TWI814250B - 羊臟器二次副產物用於治療或預防代謝相關疾病之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明係揭露一種羊臟器二次副產物用於製備治療或預防代謝相關疾病之組合物之用途,亦即本發明係透過以微生物二次處理羊內臟或是其副產物而得到具有生物活性之發酵副產物,由於該發酵副產物具有抑制或改善脂肪累積於肝臟細胞、改善或預防血糖增加之活性,因此,藉由投予一有效量之本發明所揭羊臟器發酵產物至一個體,係能夠達到預防或治療脂肪肝、糖尿病或與上述任一疾病相關之病症的功效。
Description
本發明係有關於一種畜產廢棄物之第二用途,特別係指一種羊臟器二次副產物用於治療或預防代謝相關疾病之用途。
按,屠宰場屠宰如牛、羊、雞、豬等畜禽後會產生許多不要的內臟或屠體,該些內臟和屠體被歸類為廢棄物,目前除了屠宰場自行以焚化爐進行焚燒處理外,多會委由外部業者進行高溫高壓法處理,以能完全避免病菌和寄生蟲污染,並能將處理後之物質進一步作為肥料或其他利用,然而,由於委由他人處理仍需要一筆費用,導致屠宰業者及畜產業者非為全部都會按照法規規定之方法進行廢棄物之處理。
事實上,如內臟或屠體等廢棄物若未經妥善處理而流入市場或是環境中,不僅會造成環境污染、空氣污染等問題,更可能會導致病原菌滋生,對於全民健康將造成未知風險;而即便是以焚化方式進行處理,對於業者來說除了需要額外費用或是空間外,處理過程中仍會產生污染物質;由此可知,目前對於畜產廢棄物之處理仍無一種經濟且有效之方法。
本發明之主要目的係在於提供一種羊臟器二次副產物用於治療或預防代謝相關疾病之用途,亦即藉由本發明所揭製程獲得之羊臟器二次副產物係具有抑制脂肪累積及調控血糖之功能,因此,藉由投予一有效量之羊臟器二次副產物或是含有羊臟器二次副產物之組合物至一個體,係能夠有效地達到治療或預防如脂肪肝、肥胖症、糖尿病等與代謝相關疾病之功效。
緣是,為能達成上述目的,本發明係揭露一種將羊臟器二次副產物用於製備治療或預防代謝相關疾病之組合物之用途,具體來說,該羊臟器二次副產物係由一羊臟器以一益生菌進行發酵反應所得者,其中,該羊臟器係得來自一羊肝或一羊腎;該益生菌係得為一枯草桿菌或一馬鈴薯桿菌。
藉由投予一有效量之該羊臟器二次副產物或是含有該羊臟器二次副產物至一個體,係能夠有效地達到控制體重增加、改善或治療糖尿病、脂肪肝或其相關疾病、或是預防與脂肪代謝相關疾病發生之功效。
其中,該個體係不限於人類,得為動物,故該組合物係得被製備為營養補充品、食品、寵物食品等。
於本發明之一實施例中,該羊臟器二次副產物係由一羊肝副產物以一馬鈴薯桿菌進行發酵反應後所得者。
於本發明之另一實施例中,該羊臟器二次副產物係由一羊腎副產物以一枯草桿菌進行發酵反應後所得者。
於本發明之實施例中,該與代謝相關疾病係與高糖及/或高脂飲食相關,包含有肥胖、脂肪肝、糖尿病、代謝症候群、高血脂症等。
本發明係提供一種羊臟器二次副產物用於治療或預防代謝相關疾病之用途,具體來說,將羊內臟或是其副產物以微生物進行發酵處理後獲得之發酵副產物,係具有抑制或改善脂肪累積於肝臟細胞、改善或預防血糖增加之活性,是以,投予一有效量之本發明所揭羊臟器發酵產物至一個體,係能夠達到預防或治療脂肪肝、糖尿病或與上述任一疾病相關之病症的功效。
於本發明之一實施例中,該羊臟器發酵產物係為一羊肝發酵產物或一羊腎發酵產物。
其中,該羊腎發酵產物係由一羊腎副產物以枯草桿菌(Bacillus subtilis)作為菌酛進行發酵反應所得者。
其中,該羊肝發酵產物係由一羊肝副產物以馬鈴薯桿菌(Bacillus mesentericus)作為菌酛進行發酵反應所得者。
本發明所指「與脂肪肝相關病症」,係指由脂肪肝所引發、或誘導形成之病症,或是脂肪肝為其病徵之病症,例如肝損傷、高血脂症、代謝症候群、肝硬化、肝纖維化等。
本發明所指「與糖尿病相關病症」,係指由糖尿病所引發、或誘導形成之病症,或是以糖尿病為其主要病徵之病症,例如高血糖症、代謝症候群等。
本發明所指「羊腎副產物」,係指羊隻屠宰後所廢棄或剩餘之羊腎臟組織。
本發明所指「羊肝副產物」,係指羊隻屠宰後所廢棄或剩餘之羊肝臟組織。
