TWI646974B

TWI646974B - 組合療法

Info

Publication number: TWI646974B
Application number: TW104120842A
Authority: TW
Inventors: 尼克洛茲歐斯; 葛雷維Ｄ夏恩
Original assignee: 應克隆公司
Priority date: 2014-07-03
Filing date: 2015-06-26
Publication date: 2019-01-11
Also published as: IL249240A0; EP3164154A1; JP2019014724A; AU2015284526B2; CN106470698A; NZ727147A; WO2016003789A1; AP2016009649A0; JP2017520576A; CA2950936A1; MA40367A; AU2015284526A1; EA201692564A1; SG11201610931YA; JP6446478B2; US20170129958A1; KR20170012481A; MX2016017396A; TW201611844A; BR112016030291A2

Abstract

本發明提供結合至人類血小板來源生長因子受體α(PDGFRα)之組合人類抗體，較佳係奧拉木單抗(olaratumab)及多柔比星(doxorubicin)，其作為用於治療軟組織肉瘤之藥物。

Description

組合療法

本申請案主張2014年7月3日申請之美國臨時專利申請案第62/020427號之權益。

本發明係關於免疫學及癌症治療領域。更具體言之，本發明係關於奧拉木單抗(olaratumab)及多柔比星(doxorubicin)之組合，及關於使用該組合以治療軟組織肉瘤或作為用於治療軟組織肉瘤之藥物之方法。

軟組織肉瘤(STS)起源於軟或結締組織，例如脂肪、肌肉、神經、纖維組織、血管或深層皮膚組織；所有間質源。STS為存在相對少的有效方案之異質性疾病，在美國每年有約11,400例新病例及約4400例死亡。肉瘤快照(美國國家癌症研究所(National Cancer Institute)、美國衛生及公共服務部(US Dept.of Health and Human Services)、美國國家健康研究院(National Institutes of Health))於12/02/13在http：//www.cancer.gov/researchandfunding/snapshots/sarcoma線上公佈。STS包括多種亞型；各種亞型中之一些亞型之流行率相當小。不管肉瘤之組織衍化之差異性，此等腫瘤傾向於共享諸多相似性：其等出於識別及處方治療之目的而通常一般被歸類為STS。因此，就本文之目的而言，該等亞型統稱為STS。

本發明尋求提供一種對用於治療STS之臨床上未滿足需求的回應。在此點上，用於治療STS之奧拉木單抗加上多柔比星提供出乎意料的統計學顯著的存活效益。目前很少治療方法可用於罹患晚期STS的患者。此設定中之化學療法基本上為意圖減輕；多柔比星為大多數此等患者之標準照護，相關聯的回應率為10%至30%。

多柔比星為蒽環黴素家族化合物之細胞毒性抗生素。其細胞毒性效應被認為係由插入DNA核苷酸而致拓撲異構酶II DNA修復失活，及產生自由基而致脂質過氧化及細胞膜損傷所產生。細胞暴露至多柔比星之研究已顯示與細胞凋亡相關聯之形態學變化。

最新且正在進行的STS試驗已對多種療法(包括使用及不使用多柔比星之組合化學治療方案進行研究)；然而，雖然所選定試驗已證實回應率的改善，但在存活率上的改善很小。參見Benjamin RS等人，Med Pediatr Oncol.1975；1(1)：63-76(論述多柔比星單藥療法)；Bramwell V等人，Cochrane Database of Systematic Reviews 2001，第4期，文件號：CD003293.DOI：10.1002/14651858.CD003293.Cochrane Database of Systematic & Reviews，第4期，2009(在這一期中的狀態：不變)(論述單藥療法相對組合多柔比星)；Mouridsen HT等人，Eur.J.Cancer and Clin.Onc.23(10)：1477-1483(1987)(論述多柔比星單藥療法相對表柔比星(epirubicin)單藥療法)；Lorigan P等人，J Clin Oncol.2007；25(21)：3144-3150(論述多柔比星相對異環磷醯胺(ifosfamide))；Leyvraz S等人，Br J Cancer.2006；95(10)：1342-1347(論述多柔比星相對異環磷醯胺)；Judson I等人，Lancet Online.2014年3月5日；http：//dx.doi.org/10.1016/S1470-2045(14)70063-4(論述多柔比星相對異環磷醯胺)；Edmonson JH等人，J Clin Oncol.1993；11：1269-1275(論述多柔比星相對多柔比星/異環磷醯胺及多柔比星/絲裂黴素/順鉑)；Schoenfeld DA等人，Cancer.1982；50：2757-2762(論述多柔比星相對長春新鹼(vincristine)加上放線菌素-D(actinomycin-D)加上環磷醯胺之組合)。最近的涉及酪胺酸激酶抑制劑(TKI)之第2期研究亦已顯示有限的成功。參見Kasper B等人，Ann Oncol 2014.線上公開：2014年2月6日，在http：//annonc.oxfordjournals.org/content/early/2014/02/05/annonc.mdt586.abstract(論述帕唑帕尼(pazopanib))；Maki RG等人，J Clin Oncol.2009；27(19)：3133-3140(論述索拉非尼(sorafenib))；(Chugh R等人，J Clin Oncol.2009；27(19)：3148-3153(論述伊馬替尼(imatinib))；George S等人，J Clin Oncol.2009；27(19)：3154-3160(論述蘇尼替尼(sunitinib))。簡言之，對提供存活效益之新穎晚期STS治療法存在高的未滿足的臨床需求。本發明尋求提供滿足此需求之新穎治療法。

本文中提出一種新穎的用於治療STS之奧拉木單抗及多柔比星之組合。奧拉木單抗IMC-3G3(美國專利案第8,128,929號及第8,574,578號)為特異性靶向人類血小板來源生長因子受體α(PDGFRα或PDGFR alpha)之重組人類單株抗體。該等專利案揭示用PDGFRα抗體(包括IMC-3G3)治療多種瘤性病(包括軟組織肉瘤)。該文中提及組合療法。

藥物開發係無法預期的。在各種疾病狀態中，並非全部藥物具同等活性。通常是新穎分子經常因為很少瞭解的原因而在臨床前及/或臨床階段失敗。迄今，奧拉木單抗尚未顯示在其一些臨床試驗，包括晚期非小細胞肺癌中取得成就。Gerber D.等人，J Clin Oncol 32：5s,2014(增刊；摘要8050)(論述「人類抗血小板來源生長因子α(PDGFRα)單株抗體(奧拉木單抗，IMC-3G3)與太平洋紫衫醇(paclitaxel)/卡鉑或僅太平洋紫衫醇/卡鉑在先前未接受過治療的罹患晚期非小細胞肺癌(NSCLC)之患者中之隨機化2期研究」http：//meetinglibrary.asco.org/content/134011-144)。

本發明係在組合1b期及隨機化2期試驗(http：//www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01185964？term=IMC-3G3&rank=3)(後文稱為「研究」)中進行研究。如本文所述，研究入選罹患許多在進入研究時分級的STS亞型之患者；就該研究中所代表的亞型而言，確定患者群體係代表一般STS患者群體。

該研究之期中結果說明出乎意料的效益。出乎意料且驚人的是，奧拉木單抗及多柔比星之組合提供患者此種顯著效益，尤其如藉由患者之無疾病惡化存活期(PFS)及總存活期(OS)所測得。

首要的是，來自該研究期中分析之臨床資料之所以驚人係因數據說明PFS 12週改善及或許甚至更重要地，OS 40週改善，PFS之風險比(HR)為0.597(90%置信區間=0.415，0.858)及當奧拉木單抗與多柔比星之組合與僅多柔比星(照護標準)相比時HR為0.46(90%置信區間=0.288，0.735)。雖然該研究之OS在統計學上不強大，但在存活時間中值之較低HR及較大改善方面優於當前照護標準之顯著改善極出乎意料。

