TWI726255B - 用於製備預防、延緩或治療眼部組織病變之複方組合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種用於製備預防、延緩或治療眼部組織病變之複方組合物,其包括20-50重量百分比之一熟地萃取物、10-20重量百分比之一枸杞萃取物、1-10重量百分比之一葡萄籽萃取物、1-10重量百分比之一山桑子萃取物、1-10重量百分比之一綠花椰菜苗萃取物,以及1-10重量百分比之一金盞花萃取物。其中該眼部組織病變包括眼球前後房擴張、玻璃體液擴張及視網膜脫離。
Description
本發明關於一種用於預防、延緩或治療眼部病變之複方組合物及其用途,特別是指用於預防、延緩或治療類固醇誘導之眼部病變之複方組合物,以及該組合物之用途。
類固醇藥物
1. 類固醇藥物及其在眼科上的應用
類固醇具有強力的抗發炎及免疫調節的作用。對於一些發炎性的疾病如血管炎、氣喘、過敏性疾病、頑固性溼疹、過敏性休克、慢性阻塞性肺病、自體免疫疾病(如紅斑性狼瘡、皮肌炎、多發性肌炎、腎絲球腎炎、發炎性關節炎、硬皮症)、腦部水腫、一些發炎性的神經病變及癌症(如淋巴癌)等疾病,具有很高的醫學治療價值。常用的類固醇藥物有羥甲烯龍、十一酸睪酮、氧甲氫龍、去氫甲基睪酮、美雄酮、司坦唑醇等。而含有類固醇的製劑種類繁多,可通過口服、注射、吸入及外用等方式攝入。
眼科使用的類固醇眼藥是皮質類固醇(corticosteroid)類,皮質類固醇源自人體腎上腺皮質分泌的腎上腺糖皮質素(adrenal glucocorticoids),主要包括皮質醇(cortisol)及皮質酮(corticosterone)。正常身體血液中具有一定濃度的糖皮質素,當遇到外在壓力(stress)增加的時候,其分泌就會增加(因此糖皮質素又稱為壓力激素),目的在於增強身體抗壓的生理反應,包括抗發炎、維持血壓、升糖、鈣質吸收、胃酸分泌、調節蛋白質、脂肪、醣類、電解質及水分的代謝等等。
臨床眼科使用類固醇藥物的目的,主要在於皮質類固醇可廣泛的抑制多種情況下身體所發生的發炎免疫反應,並減緩伴隨發炎所衍生的各種症狀及後遺症。適用在眼睛前部發炎、自體免疫眼疾、及角膜移植術後的患者。一般而言,眼科用的皮質類固醇抗發炎效度:betamethasone(倍他米松) ≧ dexamethasone(地塞米松) >> triamcinolone(去炎松) > prednisolone(培尼皮質醇) >> hydrocortisone(氫羥腎上腺皮質素)
2. 倍他米松(Betamethasone)
本發明試驗中所使用的類固醇藥物為倍他米松(Betamethasone),屬於糖皮質激素類藥物,於1961年在美國被批准用於醫療用途。倍他米松應用於許多疾病的治療上,包括風濕性疾病,如類風濕性關節炎和系統性紅斑狼瘡,皮膚病如皮炎和牛皮癬,過敏性疾病如哮喘和血管性水腫,也可在早產時協助嬰兒肺部發育,亦可治療克羅恩病、白血病,以及與氟氫可的松合用治療腎上腺皮質機能不足等。倍他米松可以通過口服,肌肉注射,或以外用藥膏給藥。其外用藥膏是世界衛生組織的基本藥物清單,是公共衛生系統中所需的最有效和最安全的藥物,可作為通用藥物使用。
3. 類固醇藥物的副作用
類固醇的副作用與藥量及使用期間有直接的關係,若長期使用、或大劑量使用較容易造成副作用。長期使用可能導致腎上腺功能不全。過量使用類固醇藥物會導致HPA軸(hypotalmic-pituitary-adrenocortical axis)異常,容易導致腎上腺皮質長期停止工作而萎縮,使人體對類固醇藥物產生依賴性。嚴重的副作用包括心血管問題、肝臟損害、糖尿病、皮膚問題、情緒不穩定、腸胃問題、感染風險增加、肌肉無力、月經週期改變、男性生殖功能下降和嚴重的過敏反應等。
