10H); MS (ES+): 576.3 (M+1); MS (ES-): 610.4 (M+Cl)。HPLC純度：91.36 %。 流程350
製備(S)-5-(4-((2-(2-胺甲醯基吡咯啶 -1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350d )
步驟1：製備5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350c )
化合物350c 係根據流程 1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1.5 g，7.97 mmol)在2-丙醇(45 mL)中使用DIPEA (3.09 g，23.93 mmol)及5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350b ) (2.65 g，9.57 mmol)來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350c ) (1.0 g，29%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.32 (s, 1H), 8.26 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.77 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.54 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 7.49 - 7.23 (m, 2H), 6.72 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.80 (s, 3H); MS (ES+): 429.3 (M+1); MS (ES-): 427.1 (M-1)。
步驟2：製備(S)-5-(4-((2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350d )
化合物350d 係根據流程 76之步驟2中所報道之程序，由5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350c ) (500 mg，1.16 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(266 mg，2.32 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，用(0-5%) MeOH/乙酸乙酯溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-5-(4-((2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350d ) (35 mg，6 %)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.54 (s, 1H), 8.27 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.73 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 7.58 - 7.43 (m, 2H), 7.32 - 7.17 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 6.47 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.87 (s, 6H), 2.22 (m, 2H), 1.99 (m, 4H); MS (ES+): 507.3 (M+1), MS (ES-): 505.2 (M-1)。藉由使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化將游離鹼轉化成HCl鹽，得到呈灰白色固體狀之(S)-5-(4-((2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350d ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.51 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.51 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.19 - 7.11 (m, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.43 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.41 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 4.00 - 3.88 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.55 - 3.40 (m, 1H), 2.30 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 507.3 (M+1), 529.3 (M+Na); MS (ES-): 541.3 (M+Cl)。HPLC純度：97.50%。 流程351
製備(S)-1-(4-((1-(3-(環戊基胺甲醯基)-4-羥基-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(351d )
步驟1：製備5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-環戊基-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(351c )
化合物351c 係根據流程1中所報道之程序 ，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (500 mg，2.65 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.0 g，7.95 mmol)及5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-N-環戊基-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(351b ) (1.3 g，3.93 mmol)來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之甲基5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-環戊基-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(351c ) (0.26 g，20%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.32 (s, 1H), 8.31 - 8.17 (m, 2H), 7.89 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.48 - 7.32 (m, 2H), 7.22 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 6.72 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.22 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 1.89 (m, 2H), 1.72 - 1.42 (m, 6H); MS (ES+): 482.1 (M+1); MS (ES-): 480.0 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(4-((1-(3-(環戊基胺甲醯基)-4-羥基-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(351d )
化合物351d 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-環戊基-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(351c ) (250 mg，0.52 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(590 mg，5.16 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，用MeOH/DCM (0-20%)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3-(環戊基胺甲醯基)-4-羥基-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(351d ) (160 mg，57 %)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.82 (s, 1H), 9.21 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.99 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.56 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.50 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.22 - 7.12 (m, 1H), 6.53 - 6.42 (m, 1H), 4.44 - 4.36 (m, 1H), 4.36 - 4.29 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.53 - 3.40 (m, 1H), 2.21 - 1.47 (m, 12H); MS (ES+): 546.2 (M+1); MS (ES-): 544.0 (M-1); HPLC: 95.8%。藉由使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化將游離鹼轉化成HCl鹽，得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(3-(環戊基胺甲醯基)-4-羥基-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(351d ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.82 (s, 1H), 9.21 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.99 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.56 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.50 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.22 - 7.12 (m, 1H), 6.53 - 6.42 (m, 1H), 4.44 - 4.36 (m, 1H), 4.36 - 4.29 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.53 - 3.40 (m, 1H), 2.21 - 1.47 (m, 12H); MS (ES+): 546.4 (M+1), 568.3 (M+Na); MS (ES-): 580.4 (M+Cl)。HPLC純度：94.02 %。 流程352
製備(S)-(1-(4-(苯并 [d]噁唑-2-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(352c)
步驟1：製備N-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)苯并[d]噁唑-2-胺(352b)
化合物352b 係根據流程 101之步驟3中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶( 12a ) (300 mg，1.46 mmol)、苯并[d]噁唑-2-胺(352a ) (196 mg，1.46 mmol，CAS# 4570-41-6)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，209 mg，0.44 mmol)、碳酸銫(715 mg，2.19 mmol)及Pd2 (dba)3 (201 mg，0.22 mmol)在二噁烷(20 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之N-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)苯并[d]噁唑-2-胺( 352b ) (65 mg，15%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.41 (s, 1H), 8.41 - 8.27 (m, 1H), 7.63 - 7.53 (m, 2H), 7.52 - 7.47 (m, 1H), 7.39 - 7.25 (m, 2H); MS (ES+) 303.1 (M+1); (ES-) 301.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-(苯并[d]噁唑-2-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(352c)
化合物352c 係根據流程 2中所報道之程序，由N-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)苯并[d]噁唑-2-胺( 352b ) (60 mg，0.2 mmol)在NMP (5 mL)中使用(S)-吡咯啶-3-基甲醇(40 mg，0.4 mmol)及DIPEA (0.1 mL，0.6 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-(苯并[d]噁唑-2-基胺基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 352c ) (10 mg，14%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.69 (s, 1H, D2 O可交換), 8.13 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 7.52 (d,J = 7.6 Hz, 2H), 7.40 - 7.12 (m, 3H), 5.45 - 4.58 (m, 1H, D2 O可交換), 4.36 - 4.15 (m, 1H), 3.82 - 3.45 (m, 4H), 2.19 - 1.92 (m, 4H); MS (ES+): 368.3 (M+1), 390.3 (M+Na); (ES-): 366.3 (M-1); HPLC純度98.40%。 流程353
製備(S)-(1-(2-((1H-吲唑-3-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(353b)
向(S)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(115a ) (300 mg，1.14 mmol)於t -BuOH (5 mL)及甲苯(4 mL)中之溶液中添加1H-吲唑-3-胺(353a ) (303 mg，2.28 mmol；CAS# 874-05-5)、BrettPhos鈀環(62 mg，0.07 mmol)、BrettPhos (73 mg，0.14 mmol)及Cs2 CO3 (741 mg，2.28 mmol)。使反應混合物完全脫氣且用Ar填充，在油浴中在100℃下攪拌所得混合物2天。反應混合物用EtOAc (120 mL)稀釋且過濾以移除無機固體。濾液用水、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-60% DMA-80/DCM溶離]及逆相管柱[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈紅色固體狀之(S)-(1-(2-((1H-吲唑-3-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 353b ) (39 mg，10%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.13 (s, 1H, D2 O可交換), 12.83 (s, 1H, D2 O可交換), 11.49 (s, 1H, D2 O可交換), 8.32 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 8.07 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.87 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 7.78 - 7.69 (m, 1H), 7.60 - 7.40 (m, 3H), 7.17 (t,J = 7.5 Hz, 1H), 4.78 - 4.54 (m, 1H), 4.22 - 4.11 (m, 2H), 3.89 - 3.69 (m, 2H), 3.63 - 3.46 (m, 1H), 2.22 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 361.3 (M+1), 383.2 (M+Na); (ES-): 395.3; HPLC純度，95.51%。 流程354
製備(S)-(1-(2-((5-苯基-1H-吡唑-3-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(354b)
向二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯 -2-基)膦(169 mg，0.36 mmol)於甲苯(30 mL)及第三丁醇(10 mL)中之脫氣溶液中添加碳酸銫(578 mg，1.77 mmol)及Pd2 (dba)3 (162 mg，0.18 mmol)。使所得混合物脫氣且在110℃下加熱15分鐘。隨後添加(S)-(1-(2-氯呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(148a ) (300 mg，1.18 mmol)及5-苯基-1H-吡唑-3-胺(354a ) (94 mg，0.59 mmol；CAS# 1572-10-7)，脫氣且用Ar填充。所得混合物在110℃下加熱17小時。將反應混合物用EtOAc (100 mL)及甲醇(10 mL)之混合物稀釋，攪拌10分鐘，過濾以移除無機固體。真空濃縮濾液且殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((5-苯基-1H-吡唑-3-基)胺基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 354b ) (23 mg，10%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 13.01 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.10 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.60 - 7.02 (m, 4H), 6.90 - 6.70 (m, 1H), 5.10 - 4.68 (m, 1H), 4.63 - 4.31 (m, 1H), 4.07 - 3.42 (m, 4H), 2.20 - 1.66 (m, 4H). MS (ES+): 377.2 (M+1); 399.1 (M+Na); MS (ES-): 375.3 (M-1); 411.2 (M+Cl)。HPLC純度：88.13%。流程355
製備(S)-5-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(355a)
化合物355a 係根據流程 101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 96a ) (400 mg，1.58 mmol)、5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350b ) (610 mg，2.21 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，330 mg，0.71 mmol)、碳酸銫(1.54 g，4.74 mmol)及Pd2 (dba)3 (210 mg，0.23 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用(0-5%) MeOH/乙酸乙酯溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之化合物355a (40.0 mg，5%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.13 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.59 (d,J = 2.5 Hz, 2H), 7.49 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 6.83 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 1H), 4.03 - 3.76 (m, 10H), 3.76 - 3.42 (m, 3H), 2.32 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+) 494.0 (M+1)。藉由使用逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]將游離鹼轉化成HCl鹽，得到呈灰白色狀之(S)-5-(4-((4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯( 355a ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.13 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.59 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 7.49 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 1H), 4.03 - 3.76 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.76 - 3.42 (m, 3H), 2.32 - 1.74 (m, 4H)。MS (ES+): 494.3 (M+1), 516.3 (M+Na); MS (ES-): 528.3 (M+Cl)。HPLC純度：98.18%。 流程356
製備 (S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(356b)
步驟1：製備(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-甲腈(356a)
化合物356a 係根據流程2中所報道之程序 ，由2,4-二氯喹唑啉-7-甲腈(345a ) (400 mg，1.79 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用(S)-吡咯啶-3-基甲醇(0.18 mL，1.79 mmol)及DIPEA (0.94 mL，5.36 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至50%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-甲腈( 356a ) (427 mg，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.40 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 8.7, 1.8 Hz, 1H), 4.87 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.12 - 3.87 (m, 2H), 3.78 - 3.55 (m, 2H), 2.20 - 1.76 (m, 4H)。MS (ES+): 289.2 (M+1), 311.2 (M+Na); MS (ES-): 287.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(356b)
化合物356b 係根據流程101之步驟 3中所報道之程序，由(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-甲腈( 356a ) (300 mg，1.04 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (259 mg，1.04 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，297 mg，0.62 mmol)、碳酸銫(1016 mg，3.12 mmol)及Pd2 (dba)3 (285 mg，0.31 mmol)在甲苯/t -BuOH (40 mL，比率：3:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈( 356b ) (91 mg，18%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.18 (s, 1H), 8.58 - 8.22 (m, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.78 (dd,J = 8.6, 1.6 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 4.85 (s, 1H), 4.34 - 4.02 (m, 1H), 4.00 - 3.91 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.85 - 3.71 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.30 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+): 502.3 (M+1); MS (ES-): 536.3 (M+Cl)。HPLC純度：94.11 %。流程357
製備(S)-(1-(2-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基 )吡啶-2-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(357d)
步驟1：製備5-(3,4,5-三甲氧基苯基 )吡啶-2-胺(357c)
向5-溴吡啶-2-胺(357b ) (300 mg，1.73 mmol)於ACN/H2 O (10 mL)中之溶液中添加3,4,5-三甲氧基苯基硼酸 (357a ) (551 mg，2.6 mmol)、Pd(PPh3 )2 Cl2 (122 mg，0.17 mmol)及K3 PO4 (1.47 g，6.94 mmol)。使混合物脫氣，用Ar填充且微波110℃加熱1小時。混合物用EtOAc稀釋，用水、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]純化，得到呈黃色固體狀之5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-胺( 357c ) (125 mg，28%產率)；MS (ES+): 261.2 (M+1)。
步驟2：製備 (S)-(1-(2-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(357d)
化合物357d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(115a ) (300 mg，1.14 mmol)、5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-胺( 357c ) (296 mg，1.14 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，325 mg，0.68 mmol)、碳酸銫(1112 mg，3.41 mmol)及Pd2 (dba)3 (313 mg，0.34 mmol)在甲苯/t -BuOH (40 mL，比率：3:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)胺基)喹唑啉 -4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 357d ) (208 mg，38%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 14.40 (s, 1H), 11.78 (s, 1H), 8.81 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 8.35 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 8.30 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 8.00 - 7.85 (m, 2H), 7.60 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.56 - 7.48 (m, 1H), 6.99 (s, 2H), 4.91 - 4.58 (m, 1H), 4.31 - 3.99 (m, 2H), 3.97 - 3.90 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.85 - 3.72 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.32 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 488.4 (M+1); MS (ES-): 522.4 (M+Cl)。HPLC純度：96.38 %。流程358
製備(S)-(1-(7-(哌啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基 )-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(358a)
化合物358a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(344c ) (300 mg，0.54 mmol)、哌啶(0.27 mL，2.7 mmol)、二環己基(2',6'-二異丙氧基聯苯-2-基)膦(RuPhos，151 mg，0.32 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(260 mg，2.7 mmol)及Pd2 (dba)3 (148 mg，0.16 mmol)在甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(哌啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 358a ) (110 mg，37%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.09 (s, 1H), 11.48 (s, 1H), 9.02 - 8.74 (m, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.70 - 7.38 (m, 1H), 7.26 - 6.92 (m, 3H), 4.76 - 4.24 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.83 - 3.74 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.45 (m, 4H), 2.27 - 1.76 (m, 4H), 1.78 - 1.28 (m, 6H); MS (ES+): 560.5 (M+1); MS (ES-): 598.5 (M-1)。HPLC純度：93.48 %。 流程359
製備(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(359d)
步驟1：製備(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359b)
化合物359b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序 ，由2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359a ) (CAS #: 903129-71-5) (500 mg，1.72 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(174 mg，1.72 mmol)及DIPEA (0.6 mL，3.45 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359b ) (510 mg，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.93 - 4.66 (m, 3H), 4.40 - 4.29 (m, 2H), 4.26 - 3.94 (m, 1H), 3.78 - 3.43 (m, 3H), 2.05 - 1.75 (m, 4H), 1.44 (s, 9H); MS (ES+): 355.3 (M+1); 377.2 (M+Na); (ES-): 353.3 (M-1)。
步驟2，製備(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶 -1-基)-2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359c)
化合物359c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359b ) (400 mg，1.13 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) ((309 mg，1.24 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(735 mg，2.26 mmol)及Pd2 (dba)3 (206 mg，0.23 mmol)在t -BuOH/甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]純化兩次後得到呈灰白色固體狀之(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359c ) (220 mg，34%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.16 (s, 1H, D2 O可交換), 8.07 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.90 (s, 2H), 5.00 - 4.87 (m, 1H, D2 O可交換), 4.80 - 4.61 (m, 2H), 4.30 - 4.22 (m, 2H), 3.86 (s, 6H), 3.81 - 3.72 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.65 - 3.53 (m, 2H), 3.33 - 3.20 (m, 2H), 2.02 - 1.85 (m, 4H), 1.45 (s, 9H); MS (ES+): 568.5 (M+1); 590.4 (M+Na); (ES-): 602.5 (M+Cl); HPLC純度：95.97%。
步驟3：製備(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(359d)
化合物359d 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (20 mL)中使用三氟乙酸(0.25 mL，3.26 mmol)水解(S)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359c ) (185 mg，0.37 mmol)來製備。由此在藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 359d ) (85 mg，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.40 - 10.19 (m, 3H, D2 O可交換), 8.96 (s, 1H), 7.89 - 7.78 (m, 1H, D2 O可交換), 7.06 (s, 2H), 4.77 - 4.61 (m, 2H), 4.35 - 4.24 (m, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.84 - 3.74 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.65 - 3.59 (m, 1H), 3.43 - 3.32 (m, 1H), 2.06 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 468.4 (M+1); (ES-): 502.4 (M+Cl); HPLC純度：98.83%。 流程360
製備(S)-1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(360c )
步驟1：製備2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(360a )
化合物360a 係根據流程 183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359a ) (1 g，3.45 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (1.2 mL，6.89 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (860 mg，3.45 mmol)來製備。由此在過濾後得到呈白色固體狀之2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(360a ) (1.4 g，81%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.55 - 10.26 (m, 1H, D2O可交換), 8.21 - 8.10 (m, 1H), 7.85 - 7.68 (m, 1H), 6.99 - 6.82 (m, 2H), 4.61 - 4.35 (m, 4H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 1.45 (s, 9H).); MS (ES+): 503.4 (M+1), 525.4 (M+Na); (ES-): 537.5 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)- 2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(360b )
化合物360b 係根據流程 76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(360a ) (275 mg，0.547 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(250 mg，2.187 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.286 mL，1.640 mmol)在N-甲基-2-吡咯啶酮(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(360b ) (184 mg，58%產率)。MS (ES+): 581.4 (M+1), 603.4 (M+Na), (ES-): 579.5 (M-1)。
步驟3：製備(S)-1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(360c )
化合物360c 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (10 mL)中使用三氟乙酸(0.49 mL，6.34 mmol)水解(S)-2-(2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(360b ) (184 mg, 0.32 mmol)來製備。由此在藉由層析[矽膠(12 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(360c ) (122 mg，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.25 (s, 1H, D2 O可交換), 10.71 (s, 1H, D2 O可交換), 10.57 (s, 1H, D2 O可交換), 8.52 (s, 1H), 7.86 (d,J = 1.6 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.59 (s, 1H, D2 O可交換), 7.22 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.60 - 4.39 (m, 6H), 3.93 (s, 6H), 3.90 - 3.85 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.65 - 3.52 (m, 1H), 2.36 - 2.19 (m, 1H), 2.07 - 1.90 (m, 3H); MS (ES+): 481.4 (M+1), 503.3 (M+Na); (ES-): 515.4 (M+Cl); HPLC純度：99.27%。 流程361
製備(S)-(1-(7-(3-胺基苯基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(361c)
步驟1：製備(S)-(1-(7-溴-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(361a)
化合物361a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由7-溴-2,4-二氯喹唑啉(344a ) (3 g，10.79 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(1.2 mL，11.87 mmol)、DIPEA (5.66 mL，32.4 mmol)來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-溴-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361a ) ( 2.5 g，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.19 (d,J = 9.1 Hz, 1H), 7.83 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.60 (dd,J = 9.1, 2.2 Hz, 1H), 4.86 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 4.55 (s, 1H), 3.95 (dd,J = 15.1, 7.6 Hz, 2H), 3.75 - 3.48 (m, 2H), 2.15 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 364.1, 366.1 (M+Na), (ES-): 340.1, 342.1 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-(3-胺基苯基)-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(361b)
化合物361b 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361a ) ( 500 mg，1.46 mmol)使用3-胺基苯基硼酸(200 mg，1.46 mmol)、雙(三苯基膦)二氯化鈀(II) (51 mg，0.073 mmol)及碳酸鈉(309 mg，2.92 mmol)在甲苯(15 mL)、EtOH (7 mL)及水(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-(3-胺基苯基)-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361b ) (365 mg，71%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.32 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 7.75 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.68 (dd,J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 7.16 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 6.98 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 6.93 (dt,J = 7.5, 1.2 Hz, 1H), 6.65 (ddd,J = 8.0, 2.3, 0.9 Hz, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.88 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.58 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 4.13 - 3.90 (m, 2H), 3.66 (t,J = 5.2 Hz, 2H), 2.16 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+): 355.2 (M+1), 377.2 (M+Na), (ES-): 353.3 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(1-(7-(3-胺基苯基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(361c)
化合物 361c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-(3-胺基苯基)-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361b ) (358 mg，1.01 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (314 mg，1.26 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，216 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(986 mg，3.03 mmol)、Pd2 (dba)3 (139 mg，0.15 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-(1-(7-(3-胺基苯基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361c ) (60 mg，10%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6- D2 O) δ 8.35 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.91 - 7.73 (m, 1H), 7.70 (d,J = 8.7 Hz, 2H), 7.51 (d,J = 4.8 Hz, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.17 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 6.92 (s, 2H), 4.92 - 4.67 (m, 1H), 4.24 - 4.06 (m, 2H), 4.03 - 3.91 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.81 - 3.65 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 2.24 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+) 568.4 (M+1); HPLC純度：96.68 %。流程362
製備(S)-(1-(7-(3-氟苯基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(362b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-(3-氟苯基 )喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(362a)
化合物362a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361a ) (0.5 g，1.459 mmol)使用3-氟苯基硼酸(204 mg，1.46 mmol)、雙(三苯基膦)二氯化鈀(II) (51 mg，0.073 mmol)及碳酸鈉(309 mg，2.92 mmol)在甲苯(15 mL)、EtOH (7 mL)及水(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7-(3-氟苯基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 362a ) (500 mg，96%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.35 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 8.9, 2.1 Hz, 1H), 7.76 - 7.68 (m, 2H), 7.58 (td, J = 8.2, 6.2 Hz, 1H), 7.35 - 7.25 (m, 1H), 4.89 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 4.16 - 3.86 (m, 2H), 3.66 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.18 - 1.73 (m, 4H); MS (ES+): 358.3 (M+1), 380.2 (M+Na), (ES-): 356.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-(3-氟苯基 )-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(362b)
化合物362b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-(3-氟苯基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 362a ) (361 mg，1.01 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (314 mg，1.261 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，216 mg，0.454 mmol)、碳酸銫(986 mg，3.03 mmol)、Pd2 (dba)3 (138 mg，0.15 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-(1-(7-(3-氟苯基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 362b ) (115 mg，20%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 -D2 O) δ 8.34 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.08 - 7.78 (m, 1H), 7.77 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.63 (dd,J = 20.3, 7.4 Hz, 4H), 7.32 (ddd,J = 10.6, 6.3, 2.1 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 4.81 (s, 1H), 4.31 - 4.02 (m, 2H), 3.90 - 3.83 (m, 1H), 3.85 (s, 6H), 3.79 - 3.67 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 2.23 - 1.84 (m, 4H),19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -112.13 ; MS (ES+): 571.4 (M+1), 593.4 (M+Na), (ES-): 605.4 (M+Cl); HPLC純度：94.06 %。 流程363
製備(S)-N-(3-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)苯基)甲烷磺醯胺(363b)
步驟1：製備(S)-N-(3-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯基)甲烷磺醯胺(363a)
化合物363a 係根據流程77 之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361a ) ( 500 mg，1.46 mmol)使用(3-(甲基磺醯胺基)苯基)硼酸(314 mg，1.46 mmol)、雙(三苯基膦)二氯化鈀(II) (51 mg，0.073 mmol)及碳酸鈉(309 mg，2.92 mmol)在甲苯(15 mL)、EtOH (7 mL)及水(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-N-(3-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯基)甲烷磺醯胺( 363a ) (384 mg，61%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.96 (s, 1H), 8.37 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 7.84 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.72 (dd,J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 7.60 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.57 (dt,J = 7.8, 1.4 Hz, 1H), 7.50 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.29 (ddd,J = 7.9, 2.2, 1.2 Hz, 1H), 4.89 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.58 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 4.15 - 3.87 (m, 2H), 3.66 (t,J = 5.2 Hz, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.18 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 433.2 (M+1), 455.2 (M+Na), (ES-): 431.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-N-(3-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶 -1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)苯基)甲烷磺醯胺(363b)
化合物363b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-N-(3-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯基)甲烷磺醯胺( 363a ) (390 mg，0.9 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (280 mg，1.12 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，193 mg，0.41 mmol)、碳酸銫(880 mg，2.7 mmol)、Pd2 (dba)3 (124 mg，0.14 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-N-(3-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)苯基)甲烷磺醯胺( 363b ) (225 mg，39%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.27 (s, 1H, D2 O可交換), 10.57 (s, 1H, D2 O可交換), 10.07 (s, 1H, D2 O可交換), 8.38 (d,J = 8.3 Hz, 2H), 7.74 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.70 - 7.62 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.51 (d,J = 6.1 Hz, 2H), 7.40 - 7.29 (m, 2H), 6.99 (s, 2H), 4.87 (s, 1H), 4.34 - 4.12 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.86 - 3.69 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.07 (s, 3H), 2.27 - 1.90 (m, 4H); MS (ES+): 646.5 (M+1), (ES-): 644.4 (M-1), 680.5 (M+Cl); HPLC純度：98.78 %。 流程364
製備(S)-N-(3-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)苯基)乙醯胺(364b)
步驟1：製備(S)-N-(3-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯基)乙醯胺(364a)
化合物364a 係根據流程 77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361a ) ( 500 mg，1.46 mmol)使用(3-乙醯胺基苯基)硼酸(261 mg，1.46 mmol)、雙(三苯基膦)二氯化鈀(II) (51 mg，0.073 mmol)及碳酸鈉(309 mg，2.92 mmol)在甲苯(15 mL)、EtOH (7 mL)及水(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-N-(3-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯基)乙醯胺( 364a ) (381 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.12 (s, 1H), 8.37 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 8.10 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.71 (dd,J = 8.9, 2.1 Hz, 1H), 7.62 (dt,J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 7.53 - 7.41 (m, 2H), 5.77 (s, 1H), 4.89 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.66 - 4.54 (m, 1H), 4.14 - 3.93 (m, 1H), 3.66 (t,J = 5.3 Hz, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.11 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 397.3, 399.2 (M+1), 419.3, 421.2 (M+Na), (ES-): 431.3, 433.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-N-(3-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)苯基)乙醯胺(364b)
化合物364b 係根據流程101之步驟 3中所報道之程序，由(S)-N-(3-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯基)乙醯胺( 364a ) (357 mg，0.9 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (280 mg，1.13 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，193 mg，0.41 mmol)、碳酸銫(880 mg，2.7 mmol)、Pd2 (dba)3 (124 mg，0.14 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]，逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-N-(3-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)苯基)乙醯胺( 364b ) (186 mg，34%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.21 (s, 1H, D2 O可交換), 10.56 (s, 1H, D2 O可交換), 10.31 (s, 1H, D2 O可交換), 8.36 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 8.10 (s, 1H), 7.71 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.2 Hz, 3H), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.98 (s, 2H), 5.04 - 4.67 (m, 1H), 4.32 - 4.06 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.88 - 3.71 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 2.31 - 1.85 (m, 7H); MS (ES+): 610.4 (M+1), (ES-): 644.5 (M+Cl); HPLC純度：98.94 %。流程365
製備(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(365b)
步驟1：製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(365a)
化合物365a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸酯(360a ) (275 mg，0.55 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(221 mg，2.19 mmol)及N -乙基-N -異丙基丙-2-胺(0.29 mL，1.64 mmol)在N -甲基-2-吡咯啶酮(5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(365a ) (212 mg，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.71 (s, 1H, D2 O可交換), 8.17 (s, 1H), 8.00 - 7.77 (m, 1H), 6.92 (s, 2H), 4.90 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.43 (d,J = 11.8 Hz, 2H), 4.27 (d,J = 11.4 Hz, 2H), 4.16 - 3.99 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.80 - 3.57 (m, 5H), 3.34 - 3.18 (m, 2H), 2.04 - 1.83 (m, 4H), 1.46 (d,J = 6.0 Hz, 9H); MS (ES+): 568.4 (M+1), 590.4 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(365b)
化合物365b 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (10 mL)中使用三氟乙酸(0.54 mL，7.05 mmol)水解(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯( 365a ) (200 mg，0.35 mmol)來製備。由此在藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]及逆相管柱層析[(矽膠C-18 (50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 365b ) (120 mg，73%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.14 (s, 1H, D2 O可交換), 10.42 (s, 2H, D2 O可交換), 8.43 (s, 1H), 8.05 - 7.89 (m, 1H, D2 O可交換), 6.98 (s, 2H), 4.66 - 4.18 (m, 6H), 3.87 (s, 6H), 3.82 - 3.61 (m, 5H), 3.56 - 3.41 (m, 2H), 2.13 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 468.4 (M+1); (ES-): 502.4 (M+Cl); HPLC純度：99.73% 流程366
製備(R)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(366c)
步驟1：製備(R)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(366a )
化合物366a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(359a ) (500 mg，1.72 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-基甲醇(174 mg，1.72 mmol)及DIPEA (0.60 mL，3.45 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(366a ) (486 mg，79%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.19 - 4.60 (m, 3H), 4.46 - 4.05 (m, 3H), 3.78 - 3.39 (m, 3H), 2.05 - 1.73 (m, 4H), 1.45 (s, 9H); MS (ES+): 355.3 (M+1), 377.2 (M+Na); (ES-): 353.3 (M-1)。
步驟2：製備(R)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(366b )
化合物366b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(366a ) (400 mg，1.13 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (309 mg，1.24 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，215 mg，0.45 mmol)、碳酸銫(735 mg，2.26 mmol)及Pd2 (dba)3 (206 mg，0.23 mmol)在t -BuOH/甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]純化兩次後得到呈黃色固體狀之(R)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(366b ) (200 mg，31%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.20 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.71 - 7.62 (m, 1H), 6.90 (s, 2H), 5.01 - 4.87 (m, 1H), 4.80 - 4.61 (m, 2H), 4.32 - 4.20 (m, 2H), 3.86 (s, 6H), 3.82 - 3.69 (m, 2H), 3.68 - 3.58 (m, 5H), 3.34 - 3.26 (m, 1H), 2.03 - 1.81 (m, 4H), 1.45 (s, 9H); MS (ES+): 568.4 (M+1), 590.4 (M+Na); (ES-): 566.5 (M-1)。
步驟3：製備(R)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(366c)
化合物366c 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (20 mL)中使用三氟乙酸(0.50 mL，6.52 mmol)水解(R)-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸第三丁酯(366b ) (185 mg，0.33 mmol)來製備。由此在藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 366c ) (108 mg，71%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 3H, D2 O可交換), 9.00 - 8.80 (m, 1H), 7.84 (s, 1H, D2 O可交換), 7.06 (d,J = 3.6 Hz, 2H), 4.77 - 4.60 (m, 2H), 4.53 - 4.38 (m, 1H), 4.37 - 4.18 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.84 - 3.74 (m, 1H), 3.74 - 3.51 (m, 5H), 3.45 - 3.33 (m, 1H), 2.08 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 468.4 (M+1); (ES-): 467.2 (M-1)。 流程367
製備(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)喹啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367d )
步驟1：製備(S)-(1-(4-氯喹啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367b )及(S)-(1-(2-氯喹啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367c )
化合物367b 及化合物367c 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯喹啉(367a ，CAS編號703-61-7) (1 g，5.05 mmol)在2-丙醇(4 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.56 g，5.55 mmol)及DIPEA (1.32 mL，7.57 mmol)藉由在150℃下微波加熱2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-(1-(4-氯喹啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367b ) (305 mg，23%產率)，1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.93 - 7.86 (m, 1H), 7.66 - 7.51 (m, 2H), 7.34 - 7.20 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.99 (t,J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.18 (s, 1H), 3.67 - 3.51 (m, 2H), 3.50 - 3.37 (m, 2H), 2.04 - 1.86 (m, 4H);1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.90 (dd,J = 8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.61 - 7.54 (m, 2H), 7.28 (ddd,J = 8.2, 6.4, 1.6 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.97 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.64 - 3.53 (m, 2H), 3.49 - 3.35 (m, 2H), 2.05 - 1.96 (m, 2H), 1.96 - 1.88 (m, 2H); MS (ES+): 263.1 (M+1), 285.1 (M+Na); (ES-): 261.2 (M-1)；及呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯喹啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367c ) (135 mg，10%產率)，1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.19 (dd,J = 8.7, 1.4 Hz, 1H), 7.73 (dd,J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 1H), 7.47 - 7.37 (m, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.83 (t,J = 5.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.21 - 4.10 (m, 1H), 4.03 - 3.90 (m, 1H), 3.69 - 3.48 (m, 2H), 3.46 - 3.37 (m, 1H), 2.24 - 2.10 (m, 1H), 2.05 - 1.87 (m, 2H), 1.82 - 1.62 (m, 1H);1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.18 (dd,J = 8.6, 1.3 Hz, 1H), 7.73 (dd,J = 8.4, 1.4 Hz, 1H), 7.65 (ddd,J = 8.3, 6.8, 1.3 Hz, 1H), 7.42 (ddd,J = 8.4, 6.8, 1.4 Hz, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.80 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.21 - 4.11 (m, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 1H), 3.65 - 3.57 (m, 1H), 3.57 - 3.49 (m, 1H), 3.44 - 3.35 (m, 1H), 2.23 - 2.12 (m, 1H), 2.02 - 1.86 (m, 2H), 1.79 - 1.69 (m, 1H); MS (ES+): 263.1 (M+1), 285.2 (M+Na); (ES-): 261.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)喹啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367d )
化合物367d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(4-氯喹啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367b ) (638 mg，2.43 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (666 mg，2.67 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，463 mg，0.97 mmol)、碳酸銫(158 mg，4.86 mmol)及Pd2 (dba)3 (444 mg，0.49 mmol)在t -BuOH/甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(4-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)喹啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367d ) (56 mg，5%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.91 (s, 1H, D2 O可交換), 10.11 (s, 1H, D2 O可交換), 8.60 - 8.48 (m, 2H), 8.19 (d,J = 8.2 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.92 (s, 1H), 7.78 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.50 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.86 (s, 1H), 4.18 - 4.08 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.83 - 3.73 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.62 - 3.47 (m, 3H), 2.14 - 1.95 (m, 4H); MS (ES+): 476.4 (M+1); (ES-): 510.4 (M+Cl)。 流程368
製備(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)喹啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(368a)
化合物368a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯喹啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(367c ) (320 mg，1.22 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (334 mg，1.34 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，232 mg，0.49 mmol)、碳酸銫(794 mg，2.44 mmol)及Pd2 (dba)3 (223 mg，0.24 mmol)在t -BuOH/甲苯(10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)喹啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 368a ) (73 mg，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.05 (s, 1H, D2 O可交換), 10.93 (s, 1H, D2 O可交換), 8.46 (s, 1H), 8.26 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.84 - 7.65 (m, 3H), 7.50 - 7.35 (m, 1H), 7.02 (s, 2H), 6.51 (s, 1H), 4.30 - 4.17 (m, 1H), 4.05 - 3.97 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.86 - 3.82 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.61 - 3.58 (m, 2H), 2.23 - 2.12 (m, 1H), 2.12 - 1.98 (m, 2H), 1.88 - 1.70 (m, 1H); MS (ES+): 476.4 (M+1); (ES-): 510.4 (M+Cl)。 流程369
製備(R)-(1-(3-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇(369b)
步驟1：製備(R)-(1-(3-氯異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇(369a)
化合物369a 係根據流程2中所報道之程序，由1,3-二氯異喹啉(346a ) (1.5 g，7.57 mmol)在2-丙醇(6 mL)中使用(R)-吡咯啶-2-基甲醇(843 mg，8.33 mmol)及DIPEA (1.98 mL，11.36 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈粉色油狀之(R)-(1-(3-氯異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 369a ) (1.5 g，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.18 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.73 - 7.67 (m, 1H), 7.66 - 7.56 (m, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.79 - 4.63 (m, 1H, D2 O可交換), 4.57 - 4.43 (m, 1H), 4.09 - 3.92 (m, 1H), 3.76 - 3.58 (m, 2H), 3.55 - 3.47 (m, 1H), 2.12 - 1.85 (m, 3H), 1.81 - 1.61 (m, 1H); MS (ES+): 263.1 (M+1), 285.1 (M+Na); (ES-): 261.2 (M-1)。
步驟2：製備(R)-(1-(3-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇(369b)
化合物369b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(3-氯異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 369a ) (600 mg，2.28 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (626 mg，2.51 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，435 mg，0.913 mmol)、碳酸銫(1.5 g，4.57 mmol)及Pd2 (dba)3 (418 mg，0.46 mmol)在甲苯/t-BuOH (10 mL，比率：2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(3-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基胺基)異喹啉-1-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 369b ) (93 mg，9%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.12 (s, 1H, D2 O可交換), 9.20 (s, 1H), 8.15 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.89 (d,J = 1.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.64 - 7.51 (m, 2H), 7.28 - 7.18 (m, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.58 (s, 1H, D2 O可交換), 4.79 - 4.67 (m, 1H), 4.16 - 4.04 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.88 - 3.76 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.68 - 3.64 (m, 1H), 3.62 - 3.56 (m, 1H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 2.06 - 1.91 (m, 2H), 1.89 - 1.73 (m, 1H); MS (ES+): 476.4 (M+1); (ES-): 474.5 (M-1), 510.3 (M+Cl)。 流程370
製備(S)-(1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(370b )
步驟1：製備2-氯-N-(5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)喹唑啉-4-胺(370a )
化合物370a 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯喹唑啉(21a ) (310 mg，1.54 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (0.81 mL，4.61 mmol)及5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-胺(357c ) (400 mg，1.54 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)喹唑啉-4-胺( 370a ) (480 mg，74%產率)；MS (ES+): 423.2及425.2 (M+1); MS (ES-): 421.3及423.2 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(370b )
化合物370b 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)喹唑啉-4-胺(370a ) (180 mg，0.43 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.17 mL，1.7 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.45 mL，2.55 mmol)在N-甲基-2-吡咯啶酮(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(370b ) (0.10 g，48%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.63 (s, 1H), 11.43 (s, 1H), 8.88 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.75 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.44 - 8.09 (m, 3H), 7.89 (ddd, J = 8.4, 7.1, 1.2 Hz, 1H), 7.50 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 4.72 - 4.60 (m, 1H), 4.46 - 4.24 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.74 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.50 (m, 2H), 2.30 - 1.84 (m, 4H)。MS (ES+): 488.3 (M+1); MS (ES-): 486.4 (M-1)。HPLC純度：97.17 %。 流程371
製備(S)-1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(371a )