其次，僅基於該研究之設計基礎上，此等改善之所以出乎意料係因該研究經設計以允許偵測PFS之改善從2個月(從先前經過一種活性劑治療之罹患STS的患者之各種類型中之公開臨床數據且基於臨床評估而估算得)變成3個月；換言之，根據該研究設計，4週改善視為成功。奧拉木單抗加上多柔比星之組合顯示PFS 12週改善；該組合三倍於研究視為成功之研究要求。此說明出乎意料的優於基於照護標準的所預期研究結果及優於在設計及開始該研究時之先前技術之效益。當PFS及OS與上述提及之目前可採行且為近期研究的治療進行比較時，該等結果係顯著且說明明顯出乎意料的效益。

根據本發明之第一態樣，提供一種治療罹患軟組織肉瘤之患者的方法，該方法包括對有此需要的患者投與奧拉木單抗及多柔比星。在本發明之一較佳態樣中，奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與。在本發明之另一態樣中，多柔比星係以約60mg/m²或約75mg/m²之劑量投與。在本發明之一較佳態樣中，多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與。在本發明之又另一較佳態樣中，奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與。在本發明之一較佳態樣中，該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

在本發明之另一態樣中，一種套組包括奧拉木單抗及多柔比星，其中該奧拉木單抗及多柔比星意欲同時、分開或依序投與。

本發明之又另一態樣為一種套組，其包括併與一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑包含奧拉木單抗之醫藥組合物及併與一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑包含多柔比星之醫藥組合物，其中該奧拉木單抗及多柔比星意欲同時、分開或依序投與。

本發明之另一態樣為併與一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑包含奧拉木單抗之醫藥組合物與多柔比星與一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物之組合，其中該奧拉木單抗及多柔比星意欲同時、分開或依序投與以用於治療軟組織肉瘤。

本發明之又另一態樣係一種奧拉木單抗於製造用於治療軟組織肉瘤之藥物之用途，其中該藥物意欲與多柔比星同時、分開或依序投與。

本發明亦關於一種同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤之奧拉木單抗及多柔比星之組合。

與多柔比星組合以同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤之奧拉木單抗為本發明之另一態樣。

在本發明之關於以上揭示之醫藥組合物、以上揭示之用途、以上揭示之組合及/或用於以上揭示之用途之奧拉木單抗之一較佳態樣中，奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與。

在本發明之關於以上揭示之醫藥組合物、以上揭示之用途、以上揭示之組合及/或用於以上揭示之用途之奧拉木單抗之另一態樣中，多柔比星係以約60mg/m²或約75mg/m²之劑量投與。

在本發明之關於以上揭示之醫藥組合物、以上揭示之用途、以上揭示之組合及/或用於以上揭示之用途之奧拉木單抗之一較佳態樣中，多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與。

在本發明之關於以上揭示之醫藥組合物、以上揭示之用途、以上揭示之組合及/或用於以上揭示之用途之奧拉木單抗之又另一較佳態樣中，奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與。

在本發明之關於以上揭示之醫藥組合物、以上揭示之用途、以上揭示之組合及/或用於以上揭示之用途之奧拉木單抗之又另一較佳態樣中，軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

本發明亦涵蓋以下非限制性實施例清單，其進一步述於本文別處：提及以上揭示之各種態樣，軟組織肉瘤為由以下組成但不限於其之疾病：平滑肌肉瘤、肺泡樣軟組織肉瘤、軟骨母細胞型骨肉瘤、軟骨肉瘤、透明細胞肉瘤、子宮內膜基質瘤、上皮樣肉瘤、上皮樣骨外黏液樣軟骨肉瘤、纖維黏液樣肉瘤、纖維肉瘤、復發性皮膚纖維肉瘤中之纖維肉瘤轉化、血管外皮細胞瘤、高惡性度未分化肉瘤、脂肪肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、惡性血管球瘤、惡性周邊神經鞘瘤、惡性單發性纖維瘤、惡性梭形細胞肉瘤、具有橫紋樣特徵之惡性梭形細胞瘤、黏液纖維肉瘤、黏液樣軟骨肉瘤、黏液樣脂肪肉瘤、黏液樣肉瘤、神經纖維肉瘤、骨肉瘤、多形性肉瘤(包括：左大腿高惡性度梭形及多形性肉瘤、低分化圓細胞肉瘤、肉瘤、平滑肌瘤、單發性纖維瘤、梭形細胞肉瘤(未分化))、橫紋肌肉瘤、滑膜肉瘤、未分化肉瘤及未分化子宮肉瘤。軟組織肉瘤亦可選自由平滑肌肉瘤及其他軟組織肉瘤組成之群。軟組織肉瘤可處在晚期階段。

根據本發明之一較佳實施例，提供一種包含分開、同時或依序用於療法中之奧拉木單抗及多柔比星之組合或醫藥組合物，其中該組合或醫藥組合物係非經腸投與。

根據本發明之一較佳實施例，提供一種分開、同時或依序用於療法中之奧拉木單抗及多柔比星之組合，其中該奧拉木單抗係在21天週期之第1天及第8天投與，其中奧拉木單抗之每次劑量落在約10mg/kg至約18mg/kg範圍內。較佳地，該劑量係在約13.5mg/kg至約16.5mg/kg範圍內且最佳為約15mg/kg。較佳地，患者應以21天週期治療直到出現證實疾病惡化之證據。

根據本發明之另一較佳實施例，提供一種分開、同時或依序用於療法中之奧拉木單抗及多柔比星之組合，其中該多柔比星係在21天週期第1天及第8天投與，其中多柔比星之每次劑量落在約60mg/m²至約75mg/m²範圍內。較佳地，該劑量為約60mg/m²且最佳為約75mg/m²。

根據本發明之另一較佳實施例，提供一種包含依序用於療法中之奧拉木單抗及多柔比星之組合，其中該多柔比星係在投與奧拉木單抗後投與。

根據本發明之另一實施例，提供一種包含依序用於療法中之奧拉木單抗及多柔比星之組合，其中該多柔比星係在投與奧拉木單抗一小時後投與。

本發明亦提供以重複間隔時間投與奧拉木單抗。較佳地，在奧拉木單抗以重複時間間隔投與之情況下，多柔比星將在投與奧拉木單抗後投與。在另一實施例中，當奧拉木單抗以重複時間間隔投與時，多柔比星將在投與奧拉木單抗一小時後投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與及該多柔比星係以約60mg/m²或約75mg/m²之劑量投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與，該多柔比星係以約60mg/m²或約75mg/m²之劑量投與，且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與及該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與。

較佳地，本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與及該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與，該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與，且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗及多柔比星係以21天週期給藥，該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與，該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與，且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與及其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與及其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與及該多柔比星係以約60mg/m²或約75mg/m²之劑量投與且其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與，該多柔比星係以約60mg/m²或約75mg/m²之劑量投與，且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與且其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與及該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與，且其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

較佳地，本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與及該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與，且其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與，該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與，且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與，且其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

本發明亦提供與多柔比星組合用於同時、分開或依序使用以治療軟組織肉瘤的奧拉木單抗，其中該奧拉木單抗及多柔比星係以21天週期給藥，該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與，該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與，且該奧拉木單抗係在投與多柔比星前投與且其中該軟組織肉瘤為平滑肌肉瘤。

上述本發明亦提供奧拉木單抗及多柔比星之組合，其提供約98.9週(90%置信區間[CI]：89.6，NE[其中NE表示未達到限值])(95%CI：70.9，NE)或至少70.9週之中值OS。本發明亦提供奧拉木單抗及多柔比星之組合，其提供約29.9週(90%CI：23.7，36.0)(95%CI：22.3，36.7)或至少22.3週之中值PFS。本發明亦提供奧拉木單抗及多柔比星之組合，其與僅多柔比星(照護標準)相比，提供OS之約40週改善。本發明亦提供奧拉木單抗及多柔比星之組合，其與僅多柔比星(照護標準)相比，提供PFS約12-週改善。本發明亦提供前述出乎意料的效益之組合。

本發明在本文所揭示各種態樣中提供奧拉木單抗。奧拉木單抗為特異性針對人類PDGFRα且包含揭示於表1中之以下序列之抗體：(1)6個CDR胺基酸序列(CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2、CDRL3)；(2)重鏈可變區(VH)及輕鏈可變區(VL)；(3)重鏈及輕鏈；或(4)兩條重鏈及兩條輕鏈。

