TWI590825B - 治療癌症的基於硫□酮之自體吞噬抑制劑治療 - Google Patents

Description

治療癌症的基於硫 酮之自體吞噬抑制劑治療

【優先權聲明】

本專利申請案依據35 U.S.C.§119(e)主張2010年3月8日申請之美國臨時專利申請案第61/131,736號之優先權，該案以全文引用的方式併入本文中。

本發明係關於包含基於硫酮之自體吞噬抑制劑及/或誘發自體吞噬之癌症治療性化合物的組成物、包含此等組成物之醫藥套組、使用該等化合物、組成物及套組治療癌症之方法及使用基於硫酮之自體吞噬抑制劑及放射線療法治療癌症之方法。

癌症為美國第二大死亡原因，據估計1998年有1,228,600例新病例及564,800例死亡。在過去50年，癌症死亡率不斷上升，此主要歸因於由吸菸引起之肺癌死亡率大幅上升。雖然癌症發生於所有年齡之人中，但其在45歲以上人中之發生率大大增加。然而，癌症為美國35至65歲人之主要死亡原因，且亦為美國15歲以下兒童中非意外死亡的主要原因。男性的癌症死亡率高於女性，且任何主要種族中黑人之癌死亡率最高。在美國，男性具有約1/2終身風險出現癌症且女性具有約1/3終身風險。在預期由心臟病與中風引起之死亡持續降低之情況下，癌症將成為2010年整個美國人口死亡之總體主要原因。

癌症之診斷通常需要由病理學家進行組織活檢樣本之 組織學檢查，不過惡性病之初期指示可為症狀或放射線成像異常。一旦確診，癌症通常藉由手術、化學療法、放射線療法或如免疫療法、激素療法或血管生成抑制劑療法之靶向療法來治療。療法之選擇視腫瘤之位置及等級、及疾病階段以及患者之總體狀態(體能狀況)而定。此外，視癌症之類型及階段而定，兩種或兩種以上此等類型之癌症治療可同時組合或接連使用。儘管完全移除癌症而不損傷身體其餘部分為治療目標，但當前治療癌症之方法僅獲得有限的成功。關於手術，此部分歸因於個別或少數癌細胞傾向於侵入鄰近組織或轉移至遠處部位，藉此限制局部手術治療之效用。化學療法及放射線療法之效用通常因對體內正常組織有毒性或損傷而受限制。因此，極需可更有效治療癌症之化合物、組成物及方法。另外，亦極需可治療目前尚無療法之特定類型之癌症的化合物、組成物及方法。

自體吞噬(巨型細胞自體吞噬或自吞)為分解代謝過程，藉由此過程，細胞經由溶酶體機制降解受損、多餘或另外不必要之細胞質組分，包括蛋白質及胞器。作為一種緊密調節過程，此降解路徑在養分去除、代謝應力或微環境條件下誘導以確保能量平衡、清除受損蛋白質且調整應力。自體吞噬在正常細胞生長及發育中起作用，有助於維持細胞組分合成與降解之間平衡。另外，此過程提供在代謝應力期間可充當替代能源以維持恆定及生存力之分解產物。因而，自體吞噬在養分饑餓之情形下起細胞保護作用。

自噬過程包含將細胞之細胞質的一部分囊封於稱為自噬小體或自噬空泡之雙膜結合小泡中，使包括蛋白質及胞器之組分與細胞質之其餘部分分離。自噬小體由稱為自噬小體前驅體之小膜結構伸長而形成。此形成係由III類磷酸肌醇3-激酶及自體吞噬相關基因(Atg)6(亦稱為Beclin-1)起始。此等自噬小體前驅體之擴大需要2個產生自體吞噬調節因子之經修飾複合物的泛素樣結合系統參與。一者涉及ATG12-ATG5-ATG16複合物之結合，且另一者涉及磷脂醯乙醇胺(PE)與LC3/ATG8及ATG4蛋白酶複合物之結合。接著發生成核、擴增、脫殼，以完成自噬小體之形成。接著自噬小體之外膜與溶酶體在細胞質中融合以形成自溶酶體或自噬溶酶體，其中其內含物經由酸性溶酶體水解酶降解。自體吞噬活化之最終結果高度視細胞環境及應力誘導之信號的強度及持續時間而定。

包括胺基酸、脂質核酸及糖類之細胞質及胞器分解產物藉由透過酶自溶酶體輸出至細胞質。細胞利用此等細胞分解產物作為構築基塊用於巨分子合成或保持能量恆定。因而，自體吞噬為細胞再循環及將養分再分配至更重要之細胞過程的主要機制。自體吞噬亦藉由降解諸如去極化線粒體及未摺疊蛋白質之受損或衰老細胞組分，在蛋白質及胞器品質控制上起作用。蛋白質及胞器經由自體吞噬進行更新對預防衰老及受損細胞組分之毒性積累以維持恆定而言為關鍵的。

自體吞噬已作為一種新穎細胞保護機制出現，其在代謝應力及低氧條件下增加腫瘤細胞存活，以及避免由化學療法、放射線療法或靶向療法誘發之細胞死亡。舉例而言，侵蝕性癌症依靠自體吞噬支持代謝以維持腫瘤細胞存活，尤其在低氧及養分耗盡之環境中。另外，自體吞噬產生少量當應力移除時能恢復細胞增殖之休眠腫瘤細胞。藉此，自體吞噬為癌細胞提供耐受應力、甚至治療應力且當條件更有利時恢復生長之可撓性。此由自體吞噬提供之應力存活、休眠及再生的過程可為實現成功癌症治療之主要障礙。此外，諸如化學療法、靶向療法及放射線療法之癌症治療之主要態樣為對腫瘤細胞進行破壞，足以藉由細胞凋亡、壞死或細胞死亡之替代形式殺死其。除腫瘤微環境中固有之代謝應力外，治療會擴增細胞應力且起始自體吞噬。因而，自體吞噬藉由提供保護功能以限制腫瘤壞死及發炎且減輕腫瘤細胞中反應於代謝應力及療法誘發之細胞凋亡的基因組損傷，從而延長腫瘤細胞存活。

因為自體吞噬為腫瘤細胞用以耐受代謝應力之存活路徑，所以預期自體吞噬抑制劑適用於癌症療法。因為自體吞噬抑制劑可靶向低氧性腫瘤區中對療法、尤其輻射有抗性之腫瘤細胞，所以其尤其引人注目。另外，轉移過程中之腫瘤細胞尤其視自體吞噬而定，此支持在早期進程及輔助環境中消除自體吞噬之方法。尤其有用之癌症療法為使用抑制自體吞噬降解以增強通常激活自體吞噬路徑之習知化學治療劑之功效的藥劑。預期添加自體吞噬抑制劑將增強此等藥劑之細胞毒性。舉例而言，用自體吞噬抑制劑治療可增加誘發細胞凋亡之化學療法在人類癌症患者中之功效。因此，針對用自體吞噬抑制劑阻斷自體吞噬介導之存活的癌症療法可極具價值。

儘管極需要對自體吞噬之關鍵抑制劑進行鑑別，但目前缺乏特異性靶向自體吞噬路徑之藥劑。本說明書提供自體吞噬抑制劑，其與誘發自體吞噬之化學治療性化合物或輻射組合，對多種癌症之治療產生協同有益作用。

因此，本說明書之態樣揭示一種基於硫酮之自體吞噬抑制劑。適用之基於硫酮之自體吞噬抑制劑包括(但不限於)1-((2-(二乙胺基)乙基)胺基)-4-甲基硫-9-酮、1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮、N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻-4-基]甲基]甲烷磺醯胺、其吲唑類似物或其鹽。

本說明書之其他態樣揭示一種誘發自體吞噬之癌症治療性化合物。該等化合物之非限制性實例包括三氧化二砷、依託泊苷(etoposide)、雷帕黴素(rapamycin)、組蛋白去乙醯基酶抑制劑、酪胺酸激酶抑制劑、他莫昔芬(tamoxifen)、替莫唑胺(temozolomide)、伊馬替尼(imatinib)、硼替佐米組蛋白去乙醯基酶抑制劑(bortezomib histone deacetylase inhibitor)。適用之組蛋白去乙醯基酶抑制劑包括(但不限於)異羥肟酸酯型組蛋白去乙醯基酶抑制劑或苯甲醯胺型組蛋白去乙醯基酶抑制劑。該等抑制劑之非限制性實例包括(2E,4E,6R)-7-(4-二甲胺基苯基)-N-羥基-4,6-二甲基-7-側氧基庚-2,4-二烯醯胺、N-羥基-N'-苯基 辛二醯胺、4-二甲胺基-N-(6-羥基胺甲醯基己基)-苯甲醯胺、N-羥基-3-[(E)-3-(羥胺基)-3-側氧基丙-1-烯基]苯甲醯胺、(2E)-3-[3-(苯胺基磺醯基)苯基]-N-羥基丙烯醯胺、((E)-N-羥基-3-[4-[[2-羥乙基-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、(E)-N-羥基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、N-(2-胺基苯基)-N'-苯基-辛二醯胺、4-(2-胺基苯基胺甲醯基)苄基胺基甲酸酯、4-乙醯胺基-N-(2-胺基苯基)苯甲醯胺、N-(2-胺基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)胺基]甲基]苯甲醯胺、3-(二甲胺基甲基)-N-[2-[4-(羥基胺甲醯基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲醯胺或{4-[(羥胺基)羰基]苯基}胺基甲酸{6-[(二乙胺基)甲基]-2-萘基}甲酯或其鹽。

本說明書之其他態樣揭示一種醫藥組成物，其包含本文所揭示之化合物。在一態樣中，醫藥組成物包含治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑。在另一態樣中，醫藥組成物包含治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物。在另一態樣中，醫藥組成物包含治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑；及治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物。本文所揭示之醫藥組成物可進一步包含醫藥學上可接受之載劑。

本說明書之其他態樣揭示本文所揭示之化合物或本文所揭示之組成物的用途，其係用於製造供治療癌症之醫藥品。

本說明書之其他態樣揭示一種治療癌症之方法，該方法包含向有需要之哺乳動物投予有效量的本文所揭示之基於硫酮之自體吞噬抑制劑；及向有需要之哺乳動物投予有效量的本文所揭示之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物；其中投予基於硫酮之自體吞噬抑制劑與誘發自體吞噬之癌症治療性化合物可減輕與癌症相關之症狀，藉此治療癌症。基於硫酮之自體吞噬抑制劑及誘發自體吞噬之癌症治療性化合物可同時或依序投予。基於硫酮之自體吞噬抑制劑與誘發自體吞噬之癌症治療性化合物之依序投予可在彼此間隔約三小時內、彼此間隔約兩小時內或彼此間隔約一小時內投予。可使用本文所揭示之化合物、組成物及方法治療之癌症的非限制性實例包括肺癌、腦癌、中樞神經系統癌症、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢癌。在其他態樣中，該方法進一步包含投予放射線療法。

本說明書之其他態樣揭示本文所揭示之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及誘發自體吞噬之癌症治療性化合物或包含如本文所揭示之該等化合物之組成物的用途，其係用於治療癌症，其中投予基於硫酮之自體吞噬抑制劑與誘發自體吞噬之癌症治療性化合物可減輕與癌症相關之症狀，藉此治療癌症。可使用本文所揭示之化合物、組成物及方法治療之癌症的非限制性實例包括肺癌、腦癌、中樞神經系統癌症、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢癌。在其他態樣中，該方法進一步包含投予放射線療法。

本說明書之其他態樣揭示一種醫藥套組，其含有包含治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物，及包含治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物。

