TWI638158B

TWI638158B - 電化學生物感測試紙及其製造方法

Info

Publication number: TWI638158B
Application number: TW106110629A
Authority: TW
Inventors: 林明慧; 楊佩芬; 周泰成
Original assignee: 泰博科技股份有限公司
Priority date: 2017-03-29
Filing date: 2017-03-29
Publication date: 2018-10-11
Also published as: TW201837460A

Abstract

本發明關於一種電化學生物感測試紙及其製造方法。上述電化學生物感測試紙用於檢測分析物之濃度，其包括基板及配置於上述基板上之導電層。上述導電層包括工作電極以及對電極。其中，上述工作電極之面積與上述對電極之面積比例為2:1至15:1。

Description

電化學生物感測試紙及其製造方法

本發明是有關於一種電化學生物感測試紙及其製造方法，特別是有關於一種具有特定電極面積比例之電化學生物感測試紙及其製造方法。

隨著科技的演進，電化學生物感測試紙已廣泛應用在臨床醫療上的分析物檢測，其可搭配適當的感測裝置而用來偵測生物樣本(如血液、尿液等)中的特定物質，例如血糖(blood glucose)、膽固醇(cholesterol)、尿酸(uric acid)、酮體(ketone)、乳酸(lactic acid)等。由於操作上便利且能夠快速完成檢測，電化學生物感測試紙檢測技術亦非常適用於慢性疾病患者生理參數的居家日常監測管理。

一般而言，以電化學生物感測試紙進行分析物的感測時，會設計適當的電子傳遞媒介物與樣本中的分析物作用，例如是在對電極(counter electrode)進行還原反應。此時，若對工作電極(working electrode)施加特定電壓，而電子傳遞媒介物會在工作電極再發生氧化反應，而產生感應電流。藉由偵測此感應電流之大小，即可進一步獲知目標分析物的濃度。

於習知技術中，為了確保氧化還原的反應進行完全，電化學生物感測試紙上對電極之面積應大於工作電極之面積，或者將對電極與工作電極兩者之面積設為相等。然而，當目標分析物反應後所產生的電流訊號較弱時，工作電極面積小容易導致訊號之解析度不佳的情況。

因此，對於相關製造業者而言，需要進一步發展可改善訊號解析度，同時能兼顧電化學反應進行之完全性，以達到更佳量測效果之電化學生物感測技術。

為了改善上述問題，本發明提供一種電化學生物感測試紙及其製造方法，能夠實現更佳的量測效果。

具體來說，本發明提出一種電化學生物感測試紙，用於檢測分析物之濃度，其包括：基板以及配置於上述基板上之導電層，且上述導電層包括工作電極以及對電極；其中，上述工作電極之面積與上述對電極之面積比例為2：1至15：1。

在本發明的一實施例中，上述工作電極之面積與上述對電極之面積比例為8：1至10：1。

在本發明的一實施例中，上述電化學生物感測試紙更包括反應層，其至少覆蓋於上述工作電極及上述對電極上，且上述反應層之長度為1.0mm~10.0mm。

在本發明的一實施例中，上述工作電極與上述對電極為全金屬電極。

在本發明的一實施例中，上述分析物為選自由尿酸(Uric acid)、乳酸(Lactic acid)、酮體(Ketone)、總膽固醇(Total cholesterol)、低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein，LDL)、高密度脂蛋白(High-density lipoprotein，HDL)、三酸甘油酯(Triglyceride，TG)及糖化血色素(HbA1c)所組成之群組。

在本發明的一實施例中，上述工作電極之材料為選自由碳、銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組。

在本發明的一實施例中，上述對電極之材料為選自由碳、銀、氯化銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組。

另一方面，本發明又提出一種電化學生物感測試紙之製造方法，包括：提供基板；以及於上述基板上形成導電層，上述導電層包括工作電極以及對電極；其中，上述工作電極之面積與上述對電極之面積比例為2：1至15：1。

在本發明的一實施例中，形成上述工作電極以及上述對電極之方式包括：於上述基板上形成導電材料層；利用蝕刻(Etching)製程移除上述導電材料層之一部分以形成上述導電層；以及於上述導電層上形成絕緣材料層，其至少覆蓋上述導電層之一部分，從而於上述導電層上定義出上述工作電極以及上述對電極。

