TWI747929B - 一種人胰島素或其類似物的醯化衍生物 - Google Patents

一種人胰島素或其類似物的醯化衍生物 Download PDF

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Abstract

本發明提供了一種人胰島素或其類似物的醯化衍生物。具體而言，本發明提供了一種人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，該醯化衍生物相較於已有的胰島素類似物及其醯化衍生物更加長效，且降血糖更加平穩，儲存更加穩定。

Description

一種人胰島素或其類似物的醯化衍生物
本發明涉及一種人胰島素類似物的醯化衍生物。
糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)是一種常見的代謝內分泌疾病，是由於體內胰島素絕對或相對缺乏，或靶組織對胰島素不敏感而引起的慢性高血糖為特徵的伴隨糖、脂肪和蛋白質代謝紊亂的臨床慢性、全身性代謝症候群。它由遺傳和環境因素相互作用而引起，涉及人體各個系統，包括心腦血管、腎、眼、神經等臟器併發症，嚴重危害人類健康，是一種終生疾病。
糖尿病已成為一種常見病、多發病，是繼癌症、心腦血管病之後，第三大威脅人類生命的疾病，是全人類的挑戰，其對人們生命健康的危害不分種族和國家。據國際糖尿病聯盟(IDF)的統計，上個世紀八十年代中期至九十年代中期十年間，糖尿病患者總量增長4倍，達到1.2億。2007年全球糖尿病患者人數為2.46億，其中46%為40-59歲勞動力人口。預計到2025年全世界糖尿病患者將增加到3.8億，占到世界成年人口的7.1%。
使用人胰島素是治療糖尿病的一種主要方法，但是人胰島素作用時間較短，使得病人必須頻繁注射，極為不便。因此，人們致力於獲得一些能夠更長時間作用於人體的胰島素類似物及其衍生物。其中，使用醯化基團修飾人胰島素或其類似物，是一種提高其半衰期的有效方法。WO2005012347和WO2013086927分別公開了兩類不同的人胰島素類似物的醯化衍生物，此類衍生物是藉由將脂肪酸形式的醯化基團共價連接到人胰島素類似物的胺基酸上，經過此種修飾後，它們的半衰期相對於現有的胰島素類似物大大提高。然而，仍然需要提供半衰期更長的胰島素類似物或其醯化衍生物，以提高治療效果，並維持血糖平穩。並且現有的醯化胰島素還存在不穩定的問題，也需要提供更為穩定的胰島素類似物或其醯化衍生物。
另一方面，生理性胰島素需求包括基礎和餐時(速效)，前者提供全天血糖控制，後者主要應對餐後血糖升高。根據其生理特點，理想的餐時胰島素製劑能在進餐後迅速達峰發揮作用，並能在血糖降到正常水準時降至基礎水準，以避免下餐前低血糖。理想的基礎胰島素則應有超長作用時間(在所有患者中持續>24h)、最小幅度胰島素作用變異性(減少低血糖)和安全性，且能與速效胰島素結合使用(便利性)。由於速效胰島素降血糖作用十分迅速，這就要求當基礎胰島素與其合用時應當提供一種較為平緩的降血糖作用，以免二者共同作用時產生低血糖的風險。因此，提供一種具有足夠長的作用時間，且初始作 用時平緩降血糖的基礎胰島素具有十分迫切的需求。
本發明的目的是提供一種新的人胰島素類似物的醯化衍生物，其降低血糖的效果更佳持久，且具有更高的穩定性。
本發明提供的一種人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，所述人胰島素類似物的醯化衍生物具有如下通式所示的結構：S-W-X-Y-Z(I)