本說明書之其他態樣揭示一種治療癌症之方法，該方法包含向有需要之哺乳動物投予有效量的本文所揭示之基於硫酮之自體吞噬抑制劑；及向有需要之哺乳動物投予有效量之本文所揭示之放射線療法；其中投予基於硫酮之自體吞噬抑制劑與放射線療法可減輕與癌症相關之症狀，藉此治療癌症。基於硫酮之自體吞噬抑制劑與放射線療法可同時或依序投予。基於硫酮之自體吞噬抑制劑與放射線療法之依序投予可在彼此間隔約三小時內、彼此間隔約兩小時內或彼此間隔約一小時內投予。可使用本文所揭示之化合物、組成物及方法治療之癌症的非限制性實例包括肺癌、腦癌、中樞神經系統癌症、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢癌。

本說明書之其他態樣揭示基於硫酮之自體吞噬抑制劑或包含此類化合物之組成物及本文所揭示之放射線療法的用途，其係用於治療癌症，其中投予基於硫酮之自體吞噬抑制劑與放射線療法可減輕與癌症相關之症狀，藉此治療癌症。可使用本文所揭示之化合物、組成物及方法治療之癌症的非限制性實例包括肺癌、腦癌、中樞神經系統癌症、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢癌。

因為不受控制之細胞生長為所有癌症之潛在原因，所以可減弱或預防此不受控制之細胞生長的化合物、組成物及方法將有效治療癌症。本說明書揭示可減弱或預防由癌細胞呈現之不受控制之細胞生長的化合物、組成物及方法。該等化合物部分地包含基於硫酮之自體吞噬抑制劑(TAPI)及誘發自體吞噬之癌症治療性化合物(CTAPIC)。TAPI抑制自體吞噬介導之腫瘤細胞存活，使腫瘤細胞更容易受到代謝應力、低氧及癌症治療(諸如化學療法、放射線療法或如免疫療法、激素療法或血管生成抑制劑療法之靶向療法)影響。CTAPIC為由於作用機制而誘發自體吞噬之習知化學治療劑或靶向治療劑。意外地，儘管TAPI與CTAPIC對腫瘤細胞具有相反作用，但發現TAPI與HDACI化合物之組合可提供大大改善治療有益結果且提供更有效癌症治療之協同作用。作為此發現之推論，因為輻射療法亦誘發自體吞噬，所以TAPI與輻射療法之組合治療亦將產生協同有益之癌症治療。

本說明書之態樣部分揭示一種基於硫酮之自體吞噬抑制劑(TAPI)。如實施例部分中所證實，TAPI抑制自體吞噬，破壞溶酶體功能，誘導組織蛋白酶D表現，對癌細胞有細胞毒性，具有與p53狀態無關之抗癌活性且增強CTAPIC之抗癌活性。適用於本文所揭示之方法的TAPI包括具有似乎與無鹼基連接及磷酸二酯鍵之去氧核糖環類似 的連接短鏈之任何基於硫酮之化合物。TAPI之非限制性實例包括硫蒽酮(Lucanthone)(米列西D(Miracil D))1-((2-(二乙胺基)乙基)胺基)-4-甲基硫-9-酮、塞引酮1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮、硫蒽酮及塞引酮之吲唑類似物、(WIN33377)N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻-4-基]甲基]甲烷磺醯胺以及其生理學上可耐受之衍生物、類似物及鹽。其他硫酮無嘌呤/無嘧啶核酸內切酶抑制劑描述於例如Thomas Corbett等人，Antitumor Activity of N-[[1-[[2-(diethylamino)ethyl]amino]-9-oxo-9H-thiaxanthen-4-yl]methyl]meth anesulfonamide(WIN33377)and Analogues,Exp.Opin.Invest.Drugs 3：1281-1292(1994)；及Mark P.Wentland等人，Anti-solid Tumor Efficacy and Preparation of N-[[1-[[2-(diethylamino)ethyl]amino]-9-oxo-9H-thiaxanthen-4-yl]methyl]meth anesulfonamide(WIN33377)and Related Derivatives,Bioorg.Med.Chem.Lett.4：609-614(1994)中；各文獻均以全文引用的方式併入本文中。

在此具體實例之態樣中，TAPI為1-((2-(二乙胺基)乙基)胺基)-4-甲基硫-9-酮、1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮或N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻-4-基]甲基]甲烷磺醯胺。此等化合物之化學結構如下所示。

硫酮

硫蒽酮(米列西D)1-((2-(二乙胺基)乙基)胺基)-4-甲基硫-9-酮

塞引酮1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮

WIN-33377(SR-233377)N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻-4-基]甲基]甲烷磺醯胺

本說明書之態樣部分地揭示一種誘發自體吞噬之癌症治療性化合物。誘發自體吞噬之癌症治療性化合物(CTAPIC)為一類適用於治療多種癌症，但誘發自體吞噬，藉此抑制細胞凋亡之抗癌化合物。許多癌症治療劑誘發自體吞噬，此係因為其藉由模擬因子去除或饑餓誘導損傷(細胞毒性化學療法)、代謝應力(血管生成抑制劑、2-去氧葡萄糖)或阻斷生長信號傳導路徑(靶向非細胞毒素、激酶抑制劑)。因而，CTAPIC包括化學治療及靶向治療化合物，如免疫治療、激素治療或血管生成抑制劑化合物。該等化合物之非限制性實例包括抗血管生成化合物、酪胺酸激酶抑制劑、血管內皮生長因子受體(VEGFR)抑制劑、組蛋白去乙醯基酶抑制劑、法呢基轉移酶抑制劑、mTOR抑制劑、糖酵解抑制劑及維生素D類似物及類視黃素化合物。其他CTAPIC包括(但不限於)三氧化二砷、貝伐單抗(Bevacizumab)、卡鉑I/II(carboplatin I/II)、硼替佐米、去氧葡萄糖、多烯紫杉醇(Docetaxel)、內皮生長抑素、依託泊苷、依維莫司(Everolimus)、吉非替尼(Gefitinib)、伊馬替尼、伊沙匹隆(ixabepilone)、洛那法尼(LonaFarnib)、雷帕黴素、蘋果酸舒尼替尼(sunitinib malate)、他莫昔芬、替莫唑胺及西羅莫司脂化物(Temsirolimus)。

本說明書之態樣部分揭示一種組蛋白去乙醯基酶抑制劑。組蛋白去乙醯基酶抑制劑(HDAC抑制劑、HDACI或HDI)為一類干擾HDAC功能，且可引起組蛋白高度乙醯化，藉此影響基因表現之化合物。HDAC抑制劑根據化學結構來分類，且對1類、2類及4類HDAC具有不同特異性及親和力。在HDAC抑制劑中，最有效的是展現對乳癌之劑量依賴性抗腫瘤活性且近來已批准作為皮膚T細胞淋巴瘤之治療劑的異羥肟酸酯型(異羥肟酸型)HDAC抑制劑。異羥肟酸酯型HDAC抑制劑之非限制性實例包括曲古抑菌素A(Trichostatin A)、伏立諾他(Vorinostat)、M-344、CBHA、貝林司他(Belinostat)、達西司他(Dacinostat)及帕比司他(Panobinostat)。另一重要類別之臨床有效HDAC抑制劑為苯甲醯胺型HDAC抑制劑，其證實在實體及血液贅瘤中毒性及活性低。苯甲醯胺型HDAC抑制劑之非限制性實例包括恩替諾特(Entinostat)、泰克地那林(Tacedinaline)及莫西司他(Mocetinostat)。其他類HDAC抑制劑為短鏈脂肪酸(SCFA)，諸如苯丁酸酯、丙戊酸及類似脂族酸化合物；含有環氧酮及非環氧酮之環狀四肽，諸如曲泊辛B(trapoxin B)及縮肽(depsipeptide)；親電子酮及雜交分子。儘管SCFA已廣泛使用(尤其丙戊酸)且臨床上有效，但其HDAC抑制常數弱。去乙醯化酶(sirtuin)III類HDAC視NAD+而定，因此藉由菸鹼醯胺以及NAD之衍生物、二氫香豆素、萘并哌喃酮及2-羥基萘醛抑制。HDAC抑制劑亦為有效的輻射敏化劑。

後生修飾為正常細胞中調節基因之轉錄表現，且不改變DNA序列之可逆染色質重排。轉錄為自DNA產生蛋白質中所涉及之一個步驟。為發生轉錄，必須使轉錄因子結合至DNA上之特異性結合位點。當DNA呈其縮合形式時，轉錄因子難以以物理方式進入其同源結合位點，因此很少會發生此過程。

組蛋白為在基因之轉錄調節中起重要作用之蛋白質。由於胺基存在於離胺酸及精胺酸殘基上，故此等球狀蛋白質具有通常帶正電之可撓性N端。此等正電荷有助於組蛋白之N端部分與DNA主鏈上帶負電之磷酸酯基相互作用且結合。此組蛋白-DNA相互作用有助於DNA縮合為其緊密染色質形式，作為染色體。因此，藉由確保DNA以其縮合形式成束，組蛋白在限制轉錄因子與DNA之結合中起重要作用。

組蛋白與DNA之結合受細胞中所存在之各種酶控制。在支持某些基因轉錄之條件下，稱為組蛋白乙醯基轉移酶(HAT)或離胺酸去乙醯基酶(KDAC)之酶將乙醯基添加至組蛋白上之ε-N-乙醯基離胺酸殘基。乙醯化會中和組蛋白之N端區域上之正電荷，結果，乙醯化之組蛋白不再能夠與DNA主鏈相互作用。此降低之結合使染色質擴增(或染色質去縮合)，允許進行基因轉錄，因為轉錄因子現可進入其DNA結合位點且激活基因轉錄。在不再支持基因轉錄之條件下，稱為組蛋白去乙醯基酶(HDAC)之酶會移除由HAT添加之乙醯基。去乙醯化增加組蛋白之N端的正電荷，藉此促進組蛋白與DNA主鏈之間的高親和力結合。所得染色質縮合預防基因轉錄，因為轉錄因子在實體上被阻斷與其DNA結合位點相互作用。因此，HAT有助於染色質去縮合，因而促進基因轉錄，而HDAC有助於染色質縮合，因而抑制基因轉錄。

存在18種已知之人類HDAC，基於功能及其輔助性區域之DNA序列相似性分為4類。前兩類視為「傳統」HDAC，其活性由曲古抑菌素A(TSA)抑制，而第三組為不受TSA影響之NAD+依賴性蛋白質家族。第四類視為唯一基於與其他類之DNA序列相異性的非典型種類。I類包括HDAC1、HDAC2、HDAC3及HDAC8，且與酵母還原性鉀依賴蛋白3(RPD3)具有同源性。HDAC4、HDAC5、HDAC7及HDAC9屬於II類，且與酵母組蛋白去乙醯基酶1(HDA1)具有同源性。HDAC6及HDAC10含有兩個催化位點且分類為IIa類。亦稱為去乙醯化酶之III類與SIR2有關且包括SIRT1-7，而HDAC11處於IV類，此係因為其在其催化中心具有由I類與II類HDAC共用之保守殘基。

已知若干抗贅生性化合物充當HDAC抑制劑。因而，咸信抑制染色質縮合在癌症治療中可提供治療有益作用，此係因為該染色質重塑會導致1)關鍵細胞凋亡及細胞週期調節基因之轉錄抑制，藉此促進細胞週期停滯及細胞凋亡；2)腫瘤抑制劑之異型接合增加及/或3)血管生成之抑制。因此，經由染色質縮合來後生調節基因轉錄作為引起腫瘤發生之重要機制出現。

