TWI781523B - 腺苷磷酸酯的定量分析方法 - Google Patents
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Abstract
一種腺苷磷酸酯的定量分析方法，包含：使包含腺苷磷酸酯組分與離子液體基質的混合物進行紫外光雷射脫附電離處理，形成離子化樣品，其中，腺苷磷酸酯組分包括腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯，且離子液體基質包括由二羥基苯甲酸陰離子與吡啶鎓陽離子所形成的離子液體及由α-氰基-4-羥基肉桂酸陰離子與三丙基銨鎓離子所形成的離子液體中至少一者；對該離子化樣品進行分析，獲得腺苷單磷酸酯母離子、腺苷二磷酸酯母離子及腺苷三磷酸酯母離子的訊號強度，並計算出腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯，及腺苷三磷酸酯間的含量比例。
Description
本發明是有關於一種定量分析方法，特別是指一種腺苷磷酸酯的定量分析方法。
美國專利公開第2005158863A號揭示一種用於紫外光基質輔助雷射脫附電離(matrix-assisted laser desorption/ionization，簡稱MALDI)質譜分析中且在室溫下為離子型液體的基質，且該基質包含有機物質與胺鹽。該胺鹽選自3-胺基喹啉、吡啶、一級胺、二級胺、三級胺，或咪唑。該有機物質選自2,5-二羥基苯甲酸、2-羥基-5-甲氧基苯甲酸、吡啶甲酸、3-羥基吡啶甲酸、煙酸、5-氯-2-巰基苯并噻唑、6-氮雜-2-硫代-胸腺嘧啶、2’,4’,6’-三羥基苯乙酮水合物、2’,6’-二羥基-苯乙酮、9H-吡啶并[3,4-b]吲哚、1,8,9-蒽三酚、反-3-吲哚丙烯酸、脎、阿魏酸、2,5-二羥基苯乙酮、1-硝基哢唑、7-胺基-4-甲基香豆素、2-(對-羥基苯氮雜)-苯甲酸、8-胺基芘-2,3,4-三磺酸、2[2E-3-(4-第三丁基苯基)-2-甲基丙-2-伸烯基]丙二腈、4-甲氧基-3-羥基肉桂酸，或3,4-二羥基肉桂酸。該美國專利案的基質能夠用於分析例如聚合物、蛋白質或核苷酸等分析物的MALDI質譜分析方法中。
雖該美國專利案的基質能夠用於分析核苷酸的MALDI質譜分析方法中，但由於該核苷酸為不穩定(labile)的分子，在MALDI質譜分析過程中，該核苷酸的磷酸根容易地自該核苷酸上脫離，因此，當利用MALDI質譜分析方法分析包含腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯的分析物時，該腺苷三磷酸酯因磷酸根脫離而轉變成腺苷單磷酸酯或腺苷二磷酸酯，而該腺苷二磷酸酯則轉變成腺苷單磷酸酯，此時，無法確認在質譜圖中的腺苷二磷酸酯母離子訊號峰是來自於腺苷二磷酸酯或腺苷三磷酸酯，及無法確認腺苷單磷酸酯母離子訊號峰是來自於腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯或腺苷三磷酸酯，以至於無法對腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯間的比例進行定量，甚至導致定量結果失真，此外，由於該腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯在生物細胞中的比例會影響生物細胞的代謝與能量轉移，因此，如何能夠有效地對包含腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯的分析物進行定量分析是亟為重要且迫切需被開發的。
因此，本發明的目的，即在提供一種腺苷磷酸酯的定量分析方法。
於是，本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法，包含以下步驟：
使混合物進行紫外光雷射脫附電離處理，形成離子化樣品，其中，該混合物包含腺苷磷酸酯組分與離子液體基質，該腺苷磷酸酯組分包括腺苷單磷酸酯(Adenosine monophosphate，簡稱AMP)、腺苷二磷酸酯(Adenosine diphosphate，簡稱ADP)及腺苷三磷酸酯(Adenosine triphosphate，簡稱ATP)，且該離子液體基質包括至少一種離子液體，而該離子液體選自由二羥基苯甲酸陰離子與吡啶鎓陽離子所形成的離子液體或由α-氰基-4-羥基肉桂酸陰離子與三丙基銨鎓離子所形成的離子液體；
利用質量分析器及質量偵測器對該離子化樣品進行分析，獲得衍生自該腺苷單磷酸酯的腺苷單磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度、衍生自該腺苷二磷酸酯的腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度，及衍生自該腺苷三磷酸酯的腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度；及