其中S為B鏈第30位蘇胺酸缺失的人胰島素；-W-X-Y-Z為胰島素類似物的醯化修飾基團；其中W為具有-OC(CH2)nCO-的二醯基結構，其中n為2~10之間整數，該結構以其醯基之一和母體胰島素或其類似物的A-鏈或B-鏈N-末端胺基酸殘基的α-胺基或B-鏈上存在的賴胺酸殘基的ε-胺基形成醯胺鍵；X為含羧酸基團的二胺基化合物，該化合物以其胺基之一與W中的一個醯基連接形成醯胺鍵；Y為-A(CH2)m-，其中m為6-32的整數，較佳係10-16的整數，特別佳係12-14的整數，A不存在或CO-；Z為-COOH。
較佳地，W與B-鏈上存在的賴胺酸殘基的ε-胺基形成醯胺鍵。較佳地，n為2~5之間的整數，較佳係2。
B鏈第30位蘇胺酸缺失的人胰島素，是一種人胰島素 類似物，其A、B鏈的胺基酸序列如下所示：A鏈：GIVEQCCTSICSLYQLENYCN SEQ ID NO.1
B鏈：FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPK SEQ ID NO.2。
X代表的含羧酸基團的二胺基化合物可以為-HN(CH2)pCH(COOH)NH-，其中p為2-10的整數，較佳係2-6的整數，特別佳係2-4的整數，最佳係4。
在本發明特別佳的實施方式中，-W-X-Y-Z具有如下結構：
Figure 106125882-A0101-12-0004-2
 較佳係
Figure 106125882-A0101-12-0004-3
本發明中特別佳的人胰島素類似物的醯化衍生物可依習慣命名為Nα-(HOOC(CH2)14CO)-Nε-(OCCH2CH2CO-(Nε B29-Des(B30)人胰島素))-Lys-OH，其具有如下式(Ia)的具體結構，
Figure 106125882-A0101-12-0004-4
更佳地，賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素，其具有式(Ib)所示的結構。
Figure 106125882-A0101-12-0005-5
本發明還提供了一種製備前述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物的製備方法，其包括使式(III)化合物與B鏈第30位蘇胺酸缺失的人胰島素的步驟，R-W-X-Y-Z(III)
其中R為離去基團，較佳係活化酯基團，更佳係選自
Figure 106125882-A0101-12-0005-6
較佳的式(III)化合物具體結構可為(IIIa)或(IIIb)所示，
Figure 106125882-A0101-12-0005-7
Figure 106125882-A0101-12-0005-8
所述的製備方法較佳還包括式(III’)化合物去除羧 基保護基得到式(III)化合物的步驟，
Figure 106125882-A0101-12-0006-34
其中，X’、Z’分別代表X、Z中所有的羧基被保護基保護的形式，所述的保護基較佳係C1-C6的烷基，較佳係C1-C4的烷基，特別佳係甲基或第三丁基；R如通式(III)中定義。
在本發明特別佳的實施方案中，人胰島素類似物的醯化衍生物的鋅複合物是一種人胰島素類似物的醯化衍生物的6聚體，其中每個6聚體中包含多於4個鋅原子，即6分子醯化胰島素包含多於4個鋅原子；更佳係5至8個鋅原子，特別佳係5個鋅原子。
本發明還提供了一種藥物組成物，含前述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，還含有藥學上可接受的載體。
本發明還提供了前述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物或其藥物組成物在製備治療糖尿病的藥物中的用途。
本發明還提供一種藥物組成物，除含有上述人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物外，還含有速效胰島素。
本發明還涉及上述人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物、或含有它們的藥物組成物在製備治療糖尿病的藥物中的用途。