在此具體實例之態樣中，組蛋白去乙醯基酶抑制劑為異羥肟酸酯型組蛋白去乙醯基酶抑制劑或苯甲醯胺型組蛋白去乙醯基酶抑制劑。在此具體實例之其他態樣中，組蛋白去乙醯基酶抑制劑為(2E,4E,6R)-7-(4-二甲胺基苯基)-N-羥基-4,6-二甲基-7-側氧基庚-2,4-二烯醯胺、N-羥基-N'-苯基辛二醯胺、4-二甲胺基-N-(6-羥基胺甲醯基己基)-苯甲醯胺、N-羥基-3-[(E)-3-(羥胺基)-3-側氧基丙-1-烯基]苯甲醯胺、(2E)-3-[3-(苯胺基磺醯基)苯基]-N-羥基丙烯醯胺、((E)-N-羥基-3-[4-[[2-羥乙基-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、(E)-N-羥基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、N-(2-胺基苯基)-N'-苯基-辛二醯胺、4-(2-胺基苯基胺甲醯基)苄基胺基甲酸酯、4-乙醯胺基-N-(2-胺基苯基)苯甲醯胺、N-(2-胺基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)胺基]甲基]苯甲醯胺、3-(二甲胺基甲基)-N-[2-[4-(羥基胺甲醯基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲醯胺或{4-[(羥胺基)羰基]苯基}胺基甲酸{6-[(二乙胺基)甲基]-2-萘基}甲酯。此等抑制劑之化學結構如下所示。

曲古抑菌素A(2E,4E,6R)-7-(4-二甲胺基苯基)-N-羥基-4,6-二甲基-7-側氧基庚-2,4-二烯醯胺

伏立諾他(SAHA，佐利沙(Zolinza))N-羥基-N'-苯基辛二醯胺

M-344(D-237)4-二甲胺基-N-(6-羥基胺甲醯基己基)-苯甲醯胺

CBHA

N-羥基-3-[(E)-3-(羥胺基)-3-側氧基丙-1-烯基]苯甲醯胺

貝林司他(PXD-101，PX-105684)(2E)-3-[3-(苯胺基磺醯基)苯基]-N-羥基丙烯醯胺

達西司他(LAQ-824，NVP-LAQ824)((E)-N-羥基-3-[4-[[2-羥乙基-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺

帕比司他(LBH-589，NVP-LBH589)(E)-N-羥基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺

BML-210N-(2-胺基苯基)-N'-苯基-辛二醯胺

恩替諾特(MS-275，SNDX-275，MS-27-275)4-(2-胺基苯基胺甲醯基)苄基胺基甲酸酯

泰克地那林(CI-994，PD-123654，GOE-5549)4-乙醯胺基-N-(2-胺基苯基)苯甲醯胺

莫西司他(MGCD-0103)N-(2-胺基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)胺基]甲基]苯甲醯胺

PCI-247813-(二甲胺基甲基)-N-[2-[4-(羥基胺甲醯基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲醯胺

ITF-2357

{4-[(羥胺基)羰基]苯基}胺基甲酸{6-[(二乙胺基)甲基]-2-萘基}甲酯

本說明書之態樣部分揭示一種靶向治療劑。靶向治療化合物包括(但不限於)免疫治療、激素治療或血管生成抑制劑化合物。激素療法包含經由外源性投予特定激素，尤其類固醇激素或抑制該等激素產生或活性之藥物(激素拮抗劑)操縱內分泌系統。因為類固醇激素為某些癌細胞中基因表現之強驅動劑，所以改變某些激素之含量或活性可使某些癌症中止生長或甚至經歷細胞死亡。手術移除內分泌器官，諸如睾丸切除術及卵巢切除術亦可用作一種激素療法。

免疫療法為使用天然身體物質或由天然身體物質製造之藥物的治療。其刺激身體攻擊癌細胞且克服由其他癌症治療所引起之副作用。免疫療法使用免疫系統抑制癌症。主要前提為刺激患者之免疫系統以攻擊造成疾病之惡性腫瘤細胞。此可經由免疫患者實現，在此情況下患者自身之免疫系統經訓練以識別腫瘤細胞作為待破壞之標靶，或經由投予治療抗體作為藥物實現，在此情況下患者之免疫系統經補充以藉由治療抗體破壞腫瘤細胞。

本文所揭示之組成物可包含或不包含任何數量本文所揭示之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及誘發自體吞噬之癌症治療性化合物及其組合。舉例而言，組成物可包含例如兩種或兩種以上基於硫酮之自體吞噬抑制劑及/或誘發自體吞噬之癌症治療性化合物、三種或三種以上基於硫酮之自體吞噬抑制劑及/或誘發自體吞噬之癌症治療性化合物、四種或四種以上基於硫酮之自體吞噬抑制劑及/或誘發自體吞噬之癌症治療性化合物、或五種或五種以上基於硫酮之自體吞噬抑制劑及/或誘發自體吞噬之癌症治療性化合物。

本文所揭示之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及誘發自體吞噬之癌症治療性化合物或包含該或該等化合物之組成物通常作為醫藥組成物投予個體。醫藥組成物可藉由組合治療有效量之作為活性成分的至少一種如本文所揭示之化合物或其醫藥學上可接受之酸加成鹽與習知可接受之醫藥賦形劑，且藉由製備適用於治療用途之單位劑型來製備。如本文所用之術語「醫藥組成物」係指治療有效濃度之活性化合物，諸如本文所揭示之化合物中之任一者。醫藥組成物在投予個體時較佳不會產生不利、過敏或其他不當或不良反應。本文所揭示之醫藥組成物適用於醫學及獸醫學應用。醫藥組成物可單獨或與其他補充活性化合物、藥劑、藥物或激素組合投予個體。醫藥組成物可使用多個製程中之任一者來製造，該等製程包括(但不限於)習知混合、溶解、粒化、糖衣藥丸製造、研磨、乳化、囊封、包封及凍乾。醫藥組成物可呈多種形式中之任一者，包括(但不限於)無菌溶液、懸浮液、乳液、凍乾產物、錠劑、丸劑、藥丸、膠囊、散劑、糖漿、酏劑或適用於投予之任何其他劑型。

適用於非經腸注射之液體劑型可包含生理學上可接受之無菌水性或非水性溶液、分散液、懸浮液或乳液及用於復原成無菌可注射溶液或分散液之無菌散劑。適合水性及非水性載劑、稀釋劑、溶劑或媒劑之實例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇(PEG)、丙三醇及其類似物)、其適合混合物、植物油(諸如橄欖油)及可注射有機酯(諸如油酸乙酯)。例如可藉由使用諸如卵磷脂之塗層，在分散液之情況下藉由維持所要粒度，及藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。在液體調配物中，治療有效量典型地介於約0.0001%(w/v)至約50%(w/v)，較佳約0.001%(w/v)至約1.0%(w/v)之間。

適用於經口投藥之固體劑型包括膠囊、錠劑、丸劑、散劑及顆粒。在該等固體劑型中，活性化合物可與以下混合：至少一種諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣之惰性習用賦形劑(或載劑)；或(a)填充劑或增量劑，例如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇及矽酸；(b)黏合劑，例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及阿拉伯膠；(c)保濕劑，例如丙三醇；(d)崩解劑，例如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、海藻酸、某些複合矽酸鹽及碳酸鈉；(e)溶液延遲劑，例如石蠟；(f)吸收促進劑，例如四級銨化合物；(g)濕潤劑，例如鯨蠟醇及單硬脂酸甘油酯；(h)吸附劑，例如高嶺土及膨潤土；及(i)潤滑劑，例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉或其混合物。在膠囊、錠劑及丸劑之情況下，劑型亦可包含緩衝劑。在固體調配物中，治療有效量典型地介於約0.001 mg/kg至約100 mg/kg，較佳地約0.1 mg/kg至約10 mg/kg之間。

本文所揭示之醫藥組成物可視情況包括有助於將活性化合物加工成醫藥學上可接受之組成物的醫藥學上可接受之載劑。如本文所用之術語「醫藥學上可接受」係指彼等化合物、物質、組成物及/或劑型在可靠的醫學判斷範疇內，適於與人類及動物之組織接觸而無過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題併發症，與合理之益處/風險比相稱。如本文所用之術語「藥理學上可接受之載劑」與「藥理學載劑」同義且係指投予時實質上無長期或持久不利影響之任何載劑，且涵蓋諸如「藥理學上可接受之媒劑、穩定劑、稀釋劑、添加劑、助劑或賦形劑」之術語。此類載劑通常與活性化合物混合或允許稀釋或密封活性化合物，且可為固體、半固體或液體試劑。應瞭解，活性化合物可溶解或可呈於所需載劑或稀釋劑中之懸浮液形式遞送。可使用多種醫藥學上可接受之載劑中之任一者，包括(但不限於)水性介質，諸如水、鹽水、甘胺酸、玻糖醛酸及其類似物；固體載劑，諸如澱粉、硬脂酸鎂、甘露糖醇、糖精鈉、滑石、纖維素、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、碳酸鎂及其類似物；溶劑；分散介質；塗層；抗細菌劑及抗真菌劑；等張劑及吸收延遲劑；或任何其他非活性成分。藥理學上可接受之載劑的選擇可視投藥模式而定。除非任何藥理學上可接受之載劑與活性化合物不相容，否則涵蓋其用於醫藥學上可接受之組成物中。該等醫藥載劑之特定用途之非限制性實例可見於Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(Howard C. Ansel等人編,Lippincott Williams & Wilkins Publishers,第7版,1999)；Remington: The Science and Practice of Pharmacy(Alfonso R. Gennaro編,Lippincott,Williams & Wilkins,第20版,2000)；Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics(Joel G. Hardman等人編,McGraw-Hill Professional,第10版,2001)；及Handbook of Pharmaceutical Excipients(Raymond C. Rowe等人,APhA Publications,第4版,2003)中。此等方案為常規方案，且任何修改均完全在熟習此項技術者之技術範疇內且來自本文之教示。

本文所揭示之醫藥組成物可視情況包括(但不限於)其他醫藥學上可接受之組分(或醫藥組分)，包括(但不限於)緩衝劑、防腐劑、張力調節劑、鹽、抗氧化劑、滲透壓度調節劑、生理學物質、藥理學物質、增積劑、乳化劑、濕潤劑、甜味劑或調味劑及其類似物。可使用調整pH值之各種緩衝劑及方法來製備本文所揭示之醫藥組成物，其限制條件為所得製劑為醫藥學上可接受之製劑。該等緩衝劑包括(但不限於)乙酸鹽緩衝劑、硼酸鹽緩衝劑、檸檬酸鹽緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑、中性緩衝鹽水及磷酸鹽緩衝鹽水。應瞭解，可視需要使用酸或鹼來調整組成物之pH值。醫藥學上可接受之抗氧化劑包括(但不限於)偏亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、乙醯半胱胺酸、丁基化羥基大茴香醚及丁基化羥基甲苯。適用防腐劑包括(但不限於)氯化苯甲烴鍍、氯丁醇、硫柳汞、乙酸苯汞、硝酸苯汞、穩定氧基氯基組成物(諸如亞氯酸鈉)及螯合劑(諸如DTPA或DTPA-雙醯胺、DTPA鈣及CaNaDTPA-雙醯胺)。適用於醫藥組成物中之張力調節劑包括(但不限於)諸如氯化鈉、氯化鉀之鹽、甘露糖醇或丙三醇及其他醫藥學上可接受之張力調節劑。醫藥組成物可以鹽形式提供，且可與多種酸形成，該等酸包括(但不限於)鹽酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸等。鹽傾向於比相應游離鹼形式更可溶於水性或其他質子性溶劑中。應瞭解，藥理學技術中已知之此等及其他物質可包括於適用於本發明之醫藥組成物中。

亦可將本文所揭示之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及誘發自體吞噬之癌症治療性化合物併入藥物遞送平台中，以得到隨時間控制之化合物釋放曲線。此類藥物遞送平台包含本文所揭示之化合物分散在聚合物基質，典型生物可降解、生物可侵蝕及/或生物可再吸收聚合物基質內。如本文所用之術語「聚合物」係指合成之均聚物或共聚物、天然存在之均聚物或共聚物以及具有線性、分支或星形結構的其合成改質物或衍生物。共聚物可以任何形式排列，諸如無規、嵌段(block)、多嵌段(segmented)、遞變嵌段(tapered blocks)、接枝或三嵌段(triblock)形式。聚合物通常為縮合聚合物。聚合物可藉由引入交聯劑或改變側殘基之疏水性來進一步改質以增強其機械或降解特性。若交聯，則聚合物通常5%以下交聯，通常1%以下交聯。