化合物371a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)喹唑啉-4-胺(370a ) (180 mg，0.43 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(194 mg，1.7 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.45 mL，2.55 mmol)在N-甲基-2-吡咯啶酮(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2Cl2 溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)吡啶-2-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(371a ) (96 mg，45%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.89 (s, 1H), 8.87 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 8.76 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 8.29 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 8.21 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 8.15 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.92 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.52 (ddd,J = 8.3, 7.1, 1.1 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.04 (s, 2H), 4.66 (dd,J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 4.00 - 3.92 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.86 - 3.75 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.40 - 1.87 (m, 4H); MS (ES+): 501.3 (M+1); MS (ES-): 499.4 (M-1); 535.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.97 %。 流程372
製備(R)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(372a )
化合物372a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(345b ) (0.2 g，0.46 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(0.18 mL，1.83 mmol)及DIPEA (0.48 mL，2.75 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲腈(372a ) (89 mg，39%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.95 (s, 1H), 12.02 (s, 1H), 8.94 - 8.81 (m, 1H), 8.74 - 8.65 (m, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.18 - 7.99 (m, 1H), 7.93 - 7.75 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.84 - 4.48 (m, 1H), 3.88 (d,J = 3.8 Hz, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.40 (m, 1H), 2.29 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 502.3 (M+1), 524.3 (M+Na); MS (ES-): 500.4 (M-1), 536.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.92 %。 流程373
製備(S)-1-(1,3-二甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(373c )
步驟1：製備6-氯-1,3-二甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(373b )
化合物373b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-1,3-二甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(373a ) (500 mg，2.3 mmol，CAS#1072895-86-3)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (1.21 mL，6.91 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.57 g，2.3 mmol)來製備。由此在過濾後得到呈棕色固體狀之6-氯-1,3-二甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(373b ) (0.67 g，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.61 (s, 1H), 8.24 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.81 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 2.60 (s, 3H)。MS (ES+): 452.2及454.2 (M+Na); MS (ES-): 428.3及430.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(1,3-二甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(373c )
化合物373c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由6-氯-1,3-二甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(373b ) (200 mg，0.47 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(200 mg，1.86 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.49 mL，2.79 mmol)在N-甲基-2-吡咯啶酮(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(1,3-二甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(373c ) (0.17 g，72%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.72 (2s, 1H), 9.29 (s, 1H), 8.13 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.12 (s, 2H), 4.46 - 4.12 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.82 - 3.72 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.68 - 3.60 (m, 1H), 3.58 - 3.27 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.17 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 508.3 (M+1), 530.3 (M+Na); MS (ES-): 542.4 (M+Cl)。HPLC純度：96.64 %。 流程374
製備(S)-(1-(1,3-二甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(374a )
化合物374a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由6-氯-1,3-二甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(373b ) (200 mg，0.47 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.18 mL，1.86 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.49 mL，2.79 mmol)在N-甲基-2-吡咯啶酮(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1,3-二甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(374a ) (0.16 g，68%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.72 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 8.13 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.12 (s, 2H), 4.46 - 4.12 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.85 - 3.74 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.69 - 3.56 (m, 2H), 2.60 (s, 3H), 2.17 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 495.4 (M+1), 517.4 (M+Na); MS (ES-): 529.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.04 %。 流程375
製備(S)-(1-(7-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(375a)
化合物375a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(344c ) (150 mg，0.27 mmol)、1-甲基哌嗪(0.15 mL，1.35 mmol)、二環己基(2',6'-二異丙氧基聯苯-2-基)膦(RuPhos，76 mg，0.16 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(130 mg，1.35 mmol)及Pd2 (dba)3 (74 mg，0.08 mmol)在甲苯(25 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 375a ) (75 mg，48%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) (兩種旋轉異構體之混合物) δ 12.24及12.20 (2s, 1H), 11.63 - 11.49及11.49 - 11.39 (2m,1H), 8.66 - 8.52 (m, 2H), 8.05及8.04 (2s, 1H), 7.70及7.63 (2s, 1H), 7.21及7.18 (2s, 1H), 7.02及6.97 (2s, 2H), 4.63 - 4.47 (m, 1H), 4.09及4.04 (2s, 2H), 3.97 - 3.49 (m, 15H), 3.48 - 3.35 (m, 2H), 3.26 - 3.06 (m, 2H), 2.81及2.80 2(s, 3H), 2.22 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 575.5 (M+1); MS (ES-): 609.5 (M+Cl)。HPLC純度：94.27 %。 流程376
製備(S)-(1-(7-(哌嗪-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(376b)
步驟1：製備(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(376a )
化合物376a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(344c ) (260 mg，0.47 mmol)、哌嗪-1-甲酸第三丁酯(0.44 g，2.34 mmol)、二環己基(2',6'-二異丙氧基聯苯-2-基)膦(RuPhos，130 mg，0.28 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(230 mg，2.34 mmol)及Pd2 (dba)3 (130 mg，0.14 mmol)在甲苯(25 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(376a )(60 mg，20%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 8.33 (d,J = 9.1 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.18 - 7.85 (m, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.92 - 6.84 (m, 1H), 6.70 - 6.57 (m, 1H), 5.12 - 4.79 (m, 1H), 4.65 - 4.11 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.54 - 3.38 (m, 4H), 3.33 - 3.24 (m, 4H), 2.16 - 1.74 (m, 4H), 1.43 (s, 9H); MS (ES+): 661.5 (M+1); MS (ES-): 695.5 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-(哌嗪-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(376b)
化合物376b 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (5 mL)中使用三氟乙酸(0.29 mL，3.78 mmol)水解(S)-4-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(376a ) (50 mg，0.08 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(哌嗪-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 376b ) (0.03 g，68%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (旋轉異構體之混合物) δ 12.11 (2s, 1H), 11.36 (2s, 1H), 9.73 - 9.37 (m, 1H), 8.61 - 8.49 (m, 1H), 8.43 (2s, 1H), 8.14 - 7.93 (m, 1H), 7.72 - 7.42 (m, 1H), 7.22 - 7.12 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.67 - 4.47 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.76 - 3.69 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.67 - 3.44 (m, 4H), 3.35 - 3.06 (m, 4H), 2.29 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 561.5 (M+1); MS (ES-): 595.5 (M+Cl)。HPLC純度：86.81 %。 流程377
製備(S)-(1-(1,3-二甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(377b)
步驟1：製備(S)-(1-(6-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(377a )
化合物377a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-1,3-二甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(373a ) (400 mg，1.84 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(180 mg，1.84 mmol)及DIPEA (0.97 mL，5.53 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(6-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(377a ) (490 mg，94%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.94 - 4.73 (m, 1H), 4.56 - 4.33 (m, 1H), 3.85 - 3.78 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.76 - 3.68 (m, 1H), 3.67 - 3.45 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.17 - 1.78 (m, 4H); MS (ES+): 282.2 & 284.2 (M+1); MS (ES-): 316.2 & 318.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(1,3-二甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(377b)
化合物377b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(6-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(377a ) (300 mg，1.07 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (270 mg，1.07 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，310 mg，0.64 mmol)、碳酸銫(1040 mg，3.19 mmol)及Pd2 (dba)3 (290 mg，0.32 mmol)在t -BuOH/甲苯(30 mL，2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1,3-二甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 377b ) (0.18 g，33%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.11 (s, 2H), 4.74 - 4.58 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.87 - 3.80 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.77 - 3.74 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.48 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.22 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 495.4 (M+1), 517.4 (M+Na); MS (ES-): 529.4 (M+Cl)。HPLC純度：98.48 %。流程378
製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(378c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(378b )
化合物378b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[3,4-d]嘧啶(378a ) (500 mg，2.5 mmol；CAS# 908240-50-6)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (1.31 mL，7.5 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (623 mg，2.5 mmol)來製備。由此在過濾後得到呈棕色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(378b ) (784 mg，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.58 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.68 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 8.62 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 6.94 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+): 435.2 (M+Na); (ES-): 411.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(378c )
化合物378c 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(378b ) (200 mg，0.48 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.19 mL，1.94 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.51 mL，2.91 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色HCl固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(378c ) (162 mg，70%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , 旋轉異構體之混合物) δ 9.55 (2s, 1H), 8.70 - 8.58 (m, 2H), 8.56 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.02 (s, 2H), 6.97 (s, 1H), 4.82 - 4.49 (m, 1H), 4.11 - 3.91 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.63 - 3.44 (m, 1H), 2.34 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 478.4 (M+1); MS (ES-): 476.4 (M-1), 512.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.94 %。 流程379
製備(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(379a )
化合物379a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-胺(378b ) (200 mg，0.48 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(221 mg，1.94 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.51 mL，2.91 mmol)在NMP (3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色HCl固體狀之(S)-1-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(379a ) (155 mg，65%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.61 (s, 1H), 8.69 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 8.64 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.74 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 4.24 - 4.02 (m, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.89 - 3.72 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.36 - 2.00 (m, 4H); MS (ES+): 491.4 (M+1), 513.3 (M+Na); MS (ES-): 489.4 (M-1), 525.4 (M+Cl); HPLC純度：93.57 %。 流程380
製備(S)-(5-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基)甲醇(380d)
步驟1：製備(S)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基甲醇(380b)
化合物380b 係根據流程325之步驟1及步驟2中所報道之程序，由(S)-5-(第三丁氧基羰基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-甲酸(380a ) (500 mg，2.07 mmol；CAS # 1129634-44-1)製備。由此得到呈透明油狀之(S)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基甲醇( 380b ) (488 mg，98%產率) TFA鹽。MS (ES+): 128.1 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(5-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基)甲醇(380c )
化合物380c 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (180 mg，0.96 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基甲醇( 380b ) (122 mg，0.96 mmol)及DIPEA (0.5 mL，2.88 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100%含0-60% EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(5-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基)甲醇(380c ) (81 mg，30%產率)；MS (ES-): 277.2 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(5-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基)甲醇(380d)
化合物380d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(5-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基)甲醇(380c ) (75 mg，0.27 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (67 mg，0.27 mmol，游離鹼)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，77 mg，0.16 mmol)、碳酸銫(263 mg，0.81 mmol)、Pd2 (dba)3 (74 mg，0.08 mmol)在t-BuOH/甲苯(30 mL，2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(5-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-氮雜螺[2.4]庚-6-基)甲醇( 380d ) (0.025 g，19%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.58 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.96 - 6.68 (m, 1H), 6.68 - 6.31 (m, 1H), 4.78 - 4.38 (m, 1H), 4.08 - 3.93 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 3.65 - 3.34 (m, 3H), 2.28 - 2.01 (m, 1H), 1.92 - 1.61 (m, 1H), 0.86 - 0.45 (m, 4H); MS (ES+): 492.4 (M+1), 514.5 (M+Na); MS (ES-): 526.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.29 %。 流程381
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(381b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(381a )
化合物381a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡啶并[3,4-d]嘧啶(378a ) (400 mg，1.84 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.2 mL，2.0 mmol)及DIPEA (1.05 mL，6.0 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(381a ) (451 mg，85%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.00 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.04 - 4.75 (m, 2H), 4.74 - 4.41 (m, 1H), 4.19 - 3.84 (m, 2H), 3.63 (m, 1H), 2.26 - 1.76 (m, 4H).MS (ES+): 265.2 (M+1); MS (ES-): 299.2 & 301.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(381b)
化合物381b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(381a ) (300 mg，1.13 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (282 mg，1.13 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，324 mg，0.68 mmol)、碳酸銫(1108 mg，3.4 mmol)及Pd2 (dba)3 (311 mg，0.34 mmol)在t -BuOH/甲苯(30 mL，2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 381b ) (102 mg，19%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.27 - 8.97 (m, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.56 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.08 (s, 2H), 5.08 - 4.58 (m, 1H), 4.34 - 4.01 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.81 - 3.71 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.69 - 3.57 (m, 1H), 2.36 - 1.64 (m, 4H); MS (ES+): 478.4 (M+1); MS (ES-): 512.4 (M+Cl)。HPLC純度：95.00%。 流程382
製備(R)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(382a )
化合物382a 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由7-溴-2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(344b ) (1.5 g，3.06 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(1.21 mL，12.23 mmol)及DIPEA (3.2 mL，18.34 mmol)在NMP (5 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[(矽膠，40 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，50 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(R)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(382a ) (820 mg，48%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.66 (bs, 1H), 11.82 (bs, 1H), 8.71 - 8.58 (m, 1H), 8.58 - 8.49 (m, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.69 - 7.47 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.73 - 4.47 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.84 - 3.78 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.67 - 3.60 (m, 1H), 3.59 - 3.43 (m, 2H), 2.26 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 555.3 & 557.2 (M+1)。HPLC純度：97.42%。 流程383
製備(R)-(1-(7-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(383a)
化合物383a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-(1-(7-溴-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(382a ) (150 mg，0.27 mmol)、1-甲基哌嗪(0.15 mL，1.35 mmol)、二環己基(2',6'-二異丙氧基聯苯-2-基)膦(RuPhos，76 mg，0.16 mmol)、2-甲基丙-2-醇鈉(130 mg，1.35 mmol)及Pd2 (dba)3 (74 mg，0.08 mmol)在甲苯(25 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(7-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 383a ) (24 mg，16%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.12 (s, 1H), 11.46 (s, 1H), 11.35 (s, 1H), 8.62 - 8.51 (m, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.71 - 7.47 (m, 1H), 7.20 (d,J = 9.2 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.73 - 4.38 (m, 1H), 4.16 - 3.99 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 4H), 3.62 - 3.46 (m, 4H), 3.40 (t,J = 13.0 Hz, 2H), 3.15 (q,J = 10.7 Hz, 2H), 2.81 (d,J = 4.5 Hz, 3H), 2.23 - 1.81 (m, 4H); MS (ES+): 575.5 (M+1); MS (ES-): 573.5 (M-1)。HPLC純度：97.91%。 流程384
製備(S)-(1-(6-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(384b )
步驟1：製備2-氯-6-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(384a )
化合物384a 係根據流程97之步驟3中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(97b ) (500 mg，1.07 mmol)、DIPEA (410 mg，3.21 mmol)及吡咯啶(380 mg，5.34 mmol)在DCM (15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-2%甲醇/DCM溶離)純化後得到呈棕色固體狀之2-氯-6-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(384a ) (230 mg，43%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.87 (2s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.88 (s, 2H), 6.93 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 2.61 - 2.53 (m, 2H), 1.79 - 1.55 (m, 4H), 1.34 - 1.15 (m, 4H); MS (ES+): 502.3 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(1-(6-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(384b )
化合物384b 係根據流程76之步驟2中所報道之程序，由2-氯-6-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(384a ) (250 mg，0.49 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(490 mg，4.85 mmol)在NMP (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟層析[矽膠，用0至8%甲醇/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(6-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(384b ) (140 mg，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.09 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 6.95 (s, 2H), 5.01 - 4.76 (m, 1H), 4.48 - 4.00 (m, 5H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 2.83 - 2.55 (m, 6H), 1.97 (m, 4H), 1.76 (m, 4H); MS (ES+): 566.5 (M+1); 588.4 (M+Na); MS (ES-): 600.4 (M+Cl)。 流程385
製備(S)-(1-(7-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(385c)
步驟1：製備(S)-4-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(385a)
化合物385a 係根據流程77之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(7-溴-2-氯喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 361a ) (500 mg，1.46 mmol)使用(1-(第三丁氧基羰基)-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)硼酸(331 mg，1.46 mmol)、雙(三苯基膦)二氯化鈀(II) (51 mg，0.073 mmol)及碳酸鈉(309 mg，2.92 mmol)在甲苯(15 mL)、EtOH (7 mL)及水(3 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯( 385a ) (520 mg，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.40 - 8.06 (m, 1H), 7.90 - 7.28 (m, 3H), 6.49 (s, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.25 - 3.85 (m, 3H), 3.81- 3.48 (m, 4H), 2.18 - 1.93 (m, 4H), 1.96 - 1.71 (m, 2H), 1.63 - 1.18 (m, 9H); MS (ES+): 445.4 (M+1), 467.3 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-4-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(385b)
化合物385b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-氯-4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)喹唑啉-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯( 385a ) (512 mg，1.15 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (358 mg，1.44 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，247 mg，0.52 mmol)、碳酸銫(1124 mg，3.45 mmol)、Pd2 (dba)3 (158 mg，0.17 mmol)在二噁烷(15 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]、逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈淡黃色固體狀之(S)-4-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯( 385b ) (400 mg，53%產率)，其原樣用於下一步驟中。
步驟3：製備(S)-(1-(7-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(385c)
化合物385c 係根據流程122中所報道之程序，藉由在DCM (10 mL)中使用三氟乙酸(0.35 mL，4.56 mmol)水解(S)-4-(4-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸第三丁酯( 385b ) (300 mg，0.46 mmol)來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用0-100%乙腈/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 385c ) (108 mg，43%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.50 - 12.56 (m, 1H, D2 O可交換), 10.86 - 10.36 (m, 1H, D2 O可交換), 9.33 (s, 2H, D2O可交換), 8.39 - 8.22 (m, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.64 - 7.41 (m, 2H), 6.98 (s, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.49 - 5.02 (m, 1H, D2 O可交換), 5.02 - 4.59 (m, 1H), 4.33 - 4.01 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.89 - 3.72 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.55 - 3.27 (m, 4H), 2.74 (m, 2H), 2.06 (m, 4H); MS (ES+): 558.4 (M+1), (ES-): 592.4 (M+Cl); HPLC純度：96.31%。 流程386
製備(S)-(1-(9-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(386c )
步驟1：製備2-氯-9-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-9H-嘌呤-6-胺(386b )
化合物386b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,6-二氯-9-甲基-9H-嘌呤(386a ) (500 mg，2.46 mmol；CAS# 2382-10-7)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (1.29 mL，7.39 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.61 g，2.46 mmol)來製備。由此在過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-9-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-9H-嘌呤-6-胺(386b ) (0.67 g，65%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.57 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.18 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.75 (s, 3H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 438.3, 440.2 (M+Na)。
步驟2：製備(S)-(1-(9-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(386c )
化合物386c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-9-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-9H-嘌呤-6-胺(386b ) (0.2 g，0.48 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.19 mL，1.92 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.5 mL，2.89 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色HCl鹽形式之(S)-(1-(9-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(386c ) (0.13 g，57%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.98 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.72 - 8.59 (m, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.43 - 4.22 (m, 1H), 4.22 - 4.02 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.78 (s, 3H), 3.75 - 3.71 (m, 1H), 3.68 (s, 4H), 3.65 - 3.25 (m, 1H), 2.20 - 1.71 (m, 4H)。MS (ES+): 481.4 (M+1), 503.4 (M+Na)。HPLC純度：98.88%。 流程387
製備(S)-1-(9-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(387a )
化合物387a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-9-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-9H-嘌呤-6-胺(386b ) (0.2 g，0.48 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.22 g，1.924 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.5 mL，2.89 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-1-(9-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(387a ) (0.13 g，56%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (兩種旋轉異構體之混合物) δ 11.12及10.94 (2s, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.10及7.98 (2s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.50 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.11 - 6.88 (m, 2H), 4.46 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.93及3.88 (2s, 6H), 3.85 (m 1H), 3.81及3.75 (2s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.65 - 3.50 (m, 1H), 2.35 - 1.81 (m, 4H)。MS (ES+): 494.4 (M+1); MS (ES-): 528.4 (M+Cl)。HPLC純度：99.17%。 流程388
製備(S)-(1-(9-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(388b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-9-甲基-9H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(388a )
化合物388a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,6-二氯-9-甲基-9H-嘌呤(386a ) (400 mg，1.97 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.2 mL，2.0 mmol)、DIPEA (1.03 mL，5.91 mmol)且在室溫下攪拌2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-9-甲基-9H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(388a ) (0.40 g，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.11 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.98 - 4.88 (m, 1H), 4.88 - 4.76 (m, 1H), 4.36 - 4.24 (m, 1H), 4.14 - 3.95 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.58 (m, 1H), 3.52 - 3.40 (m, 1H), 2.29 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 268.2, 270.2 (M+1); MS (ES-): 302.2, 304.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(9-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(388b)
化合物388b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-9-甲基-9H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(388a ) (0.25 g，0.93 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.23 g，0.93 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.27 g，0.56 mmol)、碳酸銫(0.91 g，2.80 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.26 g，0.28 mmol)在t -BuOH/甲苯(15 mL，2:1)中且在110℃下加熱20小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(9-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-9H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 388b ) (0.13 g，29%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.44 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 9.20 - 8.89 (m, 1H), 8.28 - 8.11 (m, 1H), 7.98 - 7.86 (m, 1H), 7.10 (s, 2H), 5.18 - 4.85 (m, 1H), 4.62 - 4.43 (m, 1H), 4.14 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.89 (m, 7H), 3.73 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.53 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 2.22 - 1.85 (m, 4H)。MS (ES+): 481.5 (M+1), 503.4 (M+Na); MS (ES-): 515.4 (M+Cl)。HPLC純度：98.32%。 流程389
製備(S)-(1-(7-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(389c)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-甲基-7H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(389b )
化合物389b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,6-二氯-7-甲基-7H-嘌呤(389a ) (400 mg，1.97 mmol；CAS#: 2273-93-0)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.19 mL，1.97 mmol)、DIPEA (1.03 mL，5.91 mmol)且在室溫下攪拌2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7-甲基-7H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(389b ) (0.41 g，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.30 (s, 1H), 4.71 (dd, J = 6.7, 5.3 Hz, 1H), 4.48 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.73 (dd, J = 8.8, 5.5 Hz, 2H), 3.67 - 3.47 (m, 2H), 2.10 - 1.67 (m, 4H).; MS (ES+): 268.2, 270.2 (M+1); MS (ES-): 302.2, 304.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(389c)
化合物389c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-甲基-7H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(389b ) (0.25 g，0.93 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.23 g，0.93 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.13 g，0.28 mmol)、碳酸銫(0.91 g，2.80 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.13 g，0.14 mmol)在t -BuOH/甲苯(15 mL，2:1)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-嘌呤-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 389c ) (0.10 g，21%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.43 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.11 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 4.81 - 4.57 (m, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.89 (m, 7H), 3.85 - 3.78 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 2.18 - 1.71 (m, 4H)。MS (ES+): 481.4 (M+1), 503.3 (M+Na); MS (ES-): 515.4 (M+Cl)。HPLC純度：97.84%。流程390
製備(S)-1-(7-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(390b )
步驟1：製備2-氯-7-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-嘌呤-6-胺(390a )
化合物390a 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,6-二氯-7-甲基-7H-嘌呤(389a ) (500 mg，2.46 mmol；CAS# 2382-10-7)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (1.29 mL，7.39 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.61 g，2.46 mmol)且在90℃下加熱2小時來製備。由此在過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-7-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-嘌呤-6-胺(390a ) (0.50 g，49%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.44 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 4.15 (s, 3H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 416.3, 418.2 (M+1); MS (ES-): 414.3 (M-1), 450.3, 452.3 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-1-(7-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(390b )
化合物390b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-嘌呤-6-胺(390a ) (0.2 g，0.48 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.22 g，1.92 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.5 mL，2.89 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈棕色固體狀之(S)-1-(7-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-嘌呤-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(390b ) (0.02 g，9%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (兩種旋轉異構體之混合物): δ 10.01 (s, 1H), 8.82及8.74 (2s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.32及7.20 (2s, 1H), 7.13及7.05 (2s, 1H), 4.58 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.26 (s, 3H), 3.91 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.61 - 3.32 (m, 1H), 3.28 - 3.00 (m, 1H), 2.34 - 1.71 (m, 4H)。MS (ES+): 494.4 (M+1), 516.3 (M+Na); MS (ES-): 492.3 (M-1), 528.4 (M+Cl)。HPLC純度：94.48%。 流程391
製備(S)-(1-(7-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(391c )
步驟1：製備2-氯-7-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(391b )
化合物391b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-甲基喹唑啉(391a ) (0.13 g，0.59 mmol；CAS# 25171-19-1)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.31 mL，1.76 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.15 g，0.59 mmol)且在90℃下加熱1小時來製備。由此在過濾後得到呈白色固體狀之2-氯-7-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(391b ) (0.18 g，72%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 11.01 (s, 1H), 8.63 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 8.5, 1.7 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 2.49 (s, 3H)。MS (ES+): 426.3 (M+1), 448.3 & 450.2 (M+Na); MS (ES-): 424.3 & 426.3 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(391c )
化合物391c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(391b ) (0.09 g，0.21 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.08 mL，0.85 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.22 mL，1.27 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(391c ) (0.08 g，78%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (兩種旋轉異構體之混合物) δ 12.36及12.30 (2s, 1H), 11.69及11.59 (2s, 1H), 8.65 - 8.55 (m, 1H), 8.52 (m, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.94 - 7.88 (m, 1H), 7.32 - 7.21 (m, 1H), 7.01及6.94 (2s, 2H), 6.02 (bs, 2 H), 4.70 - 4.47 (m, 1H), 3.88 (m, 8H), 3.68 (m, 4H), 3.63 - 3.45 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.27 - 1.84 (m, 4H)。MS (ES+): 491.5 (M+1); MS (ES-): 489.4 (M-1), 525.5 (M+Cl)。HPLC純度：99.54%。 流程392
製備(S)-1-(7-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(392a )
化合物392a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(391b ) (0.09 g，0.21 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.10 g，0.85 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.22 mL，1.27 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-1-(7-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(392a )(0.04 g，37%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.35 (s, 1H), 11.59 (s, 1H), 8.65 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.72 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.15 - 3.99 (m, 1H), 3.94 (s, 6H), 3.78 - 3.72 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.38 - 1.92 (m, 4H). MS (ES+): 504.4 (M+1); MS (ES-): 538.4 (M+Cl)。HPLC純度：89.25%。 流程393
製備(S)-(1-(7-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(393b)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-甲基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(393a )
化合物393a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-甲基喹唑啉(391a ) (0.13 g，0.59 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.06 mL，0.59 mmol)、DIPEA (0.31 mL，1.76 mmol)且在室溫下攪拌2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-7-甲基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(393a ) (0.08 g，50%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.16 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 4.84 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.64 - 4.46 (m, 1H), 4.01 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.96 - 3.84 (m, 1H), 3.71 - 3.55 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.17 - 1.71 (m, 4H). MS (ES+): 278.2 & 280.2 (M+1); MS (ES-): 312.4 & 314.4 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(393b)
化合物393b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-甲基喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(393a ) (0.08 g，0.29 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.07 g，0.29 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.04 g，0.09 mmol)、碳酸銫(0.28 g，0.86 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.04 g，0.04 mmol)在t -BuOH/甲苯(15 mL，2:1)中且在110℃下加熱15分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(7-甲基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 393b ) (0.02 g，16%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 13.05 (s, 1H), 10.40 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.18 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.26 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.99 - 4.65 (m, 1H), 4.27 - 3.99 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.58 - 3.27 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.29 - 1.73 (m, 4H)。MS (ES+): 491.5 (M+1); MS (ES-): 525.4 (M+Cl)。HPLC純度：93.25%。 流程394
製備((1R,3S,5R)-2-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(394b)
步驟1：製備((1R,3S,5R)-2-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(394a)
化合物394a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶(271a ) (0.20 g，1.06 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基甲醇( 325c ) (0.24 g，1.06 mmol)、DIPEA (0.55 mL，3.17 mmol)且在室溫下攪拌17小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100%含0-80% EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈半固體狀之((1R,3S,5R)-2-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇( 394a ) (0.11 g，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.87 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 4.34 - 4.25 (m, 1H), 3.59 - 3.49 (m, 2H), 3.43 - 3.33 (m, 1H), 3.18 (七重峰,J = 7.9, 7.4 Hz, 2H), 2.71 (t,J = 7.9 Hz, 2H), 2.25 - 2.15 (m, 1H), 1.96 (p,J = 7.6 Hz, 2H), 1.87 - 1.69 (m, 2H), 0.96 - 0.86 (m, 1H), 0.52 - 0.45 (m, 1H); MS (ES+): 288.2 (M+Na); MS (ES-): 264.2 & 266.2 (M-1)。
步驟2：製備((1R,3S,5R)-2-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(394b)
化合物394b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((1R,3S,5R)-2-(2-氯-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇( 394a ) (0.1 g，0.38 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.09 g，0.38 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.11 g，0.23 mmol)、碳酸銫(0.37 g，1.13 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.10 g，0.11 mmol)在t-BuOH/甲苯(20 mL，3:1)中在110℃下加熱20小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA-80/CH2 Cl2 溶離]，隨後逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及含0.1% HCl之水溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((1R,3S,5R)-2-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇( 394b ) (0.03 g，14%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.46 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.78 - 4.57 (m, 1H), 3.86 (s, 6H), 3.81 - 3.72 (m, 1H), 3.72 - 3.62 (m, 4H), 3.58 - 3.42 (m, 1H), 3.32 - 3.12 (m, 2H), 2.90 (t,J = 8.0 Hz, 2H), 2.31 - 2.15 (m, 1H), 2.13 - 1.97 (m, 2H), 1.97 - 1.78 (m, 2H), 1.19 - 0.95 (m, 1H), 0.74 - 0.63 (m, 1H); MS (ES+): 479.5 (M+1); MS (ES-): 477.5 (M-1), 513.6 (M+Cl)。HPLC純度：95.09%。流程395
製備(S)-1-(5-氰基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(395d )
步驟1：製備2,4-二氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395b )
在室溫下，向2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395a ) (0.45 g，2.11 mmol，CAS# 1379367-43-7)、甲苯磺醯氯(0.44 g，2.32 mmol)、硫酸氫四丁基銨(0.04 g，0.11 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液中添加氫氧化鈉(50% aq，0.40 mL，4.96 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，用水及DCM稀釋。分離有機層，乾燥，過濾且真空蒸發，獲得呈白色固體狀之2,4-二氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395b ) (0.62 g，79%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.20 (s, 1H), 8.10 - 8.06 (m, 2H), 7.55 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 2.41 (s, 3H)。
步驟2：製備2-氯-7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395c )
化合物395c 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395b ) (0.32 g，0.86 mmol)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (0.45 mL，2.57 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.21 g，0.86 mmol)且在90℃下加熱1小時來製備。由此在過濾後得到呈棕色固體狀之2-氯-7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395c ) (0.47 g，94%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.76 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.06 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.80 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.91 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.86 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 2.40 (s, 3H)。
步驟3：製備(S)-1-(5-氰基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(395d )
化合物395d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395c ) (0.23 g，0.40 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.18 g，1.59 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.42 mL，2.38 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(5-氰基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(395d )(0.05 g，23%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 -D2 O): (兩種旋轉異構體之混合物) δ 9.32及9.19 (2s, 1H), 8.14及8.05 (2s, 1H), 7.94及7.89 (2d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.20及7.12 (2s, 2H), 4.61 - 4.48及4.47 - 4.29 (m, 1H), 3.90及3.83 (2s, 6H), 3.80 - 3.73 (m, 1H), 3.69及3.68 (2s, 3H), 3.57 - 3.39 (m, 1H), 2.33 - 1.80 (m, 4H)。MS (ES+): 504.4 (M+1), 526.4 (M+Na); MS (ES-): 502.4 (M-1), 538.4 (M+Cl)。 流程396
製備((1R,3S,5R)-2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(396a )
化合物396a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-4-胺(289a ) (0.1 g，0.25 mmol)、(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基甲醇(325c ) (0.11 g，1.00 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.26 mL，1.49 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈棕色固體狀之((1R,3S,5R)-2-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7-二氫-5H-環戊并[d]嘧啶-2-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)甲醇(396a ) (0.02 g，13%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.86 (s, 1H), 10.85 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 6.93 (s, 2H), 4.63 - 4.41 (m, 1H), 3.92 - 3.86 (m, 1H), 3.85 (s, 7H), 3.67 (s, 4H), 3.64 - 3.48 (m, 1H), 2.97 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.81 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.26 - 1.77 (m, 5H), 1.13 - 0.95 (m, 1H), 0.68 - 0.40 (m, 1H)。MS (ES+): 479.4 (M+1); MS (ES-): 513.4 (M+Cl)。 流程397
製備(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(397a )
化合物397a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-甲苯磺醯基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(395c ) (0.23 g，0.40 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.16 mL，1.59 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.42 mL，2.38 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化，隨後使用逆相急驟管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之(S)-2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(397a ) (0.02 g，8%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 -D2 O): δ 12.39 - 12.19 (m, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.88 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.41 - 4.02 (m, 1H), 3.96 - 3.80 (m, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.59 - 3.25 (m, 1H), 2.14 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES+): 491.2 (M+1); MS (ES-): 489.4 (M-1)。HPLC純度：94.55%。 流程398
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7,8,9-四氫-5H-環庚并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(398c)
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-6,7,8,9-四氫-5H-環庚并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(398b )
化合物398b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-6,7,8,9-四氫-5H-環庚并[d]嘧啶(398a ) (0.12 g，0.55 mmol；CAS#: 76780-96-6)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.06 mL，0.55 mmol)、DIPEA (0.29 mL，1.66 mmol)且在室溫下攪拌2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用DCM及甲醇(0至50%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氯-6,7,8,9-四氫-5H-環庚并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(398b ) (0.07 g，46%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 -D2 O): δ 4.35 - 4.21 (m, 1H), 3.73 - 3.58 (m, 1H), 3.58 - 3.49 (m, 1H), 3.44 - 3.30 (m, 2H), 2.90 - 2.54 (m, 4H), 2.06 - 1.38 (m, 10H)。MS (ES+): 282.2 & 284.2 (M+1); MS (ES-): 316.3 & 318.2 (M+Cl)。