基於上述，藉由使工作電極與對電極具有特定的面積比例，在應用於分析物量測時，本發明之電化學生物感測試紙能夠有效放大分析物之電流訊號、提升訊號解析度，亦不增加干擾訊號。另一方面，於本發明所提供之電化學生物感測試紙之製造方法中，可應用半導體製程技術來形成試紙上之電極，藉此能夠精準控制電極的尺寸大小，並降低試紙間的訊號變異與誤差，且能夠有效應用於量產。

為讓本發明的上述特徵和優點能更明顯易懂，下文特舉實施例，並配合所附圖式作詳細說明如下。

100‧‧‧基板

102‧‧‧導電層

104‧‧‧工作電極

106‧‧‧對電極

108‧‧‧反應層

110‧‧‧絕緣材料層

L₀、L₁‧‧‧長度

W₀、W₁‧‧‧寬度

第一圖A為根據本發明一實施例的電化學生物感測試紙之電極配置示意圖；第一圖B為第一圖A之局部放大示意圖。

第二圖為以五種不同電極面積比例之試紙進行測試時，樣本之尿酸濃度與對應電流大小之關係圖。

第三圖為以三種不同電極面積比例且固定參考電極面積大小之試紙進行測試時，樣本之尿酸濃度與對應電流大小之關係圖。

第四圖為以三種不同電極面積比例且固定工作電極面積大小之試紙進行測試時，樣本之尿酸濃度與對應電流大小之關係圖。

第五圖為以五種不同電極面積比例之試紙進行測試時，樣本之乳酸濃度與對應電流大小之關係圖。

第六圖為以五種不同電極面積比例之試紙進行測試時，樣本之酮體濃度與對應電流大小之關係圖。

第七圖為以四種不同電極面積比例之試紙進行測試時，樣本之總膽固醇濃度與對應電流大小之關係圖。

本發明所提供之電化學生物感測試紙可應用於檢測分析物濃度。上述分析物之濃度檢測例如是先從人體或其他動物體取得一生物樣本，並施加於電化學生物感測試紙，再搭配對應之機器來進行量測分析而獲得濃度值，但並不限於此，實際上亦可能有其他應用方式與實施態樣。上述生物樣本可包括但不限於血液、尿液、血漿、血清、腦脊液、脊髓液或其他體液。上述分析物例如是選自由尿酸、乳酸、酮體、總膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、三酸甘油酯及糖化血色素所組成之群組，但並不限於此。此外，本發明的電化學生物感測試紙例如是採用二極式之電極系統。

以下，將搭配所附圖式進一步詳細說明本發明之實施例。

請同時參照第一圖A及第一圖B，此電化學生物感測試紙包括基板100、以及配置於基板100上之導電層102。基板100可為呈矩形之片狀材料，較佳為具有相當的電絕緣特性，其材質例如是選自聚對苯二甲酸乙二酯(Polyethylene Terephthalate，PET)、聚氯乙烯(Polyvinyl Chloride，PVC)、聚碳酸酯(Polycarbonate，PC)、聚酯、聚醚、聚醯胺、聚氨酯、聚丙烯、聚乙烯等聚合性材料，但並不限於此，亦可採用其他適當之材料。基板100之長度 L₀例如是30mm~40mm，寬度W₀例如是5mm~10mm。形成導電層102之材料例如是選自由碳、銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組，但並不限於此，亦可採用其他具有適當導電性質之單一或混合材料。於一些實施例中，在導電層102上不同位置之材質可依需求而有所不同。

具體來說，導電層102包括工作電極104及對電極106。如第一圖A及第一圖B所示，工作電極104及對電極106例如是導電層102上兩不相接觸之矩形區域，且具有大致相同之寬度。然而，本發明並不限於此，工作電極104及對電極106亦可能以其他形狀、態樣存在。

工作電極104與對電極106例如是全金屬電極，但並不限於此。當採用全金屬電極，可進一步具有更佳之檢測效果。由另一觀點來看，工作電極104之材料較佳為選自由碳、銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組；對電極106之材料較佳為選自由碳、銀、氯化銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組，但並不限於此。實際上，所屬技術領域中具通常知識者應理解可採用其他具有適當導電性質之單一或混合材料作為電極使用。

