TWI828393B - 風茹草精油用於美容之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明係提供一種風茹草精油用於美容上之用途。由於本發明所揭風茹草精油係能有效地提升皮膚之彈性、保濕度及明亮度，並能夠抑制皮膚細胞生成黑色素與紅色素，且不具有細胞毒性，故能夠達到預防或改善皮膚老化及皮膚敏感之功效。
Description
本發明係有關於植物之第二用途，特別係指一種風茹草精油用於美容之用途。
按，隨著時代之進步，現代人除了注重內在健康外，更是在意外在容貌之維持，因此，市面上出現琳瑯滿目與皮膚保養相關之產品。根據統計，消費者於挑選皮膚保養產品時，除了會在意功效是否真實外，也會特別注意其所使用之成分是否天然、產品對於環境是否友善，是以，許多業者於開發皮膚保養產品時亦會特別選用天然且對環境友善之原料，尤其是植物性原料特別受到青睞。
風茹草又被稱為鹿角草（Glossogyne tenuifolia），是一種多年生植物，具有耐旱、耐鹽之特性，除了於南亞、澳洲外，於澎湖島亦有種植。由於風茹草含有豐富鐵、鉀、鈣等元素，以及維生素B、維生素C等成分，具有消暑解熱之功效，為澎湖島上人民最常用於消暑之青草茶。近年來，更有研究指出風茹草萃取物具有許多生理活性，包含抗菌、抗疲勞、抗癌、保肝等，惟，獲得風茹草萃取物之製程中多會使用有機溶劑作為萃取溶劑，基於有機溶劑對於人體安全仍存在疑慮，以致於以現有技術獲得之風茹草萃取物具有難以被應用於人體上之缺失。
本發明之主要目的係在於提供一種風茹草精油用於美容之用途，特別係指本發明所揭風茹草精油能夠改善皮膚老化及色素沈澱之情形。
本發明之另一目的係在於提供一種風茹草精油用於美容之用途，特別係指本發明所揭風茹草精油能夠改善或預防皮膚過敏或是泛紅之情形。
緣是，為能達成上述目的，本發明係揭露一種風茹草精油用於製備美容保養相關組合物之用途，其中，該風茹草精油係不具有細胞毒性。
其中，風茹草精油係由一風茹草經水蒸氣蒸餾所得者。
於本發明之一實施例中係揭露該風茹草精油係用於製備抑制皮膚色素生成之組合物之用途，其中，該抑制皮膚色素生成之組合物係能夠用於有效地抑制皮膚細胞黑色素及/或紅色素之生成，以能有效地達到預防或改善膚色、美白以及皮膚泛紅之功效。
於本發明之另一實施例中係揭露該風茹草精油係用於製備舒緩皮膚敏感之組合物之用途，其中，該舒緩皮膚敏感之組合物係能夠有效地抑制皮膚因過敏反應而產生之發炎現象或是改善已經發生之發炎症狀。
於本發明之又一實施例中係揭露該風茹草精油係用於製備美容保養品之用途，其中，該美容保養品係為外用品，能夠經皮吸收，達到增加皮膚保水度、皮膚彈性及光澤度之功效。
本發明係在於提供一種風茹草精油用於美容上之用途，具體來說，由於本發明所揭風茹草精油係具有提升皮膚之彈性、保濕度及明亮度、且能抑制皮膚黑色素與紅色素之生成的能力，故能夠用於作為美容保養品、抑制皮膚色素生成之組合物或舒緩皮膚敏感之組合物中之活性成分。
於本發明之實施例中，本發明所揭風茹草精油之製備過程中係未使用任何不具人體安全性之溶劑，因此，本發明所揭風茹草精油係不具有細胞毒性，可以安全地使用於人體。
其中，本發明所揭風茹草精油中主要包含有α-蒎烯（α-Pinene）、檸烯（Limonene）、異丙基甲苯（p-Cymene）、γ-衣蘭油烯（γ-Muurolene）等成分。
於本發明之實施例中，係分別測試風茹草精油之主要成分：α-蒎烯、檸烯、異丙基甲苯、γ-衣蘭油烯之一氧化氮抑制能力及細胞毒性（MTT分析），結果顯示，上述成分不僅不具有細胞毒性，並能夠有效抑制細胞於LPS刺激下產生一氧化氮，且其抑制能力係隨著劑量增加而提升。
於本發明之一實施例中，該風茹草精油係將風茹草全株乾燥後，再以進行蒸餾程序所得者，其中，該蒸餾程序係得一自動化蒸餾設備進行，亦可由本發明所屬技術領域且具通常知識者常用之蒸餾設備進行。
本發明所揭「組合物」，係指含有0.001％-100％本發明所揭風茹草精油為活性成分之物。
本發明所揭「美容保養品」，係指含有本發明所揭風茹草精油之組合物，並得含有一美容上可接受之載體。
以下，為能說明本發明之技術特徵及其功效，將茲舉若干實例並搭配圖式做詳細說明如後，其中：
以下實例中所使用之風茹草係採收自台灣澎湖群島；
以下實例中所使用之RAW 264.7 鼠巨噬細胞（下稱RAW 264.7細胞）獲自美國典型培養物保藏中心（ATCC, Manassas, VA），培養條件為於溫度37°C下以含有10% 胎牛血清、4.5 g/L葡萄糖、4.5 mM谷氨酰胺、100單位/mL青黴素和100 g/mL鏈黴素之DMEM培養基進行培養。