步驟2：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7,8,9-四氫-5H-環庚并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(398c)
化合物398c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-6,7,8,9-四氫-5H-環庚并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(398b ) (0.07 g，0.25 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.06 g，0.25 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.07 g，0.15 mmol)、碳酸銫(0.24 g，0.75 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.07 g，0.08 mmol)在t -BuOH/甲苯(15 mL，2:1)中且在110℃下加熱15分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-6,7,8,9-四氫-5H-環庚并[d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 398c ) (0.02 g，13%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 -D2 O): δ 13.27 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.95 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 4.77 - 4.46 (m, 1H), 3.87 (m, 6H), 3.81 - 3.71 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.60 - 3.44 (m, 2H), 2.98 - 2.69 (m, 4H), 2.16 - 1.48 (m, 10H)。MS (ES+): 495.5 (M+1); MS (ES-): 529.5 (M+Cl)。HPLC純度：91.95%。流程399
製備(S)-(1-(7-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(399f )
步驟1：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲酸乙酯(399b )
化合物399b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯喹唑啉-7-甲酸乙酯(399a ) (4.0 g，14.75 mmol；CAS# 864291-31-6)在2-丙醇(80 mL)中使用DIPEA (5.71 mL，44.25 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (3.67 g，14.75 mmol)且在室溫下攪拌2小時來製備。由此在過濾後得到呈棕色固體狀之2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲酸乙酯(399b ) (7.0 g，98 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.38 (s, 1H), 8.90 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 8.22 (dd,J = 13.0, 1.6 Hz, 1H), 8.17 - 7.85 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 4.52 - 4.14 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 1.58 - 1.21 (m, 3H); MS (ES+): 484.1(M+1)。
步驟2：製備(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)甲醇(399c )
在0℃下，向2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-甲酸乙酯(399b ) (7.0 g，14.46 mmol)於THF (420 mL)中之溶液中添加LiBH4 (0.78 g，36.16 mmol)。反應混合物在90℃下加熱6小時，冷卻至室溫且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用(0%-10%) MeOH/DCM溶離]純化，得到呈灰白色固體狀之(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)甲醇(399c ) (2.5 g，39%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.03 (s, 1H), 8.69 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 8.22 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 - 7.46 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 5.51 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.69 (d,J = 5.9 Hz, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H); MS (ES+): 442.1 (M+1); MS (ES-): 440.0 (M-1)。
步驟3：製備2-氯-7-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(399d )
在室溫下，向(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-7-基)甲醇(399c ) (1.0 g，2.26 mmol)於N ,N ꞌ -二甲基乙醯胺(DMAc) (20.0 mL)中之攪拌溶液中添加五氯化磷(0.706 g，3.39 mmol)，且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入水(600 mL)中且用乙酸乙酯(2×50 mL)萃取水相。過濾合併之有機相且在減壓下濃縮，得到2-氯-7-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(399d ) (1.04 g)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。
步驟4：製備2-氯-7-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(399e )
在室溫下，向2-氯-7-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(399d ) (1.04 g，2.25 mmol)於DMF (15.0 mL)中之攪拌溶液中添加TEA (6.65 mL)及吡咯啶(0.24 g，3.38 mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌3小時且倒入水(200 mL)中。用乙酸乙酯(2×200 mL)萃取水相。乾燥合併之有機相，過濾且在減壓下濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用MeOH/DCM (0%至10%)溶離]純化，得到呈淺棕色固體狀之2-氯-7-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(399e )(230 mg，22 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 8.71 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 8.22 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.64 - 7.53 (m, 2H), 6.94 (s, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.58 (m, 3H), 2.20 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 0.86 (s, 4H); MS (ES+): 495.0 (M+1); MS (ES-): 493.2 (M-1)。
步驟5：製備(S)-(1-(7-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(399f )
化合物399f係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-4-胺(399e ) (0.23 g，0.464 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.47 g，4.64 mmol)在NMP (11.5 mL)中且在150℃下加熱16小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析(矽膠，用0至10% MeOH/CH2 Cl2 溶離)純化後得到呈棕色固體狀之(S)-(1-(7-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)喹唑啉-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(399f ) (200 mg，77 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.71 (s, 1H), 12.11 - 11.63 (m, 2H), 8.85 - 8.71 (m, 1H), 8.59 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.33 - 8.20 (m, 1H), 8.11 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.76 - 4.55 (m, 1H), 4.51 (m, 2H), 4.12 - 3.78 (m, 7H), 3.68 (s, 3H), 3.61 - 3.45 (m, 1H), 3.45 - 3.28 (m, 2H), 3.17 - 2.99 (m, 2H), 2.79 - 2.65 (m, 1H), 2.27 - 1.60 (m, 8H); MS (ES+): 560.6 (M+1); MS (ES-): 594.6 (M+Cl)。 流程400
製備((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(400c )及(S)-(1-(3-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(400d )
步驟1：製備6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(400b )
化合物400b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(400a ) (0.3 g，1.05 mmol；CAS# 1346447-97-9，根據由Gray, Nathanael S.及Zhou, Wenjun在PCT國際申請案2011140338中所報道之程序製備)在2-丙醇(15 mL)中使用DIPEA (0.55 mL，3.13 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.29 g，1.15 mmol)且在90℃下加熱17小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈橙色固體狀之6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(400b ) (0.40 g，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.65 (s, 1H), 8.24 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.94 (s, 2H), 5.90 - 5.54 (m, 1H), 3.98 - 3.89 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.67 - 3.61 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.46 - 2.24 (m, 1H), 2.08 - 1.42 (m, 5H)。
步驟2：製備((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(400c )
化合物400c 係根據流程2中所報道之程序，由6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(400b ) (0.2 g，0.40 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.16 mL，1.60 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.42 mL，2.40 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(400c ) (0.09 g，38%產率)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.71 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.11 - 7.84 (m, 1H), 6.96 (s, 2H), 5.69 - 5.46 (m, 1H), 4.93 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.51 - 4.31 (m, 1H), 4.30 - 4.06 (m, 1H), 3.98 - 3.92 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.83 - 3.70 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.63 - 3.39 (m, 4H), 2.57 (s, 3H), 2.47 - 2.28 (m, 1H), 2.11 - 1.42 (m, 8H)。MS (ES+): 565.5 (M+1); MS (ES-): 563.6 (M-1)。
步驟3：製備(S)-(1-(3-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(400d )
向((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 400c ) (0.09 g，0.16 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加鹽酸(3 M於MeOH中) (1.59 mL，4.78 mmol)且在90℃下加熱2小時。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯萃取且真空濃縮，得到粗產物。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析(C18，24 g)用乙腈及0.1% HCl水溶離純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(3-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(400d )(0.06 g，81%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.33 (s, 1H), 10.17 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.02 (s, 2H), 4.60 - 4.27 (m, 1H), 3.97 - 3.91 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.84 - 3.71 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 3.57 - 3.41 (m, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.21 - 1.78 (m, 4H)。MS (ES+): 481.4 (M+1); MS (ES-): 515.5 (M+Cl) HPLC純度：94.47%。 流程401
製備(2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(401a )及(S)-1-(3-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(401b )
步驟1：製備(2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(401a )
化合物401a 係根據流程2中所報道之程序，由6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(400b ) (0.2 g，0.40 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(0.18 g，1.60 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.42 mL，2.40 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱18小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至50% DMA 80/CH2 Cl2 溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(401a ) (0.10 g，42%產率)游離鹼；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): (兩種旋轉異構體之混合物) δ 8.77 (s, 1H), 8.35 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.27及8.21 (2s, 1H), 8.11及7.90 (2s, 1H), 7.49 - 7.23 (m, 1H), 7.19及7.14 (2s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 5.71 - 5.49 (m, 1H), 4.62 - 4.35 (m, 1H), 3.92 (s, 7H), 3.89 - 3.83 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.63 - 3.46 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.46 - 2.07 (m, 1H), 2.07 - 1.82 (m, 4H), 1.82 - 1.40 (m, 4H)。MS (ES+): 578.5 (M+1); MS (ES-): 576.6 (M-1)。HPLC純度：94.86%。
步驟2：製備(S)-1-(3-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(401b )
向(2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(401a )(0.05 g，0.09 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加鹽酸(3 M於MeOH中) (0.87 mL，2.60 mmol)且在90℃下加熱2小時。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯萃取且真空濃縮，得到粗產物。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析(C18，24 g)用乙腈及0.1% HCl水溶離純化，得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-甲基-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-甲醯胺(401b ) (0.02 g，56%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.14 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.18 (s, 2H), 4.66 (m, 1H), 3.93 (s, 6H), 3.89 - 3.83 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.63 - 3.49 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.38 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+): 494.4 (M+1), 516.4 (M+Na); MS (ES-): 528.5 (M+Cl)。 流程402
製備((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402b) 及(S)-(1-(3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402c )
步驟1：製備((2S)-1-(6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402a )
化合物402a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(400a ) (0.2 g，0.70 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.07 mL，0.70 mmol)、DIPEA (0.37 mL，2.09 mmol)且在室溫下攪拌2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用己烷及乙酸乙酯/甲醇(9:1) (0至80%)溶離]純化後得到呈白色固體狀之((2S)-1-(6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402a ) (0.17 g，69%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 5.77 - 5.65 (m, 1H), 4.91 - 4.75 (m, 1H), 4.55 - 4.40 (m, 1H), 3.99 - 3.48 (m, 7H), 2.57 (s, 3H), 2.46 - 2.23 (m, 1H), 2.18 - 1.41 (m, 8H)。MS (ES+): 352.3 & 354.3 (M+1); MS (ES-): 386.3 & 388.3 (M+Cl)。
步驟2：製備((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402b)
化合物402b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((2S)-1-(6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402a ) (0.17 g，0.47 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.12 g，0.47 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.13 g，0.28 mmol)、碳酸銫(0.46 g，1.41 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.13 g，0.14 mmol)在t -BuOH/甲苯(20 mL，3:1)中且在110℃下加熱15分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈黃色固體狀之((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 402b ) (0.10 g，37%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.16 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.10 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.96 (s, 2H), 5.88 - 5.65 (m, 1H), 4.97 - 4.73 (m, 1H), 4.72 - 4.50 (m, 1H), 3.99 - 3.93 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.84 - 3.69 (m, 5H), 3.68 (s, 3H), 3.63 - 3.41 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.47 - 2.18 (m, 1H), 2.17 - 1.36 (m, 8H)。MS (ES+): 565.5 (M+1), 587.5 (M+Na)。
步驟3：製備(S)-(1-(3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402c )
向((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇( 402b ) (0.06 g，0.11 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加鹽酸(3 M於MeOH中) (1.06 mL，3.19 mmol)且在90℃下加熱2小時。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯萃取且真空濃縮，得到粗產物。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析(C18，24 g)用乙腈及0.1% HCl水溶離純化及凍乾，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(402c ) (0.04 g，78%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.59 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.01 (s, 2H), 4.86 - 4.58 (m, 1H), 4.02 - 3.91 (m, 3H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.65 - 3.51 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.23 - 1.87 (m, 4H). MS (ES+): 481.4 (M+1); MS (ES-): 515.5 (M+Cl) HPLC純度：96.87%。 流程403
製備(S)-1-(6-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(403h )
步驟1：製備(2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(403a )
在室溫下，向2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-甲醛(70b ) (40.0 g，163.45 mmol)於THF (800 mL)中之溶液中小心地添加水(40.0 mL)及硼氫化鈉(7.4 g，195.76 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌3小時且用1 N HCl (500 mL)小心地淬滅。分離水層且用乙酸乙酯(3 × 600 mL)萃取。用鹽水(500 mL)洗滌合併之有機萃取物，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈淡黃色固體狀之(2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(403a ) (35.0 g，87 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.29 (t,J = 1.3 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.78 (d,J = 1.3 Hz, 2H), 2.66 (s, 3H); MS (ES+): 247.2 (M+1)。
步驟2：製備乙酸(2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403b )
在室溫下，向(2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(403a ) (30.0 g，121.5 mmol)於DCM (300.0 mL)中之攪拌溶液中添加吡啶(30.0 mL)及乙酸酐(90.0 mL)。反應混合物在相同溫度下攪拌3小時且用1 N HCl (300.0 mL)淬滅。分離水層且用DCM (3 × 200.0 mL)萃取。用鹽水洗滌合併之有機萃取物，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈淡黃色固體狀之乙酸(2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403b ) (28.0 g，80%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.58 (d,J = 1.0 Hz, 1H), 5.39 (d,J = 0.9 Hz, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.10 (s, 3H); MS (ESI) 289.2 (M+1), MS (ES+): 287.1 (M-1)。
步驟3：製備乙酸(2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403c )
在10℃下，向乙酸(2-氯-4-(甲硫基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403b ) (20.0 g，69.26 mmol)於DCM (400.0 mL)中之攪拌溶液中添加硫醯氯(56.08 g，415.53 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌2小時且藉由緩慢添加飽和碳酸氫鈉水溶液(500.0 mL)小心地淬滅。分離水層且用DCM (2 × 500.0 mL)萃取。用鹽水洗滌合併之有機萃取物，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈淺棕色固體狀之乙酸(2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403c ) (16.0 g，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.67 (d,J = 1.0 Hz, 1H), 5.43 (d,J = 1.0 Hz, 2H), 2.12 (s, 3H); MS (ES+): 277.0 (M+1)。
步驟4：製備乙酸(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403d )
化合物403d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由乙酸(2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403c ) (14.0 g，50.51 mmol)在2-丙醇(70 mL)中使用DIPEA (19.58 g，151.55 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (16.0 g，64.18 mmol)且在85℃下加熱16小時來製備。由此在過濾後得到呈灰白色固體狀之乙酸(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403d ) (9.0 g，37%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.03 (s, 1H), 8.19 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.89 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 5.33 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 2.11 (s, 3H); MS (ES+): 488.4 (M-1)。
步驟5：製備(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(403e )
在室溫下，向乙酸(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲酯(403d ) (9.0 g，18.36 mmol)於甲醇(50 mL)中之攪拌溶液中添加碳酸鉀(2.4 g，17.36 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌5小時且在真空下濃縮至乾。將所獲得之殘餘物溶解於DCM (250.0 mL)中且過濾。濾液用水(250 mL)稀釋且用DCM (3 × 300.0 mL)萃取。用鹽水洗滌合併之有機萃取物，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈淺棕色固體狀之(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(403e ) (5.0 g，61%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 8.18 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 2H), 7.82 (s, 1H), 6.92 (s, 2H), 5.81 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ESI) 448.1 (M+1), MS (ES+): 446.4 (M-1)。
步驟6：製備2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f )
在0℃下，向(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(403e ) (5.0 g，11.16 mmol)於DCM (500 mL)及DMF (50 mL)中之攪拌溶液中添加亞硫醯氯(6.63 g，55.80 mmol)且在室溫下攪拌2小時。真空濃縮反應混合物且用冰水(50.0 mL)濕磨所獲得之殘餘物。藉由過濾收集所獲得之固體，乾燥得到呈灰白色固體狀之2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f ) (4.5 g，87%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.12 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.03 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.03 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 466.0 (M-1)。
步驟7：製備2-氯-6-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403g )
在室溫下，向2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f ) (900 mg，1.92 mmol)於DCM (13.5 mL)中之攪拌溶液中添加吡咯啶(204 mg，2.88 mmol)、DIPEA (748 mg，5.76 mmol)且在室溫下攪拌5小時。將反應物質倒入水(25.0 mL)中且用DCM (3 × 50.0 mL)萃取。用鹽水洗滌合併之有機萃取物，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到粗產物。使用DCM及正己烷使粗物質結晶，得到呈棕色固體狀之2-氯-6-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403g ) (400 mg，42 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.86 (s, 1H), 8.31 - 8.13 (m, 1H), 7.98 - 7.69 (m, 1H), 6.92 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 3.88 (s, 9H), 3.76 - 3.61 (m, 4H), 1.74 (m, 4H), 1.23 (m, 2H); MS (ES+): 502.0 (M+1)。
步驟8：製備(S)-1-(6-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(403h )
化合物403h 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403g ) (800 mg，1.59 mmol)、(S )-吡咯啶-2-甲醯胺(911 mg，7.99 mmol)在NMP (16 mL)中且在150℃下加熱5小時來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(6-(吡咯啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(403h ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ; NMR顯示旋轉異構體) δ 11.33 (s, 2H), 8.53 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 4.60 (m, 3H), 3.94 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.44 (s, 2H), 3.11 (m, 4H), 2.30 (m, 2H), 2.11 - 1.83 (m, 8H); MS (ES+) 579.4 (M+1); MS (ES-) 613.4 (M+Cl)。 流程404
製備(S)-1-(6-((4-羥基哌啶-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(404b )
步驟1：製備1-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(404a )
化合物404a 係根據流程403之步驟7中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f ) (900 mg，1.92 mmol)在DCM (13.5 mL)中使用哌啶-4-醇(292 mg，2.89 mmol)及DIPEA (740 mg，5.78 mmol)來製備。由此在處理及使用DCM及正己烷結晶後得到呈棕色固體狀之1-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(404a ) (900 mg，88 %)；MS (ES+): 531.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-1-(6-((4-羥基哌啶-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(404b )
化合物404b 係根據流程2中所報道之程序，由1-((2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲基)哌啶-4-醇(404a ) (800 mg，1.50 mmol)、(S )-吡咯啶-2-甲醯胺(861 mg，7.54 mmol)在NMP (12 mL)中且在150℃下加熱5小時來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之化合物404b (430 mg，47.0%)游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(6-((4-羥基哌啶-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(404b ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ; NMR顯示旋轉異構體) δ 11.25 (s, 1H), 10.91 (s, 2H), 8.48 (s, 1H), 8.15 - 8.05 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.66 - 4.49 (m, 3H), 3.90 - 3.77 (m, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.65 - 2.87 (m, 6H), 2.35 - 1.56 (m, 8H); MS (ES+) 609.4 (M+1); MS (ES-) 643.5 (M+Cl)。 流程405
製備(S)-1-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(405b )
步驟1：製備2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(405a )
化合物405a 係根據流程403之步驟7中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f ) (1.0 g，2.14 mmol)在DCM (15 mL)中使用1-甲基哌嗪(322 mg，3.21 mmol)及DIPEA (830 mg，6.42 mmol)來製備。由此在處理及使用DCM及正己烷結晶後得到呈棕色固體狀之2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(405a ) (600 mg，53 %)；MS (ES+): 531.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-1-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(405b )
化合物405b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(405a ) (500 mg，0.943 mmol)、(S )-吡咯啶-2-甲醯胺(538 mg，4.71 mmol)在NMP (10 mL)中且在150℃下加熱5小時來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之化合物405b (430 mg，75 %)游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(405b ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ; NMR顯示旋轉異構體) δ 11.56 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 4.66 - 4.54 (m, 1H), 4.46 - 4.01 (m, 4H), 3.93 (s, 6H), 3.90 - 3.81 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.64 - 3.54 (m, 2H), 3.50 - 3.04 (m, 4H), 2.81 (s, 3H), 2.38 - 2.16 (m, 1H), 2.10 - 1.92 (m, 3H); MS (ES+) 608.4 (M+1); MS (ES-) 642.4 (M+Cl)。 流程406
製備(S)-1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(406b )
步驟1：製備2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(406a )
化合物406a 係根據流程403之步驟7中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f ) (0.9 g，1.92 mmol)在DCM (13.5 mL)中使用1-哌啶(246 mg，2.89 mmol)及DIPEA (748 mg，5.78 mmol)來製備。由此在處理及使用DCM及正己烷結晶後得到呈棕色固體狀之2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(406a ) (550 mg，55 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.86 (s, 1H), 8.27 - 8.10 (m, 1H), 8.04 - 7.75 (m, 1H), 7.01 - 6.77 (m, 3H), 3.88 (s, 6H), 3.83 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 2.43 (m, 4H), 1.47 (m, 6H); MS (ES+): 514.9.0 (M+1), 512.6(M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(406b )
化合物406b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-(哌啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(406a ) (550.0 mg，1.06 mmol)、(S )-吡咯啶-2-甲醯胺(609 mg，5.33 mmol)在NMP (10 mL)中且在150℃下加熱5小時來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之化合物406b (600 mg，95 %)游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(6-(哌啶-1-基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(406b ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 /D2O, NMR顯示旋轉異構體) δ 8.42 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.13 (s, 2H), 4.59 - 4.40 (m, 3H), 3.93 (s, 6H), 3.87 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.02 - 2.84 (m, 4H), 2.35 - 2.10 (m, 1H), 2.06 - 1.57 (m, 8H), 1.37 (m, 1H); MS (ES+): 593.4 (M+1); MS (ES- ): 627.5 (M+Cl)。 流程407
製備(S)-1-(6-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(407b )
步驟1：製備2-氯-6-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(407a )
化合物407a 係根據流程403之步驟7中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f ) (1.5 g，3.21 mmol)在DCM (30 mL)中使用嗎啉(420 mg，4.82 mmol)及DIPEA (1.24 g，9.63 mmol)來製備。由此在處理及使用DCM及正己烷結晶後得到呈棕色固體狀之2-氯-6-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(407a ) (1.5 g，90%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.88 (s, 1H), 8.19 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.92 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.74 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.60 (t,J = 4.5 Hz, 4H), 2.47 (s, 4H); MS (ES+): 518.8 (M+1), 516.0 (M-1)。
步驟2：製備(S)-1-(6-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(407b )
化合物407b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-(嗎啉基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(407a ) (1.0 g，1.93 mmol)、(S )-吡咯啶-2-甲醯胺(1.1 g，9.67 mmol)在NMP (10 mL)中且在150℃下加熱5小時來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之化合物407b (800 mg，70%)游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(6-(嗎啉基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(407b ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6/ D2 O; NMR顯示旋轉異構體) δ 8.59 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.68 - 4.53 (m, 3H), 4.08 - 3.94 (m, 6H), 3.92 (s, 6H), 3.88 - 3.82 (m, 3H), 3.45 - 3.00 (m, 4H), 2.28 (m, 1H), 2.04 (m, 3H); MS (ES+): 595.4 (M+1), 617.4 (M+Na); MS (ES-): 629.4 (M+Cl); HPLC純度：93.75%。 流程408
製備(S)-1-(6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(408b )
步驟1：製備2-氯-6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(408a )
化合物408a 係根據流程403之步驟7中所報道之程序，由2-氯-6-(氯甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(403f ) (800 mg，1.71 mmol)在DCM (12 mL)中使用1-(吡啶-2-基)哌嗪(420 mg，2.57 mmol)及DIPEA (0.665 g，5.14 mmol)來製備。由此在處理及使用DCM及正己烷結晶後得到呈棕色固體狀之2-氯-6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(408a ) (800 mg，79 %)；MS (ES+): 593.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-1-(6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(408b )
化合物408b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(408a ) (0.8 g，1.34 mmol)、(S )-吡咯啶-2-甲醯胺(0.769 g，6.74 mmol)在NMP (20 mL)中且在150℃下加熱5小時來製備。由此在處理後得到呈灰白色固體狀之化合物408b (400 mg，44 %)游離鹼。游離鹼藉由逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈灰白色固體狀之(S)-1-(6-((4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(408b ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6/ D2 O) δ 8.17 (s, 1H), 8.09 (dd,J = 5.1, 1.9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.51 (ddd,J = 8.9, 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.23 - 7.04 (m, 2H), 7.01 - 6.87 (m, 1H), 6.81 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 6.63 (dd,J = 7.1, 5.0 Hz, 1H), 4.55 - 4.33 (m, 1H), 4.02 - 3.76 (m, 6H), 3.67 (s, 6H), 3.46 (s, 3H), 3.45 - 3.34 (m, 6H), 2.22 (m, 1H), 1.93 (m, 3H); MS (ES+): 671.5 (M+1), 693.4 (M+Na); HPLC純度：97.69 %。 流程409
製備4-(哌啶-1-基)-7-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-2-胺(409e )
步驟1：製備2-氯-4-(哌啶-1-基)喹唑啉-7-甲酸乙酯(409a )
化合物409a 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯喹唑啉-7-甲酸乙酯(399a ) (8.0 g，29.5 mmol)於DCM (80 mL)中使用DIPEA (48.0 mL)、哌啶(3.01 g，35.41 mmol)且在室溫下攪拌4小時來製備。由此在處理後得到呈白色固體狀之2-氯-4-(哌啶-1-基)喹唑啉-7-甲酸乙酯(409a ) (8.0 g，85%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.12 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.07 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.92 (dt,J = 8.7, 1.3 Hz, 1H), 4.39 (q,J = 7.0 Hz, 2H), 3.82 (s, 4H), 1.73 (s, 6H), 1.42 - 1.30 (m, 3H) ; MS (ES+): 320.0 (M+1)。
步驟2：製備(2-氯-4-(哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)甲醇(409b )
化合物409b 係根據流程399之步驟2中所報道之程序，由2-氯-4-(哌啶-1-基)喹唑啉-7-甲酸乙酯(409a ) (8.0 g，25.15 mmol)在THF (400 mL)中使用LiBH4 (1.369 g，62.85mmol)在90℃下加熱6小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用(0%-10%) MeOH/DCM溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(2-氯-4-(哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)甲醇(409b ) (6.0 g，86%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 7.93 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.45 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 3.34 (s, 4H), 1.71 (s, 6H); MS (ES+): 278.0 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-7-(氯甲基)-4-(哌啶-1-基)喹唑啉(409c )
化合物409c 係根據流程399之步驟3中所報道之程序，由(2-氯-4-(哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)甲醇(409b ) (6.1 g，22.1 mmol)在N ,N ꞌ -二甲基乙醯胺(DMAc) (122 mL)中使用五氯化磷(6.90 g，33.14 mmol)在室溫下攪拌2小時來製備。由此在處理後得到2-氯-7-(氯甲基)-4-(哌啶-1-基)喹唑啉(409c )，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。
步驟4：製備2-氯-4-(哌啶-1-基)-7-(吡咯啶-1-基甲基)喹唑啉(409d )
化合物409d 係根據流程399之步驟3中所報道之程序，由2-氯-7-(氯甲基)-4-(哌啶-1-基)喹唑啉(409c ) 3.25 g，11.01 mmol)在DMF (48.75 mL)中使用TEA (19.5 mL)及吡咯啶(1.175 g，16.52 mmol)在室溫下攪拌3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用MeOH/DCM (0%至10%)溶離]純化後得到呈淺棕色固體狀之2-氯-4-(哌啶-1-基)-7-(吡咯啶-1-基甲基)喹唑啉(409d ) (2.4 g，66.11%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.91 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.47 (d,J = 9.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 4H), 3.72 (s, 2H), 2.47 (s, 4H), 1.71 (s, 10H) ; MS (ES+): 330.8 (M+1)。
步驟5：製備4-(哌啶-1-基)-7-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-2-胺(409e )
化合物409e 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯-4-(哌啶-1-基)-7-(吡咯啶-1-基甲基)喹唑啉(409d ) (1.5 g，4.53 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (1.35 g，5.43 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.9725 g，2.03 mmol)、碳酸銫(4.43 g，13.59 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.623 g，0.68 mmol)在1,4-二噁烷(11.5 mL)中且在85℃下加熱16小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用MeOH/DCM (0%至10%)溶離]純化後得到呈棕色固體狀之化合物409e (330 mg，13.38%)游離鹼。其藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]再純化且凍乾，得到呈白色固體狀之4-(哌啶-1-基)-7-(吡咯啶-1-基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)喹唑啉-2-胺(409e ) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 13.46 (s, 1H), 11.54 (s, 1H), 10.66 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.05 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.82 (s, 2H), 7.75 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.97 (s, 2H), 4.53 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.16 - 3.97 (m, 4H), 3.88 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.45 - 3.30 (m, 1H), 3.17 - 2.91 (m, 3H), 2.14 - 1.39 (m, 10H); MS (ES+): 544.5 (M+1), MS (ES-): 578.6 (M+Cl); HPLC純度：97.35 %。 流程410
製備(S)-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(410e )
步驟1：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸乙酯(410b )
化合物410b 係根據流程1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸乙酯(410a ) (1.0 g，3.86 mmol；CAS# 1363381-75-2)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.2 g，9.65 mmol)及1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (1.4 g，5.79 mmol)來製備。由此在處理及過濾後得到呈灰白色固體狀之2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸乙酯(410b ) (1.6 g，89 %)。
步驟2：製備2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(410c )
在室溫下，向2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸乙酯(410b ) (1.2 g，2.54 mmol)於MeOH (12.0 mL) THF (12.0 mL)中之溶液中添加NaOH (2.03 g，50.83 mmol)於水(12.0 mL)中之溶液。反應混合物在65℃下攪拌4小時，冷卻至室溫且倒入1N HCl水溶液(15.0 mL)中。藉由過濾收集所獲得之固體，真空乾燥，得到呈灰白色固體狀之2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(410c ) (0.9 g，79.78 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.66 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.16 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 6.95 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H)。
步驟3：製備(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(410d )
在室溫下，向2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-甲酸(410c ) (0.9 g，2.02 mmol)於DMF (9.0 mL)中之攪拌溶液中添加哌啶(0.340 g，4.04 mmol)、HATU (1.1 g，3.03 mmol)、DIPEA (0.65 g，5.05 mmol)且在室溫下攪拌14小時。將反應混合物倒入冰水(10.0 mL)中且藉由過濾收集所獲得之固體，真空乾燥，得到呈灰白色固體狀之(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(410d ) (0.8 g，77 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.22 (s, 1H), 8.00 - 7.87 (m, 2H), 7.56 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.94 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.60 (m, 4H), 1.61 (m, 6H)。
步驟4：製備(S)-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(410e )
化合物410e 係根據流程2中所報道之程序，由(2-氯-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(410d ) (0.8 g，1.56 mmol)、(S ) -吡咯啶-2-基甲醇(1.18 g，11.66 mmol)在NMP (10 mL)中在150℃下加熱14小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠，用(0-10%) MeOH/DCM溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)(哌啶-1-基)甲酮(410e ) (0.13 g，14.4 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.76 (s, 1H), 8.26 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.87 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.32 - 4.13 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.68 (s, 3H), 3.65 - 3.49 (m, 8H), 2.12 - 1.78 (m, 4H), 1.77 - 1.39 (m, 6H); MS (ES+): 577.4 (M+1); HPLC純度：97.75 %。 流程411
製備(S)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-羰基)吡咯啶-2-甲醯胺(411d )
步驟1：製備7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸甲酯(411b )
化合物411b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由7-溴苯并呋喃-5-甲酸甲酯(411a ) (1 g，3.92 mmol，CAS# 286836-79-1)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (0.98 g，3.92 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.75 g，1.57 mmol)、碳酸銫(2.55 g，7.84 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.72 g，0.78 mmol)在甲苯/t-BuOH (25 mL，比率：5:2))中且在90℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% TFA)溶離]純化後得到呈白色固體狀之7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸甲酯(411b ) (230 mg，13%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.66 - 8.53 (m, 2H), 8.12 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.81 - 7.73 (m, 2H), 7.61 (s, 1H, D2 O可交換), 7.07 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.00 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.82 (s, 3H), 3.69 (s, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.12; MS (ES+): 424.1 (M+1)。
步驟2：製備7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸(411c )
向7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸甲酯(411b ) (180 mg，0.43 mmol)於MeOH/THF (6 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(23 mg，0.55 mmol)於水(2.0 mL)中之溶液。所得混合物在室溫下攪拌12小時且真空濃縮。將所獲得之殘餘物酸化至PH~4且藉由過濾收集所獲得之固體，乾燥得到呈棕色固體狀之7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸(411c ) (80 mg，46%產率)，40 mg此化合物411c 藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]進一步純化，得到呈白色固體狀之7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸(411c ) (20 mg) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.86 (s, 1H, D2 O可交換), 9.28 (s, 1H), 8.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.13 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.84 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.58 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.13 (s, 2H), 7.10 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.71 (s, 3H); MS (ES+): 410.1 (M+1); (ES-) 408.2 (M-1)。
步驟3：製備(S)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-羰基)吡咯啶-2-甲醯胺(411d )
化合物411d 係根據流程410之步驟3中所報道之程序，由7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸(411c ) (30 mg，0.073 mmol)使用L-脯胺醯胺(10.04 mg，0.088 mmol)、HATU (33.4 mg，0.088 mmol)、DIEA (0.038 mL，0.22 mmol)在DMF (6 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至80% DMA80/DCM溶離]純化，隨後使用逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-羰基)吡咯啶-2-甲醯胺(411d ) (5 mg，13%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.85及9.52 (2s, 1H), 10.56及9.06 (2s, 1H, D2 O可交換), 8.22及8.11 2(d,J = 2.2 Hz, 1H), 8.05 - 7.95 (m, 1H), 7.52 - 7.33 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.21 - 7.09 (m, 2H), 7.07 - 6.86 (m, 3H), 4.42 - 4.29 (m, 1H), 3.88及3.79 (2s, 6H), 3.70及3.67 (2s, 3H), 3.63 - 3.44 (m, 2H), 2.26 - 2.04 (m, 1H), 1.91 - 1.69 (m, 3H); MS (ES+ ) 506.2 (M+1); (ES-) 504.3 (M-1)。 流程412
製備吡咯啶-1-基(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-基)甲酮(412a )
化合物412a 係根據流程410之步驟3中所報道之程序，由7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸(411c ) (100 mg，0.24 mmol)使用吡咯啶(20.85 mg，0.29 mmol)、HATU (111 mg，0.29 mmol)、DIEA (0.13 mL，0.73 mmol)在DMF (6 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至80% DMA80/DCM溶離]純化，隨後使用逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之吡咯啶-1-基(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-基)甲酮(412a ) (52 mg，46%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.23 (s, 1H), 8.87 (s, 1H, D2 O可交換), 8.10 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 1.7 Hz, 1H, , D2 O可交換), 7.33 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.12 (s, 3H), 7.01 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.47 - 3.40 (m, 4H), 1.92 - 1.72 (m, 4H); MS (ES+): 463.2 (M+1)。 流程413
製備(R)-(3-胺基哌啶-1-基)(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-基)甲酮(413b )
步驟1：製備(R)-(1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-羰基)哌啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(413a )
化合物413a 係根據流程410之步驟3中所報道之程序，由7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-甲酸(411c ) (150 mg，0.37 mmol)使用(R )-哌啶-3-基胺基甲酸第三丁酯(73.4 mg，0.37 mmol)、HATU (167 mg，0.44 mmol)、DIEA (0.19 mL，1.10 mmol)在DMF (6 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0至30% DMA80/DCM溶離]，隨後[矽膠(40 g)，用0至100%含EtOAc/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-羰基)哌啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(413a ) (142 mg，66%產率)；MS (ES+): 592.3 (M+1); (ES-): 590.5 (M-1)。
步驟2，製備(R)-(3-胺基哌啶-1-基)(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-基)甲酮(413b )
向(R)-(1-(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-羰基)哌啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(413a ) (140 mg，0.24 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中添加TFA (0.37 mL，4.73 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌2小時且真空濃縮至乾。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(R)-(3-胺基哌啶-1-基)(7-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)苯并呋喃-5-基)甲酮(413b ) (50 mg，43.0%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.97 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.20 (s, 3H, D2 O可交換), 8.10 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H, D2 O可交換), 7.19 (s, 1H), 7.16 - 7.11 (m, 1H), 7.08 (s, 2H), 7.01 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 4.36 - 4.16 (m, 1H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.25 - 2.98 (m, 4H), 2.06 - 1.93 (m, 1H), 1.80 - 1.68 (m, 1H), 1.65 - 1.40 (m, 2H); MS (ES+): 492.2 (M+1)。 流程414
製備(S)-(1-(4-((1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(414d )
步驟1：製備4-硝基-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑(414a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(3.57 g，22.58 mmol)與4-(三氟甲氧基)苯胺(4 g，22.58 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之4-硝基-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑(414a ) (3.5 g，57%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.05 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.51 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.00 - 7.97 (m, 1H), 7.97 - 7.93 (m, 1H), 7.67 - 7.64 (m, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H); MS (ES+): 274.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(414b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(1.05 g，1.50 mmol將4-硝基-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑(414a ) (4.1 g，15.01 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色固體狀之1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(414b ) (2.2 g，60%產率)；MS (ES+): 244.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(414c )
化合物414c 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (0.93 g，4.93 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (2.59 mL，14.80 mmol)、1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(414b ) (1.2 g，4.93 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(414c ) (720 mg，37%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.37 (s, 1H, D2 O可交換), 8.32 - 8.25 (m, 1H), 7.96 - 7.88 (m, 1H), 7.85 - 7.74 (m, 3H), 7.64 - 7.53 (m, 2H), 7.41 (s, 1H), 6.76 - 6.67 (m, 1H); MS (ES+): 395.1 (M+1); (ES-): 393.2 (M-1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(414d )
化合物414d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(414c ) (500 mg，1.27 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇 384 mg，3.80 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.66 mL，3.80 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]，隨後逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(414d ) (110 mg，19%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.84 (s, 1H, D2 O可交換), 8.61 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.02 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.99 - 7.90 (m, 2H), 7.55 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.49 - 7.42 (m, 1H), 7.16 (dd,J = 4.4, 1.6 Hz, 1H), 6.49 - 6.40 (m, 1H), 5.36 (bs, 1H), 4.24 - 4.11 (m, 1H), 3.75 (dd,J = 10.0, 3.6 Hz, 1H), 3.54 - 3.43 (m, 1H), 3.43 - 3.28 (m, 2H), 2.13 - 1.79 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.94; MS (ES+): 460.2 (M+1); (ES-): 458.3 (M-1)。 流程415
製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(415d )
步驟1：製備3-硝基-1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑(415b )
向3-硝基-1H-1,2,4-三唑(500 mg，4.38 mmol；CAS#: 24807-55-4)於DCM (50 mL)中之溶液中添加乙酸銅(II) (1194 mg，6.58 mmol)、3,4,5-三甲氧基苯基硼酸(415a ) (1859 mg，8.77 mmol；CAS#: 182163-96-8)及吡啶(0.71 mL，8.77 mmol)。所得混合物在空氣氛圍下攪拌隔夜且真空濃縮至乾。將殘餘物用EtOAc溶解且經由矽藻土墊過濾，真空濃縮濾液且藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% EtOAc/己烷溶離]純化所獲得之殘餘物，得到呈白色固體狀之3-硝基-1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑(415b ) (560 mg，46%產率)；MS (ES+): 281.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺(415c )
在大氣壓下，使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(50.1 mg，0.071 mmol)將3-硝基-1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑(415b ) (200 mg，0.71 mmol)於MeOH (120 mL)中之溶液氫化6小時。反應混合物經由矽藻土過濾且濃縮，得到呈淡黃色固體狀之1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺(415c ) (165 mg，92%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.82 (s, 1H), 7.02 (s, 2H), 5.68 (s, 2H), 3.83 (s, 6H), 3.66 (s, 3H); MS (ES+): 251.1 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(415d )
化合物415d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(96a ) (160 mg，0.63 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺(415c ) (158 mg，0.63 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，121 mg，0.25 mmol)、碳酸銫(516 mg，1.58 mmol)、Pd2 (dba)3 (116 mg，0.13 mmol)在甲苯/t-BuOH (10 mL，比率：5:2))中且在110℃下加熱隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(415d )游離鹼；取出68 mg且與1% HCl混合1小時，隨後移除過量HCl，將殘餘物用水/CH3 CN溶解且凍乾，得到呈白色固體狀之化合物415d HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.62 (s, 1H, D2 O可交換), 9.19 (s, 1H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 7.16 (s, 2H), 6.93 (d,J = 4.1 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.03 - 4.00 (m, 4H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.66 - 3.54 (m, 1H), 2.23 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+ ) 467.2 (M+1); HPLC純度：97.34%。 流程416
製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416e )及((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)(3-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯基)甲酮(416f )
步驟1：製備3-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲酸甲酯(416b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(4.36 g，27.6 mmol)與3-胺基-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416a ) (5 g，27.6 mmol；CAS# 217314-47-1)在MeOH (50 mL)中之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之3-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲酸甲酯(416b ) (6.75 g，88%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.14 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.60 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.91 (dd,J = 2.1, 1.3 Hz, 1H), 7.70 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 7.52 (dd,J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.90 (s, 3H)。
