TWI726497B - 一種b肝表面抗原抑制劑的晶型 - Google Patents

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Abstract

本發明公開了一種B肝表面抗原抑制劑的晶型及其製備方法，還包括所述晶型在製備B肝表面抗原抑制劑中的應用。

Description

一種B肝表面抗原抑制劑的晶型
本發明涉及一種B肝表面抗原抑制劑的晶型及其製備方法，還包括所述晶型在製備B肝表面抗原抑制劑中的應用。
本申請要求申請日為2018年11月22日的中國專利申請CN2018113995143的優先權。本申請引用該中國專利申請的全文。
B型病毒性肝炎，簡稱B肝，是一種由B型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，簡稱HBV）感染機體後所引起的疾病。B型肝炎病毒是一種嗜肝病毒，主要存在於肝細胞內並損害肝細胞，引起肝細胞炎症、壞死、纖維化。B型病毒性肝炎分急性和慢性兩種。急性B型肝炎在成年人中大多數可通過其自身的免疫機制而自癒。但是慢性B型肝炎（CHB）已成為全球健康保健所面臨的極大挑戰，同時也是引起慢性肝病，肝硬化（cirrhosis）和肝癌（HCC）的主要原因。據估計，全球有20億人感染了慢性B型肝炎病毒，超過3億5千萬人口已發展成為了B型肝炎，每年近60萬人死於慢性B型肝炎的併發症。中國是B肝高發區，B型肝炎累積病人多，危害嚴重。據資料顯示，中國現有B型肝炎病毒感染者約9300萬，而其中約2000萬患者確診為慢性B型肝炎，當中10%-20%可演變成肝硬化，1%-5%可發展成肝癌。
B肝功能性治癒的關鍵是清除HBsAg（B型肝炎病毒表面抗原），產生表面抗體。HBsAg量化是一個非常重要的生物指標。在慢性感染病人中，很少能觀察到HBsAg的減少和血清轉化，這是目前治療的終點。
B型肝炎病毒(HBV)的表面抗原蛋白在HBV侵入肝細胞的過程中起非常重要的作用，對於防治HBV的感染有重要意義。表面抗原蛋白包括大（L）、中（M）和小（S）的表面抗原蛋白，共享共同的C端S區。它們從一個開放閱讀框中表達，其不同的長度是由閱讀框三個AUG起始密碼子決定的。這三個表面抗原蛋白包括前S1 /前S2 / S，前S2 / S和S域。HBV表面抗原蛋白被整合到內質網（ER）膜，由N端信號序列啟動。它們不僅構成了病毒體的基本結構，而且還形成球狀和絲狀亞病毒顆粒（SVPs，HBsAg），聚集在ER，宿主ER和前高爾基體器，SVP包含大多S表面抗原蛋白。 L蛋白，在病毒的形態發生與核衣殼相互作用方面是至關重要的，但對於SVP的形成是沒有必要的。由於它們缺乏核衣殼，所述的SVPs 是非感染性的。SVPs大大參與了疾病進展，尤其是對B肝病毒的免疫應答，在感染者的血液裡，SVPs的量至少是病毒數量的10,000倍，誘捕了免疫系統，削弱人體對B肝病毒的免疫反應。HBsAg也可抑制人的天然免疫，能夠抑制多糖（LPS）和IL-2誘導的細胞因子產生，抑制樹狀細胞DC功能以及LPS對 ERK-1/2和c-Jun N端的干擾激酶-1/2在單核細胞的誘導活性。值得注意的是，肝硬化和肝細胞癌的疾病進展很大程度也與持續分泌的HBsAg相關。這些研究結果表明HBsAg在慢性肝炎的發展中起重要作用。
目前被批准上市的抗HBV藥物主要是免疫調節劑（干擾素-α和聚乙二醇干擾素-α-2α）和抗病毒治療藥物(拉美芙錠、阿德福韋酯(Adefovir)、恩替卡韋(Entecavir)、替比夫定(Telbivudine)、替諾福韋(Tenofovir)、克拉夫定(Clevudine)等)。其中，抗病毒治療藥物屬於核苷酸類藥物，其作用機制是抑制HBV DNA 的合成，並不能直接減少HBsAg水平。與延長治療一樣，核苷酸類藥物顯示HBsAg清除速度類似於自然觀察結果。
臨床已有療法降低HBsAg療效不佳，因此，開發能夠有效降低HBsAg的小分子口服抑制劑是目前臨床用藥所亟需的。
羅氏公司開發了一個名為RG7834的表面抗原抑制劑用於治療B肝，並報導了該化合物在土撥鼠抗B肝模型中的藥效：在以RG7834作為單藥使用時可以降低2.57個Log的表面抗原，降低1.7個Log的HBV-DNA。該化合物活性較好，但是分子合成過程中，需要拆分異構體，降低了產率，增加了成本。