如本文所用術語「軟組織肉瘤」或「STS」為起源於軟組織或結締組織例如脂肪、肌肉、神經、纖維組織、血管或深層皮膚組織；所有間質源之惡性瘤。已識別出多於50種STS組織學亞型。包含於本研究中之亞型包括：平滑肌肉瘤及「其他肉瘤」。由於低群體流行率，所以本研究中提出的非平滑肌肉瘤之軟組織肉瘤亞型出於如下文所述之統計目的而統稱為「其他肉瘤」。如本文中提及，「軟組織肉瘤」或「STS」定義為：肺泡樣軟組織肉瘤、軟骨母細胞型骨肉瘤、軟骨肉瘤、透明細胞肉瘤、子宮內膜基質瘤、上皮樣肉瘤、上皮樣骨外黏液樣軟骨肉瘤、纖維黏液樣肉瘤、纖維肉瘤、復發性皮膚纖維肉瘤中之纖維肉瘤轉化、血管外皮細胞瘤、高惡性度未分化肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、惡性血管球瘤、惡性周邊神經鞘瘤、惡性單發性纖維瘤、惡性梭形細胞肉瘤、具有橫紋樣特徵之惡性梭形細胞瘤、黏液纖維肉瘤、黏液樣軟骨肉瘤、黏液樣脂肪肉瘤、黏液樣肉瘤、神經纖維肉瘤、骨肉瘤、多形性肉瘤(包括：左大腿高惡性度梭形及多形性肉瘤、低分化圓細胞肉瘤、肉瘤、平滑肌瘤、單發性纖維瘤、梭形細胞肉瘤(未分化))、橫紋肌肉瘤、滑膜肉瘤、未分化肉瘤及未分化子宮肉瘤。由於疾病狀態性質及腫瘤來源，患者可診斷為上述例示性亞型中之一或多者；然而，診斷可不受限於上述亞型。

STS(包括本研究中所例舉亞型)之治療選項繼續受到限制。不管繼續做出的努力，增加之存活期效益為適中。甚至與多柔比星之組合顯示小的臨床效益或沒有。對於提供存活期效益之針對罹患STS之患者之新穎治療選項存在高的臨床上未滿足的需求；本發明提供此需求。

如本文所用，術語「晚期」STS係指任何下述標準，包括(但不限於)：(1)無法手術切除，(2)轉移性，(3)組織學上或細胞學上獲得證實之有記錄的疾病惡化，或(4)不適合用手術或放射療法治療。

除非另有指示，否則術語「血小板來源生長因子受體alpha」、「血小板來源生長因子受體α」、「PDGFR alpha」、「PDGFRα」、「PDGF alpha受體」及「PDGFα受體」在本文中可互換使用，及意欲指結合人類血小板來源生長因子之人類III型受體酪胺酸激酶及其功能上活性突變形式。PDGFRα之特定實例包括(例如)由以GenBank®寄存編號NM_006206.4提供之核苷酸序列編碼的人類多肽或由以GenBank®寄存編號NP_006197.1提供之多肽序列編碼的人類蛋白質。

PDGFRα為可藉由血小板來源生長因子(PDGF)-AA、-AB、-BB及-CC活化之受體酪胺酸激酶。此等生長因子為由同時與兩種受體結合且誘導受體二聚化、自體磷酸化及下游細胞內信號傳導之雙硫鍵鍵聯的多肽鏈組成之二聚分子。PDGFRα係在許多間質結構中表現；因此，PDGFRα在發育的早期及晚期階段中發揮關鍵的作用。

如本文所用，術語「奧拉木單抗」(亦稱作IMC-3G3，CAS登錄號1024603-93-7)係指抗-PDGFRα抗體，其包含：兩條重鏈，其各胺基酸序列提供於SEQ ID NO：9，及兩條輕鏈，其各胺基酸序列提供於SEQ ID NO：10。美國專利第8,128,929號及第8,574,578號。

奧拉木單抗為特異性靶向人類PDGFRα之IgG₁同型之重組人類單株抗體。該抗體具有針對PDGFRα之高親和性結合且阻斷血小板來源生長因子-AA(PDGF-AA)、-BB及-CC配體與該受體結合。結果，奧拉木單抗抑制下游信號傳導分子蛋白質激酶B(Akt)及絲裂原活化蛋白質激酶(MAPK)之配體誘導的受體自體磷酸化及磷酸化。奧拉木單抗抑制多種人類腫瘤細胞系之增殖及生長。

如本文所用，術語「抗體」包括包含四條多肽鏈(兩條重(H)鏈及兩條輕(L)鏈)由雙硫鍵互連之免疫球蛋白分子。個別鏈可摺疊成具有相似大小(110至125個胺基酸)及結構但不同功能之域。抗體在本文中可簡寫為「Ab」。

輕鏈可包含一個可變域(VL)及/或一個恆定域(本文中簡寫為CL)。人類抗體(免疫球蛋白)之輕鏈為卡帕(κ)輕鏈或蘭姆達(λ)輕鏈。如本文所用，表現VL意欲包含卡帕型輕鏈(Vκ)及蘭姆達型輕鏈(Vλ)之可變區。重鏈亦可包含一個可變域(VH)，及/或根據抗體之類別或同型，包含三個或四個恆定域(CH1、CH2、CH3及CH4)(本文中共同簡寫為CH)。在人類中，同型為IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，其中IgA及IgG進一步細分為亞類或亞型(IgA_1-2及IgG_1-4)。本發明包括任何上述類別或亞類之抗體。人類IgG₁為本發明抗體之較佳同型。

稱作超變或互補決定區(後文稱作「CDR」)之三個區域在VL及VH各者中發現，其係受稱作架構(本文中稱作「FR」)之較不可變區支撐。根據各種規定將胺基酸指派給特定CDR區或域，該規定包括(但不限於)：Kabat(Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，美國衛生及公共服務部(U.S.Department of Health and Human Services),NIH公開案第91-3242號(1991))、Chothia(Chothia等人，J Mol Biol.1987；196：901-917.Chothia等人，Nature.1989；342：877-883)、及/或Oxford Molecular的AbM抗體模型化軟體(http：//www.bioinf.org.uk/abs/)。各VH及VL係由自胺基端至羧基端以下順序排列之三個CDR及四個FR組成：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。抗體之由VL及VH域組成之部分表示為Fv(片段變量)且構成抗原結合位點。

術語「單離」係指不含或實質上不含在細胞環境中發現之其他大分子物質之抗體、蛋白質、肽或核酸。「實質上不含」如本文中使用意指受關注蛋白質、肽或核酸包含大於80%(以莫耳計)之存在的大分子物質，較佳大於90%且更佳大於95%。「單離」抗體之實例包括已經過親和純化之抗體、已由活體外融合瘤或其他細胞系製得之抗體及衍生自轉殖基因小鼠之人類抗體。

術語「單株」如本文中使用係指自實質上同源抗體群體獲得之抗體，例如，構成該群體之個別抗體除了可能的自然產生之突變或可存在之少許轉譯後變化之外實質上相同。單株抗體針對單一抗原位點(亦稱作決定子或抗原決定基)具高度特異性。另外，與通常包含不同的針對不同決定子之抗體之習知(多株)抗體製劑不同，各單株抗體係針對抗原上之單一決定子。修飾詞「單株」指示如自實質上同源抗體群體獲得之抗體之特性，而不應被解釋為需要藉由任何特定方法製備抗體。單株抗體在本文中可簡寫為「mAb」。

術語「人類抗體」如本文中使用包括具有對應於人類生殖免疫球蛋白序列之可變及恆定區之抗體(如Kabat等人所述，同前述)。本發明之人類抗體可包括例如在CDR中非由人類生殖免疫球蛋白序列編碼的胺基酸殘基(例如，藉由活體外隨機或定點突變或活體內體細胞突變引入之突變)。人類抗體可具有至少一個改由胺基酸殘基更換的位置，例如，非由人類生殖免疫球蛋白序列編碼的活性增強型胺基酸殘基。然而，術語「人類抗體」如本文中使用不欲包括其中衍生自另一哺乳動物物種諸如小鼠之生殖系之CDR序列已接枝至人類架構序列上的抗體。製備「人類抗體」之方法如本文中使用不欲包括產生於人類中之抗體。