依據該等離子訊號強度，計算出該腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯間的含量比例。
本發明的功效在於：透過該離子液體基質降低該腺苷磷酸酯組分的腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯中的磷酸根分別自該腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯上脫離，在本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法中，該腺苷單磷酸酯母離子是衍生自腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯母離子是衍生自腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯母離子是衍生自腺苷三磷酸酯，致使能夠對該腺苷磷酸酯組分中該腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯間的含量比例進行定量分析。
以下就本發明內容進行詳細說明。
本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法包含以下步驟：
使混合物進行紫外光雷射脫附電離處理，形成離子化樣品，其中，該混合物包含腺苷磷酸酯組分與離子液體基質，該腺苷磷酸酯組分包括腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯，且該離子液體基質包括至少一種離子液體，而該離子液體選自由二羥基苯甲酸陰離子與吡啶鎓陽離子所形成的離子液體或由α-氰基-4-羥基肉桂酸陰離子與三丙基銨鎓離子所形成的離子液體；
利用質量分析器及質量偵測器對該離子化樣品進行分析，獲得衍生自該腺苷單磷酸酯的腺苷單磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度、衍生自該腺苷二磷酸酯的腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度，及衍生自該腺苷三磷酸酯的腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度；及
依據該等離子訊號強度，計算出該腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯間的含量比例。
＜紫外光雷射脫附電離處理＞
在本發明的具體例中，該紫外光雷射的波長為355nm。該紫外光雷射的重複頻率(repetition rate)並無特殊限制，可採用以往MALDI質譜分析方法中常用的重複頻率。在本發明的具體例中，該紫外光雷射的重複頻率為100Hz。
為能夠使本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法更精準地定量該腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯間的含量比例，較佳地，該離子液體為由二羥基苯甲酸陰離子與吡啶鎓陽離子所形成的離子液體。
＜質量分析器＞
該質量分析器例如飛行時間式(Time-of-flight，簡稱TOF)質量分析器。在本發明的具體例中，該質量分析器為飛行時間式質量分析器，且該飛行模式為反射式模式。
＜質量偵測器＞
該質量偵測器例如電子倍增管式離子偵測器或微通道片(microchannel plate，簡稱MCP)式離子偵測器等。
本發明將就以下實施例作進一步說明，但應瞭解的是，該實施例僅為例示說明用，而不應被解釋為本發明實施的限制。
製備例1 離子液體基質
將0.2mmole的二羥基苯甲酸溶解於甲醇中，接著，加入0.2mmole的苯胺，然後，利用一台試管震盪器震盪2~3分鐘，以使該二羥基苯甲酸與該苯胺混合均勻，接著，置於溫度設定在室溫且壓力設定在0.1 torr的一台真空烘箱中進行24小時的處理，以使甲醇與殘留的苯胺蒸發。接著，加入乙醇(溶劑)，獲得包含離子液體基質及乙醇的基質組分，其中，在該基質組分中，該離子液體基質的濃度為0.2M，且該離子液體基質包括由二羥基苯甲酸陰離子與苯基銨鎓陽離子所形成的離子液體。
製備例2~11
製備例2~11的製備步驟大致與製備例1相同，差別主要在於：改變羧酸陰離子及鎓陽離子來源，參閱表1。
製備例12
將二羥基苯甲酸溶解於體積比1：3的水與乙腈混合溶劑中，形成一溶液，其中，在該溶液中，該二羥基苯甲酸的濃度為1M。
製備例13
將α-氰基-4-羥基肉桂酸溶解於體積比1：3的水與乙腈混合溶劑中，形成一溶液，其中，在該溶液中，該α-氰基-4-羥基肉桂酸的濃度為0.1M。