實例一：製備風茹草精油
將風乾之風茹草全株置於蒸餾設備（Clevenger-type apparatus），以水蒸氣蒸餾6小時，得到風茹草精油，其中，該風茹草精油中係含有α-蒎烯（α-Pinene）、檸烯（Limonene）、異丙基甲苯（p-Cymene）、γ-衣蘭油烯（γ-Muurolene）。
實例二：人體試驗
取實例一製備之風茹草精油並稀釋為濃度10％，作為風茹草精油液。收集20位受試者，每天分別將2cc風茹草精油液塗於臉上，試驗時間共5週，並每天以皮膚檢測儀器檢測皮膚含水度、亮度、黑色素生成量、紅色素生成量及彈力，經統計分析後，結果如圖1至圖5所示，其中，檢測彈力及含水度之儀器係為多功能生理分析儀（Comb，丹麥 Cortex Technology）；檢測明亮度、、黑色素生成量、紅色素生成量之儀器係為皮膚黑紅色素色差儀（DSM III，丹麥 Cortex Technology）。
由圖1至圖5之結果可知，投予本發明所揭風茹草精油至人體皮膚上，係能夠於短時間內提升皮膚保濕度、彈力及明亮度，並且能夠有效地降低黑色素生成、皮膚泛紅或皮膚敏感之症狀。換言之，本發明所揭風茹草萃取物係能夠用於作為保養品或護膚品之活性成分。
實例三：細胞實驗（一）
將 RAW 264.7細胞（1 x 10
4細胞）接種於96 孔培養板中，除空白組外，其餘細胞組皆以1 μg/mL脂多醣（下稱LPS）及不同劑量之風茹草精油（0、12.5、25、50、100、200 µg/mL）處理，培養24小時後，以MTT比色分析法檢測各細胞組之存活率，結果如圖6所示。
由圖6之結果可知，在LPS刺激下，RAW 264.7細胞數量顯著增加，顯示LPS確實會使細胞產生發炎反應；而於LPS刺激下，同時投予本發明所揭風茹草精油，不論於何劑量下，皆不會對於RAW 264.7細胞活性造成影響，顯示本發明所揭風茹草精油係不具有細胞毒性。
實例四：細胞實驗（二）
將 RAW 264.7細胞（1 x 10
4細胞）接種於96 孔培養板中，除空白組外，其餘細胞組皆以1 μg/mL LPS及不同劑量之風茹草精油（0、25、50、100 µg/mL）處理，培養24小時後，分別以Griess試劑分析法及（prostaglandin E2）檢測套組檢測各細胞組之存活率、亞硝酸鹽濃度及PGE
2（prostaglandin E2）生成量，結果如圖7至圖8所示。
由圖7及圖8之結果可知，於LPS刺激下，RAW 264.7 細胞之一氧化氮及PGE2之生成量係分別為646±17%及666±47 pg/mL，分別較空白組係明顯增加；而於LPS刺激之條件下，同時投予本發明所揭風茹草精油時，RAW 264.7 細胞之一氧化氮及PGE2之生成量係會被抑制，並且隨著風茹草精油之劑量越高，抑制效果越佳，具體來說，於投予風茹草精油劑量為25、50及100μg/mL時，RAW 264.7 細胞之一氧化氮生成量分別為542±18%、433±33%及212±19%，並PGE
2之生成量係分別為524±41 pg/mL、399±40 pg/mL及153±7 pg/mL。
根據本發明之通常知識，皮膚暴露在有粉塵、塵螨或發炎因子下，會造產生過敏發炎之反應，使細胞中一氧化氮及PGE
2之生成量增加，而由上述結果可知，本發明所揭風茹草精油確實能夠有效抑制細胞中生成一氧化氮及PGE2，顯示本發明所揭風茹草精油係能夠增加皮膚細胞抵禦環境並減少過敏現象之功效。
實例五：細胞實驗（三）
將 RAW 264.7細胞（1 x 10
6細胞）接種於96 孔培養板中，除空白組外，其餘細胞組皆以1 μg/mL LPS及不同劑量之風茹草精油（0、25、50、100 µg/mL）處理並培養6小時，而後萃取各細胞組之RNA並且以Q-PCR對iNOS及COX-2之表現進行定量，結果如圖9及圖10所示。
實例六：細胞實驗（四）
將 RAW 264.7細胞（1 x 10
6細胞）接種於96 孔培養板中，除空白組外，其餘細胞組皆以1 μg/mL LPS及不同劑量之風茹草精油（0、25、50、100 µg/mL）處理並培養24小時，而後以特異性抗體進行免疫足跡分析，結果如圖11及圖12所示。