詞組「重組人類抗體」包括藉由重組方法製造、表現、建立或單離之人類抗體，諸如使用轉染至宿主細胞中之重組表現載體表現之抗體、自重組組合式人類抗體庫單離之抗體、自人類免疫球蛋白基因轉殖基因之動物分離的抗體或藉由任何其他涉及將人類免疫球蛋白基因序列剪接至其他DNA序列的方法製造、表現、建立或單離之抗體。此等重組人類抗體具有衍生自人類生殖免疫球蛋白序列之可變及恆定區。

因此，本發明之抗體包括(但不限於)單離之抗體、人類抗體、人源化抗體、重組人類抗體、單株抗體、消化片段、其特異性部分及變體，包括抗體疑似物或包含抗體之模擬抗體或其特異性片段或部分之結構及/或功能之部分；各者均包含至少一個CDR。

可基於親和性測定抗體或其片段之特異性。由抗體解離抗原之平衡常數(K_D)表示之親和性測量抗原決定子與抗體結合位點間的結合強度。可例如藉由表面電漿共振測定親和性。

本發明之抗體結合至PDGFRα之位於胞外域片段(後文簡單地稱作「域」或「ECD」)上之抗原決定基。術語「抗原決定基」如本文中使用係指由本發明抗體識別之抗原上的離散三維位點。

除了本文中明確所述的抗體外，可利用熟習此項技術者熟知的各種重組DNA技術輕易地設計及製造其他「實質上同源」改質抗體。例如，架構區可藉由若干胺基酸代換、末端及中間新增及缺失及類似在一級結構水平自天然序列改變。除此之外，多種不同人類架構區可單獨地或以組合方式用作用於本發明之人源化免疫球蛋白之基礎。一般而言，基因之修飾可由多種熟知的技術(諸如定點突變)輕易達成。

本發明包括編碼抗-PDGFRα抗體重鏈之核酸序列，其包含如本文揭示之任何一個VH區或其一部分或任何一個VH CDR(包括其任何變體)。本發明亦包括編碼抗-PDGFRα抗體輕鏈之核酸分子，其包含如本文揭示之任何一個VL區或其一部分或任何一個VL CDR(包括其任何變體)。本發明亦包括奧拉木單抗之核酸序列，重鏈及輕鏈分別為SEQ ID NO 11及12。本發明之抗體包括包含奧拉木單抗之相同CDR區及/或奧拉木單抗之相同輕鏈可變區及/或重鏈可變區之抗體。

本發明之抗體可由相關技術中已知的方法製備。此等方法包括使用由如下所述之轉殖基因動物、噬菌體呈現及免疫學方法：Kohler與Milstein,Nature 256：495-497(1975)；在Monoclonal Antibody Technology,The Production and Characterization of Rodent and Human Hybridomas(Campbell編輯，1984)中之Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology，第13卷(Burdon等人編輯，Elsevier Science Publishers,Amsterdam)；以及由Huse等人，Science 246：1275-1281(1989)所述之重組DNA方法。

應了解，為單域抗體之結合一級決定子的胺基酸殘基可於界定CDR之Kabat、Chothia、AbM或其組合中，但亦可包括其他殘基，諸如將以其他方式埋在VH-VL異二聚物之VH-VL介面中之殘基。

用於載體之轉形及本發明抗體之表現的較佳宿主細胞為哺乳動物細胞，例如，NS0細胞、293、SP20、CHO細胞及其他淋巴源細胞系(諸如淋巴瘤、骨髓瘤或融合瘤細胞)。或者可用其他真核宿主，諸如酵母。

本發明之抗體可藉由相關技術中已知的任何方法，包括藉由硫酸銨或硫酸鈉沉澱接著進行抗鹽水透析、離子交換層析、親和或免疫親和層析以及凝膠過濾或區帶電泳而單離或純化。純化本發明抗體之一較佳方法為蛋白質-A親和層析。

如本文所用，「約」意指±5%。

如本文所用，「右雷佐生(dexrazoxane)」或鹽酸右雷佐生為心臟保護劑。其通常用於保護心臟免遭蒽環黴素(諸如柔紅黴素或多柔比星)之心臟毒性副作用。

如本文所用，術語「治療(treating)」、「治療(treat)」或「治療(treatment)」係指抑制、減緩、減少、降低或逆轉現有症狀、病症、病況或疾病之進展或嚴重度或改善病況之臨床症狀。有益或所需的臨床結果包括(但不限於)緩解症狀，消減疾病或病症程度，穩定疾病或病症(亦即，疾病或病症未惡化之情況)，延遲或減緩疾病或病症之進展，改善或減輕疾病或病症，及(部分或全部)緩解可檢測或不可檢測之疾病或病症。「治療」亦可意指相較於若未接受治療之預期存活期，延長存活期。彼等需要治療者包括彼等早已患有疾病者。在一個實施例中，本發明可用作藥物。

如本文所用，術語「癌症」及「癌」係指或描述哺乳動物的通常以不受調節的細胞生長為特徵之生理狀況。此定義包括良性及惡性癌症。

雖然本發明之人類抗體尤其可用於投與給人類，但其亦可投與給其他哺乳動物。因此，如本文所用，術語「患者」係指哺乳動物，較佳係人類。術語哺乳動物如本文中使用意欲包括(但不限於)人類、實驗室動物、家養寵物及農場動物。

治療上有效量亦為抗體或抗體部分之任何毒性或有害效應不及治療有益效應之量。

在本發明之方法中，投與治療上有效量之本發明抗體給有此需要的哺乳動物或患者。另外，本發明之醫藥組合物可包含治療上有效量之本發明抗-PDGFRα抗體或治療上有效量之多柔比星。

「治療上有效量」、「有效量」或「有效劑量」如本文中使用係指在劑量及持續時間段下需要以有效達成所需治療結果之量。有效量可輕易地由主治診斷醫生(如熟習此項技術者)藉由使用已知技術以及藉由觀察在相似環境下得到的結果來確定。在確定針對患者之有效量時，主治診斷醫生考慮多個因素，包括(但不限於)：患者種類；其大小、年齡及健康情況；所涉及之特定疾病或病症；目標位點；疾病或病症程度或涉及或嚴重程度；個體患者之反應；所投與之特定化合物；投與模式；所投與製劑之生物利用率特徵；所選擇之給藥方案；伴隨藥物之使用；所投與之其他藥品；及其他有關環境。治療上有效量亦為抗體或抗體部分之任何毒性或有害效應不及治療有益效應之量。

一般而言，可調整給藥方案以提供最佳所需反應(例如，治療反應)。可利用熟習此項技術者已知的慣常方法來滴定治療劑量以使安全性及藥效最佳化。給藥方案將通常範圍從一次快速注射劑量或連續輸注至每天給藥多次(例如，每隔4至6小時)或如由主治醫生及患者狀況所指示。本發明抗體之治療上有效量之一例示性非限制性範圍為0.1至50mg/kg，更佳3至35mg/kg，且更佳5至20mg/kg。抗體之給藥量及頻率將由治療患者的醫生確定及可包括每天、每週三次、每週、每兩週一次或更不頻繁提供的小於1mg/kg至超過100mg/kg之劑量。然而，應注意，本發明不受限於任何特定劑量。

一般而言，在本發明組合中，奧拉木單抗在寬劑量範圍有效。例如，劑量通常係基於21天週期常在第1天及第8天提供及各劑量落在約10mg/kg至約18mg/kg，較佳約13.5mg/kg至約16.5mg/kg，且最佳約15mg/kg範圍內。較佳地，患者應以21天週期治療直到出現證實疾病進展之證據。

一般而言，在本發明組合中，多柔比星在寬劑量範圍有效；然而，STS中多柔比星之標準劑量為60mg/m²或75mg/m²。因此，例如，每21天週期的劑量通常為約60mg/m²或75mg/m²，較佳約75mg/m²。就多柔比星而言，一般不推薦超過8個21天週期，此乃因高得不可接受的心臟功能不全率在600mg/m²之累積劑量時開始。