表1
| 製備例 | 羧酸陰離子來源 | 鎓陽離子來源 | 在基質組分中，該離子液體基質的濃度(M) |
| 1 | 二羥基苯甲酸(DHB) | 苯胺(A) | 0.2 |
| 2 | 二羥基苯甲酸(DHB) | 吡啶(P) | 0.2 |
| 3 | 二羥基苯甲酸(DHB) | 丁胺(B) | 1 |
| 4 | 二羥基苯甲酸(DHB) | 1-甲咪唑(MI) | 1 |
| 5 | 二羥基苯甲酸(DHB) | 三正丁基胺(TBA) | 1 |
| 6 | 二羥基苯甲酸(DHB) | 三正丙基胺(TPA) | 0.2 |
| 7 | α-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA) | 苯胺(A) | 0.2 |
| 8 | α-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA) | 丁胺(B) | 0.2 |
| 9 | α-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA) | 1-甲咪唑(MI) | 1 |
| 10 | α-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA) | 三正丁基胺(TBA) | 1 |
| 11 | α-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA) | 三正丙基胺(TPA) | 1 |
評價項目
ATP母離子訊號峰的偵測效率(detection efficiency)量測：將製備例1至11的基質組分與1nmol的腺苷單磷酸酯二鈉鹽(購自美國Sigma-Aldrich，純度為99%)混合，獲得混合物，其中，該腺苷單磷酸酯二鈉鹽與該基質組分中的離子液體基質的莫耳比例為1：500。然後，利用乾燥液滴方法(Dried droplet method)將1μL的混合物滴(spot)在一台紫外光雷射脫附電離飛行時間串聯質譜儀(廠牌：德國Bruker Daltonics；型號：Ultraflex III)的不鏽鋼盤上，且待該乙醇揮發，形成檢測樣品。將該檢測樣品置於該紫外光雷射脫附電離飛行時間串聯質譜儀內，並以負電檢測模式(negative mode)進行質譜分析。該紫外光雷射是由摻釹釔鋁石榴石(Nd-YAG)材料經由三倍頻技術來產生且該紫外光雷射的波長為355nm，而打擊(single-shot)重複頻率為100Hz且打擊次數為1000次，其中，製備例1~6的雷射能量(laser energy)為該紫外光雷射的總能量的95%，而製備例7~11的雷射能量為該紫外光雷射的總能量的75%，且該等打擊次數是分配在每一檢測樣品的20個不同位置。該紫外光雷射脫附電離飛行時間串聯質譜儀的質量分析器為飛行時間式質量分析器且飛行模式採反射模式(reflectron mode)。該紫外光雷射脫附電離飛行時間串聯質譜儀的質量偵測器為微通道片式離子偵測器。分析結果參閱圖1及圖2。
ADP母離子訊號峰的偵測效率量測：將製備例1~11的基質組分與1nmol的腺苷二磷酸酯二鈉鹽(購自美國Sigma-Aldrich，純度為95%以上)混合，獲得混合物，其中，該腺苷二磷酸酯二鈉鹽與該基質組分中的離子液體基質的莫耳比例為1：500。然後，依照上述ATP母離子訊號峰的偵測效率量測方式來進行。分析結果參閱圖3及圖4。
AMP母離子訊號峰的偵測效率量測：將製備例1~2、製備例5~6及製備例8~11的基質組分與1nmol的腺苷三磷酸酯二鈉鹽(購自美國Sigma-Aldrich，純度為99%)混合，獲得混合物，其中，該腺苷三磷酸酯二鈉鹽與該基質組分中的離子液體基質的莫耳比例為1：500。然後，然後，依照上述ATP母離子訊號峰的偵測效率量測方式來進行。分析結果參閱圖5及圖6。
參閱圖1，在製備例1~2及製備例5~6的質譜圖中，於質荷比(m/z)為506.5處有[ATP-H]
-的母離子訊號峰，而製備例3~4的質譜圖中，並不具有該母離子訊號峰，此表示製備例3~4的離子液體基質並不適合用來分析ATP。參閱圖2，在製備例7~11的質譜圖中，於質荷比(m/z)為506.5處有[ATP-H]
-的母離子訊號峰，此表示製備例7~11的離子液體基質皆適合用來分析ATP。
參閱圖3，在製備例1~6的質譜圖中，於質荷比(m/z)為426.8處有[ADP-H]
-的母離子訊號峰，此表示製備例1~6的離子液體基質皆適合用來分析ADP。參閱圖4，在製備例7~11的質譜圖中，於質荷比(m/z)為426.8處有[ADP-H]
-的母離子訊號峰，此表示製備例7~11的離子液體基質皆適合用來分析ADP。
參閱圖5，在製備例1~2及製備例5的質譜圖中，於質荷比(m/z)為346.2處有[AMP-H]