由圖9至圖12之結果可知，當RAW 264.7未受LPS刺激誘導時，細胞中iNOS和COX-2之表現量幾乎沒有；當RAW 264.7受LPS刺激時，細胞內iNOS和COX-2表現量係明顯上升；而當RAW 264.7受LPS刺激之同時投予本發明所揭風茹草精油，細胞內iNOS和COX-2表現量係會被抑制，並隨著投予之風茹草精油劑量越高，抑制iNOS和COX-2之表現量的效果越佳。
綜合由圖9至圖12之結果顯示，本發明所揭風茹草精油係能有效抑制細胞中促發炎因子之表現，以達到預防或減緩皮膚細胞因接觸過敏原而發生過敏反應之功效。
實例七：細胞實驗（五）
將RAW 264.7細胞於無抗生素之DMEM培養基中培養5小時後，以 雙熒光素酶報告基因檢測系統（Promega，Madison，WI）檢測經不同處理之各細胞中之螢光強度，其中，除空白組外，各細胞組係以不同劑量（0、25、50、100 µg/mL）之風茹草精油處理之條件下，同時添加LPS（1 µg/mL），共培養2小時。而後以光譜儀（Hidex Oy，Turku，Finland）在 405 nm（A405）下對相對熒光強度進行量化，結果如圖13及圖14所示。
由圖13及圖14之結果可知，於LPS刺激下，NF-κB報導基因活性增加8.6倍，並且會增加NF-κB之核轉位；而於LPS誘導刺激下同時投予25、50、100 µg/mL之風茹草精油，可分別降低NF-κB報導基因活性6.0、4.4、2.4倍，並且能夠有效地抑制NF-κB之核轉位。
實例八：細胞實驗（六）
將 RAW 264.7細胞分為若干組，除空白組外，其餘細胞組皆以1 μg/mL LPS及不同劑量之風茹草精油（0、25、50、100 µg/mL）進行共培養1小時，而後以特異性抗體進行免疫足跡分析，得到各細胞組中I-κBα及IKKα之表現量，結果如圖15及圖16所示。
由圖15及圖16之結果可知，於LPS刺激下，於Ser32/36殘基之磷酸化I-κBα顯著增加，而同時處理風茹草精油與LPS者，細胞中磷酸化I-κBα顯則明顯降低，並且會抑制I-κBα上游激酶：IKKα之磷酸化。
無
圖1係為統計分析所有受試者於試驗期間之皮膚明亮度變化之結果。
圖2係為統計分析所有受試者於試驗期間之皮膚保濕率變化之結果。
圖3係為統計分析所有受試者於試驗期間之黑色素生成量變化之結果。
圖4係為統計分析所有受試者於試驗期間之紅色素生成量變化之結果。
圖5係為統計分析所有受試者於試驗期間之皮膚彈性度變化之結果。
圖6係為分析實例三中各細胞組之細胞活性之結果。
圖7係為分析實例四中各細胞組之一氧化氮生成量之結果。
圖8係為分析實例四中各細胞組之PGE
2生成量之結果。
圖9係為分析實例五中各細胞組之iNOS相對表現量之結果。
圖10係為分析實例五中各細胞組之COX-2相對表現量之結果。
圖11係為分析實例六中各細胞組之iNOS蛋白相對表現量之結果。
圖12係為分析實例六中各細胞組之COX-2蛋白相對表現量之結果。
圖13係為分析實例七中各細胞組中NF-κB相對螢光活性（相對於β-半乳糖苷酶）之結果。
圖14係為以免疫螢光染色實例七中各細胞組之細胞核之結果。
圖15係為分析實例八中各細胞組之IKKα蛋白及磷酸化IKKα蛋白相對表現量之結果。
圖16係為分析實例八中各細胞組之I-κBα蛋白及磷酸化I-κBα蛋白相對表現量之結果。
無
Claims (3)
- 一種將風茹草(Glossogyne tenuifolia)精油用於製備抑制皮膚色素生成之組合物之用途，其中，該風茹草精油係由一風茹草(Glossogyne tenuifolia)經水蒸氣蒸餾6小時所得者，並含有α-蒎烯(α-Pinene)、檸烯(Limonene)、異丙基甲苯(p-Cymene)、γ-衣蘭油烯(γ-Muurolene)。
- 如請求項1所述用途，其中，該抑制皮膚色素生成之組合物係用於抑制皮膚黑色素及紅色素生成。
- 一種將風茹草精油用於製備舒緩皮膚敏感之組合物之用途，其中，該風茹草精油係由一風茹草(Glossogyne tenuifolia)經水蒸氣蒸餾6小時所得者，並含有α-蒎烯(α-Pinene)、檸烯(Limonene)、異丙基甲苯(p-Cymene)、γ-衣蘭油烯(γ-Muurolene)。
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-
2022
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 期刊 徐玟靖 蝦紅素及香茹、苦茶花萃取物之化粧品生物活性探討 2011年 |
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