WO2017013046A1公開了一系列用於治療或者預防B型肝炎病毒感染的2-氧代-7，8-二氫-6H-吡啶并[2,1,a][2]苯并氮雜卓-3-羧酸衍生物。該系列稠環化合物最高活性實施例3的IC50 為419 nM，活性有很大提高空間。該系列化合物含有的手性中心，不對稱合成難度較大。通常7元碳環的水溶性不佳，易於氧化代謝。
本發明提供式（I）化合物的A晶型，其X射線粉末衍射圖譜在下列2θ角處具有特徵衍射峰：8.04°± 0.2°、16.52°± 0.2°、19.52°± 0.2°，
Figure 02_image003
。
在本發明的一些方案中，上述A晶型的X射線粉末衍射圖譜在下列2θ角處具有特徵衍射峰：8.04°± 0.2°、10.47°± 0.2°、11.90°± 0.2°、16.52°± 0.2°、18.06°± 0.2°、19.52°± 0.2°、22.02°± 0.2°、25.28°± 0.2°。
在本發明的一些方案中，上述A晶型的X射線粉末衍射圖譜如圖1所示。
在本發明的一些方案中，上述A晶型的XRPD圖譜解析數據如表1所示。 表1  式（I）化合物A晶型的XRPD圖譜解析數據
Figure 108142579-A0304-0001
在本發明的一些方案中，上述A晶型的差示掃描量熱曲線在139.64±5℃處具有吸熱峰的起始點。
在本發明的一些方案中，上述A晶型的差示掃描量熱曲線圖譜如圖2所示。
在本發明的一些方案中，上述A晶型的熱重分析曲線在125.23±3℃處失重達0.4757%。
在本發明的一些方案中，上述A晶型的熱重分析曲線圖譜如圖3所示。
本發明還提供上述A晶型在製備治療B肝藥物中的應用。
技術效果
本發明化合物有顯著的抗B肝病毒活性。本發明化合物具有適中的血漿蛋白結合率，對細胞色素P450同功酶沒有抑制，顯示藥物-藥物相互作用的風險較低；在大鼠、人和小鼠這三個種屬中的肝微粒體穩定性優秀，顯示化合物不易被代謝；具有較好的暴露量和生物利用度；在單次給藥的神經毒性研究中耐受性較好。本發明化合物合成方法簡潔、經濟。
本發明晶型溶解性好、易於獲得、物理穩定性和化學穩定性均較好。
定義和說明
除非另有說明，本文所用的下列術語和短語旨在含有下列含義。一個特定的短語或術語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文出現商品名時，旨在指代其對應的商品或其活性成分。
本發明的中間體化合物可以通過本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式，優選的實施方式包括但不限於本發明的實施例。
本發明具體實施方式的化學反應是在合適的溶劑中完成的，所述的溶劑須適合於本發明的化學變化及其所需的試劑和物料。為了獲得本發明的化合物，有時需要本領域技術人員在已有實施方式的基礎上對合成步驟或者反應流程進行修改或選擇。
下面會通過實施例具體描述本發明，這些實施例並不意味著對本發明的任何限制。
本發明所使用的所有溶劑是市售的，無需進一步純化即可使用。
化合物經手工或者ChemDraw®軟件命名，市售化合物採用供應商目錄名稱。
本發明粉末X-射線衍射（X-ray powder diffractometer, XRPD）方法 儀器型號：丹東浩元DX-2700BH X-射線衍射儀 測試方法：大約10 ~ 20 mg樣品用於XRPD檢測。 詳細的XRPD 參數如下： 光管：Cu, kα, (λ=1.54184Ǻ). 光管電壓：40 kV，光管電流：30 mA 發散狹縫：1 mm 探測器狹縫：0.3 mm 防散射狹縫：1 mm 掃描範圍：3-40 deg 步徑：0.02 deg 步長：0.5 秒
本發明差熱分析（Differential Scanning Calorimeter, DSC）方法 儀器型號：METTLER TOLEDO DSC1 差示掃描量熱儀 測試方法：取樣品（2~ 6 mg）置於30 UL 的DSC鍍金高壓坩鍋內進行測試，以10℃/min的升溫速率，加熱樣品從40°C到350°C。