於本發明之實施例中，工作電極104與對電極106之面積比例為2：1至15：1。亦即，將工作電極104之面積設為對電極106之面積的2-15倍。進一步來說，工作電極104之面積與對電極106之面積比例例如是8：1至10：1。應注意的是，上述面積比例範圍包括在該比例範圍內之任意比例，且應視為一種避免於一一列舉該範圍內所有數值的表示方式，亦即，記載一面積比例範圍等同於已在說明書中揭露該範圍內的所有任意比例及其所構成之範圍。具體來說，上述「2：1至15：1」之比例範圍即包括但不限於2：1、2.5：1、3：1、3.5：1、4：1、4.5：1、5：1、 5.5：1、6：1、6.5：1、7：1、7.5：1、8：1、8.5：1、9：1、9.5：1、10：1、10.5：1、11：1、11.5：1、12：1、12.5：1、13：1、13.5：1、14：1、14.5：1、15：1等比例關係。工作電極104之面積例如是在1.0mm²~9.0mm²之範圍，對電極106之面積例如是在0.15mm²~5.0mm²之範圍，但不限於此，當設定於上述範圍內時，可進一步具備更佳之量測效果。此外，當工作電極104及對電極106之寬度係設定為大致相同時，兩者之面積比例與長度成正比，而可藉由調整電極之長度來製作具有不同電極面積比例的試片。

如第一圖A及第一圖B所示，電化學生物感測試紙可更包括反應層108，其至少覆蓋於工作電極104及對電極106上。當由上方俯視電化學感測試紙時，反應層108例如是呈現一矩形，具有長度L₁及寬度W₁，且恰好覆蓋於工作電極104、對電極106以及位在工作電極104與對電極106之間的一部分基板100(請參照第一圖A及第一圖B上以淺灰色表示之區塊)。反應層108中例如是包含可與目標分析物進行反應之生物活性物質(例如尿酸酶等具有受質專一性之酵素)、酵素輔助因子、安定劑(如高分子聚合物)及緩衝溶液等，但並不限於此，所屬技術領域中具通常知識者應理解可根據目標分析物之種類來設計反應層108之最適組成。

另一方面，反應層108之長度L₁較佳為1.0mm~10.0mm，更佳為1.0mm~5.0mm，特佳為1.4mm~3.8mm；寬度W₁較佳為1.0mm~2.5mm。當反應層108之長度L₁或者寬度W₁設定在上述範圍內時，應用效果更佳，但本發明並不限於此。在一些實施例中，由於位在工作電極104與對電極106之間的一部分基板100之長度相對較小(例如是小於0.1mm等狀況)而可忽略不計，此時可將反應層108之長度L₁視作為工作電極104與對電極106長度之總和，並將反應層108之面積視作為工作電極104與對電極106面積之總和。具體來說，工作電極104 與對電極106之面積總和(或反應層108之整體面積)例如是在1.5mm²~10.0mm²之間，而不限於此。

應注意的是，第一圖A及第一圖B分別僅為根據本發明一實施例的電化學生物感測試紙之電極配置示意圖及其局部放大示意圖。所屬技術領域中具通常知識者應了解電化學生物感測試紙可包括其他構件。具體來說，電化學生物感測試紙例如是包括基板、配置於基板上且具工作電極與對電極之導電層、覆蓋一部分的基板及導電層而至少使工作電極與對電極區域露出的中隔板、設置於工作電極與對電極上之反應層、以及設置於反應層上之上隔板。其中，中隔板及上隔板之材質較佳為電絕緣材料，例如是選自聚對苯二甲酸乙二酯(PET)、聚氯乙烯(PVC)、聚碳酸酯(PC)、聚酯、聚醚、聚醯胺、聚氨酯、聚丙烯、聚乙烯等聚合性材料。此外，於電化學生物感測試紙之一端例如是設有一開口，以供待測樣本流入感測試紙並與其中之反應層接觸。藉此，當含有目標分析物樣本流入後，即可與反應層中物質產生電化學反應，所產生之訊號可透過工作電極與對電極傳導至位在導電層另一端之陰極接頭與陽極接頭，再由與電化學生物感測試紙相連之感測器接收，並經進一步運算而將電訊號轉換成待測物濃度。