步驟2：製備3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(1.707 g，2.431 mmol)將3-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲酸甲酯(416b ) (6.74 g，24.31 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色半固體狀之3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416c ) (5.6 g，93%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.62 - 7.54 (m, 1H), 7.40 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 1H), 6.72 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.88 (s, 3H)。
步驟3：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416d )
化合物416d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1.37 g，7.28 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (3.81 mL，21.84 mmol)、3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416c ) (1.8 g，7.28 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416d ) (1.5 g，52%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.37 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.94 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.68 (dd,J = 2.0, 1.3 Hz, 1H), 7.54 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 7.44 (dd,J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.91 (d,J = 2.3 Hz, 6H); MS (ES+): 399.1 (M+1); MS (ES-): 397.2 (M-1)。
步驟4：製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416e )及((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)(3-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯基)甲酮(416f )
化合物416e 及416f 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416d ) (1 g，2.51 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.76 g，7.52 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(1.31 mL，7.52 mmol)在NMP (15 mL)中且在140℃下加熱2天來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416e ) (65 mg，6%產率) HCl鹽及呈白色固體狀之((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)(3-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯基)甲酮(416f ) (125 mg，9%產率) HCl鹽；
化合物416e 之資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.73 (s, 1H, D2 O可交換), 8.57 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.06 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 7.61 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 2H), 7.13 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 6.42 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.24 - 4.11 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.70 (dd,J = 10.1, 3.7 Hz, 1H), 3.61 - 3.49 (m, 1H), 3.48 - 3.36 (m, 2H), 2.10 - 1.82 (m, 4H);MS (ES+): 464.4 (M+1); (ES-): 462.4 (M-1)；化合物416f 之資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.83 (s, 1H, D2 O可交換), 8.69 (s, 1H), 8.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.49 (s, 1H), 7.46 - 7.43 (m, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.14 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 7.09 - 6.96 (m, 1H), 6.51 - 6.38 (m, 1H), 4.23 - 4.06 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.70 (dd,J = 10.0, 3.7 Hz, 1H), 3.67 - 3.55 (m, 2H), 3.53 - 3.43 (m, 2H), 3.40 - 3.02 (m, 3H), 2.04 - 1.67 (m, 8H); MS (ES+): 533.5 (M+1); (ES-): 531.5 (M-1)。 流程417
製備(S)-(1-(4-((1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(417e )
步驟1：製備1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(417b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(3.74 g，23.63 mmol)與3-氯-4-(三氟甲氧基)苯胺(417a ) (5 g，23.63 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(417b ) (6 g，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.10 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.56 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.33 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.97 (dd,J = 8.9, 2.7 Hz, 1H), 7.88 - 7.80 (m, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -57.12; MS (ES+): 308.0 (M+1); (ES-): 342.1 (M+Cl)。
步驟2：製備1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(417c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(1.370 g，1.951 mmol)將1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(417b ) (6 g，19.51 mmol)之硝基還原成胺得到呈深綠色油狀之1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(417c ) (4.1 g，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.08 - 7.92 (m, 2H), 7.75 - 7.57 (m, 2H), 6.75 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 4.55 (s, 2H); MS (ES+): 278.1及279.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(417d )
化合物417d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1.17 g，6.23 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (3.26 mL，18.69 mmol)、1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(417c ) (1.73 g，6.23 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(417d ) (2.1 g，79%產率)；MS (ES+): 429.0及430.1 (M+1); (ES-): 427.1及428.1 (M-1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(417e )
化合物417e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(417d ) (500 mg，1.17 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(354 mg，3.50 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.61 mL，3.50 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱2天來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(417e ) (42 mg，7%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.60 (s, 1H, D2 O可交換), 8.40 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.23 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (dd,J = 9.0, 2.7 Hz, 1H), 7.74 - 7.65 (m, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 1H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.45 - 6.36 (m, 1H), 4.25 - 4.15 (m, 2H), 3.79 (dd,J = 9.9, 3.4 Hz, 1H), 3.53 - 3.42 (m, 1H), 3.34 (t,J = 9.5 Hz, 2H), 2.13 - 1.81 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -57.10; MS (ES+): 494.3 (M+1); (ES-): 492.3 (M-1)。 流程418
製備(S)-(1-(2-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(418b )
化合物418b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(96a ) (200 mg，0.79 mmol)、5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噁二唑-2-胺(418a ) (199 mg，0.79 mmol；CAS# 1673-43-4)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，151 mg，0.32 mmol)、碳酸銫(645 mg，1.98 mmol)、Pd2 (dba)3 (145 mg，0.16 mmol)在甲苯/t-BuOH (12 mL，比率：5:1)中且在110℃下加熱隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(418b ) (133 mg，36%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.67 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 7.03 - 6.94 (m, 1H), 6.67 - 6.59 (m, 1H), 4.58 - 4.45 (m, 1H), 4.09 - 3.91 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.82 - 3.65 (m, 5H), 3.64 - 3.39 (m, 1H), 2.25 - 1.89 (m, 4H); MS (ES+): 468.3 (M+1); (ES-): 466.3 (M-1)。 流程419
製備吡咯啶-1-基(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)甲酮(419b )
步驟1：製備2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-甲酸(419a )
化合物419a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-甲酸乙酯(1c ) (2 g，8.86 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (2.209 g，8.86 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，1.27 g，2.66 mmol)、碳酸銫(7.22 g，22.16 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.812 g，0.886 mmol)在甲苯/t-BuOH (10 mL，比率：5:1)中且在110℃下加熱隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用0-40% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈棕色固體狀之2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-甲酸(419a ) (1.6 g，44%產率)；MS (ES+): 411.1 (M+1); (ES-): 409.1 (M-1)。
步驟2：製備吡咯啶-1-基(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)甲酮(419b )
化合物419b 係根據流程410之步驟3中所報道之程序，由2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-甲酸(419a ) (350 mg，0.85 mmol)使用吡咯啶(72.8 mg，1.02 mmol)、HATU (389 mg，1.02 mmol)、DIEA (0.45 mL，2.56 mmol)在DMF (6 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0至80% DMA80/DCM溶離]純化，隨後使用逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之吡咯啶-1-基(2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)甲酮(419b ) (42 mg，11%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 (s, 1H, D2 O可交換), 8.89 (s, 1H), 8.07 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.08 (s, 2H), 6.92 - 6.80 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 3.61 - 3.50 (m, 4H), 1.97 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+) 464.0 (M+1)。 流程420
製備(S)-(1-(4-((1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(420e )
步驟1：製備1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(420b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(3.09 g，19.53 mmol)與3-溴-4-(三氟甲氧基)苯胺(420a ) (5 g，19.53 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(420b ) (4.2 g)；MS (ES+): 352.0及353.0 (M+1)。
步驟2：製備1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(420c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(0.319 g，0.454 mmol)將1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(420b ) (1.6 g，4.54 mmol)之硝基還原成胺在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-100% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈棕色固體狀之1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(420c ) (880 mg，60%產率)；MS (ES+): 323.9及324.9 (M+1)。
步驟3：製備N-(1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(420d )
化合物420d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (350 mg，1.86 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (0.98 mL，5.59 mmol)、1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(420c ) (600 mg，1.86 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之N-(1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(420d ) (465 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.36 (s, 1H, D2 O可交換), 8.35 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.25 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.84 - 7.71 (m, 3H), 7.40 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.77 - 6.69 (m, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.80; MS (ES+ ) 472.8及473.8 (M+1); MS (ES- ) 470.7及471.8 (M-1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(420e )
化合物420e 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(420d ) (315 mg，0.67 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(202 mg，1.20 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.35 mL，1.20 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(420e ) (58 mg，16%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.56 (s, 1H, D2 O可交換), 8.36 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.30 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (dd,J = 8.9, 2.7 Hz, 1H), 7.66 - 7.60 (m, 1H), 7.43 - 7.36 (m, 1H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.43 - 6.36 (m, 1H), 4.98 (t,J = 5.1 Hz, 1H, D2 O可交換), 4.26 - 4.12 (m, 1H), 3.84 - 3.72 (m, 1H), 3.55 - 3.43 (m, 1H), 3.34 - 3.25 (m, 2H), 2.11 - 1.78 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -56.77; MS (ES+): 539.8及540.8 (M+1); (ES-): 536.8及537.8 (M-1)。 流程421
製備(S)-(1-(4-((1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(421e )
步驟1：製備4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(421b )
4-碘吡啶(421a ) (7.6 g，37.1 mmol)、L-脯胺酸(1.71 g，14.83 mmol)、碘化銅(I) (1.412 g，7.41 mmol)、4-硝基-1H-咪唑(8.38 g，74.1 mmol)及K2 CO3 (10.25 g，74.1 mmol)之混合物藉由真空/Ar填充方法(2×)脫氣。向脫氣混合物中添加DMSO (10 mL)。使反應混合物再次脫氣，密封且在95℃下加熱2天，冷卻至室溫，用水稀釋。所得混合物用二氯甲烷(2×)萃取。合併之萃取物用水洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮。殘餘物藉由層析[矽膠(24 g)，用0-100% EtOAc/己烷溶離]純化得到呈黃色固體狀之4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(421b ) (550 mg，8%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.23 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.79 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.77 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.74 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.94 (d,J = 1.7 Hz, 1H); MS (ES+): 191.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-胺(421c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(203 mg，0.289 mmol)將4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(421b ) (550 mg，2.89 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-100% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-胺(421c ) (50 mg，11%產率)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(421d )
化合物421d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (470 mg，2.50 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.31 mL，7.49 mmol)、1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-胺(421c ) (400 mg，2.50 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(421d ) (78 mg，10%產率)；MS (ES+): 311.9 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(421e )
化合物421e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(421d ) (50 mg，0.160 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(49 mg，0.48 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.084 mL，0.48 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下微波加熱2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(421e ) (6.5 mg，11%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.77 (s, 1H, D2 O可交換), 8.94 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.36 (s, 2H), 8.15 (s, 1H), 7.47 - 7.42 (m, 1H), 7.18 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.47 - 6.38 (m, 1H), 4.73 - 4.50 (m, 2H), 4.31 - 4.18 (m, 2H), 3.81 (dd,J = 9.8, 3.4 Hz, 1H), 3.49 (dt,J = 7.1, 3.7 Hz, 1H), 3.36 (t,J = 9.5 Hz, 2H), 2.15 - 2.02 (m, 1H), 2.02 - 1.89 (m, 3H); MS (ES+): 377.1 (M+1); (ES-): 375.0 (M-1); HPLC純度：95.24%。 流程422
製備2-(4-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醇(422a )
化合物422a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(84a ) (400 mg，0.96 mmol)、2-(哌嗪-1-基)乙醇(150 mg，1.15 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.33 mL，1.91 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之2-(4-(4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醇(422a ) (250 mg，51%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H, D2 O可交換), 11.04 (s, 1H, D2 O可交換), 9.19 (s, 1H), 8.12 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.32 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.72 (s, 2H, D2 O可交換), 4.69 (d,J = 14.0 Hz, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.79 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.63 - 3.48 (m, 4H), 3.28 - 3.08 (m, 4H); MS (ES+): 512.2 (M+1); (ES-): 510.2 (M-1)。 流程423
製備(S)-(1-(4-((1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(423e )
步驟1：製備1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-4-硝基-1H-咪唑(423b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.091 g，13.23 mmol)與2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-胺(423a ) (2 g，13.23 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-4-硝基-1H-咪唑(423b ) (3 g，92%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.90 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.37 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.26 (dd,J = 8.7, 2.7 Hz, 1H), 7.04 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.35 - 4.27 (m, 4H); MS (ES+): 248.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-胺(423c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(0.497 g，0.708 mmol)將1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-4-硝基-1H-咪唑(423b ) (1.75 g，7.08 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色半固體狀之1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-胺(423c ) (1.2 g，78%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.70 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.05 (dd,J = 2.5, 0.5 Hz, 1H), 6.99 - 6.94 (m, 1H), 6.91 (dd,J = 8.6, 0.5 Hz, 1H), 6.54 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H, D2 O可交換), 4.28 - 4.24 (m, 4H); MS (ES+): 218.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(423d )
化合物423d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (606 mg，3.22 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (1.69 mL，9.67 mmol)、1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-胺(423c ) (700 mg，3.22 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(423d ) (520 mg，44%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.31 (s, 1H, D2 O可交換), 8.11 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.36 (m, 1H), 7.20 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.09 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.06 - 7.00 (m, 1H), 6.71 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 4.35 - 4.24 (m, 4H); MS (ES+): 369.1 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(423e )
化合物423e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(423d ) (400 mg，1.09 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(329 mg，3.25 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.57 mL，3.25 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯-6-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(423e ) (100 mg，21%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.94 (s, 1H, D2 O可交換), 8.73 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.94 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.47 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.36 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.25 (dd,J = 8.7, 2.7 Hz, 1H), 7.12 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 7.02 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 6.49 - 6.43 (m, 1H), 6.35 - 6.03 (m, 2H, D2 O可交換), 4.31 (s, 4H), 4.12 (dt,J = 8.8, 3.7 Hz, 1H), 3.67 (dd,J = 10.1, 3.8 Hz, 1H), 3.46 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 3.35 (dd,J = 10.1, 8.1 Hz, 2H), 2.09 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 434.0 (M+1); (ES-): 432.0 (M-1)。 流程424
製備(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(424e )及(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯-1,2-二醇(424f )
步驟1：製備1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-4-硝基-1H-咪唑(424b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.15 g，7.29 mmol)與苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-胺(424a ) (1 g，7.29 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-4-硝基-1H-咪唑(424b ) (1.4 g，82%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.84 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.37 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.30 (dd,J = 7.5, 2.0 Hz, 1H), 7.14 - 6.98 (m, 2H), 6.20 (s, 2H)。
步驟2：製備1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-胺(424c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(0.42 g，0.60 mmol)將1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-4-硝基-1H-咪唑(424b ) (1.40 g，6.0 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色半固體狀之1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-胺(424c ) (1.2 g，98%產率)；MS (ES+): 204.1 (M+1)。
步驟3：製備N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(424d )
化合物424d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (666 mg，3.54 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (1.857 mL，10.63 mmol)、1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-胺(424c ) (720 mg，3.54 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(424d ) (450 mg，36%產率)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(424e )及(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯-1,2-二醇(424f )
化合物424e 及424f 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(424d ) (400 mg，1.13 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(342 mg，3.38 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.59 mL，3.38 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(424e ) (23 mg，5%產率)及呈白色固體狀之(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯-1,2-二醇(424f ) (27 mg，6%產率)；化合物424e 之資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.69 (s, 1H, D2 O可交換), 8.32 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.11 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.41 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 7.31 (dd,J = 7.4, 2.0 Hz, 1H), 7.13 (dd,J = 4.4, 1.7 Hz, 1H), 7.05 - 6.92 (m, 2H), 6.41 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 6.18 (dd,J = 8.8, 1.2 Hz, 2H), 4.14 (s, 1H), 3.67 (dd,J = 10.2, 3.6 Hz, 1H), 3.61 - 3.49 (m, 1H), 3.48 - 3.29 (m, 2H), 2.13 - 1.80 (m, 4H); MS (ES+): 420.1 (M+1); (ES-): 418.1 (M-1)；化合物424f 之資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.19 - 10.96 (m, 1H, D2 O可交換), 10.37 - 9.27 (m, 1H, D2 O可交換), 8.92 - 8.78 (m, 1H), 7.85 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.50 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.06 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 7.05 - 6.93 (m, 2H), 6.81 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 6.49 (dd,J = 4.5, 2.5 Hz, 1H), 4.15 - 4.00 (m, 1H), 3.60 (dd,J = 10.3, 4.0 Hz, 1H), 3.55 - 3.41 (m, 1H), 3.43 - 3.30 (m, 2H), 2.05 - 1.75 (m, 4H); MS (ES+): 408.1 (M+1); (ES-): 406.1 (M-1)。 流程425
製備(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(425e )
步驟1：製備1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(425b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(3.46 g，21.88 mmol)與苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-胺(425a ) (3 g，21.88 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(425b ) (3.2 g，63%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.90 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.36 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.47 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.27 (dd,J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 7.10 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H); MS (ES+): 234.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(425c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(0.36 g，0.52 mmol)將1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(425b ) (1.2 g，5.15 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色半固體狀之1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(425c ) (660 mg，63%產率)；MS (ES+): 204.1 (M+1)。
步驟3：製備N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(425d )
化合物425d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (611 mg，3.25 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (1.70 mL，9.74 mmol)、1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(425c ) (660 mg，3.25 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(425d ) (456 mg，40%產率)；MS (ES+): 355.0 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(425e )
化合物425e 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(425d ) (400 mg，1.13 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(342 mg，3.38 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.59 mL，3.38 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(425e ) (122 mg，26%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.04 (s, 1H, D2 O可交換), 8.78 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.27 (dd,J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 7.13 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 7.07 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 6.50 - 6.44 (m, 1H), 6.15 (s, 2H), 4.25 - 4.02 (m, 1H), 3.68 (dd,J = 10.1, 3.8 Hz, 1H), 3.54 - 3.43 (m, 1H), 3.40 - 3.29 (m, 2H), 2.16 - 1.77 (m, 4H);MS (ES+): 420.2 (M+1); (ES-): 418.1 (M-1)。 流程426
製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N,N-二甲基苯甲醯胺(426c )
步驟1：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸(426a )
化合物426a 係根據流程411之步驟2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(416d ) (172 mg，0.431 mmol)在MeOH/THF (6 mL)中使用氫氧化鋰單水合物(42 mg，1.0 mmol)於水(2 mL)中之溶液來製備。由此在處理後得到呈黃色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸(426a ) (166 mg，100%產率)。MS (ES+): 384.9 (M+1); MS (ES-): 382.9 (M-1)。
步驟2：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N,N-二甲基苯甲醯胺(426b )
化合物426b 係根據流程410之步驟3中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸(426a ) (585 mg，1.52 mmol)使用40%二甲胺(370 mg，3.28 mmol)、HATU (699 mg，1.838 mmol)、DIPEA (0.8 mL, 4.58 mmol)在DMF (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用50至10%含EA/MeOH 9:1之DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N,N-二甲基苯甲醯胺(426b ) (453 mg，72%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.33 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.30 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 7.27 - 7.16 (m, 1H), 6.97 (dd,J = 2.4, 1.2 Hz, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 2.95 (s, 3H); MS (ES+): 412.1 (M+1)。
步驟3：製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N,N-二甲基苯甲醯胺(426c )
化合物426c 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N,N-二甲基苯甲醯胺(426b ) (453 mg，1.100 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(349 mg，3.45 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.6 mL，3.44 mmol)在NMP (6 mL)中且在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18 (RediSep 250×30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃白色固體狀之(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N,N-二甲基苯甲醯胺(426c ) (195 mg，37%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.98 (s, 1H), 8.80 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.08 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.56 - 7.44 (m, 1H), 7.39 (dt,J = 9.5, 1.9 Hz, 2H), 7.15 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.98 (dd,J = 2.3, 1.2 Hz, 1H), 6.46 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.69 (dd,J = 10.1, 3.8 Hz, 1H), 3.50 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 3.45 - 3.26 (m, 2H), 3.01 (s, 3H), 2.95 (s, 3H), 2.13 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+): 477.2 (M+1); MS (ES-): 475.2 (M-1)。HPLC純度99.25%。 流程427
製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺(427b )
步驟1：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺(427a )
化合物427a 係根據流程410之步驟3中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲酸(426a ) (585 mg，1.52 mmol)使用甲胺(2 M於THF中，1.6 mL，3.20 mmol)、HATU (708 mg，1.862 mmol)、DIPEA (0.8 mL，4.58 mmol)在DMF (10 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至20%甲醇/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺(427a ) (298 mg，49%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.63 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 8.32 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.64 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 7.41 (p,J = 2.3 Hz, 3H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.82 (d,J = 4.5 Hz, 3H); MS (ES+): 398.1(M+1)。
步驟2：製備(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺(427b )
化合物427b 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺(427a ) (298 mg，0.749 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(277 mg，2.74 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.45 mL，2.58 mmol)在NMP (6 mL)中且在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18 (RediSep 250×30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃白色固體狀之(S)-3-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基-N-甲基苯甲醯胺(427b ) (111 mg，32%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.09 (s, 1H), 8.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.73 (q,J = 4.4 Hz, 1H), 8.13 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 (t,J = 1.6 Hz, 1H), 7.55 - 7.47 (m, 2H), 7.45 (dd,J = 2.3, 1.2 Hz, 1H), 7.16 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.47 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.71 (dd,J = 10.1, 3.9 Hz, 1H), 3.51 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 3.47 - 3.27 (m, 2H), 2.83 (d,J = 4.3 Hz, 3H), 2.14 - 1.74 (m, 4H); MS (ES+): 463.2 (M+1); MS (ES-): 461.1 (M-1)。HPLC純度99.35%。 流程428
製備(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(428b )
步驟1：製備N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(428a )
化合物428a 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (858 mg，4.18 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (2.19 mL，12.55 mmol)、1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(425c ) (850 mg，4.18 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(428a ) (330 mg，21%產率)；MS (ES+): 372.0 (M+1); (ES-): 370.0 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(428b )
化合物428b 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(428a ) (300 mg，0.80 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(245 mg，2.42 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.42 mL，2.42 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(428b ) (230 mg，65%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.47 (s, 1H, D2 O可交換), 8.39 (s, 1H), 7.90 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.41 - 7.27 (m, 2H), 7.22 - 7.08 (m, 1H), 7.02 - 6.91 (m, 1H), 6.07 (s, 2H), 4.40 - 4.25 (m, 1H), 3.77 - 3.66 (m, 1H), 3.66 - 3.55 (m, 1H), 3.54 - 3.39 (m, 2H), 2.10 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 437.1 (M+1); (ES-): 435.1 (M-1)。 流程429
製備(S)-1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(429a )
化合物429a 係根據流程2中所報道之程序，由N-(1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)-2-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(428a ) (320 mg，0.86 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(295 mg，2.58 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.45 mL，2.58 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(429a ) (194 mg，50%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.44 (s, 1H, D2 O可交換), 8.44 (s, 1H), 8.00 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.54 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.43 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.34 - 7.20 (m, 2H), 7.04 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 4.59 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 4.03 - 3.91 (m, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 1H), 2.36 - 2.23 (m, 1H), 2.12 - 1.90 (m, 3H); MS (ES+): 450.1 (M+1), (ES-): 448.1 (M-1)。 流程430
製備((2S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(430b )
步驟1：製備((2S)-1-(6-氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(430a )
化合物430a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(326a ) (1 g，3.66 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.361 mL，3.66 mmol)、DIPEA (1.92 mL，10.98 mmol)且在室溫下攪拌3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠12 g，用DCM及甲醇(0至30%)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((2S)-1-(6-氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(430a ) (650 mg，53%產率)；MS (ES+): 338.1 (M+1)。
步驟2：製備((2S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(430b )
化合物430b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((2S)-1-(6-氯-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(430a ) (300 mg，0.89 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (221 mg，0.89 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，169 mg，0.36 mmol)、碳酸銫(723 mg，2.22 mmol)、Pd2 (dba)3 (163 mg，0.18 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[(矽膠C-18，24 g)，用乙腈及0.1% HCl水溶離]純化及凍乾後得到呈白色固體狀之((2S)-1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(430b ) (135 mg，28%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.54 - 10.17 (m, 1H, D2 O可交換), 9.15 (s, 1H), 8.15 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.23 - 7.07 (m, 2H), 5.93 - 5.73 (m, 1H), 4.68 - 4.33 (m, 1H), 4.02 - 3.92 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.80 - 3.47 (m, 8H), 2.41 - 2.29 (m, 1H), 2.23 - 1.93 (m, 6H), 1.91 - 1.67 (m, 2H), 1.62 - 1.46 (m, 2H); MS (ES+): 551.3 (M+1)。 流程431
製備(S)-1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(431e )
步驟1：製備1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(431b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(4.57 g，28.9 mmol)與2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-胺(431a ) (5 g，28.9 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(431b ) (5.5 g，71%產率)；MS (ES+): 270.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(431c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (120 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(0.522 g，0.743 mmol)將1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(431b ) (2 g，7.43 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色半固體狀之1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(431c ) (560 mg，32%產率)；MS (ES+): 240.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(431d )
化合物431d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(31a ) (557 mg，2.72 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (1.42 mL，8.15 mmol)、1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(431c ) (650 mg，2.72 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(431d ) (560 mg，51%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.20 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.09 - 7.98 (m, 1H), 7.95 - 7.86 (m, 2H), 7.71 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 7.61 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.50 (dd,J = 8.6, 2.2 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -48.79 MS (ES+): 408.0 (M+1); (ES-): 406.0 (M-1)。
步驟4：製備(S)-1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(431e )
化合物431e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(431d ) (250 mg，0.61 mmol)、(S)-吡咯啶-2-甲醯胺(210 mg，1.84 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.32 mL，1.84 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-甲醯胺(431e ) (122 mg，41%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.34 (s, 1H, D2 O可交換), 8.35 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.05 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 1.6 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.72 - 7.62 (m, 2H), 7.57 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.41 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.02 - 3.92 (m, 1H), 3.68 - 3.55 (m, 1H), 2.40 - 2.23 (m, 1H), 2.13 - 1.93 (m, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -48.77; MS (ES+): 486.1 (M+1); (ES-): 484.1 (M-1)。 流程432
製備(S)-(1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(432a )
化合物432a 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(431d ) (250 mg，0.61 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(186 mg，1.84 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.32 mL，1.84 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(432a ) (179 mg，62%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.44 (s, 1H, D2 O可交換), 8.37 (s, 1H), 8.04 - 7.87 (m, 3H), 7.67 - 7.51 (m, 2H), 7.40 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 4.48 - 4.37 (m, 2H), 3.79 - 3.69 (m, 2H), 3.59 - 3.44 (m, 2H), 2.18 - 1.91 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -48.73; MS (ES+): 473.1 (M+1); (ES-): 471.1 (M-1)。 流程433
製備(S)-(1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(433b )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(433a )
化合物433a 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (519 mg，2.76 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (1.45 mL，8.28 mmol)、1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(431c ) (660 mg，2.76 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(433a ) (630 mg，58%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.35 (s, 1H), 8.21 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.91 (dd,J = 6.8, 1.9 Hz, 2H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.60 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.50 (dd,J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.44 - 7.36 (m, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -48.78; MS (ES+): 391.1 (M+1); (ES-): 389.1 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(433b )
化合物433b 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(433a ) (200 mg，0.51 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(155 mg，1.54 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.29 mL，1.54 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(433b ) (50 mg，21%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.77 (s, 1H, D2 O可交換), 8.47 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.96 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.66 - 7.60 (m, 1H), 7.59 - 7.54 (m, 1H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 7.14 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.45 - 6.38 (m, 1H), 4.22 - 4.11 (m, 1H), 3.75 (dd,J = 10.1, 3.6 Hz, 1H), 3.53 - 3.42 (m, 1H), 3.39 - 3.26 (m, 2H), 2.11 - 2.00 (m, 1H), 1.99 - 1.84 (m, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -48.73; MS (ES+): 456.1 (M+1); (ES-): 454.1 (M-1)。 流程434
製備(S)-(1-(4-((1-(3-(羥甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(434e )
步驟1：製備(3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.57 g, 16.24 mmol)與(3-胺基苯基)甲醇(434a ) (2 g，16.24 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之(3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434b ) (2.4 g，67%產率)；MS (ES+): 220.0 (M+1)。
步驟2：製備(3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (40 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(0.35 g，0.50 mmol)將(3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434b ) (1.1 g，5.02 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色半固體狀之(3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434c ) (745 mg，78%產率)；MS (ES+): 190.1 (M+1)。
步驟3：製備(3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434d )
化合物434d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (745 mg，3.96 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (2.08 mL，11.89 mmol)、(3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434c ) (750 mg，3.96 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之(3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434d ) (660 mg，49%產率)；MS (ES+): 341.1 (M+1); (ES-): 339.1 (M-1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(3-(羥甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(434e )
化合物434e 係根據流程2中所報道之程序，由(3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(434d ) (250 mg，0.73 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(223 mg，2.20 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.38 mL，2.20 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(3-(羥甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(434e ) (82 mg，28%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.95 (s, 1H, D2 O可交換), 8.75 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.04 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.70 (t,J = 1.8 Hz, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 1H), 7.51 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.47 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.40 (dt,J = 7.7, 1.2 Hz, 1H), 7.13 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.45 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.15 (s, 1H), 3.71 (dd,J = 10.1, 3.8 Hz, 1H), 3.58 - 3.45 (m, 1H), 3.37 (dd,J = 10.2, 8.1 Hz, 2H), 2.07 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 406.2 (M+1)。 流程435
製備((S)-1-(1-((反)-4-胺基環己基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(435e )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b )
化合物435b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435a ) (100 mg，0.49 mmol；CAS# 1211522-68-7)在DCM (5 mL)中使用(S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基氧基)甲基)吡咯啶鹽酸鹽(124 mg，0.49 mmol；CAS# 134756-75-5)、DIPEA (0.26 mL，1.48 mmol)且在室溫下攪拌2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基 )氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b )；MS (ES+): 382.2 (M+1); (ES-): 380.1 (M-1)。
步驟2：製備((反)-4-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己基)胺基甲酸第三丁酯(435c)
在0℃下，向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (150 mg，0.39 mmol)、三苯基膦(206 mg，0.79 mmol)、順-4-羥基環己基胺基甲酸第三丁酯(127 mg，0.59 mmol)於THF (3 mL)中之溶液中逐滴添加DIAD (0.12 mL，0.59 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌隔夜，真空濃縮且藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化所獲得之殘餘物，得到呈白色固體狀之((反)-4-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己基)胺基甲酸第三丁酯( 435c ) (150 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 6.83 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 2H), 3.90 - 3.63 (m, 4H), 3.32 - 3.22 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.13 - 1.75 (m, 10H), 1.39 (s, 11H), 0.82 (s, 9H), -0.05 (s, 6H); MS (ES+): 579.3 (M+1)。
步驟3：製備((反)-4-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己基)胺基甲酸第三丁酯(435d )
化合物435d 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((反)-4-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己基)胺基甲酸第三丁酯( 435c ) (220 mg，0.38 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (114 mg，0.46 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，72.4 mg，0.15 mmol)、碳酸銫(433 mg，1.33 mmol)、Pd2 (dba)3 (70 mg，0.076 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((反)-4-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己基)胺基甲酸第三丁酯(435d ) (150 mg，50%產率)；MS (ES+): 792.4 (M+1)。
步驟4：製備((S)-1-(1-((反)-4-胺基環己基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(435e )
向((反)-4-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己基)胺基甲酸第三丁酯(435d ) (150 mg，0.19 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液中添加TFA (0.29 mL，3.79 mmol)，在室溫下攪拌1小時且真空濃縮至乾。將所獲得之殘餘物溶解於MeOH中，添加HCl (於二噁烷中之4 N溶液，0.95 mL，3.79 mmol)且在室溫下攪拌30分鐘。真空濃縮反應混合物且藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化所獲得之殘餘物，得到呈白色固體狀之((S)-1-(1-((反)-4-胺基環己基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(435e ) (61 mg，56%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H, D2 O可交換), 9.11 (s, 1H), 8.35 - 8.19 (m, 3H, D2 O可交換), 7.84 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.11 (s, 2H), 4.70 - 4.62 (m, 1H), 4.55 - 4.45 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.85 - 3.79 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.65 - 3.62 (m, 1H), 3.56 - 3.44 (m, 2H), 3.20 - 3.07 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.14 - 2.05 (m, 3H), 2.01 - 1.88 (m, 7H), 1.73 - 1.54 (m, 2H); MS (ES+): 578.3 (M+1); (ES-): 612.3 (M+Cl)。 流程436
製備(S)-(1-(4-((1-(4-(羥甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(436e )
步驟1：製備(4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.182 g，13.80 mmol)與(4-胺基苯基)甲醇(436a ) (1.7 g，13.80 mmol)之反應在過濾後得到呈紅色固體狀之(4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436b ) (2.2 g，73%產率)；MS (ES+): 220.1 (M+1)。
步驟2：製備(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (50 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(256 mg，0.37 mmol)將(4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436b ) (800 mg，3.65 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色半固體狀之(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436c ) (455 mg，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.82 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.51 - 7.43 (m, 2H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 6.63 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 5.25 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.50 (d,J = 4.9 Hz, 2H), 4.41 (s, 2H); MS (ES+) 190.1 (M+1)。