本發明熱重分析（Thermal Gravimetric Analyzer, TGA）方法 儀器型號：TA TGA550熱重分析儀 測試方法：取樣品（2 ~ 10 mg）置於鋁坩堝內，然後放置於鉑金吊籃內進行測試，在氮氣（N2 ）條件下，以40 mL/min 的氣體流速，以10°C/min的升溫速率，加熱樣品從40°C到500°C。
為了更好的理解本發明的內容，下面結合具體實施例來做進一步的說明，但具體的實施方式並不是對本發明的內容所做的限制。
實施例1式（I）化合物的製備
Figure 02_image004
Figure 02_image006
Figure 02_image008
Figure 02_image010
Figure 02_image012
步驟A: 保持0攝氏度下，向化合物1（100.00克，762.36毫莫耳，1.00當量）的四氫呋喃（400.00毫升）溶液中加入四氫鋰鋁（80.00克，2.11莫耳，2.77當量）。溶液在10攝氏度下攪拌10小時。然後在攪拌下向反應液中加入80.00毫升水，並加入240.00毫升15%氫氧化鈉水溶液，再加入80.00毫升水。得到的懸浮液在10攝氏度下攪拌20分鐘，過濾得到無色清液。減壓濃縮得到化合物2。
步驟B: 將化合物2（50.00克，426.66毫莫耳）和三乙胺（59.39毫升，426.66毫莫耳）溶解在二氯甲烷（500.00毫升）中，二碳酸二三級丁酯（92.19克，422.40毫莫耳）溶解在二氯甲烷（100.00毫升）中，在0攝氏度下逐滴加入到上一反應液中。然後反應液在25攝氏度下攪拌12小時。反應液用飽和食鹽水（600.00毫升）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，有機相減壓濃縮旋乾，然後用甲基三級丁基醚/石油醚（50.00/100.00）重結晶，得到化合物3。
步驟C：將氯化亞碸（100.98毫升，1.39 毫莫耳）溶解在乙腈（707.50毫升），化合物3（121.00克，556.82毫莫耳）溶解在乙腈（282.90毫升）中，與零下40攝氏度下滴加到上一反應液，滴加完後，吡啶（224.72毫升，2.78莫耳）一次性加入反應液中。移去冰浴，反應液在5-10攝氏度下攪拌1小時。減壓旋乾溶劑後，加入乙酸乙酯（800.00毫升），有固體析出，過濾，減壓濃縮濾液。第二步：得到的油和水和三氯化釕（12.55克，55.68毫莫耳）溶解在乙腈（153.80毫升）中，將高碘酸鈉（142.92克，668.19毫莫耳）懸浮在水（153.80毫升）中，緩慢加入上述反應液中，最終的反應混合液在5-10攝氏度下攪拌0.15小時。過濾反應混合液，得到濾液，用乙酸乙酯（800.00毫升×2）萃取，有機相用飽和食鹽水（800.00毫升）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮旋乾。過柱純化（二氧化矽，石油醚/乙酸乙酯=50/1至20/1）得到化合物4。
步驟D：將化合物5(100.00克，657.26毫莫耳)溶解在乙腈(1300.00毫升)中，加入碳酸鉀(227.10克，1.64莫耳)和1-溴-3-甲氧基丙烷(110.63克，722.99毫莫耳)。反應液在85攝氏度攪拌6小時。反應液用乙酸乙酯600.00毫升(200.00毫升×3)萃取，用無水硫酸鈉進行乾燥，然後過濾，減壓濃縮，得到化合物6。
步驟E：將化合物6(70.00克，312.15 毫莫耳) 溶解在二氯甲烷中，加入間氯過氧苯甲酸(94.27克，437.01毫莫耳)，反應物在50攝氏度攪拌2小時。待冷卻反應液後，過濾，濾液用二氯甲烷進行萃取，有機相用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌2000.00毫升(400.00毫升×5)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。得到棕色的油狀物，用儘量少的甲醇溶解後，緩慢加入2莫耳每升的氫氧化鉀（350.00毫升）溶液（會放熱）。深色的反應液在室溫攪拌20分鐘，用37%的鹽酸將反應液調酸鹼度至5。用乙酸乙酯400.00毫升(200.00毫升×2)進行萃取，有機相用飽和食鹽水200.00毫升(100.00毫升×2)進行洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到化合物7。