適合聚合物包括(但不限於)海藻酸酯、脂族聚酯、草酸聚伸烷酯、聚醯胺、聚醯胺酯、聚酸酐、聚碳酸酯、聚酯、聚乙二醇、聚羥基脂族羧酸、聚原酸酯、聚氧雜酯、多肽、聚磷氮烯、多醣及聚胺基甲酸酯。聚合物通常包含至少約10%(w/w)、至少約20%(w/w)、至少約30%(w/w)、至少約40%(w/w)、至少約50%(w/w)、至少約60%(w/w)、至少約70%(w/w)、至少約80%(w/w)或至少約90%(w/w)之藥物遞送平台。適用於製造藥物遞送平台之生物可降解、生物可侵蝕及/或生物可再吸收之聚合物及方法的實例描述於例如Drost等人,Controlled Release Formulation,美國專利4,756,911；Smith等人,Sustained Release Drug Delivery Devices,美國專利5,378,475；Wong及Kochinke,Formulation for Controlled Release of Drugs by Combining Hyrophilic and Hydrophobic Agents,美國專利7,048,946；Hughes等人,Compositions and Methods for Localized Therapy of the Eye,美國專利公開案2005/0181017；Hughes,Hypotensive Lipid-Containing Biodegradable Intraocular Implants and Related Methods,美國專利公開案2005/0244464；Altman等人,Silk Fibroin Hydrogels and Uses Thereof,美國專利公開案2011/0008437；各文獻均以全文引用的方式併入本文中。

在此具體實例之態樣中，構成基質之聚合物為多肽，諸如絲纖蛋白、角蛋白或膠原蛋白。在此具體實例之其他態樣中，構成基質之聚合物為多醣，諸如纖維素、瓊脂糖、彈性蛋白、聚葡萄胺糖、甲殼素或葡糖胺聚糖樣硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸角質素或玻糖醛酸。在此具體實例之其他態樣中，構成基質之聚合物為聚酯，諸如D-乳酸、L-乳酸、外消旋乳酸、乙醇酸、己內酯及其組合。

一般技術者瞭解，適於形成適合所揭示藥物遞送平台之聚合物的選擇視若干因素而定。選擇適當聚合物之更多相關因素包括(但不限於)聚合物與藥物之相容性、藥物之所需釋放動力學、平台在植入部位之所需生物降解動力學、平台在植入部位之所需生物可侵蝕動力學、平台在植入部位之所需生物可再吸收動力學、平台之活體內機械性能、加工溫度、平台之生物相容性及患者耐受性。在一定程度上指示聚合物之試管內及活體內行為的其他相關因素包括化學組成、組分之空間分佈、聚合物之分子量及結晶度。

藥物遞送平台包括持續釋放藥物遞送平台與延緩釋放藥物遞送平台。如本文所用之術語「持續釋放」係指本文所揭示之化合物經約七天或七天以上之時間釋放。如本文所用之術語「延緩釋放」係指本文所揭示之化合物經小於約七天之時間釋放。

在此具體實例之態樣中，持續釋放藥物遞送平台經例如投予後約7天、投予後約15天、投予後約30天、投予後約45天、投予後約60天、投予後約75天或投予後約90天之時間以實質上一級釋放動力學釋放本文所揭示之化合物。在此具體實例之其他態樣中，持續釋放藥物遞送平台經例如投予後至少7天、投予後至少15天、投予後至少30天、投予後至少45天、投予後至少60天、投予後至少75天或投予後至少90天之時間以實質上一級釋放動力學釋放本文所揭示之化合物。

在此具體實例之態樣中，藥物遞送平台經例如投予後約1天、投予後約2天、投予後約3天、投予後約4天、投予後約5天或投予後約6天之時間以實質上一級釋放動力學釋放本文所揭示之化合物。在此具體實例之其他態樣中，藥物遞送平台經例如投予後至多1天、投予後至多2天、投予後至多3天、投予後至多4天、投予後至多5天或投予後至多6天之時間以實質上一級釋放動力學釋放本文所揭示之化合物。

本說明書之其他態樣部分揭示一種醫藥套組，其包括包含治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物及包含治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物。

本發明之態樣部分提供一種癌症。本文所揭示之基於硫酮之自體吞噬抑制劑、誘發自體吞噬之癌症治療性化合物、包含該等化合物之組成物及方法可適用於治療任何癌症。癌症為一組100種以上之疾病，其中一組細胞顯示在哺乳動物體內不受控制地增殖，因而根本上為影響身體用以控制細胞分裂及生長之調節機制的疾病。大多數情況下，癌細胞會形成一團稱為腫瘤之細胞，但在如白血病之一些癌症中，該等細胞不會形成腫瘤。腫瘤可為惡性腫瘤或良性腫瘤。此外，惡性腫瘤(或癌症)包含具有異常遺傳物質之細胞且通常經歷快速且不受控制之細胞生長，侵入並破壞鄰近組織，且有時經由淋巴或血液擴散至體內其他位置(亦即轉移)。癌症與高死亡發生率相關，此係因為若遍及身體之癌細胞之侵入及轉移未中止，則癌細胞將侵入生命器官中且導致器官功能障礙且最終死亡。癌症之惡性特性不同於良性腫瘤，良性腫瘤通常生長緩慢且具有自限性，不會侵入或轉移，因而通常不會危急生命。局部期、區域期或遠端期癌症視為侵襲性癌症。僅在幾層細胞中發現之稱為原位癌之極早期癌症視為非侵襲性癌症。

癌症為起因及生物學相差很大之不同類別之疾病。癌症由多種因素單獨或組合作用引起。一些癌症係由諸如菸草、飲食、某些化學品、輻射及病毒之外部因素引起。其他癌症係由諸如激素、免疫狀況及遺傳突變之內部因素引起。曝露於引起癌症之因素至可偵測到疾病通常經過十年或十年以上。

癌症通常藉由類似腫瘤之細胞的類型分類，因此，假定該組織為腫瘤之來源。癌瘤為源自上皮細胞之惡性腫瘤。此群組代表最常見癌症，包括常見形式之肺癌、腦癌、中樞神經系統癌、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌及卵巢癌。肉瘤為源自結締組織或間質細胞之惡性腫瘤。胚細胞瘤通常為類似未成熟或胚性組織之惡性腫瘤。此等腫瘤中之多者在兒童中最常見。淋巴瘤及白血病為源自造血(血液形成)細胞之惡性病。最後，生殖細胞腫瘤為源自全能細胞之腫瘤。成人中，最常見於睾丸及卵巢中；在胎兒、嬰兒及幼兒中最常見於身體中線，尤其尾骨尖端。因而，如本文所用之術語「癌症」包括可為癌瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病、胚細胞瘤或生殖細胞腫瘤之原發性癌症及轉移性癌症。

本發明之態樣部分提供減輕與癌症相關之症狀。在此具體實例之一態樣中，所減輕之症狀為癌細胞生長速度的增加。在此具體實例之另一態樣中，所減輕之症狀為癌細胞之細胞分裂速度的增加。在此具體實例之另一態樣中，所減輕之症狀為癌細胞侵入鄰近組織或器官之程度的增加。在此具體實例之另一態樣中，所減輕之症狀為轉移程度的增加。在此具體實例之另一態樣中，所減輕之症狀為血管生成的增加。在此具體實例之另一態樣中，所減輕之症狀為細胞凋亡的減少。在此具體實例之另一態樣中，所減輕之症狀為細胞死亡或細胞壞死的減少。因此，使用本文所揭示之化合物、組成物及方法進行治療將降低癌細胞之生長速度、降低癌細胞之細胞分裂速率、降低癌細胞侵入鄰近組織或器官之程度、降低轉移程度、減少血管生成、增加細胞凋亡及/或增加細胞死亡及/或細胞壞死。

本發明之態樣部分提供一種哺乳動物。哺乳動物包括人類，且人類可為患者。本發明之其他態樣部分提供一種個體。個體包括哺乳動物及人類，且人類可為患者。

本發明之態樣部分提供投予包含本文所揭示之化合物的組成物。如本文所用之術語「投予」意謂向個體提供包含本文所揭示之化合物的組成物且可能產生臨床上、治療上或實驗上有益之結果的任何遞送機制。

包含本文所揭示之化合物的組成物可同時或依序投予。因而，包含基於硫酮之自體吞噬抑制劑之組成物可與包含誘發自體吞噬之癌症治療性化合物之組成物在同一時間(同時)或在不同時間點以任何次序依序投予。此外，如所用之同時可能意謂基於硫酮之自體吞噬抑制劑與誘發自體吞噬之癌症治療性化合物可在同一時間作為一種醫藥組成物之一部分獲取，或在同一時間但以各別醫藥組成物一起獲取。因此，各組分可分別投予但時間足夠靠近，以便提供所需治療作用。或者，基於硫酮之自體吞噬抑制劑及誘發自體吞噬之癌症治療性化合物之投予可在彼此間隔約一小時內、彼此間隔約兩小時內或彼此間隔約三小時內。

包含本文所揭示之化合物的組成物可投予一或多個週期。在一具體實例中，一個週期包含每四天一次，共七次。

包含本文所揭示之化合物之組成物的投予包括多種腸內或非經腸方法，包括(但不限於)以諸如錠劑、液體、膠囊、散劑或其類似形式之任何可接受形式經口投予；以諸如滴劑、噴霧劑、乳膏、凝膠或軟膏之任何可接受形式局部投予；以任何可接受形式經頰內、經鼻及/或吸入投予；以任何可接受形式經直腸投予；以任何可接受形式經陰道投予；以諸如靜脈內快速注射、靜脈內輸注、動脈內快速注射、動脈內輸注及導管滴注至血管結構之任何可接受形式經血管內投予；以諸如腹膜內注射、肌肉內注射、皮下注射、皮下輸注、眼球內注射、視網膜注射或視網膜下注射或硬膜外注射之任何可接受形式經組織周圍及組織內投予；以諸如導管滴注之任何可接受形式經囊泡內投予；及藉由置放裝置，諸如植入物、支架、貼片、藥丸、導管、滲透泵、栓劑、生物可侵蝕遞送系統、非生物可侵蝕遞送系統或另一植入之延緩或緩慢釋放系統。生物可降解聚合物之例示性清單及使用方法描述於例如Handbook of B iodegradable Polymers(Abraham J. Domb等人編,Overseas Publishers Association,1997)中。

可使用多種途徑向哺乳動物投予包含本文所揭示之化合物之組成物。適用於如本文所揭示之癌症治療方法之投藥途徑包括局部與全身投藥。與哺乳動物全身相比，局部投藥可使組成物明顯更多地遞送至特定位置，而全身投藥可使組成物基本上遞送至個體之全身中。適用於如本文所揭示之癌症治療方法之投藥途徑亦包括中樞投藥與周邊投藥。中樞投藥可使組成物基本上遞送至個體之中樞神經系統且包括例如鞘內投藥、硬膜外投藥以及顱部注射或植入。周邊投藥可使組成物基本上遞送至個體中樞神經系統外之任何區域，且涵蓋除直接投至脊柱或腦以外之任何投藥途徑。哺乳動物中所用之包含本文所揭示之化合物之組成物的實際投藥途徑可由一般技術者考慮包括(但不限於)以下之因素來確定：癌症類型、癌症位置、癌症起因、癌症嚴重程度、所需減輕之程度、所需減輕之持續時間、所用之特定化合物、分泌所用化合物之速率、所用化合物之藥效學、包括於組成物中之其他化合物之性質、特定投藥途徑、具體特性、個體之病史及風險因素(諸如年齡、重量、一般健康狀況及其類似因素)或其任何組合。