以下,為能說明本發明之技術特徵及效果,將茲舉若干實例並搭配圖式做詳細說明如後。
以下實例中所使用之細胞皆為本發明所屬技術領域且具通常知識者能夠輕易取得。
實例一:製備羊內臟發酵產物
將羊腎副產物及羊肝副產物分別乾燥粉碎,以90ºC,15秒條件進行殺菌,以HCl(20%)調整pH值至4.6,經離心(10分鐘、1,000 ×g、20ºC)去除固形物,將90 mL上清液加入0.024 g硫酸鎂、0.003 g 硫酸錳、0.001 g 硫酸亞鐵、0.100 g Tween 80、20μg胺基苯甲酸(P-Aminobenzoic Acid)、10μg 葉酸,經濾膜過濾後調整pH值至5.2後,以厭氧包脫氧,接種1×10
6菌酛,於適當溫度下培養8-16小時,菌體以4,000 ×g離心,取上清液(Liu et al., 2012; Pescuma et al., 2012),通過濾膜(0.22 μm)過濾後,得到以不同菌酛發酵之羊腎發酵產物或羊肝發酵產物,其中,菌酛包含有馬鈴薯桿菌(
Bacillus mesentericus)、枯草桿菌(
Bacillus subtilis)、植物乳桿菌(
Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳桿菌(
Lactibacillus rhamnosus)。
實例二:細胞試驗
使用HepG2肝細胞,除空白組外,分別經由高糖培養液將行培養,並於培養基中添加不同濃度之羊腎發酵產物或羊肝發酵產物(實例一中所獲得):0、25、50、100 mg/ml後,以油紅O進行細胞染色,以影像分析軟體進行分析定量,以觀察不同濃度之羊腎發酵產物或羊肝發酵產物對肝細胞攝入脂肪的狀況,結果如圖1及圖2所示。
由圖1之結果可知,培養基中未添加羊肝發酵產物之肝細胞中明顯出現大量脂肪累積,而當培養基中添加以馬鈴薯桿菌發酵所得之羊肝發酵產物時,脂肪於肝臟細胞累積量才有下降之情形,並且脂肪於肝臟細胞中之累積量隨著以馬鈴薯桿菌發酵所得之羊肝發酵產物添加量之增加而下降。
由圖2之結果可知,培養基中未添加羊腎發酵產物之肝細胞中明顯出現大量脂肪累積,而當培養基中添加以枯草桿菌發酵所得之羊腎發酵產物時,脂肪於肝臟細胞累積量才有下降之情形,並且脂肪於肝臟細胞中之累積量隨著以枯草桿菌發酵所得之羊腎發酵產物添加量之增加而下降。
由圖1及圖2之結果顯示,並非利用任何微生物或益生菌作為菌酛所得之羊肝發酵產物或是羊腎發酵產物皆具有抑制肝臟細胞中脂肪累積之能力,亦即羊腎副產物以枯草桿菌作為菌酛進行發酵反應所得之羊腎bs發酵產物及羊肝副產物以馬鈴薯桿菌作為菌酛進行發酵反應所得之羊肝bm發酵產物係具有抑制脂肪累積於肝臟細胞之功效。
實例三:分析羊腎bs發酵產物及羊肝bm發酵產物
將羊腎bs發酵產物及羊肝bm發酵產物分別進行LC分析,其中,分析條件為流速0.5 ml/分、沖堤液為30%甲醇;結果如圖3及圖4所示,其中,羊腎發酵產物之滯留時間為218分鐘;羊肝發酵產物之滯留時間為213、377、395、469分鐘。
實例四:動物試驗(一)
取C57BL/6J品系的8週齡公鼠(購自財團法人國家實驗動物中心),隨機進行分組,並分別以下列條件處理:
第1組:正常飲食小鼠;
第2組:高脂高糖飲食誘導;
第3組:高脂高糖飲食誘導脂肪肝模式,投予羊肝bm發酵產物低劑量組:30 mg/kg;
第4組:高脂高糖飲食誘導脂肪肝模式,投予羊肝bm發酵產物高劑量組:300 mg/kg;
第5組:高脂高糖飲食誘導脂肪肝模式,投予羊腎bs發酵產物低劑量組:30 mg/kg;
第6組:高脂高糖飲食誘導脂肪肝模式,投予羊腎bs發酵產物高劑量組:300 mg/kg;
第7組:高脂高糖飲食誘導脂肪肝模式,投予肌肽(carnosin),劑量:200 mg/kg。
試驗時間共8週,除第1組小鼠外,第2-7組小鼠於試驗第1-4週為正常飲食並投與不同劑量試驗物質,試驗第5-8週以高脂高糖飲食並同時投予不同劑量試驗物質進行誘導形成代謝症候群模式,具有糖尿病前期及脂肪肝之病症。
試驗期間每週紀錄各組小鼠之體重變化,結果如圖5所示。試驗結束後,犧牲各組小鼠,並且取各組小鼠之肝臟進行秤重分析,結果如圖6至圖8所示。