在一些情況中，低於上述奧拉木單抗及多柔比星範圍下限之劑量水平可能高於足夠；而在其他情況下，可在可接受之副作用下使用更小或仍更大的劑量，因此，以上劑量範圍無意以任何方式限制本發明範圍。當奧拉木單抗及多柔比星以組合方式提供時，其係在上述相同範圍中進行投與。

如本文所用，術語患者之「有效反應」或患者對藥劑治療之「反應性」或「治療效應」係指投藥後所賦予患者的臨床或治療效益。如本文所用，本發明之治療之「出乎意料的治療效應」為在患者中產生出顯著抗癌效應而不引起顯著毒性或有害效應使得患者總體上從治療獲益之能力。本發明之治療之療效(即，治療效應)可由通常用於評估癌症治療中之各種終點測量，其包括包括(但不限於)以下之任何一者或多者：延長存活期(包括OS及PFS)；引起客觀反應(包括CR或PR)；腫瘤消退、腫瘤重量或大小縮減、疾病進展時間變長、存活持續時間增加、PFS變長、OS率提高、反應持續時間增加及生活品質提高及/或癌症之徵兆及症狀改良等。因為本發明係關於獨特抗腫瘤藥劑之組合之用途，故可視情況使用測定本發明之任何特定組合療法之療效(即，治療效果)之新穎方法，包括(例如)測定血管生成之電漿或尿液標誌物及經由放射成像測定反應。

如本文所用，在本文中可互換使用的術語「疾病進展」或「進行性疾病」(PD)係指目標病灶之直徑總和增加至少20%，將研究時的最小總和(此包括基線總和，假若其為研究時的最小值)作為參考。除了20%之相對增加外，總和亦必須展現至少5mm之絕對增加。一或多個新穎病灶之出現亦視作進展。

如本文所用，術語「部分反應」(PR)係指目標病灶之直徑總和減少至少30%，將基線直徑總和作為參考。

如本文所用，術語「完全反應」(CR)係指所有目標病灶之消失。任何病理淋巴結(無論目標或非目標)必須具有短軸變為<10mm之減小量。

如本文所用，術語「穩定疾病」(SD)係指縮減量不足以量化為PR或增量不足以量化為PD之腫瘤直徑，將研究時的最小直徑總和作為參考。

如本文所用，術語「客觀反應」(OR)係指可檢測之反應，包括CR或PR。

如本文所用，術語「總存活期」(OS)係指患者從診斷或治療的時間保持存活長達一段限定時間期，諸如1年、5年等。在本發明之一較佳態樣中，就本研究而言，總存活期係定義為自研究隨機分組之日至任何原因引起的死亡之日之時間；假若患者在隨訪期結束時存活或未進行隨訪，則OS將設限在已知患者存活的最後日期。

如本文所用，術語「無疾病進展存活期」(PFS)係指患者保持存活而無癌症進展或惡化。在本發明之一較佳態樣中，PFS係定義為自研究中隨機分組直至對如由RECIST(第1.1版)定義之客觀進展首次放射影像記載或任何原因引起的死亡之時間。死亡而未報告先前進展的患者將視為在其死亡日時已經進展。未進展或未進行隨訪之患者將設限在其最後放射影像腫瘤評估之日。

如本文所用，在本文中可互換使用的術語「延長存活期」或「經延長的存活期」係指相對於i)未經治療的患者，ii)經少於特定組合療法中所有抗腫瘤藥劑治療之患者，或iii)對照治療方案，增加經治療患者之OS或PFS。在開始治療後或在開始診斷得癌症後監測存活期至少約一個月、至少約兩個月、至少約四個月、至少約六個月、至少約九個月或至少約1年或至少約2年或至少約3年或至少約4年或至少約5年或至少約10年等。

抗-PDGFRα抗體可組合一或多種其他抗癌治療包括(但不限於)抗血管生成劑、化療劑及抗瘤藥物投與。可使用任何適宜抗癌劑，諸如化療劑、輻射、抗體或其組合。抗癌劑包括(但不限於)抗瘤藥物、抗體、佐劑及前藥。本發明之抗-PDGFRα抗體可併與會抑制及/或調節參與腫瘤生長或血管生成或胞外基質蛋白質/因子或上皮/間質轉化之其他細胞表面受體的抗體及/或小分子投與。其亦可組合一或多種適宜佐劑，諸如(例如)細胞激素或其他免疫刺激因子(諸如(但不限於)趨化細胞素、腫瘤相關聯抗原及肽)投與。

本發明中，任何適宜方法或途徑可用於投與本發明之抗-PDGFRα抗體，及視情況用於共同投與抗瘤藥物及/或其他受體之拮抗劑。在本發明之一組合療法中，抗-PDGFRα抗體可在開始用另一藥劑治療之前、期間、實質上同時或之後投與。投藥途徑包括(例如)口服、靜脈內、腹膜內、皮下或肌肉內投與；靜脈內投與為較佳途徑。然而，應強調的是，本發明不受限於任何特定投藥方法或途徑。

本發明之抗-PDGFRα抗體在出於治療目的用於哺乳動物中之情況下較佳調配為醫藥組合物。該等醫藥組合物及製備其之方法在相關技術中係熟知的。參見，例如，Remington：The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro A.等人編輯，第19版，Mack Publishing Co.,1995)。

奧拉木單抗及多柔比星較佳調配成以使化合物具有生物可利用性之任何途徑投與之醫藥組合物。投藥途徑可以任何方式改變，但受藥物之物理性質及患者及照護者之方便性限制。較佳地，奧拉木單抗及多柔比星組合物適合非經腸投與，諸如靜脈內(i.v.)投與。此等醫藥組合物及製備其之方法在相關技術中係熟知的。(參見例如同上)。投藥途徑可以任何方式改變，但受藥物之物理性質及患者及照護者之方便性限制。

奧拉木單抗及多柔比星可同時、分開或依序地投與。如本文所用，詞語「與...組合」係指同時、以任何順序依序或其任何組合投與奧拉木單抗及多柔比星。此兩種化合物可以各別醫藥組合物投與。奧拉木單抗可在投與多柔比星或其一些組合之前、相同時間或之後投與。在一較佳態樣中，多柔比星將在投與奧拉木單抗後投與。在另一態樣中，多柔比星將在投與奧拉木單抗一小時後投與。在奧拉木單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準治療過程中)，多柔比星可在每次投與奧拉木單抗或其一些組合之前、相同時間或之後或以與奧拉木單抗療法相比不同的時間間隔或在奧拉木單抗治療過程之前、期間的任何時間或之後於以單一或一系列劑量方式投與。在奧拉木單抗於重複時間間隔下投與之一較佳態樣中，多柔比星將在投與奧拉木單抗後投與。在奧拉木單抗於重複時間間隔下投與之另一態樣中，多柔比星將在投與奧拉木單抗一小時後投與。

如本文所用，術語「套組」係指包括至少兩個各別容器之包裝，其中第一容器裝納奧拉木單抗及第二容器裝納多柔比星。「套組」亦可包括投與此等第一及第二容器之全部或部分內含物至癌症患者(較佳STS患者)之使用說明。視情況，此等套組亦包括裝納另一抗瘤藥劑之第三容器。

隨後之實例說明本發明組合之出乎意料的效益。

實例及檢定

以下實例及檢定進一步說明本發明，但不應解釋成以任何方式限制本發明之範疇。習知方法諸如彼等用於建構載體及質體，將編碼多肽之基因插入至此等載體及質體中，將質體引入至宿主細胞中，及基因之表現及其測定及基因產物者之詳細描述可自許多出版物獲得，包括Sambrook,J.等人，Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第2版，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)及Coligan,J.等人.Current Protocols in Immunology,Wiley & Sons,Incorporated(2007)。