在一具體實例中，向哺乳動物全身投予包含本文所揭示之化合物之組成物。在另一具體實例中，向哺乳動物局部投予包含本文所揭示之化合物之組成物。在此具體實例之一態樣中，向哺乳動物之腫瘤投予包含本文所揭示之化合物之組成物。在此具體實例之另一態樣中，向哺乳動物之腫瘤周圍區域投予包含本文所揭示之化合物之組成物。

本發明之態樣部分提供投予治療有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物。如本文所用之術語「治療有效量」與「治療有效劑量」同義，且在關於治療癌症使用時意謂達到所需治療作用所必需之本文所揭示之化合物的最小劑量且包括足以減輕與癌症相關之症狀的劑量。在此具體實例之態樣中，治療有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物可減輕與癌症相關之症狀例如至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少100%。在此具體實例之其他態樣中，治療有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物可減輕與癌症相關之症狀例如至多10%、至多20%、至多30%、至多40%、至多50%、至多60%、至多70%、至多80%、至多90%或至多100%。在此具體實例之其他態樣中，治療有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物可減輕與癌症相關之症狀例如約10%至約100%、約10%至約90%、約10%至約80%、約10%至約70%、約10%至約60%、約10%至約50%、約10%至約40%、約20%至約100%、約20%至約90%、約20%至約80%、約20%至約20%、約20%至約60%、約20%至約50%、約20%至約40%、約30%至約100%、約30%至約90%、約30%至約80%、約30%至約70%、約30%至約60%或約30%至約50%。在此具體實例之其他態樣中，本文所揭示之化合物之治療有效量為足以減輕與癌症相關之症狀例如至少一週、至少一個月、至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月、至少七個月、至少八個月、至少九個月、至少十個月、至少十一個月或至少十二個月的劑量。

用於治療癌症之組成物及方法中活性組份之量可改變以便獲得適合劑量。待投予哺乳動物的包含本文所揭示之化合物之組成物的實際治療有效量可由一般技術者考慮包括(但不限於)以下之因素來確定：癌症類型、癌症位置、癌症起因、癌症嚴重程度、治療持續時間、所需減輕之程度、所需減輕之持續時間、所用之特定化合物、所用化合物之分泌速率、所用化合物之藥效學、組成物中所包括之其他化合物的性質、特定投藥途徑、具體特性、個體之病史及風險因素(諸如年齡、重量、一般健康狀況及其類似因素)、待治療之個體的反應或其任何組合。因此活性組份之有效劑量可容易地由一般技術者考慮所有準則且利用其對個體利益之最佳判斷來確定。

另外，在重複投予包含本文所揭示之化合物之組成物的情況下，包含本文所揭示之化合物之組成物的實際有效量將進一步視包括(但不限於)以下之因素而定：投藥頻率、包含本文所揭示之化合物之組成物的半衰期或其任何組合。一般技術者已知，在投予人類之前，包含本文所揭示之化合物之組成物的有效量可由使用動物模型之試管內檢定及活體內投藥研究來推斷。鑒於各種投藥途徑之不同效率，預期必需有效量廣泛變化。舉例而言，預期與藉由靜脈內或玻璃體內注射投藥相比，經口投藥通常需要較高劑量。此等劑量變化可使用一般技術者熟知之最佳化標準經驗程序來調整。精確之治療有效劑量及模式較佳由主治醫師考慮上文所指出之因素來確定。

作為非限制性實例，當向哺乳動物投予包含本文所揭示之化合物的組成物時，治療有效量通常在約0.001 mg/kg至約100.0 mg/kg之範圍內。在此具體實例之態樣中，包含本文所揭示之化合物之組成物的有效量可為例如約0.01 mg/kg至約0.1 mg/kg、約0.03 mg/kg至約3.0 mg/kg、約0.1 mg/kg至約3.0 mg/kg或約0.3 mg/kg至約3.0 mg/kg。在此具體實例之其他態樣中，包含本文所揭示之化合物之組成物的治療有效量可為例如至少0.001 mg/kg、至少0.01 mg/kg、至少0.1 mg/kg、至少1.0 mg/kg、至少10 mg/kg或至少100 mg/kg。在此具體實例之其他態樣中，包含本文所揭示之化合物之組成物的治療有效量可為例如至多0.001 mg/kg、至多0.01 mg/kg、至多0.1 mg/kg、至多1.0 mg/kg、至多10 mg/kg或至多100 mg/kg。

給藥可為單次劑量或累積劑量(連續給藥)，且可容易由熟習此項技術者確定。舉例而言，癌症治療可包含一次投予有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物。作為非限制性實例，有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物可例如以在展現癌症症狀之部位或附近單次注射或沈積或單次經口投予藥物的形式一次投予哺乳動物。或者，癌症治療可包含在諸如每天、每隔幾天一次、每週、每月或每年時間範圍內多次投予有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物。作為非限制性實例，包含本文所揭示之化合物的組成物可向哺乳動物每週投予一次或兩次。投藥時間選擇可隨各哺乳動物而變化，視諸如哺乳動物症狀之嚴重程度的因素而定。舉例而言，可一月一次向哺乳動物投予有效量之包含本文所揭示之化合物的組成物，無限期或直至哺乳動物不再需要治療。一般技術者將認識到，可監測整個治療過程中哺乳動物之狀況，因此可調整所投包含本文所揭示之化合物之組成物的有效量。

基於硫酮之自體吞噬抑制劑與誘發自體吞噬之癌症治療性化合物同時或依序組合投藥可提供有益於治療如本文所揭示之癌症的協同治療作用。協同治療作用為本文所揭示之化合物或組成物組合投予時與癌症相關之症狀減輕程度比個別投予相同化合物時大之作用。在此具體實例之態樣中，組合投予本文所揭示之化合物或組成物相對於單獨投予相同基於硫酮之自體吞噬抑制劑或相同誘發自體吞噬之癌症治療性化合物，減輕與癌症相關之症狀例如至少10%以上、至少20%以上、至少30%以上、至少40%以上、至少50%以上、至少60%以上、至少70%以上、至少80%以上、至少90%以上或至少100%以上。

包含本文所揭示之化合物的組成物亦可與其他治療化合物組合投予哺乳動物，以增強治療之總體治療作用。使用多種化合物治療適應症可增強有益作用，同時減少副作用之存在。

本說明書之態樣部分揭示一種放射線療法。在一具體實例中，藉由投予本文所揭示之TAPI及CTAPIC治療癌症之方法可進一步包含投予放射線療法。放射線療法可在投予本文所揭示之化合物及組成物之前、之後或期間投予。在另一具體實例中，治療癌症之方法包含投予TAPI及放射線療法，而非CTAPIC。

輻射可以多種方式投予。舉例而言，自然界中輻射可為電磁輻射或粒子輻射。適用於實施本發明之電磁輻射包括(但不限於)x射線及γ射線。在一較佳具體實例中，超高壓x射線(x射線>=4 MeV)可用於實施本發明。適用於實施本發明之粒子輻射包括(但不限於)電子束、質子束、中子束、α粒子及負π介子。可使用習知放射性治療設備及方法且藉由手術及立體定位方法遞送輻射。關於適用於實施本發明之輻射治療之其他討論可見於整個Steven A. Leibel等人,Textbook of Radiation Oncology(1998)(W. B. Saunders公司出版)中，且尤其第13章及第14章中。輻射亦可藉由諸如靶向遞送之其他方法，例如藉由放射性「種子」或藉由靶向放射性結合物之全身遞送來遞送。J. Padawer等人,Combined Treatment with Radioestradiol Lucanthone in Mouse C3HBA Mammary Adenocarcinoma and with Estradiol Lucanthone in an Estrogen Bioassay,Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 7:347-357(1981)。可使用其他輻射遞送方法實施本發明。

遞送至所需治療體積(treatment volume)之輻射量可改變。在一較佳具體實例中，當輻射與本文所揭示之化合物或組成物一起投予時，輻射可以有效使宿主中中樞神經系統之癌症停滯或退化之量投予。在另一具體實例中，向治療體積投予至少約1戈瑞(Gy)份輻射至少每隔一天一次，且更佳向治療體積投予至少約2戈瑞(Gy)份輻射至少每天一次，甚至更佳向治療體積投予至少約2戈瑞(Gy)份輻射至少每天一次，每週連續五天。在另一具體實例中，每隔一天向治療體積投予3 Gy份輻射，每週三次。在另一具體實例中，向初始治療體積投予開始23份，而向增強治療體積遞送另外7治療份。在又一具體實例中，向有需要之宿主投予總計至少約20 Gy，更佳至少約30 Gy，最佳至少約60 Gy之輻射。在另一更佳具體實例中，向整個大腦，而非向治療體積投予輻射。當輻射整個大腦時，推薦最大值劑量為30 Gy。在一最佳具體實例中，向宿主之整個大腦投予輻射，其中宿主正進行轉移性癌症之治療。

在一較佳具體實例中，治療體積包含經CT或MRI掃描之對比度增強病變，更佳為對比度增強病變及周圍水腫，又更佳為經CT或MRI掃描之對比度增強病變及周圍水腫加至少約1 cm邊緣部分。

治療計劃可包括(但不限於)對側區域、一對楔狀區域、旋轉或多區域技術。CT引導之治療計劃表明可提高區域排列選擇之精確度。針對所有患者，提出初始治療體積及縮小(cone-down)治療體積之等劑量分佈，包括具有平行相對區域者。需要顯示初始治療體積及增強治療體積之劑量分佈的綜合計劃。治療體積之最小及最大劑量較佳保持在治療體積中心劑量之約10%內。

本發明之揭示之態樣亦可如下描述：

1.　一種醫藥組成物，其包含治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑。

2.　一種醫藥組成物，其包含治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物。

3.　一種醫藥組成物，其包含：

a)治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑；及

b)治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物。

4.　如具體實例1至3之組成物，其中該組成物進一步包含醫藥學上可接受之載劑。

5.　如具體實例1、3或4之組成物，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑為1-((2-(二乙胺基)乙基)胺基)-4-甲基硫-9-酮、1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮、N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻-4-基]甲基]甲烷磺醯胺、其吲唑類似物或其鹽。

6.　如具體實例2至4之組成物，其中該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物為三氧化二砷、依託泊苷、雷帕黴素、組蛋白去乙醯基酶抑制劑、酪胺酸激酶抑制劑、他莫昔芬、替莫唑胺、伊馬替尼或硼替佐米。

7.　如具體實例6之組成物，其中該組蛋白去乙醯基酶抑制劑為異羥肟酸酯型組蛋白去乙醯基酶抑制劑或苯甲醯胺型組蛋白去乙醯基酶抑制劑。

8.如具體實例6之組成物，其中該組蛋白去乙醯基酶抑制劑為(2E,4E,6R)-7-(4-二甲胺基苯基)-N-羥基-4,6-二甲基-7-側氧基庚-2,4-二烯醯胺、N-羥基-N'-苯基辛二醯胺、4-二甲胺基-N-(6-羥基胺甲醯基己基)-苯甲醯胺、N-羥基-3-[(E)-3-(羥胺基)-3-側氧基丙-1-烯基]苯甲醯胺、(2E)-3-[3-(苯胺基磺醯基)苯基]-N-羥基丙烯醯胺、((E)-N-羥基-3-[4-[[2-羥乙基-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、(E)-N-羥基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、N-(2-胺基苯基)-N'-苯基-辛二醯胺、4-(2-胺基苯基胺甲醯基)苄基胺基甲酸酯、4-乙醯胺基-N-(2-胺基苯基)苯甲醯胺、N-(2-胺基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)胺基]甲基]苯甲醯胺、3-(二甲胺基甲基)-N-[2-[4-(羥基胺甲醯基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲醯胺或{4-[(羥胺基)羰基]苯基}胺基甲酸{6-[(二乙胺基)甲基]-2-萘基}甲酯。