步驟F：將化合物7(33.00克，155.48 毫莫耳)溶於四氫呋喃中(330.00毫升)，加入多聚甲醛(42.02克，466.45毫莫耳)，氯化鎂 (29.61克，310.97毫莫耳)，三乙胺(47.20克，466.45毫莫耳，64.92毫升)。反應液在80攝氏度攪拌8小時。反應完後，在25攝氏度用2莫耳鹽酸溶液（200.00毫升）淬滅，然後用乙酸乙酯600.00毫升(200.00毫升×3)萃取，有機相用飽和食鹽水400.00毫升(200.00毫升×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮得殘渣。殘渣用乙醇（30.00毫升）洗滌，過濾，得濾餅。從而獲得化合物8。
步驟G：將化合物8（8.70克，36.21毫莫耳）溶解在N,N-二甲基甲醯胺（80.00毫升）中，加入碳酸鉀（10.01克，72.42毫莫耳）和化合物4（11.13克，39.83毫莫耳），反應液在50攝氏度下攪拌2小時。反應液用1.00莫耳/升鹽酸水溶液（200.00毫升）淬滅，乙酸乙酯（150.00毫升×2）萃取。合併有機相用水（150.00毫升×3）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，得到化合物9。
步驟H：將化合物9（15.80克，35.95毫莫耳）溶解在二氯甲烷（150.00毫升）中，加入三氟乙酸（43.91毫升，593.12毫莫耳）。反應液在10攝氏度下攪拌3小時。反應液減壓濃縮旋乾，加入碳酸氫鈉水溶液（100.00毫升），二氯甲烷（100.00毫升）萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，得到化合物10。
步驟I：將化合物10（5.00克，15.56毫莫耳）溶解在甲苯（20.00毫升）中加入化合物11（8.04克，31.11毫莫耳）反應液在氮氣保護下於120攝氏度下攪拌12小時。反應液用水（100.00毫升）淬滅，乙酸乙酯（100.00毫升×2）萃取，合併有機相用水（80.00毫升×2）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮。殘渣通過反相柱純化。再經高效液相製備色譜法純化（柱子：Phenomenex luna C18 250×50毫米×10 微米;流動相: [水(0.225%甲酸)-乙腈];洗脫梯度: 35%-70%,25分鐘）得到化合物12。
步驟J：將化合物12（875.00毫克，1.90毫莫耳）溶解在甲苯（20.00毫升）和乙二醇二甲醚（20.00毫升）中，加入四氯苯醌（1.40克，5.69毫莫耳）。反應液在120攝氏度下攪拌12小時。反應液冷卻到室溫，加入飽和碳酸鈉水溶液（50.00毫升）和乙酸乙酯（60.00毫升）。將混合液在10-15攝氏度下攪拌20分鐘，分液得到有機相。有機相加入2.00莫耳/升鹽酸水溶液（60.00毫升），在10-15攝氏度下攪拌20分鐘，分液，有機相再用2莫耳/升鹽酸水溶液（60.00毫升×2）洗滌，分液，水相中加入2莫耳/升氫氧化鈉水溶液（200.00毫升）和二氯甲烷（200.00毫升）。分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，得到化合物13。
步驟K：將化合物13（600.00毫克，1.31毫莫耳）溶解在甲醇（6.00毫升），加入4.00莫耳/升的氫氧化鈉水溶液（2.00毫升，6.39當量）。反應液在15攝氏度下攪拌0.25小時。將反應液用1.00莫耳/升的鹽酸水溶液調節pH=3-4，然後用二氯甲烷（50.00毫升×3）萃取，合併有機相，用飽和食鹽水洗滌（50.00毫升），無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，得到式（I）化合物。ee值(對映體過量)：100%。
SFC(超臨界流體色譜)方法： 柱子: Chiralcel OD-3 100毫米×4.6毫米規格, 3微米。 流動相: 甲醇 (0.05%二乙胺) 在二氧化碳中，從 5% 到 40%。 流速: 3毫升每分鐘。 波長: 220奈米。