人類抗-PDGFRα抗體之工程改造、表現及純化

就各抗體(美國專利案第8,128,929號及第8,574,578號)而言，由適宜方法諸如PCR選殖對奧拉木單抗之適宜重鏈核苷酸序列例如SEQ ID NO.11進行工程改造成適宜表現質體及對奧拉木單抗之適宜輕鏈核苷酸序列例如SEQ ID NO.12進行工程改造成適宜表現質體。為建立穩定的細胞系，在適宜宿主細胞系諸如NSO或CHO細胞中用線性化重及輕鏈質體轉染且在適宜培養基諸如具有經透析胎牛血清及麩醯胺酸合成酶補充劑之無麩醯胺酸杜貝卡氏改良依格培養基中培養。以酶聯免疫吸附分析(ELISA)篩選用於抗體表現之純系及選擇適合旋轉燒瓶中培養之最高生產者。以適宜方法諸如蛋白質-A親和層析純化抗體。

表1提供本發明抗體之胺基酸序列及對應之SEQ ID NO。採用Kabat規定確定所有CDR序列。編碼以下所揭示胺基酸序列之多核酸序列亦被包括在本發明之範圍內。

隨機化2期研究，其評估多柔比星或多柔比星與奧拉木單抗在治療軟組織肉瘤中之藥效(「本研究」)

研究設計：

本研究為開放標籤、多中心、2期試驗，其中用奧拉木單抗組合多柔比星或僅多柔比星治療不適合以手術或放射療法治療之罹患晚期STS之患者。

將符合所有可選標準之入選患者隨機1：1分組為兩治療組之一，組A或組B。組A患者接受奧拉木單抗組合多柔比星(後文稱為「組合組」)及組B患者僅接受多柔比星(後文稱為「多柔比星組」)。依照使用4個預限定風險因素之動態隨機分組演算法進行本研究之隨機分組：PDGFRα表現(陽性相對於陰性)、先前治療線數(0相對於1+線)、組織學腫瘤類型(即平滑肌肉瘤相對於滑膜肉瘤相對於其他腫瘤類型)及ECOG性能狀態(0-1相對於2)。此動態隨機分組程序用於使治療組之間之不平衡減至最小。為確定患者之腫瘤類型及PDGFRα表現，來自活組織檢查或先前已存檔的腫瘤組織樣品之腫瘤樣品係足夠的。活組織檢查需要在隨機分組前21天內進行；已存檔之組織樣品亦必須在此時段內取得。

組合組：隨機分在組合組中的64位患者於各21天治療週期的第1天及第8天接受15mg/kg奧拉木單抗，組合在各週期的第1天投與之75mg/m²多柔比星。(註：若在首次多柔比星輸注前需要術前用藥(premedication)，則此係在完成奧拉木單抗輸注後而非在奧拉木單抗輸注前進行。此術前用藥可在完成奧拉木單抗輸注後一小時內投與。)各多柔比星輸注之實際(非計劃)投與界定在各21天治療週期的第1天。在研究者判斷下繼續剛描述之組合治療長達8個週期。在第5週期至第8週期期間，接受多柔比星治療的患者亦可在各21天週期的第1天接受多柔比星治療前於各週期的第1天投與750mg/m²右雷佐生(在研究者判斷下)。若在本研究的任何時間點減小多柔比星之劑量，則應相應地減小右雷佐生之劑量，維持劑量比為10：1。例如，若多柔比星減少至60mg/m²，則右雷佐生應減小至600mg/m²。可在完成奧拉木單抗輸注後一小時內投與多柔比星。不存在PD或其他退出準則下，組合組中已完成8個治療週期之患者將要接受隨後之奧拉木單抗單藥療法，在各21天週期的第1天及第8天投與。另外，假若在第8週期結束前中斷多柔比星(例如，因為毒性)且不存在退出準則，則患者可繼續接受奧拉木單抗單藥療法。就在前8個治療週期中中斷奧拉木單抗的患者而言，可繼續接受多柔比星(長達8個週期)，只要不符合退出準則。

多柔比星組：隨機分在多柔比星組中的65位患者在研究者判斷下於各週期的第1天接受75mg/m²多柔比星長達8個週期。各多柔比星輸注之實際(非計劃)投與界定各21天治療週期的第1天。在第5週期至第8週期期間，亦可在各21天週期的第1天接受多柔比星前於各週期的第1天投與750mg/m²右雷佐生(在研究者判斷下)。假若在本研究之任何時間點減小多柔比星的劑量，則應相應地減小右雷佐生的劑量，維持劑量比為10：1。例如，假若多柔比星減小至60mg/m²，則右雷佐生應減小至600mg/m²。在初始的8個週期中發展出PD的多柔比星組患者可轉到於相同給藥方案下接受奧拉木單抗單藥療法及持續時間類似於彼等來自組合組之繼續奧拉木單抗單藥療法的患者。另外，多柔比星組中因療法相關毒性中斷本研究療法或完成多柔比星治療及經歷SD或更佳的患者可繼續本研究方案及評估直到記載PD且接著接受奧拉木單抗單藥療法。在多柔比星組患者意欲接受奧拉木單抗單藥療法之情況中，PD必需符合協議標準。

每6週評估患者之腫瘤反應。繼續進行治療直到PD、發展出不可接受之毒性、患者或研究者判斷的不順服或同意退出。約130位患者(各治療組65位)入選本研究的2期階段。

藥效資料分析

按照預限定研究標準，本研究當在進行OS之最終分析(此包括在最後一位患者經過其第一劑量研究藥物治療後長達24個月[2年]之存活資料)時視為完成。在此時間點後，於研究治療上獲得益處之任何患者可在研究完成後繼續接受研究治療，及此治療之延續係視個人而定。

試驗之預限定結束定義為最後一位患者經過其第一劑量之研究藥物治療兩年後時，且最後一位患者已中斷研究治療且完成30天安全性隨訪或已追蹤所有奧拉木單抗相關不良事件(AE)直到其解決、穩定化、返回至基線或認為不可逆，無論哪個係最遲的。

就2期數據而言，在觀測到至少80例PFS事件後安排考察藥效數據之期中分析。期中分析主要評估在PFS方面的藥效。亦可評估其他所選次要變量，諸如OS及OR。

2期患者之藥效數據之分析

就多柔比星組出現PD後轉到奧拉木單抗單藥療法之患者而言，個別地概述交叉後期間之除OS外的所有藥效終點。

主要藥效終點

PFS定義為自隨機分組直到首次放射影像記載客觀進展或任何原因引起的死亡之時間。死亡而未報告先前進展的患者視為在其死亡日已經進展。將未進展或未進行隨訪之患者設限在其最後放射影像腫瘤評估之日。假若無基線或基線後放射學評估可用，則將患者設限在隨機分組之日。假若死亡或PD在兩次或更多次連續錯過放射影像檢查後發生，則設限在所錯過檢查前最後一次放射影像檢查之日。在出現PD前採用新穎抗癌療法使得設限在開始新穎療法前最後一次放射影像評估之日。

就敏感性分析而言，進展及死亡之實際報告日期用於界定PFS，不論是否錯過檢查、早期中斷或開始新穎療法，以避免資訊設限。另外，症狀性劣化亦可新增作為另一敏感性分析之進展事件。

Kaplan-Meier方法用於估計中值PFS時間，以及90%置信區間(後文稱作「CI」)。亦估計3個月PFS。採用對數秩檢驗進行組間比較，及由Cox比例風險回歸模型估計風險比(HR)。僅當各階層中存在足夠數目之患者時，可進行分級分析。否則，分級因素可在Cox模型中處理為協方差以估計HR及90%置信限值。

次要藥效終點

次要藥效終點包括OS、客觀反應率(「ORR」)及腫瘤PDGFRα表現與臨床結果包括PFS、ORR等之間之關係。次要終點之分析可因分級因素而進行調整。

OS係定義為自隨機分組之日至任何原因引起之死亡之日之時間。假若患者在隨訪期結束時存活或未進行隨訪，則OS設限在已知患者存活的最後日期。以Kaplan-Meier方法評估OS及提供中值OS之90%CI。自Cox回歸模型估計OS之HR及90%置信限值，將分級因素視作協方差。就敏感性分析而言，將多柔比星組中的患者設限在轉日，此乃因OS終點因轉而混淆。