-的母離子訊號峰，但製備例5的母離子訊號峰的訊號強度非常的小，而製備例6的質譜圖中，並不具有該母離子訊號峰，此表示採用製備例5~6的離子液體基質對AMP的游離效率不佳，而存在有偵測效率低的問題，故製備例5~6的離子液體基質並不適合用來分析AMP。參閱圖6，在製備例8~11的質譜圖中，於質荷比(m/z)為346.2處有[AMP-H]
-的母離子訊號峰，然而，該等母離子訊號峰的訊號強度非常的小，此表示採用製備例8~10的離子液體基質對AMP的游離效率不佳，而存在有偵測效率低的問題。
由上述可知，製備例1~2及製備例11的離子液體基質可用於基質輔助雷射脫附電離質譜分析中對ATP、ADP及AMP進行分析，然而，參閱圖1、圖3及圖5，在製備例1中，腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度與腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度差異過大，較不利於進行定量分析。基於上述，適合用於基質輔助雷射脫附電離質譜分析中以能夠同時分析ATP、ADP及AMP的離子液體基質為製備例2及製備例11。
實施例1
將0.33nmol的腺苷單磷酸酯二鈉鹽、0.33nmol的腺苷雙磷酸酯二鈉鹽、0.33nmol的腺苷三磷酸酯二鈉鹽與去離子水混合，獲得包含腺苷磷酸酯組分與去離子水的組成物，其中，在該組成物中，該腺苷磷酸酯組分的濃度為2mM。
將該組成物與製備例2的基質組分混合，獲得混合物，其中，該組成物中的腺苷磷酸酯組分與該基質組分中的離子液體基質的莫耳比例為1：500。然後，依照上述ATP母離子訊號峰的偵測效率量測方式來進行。
實施例2至10
實施例2的製備步驟大致與實施例1相同，差別主要在於：改變離子液體基質的種類，或腺苷磷酸酯組分中各成分的含量，參閱表2。
表2
| 基質 | 腺苷磷酸酯組分 | ||
| 製備例 | AMP：ADP：ATP (莫耳比例) | ||
| 實施例 | 1 | 2 | 1：1：1 |
| 2 | 2 | 1：1：2 | |
| 3 | 2 | 1：1：3 | |
| 4 | 2 | 1：1：4 | |
| 5 | 2 | 1：1：5 | |
| 6 | 11 | 1：1：1 | |
| 7 | 11 | 1：1：2 | |
| 8 | 11 | 1：1：3 | |
| 9 | 11 | 1：1：4 | |
| 10 | 11 | 1：1：5 | |
| 比較例 | 1 | 12 | 1：1：1 |
| 2 | 12 | 1：1：2 | |
| 3 | 12 | 1：1：3 | |
| 4 | 12 | 1：1：4 | |
| 5 | 12 | 1：1：5 | |
| 6 | 13 | 1：1：1 | |
| 7 | 13 | 1：1：2 | |
| 8 | 13 | 1：1：3 | |
| 9 | 13 | 1：1：4 | |
| 10 | 13 | 1：1：5 |
將由偵測效率量測方式所獲得的實施例1、實施例6、比較例1及比較例6的腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
1-ATP)與腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
1-ADP)的比值A(即，I
1-ATP/I
1-ADP)歸一化，獲得離子訊號強度比(ion intensity ratio)且為1。將實施例2~5、實施例7~10、比較例2~5及比較例7~10的腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
ATP)與腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
ADP)的比值(簡稱I
ATP/I
ADP)乘以
，獲得離子訊號強度比。以該等離子訊號強度比為縱座標，而AMP：ADP：ATP的莫耳比例為橫坐標，繪製一張曲線圖，如圖7所示。值得說明的是，在圖7中，因對實施例1、實施例6、比較例1、及比較例6的實驗數據進行歸一化處理，故該等離子訊號強度比皆為1。
將由偵測效率量測方式所獲得的實施例1、實施例6、比較例1及比較例6的腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
1-ADP)與腺苷單磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
1-AMP)的比值B(即，I
1-ADP/I
1-AMP)歸一化，獲得離子訊號強度比(ion intensity ratio)且為1。將實施例2~5、實施例7~10、比較例2~5及比較例7~10的腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