步驟3：製備(4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436d )
化合物436d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (288 mg，1.53 mmol)在2-丙醇(40 mL)中使用DIPEA (0.803 mL，4.60 mmol)、(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436c ) (290 mg，1.53 mmol)且在回流下加熱2小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之(4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436d ) (334 mg，64%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.34 (s, 1H), 8.23 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.67 - 7.57 (m, 2H), 7.55 - 7.46 (m, 2H), 7.40 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.72 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 5.32 (t,J = 5.5 Hz, 1H), 4.56 (d,J = 4.7 Hz, 2H); MS (ES+) 341.1 (M+1); (ES-) 339.0 (M-1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(4-(羥甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(436e )
化合物436e 係根據流程2中所報道之程序，由(4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)苯基)甲醇(436d ) (150 mg，0.44 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(134 mg，1.32 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.23 mL，1.32 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(4-(羥甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(436e ) (86 mg，48%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.92 (s, 1H, D2 O可交換), 8.78 - 8.68 (m, 1H), 8.02 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.75 (d,J = 8.3 Hz, 2H), 7.55 - 7.40 (m, 3H), 7.13 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.50 - 6.40 (m, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.22 - 4.07 (m, 1H), 3.71 (dd,J = 10.1, 3.8 Hz, 1H), 3.55 - 3.42 (m, 1H), 3.42 - 3.29 (m, 2H), 2.08 - 1.79 (m, 4H); MS (ES+): 406.2 (M+1)。 流程437
製備(S)-(1-(4-((1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(437e )
步驟1：製備2-甲基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(437b )
4-溴-2-甲基吡啶(437a ) (3.05 g，17.73 mmol；CAS# 22282-99-1)、4-硝基-1H-咪唑(1.97 g，17.42 mmol；CAS#: 3034-38-6)、碘化鉀(2.7 g，16.26 mmol)及碳酸鉀(5.7 g，41.2 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液在微波反應器中在130℃下加熱3小時。反應物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併之有機層用水、鹽水洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(80 g)，用50-100%含乙酸乙酯/甲醇(9:1)之己烷溶離]純化，得到呈黃色固體狀之2-甲基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(437b ) (1.36 g，38%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.19 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.71 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.62 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.92 - 7.83 (m, 1H), 7.74 (ddd,J = 5.6, 2.3, 0.6 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H); MS (ES+): 205.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-胺(437c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(0.468 g，0.666 mmol)將2-甲基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(437b ) (1.36 g，6.66 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈黃色糖漿狀之1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-胺(437c ) (531 mg，46%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.41 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 8.13 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.49 (dt,J = 2.3, 0.6 Hz, 1H), 7.40 (ddd,J = 5.7, 2.3, 0.6 Hz, 1H), 6.76 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H), 2.48 (s, 3H); MS (ES+): 175.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(437d )
化合物437d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (341 mg，1.81 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.5 mL，2.86 mmol)、1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-胺(437c ) (311 mg，1.79 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(437d ) (349 mg，60%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.38 (s, 1H), 8.56 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 8.52 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.02 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.54 (dd,J = 5.6, 2.2 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.74 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H); MS (ES+): 326.1 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(437e )
化合物437e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(437d ) (145 mg，0.445 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(150 mg，1.483 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.28 mL，1.602 mmol)在NMP (5 mL)中且在140℃下微波加熱3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250×30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(437e ) (73 mg，42%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.78 (s, 1H), 8.86 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.82 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 8.35 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 8.28 (dd,J = 6.8, 2.4 Hz, 1H), 8.09 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.50 - 7.38 (m, 1H), 7.18 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.43 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 3.48 (d,J = 9.7 Hz, 1H), 3.35 (t,J = 8.2 Hz, 2H), 2.73 (s, 3H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 1.96 (m, 3H); MS (ES+): 391.2 (M+1); MS(ES-): 389.2 (M-1)。 流程438
製備(S)-(1-(1-(環己基甲基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(438c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(環己基甲基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(438a )
化合物438a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、環己基甲醇(224 mg，1.96 mmol)及DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(環己基甲基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(438a ) (350 mg，93%產率)；MS (ES+): 478.3 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(環己基甲基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(438b )
化合物438b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(環己基甲基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(438a ) (350 mg，0.73 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (219 mg，0.88 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，140 mg，0.29 mmol)、碳酸銫(835 mg，2.56 mmol)、Pd2 (dba)3 (134 mg，0.15 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(環己基甲基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(438b ) (185 mg，37%產率)，MS (ES+): 691.4 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-(環己基甲基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(438c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(環己基甲基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(438b ) (185 mg)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(4 mL)，在室溫下攪拌10分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-(環己基甲基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(438c ) (150 mg，36%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.11 (s, 1H, D2 O可交換), 8.95 (s, 1H), 7.85 (d,J = 1.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.09 (s, 2H), 4.76 - 4.57 (m, 2H), 4.04 (d,J = 7.1 Hz, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.52 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.14 - 1.82 (m, 6H), 1.69 - 1.48 (m, 6H), 1.22 - 0.93 (m, 6H); MS (ES+): 577.3 (M+1)。 流程439
製備(S)-(1-(1-環己基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(439c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環己基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(439a )
化合物439a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、環己醇(197 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌5天來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環己基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(439a ) (300 mg，82%產率)；MS (ES+): 464.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環己基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(439b )
化合物439b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環己基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(439a ) (300 mg，0.65 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (193 mg，0.78 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，123 mg，0.26 mmol)、碳酸銫(737 mg，2.26 mmol)、Pd2 (dba)3 (118 mg，0.13 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-60% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈棕色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環己基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(439b ) (142 mg，33%產率)；MS (ES+): 677.4 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-環己基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(439c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環己基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(439b ) (142 mg)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(0.39 mL，12.93 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-環己基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(439c ) (94 mg，26%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H, D2 O可交換), 8.98 (s, 1H), 7.85 (d,J = 1.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.11 (s, 2H), 4.70 - 4.65 (m, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.88 - 3.80 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.68 - 3.51 (m, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.14 - 1.96 (m, 4H), 1.88 - 1.80 (m, 6H), 1.71 - 1.63 (m, 1H), 1.47 - 1.34 (m, 2H), 1.30 - 1.19 (m, 1H); MS (ES+) 563.3 (M+1)。 流程440
製備(S)-(1-(1-環戊基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(440c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環戊基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(440a )
化合物440a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、環戊醇(169 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌5天來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環戊基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(440a ) (300 mg，85%產率)；MS (ES+): 450.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環戊基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(440b )
化合物440b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環戊基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(440a ) (300 mg，0.67 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (199 mg，0.80 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，127 mg，0.27 mmol)、碳酸銫(760 mg，2.33 mmol)、Pd2 (dba)3 (122 mg，0.13 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環戊基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(440b )，其原樣用於下一步驟；MS (ES+): 663.4 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-環戊基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(440c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環戊基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(440b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(0.393 mL，12.93 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-環戊基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(440c ) (191 mg，2個步驟52%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 (s, 1H, D2 O可交換), 9.03 (s, 1H), 7.88 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.10 (s, 3H), 5.15 - 5.01 (m, 1H), 4.76 - 4.63 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.88 - 3.78 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.56 (s, 3H), 2.13 - 1.78 (m, 12H), 1.71 - 1.56 (m, 2H); MS (ES+): 549.2 (M+1); HPLC純度：98.78%。 流程441
製備(S)-(1-(4-((1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(441e )
步驟1：製備8-氟-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(441b )
化合物441b 係根據流程437之步驟1中所報道之程序，由4-溴-8-氟喹啉(441a ) (1.08 g，4.78 mmol；CAS#:927800-38-2)在DMF (8 mL)中使用4-硝基-1H-咪唑(550 mg，4.86 mmol)、碘化鉀(811 mg，4.89 mmol)、碳酸鉀(2.2 g，15.92 mmol)且在微波反應器中在100℃下加熱2小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(40 g)，用50-100%含乙酸乙酯/甲醇(9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之8-氟-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(441b ) (634 mg，51%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.18 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 9.00 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.39 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.96 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 7.86 - 7.69 (m, 2H), 7.63 (dt,J = 8.4, 1.0 Hz, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -123.84. MS (ES+): 259.0 (M+1)。
步驟2：製備1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-胺(441c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(241 mg，0.343 mmol)將8-氟-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(441b )( 630 mg，2.44 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈黃色糖漿狀之1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-胺(441c ) (323 mg，58%產率)。MS (ES+): 229.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(441d )
化合物441d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (267 mg，1.42 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.63 mL，3.59 mmol)、1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-胺(441c ) (319 mg，1.398 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(441d ) (223 mg，42%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.52 (s, 1H), 9.12 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 8.21 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 7.83 - 7.69 (m, 4H), 7.44 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.75 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 380.0 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(441e )
化合物441e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(441d ) (110 mg，0.29 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(195 mg，1.93 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.212 mL，1.215 mmol)在NMP (3 mL)中且在140℃下微波加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(8-氟喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(441e ) (15 mg，12%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.91 (s, 1H), 9.10 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 8.36 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 - 7.85 (m, 2H), 7.85 - 7.69 (m, 2H), 7.51 - 7.41 (m, 1H), 7.20 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.45 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 1H), 3.59 (dd,J = 10.2, 3.6 Hz, 1H), 3.46 (t,J = 8.4 Hz, 1H), 3.41 - 3.19 (m, 2H), 2.01 - 1.70 (m, 4H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -123.74. MS (ES+): 445.2 (M+1); MS(ES-): 443.1 (M-1)。HPLC純度：93.63%。 流程442
製備(S)-(1-(1-環丁基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(442c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(442a )
化合物442a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、環丁醇(142 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.382 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌5天來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(442a ) (330 mg，96%產率)；MS (ES+): 436.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(442b )
化合物442b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(442a ) (330 mg，0.76 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (226 mg，0.91 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，144 mg，0.30 mmol)、碳酸銫(863 mg，2.65 mmol)、Pd2 (dba)3 (139 mg，0.15 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(442b )；MS (ES+): 649.3 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-環丁基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(442c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(442b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(1.89 mL，7.57 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-環丁基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(442c ) (140 mg，35%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.17 (s, 1H, D2 O可交換), 9.04 (s, 1H), 7.89 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.11 (s, 2H), 5.26 - 5.13 (m, 1H), 4.71 - 4.62 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.77 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.66 - 3.53 (m, 2H), 2.70 - 2.58 (m, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.41 - 2.28 (m, 2H), 2.20 - 1.95 (m, 4H), 1.95 - 1.66 (m, 4H); MS (ES+): 535.3 (M+1)。 流程443
製備(S)-(1-(4-((1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(443e )
步驟1：製備7-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)噻吩并[3,2-b]吡啶(443b )
化合物443b 係根據流程437之步驟1中所報道之程序，由7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶(443a ) (1 g，5.90 mmol；CAS#: 69627-03-8)在DMF (5 mL)中使用4-硝基-1H-咪唑(713 mg，6.31 mmol)、碘化鉀(1.032 g，6.22 mmol)、碳酸鉀(2.37 g，17.15 mmol)且在微波反應器中在100℃下加熱2小時來製備。由此在處理後得到呈黃色固體狀之7-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)噻吩并[3,2-b]吡啶(443b ) (420 mg，29%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.08 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.90 (d,J = 5.1 Hz, 1H), 8.59 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.37 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.83 - 7.72 (m, 2H); MS (ES+): 247.0 (M+1)。
步驟2：製備1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-胺(443c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (20 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(133 mg，0.189 mmol)將7-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)噻吩并[3,2-b]吡啶(443b ) (418 mg，1.697 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠12 g，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-胺(443c ) (137 mg，37%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.71 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 8.26 (dd,J = 5.6, 0.4 Hz, 1H), 8.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.67 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 7.54 (dd,J = 5.2, 0.5 Hz, 1H), 6.85 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H); MS (ES+): 217.0 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(443d )
化合物443d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (121 mg，0.644 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (0.378 mL，2.166 mmol)、1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-胺(443c ) (135 mg，0.624 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈橙色固體狀之2-氯-N-(1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(443d ) (181 mg，79%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.57 (s, 1H), 8.83 (d,J = 5.1 Hz, 1H), 8.48 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.42 - 8.31 (m, 2H), 7.81 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.78 - 7.66 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 6.75 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 368.0 (M+1), 390.0 (M+Na)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(443e )
化合物443e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(443d ) (89 mg，0.242 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(157 mg，1.552 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.165 mL，0.944 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在140℃下微波加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(443e ) (48 mg，46%產率) HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.83 (s, 1H), 8.91 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 8.59 - 8.39 (m, 2H), 8.25 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.49 - 7.37 (m, 1H), 7.20 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.44 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.16 (s, 1H), 3.68 (dd,J = 10.2, 3.6 Hz, 1H), 3.58 (s, 1H), 3.53 - 3.41 (m, 1H), 3.35 (dd,J = 10.2, 8.1 Hz, 1H), 2.10 - 1.77 (m, 4H); MS (ES+): 433.1 (M+1); MS (ES-): 431.1 (M-1)。 流程444
製備((S)-1-(1-((順)-3-胺基環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(444c )
步驟1：製備((順)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(444a )
化合物444a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (350 mg，0.92 mmol)在THF中使用三苯基膦(601 mg，2.291 mmol)、(反)-3-羥基環丁基胺基甲酸第三丁酯(429 mg，2.29 mmol)、DIAD (0.445 mL，2.29 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之((順)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(444a ) (430 mg，85%產率)；MS (ES+): 551.3 (M+1)。
步驟2：製備((順)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(444b)
化合物444b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((順)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(444a ) (430 mg，0.78 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (233 mg，0.96 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，149 mg，0.31 mmol)、碳酸銫(890 mg，2.73 mmol)、Pd2 (dba)3 (143 mg，0.16 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之((順)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯( 444b ) ；MS (ES+): 650.3 (M+1)。
步驟3：製備((S)-1-(1-((順)-3-胺基環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(444c )
向((順)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯( 444b ) (來自上文步驟2)溶解於DCM/MeOH (10 mL，1:1)中之溶液中添加TFA (1.202 mL，15.60 mmol)、HCl (4N於二噁烷中，1.950 mL，7.80 mmol)且在室溫下攪拌20分鐘。真空濃縮反應混合物且藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化所獲得之殘餘物，得到呈白色固體狀之((S)-1-(1-((順)-3-胺基環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(444c ) (138 mg，32%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.05 (s, 1H, D2 O可交換), 9.11 (s, 1H), 8.50 (d,J = 4.9 Hz, 3H, D2 O可交換), 7.91 (d,J = 1.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.13 (s, 2H), 5.09 - 4.99 (m, 1H), 4.69 - 4.62 (m, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.87 - 3.76 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.68 - 3.49 (m, 4H), 2.78 - 2.70 (m, 4H), 2.59 (s, 3H), 2.09 - 1.89 (m, 4H); MS (ES+ ) 550.3 (M+1)。 流程445
製備((S)-1-(1-((反)-3-胺基環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(445c )
步驟1：製備((反)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(445a )
化合物445a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (350 mg，0.92 mmol)在THF中使用三苯基膦(601 mg，2.291 mmol)、(順)-3-羥基環丁基胺基甲酸第三丁酯(429 mg，2.29 mmol)、DIAD (0.45 mL，2.29 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之((反)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(445a ) (475 mg，94%產率)；MS (ES+): 551.3 (M+1)。
步驟2：製備((反)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(445b)
化合物445b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由((反)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯(445a ) (475 mg，0.86 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (258 mg，1.03 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，164 mg，0.35 mmol)、碳酸銫(983 mg，3.02 mmol)、Pd2 (dba)3 (158 mg，0.17 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA-80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之((反)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯( 445b ) ；MS (ES+): 764.3 (M+1)。
步驟3：製備((S)-1-(1-((反)-3-胺基環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(445c )
向((反)-3-(4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁基)胺基甲酸第三丁酯( 445b ) (來自上文步驟2)溶解於DCM/MeOH (10 mL，1:1)中之溶液中添加TFA (0.66 mL，8.62 mmol)、HCl (4N於二噁烷中，2.15 mL，8.62 mmol)且在室溫下攪拌20分鐘。真空濃縮反應混合物且藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化所獲得之殘餘物，得到呈白色固體狀之((S)-1-(1-((反)-3-胺基環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(445c ) (110 mg，23%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H, D2 O可交換), 9.21 (s, 1H), 8.62 (d,J = 4.6 Hz, 3H, D2 O可交換), 7.88 (d,J = 1.8 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.13 (s, 2H), 5.68 - 5.48 (m, 1H), 4.69 - 4.59 (m, 2H), 4.00 - 3.93 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.76 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.66 - 3.61 (m, 1H), 3.56 - 3.48 (m, 1H), 2.87 - 2.76 (m, 2H), 2.74 - 2.64 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.10 - 1.88 (m, 4H); MS (ES+ ) 550.3 (M+1)。 流程446
製備((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(446c )
步驟1：製備4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(446a )
化合物446a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、四氫呋喃-3-醇(173 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(446a ) (300 mg，84%產率)；MS (ES+): 452.3 (M+1)。
步驟2：製備4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(446b )
化合物446b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(446a ) (300 mg，0.67 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (199 mg，0.80 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，127 mg，0.27 mmol)、碳酸銫(760 mg，2.33 mmol)、Pd2 (dba)3 (122 mg，0.13 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(446b )；MS (ES+): 665.3 (M+1)。
步驟3：製備((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(446c )
向4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(446b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液添加含4N HCl之二噁烷(1.66 mL，6.64 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈黃色固體狀之((2S)-1-(3-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(446c ) (132 mg，36%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.35 (s, 1H, D2 O可交換), 9.20 (s, 1H), 7.98 (s, 1H, D2 O可交換), 7.13 (s, 2H), 5.42 - 5.31 (m, 4H), 4.71 - 4.63 (m, 1H), 4.10 - 3.98 (m, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 8H), 3.85 - 3.78 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.66 - 3.53 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.39 - 2.23 (m, 2H), 2.12 - 1.88 (m, 4H); MS (ES+): 551.3 (M+1); (ES-): 549.2 (M-1)。 流程447
製備(順)-4-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己醇(447c )
步驟1：製備1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(447a )
化合物447a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、(反)-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)環己醇(452 mg，1.96 mmol；CAS# 103202-63-7)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(447a ) (350 mg，75%產率)；MS (ES+): 594.4 (M+1)。
步驟2：製備1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(447b )
化合物447b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(447a ) (350 mg，0.59 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (176 mg，0.71 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，112 mg，0.24 mmol)、碳酸銫(672 mg，2.06 mmol)、Pd2 (dba)3 (108 mg，0.12 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(447b )；MS (ES+): 807.4 (M+1)。
步驟3：製備(順)-4-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己醇(447c )
向1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(447b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(0.15 mL，0.59 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(順)-4-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己醇(447c ) (106 mg，31%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 (s, 1H, D2 O可交換), 9.00 (s, 1H), 7.85 (d,J = 1.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.10 (s, 2H), 4.72 - 4.64 (m, 1H), 4.60 - 4.49 (m, 1H), 3.92 - 3.82 (m, 10H), 3.70 (s, 3H), 3.66 - 3.53 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.32 - 2.19 (m, 2H), 2.09 - 1.90 (m, 4H), 1.86 - 1.75 (m, 2H), 1.63 - 1.53 (m, 4H); MS (ES+): 579.3 (M+1); (ES-): 613.3 (M+Cl)。 流程448
製備(S)-(1-(4-((1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(448e )
步驟1：製備4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(448b )
化合物448b 係根據流程437之步驟1中所報道之程序，由4-溴喹啉(448a ) (1.1 g，5.29 mmol；CAS#: 3964-04-3)在DMF (8 mL)中使用4-硝基-1H-咪唑(0.588 g，5.20 mmol)、碘化鉀(0.86 g，5.18 mmol)、碳酸鉀(1.85 g，13.39 mmol)且在微波反應器中在100℃下加熱4小時來製備。由此在處理後得到呈黃色固體狀之4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(448b ) (745 mg，60%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.13 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 9.00 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.39 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.23 (dt,J = 8.5, 1.0 Hz, 1H), 7.94 (ddd,J = 8.4, 5.9, 2.3 Hz, 1H), 7.84 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 7.82 - 7.72 (m, 2H); MS (ES+): 241.1 (M+1)。
步驟2：製備1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-胺(448c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (20 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(123 mg，0.175 mmol)將4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(448b ) (472 mg，1.965 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈黃色糖漿狀之1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-胺(448c ) (244 mg，59%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.97 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 8.14 (ddd,J = 8.4, 1.3, 0.6 Hz, 1H), 8.02 (ddd,J = 8.4, 1.5, 0.7 Hz, 1H), 7.87 (ddd,J = 8.4, 6.9, 1.4 Hz, 1H), 7.77 - 7.67 (m, 2H), 7.54 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 6.65 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H); MS (ES+): 211.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(448d )
化合物448d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (216 mg，1.149 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (0.408 mL，2.337 mmol)、1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-胺(448c ) (239 mg，1.137 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(448d ) (244 mg，59%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.51 (s, 1H), 9.08 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 8.22 (dd,J = 7.7, 1.4 Hz, 2H), 8.02 - 7.86 (m, 3H), 7.84 - 7.71 (m, 3H), 7.45 (d,J = 4.2 Hz, 1H), 6.75 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H); MS (ES+): 362.1 (M+1), 384.1 (M+Na)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(448e )
化合物448e 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(448d ) (120 mg，0.332 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(189 mg，1.87 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.3 mL，1.72 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在140℃下微波加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1-(喹啉-4-基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(448e ) (55 mg，39%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.98 (s, 1H), 9.32 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 8.59 - 8.41 (m, 2H), 8.35 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 8.28 - 8.04 (m, 3H), 8.04 - 7.89 (m, 1H), 7.46 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.21 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.46 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.23 - 4.01 (m, 1H), 3.62 (dd,J = 10.1, 3.6 Hz, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.43 - 3.17 (m, 2H), 2.07 - 1.66 (m, 4H); MS (ES+): 427.2 (M+1); MS (ES-): 425.2 (M-1)。HPLC純度98.8%。 流程449
製備(S)-(1-(4-((1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(449d )
步驟1：製備1'-環丙基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(449a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.29 g，14.49 mmol)與1-環丙基-1H-咪唑-4-胺(26a ) (1.91 g，15.51 mmol)之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈橙色固體狀之1'-環丙基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(449a ) (2.33 g，69%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.71 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.28 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.85 (dd,J = 1.6, 0.5 Hz, 1H), 7.77 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 1H), 1.02 - 0.99 (m, 4H); MS (ES+): 220.1 (M+1)。
步驟2：製備1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(449b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(255 mg，0.363 mmol)將1'-環丙基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(449a ) (749 mg，3.42 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[12 g，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈深色油狀之1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(449b ) (328 mg，51%產率)。MS (ES+): 190.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(449c )
化合物449c 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (330 mg，1.755 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (0.634 mL，3.63 mmol)、1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(449b ) (328 mg，1.733 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(449c ) (185 mg，31%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.29 (s, 1H), 8.03 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.85 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.81 - 7.71 (m, 2H), 7.60 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.38 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.71 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 3.59 (tt,J = 7.2, 4.1 Hz, 1H), 1.12 - 0.89 (m, 4H); MS (ES+): 341.1 (M+1), 363.1 (M+Na)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(449d )
化合物449d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(449c ) (90 mg，0.264 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(109 mg，1.08 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.185 mL，1.06 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱120分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% DMA80/DCM溶離]純化，隨後藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250×30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1'-環丙基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(449d ) (31 mg，29%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.88 (s, 1H), 8.48 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.92 (dd,J = 3.9, 1.5 Hz, 2H), 7.77 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.57 - 7.37 (m, 1H), 7.11 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.44 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.19 - 4.18 (m, 1H), 3.78 (dd,J = 10.4, 3.6 Hz, 1H), 3.67 - 3.55 (m, 1H), 3.47 (t,J = 8.3 Hz, 1H), 3.40 - 3.27 (m, 2H), 2.12 - 1.86 (m, 4H), 1.01 (m, 4H); MS (ES+): 406.2 (M+1); MS (ES-): 404.2 (M-1)。 流程450
製備(S)-(1-(4-((1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(450d )
步驟1：製備1'-環丁基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(450a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(960 mg，6.07 mmol)與1-環丁基-1H-咪唑-4-胺(37a ) (919 mg，6.70 mmol)之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈橙色固體狀之1'-環丁基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(450a ) (1.03 g，66%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.71 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.29 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.78 (p,J = 8.4 Hz, 1H), 2.47 - 2.27 (m, 4H), 1.93 - 1.65 (m, 2H)。
步驟2：製備1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(450b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(157 mg，0.223 mmol)將1'-環丁基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(450a ) (520 mg，2.230 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[24 g，用MeOH/DCM 0-20%溶離]純化後得到呈黃色固體狀之1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(450b ) (247 mg，55%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.66 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.59 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.49 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.70 (p,J = 8.4 Hz, 1H), 4.32 (s, 2H), 2.45 - 2.28 (m, 4H), 1.92 - 1.67 (m, 2H); MS (ES+): 204.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(450c )
化合物450c 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (228 mg，1.213 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (0.422 mL，2.414 mmol)、1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(450b ) (245 mg，1.205 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[24 g，用MeOH/DCM 0-20%溶離]純化後得到呈黃色泡沫狀之2-氯-N-(1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(450c ) (350 mg，82%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.29 (s, 1H), 8.03 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.85 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.82 - 7.72 (m, 3H), 7.39 (d,J = 4.2 Hz, 1H), 6.71 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 4.77 (p,J = 8.6 Hz, 1H), 2.47 - 2.36 (m, 4H), 1.90 - 1.72 (m, 2H); MS (ES+): 355.1 (M+1), 377.1 (M+Na)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(450d )
化合物450d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(450c ) (100 mg，0.282 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(181 mg，1.79 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.2 mL，1.16 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((1'-環丁基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(450d ) (42 mg，36%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.09 (s, 1H), 8.65 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.00 (s, 2H), 7.96 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.48 (dd,J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.12 (dd,J = 4.4, 1.6 Hz, 1H), 6.47 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.79 (p,J = 8.4 Hz, 1H), 4.17 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 3.78 (dd,J = 10.4, 3.7 Hz, 1H), 3.47 (t,J = 8.4 Hz, 1H), 3.42 - 3.27 (m, 2H), 2.48 - 2.29 (m, 4H), 2.16 - 1.71 (m, 6H); MS (ES+): 420.2 (M+1); MS(ES-): 418.2 (M-1)。 流程451
製備(S)-(1-(4-((1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(451d )
步驟1：製備1'-環戊基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(451a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(691 mg，4.37 mmol)與1-環戊基-1H-咪唑-4-胺(50a ) (651 mg，4.31 mmol)之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈橙色固體狀之1'-環戊基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(451a ) (637 mg，60%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.73 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.29 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.92 - 7.73 (m, 2H), 4.63 (p,J = 6.7 Hz, 1H), 2.28 - 2.05 (m, 2H), 1.94 - 1.75 (m, 4H), 1.75 - 1.58 (m, 2H); MS (ES+): 248.1 (M+1)。
步驟2：製備1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(451b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(135 mg，0.192 mmol)將1'-環戊基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(451a ) (632 mg，2.56 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[24 g，用MeOH/DCM 0-20%溶離]純化後得到呈黃色糖漿狀之1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(451b ) (328 mg，59%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.63 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.59 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.38 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.49 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.55 (q,J = 6.9 Hz, 1H), 4.31 (s, 2H), 2.11 (d,J = 6.2 Hz, 2H), 1.86 - 1.73 (m, 4H), 1.65 (p,J = 5.4, 3.7 Hz, 2H); MS (ES+): 218.1 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(451c )
化合物451c 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (290 mg，1.542 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (0.324 mL，1.857 mmol)、1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(451b ) (323 mg，1.487 mmol)且在90℃下加熱2.5小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(451c ) (252 mg，46%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.28 (s, 1H), 8.03 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.85 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.64 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.71 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.60 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 2.26 - 2.07 (m, 2H), 1.83 (q,J = 4.1, 2.5 Hz, 4H), 1.73 - 1.53 (m, 2H); MS (ES+): 369.1 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(451d )
化合物451d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(451c ) (102 mg，0.277 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(185 mg，1.83 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.169 mL，0.967 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1'-環戊基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(451d ) (64 mg，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.88 (s, 1H), 8.49 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (s, 2H), 7.83 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.53 - 7.36 (m, 1H), 7.11 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.45 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.61 (p,J = 7.0 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.80 (dd,J = 10.4, 3.7 Hz, 1H), 3.47 (t,J = 8.1 Hz, 1H), 3.34 (q,J = 9.7, 8.3 Hz, 2H), 2.25 - 1.99 (m, 4H), 1.99 - 1.76 (m, 6H), 1.67 (qd,J = 7.7, 6.7, 3.9 Hz, 2H); MS (ES+): 434.2 (M+1); MS (ES-): 432.2 (M-1)。 流程452
製備(S)-(1-(4-((1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(452d )
步驟1：製備1'-環己基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(452a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(550 mg，3.48 mmol)與1-環己基-1H-咪唑-4-胺(28a ) (564 mg，3.41 mmol)之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈橙色固體狀之1'-環己基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(452a ) (650 mg，73%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.70 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.27 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.91 - 7.75 (m, 2H), 4.11 (tt,J = 11.7, 3.8 Hz, 1H), 2.04 (d,J = 12.2 Hz, 2H), 1.83 (d,J = 13.1 Hz, 2H), 1.76 - 1.53 (m, 3H), 1.53 - 1.31 (m, 2H), 1.31 - 1.11 (m, 1H); MS (ES+): 262.1 (M+1)。
步驟2：製備1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(452b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(142 mg，0.202 mmol)將1'-環己基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(452a ) (645 mg，2.469 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[24 g，用MeOH/DCM 0-20%溶離]純化後得到呈黃色糖漿狀之1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(452b ) (425 mg，74%產率)。MS (ES+): 232.2 (M+1)。
步驟3：製備2-氯-N-(1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(452c )
化合物452c 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (342 mg，1.82 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (0.34 mL，1.93 mmol)、1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(452b ) (420 mg，1.82 mmol)且在90℃下加熱4小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-氯-N-(1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(452c ) (184 mg，27%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.29 (s, 1H), 8.01 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.84 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.76 (dd,J = 3.5, 1.4 Hz, 2H), 7.65 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.39 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.71 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.09 (ddd,J = 11.7, 7.9, 3.7 Hz, 1H), 2.04 (d,J = 12.2 Hz, 2H), 1.83 (d,J = 13.0 Hz, 2H), 1.77 - 1.58 (m, 3H), 1.40 (q,J = 12.7 Hz, 2H), 1.24 (t,J = 12.6 Hz, 1H); MS (ES+): 383.1 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(4-((1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(452d )