ORR相等於從開始治療直至PD/復發根據RECIST(1.1)達成PR或CR(PR+CR)之最佳總體反應之患者的比例。採用Fisher準確檢驗比較各治療組中之ORR。確定準確置信界限(90%CI)。

就多柔比星組中轉到奧拉木單抗療法之患者而言，分開評估開始奧拉木單抗療法之前及之後之最佳總體反應。

反應者之反應持續時間僅係自先符合CR/PR(無論哪個係先記錄)的時間量測標準直到符合PD之標準的第一日或死亡測量。用Kaplan-Meier方法估計反應之持續時間；提供中值反應持續時間之90%CI。將未復發的患者係設限在其最後客觀腫瘤評估之日。

2期期中分析結果

PFS：組合組及多柔比星組之期中分析(表2)顯示中值PFS分別為29.9週(90%CI=23.7，36.0)(95%CI=22.3，36.7)及17.9週(90%CI=12.7，23.3)(95%CI=12.1，23.4)。此期中分析之分級HR為0.597(90%CI=0.415，0.858)，分級對數秩p-值為p=0.0184。

根據組織學腫瘤類型進行組合組及多柔比星組之PFS之進一步期中分析。患者被分類為2個組：平滑肌肉瘤及其他肉瘤。其他肉瘤包括肺泡樣軟組織肉瘤、軟骨母細胞型骨肉瘤、骨肉瘤、透明細胞肉瘤、子宮內膜基質瘤、上皮樣肉瘤、上皮樣骨外黏液樣軟骨肉瘤、纖維黏液樣肉瘤、纖維肉瘤、復發性皮膚纖維肉瘤中之纖維肉瘤轉化、血管外皮細胞瘤、高惡性度未分化肉瘤、脂肪肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、惡性血管球瘤、惡性周邊神經鞘瘤、惡性單發性纖維瘤、惡性梭形細胞肉瘤、具有橫紋樣特徵之惡性梭形細胞瘤、黏液纖維肉瘤、黏液樣軟骨肉瘤、黏液樣脂肪肉瘤、黏液樣肉瘤、神經纖維肉瘤、多形性肉瘤(包括：左大腿高惡性度梭形及多形性肉瘤(低分化)、圓細胞肉瘤、肉瘤、平滑肌瘤、梭形細胞肉瘤(未分化))、滑膜肉瘤、未分化肉瘤、未分化子宮肉瘤。

罹患平滑肌肉瘤的亞型患者顯示組合組及多柔比星組之中值PFS分別為28.3週(90%CI=15.0，42.7)及15.7週(90%CI=7.1，31.7)。對於平滑肌肉瘤，組合組相對多柔比星組之此期中分析的HR為0.671(90%CI=0.377，1.194)。歸為「其他肉瘤」亞型的患者顯示組合組及多柔比星組之中值PFS分別為30.3週(90%CI=22.3，36.7)及19.0週(90%CI=10.3，23.4)。對於「其他肉瘤」，組合組相對多柔比星組之此期中分析的分級HR分別為0.608(90%CI=0.395，0.937)。

OS：組合組及多柔比星組之期中分析(表3)顯示中值OS分別為98.9週(90%CI=89.6，NE)(95%CI=70.9，NE)及58.7週(90%CI=42.6，78.1)(95%CI=40.1，94.3)。此期中分析之分級HR為0.460(90%CI=0.288，0.735)，其中分級對數秩p=值0.0052。組合組之12個月OS率及18個月OS率分別為80.3%(90%CI=70.2，87.3)及64.2%(90%CI=50.9，74.8)。多柔比星組之對應的12個月及18個月OS率分別為55.1%(90%CI=43.7，65.1)及40.0%(90%CI=27.5，52.1)。

根據組織學腫瘤類型進行組合組及多柔比星組之進一步期中OS分析。患者按照上述清單被歸為2個組：平滑肌肉瘤及「其他肉瘤」。罹患平滑肌肉瘤的亞型患者顯示，組合組及多柔比星組之OS分別為100.3週(90%CI=89.6，NE)及45.3週(90%CI=40.1，58.7)。對於平滑肌肉瘤，組合組相對多柔比星組之此期中分析的HR為0.258(90%CI=0.116，0.570)。罹患「其他肉瘤」的亞型患者顯示，組合組及多柔比星組之OS分別為98.9週(90%CI=61.4，NE)及78.1週(90%CI=35.7，NE)。對於「其他肉瘤」，組合組相對多柔比星組之此期中分析的HR分別為0.716(90%CI=0.399，1.285)。

ORR/疾病控制率：組合組及多柔比星組中反應率之期中分析(表4)顯示患者之疾病控制率(CR+PR+SD)分別在71.9%(90%CI=61.2，81.0)及53.8%(90%CI=42.9，64.5)。在組合組及多柔比星組中所觀察到的ORR(CR+PR)分別為18.8%(90%CI=11.2，28.6)，p=0.2236及10.8%(90%CI=5.2，19.3)。

NE=未達到限值

本研究在亞型範圍中之臨床資料之期中分析說明中值PFS為29.9週，當奧拉木單抗與多柔比星組合時，與僅多柔比星相比，其為PFS之12週改善(參見表2)。此PFS之12週改善基於本研究的設計尤其出乎意料，其中本研究經設計為以組合組超過多柔比星組4週的PFS改善視作成功。

本研究在亞型範圍中之臨床資料之期中分析亦顯示中值OS為98.9週，當奧拉木單抗與多柔比星組合時，與僅多柔比星相比，其為OS之40週改善(參見表3)。OS之40週改善極其出乎意料。

另外，從統計學觀點來看，通常設計2期試驗以說明PFS，而不是OS，部分地歸因於本研究之有限樣品大小；2期試驗通常不設計為證實OS效益之統計上顯著證據而當然非本研究中所證實的量值。相對小的群體將不顯示統計學顯著性，除非觀察到顯著差異。資料出乎意料地顯示，2期研究中的OS之明顯統計學改善；本研究在亞型範圍中之臨床資料之期中分析證實類似的OS效益趨勢。

當本研究之PFS及OS與當前可用且最新研究之治療比較時，在就(1)較低風險比及(2)較大中值存活時間改善方面優於當前照護標準之顯著改善說明明顯出人意外的效益。

最終，根據期中分析，就不良事件而言，與其他STS治療相比，與多柔比星組合之奧拉木單抗之組合的毒性特性總體上可接受且良好耐受。

2期最終分析結果

初級分析之最終結果實質上證實在期中分析中所觀察到的趨勢。

組合或不組合多柔比星之奧拉木單抗在SKLMS-1平滑肌肉瘤、KHOS/NP骨肉瘤及A204橫紋肌肉瘤之鼠科異種移植模型中之抗腫瘤效應。

SKLMS-1平滑肌肉瘤異種移植模型

對6至7週齡雌性nu/nu無胸腺小鼠注射含於50%基質膠(Matrigel)(BD Biosciences #356235)中之5×10⁶個SKLMS-1(ATCC #HBT-88)細胞/小鼠。當腫瘤體積為約300mm³時，小鼠依腫瘤體積隨機分成4個治療組(n=12)：組1對照小鼠用USP鹽水(Aldwin Scientific #2F7124)以10μL/公克用藥，組2小鼠用奧拉木單抗以60mg/kg(負荷劑量214mg/kg)用藥，組3小鼠用多柔比星(Sigma #D-1515)以3mg/kg用藥及組4小鼠用奧拉木單抗及多柔比星之組合以60mg/kg奧拉木單抗及3mg/kg多柔比星之單藥療法濃度用藥。該等組合經用藥使得在治療日多柔比星前1至2小時投與奧拉木單抗。經腹膜內注射每週兩次於週二及週五投與所有治療。

在USP鹽水中製備奧拉木單抗及多柔比星。在本研究過程中每週兩次以三維測徑規測量法量測腫瘤體積及計算為體積(單位為mm³)=L(較長的測得尺寸)×W²(較短尺寸)×(pi/6)。重複測量ANOVA用於評估治療組之間的腫瘤生長及體重差異。採用在第21天進行的腫瘤體積測量值計算得腫瘤體積的相對變化(%T/C)及基線腫瘤體積為在投藥第一天或剛好之前記錄的體積。