本發明還涉及前述的人胰島素類似物的醯化衍生物 或其鋅複合物、或含有它們的藥物組成物與速效胰島素聯合在製備治療糖尿病的藥物中的用途。
另外，本發明提供了一種治療糖尿病的方法，所述方法包括對需要治療的患者給予前述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物、或含有它們的藥物組成物。
本發明提供的另一種治療糖尿病的方法，所述方法包括對需要治療的患者給予前述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物、或含有它們的藥物組成物和速效胰島素。本發明還涉及前述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物、或含有它們的藥物組成物作為治療糖尿病的藥物。
本發明還涉及前述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物、或含有它們的藥物組成物聯合速效胰島素作為治療糖尿病的藥物。
本發明中的糖尿病包括I型糖尿病和II型糖尿病。
第1圖顯示STZ大鼠給藥後血糖值變化曲線(*P<0.05，**P<0.01 vs模型對照組；#P<0.05 vs德穀胰島素)
第2圖顯示0~6小時內STZ大鼠給藥後血糖值變化曲線
第3圖顯示給藥後0~2、0~4和0~6小時內血糖AUC的比較(* P<0.05，** P<0.01 vs INS-C)
以下結合實施例進一步描述解釋本發明。
實施例1：賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素的製備
1、Nα-(十六烷脂肪二酸)-Nε-(3-醯基丙酸-OSu)賴胺酸的製備
Figure 106125882-A0101-12-0008-9
取X01(150g，524.5mmol)，室溫下加入乾燥的THF(2.5L)，隨後加入催化量的DMF(1.0mL)，將草醯氯(49mL)加入到100mL的恆壓滴液漏斗中，將草醯氯緩慢滴加到反應瓶中，期間有氣體生成，需不斷放氣，約滴加兩小時。滴加完畢後，室溫攪拌1.5h，隨後減壓旋乾THF，向反應瓶中加入DCM(800mL)和第三丁醇(500mL)，室溫下攪拌過夜。旋乾第三丁醇和二氯甲烷，加入二氯甲烷(1L)，過濾，除去不溶固體。濾液旋乾過管柱。收集所需成分，旋乾，石油醚重結晶，得54g產品X02，同時回收二第三丁酯產物X03。
將X02(28.5g，83.3mmol)溶於DCM(200mL)中，室溫下加入N-羥基丁二醯亞胺(5.54g，48.1mmol)和二異丙基碳二醯亞胺(7.6mL)，室溫攪拌1天，TLC顯示基本反應完全。過濾，除去不溶固體，減壓旋乾溶劑，管柱層析純化，得28.5g X04。
將X04(22g，50.1mmol)溶於乾燥的THF(250mL)中，室溫攪拌，賴胺酸衍生物(20.5g，55mmol)和三乙胺(21mL)分別加入到反應體系中，室溫攪拌24h。矽藻土過濾，THF洗滌三次，旋乾溶劑，管柱層析純化，得31g產物X11。
將X11(30.6g，46.3mmol)溶於無水乙醇(200mL)中，室溫攪拌，加入6.0g 10% Pd/C，隨後通入氫氣，室溫劇烈攪拌反應過夜。矽藻土抽濾，無水乙醇洗滌三次，濾液旋乾，得24.5g X12粗製品，直接用於下一步反應。
將X12(24g，45.6mmol)溶於乾燥THF(200mL)中，加入三乙胺(12.7mL)，隨後降溫至0℃。將丁二酸酐(5.2g，52mmol)分批加入到反應體系中，0℃下繼續攪拌30min，隨後轉移至室溫攪拌過夜。減壓旋乾THF，剩餘物溶於二氯甲烷(500mL)中，用5%檸檬酸水溶液(500mL*2)洗滌2次，飽和食鹽水洗滌1次，無水硫酸鈉乾燥。減壓旋乾溶劑，得29.0g X13粗製品，直接用於下一步反應。