實施例2式（I）化合物A晶型的製備
步驟A：將式（I）化合物（1.89 Kg）加入到乙醇（9.5 L）中，然後加熱回流至溶解，然後梯度降溫，將反應體系溫度下降到25攝氏度左右時，有大量固體析出，然後過濾得到固體。
步驟B：將步驟A所得到的固體加入到水（9.5 L）中，在室溫下攪拌3~5h，然後過濾得到固體。
步驟C：將步驟B所得到的固體在45~50攝氏度的烘箱中，烘48~72h，得到式（I）化合物的A晶型。質譜：[M+H]+ = 432.2。1 H NMR (400 MHz, 氘代氯仿) δ 15.72 (br s, 1H), 8.32-8.93 (m, 1H), 6.60-6.93 (m, 2H), 6.51 (br s, 1H), 4.38-4.63 (m, 2H), 4.11 (br dd,J =4.52, 12.23 Hz, 3H), 3.79-3.87 (m, 3H), 3.46-3.54 (m, 2H), 3.29 (s, 3H), 2.07 (quin,J =6.24 Hz, 2H), 0.77-1.21 (m, 9H)。
實施例3式（I）化合物的HBV體外活性測試
實驗材料：
1.細胞系：HepG2.2.15 細胞 HepG2.2.15 細胞培養基 (DMEM/F12，Invitrogen-11330032；10%血清，Invitrogen-10099141；每毫升100單位青黴素和100 µg/mL鏈黴素，Hyclone-SV30010；1% 非必需胺基酸，Invitrogen-11140050；2毫米 L-GLUTAMINE，Invitrogen-25030081；300 μg/mL Geneticin， Invitrogen-10131027 )
2.試劑： 胰酶（Invitrogen-25300062） DPBS （Corning-21031CVR） 二甲基亞碸（Sigma-D2650-100ML） 高通量DNA純化試劑盒（QIAamp 96 DNA Blood Kit，Qiagen-51162） 定量快速啟動通用探針試劑（FastStart Universal Probe Master，Roche-04914058001） B型肝炎表面抗原定量檢測試劑盒（安圖生物，CL 0310）
3.耗材與儀器： 96孔細胞培養板（Corning-3599） CO2 培養箱（HERA-CELL-240） 光學封板膜（ABI-4311971） 定量PCR 96孔板（Applied Biosystems-4306737） 螢光定量PCR儀（Applied Biosystems-7500 real time PCR system）
實驗方法： 1. 種HepG2.2.15細胞（4x104 細胞/孔）到96孔板，在37℃，5% CO2培養過夜。 2. 第二天，稀釋化合物，共8個濃度，3倍梯度稀釋。加不同濃度化合物到培養孔中，雙複孔。培養液中二甲基亞碸的終濃度為0.5%。10 µM ETV（恩替卡韋）作為100%抑制對照；0.5%的二甲基亞碸作為0%抑制對照。 3. 第五天，更換含有化合物的新鮮培養液。 4. 第八天收取培養孔中的培養液，取部分樣品ELISA測定B肝病毒S抗原的含量；取部分樣品使用高通量DNA純化試劑盒（Qiagen-51162）提取DNA。 5. PCR反應液的配製如表1所示： 表2  PCR 反應液的配製
Figure 108142579-A0304-0002
 前引子序列：GTGTCTGCGGCGTTTTATCA(SEQ ID NO.1) 後引子序列：GACAAACGGGCAACATACCTT(SEQ ID NO.2) 探針序列：5'+FAM+CCTCTKCATCCTGCTGCTATGCCTCATC(SEQ ID NO.3)+ TAMRA -3' 6. 在96孔PCR板中每孔加入15 µL的反應混合液，然後每孔加入10µL的樣品DNA或HBV DNA的標準品。 7. PCR的反應條件為：95℃加熱10分鐘，然後95℃變性15秒，60℃延伸1分鐘，共40個循環。 8. ELISA測定B肝病毒S抗原的含量 取50µL樣品和標準品分別加入到反應板中，再每孔分別加入50µL酶結合物，震盪混勻，37℃溫浴60分鐘，然後用洗液洗板5次，再每孔加入50µL發光底物，混勻，室溫避光反應10分鐘，最後用酶標儀檢測化學發光強度。 9. 數據分析： 計算抑制百分比：% Inh. =（1-樣品中的值/二甲基亞碸對照值）×100。 計算EC50 ：使用GraphPad Prism軟件計算化合物對HBV的50%抑制濃度（EC50 ）值。