類固醇藥物在眼睛上的副作用,會抑制眼睛的細胞免疫功能,可以導致原有微生物感染加重,因此類固醇眼藥水通常會與抗生素合併使用。且類固醇眼藥水會抑制角膜上皮癒合,長期使用可造成高眼壓及白內障等眼部病變。
因此,要如何減低類固醇藥物對人體造成的副作用,逐漸成為一個重要的課題。
根據本發明一實施例,提供一種用於製備預防、延緩或治療眼部組織病變之複方組合物,其包括20-50重量百分比之一熟地萃取物、10-20重量百分比之一枸杞萃取物、1-10重量百分比之一葡萄籽萃取物、1-10重量百分比之一山桑子萃取物、1-10重量百分比之一綠花椰菜苗萃取物,以及1-10重量百分比之一金盞花萃取物。其中該眼部組織病變包括眼球前後房擴張、玻璃體液擴張及視網膜脫離。
一實施例中,其中該眼部組織病變係由類固醇誘導產生。
一實施例中,上述複方組合物為一醫藥組合物,且進一步包含藥學上可接受之載劑、賦形劑、稀釋劑或輔劑。
一實施例中,上述複方組合物為一食品添加劑。
一實施例中,上述複方組合物,包括40-50重量百分比之熟地萃取物,15-20重量百分比之枸杞萃取物、5-10重量百分比之葡萄籽萃取物、5-10重量百分比之山桑子萃取物、5-10重量百分比之綠花椰菜苗萃取物及5-10重量百分比之金盞花萃取物。
一實施例中,上述複方組合物包括50重量百分比之熟地萃取物,18重量百分比之枸杞萃取物、8重量百分比之葡萄籽萃取物、8重量百分比之山桑子萃取物、8重量百分比之綠花椰菜苗萃取物及8重量百分比之金盞花萃取物。
根據本發明另一實施例,提供上述複方組合物之用途,其係用於製備預防、延緩或治療眼部組織病變之藥物。其中該眼部組織病變包括眼球前後房擴張、玻璃體液擴張及視網膜脫離。
一實施例中,該藥物作用在哺乳動物。
一實施例中,該哺乳動物為人類。
一實施例中,該複方組合物對人類的有效劑量範圍為1.7-32.8 毫克/公斤體重/天。
一實施例中,該藥物的施用方式為口服、滴劑或栓劑。
為使本發明之上述及其他方面更為清楚,下文特舉實施例,並配合所附圖式進行說明。
複方組合物之製備
本實施例提供一種中草藥複方組合物,其可用於預防、延緩或治療類固醇誘導之眼部組織病變。此中草藥複方組合物是由熟地萃取物、枸杞萃取物、葡萄籽萃取物、山桑子萃取物、綠花椰菜苗萃取物及金盞花萃取物所組成。本實施例中使用的萃取物,其原料產地如下表所示,然本發明並不對其來源進行限制。
熟地、枸杞、葡萄籽、山桑子、綠花椰菜苗及金盞花等中草藥材料之萃取方式為習知,包含水萃取、醇萃取或離子樹脂萃取等方式。各材料的細部萃取方式略有不同,但仍有共通之處。首先,先將原料以純水洗淨後,使用水及/或醇類溶劑進行數次萃取,中間可選擇性的使用如ADS-8之類的陽離子吸附樹脂。之後經由濃縮、噴霧或真空乾燥以及解碎過篩後,得到萃取物本實施例中,對於熟地、枸杞、葡萄籽、山桑子、綠花椰菜苗及金盞花的萃取方式分別列於第1A圖至第1F圖中。特別注意的是,以上萃取步驟僅為例示說明,該技術領域具有通常知識者可依實際狀況增加/刪除/調整相關萃取步驟及條件,不受特別限制。例如各步驟的萃取時間並不限定於1小時、萃取溫度不限定為100℃,而可依實際狀況略為調整。
本實施例文中以數值範圍或百分比範圍形式界定的特徵條件(例如10-20 wt%),其描述應視為已涵蓋且具體揭示了所有可能的次範圍及範圍內的個別數值,特別是整數數值。舉例而言,「10-20」的範圍描述應視為已經具體揭示了如10-20、11-19、12-18、13-17、14-16等等所有次範圍,特別是由所有整數數值所界定的次範圍,且應視為已經具體揭示了範圍內如11、12、13、14、15、16、17、18、19等個別數值。除非另有指明,否則前述解釋方法適用於本發明全文的所有內容,不論範圍廣泛與否。