將X13(28.5g，45.5mmol)溶於DCM(200mL)中，室溫下加入N-羥基丁二醯亞胺(5.54g，48.2mmol)和二異丙基碳二醯亞胺(7.6mL)，室溫攪拌1天，TLC顯示基本反應完全。過濾，除去不溶固體，減壓旋乾溶劑，管柱層析純化，得28.5g產品X14。
將X14(3.0g，4.1mmol)溶於三氟乙酸(15mL)中，室溫攪拌45min，隨後低溫減壓旋乾三氟乙酸，加入無水乙醚，有固體析出，過濾，濾餅用無水乙醚洗滌三次，固體乾燥後，得1.8g產品X15。
2、賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素的製備
取B鏈第30位蘇胺酸缺失的人胰島素53mg(8mg/mL，50mM Tris HCl pH8.5緩衝液)，用1.5M Na2CO3調節pH至約10.75，後用緩衝液(50mM Tris HCl pH8.5緩衝液)定容至4mg/mL。將Nα-(十六烷脂肪二酸)-Nε-(3-醯基丙酸-OSu)賴胺酸(18mg)懸浮於7mL乙腈後，每隔15min將1.75mL本溶液加入到上述B鏈第30位蘇胺酸缺失的人胰 島素溶液中開始反應，分4次加完，同時攪拌。加完後開始計時，反應1h後，用乙酸將溶液pH調節至約7.5，終止反應，獲得粗製品溶液。採用RP-HPLC對反應過程進行中控。
3、賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素的純化
將上述前體粗製品溶液加入水稀釋使有機相含量約15%(v：v)，用0.45μm濾膜過濾後採用RP-HPLC對其進行純化得純化液。
4、賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素的超濾及凍乾
將上述純化溶液用超濾膜包系統將樣品置換至注射用水中，進行凍乾獲得凍乾產物26mg。所得分子結構式如下。
Figure 106125882-A0101-12-0011-10
5、賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素結構確證
賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素實測質譜分子量為6203.37Da，與理論分子量6203.21Da一致。
用V8蛋白酶對INS進行酶解，並對酶解產物進行LC-MS分析，結果顯示共產生4個肽段，肽段分子量分別為416.23Da(A1-A4)、2968.29Da(A5-A17,B1-B13)、1376.57Da(A18-A21,B14-B21)和1510.84Da(B22-B29)，與理論肽段分子量相符，其中肽段B22-B29為脂肪酸鏈修飾的肽段。證明修飾位點和預期一致。
實施例2：觀察受試藥物在STZ誘導的I型糖尿病模型上的降血糖作用
1、供試品
Figure 106125882-A0101-12-0012-11
其中，INS-1和INS-2分別代表將賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素製備成每個胰島素衍生物六聚體包含5個Zn和8個Zn的兩種不同複合物，其配製方法為本領域常規方法，德穀胰島素中每六聚體包含5個Zn。
2、供試品配製
供試品避光保存在4℃條件下，取適量受試樣品母液600nmol/mL，用溶媒稀釋400倍至1.5nmol/mL，劑量為7.5nmol/kg。使用時藥物恢復至室溫。
3、實驗動物
Figure 106125882-A0101-12-0013-13
4、實驗方法
