TWI725326B - 苦瓜胜肽組合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本發明係揭露一種苦瓜胜肽組合物及其用途，其中，該苦瓜胜肽組合物係能有效地抑制脂肪被個體吸收，使個體於攝取高脂食物時，能夠避免脂肪進入體內或是累積於內臟，進而降低內臟脂肪之增加率及體脂肪之形成率。

Description

苦瓜胜肽組合物及其用途

本發明係有關於一種組合物及其用途，特別係指一種苦瓜胜肽組合物及其用途。

按，由於現代人飲食習慣逐漸西化，多以外食為主，並且，工作壓力繁重，以致於無法定期運動，故使體重逐漸上升而形成肥胖之體型，或是使脂肪大量累積於體內，造成身體機能逐漸下降，進而引發許多疾病，例如心血管疾病、中風、糖尿病、膽囊疾病、睡眠呼吸暫緩症等。

由台灣衛福部每年統計之十大死因中可知，超過半數係與肥胖有關係，由此可知，肥胖或是脂肪堆積乃為身體健康之元兇。目前市面上係推出許多營養補充品，主要係訴求能夠達成減重之功效，例如甲殼素能夠吸附脂肪、辣椒萃取物能夠促進糖及脂肪轉化分解等，惟，絕大多數營養補充品係為協助身體排除水分，雖然能夠使體重下降，但是實際上卻未消除體內脂肪，亦即無法達到減肥之功效。

本發明之主要目的係在於提供一種苦瓜胜肽組合物及其用途，其中，該苦瓜胜肽組合物係能有效地抑制脂肪被個體吸收，使個體於攝取高脂食物時，能夠避免脂肪進入體內或是累積於內臟，進而降低內臟脂肪之增加率及體脂肪之形成率。

更進一步來說，本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能夠改變身體組成之變化，意即該苦瓜胜肽組合物除能調控脂肪之合成外，並且能夠促進肌肉之增加，換言之，本發明所揭苦瓜胜肽組合物不僅能夠抑制個體吸收脂肪，並且高脂飲食下，仍能促使個體增加肌肉量。

是以，於本發明之一實施例中所揭苦瓜胜肽組合物係包含有一苦瓜萃取粉及一綠咖啡豆萃取粉，其中，該苦瓜萃取粉與該綠咖啡豆萃取粉之重量比係約為3：1.9，並且，該綠咖啡豆萃取物中含有至少40%以上之綠原酸，該苦瓜萃取粉係包含有胺基酸序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2之胜肽。

其中，該苦瓜胜肽組合物係更包含有一食品上可接受之載體，而該食品上可接受之載體係如複形劑、增味劑、調色劑等，如微結晶狀α-纖維素、磷酸鈣。

更進一步來說，該苦瓜萃取粉之重量百分比係為53.57%，該綠咖啡豆萃取粉之重量百分比係為33.93%，該食品上可接受之載體之重量百分比係為12.5%。

而由於本發明所揭苦瓜胜肽組合物係具有抑制脂肪吸收、增加肌肉量及調控脂肪累積之功效，故該苦瓜胜肽組合物係能作為一醫藥組合物之有效成份，而當投予一有效量之該醫藥組合物至一個體時，能夠達到抑制個體體重增加、阻止脂肪吸收、增加個體肌肉含量、預防或治療脂肪肝之功效。

本發明所揭苦瓜胜肽組合物係主要包含有一苦瓜萃取粉及一綠咖啡豆萃取粉，而該苦瓜萃取粉及該綠咖啡豆萃取粉係以本發明所屬技術領域且具通常知識者所周知之萃取技術自苦瓜及綠咖啡豆中萃取而得者，並且，為能達成本發明所揭功效，該苦瓜萃取粉中係具有胺基酸序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2之胜肽，並且，該綠咖啡豆萃取粉中具有40％以上之綠原酸。

更進一步來說，本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能搭配一食品上可接受之載體而被製備為一組合物，並且，該組合物投予至人體之劑量係為每日至少1120mg。

舉例來說，該組合物之組成係為：該苦瓜萃取粉之重量百分比係為53.57％，該綠咖啡豆萃取粉之重量百分比係為33.93％，該食品上可接受之載體之重量百分比係為12.5％。

以下，為能說明本發明之功效，將茲舉若干實例並搭配圖表做更進一步說明如后。

以下實例中結果皆以SPSS 18.0 進行統計分析並使用單因子變異數分析法（one-way ANOVA），再以鄧肯氏新多變域法（Duncan's new multiple range test；DMRT）進行各組間檢定分析，其數值皆以mean ± SD表示，並以abcde不同字母表示各組別同時間點相比具有顯著差異，p＜ 0.05。