結果：奧拉木單抗及多柔比星之組合治療與各單藥治療組相比，產生抗腫瘤藥效之統計上顯著改善。第21天的腫瘤體積顯示組合組中之%T/C為46%(p<0.0001)，比較而言，在兩個各自單藥治療組中之%T/C為64%。當與鹽水對照組進行比較時，測得此等值為統計上顯著，其中對於該組合、奧拉木單抗單藥療法及多柔比星單藥療法治療組分別為p<0.0001，p=0.0015及p=0.001。

SKLMS-1平滑肌肉瘤異種移植模型中之臨床前資料進一步支持奧拉木單抗及多柔比星之組合與使用作為單藥療法之奧拉木單抗或多柔比星中任何一者相比在STS中就減小腫瘤體積而言之藥效。

KHOS/NP骨肉瘤異種移植模型

對6至7週齡雌性nu/nu無胸腺小鼠注射含於50%基質膠(BD Biosciences #356235)中之1×10⁶個KHOS/NP(ATCC #CRL-1544)細胞/小鼠。當腫瘤體積為約450mm³時，小鼠依腫瘤體積隨機分成4個治療組(n=12)：組1對照小鼠用USP鹽水(Aldwin Scientific #2F7124)以10μL/公克用藥，組2小鼠用奧拉木單抗以60mg/kg(負荷劑量214mg/kg)用藥，組3小鼠用多柔比星(Sigma #D-1515)以3mg/kg用藥及組4小鼠用奧拉木單抗及多柔比星之組合以60mg/kg奧拉木單抗及3mg/kg多柔比星之單藥療法濃度用藥。該等組合經用藥使得在治療日奧拉木單抗前3小時投與多柔比星。經腹膜內注射每週兩次於週一及週四投與所有治療。

在USP鹽水中製備奧拉木單抗及多柔比星。在本研究過程中每週兩次以三維測徑規測量法量測腫瘤體積及計算為體積(單位為mm³)=L(較長的測得尺寸)×W²(較短尺寸)×(pi/6)。重複測量ANOVA用於評估治療組之間的腫瘤生長及體重差異。採用在第32天進行的腫瘤體積測量值計算得腫瘤體積的相對變化(%T/C)，而基線腫瘤體積為在投藥第一天或剛好之前記錄的體積。

結果：奧拉木單抗及多柔比星之組合治療與各單藥治療組相比，產生抗腫瘤藥效之統計上顯著改善。第32天的腫瘤體積顯示組合組中之%T/C為55%，比較而言，奧拉木單抗及多柔比星單藥治療組中之%T/C分別為79%及72%。當與鹽水對照組進行比較時，測得此等值為統計上顯著，其中該組合、奧拉木單抗單藥療法及多柔比星單藥療法治療組分別為p<0.0001，p=0.01及p=0.002。

KHOS/NP骨肉瘤異種移植模型中之臨床前資料進一步支持奧拉木單抗及多柔比星之組合與使用作為單藥療法之奧拉木單抗或多柔比星中任何一者相比，在肉瘤中就減小腫瘤體積而言之藥效。

A204橫紋樣異種移植模型

A204模型在一開始時被歸類為RMS，但在後來確定更有可能為橫紋樣。Hinson,Ashley R.P.等人，Frontiers in Oncology 3(2013)：183.PMC.Web.2015年5月8日。橫紋樣腫瘤尚屬未知來源且罕見。目前，據信惡性橫紋樣腫瘤源自於腎臟，但確切來源細胞尚屬未知。

對7至8週齡雌性nu/nu無胸腺小鼠注射含於100%基質膠(BD Biosciences #356235)中之5×10⁶個A204(ATCC #CRL-7900)細胞/小鼠。當腫瘤體積為約340mm³時，小鼠依腫瘤體積隨機分成2個治療組(n=12)：組1對照小鼠用HuIgG(Equitech-Bio #SLH66-0001)以40mg/kg用藥及組2小鼠用奧拉木單抗以40mg/kg用藥。經腹膜內注射每週3次於週一、週三及週五投與所有治療。

以4mg/mL將奧拉木單抗稀釋於USP鹽水(Aldwin Scientific #2F7124)中。在本研究過程中每週兩次以三維測徑規測量法量測腫瘤體積及計算為體積(單位為mm³)=L(較長的測得尺寸)×W²(較短尺寸)×(pi/6)。重複測量ANOVA用於評估治療組之間的腫瘤生長及體重差異。採用在第30天進行的腫瘤體積測量值計算得腫瘤體積的相對變化(%T/C)，而基線腫瘤體積為在投藥第一天或剛好之前記錄的體積。

結果：與HuIgG對照組相比，奧拉木單抗治療顯示抗腫瘤藥效之統計上顯著改善(p<0.0001)，其中%T/C為37%。

A204橫紋樣腫瘤異種移植模型中之臨床前資料支持奧拉木單抗與鹽水相比在橫紋樣腫瘤中就減小腫瘤體積而言之藥效。

其他序列

SEQ ID NO.11

SEQ ID NO.12

<110> 美國禮來大藥廠

<120> 組合療法

<130> X20243

<150> 62/020427

<151> 2014-07-03

<160> 12

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 1

<210> 2

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 2

<210> 3

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 3

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 4

<210> 5

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 5

<210> 6

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 6

<210> 7

<211> 127

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 7

<210> 8

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 8

<210> 9

<211> 476

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 9

<210> 10

<211> 233

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 10

<210> 11

<211> 1431

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 11

<210> 12

<211> 702

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成

<400> 12

Claims

一種奧拉木單抗(olaratumab)之用途，其用於製備治療軟組織肉瘤之藥劑，其中該藥劑係與多柔比星(doxorubicin)及一心臟保護劑組合投與，其中該心臟保護劑係於該奧拉木單抗投與後且於該多柔比星投與前投與病患。
一種奧拉木單抗(olaratumab)之用途，其用於製備治療軟組織肉瘤之藥劑，其中該藥劑係於第1週期至第4週期中的第一天與多柔比星(doxorubicin)組合投與，其中在第5週期中以及之後週期中的第一天，在奧拉木單抗投與該病患後且於多柔比星投與該病患前，將心臟保護劑投與該病患，其中一週期包含21天。
如請求項2之用途，其中對病患之該投與係進行8週期，其中於第1至4週期中的第一天，該多柔比星係於奧拉木單抗之後投與，且於第5至8週期中的第一天，該心臟保護劑係於奧拉木單抗投與後且於多柔比星投與前投與至該病患。
如請求項2之用途，其中於第1至4週期中的第8天，奧拉木單抗係單獨投與。
如請求項3之用途，其中於第5至8週期中的第8天，奧拉木單抗係單獨投與。
如請求項1或2之用途，其中該病患不適合用手術或放射療法治療。
如請求項6之用途，其中該病患之前並未接受過多柔比星治療。
如請求項1或2之用途，其中該治療係用於具有軟組織肉瘤(STS)之病患，該軟組織肉瘤之組織學亞型適合於含有蒽環黴素之療法且不適合用手術或放射療法治療。
如請求項1或2之用途，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與。
如請求項1或2之用途，其中該多柔比星係以約60mg/m²或約75mg/m²之劑量投與。
如請求項10之用途，其中該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與。
如請求項1或2之用途，其中該心臟保護劑係右雷佐生(dexrazoxane)。
如請求項12之用途，其中該右雷佐生與多柔比星之劑量比為10：1。
如請求項1或2之用途，其中該奧拉木單抗係以約15mg/kg之劑量投與，其中該多柔比星係以約75mg/m²之劑量投與，且其中該心臟保護劑係右雷佐生且以約750mg/m²之劑量投與。
如請求項1或2之用途，其中該軟組織肉瘤係平滑肌肉瘤。
如請求項3之用途，其中已完成8個治療週期之病患接受隨後之奧拉木單抗單藥療法。