由圖5之結果可知,投予本發明所揭羊肝bm發酵產物或羊腎bs發酵產物係能夠預防或減緩個體於高脂高糖飲食下之肥胖情形;並且,由圖6至圖8之結果可知,高脂高糖飲食下確實會成功誘導脂肪肝模式小鼠,使小鼠肝臟重量因為脂肪累積而增加,而透過預先投予本發明所揭羊肝bm發酵產物或羊腎bs發酵產物,不論於高劑量或是低劑量,都能夠有效地使小鼠於高脂高糖誘導模式下不增加肝臟重量,亦即能夠抑制高脂高糖飲食下所造成之脂肪累積於肝臟之情形。
由圖5至圖8之結果證實,投予有效量之本發明所揭羊肝bm發酵產物或羊腎bs發酵產物係能夠抑制或預防因高熱量或高糖份飲食所造成之體重增加,並且能夠有效地抑制脂肪累積於肝臟或是其他臟器,以達到預防或減緩脂肪肝之形成,並有效降低與脂肪肝相關疾病發生之風險,如代謝症候群、糖尿病、肝臟纖維化、肝臟損傷等。
實例五:動物試驗(二)
參照實例四的內容,以高脂高果糖飲食誘導形成代謝症候群模式,使誘導形成代謝症候群模式之小鼠具有糖尿病前期之病症,而故各組小鼠分別以下列條件處理:
第1組:正常飲食小鼠;
第2組:高脂高果糖飲食誘導糖尿病模式;
第3組:高脂高果糖飲食誘導糖尿病模式,投予肌肽,劑量:10 mg/kg;
第4組:高脂高果糖飲食誘導糖尿病模式,投予羊肝bm發酵產物低劑量組:30 mg/kg;
第5組:高脂高果糖飲食誘導糖尿病模式,投予羊肝bm發酵產物高劑量組:300 mg/kg;
第6組:高脂高果糖飲食誘導糖尿病模式,投予羊腎bs發酵產物低劑量組:30 mg/kg;
第7組:高脂高果糖飲食誘導糖尿病模式,投予羊腎bs發酵產物高劑量組:300 mg/kg。
試驗時間共8週,試驗期間每週紀錄各組小鼠之體重,結果如圖9所示;並計算試驗期間之各組小鼠的體重變化,結果如圖10所示。試驗結束後,對各組小鼠進行口服葡萄糖耐受性試驗且進行分析,結果如圖11及圖12所示;並且取各組小鼠之血液,進行糖化血色素分析,結果如圖13所示。
由圖9至圖13之結果可知,第2組之小鼠的體重、葡萄糖耐受性及糖化血色素係明顯高於第1組小鼠,顯示確實成功誘導建立出糖尿病模式小鼠;而投予本發明所揭羊肝bm發酵產物或羊腎bs發酵產物不僅能夠抑制體重增加,並且能夠降低糖化血色素及葡萄糖耐受性。換言之,對罹患糖尿病之個體或是有罹患糖尿病風險之個體投予有效量之本發明羊肝bm發酵產物或羊腎bs發酵產物,係能夠改善或預防糖尿病或其相關病症。
無
圖1係為分析不同菌酛發酵所得之羊肝發酵產物於不同添加量下對於脂肪於肝細胞中累積之結果,其中,正控制組表示僅以高糖培養液培養;空白組表示以正常培養基培養;其餘則為高糖培養基中添加羊肝發酵產物之劑量;Bm代表羊肝發酵產物以馬鈴薯桿菌(
Bacillus mesentericus)發酵所得者;Bs代表羊肝發酵產物以枯草桿菌(
Bacillus subtilis)發酵所得者;Lp代表羊肝發酵產物以植物乳桿菌(
Lactobacillus plantarum)發酵所得者;Lr代表羊肝發酵產物以鼠李糖乳桿菌(
Lactibacillus rhamnosus)發酵所得者。
圖2係為分析不同菌酛發酵所得之羊腎發酵產物於不同添加量下對於脂肪於肝細胞中累積之結果,其中,正控制組表示僅以高糖培養液培養;空白組表示以正常培養基培養;其餘則為高糖培養基中添加羊腎發酵產物之劑量;Bm代表羊腎發酵產物以馬鈴薯桿菌(
Bacillus mesentericus)發酵所得者;Bs代表羊腎發酵產物以枯草桿菌(
Bacillus subtilis)發酵所得者;Lp代表羊腎發酵產物以植物乳桿菌(
Lactobacillus plantarum)發酵所得者;Lr代表羊腎發酵產物以鼠李糖乳桿菌(
Lactibacillus rhamnosus)發酵所得者。
圖3羊肝發酵產物之LC圖譜。
圖4係為羊腎發酵產物之LC圖譜。
圖5係為實例四中各組小鼠於試驗前後之體重變化。
圖6係為實例四中各組小鼠之肝臟外觀。
圖7係為實例四中各組小鼠之肝臟重量變化。
圖8係為實例四中各組小鼠之肝臟體重比。
圖9係為紀錄實例五中各組小鼠於試驗期間各週體重之結果。
圖10係為實例五中各組小鼠於試驗前後之體重變化。
圖11係為實例五中各組小鼠進行口服葡萄糖耐受性試驗之結果。