實例一：製備苦瓜胜肽組合物

將苦瓜乾燥後，研磨成粉，進行低溫水萃取程序，去除殘渣後，冷凍乾燥，得到苦瓜萃取粉。以本發明所屬技術領域之通常分析技術分析苦瓜萃取粉之組成，例如HPLC，得知苦瓜萃取粉包含有26.9％蛋白質、17.7％脂肪、49.2％碳水化合物，其他成份係為金屬離子，並且，苦瓜萃取粉中包含有胺基酸序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2所示之胜肽。

將綠咖啡磨粉後，以30％酒精及70％水組成之萃取溶劑進行萃取，除去殘渣，將分離後之液體進行濃縮，而後進行乾燥程序，得到一綠咖啡萃取粉。以本發明所屬技術領域之通常分析技術分析綠咖啡萃取粉之組成，例如HPLC，得知綠咖啡萃取粉包含有50～55％之多酚、45～50％綠原酸。

取苦瓜萃取粉及綠咖啡豆萃取粉以約3：1.9之重量比予以混合，例如苦瓜萃取粉為150mg，綠咖啡豆萃取粉為95mg，並且，綠原酸約為40mg。

實例二：動物實驗

將60隻五週齡雄性 SD 大鼠飼養於下列條件：環境溫度控制於22±2℃、濕度控制於55±5 %，及予以12小時日夜生活週期，無限制供應飲水與一般固形飼料，並且給予一週適應期（W0）。

隨機將該些大鼠分為五組，分別依據下列條件飼養連續8週（W1~W8）：第一組係為正常控制組，以固形飼料MFG餵食；第二組係為高脂飼料組，以高脂飼料餵食；第三組係為低劑量實驗組，餵食本發明所揭苦瓜胜肽組合物及高脂飼料餵食；第四組係為中劑量實驗組，餵食本發明所揭苦瓜胜肽組合物及高脂飼料餵食；第五組係為高劑量實驗組，餵食本發明所揭苦瓜胜肽組合物及高脂飼料餵食，其中，固形飼料MFG係購於樂斯科生物科技股份有限公司，熱量為3.57kcal/g；高脂飼料係購於鴻洺科技有限公司，熱量為5.24kcal/g；高劑量組中所投予之本發明所揭苦瓜胜肽組合物的劑量係為低劑量組之5倍，中劑量組中所投予之本發明所揭苦瓜胜肽組合物的劑量係為中劑量組之2倍，具體來說，第五組投予本發明所揭苦瓜胜肽組合物之劑量為578.7mg / kg per rat / day，第四組投予本發明所揭苦瓜胜肽組合物之之劑量為231.4mg / kg per rat / day，第三組投予本發明所揭苦瓜胜肽組合物之劑量為115.7mg / kg per rat / day。

實例三：體重及攝食量變化

於試驗期間，每週定期測量各組大鼠之體重，並且，紀錄每日之飼料攝取量，以下列算式計算出食物利用率。

食物利用率（%）＝（結束體重–起始體重）/總攝食量 × 100%

各組大鼠之體重變化係如下表一所示，各組大鼠於試驗期間之攝食量、熱量、食物利用率之測量及計算結果，係如下表二所示。

由表一及表二之結果可知，雖然各組大鼠於試驗期間之攝食量無明顯差異，但是基於第二組大鼠係採取高脂飼料，故第二組大鼠之體重係明顯高於第一組大鼠，顯示高脂飼料係會造成體重快速增加。

再者，第二組至第五組大鼠所攝取之熱量雖無顯著差異，但是透過投予本發明所揭苦瓜胜肽組合物至少3週後，係能有效地降低第三組至第五組大鼠體重上升之速度，並且，當投予劑量越高係越能抑制體重增加之速度。而隨著投予予本發明所揭苦瓜胜肽組合物之時間越長，第三組至第五組大鼠之體重與第二組大鼠之體重差距越大。由此可知，本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能有效減緩體重增加之速度，控制個體體重上升。

更進一步來說，由各組之食物利用率的數據顯示各組大鼠之食物利用率係無顯著差異存在，合併上述體重變化及攝食量之結果，可知本發明所揭苦瓜胜肽組合物控制個體體重上升係非抑制個體食慾，而是抑制脂肪被個體所吸收，降低高脂食物之利用率。換言之，本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能有效地抑制脂肪被吸收。

表一：各組大鼠之體重變化

表二：各組大鼠之攝食量、熱量及食物利用率

實例四：測量體脂肪

於8週試驗結束後，於犧牲前，分別以雙能 X 光吸收法（Dual-Energy X-ray Absorptiometery, DEXA）得知各組大鼠之體組成，結果如第一圖所示。