ADP)與腺苷單磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
AMP)的比值(簡稱I
ADP/I
AMP)乘以
，獲得離子訊號強度比。以該等離子訊號強度比為縱座標，而AMP：ADP：ATP的莫耳比例為橫坐標，繪製一張曲線圖，如圖8所示。值得說明的是，在圖7中，因對實施例1、實施例6、比較例1、及比較例6的實驗數據進行歸一化處理，故該等離子訊號強度比皆為1。
將由偵測效率量測方式所獲得的實施例1、實施例6、比較例1及比較例6的腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
1-ATP)與腺苷單磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
1-AMP)的比值C(即，I
1-ATP/I
1-AMP)歸一化，獲得離子訊號強度比(ion intensity ratio)且為1。將實施例2~5、實施例7~10、比較例2~5及比較例7~10的腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
ATP)與腺苷單磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度(簡稱I
AMP)的比值(簡稱I
ATP/I
AMP)乘以
，獲得離子訊號強度比。以該等離子訊號強度比為縱座標，而AMP：ADP：ATP的莫耳比例為橫坐標，繪製一張曲線圖，如圖9所示。值得說明的是，在圖7中，因對實施例1、實施例6、比較例1、及比較例6的實驗數據進行歸一化處理，故該等離子訊號強度比皆為1。
在圖7、圖8及圖9中，理論離子訊號強度比亦如上所述來獲得，且在理論上，理論離子訊號強度比為AMP：ADP：ATP的莫耳比。
參閱圖7至圖9，將製備例2及製備例11的離子液體基質用於MALDI質譜分析中對該腺苷磷酸酯組分進行分析所獲得的實際離子訊號強度比幾乎與理論離子訊號強度比一致，而將製備例12及製備例13的基質用於MALDI質譜分析中對該腺苷磷酸酯組分進行分析所獲得的實際離子訊號強度比與理論離子訊號強度比偏差過大，尤其是ADP與AMP的離子訊號強度比(參閱圖8)及ATP與AMP的離子訊號強度比(參閱圖9)，此表示製備例2及製備例11的離子液體基質確實能夠有效地降低該腺苷磷酸酯組分的腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯中的磷酸根分別自該腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯上脫離的機率，致使能夠對該腺苷磷酸酯組分中該腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯間的含量比例進行定量分析。
綜上所述，透過該離子液體基質降低該腺苷磷酸酯組分的腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯中的磷酸根分別自該腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯上脫離，在本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法中，該腺苷單磷酸酯母離子是衍生自腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯母離子是衍生自腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯母離子是衍生自腺苷三磷酸酯，致使能夠對該腺苷磷酸酯組分中該腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯間的含量比例進行定量分析，故確實能達成本發明的目的。
惟以上所述者，僅為本發明的實施例而已，當不能以此限定本發明實施的範圍，凡是依本發明申請專利範圍及專利說明書內容所作的簡單的等效變化與修飾，皆仍屬本發明專利涵蓋的範圍內。
本發明的其他的特徵及功效，將於參照圖式的實施方式中清楚地呈現，其中：
圖1是一質譜圖，用來說明製備例1~6的離子液體基質對ATP母離子訊號峰的偵測效率；
圖2是一質譜圖，用來說明製備例7~11的離子液體基質對ATP母離子訊號峰的偵測效率；
圖3是一質譜圖，用來說明製備例1~6的離子液體基質對ADP母離子訊號峰的偵測效率；
圖4是一質譜圖，用來說明製備例7~11的離子液體基質對ADP母離子訊號峰的偵測效率；
圖5是一質譜圖，用來說明製備例1~2及製備例5~6的離子液體基質對AMP母離子訊號峰的偵測效率；
圖6是一質譜圖，用來說明使用製備例8~11的離子液體基質對AMP母離子訊號峰的偵測效率；