9.一種如具體實例1至8之組成物的用途，其係用於製造供治療癌症之藥劑。

10.一種治療癌症之方法，該方法包含a)向有需要之哺乳動物投予有效量的如具體實例1或3至6之基於硫酮之自體吞噬抑制劑；及b)向有需要之哺乳動物投予有效量的如具體實例2至6之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物；其中投予該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物減輕與癌症相關之症狀，藉此 治療該癌症。

11.一種如具體實例1至8之組成物的用途，其係用於治療癌症，其中投予該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物減輕與癌症相關之症狀，藉此治療該癌症。

12.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與誘發自體吞噬之癌症治療性化合物同時投予。

13.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物依序投予。

14.如具體實例13之方法或用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物在彼此間隔約三小時內投予。

15.如具體實例13之方法或用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物在彼此間隔約兩小時內投予。

16.如具體實例13之方法或用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物在彼此間隔約一小時內投予。

17.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及該治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物以單一的每日劑或分成一個以上的每日劑投予。

18.如具體實例17之方法或用途，其中該一個以上的每日劑為兩個每日劑。

19.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物經口投予。

20.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物非經腸投予。

21.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物以膠囊或錠劑形式投予。

22.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物以一或多個週期投予。

23.如具體實例10之方法或如具體實例11之用途，其中該一個週期包含每四天一次，共七次。

24.如具體實例10或12至23之方法或如具體實例11至23之用途，其中該癌症為肺癌、腦癌、中樞神經系統癌、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢癌。

25.如具體實例24之方法或用途，其中該肺癌為非小細胞肺癌。

26.如具體實例10至25之方法或用途，其中該方法或用途進一步包含投予輻射療法、激素療法或免疫療法。

27.一種醫藥套組，其包含： a)包含治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物，及b)包含治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物。

28.一種治療癌症之方法，該方法包含a)向有需要之哺乳動物投予有效量之如具體實例1、4或5之基於硫酮之自體吞噬抑制劑；及b)向有需要之哺乳動物投予有效量之電離輻射；其中投予該基於硫酮之自體吞噬抑制劑與該電離輻射減輕與癌症相關之症狀，藉此治療該癌症。

29.一種治療癌症之方法，該方法包含a)向有需要之哺乳動物投予有效量之如具體實例1或3至6之基於硫酮之自體吞噬抑制劑；及b)向有需要之哺乳動物投予有效量之如具體實例1、4或6至8之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物；及c)向有需要之哺乳動物投予有效量之電離輻射；其中投予該基於硫酮之自體吞噬抑制劑、該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物及該電離輻射減輕與癌症相關之症狀，藉此治療該癌症。

31.一種如具體實例1、4或5之組成物的用途，其係用於治療有需要之哺乳動物之癌症，其中投予該基於硫酮之自體吞噬抑制劑聯合投予有效量之電離輻射減輕與癌症相關之症狀，藉此治療該癌症。

32.一種如具體實例1至8之組成物的用途，其係用於治療有需要之哺乳動物之癌症，其中投予該基於硫酮之自體吞噬抑制劑、該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物或兩者聯合投予有效量之電離輻射降減輕與癌症相關之症狀，藉此治療該癌症。

實施例

以下非限制性實施例僅為說明性目的而提供，以有助於更完整地瞭解目前所涵蓋之代表性具體實例。不應將此等實施例視為限制本說明書所述之任何具體實例，包括與治療癌症之化合物、醫藥組成物、醫藥套組或方法有關之具體實例。

實施例1硫蒽酮抑制自體吞噬降解

硫蒽酮誘導溶酶體膜滲透(LMP)。 自體吞噬藉由使癌細胞重複利用細胞組分產生ATP來促進細胞存活且產生抗藥性。據此，以遺傳方式或使用諸如3-MA之化合物抑制自體吞噬可增強許多抗癌劑之活性。硫蒽酮為抗血吸蟲劑，基於其化學結構，可破壞溶酶體功能且抑制自體吞噬降解之最後一步。為測試此假設，將乳癌細胞用硫蒽酮或氯奎寧(chloroquine)處理，且檢定LC3-II之積聚、空泡形成之增加及溶酶體膜滲透之出現。

藉由免疫細胞化學觀測LC3-II之積聚。將來自MDA-MB-231乳癌細胞系之細胞塗於腔室載片上且附著隔夜。接著用10 μM硫蒽酮或50 μM氯奎寧處理細胞48小時。在藥物處理之後，用4%三聚甲醛固定細胞，使用0.2% TRITON-X-100滲透且與所指示之一次抗體一起培育隔夜。使用Alexa Fluor 488結合之螢光二次抗體觀測蛋白質定位。使用具有DP71相機及60X物鏡之Olympus螢光顯微鏡(Center Valley,PA)捕捉影像。使用Image-Pro Plus軟體6.2.1版(MediaCybernetics,Bethesda,MD)獲取影像。

空泡形成之增加藉由吉姆沙染色(Giemsa staining)及穿透式電子顯微術觀測。將來自MDA-MB-231乳癌細胞系之細胞塗於腔室載片中且用10 μM硫蒽酮或50 μM氯奎寧處理48小時。在藥物處理之後，用PBS洗滌細胞且用甲醇固定5分鐘。接著在用去離子水1:20稀釋之Giemsa染色劑中培育細胞1小時。用水沖洗細胞且使用Olympus螢光顯微鏡成像。使用Image-Pro Plus軟體6.2.1版獲取影像。使用常規程序執行細胞之透射電子顯微術。用LKB Ultracut切片機(Leica,Deerfield,IL)切割切片，用乙酸鈾醯及檸檬酸鉛染色，且用JEM 1230透射電子顯微鏡(JEOL,USA公司,Peabody,MA)檢查。使用AMT成像系統(Advanced Microscopy Techniques公司,Danvers,MA)捕捉影像。

藉由吖啶橙螢光損失來監測LMP之出現。藉由吖啶橙染色觀測酸性溶酶體。在用10 μM硫蒽酮或50 μM氯奎寧處理48小時之後，在37℃下用1 μM吖啶橙染色來自MDA-MB-231乳癌細胞系之細胞15分鐘。用PBS洗滌細胞且使用Olympus螢光顯微鏡捕捉影像。基於酸度，溶酶體表現為橙色螢光細胞質囊。5個隨機區域吖啶橙強度之定量由免疫螢光法量測，且使用Image-Pro Plus軟體6.2.1版獲取影像。

硫蒽酮誘導LC3-1至LC3-II之脂質改質，特徵為LC3之點狀定位至自噬小體(圖IB)。硫蒽酮亦誘導細胞質空泡形成，其為溶酶體膜滲透及自體吞噬之特徵(圖IB)。此外，在用氯奎寧及硫蒽酮處理之後，硫蒽酮降低溶酶體之紅色染色強度，其中吖啶橙指示溶酶體酸度損失(圖1B及圖IC)。

抑制自體吞噬引起蛋白質積聚。 在由透射電子顯微術觀測時硫蒽酮或氯奎寧誘導電子緻密顆粒積聚，表明蛋白質聚集(圖1B)。為確定此發現，用硫蒽酮或氯奎寧處理乳癌細胞且檢定多泛素結合蛋白p62或死骨片I(sequestosome I，SQSTMI)之積聚。此蛋白質由自體吞噬降解，侷限於細胞包涵體中，且已提出其在藉由自體吞噬促進蛋白質聚集體清除中起作用。因而，此過程之破環將引起SQSTMI/p62積聚。

SQSTMI/p62之含量及聚集分別藉由免疫墨點法及免疫細胞化學法測定。對於免疫墨點法，用10 μM硫蒽酮或50 μM氯奎寧培育MDA-MB-231乳癌細胞系癌細胞48小時。收集細胞，接著使用常規程序溶解。使約50 μg來自各樣品之全部細胞蛋白質經受SDS-PAGE，將蛋白質轉移至硝化纖維薄膜，且用含有0.1% TWEEN-20之Tris緩衝鹽水溶液中5%脫脂乳阻斷該等薄膜1小時。接著在4℃下用一次抗體探查墨點隔夜，洗滌且用偶合至辣根過氧化酶之物種特異性二次抗體探查。藉由增強之化學發光法(West Pico,Pierce公司,Rockville,IL)偵測免疫活性物質。

與自體吞噬抑制之其他標記物一致，在用硫蒽酮處理之後，SQSTMI/p62含量劇增(圖ID)。免疫細胞化學法顯示在基本條件下SQSTMI/p62呈現擴散染色模式，但對硫蒽酮起反應而聚集。此等結果指示，硫蒽酮刺激SQSTM1/p62積聚及聚集，此作用與所報導之SQSTM1/p62與泛素化蛋白質之相互作用一致(圖ID)。

實施例2硫蒽酮對乳癌細胞具有細胞毒性

已報導在癌細胞中溶酶體膜滲透及隨後自體吞噬之抑制會誘發細胞死亡。為研究硫蒽酮之抗癌活性，由MTT檢定使用一組七種乳癌細胞系來量測細胞生存力。

將來自乳癌細胞系MDA-MB-231、HCC1954、BT-474、SKBR-3、MDA-MB-435、HCC1937及BT-20之細胞以每孔10,000個細胞接種至96孔微量培養盤中，且附著24小時。接著用不同濃度之硫蒽酮或氯奎寧處理細胞72小時。藥物處理之後，添加溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓(MTT)且使用BioTek(Winooski,VT)微定量盤式讀取器定量細胞生存力。試管內藥物曝露後之促細胞凋亡作用藉由子G₀/G₁ DNA含量之碘化丙啶(PI)染色及螢光激活細胞分選(FACS)分析來定量。資料表示三個獨立實驗。IC₅₀值由MTT檢定之結果計算。

在一組七種乳癌細胞系中硫蒽酮降低細胞生存力之程度類似(圖2)。另外，直接比較顯示在降低乳癌細胞生存力方面與CQ相比硫蒽酮明顯更有效，其中相對於CQ 66 μM之平均IC₅₀，硫蒽酮之平均IC₅₀為7.2 μM(圖2)。

實施例3硫蒽酮誘導組織蛋白酶D表現

使用Affymetrix表現陣列定性硫蒽酮對癌細胞之作用。 為進一步定性硫蒽酮對乳癌細胞之作用，對乳癌細胞系執行表現概況分析。用10 μM硫蒽酮處理來自MDA-MB-231及BT-20乳癌細胞系之細胞48小時。使用RNeasy Plus小型套組(Qiagen,Germantown,MD)分離總RNA且用TURBO DNA-free^TM套組(Applied Biosystems,Foster City,CA)處理。將每樣品300 ng總RNA擴增且根據製造商之說明書與人類基因1.0 ST陣列(Affymetrix公司,Santa Clara,CA)雜交。此等陣列用764,885個不同探針檢定約28,869個良好註釋之基因的表現。使用預設Partek正規化參數及針對探針序列及GC含量調整之穩固多陣列平均(RMA)分析(GC-RMA)將Affymetrix CEL檔案輸入 Genomics Suite^TM 6.4(Partek公司,St. Louis,MO)中。使用分位數正規化在所有陣列上執行資料正規化。鑑別顯著上調之基因(p<0.05及增加>4倍)。資料表示在硫蒽酮處理之後上調至少4倍之基因。