SPF級大鼠實驗室環境飼養7天，均以標準飼料、標準籠餵養，溫度20-25℃，濕度40-60%。造模前一天，大鼠禁食16小時，腹腔快速注射STZ(65mg/kg)，1小時後，恢復給食。造模後每日給予充足飲水(提供正常的2-3倍的飲水量)、食物，每日換墊料1-2次，保持乾燥。在第五天測量空腹血糖(禁食6小時)，挑出血糖值>16.7mmol/L的大鼠。根據血糖水準，將其分為4組。
動物分組及給藥資訊如下：
Figure 106125882-A0101-12-0014-14
給藥前不禁食，單次皮下注射各藥物，對照組用溶媒注射相同體積，給藥後全程禁食。給藥後1、2、4、6、8、10、12、24小時測定大鼠血糖值。24小時點測完血糖值後，採血製備血清。
所有的資料被錄入到Excel文檔中，並以Mean±SEM的方式表示。資料統計分析使用Graphpad Prism 6.0軟體，單因素或雙因素方差分析比較方法，以P<0.05作為顯著性差異的判斷標準。
5、結果：SD大鼠注射STZ後第五天，禁食6小時，進行血糖測試，造模成功率達80%。
由第1圖可見，STZ溶媒組基礎血糖值給藥前為27.3mmol/L，給藥後其血糖值逐步降低，24小時後達到15.1mmol/L，血糖變化值為12.1mmol/L。陽性藥德穀胰島素組給藥前後血糖值變化為16.8mmol/L。陽性藥物德穀胰島素組給藥後6、8、10、12和24小時時間點，其血糖水準與 溶媒陰性對照組比較都具有顯著性差異，表明該動物模型及實驗方法的有效性。
與溶媒陰性對照組比較，受試藥物INS-1和INS-2在給藥後24小時內均能顯著降低動物的血糖水準，在6、8、10、12和24小時時間點都具有顯著性差異，並且血糖水準持續下降，表明其具有良好的長效降糖作用。
試藥物INS-1和INS-2對於STZ大鼠，其血糖值隨給藥後時間的變化曲線基本一致，表明兩者的降糖效果類似。在24小時時間點，INS-1和INS-2的降糖效果優於德穀胰島素組，表明INS-1和INS-2具有更好的長效作用。
實施例3：觀察各種長效胰島素在STZ誘導的I型糖尿病模型上的降血糖作用
1、供試品
Figure 106125882-A0101-12-0015-15
其中INS-A代表WO2013086927中的HS061、INS-B代表WO2013086927中的HS067、INS-C代表賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素，所有供試品均使用相同的處方，且使用鋅複合物形式，每個胰島素六聚體包含5個Zn。
2、供試品配製
供試品避光保存在4℃條件下，取適量受試樣品母液600nmol/mL，用溶媒稀釋80倍至7.5nmol/mL，劑量為7.5nmol/kg。使用時藥物恢復至室溫。
3、實驗動物
Figure 106125882-A0101-12-0016-17
4、實驗方法
SPF級大鼠實驗室環境飼養7天，均以標準飼料、標準籠餵養，溫度20-25℃，濕度40-60%。造模前一天，大鼠禁食16小時，腹腔快速注射STZ(65mg/kg)，1小時後，恢復給食。造模後每日給予充足飲水(提供正常的2-3倍的飲水量)、食物，每日換墊料1-2次，保持乾燥。在第五天測量空腹血糖(禁食6小時)，挑出血糖值>16.7mmol/L的大鼠。根據血糖水準隨機分為5組。
動物分組及給藥資訊如下：
Figure 106125882-A0101-12-0017-18
給藥前不禁食，單次皮下注射各藥物，對照組用溶媒注射相同體積，給藥後全程禁食。給藥後1、2、4、6、8、10、12、24小時測定大鼠血糖值。
所有的資料被錄入到Excel文檔中，並以Mean±SEM的方式表示。資料統計分析使用SPSS軟體，單因素或雙因素方差分析比較方法，以P<0.05作為顯著性差異的判斷標準。
5、結果