化合物452d 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-N-(1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(452c ) (103 mg，0.269 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(165 mg，1.63 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.207 mL，1.12 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(4-((1'-環己基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(452d ) (59 mg，49%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.92 (s, 1H), 8.52 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.98 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.46 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.11 (dd,J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.45 (dd,J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 4.17 - 4.10 (m, 2H), 3.79 (dd,J = 10.4, 3.6 Hz, 1H), 3.47 (t,J = 8.4 Hz, 1H), 3.34 (t,J = 9.7 Hz, 2H), 2.17 - 1.76 (m, 8H), 1.66 (m, 3H), 1.53 - 1.12 (m, 3H); MS (ES+): 448.2 (M+1); MS(ES-): 446.2 (M-1)。HPLC純度97.62%。 流程453
製備(S)-(1-(1-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(453d )
步驟1：製備6-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453b )
化合物453b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(453a ) (455 mg，2.41 mmol)在2-丙醇(20 mL)中使用DIPEA (1.26 mL，7.22 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (600 mg，2.41 mmol)且在回流下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之6-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453b ) (900 mg，93%產率)；MS (ES+): 402.1 (M+1)。
步驟2：製備6-氯-1-(環己基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453c )
化合物453c 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由6-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453b ) (300 mg，0.75 mmol)在THF中使用三苯基膦(490 mg，1.87 mmol)、環己基甲醇(213 mg，1.87 mmol)及DIAD (0.36 mL，1.87 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之6-氯-1-(環己基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453c ) (200 mg，54%產率)；MS (ES+): 498.2 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(453d )
化合物453d 係根據流程2中所報道之程序，由6-氯-1-(環己基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453c ) ((200 mg，0.40 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(61 mg，0.60 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.21 mL，1.21 mmol)在NMP (3 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相製備型HPLC [C18鋼管柱，250 mm × 30 mm，用0-100% ACN/水(含有0.1% TFA)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(453d ) (35 mg，15%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.86 - 10.52 (m, 1H, D2 O可交換), 8.35 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.09 - 7.90 (m, 1H), 6.97 (s, 2H), 4.38 - 4.15 (m, 2H), 4.00 (d,J = 7.0 Hz, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.82 - 3.72 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.62 - 3.30 (m, 2H), 2.08 - 1.82 (m, 5H), 1.71 - 1.45 (m, 5H), 1.27 - 1.07 (m, 3H), 1.05 - 0.89 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.47 (來自TFA鹽); MS (ES+): 563.3 (M+1); (ES-): 561.3 (M-1)。 流程454
製備(S)-(1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(454c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(454a )
化合物454a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、四氫-2H-哌喃-4-醇(201 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌5天來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(454a ) (300 mg，82%產率)；MS (ES+): 466.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(454b )
化合物454b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(454a ) (300 mg，0.64 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (193 mg，0.78 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，123 mg，0.26 mmol)、碳酸銫(737 mg，2.26 mmol)、Pd2 (dba)3 (118 mg，0.13 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(454b )；MS (ES+): 679.3 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(454c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(454b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(0.16 mL，0.64 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(3-甲基-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(454c ) (34 mg，10%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.21 (s, 1H, D2 O可交換), 9.10 (s, 1H), 7.88 (d,J = 1.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.13 (s, 2H), 4.86 - 4.75 (m, 2H), 4.71 - 4.65 (m, 2H), 4.02 - 3.96 (m, 2H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.77 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 3.52 - 3.43 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.15 - 1.94 (m, 6H), 1.86 - 1.77 (m, 2H); MS (ES+): 565.3 (M+1); HPLC純度：96.22%。 流程455
製備(S)-(1-(4-(噻唑-2-基胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(455c )及(S)-2-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸甲酯(455d )
步驟1：製備2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸甲酯(455b )
化合物455b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (1.19 g，6.32 mmol)在2-丙醇(30 mL)中使用DIPEA (3.31 mL，18.97 mmol)、2-胺基噻唑-5-甲酸甲酯(455a ) (1 g，6.32 mmol；CAS# 6633-61-0)且在90℃下加熱4小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸甲酯(455b ) (0.75 g，38%產率)；MS (ES-): 308.0 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-(噻唑-2-基胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(455c )及(S)-2-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸甲酯(455d )
化合物455c 及455d 係根據流程2中所報道之程序，由2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸甲酯(455b ) (0.2 g，0.65 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.19 mL，1.937 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.34 mL，1.94 mmol)在NMP (3 mL)中且在130℃下加熱60分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-(噻唑-2-基胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(455c ) (10 mg，5%產率) HCl鹽及呈黃色固體狀之(S)-2-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸甲酯(455d ) (11 mg，5%產率) HCl鹽；化合物455c 之資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.24 (s, 1H), 7.55 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.48 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.30 - 4.13 (m, 1H), 3.72 (dd, J = 10.2, 3.5 Hz, 1H), 3.58 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.54 - 3.43 (m, 1H), 3.36 (dd, J = 10.2, 8.1 Hz, 1H), 2.11 - 1.86 (m, 4H); MS (ES+): 317.1 (M+1); MS (ES-): 315.1 (M-1); HPLC純度：97.33 %。化合物455d 之資料：1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.69 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 6.53 (dd, J = 4.6, 2.4 Hz, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.66 (dd, J = 10.3, 3.3 Hz, 2H), 3.50 (td, J = 11.7, 10.3, 6.6 Hz, 2H), 2.18 - 1.77 (m, 4H). MS (ES+): 375.1 (M+1); MS (ES-): 373.1 (M-1); HPLC純度：92.43 %。 流程456
製備(S)-(1-(1-異丙基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(456c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-異丙基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(456a )
化合物456a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF (4 mL)中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、丙-2-醇(118 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-異丙基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(456a ) (310 mg，93%產率)；MS (ES+): 424.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-異丙基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(456b )
化合物456b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-異丙基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(456a ) (310 mg，0.73 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (219 mg，0.88 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，139 mg，0.29 mmol)、碳酸銫(834 mg，2.56 mmol)、Pd2 (dba)3 (134 mg，0.15 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-異丙基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(456b )；MS (ES+): 637.4 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-異丙基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(456c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-異丙基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(456b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(1.83 mL，7.31 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-異丙基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(456c ) (115 mg，30%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13 (s, 1H, D2 O可交換), 9.01 (s, 1H), 7.86 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.09 (s, 2H), 4.96 - 4.86 (m, 1H), 4.70 - 4.61 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.87 - 3.78 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.52 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.13 - 1.87 (m, 4H), 1.45 - 1.38 (m, 6H); MS (ES+): 523.3 (M+1); (ES-): 557.1 (M+Cl); HPLC純度；99.14%。 流程457
製備(順)-4-(6-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己醇(457c )
步驟1：製備1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-6-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(457a )
化合物457a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由6-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453b ) (300 mg，0.75 mmol)在THF中使用三苯基膦(587 mg，2.24 mmol)、(反)-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)環己醇(516 mg，2.24 mmol)及DIAD (0.44 mL，2.24 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-6-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(457a ) (230 mg，50%產率)；MS (ES+): 614.2 (M+1)。
步驟2：製備((S)-1-(1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(457b )
化合物457b 係根據流程2中所報道之程序，由1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-6-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(457a ) (230 mg，0.37 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(57 mg，0.56 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.20 mL，1.12 mmol)在NMP (3 mL)中且在微波反應器上在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之((S)-1-(1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(457b )；MS (ES+): 679.4 (M+1)。
步驟3：製備(順)-4-(6-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己醇(457c )
向((S)-1-(1-((順)-4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環己基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(457b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(0.11 mL，3.74 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，250 mm × 30 mm，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(順)-4-(6-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環己醇(457c ) (145 mg，69%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.92 - 11.23 (m, 1H, D2 O可交換), 8.67 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.03 (s, 2H), 4.97 (s, 2H, D2 O可交換), 4.65 - 4.51 (m, 1H), 4.44 - 4.28 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.81 - 3.66 (m, 6H), 3.64 - 3.35 (m, 2H), 2.39 - 2.20 (m, 2H), 2.08 - 1.89 (m, 4H), 1.85 - 1.73 (m, 2H), 1.68 - 1.53 (m, 4H); MS (ES+): 565.3 (M+1); (ES-): 563.3 (M-1); HPLC純度：98.26%。 流程458
製備(S)-(1-(1-乙基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(458c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(458a )
化合物458a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF (4 mL)中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、乙醇(90 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(458a ) (300 mg，93%產率)；MS (ES+): 410.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-乙基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(458b )
化合物458b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(458a ) (300 mg，0.73 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (219 mg，0.88 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，140 mg，0.29 mmol)、碳酸銫(834 mg，2.56 mmol)、Pd2 (dba)3 (134 mg，0.15 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-乙基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(458b )；MS (ES+): 623.3 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-乙基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(458c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-乙基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(458b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(1.83 mL，7.31 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-乙基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(458c ) (78 mg，21%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H, D2 O可交換), 9.02 (s, 1H), 7.87 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 7.09 (s, 2H), 4.70 - 4.61 (m, 1H), 4.22 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 3.92 - 3.85 (m, 8H), 3.85 - 3.77 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.68 - 3.60 (m, 1H), 3.59 - 3.49 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.11 - 1.91 (m, 4H), 1.33 (t,J = 7.2 Hz, 3H); MS (ES+): 509.3 (M+1); HPLC純度：97.14%。 流程459
製備(S)-(1-(1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(459c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(459a )
化合物459a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF (4 mL)中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、3,3-二氟環丁醇(212 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(459a ) (180 mg，49%產率)；MS (ES+): 472.1 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(459b )
化合物459b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(459a ) (180 mg，0.38 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (114 mg，0.46 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，73 mg，0.15 mmol)、碳酸銫(435 mg，1.34 mmol)、Pd2 (dba)3 (70 mg，0.076 mmol)在t -BuOH/甲苯(11 mL，2.67:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(459b )；MS (ES+): 685.3 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(459c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(459b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (5 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(0.953 mL，3.81 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-(3,3-二氟環丁基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(459c ) (51 mg，23%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.04 (s, 1H, D2 O可交換), 9.15 (s, 1H), 7.96 (s, 1H, D2 O可交換), 7.13 (s, 2H), 5.28 - 5.15 (m, 1H), 4.69 - 4.58 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.86 - 3.75 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.67 - 3.59 (m, 1H), 3.59 - 3.50 (m, 1H), 3.26 - 3.10 (m, 4H), 2.58 (s, 3H), 2.09 - 1.87 (m, 4H);19 F NMR: (282 MHz, DMSO-d 6 , 觀察到兩對峰) δ -81.77, -82.47, -97.52, -98.21; MS (ES+): 571.3 (M+1); (ES-): 605.2 (M+Cl); HPLC純度：99.71%。 流程460
製備(R)-(1-(1-環丁基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(460d )
步驟1：製備(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(460a )
化合物460a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435a ) (1 g，4.93 mmol)在DCM (25 mL)中使用(R)-2-((第三丁基二甲基矽烷基氧基)甲基)吡咯啶鹽酸鹽(1.24 g，4.93 mmol；CAS# 474774-33-9)、DIPEA (2.58 mL，14.78 mmol)且在室溫下攪拌3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(460a ) (1.5 g，80%產率)；MS (ES+): 382.1 (M+1)。
步驟2：製備(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(460b )
化合物460b 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(460a ) (350 mg，0.92 mmol)在THF (4 mL)中使用三苯基膦(601 mg，2.29 mmol)、環丁醇(165 mg，2.29 mmol)、DIAD (0.445 mL，2.29 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(460b ) (350 mg，88%產率)；MS (ES+): 436.2 (M+1)。
步驟3：製備(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(460c )
化合物460c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(460b ) (350 mg，0.80 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (240 mg，0.96 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，153 mg，0.32 mmol)、碳酸銫(915 mg，2.81 mmol)、Pd2 (dba)3 (147 mg，0.16 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，1:4)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(460c )；MS (ES+): 649.3 (M+1)。
步驟4：製備(R)-(1-(1-環丁基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(460d )
向(R)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(460c ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(2.01 mL，8.03 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈黃色固體狀之(R)-(1-(1-環丁基-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(460d ) (85 mg，20%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.11 (s, 1H, D2 O可交換), 9.02 (s, 1H), 7.89 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.10 (s, 2H), 5.26 - 5.14 (m, 1H), 4.70 - 4.61 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.75 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.68 - 3.50 (m, 2H), 2.70 - 2.59 (m, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.40 - 2.29 (m, 2H), 2.11 - 1.96 (m, 3H), 1.94 - 1.76 (m, 3H); MS (ES+): 535.3 (M+1); (ES-): 533.2 (M-1)。 流程461
製備(S)-(1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(461c )
步驟1：製備N-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-胺(461b )
化合物461b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (70.6 mg，0.38 mmol)、5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-胺(461a ) (50 mg，0.98 mmol；CAS# 1681084-05-8；根據由Chen, Lijuan及Wei, Yuquan在《發明專利申請》, 104418821中所報道之程序製備)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，36 mg，0.075 mmol)、碳酸銫(214 mg，0.66 mmol)、Pd2 (dba)3 (34.4 mg，0.04 mmol)在t -BuOH/甲苯(5 mL，4:1)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(4 g)，用0-50% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈黃色固體狀之N-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-胺(461b ) (0.06 g，70%產率)；MS (ES+): 418.0, 420.0 (M+1); MS (ES-): 416.0, 418.1 (M-1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(461c )
化合物461c 係根據流程2中所報道之程序，由N-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-胺(461b ) (0.12 g，0.29 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.09 mL，0.862 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.150 mL，0.862 mmol)在NMP (2 mL)中且在微波反應器中在130℃下加熱60分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(461c ) (0.01 g，7%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.99 (s, 1H), 7.53 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 4.5, 1.6 Hz, 1H), 7.01 (s, 2H), 6.50 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.29 (m, 1H), 3.88 - 3.86 (m, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.67 (s, 3H), 3.52 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.45 - 3.27 (m, 2H), 2.19 - 1.82 (m, 4H); MS (ES+): 483.2 (M+1); MS (ES-): 481.2 (M-1)。 流程462
製備(S)-(1-(7-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(462c )
步驟1：製備2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(462a )
化合物462a 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(462d ) (5 g，26.6 mmol)在2-丙醇(50 mL)中使用DIPEA (13.93 mL，80 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (6.63 g，26.6 mmol)且在回流下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈灰白色固體狀之2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(462a ) (1.5 g，14%產率)；MS (ES+): 400.1 (M+1)。
步驟2：製備2-氯-7-(環己基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(462b )
化合物462b 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由2-氯-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(462a ) (250 mg，0.62 mmol)在THF中使用三苯基膦(409 mg，1.56 mmol)、環己基甲醇(178 mg，1.56 mmol)及DIAD (0.30 mL，1.56 mmol)來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之2-氯-7-(環己基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(462b ) (40 mg，13%產率)；MS (ES+): 497.2 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(7-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(462c )
化合物462c 係根據流程2中所報道之程序，由2-氯-7-(環己基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(462b ) (68 mg，0.14 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(21 mg，0.21 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(.072 mL，0.41 mmol)在NMP (3 mL)中且在微波反應器上在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相製備型HPLC [C18鋼管柱，250 mm × 30 mm，用0-100% ACN/水(含有0.1% TFA)溶離]純化，隨後藉由製備型HPLC [C18鋼管柱，250 mm × 30 mm，用0-100% ACN/水(含有0.1% TFA)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(462c ) (6.4 mg，8%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 with D2 O) δ 8.45 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 7.76 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.10 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.74 (s, 1H), 4.25 (s, 1H), 3.97 - 3.91 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.69 - 3.59 (m, 4H), 2.12 - 1.96 (m, 4H), 1.86 - 1.74 (m, 1H), 1.70 - 1.59 (m, 3H), 1.57 - 1.46 (m, 2H), 1.21 - 1.10 (m, 3H), 1.05 - 0.93 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.37 (來自TFA鹽); MS (ES+): 562.3 (M+1)。 流程463
製備(S)-(1-(1-(環丙基甲基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(463c )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(環丙基甲基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(463a )
化合物463a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF (4 mL)中使用三苯基膦(515 mg，1.96 mmol)、環丙基甲醇(142 mg，1.96 mmol)、DIAD (0.38 mL，1.96 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(環丙基甲基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(463a ) (300 mg，88%產率)；MS (ES+): 436.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(環丙基甲基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(463b )
化合物463b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-(環丙基甲基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(463a ) (300 mg，0.69 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (206 mg，0.83 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，131 mg，0.28 mmol)、碳酸銫(785 mg，2.41 mmol)、Pd2 (dba)3 (126 mg，0.14 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，1:4)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(環丙基甲基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(463b )；MS (ES+ ): 649.3 (M+1)。
步驟3：製備(S)-(1-(1-(環丙基甲基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(463c )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-(環丙基甲基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(463b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(1.72 mL，6.88 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(1-(環丙基甲基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇 (463c ) (128 mg, 35%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.39 (s, 1H, D2 O可交換), 9.05 (s, 1H), 7.89 (d,J = 1.7 Hz, 1H, D2 O可交換), 7.09 (s, 2H), 4.75 - 4.65 (m, 1H), 4.09 (d,J = 7.1 Hz, 2H), 3.95 - 3.83 (m, 8H), 3.70 (s, 3H), 3.66 - 3.53 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.15 - 1.86 (m, 4H), 1.32 - 1.20 (m, 1H), 0.51 - 0.43 (m, 2H), 0.43 - 0.37 (m, 2H); MS (ES+): 535.3 (M+1); HPLC純度：98.43%。 流程464
製備(S)-(1-(1-環丁基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(464d )
步驟1：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(464a )
化合物464a 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(453a ) (5 g，26.5 mmol)在DCM (25 mL)中使用(S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基氧基)甲基)吡咯啶鹽酸鹽(6.66 g，26.5 mmol)、DIPEA (13.86 mL，79 mmol)且在室溫下攪拌3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-70% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(464a ) (8 g，82%產率)；MS (ES+): 368.2 (M+1)。
步驟2：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(464b )
化合物464b 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(464a ) (350 mg，0.95 mmol)在THF中使用三苯基膦(624 mg，2.38 mmol)、環丁醇(171 mg，2.38 mmol)、DIAD (0.46 mL，2.38 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(464b ) (300 mg，75%產率)；MS (ES+): 422.2 (M+1)。
步驟3：製備(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(464c )
化合物464c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-1-環丁基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(464b ) (300 mg，0.71 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (213 mg，0.85 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，136 mg，0.28 mmol)、碳酸銫(811 mg，2.49 mmol)、Pd2 (dba)3 (130 mg，0.14 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，1:4)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(464c )；MS (ES+): 635.3 (M+1)。
步驟4：製備(S)-(1-(1-環丁基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(464d )
向(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-1-環丁基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(464c ) (來自上文步驟3)於MeOH/DCM (10 mL)中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(1.78 mL，7.11 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(S)-(1-(1-環丁基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇 (464d ) (174 mg, 47%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.48 - 10.05 (m, 1H, D2 O可交換), 9.06 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.94 (d,J = 6.9 Hz, 1H), 7.11 (d,J = 2.6 Hz, 2H), 5.31 - 5.18 (m, 1H), 4.62 - 4.33 (m, 1H), 3.98 - 3.91 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.79 - 3.73 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.68 - 3.40 (m, 2H), 2.70 - 2.56 (m, 2H), 2.45 - 2.34 (m, 2H), 2.21 - 1.94 (m, 4H), 1.90 - 1.76 (m, 2H); MS (ES+): 521.3 (M+1); HPLC純度：97.54%。 流程465
製備(反)-3-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁醇(465c )
步驟1：製備1-((反)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(465a )
化合物465a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(412 mg，1.571 mmol)、(順)-3-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)環丁醇(318 mg，1.57 mmol；CAS# 1408074-89-4)、DIAD (0.31 mL，1.57 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之1-((反)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(465a ) (390 mg，88%產率)；MS (ES+): 566.3 (M+1)。
步驟2：製備1-((反)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(465b )
化合物465b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由1-((反)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(465a ) (390 mg，0.69 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (206 mg，0.83 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，131 mg，0.28 mmol)、碳酸銫(785 mg，2.41 mmol)、Pd2 (dba)3 (126 mg，0.14 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，1:4)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到1-((反)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(465b )；MS (ES+): 779.4 (M+1)。
步驟3：製備(反)-3-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁醇(465c )
向1-((反)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(465b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(1.722 mL，6.89 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(反)-3-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁醇 (465c ) (107 mg, 28%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H, D2 O可交換), 9.07 (s, 1H), 7.87 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.10 (s, 2H), 5.36 - 5.27 (m, 1H), 4.70 - 4.61 (m, 1H), 4.54 - 4.46 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.87 - 3.75 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.67 - 3.48 (m, 2H), 2.77 - 2.62 (m, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.41 - 2.28 (m, 2H), 2.13 - 1.85 (m, 4H); MS (ES+): 551.3 (M+1); HPLC純度：98.70%。 流程466
製備(順)-3-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁醇(466c )
步驟1：製備1-((順)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(466a )
化合物466a 係根據流程435之步驟2中所報道之程序，由(S)-4-(2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(435b ) (300 mg，0.79 mmol)在THF中使用三苯基膦(412 mg，1.571 mmol)、(反)-3-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)環丁醇(318 mg，1.57 mmol；CAS# 1408075-44-4)、DIAD (0.31 mL，1.57 mmol)且在室溫下攪拌隔夜來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-60% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之1-((順)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(466a ) (380 mg，85%產率)；MS (ES+): 566.3 (M+1)。
步驟2：製備1-((順)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(466b )
化合物466b 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由1-((順)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-6-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(466a ) (380 mg，0.671 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (201 mg，0.81 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，128 mg，0.27 mmol)、碳酸銫(765 mg，2.35 mmol)、Pd2 (dba)3 (123 mg，0.13 mmol)在t -BuOH/甲苯(25 mL，1:4)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到1-((順)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(466b )；MS (ES+): 779.4 (M+1)。
步驟3：製備(順)-3-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁醇(466c )
向1-((順)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)環丁基)-4-((S)-2-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(466b ) (來自上文步驟2)於MeOH/DCM中之溶液中添加含4N HCl之二噁烷(1.68 mL，6.71 mmol)，在室溫下攪拌20分鐘且真空濃縮。所獲得之殘餘物藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之(順)-3-(4-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)-3-甲基-6-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)環丁醇(466c ) (76 mg，21%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.12 (s, 1H, D2 O可交換), 9.07 (s, 1H), 7.90 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.16 - 7.09 (m, 2H), 4.75 - 4.63 (m, 3H), 4.04 - 3.96 (m, 1H), 3.90 (s, 6H), 3.82 - 3.78 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.67 - 3.60 (m, 2H), 3.58 - 3.50 (m, 1H), 2.71 - 2.62 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.48 - 2.37 (m, 2H), 2.10 - 1.90 (m, 4H); MS (ES+): 551.3 (M+1); HPLC純度：98.15%。 流程467
製備((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)(2-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-基)甲酮(467c )
步驟1：製備2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸(467a )
向2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸甲酯(455b ) (0.11 g，0.36 mmol)於THF/MeOH (6 mL，1:1)中之溶液中添加氫氧化鋰水合物(0.12 g，2.84 mmol)於水(2 mL)中之溶液。所得混合物在室溫下攪拌23小時且真空蒸發至乾。將殘餘物溶解於水中，酸化至pH~4，且藉由過濾收集所獲得之固體，藉由逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化，得到呈白色固體狀之2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸(467a ) (0.10 g，95%產率)；MS (ES+): 296.0, 298.0 (M+1); MS (ES-): 294.0, 296.0 (M-1)。
步驟2：製備N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲醯胺(467b )
化合物467b 係根據流程410之步驟3中所報道之程序，由2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲酸(467a ) (0.12 g，0.41 mmol)使用2-氯-6-甲基苯胺(0.07 mL，0.61 mmol)、HATU (0.46 g，1.22 mmol)、DIPEA (0.21 mL，1.22 mmol)在DMF (4 mL)中製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0至60%乙酸乙酯/己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲醯胺(467b ) (0.05 g，29%產率)；MS (ES+): 420.9 (M+1)。
步驟3：製備((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)(2-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-基)甲酮(467c )
化合物467c 係根據流程2中所報道之程序，由N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-甲醯胺(467b ) (50 mg，0.12 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.04 mL，0.36 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.06 mL，0.36 mmol)在NMP (1 mL)中且在130℃下加熱60分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)(2-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)噻唑-5-基)甲酮(467c ) (12 mg，23%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.43 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.56 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.51 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.26 - 4.09 (m, 2H), 3.85 - 3.27 (m, 8H), 2.14 - 1.77 (m, 8H); MS (ES+): 444.2 (M+1), 909.3 (2M+Na); MS (ES-): 442.2 (M-1)。HPLC純度：95.36 %。 流程468
製備(S)-3-環丙基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-甲基苯甲醯胺(468g )
步驟1：製備3-環丙基-N-甲基-5-硝基苯甲醯胺(468b )
向3-溴-N-甲基-5-硝基苯甲醯胺(468a ) (906 mg，3.50 mmol；CAS# 1375069-14-9)、三環己基膦(103 mg，0.367 mmol)、乙酸鈀(II) (67 mg，0.298 mmol)及環丙基硼酸(423 mg，4.92 mmol)於甲苯(12 mL)中之溶液中添加K3 PO4 (2.57 g，12.11 mmol)於水(1.2 mL)中之溶液。使混合物脫氣，用氬氣填充且在100℃下加熱3小時。真空移除溶劑且所獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用30-100%乙酸乙酯/己烷溶離]純化，得到呈黃色固體狀之3-環丙基-N-甲基-5-硝基苯甲醯胺(468b ) (626 mg，81%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.78 (d,J = 5.1 Hz, 1H), 8.40 (dd,J = 2.2, 1.5 Hz, 1H), 8.10 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 7.90 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 2.81 (d,J = 4.5 Hz, 3H), 2.30 - 2.08 (m, 1H), 1.17 - 1.01 (m, 2H), 0.87 (m, 2H); MS (ES+): 221.1 (M+1)。
步驟2：製備3-胺基-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(122 mg，0.174 mmol)將3-環丙基-N-甲基-5-硝基苯甲醯胺(468b ) (623 mg，2.83 mmol)之硝基還原成胺，得到呈淡黃色油狀之3-胺基-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468c ) (538 mg，2.83 mmol，100%產率)，其未經進一步純化即用於下一步驟中；MS (ES+): 191.1 (M+1)。
步驟3：製備3-環丙基-N-甲基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(468d )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(500 mg，3.16 mmol)與3-胺基-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468c ) (538 mg，2.83 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之3-環丙基-N-甲基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(468d ) (654 mg，81%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.04 (dd,J = 3.7, 1.6 Hz, 1H), 8.55 - 8.48 (m, 2H), 7.93 (dd,J = 2.1, 1.5 Hz, 1H), 7.62 (dt,J = 6.3, 1.7 Hz, 2H), 2.82 (dd,J = 4.5, 1.9 Hz, 3H), 2.06 (m, 1H), 1.14 - 0.99 (m, 2H), 0.99 - 0.81 (m, 2H); MS (ES+): 287.1 (M+1)。
步驟4：製備3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468e )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (15 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(132 mg，0.188 mmol)將3-環丙基-N-甲基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(468d ) (650 mg，2.27 mmol)之硝基還原成胺持續3.5小時，得到呈黃色油狀之3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468e ) (582 mg，100%產率)，其未經進一步純化即用於下一步驟中；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.50 (d,J = 5.0 Hz, 1H), 7.89 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.65 (t,J = 1.8 Hz, 1H), 7.38 (d,J = 1.8 Hz, 2H), 6.70 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.44 (s, 2H), 2.79 (d,J = 4.5 Hz, 3H), 2.02 (m, 1H), 1.11 - 0.95 (m, 2H), 0.88 - 0.78 (m, 2H); MS (ES+): 257.1 (M+1)。
步驟5：製備3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468f )
化合物468f 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (437 mg，2.324 mmol)在2-丙醇(12 mL)中使用DIPEA (0.405 mL，2.321 mmol)、3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468e ) (578 mg，2.255 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468f ) (323 mg，35%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.34 (s, 1H), 8.61 (d,J = 4.8 Hz, 2H), 8.31 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 7.84 - 7.74 (m, 2H), 7.54 (dt,J = 5.1, 1.7 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 2.87 - 2.78 (m, 3H), 2.17 - 2.02 (m, 1H), 1.11 - 1.02 (m, 2H), 0.92 - 0.84 (m, 2H); MS (ES+): 408.1 (M+1)。
步驟6：製備(S)-3-環丙基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-甲基苯甲醯胺(468g )
化合物468g 係根據流程2中所報道之程序，由3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-5-環丙基-N-甲基苯甲醯胺(468f ) (110 mg，0.270 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(171 mg，1.69 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.176 mL，1.01 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-3-環丙基-5-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-N-甲基苯甲醯胺(468g ) (35 mg，28%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.87 (s, 1H), 8.72 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.62 (q,J = 4.5 Hz, 1H), 8.09 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.91 (t,J = 1.8 Hz, 1H), 7.58 (dt,J = 10.4, 1.7 Hz, 2H), 7.46 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 7.13 (dd,J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 6.45 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.26 - 4.18 (m, 1H), 3.73 (dd,J = 10.1, 3.8 Hz, 1H), 3.51 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 3.39 (dt,J = 10.0, 6.9 Hz, 2H), 2.82 (d,J = 4.4 Hz, 3H), 2.18 - 1.81 (m, 5H), 1.13 - 1.00 (m, 2H), 0.96 - 0.80 (m, 2H); MS (ES+): 473.2 (M+1); MS(ES-): 471.2 (M-1)。 流程469
製備(S)-6-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)異苯并呋喃-1(3H)-酮(469g )
步驟1：製備2-(羥甲基)-N-甲基-5-硝基苯甲醯胺(469b )
向甲胺(2 M於THF中，3 mL，6.00 mmol)溶液中添加6-硝基異苯并呋喃-1(3H)-酮(469a ) (300 mg，1.675 mmol；CAS# 610-93-5)且在密封管中加熱至75℃持續12小時。真空移除溶劑，得到呈黃色固體狀之2-(羥甲基)-N-甲基-5-硝基苯甲醯胺(469b ) (352 mg，100%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.59 (s, 1H), 8.32 (dd,J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 8.21 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 5.55 (s, 1H), 4.82 - 4.64 (m, 2H), 2.78 (d,J = 4.6 Hz, 3H)。
步驟2：製備5-胺基-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (30 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(226 mg，0.322 mmol)將2-(羥甲基)-N-甲基-5-硝基苯甲醯胺(469b ) (1.45 g，6.90 mmol)之硝基還原成胺，在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用MeOH/DCM 0-30%溶離]純化後得到呈黃色糖漿狀之5-胺基-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469c ) (1.04 g，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.26 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 6.65 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 6.57 (dd,J = 8.1, 2.4 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H), 5.03 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.33 (d,J = 5.7 Hz, 2H), 2.73 (d,J = 4.6 Hz, 3H)。
步驟3：製備2-(羥甲基)-N-甲基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(469d )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(692 mg，4.38 mmol)與5-胺基-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469c ) (842 mg，4.67 mmol)之反應在過濾後得到呈橙色固體狀之2-(羥甲基)-N-甲基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(469d ) (779 mg，64%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.04 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.53 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.42 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.91 - 7.85 (m, 2H), 7.73 (dd,J = 8.0, 0.8 Hz, 1H), 5.37 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 4.67 (d,J = 5.6 Hz, 2H), 2.79 (d,J = 4.6 Hz, 3H); MS (ES+): 277.1 (M+1)。
步驟4：製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469e )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (15 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(97 mg，0.138 mmol)將2-(羥甲基)-N-甲基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(469d ) (393 mg，1.423 mmol)之硝基還原成胺持續3.5小時，得到呈黃色泡沫狀之5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469e ) (350 mg，100%產率)，其未經進一步純化即用於下一步驟中；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.42 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.59 (d,J = 1.4 Hz, 2H), 7.54 (t,J = 1.4 Hz, 1H), 6.69 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 5.26 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 4.59 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 4.44 (s, 2H), 2.77 (d,J = 4.6 Hz, 3H). MS (ES+): 247.1 (M+1)。
步驟5：製備5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469f )
化合物469f 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (267 mg，1.42 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (0.49 mL，2.79 mmol)、5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469e ) (348 mg，1.41 mmol)且在90℃下加熱3.5小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469f ) (405 mg，72.0%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.33 (s, 1H), 8.48 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 8.28 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.72 (d,J = 1.6 Hz, 2H), 7.68 (t,J = 1.4 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.73 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 5.35 (t,J = 5.7 Hz, 1H), 4.65 (d,J = 5.0 Hz, 2H), 2.80 (d,J = 4.6 Hz, 3H); MS (ES+): 398.1 (M+1)。
步驟6：製備(S)-6-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)異苯并呋喃-1(3H)-酮(469g )
化合物469g 係根據流程2中所報道之程序，由5-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)-2-(羥甲基)-N-甲基苯甲醯胺(469f ) (123 mg，0.309 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(129 mg，1.27 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.219 mL，1.25 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18鋼管柱(250 mm × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-6-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)異苯并呋喃-1(3H)-酮(469g ) (22 mg，17%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.70 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.20 (d,J = 13.6 Hz, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.81 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 5.48 (s, 2H), 4.18 (s, 1H), 3.75 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 3.50 (s, 1H), 3.37 (t,J = 9.0 Hz, 2H), 1.98 (m, 4H); MS (ES+): 432.1 (M+1); MS (ES-): 430.1 (M-1)。 流程470
製備(反)-4-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己醇(470e )
步驟1：製備(反)-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環己醇(470b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.08 g，6.83 mmol)與(反)-4-胺基環己醇(470a ) (818 mg，7.10 mmol；CAS# 27489-62-9)之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(反)-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環己醇(470b ) (1.0 g，69%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.50 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.94 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.72 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 4.16 (m, 1H), 3.48 (m, 1H), 2.06 - 1.85 (m, 4H), 1.85 - 1.68 (m, 2H), 1.30 (m, 2H); MS (ES+): 212.1 (M+1)。
步驟2：製備(反)-4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環己醇(470c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (20 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(110 mg，0.157 mmol)將(反)-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環己醇(470b ) (536 mg，2.54 mmol)之硝基還原成胺，得到呈淡黃色油狀之(反)-4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環己醇(470c ) (460 mg，100%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟；MS (ES+): 182.2 (M+1)。
步驟3：製備(反)-4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己醇(470d )
化合物470d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (484 mg，2.57 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (1.3 mL，7.44 mmol)、(反)-4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環己醇(470c ) (460 mg，2.54 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈灰色固體狀之(反)-4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己醇(470d ) (563 mg，67%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.14 (s, 1H), 7.72 (dd,J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.67 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.35 (dd,J = 4.4, 1.6 Hz, 1H), 6.68 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.70 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 4.08 (m, 1H), 3.51 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 1.97 (m, 4H), 1.85 - 1.60 (m, 2H), 1.33 (m, 2H); MS (ES+): 333.1 (M+1)。
步驟4：製備(反)-4-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己醇(470e )
化合物470e 係根據流程2中所報道之程序，由(反)-4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己醇(470d ) (117 mg，0.352 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(174 mg，1.72 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.196 mL，1.12 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱100分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(反)-4-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己醇(470e ) (55 mg，39%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , D2 O可交換) δ 8.92 (s, 1H), 7.76 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.52 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 6.93 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 6.54 (dd,J = 4.6, 2.4 Hz, 1H), 4.41 - 4.25 (m, 1H), 4.13 - 4.03 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 2H), 3.48 - 3.39 (m, 1H), 3.39 - 3.25 (m, 2H), 2.18 - 2.04 (m, 2H), 2.04 - 1.78 (m, 8H), 1.50 - 1.21 (m, 2H); MS (ES+): 398.2 (M+1); MS (ES-): 396.2 (M-1)。 流程471