在由硫蒽酮誘導之基因中，組織蛋白酶D(CTSD)、基質金屬蛋白酶-1(MMP1)及細胞色素P450第1族成員AI(CYPIAI)在兩個細胞系中均增加(圖3A)。

組織蛋白酶D之定量即時PCR分析。 溶酶體蛋白酶組織蛋白酶D為細胞凋亡之關鍵介體且已報導其釋放至細胞溶質中以促進細胞死亡。鑒於此，使用定量即時PCR(qRT-PCR)進一步評估硫蒽酮介導之細胞死亡期間組織蛋白酶D之作用。為執行qRT-PCR，用10 μM硫蒽酮處理來自MDA-MB-231或BT-20細胞系之細胞48小時，接著收集進行分析。使用RNeasy Plus小型套組(Qiagen,Germantown,MD)分離總RNA且用TURBO DNAfree^TM套組(Applied Biosystems,Foster City,CA)處理。使用高能力cDNA反轉錄套組(Applied Biosystems,Foster City,CA)由含1 μg RNA之20 μL反應混合物合成第一股cDNA。使用市售TaqMan＠基因表現檢定(Applied Biosystems,Foster City,CA)擴增組織蛋白酶D及GAPDH轉錄物。mRNA之含量相對於GAPDH之表現標準化且用2^-ΔCt方法計算相對基因表現。

定量即時PCR(qRT-PCR)確定在兩種細胞系中硫蒽酮誘導組織蛋白酶D含量顯著增加(圖3B)。此外，如免疫細胞化學所量測，硫蒽酮亦顯著增加組織蛋白酶D蛋白質含量且促進其胞內聚集(圖3C)。

實施例4組織蛋白酶D之誘導促進硫蒽酮介導之細胞凋亡

乳癌中組織蛋白酶D之表現。 因為組織蛋白酶D明顯促進硫蒽酮介導之細胞凋亡，所以在四種乳癌細胞系中藉由免疫墨點法研究組織蛋白酶D之表現及藉由PI-FACS研究細胞凋亡。將來自乳癌細胞系MDA-MB-231、BT-474、SKBR-3及BT-20之細胞以每孔10,000個細胞接種至96孔微量培養盤中，且附著24小時。接著用10 μM硫蒽酮處理細胞72小時(對於細胞凋亡檢定而言48小時)。對於免疫墨點法，在處理之後收集細胞且如上所述測定組織蛋白酶D含量。試管內藥物曝露後之促細胞凋亡作用藉由子G₀/G₁ DNA含量之碘化丙啶(PI)染色及螢光激活細胞分選(FACS)分析來定量。資料表示三個獨立實驗。如所預期，組織蛋白酶D含量在硫蒽酮處理之後劇增(圖4A)且與細胞凋亡相關聯(圖4B)。

組織蛋白酶D之表現阻抑減少硫蒽酮誘發之細胞凋亡。 為進一步確定組織蛋白酶D於硫蒽酮誘導之細胞凋亡中之機械作用，使用siRNA阻抑其基因表現(圖4C)。自Dharmacon(Lafayette,CO)獲得組織蛋白酶D及非標靶SMARTpool siRNA之siRNA製劑。使用Oligofectamine(Invitrogen,Carlsbad,CA)，根據製造商之方案，用100 nM非標靶或組織蛋白酶D siRNA轉染來自MDA-MB-231乳癌細胞系之細胞。在37℃下培育轉染之細胞24小時，接著用10 μM硫蒽酮處理48小時。在第48小時藉由免疫墨點法使用α-組織蛋白酶D抗體量測RNAi之效率。藉由PI染色及流式細胞測量術測定細胞凋亡。結果指示組織蛋白酶D含量降低之細胞對硫蒽酮介導之細胞凋亡的敏感性明顯較小(圖4D)。

實施例5p53不會減少組織蛋白酶D積聚或降低硫蒽酮活性

p53功能損失為人類癌症中與腫瘤形成及抗藥性相關之常見事件。因此，具有與p53狀態無關之功效的藥劑非常合乎需要。為研究p53在硫蒽酮介導之細胞死亡中之作用，使用同基因型p53+1⁺及p53-1^- HCT116結腸直腸癌細胞系(圖5A)。重要地，硫蒽酮誘導組織蛋白酶D積聚同樣與p53狀態無關(圖5B)。與對組織蛋白酶D之誘導等效一致，硫蒽酮使HCT116 p53+1⁺與p53-1^-細胞系中生存力降低之程度類似(圖5C)。因而，p53損失不會減少組織蛋白酶D積聚或降低硫蒽酮活性。

實施例6硫蒽酮增強伏立諾他之活性

因為硫蒽酮抑制自體吞噬，所以其亦能夠增強誘導此路徑之化學治療劑之活性。基於硫酮之自體吞噬抑制劑伏立諾他誘發細胞凋亡與自體吞噬，且自體吞噬之抑制強烈加強其促細胞凋亡活性。為測定組合硫蒽酮與伏立諾他是否有效，在四種乳癌細胞系中藉由免疫墨點法研究組織蛋白酶D之表現，藉由MTT檢定研究細胞生存力且藉由PI-FACS研究細胞凋亡。

將來自乳癌細胞系MDA-MB-231、BT-474、SKBR-3及BT-20之細胞以每孔10,000個細胞接種至96孔微量培養盤中，且附著24小時。對於免疫墨點法，接著用10 μM硫蒽酮、2.5 μM伏立諾他或其組合處理細胞72小時，收集且如上所述測定組織蛋白酶D含量。對於MTT細胞生存力檢定，接著用10 μM硫蒽酮、2.5 μM伏立諾他或其組合處理細胞72小時。處理之後，添加溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓(MTT)且使用BioTek(Winooski,VT)微定量盤式讀取器定量細胞生存力。對於細胞凋亡檢定，接著用10 μM硫蒽酮、2.5 μM伏立諾他或其組合處理細胞48小時。試管內藥物曝露後之促細胞凋亡作用藉由子G₀/G₁ DNA含量之碘化丙啶(PI)染色及螢光激活細胞分選(FACS)分析來定量。資料表示三個獨立實驗。

硫蒽酮與伏立諾他之組合使MDA-MB-231細胞中組織蛋白酶D之誘導增加高於藉由單一藥劑處理所達到(圖6A)，與細胞生存力降低(圖6B)及細胞凋亡增加(圖6C)相關聯。此等資料證明用硫蒽酮抑制自體吞噬可成功增強伏立諾他之抗癌活性。

實施例7硫蒽酮增強貝林司他之活性

為進一步探究及擴展硫蒽酮可成功增強HDAC抑制劑之抗癌活性的研究結果，在四種乳癌細胞系中藉由MTT檢定評估細胞生存力及藉由PI-FACS評估細胞凋亡來研究硫蒽酮與另一HDAC抑制劑貝林司他組合之功效。

將來自乳癌細胞系MDA-MB-231及BT-20之細胞以每孔10,000個細胞接種至96孔微量培養盤中，且附著24小時。對於MTT細胞生存力檢定，接著用5 μM硫蒽酮、1 μM貝林司他或其組合處理細胞72小時。處理之後，添加溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓(MTT)且使用BioTek(Winooski,VT)微定量盤式讀取器定量細胞生存力。對於細胞凋亡檢定，接著用10 μM硫蒽酮、1 μM貝林司他或其組合處理細胞48小時。試管內藥物曝露後之促細胞凋亡作用藉由子G₀/G₁ DNA含量之碘化丙啶(PI)染色及螢光激活細胞分選(FACS)分析來定量。資料表示三個獨立實驗。

硫蒽酮與貝林司他之組合會降低細胞生存力(圖7A)且增加細胞凋亡(圖7B)。此等資料證明用硫蒽酮抑制自體吞噬可成功增強貝林司他之抗癌活性。

最後，應瞭解，儘管本說明書之態樣藉由提及特定具體實例而突出，但熟習此項技術者將容易瞭解此等所揭示之具體實例僅說明本文所揭示之標的物的原理。因此，應瞭解，所揭示之標的物決不限於本文所述之特定方法、方案及/或試劑等。因而，在不背離本說明書之精神下，可根據本文之教示對所揭示之標的物進行各種修改或改變或形成替代組態。最後，本文所用之術語僅為達成描述特定具體實例之目的，且不意欲限制本發明之範疇，該範疇僅由申請專利範圍界定。因此，本發明不限於確切展示及描述之內容。

本文描述本發明之某些具體實例，包括本發明者已知用於進行本發明之最佳方式。當然，一般技術者在閱讀上述描述後將顯而易知此等所述具體實例之變化。本發明者期望熟習此項技術者在適當時會利用該等變化，且本發明者希望以除本文所特定描述以外之方式實施本發明。因此，本發明包括如適用法律所允許，對在隨附申請專利範圍中所述之所有標的物之修改及相等物。此外，除非本文另外指出或上下文另外明確相矛盾，否則本發明涵蓋上述具體實例之所有可能變體的任何組合。

本發明之替代具體實例、要素或步驟之分組不應視為有所限制。各群組成員可個別或以與本文所揭示之其他群組成員之任何組合提及及主張。預期出於便利及/或專利性之原因，群組之一或多個成員可包括在群組內或自其刪除。當任何此類包括或刪除發生時，說明書視為含有經修改，因此滿足隨附申請專利範圍中所用之所有馬庫西群組之書面描述的群組。

除非另外指出，否則表示本說明書及申請專利範圍中所用之特性、條目、數量、參數、性質、術語等之所有數值將理解為在所有情況下均由術語「約」修飾。如本文所用之術語「約」意謂此修飾之特性、條目、數量、參數、性質或術語涵蓋高於及低於規定特性、條目、數量、參數、性質或術語之值正或負10%之範圍。因此，除非相反指示，否則本說明書及隨附申請專利範圍中所述之數值參數為可變化之近似值。最低限度地，且不試圖限制等同原則應用於申請專利範圍之範疇，至少應根據所報導之有效數位之數值且藉由應用一般捨入技術來解釋每一數值指示。儘管闡述本發明之廣泛範疇的數值範圍及值為近似值，但特定具體實例中所闡述之數值範圍及值儘可能精確地報導。然而，任何數值範圍或值固有地含有某些由在其各別測試量測中所發現之標準差必然導致之誤差。本文中之數值範圍或值之敍述僅意欲充當個別提及屬於該範圍內之每一各別數值的簡寫方法。除非本文另外指出，否則將數值範圍之每一個別值併入本說明書中，其併入程度如其在本文中個別敍述一般。

除非本文另外指出或上下文另外明確相矛盾，否則在描述本發明之上下文中(尤其在以下申請專利範圍之上下文中)所用之術語「一」、「該」及類似指示物視為涵蓋單數與複數。除非本文另外指出或上下文另外明確相矛盾，否則本文所述之所有方法均可以任何適合次序執行。使用本文所提供之任何及所有實例或例示性措辭(例如「諸如」)僅意欲更好地闡明本發明且不會對另外主張之本發明範疇構成限制。本說明書之措辭不應視為指示任何未主張之要素為本發明之實施所必需。

可在申請專利範圍中使用措辭由……組成或措辭基本上由……組成進一步限制本文所揭示之特定具體實例。當用於所申請或經修正添加之申請專利範圍中時，轉變術語「由……組成」排除申請專利範圍未指定之任何要素、步驟或成分。轉變術語「基本上由……組成」將申請專利範圍之範疇限於指定物質或步驟及實質上不影響基本及新穎特性之物質或步驟。本文固有或明確描述及實現如此主張之本發明之具體實例。

本說明書中所參考及鑑別之所有專利、專利公開案及其他公開案個別且明確地以全文引用的方式併入本文中，以達到描述及揭示例如可與本發明結合使用之該等公開案中所述之組成物及方法的目的。此等公開案僅係因其揭示內容在本申請案之申請日期之前而提供。關於此點，不應理解為承認本發明者由於先前發明或任何其他原因而無權先於該揭示內容。關於日期之所有聲明或關於此等文獻之內容的陳述係基於申請者可獲得之資訊且不允許修改此等文獻之日期或內容。