以下，將參照第一圖A及第一圖B來說明根據本發明一實施例的電化學生物感測試紙之製造方法。首先，提供基板100，然後於基板100上形成導電材料層。上述導電材料層例如是全金屬材質。形成上述導電材料層之材料例如是選自由碳、銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組。此外，形成上述導電材料層之方法包括但不限於物理氣相沉積法(Physical Vapor Deposition，PVD)(如蒸鍍、濺鍍等)、化學氣相沉積法(Chemical Vapor Deposition，CVD)、原子層沉積法、電鍍法、無電鍍法或其他適當方法。

接下來，利用蝕刻製程移除上述導電材料層之一部分，以形成具有特定圖案之導電層102。具體來說，上述蝕刻製程例如是先在導電材料層表面定義出所需圖案之範圍，再以化學腐蝕反應或物理撞擊的方式，或上述兩種方式的合成效果，去除部份導電材料層，留下所需的圖案部分。進一步來說，上述蝕刻製程例如是利用雷射蝕刻、濕式蝕刻或其他乾式蝕刻等方法進行。實際上並不限於此，亦可採用其他能有效形成精確度良好之圖案的技術。

而後，於上述導電層102上形成絕緣材料層110(或稱中隔板)，其至少覆蓋導電層102之一部分，從而於導電層102上定義出工作電極104以及對電極106。絕緣材料層110之材料例如是選自聚對苯二甲酸乙二酯(PET)、聚氯乙烯(PVC)、聚碳酸酯(PC)、聚酯、聚醚、聚醯胺、聚氨酯、聚丙烯、聚乙烯等聚合性材料，且絕緣材料層110例如是藉由貼合方式形成，但並不限於此。所形成的工作電極及對電極之面積比例為2：1至15：1。進一步來說，所形成的工作電極之面積與對電極之面積比例例如是8：1至10：1。

由於感測試紙上電極之面積比例範圍、定義及其他元件之材料與結構組成等相關技術內容已於前文中進行了詳盡說明，所屬技術領域中具通常知識者應已可充分理解本發明之技術內涵，故於此不再贅述。

以下，將列舉數個具體實施例，以更進一步說明本發明之相關技術功效。於以下各實施例中所提及之固定量樣本的實際範圍在約0.5μL-5μL之間，而各實施例中所提及之固定電壓的實際範圍在約0.1V-0.6V之間。

《實施例一》

以半導體製程技術製作具有工作電極和對電極之一次性使用的電化學生物感測試紙。其中，將感測試紙上對電極的面積大小固定為約0.72mm²，並分別製作出工作電極面積為對電極面積的一倍(1：1)、二倍(2：1)、三倍(3：1)、四倍(4：1)和五倍(5：1)之感測試紙，在工作電極和對電極上塗佈有固定量之尿酸感測物質。以五種不同尿酸濃度(5.1-18.8mg/dL)之人類靜脈血全血作為測試樣本。測試方式如下：取固定量之樣本添加至感測試紙之樣本槽，並對感測試紙施加固定電壓，記錄偵測到的電流，針對各濃度的樣本進行三重複之測試，計算其平均值和標準差並進行線性迴歸分析。上述實驗結果示於下表一及第二圖中。

由上表一中之數據可知，隨著工作電極與對電極面積比例由1：1放大至5：1，整體的平均電流訊號獲得提升，由0.34μA至0.63μA的範圍提高至2.32μA至3.85μA的水準，且各實驗組的標準差相近，顯示即使將工作電極之面積放大仍可維持感測試紙的精確度。此外，如第二圖中之迴歸線所示，在工作電極與對電極面積比例為5：1的情況下，整體電流訊號提升，且所得到的訊號解析度最佳。

《實施例二》

以半導體製程技術製作具有工作電極和對電極之一次性使用的電化學生物感測試紙。其中，將感測試紙上對電極的面積大小固定為約0.72mm²，並分別製作出工作電極面積為對電極面積的五倍(5：1)、八倍(8：1)和十倍(10：1)之感測試紙，且在工作電極和對電極上塗佈有固定量之尿酸感測物質。以五種不同尿酸濃度(5.7-16.45mg/dL)之人類靜脈血全血作為測試樣本。測試方式如下：取固定量之樣本添加至感測試紙之樣本槽，並對感測試紙施加固定電壓，記錄偵測到的電流，針對各濃度的樣本進行三重複之測試，計算其平均值和標準差並進行線性迴歸分析。上述實驗結果示於下表二及第三圖中。