若數量或其他數值或參數是以範圍、較佳範圍或一系列上限與下限表示,則其應理解成是本文已特定揭示了由任一對該範圍的上限或較佳值與該範圍的下限或較佳值構成的所有範圍,不論該等範圍是否有分別揭示。此外,本文中若提到數值的範圍時,除非另有說明,否則該範圍應包含其端點以及範圍內的所有整數與分數。
中草藥複方組合物的成份比例範圍較佳如下:熟地萃取物(Rehmannia glutinosa
extract)占20-50 wt%,枸杞萃取物(Lycium barbarum
extract)占10-20 wt %、葡萄籽萃取物(Grape seed extract)占1-10 wt %、山桑子萃取物(Vaccinium myrtillus
extract)占1-10 wt %、綠花椰菜苗萃取物(青花菜,Brassica oleracea var. italica
extract)占1-10 wt %、金盞花萃取物(Calendula officinalis
extract)占1-10 wt %。更佳成份比例為熟地萃取物占40-50 wt%,枸杞萃取物占15-20 wt %、葡萄籽萃取物占5-10 wt %、山桑子萃取物占5-10 wt %、綠花椰菜苗萃取物占5-10 wt %、金盞花萃取物占5-10 wt %。
本實施例係使用熟地萃取物50 wt%,枸杞萃取物18 wt %、葡萄籽萃取物8 wt %、山桑子萃取物8 wt %、綠花椰菜苗萃取物8 wt %及金盞花萃取物8 wt %的重量比例。
前述類固醇誘導之眼部組織病變係指受治療者施用類固醇藥物後,引發的眼部疾病。其包括但不限於眼球前房擴張、眼球後房擴張、玻璃體液擴張、水晶體退化及視網膜脫離等。
本實施例中草藥護眼複方組合物的製備方法如下:量取適當比例的各原料萃取物(乾粉),將各原料解(粉)碎後,充分混合,即獲得本實施例之中草藥護眼複方組合物。
特別說明的是,本實施例使用的複方組合物劑量主要是透過口服給藥方式用於大鼠上。因此,如果需要治療的個體是人類,則該劑量應根據本領域中習知的轉換方法重新計算。例如,大鼠(標準體重為0.2kg)和人類(標準體重70kg)之間的劑量的轉換可以如下所示: 1(mg/kg.BW) × 0.2 × 56/70=0.16(mg/kg.BW); 2.8(mg/kg.BW) × 0.2 × 56/70=0.448(mg/kg.BW); 4.2(mg/kg.BW) × 0.2 × 56/70=0.672(mg/kg.BW); 5(mg/kg.BW) × 0.2 × 56/70=0.8(mg/kg.BW);或 10(mg/kg.BW) × 0.2 × 56/70=1.6(mg/kg.BW)。
也就是說,用於大鼠上1至100 mg/kg.BW (毫克/公斤體重)的劑量大約等於使用於人類身上0.16至16 mg/kg.BW (毫克/公斤體重)。
本實施之複方組合物,其作用於大鼠身上的有效劑量測量為10-200 mg/kg.BW/d,更佳有效為50 mg/kg.BW/d。換算後對人類的治療有效劑量範圍約為1.7-32.8 mg/kg.BW/d (毫克/公斤體重/天),更佳為8 mg/kg.BW/d,施用方式為口服給藥。類固醇誘導眼部病變動物模式及組織染色切片分析
本試驗中使用7-8週齡SD品系雄性大鼠,此品系實驗動物已有豐富的基礎參考資料與數據,可適用於眼部組織觀察之動物模式。本試驗中先採用類固醇藥物誘導動物眼球組織病變,再投予試驗物質分析其對病變組織的影響,為目前藥物開發常採用的方式。
本發明中之部分實施例即根據上述原理,以大鼠動物誘導傷害模式,評估護眼配方用於預防、延緩或治療其所導致之眼部病變之效果及其應用於眼睛藥物及保健品開發之相關用途。