圖7是一曲線圖，用來說明本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法能夠對腺苷磷酸酯組分中ATP、ADP及AMP進行定量分析；
圖8是一曲線圖，用來說明本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法能夠對腺苷磷酸酯組分中ATP、ADP及AMP進行定量分析；及
圖9是一曲線圖，用來說明本發明腺苷磷酸酯的定量分析方法能夠對腺苷磷酸酯組分中ATP、ADP及AMP進行定量分析。
Claims (3)
- 一種腺苷磷酸酯的定量分析方法，包含以下步驟： 使混合物進行紫外光雷射脫附電離處理，形成離子化樣品，其中，該混合物包含腺苷磷酸酯組分與離子液體基質，該腺苷磷酸酯組分包括腺苷單磷酸酯、腺苷二磷酸酯及腺苷三磷酸酯，且該離子液體基質包括至少一種離子液體，而該離子液體選自由二羥基苯甲酸陰離子與吡啶鎓陽離子所形成的離子液體或由α-氰基-4-羥基肉桂酸陰離子與三丙基銨鎓離子所形成的離子液體； 利用質量分析器及質量偵測器對該離子化樣品進行分析，獲得衍生自該腺苷單磷酸酯的腺苷單磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度、衍生自該腺苷二磷酸酯的腺苷二磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度，及衍生自該腺苷三磷酸酯的腺苷三磷酸酯母離子的訊號峰的離子訊號強度；及 依據該等離子訊號強度，計算出該腺苷單磷酸酯、該腺苷二磷酸酯，及該腺苷三磷酸酯間的含量比例。
- 如請求項1所述的腺苷磷酸酯的定量分析方法，其中，該質量分析器為飛行時間式質量分析器。
- 如請求項1所述的腺苷磷酸酯的定量分析方法，其中，該離子液體為由二羥基苯甲酸陰離子與吡啶鎓陽離子所形成的離子液體。
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| TW110102803A TWI781523B (zh) | 2021-01-26 | 2021-01-26 | 腺苷磷酸酯的定量分析方法 |
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|---|---|---|---|
| TW110102803A TWI781523B (zh) | 2021-01-26 | 2021-01-26 | 腺苷磷酸酯的定量分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW202229867A TW202229867A (zh) | 2022-08-01 |
| TWI781523B true TWI781523B (zh) | 2022-10-21 |
Family
ID=83782598
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW110102803A TWI781523B (zh) | 2021-01-26 | 2021-01-26 | 腺苷磷酸酯的定量分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TWI781523B (zh) |
-
2021
- 2021-01-26 TW TW110102803A patent/TWI781523B/zh active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 期刊 Sun et al., "Shotgun Metabolomics Approach for the Analysis of Negatively Charged Water-Soluble Cellular Metabolites from Mouse Heart Tissue", Anal. Chem., 79, 2007, pp 6629-6640. * |
| 期刊 Zabet-Moghaddam et al., "Qualitative and quantitative analysis of low molecular weight compounds by ultraviolet matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry using ionic liquid matrices", Rapid Commun. Mass Spectrom, 18, 2004, pp 141-148.; * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW202229867A (zh) | 2022-08-01 |
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