STZ溶媒組基礎血糖值給藥前為27.01mmol/L，給藥後其血糖值逐步降低，24小時後達到11.64mmol/L，血糖變化值為15.37mmol/L。陽性藥德穀胰島素組給藥前後血糖值變化為19.78mmol/L。陽性藥物德穀胰島素組給藥後1、2、4、6、8、10和12小時時間點，其血糖水準與溶媒陰性對照組比較都具有顯著性差異，表明該動物模型及實 驗方法的有效性。
與溶媒陰性對照組比較，受試藥物INS-A、INS-B和INS-C在給藥後24小時內均能顯著降低動物的血糖水準，從血糖值來看，受試藥物的血糖值(分別為7.03±1.15、3.57±0.44及4.20±0.72mmol/L)低於溶媒陰性對照組(11.64±3.94mmol/L)。這表明三者均具有較良好的長效降糖作用。重點比較了各組在0~6小時內降低血糖的差異性，具體數值如表1和表2所示：
Figure 106125882-A0101-12-0018-19
Figure 106125882-A0101-12-0019-20
INS-C和德穀胰島素對於STZ大鼠，給藥後INS-C組血糖值下降幅度小於德穀胰島素，且在給藥1小時後顯著高於德穀胰島素組(見第2圖和表1)。具體數值如表1所示。另由第3圖和表2可見，INS-C在給藥後0~2、0~4和0~6小時內血糖-時間曲線下面積(AUC)均顯著高於德穀胰島素。這表明，若與速效胰島素聯合給藥或組成複方製劑給藥，INS-C+速效胰島素在給藥後0~6小時內(速效胰島素發揮降血糖作用的時間段)發生低血糖的風險明顯低於德穀胰島素+速效胰島素。
INS-C和INS-A對於STZ大鼠，給藥後INS-C組血糖值下降幅度小於INS-A，且在給藥1、2和4小時後顯著高於INS-A組；而在給藥10和12小時後則顯著低於INS-A組，給藥24小時後血糖值也有低於INS-A組的趨勢。表明 INS-C降血糖速度慢於INS-A，且長效作用也優於INS-A，更符合長效胰島素的作用特點。此外，由第3圖可見，INS-C在給藥後0~2、0~4和0~6小時內血糖AUC均顯著高於INS-A。這表明，若與速效胰島素聯合給藥或組成複方製劑給藥，INS-C+速效胰島素在給藥後0~6小時內發生低血糖的風險明顯低於INS-A+速效胰島素。
INS-C和INS-B對於STZ大鼠，給藥後INS-C組血糖值下降幅度小於INS-B，且在給藥1和2小時後顯著高於INS-B組，表明INS-C降血糖速度慢於INS-B。此外，由第3圖可見，INS-C在給藥後0~2、0~4和0~6小時內血糖AUC均顯著高於INS-B。這表明，若與速效胰島素聯合給藥或組成複方製劑給藥，INS-C+速效胰島素在給藥後0~6小時內發生低血糖的風險明顯低於INS-B+速效胰島素。
綜合24小時和0~6小時內降血糖的效果，INS-C有降糖作用持久且初期降糖平緩的特點，是最為理想的長效胰島素，特別適合於與速效胰島素聯合或組成複方，從而減少注射次數，提高患者的依從性。
實施例4：犬PK試驗(INS-B和INS-C與實施例3中具有相同的含義)
6隻雄性比格犬(每組3隻)單次皮下注射INS-B或INS-C(3nmol/kg)後，不同時間點採血並分離血清，檢測血清中INS-B或INS-C的濃度。結果顯示，INS-B在4.7± 1.2小時(3隻動物分別為4、4和6小時)內達峰，而INS-C則為8小時(三隻動物均為8小時)達峰。INS-B和INS-C的半衰期分別為6.0±1.2和7.8±1.1小時。這提示INS-C作用更為平緩且作用時間更長。
實施例5：穩定性比較
INS-A、INS-B、INS-C(各種代號與實施例3含義相同)、德穀胰島素均按照德穀胰島素上市處方製備成製劑，然後觀察它們的穩定性，使用HPLC測定起始和各時間點主峰純度以及雜質含量，具體結果如表3所示。從表3可以看出，INS-C的穩定性明顯優於INS-A和INS-B；略優於德穀胰島素。
Figure 106125882-A0101-12-0022-21
<110> 江蘇恆瑞醫藥股份有限公司(JIANGSU HENGRUI MEDICINE CO.,LTD.)