圖 1.　硫蒽酮抑制自體吞噬。圖1A：硫蒽酮誘導LC3-II形成、空泡形成及LMP。LC3-II藉由免疫細胞化學觀測到，空泡形成(箭頭)藉由吉姆沙染色觀測到，且溶酶體膜滲透藉由吖啶橙螢光損失觀測到。電子顯微術表明空泡形成及電子緻密顆粒積聚(箭頭)，該電子緻密顆粒積聚表明未降解之蛋白質積聚。圖1B：溶酶體膜滲透之定量。平均值±標準偏差，n=5。*指示與對照組之顯著差異。P<0.05。圖1C：硫蒽酮刺激SQSTM1/p62積聚。圖1D：硫蒽酮刺激SQSTM1/p62聚集，如在視覺上由螢光顯微術(圖1D)及相對螢光定量(圖1E)所顯示。圖1F：硫蒽酮、巴弗洛黴素(Bafilomycin)A1及組合誘導LC3-II形成及SQSTM1/p62積聚。圖1G：硫蒽酮、巴弗洛黴素A1及組合誘發乳癌細胞系中之細胞凋亡。

圖2.　硫蒽酮及氯奎寧處理可降低細胞生存力。圖2A：七種乳癌細胞系中硫蒽酮之劑量反應曲線。圖2B：七種乳癌細胞系中氯奎寧之劑量反應曲線。

圖3.　在硫蒽酮處理之後組織蛋白酶D表現大大提高。圖3A：Affymetrix表現陣列鑑別組織蛋白酶D(CTSD)為乳癌細胞中高度上調之基因。圖3B：乳癌細胞中組織蛋白酶D表現之定量即時PCR分析。平均值±標準偏差，n=4。*指示與對照組之顯著差異。P<0.05。圖3C：硫蒽酮增加組織蛋白酶D含量且促進其聚集。

圖4.　組織蛋白酶D之誘導促進硫蒽酮介導之細胞凋亡。圖4A：硫蒽酮誘導組織蛋白酶D表現及LC3-II形成。圖4B：在四種不同乳癌細胞系中硫蒽酮誘發細胞凋亡。平均值±標準偏差，n=3。*指示與對照組之顯著差異。P<0.05。圖C：如免疫墨點法所示，組織蛋白酶D之表現阻斷減少硫蒽酮誘發之細胞凋亡。圖D：對組織蛋白酶D之表現阻斷降低硫蒽酮誘發之細胞凋亡的定量。平均值±SD，n=3。*指示與用硫蒽酮處理之非標靶siRNA轉染細胞的顯著差異。P<0.05。

圖5.　硫蒽酮誘導組織蛋白酶D表現且降低細胞生存力，與p53無關。圖5A：使用HCT116 p53+/+及p53-/-細胞評估硫蒽酮介導之細胞凋亡是否需要p53。圖5B：硫蒽酮可增加HCT116細胞中組織蛋白酶D含量，與p53狀態無關。圖5C：HCT116 p53+/+及p53-/-細胞對硫蒽酮同等敏感。平均值±標準偏差，n=3。

圖6.　硫蒽酮增強伏立諾他之抗癌活性。圖6A：硫蒽酮與伏立諾他之組合可增加組織蛋白酶D含量。圖6B：硫蒽酮及伏立諾他對乳癌細胞生存力之作用的定量。平均值±標準偏差，n=3。*指示與對照組相比之顯著差異。**指示與單個藥劑組相比之顯著差異。P<0.05。圖6C：硫蒽酮可增強伏立諾他介導之細胞凋亡。平均值±標準偏差，n=3。*指示與對照組相比之顯著差異。**指示與單個藥劑組相比之顯著差異。P<0.05。

圖7.　硫蒽酮可增強貝林司他之抗癌活性。圖7A：硫蒽酮及貝林司他對乳癌細胞生存力之作用的定量。平均值±標準偏差，n=3。*指示與對照組相比之顯著差異。**指示與單個藥劑組相比之顯著差異。P<0.05。圖7B：硫蒽酮可增強貝林司他介導之細胞凋亡。平均值±標準偏差，n=3。*指示與對照組相比之顯著差異。**指示與單個藥劑組相比之顯著差異。P<0.05。圖7C：來自MDA-MB-231乳癌細胞系之細胞中貝林司他之劑量反應曲線。圖7D：來自BT-20乳癌細胞系之細胞中貝林司他之劑量反應曲線。

Claims (33)

1. 一種基於硫酮(thioxanthone)之自體吞噬抑制劑之用途，其係用於製造在哺乳動物中治療癌症之醫藥品，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑為1-((2-(二乙胺基)乙基)胺基)-4-甲基硫-9-酮(methylthioxanthen-9-one)、1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮(thioxanthenone)、N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻(thiaxanthen)-4-基]甲基]甲烷磺醯胺、硫蒽酮(Lucanthone)與塞引酮(Hycanthone)之吲唑類似物或其鹽；且其中該醫藥品係與誘發自體吞噬之癌症治療性化合物組合使用，其中投予該醫藥品與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物兩者減輕與癌症相關之症狀，藉此治療該癌症，其中該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物為(2E,4E,6R)-7-(4-二甲胺基苯基)-N-羥基-4,6-二甲基-7-側氧基庚-2,4-二烯醯胺、N-羥基-N'-苯基辛二醯胺(octanediamide)、4-二甲胺基-N-(6-羥基胺甲醯基己基)-苯甲醯胺、N-羥基-3-[(E)-3-(羥胺基)-3-側氧基丙-1-烯基]苯甲醯胺、(2E)-3-[3-(苯胺基磺醯基)苯基]-N-羥基丙烯醯胺、((E)-N-羥基-3-[4-[[2-羥乙基-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、(E)-N-羥基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、N-(2-胺基苯基)-N'-苯基-辛二醯胺、4-(2-胺基苯基胺甲醯基)苄基胺基甲酸 酯、4-乙醯胺基-N-(2-胺基苯基)苯甲醯胺、N-(2-胺基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)胺基]甲基]苯甲醯胺、3-(二甲胺基甲基)-N-[2-[4-(羥基胺甲醯基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲醯胺或{4-[(羥胺基)羰基]苯基}胺基甲酸{6-[(二乙胺基)甲基]-2-萘基}甲酯或其鹽。
2. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥品與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物係同時投予。
3. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥品與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物係依序投予。
4. 如申請專利範圍第3項之用途，其中該醫藥品與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物在彼此間隔約三小時內投予。
5. 如申請專利範圍第3項之用途，其中該醫藥品與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物在彼此間隔約兩小時內投予。
6. 如申請專利範圍第3項之用途，其中該醫藥品與該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物在彼此間隔約一小時內投予。
7. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該癌症為肺癌、腦癌、中樞神經系統癌、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢癌。
8. 如申請專利範圍第7項之用途，其中該肺癌為非小細胞肺癌(non-small lung carcinoma)。
9. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥品及該誘發 自體吞噬之癌症治療性化合物以單一的每日劑(daily dose)或分成超過一個的每日劑投予。
10. 如申請專利範圍第9項之用途，其中該超過一個的每日劑為兩個每日劑。
11. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥品及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物係經口投予。
12. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥品及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物係非經腸投予。
13. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥品及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物以膠囊或錠劑形式投予。
14. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥品及該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物以一或多個週期投予。
15. 如申請專利範圍第14項之用途，其中該一個週期包含每四天一次，共七次。
16. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該治療癌症進一步包含投予輻射療法、激素療法或免疫療法。
17. 一種醫藥組成物，其包含：a)治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑為1-((2-(二乙胺基)乙基)胺基)-4-甲基硫-9-酮、1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮、N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻-4-基]甲基]甲烷磺醯 胺、硫蒽酮與塞引酮之吲唑類似物或其鹽；b)治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物，其中該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物為(2E,4E,6R)-7-(4-二甲胺基苯基)-N-羥基-4,6-二甲基-7-側氧基庚-2,4-二烯醯胺、N-羥基-N'-苯基辛二醯胺、4-二甲胺基-N-(6-羥基胺甲醯基己基)-苯甲醯胺、N-羥基-3-[(E)-3-(羥胺基)-3-側氧基丙-1-烯基]苯甲醯胺、(2E)-3-[3-(苯胺基磺醯基)苯基]-N-羥基丙烯醯胺、((E)-N-羥基-3-[4-[[2-羥乙基-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、(E)-N-羥基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、N-(2-胺基苯基)-N'-苯基-辛二醯胺、4-(2-胺基苯基胺甲醯基)苄基胺基甲酸酯、4-乙醯胺基-N-(2-胺基苯基)苯甲醯胺、N-(2-胺基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)胺基]甲基]苯甲醯胺、3-(二甲胺基甲基)-N-[2-[4-(羥基胺甲醯基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲醯胺或{4-[(羥胺基)羰基]苯基}胺基甲酸{6-[(二乙胺基)甲基]-2-萘基}甲酯或其鹽；及c)醫藥學上可接受之載劑。
18. 一種醫藥套組，其包含：a)包含治療有效量之基於硫酮之自體吞噬抑制劑及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物，其中該基於硫酮之自體吞噬抑制劑為1-((2-(二乙胺基)乙 基)胺基)-4-甲基硫-9-酮、1-(2-二乙胺基乙胺基)-4-(羥甲基)-9-硫酮、N-[[1-[[2-(二乙胺基)乙基]胺基]-9-側氧基-9H-噻-4-基]甲基]甲烷磺醯胺、硫蒽酮與塞引酮之吲唑類似物或其鹽，及b)包含治療有效量之誘發自體吞噬之癌症治療性化合物及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組成物，其中該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物為(2E,4E,6R)-7-(4-二甲胺基苯基)-N-羥基-4,6-二甲基-7-側氧基庚-2,4-二烯醯胺、N-羥基-N'-苯基辛二醯胺、4-二甲胺基-N-(6-羥基胺甲醯基己基)-苯甲醯胺、N-羥基-3-[(E)-3-(羥胺基)-3-側氧基丙-1-烯基]苯甲醯胺、(2E)-3-[3-(苯胺基磺醯基)苯基]-N-羥基丙烯醯胺、((E)-N-羥基-3-[4-[[2-羥乙基-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、(E)-N-羥基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙-2-烯醯胺、N-(2-胺基苯基)-N'-苯基-辛二醯胺、4-(2-胺基苯基胺甲醯基)苄基胺基甲酸酯、4-乙醯胺基-N-(2-胺基苯基)苯甲醯胺、N-(2-胺基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)胺基]甲基]苯甲醯胺、3-(二甲胺基甲基)-N-[2-[4-(羥基胺甲醯基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲醯胺或{4-[(羥胺基)羰基]苯基}胺基甲酸{6-[(二乙胺基)甲基]-2-萘基}甲酯或其鹽。
19. 如申請專利範圍第18項之醫藥套組，其用於在哺乳動 物中治療癌症，其中投予該等醫藥組成物減輕與癌症相關之症狀，藉此治療該癌症。
20. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物係同時投予。
21. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物係依序投予。
22. 如申請專利範圍第21項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物在彼此間隔約三小時內投予。
23. 如申請專利範圍第21項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物在彼此間隔約兩小時內投予。
24. 如申請專利範圍第21項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物在彼此間隔約一小時內投予。
25. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該癌症為肺癌、腦癌、中樞神經系統癌、乳癌、結腸癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢癌。
26. 如申請專利範圍第25項之醫藥套組，其中該肺癌為非小細胞肺癌。
27. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該治療有效量之該基於硫酮之自體吞噬抑制劑及該治療有效量之該誘發自體吞噬之癌症治療性化合物以單一的每日劑或分成超過一個的每日劑投予。
28. 如申請專利範圍第27項之醫藥套組，其中該超過一個的每日劑為兩個每日劑。
29. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該等醫藥組 成物係經口投予。
30. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物係非經腸投予。
31. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物以膠囊或錠劑形式投予。
32. 如申請專利範圍第19項之醫藥套組，其中該等醫藥組成物以一或多個週期投予。
33. 如申請專利範圍第32項之醫藥套組，其中該一個週期包含每四天一次，共七次。