由上表二中之數據可知，隨著工作電極與對電極面積比例由5：1放大至8：1至10：1時，整體的平均電流訊號都進一步獲得了提升，由1.53μA至2.19μA的範圍提高至3.43μA至4.75μA的水準，且電流值之標準差和原先相近，顯示即使將工作電極之面積放大至對電極之8~10倍，仍可維持感測試紙的精確度。此外，如第三圖中之迴歸線所示，在工作電極與對電極面積比例為10：1的情況下，整體電流訊號最大，迴歸線的斜率最大，顯示其訊號解析度最佳。

《實施例三》

以半導體製程技術製作具有工作電極和對電極之一次性使用的電化學生物感測試紙。其中，將感測試紙上工作電極的面積大小固定為約7.2mm²，分別將對電極之面積比例設為工作電極之0.07倍(10：0.7)和0.1倍(10：1)及0.2倍(10：2)，接著在工作電極和對電極上塗佈有固定量之尿酸感測物質。以五種不同尿酸濃度(3.45-20.2mg/dL)之人類靜脈血全血作為測試樣本。測試方式如下：取固定量之樣本添加至感測試紙之樣本槽，並對感測試紙施加固定電壓，記錄偵測到的電流，針對各濃度的樣本進行三重複之測試，計算其平均值和標準差並進行線性迴歸分析。上述實驗結果示於下表三及第四圖中

如上表三中之數據及第四圖所示，可知於此實施例中，由三種面積比例的感測試紙所獲得的電流訊號均落在良好範圍(1.68μA至3.92μA)。其中，工作電極與對電極面積之比例為10：1的感測試紙之電流值標準差為最小(標準差之平均值僅為0.052)，顯示於此實施例中，工作電極與對電極面積之比例為10：1的感測試紙為量測精確度最佳之設計。

《實施例四》

以半導體製程技術製作具有工作電極和對電極之一次性使用的電化學生物感測試紙。其中，將感測試紙上工作電極和對電極的總面積(此處可視為反應層之總面積)大小固定為約2.6mm²，將工作電極與對電極之面積比例分別設為1：2、2：3、1：1、3：2、2：1，接著在工作電極和對電極上塗佈有固定量之乳酸感測物質。以六種不同乳酸濃度(2.42mM-23.28mM)之人類靜脈血全血作為測試樣本。測試方式如下：取固定量之樣本添加至感測試紙之樣本槽，並對感測試紙施加固定電壓，記錄偵測到的電流，針對各濃度的樣本進行三重複之測試，計算其平均值和標準差並進行線性迴歸分析。上述實驗結果示於下表四及第五圖中。

如上表四中之數據及第五圖所示，於所測試的各組乳酸濃度樣本中，工作電極與對電極面積之比例為2：1的感測試紙均可獲得最大的電流訊號，而迴歸線的斜率亦最大，顯示其訊號解析度最佳，精確度仍能維持在一定水平。

《實施例五》

以半導體製程技術製作具有工作電極和對電極之一次性使用的電化學生物感測試紙。其中，將感測試紙上工作電極與對電極的總面積(此處可視為反應層之總面積)大小固定為約2.6mm²，將工作電極與對電極之面積比例分別設為1：2、2：3、1：1、3：2、2：1，接著在工作電極和對電極上塗佈有固定量之酮體感測物質。以八種不同酮體濃度(0.058mM-8.905mM)之人類靜脈血全血作為測試樣本。測試方式如下：取固定量之樣本添加至感測試紙之樣本槽，並對感測試紙施加固定電壓，記錄偵測到的電流，針對各濃度的樣本進行三重複之測試，計算其平均值和標準差並進行線性迴歸分析。上述實驗結果示於下表五及第六圖中。

如上表五中之數據及第六圖所示，於所測試的各組酮體濃度樣本中，工作電極與對電極面積之比例為2：1的感測試紙均可獲得最大的電流訊號，而迴歸線的斜率亦最大，顯示其訊號解析度最佳，精確度仍能維持在一定水平。