實驗結果：式（I）化合物作用於HBV-DNA和HBsAg的EC50 分別是2.55 nM和3.88 nM。
實驗結論：本發明式（I）化合物能有效抑制HBV-DNA和B肝表面抗原（HBsAg）。
實施例4式（I）化合物的體內藥效研究
實驗材料： C57BL/6小鼠、10%HP-β-CD作為溶媒、參考化合物TDF (替諾福韋酯)、式（I）化合物、重組病毒rAAV8-1.3HBV。 本項目主要試劑包括QIAamp96 DNA試劑盒和TaqMan® Universal PCR Master Mix，B型肝炎病毒表面抗原檢測試劑盒。 儀器包括：離心機（Beckman Allegra X-15R），組織研磨機（QIAGEN-Tissue lyser II）和分光光度儀（Thermo-NANODROP 1000）。
實驗方法： a)  所有小鼠在病毒注射後第28天開始口服給藥，將該天設為第0天。給藥前所有小鼠頜下採血收集血清。每天給一次藥，連續給四周。具體給藥方案見表3。 b) 所有小鼠每週進行兩次頜下採血用於收集血清，每次採血量為約100 µL。具體採血時間見表3。 c)  第28天，將所有小鼠安樂死，心臟採血收集血清。 d) 所有血清樣品送至檢測。 表3  體內實驗方案
Figure 108142579-A0304-0003
實驗結果：
檢測血清中HBsAg 含量評價受試化合物在AAV/HBV小鼠模型中抗HBV活性。結果見表4和圖4。小鼠體重變化見圖5。 表4  小鼠給藥後不同日期的HBsAg含量（IU/mL）
Figure 108142579-A0304-0004
實驗結論：
本發明化合物在AAV/HBV小鼠模型實驗中，能夠極顯著降低HBsAg，且小鼠表現出良好的耐受性。
雖然本發明已以實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，本發明所屬技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作些許之更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
無
圖1為式（I）化合物A晶型的Cu-Kα輻射的XRPD譜圖。 圖2為式（I）化合物A晶型的DSC譜圖。 圖3為式（I）化合物A晶型的TGA譜圖。 圖4為小鼠給藥後不同日期的HBsAg含量（IU/mL）。 圖5為小鼠給藥後不同日期的體重變化。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002

Claims (8)

  1. 一種式（I）化合物的A晶型，其中，其X射線粉末衍射圖譜在下列2θ角處具有特徵衍射峰：8.04°± 0.2°、16.52°± 0.2°、19.52°± 0.2°，
    Figure 03_image003
    。
  2. 根據請求項1所述的A晶型，其中，其X射線粉末衍射圖譜在下列2θ角處具有特徵衍射峰：8.04°± 0.2°、10.47°± 0.2°、11.90°± 0.2°、16.52°± 0.2°、18.06°± 0.2°、19.52°± 0.2°、22.02°± 0.2°、25.28°± 0.2°。
  3. 根據請求項2所述的A晶型，其X射線粉末衍射圖譜如圖1所示。
  4. 根據請求項1-3中任一項所述的A晶型，其差示掃描量熱曲線在139.64±5℃處具有吸熱峰的起始點。
  5. 根據請求項4所述的A晶型，其差示掃描量熱曲線圖譜如圖2所示。
  6. 根據請求項1-3中任一項所述的A晶型，其熱重分析曲線在125.23±3℃處失重達0.4757%。
  7. 根據請求項6所述的A晶型，其熱重分析曲線圖譜如圖3所示。
  8. 一種治療B肝的藥物，其利用如請求項1-7任意一項所述A晶型製備而成。
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