1.1 實驗動物與分組
本實施例採用7-8週齡SD品系雄性大鼠建立類固醇誘導病變之動物模式。大鼠購自樂斯科生技園區實驗動物培育及研發中心(宜蘭,台灣),提供充足的飲水與飼料(LabDiet® 5001 Rodent diet, Purina Mills LLC, St. Louis, MO, USA),且動物房溫度維持於22±2℃、12小時日夜交替之光照週期,飼養一週使大鼠適應環境。
本實施例將大鼠分為3組,分別為正常組、陰性對照組、複方組合物實驗組,每組6隻動物,全部以大鼠右眼進行實驗。除正常組外,陰性對照組及複方組合物實驗組於大鼠眼睛結膜下注射類固醇倍他米松(betamethasone),為期三週,誘導眼部病變產生。觀察到的眼部病變包括眼球前房、後房及玻璃體液擴張、水晶體退化及視網膜脫離等組織病變。特別注意的是,上述用以誘導眼部病變之類固醇藥物不限於倍他米松。
1.2 餵食劑量與實驗步驟
實驗期間,正常組與陰性對照組不給藥,複方組合物實驗組分別經口每日管餵劑量50 mg/kg.BW之複方組合物,共餵食四週。
試驗結束時,以CO2
昏迷大鼠後經腹部動脈採血,並達完全放血後犧牲,採集右眼球進行肉眼觀察及組織病理觀察。
眼球各部位組織損傷程度檢測
2.1 組織染色切片檢測
以CO2
昏迷大鼠,後經腹部動脈放血並採集右眼球浸泡於Davidson’s Fluid (DF)組織固定液中,固定48 小時後,再放入10%中性福馬林溶液中固定一週後,進行後續之組織石蠟切片製作與病理判別。其眼球組織以石蠟包埋機(Histoembedder, Leica, German)包埋製成蠟塊,再以組織切片機(Leica, RM-2145, German)切5μm 厚度,並以自動染色機(Sakura model, DRS -60A)經H&E 染色及阿拉伯膠封片後,再置於光學顯微鏡(BX51, Olympus, Tokyo, Japan) 觀察眼球前房、後房及玻璃體液是否擴張、水晶體退化情形及視網膜脫離程度等組織病理變化。結果列於第1至第4圖,其中的A組代表正常組,B組代表陰性對照組,C組代表複方組合物實驗組。
第1圖為眼球前房組織之染色切片檢測(放大20倍),B組(陰性對照組)之眼球前房組織顯示適度擴張,伴有玻璃體液擴張;A(正常組)、C(複方組合物實驗組)組之眼球前房組織均無明顯病理變化。
第2圖為眼球後房組織之染色切片檢測(放大40倍),B組的眼球前房組織中顯示適度擴張,伴有玻璃體液擴張;A、C組的眼球前房組織均無明顯病理變化。
第3圖為眼球視網膜組織之染色切片檢測(放大400倍),B組可觀查到明顯的眼球視網膜組織脫離;而A、C組之眼球視網膜組織均無明顯病理變化。
第4圖為眼球水晶體組織之染色切片檢測(放大400倍),B組可看出眼球水晶體組織退化;而A、C組之眼球水晶體組織均無明顯病理變化。
2.2 眼球病理檢查
眼球組織的病理變化除可如第1至第4圖直接觀察外,另有量化的評分標準。眼球組織病變程度可分成1-5級: 1=最小的(<1%);2=輕微的(1-25%);3=中度(26-50%);4 =中度/重度(51 - 75%);5=嚴重/高(76-100%)。依A、B、C三組大鼠眼球各部位組織病理檢查結果建立病理積分表,其中眼球組織包含了前房、後房、玻璃體、角膜、脈絡膜、鞏膜、視網膜及水晶體等。
2.3統計分析
將各組所有動物實驗數值計算後,以平均數±標準偏差值列出如下表2之積分。每組實驗動物以單因子變異數分析(One-way ANOVA)進行組內間之比較,再以Duncan 比較各組間之差異顯著性。差異顯著程度定為p<0.01代表具有統計差異。