《實施例六》

以半導體製程技術製作具有工作電極和對電極之一次性使用的電化學生物感測試紙。其中，將感測試紙上工作電極與對電極的總面積(此處可視為反應層之總面積)大小固定為約9.7mm²，將工作電極與對電極之面積比例分別設為6.6：1、3.2：1、1.1：1、0.36：1，接著在工作電極和對電極上塗佈有固定量之總膽固醇感測物質。以五種不同總膽固醇濃度(133.82mM-241.24mM)之人類靜脈血全血作為測試樣本。此處所指之總膽固醇包含低密度脂蛋白(LDL)以及高密度脂蛋白(HDL)。測試方式如下：取固定量之樣本添加至感測試紙之樣本槽，並對感測試紙施加固定電壓，記錄偵測到的電流，針對各濃度的樣本進行三重複之測試，計算其平均值和標準差並進行線性迴歸分析。上述實驗結果示於下表六及第七圖中。

如上表六中之數據及第七圖所示，於所測試的各組總膽固醇濃度樣本中，工作電極與對電極面積之比例為6.6：1的感測試紙均可獲得最大的電流訊號，而迴歸線的斜率亦最大，顯示其訊號解析度最佳，精確度仍能維持在一定水平；次佳的則為工作電極與對電極面積之比例為3.2：1的感測試紙。

另一方面，在應用具有本發明之特定電極面積比例範圍的試紙來檢測三酸甘油酯或糖化血色素時，亦同樣能夠獲得較大的電流訊號以及良好的訊號解析度與精確度。

由上述實施例可知，運用本發明之電化學生物感測試紙能夠實現更佳之分析物檢測效果，不但在訊號解析度及精確度方面表現良好，且量測穩定度亦佳。

綜上所述，本發明提供一種電化學生物感測試紙，其應用於分析物量測時能夠有效放大分析物之電流訊號、提升訊號解析度，亦不增加干擾訊號。此外，於本發明所提供之電化學生物感測試紙之製造方法中，可利用特定半導體製程技術來形成試紙上之工作電極與對電極，藉此能夠精準控制電極的尺寸大小，降低試紙間的訊號變異與誤差，且能夠有效應用於量產。進一步來說，於本發明所提供之電化學生物感測試紙及其製造方法中，採用了不同於所屬技術領域中具有通常知識者長久以來所認為「對電極面積應大於工作電極面積、或者兩者面積應相等或相近」概念之技術方案，並且取得了無法預期之技術功效。

雖然本發明已以實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何所屬技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明的精神和範圍內，當可作些許更動與潤飾，故本發明的保護範圍當視後附的申請專利範圍所界定者為準。

Claims

一種電化學生物感測試紙，用於檢測一分析物之濃度，其包括：一基板；以及一導電層，配置於該基板上，包括一工作電極以及一對電極；其中，該工作電極之面積與該對電極之面積比例為2:1至15:1。
如申請專利範圍第1項所述之電化學生物感測試紙，其中該工作電極之面積與該對電極之面積比例為8:1至10:1。
如申請專利範圍第1項所述之電化學生物感測試紙，更包括：一反應層，至少覆蓋於該工作電極及該對電極上，且該反應層之長度為1.0 mm～10.0 mm。
如申請專利範圍第1項所述之電化學生物感測試紙，其中該工作電極與該對電極為全金屬電極。
如申請專利範圍第1項所述之電化學生物感測試紙，其中該分析物為選自由尿酸、乳酸、酮體、總膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、三酸甘油酯及糖化血色素所組成之群組。
如申請專利範圍第1項所述之電化學生物感測試紙，其中該工作電極之材料為選自由碳、銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組。
如申請專利範圍第1項所述之電化學生物感測試紙，其中該對電極之材料為選自由碳、銀、氯化銀、金、鉑、銅、銥、鎳、鋅、鋁、鐵、鉛、銦、鈀、鎢、鉭、釔、鈧、銠、鋨、錸、鋯、鎵、鈦及其合金或混合物所組成之群組。
一種電化學生物感測試紙之製造方法，包括：提供一基板；以及於該基板上形成一導電層，該導電層包括一工作電極以及一對電極；其中，該工作電極之面積與該對電極之面積比例為2:1至15:1。
如申請專利範圍第8項所述之電化學生物感測試紙之製造方法，其中該工作電極之面積與該對電極之面積比例為8:1至10:1。
如申請專利範圍第8項所述之電化學生物感測試紙之製造方法，其中，形成該工作電極以及該對電極之方式包括：於該基板上形成一導電材料層；利用蝕刻製程移除該導電材料層之一部分以形成該導電層；以及於該導電層上形成一絕緣材料層，其至少覆蓋該導電層之一部分，從而於該導電層上定義出該工作電極以及該對電極。