製備(反)-3-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471e )
步驟1：製備(反)-3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(726 mg，4.59 mmol)與(反)-3-胺基環丁醇鹽酸鹽(471a ) (560 mg，4.53 mmol；CAS# 1205037-95-1)使用DIEA (0.865 mL，4.95 mmol)在MeOH (20 mL)中之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(反)-3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471b ) (696 mg，84%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.57 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 4.97 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 2.71 - 2.57 (m, 2H), 2.45 - 2.32 (m, 2H)。
步驟2：製備(反)-3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (20 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(110 mg，0.157 mmol)將(反)-3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471b ) (390 mg，2.129 mmol之硝基還原成胺，得到呈淺黃色油狀之(反)- 3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471c ) (326 mg，100%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟；MS (ES+): 154.1 (M+1)。
步驟3：製備(反)-3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471d )
化合物471d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (414 mg，2.202 mmol)在2-丙醇(8 mL)中使用DIPEA (1.0 mL，5.73 mmol)、(反)-3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471c ) (326 mg，2.128 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之(反)-3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471d ) (446 mg，69%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.17 (s, 1H), 7.82 - 7.69 (m, 2H), 7.52 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.36 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.69 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 5.31 (d,J = 5.0 Hz, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.56 - 4.36 (m, 1H), 2.62 - 2.54 (m, 2H), 2.41 (m, 2H); MS (ES+): 305.1 (M+1)。
步驟4：製備(反)-3-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471e )
化合物471e 係根據流程2中所報道之程序，由(反)-3-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471d ) (109 mg，0.358 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(171 mg，1.69 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.261 mL，1.49 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱170分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(反)-3-(4-((2-((S)-2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環丁醇(471e ) (51 mg，39%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , D2 O可交換) δ 9.02 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 7.77 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 7.52 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 6.96 (dd,J = 4.5, 1.5 Hz, 1H), 6.54 (dd,J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 5.20 - 5.03 (m, 1H), 4.51 - 4.34 (m, 1H), 4.18 - 4.04 (m, 1H), 3.60 (dd,J = 10.3, 4.2 Hz, 1H), 3.54 - 3.41 (m, 1H), 3.41 - 3.25 (m, 2H), 2.83 - 2.66 (m, 2H), 2.52 - 2.38 (m, 2H), 2.06 - 1.75 (m, 4H); MS (ES+): 370.2 (M+1); MS (ES-): 368.2 (M-1)。 流程472
製備(S)-(1-(7-異丙基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(472c )
步驟1：製備(S)-(1-(2-氯-7-異丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(472b )
化合物472b 係根據流程96之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯-7-異丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(472a ) (200 mg，0.87 mmol；CAS# 1227635-12-2)在IPA (5 mL)中使用(S)-吡咯啶-2-基甲醇(88 mg，0.87 mmol)、DIPEA (0.46 mL，2.61 mmol)且在室溫下攪拌3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-70% EtOAc/己烷溶離]純化後得到呈透明油狀之(S)-(1-(2-氯-7-異丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(472b ) (200 mg，78%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.35 (s, 1H), 6.62 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 4.88 - 4.74 (m, 1H), 4.37 - 4.25 (m, 1H), 3.91 - 3.52 (m, 3H), 3.48 - 3.35 (m, 1H), 2.13 - 1.78 (m, 4H), 1.46 - 1.29 (m, 6H); MS (ES+): 295.1 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(1-(7-異丙基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(472c )
化合物472c 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯-7-異丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(472b ) (200 mg，0.68 mmol)、1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (203 mg，0.81 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，129 mg，0.27 mmol)、碳酸銫(774 mg，2.38 mmol)、Pd2 (dba)3 (124 mg，0.14 mmol)在t -BuOH/甲苯(15 mL，1:4)中且在110℃下加熱12小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(24 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-(1-(7-異丙基-2-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(472c ) (95 mg，28%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.98 - 10.34 (m, 1H, D2 O可交換), 8.57 (s, 1H), 7.81 (s, 1H, D2 O可交換), 7.32 (s, 1H), 7.00 (s, 2H), 6.75 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 4.95 - 4.78 (m, 1H), 4.75 - 4.42 (m, 1H), 4.06 - 3.94 (m, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.84 - 3.71 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.65 - 3.54 (m, 2H), 2.22 - 1.95 (m, 4H), 1.49 - 1.43 (m, 6H); MS (ES+): 508.3 (M+1); HPLC純度：98.94%。 流程473
製備(R)-(1-(1-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(473a )
化合物473a 係根據流程2中所報道之程序，由6-氯-1-(環己基甲基)-N-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(453c ) (330 mg，0.663 mmol)、(R)-吡咯啶-2-基甲醇(134 mg，1.325 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.347 mL，1.988 mmol)在NMP (3 mL)中且在微波反應器上在140℃下加熱50分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]及逆相製備型HPLC [C18鋼管柱，250mm × 30mm，用0-100% ACN/水(含有0.1% TFA)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(R)-(1-(1-(環己基甲基)-4-((1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)胺基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)吡咯啶-2-基)甲醇(473a ) (69 mg，19%產率) TFA鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.49 (m, 1H, D2 O可交換), 8.68 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.02 (s, 2H), 5.20 (brs, 1H, D2 O可交換), 4.44 - 4.19 (m, 1H), 4.15 - 3.99 (m, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.77 - 3.64 (m, 5H), 3.62 - 3.29 (m, 2H), 2.07 - 1.82 (m, 5H), 1.70 - 1.40 (m, 5H), 1.20 - 1.07 (m, 3H), 1.06 - 0.90 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -74.69 (來自TFA鹽); MS (ES+): 563.3 (M+1); HPLC純度：98.67%。 流程474
製備((S)-1-(4-((1-((反)-4-(羥甲基)環己基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(474e )
步驟1：製備((反)-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1 g，6.33 mmol)與((反)-4-胺基環己基)甲醇鹽酸鹽(474a ) (1.07 g，6.46 mmol；CAS# 1504-49-0)使用DIEA (1.1 mL，6.30 mmol)在MeOH (20 mL)中之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之((反)-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474b ) (961 mg，67%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , D2 O可交換) δ 8.50 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 4.13 (m, 1H), 3.26 (d,J = 6.2 Hz, 2H), 2.13 - 1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.60 (m, 4H), 1.45 (t,J = 10.2 Hz, 1H), 1.07 (m, 2H)。
步驟2：製備((反)-4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (20 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(125 mg，0.178 mmol)將((反)-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474b ) (400 mg，1.776 mmol)之硝基還原成胺，得到呈黃色油狀之((反)-4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474c ) (347 mg，100%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。MS (ES+): 196.1 (M+1)。
步驟3：製備((反)-4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474d )
化合物474d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (355 mg，1.888 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.9 mL，5.15 mmol)、((反)-4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474c ) (347 mg，1.777 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]純化後得到呈黃色泡沫狀之((反)-4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474d ) (518 mg，84%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.14 (s, 1H), 7.72 (dd,J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 7.68 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.51 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.35 (d,J = 4.3 Hz, 1H), 6.68 (dd,J = 4.4, 2.6 Hz, 1H), 4.49 (t,J = 5.3 Hz, 1H), 4.12 - 4.02 (m, 1H), 3.26 (m, 2H), 2.07 (m, 2H), 1.87 (m, 2H), 1.78 - 1.57 (m, 2H), 1.45 (s, 1H), 1.17 - 0.97 (m, 2H); MS (ES+): 347.2 (M+1)。
步驟4：製備((S)-1-(4-((1-((反)-4-(羥甲基)環己基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(474e )
化合物474e 係根據流程2中所報道之程序，由((反)-4-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)環己基)甲醇(474d ) (120 mg，0.346 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(206 mg，2.04 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.211 mL，1.21 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱150分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之((S)-1-(4-((1-((反)-4-(羥甲基)環己基)-1H-咪唑-4-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(474e ) (71 mg，50%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , D2 O可交換) δ 8.94 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.52 (t,J = 3.1 Hz, 1H), 4.40 - 4.19 (m, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.64 (s, 1H), 3.43 (s, 1H), 3.39 - 3.21 (m, 4H), 2.24 - 2.04 (m, 2H), 2.04 - 1.69 (m, 8H), 1.47 (s, 1H), 1.10 (m, 2H); MS (ES+): 412.2 (M+1); MS (ES-): 410.2 (M-1)。HPLC純度：97.50%。 流程475
製備(S)-(1-(4-((5-(3-氯-5-甲基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(475c )
步驟1：製備5-(3-氯-5-甲基苯基)-N-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)噻唑-2-胺(475b )
化合物475b 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (42 mg，0.22 mmol)在2-丙醇(5 mL)中使用DIPEA (0.12 mL，0.67 mmol)、5-(3-氯-5-甲基苯基)噻唑-2-胺(475a ) (50 mg，0.22 mmol；CAS# 1935900-98-3)且在90℃下加熱19小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之5-(3-氯-5-甲基苯基)-N-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)噻唑-2-胺(475b ) (26 mg，31%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.51 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 2.40 (s, 3H); MS (ES+): 377.0 (M+1)。
步驟2：製備(S)-(1-(4-((5-(3-氯-5-甲基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(475c )
化合物475c 係根據流程2中所報道之程序，由5-(3-氯-5-甲基苯基)-N-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)噻唑-2-胺(475b ) (25 mg，0.07 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(0.02 mL，0.20 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.04 mL，0.20 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在150℃下加熱30分鐘來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-20% MeOH/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18 (50 g)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(4-((5-(3-氯-5-甲基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯啶-2-基)甲醇(475c ) (12 mg，41%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.30 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.54 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.17 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.50 (dd, J = 4.5, 2.4 Hz, 1H), 4.43 - 4.30 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.58 - 3.44 (m, 1H), 3.36 (m, 2H), 2.34 - 2.31 (m, 3H), 2.22 - 1.83 (m, 4H); MS (ES+): 441.1, 443.1 (M+1); MS (ES-): 439.1, 441.1 (M-1)。 流程476
製備(S)-(1-(2-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(476a )
化合物476a 係根據流程101之步驟3中所報道之程序，由(S)-(1-(2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(96a ) (200 mg，0.68 mmol)、5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-胺(461a ) (203 mg，0.81 mmol)、二環己基(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦(XPhos，0.08 g，0.16 mmol)、碳酸銫(0.451 g，1.385 mmol)、Pd2 (dba)3 (0.07 g，0.08 mmol)在t -BuOH/甲苯(12 mL，1:4)中且在110℃下加熱21小時來製備。由此在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠(12 g)，用0-50% DMA80/DCM溶離]，隨後逆相管柱層析[C18鋼管柱，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈黃色固體狀之(S)-(1-(2-((5-(3,4,5-三甲氧基苯基)噻唑-2-基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)吡咯啶-2-基)甲醇(476a ) (0.04 g，20%產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.88 (s, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 1H), 6.95 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 6.86 (s, 1H), 6.61 (dd, J = 4.6, 2.6 Hz, 1H), 4.83 - 4.69 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.96 - 3.87 (m, 1H), 3.84 (s, 7H), 3.67 (s, 3H), 3.51 (m, 1H), 2.30 - 1.84 (m, 4H); MS (ES+): 483.1 (M+1); MS (ES-): 481.1 (M-1)。HPLC純度：98.89 %。 流程477
製備(S)-6-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477e )
步驟1：製備6-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(485 mg，3.07 mmol)與6-胺基螺[3.3]庚-2-醇(477a ) (502 mg，3.07 mmol；CAS# 1820979-19-8)使用DIPEA (0.6 mL，3.44 mmol)在MeOH (20 mL)中之反應在處理及藉由急驟管柱層析[矽膠24 g，用50-100%含乙酸乙酯/MeOH (9:1)之己烷溶離]純化後得到呈黃色固體狀之6-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477b ) (587 mg，86%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , D2 O可交換) δ 8.50 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.91 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.71 (p,J = 8.4 Hz, 1H), 4.00 (p,J = 7.3 Hz, 1H), 2.42 (m, 5H), 2.27 (m, 1H), 1.90 (m, 2H)。
步驟2：製備6-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，在MeOH (20 mL)中使用氫氧化鈀/碳20重量%負載(以乾重計)基質碳濕潤載體(92 mg，0.131 mmol)將6-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477b ) (295 mg，1.322 mmol)之硝基還原成胺，得到呈黃色油狀之6-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477c ) (255 mg，100%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟；MS (ES+): 194.1 (M+1)。
步驟3：製備6-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477d )
化合物477d 係根據流程183之步驟1中所報道之程序，由2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4a ) (251 mg，1.335 mmol)在2-丙醇(10 mL)中使用DIPEA (0.6 mL，3.44 mmol)、6-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477c ) (255 mg，1.320 mmol)且在90℃下加熱3小時來製備。由此在處理及過濾後得到呈黃色固體狀之6-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477d ) (345 mg，76%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.13 (s, 1H), 7.72 (dd,J = 2.6, 1.5 Hz, 1H), 7.68 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.49 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.35 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 6.68 (dd,J = 4.5, 2.6 Hz, 1H), 4.96 (d,J = 6.3 Hz, 1H), 4.65 (p,J = 8.2 Hz, 1H), 4.00 (p,J = 7.3 Hz, 1H), 2.59 - 2.48 (m, 1H), 2.48 - 2.38 (m, 2H), 2.38 - 2.22 (m, 3H), 2.01 - 1.83 (m, 2H); MS (ES+): 345.1 (M+1)。
步驟4：製備(S)-6-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477e )
化合物477e 係根據流程2中所報道之程序，由6-(4-((2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477d ) (109 mg，0.316 mmol)、(S)-吡咯啶-2-基甲醇(151 mg，1.49 mmol)、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.196 mL，1.12 mmol)在NMP (1.5 mL)中且在微波反應器中在140℃下加熱220分鐘來製備。由此在處理及藉由逆相管柱層析[C18 (RediSep 250 × 30 mm)，用0-100% ACN/水(含有0.1% HCl)溶離]純化後得到呈白色固體狀之(S)-6-(4-((2-(2-(羥甲基)吡咯啶-1-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)胺基)-1H-咪唑-1-基)螺[3.3]庚-2-醇(477e ) HCl鹽；MS (ES+): 410.2 (M+1); MS (ES-): 408.2 (M-1)。HPLC純度：97.68%。呈淺棕色固體狀之(72 mg，57 %產率) HCl鹽；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , D2 O可交換) δ 8.88 (s, 1H), 7.73 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 7.52 (t,J = 2.0 Hz, 1H), 6.91 (dd,J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 6.55 (dd,J = 4.5, 2.5 Hz, 1H), 4.84 (p,J = 8.3 Hz, 1H), 4.12 - 3.99 (m, 2H), 3.60 (dd,J = 10.3, 4.3 Hz, 1H), 3.53 - 3.26 (m, 3H), 2.65 - 2.56 (m, 1H), 2.52 - 2.39 (m, 4H), 2.37 - 2.21 (m, 1H), 2.07 - 1.78 (m, 6H); MS (ES+): 410.2 (M+1); MS(ES-): 408.2 (M-1)。HPLC純度97.68%。 第 2 部分：合成 3 - 取代 -( 4 - 胺基 - 1H - 咪唑 - 1 - 基 ) 試劑 製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程
步驟1：製備1,4-二硝基咪唑
1,4-二硝基咪唑係根據由Wuellner, Guido等人在2010年2月25日PCT國際申請案2010021409中所報道之程序或如Huibin Zhang等人在《化學生物學與藥物設計(Chem Biol Drug Des)》 2015; 85: 79-90中所報道來製備。
注意：1,4-二硝基咪唑為一種高能量、半穩定的物質，在不使用時應始終存放在冰箱中。熱力學量測表明，其在絕熱條件下可能會在35℃下產生足夠的能量而劇烈爆炸，使用此材料時應始終保持極端謹慎。
步驟2 製備3-取代-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)
在室溫下，將1,4-二硝基-1H-咪唑(1 mmol)添加至胺(1 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中且攪拌16小時。藉由過濾收集所獲得之固體，得到呈固體狀之3-取代-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)。
步驟3 製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)
使用10%鈀/碳作為催化劑，在15 psi下使3-取代-(4-硝基-1H-咪唑-1-基) (1 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液氫化，直至反應完成(2-16小時)。將反應混合物過濾且濃縮，得到呈油或固體狀之3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。將3-取代-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)之油性殘餘物或固體溶解於含3 M HCl之甲醇中，攪拌1小時且真空濃縮，得到呈HCl鹽形式之3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)。 製備1-環丙基-1H-咪唑-4-胺(26a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2 g，12.65 mmol)與環丙胺(0.89 mL，12.65 mmol)之反應在藉由急驟管柱層析(矽膠，用1:1己烷-乙酸乙酯溶離)純化後得到1-環丙基-4-硝基-1H-咪唑(1.75 g，90%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.45 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 3.66 (tt, J = 7.5, 3.9 Hz, 1H), 1.17 - 1.05 (m, 2H), 1.05 - 0.90 (m, 2H); MS (ES+): 154.2 (M+1), 176.2 (M+Na)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-環丙基-4-硝基-1H-咪唑(1.75 g，11.43 mmol)之硝基還原成胺得到呈油性殘餘物之1-環丙基-1H-咪唑-4-胺(26a ) (1.41 g，100%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟；MS (ES+): 124.2 (M+1)。 製備1-環己基-1H-咪唑-4-胺(28a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2 g，12.65 mmol)與環己胺(1.45 mL，12.65 mmol)之反應在藉由急驟管柱層析(矽膠，用1:1己烷-乙酸乙酯溶離)純化後得到1-環己基-4-硝基-1H-咪唑(1.38，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.57 - 8.46 (m, 1H), 8.02 - 7.89 (m, 1H), 4.26 - 4.00 (m, 1H), 2.06 - 1.94 (m, 2H), 1.88 - 1.76 (m, 2H), 1.75 - 1.67 (m, 2H), 1.67 - 1.59 (m, 1H), 1.48 - 1.10 (m, 3H); MS (ES+): 196.2 (M+1), 218.3 (M+Na)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-環己基-4-硝基-1H-咪唑(1.38 g，7.07 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-環己基-1H-咪唑-4-胺(1.22 g，104%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.54 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.10 (tt, J = 11.8, 3.8 Hz, 1H), 2.06 - 1.91 (m, 2H), 1.81 (d, J = 10.9 Hz, 2H), 1.75 - 1.51 (m, 3H), 1.47 - 1.03 (m, 3H); MS (ES+): 166.3 (M+1)。 製備1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(36a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2 g，12.65 mmol)與3-氟苯胺(1.41 g，12.65 mmol)之反應在過濾後得到呈淺灰白色固體狀之1-(2-氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(1.96 g，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.07 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.84 (dt, J = 10.2, 2.3 Hz, 1H), 7.75 - 7.68 (m, 1H), 7.68 - 7.58 (m, 1H), 7.41 - 7.29 (m, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -110.55。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(2-氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(1 g，4.83 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(36a ) (1.22 g)，其轉化成HCl鹽。 製備1-環丁基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(37a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.11 g，7.03 mmol)與3-環丁胺(0.5 g，7.03 mmol)之反應在過濾後得到呈粉色固體狀之1-環丁基-4-硝基-1H-咪唑(0.88 g，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.61 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 4.93 - 4.67 (m, 1H), 2.48 - 2.35 (m, 4H), 1.90 - 1.69 (m, 2H); MS (ES+): 168.2 (M+1), 190.2 (M+Na)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-環丁基-4-硝基-1H-咪唑(875 mg，5.23 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-環丁基-1H-咪唑-4-胺，其轉化成HCl鹽，得到呈淡黃色固體狀之1-環丁基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(37a ) (1.15 g)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.60 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.75 (p, J = 8.5 Hz, 1H), 2.46 - 2.27 (m, 4H), 1.89 - 1.65 (m, 2H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 /D2 O) δ 8.54 (s, 1H), 4.73 (p, J = 8.5 Hz, 1H), 2.46 - 2.21 (m, 4H), 1.92 - 1.62 (m, 2H); MS (ES+): 138.2 (M+1); HPLC純度：97.65%。 製備11-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(38a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(0.5 g，3.16 mmol)與喹啉-3-胺(801 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈棕色固體狀之3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(595 mg，78%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.36 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 9.21 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.87 (dd, J = 2.7, 0.8 Hz, 1H), 8.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.14 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.95 - 7.82 (m, 1H), 7.81 - 7.69 (m, 1H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(595 mg，2.48 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-胺，其轉化成HCl鹽，得到呈淡黃色固體狀之1-(喹啉-3-基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(38a ) (866 mg)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。 製備1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-胺(39a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.418 g，8.97 mmol)與吡啶-3-胺(844 mg，8.97 mmol)之反應在過濾後得到呈固體狀之3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(588 mg，35%產率)。蒸發濾液且藉由急驟管柱層析(矽膠，用0-100% DCM-80/DCM溶離)純化，得到3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(377 mg，22%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.09 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 9.06 (dd, J = 2.8, 0.8 Hz, 1H), 8.69 (dd, J = 4.8, 1.4 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.26 (ddd, J = 8.3, 2.8, 1.4 Hz, 1H), 7.65 (ddd, J = 8.3, 4.7, 0.8 Hz, 1H); MS (ES+): 191.2 (M+1), 213.2 (M+Na); MS (ES-): 189.1(M-1); HPLC純度：98.87%。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(588 mg，3.09 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-(吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-胺(39a ) (509 mg，103%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.85 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.46 (dd, J = 4.7, 1.4 Hz, 1H), 8.01 - 7.95 (m, 2H), 7.58 - 7.41 (m, 1H), 6.73 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H); MS (ES+): 161.2 (M+1), 183.2 (M+Na); MS (ES-): 195.0 (M+Cl)。 製備1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(44a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2 g，12.65 mmol)與3-氟苯胺(1.41 g，12.65 mmol)之反應在過濾後得到呈淺灰白色固體狀之1-(3-氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(1.96 g，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.07 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.84 (dt, J = 10.2, 2.3 Hz, 1H), 7.75 - 7.68 (m, 1H), 7.68 - 7.58 (m, 1H), 7.41 - 7.29 (m, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -110.55。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3-氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(1 g，4.83 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(1.03 g，100%產率)，其轉化成HCl鹽，得到呈黃色固體狀之1-(3-氟苯基)-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(44a )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (s, 1H), 7.82 - 7.71 (m, 1H), 7.69 - 7.56 (m, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.40 - 7.25 (m, 1H); MS (ES+): 178.2 (M+1)。 製備1-(3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(0.5 g，3.16 mmol)與1-(3-胺基苯基)乙酮(0.428 g，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈紅色固體狀之1-(3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(610 mg，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.15 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.60 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.33 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 8.12 - 8.05 (m, 1H), 8.05 - 7.99 (m, 1H), 7.74 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 2.68 (s, 3H); MS (ES+): 232.2 (M+1), 254.3 (M+Na); MS (ES-): 230.2 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(273 mg，1.18 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之1-(3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(47a ) (238 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 202.2(M+1), 224.2 (M+Na); MS (ES-): 200.1 (M-1)。 製備4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯酚(48a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(500 mg，3.16 mmol)與4-胺基苯酚(345 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈紅色固體狀之4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯酚(536 mg，83%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.96 (s, 1H), 8.94 - 8.74 (m, 1H), 8.40 - 8.20 (m, 1H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.91 (d, J = 8.9 Hz, 2H);1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 /D2 O) δ 8.76 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 6.90 (d, J = 8.9 Hz, 1H); MS (ES+): 206.2 (M+1); 239.3 (M+Na); MS (ES-): 204.2 (M-1), 240.2 (M+Cl); HPLC純度：99.58%。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯酚(536 mg，2.61 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯酚(48a ) (458 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 176.2 (M+1); MS (ES-): 174.1 (M-1)。 製備1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-胺(49a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(0.5 g，3.16 mmol)與4-氯苯胺(404 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈紅色固體狀之1-(4-氯苯基)-4-硝基-1H-咪唑(513 mg，73%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.02 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 - 7.80 (m, 2H), 7.71 - 7.61 (m, 2H); MS (ES+): 224.2 (M+1), 246.2 (M+Na); MS (ES-): 222.1 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(4-氯苯基)-4-硝基-1H-咪唑(536 mg，2.4 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-胺(49a ) (464 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 194.2 (M+1), 216.2 (M+Na)。 製備1-環戊基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(50a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1 g，6.33 mmol)與環戊胺(539 mg，6.33 mmol)之反應在過濾後得到呈粉紅色固體狀之1-環戊基-4-硝基-1H-咪唑(860 mg，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.50 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 4.63 (p, J = 7.2 Hz, 1H), 2.28 - 2.05 (m, 2H), 1.95 - 1.65 (m, 4H), 1.68 - 1.49 (m, 2H); MS (ES+): 182.2 (M+1), 204.3 (M+Na); MS (ES-): 180.2 (M-1), 217.2 (M+Cl)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-環戊基-4-硝基-1H-咪唑(875 mg，4.83 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-環戊基-1H-咪唑-4-胺，其轉化成HCl鹽，得到呈淡黃色固體狀之1-環戊基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(50a ) (831 mg，92%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.56 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.76 - 4.45 (m, 1H), 2.26 - 1.99 (m, 2H), 2.01 - 1.44 (m, 6H); MS (ES+): 152.2 (M+1)。 製備1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(55a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(0.5 g，3.16 mmol)與4-甲氧基苯胺(390 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈粉紅色固體狀之1-(4-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(593 mg，86%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.91 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 - 7.59 (m, 2H), 7.12 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H); MS (ES+): 220.3 (M+1); 242.3 (M+Na); MS (ES-): 218.2 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(4-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(592 mg，2.7 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(55a ) (511 mg，100%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟；MS (ES+): 190.3 (M+1); 212.3 (M+Na)。 製備1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(56a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(0.5 g，3.16 mmol)與3-甲氧基苯胺(390 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(522 mg，75%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.05 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.48 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.44 - 7.34 (m, 2H), 7.12 - 6.95 (m, 1H), 3.85 (s, 3H); MS (ES+): 220.3 (M+1); 242.3 (M+Na); MS (ES-): 218.2 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(522 mg，2.38 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-(3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(56a ) (451 mg，100%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟；MS (ES+): 190.2 (M+1); 212.3 (M+Na)。 製備1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(500 mg，3.16 mmol)與3,4,5-三甲氧基苯胺(924 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之4-硝基-1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑(854 mg，97%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.07 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.13 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 3H); MS (ES+): 302.3 (M+Na); MS (ES-): 278.2 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將4-硝基-1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑(411 mg，1.47 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色油狀之1-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(57a ) (309 mg，84%產率)，其未經進一步純化即原樣使用；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.83 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.68 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.83 (s, 6H), 3.65 (s, 3H); MS (ES+): 250.3 (M+1), 272.3 (M+Na)。 製備3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(298 mg，1.89 mmol)與3-胺基環丁腈鹽酸鹽(250 mg，1.89 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環丁腈(150 mg，41%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.77 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 4.94 - 4.69 (m, 1H), 3.32 - 3.13 (m, 1H), 3.00 - 2.73 (m, 4H); MS (ES-): 227.2 (M+Cl)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)環丁腈(150 mg，0.78 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)環丁腈(59a ) (127 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 163.2 (M+1), 185.2 (M+Na)。 製備1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-胺(65a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(500 mg，3.16 mmol)與1H-吲哚-6-胺(418 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到6-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-1H-吲哚(532 mg，74%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.51 (s, 1H), 8.96 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.42 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.77 - 7.74 (m, 1H), 7.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 3.1, 2.5 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 6.65 - 6.37 (m, 1H); MS (ES+): 229.3 (M+1), 251.3 (M+Na); MS (ES-): 227.2 (M-1), 263.2 (M+Cl); HPLC純度：97.84%。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將6-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-1H-吲哚(270 mg，1.17 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之1-(1H-吲哚-6-基)-1H-咪唑-4-胺(65a ) (231 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 199.2 (M+1); MS (ES-): 197.2 (M-1), 233.2 (M+Cl)。 製備1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-胺(67a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(500 mg，3.16 mmol)與1H-吲哚-5-胺(418 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-1H-吲哚(67a ) (668 mg，93%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.44 (s, 1H), 8.91 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 2.8 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 8.7, 2.2 Hz, 1H), 6.54 (ddd, J = 3.0, 2.0, 0.9 Hz, 1H); MS (ES+): 229.3 (M+1); MS (ES-): 227.1 (M-1), 263.2 (M+Cl)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-1H-吲哚(287 mg，1.26 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之1-(1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-胺(67a ) (231 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 199.2 (M+1), 221.2 (M+Na); MS (ES-): 197.2 (M-1), 233.1.1 (M+Cl)。 製備1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-胺(71a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(0.5 g，3.16 mmol)與1H-吡唑-3-胺(342 mg，4.11 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-1H-吡唑(410 mg, 72%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.21 (s, 1H, D2 O可交換), 8.86 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 2.5, 1.7 Hz, 1H), 6.78 (t, J = 2.2 Hz, 1H); MS (ES+): 202.2 (M+Na); MS (ES-):178.1 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)-1H-吡唑(410 mg，2.29 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之1-(1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-4-胺(71a ) (341 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 150.2 (M+1), 172.2 (M+Na); MS (ES-): 148.1 (M-1)。 製備1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(72a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1 g，6.33 mmol)與3,5-二甲氧基苯胺(969 mg，6.33 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(860 mg，55%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.07 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 6.59 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 3.83 (s, 6H); MS (ES+): 250.3 (M+1), 272.3(M+Na); MS (ES-): 248.2 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(415 mg，1.67 mmol)之硝基還原成胺得到呈黃色固體狀之1-(3,5-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(72a ) (365 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 220.2 (M+1), 242.2 (M+Na)。 製備1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(73a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1 g，6.33 mmol)與3,4-二甲氧基苯胺(969 mg，6.33 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3,4-二甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(1.38 g，87%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.98 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.42 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 8.6, 2.6 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.81 (s, 3H); MS (ES+): 250.3 (M+1), 272.3(M+Na); MS (ES-): 248.2 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3,4-二甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(415 mg，1.67 mmol)之硝基還原成胺得到呈黃色固體狀之1-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(73a ) (365 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 220.3 (M+1), 242.3 (M+Na)。 製備1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-胺(76a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.19 g，13.87 mmol)與喹啉-5-胺(2.0 g，13.87 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(1.6 g，53%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.062-9.057 (s, 1H), 8.92-8.91 (s, 1H), 8.28-8.26 (d, 2H), 8.077-8.073 (d, 1H), 7.98-7.88 (m, 2H), 7.67-7.66 (d, 1H); MS (ES+): 241.0 (M+1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)喹啉(1.0 g，4.16 mmol)之硝基還原成胺得到呈固體狀之1-(喹啉-5-基)-1H-咪唑-4-胺(76a ) (800 mg，92%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。 製備1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(81a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(500 mg，3.16 mmol)與1-甲基-1H-咪唑-4-胺鹽酸鹽(423 mg，3.16 mmol)之反應在過濾後得到呈藍色固體狀之1'-甲基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(192 mg，31%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.72 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.76 - 7.69 (m, 1H), 7.65 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H); MS (ES+): 194.2 (M+1), 216.2 (M+Na)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1'-甲基-4-硝基-1'H-1,4'-聯咪唑(190 mg，0.99 mmol)之硝基還原成胺得到呈粉紅色固體狀之1'-甲基-1'H-[1,4'-二咪唑]-4-胺(81a ) (162 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 164.2 (M+1), 186.2 (M+Na)。 製備1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(83a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1 g，6.33 mmol)與3,5-二氟苯胺(0817 mg，6.33 mmol)之反應在過濾後得到呈淺灰白色固體狀之1-(3,5-二氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(860 mg，60%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.16 - 9.06 (m, 1H), 8.63 - 8.53 (m, 1H), 7.96 - 7.66 (m, 2H), 7.54 - 7.35 (m, 1H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -107.26; MS (ES-): 224.2 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3,5-二氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(437 mg，1.94 mmol)之硝基還原成胺得到呈黃色固體狀之1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(83a ) (379 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 196.2 (M+1), 218.2 (M+Na)。 製備4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺鹽酸鹽(93a)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.5 g，9.5 mmol)與4-胺基苯甲醯胺(1.29 g，9.5 mmol)之反應在過濾後得到呈淡紅色固體狀之4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(1.65 g，75%產率)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(1.65 g，7.11 mmol)之硝基還原成胺，在使用含3 M HCl之甲醇轉化成HCl鹽後得到呈淡黃色固體狀之4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺鹽酸鹽(93a ) (680 mg，40%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。MS (ES+): 203.2 (M+1), 225.2 (M+Na)。 製備3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺鹽酸鹽(94a)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.5 g，9.5 mmol)與3-胺基苯甲醯胺(1.29 g，9.5 mmol)之反應在過濾後得到呈淡紅色固體狀之3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(1.85 g，84%產率)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將3-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(1.85 g，7.97 mmol)之硝基還原成胺，在使用含3 M HCl之甲醇轉化成HCl鹽後得到呈淡黃色固體狀之3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺鹽酸鹽(94a ) (3.05 g)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。MS (ES+): 203.3 (M+1), 225.3 (M+Na)。MS (ES-): 201.2 (M-1)。 製備1-(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮鹽酸鹽(95a)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.5 g，9.5 mmol)與1-(4-胺基苯基)乙酮(1.28 g，9.49 mmol)之反應在過濾後得到呈淡紅色固體狀之1-(4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(620 mg，28%產率)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(620 mg，0.27 mmol)之硝基還原成胺，在使用含3 M HCl之甲醇轉化成HCl鹽後得到呈淡黃色固體狀之1-(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮鹽酸鹽( 95a ) (770 mg)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。MS (ES+): 202.3 (M+1), 224.3 (M+Na)。 製備4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈鹽酸鹽(116a)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.5 g，9.5 mmol)與4-胺基苯甲腈(1.12 g，9.5 mmol)之反應在過濾後得到呈淡紅色固體狀之4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(310 mg，15%產率)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(310 mg，1.45 mmol)之硝基還原成胺，在使用含3 M HCl之甲醇轉化成HCl鹽後得到呈固體狀之4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈鹽酸鹽( 116a ) (403 mg)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。 製備1-(5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯基)乙酮鹽酸鹽(123a)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(470 mg，2.98 mmol)與1-(5-胺基-2-甲氧基苯基)乙酮鹽酸鹽(600 mg，2.98 mmol；根據由Mattes, Kenneth等人在2001年6月28日於PCT國際申請案2001046170中所報道作程序製備)之反應在過濾後得到呈紅色固體狀之1-(2-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(380 mg，49%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES-): 260.4 (M-1)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(2-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(380 g，1.46 mmol)之硝基還原成胺，在使用含3 M HCl之甲醇轉化成HCl鹽後得到呈黃色固體狀之1-(5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯基)乙酮鹽酸鹽( 123a ) (403 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。MS (ES+): 232.3 (M+1)。 製備3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺(125a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(0.33 g，2.11 mmol)與3-胺基-5-甲氧基苯甲醯胺(350 mg，2.11 mmol；根據由Priestley, Eldon Scott及Zhang, Xiaojun在2007年12月21日於PCT國際申請案2007146719中所報道作程序製備)之反應在過濾後得到呈紅色固體狀之3-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(450 mg，82%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 285.3 (M+Na)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將3-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(450 mg，1.72 mmol)之硝基還原成胺得到呈白色固體狀之3-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-5-甲氧基苯甲醯胺( 125a ) (400 mg，100%)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。 製備1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(128a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.39 g，8.79 mmol)與3,4-二氟苯胺(1.14 g，8.79 mmol)之反應在過濾後得到呈淺灰白色固體狀之1-(3,4-二氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(901 mg，46%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.03 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.19 - 8.03 (m, 1H), 7.81 - 7.66 (m, 2H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -135.17 - -135.67 (m), -138.10 - -138.52 (m);19 F CPD NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -135.44 (d, J = 22.7 Hz), -138.33 (d, J = 22.8 Hz)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3,4-二氟苯基)-4-硝基-1H-咪唑(440 mg，1.95 mmol)之硝基還原成胺得到呈黃色固體狀之1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-胺(128a ) (380 mg，100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟；MS (ES+): 196.2 (M+1), 218.2 (M+Na)。 製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈鹽酸鹽(167d )
步驟1：製備5-胺基-2,3-二甲氧基苯甲腈(167b )
在室溫下，向2,3-二甲氧基-5-硝基-苯甲腈(167a ) (2.0 g，9.61 mmol，根據由Shackelford, Scott A.等人在《有機化學雜誌(Journal of Organic Chemistry)》, 68(2), 267-275; 2003中所報道之程序製備)於EtOH (50 mL)中之攪拌溶液中添加Fe (4.2 g，76.90 mmol)且在75℃下加熱3小時。減壓濃縮反應混合物，用氨水(100 mL)淬滅且用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(100 mL)洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈灰白色固體狀之5-胺基-2,3-二甲氧基苯甲腈(167b ) (1.2 g，70 %)；1 HNMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 6.58 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.34 (s, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.71 (s, 3H)。
步驟2：製備2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(167c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.06 g，6.74 mmol)與5-胺基-2,3-二甲氧基苯甲腈(167b ) (1.2 g，6.74 mmol)之反應在過濾後得到呈灰白色固體狀之2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(167c ) (1.0 g，54 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.09 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.86-7.82 (2s, 2H), 3.98 (2s, 6H)。
步驟3：5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈鹽酸鹽(167d )
如此流程之步驟1中所報道，使用Fe (1.6 g，17.91 mmol)及含濃HCl (40 mL)之乙醇(50 mL)將2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(167c ) (1.0 g，3.64 mmol)之硝基還原成胺，得到呈灰白色固體狀之5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲腈鹽酸鹽(167d ) (1.0 g，98 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 10.49 (s, 1H), 7.84-7.78 (m, 3H), 7.24 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.90 (s, 3H)。 製備1-(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212e )
步驟1：製備1-(2,3-二甲氧基-4-硝基苯基)乙酮(212b) 及1-(2,3-二甲氧基-5-硝基苯基)乙酮(234a)
在-5℃下，向1-(2,3-二甲氧基苯基)乙-1-酮(212a ) (6.0 g，33.29 mmol)於DCM中之攪拌溶液中添加HNO3 (12.59 g，199 mmol)，在-5℃下攪拌0.5小時，倒入冰水(500 mL)中且用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取。合併有機層，用飽和NaHCO3 水溶液(3 × 100 mL)洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用乙酸乙酯/正己烷(0-25%)]純化，得到呈黃色固體狀之1-(2,3-二甲氧基-5-硝基苯基)乙酮( 234a ) (2.0 g，19%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.99 (q,J = 2.8 Hz, 2H), 3.98 (d,J = 4.9 Hz, 6H), 2.60 (s, 3H); MS (ES+): 226.0 (M+1)及呈黃色固體狀之1-(2,3-二甲氧基-4-硝基苯基)乙酮(212b) (1.8 g，17 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.04 (dd,J = 9.2, 1.1 Hz, 1H), 7.31 (dd,J = 9.3, 1.2 Hz, 1H), 3.97 (d,J = 1.3 Hz, 3H), 3.74 (d,J = 1.2 Hz, 3H), 2.48 (d,J = 1.3 Hz, 3H); MS (ES+): 226.0 (M+1)。