第1圖至第4圖的大鼠眼球病理組織切片結果顯示,正常組及複方組合物實驗組之眼球組織切片並未發現前房和後房及玻璃體液擴張、晶狀體退化、視網膜脫離等現象產生;陰性對照組之眼球組織切片出現中度前房、後房和玻璃體液有擴張現象及輕度水晶退化、視網膜脫離等現象。而病理積分表2得到相同之結果,正常組及複方組合物實驗組之眼球各部位組織皆無病變。陰性對照組之眼球各部位組織皆發生病變,其中前房、後房為中度病變,積分為3;玻璃體為中度病變,積分為3,角膜為中度病變,積分為3;脈絡膜和鞏膜為重度病變,積分為4;視網膜為輕微病變,積分為1;水晶體為輕微病變,積分為1。
由以上結果顯示,複方組合物實驗組與陰性對照組比較在統計上具有顯著差異,可減輕類固醇誘導產生之眼部病變,甚至達到完全無眼部病變。亦即,本發明之複方組合物具有預防、延緩或治療因類固醇誘導產生眼部組織病變之效果。
特別補充說明的是,本發明之複方組合物亦可應用於藥物之製備,或作為食品添加劑、保健食品等相關用途,且其施用方式除口服外,亦可包括滴劑或栓劑。
第1A圖至第1F圖繪示本發明實施例之各萃取物的製備方法,其中第1A圖為熟地萃取物的製備方法,第1B圖為枸杞萃取物的製備方法,第1C圖為葡萄籽萃取物的製備方法,第1D圖為山桑子萃取物的製備方法,第1E圖為綠花椰菜苗萃取物的製備方法,第1F圖為金盞花萃取物的製備方法;
第2圖繪製本發明一實施例中,各組大鼠之眼球前房組織染色切片檢測的結果;
第3圖繪製本發明一實施例中,各組大鼠之眼球後房組織染色切片檢測的結果;
第4圖繪製本發明一實施例中,各組大鼠之眼球視網膜組織染色切片檢測的結果;
第5圖繪製本發明一實施例中,各組大鼠之眼球水晶體組織染色切片檢測的結果。
無符號。
Claims (11)
- 一種用於預防、延緩或治療眼部組織病變之複方組合物,其包括: 20-50重量百分比之一熟地萃取物, 10-20重量百分比之一枸杞萃取物, 1-10重量百分比之一葡萄籽萃取物, 1-10重量百分比之一山桑子萃取物, 1-10重量百分比之一綠花椰菜苗萃取物,以及 1-10重量百分比之一金盞花萃取物, 其中該眼部組織病變包括眼球前後房擴張、玻璃體液擴張及視網膜脫離。
- 如申請專利範圍第1項所述之複方組合物,其中該眼部組織病變係由類固醇誘導產生。
- 如申請專利範圍第1項所述之複方組合物,其為一醫藥組合物,且進一步包含藥學上可接受之載劑、賦形劑、稀釋劑或輔劑。
- 如申請專利範圍第1項所述之複方組合物,其為一食品添加劑。
- 如申請專利範圍第1項所述之複方組合物,其包括40-50重量百分比之該熟地萃取物,15-20重量百分比之該枸杞萃取物、5-10重量百分比之該葡萄籽萃取物、5-10重量百分比之該山桑子萃取物、5-10重量百分比之該綠花椰菜苗萃取物及5-10重量百分比之該金盞花萃取物。
- 如申請專利範圍第5項所述之複方組合物,其包括50重量百分比之該熟地萃取物,18重量百分比之該枸杞萃取物、8重量百分比之該葡萄籽萃取物、8重量百分比之該山桑子萃取物、8重量百分比之該綠花椰菜苗萃取物及8重量百分比之該金盞花萃取物。
- 一種如申請專利範圍第1至6項中任一項的複方組合物用於製備預防、延緩或治療眼部組織病變之藥物之用途,其中該眼部組織病變包括眼球前後房擴張、玻璃體液擴張及視網膜脫離。
- 如申請專利範圍第7項所述之用途,其中該用於製備預防、延緩或治療眼部組織病變之藥物作用在哺乳動物。
- 如申請專利範圍第8項所述之用途,其中該哺乳動物為人類。
- 如申請專利範圍第9項所述之用途,其中該複方組合物對人類的有效劑量範圍為1.7-32.8 毫克/公斤體重/天。
- 如申請專利範圍第7項所述之用途,其中該用於製備預防、延緩或治療眼部組織病變之藥物的施用方式為口服、滴劑或栓劑。
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