<120> 一種人胰島素或其類似物的醯化衍生物
<130> 770053CPCT
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<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 21
<212> PRT
<213> 人類
<223> 人胰島素類似物A鏈
<400> 1
Figure 106125882-A0305-02-0025-1
<210> 2
<211> 29
<212> PRT
<213> 人工序列
<223> 人胰島素類似物B鏈
<400> 2
Figure 106125882-A0305-02-0025-2
Figure 106125882-A0101-11-0002-1

Claims (22)

  1. 一種人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，該人胰島素類似物的醯化衍生物具有如下通式所示的結構：S-W-X-Y-Z (I)其中S為B鏈第30位蘇胺酸缺失的人胰島素；-W-X-Y-Z為胰島素類似物的醯化修飾基團；其中W為具有-OC(CH2)nCO-的二醯基結構，其中n為2至5之間整數，該結構以其醯基之一和母體胰島素類似物B-鏈上存在的賴胺酸殘基的ε-胺基形成醯胺鍵；X為結構如-HN(CH2)pCH(COOH)NH-的化合物，p為2至10的整數，該化合物以其胺基之一與W中的一個醯基連接形成醯胺鍵；Y為-A(CH2)m-，其中m為10至16的整數，A為CO-；Z為-COOH。
  2. 如申請專利範圍第1項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，其中m係12至14的整數。
  3. 如申請專利範圍第1項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，其中n為2。
  4. 如申請專利範圍第1項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，其中p為2至6的整數。
  5. 如申請專利範圍第1項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，其中p為2至4的整數。
  6. 如申請專利範圍第1項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，其中p為4。
  7. 如申請專利範圍第1項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，其中-W-X-Y-Z具有如下結構，
    Figure 106125882-A0305-02-0027-3
  8. 如申請專利範圍第11項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物，其中-W-X-Y-Z具有如下結構，
    Figure 106125882-A0305-02-0027-4
  9. 一種Nα-(HOOC(CH2)14CO)-Nε-(OCCH2CH2CO-(Nε B29-Des(B30)人胰島素))-Lys-OH或其鋅複合物。
  10. 如申請專利範圍第9項所述的Nα-(HOOC(CH2)14CO)-Nε-(OCCH2CH2CO-(Nε B29-Des(B30)人胰島素))-Lys-OH或其鋅複合物，其係賴胺酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-賴胺酸-Nε-氧代丁醯基))des(B30)人胰島素或其鋅複合物。
  11. 一種申請專利範圍第1至8項中任意一項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物的製備方法，其包括使式(III)化合物與B鏈第30位蘇胺酸缺失 的人胰島素反應的步驟，R-W-X-Y-Z (III)其中R為離去基團。
  12. 如申請專利範圍第11項所述的方法，其中R為活化酯基團。
  13. 如申請專利範圍第11項所述的方法，其中R係選自
    Figure 106125882-A0305-02-0028-5
  14. 如申請專利範圍第11項所述的方法，還包括式(III’)化合物去除羧基保護基得到式(III)化合物的步驟，
    Figure 106125882-A0305-02-0028-6
     其中，X’、Z’分別代表X、Z中所有的羧基被保護基保護的形式；R如申請專利範圍第11項中定義。
  15. 如申請專利範圍第14項所述的方法，其中，該保護基係C1-C6的烷基。
  16. 如申請專利範圍第14項所述的方法，其中，該保護基係C1-C4的烷基。
  17. 如申請專利範圍第14項所述的方法，其中，該保護基係甲基或第三丁基。
  18. 如申請專利範圍第1至10項中任意一項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物的鋅複合物，其中每6分子醯化胰島素包含多於4個鋅原子。
  19. 一種藥物組成物，含有如申請專利範圍第1至8項中任意一項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物或如申請專利範圍第18項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物的鋅複合物，還含有藥學上可接受的載體。
  20. 如申請專利範圍第19項所述的藥物組成物，還含有速效胰島素。
  21. 一種如申請專利範圍第1至10項中任意一項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物、如申請專利範圍第18項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物的鋅複合物、或如申請專利範圍第19或20項所述的藥物組成物在製備治療糖尿病的藥物中的用途。
  22. 一種如申請專利範圍第1至10項中任意一項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物或其鋅複合物、如申請專利範圍第18項所述的人胰島素類似物的醯化衍生物的鋅複合物、或如申請專利範圍第19項所述的藥物組成物與速效胰島素聯合在製備治療糖尿病的藥物中的用途。
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