更進一步地，檢測各組大鼠體內組織之脂肪組織，以獲得脂肪組織之量，並且以下列公式計算出體脂率，結果如下表三所示。

體脂率=（附睪附近白色脂肪重+腎臟周圍白色脂肪重+腸繫膜白色脂肪重）/ 體重 × 100%

由表三之結果可知，單純餵食高脂飼料之第二組大鼠，會造成脂肪大量堆積於內臟，而藉由投予本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能夠抑制脂肪於內臟中堆積，進而降低體脂肪。而更進一步地由第一圖之結果可知，本發明所揭苦瓜胜肽組合物不僅單純降低脂肪堆積，更能夠改變個體組成，意即能夠增加個體肌肉之組成量。

由此可知，本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能有效地抑制脂肪被吸收，避免脂肪堆積於內臟，並且能夠提昇個體肌肉含量，以達到個體體重快速上升及降低體脂肪形成率之功效。

表三：各組大鼠之體脂肪率

實例五：生化值檢測

於8週試驗結束後，於犧牲前，分別採集各組大鼠之血液，並於4000rpm下離心後，收集上清液，作為待測樣品，檢測其血液生化值，包含以SYNCHRON系統生化儀器檢測低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、丙胺酸轉胺酶（ALT）、肌酸酐之含量或濃度。

再者，將各待測樣品與標準品分別加入2 μl ACS試劑，於37℃下反應30分鐘後，再加入50μl 反應混合物，於37℃下反應30分鐘，最後以ELISA 讀取儀以570 nm讀值檢測各待側樣品中非酯化游離脂肪酸（free fatty acid, FFA）。

另分別使用膽固醇試劑（Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA, USA）測量各待測樣品中膽固醇濃度，以三酸甘油酯GPO試劑（Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA, USA）測量各待測樣品中三酸甘油酯的濃度，以葡萄糖試劑（Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA, USA）測量空腹葡萄糖濃度。

上述血液生化值之檢測結果係如下表四所示。而由表四之結果可知，相較於第二組大鼠，藉由投予本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能夠降低第三組至第五組大鼠血液中三酸甘油酯及總膽固醇濃度，使之恢復至於第一組大鼠之狀態，並且能夠改善第三組至第五組大鼠血液中低密度脂蛋白膽固醇、非酯化游離脂肪酸、丙胺酸轉胺酶及血糖之含量。

由此可知本發明所揭苦瓜胜肽組合物係能夠有效地抑制脂肪被吸收，並且調節個體脂肪之利用率，而能改善脂肪於體內累積之情形。

表四：各組大鼠之血液生化值

實例六：肝臟生化值之檢測

取各組大鼠之肝臟組織20 mg，加入200 uL磷酸鹽緩衝液，以均質機磨碎，磨碎後以低溫離心機離心（10,000xg，10分鐘），並以磷酸鹽緩衝液回溶後，以超音波震盪將沉澱物震碎，最後以市售套組（Triglyceride Colorimetric Assay Kit, Item Number 10010303）進行分析總三酸甘油酯濃度。

再者，取各組大鼠之肝臟組織20 mg，加入200 uL有機溶劑 （chloroform：isopropanol：NP40= 7:11:0.1），進行離心，而後取100 uL至真空機中抽乾。抽乾後以磷酸鹽緩衝液回溶，再以超音波震盪將沉澱物震碎，再以市售套組（Cayman Cholesterol Fluorometric Assay Kit, Item Number 10007640）進行分析肝臟總膽固醇之含量。

各組大鼠肝臟生化值之檢測結果係如表五所示。由表五之結果可知，相較於第二組大鼠之肝臟係大量累積脂肪，第三組至第五組大鼠之肝臟內脂肪量係明顯下降，顯示藉由投予本發明所揭苦瓜胜肽組合物確實能夠降低肝臟中脂肪之累積。

表五：各組大鼠之肝臟生化值

無

第一圖係為各組大鼠經不同處理後，其身體組成之比例。

Claims (6)

1. 一種苦瓜胜肽組合物，其係由一苦瓜萃取粉及一綠咖啡豆萃取粉所組成，其中，該苦瓜萃取粉與該綠咖啡豆萃取粉之重量比係約為3：1.9，並且，該綠咖啡豆萃取粉中含有至少40%以上之綠原酸，該苦瓜萃取粉包含有胺基酸序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2之胜肽。
2. 一種將如申請專利範圍第1項所述苦瓜胜肽組合物用於製備抑制脂肪吸收之食品之用途。
3. 一種將如申請專利範圍第1項所述苦瓜胜肽組合物用於製備增加肌肉之食品之用途。
4. 一種將如申請專利範圍第1項所述苦瓜胜肽組合物用於製備治療脂肪肝之食品之用途。
5. 依據申請專利範圍第2、3或4項所述用途，其中，該食品係為營養補充品。
6. 依據申請專利範圍第2、3或4項所述用途，其中，該食品係包含該苦瓜萃取粉、該綠咖啡豆萃取粉及一食品上可接受之載體，而該苦瓜萃取粉之重量百分比係為53.57%，該綠咖啡豆萃取粉之重量百分比係為33.93%，該食品上可接受之載體之重量百分比係為12.5%。

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