圖12係為分析實例五中各組小鼠口服葡萄糖耐受性試驗曲線下面積之結果。
圖13係為分析實例五中各組小鼠之糖化血色素之結果。
Claims (3)
- 一種將羊臟器二次副產物用於製備治療或預防代謝相關疾病之組合物之用途,其中:該羊臟器二次副產物係由下列流程所製得者:將一羊肝副產物粉碎後,調整pH值至約4.6,經離心處理去除固形物,得到一上清液;將該上清液與硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、Tween 80、胺基苯甲酸、葉酸以一預定比例混合併調整pH值至約5.2,接種一馬鈴薯桿菌進行一發酵反應;發酵反應完成後,過濾所得者即為該羊臟器二次副產物;該與代謝相關疾病係為糖尿病、脂肪肝或肥胖症。
- 一種將羊臟器二次副產物用於製備治療或預防代謝相關疾病之組合物之用途,其中:該羊臟器二次副產物係由下列流程所製得者:一羊腎副產物粉碎後,調整pH值至約4.6,經離心處理去除固形物,得到一上清液;將該上清液與硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、Tween 80、胺基苯甲酸、葉酸以一預定比例混合併調整pH值至約5.2,接種一枯草桿菌進行一發酵反應;發酵反應完成後,過濾所得者即為該羊臟器二次副產物;該與代謝相關疾病係為糖尿病、脂肪肝或肥胖症。
- 如請求項1或2所述用途,其中,該組合物係為一寵物食品。
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TW111105160A TWI814250B (zh) | 2022-02-11 | 2022-02-11 | 羊臟器二次副產物用於治療或預防代謝相關疾病之用途 |
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TW202332454A TW202332454A (zh) | 2023-08-16 |
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Citations (1)
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CN106722270A (zh) * | 2016-12-27 | 2017-05-31 | 济南邦地生物工程有限公司 | 一种青山羊肝口服液及其生产方法 |
-
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- 2022-02-11 TW TW111105160A patent/TWI814250B/zh active
Patent Citations (1)
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CN106722270A (zh) * | 2016-12-27 | 2017-05-31 | 济南邦地生物工程有限公司 | 一种青山羊肝口服液及其生产方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
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期刊 Kou-Tai Yang, Chen Lin, Cheng-Wei Liu, Yi-Chen Chen, "Effects of chicken-liver hydrolysates on lipid metabolism in a high-fat diet", Food Chemistry Volume 160, 1 October 2014, Pages 148-156. * |
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TW202332454A (zh) | 2023-08-16 |
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