步驟2：製備1-(4-胺基-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212c)
向1-(2,3-二甲氧基-4-硝基苯基)乙酮(212b ) (3.0 g，13.32 mmol)於EtOH (60 ml)中之溶液中添加Pd/C (0.63 g，5.32 mmol)且在室溫下氫化12小時。反應混合物經由矽藻土過濾且在減壓下濃縮濾液，得到1-(4-胺基-2,3-二甲氧基苯基)乙酮( 212c ) ，其原樣用於下一步驟中；MS (ES+): 196 (M+1)。
步驟3：製備1-(2,3-二甲氧基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(212d)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.42 g，15.37 mmol)與1-(4-胺基-2,3-二甲氧基苯基)乙酮( 212c ) (3.0 g，15.37 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(2,3-二甲氧基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮( 212d ) (2.5 g，56 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.07 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.51 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.66 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.51 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 2.60 (s, 3H); MS (ES+): 292.0 (M+1)。
步驟4：製備1-(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(212e)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(2,3-二甲氧基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮( 212d ) (1.2 g，4.12 mmol)之硝基還原成胺得到呈固體狀之1-(4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮( 212e ) (100%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。 製備1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-胺(228c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.55 g，16.11 mmol)與5-甲氧基吡啶-3-胺(2 g，16.11 mmol；CAS# 64436-92-6)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之3-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(2 g，9.08 mmol，56%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.09 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 8.64 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.54 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.39 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將3-甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)吡啶(1 g，4.54 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色固體狀之1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-咪唑-4-胺(228c ) (853 mg，99%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.44 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.59 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.52 (s, 2H, D2 O可交換), 3.90 (s, 3H)。 製備1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(229c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(4.13 g，26.2 mmol)與4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯胺(5 g，26.2 mmol；CAS# 393-15-7)之反應在過濾後得到呈白色固體狀之1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(3.5 g，47%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.04 (t,J = 1.2 Hz, 1H), 8.47 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.54 - 7.42 (m, 1H), 3.97 (s, 3H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(1 g，3.48 mmol)之硝基還原成胺得到呈淡黃色固體狀之1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(229c ) (800 mg，89%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.86 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 (dd,J = 9.0, 2.8 Hz, 1H), 7.73 (d,J = 2.8 Hz, 1H), 7.36 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 6.68 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.92 (s, 3H);19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -60.99。 製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(230e )
步驟1：製備2,3-二甲氧基-5-硝基-苯甲醯胺(230b)
在15℃下，向2,3-二甲氧基-苯甲醯胺(230a ) (20 g，110.38 mmol；CAS# 1521-39-7)於乙酸酐(140 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加70% HNO3 (13.91 g，154.53 mmol)。反應混合物在15-25℃下攪拌1小時且倒入冰水(1000 mL)中。藉由過濾收集所獲得之固體，得到呈黃色固體狀之2,3-二甲氧基-5-硝基-苯甲醯胺( 230b ) (15 g，60 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.03-8.02 (d, 1H). 7.92-7.91 (d, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.80(s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.92 (s, 3H); MS (ES+): 227.0 (M+1)。
步驟2：製備5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲醯胺(230c)
向2,3-二甲氧基-5-硝基-苯甲醯胺(230b ) (15 g，66.31 mmol)於EtOH (500 mL)中之溶液中添加Pd/C (3.4 g，13.19 mmol)且在室溫下氫化12小時。反應混合物經由矽藻土過濾且在減壓下濃縮濾液，得到5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲醯胺( 230c ) ，其原樣用於下一步驟中。
步驟3：製備2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲醯胺(230d)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(8.21 g，52.02 mmol)與5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲醯胺( 230c ) (10 g，52.02 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲醯胺( 230d ) (8 g，61%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 9.06-9.05 (s, 1H). 8.51- 8.50 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.58-7.57 (s, 1H), 7.54 - 7.53 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.82 (s, 3H); MS (ES+): 293.0 (M+1)。
步驟4：製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(230e )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲醯胺( 230d ) (2 g，6.84 mmol)之硝基還原成胺，在藉由急驟管柱層析[矽膠，用甲醇/乙酸乙酯(0-5%)溶離]純化後得到呈灰白色固體狀之5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(230e ) (600 mg，34 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.28-8.27 (s, 1H). 8.05-8.04 (s, 1H), 7.78-7.75 (d, 2H),7.64-7.60 (d, 2H),7.38 (s, 1H),7.34 (s,1H), 3.94 (s, 3H), 3.84 (s, 3H); MS: ES+ (M+1) 263.1。 製備1-(5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(234d )
步驟1：製備1-(5-胺基-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(234b)
向1-(2,3-二甲氧基-5-硝基苯基)乙酮(234a ) (3 g，13.32 mmol)於EtOH (60 mL)中之溶液中添加Pd/C (0.63 g，5.32 mmol)且在室溫下氫化12小時。反應混合物經由矽藻土過濾且在減壓下濃縮濾液，得到1-(5-胺基-2,3-二甲氧基苯基)乙酮( 234b ) ，其原樣用於下一步驟中；MS (ES+): 196 (M+1)。
步驟2：製備1-(2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(234c)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.62 g，10.25 mmol)與1-(5-胺基-2,3-二甲氧基苯基)乙酮( 234b ) (2 g，10.25 mmol)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮( 234c ) (800 mg，27 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.58 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.47 - 7.13 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 2.45 (s, 3H); MS (ES+): 292.0 (M+1)。
步驟4：製備1-(5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮(234d)
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮( 234c ) (800 mg，2.74 mmol)之硝基還原成胺得到呈固體狀之1-(5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯基)乙酮( 234d ) (300 mg，34%產率)，其未經進一步純化即原樣用於下一步驟。 製備1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(249c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.01 g，12.69 mmol)與3-氯-5-甲氧基苯胺(249a ) (2 g，12.69 mmol；CAS# 10272-06-7)之反應在過濾後得到呈紅色固體狀之1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(249b ) (2.48 g，77%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.11 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.57 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.61 (t,J = 1.8 Hz, 1H), 7.44 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.17 (t,J = 1.9 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(249b ) (500 mg，1.97 mmol)之硝基還原成胺，得到呈棕色油狀之1-(3-氯-5-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(249c ) (430 g，98%產率)，其未經進一步純化即原樣使用；MS (ES+): 224.1 (M+1)。 製備1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(250c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.01 g，12.69 mmol)與4-氯-3-甲氧基苯胺(250a ) (2 g，12.69 mmol；CAS# 13726-14-2)之反應在過濾後得到呈淡黃色固體狀之1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(250b ) (2.64 g，82%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.11 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.65 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.59 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 7.42 (dd,J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(250b ) (1 g，3.94 mmol)之硝基還原成胺，得到呈淡黃色固體狀之1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(250c ) (430 mg，98%產率)，其未經進一步純化即原樣使用；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.93 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.47 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.27 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (dd,J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 6.71 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.93 (s, 3H)。 製備1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(256c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.744 g，11.04 mmol)與3,4-二乙氧基苯胺(256a ) (2 g，11.04 mmol；CAS# 39052-12-5)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3,4-二乙氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(256b )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.97 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.42 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.38 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 7.28 (dd,J = 8.5, 2.5 Hz, 1H), 7.10 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.11 (dq,J = 17.4, 6.9 Hz, 4H), 1.35 (td,J = 6.9, 5.3 Hz, 6H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3,4-二乙氧基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(256b ) (1 g，3.61 mmol)之硝基還原成胺，得到呈棕色固體狀之1-(3,4-二乙氧基苯基)-1H-咪唑-4-胺(256c ) (844 mg，95%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.73 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.08 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.97 (d,J = 2.9 Hz, 2H), 6.59 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H), 4.05 (dq,J = 21.4, 7.0 Hz, 4H), 1.41 - 1.23 (m, 6H); MS (ES+) 248.3 (M+1), 270.3 (M+Na)。 製備1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-咪唑-4-胺(257c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.74 g，11.04 mmol)與3-甲氧基-5-甲基苯胺(257a ) (2 g，14.58 mmol；CAS# 66584-31-4)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(257b )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.02 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.49 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.22 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.35 (s, 3H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-4-硝基-1H-咪唑(257b ) (1 g，4.29 mmol)之硝基還原成胺得到呈棕色糖漿狀之1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-咪唑-4-胺(257c ) (826 mg，95%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.84 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.88 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.63 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.31 (s, 3H); MS (ES+): 204.3 (M+1)。 製備4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲腈(258c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(2.134 g，13.50 mmol)與4-胺基-2-甲氧基苯甲腈(258a ) (2 g，13.5 mmol；CAS#7251-09-4)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之2-甲氧基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(258b )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.23 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.00 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.65 - 7.52 (m, 1H), 4.04 (s, 3H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將2-甲氧基-4-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲腈(258b ) (1 g，4.09 mmol)之硝基還原成胺，得到呈棕色糖漿狀之4-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2-甲氧基苯甲腈(258c ) (600 mg，68%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.13 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.78 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.34 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 7.27 (dd,J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.99 (s, 3H)。 製備1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(262c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.785 g，11.29 mmol)與3-(三氟甲氧基)苯胺(262a ) (2 g，11.29 mmol；CAS#1535-73-5)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之4-硝基-1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑(262b )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.12 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.58 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.91 (dd,J = 8.1, 2.1 Hz, 1H), 7.74 (t,J = 8.2 Hz, 1H), 7.52 (d,J = 8.2 Hz, 1H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將4-硝基-1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑(262b ) (1 g，3.66 mmol)之硝基還原成胺，得到呈棕色糖漿狀之1-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(262c )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.13 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 7.78 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.34 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 7.27 (dd,J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H)。 製備1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(263c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(1.65 g，10.46 mmol)與3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯胺(263a ) (2 g，10.46 mmol；CAS#86256-63-5)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(263b )；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.09 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.56 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.79 (s, 2H), 7.36 (s, 1H), 2.44 (s, 3H)。
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1H-咪唑(263b ) (1 g，3.48 mmol)之硝基還原成胺，得到呈棕色糖漿狀之1-(3-甲基-5-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-4-胺(263c )。 製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-N-(環丙基甲基)-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(267g )
步驟1：製備2, 3-二甲氧基-5-硝基-苯甲酸甲酯(267b)
在15℃下，向2,3-二甲氧基-苯甲酸甲酯(267a ) (70 g，357 mmol，CAS # 2150-42-7)於乙酸酐(490 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加70% HNO3 (33.72 g，535 mmol)。反應混合物在15至25℃之間攪拌1小時，倒入冰水(1500 mL)中且用DCM (3 × 800 mL)萃取。合併有機層，用NaHCO3 水溶液(3 × 300 mL)洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用乙酸乙酯/正己烷(0-25%)溶離]純化，得到呈黃色固體狀之2,3-二甲氧基-5-硝基-苯甲酸甲酯( 267b ) (35 g，41 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.05-8.04 (s, 1H), 7.97-7.96 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.87 (s, 3H); MS (ES+): (M+1) 242.0。
步驟2：製備5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲酸甲酯(267c)
向2,3-二甲氧基-5-硝基-苯甲酸甲酯(267b ) (4 g，16.58 mmol)於EtOH (80 mL)中之攪拌溶液中添加10% Pd/C (0.79 g, 6.63 mmol)且在室溫下氫化12小時。反應混合物經由矽藻土墊過濾且在減壓下濃縮濾液。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用乙酸乙酯/正己烷(0-25%)溶離]純化，得到呈黃色液體狀之5-胺基-2, 3-二甲氧基-苯甲酸甲酯( 267c ) (3.4 g，87 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 6.45-6.44 (s, 1H), 6.37-6.36 (s, 1H), 5.09 s, 2H) 3.76 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.61 (s, 3H); MS: (ES+): 242.0 (M+1)。
步驟3：製備5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲酸(267d)
在室溫下，向5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲酸甲酯(267c ) (3.4 g，16.09 mmol)於MeOH (30 mL)中之攪拌溶液中添加NaOH水溶液(3.21 g，80.48 mmol於水30 mL中)且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物真空濃縮以移除甲醇，冷卻至5℃，使用1 N HCl酸化(pH 3-4)且用EtOAc (4 × 100 mL)萃取。合併之萃取物用鹽水(50 mL)洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈棕色固體狀之5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲酸( 267d ) (2.2 g，70 %)；MS (ES+): 196.0 (M+1)。
步驟4：製備2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲酸(267e)
向5-胺基-2,3-二甲氧基-苯甲酸(267d ) (2.2 g，11.15mmol)於EtOH (50 mL)中之攪拌溶液中添加1,4-二硝基-1H-咪唑(1.76 g，11.15 mmol)且在室溫下攪拌5小時。藉由過濾收集所獲得之固體，真空乾燥，得到呈黃色固體狀之2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲酸( 267e ) (1.7 g，52 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.94 (s, 1H) 9.05 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.61-7.60 (s, 1H), 7.55-7.54 (s,1H), 3.94 (s, 3H), 3.83 (s, 3H); MS (ES+): 294.0 (M+1); (ES-): 292 (M-1)。
步驟5：製備N-環丙基甲基-2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲醯胺(267f)
在室溫下，向2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲酸(267e ) (1.7 g，5.79 mmol)於DMF (30.0 mL)中之溶液中添加環丙基-甲胺(500 mg，6.95 mmol)、HATU (2.7 g，6.95 mmol)、DIPEA (2.24 g，17.37 mmol)且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入冰水(100 mL)中且用EtOAc (3 × 80 mL)萃取。合併之有機相用鹽水(100 mL)洗滌，乾燥，過濾且減壓濃縮。粗殘餘物藉由急驟管柱層析[矽膠，用乙酸乙酯/正己烷(0-70%)溶離]純化，得到呈黃色固體狀之N-環丙基甲基-2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲醯胺( 267f ) (1.1 g，55 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.81-8.80 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.15 (s , 1H), 7.33 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 2.92-2.91 (m, 2H), 0.92-0.90 (m, 1H), 0.21-0.015 (m, 2H), 0.004-0.0 (m, 2H); MS (ES): 347.0 (M+1), (ES-): 345.0 (M-1)。
步驟6：製備5-(4-胺基-咪唑-1-基)-N-環丙基甲基-2,3-二甲氧基-苯甲醯胺(267g)
向N-環丙基甲基-2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-咪唑-1-基)-苯甲醯胺(267f ) (1.1 g，3.17 mmol)於IPA (60 mL)中之溶液中添加10% Pd/C (0.15 g，1.27 mmol)且在氣球壓力下氫化12小時。反應混合物經由矽藻土墊過濾且在減壓下濃縮濾液，得到5-(4-胺基-咪唑-1-基)-N-環丙基甲基-2,3-二甲氧基-苯甲醯胺( 267g ) (100%產率)，其原樣用於下一步驟中。MS (ES+): 317.0 (M+1), (ES-): 315.0 (M-1)。 製備1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(339c )
步驟1：製備1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(339b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(913 mg，5.78 mmol)與2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-胺(339a ) (1 g，5.78 mmol；CAS# 1544-85-0)之反應在過濾後得到呈黃色固體狀之1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(339b ) (491 mg，31.6%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.99 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.45 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.04 (dd,J = 1.9, 0.8 Hz, 1H), 7.68 (t,J = 1.4 Hz, 2H)。
步驟2：製備1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(339c )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-4-硝基-1H-咪唑(339b ) (484 mg，1.8 mmol)之硝基還原成胺，得到呈白色固體狀之1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1H-咪唑-4-胺(339c ) (420 mg，98%產率)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.83 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.75 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.49 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.37 (dd,J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 6.64 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H)。 製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350b )
步驟1：製備2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲酸甲酯(350a )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟2中所報道，1,4-二硝基-1H-咪唑(3.74 g，23.67 mmol)與5-胺基-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(267c ) (5 g，23.67 mmol)之反應在過濾後得到呈棕色固體狀之2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲酸甲酯(350a ) (4 g，55%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 9.06 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 8.50 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.67 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.59 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.81 (s, 3H); MS (ES+): 308.1 (M+1)。
步驟2：製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲酸甲酯(350a ) (4 g，13.01 mmol)之硝基還原成胺得到呈棕色油性物質狀之5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-2,3-二甲氧基苯甲酸甲酯(350b ) (3.61 g，100%)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.80 (dd,J = 7.3, 2.1 Hz, 1H), 7.68 - 7.34 (m, 2H), 7.35 - 7.25 (m, 1H), 7.18 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 6.62 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.81 - 3.75 (m, 6H); MS (ES+): 278.4 (M+1)。 製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-N-環戊基-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(351b )
步驟1：製備N-環戊基-2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(351a )
在室溫下，向2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲酸(267e ) (1.5 g，5.11 mmol)於DMF (30.0 mL)中之攪拌溶液中添加環戊胺(0.52 g，6.13 mmol)、HATU (1.5 g，6.13 mmol)及DIPEA (1.98 g，15.33 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌5小時，倒入冰水(150 mL)中且用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取。合併之有機萃取物用鹽水(2 × 100 mL)、水(100 mL)洗滌，乾燥，過濾且真空濃縮。粗殘餘物藉由矽膠管柱層析用80.0%乙酸乙酯/正己烷溶離純化，得到呈灰白色固體狀之N-環戊基-2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(351a ) (1.2 g，66 %)；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 9.05 (s, 1H), 8.50 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 4.26 - 4.13 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 2.02 - 1.83 (m, 2H), 1.77(m, 3H),1.43 (m, 3H); MS (ES+): 361.0 (M+1), MS (ES-): 359.3(M-1)。
步驟2：製備5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-N-環戊基-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(351b )
如用於製備3-取代-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)之通用流程之步驟3中所報道，將N-環戊基-2,3-二甲氧基-5-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)苯甲醯胺(351a ) (1.0 g，2.77 mmol)之硝基還原成胺，得到呈棕色油性物質狀之5-(4-胺基-1H-咪唑-1-基)-N-環戊基-2,3-二甲氧基苯甲醯胺(351b ) (900 mg，100%)；MS (ES+): 331.3 (M+1)。 第 3 部分：生物學分析資料
量測化合物抑制效應之生物化學分析係藉由ThermoFisher Scientific (Life Technologies)來執行。使用LanthaScreen™ Eu激酶結合分析篩選方案測試ALK2抑制。由酶分析產生之值顯示於下表中。
表 1. 化合物之量測Ki (IC50 )值。一個(+ )用於表示IC50 值小於0.1微莫耳濃度之化合物；兩個(++ )表示IC50 值在0.1與1微莫耳濃度之間的化合物；三個(+++ )表示IC50 值大於1微莫耳濃度之化合物。 以引用的方式併入
本文中列舉之所有美國專利及美國及PCT公開專利申請案以引用的方式併入本文中。 等效物
前述書面說明書被認為足以使熟習此項技術者能夠實施本發明。本發明不限於所提供之實例的範疇，因為所述實例意欲作為本發明之一個態樣的單個說明，且其他功能上等效之實施例亦在本發明之範疇內。除本文所示及所述之修改之外，本發明之各種修改對於熟習此項技術者而言將根據前述說明書變得顯而易見，且屬於隨附申請專利範圍之範疇內。本發明之各實施例未必涵蓋本發明之優勢及目標。

Claims (49)

  1. 一種由式(Ia)、式(IIa)、式(Ij)或式(IIj)表示之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，
    Figure 107120504-A0305-02-0815-2
     其中：在價數允許的情況下，Q、T、U及V各自獨立地表示CH、CH2、N、NH、O或SO2，其中CH、CH2或NH基團之任何氫視情況經出現之R4置換；W為C或N；在價數允許的情況下，X、Y及Z各自獨立地表示CH、CH2、CO、N、NH、O、S或SO2，其中CH、CH2或NH基團之任何氫視情況經出現之R4置換；Ra表示H或烷基；-R1-R1a表示
    Figure 107120504-A0305-02-0815-4
    或
    Figure 107120504-A0305-02-0815-117
    ，其中R1a表示包含二或多次出現的烷氧基之視情況經取代之苯基；J表示H、鹵基、-OR2、-NR2R3、-C(O)NR2R3、-C(O)O(烷基)、-C(O)OH、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基視情況經一或多次出現的R2a取代；R2表示視情況經取代之烷基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、雜環烷基、(環 烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基；R3表示H或烷基；或R2及R3一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a取代；R2a在每次出現時獨立地表示鹵基、羥基、-C(O)H、側氧基、-NH2、-C(O)NH2、-C(O)OH、-C(O)R5、-C(O)OR5、-C(O)NH(R5)，或視情況經取代之烷基、烷氧基、羥基烷基、未經取代之雜芳基、未經取代之芳基、未經取代之芳氧基、未經取代之雜芳氧基、未經取代之芳基烷氧基、未經取代之雜芳基烷氧基或-N(烷基)2；或任何兩個偕位或鄰位出現之R2a一起可形成螺環或稠合環烷基環；R4在每次出現時獨立地表示鹵基、氰基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、-CH2C(O)NH2、-C(O)R5、-C(O)OR5或-S(O)2R5；如價數允許，m為0-4之整數；如價數允許，n為0-4之整數；R5在每次出現時獨立地表示視情況經取代之烷基、芳烷基、芳基、雜芳烷基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基或(雜環烷基)烷基；且其中該視情況選用之取代基係選自鹵素、鹵烷基、羥基、羧基、烷氧基羰基、甲醯基、醯基、硫酯基、硫乙酸酯基、硫甲酸酯基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、-C(O)NH2、氰基、硝基、疊氮基、巰基、烷硫基、雜環烷基、環烷基、烷基、烯基、炔基、未經取代之芳基、未經取代之雜芳基、未經取代之芳烷基或未經取代之雜芳烷基。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(Ia)或式(IIa)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0817-7
    Figure 107120504-A0305-02-0817-8
  3. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由以下所表示：(a)式(Ib)或(IIb)：
    Figure 107120504-A0305-02-0817-10
    Figure 107120504-A0305-02-0817-11
     其中Q表示CH或N；且V表示CH或N；(b)式(Ic)或(IIc)：
    Figure 107120504-A0305-02-0818-12
    Figure 107120504-A0305-02-0818-13
     (c)式(Id)或(IId)：
    Figure 107120504-A0305-02-0818-14
    Figure 107120504-A0305-02-0818-15
     其中T表示CH2、NH、O或SO2，且U表示CH2、NH、O或SO2；或(d)式(Ie)或(IIe)：
    Figure 107120504-A0305-02-0818-16
    Figure 107120504-A0305-02-0818-17
  4. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(Ib)或 (IIb)表示；且其中Q為N；且V為CH；或其中Q為CH；且V為N。
  5. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(Id)或(IId)表示；且其中T為NH；且U為CH2；或其中T為CH2；且U為NH。
  6. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(Ij)或式(IIj)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0819-18
    Figure 107120504-A0305-02-0819-19
  7. 如請求項1或6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(Ik)或(IIk)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0819-21
    Figure 107120504-A0305-02-0819-22
     其中X、Y及Z各自獨立地表示CH、N、NH、O、S或SO2。
  8. 如請求項7之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由下列所表示：(a)式(Ik')或(IIk')：
    Figure 107120504-A0305-02-0820-23
    Figure 107120504-A0305-02-0820-24
     (b)式(Ik")或(IIk")：
    Figure 107120504-A0305-02-0820-25
    Figure 107120504-A0305-02-0820-26
     其中X及Z中之至少一者係選自由O、N、NH及S組成之群；或(c)式(In)或(IIn)：
    Figure 107120504-A0305-02-0821-27
    Figure 107120504-A0305-02-0821-28
     其中Y及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群。
  9. 如請求項8之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(Ik")或(IIk")表示，且：(a)X及Z中之一者係選自由O、NH及S組成之群，且X及Z中之另一者為CH；(b)X係選自由O、NH及S組成之群；(c)Z係選自由O、NH及S組成之群；(d)X及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群；或(e)X及Z中之一者為N且X及Z中之另一者為NH。
  10. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(Im)或(IIm)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0822-29
    Figure 107120504-A0305-02-0822-30
     其中X、Y及Z各自獨立地表示CH2、CO、NH、O、S或SO2。
  11. 如請求項10之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：(a)X、Y及Z中之每一者為CH2；或(b)X、Y及Z中之一者為NH或O。
  12. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R4若存在，係選自由視情況經取代之烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基及(雜環烷基)烷基組成之群。
  13. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra為H。
  14. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-R1-R1a表示
    Figure 107120504-A0305-02-0822-112
  15. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1a為3,4,5-三甲氧基苯基。
  16. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：(a)J為芳基，其視情況經一或多次出現的R2a取代；或(b)J為-NR2R3。
  17. 如請求項16之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中J為-NR2R3；且：(a)R2及R3一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a取代；或(b)R2及R3一起形成吡咯啶環，其視情況經一或多次出現的R2a取代。
  18. 如請求項16之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R2a在每次出現時獨立地表示-C(O)NH2、-C(O)R5、羥基烷基、雜芳基或芳基。
  19. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自下表：
    Figure 107120504-A0305-02-0823-118
    Figure 107120504-A0305-02-0824-32
    Figure 107120504-A0305-02-0825-33
    Figure 107120504-A0305-02-0826-34
    Figure 107120504-A0305-02-0827-35
    Figure 107120504-A0305-02-0828-36
    Figure 107120504-A0305-02-0829-37
    Figure 107120504-A0305-02-0830-38
    Figure 107120504-A0305-02-0831-39
    Figure 107120504-A0305-02-0832-40
  20. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自下表：
    Figure 107120504-A0305-02-0832-119
    Figure 107120504-A0305-02-0833-41
    Figure 107120504-A0305-02-0834-42
    Figure 107120504-A0305-02-0835-43
    Figure 107120504-A0305-02-0836-44
    Figure 107120504-A0305-02-0837-45
    Figure 107120504-A0305-02-0838-46
    Figure 107120504-A0305-02-0839-47
    Figure 107120504-A0305-02-0840-48
    Figure 107120504-A0305-02-0841-49
    Figure 107120504-A0305-02-0842-50
    Figure 107120504-A0305-02-0843-51
    Figure 107120504-A0305-02-0844-116
    Figure 107120504-A0305-02-0845-54
  21. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自下表：
    Figure 107120504-A0305-02-0845-121
    Figure 107120504-A0305-02-0846-55
    Figure 107120504-A0305-02-0847-56
    Figure 107120504-A0305-02-0848-57
    Figure 107120504-A0305-02-0849-122
    Figure 107120504-A0305-02-0850-59
    Figure 107120504-A0305-02-0851-60
    Figure 107120504-A0305-02-0852-61
    Figure 107120504-A0305-02-0853-62
    Figure 107120504-A0305-02-0854-63
    Figure 107120504-A0305-02-0855-64
    Figure 107120504-A0305-02-0856-65
  22. 一種由式(IIIa)、式(IVa)、式(IIIj)或式(IVj)表示之化合物其或其醫藥學上可接受之鹽，
    Figure 107120504-A0305-02-0856-66
     其中：在價數允許的情況下，Q、T、U及V各自獨立地表示CH、CH2、N、NH、O或SO2，其中CH、CH2或NH基團之任何氫視情況經出現之R4置換； W為C或N；在價數允許的情況下，X、Y及Z各自獨立地表示CH、CH2、CO、N、NH、O、S或SO2，其中CH、CH2或NH基團之任何氫視情況經出現之R4置換；B為CH或N；D為CH或N；其限制條件為當B為CH時，則D為N；或當D為CH時，則B為N；Ra表示H或烷基；-R1-R1a表示
    Figure 107120504-A0305-02-0857-68
    或
    Figure 107120504-A0305-02-0857-71
    ，其中R1a表示包含二或多次出現的烷氧基之視情況經取代之苯基；J表示H、鹵基、-OR2、-NR2R3、-C(O)NR2R3、-C(O)O(烷基)、-C(O)OH、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基視情況經一或多次出現的R2a取代；R2表示視情況經取代之烷基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基、(雜環烷基)烷基或羥基烷基；R3表示H或烷基；或R2及R3一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a取代；R2a在每次出現時獨立地表示鹵基、羥基、-C(O)H、側氧基、-NH2、-C(O)NH2、-C(O)OH、-C(O)R5、-C(O)OR5、-C(O)NH(R5)，或視情況經取代之烷基、烷氧基、羥基烷基、未經取代之雜芳基、未經取代之芳基、未經取代之芳氧基、未經取代之雜芳氧基、未經取代之芳基烷氧基、未經取代之雜芳基烷氧基或-N(烷基)2；或任何兩個偕位或鄰位出現之R2a一起可形成螺環或稠合環烷基環；R4在每次出現時獨立地表示鹵基、氰基或視情況經取代之烷基、烯基、鹵烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜 環烷基、雜環烯基、(雜環烷基)烷基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵環烷基、羥基環烷基、胺基環烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、-CH2C(O)NH2、-C(O)R5、-C(O)OR5或-S(O)2R5；如價數允許，m為0-4之整數；如價數允許，n為0-4之整數；R5在每次出現時獨立地表示視情況經取代之烷基、芳烷基、芳基、雜芳烷基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、(環烷基)烷基或(雜環烷基)烷基；且其中該視情況選用之取代基係選自鹵素、鹵烷基、羥基、羧基、烷氧基羰基、甲醯基、醯基、硫酯基、硫乙酸酯基、硫甲酸酯基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、-C(O)NH2、氰基、硝基、疊氮基、巰基、烷硫基、雜環烷基、環烷基、烷基、烯基、炔基、未經取代之芳基、未經取代之雜芳基、未經取代之芳烷基或未經取代之雜芳烷基。
  23. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(IIIa)或式(IVa)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0858-72
    Figure 107120504-A0305-02-0858-73
  24. 如請求項22或23之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由下列表示： (a)式(IIIb)或(IVb)：
    Figure 107120504-A0305-02-0859-74
    Figure 107120504-A0305-02-0859-75
     其中Q表示CH或N，且V表示CH或N；(b)式(IIIc)或(IVc)：
    Figure 107120504-A0305-02-0859-76
    Figure 107120504-A0305-02-0859-77
     (c)式(IIId)或(IVd)：
    Figure 107120504-A0305-02-0859-78
    Figure 107120504-A0305-02-0859-79
     其中T表示CH2、NH、O或SO2，且U表示CH2、NH、O或SO2；或(d)式(IIIe)或(IVe)
    Figure 107120504-A0305-02-0860-80
    Figure 107120504-A0305-02-0860-81
  25. 如請求項24之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(IIIb)或(IVb)代表；且其中Q為N；且V為CH；或其中Q為CH；且V為N。
  26. 如請求項24之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(IIId)或(IVd)代表；且其中T為NH；且U為CH2；或其中T為CH2；且U為NH。
  27. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(IIIj)或式(IVj)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0860-123
    Figure 107120504-A0305-02-0860-83
  28. 如請求項22或27之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式 (IIIk)或(IVk)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0861-124
    Figure 107120504-A0305-02-0861-85
     其中X、Y及Z各自獨立地表示CH、N、NH、O、S或SO2。
  29. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由下列表示：(a)式(IIIk')或(IVk')：
    Figure 107120504-A0305-02-0861-86
    Figure 107120504-A0305-02-0861-87
     (b)式(IIIk")或(IVk")：
    Figure 107120504-A0305-02-0861-125
    Figure 107120504-A0305-02-0862-89
     其中X及Z中之至少一者係選自由O、N、NH及S組成之群；或(c)式(IIIn)或(IVn)：
    Figure 107120504-A0305-02-0862-91
    Figure 107120504-A0305-02-0862-94
     其中Y及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群。
  30. 如請求項29之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(IIIk")或(IVk")，且：(a)X及Z中之一者係選自由O、NH及S組成之群，且X及Z中之另一者為CH；(b)X係選自由O、NH及S組成之群；(c)Z係選自由O、NH及S組成之群；(d)X及Z中之每一者係選自由O、N、NH及S組成之群；或(e)X及Z中之一者為N且X及Z中之另一者為NH。
  31. 如請求項27之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物由式(IIIm)或(IVm)表示：
    Figure 107120504-A0305-02-0863-96
    Figure 107120504-A0305-02-0863-97
     其中X、Y及Z各自獨立地表示CH2、CO、NH、O、S或SO2。
  32. 如請求項31之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：(a)X、Y及Z中之每一者為CH2；或(b)X、Y及Z中之一者為NH或O。
  33. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R4若存在，係選自由視情況經取代之烷基、羥基烷基、胺基烷基、烷氧基、芳基、芳烷基及(雜環烷基)烷基組成之群。
  34. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra為H。
  35. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-R1-R1a表示
    Figure 107120504-A0305-02-0863-126
  36. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1a為3,4,5-三甲氧基苯基。
  37. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：(a)J為芳基，其視情況經一或多次出現的R2a取代；或(b)J為-NR2R3。
  38. 如請求項37之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中J為-NR2R3且：(a)R2及R3一起形成雜環烷基環，其視情況經一或多次出現的R2a取代；或(b)R2及R3一起形成吡咯啶環，其視情況經一或多次出現的R2a取代。
  39. 如請求項37之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R2a在每次出現時獨立地表示-C(O)NH2、-C(O)R5、羥基烷基、雜芳基或芳基。
  40. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自下表：
    Figure 107120504-A0305-02-0864-100
  41. 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自下表：
    Figure 107120504-A0305-02-0865-99
  42. 一種如請求項1至41中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用於抑制ALK2激酶之藥劑。
  43. 一種如請求項1至41中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用於治療進行性骨化性纖維發育不良之藥劑。
  44. 一種如請求項1至41中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用於治療癌症之藥劑。
  45. 如請求項44之用途，其中該癌症為神經膠質瘤。
  46. 如請求項45之用途，其中該神經膠質瘤為彌漫型內因性腦橋神經膠質瘤。
  47. 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自下表：
    Figure 107120504-A0305-02-0867-101
    Figure 107120504-A0305-02-0868-102
    Figure 107120504-A0305-02-0869-103
    Figure 107120504-A0305-02-0870-105
    Figure 107120504-A0305-02-0871-106
    Figure 107120504-A0305-02-0872-107
    Figure 107120504-A0305-02-0873-108
    Figure 107120504-A0305-02-0874-109
    Figure 107120504-A0305-02-0875-110
  48. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X、Y或Z之一者為NR4。
  49. 如請求項48之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R4係選自由以下所組成之群：
    Figure 107120504-A0305-02-0876-111
TW107120504A 2017-06-15 2018-06-14 含有咪唑之alk2激酶抑制劑 TWI833696B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762520150P 2017-06-15 2017-06-15
US62/520,150 2017-06-15

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201904958A TW201904958A (zh) 2019-02-01
TWI833696B true TWI833696B (zh) 2024-03-01

Family

ID=64659499

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW107120504A TWI833696B (zh) 2017-06-15 2018-06-14 含有咪唑之alk2激酶抑制劑

Country Status (19)

Country Link
US (2) US11661426B2 (zh)
EP (1) EP3638229A4 (zh)
JP (2) JP7257338B2 (zh)
KR (2) KR102659955B1 (zh)
CN (1) CN110913855B (zh)
AR (1) AR112027A1 (zh)
AU (2) AU2018283053C1 (zh)
BR (1) BR112019026517A2 (zh)
CA (1) CA3066164A1 (zh)
CL (1) CL2019003669A1 (zh)
CO (1) CO2020000194A2 (zh)
EA (1) EA202090052A1 (zh)
IL (2) IL271109B2 (zh)
MA (1) MA49401A (zh)
MX (2) MX2019015226A (zh)
PH (1) PH12019502781A1 (zh)
SG (1) SG10202112496SA (zh)
TW (1) TWI833696B (zh)
WO (1) WO2018232094A1 (zh)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TR201911151T4 (tr) 2013-03-14 2019-08-21 Tolero Pharmaceuticals Inc Jak2 ve alk2 inhibitörleri ve bunların kullanım yöntemleri.
AR112027A1 (es) 2017-06-15 2019-09-11 Biocryst Pharm Inc Inhibidores de alk 2 quinasa que contienen imidazol
CA3103995A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Methods for treating diseases associated with abnormal acvr1 expression and acvr1 inhibitors for use in the same
ES2973117T3 (es) * 2018-09-25 2024-06-18 Incyte Corp Compuestos de pirazolo[4,3-d]pirimidina como moduladores de ALK2 y/o FGFR
JP7504880B2 (ja) 2018-10-26 2024-06-24 ケロス セラピューティクス インコーポレイテッド Ａｌｋ２阻害剤の結晶形
JP7248255B2 (ja) * 2019-01-29 2023-03-29 シャンドン スアンズ ファーマ カンパニー，リミテッド ヘキソングルコキナーゼ阻害剤およびその使用
WO2020235902A1 (ko) * 2019-05-17 2020-11-26 주식회사 보로노이 헤테로고리 융합 피리미딘 유도체 및 이의 용도
SG11202112796YA (en) * 2019-05-21 2021-12-30 Voronoi Inc N-containing heteroaryl derivative and pharmaceutical composition comprising same as active ingredient for prevention or treatment of cancer
GB202006382D0 (en) 2020-04-30 2020-06-17 Spermatech As Use
IL303812A (en) * 2020-12-21 2023-08-01 Biocryst Pharm Inc Dosing regimens for oral ALK2 kinase inhibitors
MX2023013742A (es) * 2021-05-25 2023-11-28 Biocryst Pharm Inc Inhibidores de alk2 quinasa que contienen imidazol.
US12084453B2 (en) 2021-12-10 2024-09-10 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK12 inhibitors
CN116478145B (zh) * 2022-04-13 2024-02-02 杭州邦顺制药有限公司 Alk2激酶抑制剂

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201018693A (en) * 2008-09-30 2010-05-16 Astrazeneca Ab Chemical compounds 496-1p
WO2014151871A2 (en) * 2013-03-14 2014-09-25 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Jak2 and alk2 inhibitors and methods for their use

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4559157A (en) 1983-04-21 1985-12-17 Creative Products Resource Associates, Ltd. Cosmetic applicator useful for skin moisturizing
LU84979A1 (fr) 1983-08-30 1985-04-24 Oreal Composition cosmetique ou pharmaceutique sous forme aqueuse ou anhydre dont la phase grasse contient un polyether oligomere et polyethers oligomeres nouveaux
LU86084A1 (fr) 1985-09-20 1987-04-02 Faco Sa Apparei de massage electrique
US5102417A (en) 1985-11-07 1992-04-07 Expandable Grafts Partnership Expandable intraluminal graft, and method and apparatus for implanting an expandable intraluminal graft
US4800882A (en) 1987-03-13 1989-01-31 Cook Incorporated Endovascular stent and delivery system
US4820508A (en) 1987-06-23 1989-04-11 Neutrogena Corporation Skin protective composition
US4886062A (en) 1987-10-19 1989-12-12 Medtronic, Inc. Intravascular radially expandable stent and method of implant
US4992478A (en) 1988-04-04 1991-02-12 Warner-Lambert Company Antiinflammatory skin moisturizing composition and method of preparing same
US4938949A (en) 1988-09-12 1990-07-03 University Of New York Treatment of damaged bone marrow and dosage units therefor
WO1990013332A1 (en) 1989-05-11 1990-11-15 Cedars-Sinai Medical Center Stent with sustained drug delivery
DE69110787T2 (de) 1990-02-28 1996-04-04 Medtronic, Inc., Minneapolis, Minn. Intraluminale prothese mit wirkstoffeluierung.
PT100905A (pt) * 1991-09-30 1994-02-28 Eisai Co Ltd Compostos heterociclicos azotados biciclicos contendo aneis de benzeno, ciclo-hexano ou piridina e de pirimidina, piridina ou imidazol substituidos e composicoes farmaceuticas que os contem
US5429634A (en) 1993-09-09 1995-07-04 Pdt Systems Biogenic implant for drug delivery and method
US5419760A (en) 1993-01-08 1995-05-30 Pdt Systems, Inc. Medicament dispensing stent for prevention of restenosis of a blood vessel
US6774278B1 (en) 1995-06-07 2004-08-10 Cook Incorporated Coated implantable medical device
US6335324B1 (en) 1998-06-25 2002-01-01 Bristol-Myers Squibb Co. Beta lactam compounds and their use as inhibitors of tryptase
CA2386955A1 (en) * 1999-11-22 2001-05-31 Warner-Lambert Company Quinazolines and their use for inhibiting cyclin-dependent kinase enzymes
US6919338B2 (en) 2000-06-28 2005-07-19 Astrazeneca Ab Substituted quinazoline derivatives and their use as inhibitors of aurora-2 kinase
JP4105948B2 (ja) 2000-09-15 2008-06-25 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロテインキナーゼインヒビターとして有用なピラゾール化合物
WO2003022214A2 (en) 2001-09-06 2003-03-20 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Piperazine and homopiperazine compounds
WO2003078423A1 (en) 2002-03-15 2003-09-25 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Compositions useful as inhibitors of protein kinases
US6770729B2 (en) 2002-09-30 2004-08-03 Medtronic Minimed, Inc. Polymer compositions containing bioactive agents and methods for their use
WO2004081000A1 (en) 2003-03-10 2004-09-23 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
MY145634A (en) 2003-12-29 2012-03-15 Bristol Myers Squibb Co Pyrrolotriazine compounds as kinase inhibitors
US20070244114A1 (en) 2004-07-06 2007-10-18 Myriad Genetics, Incorporated Compounds and therapeutical use thereof
EP1831216A2 (en) 2004-12-23 2007-09-12 Pfizer Products Inc. Heteroaromatic derivatives useful as anticancer agents
US7572809B2 (en) 2005-12-19 2009-08-11 Hoffmann-La Roche Inc. Isoquinoline aminopyrazole derivatives
PL2041138T3 (pl) * 2006-07-07 2014-11-28 Bristol Myers Squibb Co Pirolotriazyny jako inhibitory kinazy
US7531539B2 (en) 2006-08-09 2009-05-12 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolotriazine kinase inhibitors
US20100311965A1 (en) 2007-12-28 2010-12-09 Carna Biosciences Inc. 2-aminoquinazoline derivative
RU2567752C2 (ru) 2009-06-12 2015-11-10 Абивакс Соединения, пригодные для лечения рака
AR079814A1 (es) * 2009-12-31 2012-02-22 Otsuka Pharma Co Ltd Compuestos heterociclicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y sus usos
US8470820B2 (en) 2010-01-22 2013-06-25 Hoffman-La Roche Inc. Nitrogen-containing heteroaryl derivatives
JP6121658B2 (ja) 2011-06-29 2017-04-26 大塚製薬株式会社 治療用化合物、及び関連する使用の方法
US9499519B2 (en) 2012-12-26 2016-11-22 Medivation Technologies, Inc. Fused pyrimidine compounds and use thereof
GB201416754D0 (en) 2014-09-23 2014-11-05 Mission Therapeutics Ltd Novel compounds
CN108239071B (zh) 2016-12-27 2020-12-04 沈阳药科大学 酰胺及硫代酰胺类衍生物及其制备方法和应用
AR112027A1 (es) 2017-06-15 2019-09-11 Biocryst Pharm Inc Inhibidores de alk 2 quinasa que contienen imidazol

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201018693A (en) * 2008-09-30 2010-05-16 Astrazeneca Ab Chemical compounds 496-1p
WO2014151871A2 (en) * 2013-03-14 2014-09-25 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Jak2 and alk2 inhibitors and methods for their use

Also Published As

Publication number Publication date
US20230271975A1 (en) 2023-08-31
AU2022221581B2 (en) 2024-07-04
PH12019502781A1 (en) 2020-10-26
KR102659955B1 (ko) 2024-04-23
KR20200028939A (ko) 2020-03-17
EP3638229A1 (en) 2020-04-22
IL271109B1 (en) 2024-06-01
IL271109A (en) 2020-01-30
AU2018283053C1 (en) 2023-03-02
JP7257338B2 (ja) 2023-04-13
EA202090052A1 (ru) 2020-05-22
CN110913855A (zh) 2020-03-24
AU2022221581A1 (en) 2022-09-22
US20220332723A1 (en) 2022-10-20
CN110913855B (zh) 2024-09-03
AR112027A1 (es) 2019-09-11
MX2019015226A (es) 2020-08-03
CA3066164A1 (en) 2018-12-20
BR112019026517A2 (pt) 2020-07-21
CO2020000194A2 (es) 2020-04-24
IL271109B2 (en) 2024-10-01
TW201904958A (zh) 2019-02-01
KR20240063970A (ko) 2024-05-10
MX2023004309A (es) 2023-05-04
EP3638229A4 (en) 2021-03-03
US12054492B2 (en) 2024-08-06
WO2018232094A1 (en) 2018-12-20
JP2023082149A (ja) 2023-06-13
US11661426B2 (en) 2023-05-30
AU2018283053B2 (en) 2022-09-08
IL312670A (en) 2024-07-01
JP2020523351A (ja) 2020-08-06
SG10202112496SA (en) 2021-12-30
MA49401A (fr) 2020-04-22
CL2019003669A1 (es) 2020-05-22
AU2018283053A1 (en) 2020-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI833696B (zh) 含有咪唑之alk2激酶抑制劑
US7541362B2 (en) Heterocyclic dihydropyrimidine compounds
RU2258705C2 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ 8-ФЕНИЛ-6,9-ДИГИДРО[1,2,4]-ТРИАЗОЛО[3,4-i]ПУРИН-5-ОНА, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ
US12043610B2 (en) Substituted benzofuran, benzopyrrole, benzothiophene, and structurally related complement inhibitors
US20110165183A1 (en) Piperidine derivatives as jak3 inhibitors
AU2017213768A1 (en) Benzopyrazole compounds and analogues thereof
EA020322B1 (ru) СОЕДИНЕНИЯ ДЛЯ УМЕНЬШЕНИЯ ПРОДУКЦИИ β-АМИЛОИДА
JP2023519824A (ja) 補体阻害剤としてのピロロピリミジンアミン
TW202436303A (zh) 含有咪唑之alk2激酶抑制劑
OA21436A (en) Pyrrolopyrimidine amines as complement inhibitors